專利名稱：治療輪狀病毒感染的含有乳果糖的組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明一般性涉及抑制病毒感染的方法，尤其涉及應(yīng)用含寡糖的組合物抑制輪狀病毒感染哺乳動(dòng)物細(xì)胞。
相關(guān)領(lǐng)域描述世界范圍內(nèi)，輪狀病毒感染是導(dǎo)致嬰兒、幼兒和兒童腹瀉的最常見原因。該類病癥可以和霍亂一樣嚴(yán)重，能導(dǎo)致嚴(yán)重脫水和死亡。全球每年約有1.25億例腹瀉是由輪狀病毒引起的，并且占所有因腹瀉住院的5歲以下兒童的30-40％。在美國(guó)，約有1/78的兒童在長(zhǎng)到5歲前會(huì)因輪狀病毒引起的腹瀉而住院。在發(fā)展中國(guó)家，每年死于輪狀病毒感染的兒童在600,000到800,000之間。該項(xiàng)死亡數(shù)約占所有5歲以下兒童死亡數(shù)的5％。常規(guī)治療依賴于預(yù)防輪狀病毒所致腹瀉疫苗的開發(fā)。因此，開發(fā)一種抗輪狀病毒疫苗已成為主要的公共衛(wèi)生目標(biāo)，但這已證實(shí)難以捉摸。盡管輪狀病毒屬已被測(cè)序并且已知很多有關(guān)它的結(jié)構(gòu)、生物化學(xué)、免疫學(xué)和藥理學(xué)，但試圖生產(chǎn)一種安全的疫苗至今仍未成功(J.Ped.Gastr.Nutr.3010-11，2000，)1999年，當(dāng)一些嬰兒在接種后的1-3周內(nèi)引發(fā)腸套迭曝光后，該疫苗被撤出美國(guó)市場(chǎng)。腸套迭指腸的一部分的自身折疊。這類折疊壓制了含有供給這些腸營(yíng)養(yǎng)的血管的腸壁組織和腸系膜區(qū)組織。因此，目前迫切需要可抑制輪狀病毒腹瀉或改善它的嚴(yán)重性并且不會(huì)引起不需要的副作用的方法。已注意到母乳喂養(yǎng)的嬰兒腹瀉發(fā)生率低。多數(shù)這類保護(hù)活性被認(rèn)為是由于人乳中含有某些抗體，如分泌型IgA，這類抗體已知能有效抵抗輪狀病毒。然而，在人乳中這類抗體的水平似乎不足以完全解釋抵抗輪狀病毒感染的有效保護(hù)。目前認(rèn)為人乳可能含有其它抵抗輪狀病毒及其它病原體的活性保護(hù)劑。哺乳動(dòng)物細(xì)胞，包括人類細(xì)胞，在它們表面都呈現(xiàn)出某些復(fù)合糖的序列，這類糖在細(xì)胞與外界交流中扮演一定角色。細(xì)菌、病毒和其它病原體可采用糖結(jié)合蛋白附著于這些位于細(xì)胞表面的糖位點(diǎn)，并因此引起細(xì)胞感染。然而，某些糖可存在于所有上皮細(xì)胞排列于其上的粘膜層或存在于與細(xì)胞接觸的體液中，作為誘導(dǎo)劑以抑制病原體附著細(xì)胞。這些誘導(dǎo)物質(zhì)具有與存在于細(xì)胞表面的糖相似的結(jié)構(gòu)，但并不附著于目標(biāo)細(xì)胞。該誘導(dǎo)化合物與病原體的糖結(jié)合蛋白結(jié)合。與誘導(dǎo)物結(jié)合的病原體通過所述組織的特異的排泄機(jī)理被清除出機(jī)體，例如，呼吸道中的粘液纖毛(mucociliary)作用或胃腸道的大體液運(yùn)動(dòng)。在本領(lǐng)域內(nèi)已知可以應(yīng)用寡糖抑制病原體與哺乳動(dòng)物細(xì)胞的結(jié)合。例如，專利號(hào)為6,001,819的美國(guó)專利公開了一種抑制細(xì)菌建群的方法，所述細(xì)菌選自肺炎鏈球菌(Streptococcus Pneumoniae)、流感嗜血桿菌(Hemophilies Influenzae)、副流感嗜血桿菌(HaemopnilusParainfluenzae)、洋蔥伯克霍爾德菌(Burkholderia(假單胞菌屬Pseudomonas)cepacia)及其混合物。所述方法包含給予患者有效量的抑制結(jié)合的合成糖。另一方面，美國(guó)專利5,827,526公開了一種減少人類腹瀉持續(xù)時(shí)間的方法，該方法包含給予人體一定的果寡糖(fructooligosaccharides)混合物。一種有效水平的霉菌赤蘚醛糖(nystose)、1F-β-呋喃果糖或它們的混合物用以減少腹瀉的持續(xù)時(shí)間。寡糖混合物可以作為部分營(yíng)養(yǎng)品服用。該產(chǎn)品可以為嬰兒配方食品、第二階段配方奶(follow-on formula)、幼兒飲料、牛奶、酸乳或發(fā)酵產(chǎn)品。它還可以是糖果、口香糖、片劑、錠劑或液體劑。類似地，美國(guó)專利5,658,893公開了一種抑制動(dòng)物或人類消化道上皮細(xì)胞被輪狀病毒感染的方法，該方法包含給予所述動(dòng)物或人體某些多糖硫酸酯。特別公開的多糖為葡聚糖硫酸酯、λ-角叉菜膠、ι-角叉菜膠和κ-角叉菜膠。優(yōu)選類型為λ-角叉菜膠并且它可以通過添加到營(yíng)養(yǎng)品中服用。由于寡糖和多糖對(duì)于病原體與哺乳動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合的抑制作用為本領(lǐng)域所熟知，不同的病毒對(duì)于不同的寡和多糖有不同的反應(yīng)。特定病毒對(duì)于特定糖的反應(yīng)不能被預(yù)知。乳果糖是一種自然界不存在的合成的二糖(4-O-β-D-乳吡喃糖-D-呋喃果糖)。它可通過加熱處理牛奶小量產(chǎn)生或通過對(duì)乳糖進(jìn)行堿異構(gòu)化而大量生產(chǎn)。高劑量的乳果糖已被用于治療某些醫(yī)學(xué)病癥，也就是便秘和肝腦病。此外，它還被視為有效促進(jìn)結(jié)腸內(nèi)雙歧桿菌生長(zhǎng)的前生物成分。不過，乳果糖具有抑制輪狀病毒與上皮細(xì)胞系結(jié)合的作用還未被認(rèn)識(shí)?，F(xiàn)在意外地發(fā)現(xiàn)，乳果糖抑制輪狀病毒與上皮細(xì)胞的結(jié)合。乳果糖的抑制特性，與營(yíng)養(yǎng)品中添加的寡糖的性能一起，使得開發(fā)一種有效的方法以避免由輪狀病毒誘導(dǎo)的嬰兒、幼兒和兒童腹瀉或改善其嚴(yán)重性成為可能。
發(fā)明概述簡(jiǎn)言之，本發(fā)明涉及一種新型的抑制哺乳動(dòng)物細(xì)胞被輪狀病毒感染的方法，該方法包含給予哺乳動(dòng)物有效量的乳果糖。該方法可應(yīng)用于動(dòng)物和人，包括嬰兒、幼兒和兒童。本發(fā)明還涉及一種新型的包含有效抑制哺乳動(dòng)物細(xì)胞被輪狀病毒感染的量的乳果糖的嬰兒配方食品組合物，并且涉及一種嬰兒、幼兒和兒童營(yíng)養(yǎng)品，其包含有效抑制哺乳動(dòng)物細(xì)胞被輪狀病毒感染的量的乳果糖。
附圖簡(jiǎn)述表1是一張顯示了輪狀病毒感染的MA104細(xì)胞，在不同稀釋水平的治療結(jié)果圖。
優(yōu)選具體實(shí)施方案的詳細(xì)描述詳細(xì)提到了本發(fā)明的實(shí)施方案，其中一或多個(gè)實(shí)施例闡述如下。所提供的每個(gè)公開的實(shí)例是作為對(duì)本發(fā)明的說(shuō)明，并不是對(duì)本發(fā)明的限制。事實(shí)上，對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見的是，各種修改和變化可在本發(fā)明中進(jìn)行而并未背離本發(fā)明的范圍或精神。例如，作為一個(gè)實(shí)施方案的一部分闡明的或描述的特征可以在另一實(shí)施方案中使用以產(chǎn)生進(jìn)一步的實(shí)施方案。因此，本發(fā)明旨在將這類修改和變化涵蓋于所附的權(quán)利要求及其等同權(quán)利要求中。本發(fā)明的其它目標(biāo)、特征和方面在下列詳細(xì)描述中被公開或隨之明朗。本討論僅是出于對(duì)示例性實(shí)施方案的描述，而并非旨在限制本發(fā)明的更廣方面，這點(diǎn)應(yīng)為本領(lǐng)域一般技術(shù)人員所理解。根據(jù)本發(fā)明，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)給予動(dòng)物或人有效量的乳果糖會(huì)抑制輪狀病毒對(duì)哺乳動(dòng)物細(xì)胞的感染。該發(fā)現(xiàn)使得有可能開發(fā)一種有效的方法以避免或改善輪狀病毒誘導(dǎo)的嬰兒、幼兒和兒童腹瀉的影響。只要給予有效量的寡糖，本發(fā)明方法中乳果糖的給藥形式并非關(guān)鍵。一種方便的給藥形式是將乳果糖加入到嬰兒配方食品(包括足月的和早產(chǎn)的嬰兒)、第二階段配方奶、幼兒飲料、牛奶、酸乳或發(fā)酵產(chǎn)品中。另外，乳果糖可作為配方食品添加劑而并非以整體配方食品喂養(yǎng)，例如，以滴劑、囊劑或與其它營(yíng)養(yǎng)素如維生素合并給藥。乳果糖還可添加到其它適于喂養(yǎng)小孩的營(yíng)養(yǎng)品中，如固體嬰兒食品、果汁、果凍、餅干、糖果等。其它的在營(yíng)養(yǎng)品中給予的乳果糖實(shí)例可以由嬰兒和兒童營(yíng)養(yǎng)領(lǐng)域中的普通技術(shù)人員開發(fā)。所有這些乳果糖給藥形式，以及其它形式都包含在本發(fā)明的范圍內(nèi)。在本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案中，乳果糖作為嬰兒配方食品的一部分給藥。本發(fā)明中所使用的嬰兒配方食品，典型地為全營(yíng)養(yǎng)的，包含適當(dāng)類型和數(shù)量的脂類、糖、蛋白、維生素和礦物質(zhì)。脂類或脂肪的量典型地可在約3-7g/100kcal之間變化。蛋白的量典型地可在約1-5g/100kcal之間變化。糖的量典型地在約6-16g/100kcal之間變化。蛋白來(lái)源可以為任何在本領(lǐng)域內(nèi)使用的，如脫脂乳品、乳清蛋白、酪蛋白、大豆蛋白、水解蛋白和氨基酸。脂類來(lái)源可以為任何在本領(lǐng)域內(nèi)使用的，如植物油如棕櫚油、大豆油、棕櫚精油(palmolein oil)、玉米油、蕓苔油、椰子油、中鏈甘油三酯油、高油(high oleic)向日葵油以及高油(high oleic)紅花子油。糖來(lái)源可以為任何在本領(lǐng)域內(nèi)已知的，如乳糖、葡萄糖聚合體、玉米糖漿固體、麥芽糖糊精、蔗糖、淀粉和大米糖漿固體?？梢苑奖愕厥褂脦追N市售嬰兒配方食品。例如，含鐵的EnfamilLipil(從美國(guó)印第安那州Evansville市的Mead Johnson & Company公司處獲得)中可以添加有效量的乳果糖并按本發(fā)明的方法使用。實(shí)施例3-8中描述了本發(fā)明特別適宜的嬰兒配方食品。本發(fā)明所使用的有效量典型地從約每天每千克體重1.5mg到每天每千克體重450mg。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，使用量為從每天每千克體重約4mg到每天每千克體重約225mg。在另一實(shí)施方案中，使用量為從每天每千克體重約5mg到每天每千克體重約100mg。本發(fā)明中乳果糖在嬰兒配方食品中的使用量典型地在約1.5mg/100kcal至約450mg/100kcal之間變化。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，它在約4mg/100kcal至約225mg/100kcal之間變化，而在另一實(shí)施方案中，從約5mg/100kcal至約100mg/100kcal。本發(fā)明中使用的補(bǔ)充乳果糖的嬰兒配方食品可通過本領(lǐng)域內(nèi)已知的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)制備。例如，可通過替換等量的其它糖或多糖將乳果糖添加到配方食品中。作為另一個(gè)實(shí)例，乳果糖可與含有有益微生物如乳酸桿菌和雙歧桿菌的活培養(yǎng)物一起添加到配方食品中。下列實(shí)施例描述了本發(fā)明的具體實(shí)施方案。根據(jù)對(duì)此處所公開的本發(fā)明的說(shuō)明書或?qū)嵺`的思考，其它在此權(quán)利要求書范圍內(nèi)的實(shí)施方案對(duì)于本領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)人員是顯而易見的。所述的說(shuō)明書與實(shí)施例一起被認(rèn)為僅是作為示例，本發(fā)明的范圍和精神由實(shí)施例后面的權(quán)利要求書顯示。除另有說(shuō)明，在實(shí)施例中所有的百分比都是以重量計(jì)的。
實(shí)施例1本實(shí)施例顯示了評(píng)估乳果糖和其它寡糖抑制輪狀病毒與哺乳動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合作用的研究結(jié)果。上皮形態(tài)的MA-104細(xì)胞從美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心(American Type Culture Collection)處得到的，該細(xì)胞最初是從恒河猴胚胎腎中獲得的。上述細(xì)胞在加濕培養(yǎng)箱中于37℃和5％CO2中，在添加了10％從Hyclone，Logan，UT得到的胚胎牛血清的Earle′s平衡鹽溶液(2mM谷氨酰胺、1mM丙酮酸鈉、0.1mM非必需氨基酸和1.5g/L碳酸氫鈉)的最低必需培養(yǎng)基(Minimal Essential Medium)中孵育。該細(xì)胞以1∶4的分裂比率每周傳代兩次。人輪狀病毒株Wa從American Type Culture Collection處得到。將病毒原種在培養(yǎng)基中以1∶5稀釋，等分為0.2mL每瓶并于約-80℃下貯存。人輪狀病毒株，Wa(TC變型)(商品目錄編號(hào)為VR-2018)-最初是從人患者的腹瀉糞便中分離得到(Wyatt等，Science 207189-191，1980；美國(guó)專利4,341,870)-為VP7的血清型1(G1)。MTT活力分析是在從Promega，Madison，W1得到并按生產(chǎn)商說(shuō)明書使用的Promega CellTiter 96非放射活性細(xì)胞試劑盒(Non-Radioactive Cell Kit)(Cat#G400)上進(jìn)行。測(cè)試化合物是通過將每個(gè)化合物溶解在最終濃度為20-μg/ml的不完全的MA-104培養(yǎng)基(含Earle′s平衡鹽溶液的最低必需培養(yǎng)基)中制備。該化合物通過0.45微米過濾器過濾除菌。過濾滅菌的原種在低于-20℃下冷凍貯存。病毒抑制分析病毒株Wa(從原種以1∶2稀釋)在5μg/mL胰蛋白酶存在下激活并與1、10或100μg/ml檢測(cè)化合物一起在無(wú)血清介質(zhì)中于37℃孵育30分鐘。將活化的病毒在相同濃度檢測(cè)化合物的無(wú)血清培養(yǎng)基中以1∶5稀釋(得到胰蛋白酶濃度為1μg/ml)，加入到MA-104細(xì)胞中，并在微量滴定板上連續(xù)稀釋(5-倍系列)。所得稀釋劑含有1μg/ml的胰蛋白酶和指示量的檢測(cè)化合物。當(dāng)病毒在37℃吸附1小時(shí)后，除去病毒接種物，培養(yǎng)基用含有1μg/ml胰蛋白和指示量檢測(cè)化合物的無(wú)血清培養(yǎng)基置換。培養(yǎng)物在37℃孵育3天，按生產(chǎn)商的說(shuō)明書用Promega MTT分析評(píng)估細(xì)胞活力。每板含有未用試驗(yàn)化合物處理的連續(xù)稀釋的病毒，且每板含有暴露于試驗(yàn)化合物不含病毒的細(xì)胞。所有的樣品均檢測(cè)三份。用裝備有SoftMax Pro(v3.1.2)數(shù)據(jù)分析軟件的SpectraMax微板閱讀器(Molecular Devices)檢測(cè)570nm處的吸光度。計(jì)算三次檢測(cè)的平均吸光度、標(biāo)準(zhǔn)偏差以及％CV(標(biāo)準(zhǔn)偏差/平均*100)。使用Q檢驗(yàn)去除異常值(Anderson，RobertL.1987 in Practical Statistics for Analytical Chemists，page 31-33，Table7，Appendix D)。用SoftMax Pro軟件將數(shù)據(jù)擬合為4-參數(shù)曲線。該曲線等式為y＝((A-D)/(1+(x/C)B))＝D，它定義了一個(gè)S型的曲線；當(dāng)X接近0時(shí)A為較低漸近線；當(dāng)X接近無(wú)窮大時(shí)D為較高坪；B為該曲線線性部分斜面；C為ED50。結(jié)果表1和

圖1顯示了MA-104細(xì)胞用輪狀病毒感染并用乳果糖處理的結(jié)果。乳果糖以劑量依賴方式保護(hù)MA-104細(xì)胞免于被病毒破壞。表2顯示了幾種寡糖作用比較的研究結(jié)果。被測(cè)化合物和活化的輪狀病毒于無(wú)血清的培養(yǎng)基中稀釋并添加到5孔MA-104細(xì)胞中。在相同的效價(jià)板上的另外5孔在含有胰蛋白酶的無(wú)血清培養(yǎng)基中暴露于被測(cè)化合物。經(jīng)過三天的孵育后，用MTT代謝分析評(píng)估細(xì)胞活力。被研究的寡糖為唾液乳糖、κ-角叉菜膠、阿拉伯半乳聚糖、低聚乳糖和乳果糖。唾液乳糖、阿拉伯半乳聚糖和低聚乳糖在病毒存在下會(huì)導(dǎo)致明顯的病毒感染所致的細(xì)胞殺滅。(MTT代謝分析中的低值)。這些數(shù)據(jù)與先前的結(jié)果一致，表明這三個(gè)化合物并不抑制輪狀病毒。用病毒和κ-角叉菜膠及乳果糖處理的細(xì)胞仍存活。盡管該發(fā)現(xiàn)與先前的κ-角叉菜膠(美國(guó)專利5,658,526)抑制輪狀病毒感染的數(shù)據(jù)一致，但并沒有數(shù)據(jù)表明乳果糖以這樣的方式作用。
表1.帶有乳果糖的MA-104感染(平均OD值)
表2.有或沒有輪狀病毒暴露于試驗(yàn)化合物后MA-104細(xì)胞存活率
實(shí)施例2本實(shí)施例說(shuō)明了用于本發(fā)明的適于添加乳果糖的嬰兒配方食品。
表3.嬰兒配方食品的營(yíng)養(yǎng)信息(含鐵的EnfamilLipil) 本特定配方食品的成分為縮減礦物質(zhì)乳清、脫脂乳、植物油(棕櫚精油、大豆油、椰子油和高油向日葵油)、乳果糖和少于1％的mortierella alpina油、crypthecodinium cohnii油、維生素A棕櫚酸酯、維生素D3、維生素E乙酸酯、維生素K1、硫胺鹽酸鹽、維生素B6鹽酸鹽、維生素B12、煙酰胺、葉酸、泛酸鈣、生物素、抗壞血酸鈉、肌醇、氯化鈣、磷酸鈣、硫酸亞鐵、硫酸鋅、硫酸鎂、硫酸銅、氯化鈉、檸檬酸鈉、檸檬酸鉀、氫氧化鉀、亞硒酸鈉、牛磺酸、核苷酸(腺苷5’-單磷酸、胞苷5’-單磷酸，鳥苷二鈉5’-單磷酸、尿苷二鈉5’-單磷酸)。為了運(yùn)用這一特定公式去實(shí)踐本發(fā)明，需要添加，例如，1.5mg-10mg的乳果糖至表3中所描述的組合物中。所添加的乳果糖的量將成為糖總量的一部分。
實(shí)施例3本實(shí)施例舉例說(shuō)明了可以添加乳果糖的低變應(yīng)原性的、實(shí)際等滲的、全營(yíng)養(yǎng)的嬰兒配方食品。該配方食品包含中鏈甘油三酸酯(MCT油)作為55％的脂肪混合物和一種蛋白水解產(chǎn)物，為不含乳果糖的粉末或直接使用的液體(每單位包含20卡路里或24卡路里)，由印地安娜州伊萬(wàn)斯維爾的Mead Johnson & Company公司銷售，商品名為EnfamilPregestimil。表4列出了該特定配方食品的營(yíng)養(yǎng)素。所述成分為玉米糖漿固體、酪蛋白水解產(chǎn)物、中鏈甘油三酸酯(MCT油)、葡萄糖、改性玉米淀粉、大豆油、玉米油、高油酸(紅花或向日葵)和少于2％的維生素A棕櫚酸酯、維生素D3、維生素E乙酸酯、維生素K1、維生素B1鹽酸鹽、核黃素、維生素B6鹽酸鹽、維生素B12、煙酰胺、葉酸、泛酸鈣、生物素、維生素C、氯化膽堿、肌醇、枸櫞酸鈣、磷酸鈣、氧化鎂、硫酸亞鐵、硫酸鋅、硫酸鎂、硫酸銅、碘化鈉、枸櫞酸鈉、枸櫞酸鉀、氯化鉀、亞硒酸鈉、乙?；视蛦熙?、L-胱氨酸、L-酪氨酸、L-色氨酸、?；撬?、L-肉毒堿。為了使用本特定配方食品實(shí)踐本發(fā)明，可能會(huì)有必要添加，例如，1.5mg-10mg的乳果糖至表4所描述的組合物中。所添加的乳果糖量將成為糖總量的一部分。
表4.嬰兒配方食品的營(yíng)養(yǎng)信息(EnfamilPregestimil)
實(shí)施例4本實(shí)施例舉例說(shuō)明了可添加乳果糖以實(shí)踐本發(fā)明的幼兒均衡配方食品。該配方食品由Mead Johnson & Company公司以商品名為EnfamilNextStep上市。該配方食品包含下列成分脫脂乳品、玉米糖漿固體、植物油(棕櫚、大豆、椰子和高油葵花籽油)、乳糖和少于2％的維生素A棕櫚酸酯、維生素D3、維生素E乙酸酯、維生素K1、維生素B1鹽酸鹽、核黃素、維生素B6鹽酸鹽、維生素B12、煙酰胺、葉酸、泛酸鈣、生物素、維生素C、氯化膽堿、肌醇、磷酸鈣、硫酸亞鐵、硫酸鋅、硫酸鎂、硫酸銅、亞硒酸鈉、牛磺酸。表5列出了配方食品中的營(yíng)養(yǎng)素。
表5.嬰兒配方食品的營(yíng)養(yǎng)信息(EnfamilNextStep)
實(shí)施例5這是可以添加乳果糖配方食品的另一個(gè)實(shí)施例。在該實(shí)施例中，為一種預(yù)濃縮配方食品，由Mead Johnson & Company公司以商品名為Enfamil A.R.銷售。Enfamil A.R.是一種含有與常規(guī)嬰兒配方食品相似卡路里特征的全營(yíng)養(yǎng)嬰兒配方食品。然而，它提高的粘稠度有益于帶有不成熟胃食管返流(GER)的嬰兒或那些希望濃縮配方食品的嬰兒。它以即用的液體或以粉末形式上市?；镜某煞譃槊撝Ｄ?、植物油(棕櫚、大豆、椰子和高油葵花籽油)、大米淀粉、乳糖、麥芽糖糊精和少于1％的維生素A棕櫚酸酯、維生素D3、維生素E乙酸酯、維生素K1、維生素B1鹽酸鹽、核黃素、維生素B6鹽酸鹽、維生素B12、煙酰胺、葉酸、泛酸鈣、生物素、抗壞血酸、氯化膽堿、肌醇、硫酸亞鐵、硫酸鋅、硫酸鎂、硫酸銅、亞硒酸鈉、?；撬?。表6列出了該配方食品中的營(yíng)養(yǎng)素。
表6.嬰兒配方食品的營(yíng)養(yǎng)信息(EnfamilA.R.)
實(shí)施例6這是可以添加乳果糖的配方食品的另一實(shí)施例。在本實(shí)例中，它為一種含有大豆蛋白的無(wú)牛奶、無(wú)乳果糖和無(wú)蔗糖的嬰兒配方食品。它由Mead Johnson & Company公司，以商品名為EnfamilProSobee，以濃縮液、即用液體或粉末形式上市。濃縮液和即用液的基本成分為水、玉米糖漿固體、植物油(棕櫚、大豆、椰子和高油葵花籽油)、大豆蛋白和少于1％的大豆卵磷脂、單和二脂酸甘油酯、角叉菜膠、維生素A棕櫚酸酯、維生素D3、維生素E鹽酸鹽、維生素B12、煙酰胺、葉酸、泛酸鈣、生物素、抗壞血酸鈉、氯化膽堿、肌醇、磷酸鈣、氯化鎂硫酸亞鐵、硫酸鋅、硫酸銅、碘化鉀、氯化鈉、枸櫞酸鉀、氫氧化鉀、氯化鉀、亞硒酸鈉、L-蛋氨酸、牛磺酸、L-肉毒堿。表7列出了該配方食品中的營(yíng)養(yǎng)素。
表7.嬰兒配方食品的營(yíng)養(yǎng)信息(EnfamilProSobee)
實(shí)施例7這是可以添加乳果糖配方食品的另一實(shí)施例。在本實(shí)例中，所述配方食品專為對(duì)乳品敏感幼兒的易消化和均衡配方食品。它不含乳而含有高質(zhì)量大豆蛋白，含有適合幼兒的蛋白水平。它還含有牛奶所缺乏的鐵以及為幫助滿足成長(zhǎng)幼兒所需的營(yíng)養(yǎng)素所設(shè)計(jì)的完整的糖、脂肪、蛋白、維生素和礦物質(zhì)。該配方食品由Mead Johnson& Company公司以EnfamilNextStepSoy為商品名銷售。該配方食品中的基本成分為玉米糖漿固體、植物油(棕櫚、大豆、椰子和高油向日葵油)、大豆蛋白分離物、糖和少于2％的維生素A棕櫚酸酯、維生素D3、維生素E乙酸酯、維生素K1、鹽酸硫胺、核黃素、維生素B6鹽酸鹽、維生素B12、煙酰胺、葉酸、泛酸鈣、生物素、抗壞血酸鈉、氯化膽堿、肌醇、磷酸鈣、碳酸鈣、氯化鎂、硫酸亞鐵、硫酸鋅、硫酸鎂、硫酸銅、碘化鉀、氯化鈉、枸櫞酸鉀、氯化鉀、磷酸鉀、亞硒酸鈉、L-蛋氨酸、?；撬?、L-肉毒堿。表8列出了該配方食品中的營(yíng)養(yǎng)素。
表8.嬰兒配方食品的營(yíng)養(yǎng)信息(EnfamilA.R.)
實(shí)施例8乳果糖還可以添加到復(fù)合維生素或其它營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑中。例如，它可以添加到Poly-Vi-Sol滴劑、含鐵的Poly-Vi-Sol滴劑、Poly-Vi-Sol咀嚼片、含鐵的Poly-Vi-Sol咀嚼片這四種由MeadJohnson & Company公司銷售的復(fù)合維生素補(bǔ)充劑中。Poly-Vi-Sol滴劑中的成分為人造香精和色素(焦糖)、抗壞血酸、硫酸亞鐵(作為維生素B12的穩(wěn)定劑)、甘油、煙酰胺、吐溫80、核黃素-5-磷酸鈉、硫胺鹽酸鹽、維生素A棕櫚酸酯、維生素B6鹽酸鹽、維生素B12、維生素D3、維生素E琥珀酸鹽、水。含鐵的Poly-Vi-SolO滴劑成分為人造香精和色素(焦糖)、抗壞血酸、硫酸亞鐵、甘油、煙酰胺、吐溫80、核黃素-5-磷酸鈉、硫胺鹽酸鹽、維生素A棕櫚酸酯、維生素B6鹽酸鹽、維生素D3、維生素E琥珀酸鹽、水。Poly-Vi-SolO咀嚼片的成分為人造香精和色素(黃6、紅40、藍(lán)2)、抗壞血酸、葡聚糖結(jié)合劑，葉酸、硬脂酸鎂、煙酰胺、核黃素、鹽、二氧化硅、抗壞血酸鈉、糖、硫胺一硝酸鹽、維生素A醋酸鹽、維生素B6鹽酸鹽、維生素B12、維生素D3、維生素E醋酸鹽。含鐵的Poly-Vi-SolO咀嚼片成分為人造香精和色素(紅40)、抗壞血酸、氧化銅、葡聚糖結(jié)合劑、延胡索酸亞鐵、葉酸、硬脂酸鎂、煙酰胺、核黃素、鹽、二氧化硅、抗壞血酸鈉、硬脂酸、糖、硫胺一硝酸鹽、維生素A醋酸酯、維生素B6鹽酸鹽、維生素B12、維生素D3、維生素E醋酸、氧化鋅。表9列出了這些每個(gè)復(fù)合維生素補(bǔ)充劑的維生素含量。
表9
*嬰兒每天攝入值(DV)百分比。
**成人和4歲以上兒童每天攝入值(DV)百分比。
±來(lái)自50mg七水硫酸亞鐵±±來(lái)自40mg富馬酸鐵本發(fā)明的這些和其它的修改和變化可以被本領(lǐng)域內(nèi)普通的技術(shù)人員所實(shí)踐，而沒有背離本發(fā)明的精神與范圍，在所附的權(quán)利要求中尤其說(shuō)明了這點(diǎn)。另外，不言而喻的是各實(shí)施方案的全部或部分內(nèi)容是可互相替換的。此外，本領(lǐng)域里普通技術(shù)人員將領(lǐng)會(huì)到前面的描述僅僅是舉例而并非是對(duì)本發(fā)明的限制，因此在該附加權(quán)利要求書中有進(jìn)一步的描述。因此，所附的權(quán)利要求書的精神和范圍不應(yīng)被限于優(yōu)選版本中的所包含的描述中。在本說(shuō)明書中所有引用的參考，包括但不限于所有論文、出版物、專利、專利申請(qǐng)、簡(jiǎn)報(bào)、文章、報(bào)告、手稿、小冊(cè)子、書、網(wǎng)絡(luò)記錄、雜志文章、期刊等，通過引用整體結(jié)合到本說(shuō)明書中。在此所討論的參考旨在僅僅對(duì)它們的作者論斷的總結(jié)而并未承認(rèn)任何參考構(gòu)成了現(xiàn)有技術(shù)。申請(qǐng)者保留有對(duì)所引用參考文獻(xiàn)的準(zhǔn)確性和相關(guān)性進(jìn)行探究的權(quán)力。
權(quán)利要求
1.一種抑制輪狀病毒感染哺乳動(dòng)物或人細(xì)胞的方法，該方法包括給予哺乳動(dòng)物有效抑制輪狀病毒感染的量的乳果糖。
2.權(quán)利要求1的方法，其中乳果糖給予五歲或五歲以下的兒童。
3.權(quán)利要求1的方法，其中乳果糖是作為營(yíng)養(yǎng)品的一部分給予。
4.權(quán)利要求3的方法，其中營(yíng)養(yǎng)品選自嬰兒配方食品、第二階段配方奶、幼兒飲料、果汁、乳品、酸乳和發(fā)酵產(chǎn)品。
5.權(quán)利要求3的方法，其中營(yíng)養(yǎng)品為嬰兒配方食品。
6.權(quán)利要求5的方法，其中嬰兒配方食品為全營(yíng)養(yǎng)配方食品。
7.權(quán)利要求5的方法，其中嬰兒配方食品包含約3-7g/100kcal配方食品的脂肪；約1-5g/100kcal配方食品的蛋白質(zhì)；約6-16g/100kcal配方食品的糖；維生素和礦物質(zhì)。
8.權(quán)利要求3的方法，其中營(yíng)養(yǎng)品選自固體嬰兒食品、糖果、餅干和果凍。
9.權(quán)利要求1的方法，其中乳果糖以液體滴劑、散劑、丸劑、膠囊劑、片劑、錠劑給予或與維生素合并給予。
10.權(quán)利要求1的方法，其中所給予乳果糖的量為每千克體重約1.5mg至每千克體重約450mg。
11.權(quán)利要求10的方法，其中所給予乳果糖的量為每千克體重約5mg至每千克體重約100mg。
12.一種組合物，包含有效抑制輪狀病毒感染量的乳果糖。
13.權(quán)利要求12的包含乳果糖的組合物，其中所述組合物為營(yíng)養(yǎng)品。
14.權(quán)利要求13的組合物，其中營(yíng)養(yǎng)品為嬰兒配方食品。
15.權(quán)利要求14的嬰兒配方食品，其中配方食品為早產(chǎn)嬰兒配方食品。
16.權(quán)利要求15的嬰兒配方食品，還包含ARA和DHA。
17.權(quán)利要求12的組合物，其中乳果糖的量為每千克體重約1.5mg到每千克體重約450mg。
18.權(quán)利要求12的組合物，其中乳果糖的量為每千克體重約5mg到每千克體重約100mg。
19.權(quán)利要求12的組合物，還包含寡糖。
20.權(quán)利要求12的組合物，還包含一種或多種選自乳酸桿菌和雙歧桿菌的微生物活培養(yǎng)物。
21.一種組合物，包含有效改善嬰兒、幼兒和兒童腹瀉的量的乳果糖。
22.權(quán)利要求21的包含乳果糖的組合物，其中組合物為營(yíng)養(yǎng)品。
23.權(quán)利要求22的組合物，其中營(yíng)養(yǎng)品為嬰兒配方食品。
24.權(quán)利要求23的嬰兒配方食品，其中配方食品為早產(chǎn)嬰兒配方食品。
25.權(quán)利要求24的嬰兒配方食品，還包含ARA和DHA。
26.權(quán)利要求21的組合物，其中乳果糖的量為每千克體重約1.5mg到每千克體重約450mg。
27.權(quán)利要求21的組合物，其中乳果糖的量為每千克體重約5mg到每千克體重約100mg。
28.權(quán)利要求21的組合物，還包含寡糖。
29.權(quán)利要求21的組合物，包含一種或多種選自乳酸桿菌和雙歧桿菌的微生物活培養(yǎng)物。
全文摘要
本發(fā)明通過給予有效量的乳果糖，提供了抑制輪狀病毒感染的方法。乳果糖可單獨(dú)給予，或與其它營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑如維生素聯(lián)合給予，或作為營(yíng)養(yǎng)品如嬰兒配方食品的一部分給予。
文檔編號(hào)A61P1/12GK1795000SQ200480014329
公開日2006年6月28日 申請(qǐng)日期2004年3月19日 優(yōu)先權(quán)日2003年3月28日
發(fā)明者M·F·洛克尼斯卡, B·W·佩特肖夫, R·A·伯恩斯, V·S·西克萊斯, J·W·漢森, S·C·拉姆西 申請(qǐng)人:布里斯托爾-邁爾斯斯奎布公司