專(zhuān)利名稱(chēng)：用于治療虛弱、肌肉損傷或少肌癥的2－亞烷基－19－去甲－維生素d衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及治療虛弱(frailty)、肌肉損傷或少肌癥(sarcopenia)的方法，該方法包括給藥于需要的患者2-亞烷基-19-去甲-維生素D衍生物。具體而言，本發(fā)明涉及治療虛弱、肌肉損傷或少肌癥的方法，該方法包括給藥于需要的患者治療有效量的2-亞甲基-19-去甲-20(S)-1α，25-二羥基維生素D3。
背景技術(shù)：
維生素D是一般術(shù)語(yǔ)，指一類(lèi)甾體分子。維生素D的活性形式，稱(chēng)作1，25-二羥基維生素D3(1，25-二羥基膽鈣化甾醇)，是在人體內(nèi)通過(guò)7-去氫膽甾醇轉(zhuǎn)化成維生素D3(膽鈣化甾醇)生物合成的。該轉(zhuǎn)化發(fā)生在皮膚并且需要UV輻射，其典型地是來(lái)自陽(yáng)光。維生素D3然后在肝臟中代謝成25-羥基維生素D3(25-羥基膽鈣化甾醇)，然后其在腎臟中進(jìn)一步代謝成維生素D的活性形式1，25-二羥基維生素D3。1，25-二羥基維生素D3然后分布在整個(gè)體內(nèi)與細(xì)胞內(nèi)維生素D受體結(jié)合。
維生素D的活性形式是已知涉及礦物質(zhì)代謝和骨生長(zhǎng)并且促進(jìn)鈣的腸吸收的激素。
維生素D類(lèi)似物在1998年12月1日出版的美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5,843,928中公開(kāi)。公開(kāi)的化合物是2-亞烷基-19-去甲-維生素D衍生物，并且特征在于相對(duì)于1，25-二羥基維生素D3，有低腸鈣轉(zhuǎn)運(yùn)活性以及高骨鈣動(dòng)員活性。
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)2-亞烷基-19-去甲-維生素D衍生物具體是化合物2-亞甲基-19-去甲-20(S)-1α，25-二羥基維生素D3(也稱(chēng)作2MD)能夠用于治療虛弱、肌肉損傷或少肌癥。
發(fā)明概述本發(fā)明提供治療虛弱、肌肉損傷或少肌癥的方法，該方法包括給藥于需要的患者有效量的2-亞烷基-19-去甲-維生素D衍生物。具體而言，本發(fā)明提供治療虛弱、肌肉損傷或少肌癥的方法，該方法包括給藥于需要其的患者治療有效量的2-亞甲基-19-去甲-20(S)-1α，25-二羥基維生素D3或其藥學(xué)上可接受的鹽或前藥。本發(fā)明的具體實(shí)施方式
是治療虛弱、肌肉損傷或少肌癥的方法，其中2-亞甲基-19-去甲-20(S)-1α，25-二羥基維生素D3是口服給藥、非胃腸道給藥或透皮給藥。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明涉及使用2-亞烷基-19-去甲-維生素D衍生物治療虛弱、肌肉損傷或少肌癥。在優(yōu)選實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及使用2-亞甲基-19-去甲-20(S)-1α，25-二羥基維生素D3或其藥學(xué)上可接受的鹽或前藥治療虛弱、肌肉損傷或少肌癥的方法。能夠在本發(fā)明方法中使用的2-亞烷基-19-去甲-維生素D衍生物在美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5,843,928中公開(kāi)，這些衍生物的特征在于如下所示的通式I 其中Y1和Y2可以相同或不同，各選自氫和羥基保護(hù)基團(tuán)，R6和R8可以相同或不同，各選自氫、烷基、羥基烷基和氟烷基，或一起來(lái)代表基團(tuán)-(CH2)x-，其中X是2～5的整數(shù)，并且基團(tuán)R代表任何對(duì)于維生素D型化合物已知的典型側(cè)鏈。
更具體地，R能代表飽和或不飽和1～35個(gè)碳的烴基，其可以是可含有一個(gè)或多個(gè)其他取代基比如羥基或被保護(hù)的羥基、氟、羰基、酯、環(huán)氧基、氨基或其他雜原子基團(tuán)的直鏈、支鏈或環(huán)。這種類(lèi)型的優(yōu)選側(cè)鏈由以下結(jié)構(gòu)所表示
其中立體化學(xué)中心(相應(yīng)于甾體編號(hào)中的C-20)可以具有R或S構(gòu)型(即，或者關(guān)于碳20的天然構(gòu)型或20-表構(gòu)型)，以及其中Z選自Y、-OY、-CH2OY、-C≡CY和-CH＝CHY，其中該雙鍵可以具有順式或反式幾何構(gòu)型，并且其中Y選自氫、甲基、-COR5和以下結(jié)構(gòu)基團(tuán) 其中m和n獨(dú)立地代表0～5的整數(shù)，其中R1選自氫、氘、羥基、被保護(hù)的羥基、氟、三氟甲基和C1-5烷基，該C1-5烷基可以是直鏈或支鏈并且任選地具有羥基或被保護(hù)的羥基取代基，并且其中各R2、R3和R4獨(dú)立地選自氘、含氘烷基、氫、氟、三氟甲基和C1-5烷基，該C1-5烷基可以是直鏈或支鏈并且任選地具有羥基或被保護(hù)的羥基取代基，并且其中R1和R2一起代表氧代基團(tuán)或亞烷基、＝CR2R3、或基團(tuán)-(CH2)p-，其中p是2～5的整數(shù)，并且其中R3和R4一起代表氧代基團(tuán)或基團(tuán)-(CH2)q-，其中q是2～5的整數(shù)，并且其中R5代表氫、羥基、被保護(hù)的羥基、或C1-5烷基并且其中在側(cè)鏈的20、22或23位置的任何CH-基團(tuán)可以被氮原子代替，或者其中分別在20、22和23位置的-CH(CH3)-、-CH(R3)-或-CH(R2)-任何基團(tuán)可以被氧或硫原子代替。
在C-20的甲基取代基的波浪線表明碳20可以具有R構(gòu)型或S構(gòu)型。
具有天然20R-構(gòu)型的側(cè)鏈特別重要的實(shí)例是下式(a)、(b)、(c)、(d)和(e)所代表的結(jié)構(gòu)，即在25-羥基維生素D3中存在的側(cè)鏈(a)；維生素D3(b)；25-羥基維生素D2(c)；維生素D2(d)；以及25-羥基維生素D2的C-24差向異構(gòu)體(e)；
文中所用的術(shù)語(yǔ)“羥基保護(hù)基團(tuán)”表示通常用于暫時(shí)保護(hù)羥基官能團(tuán)的任何基團(tuán)，比如例如烷氧基羰基、酰基、烷基甲硅烷基或烷基芳基甲硅烷基(此后簡(jiǎn)稱(chēng)為“甲硅烷基”基團(tuán))，和烷氧基烷基。烷氧基羰基保護(hù)基團(tuán)是烷基-O-CO-基，比如甲氧基羰基、乙氧基羰基、丙氧基羰基、異丙氧基羰基、丁氧基羰基、異丁氧基羰基、叔丁氧基羰基、芐氧基羰基或烯丙氧基羰基。術(shù)語(yǔ)“酰基”表示所有異構(gòu)體形式的1～6個(gè)碳的烷?；鶊F(tuán)，或1～6個(gè)碳的羧基烷?；鶊F(tuán)，比如乙二?；⒈；⒍《；臀於；蚍枷沲；热绫郊柞；虮畸u素、硝基或烷基取代的苯甲?；?。術(shù)語(yǔ)“烷基”，除非文中另有說(shuō)明，表示所有異構(gòu)體形式的1～10個(gè)碳的直鏈或支鏈烷基基團(tuán)。烷氧基烷基保護(hù)基團(tuán)是例如以下的基團(tuán)甲氧基甲基、乙氧基甲基、甲氧基乙氧基甲基、或四氫呋喃基和四氫吡喃基。優(yōu)選的甲硅烷基保護(hù)基團(tuán)是三甲基甲硅烷基、三乙基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基、二丁基甲基甲硅烷基、二苯基甲基甲硅烷基、苯基二甲基甲硅烷基、二苯基叔丁基甲硅烷基和類(lèi)似烷基化的甲硅烷基。術(shù)語(yǔ)“芳基”，除非文中另有說(shuō)明，指苯基或任何被烷基、硝基和鹵素取代的苯基。
“被保護(hù)的羥基”基團(tuán)是被通常用于羥基官能團(tuán)的暫時(shí)或永久保護(hù)的如前述限定的任何上述基團(tuán)例如甲硅烷基、烷氧基烷基、?；蛲檠趸驶苌虮Ｗo(hù)的羥基。術(shù)語(yǔ)“羥基烷基”、“含氘的烷基”和“氟烷基”指分別被一個(gè)或多個(gè)羥基、氘或氟所取代的任何烷基基團(tuán)。
應(yīng)當(dāng)注意在說(shuō)明書(shū)中術(shù)語(yǔ)“24-高(homo)”指在側(cè)鏈的碳24位添加一個(gè)亞甲基并且術(shù)語(yǔ)“24-二高”指添加兩個(gè)亞甲基。同樣，術(shù)語(yǔ)″三高”指添加三個(gè)亞甲基。同樣，術(shù)語(yǔ)“26，27-二甲基”指在碳26和27位添加甲基使得例如R3和R4是乙基。同樣，術(shù)語(yǔ)“26，27-二乙基”指在碳26和27位添加乙基使得R3和R4是丙基。
在下列化合物中，連接在碳2位的具體的亞烷基取代基應(yīng)當(dāng)加入到命名中。例如，如果亞甲基是該亞烷基取代基，術(shù)語(yǔ)“2-亞甲基”應(yīng)當(dāng)在每個(gè)命名的化合物之前。如果亞乙基是該亞烷基取代基，術(shù)語(yǔ)“2-亞乙基”應(yīng)當(dāng)在每個(gè)命名的化合物之前等等。此外，如果連接在碳20位的甲基是在其表或非天然構(gòu)型中，術(shù)語(yǔ)“20(S)”或“20-表”應(yīng)當(dāng)包括在每個(gè)下列被命名的化合物中。如果需要，該命名的化合物也能夠是維生素D2型。
當(dāng)側(cè)鏈?zhǔn)遣伙柡偷臅r(shí)，結(jié)構(gòu)I的2-亞烷基-化合物的具體的和優(yōu)選的實(shí)例是19-去甲-24-高-1，25-二羥基-22-脫氫維生素D3；19-去甲-24-二高-1，25-二羥基-22-脫氫維生素D3；19-去甲-24-三高-1，25-二羥基-22-脫氫維生素D3；19-去甲-26，27-二甲基-24-高-1，25-二羥基-22-脫氫維生素D3；19-去甲-26，27-二甲基-24-二高-1，25-二羥基-22-脫氫維生素D3；19-去甲-26，27-二甲基-24-三高-1，25-二羥基-22-脫氫維生素D3；19-去甲-26，27-二乙基-24-高-1，25-二羥基-22-脫氫維生素D3；19-去甲-26，27-二乙基-24-二高-1，25-二羥基-22-脫氫維生素D3；19-去甲-26，27-二乙基-24-三高-1，25-二羥基-22-脫氫維生素D3；
19-去甲-26，27-2丙基-24-高-1，25-二羥基-22-脫氫維生素D3；19-去甲-26，27-二丙基-24-二高-1，25-二羥基-22-脫氫維生素D3；及19-去甲-26，27-二丙基-24-三高-1，25-二羥基-22-脫氫維生素D3。
當(dāng)側(cè)鏈?zhǔn)秋柡偷臅r(shí)，結(jié)構(gòu)I的2-亞烷基-化合物的具體的和優(yōu)選的實(shí)例是19-去甲-24-高-1，25-二羥基維生素D3；19-去甲-24-二高-1，25-二羥基維生素D3；19-去甲-24-三高-1，25-二羥基維生素D3；19-去甲-26，26-二甲基-24-高-1，25-二羥基維生素D3；19-去甲-26，27-二甲基-24-二高-1，25-二羥基維生素D3；19-去甲-26，27-二甲基-24-三高-1，25-二羥基維生素D3；19-去甲-26，27-二乙基-24-高-1，25-二羥基維生素D3；19-去甲-26，27-二乙基-24-二高-1，25-二羥基維生素D3；19-去甲-26，27-二乙基-24-三高-1，25-二羥基維生素D3；19-去甲-26，27-二丙基-24-高-1，25-二羥基維生素D3；19-去甲-26，27-二丙基-24-二高-1，25-二羥基維生素D3；及19-去甲-26，27-二丙基-24-三高-1，25-二羥基維生素D3。
虛弱的特征在于骨骼肌量的進(jìn)行性的和不斷地喪失，導(dǎo)致跌傷的高度風(fēng)險(xiǎn)、疾病康復(fù)的困難、住院時(shí)間的延長(zhǎng)及在日常生活中需要援助的長(zhǎng)期殘疾。肌肉量、體力和身體工作能力(physical performance)的減少典型地導(dǎo)致生活質(zhì)量降低、獨(dú)立性喪失及死亡率。虛弱通常與年齡相關(guān)，但當(dāng)由于其他因素比如疾病誘導(dǎo)的惡質(zhì)病、不能行動(dòng)、或藥物誘導(dǎo)的少肌癥引起肌肉喪失(muscleloss)和力量下降發(fā)生時(shí)，也會(huì)導(dǎo)致。用來(lái)表示虛弱的另外的術(shù)語(yǔ)是少肌癥，其是骨骼肌量(muscle mass)或性質(zhì)(quality)喪失的總稱(chēng)。促成骨骼肌全部性質(zhì)的骨骼肌特性的實(shí)例包括收縮性、纖維大小和類(lèi)型、疲勞能力、激素反應(yīng)性、葡萄糖攝取/代謝和毛細(xì)血管密度。即使不存在肌肉量的損失，肌肉性質(zhì)的喪失能導(dǎo)致體力喪失和身體工作能力的削弱。
文中使用的術(shù)語(yǔ)“肌肉損傷”是對(duì)任何肌肉組織的損傷。肌肉損傷能夠由于因事故、運(yùn)動(dòng)損傷、內(nèi)分泌失調(diào)、疾病、創(chuàng)傷或手術(shù)操作引起的對(duì)肌肉組織的身體外傷而引發(fā)。本發(fā)明方法通過(guò)促進(jìn)肌肉損傷修復(fù)而對(duì)治療肌肉損傷是有用的。本發(fā)明方法對(duì)于減輕肌肉痙攣也是有用的。
本發(fā)明也涉及治療虛弱、肌肉損傷或少肌癥的藥物組合物，包括給藥于需要該治療的患者2-亞烷基-19-去甲-維生素D衍生物，比如式I化合物，和載體、溶劑、稀釋劑等。
應(yīng)當(dāng)注意，當(dāng)化合物在文中討論時(shí)，考慮化合物可以作為可藥用的鹽、前藥、或前藥的鹽來(lái)給藥于患者。所有這些變化都包括在本發(fā)明內(nèi)。
術(shù)語(yǔ)“需要該治療的患者”指患有或具有虛弱、肌肉損傷或少肌癥的風(fēng)險(xiǎn)的人和其他動(dòng)物。
文中所用的術(shù)語(yǔ)“治療”、“治療”或“治療”包括預(yù)防(例如預(yù)防劑)，減輕治療(palliative)和治愈治療。
“可藥用的”指該載體、稀釋劑、賦形劑和/或鹽或前藥必須是與制劑中其他的成分相容的，并且對(duì)患者是無(wú)害的。
術(shù)語(yǔ)“前藥”指在體內(nèi)轉(zhuǎn)變成本發(fā)明化合物的化合物。該轉(zhuǎn)變可以以不同的機(jī)理發(fā)生，比如通過(guò)在血中水解。應(yīng)用前藥的討論被T.Higuchi和W.Stella在“Pro-drugs as Novel Delivery Systems”，A.C.S.Symposium Series第14卷，以及在Bioreversible Carriers in Drug Design，編者Edward B.Roche，American Pharmaceutical Association and Pergamon Press，1987中提供。
例如，當(dāng)本發(fā)明化合物含有羧酸官能團(tuán)時(shí)，前藥能夠包括用以下基團(tuán)代替該酸基的氫原子而形成的酯，基團(tuán)比如(C1-C8)烷基、(C2-C12)烷?；趸谆⒕哂?～9個(gè)碳原子的1-(烷?；趸?乙基、具有5～10個(gè)碳原子的1-甲基-1-(烷?；趸?-乙基、具有3～6個(gè)碳原子的烷氧基羰基氧基甲基、具有4～7個(gè)碳原子的1-(烷氧基羰基氧基)乙基、具有5～8個(gè)碳原子的1-甲基-1-(烷氧基羰基氧基)乙基、具有3～9個(gè)碳原子的N-(烷氧基羰基)氨基甲基、具有4～10個(gè)碳原子的1-(N-(烷氧基羰基)氨基)乙基、3-酞基、4-巴豆酸內(nèi)酯基、γ-丁內(nèi)酯-4-基、二-N，N-(C1-C2)烷基氨基(C2-C3)烷基(比如β-二甲基氨基乙基)、氨基甲?；?(C1-C2)烷基、N，N-二(C1-C2)烷基氨基甲酰基-(C1-C2)烷基和哌啶并-、吡咯烷并-或嗎啉并(C2-C3)烷基。
相似地，當(dāng)本發(fā)明化合物包括醇官能團(tuán)時(shí)，前藥能夠通過(guò)用以下基團(tuán)代替該醇基的氫原子而形成，基團(tuán)比如(C1-C6)烷?；趸谆?、1-((C1-C6)烷酰基氧基)乙基、1-甲基-1-((C1-C6)烷酰基氧基)乙基、(C1-C6)烷氧基羰基氧基甲基、N-(C1-C6)烷氧基羰基氨基甲基、琥珀?；?C1-C6)烷?；?、α-氨基(C1-C4)烷?；?、芳基?；挺?氨基酰基或α-氨基?；?α-氨基?；渲忻總€(gè)α-氨基?；?dú)立地選自天然存在的L-氨基酸、P(O)(OH)2、-P(O)(O(C1-C6)烷基)2或糖基(該基團(tuán)由糖類(lèi)(carbohydrate)的半縮醛形式的脫羥基產(chǎn)生)。
當(dāng)本發(fā)明化合物包括胺官能團(tuán)，前藥能夠通過(guò)用以下基團(tuán)代替該胺基團(tuán)的氫原子而形成，基團(tuán)比如RX-羰基、RXO-羰基、NRXRX1-羰基，其中RX和RX1各自獨(dú)立地是(C1-C10)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、芐基，或RX-羰基是天然α氨基?；蛱烊沪?氨基?；?天然α-氨基酰基、其中YX是H、(C1-C6)烷基或芐基)的-C(OH)C(O)OYX、其中YX0是(C1-C4)烷基并且YX1是(C1-C6)烷基的-C(OYX0)YX1、羧基(C1-C6)烷基、氨基(C1-C4)烷基或單-N-或二-N，N-(C1-C6)烷基氨基烷基，-C(YX2)YX3其中YX2是H或甲基并且YX3是單-N-或二-N，N-(C1-C6)烷基氨基，嗎啉并、哌啶-1-基或吡咯烷-1-基。
表述“可藥用的鹽”指含有陰離子的非毒性陰離子鹽，例如(但不限于)氯化物、溴化物、碘化物、硫酸鹽、二硫酸鹽、磷酸鹽、乙酸鹽、馬來(lái)酸鹽、富馬酸鹽、草酸鹽、乳酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、葡糖酸鹽、甲磺酸鹽和4-甲苯-磺酸鹽。該表述也指非毒性陽(yáng)離子鹽比如(但不限于)鈉、鉀、鈣、鎂、銨或質(zhì)子化的芐星青霉素(benzathine)(N，N’-二芐基亞乙基二胺)、膽堿、乙醇胺、二乙醇胺、乙二胺、meglamine(N-甲基-葡糖胺)、苯乙芐胺(N-芐基苯乙胺)、哌嗪或氨丁三醇(2-氨基-2-羥基甲基-1，3-丙二醇)。
應(yīng)當(dāng)認(rèn)為本發(fā)明化合物能夠以放射標(biāo)記形式存在，即所述化合物可以含有一個(gè)或多個(gè)含有原子量或質(zhì)量數(shù)不同于通常天然發(fā)現(xiàn)的原子量或質(zhì)量數(shù)的原子。氫、碳、磷、氟和氯的放射性同位素分別包括3H、14C、32P、35S、18F和36Cl。含有這些放射性同位素和/或其他原子的其他放射性同位素的本發(fā)明化合物在本發(fā)明的范圍內(nèi)。氚即3H和碳-14即14C放射性同位素由于它們?nèi)菀字苽浜蜋z測(cè)而尤其優(yōu)選。本發(fā)明的放射性標(biāo)記化合物一般能夠用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的方法制備。常規(guī)地，這樣的放射性標(biāo)記的化合物能夠通過(guò)實(shí)施文中公開(kāi)的方法來(lái)制備，除了用容易獲得的放射性標(biāo)記反應(yīng)物代替非放射性標(biāo)記的反應(yīng)物。
本領(lǐng)域普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)認(rèn)為本發(fā)明的一些化合物具有至少一個(gè)不對(duì)稱(chēng)碳原子并且因此是對(duì)映異構(gòu)體或非對(duì)映異構(gòu)體。非對(duì)映異構(gòu)體混合物能夠基于它們的物理化學(xué)差別通過(guò)自身已知的方法例如色譜法和/或分步結(jié)晶來(lái)拆分成它們單個(gè)的非對(duì)映異構(gòu)體。對(duì)映異構(gòu)體能夠通過(guò)與適當(dāng)?shù)男饣钚曰衔?例如乙醇)反應(yīng)將對(duì)映異構(gòu)體混合物轉(zhuǎn)化成非對(duì)映異構(gòu)體混合物，拆分非對(duì)映異構(gòu)體并且轉(zhuǎn)化(例如水解，包括化學(xué)水解方法和微生物脂酶水解方法，即酶催化的水解)單個(gè)非對(duì)映異構(gòu)體成相應(yīng)的純對(duì)映異構(gòu)體從而被拆分。所有這些異構(gòu)體包括非對(duì)映異構(gòu)體、對(duì)映異構(gòu)體及其混合物被認(rèn)為是本發(fā)明的一部分。同樣，本發(fā)明的一些化合物是阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體(例如被二芳基所取代)并被認(rèn)為是本發(fā)明的一部分。
此外，當(dāng)本發(fā)明的化合物，包括式I化合物，形成水合物或溶劑合物時(shí)，它們也在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
本發(fā)明化合物的給藥能夠以系統(tǒng)和/或局部地遞送本發(fā)明化合物的任何方法進(jìn)行。這些方法包括口服、胃腸道外和十二指腸內(nèi)途徑等。一般地，本發(fā)明化合物以口服給藥，但胃腸道外給藥(例如靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、透皮、皮下、直腸的或髓內(nèi))也可應(yīng)用，例如當(dāng)口服給藥不適合于靶位或當(dāng)患者不能攝入藥物時(shí)。
本發(fā)明化合物也可以在適合的載體或稀釋劑中局部應(yīng)用于患者體內(nèi)或體表(in or on apatient)部位。
2MD和本發(fā)明其他2-亞烷基-19-去甲-維生素D衍生物能夠以大約0.01μg/天～大約10μg/天的范圍給藥于病人。優(yōu)選劑量范圍是大約0.05μg/天～大約1μg/天并且更優(yōu)選劑量范圍是大約0.1μg/天～大約0.4μg/天。
當(dāng)然，給藥的量和時(shí)間取決于被治療的受治療者、病情的嚴(yán)重性、給藥方式和主治醫(yī)生的判斷。因此，由于患者與患者之間的差異性，文中所給劑量是指導(dǎo)性的并且醫(yī)生可以逐漸增加藥物的劑量以達(dá)到醫(yī)生認(rèn)為適合患者的治療?？紤]到期望治療的程度，醫(yī)生必需平衡多種因素比如患者的年齡、預(yù)成疾病的存在和其他疾病的存在。劑量可以給藥一天一次或多于一天一次并且可以以緩釋或控釋制劑給藥。采用速釋和控釋和/或緩釋制劑的組合來(lái)給藥化合物也是可以的。
2MD或其他2-亞烷基-19-去甲-維生素D衍生物的給藥能夠根據(jù)任何連續(xù)的或間隔的給藥方案進(jìn)行。一天一次、一天多次、一周一次、一周多次、每?jī)芍芤淮?、每?jī)芍芏啻巍⒁辉乱淮?、一月多次、每?jī)稍乱淮?、每三月一次、每六月一次以及一年一次給藥是2MD或其他2-亞烷基-19-去甲-維生素D衍生物給藥方案的非限制性實(shí)例。
本發(fā)明化合物一般以包括至少一種本發(fā)明化合物和可藥用的載體或稀釋劑的藥物組合物的形式給藥。因此，本發(fā)明化合物能夠以任何常規(guī)的口服、胃腸道外，直腸的或透皮劑型給藥。
對(duì)于口服給藥，藥物組合物能夠以溶液、混懸液、片劑、丸劑、膠囊、粉末等的形式。含有不同賦形劑如檸檬酸鈉、碳酸鈣和磷酸鈣的片劑可被采用，同時(shí)具有不同的崩解劑比如淀粉優(yōu)選馬鈴薯或木薯淀粉和某些復(fù)合硅酸鹽，和粘合劑比如聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、明膠和阿拉伯膠。此外，潤(rùn)滑劑比如硬脂酸鎂、月桂基硫酸鈉和滑石通常對(duì)于壓片目的是有用的。相似類(lèi)型的固體組合物也被用作軟膠囊和硬膠囊的填料；在該關(guān)系中，優(yōu)選材料也包括乳糖(lactose)或乳糖(milk sugar)和高分子量聚乙二醇。當(dāng)需要含水混懸液和/或酏劑口服給藥時(shí)，本發(fā)明化合物能夠組合有不同增甜劑、調(diào)味劑、著色劑、乳化劑和/或懸浮劑，以及稀釋劑例如水、乙醇、丙二醇、乙二醇、甘油和其不同組合。2MD和其他2-亞烷基-19-去甲-維生素D衍生物的可接受制劑的一個(gè)實(shí)例是含有溶解了2MD或其他2-亞烷基-19-去甲-維生素D衍生物的neobe油的軟明膠膠囊。其他適合的制劑對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員是明顯的。
對(duì)于胃腸道外給藥目的，在蓖麻油或花生油中或含水丙二醇中的溶液、以及相應(yīng)水溶性鹽的無(wú)菌水溶液能夠被采用。這樣的水溶液如果必要可以是適當(dāng)緩沖的，并且該液體稀釋劑首先用飽和鹽水或葡萄糖調(diào)成等滲的。這些水溶液尤其適合于靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、皮下和腹腔內(nèi)注射目的。在該關(guān)系中，所用的無(wú)菌含水介質(zhì)都通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)容易地得到。
對(duì)于透皮(例如局部)給藥目的，制備稀無(wú)菌、含水或部分含水溶液(通常以大約0.1％～5％濃度)，其他類(lèi)似于上述胃腸外溶液。
制備具有一定量活性成分的多種藥物組合物的方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的或參照該公開(kāi)是明顯的。制備藥物組合物的方法的實(shí)例見(jiàn)Remington′sPharmaceutical Sciences，Mack Publishing Company，Easton，Pa.，第19版，(1995)。
有利地，本發(fā)明也提供用于消費(fèi)者使用的治療虛弱、肌肉損傷或少肌癥的試劑盒。該試劑盒包括a)藥物組合物，包括2-亞烷基-19-去甲-維生素D衍生物，具體是化合物2-亞甲基-19-去甲-20(S)-1α，25-二羥基維生素D3，及可藥用的載體、賦形劑(vehicle)或稀釋劑；和b)描述使用該藥物組合物治療虛弱、肌肉損傷或少肌癥的方法的說(shuō)明書(shū)。
本申請(qǐng)中使用的“試劑盒”包括用于容納該藥物組合物的容器并且也可以包括分開(kāi)的容器比如分開(kāi)的瓶或分開(kāi)的箔包裝。該容器能夠是本領(lǐng)域已知的常規(guī)形狀或形式，其為用可藥用的材料制成，例如紙或卡紙板、玻璃或塑料瓶或罐、可再密封的袋(例如來(lái)盛裝“再填裝”片劑用于裝入不同的容器)、或具有分開(kāi)劑量的泡眼包裝，用于根據(jù)治療方案擠壓包裝。所采用的容器能取決于所涉及的具體劑型，例如常規(guī)卡紙板不用于盛裝液體混懸劑。多于一個(gè)的容器能在單個(gè)包裝中一起使用，以出售單個(gè)劑型是可行的。例如，片劑可包含在瓶中，其依次包含在盒中。
這樣的試劑盒的實(shí)例是所謂的泡眼包裝。泡眼包裝在包裝工業(yè)中是熟知的并且廣泛用于藥物單位劑型(片劑、膠囊等)的包裝。泡眼一般由相對(duì)硬的材料的薄片組成，該材料覆蓋有優(yōu)選是透明塑料材料的箔。在包裝過(guò)程中塑料箔中形成凹陷。該凹陷具有要被包裝的單個(gè)片劑或膠囊的尺寸，或可以具有容納要包裝的多個(gè)片和/或膠囊的尺寸和形狀。接下來(lái)，片劑或膠囊被相應(yīng)地放置于凹陷中，并且在與凹陷形成的方向相反的方向上，面對(duì)塑料箔封上相對(duì)硬的材料的薄片。結(jié)果是，片劑或膠囊被單個(gè)或如果需要?jiǎng)t一起封在塑料箔和薄片之間的凹陷內(nèi)。優(yōu)選薄片的強(qiáng)度是能夠通過(guò)用手施加壓力于凹陷上就會(huì)在凹陷處薄片中形成開(kāi)口使片劑或膠囊從泡眼包裝中移出。然后該片劑或膠囊能夠通過(guò)所述開(kāi)口而移出。
可以期望提供寫(xiě)成文字的記憶幫助(written memory aid)，其中該類(lèi)型的寫(xiě)成文字的記憶幫助含有對(duì)醫(yī)生、藥師或患者的信息和/或指導(dǎo)，即以在片劑或膠囊的旁邊的數(shù)字的形式，該數(shù)字相應(yīng)于這樣指定(specified)的片劑或膠囊應(yīng)當(dāng)被攝取的用藥的天數(shù)，或含有相同類(lèi)型信息的卡片的形式。這樣的記憶幫助的另外實(shí)例是印刷在卡片上的日歷，例如，如下“第一周，星期一，星期二，...等...第二周，星期一，星期二...”等。記憶幫助的其他變化將容易明顯。“每日劑量”能夠是給藥日被攝取的單個(gè)片或膠囊，或幾個(gè)片或膠囊。
試劑盒的另外具體實(shí)例是為了預(yù)期用途而設(shè)計(jì)成將每日劑量分配成一次一個(gè)的分配器(dispenser)。優(yōu)選地，該分配器裝備有記憶幫助，以更促進(jìn)服藥的順應(yīng)性。這樣的記憶幫助的實(shí)例是指明已經(jīng)分配的每日劑量的數(shù)量的機(jī)械計(jì)數(shù)器。這樣的記憶幫助的另外實(shí)例是電池供電微芯片記憶，配對(duì)有液晶讀數(shù)器或可聽(tīng)提醒信號(hào)，例如讀出最后每日劑量被服用的日期和/或在下次劑量要被服用時(shí)提醒人。
1α-羥基-2-烷基-19-去甲-維生素D化合物尤其是具有基本結(jié)構(gòu)I的1α-羥基-2-甲基-19-去甲-維生素D化合物的制備能夠通過(guò)通常一般方法進(jìn)行，即將雙環(huán)Windaus-Grundmann型酮II與烯丙型氧化膦III縮合成相應(yīng)的2-亞甲基-19-去甲-維生素D類(lèi)似物IV，然后在后者化合物中在C-1和C-3脫保護(hù) 在結(jié)構(gòu)II、III和IV中，基團(tuán)Y1和Y2和R代表上述限定的基團(tuán)；Y1和Y2優(yōu)選地是羥基-保護(hù)基團(tuán)，也應(yīng)當(dāng)理解R中的可以是敏感的或干擾縮合反應(yīng)的任何官能團(tuán)(functionalities)如本領(lǐng)域熟知適當(dāng)?shù)乇槐Ｗo(hù)。上述顯示的方法代表匯集合成概念的應(yīng)用，其已經(jīng)有效地應(yīng)用于維生素D化合物的制備[例如Lythgoe等，J.Chem.Soc.Perkin Trans.1，590(1978)；Lythgoe，Chem.Soc.Rev.9，449(1983)；Toh等，J.Org.Chem.48，1414(1983)；Baggiolini等，J.Org.Chem.51，3098(1986)；Sardina等，J.Org.Chem.51，1264(1986)；J.Org.Chem.51，1269(1986)；DeLuca等，美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5,086,191；DeLuca等，美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5,536,713]。
通用(general)結(jié)構(gòu)II的茚烷酮(hydrindanones)是已知的或能夠用已知的方法制備。這樣的已知雙環(huán)酮的特別重要的實(shí)例是具有上述(a)、(b)、(c)和(d)側(cè)鏈的結(jié)構(gòu)，即25-羥基格倫德曼酮(f)[Baggiolini等，J.Org.Chem.51，3098(1986)]；格倫德曼酮(g)[Inhoffen等，Chem.Ber.90，664(1957)]；25-羥基Windaus酮(h)[Baggiolini等，J.Org.Chem.51，3098(1986)]和Windaus酮(i)[Windaus等，Ann.，524，297(1936)]
對(duì)于通用結(jié)構(gòu)III的所要求的氧化膦的制備，已經(jīng)開(kāi)發(fā)了新的合成途徑，如Perlman等，Tetrahedron Lett.32，7663(1991)和DeLuca等，美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5,086,191中說(shuō)明的，從商品化的(1R，3R，4S，5R)-(-)-奎尼酸容易得到的奎尼酸甲酯衍生物1開(kāi)始。由起始甲酯轉(zhuǎn)變成期望的A-環(huán)合成子的整個(gè)方法，在圖解1中概述。因此，1的仲4-羥基用RuO4(用RuCl3和NaIO4作為共氧化劑的催化法)氧化。使用這樣的強(qiáng)氧化劑對(duì)于該非常阻礙的羥基的有效氧化方法是必要的。然而，其他更普遍使用的氧化劑也能應(yīng)用(例如吡啶重鉻酸鹽)，盡管通常要求更長(zhǎng)的時(shí)間來(lái)完成。合成的第二步包括被空間阻礙的4-酮化合物2與由甲基三苯基溴化和正-丁基鋰制備得的內(nèi)鹽的Wittig反應(yīng)。其他的堿也能夠用于反應(yīng)性的亞甲基正膦的產(chǎn)生，如t-BuOK、NaNH2、NaH、K/HMPT、NaN(TMS)2等。對(duì)于4-亞甲基化合物3的制備，能夠使用一些說(shuō)明的Wittig方法的改良，例如，2與活化的亞甲基三苯基膦的反應(yīng)[Corey等，Tetrahedron Lett.26，555(1985)]?；蛘撸軌驊?yīng)用廣泛用于非反應(yīng)性酮的亞甲基化的其他方法，例如與由甲基二苯基膦氧化物用正丁基鋰去質(zhì)子化而得到的PO-內(nèi)鹽的Wittig-Horner反應(yīng)[Schosse等，Chimia 30，197(1976)]，或酮與甲基亞磺酸鈉[Corey等，J.Org.Chem.28，1128(1963)]和甲基亞磺酸鉀[Greene等，Tetrahedron Lett.3755(1976)]的反應(yīng)。用氫化鋁鋰或其他適合的還原劑(例如DIBALH)還原酯3提供二醇4，該二醇4然后被高碘酸鈉氧化成環(huán)己酮衍生物5。該方法的下一步驟包括酮5與(三甲基甲硅烷基)乙酸甲酯的Peterson反應(yīng)。將產(chǎn)生的烯丙型酯6用氫化二異丁基鋁處理，并且依次將形成的烯丙型醇7轉(zhuǎn)換成期望的A-環(huán)氧化膦(A-ring phosphineoxide)8。7到8的轉(zhuǎn)變涉及3步，即，用正丁基鋰和對(duì)甲苯磺酰氯進(jìn)行原位甲苯磺?；缓笈c二苯基膦鋰鹽反應(yīng)并用過(guò)氧化氫氧化。
通用結(jié)構(gòu)IV的幾種2-亞甲基-19-去甲-維生素D化合物可以使用A-環(huán)合成子8和具有所要求的側(cè)鏈結(jié)構(gòu)的合適的Windaus-Grundmann酮II來(lái)合成。因此，例如，Wittig-Horner偶合產(chǎn)生期望的被保護(hù)的維生素化合物10，該偶合是由8和正丁基鋰產(chǎn)生的膦氧基鋰負(fù)碳離子(lithium phosphinoxy carbanion)與根據(jù)公開(kāi)方法[Sicinski等，J.Med.Chem.37，3730(1994)]制備的被保護(hù)的25-羥基格倫德曼酮9進(jìn)行的偶合。在用AG 50W-X4陽(yáng)離子交換樹(shù)脂脫保護(hù)之后，其提供1α，25-二羥基-2-亞甲基-19-去甲-維生素D3(11)。
通過(guò)氧化膦8與被保護(hù)的(20S)-25-羥基格倫德曼酮13(圖解II)的類(lèi)似的偶合實(shí)現(xiàn)C-20的差向異構(gòu)化，并且提供19-去甲-維生素14，其在羥基-保護(hù)基團(tuán)水解之后產(chǎn)生(20S)-1α，25-二羥基-2-亞甲基-19-去甲-維生素D3(15)。如上所說(shuō)的，其他2-亞甲基-19-去甲-維生素D類(lèi)似物可以用文中公開(kāi)的方法合成。例如1α-羥基-2-亞甲基-19-去甲-維生素D3能夠通過(guò)提供格倫德曼酮(g)而得到。
本申請(qǐng)中引用的所有文件，包括專(zhuān)利和專(zhuān)利申請(qǐng)，作為參考引入。以下列出的實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明的具體實(shí)施方式
，并不以任何方式限制本發(fā)明，包括權(quán)利要求。
實(shí)施例在本申請(qǐng)中使用下列縮寫(xiě)。
NMR核磁共振mp 熔點(diǎn)H 氫h 小時(shí)min分鐘t-Bu 叔丁基THF四氫呋喃n-BuLi正丁基鋰MS 質(zhì)譜HPLC 高效液相色譜法SEM測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)誤差Ph 苯基Me 甲基Et 乙基DIBALH 氫化二異丁基鋁LDA二異丙基氨基鋰式I化合物的制備在美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5,843,928中說(shuō)明如下在這些實(shí)施例中，用阿拉伯?dāng)?shù)字表示的具體化合物(例如1、2、3等)指在前面說(shuō)明書(shū)中和圖解I和圖解II中說(shuō)明的具體結(jié)構(gòu)。
實(shí)施例11α，25-二羥基-2-亞甲基-19-去甲-維生素D3(11)的制備參考圖解1，起始的奎寧酸甲酯衍生物1由在前面說(shuō)明的商品化的(-)-奎寧酸得到[Perlman等，Tetrahedron Lett.32，7663(1991)和DeLuca等，美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5,086,191]。1mp.82-82.5℃(由己烷)，1H NMR(CDCl3)δ0.098，0.110，0.142，和0.159(每個(gè)為3H，每個(gè)為s，4×SiCH3)，0.896和0.911(9H和9H，每個(gè)為s，2×Si-t-Bu)，1.820(1H，dd，J＝13.1，10.3Hz)，2.02(1H，ddd，J＝14.3，4.3，2.4Hz)，2.09(1H，dd，J＝14.3，2.8Hz)，2.19(1H，ddd，J＝13.1，4.4，2.4Hz)，2.31(1H，d，J＝2.8Hz，OH)，3.42(1H，m；加入D2O之后dd，J＝8.6，2.6Hz)，3.77(3H，s)，4.12(1H，m)，4.37(1H，m)，4.53(1H，br s，OH)。
(a)奎寧酸甲酯衍生物1中4-羥基的氧化(3R，5R)-3，5-雙(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-1-羥基-4-氧代環(huán)己烷羧酸甲酯(2)。向在水(42mL)中的氯化釕(III)水合物(434mg，2.1mmol)和高碘酸鈉(10.8g，50.6mmol)的攪拌的混合物中加入奎寧酸甲酯1(6.09g，14mmol)的CCl4/CH3CN(1∶1，64mL)溶液。持續(xù)強(qiáng)力攪拌8h。加入幾滴2-丙酮，將混合物傾入水中并用氯仿萃取。合并有機(jī)萃取物，用水洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)產(chǎn)生暗色油狀殘留物(大約5g)，其用快速色譜純化。用己烷/乙酸乙酯(8∶2)洗脫產(chǎn)生純的油狀4-酮2(3.4g，56％)1H NMR(CDCl3)δ0.054，0.091，0.127，和0.132(每個(gè)為3H，每個(gè)為s，4×SiCH3)，0.908和0.913(9H和9H，每個(gè)為s，2×Si-t-Bu)，2.22(1H，dd，J＝13.2，11.7Hz)，2.28(1H，～dt J＝14.9，3.6Hz)，2.37(1H，dd，J＝14.9，3.2Hz)，2.55(1H，ddd，J＝13.2，6.4，3.4Hz)，3.79(3H，s)，4.41(1H，t，J～3.5Hz)，4.64(1H，s，OH)，5.04(1H，dd，J＝11.7，6.4Hz)；MSm/z(相對(duì)強(qiáng)度)無(wú)M+，375(M+-t-Bu，32)，357(M+-t-Bu-H2O，47)，243(31)，225(57)，73(100)。
(b)4-酮2的Wittig反應(yīng)(3R，5R)-3，5-雙[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-1-羥基-4-亞甲基環(huán)己烷羧酸甲酯(3)。于氬氣下向0℃的甲基三苯基溴化(2.813g，7.88mmol)的無(wú)水THF(32mL)中攪拌逐滴加入n-BuLi(2.5M的己烷溶液，6.0mL，15mmol)。然后加入MePH3P+Br-的另外部分(2.813g，7.88mmol)并且該溶液于0℃攪拌10min，于室溫?cái)嚢?0min。再次將該桔紅色混合物冷卻到0℃并將4-酮2(1.558g，3.6mmol)的無(wú)水THF(16+2mL)溶液在20min內(nèi)虹吸入反應(yīng)燒瓶中。然后反應(yīng)混合物于0℃攪拌1h并于室溫?cái)嚢?h。然后將混合物小心地傾入到鹽水濃度1％HCl中并用乙酸乙酯和苯萃取。合并的有機(jī)萃取物用稀NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)產(chǎn)生橙色油狀殘留物(大約2.6g)，其用快速色譜純化。用己烷/乙酸乙酯(9∶1)洗脫產(chǎn)生純的無(wú)色油狀的4-亞甲基化合物3(368mg，24％)1H NMR(CDCl3)δ0.078，0.083，0.092，和0.115(每個(gè)為3H，每個(gè)為s，4×SiCH3)，0.889和0.920(9H和9H，每個(gè)為s，2×Si-t-Bu)，1.811(1H，dd，J＝12.6，11.2Hz)，2.10(2H，m)，2.31(1H，dd，J＝12.6，5.1Hz)，3.76(3H，s)，4.69(1H，t，J＝3.1Hz)，4.78(1H，m)，4.96(2H，m；加入D2O之后1H，br s)，5.17(1H，t，J＝1.9Hz)；MS m/z(相對(duì)強(qiáng)度)無(wú)M+，373(M+-t-Bu，57)，355(M+-t-Bu-H2O，13)，341(19)，313(25)，241(33)，223(37)，209(56)，73(100)。
(c)4-亞甲基化合物3中的酯基團(tuán)的還原[(3R，5R)-3，5-雙[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-1-羥基-4-亞甲基環(huán)己基]甲醇(4)。(i)于0℃于氬氣下向攪拌的酯3(90mg，0.21mmol)的無(wú)水THF(8mL)溶液中加入氫化鋁鋰(60mg，1.6mmol)。1h后除去冷卻浴，并于6℃連續(xù)攪拌12h，接著于室溫?cái)嚢?h。多余的反應(yīng)物用飽和Na2SO4水溶液分解(decomposed)，并且混合物用乙酸乙酯和乙醚萃取，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。使用己烷/乙酸乙酯(9∶1)的殘留物快速色譜提供未反應(yīng)的底物(12mg)和純的晶體二醇4(35mg，基于回收的酯3的48％)1H NMR(CDCl3+D2O)δ0.079，0.091，0.100，和0.121(每個(gè)為3H，每個(gè)為s，4×SiCH3)，0.895和0.927(9H和9H，每個(gè)為s，2×Si-t-Bu)，1.339(1H，t，J～12Hz)，1.510(1H，dd，J＝14.3，2.7Hz)，2.10(2H，m)，3.29和3.40(1H和1H，每個(gè)為d，J＝11.0Hz)，4.66(1H，t，J～2.8Hz)，4.78(1H，m)，4.92(1H，t，J＝1.7Hz)，5.13(1H，t，J＝2.0Hz)；MS m/z(相對(duì)強(qiáng)度)無(wú)M+，345(M+-t-Bu，8)，327(M+-t-Bu-H2O，22)，213(28)，195(11)，73(100)。
(ii)于-78℃在氬氣下將氫化二異丁基鋁(在甲苯中1.5M，2.0mL，3mmol)加入到酯3(215mg，0.5mmol)的無(wú)水乙醚(3mL)溶液中。將混合物于-78℃攪拌3h接著在-24℃攪拌1.5h，用乙醚(10mL)稀釋并通過(guò)緩慢加入2N酒石酸鉀鈉來(lái)終止。將溶液溫?zé)嶂潦覝夭嚢?5min，傾入到鹽水中并用乙酸乙酯和乙醚洗滌。合并有機(jī)萃取物，用稀(大約1％)HCl和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。該結(jié)晶殘留物用快速色譜純化。用己烷/乙酸乙酯(9∶1)洗脫產(chǎn)生結(jié)晶二醇4(43mg，24％)。
(d)鄰位二醇4的裂解(cleavage)
(3R，5R)-3，5-雙[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-4-亞甲基環(huán)己酮(5)。于0℃將高碘酸鈉的飽和水(2.2mL)加入到二醇4(146mg，0.36mmol)的甲醇(9mL)溶液中。將溶液于0℃攪拌1h，傾入到鹽水中并用乙醚和苯萃取。將有機(jī)萃取物合并，用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。將油狀殘留物溶于己烷(1mL)并施加到硅膠Sep-Pak柱(cartridge)上。用己烷/乙酸乙酯(95∶5)洗脫無(wú)色油狀的純4-亞甲基環(huán)己酮衍生物5(110mg，82％)1H NMR(CDCl3)δ0.050和0.069(6H和6H，每個(gè)為s，4×SiCH3)，0.881(18H，s，2×Si-t-Bu)，2.45(2H，ddd，J＝14.2，6.9，1.4Hz)，2.64(2H，ddd，J＝14.2，4.6，1.4Hz)，4.69(2H，dd，J＝6.9，4.6Hz)，5.16(2H，s)；MS m/z(相對(duì)強(qiáng)度)無(wú)M+，355(M+-Me，3)，313(M+-t-Bu，100)，73(76)。
(e)烯丙型酯6的制備[(3′R，5′R)-3′，5′-雙[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-4′-亞甲基環(huán)亞己基]乙酸甲酯(6)。于-78℃于氬氣下向二異丙基胺(37μL，0.28mmol)的無(wú)水THF(200μL)溶液中攪拌加入n-BuLi(2.5M的己烷溶液，113μL，0.28mmol)，然后加入(三甲基甲硅烷基)乙酸甲酯(46μL，0.28mmol)。15min后，逐滴加入無(wú)水THF(200+80μL)中的酮化合物5(49mg，0.132mmol)。將溶液于-78℃攪拌2h并用飽和NH4Cl將反應(yīng)混合物終止，傾入到鹽水中并用乙醚和苯萃取。合并的有機(jī)萃取物用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。將殘留物溶于己烷(1mL)并施加到硅膠Sep-Pak柱上。用己烷和己烷/乙酸乙酯(98∶2)洗脫產(chǎn)生無(wú)色油狀的純的烯丙型酯6(50mg，89％)1H NMR(CDCl3)δ0.039，0.064和0.076(6H，3H和3H，每個(gè)為s，4×SiCH3)，0.864和0.884(9H和9H，每個(gè)為s，2×Si-t-Bu)，2.26(1H，dd，J＝12.8，7.4Hz)，2.47(1H，dd，J＝12.8，4.2Hz)，2.98(1H，dd，J＝13.3，4.0Hz)，3.06(1H，dd，J＝13.3，6.6Hz)，3.69(3H，s)，4.48(2H，m)，4.99(2H，s)，5.74(1H，s)；MS m/z(相對(duì)強(qiáng)度)426(M+，2)，411(M+-Me，4)，369(M+-t-Bu，100)，263(69)。
(f)烯丙型酯6的還原2-[(3′R，5′R)-3′，5′-雙[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-4′-亞甲基環(huán)亞己基]乙醇(7)。于-78℃于氬氣下將氫化二異丁基鋁(甲苯中1.5M，1.6mL，2.4mmol)緩慢加入到烯丙型酯6(143mg，0.33mmol)的甲苯/二氯甲烷(2∶1，5.7mL)的攪拌溶液中。攪拌在-78℃持續(xù)1h接著在-46℃(環(huán)己酮/干冰浴)25min。通過(guò)緩慢加入酒石酸鉀鈉(2N，3mL)、稀HCl(2N，3mL)和H2O(12mL)將混合物終止，然后用二氯甲烷(12mL)稀釋并用乙醚和苯萃取。將有機(jī)萃取物合并，用稀(大約1％)HCl和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。殘留物用快速色譜純化。用己烷/乙酸乙酯(9∶1)洗脫產(chǎn)生結(jié)晶烯丙型醇7(130mg，97％)1HNMR(CDCl3)δ0.038，0.050和0.075(3H，3H和6H，每個(gè)為s，4×SiCH3)，0.876和0.904(9H和9H，每個(gè)為s，2×Si-t-Bu)，2.12(1H，dd J＝12.3，8.8Hz)，2.23(1H，dd，J＝13.3，2.7Hz)，2.45(1H，dd，J＝12.3，4.8Hz)，2.51(1H，dd，J＝13.3，5.4Hz)，4.04(1H，m；加入D2O之后dd，J＝12.0，7.0Hz)，4.17(1H，m；加入D2O之后dd，J＝12.0，7.4Hz)，4.38(1H，m)，4.49(1H，m)，4.95(1H，br s)，5.05(1H，t，J＝1.7Hz)，5.69(1H，～t，J＝7.2Hz)；MS m/z(相對(duì)強(qiáng)度)398(M+，2)，383(M+-Me，2)，365(M+-Me-H2O，4)，341(M+-t-Bu，78)，323(M+-t-Bu-H2O，10)，73(100)。
(g)烯丙型醇7轉(zhuǎn)化成氧化膦8[2-[(3′R，5′R)-3′，5′-雙[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-4′亞甲基環(huán)亞己基]乙基]二苯基氧化膦(8)。于0℃于氬氣下向烯丙型醇7(105mg，0.263mmol)的無(wú)水THF(2.4mL)中加入n-BuLi(己烷中2.5M，105μL，0.263mmol)。將新鮮重結(jié)晶的甲基苯磺酰氯(50.4mg，0.264mmol)溶于無(wú)水THF(480μL)中接著加入到烯丙型醇-BuLi溶液中。將混合物于0℃攪拌5min接著于0℃放置(set aside)。在用氬氣代替空氣的另外的干燒瓶中，在攪拌下于0℃將n-BuLi(2.5M己烷溶液，210μL，0.525mmol)加入到PH2PH(93μL，0.534mmol)的無(wú)水THF(750μL)中。在氬氣壓下將紅色溶液虹吸入甲苯磺酸鹽溶液中直到持續(xù)橙色(大約1/2的該溶液被加入)。得到的混合物于0℃再攪拌30min接著通過(guò)加入H2O(30μL)而終止。溶劑在減壓下蒸發(fā)并且殘留物被再溶于二氯甲烷(2.4mL)中并用10％H2O2于0℃攪拌1h。分離有機(jī)層，用冷亞硫酸鈉水溶液和H2O洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。將殘留物應(yīng)用快速色譜。用苯/乙酸乙酯(6∶4)洗脫產(chǎn)生半結(jié)晶氧化膦8(134mg，87％)1H NMR(CDCl3)δ0.002，0.011和0.019(3H，3H，和6H，每個(gè)為s，4×SiCH3)，0.855和0.860(9H和9H，每個(gè)為s，2×Si-t-Bu)，2.0-2.1(3H，br m)，2.34(1H，m)，3.08(1H，m)，3.19(1H，m)，4.34(2H，m)，4.90和4.94(1H和1H，每個(gè)為s)，5.35(1H，～q，J＝7.4Hz)，7.46(4H，m)，7.52(2H，m)，7.72(4H，m)；MS m/z(相對(duì)強(qiáng)度)無(wú)M+，581(M+-1，1)，567(M+-Me，3)525(M+-t-Bu，100)，450(10)，393(48)。
(h)被保護(hù)的25-羥基格倫德曼酮9與氧化膦8的Wittig-Horner偶合1α，25-二羥基-2-亞甲基-19-去甲-維生素D3(11)。于0℃于氬氣下于攪拌下向氧化膦8(33.1mg，56.8μmol)的無(wú)水THF(450μL)溶液中緩慢加入nBuLi(2.5M己烷溶液，23μL，57.5μmol)。溶液變成深橙色。混合物冷卻至-78℃并緩慢加入根據(jù)公開(kāi)的方法[Sicinski等，J.Me d.Chem.37，3730(1994)]制備的預(yù)冷的(-78℃)被保護(hù)的羥基酮9(9.0mg，22.8μmol)的無(wú)水THF(200+100μL)溶液。將混合物于氬氣下于-78℃攪拌1h接著于0℃攪拌18h。加入乙酸乙酯并將有機(jī)相用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。殘留物溶于己烷并施加到硅膠Sep-Pak柱上，用己烷/乙酸乙酯(99∶1，20mL)洗脫產(chǎn)生19-去甲-維生素衍生物10(13.5mg，78％)。然后將Sep-Pak用己烷/乙酸乙酯(96∶4)，10mL)洗脫以回收一些未變的C，D-環(huán)酮9(2mg)，并用乙酸乙酯(10mL)洗脫以回收二苯基氧化膦(20mg)。為了分析的目的，被保護(hù)的維生素10的樣品進(jìn)一步用采用己烷/乙酸乙酯(99.9∶0.1)溶劑體系的HPLC(6.2mm×25cm Zorbax-Sil柱，4mL/min)純化。無(wú)色油狀純的化合物以Rv26mL被洗脫UV(己烷中)λmax224，253，263nm；1H NMR(CDCl3)δ0.025，0.049，0.066和0.080(每個(gè)為3H，每個(gè)為s，4×SiCH3)，0.546(3H，s，18-H3)，0.565(6H，q，J＝7.9Hz，3×SiCH2)，0.864和0.896(9H和9H，每個(gè)為s，2×Si-t-Bu)，0.931(3H，d，J＝6.0Hz，21-H3)，0.947(9H，t，J＝7.9Hz，3×SiCH2CH3)，1.188(6H，s，26-和27-H3)，2.00(2H，m)，2.18(1H，dd，J＝12.5，8.5Hz，4β-H)，2.33(1H，dd，J＝13.1，2.9Hz，10β-H)，2.46(1H，dd J＝12.5，4.5Hz，4α-H)，2.52(1H，dd，J＝13.1，5.8Hz，10α-H)，2.82(1H，br d，J＝12Hz，9β-H)，4.43(2H，m，1β-和3α-H)，4.92和4.97(1H和1H，每個(gè)為s，＝CH2)，5.84和6.22(1H和1H，每個(gè)為d，J＝11.0Hz，7-和6-H)；MS m/z(相對(duì)強(qiáng)度)758(M+，17)，729(M+-Et，6)，701(M+-t-Bu，4)，626(100)，494(23)，366(50)，73(92)。
將被保護(hù)的維生素10(4.3mg)溶于苯(150μL)中并加入在甲醇(800μL)中的樹(shù)脂(AG50W-X4，60mg；用甲醇預(yù)洗滌)?；旌衔镉跉鍤庀掠谑覝?cái)嚢?7h，用乙酸乙酯/乙醚(1∶1，4mL)稀釋并傾析。將樹(shù)脂用乙醚(8mL)洗滌并將合并的有機(jī)相用鹽水和飽和NaHCO3洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。殘留物用使用己烷/2-丙醇(9∶1)溶劑體系的HPLC(62mm×25cm Zorbax-Sil柱，4mL/min)純化。以Rv29mL收集白色固體狀的分析純的2-亞甲基-19-去甲-維生素11(2.3mg，97％)(1α，25-二羥基維生素D3在相同體系以Rv52mL被洗脫)UV(在EtOH中)λmax243.5，252，262.5nm；1H NMR(CDCl3)δ0.552(3H，s，18-H3)，0.941(3H，d，J＝6.4Hz，21-H3)，1.222(6H，s，26-和27-H3)，2.01(2H，m)，2.27-2.36(2H，m)，2.58(1H，m)，2.80-2.88(2H，m)，4.49(2H，m，1β-和3α-H)，5.10和5.11(1H和1H，每個(gè)為s，＝CH2)，5.89和6.37(1H和1H，每個(gè)為d，J＝11.3Hz，7-和6-H)；MS m/z(相對(duì)強(qiáng)度)416(M+，83)，398(25)，384(31)，380(14)，351(20)，313(100)。
實(shí)施例2(20S)-1α，25-二羥基-2-亞甲基-19-去甲-維生素D3(15)的制備圖解II說(shuō)明了被保護(hù)的(20S)-25-羥基格倫德曼酮13的制備及其與氧化膦8(按照實(shí)施例1中說(shuō)明所得到的)的偶合。
(a)羥基酮12的硅烷基化(20S)-25-[(三乙基甲硅烷基)氧基]-脫(des)-A，B-膽甾烷-8-酮(13)。酮12(Tetrionics，Inc.Madison，W1.；56mg，0.2mmol)和咪唑(65mg，0.95mmol)的無(wú)水DMF(1.2mL)的溶液用三乙基甲硅烷基氯化物(95μL，0.56mmol)處理，并且混合物于氬氣下于室溫?cái)嚢?h。加入乙酸乙酯并分離水層和有機(jī)層。乙酸乙酯層用水和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。將殘留物于己烷/乙酸乙酯(9∶1)中通過(guò)硅膠Sep-Pak柱，蒸發(fā)后用使用己烷/乙酸乙酯(9∶1)溶劑體系的HPLC(9.4mm×25cm Zorbax-Sil柱，4mL/min)純化。無(wú)色油狀的純的被保護(hù)的羥基酮13(55mg，70％)以Rv35mL被洗脫1H NMR(CDCl3)δ0.566(6H，q，J＝7.9Hz，3×SiCH2)，0.638(3H，s，18-H3)，0.859(3H，d，J＝6.0Hz，21-H3)，0.947(9H，t，J＝7.9Hz，3×SiCH2CH3)，1.196(6H，s，26-和27-H3)，2.45(1H，dd，J＝11.4，7.5Hz，14α-H).
(b)被保護(hù)的(20S)-25-羥基格倫德曼酮13與氧化膦8的Wittig-Horner偶合(20S)-1α，25-二羥基-2-亞甲基-19-去甲-維生素D3(15)。于0℃于氬氣下于攪拌下向氧化膦8(15.8mg，27.1μmol)的無(wú)水THF(200μL)溶液中緩慢加入nBuLi(2.5M己烷溶液，11μL，27.5μmol)。溶液變成深橙色。將混合物冷卻至-78℃并緩慢加入預(yù)冷的(-78℃)被保護(hù)的羥基酮13(8.0mg，20.3μmol)的無(wú)水THF(100μL)溶液。將混合物于氬氣下于-78℃攪拌1h并于0℃攪拌18h。加入乙酸乙酯，接著將有機(jī)相用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。殘留物溶于己烷并施加到硅膠Sep-Pak柱上，用己烷/乙酸乙酯(99.5∶0.5，20mL)洗脫產(chǎn)生無(wú)色油狀19-去甲-維生素衍生物14(7mg，45％)。然后將Sep-Pak用己烷/乙酸乙酯(96∶4，10mL)洗脫以回收一些未變的C，D-環(huán)酮13(4mg)，并用乙酸乙酯(10mL)洗脫以回收二苯基氧化膦(9mg)。為了分析的目的，被保護(hù)的維生素14的樣品進(jìn)一步用采用己烷/乙酸乙酯(99.9∶0.1)溶劑體系的HPLC(6.2mm×25cm Zorbax-Sil柱，4mL/min)純化。
14UV(己烷中)λmax244，253.5，263nm；1H NMR(CDCl3)δ0.026，0.049，0.066和0.080(每個(gè)為3H，每個(gè)為s，4×SiCH3)，0.541(3H，s，18-H3)，0.564(6H，q，J＝7.9Hz，3×SiCH2)，0.848(3H，d，J＝6.5Hz，21-H3)，0.864和0.896(9H和9H，每個(gè)為s，2xSi-t-Bu)，0.945(9H，t，J＝7.9Hz，3×SiCH2CH3)，1.188(6H，s，26-和27-H3)，2.15-2.35(4H，br m)，2.43-2.53(3H，br m)，2.82(1H，br d，J＝12.9Hz，9β-H)，4.42(2H，m，1β和3α-H)，4.92和4.97(1H和1H，每個(gè)為s，＝CH2)，5.84和6.22(1H和1H，每個(gè)為d，J＝11.1Hz，7-和6-H)；MS m/z(相對(duì)強(qiáng)度)758(M+，33)，729(M+-Et，7)，701(M+-t-Bu，5)，626(100)，494(25)，366(52)，75(82)，73(69)。
將被保護(hù)的維生素14(5.0mg)溶于苯(160μL)中并加入在甲醇(900μL)中的樹(shù)脂(AG50W-X4，70mg；用甲醇預(yù)洗滌)。混合物于氬氣下于室溫?cái)嚢?9h，用乙酸乙酯/乙醚(1∶1，4mL)稀釋并傾析。樹(shù)脂用乙醚(8mL)洗滌并將合并的有機(jī)相用鹽水和飽和NaHCO3洗滌，干燥(MgSO4)并蒸發(fā)。殘留物用使用己烷/2-丙醇(9∶1)溶劑體系的HPLC(62mm×25cm Zorbax-Sil柱，4mL/min.)純化。以Rv28mL收集分析純的2-亞甲基-19-去甲-維生素15(2.6mg，95％)[在相同體系中(20R)-類(lèi)似物以Rv29mL洗脫并且1α，25-二羥基維生素D3以Rv52mL被洗脫]白色固體UV(在EtOH中)λmax243.5，252.5，262.5nm；3H NMR(CDCl3)δ0.551(3H，s，18-H3)，0.858(3H，d，J＝6.6Hz，21-H3)，1.215(6H，s，26-和27-H3)，1.95-2.04(2H，m)，2.27-2.35(2H，m)，2.58(1H，dd，J＝13.3，3.0Hz)，2.80-2.87(2H，m)，(2H，m，1β-和3α-H)，5.09和5.11(1H和1H，每個(gè)為s，＝CH2)，5.89和6.36(1H和1H，每個(gè)為d，J＝11.3Hz，7-和6-H)；MSm/z(相對(duì)強(qiáng)度)416(M+，100)，398(26)，380(13)，366(21)，313(31)。
2-亞甲基-取代的19-去甲-1，25-(OH)2D3化合物及其20S-異構(gòu)體的生物活性式I化合物的生物活性在美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5,843,928中如下說(shuō)明。19-去甲-1，25-(OH)2D3或其20S-異構(gòu)體的2-位上引入亞甲基，對(duì)與豬腸維生素D受體的結(jié)合具有很少或沒(méi)有影響。所有化合物相等地良好地結(jié)合于豬受體上，包括標(biāo)準(zhǔn)1，25-(OH)2D3。由這些結(jié)果，認(rèn)為可能是由于所有化合物具有相等的生物活性。然而令人驚訝的是，該2-亞甲基取代產(chǎn)生主要作用于骨的高選擇性類(lèi)似物。當(dāng)以長(zhǎng)期方式給藥7天時(shí)，受試的最有效的化合物是2-亞甲基-19-去甲-20S-1，25-(OH)2D3(表1)。當(dāng)以130pmol/天給藥時(shí)，它的在骨鈣動(dòng)員(血清鈣)方面的活性是至少10的數(shù)量級(jí)并且可能是多于天然激素的100-1,000倍。在同一條件下，以130pmol給藥劑量下兩個(gè)劑量的1，25-(OH)2D3產(chǎn)生血清鈣13.8mg/100ml的血清鈣值。當(dāng)以260pmol/天給藥時(shí)，消耗骨(expense of bone)，產(chǎn)生令人驚訝的14mg/100ml的血清鈣值。為了顯示其選擇性，在130或260pmol劑量，該化合物在腸鈣轉(zhuǎn)運(yùn)上沒(méi)有產(chǎn)生顯著的變化，而1，25-(OH)2D3在唯一受試的劑量即260pmol/天就產(chǎn)生了腸鈣轉(zhuǎn)運(yùn)的期望的提高。2-亞甲基-19-去甲-1，25-(OH)2D3在兩個(gè)劑量水平也都具有很強(qiáng)的骨鈣動(dòng)員而且顯示沒(méi)有腸鈣轉(zhuǎn)運(yùn)活性。該化合物的骨該動(dòng)員活性可能是1，25-(OH)2D3的10-100倍。這些結(jié)果表明19-去甲-1，25-(OH)2D3的2-亞甲基和20S-2-亞甲基衍生物對(duì)于鈣從骨的動(dòng)員是選擇性的。表2表明了腸和血清鈣兩者對(duì)單一大劑量的不同化合物的反應(yīng)，再次支持表1得出的結(jié)論。
這些結(jié)果表明2-亞甲基-19-去甲-20S-1，25-(OH)2D3在誘導(dǎo)HL-60細(xì)胞分化成單核細(xì)胞中是很有效的。2-亞甲基-19-去甲化合物具有相似于1，25-(OH)2D3的活性。這些結(jié)果表明了2-亞甲基-19-去甲-20S-1，25-(OH)2D3和2-亞甲基-19-去甲-1，25-(OH)2D3化合物作為抗癌劑尤其是抗白血病、結(jié)腸癌、乳腺癌和前列腺癌，或作為治療牛皮癬的藥物的潛力。
類(lèi)似物對(duì)豬腸受體的競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合通過(guò)Dame等說(shuō)明的方法(Biochemistry25，4523-4534，1986)來(lái)進(jìn)行。
HL-60原髓細(xì)胞(promyelocytic)向單核細(xì)胞的分化按照Ostrem等說(shuō)明的(J.Biol.Chem.262，14164-14171，1987)來(lái)測(cè)定。
表1

雄性斷奶大鼠從Sprague Dawley Co.(Indianapolis，Ind.)得到并喂0.47％鈣、0.3％磷維生素D-缺乏飼料(diet)1周，然后喂含有0.02％鈣、0.3％磷的相同的飼料2周。在最后一周內(nèi)，它們每天被腹腔注射0.1ml 95％丙二醇和5％乙醇中的確定劑量的化合物7天。對(duì)照動(dòng)物只接受0.1ml的95％丙二醇和5％乙醇。最后給藥24小時(shí)后，將大鼠處死并通過(guò)如前面說(shuō)明的外翻囊技術(shù)測(cè)定腸鈣轉(zhuǎn)運(yùn)，并通過(guò)在model3110 Perkin Elmer儀器(Norwalk，Conn.)上的原子吸收光譜測(cè)定血清鈣。每組有5只大鼠并且數(shù)值表示為均值(±)SEM。
表2

雄性斷奶大鼠從Sprague Dawley Co.(Indianapolis，Ind.)得到并喂Suda等說(shuō)明的(J.Nutr.100，1049-1052，1970)0.47％鈣、0.3％磷飼料1周，然后喂含有0.02％鈣和0.3％磷的相同的飼料另外2周。在這一點(diǎn)上，它們接受溶于0.1ml95％丙二醇/5％乙醇中的確定劑量的單次頸靜脈注射。給藥24小時(shí)后，將大鼠處死并通過(guò)如表1說(shuō)明的來(lái)測(cè)定腸鈣轉(zhuǎn)運(yùn)和血清鈣?；衔锏膭┝繛?50pmol并且每組有5只動(dòng)物。數(shù)據(jù)表示為均值(±)SEM。
據(jù)此，下式Ia化合物與式I的那些化合物一起也被本發(fā)明所包括 在上式Ia中，Y1、Y2、R6、R8和Z的定義為如文中前述的。在X1、X2、X3、X4、X5、X6、X7、X8和X9方面，這些取代基可以相同或不同，并且選自氫或低級(jí)烷基，即C1-5烷基比如甲基、乙基或正丙基。此外，成對(duì)的取代基X1與X4或X5、X2或X3與X6或X7、X4或X5與X8或X9，當(dāng)與分別相應(yīng)于8、14、13，或14、13、17，或13、17、20位的化合物中心部分的三個(gè)相鄰的碳原子一起時(shí)，可以相同或不同并且形成飽和或不飽和、取代的或非取代的碳環(huán)3、4、5、6或7員環(huán)。
本發(fā)明優(yōu)選的化合物可以以下式之一來(lái)表示



在上述式Ib、Ic、Id、Ie、If、Ig和Ih中，Y1、Y2、R6、R8、R、Z、X1、X2、X3、X4、X5、X6、X7和X8的定義是如文中前述的。取代基Q代表飽和或不飽和、取代的或非取代的、包括0、1、2、3或4個(gè)碳原子的烴鏈，但優(yōu)選是基團(tuán)-(CH2)k-，其中k是等于2或3的整數(shù)。
制備式Ia-Ih化合物的方法是已知的。具體地參考是1994年7月7日提交并在1995年1月19日公開(kāi)的國(guó)際申請(qǐng)?zhí)朠CT/EP94/02294，其國(guó)際公開(kāi)號(hào)是WO95/01960。
圖解1
圖解1(續(xù))
圖解2
權(quán)利要求
1.一種治療虛弱、肌肉損傷或少肌癥的方法，該方法包括給藥于需要該治療的患者治療有效量的2-亞甲基-19-去甲-20(S)-1α，25-二羥基維生素D3。
2.權(quán)利要求1的方法，其中該2-亞甲基-19-去甲-20(S)-1α，25-二羥基維生素D3是口服給藥。
3.權(quán)利要求1的方法，其中該2-亞甲基-19-去甲-20(S)-1α，25-二羥基維生素D3是胃腸道外給藥。
4.權(quán)利要求1的方法，其中該2-亞甲基-19-去甲-20(S)-1α，25-二羥基維生素D3是透皮給藥。
5.權(quán)利要求1的方法，其中治療的是虛弱。
6.權(quán)利要求1的方法，其中治療的是肌肉損傷。
7.權(quán)利要求1的方法，其中治療的是少肌癥。
8.權(quán)利要求5的方法，其中是治療由虛弱導(dǎo)致的身體工作能力的削弱。
9.權(quán)利要求7的方法，其中是治療由少肌癥導(dǎo)致的身體工作能力的削弱。
全文摘要
本發(fā)明涉及治療虛弱、肌肉損傷或少肌癥的方法，方法包括給藥于需要其的患者2－亞烷基－19－去甲－維生素D衍生物。尤其本發(fā)明涉及治療虛弱、肌肉損傷或少肌癥的方法，方法包括給藥于需要其的患者治療有效量的2－亞甲基－19－去甲－20(S)－1α，25－二羥基維生素D3。
文檔編號(hào)A61P3/02GK1852718SQ200480027153
公開(kāi)日2006年10月25日 申請(qǐng)日期2004年9月6日 優(yōu)先權(quán)日2003年9月19日
發(fā)明者安德魯·G·李 申請(qǐng)人:輝瑞產(chǎn)品公司