專利名稱：細胞排除方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及細胞排除方法，更具體地講，涉及在移植活體組織時能增強從活體組織中排除細胞的效果的細胞排除方法。
背景技術(shù)：
當人體的心臟瓣膜不能正常工作時，會導致諸如心臟瓣膜開口縮窄和血液回流的困難，所述心臟瓣膜必須用替代瓣膜更換。作為目前使用的替代瓣膜，可以使用由人工材料制成的機械瓣膜，從諸如豬的動物體內(nèi)取出的異種生物瓣膜，和由其他人捐獻的同種異體生物瓣膜等。這樣的瓣膜存在以下問題。盡管機械瓣膜耐用，但受體必須在他的一生中使用抗凝血劑。另一方面，在異種生物瓣膜中，受體沒有必要一生使用抗凝血劑；不過長時間發(fā)生的鈣沉積等問題，導致了瓣膜的功能異常，其結(jié)果是必須以大約15年的時間間隔用新的替代瓣膜更換損壞的瓣膜。另外，對于同種異體生物瓣膜來說，由于供體的數(shù)量有限，不容易獲得大量的同種異體生物瓣膜。
其中，異種生物瓣膜是具有應用前景的，因為可以提供足夠數(shù)量的這樣的瓣膜，并且，患者在移植之后沒有必要終生使用抗凝血劑。因此，預計異種生物瓣膜比其他替代瓣膜更有用，只需要克服耐用性較差的缺陷即可。
在本文中，已知下列方法能夠抑制移植后免疫排斥，并且改善從諸如豬的動物體內(nèi)取出的異種生物瓣膜的耐用性(例如，參見日本專利號6-261933)。在該方法中，首先將異種生物瓣膜浸泡在細胞排除溶液中，如膽酸或表面活性劑中，以便排除來自所述動物的細胞，如內(nèi)皮細胞和成纖維細胞(細胞排除方法)。然后將業(yè)已排除了它里面的原始細胞的異種生物瓣膜浸泡在含有自體細胞，如從受體人體(所述異種生物瓣膜將要移植到所述人體內(nèi))的內(nèi)皮細胞和成纖維細胞的含有細胞的溶液中，以便將所述自體細胞接種在所述異種生物瓣膜上(細胞接種方法)。
不過，在上述處理方法中，由于從動物體內(nèi)取出的異種生物瓣膜在所述細胞排除過程和細胞接種過程中不能夠有效地處理，所得到的異種生物瓣膜不能獲得足夠的生物兼容性。換句話說，由于原始細胞或多或少地保持在所述細胞排除過程中，所得到的異種生物瓣膜的生物兼容性由于原始細胞的存在而降低。
在上述場合下，本發(fā)明人業(yè)已進行了深入的實驗研究，其目的是克服上述問題。他們設計了一種提供所述細胞排除溶液的方法，用于以實際上相當于人體血液流動的流速浸泡異種生物瓣膜和/或用微波輻射浸泡在所述細胞排除溶液中的異種生物瓣膜。結(jié)果，他們發(fā)現(xiàn)通過該方法顯著減少了殘留原始細胞的數(shù)量。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明是基于上述發(fā)現(xiàn)構(gòu)思的。本發(fā)明的一個目的是提供有效排除存在于諸如異種生物瓣膜的活體組織中的原始細胞的方法，以便在移植之后提高活體組織的生物兼容性。
為了達到上述目的，本發(fā)明涉及用于在移植活體組織時從預定的活體組織中排除原始細胞的細胞排除方法，包括將所述活體組織浸泡在預定的細胞排除溶液中，其中，所述細胞排除溶液能夠以搏動流的狀態(tài)流動，這是通過對所述細胞排除溶液施加預定的脈沖實現(xiàn)的，并且，將活體組織放入所述搏動流中。通過該方法，所述活體組織中殘留原始細胞的數(shù)量與常規(guī)方法相比能夠顯著減少，從而提高了在移植之后所述活體組織的生物兼容性。
另外，本發(fā)明涉及用于在移植活體組織時從預定的活體組織排除原始細胞的細胞排除方法，包括將活體組織浸泡在細胞排除溶液中，其中，用微波輻射放入所述細胞排除溶液中的活體組織。上述目的還可以通過該方法實現(xiàn)。
所述(后一種)方法可以與通過對細胞排除溶液施加預定的脈沖以使細胞排除溶液以搏動流的狀態(tài)流動，并且將活體組織放入所述搏動流的方法同時進行。通過這種方法可以進一步提高排除細胞的效果，并且能夠?qū)⒃技毎麕缀跬耆珡乃龌铙w組織中排除。
微波是在活體組織相對所述微波輻射部位轉(zhuǎn)動時施加的。這樣，實際上可以沿旋轉(zhuǎn)圓周方向均勻地對活體組織施加微波，其結(jié)果是，實際上可以將細胞均勻地沿旋轉(zhuǎn)圓周方向從活體組織的幾乎所有部位除去。
附圖的簡要說明

圖1是表示要應用在本發(fā)明中的活體組織處理設備的示意性結(jié)構(gòu)的示意圖；圖2是驅(qū)動泵的縱向剖視示意圖；圖3是構(gòu)成所述活體組織處理設備的保持裝置的示意性正視圖；圖4是所述保持裝置的蓋子的分解透視圖；圖5是所述保持裝置的示意性剖視圖；圖6是圖5所示結(jié)構(gòu)的右側(cè)分解剖視圖；圖7是流入口的通道形成部件的示意性分解透視圖；圖8是圖5所示結(jié)構(gòu)的左側(cè)分解剖視圖；圖9是流出口的通道形成部件的示意性分解透視圖；圖10(A)是來自圖3所示結(jié)構(gòu)一部分的示意圖，包括所述保持裝置；圖10(B)是圖10(A)所示相同的結(jié)構(gòu)處在繞支撐軸相對圖10(A)所示狀態(tài)旋轉(zhuǎn)180°的狀態(tài)；圖11是表示在例1，2中單位面積上殘留原始細胞數(shù)量的表格，與比較例1進行比較；圖12是在例3中獲得的活體組織的放大的顯微照相；和圖13是在例4中獲得的活體組織的放大的顯微照相。
實施本發(fā)明的最佳方式現(xiàn)在，將結(jié)合附圖對本發(fā)明的實施方案進行說明。
圖1是表示本發(fā)明的活體組織處理設備的示意性結(jié)構(gòu)的示意圖。在附圖中所示出的活體組織處理設備10被用于異種生物瓣膜的活體組織的細胞排除過程和細胞接種過程。細胞排除過程是在從諸如豬的動物體內(nèi)取出的異種生物瓣膜被移植到人體中之前進行的。細胞排除過程是通過將異種生物瓣膜浸泡在諸如膽酸的細胞排除溶液中，以便排除動物細胞(以下稱之為″原始細胞″)進行的，以便僅獲得由膠原等組成的基質(zhì)。另一方面，細胞接種過程是通過將業(yè)已除去了其中的原始細胞的異種生物瓣膜浸泡在含有人類受體(所述異種生物瓣膜將要移植到該人體內(nèi))的細胞(以下稱之為″自體細胞″)的含有細胞的溶液中，以便將自體細胞黏附在所述基質(zhì)上。
活體組織處理設備10包括循環(huán)裝置10A，用于使細胞排除溶液和含有細胞的溶液通過預定的回路循環(huán)，以及連接在循環(huán)裝置10A上的保持裝置10B，用于保持異種生物瓣膜。注意，如果沒有專門說明，細胞排除溶液和含有細胞的溶液被統(tǒng)稱為“溶液”。
循環(huán)裝置10A包括已知的空氣吸入/供給裝置11，由聚氨酯組成的并且與空氣吸入/供給裝置11連接的驅(qū)動泵12，以及這樣安裝的循環(huán)通道13，使得從驅(qū)動泵12中排除的溶液返回驅(qū)動泵12。
空氣吸入/供給裝置11具有已知結(jié)構(gòu)，能夠?qū)⒖諝鈴尿?qū)動泵12中吸出，并且將空氣輸送到驅(qū)動泵12。本文省略了對所述結(jié)構(gòu)的詳細說明。
驅(qū)動泵12是吸水泵，能夠通過在泵內(nèi)產(chǎn)生螺旋形渦流來噴射搏動流。更具體地講，在圖2中示出的驅(qū)動泵12采用了業(yè)已由本申請人提出的結(jié)構(gòu)(日本專利公開號2002-167836)。更具體地講，驅(qū)動泵12包括中空的上部結(jié)構(gòu)17，實際上具有錐形外形，它具有流入口15和流出口16，中空的下部結(jié)構(gòu)18，實際上具有圓頂形外形，它位于上部結(jié)構(gòu)17下面，以及柔性膜片20，它將由結(jié)構(gòu)17和18形成的空間分隔成兩部分，即內(nèi)部空間S1和S2。在圖2的右側(cè)示出的流入口15是這樣形成的，以便通過上部結(jié)構(gòu)17的外周壁擰入，而流出口16設置在上部結(jié)構(gòu)17的頂部，參見圖2的上端。
下部結(jié)構(gòu)18具有與空氣吸入/供給裝置11連通的排氣孔22。在預定的時間，將壓縮空氣交替地輸送到下方內(nèi)部空間S2和從該空間中排除。在壓縮空氣輸入和排除內(nèi)部空間S2時，膜片20發(fā)生位移，增加或減少上方內(nèi)部空間S1的體積。結(jié)果，從流出口16輸出的溶液形成搏動流。此時，在上部空間S1中產(chǎn)生了螺旋形渦流，如圖2中的虛線所示出的。在這種狀態(tài)下，不容易出現(xiàn)靜止區(qū)。在本發(fā)明的實施例中，輸送到內(nèi)部空間S2中的空氣的壓力(正壓)被設定為大約140mmHg-260mmHg，而從內(nèi)部空間S2中吸出的空氣的壓力(負壓)被設定為大約-30mmHg至-50mmHg，不過，上述范圍并不局限于這些值。
參見圖1，循環(huán)通道13是由以下形式的閉合回路形成的，所述溶液從驅(qū)動泵12的流出口16流出并且流入流入口15而不接觸外界空氣。更具體地講，流體通道13包括阻力形成裝置23，它對從流出口16中輸出的溶液產(chǎn)生流動阻力；與流出口16連接的上游管24；起著強度控制裝置作用的控制管25，它與上游管24的下游端連接；與控制管25的下游端連接的連接管26；安裝在連接管26的下游并且與驅(qū)動泵12的流入口15連接的下游管27；以及在連接管26和下游管27之間提供的連接泵28。注意部件24-28是通過已知接頭29連接的。在下面，為了方便起見，循環(huán)通道13的位于阻力形成裝置23上游的部分被稱作″上游管L1″，而位于阻力形成裝置23下游的部分被稱作″下游管L2″。
假定是在人體的外周阻力的情況下，阻力形成裝置23被單獨設置在連接管26的中間，并且設置了夾緊部件(未示出)，用于固定連接管26。由于連接管26是通過阻力形成裝置23固定的，如果驅(qū)動泵12脈沖的話，上游管L1的最低的血壓將不會達到0mm Hg。這樣，模擬了人體的動脈血流?？梢酝ㄟ^控制連接管26的緊固程度，將上游管L1的平均脈壓調(diào)節(jié)到預定值。在本實施方案中，將平均脈壓設定為大約100mmHg，它實際上相當于人體的平均脈壓。注意，作為阻力形成裝置23，除了夾緊部件之外的包括可變孔在內(nèi)的任何部件都可以使用，只要它具有與上文所述相同的作用就行。
上游管24，連接管26和下游管27是由氯乙烯制成，但是并不特別局限于此。正如下文所披露的，保持裝置10B設置在上游管24的中間。由于異種生物瓣膜放置在保持裝置10B中，而止回閥30設置在下游管27中，所述溶液可以在不沿圖1中的箭頭所示方向回流的條件下循環(huán)。
控制管25安裝在阻力形成裝置23的上游，并且起著控制器的作用，控制上游管L1的脈壓的強度。更具體地講，控制管25是由柔軟材料制成的，如片段狀聚氨酯或硅酮，可以通過改變管壁厚度控制上游管L1的脈壓強度。注意，在本實施方案中，上游管L1的脈壓強度被設定為，例如，100mmHg(平均脈壓)±20mmHg，以便接近人體脈壓。
連接泵28是具有與驅(qū)動泵12相同的結(jié)構(gòu)的搏動流形成泵。使用類似的附圖標記表示與驅(qū)動泵12相應的類似的結(jié)構(gòu)部件，并且省略所有進一步的說明。注意，連接泵28是沿這樣的方向安裝的，使得所述溶液通過流入口15流入，并且通過流出口16流出。連接泵28的排氣孔22通向外界。膜片20根據(jù)溶液流動位移。裝入循環(huán)裝置10A中的溶液的量略低于裝置10A的最大允許裝載量，連接泵28的膜片20的位移量略小于最大物理允許位移量。因此，連接泵28提供了抑制作用。更具體地講，當溶液通過所述連接泵時，膜片20位移，從而降低血壓。因此，連接泵28被安裝在阻力形成裝置23的下游，并且起著脈壓減弱裝置的作用，用于減弱下游管L2的溶液的液體壓力。在本實施方案中，通過連接泵28的溶液的壓力被設定為大約10mmHg，以便與人體左心房的壓力相當。
注意，連接泵28可以安裝在控制管25和連接管26之間。
流過循環(huán)裝置10A的溶液被引入其中的保持裝置10B將浸泡在溶液中的異種生物瓣膜保留。在本實施方案中，作為要進行細胞排除過程和細胞接種過程的異種生物瓣膜，使用了豬主動脈瓣。保持裝置10B被安裝在循環(huán)通道13的具有接近于人主動脈瓣部分的血流狀態(tài)的部位。簡單地講，保持裝置10B與上游管24的中間連接。在下面，為了便于說明起見，上游管24的位于保持裝置10B上游的部分被稱作入口管24A，而位于保持裝置10B下游的部分被稱作出口管24B。注意，保持裝置10B可自由地與循環(huán)通道13的任何部位連接，通過適當選擇循環(huán)通道13的部位，它的狀態(tài)(如壓力)接近于通過目標活體組織的血流的狀態(tài)。
參見圖3，保持裝置10B包括管狀底座33，它能夠被放置在預定的表面F上，位于底座33上方的主體35，和位于底座33的左右兩側(cè)的支撐部件36，36，用于支撐主體35。
主體35包括箱形蓋子38，從正面看它具有六邊形形狀；用于固定異種生物瓣膜V的保持裝置39，它設置在蓋子38內(nèi)；具有八邊形(從正面看)、用于支撐保持裝置39、并且是沿蓋子38的內(nèi)壁安裝的構(gòu)件40；輻射器42(輻射裝置)，它位于蓋子38后面，用于對保持在保持裝置39中的異種生物瓣膜V施加微波；支撐軸44，44分別從構(gòu)件40的右側(cè)和左側(cè)通過蓋子38向支撐部件36，36延伸；以及兩個管子，即與保持裝置39相連的導入管46和排放管47。
參見圖4，蓋子38具有箱形結(jié)構(gòu)，它由縱向分隔的兩部分構(gòu)成，更具體地講，包括位于正面的前蓋51，和位于背面的后蓋52。前蓋51和后蓋52的對接部分是在與支撐軸44，44相交的位置形成的。在所述對接部分的外側(cè)邊緣部分，實際上沿所述外側(cè)邊緣部分，形成了凸緣平面54，54。在凸緣平面54，54上，形成了多個用于螺釘(volts)的通孔55(未示出)。當凸緣平面54，54面對面地彼此接觸，并且用螺釘連接時，前蓋51和后蓋52合并成一體。當所述螺釘從所述集成結(jié)構(gòu)上去掉，前蓋51可以分離，并且與后蓋52分開。另外，微波輻射口57具有向前開的矩形形狀，它是在后蓋52內(nèi)部的中央周圍形成的。輻射口57是這樣形成的，以便實際上向前對應于由保持裝置39保留的異種生物瓣膜V(參見圖3)。通過這種裝置，由輻射器42向后輸送的微波，通過輻射口57，并且向前施加到位于保持裝置39內(nèi)的異種生物瓣膜V上。另外，前蓋51和后蓋52具有這樣的結(jié)構(gòu)，在從輻射口57向保持裝置39施加微波時能夠防止微波向外界泄露。注意，在前蓋51的前端提供了門板59。門板59是用已知材料制成的，通過它可以看見保持裝置39的狀態(tài)，并且通過它可以防止微波向外界泄露。
參見圖5，保持裝置39包括在附圖中沿右向和左向延伸的丙烯酸筒形部件61，位于筒形部件61的右側(cè)末端的流入部分62，位于它的左側(cè)末端的流出部分63，和用于將異種生物瓣膜V安裝在流入部分62和流出部分63之間的安裝空間64。保持裝置39中，所述溶液從流入部分62流入筒形部件61，通過安裝空間64，并且從流出部分63流到外面，正如下面所披露的。
筒形部件61在延伸方向的各端都具有開口。在所述開口末端，設置了流入部分62和流出部分63。將薄鋁板66粘貼在筒形部件61的整個外周表面上，實際上相當于安裝空間64的中央部位除外。采用這種結(jié)構(gòu)，由輻射器42提供的微波(參見圖3)只能通過實際上與安裝空間64相應的筒形部件61的中央周壁部分透射。結(jié)果，微波可以集中到中央部分；與此同時，可以避免提高安裝空間64外側(cè)部分的溫度。
參見圖5和6，流入部分62包括末端部件68，它與筒形部件61的外周表面接合，以及位于末端部件68內(nèi)的通道形成部件69。
末端部件68被制成容器形式，如圖6所示，在它底部的左側(cè)具有孔。更具體地講，末端部件68具有位于附圖右側(cè)的下盤71，和在下盤71的周向邊緣連續(xù)形成的側(cè)壁72，并且實際上垂直延伸到(朝向圖6的左側(cè))下盤71。下盤71在接近中心部分具有通孔73。側(cè)壁72具有在開口一側(cè)的內(nèi)部周向形成的螺紋74。螺紋74與在筒形部件61的外周上形成的螺紋75接合。
參見圖5-7，通道形成部件69包括具有與錐體類似形狀的中空的錐形管77，以及要插入錐形管77的插入管78。
錐形管77包括靠近安裝空間64定位的柱形頂部79，裙緣形部分80從頂部79逐漸向外擴張到圖6的右側(cè)，并且在附圖中從中間開始沿右和左的方向線性延伸，凸緣形邊緣部分81在圖6中的裙緣形部分80的右側(cè)末端連續(xù)地形成，并且內(nèi)部空間83在部分79-81中形成，并且在圖6中的右側(cè)和左側(cè)與外界連通。注意，在下面的解釋通道形成部件69的部分，如果沒有特別說明，術(shù)語″前緣側(cè)″表示錐形管77靠近頂部79的一側(cè)，而術(shù)語″后緣側(cè)″表示錐形管77靠近邊緣部分81的一側(cè)。
在頂部79的外周表面上，沿所述圓周形成了止動槽85。當包括主動脈瓣的豬血管組織B的末端部分(作為異種生物瓣膜V)被放置在止動槽85上，并且用結(jié)合部件(未示出)固定時，參見圖5，可以限制將血管組織B從頂部79上取出。
在裙緣形部分80上，將邊緣部分81的外徑設定為等于筒形部件61的內(nèi)徑，以便邊緣部分81正好接合在筒形部件61內(nèi)。
邊緣部分81被制成環(huán)形形式。將邊緣部分81的外徑設定成等于末端部件68的側(cè)壁72的內(nèi)徑。采用這種結(jié)構(gòu)，邊緣部分81可正好結(jié)合在末端部件68內(nèi)。在邊緣部分81的內(nèi)側(cè)周向表面上，形成了螺紋87。
參見圖6，內(nèi)部空間83具有位于右側(cè)末端的開口部分。內(nèi)部空間83包括底部空間89，插入管78的頂部通過開口部分將插入其中。主通道91與底部空間89連通，并且朝向在前緣側(cè)形成的開口部分90延伸，并且在主通道91周圍提供了四個側(cè)面通道92，與底部空間89連通。底部空間89具有內(nèi)部空間，它的形狀與插入管78的頂部一致，可正好接合在插入管78上。主通道91被制成錐形孔形式，它的內(nèi)徑從頂部79開始向內(nèi)縮小，不過，并不局限于此。參見圖7，在裙緣形部分80的傾斜的表面上形成了側(cè)面通道92。更具體地講，四個側(cè)面通道92是沿裙緣形部分80的圓周方向以相等的間隔排列的。應當指出的是，在本實施方案中，將側(cè)面通道92的開口部分的總面積設定為等于主通道91的面積。
參見圖6，插入管78包括在前緣側(cè)具有球形外形的球形部分94，外徑比球形部分94的外徑更小的筒形部分95，并且通過階梯形部分連續(xù)地形成到球形部分94。外部筒形部分96接合在筒形部分95的外周表面周圍，以便可以相互轉(zhuǎn)動，環(huán)形軸環(huán)部分97連續(xù)地設置在外部筒形部分96的后緣側(cè)，并且其外徑小于末端部件68的通孔73的內(nèi)徑，內(nèi)部空間99形成在球形部分94和筒形部分95中。在外部筒形部分96的外周表面上，形成了螺紋101。螺紋101與在邊緣部分81的內(nèi)部形成的螺紋87接合。通過這種結(jié)構(gòu)，插入管78可以與錐形管77連接。
內(nèi)部空間99包括底部通道103，溶液可通過它流動，頂部孔104與底部通道103連通，并且在球形部分94的前緣側(cè)開放，以及四個側(cè)孔105形成在頂部孔104周圍，并且與底部通道103連通。當插入管78的前緣側(cè)結(jié)合到錐形管77的內(nèi)部空間83中時，頂部孔104穩(wěn)定地與主通道91連通。側(cè)孔105實際上是在球形部分94的表面上沿圓周方向以相等的間隔分布的。當插入管78結(jié)合到錐形管77中時，側(cè)孔105可旋轉(zhuǎn)地改變位置，從能夠完全與所有側(cè)面通道92連通的最大連通位置改變成與所有側(cè)面通道92的聯(lián)系完全切斷的關(guān)閉位置，這一過程是通過管78和77的相互轉(zhuǎn)動實現(xiàn)的。因此，插入管78通過改變它的位置控制流量，從流出所有側(cè)面通道92的溶液的總流量等于流出主通道91的總流量的位置，改變到流出所有側(cè)面通道92的溶液的總流量實際上為零的位置。在這種意義上，插入管78起著類似于可變節(jié)流閥的作用，由它控制從側(cè)面通道92中流出的溶液的流量。
參見圖5，8和9，流出部分63的形狀部分不同于流入部分62的形狀；不過，具有大體上相同的結(jié)構(gòu)部件，并且以實際上類似的方式起作用。
因此，在流出部分63上使用了類似的附圖標記，以便表示與流入部分62相應的流出部分63的相同或等同的結(jié)構(gòu)部件，并且省略或簡化了對所有技術(shù)的解釋。僅對與流入部分62的不同之處作補充說明。
流出部分63的末端部件68被制成類似螺母的形式。實際上，在末端部件68的中央，提供了螺紋孔107，以便在圖8中沿左右方向延伸。
流出部分63的錐形管77與流入部分62的形狀不同，邊緣部分81連續(xù)地形成到裙緣形部分80。具體地講，邊緣部分81被制成類似螺紋桿形式，其外徑小于裙緣形部分80的最大外徑。邊緣部分81的外周部分與末端部件68的螺紋孔107接合。錐形管77具有導向槽109，用于在這里插入熱傳感器(未示出)。導向槽109設置在內(nèi)部空間83外面。槽109包括第一導向槽109A，它從邊緣部分81的后緣側(cè)延伸到裙緣形部分80的傾斜的表面，以及第二導向槽109B，它是在第一導向槽109A的中央分支的，并且向主通道91延伸。注意，導向槽109A和109B中的兩個或任一個可以省去。
流出部分63的插入管78在它的整體形狀上與流入部分62不同。在插入管78上，筒形部分95向前緣側(cè)延伸，取代球形部分94。頂部孔104設置在筒形部分95的前緣側(cè)。四個側(cè)孔105以實際上相等的間隔沿圓周方向設置在筒形部分95的前緣側(cè)的外周表面。
注意，在圖5，6和8中的阻擋部件是用于密封的O形環(huán)。
參見圖3，構(gòu)件40支撐著保持裝置39，以便在它里面轉(zhuǎn)動。更具體地講，插入管78，78實際上從末端部件68，68的中央向外突出，它們通過管螺母111，111連接在旋轉(zhuǎn)管112，112上。旋轉(zhuǎn)管112，112通過軸承(未示出)各自連接在構(gòu)件40的一部分上，并且突出到構(gòu)件40外面。保持裝置39接合在構(gòu)件40內(nèi)，以便旋轉(zhuǎn)管112，112可以如圖3所示以45°的角度傾斜地延伸。保持裝置39可以繞旋轉(zhuǎn)管112，112轉(zhuǎn)動(自轉(zhuǎn))。在構(gòu)件40的外表面上，并且靠近旋轉(zhuǎn)管112位于流出部分63(圖3的右上面)突出一側(cè)的部位，提供具有馬達和齒輪等的自轉(zhuǎn)驅(qū)動裝置114。保持裝置39通過啟動自轉(zhuǎn)驅(qū)動裝置114在構(gòu)件40內(nèi)轉(zhuǎn)動。另外，旋轉(zhuǎn)管112，112分別與導入管46和排放管47連接，通過固定在靠近構(gòu)件40安裝的結(jié)構(gòu)上的旋轉(zhuǎn)接頭115連接。作為旋轉(zhuǎn)接頭115，使用了已知的接頭，它能夠連接兩種類型的管型部件(旋轉(zhuǎn)管112，112和管46，47)，同時允許相互轉(zhuǎn)動和相互連接。通過所述接頭，即使旋轉(zhuǎn)管112，112是通過操作自轉(zhuǎn)驅(qū)動裝置114轉(zhuǎn)動的，旋轉(zhuǎn)力也不會傳遞到每一個管46和47上。
輻射器42是用磁電管(未示出)作為微波來源的已知裝置。本文省略了對該裝置的詳細說明。
支撐軸44是中空的管，并且將導入管46和排放管47的末端部分納入其中。更具體地講，在每一個支撐軸44，44的外周表面的位于支撐部件36，36內(nèi)部和附近的位置上形成了掏槽孔117。將從旋轉(zhuǎn)管112，112上延伸的管46和47插入掏槽孔117。
支撐部件36包括安裝在內(nèi)側(cè)的第一支撐部分120，用于可旋轉(zhuǎn)地支撐支撐軸44，44，和安裝在第一支撐部分120外側(cè)的接頭支撐部分122，用于支撐旋轉(zhuǎn)接頭121，該接頭的結(jié)構(gòu)與上述旋轉(zhuǎn)接頭115的結(jié)構(gòu)相同。由支撐部件36支撐的旋轉(zhuǎn)接頭121(圖3中的左側(cè))與插入支撐軸44的左側(cè)的排放管47和出口管24B相互可旋轉(zhuǎn)地連接。另一方面，通過支撐部件36支撐的旋轉(zhuǎn)接頭121(圖3中的右側(cè))與插入支撐軸44右側(cè)的導入管46和入口管24A可相互旋轉(zhuǎn)地連接。另外，在支撐部件36上(圖3中的右側(cè))提供了具有馬達和齒輪等的旋轉(zhuǎn)驅(qū)動裝置124?？梢酝ㄟ^操縱旋轉(zhuǎn)驅(qū)動裝置124轉(zhuǎn)動支撐軸44，44。如上文所述，當支撐軸44，44轉(zhuǎn)動時，構(gòu)件40和保持裝置39同時繞支撐軸44，44轉(zhuǎn)動(旋轉(zhuǎn))。插入支撐軸44的導入管46和排放管47各自被設計成在旋轉(zhuǎn)期間不會與底座33相互干擾。更具體地講，它們具有適當?shù)拈L度，并且被安裝成通過底座33和支撐軸44之間的空間。參見圖10，當支撐軸44從圖10(A)所示狀態(tài)旋轉(zhuǎn)180°(半周)時，構(gòu)件40被轉(zhuǎn)動。結(jié)果，保持裝置39的上/下和右/左的位置關(guān)系顛倒了，參見圖10(B)。更具體地講，保持裝置39不僅可以通過自轉(zhuǎn)驅(qū)動裝置114自轉(zhuǎn)，而且還可以通過旋轉(zhuǎn)驅(qū)動裝置124旋轉(zhuǎn)。當保持裝置39旋轉(zhuǎn)時，血管組織B的上/下和右/左的位置關(guān)系顛倒了。注意圖3中的附圖標記125表示旋轉(zhuǎn)驅(qū)動裝置124的開關(guān)。注意，可以提供冷卻裝置，用于冷卻導入管46的外周，以便防止溶液溫度提高。
下面將說明將異種生物瓣膜V放入按上述方法制造的保持裝置10B中的過程，以及保持裝置10B在設定時間內(nèi)的功能。
首先，在圖3所示狀態(tài)下，旋轉(zhuǎn)管112從旋轉(zhuǎn)接頭115中釋放出來。然后，通過轉(zhuǎn)動將管螺母111松開，并且從保持裝置39中取出，以便將保持裝置39從旋轉(zhuǎn)管112，112中取出。然后，取出末端部件68，68，并且將流入部分62和流出部分63從筒形部件61中取出。然后，在保持流入部分62的頂部79，79和流出部分63的頂部79可以彼此相對的條件下，參見圖5，將包括主動脈瓣V的豬血管組織B的兩端分別插入頂部79，79，然后通過結(jié)合部件(未示出)分別固定在止動槽85，85上。血管組織B被設定為這樣的方向，使得溶液可以通過主動脈瓣V(導向閥)從圖5的右側(cè)流向左側(cè)。然后，通過血管組織B連接的流入部分62和流出部分63再次返回筒形部件61，并且末端部件68，68與筒形部件61連接，并且保持裝置39接合在旋轉(zhuǎn)管112，112中，參見圖3。這樣，就完成了血管組織B的裝配。
在細胞排除過程中，通過旋轉(zhuǎn)管112將細胞排除溶液從導入管46輸送到流入部分62的插入管78。此時，流入部分62和流出部分63的插入管78，78被設定在側(cè)孔105和錐形管77的側(cè)面通道92處于完全連通狀態(tài)的位置，參見圖5。通過這種結(jié)構(gòu)，輸送給流入部分62的細胞排除溶液通過流入部分62的頂部孔104和主通道91進入血管組織B，通過主動脈瓣V，并且進入流出部分63的主通道91。同時，相同量的溶液流過側(cè)孔105和流入部分62的子通道92，通過筒形部件61的內(nèi)部空間，并且進入流出部分63的側(cè)面通道92，以便繞過血管組織B。細胞排除溶液通過流出部分63的主通道91和側(cè)面通道92，并且從流出部分63的插入管78中流出，通過旋轉(zhuǎn)管112排放到排放管47中，參見圖3。因此，在流入部分62和流出部分63上的主通道91和頂部孔104構(gòu)成了通過管狀活體組織(血管組織B)相互連通的第一通道，而在流入部分62和流出部分63中的每一個上提供的側(cè)面通道92和側(cè)孔105構(gòu)成了通過在活體組織(血管組織B)的外側(cè)形成的迂回徑路相互連通的第二流體通道。
在實施上述細胞排除過程時，操作輻射器42和自轉(zhuǎn)驅(qū)動裝置114。保持裝置39是自轉(zhuǎn)的，同時向保持在保持裝置39中的血管組織B施加微波。通過這種操作，可以在血管組織B的整個圓周方向上均勻地實施細胞排除作業(yè)。所述細胞排除作業(yè)優(yōu)選是在檢查血管組織B內(nèi)和外的溶液溫度的條件下進行的，通過使用插入第一和第二導向槽109A，109B的熱傳感器(未示出)(參見圖5)來完成。在這種場合下，細胞排除溶液實際上能夠以相同的流速在血管組織B的內(nèi)部和外部流動，以便在它們之間不存在溫差?？梢酝ㄟ^插入第一和第二導向槽109A和109B的熱傳感器(未示出)檢查它們之間的溫差。注意，當內(nèi)部和外部的溫度達到人體溫度(例如，37℃)時，輻射器42自動停止輻射微波。反之，當溫度低于體溫時，它自動地開始輻射微波。該實施方案的輻射器42可以施加頻率為2.45GHz，功率為大約0-1200W的微波。注意，所述溫度傳感器可以通過設置在排放管47中間的孔導入第一通道。
另一方面，在實施細胞接種過程中，停止了通過輻射器42施加微波和保持裝置39的自轉(zhuǎn)。通過轉(zhuǎn)動并且松開軸環(huán)部分97，以及將筒形部分95從圖5所示狀態(tài)旋轉(zhuǎn)到側(cè)孔105(參見圖5等)和側(cè)面通道92之間的聯(lián)系完全切斷的狀態(tài)來改變插入管78，78在保持裝置39內(nèi)的位置。然后，將含有細胞的溶液輸送到流入部分62的插入管78。含有細胞的溶液然后通過流入部分62的頂部孔104和主通道91到達血管組織B，通過主動脈瓣V，流入流出部分63的主通道91，并且隨后從流出部分63的插入管78中排除。在此操作期間，插入管78，78被放置在側(cè)面通道之間的聯(lián)系被切斷狀態(tài)的位置。因此，含有細胞的溶液不會流到血管組織B外面，與上面提到的細胞排除過程的情況不同。
在實施細胞接種過程中，啟動了如圖3所示的旋轉(zhuǎn)驅(qū)動裝置124。保持裝置39與構(gòu)件40一起繞支撐軸44，44旋轉(zhuǎn)，其結(jié)果是保持裝置39沿圖10所示方向旋轉(zhuǎn)成顛倒狀態(tài)。由于保持裝置39旋轉(zhuǎn)，含有細胞的溶液的自體細胞可以均勻地附著在血管組織B上，而沒有重力效應。
下面將結(jié)合圖1等說明通過使用活體組織處理設備10排除和接種細胞的方法。
首先，將包括主動脈瓣V的血管組織B從諸如豬的動物體內(nèi)取出。按上述方法將血管組織B放入保持裝置10B。將細胞排除溶液注入活體組織處理設備10，然后循環(huán)。作為細胞排除溶液，使用了諸如脫氧膽酸(膽酸)，十二烷基硫酸鈉(SDS)，或Triton X-100的表面活性劑。此時，細胞排除溶液在活體組織處理設備10中循環(huán)，同時按上述方法保持所述溶液的狀態(tài)接近于人體流動狀態(tài)，在按壓開關(guān)(未示出)時，圖1所示的吸入/供給裝置11被啟動。然后，細胞排除溶液通過驅(qū)動泵12的脈動通過循環(huán)通道13循環(huán)。更具體地講，從驅(qū)動泵12中噴出的細胞排除溶液以實際上相當于人體常見大動脈壓力的壓力流過上游管L1，通過設置在上游管L1中間的保持裝置10B，并且到達阻力形成裝置23，以便產(chǎn)生相當于人體外周阻力的阻力。從阻力形成裝置23流出的細胞排除溶液通過連接泵28，并且以實際上相當于左心房的壓力的大約10mmHg的壓力流入驅(qū)動泵12。
此時，在保持裝置10B上，細胞排除溶液流過保持在保持裝置39中的血管組織B內(nèi)部和外部，其流動狀態(tài)相當于流過人體大動脈的血流的狀態(tài)；與此同時，對按上述方法通過保持裝置39的自轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)動的血管組織B施加微波。這樣，將各種類型的原始細胞(內(nèi)皮細胞，成纖維細胞，平滑肌細胞)從取自動物的血管組織B中排除。結(jié)果，留下了僅由膠原組成的基質(zhì)。在本實施方案中，微波被設定為頻率為2.45GHz，功率為大約100W-500W，不過并不局限于這種條件。不過，微波功率可以在預定范圍內(nèi)改變，只要微波不會對血管組織B產(chǎn)生任何變性(對人體有害)，并且產(chǎn)生預定的細胞排除效果就行。另外，可以使用頻率不同的電磁波和聲波。再者，細胞排除溶液的流動即使不與血液流動類似也是可行的。換句話說，搏動流也是可以接受的。
在細胞排除溶液從活體組織處理設備10中排除之后，將生理鹽水注入活體組織處理設備10。在裝置10通過循環(huán)生理鹽水洗滌之后，將生理鹽水從活體組織處理設備10中排除。然后，將諸如纖連蛋白的黏合劑直接注入保持裝置39的第一通道，以便關(guān)閉流入部分62和流出部分63的開口端。這樣，將業(yè)已排除了細胞并且保持在保持裝置39中的血管組織B在所述黏結(jié)劑中浸泡預定的時間。然后，將黏結(jié)劑從保持裝置39中排除，并且將含有細胞的溶液注入保持裝置39。含有細胞的溶液是通過以下方法制備的采集受體的自體細胞(內(nèi)皮細胞，成纖維細胞和/或平滑肌細胞)，培養(yǎng)預定的時間，并且添加到預定的培養(yǎng)液中。作為培養(yǎng)液，任何培養(yǎng)液都可以使用，只要它可用于細胞接種過程就行。這種培養(yǎng)液的例子包括M199(培養(yǎng)基199，由LifeTechnologies公司生產(chǎn))。與黏結(jié)劑的情況相同，將業(yè)已排除了細胞的血管組織B在含有細胞的溶液浸泡預定的時間，然后啟動循環(huán)裝置10A，以便使含有細胞的溶液在活體組織處理設備10循環(huán)，其流動狀態(tài)與人體的血液流動相當。這樣，將業(yè)已排除了細胞的血管組織B放入以相當于通過人類大動脈的血液流動狀態(tài)流動的含有細胞的溶液中，將自體細胞接種到血管組織B中。在通過循環(huán)裝置10A產(chǎn)生搏動流之前，啟動旋轉(zhuǎn)驅(qū)動裝置124(參見圖3)。這樣，浸泡在含有細胞的溶液的血管組織B以顛倒的方式旋轉(zhuǎn)，以便將含有細胞的溶液均勻地結(jié)合在血管組織B的實際上的整個區(qū)域，而沒有重力效應的影響。注意，這種旋轉(zhuǎn)作業(yè)可以在產(chǎn)生含有細胞的溶液的搏動流期間連續(xù)地進行。
根據(jù)這樣一種實施方案，可以顯著提高細胞排除效果和細胞接種效果。與此同時，細胞排除過程和細胞接種過程可以按一定的操作順序進行，同時將血管組織B保持在保持裝置39中。與移植相關(guān)的異種生物瓣膜的處理可以在短時間內(nèi)簡單地進行。另外，由于這種系列操作可以在一個密封的通道中進行，異種生物瓣膜可以保持清潔，同時防止污染。
然后，本發(fā)明人進行了實驗，以便驗證基于本發(fā)明的細胞排除效果和細胞接種效果。
(1)細胞排除效果實驗[例1]在例1中，將37℃的膽酸用作細胞排除溶液。將膽酸注入循環(huán)裝置10A，并且讓它流動，以便相當于人類大動脈中的血液流動(搏動流)。讓包括主動脈瓣的豬血管組織在所述液流中單獨待24小時。此時，循環(huán)裝置10A在以下條件下工作平均流速5L/分鐘，驅(qū)動泵12的搏動速度(攪打速率)70次/分鐘，膽酸的平均液壓大約90mmHg，而液體的最大壓力和最小壓力可以分別相當于典型人體的最大和最小脈壓。在處理之后，在顯微鏡下觀察血管組織，并且通過照相機拍攝放大的圖像。對保留在血管組織中的原始細胞(內(nèi)皮細胞和成纖維細胞)進行計數(shù)，以便獲得單位面積(1mm2)的平均原始細胞數(shù)量。
結(jié)果，參見圖11，單位面積上保留了大約850個原始細胞。
在例2中，除了例1的條件之外，對血管組織施加預定的微波，同時通過保持裝置10B旋轉(zhuǎn)。在這里使用了頻率為2.45GHz的微波，并且在以下三種不同條件下通過改變功率和輻射時間施加100W的功率8小時，500W的功率12小時，和500W的功率24小時。在所有場合下，血管組織以自轉(zhuǎn)的方式每分鐘旋轉(zhuǎn)4次。以與例1相同的方式對保留在血管組織中的原始細胞進行計數(shù)，并且獲得了單位面積(1mm2)的平均細胞數(shù)量。
結(jié)果，在以100W的功率施加8小時的微波時，在單位面積上保留了大約380個原始細胞。另一方面，在以500W的功率施加12小時和24小時的微波的條件下，沒有觀察到保留的原始細胞。另外，原始組織中所包含的蛋白實際上被排除了。在所有場合下，膠原和彈性蛋白實際上不受影響。
作為例1和2的比較例進行了一項實驗。將在例1所使用的血管組織浸泡在膽酸中，在容器中靜置24小時。對血管組織中保留的原始細胞進行計數(shù)，以便以與例1相同的方式獲得單位面積(1mm2)的平均原始細胞數(shù)量。
結(jié)果，參見圖11，單位面積上保留了大約970個原始細胞。
在進行細胞排除過程之前的起始條件下，在用于例1和2和比較例1中的血管組織中單位面積(1mm2)存在1880個原始細胞。
根據(jù)以上結(jié)果，很顯然，在例1和例2中排除的原始細胞的數(shù)量明顯大于在比較例1中排除的原始細胞的數(shù)量。因此，驗證了高的細胞排除效果。具體地講，在比較血管組織被簡單地浸泡在膽酸的搏動流中的場合(例1)與除了浸泡處理之外額外實施微波輻射的場合相比時，在后一種情況下細胞排除效果更好。當微波頻率從100W到500W時，原始細胞不能保留下來。注意，盡管這里省略了詳細說明，上面所提到的微波可施加在浸泡在膽酸中的血管組織上，允許它保留靜止不動。這種情況的細胞排除效果好于比較例1的效果。
(2)細胞接種效果的實驗[例3]在例3中，在細胞排除過程之后，用生理鹽水洗滌血管組織大約1小時，并且在纖連蛋白中浸泡4小時。與此同時，從要移植的受體的活體中取出自體細胞(內(nèi)皮細胞)，以便制備含有細胞的溶液。這里所使用的含有細胞的溶液是通過以下方法制備的在含有M199的培養(yǎng)平板上培養(yǎng)所采集的自體細胞5天，用胰蛋白酶排除培養(yǎng)平板上培養(yǎng)的自體細胞，并且添加到M199中。所述細胞在補充了FBS(胎牛血清IWK-500，由Iwaki生產(chǎn))，抗生素(青霉素/鏈霉素混合溶液)，和FGF-2(由Pepro Tech Ec Ltd.生產(chǎn))的M199中培養(yǎng)。
然后，將血管組織在含有細胞的溶液中浸泡大約4小時，同時上下轉(zhuǎn)動血管組織。在細胞接種過程之后，在顯微鏡下觀察血管組織，并且用照相機拍攝血管組織的放大圖像。觀察接種在血管組織中的自體細胞(內(nèi)皮細胞)的狀態(tài)。
結(jié)果，發(fā)現(xiàn)自體細胞被接種到實際上整個血管組織中，參見圖12。實際上，在血管組織的單位面積(1mm2)上平均結(jié)合了大約850個自體細胞。在血管組織的單位面積(1mm2)上由自體細胞所占據(jù)的面積的比例(粒度)平均為大約18％。
在例4中，在以與例3相同的步驟處理血管組織之后，讓含有細胞的溶液在與例1相同的流動條件下在循環(huán)裝置10A中循環(huán)。
更具體地講，在血管組織浸泡在含有細胞的溶液中保持靜止不動大約48小時之后，將它上下旋轉(zhuǎn)大約4小時。然后，讓含有細胞的溶液流動，以便相當于人體大動脈中的血液流動。將血管組織單獨留在所述液流中一小時。然后，用與例3相同的方式觀察接種在血管組織中的自體細胞的狀態(tài)。
結(jié)果，發(fā)現(xiàn)自體細胞實際上被均勻地接種在血管組織的所有部位，并且自體細胞沿含有細胞的溶液的流動方向排列，參見圖13。另外，與例3相比，細胞密度提高了，這是因為自體細胞的增殖。在本實施例中，結(jié)合在單位面積(1mm2)的血管組織上的自體細胞的數(shù)量平均為大約2170。在單位面積(1mm2)的血管組織上由自體細胞所占據(jù)的面積的比例(密度)平均為大約63％。
例5是按照與例4相同的方式實施的，所不同的是，保持血管組織在含有細胞的溶液中靜止不動的步驟和上下轉(zhuǎn)動血管組織的步驟是按相反的順序進行的。更具體地講，在本實施例中，浸泡在含有細胞的溶液中的血管組織上下轉(zhuǎn)動大約4小時，然后在靜止狀態(tài)下將血管組織浸泡在含有細胞的溶液中48小時。然后，讓所述含有細胞的溶液流動，以便相當于大動脈中的人體血液流動，并且讓血管組織單獨留在所述液流中一小時。其他條件與例4相同。然后，按照與例4相同的方法觀察接種在血管組織中的自體細胞的狀態(tài)。
結(jié)果，自體細胞以與例4相同的方式增殖并且增加密度。除此之外，與例4相比，自體細胞更均勻地接種在所有部位。
例6是以與例5相同的方式進行的，所不同的是，將血管組織留在按照與例5相同的條件制備的含有細胞的溶液的液流中的時間被設定為48小時。
結(jié)果，接種的細胞增殖并且覆蓋血管組織的實際上整個表面。
例7是以與例6相同的方式進行的，所不同的是，改變了含有細胞的溶液的流動條件。更具體地講，將含有細胞的溶液的平均流速設定為2L/分鐘，將含有細胞的溶液的平均液體壓力設定為大約20mmHg。
結(jié)果，實際上獲得了與例6相同的效果。換句話說，如果采用本發(fā)明的細胞接種方法的話，即使含有細胞的溶液的流動條件根據(jù)受體(要移植的患者)的血液流動狀態(tài)和心臟瓣膜定位而改變，接種在血管組織中的自體細胞也可以增殖并且覆蓋它的幾乎整個表面。因此，一般來說，可以制備生物瓣膜，以便滿足從成年人到兒童的心臟瓣膜的條件，這些人在體內(nèi)的血液循環(huán)量不同，并且它們的血壓也不同。
作為例3-7的比較例進行了一項實驗。使血管組織單獨留在溶液中，而不上下轉(zhuǎn)動，以便與例3進行比較，并且按照與例3相同的方式觀察接種到血管組織中的自體細胞的狀態(tài)。
結(jié)果，接種了自體細胞，但是非均勻地分布在血管組織中。因此，接種在血管組織中的自體細胞的數(shù)量與例3-7相比顯著減少了。
根據(jù)上述結(jié)果，在例3-7中與所述組織結(jié)合的自體細胞數(shù)量顯著大于比較例2中的數(shù)量。就是說，獲得了高的細胞接種效果。具體地講，當血管組織浸泡在含有細胞的溶液的搏動流中時，改善了細胞的定向。另外，激活了細胞，并且改善了細胞的功能，其結(jié)果是可以接種更大數(shù)量的細胞。
本發(fā)明可應用于其他活體組織的細胞排除過程，正如在本實施方案中所披露的，它的血液與含有主動脈瓣的血管組織以外的組織接觸。另外，本發(fā)明可用于處理同種異體生物瓣膜，而不是異種生物瓣膜。
在本發(fā)明的細胞排除方法中，在本實施方案中所披露的活體組織處理設備10中實際上不是必須使用的?？梢允褂酶鞣N設備和裝置，只要它們能排除細胞就行。換句話說，任何裝置都可以使用，只要它能在細胞排除過程中提供溶液的預定的搏動流用于浸泡活體組織和/或它可以對活體組織施加微波就行。
正如上文所披露的，根據(jù)本發(fā)明，存在于諸如異種生物瓣膜的活體組織中的原始細胞可以排除，并且在移植之后活體組織的生物兼容性可以提高。
工業(yè)實用性本發(fā)明可用于將從包括人在內(nèi)的動物體內(nèi)取出的生物瓣膜處理成能夠移植到人體中的狀態(tài)。
權(quán)利要求
1.用于在移植活體組織時排除活體組織中的原始細胞的細胞排除方法，包括將活體組織浸泡在細胞排除溶液中，其中，使所述細胞排除溶液以搏動流的狀態(tài)流動，并且，將活體組織放入所述搏動流。
2.一種在移植活體組織時用于排除活體組織中的原始細胞的細胞排除方法，包括將活體組織浸泡在細胞排除溶液中，其中，用微波輻射放入所述細胞排除溶液中的活體組織。
3.如權(quán)利要求2的細胞排除方法，其中，使所述細胞排除溶液以搏動流的狀態(tài)流動，并且，將活體組織放入所述搏動流中。
4.如權(quán)利要求2或3的細胞排除方法，其中，在所述活體組織相對微波輻射部位轉(zhuǎn)動時施加所述微波。
全文摘要
在從動物身體上取出的準備放入人體的諸如心臟瓣膜的活體組織移植中，使用于排除活體組織中的原始細胞的細胞排除溶液的流動狀態(tài)大體上等于移植物受體活體的流動狀態(tài)，并且將所述活體組織放入所述液流中，以便將所述活體組織有效浸泡在細胞排除溶液中。在浸泡時，優(yōu)選將所述活體組織放入細胞排除溶液，同時旋轉(zhuǎn)、用微波輻射。結(jié)果，可以將原始細胞均勻并且可靠地從活體組織中排除，以便可以提高在移植之后活體組織的生物兼容性。
文檔編號A61L27/00GK1787792SQ200480013198
公開日2006年6月14日 申請日期2004年5月12日 優(yōu)先權(quán)日2003年5月15日
發(fā)明者梅津光生, 巖崎清隆, 尾崎重之, 守本祐司, 遠藤修 申請人:學校法人早稻田大學, 歐貝克斯株式會社