專利名稱：用于抑制細(xì)菌定居的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于在生物學(xué)系統(tǒng)中抑制粘液上皮的細(xì)菌定居的方法和組合物，還涉及用于減輕由粘液上皮的細(xì)菌定居引起的感染、炎癥、和損傷的方法和組合物。
背景技術(shù)：
許多疾病和狀況與粘膜表面的致病細(xì)菌定居和感染有關(guān)。諸如胃腸道、口腔、呼吸道、食管、口、泌尿生殖道、和眼等器官和組織的粘膜表面都可以被許多不同類型的致病細(xì)菌所定居和感染。例如，幽門螺桿菌(Helicobacter pylori)對(duì)胃粘膜的定居和感染在許多臨床表現(xiàn)的發(fā)展中發(fā)揮關(guān)鍵作用，包括胃炎、胃和十二指腸潰瘍、胃部腺癌、粘膜相關(guān)淋巴組織淋巴癌、和非潰瘍性消化不良。
細(xì)菌定居和感染這些粘膜表面的能力涉及許多因素，包括致病細(xì)菌粘附宿主細(xì)胞和抵抗物理清除的能力、細(xì)菌侵入宿主細(xì)胞的能力、細(xì)菌抵抗吞噬作用和補(bǔ)體的能力、細(xì)菌躲避宿主免疫防御的能力、以及細(xì)菌與宿主組織和正常菌群競(jìng)爭(zhēng)有限營(yíng)養(yǎng)的能力。
例如，淋病奈瑟氏菌(Neisseria gonorrheae)合成不同菌毛，使之粘附多種組織的粘膜表面，包括咽喉、泌尿生殖道、直腸、和眼球結(jié)膜。釀膿鏈球菌(Streptococcus pyogenes)生成粘附素，即與宿主細(xì)胞表面特異受體相結(jié)合的蛋白質(zhì)。有些細(xì)菌，諸如志賀氏菌菌株，生成激活宿主細(xì)胞骨架系統(tǒng)使得細(xì)菌能夠通過(guò)吞噬作用進(jìn)入細(xì)胞的分子。
在幽門螺桿菌感染胃粘膜的情形中，細(xì)菌利用多種不同機(jī)制來(lái)定居和感染胃粘膜下面的胃。首先，幽門螺桿菌定居胃竇，因?yàn)樵搮^(qū)域的酸性適中。然后，細(xì)菌利用它的鞭毛和螺旋外形鉆透胃粘液層。再后，生成的粘附素使之與上皮細(xì)胞的膜結(jié)合脂質(zhì)和碳水化合物相結(jié)合。最后，細(xì)菌生成脲酶，促進(jìn)酸性胃環(huán)境的定居。脲酶消化尿素而生成氨和碳酸氫鹽，有助于中和胃酸。胃部保護(hù)性粘液層的削弱使得胃易受酸和胃蛋白酶破壞作用的影響。
胃粘膜中幽門螺桿菌的存在總是與由嗜中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞浸潤(rùn)引起的粘膜炎癥有關(guān)。幽門螺桿菌還生成許多有害的酶，而且它們也有可能牽涉胃粘膜炎癥。胃粘膜炎癥還可能導(dǎo)致胃的進(jìn)一步損傷。
用于根除定居和感染粘膜的細(xì)菌的治療通常較為昂貴，缺乏功效，且只有在某些臨床狀況下是明智的。許多治療方案還常常是復(fù)雜的，產(chǎn)生嚴(yán)重的副作用，且難以讓患者遵從。治療方案常常牽涉多種試劑，包括一種或多種抗生素。例如，目前推薦的用于根除幽門螺桿菌的治療方法牽涉使用抗生素和質(zhì)子泵抑制劑的三聯(lián)治療方案。同樣還不清楚，針對(duì)與許多致病細(xì)菌定居和感染粘膜有關(guān)的疾病和狀況，免疫接種是否是現(xiàn)實(shí)且有效的預(yù)防性治療方法。
因此，需要抑制粘液上皮的細(xì)菌定居和感染的新方法和組合物。
本發(fā)明涉及發(fā)揮抑制粘液上皮的細(xì)菌定居和感染以及相關(guān)炎癥作用的試劑組合的鑒定。
貫穿本說(shuō)明書，出于描述本發(fā)明各個(gè)方面的目的，可以參考其它文件。然而，這并非承認(rèn)本說(shuō)明書中引用的任何參考文獻(xiàn)構(gòu)成現(xiàn)有技術(shù)。具體而言，應(yīng)當(dāng)理解，本文對(duì)任何文件的參考并非承認(rèn)這些文件在任何其它國(guó)家形成本領(lǐng)域共同常識(shí)的一部分。關(guān)于參考文獻(xiàn)的討論是陳述它們的作者所聲稱的內(nèi)容，而且申請(qǐng)人保留挑戰(zhàn)本文所引用的任何文件的精確性和針對(duì)性的權(quán)利。
發(fā)明概述本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中抑制粘液上皮的細(xì)菌定居的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠抑制細(xì)菌定居的成分。
本發(fā)明還提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中減輕粘液上皮的細(xì)菌感染的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠減輕細(xì)菌感染的成分。
本發(fā)明還提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中減輕與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的炎癥的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠減輕與細(xì)菌感染有關(guān)的炎癥的成分。
本發(fā)明還提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中減輕與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮損傷的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠減輕與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮損傷的成分。
本發(fā)明還提供了用于在受試者中治療與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)受試者施用有效量的粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠在受試者中治療與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況的成分。
本發(fā)明還提供了包含粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的組合物。
本發(fā)明源自關(guān)于初乳抑制與粘液上皮疾病或狀況有關(guān)的粘液上皮的細(xì)菌定居和感染之能力研究。令人驚訝的發(fā)現(xiàn)，抑制細(xì)菌定居、感染、和相關(guān)胃部炎癥的能力通過(guò)初乳(或初乳成分)與粘液溶解劑的聯(lián)合而得到了提高。具體而言，發(fā)現(xiàn)由幽門螺桿菌引起的定居、感染、和胃部相關(guān)炎癥可以通過(guò)初乳或初乳成分聯(lián)合粘液溶解劑諸如N-乙酰半胱氨酸的治療得到抑制或預(yù)防。
用于整篇說(shuō)明書的多個(gè)術(shù)語(yǔ)具有熟練技術(shù)人員充分理解的含義。然而，為了便于理解，現(xiàn)在定義這些術(shù)語(yǔ)中的一些。
術(shù)語(yǔ)“粘液上皮”在用于整篇說(shuō)明書時(shí)理解為任何上皮細(xì)胞集合，包括分泌粘液且生成能夠被細(xì)菌定居的一層粘液的細(xì)胞。
術(shù)語(yǔ)“生物學(xué)系統(tǒng)”在用于整篇說(shuō)明書時(shí)理解為具有粘液上皮的任何多細(xì)胞系統(tǒng)。例如，生物學(xué)系統(tǒng)可以是具有粘液上皮的完整器官或組織或其一部分，或者是易受粘液上皮的細(xì)菌定居或感染的影響或正在遭受其影響的完整動(dòng)物或人受試者。
術(shù)語(yǔ)“粘液溶解劑”在用于整篇說(shuō)明書時(shí)理解為有能力降低粘液疏水性的任何試劑。如Absolom等，1986，J.Colloid Interface Sci112599中所述，用于測(cè)量疏水性的一種經(jīng)驗(yàn)證的技術(shù)是在將一滴鹽水置于標(biāo)本表面上時(shí)測(cè)量活組織檢查標(biāo)本的接觸角?？梢允褂脺y(cè)角計(jì)來(lái)測(cè)量接觸角，測(cè)角計(jì)安裝了單色光源和用于對(duì)組織表面施加小體積鹽水的千分尺激活注射器。對(duì)組織表面施加小體積鹽水(5μl)。將視野中心調(diào)至與三相點(diǎn)一致，然后將一條叉絲調(diào)至與組織-流體界面一致。二者之間的角度就是接觸角，而且它可以由圍繞目鏡的刻度直接讀出。
術(shù)語(yǔ)“粘液上皮的定居”在用于整篇說(shuō)明書時(shí)理解為一種或多種細(xì)菌在與粘液上皮相連的粘液層下面和/或其中的駐扎。
術(shù)語(yǔ)“減輕”和“抑制”在用于整篇說(shuō)明書時(shí)理解為減輕或抑制某個(gè)過(guò)程的進(jìn)展，包括該過(guò)程的開(kāi)始、繼續(xù)、或結(jié)束，而且在本發(fā)明的內(nèi)容中，這些術(shù)語(yǔ)包括對(duì)粘液上皮的細(xì)菌定居和感染以及炎癥的預(yù)防。
術(shù)語(yǔ)“粘液上皮的感染”在用于整篇說(shuō)明書時(shí)理解為一種或多種細(xì)菌在與粘液上皮相連的粘液層下面和/或其中的存在。
術(shù)語(yǔ)“粘液上皮損傷”在用于整篇說(shuō)明書時(shí)理解為由于粘液上皮細(xì)菌感染而發(fā)生的粘液上皮損傷。這種損傷可以是直接由細(xì)菌定居或感染引起的損傷，和/或由粘液上皮細(xì)菌感染間接引起的損傷，諸如由于粘液上皮炎癥而發(fā)生的損傷。
術(shù)語(yǔ)“由乳制品衍生的抗細(xì)菌劑”在用于整篇說(shuō)明書時(shí)理解為通過(guò)本領(lǐng)域已知方法生成的，乳、超免疫乳、初乳、超免疫初乳、或其它乳衍生產(chǎn)品中具有抗細(xì)菌活性(或是殺菌的或是抑菌的)的任何成分。這包括由乳、超免疫乳、初乳、或超免疫初乳衍生的一種或多種級(jí)分或提取物，或者是乳、超免疫乳、初乳、或超免疫初乳中通常存在的組合物中具有抗細(xì)菌活性的任何成分，包括由乳、超免疫乳、初乳、或超免疫初乳充分純化得到的產(chǎn)品，或是通過(guò)重組DNA技術(shù)生成的產(chǎn)品。
附圖簡(jiǎn)述在

圖1中，板塊A顯示了用鹽水(NaCl)、超免疫牛初乳(HBC)、或牛乳鐵蛋白(BLf)治療的小鼠的胃體中的定居水平。板塊B顯示了胃竇中的定居水平，而板塊C顯示了整個(gè)胃中的定居水平。各個(gè)動(dòng)物的結(jié)果以符號(hào)(◆)顯示；每個(gè)組的平均響應(yīng)以水平條(-)和數(shù)值指示。
在圖2中，板塊A顯示了用水(H2O)、牛乳鐵蛋白(BLf)、或牛乳鐵蛋白連同N-乙酰半胱氨酸(BLf*)治療的小鼠的整體定居水平。各個(gè)動(dòng)物的結(jié)果以符號(hào)(□)顯示；每個(gè)組的平均響應(yīng)以水平條(-)和數(shù)值指示。板塊B顯示了過(guò)渡區(qū)中的定居水平。
在圖3中，板塊A顯示了單獨(dú)用水(H2O)、單獨(dú)用N-乙酰半胱氨酸(NAC)、用牛乳鐵蛋白胃蛋白酶水解產(chǎn)物(BLc-A)、牛乳鐵蛋白酸水解產(chǎn)物(BLc-B)、未免疫牛初乳和N-乙酰半胱氨酸(NBC*)、超免疫牛初乳和N-乙酰半胱氨酸(HBC*)、牛乳鐵蛋白和N-乙酰半胱氨酸(BLf*)、牛乳鐵蛋白胃蛋白酶水解產(chǎn)物和N-乙酰半胱氨酸(BLc-A*)、牛乳鐵蛋白酸水解產(chǎn)物和N-乙酰半胱氨酸(BLc-B*)治療的小鼠或者用三聯(lián)療法(TT)治療的小鼠的胃體中的定居水平。圖B顯示了過(guò)渡區(qū)中的定居水平。各個(gè)動(dòng)物的結(jié)果以符號(hào)(-)顯示；每個(gè)組的平均響應(yīng)以水平條(-)和數(shù)值指示。
在圖4中，板塊A顯示了單獨(dú)用水(H2O)、單獨(dú)用N-乙酰半胱氨酸(NAC)、用牛乳鐵蛋白胃蛋白酶水解產(chǎn)物(BLc-A)、牛乳鐵蛋白酸水解產(chǎn)物(BLc-B)、未免疫牛初乳和N-乙酰半胱氨酸(NBC*)、超免疫牛初乳和N-乙酰半胱氨酸(HBC*)、牛乳鐵蛋白和N-乙酰半胱氨酸(BLf*)、牛乳鐵蛋白胃蛋白酶水解產(chǎn)物和N-乙酰半胱氨酸(BLc-A*)、牛乳鐵蛋白酸水解產(chǎn)物和N-乙酰半胱氨酸(BLc-B*)治療的小鼠或者用三聯(lián)療法(TT)治療的小鼠的胃竇中的定居水平。板塊B顯示了整體考慮的小鼠胃中的定居水平。各個(gè)動(dòng)物的結(jié)果以符號(hào)(-)顯示；每個(gè)組的平均響應(yīng)以水平條(-)和數(shù)值指示。
圖5顯示了用水(H2O)、牛乳鐵蛋白(BLf)、或牛乳鐵蛋白聯(lián)合N-乙酰半胱氨酸(BLf*)治療的小鼠中慢性炎性細(xì)胞浸潤(rùn)(慢性胃炎)的整體水平。各個(gè)動(dòng)物的結(jié)果以符號(hào)(◆)顯示；每個(gè)組的平均響應(yīng)以水平條(-)和數(shù)值指示。
在圖6中，板塊A顯示了單獨(dú)用水(H2O)、用超免疫牛初乳和N-乙酰半胱氨酸(HBC)、牛乳鐵蛋白和N-乙酰半胱氨酸(BLf)、牛乳鐵蛋白胃蛋白酶水解產(chǎn)物和N-乙酰半胱氨酸(BLc-A)、或牛乳鐵蛋白酸水解產(chǎn)物和N-乙酰半胱氨酸(BLc-B)治療的小鼠的胃體中的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)水平。板塊B顯示了小鼠過(guò)渡區(qū)中的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)水平。對(duì)于板塊A和B，各個(gè)動(dòng)物的結(jié)果以符號(hào)(×或□)顯示；每個(gè)組的平均響應(yīng)以水平條(-)和數(shù)值指示。板塊C顯示了小鼠胃竇中的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)水平。板塊D顯示了炎性細(xì)胞浸潤(rùn)的綜合評(píng)分。對(duì)于板塊C和D，各個(gè)動(dòng)物的結(jié)果以符號(hào)(○或◆)顯示；每個(gè)組的平均響應(yīng)以水平條(-)和數(shù)值指示。
圖7顯示了在用牛乳鐵蛋白(BLf)或牛乳鐵蛋白聯(lián)合N-乙酰半胱氨酸(BLf*)治療的小鼠中檢測(cè)到的急性胃炎(MPO活性)水平與H2O對(duì)照小鼠中的急性胃炎(MPO活性)水平進(jìn)行的比較。各個(gè)動(dòng)物的結(jié)果以符號(hào)(□)顯示；每個(gè)組的平均響應(yīng)以水平條(-)和數(shù)值指示。
圖8顯示了單獨(dú)用水(H2O)、用超免疫牛初乳和N-乙酰半胱氨酸(HBC)、牛乳鐵蛋白和N-乙酰半胱氨酸(BLf)、牛乳鐵蛋白胃蛋白酶水解產(chǎn)物和N-乙酰半胱氨酸(BLc-A)、或牛乳鐵蛋白酸水解產(chǎn)物和N-乙酰半胱氨酸(BLc-B)治療的小鼠中的急性胃炎(MPO活性)水平。各個(gè)動(dòng)物的結(jié)果以符號(hào)(□)顯示；每個(gè)組的平均響應(yīng)以水平條(-)和數(shù)值指示。
在圖9中，板塊A顯示了依照實(shí)施例11中所述多種治療方案的SS1定居存活計(jì)數(shù)，而板塊B顯示了依照實(shí)施例11中所述多種治療方案的胃組織MPO活性。
發(fā)明描述如上所述，在一種形式中，本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中抑制粘液上皮的細(xì)菌定居的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠抑制細(xì)菌定居的成分。
依照本發(fā)明多種形式的粘液上皮可以是已經(jīng)被細(xì)菌定居或感染的任何粘液上皮，或者是能夠被細(xì)菌定居或感染的任何粘液上皮。優(yōu)選的是，粘液上皮是動(dòng)物或人的粘液上皮。最優(yōu)選的是，粘液上皮是人的粘液上皮。
粘液上皮可以是一種或多種下列器官或組織的一部分胃，包括胃的賁門、胃底、胃體、胃竇、和幽門；十二指腸；回腸；小腸；大腸；結(jié)腸；腸；直腸；食道；口；舌；咽；泌尿生殖道；眼；以及呼吸道，包括鼻腔、口腔、喉、氣管、支氣管(包括細(xì)支氣管和肺泡)、和肺。優(yōu)選的是，粘液上皮是胃的賁門、胃底、胃竇、或幽門中一種或多種的粘液上皮。
粘液上皮可以是與疾病或狀況有關(guān)的任何粘液上皮，而所述疾病或狀況又與粘液上皮的細(xì)菌定居或感染有關(guān)。在這個(gè)方面，與粘液上皮的細(xì)菌定居或感染有關(guān)的疾病或狀況包括胃部炎癥；胃或十二指腸潰瘍；胃部腺癌；粘膜相關(guān)淋巴組織淋巴癌；非潰瘍性消化不良；與白細(xì)胞浸潤(rùn)有關(guān)的胃部狀況；尿道感染；鏈球菌性咽喉炎；傳染性心內(nèi)膜炎；細(xì)菌性肺炎；百日咳；齦炎；急性或慢性支氣管炎；(細(xì))支氣管擴(kuò)張；哮喘性支氣管炎；支氣管哮喘；細(xì)支氣管炎；囊腫性纖維化；咽喉炎；急性或慢性鼻炎。優(yōu)選的是，粘液上皮是與下列疾病或狀況有關(guān)的粘液上皮胃部炎癥、胃或十二指腸潰瘍、胃部腺癌、粘膜相關(guān)淋巴組織淋巴癌、非潰瘍性消化不良、或與淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)有關(guān)的胃部狀況。
可能定居或感染依照本發(fā)明多種形式的粘液上皮的細(xì)菌包括螺桿菌屬(Helicobacter)物種，包括幽門螺桿菌(Helicobacterpylori)、肝螺桿菌(Helicobacter hepaticus)、拉氏螺桿菌(Helicobacter rappini)、小家鼠螺桿菌(Helicobactermuridarum)、Helicobacter bilis；鏈球菌屬(Streptococcus)物種，包括變異鏈球菌(Streptococcus mutans)、釀膿鏈球菌(Streptococcus pyogenes)、肺炎鏈球菌(Streptococcuspneumoniae)；腸球菌屬(Enterococcus)物種，包括糞腸球菌(Enterococcus faecalis)；類桿菌屬(Bacteroides)物種；雙歧桿菌屬(Bifidobacterium)物種；消化球菌屬(Peptococcus)物種；消化鏈球菌屬(Peptostreptococcus)物種；瘤胃球菌屬(Ruminococcus)物種；梭菌屬(Clostridium)物種，包括艱難梭菌(Clostridium difficile)；乳桿菌屬(Lactobacillus)物種，包括嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)；奈瑟氏菌屬(Neisseria)物種，包括淋病奈瑟氏菌(Neisseria gonorrhoeae)和腦膜炎奈瑟氏菌(Neisseria meningitides)；埃希氏大腸桿菌(Escherichia coli)；霍亂弧菌(Vibrio cholerae)；志賀氏菌屬(Shigella)物種，包括痢疾志賀氏菌(Shigella dysenteriae)、弗氏志賀氏菌(Shigella flexneri)、和索氏志賀氏菌(Shigellasonnei)；耶爾森氏菌屬(Yersinia)物種，包括小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌(Yersinia enterocolitica)；銅綠假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa)；百日咳博德特氏菌(Bordetella pertussis)；彎曲桿菌屬(Campylobacter)物種，包括空腸彎曲桿菌(Campylobacterjejuni)；流感嗜血菌(Haemophilus influenzae)；葡萄球菌屬(Staphylococcus)物種，包括表皮葡萄球菌(Staphylococcusepidermidis)和金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)。優(yōu)選的是，可能定居或感染粘液上皮的細(xì)菌是螺桿菌屬的細(xì)菌物種。最優(yōu)選的是，細(xì)菌是幽門螺桿菌。
依照本發(fā)明多種形式的生物學(xué)系統(tǒng)可以是具有粘液上皮的任何多細(xì)胞系統(tǒng)，包括完整器官或組織或其一部分，或者是完整動(dòng)物或人受試者，它們所具有的粘液上皮能夠被細(xì)菌定居或感染。
優(yōu)選的是，生物學(xué)系統(tǒng)是人或動(dòng)物。更優(yōu)選的是，生物學(xué)系統(tǒng)是具有與疾病或狀況有關(guān)的粘液上皮的人或動(dòng)物，而所述疾病或狀況又是由細(xì)菌定居或感染引起的。最優(yōu)選的是，生物學(xué)系統(tǒng)是易受一種或多種下列由粘液上皮的細(xì)菌定居或感染引起的疾病或狀況影響或?qū)嶋H上正在遭受其影響的人受試者胃部炎癥；胃或十二指腸潰瘍；胃部腺癌；粘膜相關(guān)淋巴組織淋巴癌；非潰瘍性消化不良；與白細(xì)胞浸潤(rùn)有關(guān)的胃部狀況；尿道感染；鏈球菌性咽喉炎；傳染性心內(nèi)膜炎；細(xì)菌性肺炎；百日咳；齦炎；急性或慢性支氣管炎；(細(xì))支氣管擴(kuò)張；哮喘性支氣管炎；支氣管哮喘；細(xì)支氣管炎；囊腫性纖維化；咽喉炎；急性或慢性鼻炎。
依照本發(fā)明多種形式的粘液溶解劑是能夠降低粘液疏水性的試劑。如Absolom等，1986，J.Colloid Interface Sci 112599中所述，用于測(cè)量疏水性的一種經(jīng)確認(rèn)技術(shù)是在將一滴鹽水置于標(biāo)本表面上時(shí)測(cè)量活組織檢查標(biāo)本的接觸角?？梢允褂脺y(cè)角計(jì)來(lái)測(cè)量接觸角，測(cè)角計(jì)安裝了單色光源和用于對(duì)組織表面施加小體積鹽水的千分尺激活注射器。對(duì)組織表面施加小體積鹽水(5μl)。將視野中心調(diào)至與三相點(diǎn)一致，然后將一條叉絲調(diào)至與組織-流體界面一致。二者之間的角度就是接觸角，而且它可以由圍繞目鏡的刻度直接讀出。
粘液溶解劑的實(shí)例包括N-乙酰半胱氨酸、叔丁基半胱氨酸、半胱氨酸的脂肪酸衍生物、N-鳥嘌呤基-半胱氨酸、乙基半胱氨酸、萘索司坦、氨溴索、DNA酶(Dnase)、碘、Gesolin、2-巰基乙烷磺酸鈉、羧甲半胱氨酸和半胱甲酯、以及溴己新。優(yōu)選的是，粘液溶解劑是N-乙酰半胱氨酸。
因此，在一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中抑制粘液上皮的細(xì)菌定居的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的N-乙酰半胱氨酸和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在聯(lián)合N-乙酰半胱氨酸時(shí)能夠抑制細(xì)菌定居的成分。
依照本發(fā)明多種形式的初乳可以是由哺乳動(dòng)物分泌的任何初乳，包括人初乳、牛初乳、綿羊初乳、山羊初乳、豬初乳、或馬初乳。優(yōu)選的是，初乳是牛初乳。
可以通過(guò)本領(lǐng)域已知的合適方法采集初乳，諸如Davidson等，1989，Lancet 2709-712中所述。
優(yōu)選的是，初乳是通過(guò)用細(xì)菌(或由細(xì)菌衍生的抗原)連續(xù)免疫哺乳動(dòng)物而產(chǎn)生的超免疫初乳，其中所述細(xì)菌的定居或感染需要抑制、與細(xì)菌感染有關(guān)的炎癥或損傷需要減輕、或與細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況需要治療。用于生產(chǎn)超免疫初乳的合適方法正如Davidson等，1989，Lancet 2709-712中所述。
例如，為了抑制幽門螺桿菌定居或感染胃腸道，可以使用來(lái)自經(jīng)過(guò)幽門螺桿菌接種的母牛的超免疫初乳。
因此，在一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于抑制幽門螺桿菌定居胃腸道的方法，所述方法包括如下步驟施用有效量的粘液溶解劑和超免疫初乳。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于抑制幽門螺桿菌定居胃腸道的方法，所述方法包括如下步驟施用有效量的N-乙酰半胱氨酸和超免疫初乳。
依照本發(fā)明多種形式的超免疫乳可以是由哺乳動(dòng)物分泌的任何超免疫乳，包括人超免疫乳、牛超免疫乳、綿羊超免疫乳、山羊超免疫乳、豬超免疫乳、或馬超免疫乳。優(yōu)選的是，超免疫乳是牛超免疫乳。
應(yīng)當(dāng)理解，超免疫乳指由經(jīng)過(guò)相關(guān)細(xì)菌(或由細(xì)菌衍生的抗原)連續(xù)免疫的哺乳動(dòng)物分泌的乳，其中所述細(xì)菌的定居或感染需要抑制、與細(xì)菌感染有關(guān)的炎癥或損傷需要減輕、或與細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況需要治療。用于生產(chǎn)超免疫乳的合適方法正如Dayidson等，1989，Lancet 2709-712中所述。
例如，為了抑制幽門螺桿菌定居或感染胃腸道，可以使用來(lái)自經(jīng)過(guò)幽門螺桿菌接種的母牛的超免疫乳。
因此，在一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于抑制幽門螺桿菌定居胃腸道的方法，所述方法包括如下步驟施用有效量的粘液溶解劑和超免疫乳。
依照本發(fā)明多種形式的初乳和/或超免疫乳成分可以是由初乳、超免疫初乳、或超免疫乳衍生的在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠發(fā)揮抑制相關(guān)細(xì)菌定居或感染、減輕與相關(guān)細(xì)菌感染有關(guān)的炎癥或損傷、或治療與相關(guān)細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況的作用的一種或多種成分。應(yīng)當(dāng)理解，這種成分包括通過(guò)本發(fā)明已知方法由初乳、超免疫初乳、或超免疫乳衍生的任何級(jí)分或提取物，由初乳、超免疫初乳、或超免疫乳衍生的任何純化的或半純化的成分，或者是通過(guò)其它手段(包括重組DNA技術(shù))生成的初乳、超免疫初乳、或超免疫乳中通常存在的任何成分，或者是由初乳、超免疫初乳、或超免疫乳衍生的經(jīng)過(guò)進(jìn)一步處理或修飾(包括這些成分的水解)的任何成分。
優(yōu)選的是，初乳和/或超免疫乳成分是乳鐵蛋白。更優(yōu)選的是，所述成分指牛乳鐵蛋白。在這個(gè)方面，還發(fā)現(xiàn)乳鐵蛋白，即初乳和其它乳制品中的一種成分，在聯(lián)合粘液溶解劑N-乙酰半胱氨酸使用時(shí)顯示抑制粘液上皮幽門螺桿菌定居或感染的能力得到提高。
本發(fā)明多種形式中的初乳和/或超免疫乳成分還可以是一種或多種針對(duì)細(xì)菌的特異性或交叉反應(yīng)性抗體，包括IgG1、IgG2、IgA、IgM、或抗體。
因此，在一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中抑制粘液上皮的細(xì)菌定居的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和一種或多種針對(duì)定居粘液上皮的細(xì)菌的特異性或交叉反應(yīng)性抗體。
例如，在抑制幽門螺桿菌定居胃腸道的情況中，可以聯(lián)合粘液溶解劑施用一種或多種幽門螺桿菌特異性抗體，或者可以聯(lián)合粘液溶解劑施用一種或多種幽門螺桿菌交叉反應(yīng)性抗體。
在這個(gè)方面，一種或多種特異性或交叉反應(yīng)性抗體可以存在于其它化合物的混合物中，諸如存在于初乳、超免疫初乳、乳、或超免疫乳中?；蛘撸贵w可以是通過(guò)本領(lǐng)域已知方法諸如抗體親和純化由諸如血漿、初乳、超免疫初乳、乳、超免疫乳、卵黃、或超免疫卵黃等來(lái)源純化得到的充分純化形式。
可以通過(guò)本領(lǐng)域已知方法通過(guò)接種合適細(xì)菌或由細(xì)菌衍生的一種或多種抗原在人、動(dòng)物、或鳥中引發(fā)抗體。
將要在本發(fā)明多種形式中施用的粘液溶解劑的數(shù)量和形式?jīng)]有特別限制，只要它是通常展示有益效果的數(shù)量和形式。
將要施用的初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的數(shù)量也沒(méi)有特別限制，只要它是通常展示有益效果的數(shù)量和形式。
在這個(gè)方面，可以根據(jù)具體的粘液溶解劑和初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分、待抑制細(xì)菌定居或感染的程度、待減輕粘液上皮炎癥或損傷的程度、所定居或感染的組織或器官、待治療疾病或狀況的種類、受試者的年齡和體重、施用頻率、或存在的其它活性劑，適當(dāng)選擇粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的劑量。
粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分可以共施用，或者分開(kāi)施用(從而達(dá)到聯(lián)合作用的期望部位)，而且或是單獨(dú)使用或是聯(lián)合其它試劑以提高根除細(xì)菌的可能性。在用作附屬療法時(shí)，可能可以應(yīng)用較小劑量。
在本發(fā)明的多種形式中，粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分可以在適于產(chǎn)生期望效果的任何時(shí)間內(nèi)施用。例如，可以在定居發(fā)作前施用，從而預(yù)防定居?；蛘撸梢栽谝呀?jīng)發(fā)生或檢測(cè)到粘液上皮定居的過(guò)程中或其后施用。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中預(yù)防粘液上皮的細(xì)菌定居的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠預(yù)防細(xì)菌定居的成分。
在人或動(dòng)物系統(tǒng)中，粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分可以口服施用，或者通過(guò)任何其它合適手段，因此必須考慮粘液溶解劑和初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的通過(guò)時(shí)間。優(yōu)選的是，粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的施用是通過(guò)口服施用。
對(duì)于為了抑制胃腸道粘液上皮定居或感染而口服施用粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分而言，優(yōu)選的是，粘液溶解劑是N-乙酰半胱氨酸，而初乳是超免疫初乳。例如，為了抑制幽門螺桿菌定居胃腸道，粘液溶解劑優(yōu)選N-乙酰半胱氨酸，而初乳是來(lái)自經(jīng)過(guò)幽門螺桿菌或其抗原免疫的母牛的超免疫初乳。
在本發(fā)明的多種形式中，考慮到待施用粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分二者的具體物理和化學(xué)特征，粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的施用還可以包括一種或多種可接受添加劑的使用，包括可接受鹽、氨基酸、多肽、聚合物、溶劑、緩沖劑、賦形劑、和填充劑。
例如，粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分可以配制成食品添加劑、水溶液、油性制劑、脂肪乳劑、乳劑、凝膠等形式的多種制劑，而且這些制劑可以以含有常規(guī)無(wú)毒可接受載體的劑量配方或任何其它方便的劑量形式通過(guò)口服、吸附和吸收、局部、直腸、鼻、含服、或陰道施用。
在口服施用的情況中，可以以合適口服制劑的形式施用組合物(例如固體制劑，諸如片劑、膠囊、食品添加劑、顆粒、或粉劑；液體制劑，諸如奶制品、糖漿、乳劑、或懸浮液)。
含有粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的組合物還可以含有防腐劑、穩(wěn)定劑、分散劑、pH控制劑、或等滲劑。合適防腐劑的實(shí)例是甘油、丙二醇、酚、或苯甲醇。合適穩(wěn)定劑的實(shí)例是右旋糖苷、明膠、α-醋酸生育酚、或α-硫代甘油。合適分散劑的實(shí)例包括聚氧乙烯(20)、失水山梨糖醇單油酸酯(吐溫80)、失水山梨糖醇倍半油酸酯(Span 30)、聚氧乙烯(160)聚氧丙烯(30)乙二醇(Pluronic F68)、或聚氧乙烯氫化蓖麻油60。合適的pH控制劑的實(shí)例包括氫氯酸、氫氧化鈉等等。合適的等滲劑的實(shí)例是葡萄糖、D-山梨醇、或D-甘露醇。
在本發(fā)明的多種形式中，考慮到所用具體粘液溶解劑和初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的物理和化學(xué)特性，粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的施用還可以是含有可接受載體、稀釋劑、賦形劑、懸浮劑、潤(rùn)滑劑、佐劑、媒介、投遞系統(tǒng)、乳化劑、崩解劑、吸收劑、防腐劑、表面活性劑、著色劑、食用香料、或增甜劑的組合物的形式。
口服施用時(shí)，使用常規(guī)設(shè)備和本領(lǐng)域已知技術(shù)，常常將組合物配制成單位劑量形式，諸如液體(包括用于口服或局部施用的長(zhǎng)期保存液體配方、水性懸浮液、或溶液)、片劑、扁囊劑、粉劑、微粒、顆粒、咀嚼錠劑、食品添加劑、膠囊、或相似劑量形式。這些配方通常包含液體、固體、或半固體載體。例示性載體包括乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、淀粉、阿拉伯樹(shù)膠、磷酸鈣、礦物油、可可脂、可可油、藻酸鹽、黃芪膠、明膠、糖漿、甲基纖維素、聚氧乙烯山梨聚糖單月桂酸酯、羥基苯甲酸甲酯、羥基苯甲酸丙酯、滑石、硬脂酸鎂、諸如此類。
在以片劑施用組合物的情況中，可以通過(guò)將活性成分與任選包含的一種或多種輔助成分壓縮或注模來(lái)生產(chǎn)片劑。可以通過(guò)在合適機(jī)器中壓縮易流形式(諸如粉末或微粒)的活性成分，任選與粘合劑、潤(rùn)滑劑、惰性稀釋劑、表面活性劑、或分散劑混合，來(lái)制備壓制片劑?？梢酝ㄟ^(guò)在合適機(jī)器中將用惰性液體稀釋劑弄濕的粉狀活性成分與合適載體的混合物一起注模來(lái)生產(chǎn)模制片劑。
載體還可以包含少量添加劑，諸如提高溶解度、等滲性、和化學(xué)穩(wěn)定性的物質(zhì)，例如抗氧化劑、緩沖劑、和防腐劑。
在本發(fā)明的多種形式中，粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的施用還可以利用受控釋放技術(shù)。粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫初乳、超免疫乳(或任何上述各項(xiàng)的一種或多種成分)還可以作為持續(xù)釋放產(chǎn)品施用。為了進(jìn)一步提高持續(xù)釋放效果，可以與額外成分一起配制組合物，諸如植物油(例如大豆油、芝麻油、山茶油、蓖麻油、花生油、菜籽油)；中級(jí)脂肪酸甘油三酯；脂肪酸酯，諸如油酸乙酯；聚硅氧烷衍生物；或者，水溶性高分子量化合物，諸如透明質(zhì)酸或其鹽(重均分子量約80,000-2,000,000)、羧甲基纖維素鈉(重均分子量約20,000-400,000)、羥丙基纖維素(2％水溶液的粘性3-4,000cps)、atherocollagen(重均分子量約300,000)、聚乙二醇(重均分子量約400-20,000)、聚環(huán)氧乙烷(重均分子量約100,000-9,000,000)、羥丙基甲基纖維素(1％水溶性的粘性4-100,000cSt)、甲基纖維素(2％水溶液的粘性15-8,000cSt)、聚乙烯醇(粘性2-100cSt)、聚乙烯吡咯烷酮(重均分子量25,000-1,200,000)。
在本發(fā)明的多種形式中，粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的施用還可以包括其它試劑的施用，包括抗生素和酸抑制劑。
粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分抑制粘液上皮定居能力的測(cè)定可以通過(guò)本領(lǐng)域已知的合適方法得到確認(rèn)。例如，抑制定居的程度可以通過(guò)直接顯現(xiàn)暴露或不暴露于粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的具體粘液上皮樣品中的細(xì)菌數(shù)目來(lái)測(cè)定。在這種情況中，可以用用于檢測(cè)目的細(xì)菌的特異染色劑(例如幽門螺桿菌的姬姆薩染色)進(jìn)行染色來(lái)顯現(xiàn)細(xì)菌，例如如《Saunders氏實(shí)驗(yàn)室醫(yī)學(xué)和技術(shù)字典和百科全書》“Saunders Dictionary and Encyclopedia of LaboratoryMedicine and Technology”(Benington J.L)中所述。
或者，可以通過(guò)暴露或不暴露于粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的具體粘液上皮樣品中炎性細(xì)胞對(duì)粘液樣品的浸潤(rùn)程度來(lái)測(cè)定細(xì)菌定居，例如如《組織學(xué)課本和圖集》“Histology a Text and Atlas”(第三版；Ross，M.H.、Rommell，L.J.、Kaye，G.I.，1995，Williams and Wilkins，馬里蘭州，美國(guó))中所述。
用于測(cè)定粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分抑制粘液上皮定居能力的另一種方法是通過(guò)使用酶標(biāo)志物，諸如作為嗜中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)粘液上皮指標(biāo)的髓過(guò)氧化物酶，例如Krawisz，J.等，1984，Gastroenterology 871344-1350中所述?？梢酝ㄟ^(guò)本領(lǐng)域已知的合適方法獲得用于測(cè)試的粘液上皮樣品，包括粘液上皮的活組織檢查。
優(yōu)選的是，抑制定居的程度是治療后單位面積的粘液上皮中的平均細(xì)菌數(shù)目與未治療受試者的單位面積中的平均細(xì)菌數(shù)目相比降低了70％或更多。更優(yōu)選的是，抑制定居的程度是治療后單位面積的粘液上皮中的平均細(xì)菌數(shù)目與未治療受試者的單位面積中的平均細(xì)菌數(shù)目相比降低了85％或更多。最優(yōu)選的是，抑制定居的程度是治療后單位面積的粘液上皮中的平均細(xì)菌數(shù)目與未治療受試者的單位面積中的平均細(xì)菌數(shù)目相比降低了90％或更多。
還發(fā)現(xiàn)，乳鐵蛋白，即初乳和乳中的抗細(xì)菌成分，顯示抑制粘液上皮的細(xì)菌定居或感染的能力得到提高。例如，乳鐵蛋白在聯(lián)合粘液溶解劑N-乙酰半胱氨酸使用時(shí)顯示抑制幽門螺桿菌定居粘液上皮的能力得到提高。
因此，在一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中抑制粘液上皮的細(xì)菌定居的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和由乳制品衍生的抗細(xì)菌劑。
由乳制品衍生的抗細(xì)菌劑是通過(guò)本領(lǐng)域已知方法生成的乳、超免疫乳、初乳、超免疫初乳、或任何其它乳衍生產(chǎn)品中具有抗細(xì)菌活性(或是殺菌或是抑菌)的任何成分。這包括由乳、超免疫乳、初乳、或超免疫初乳衍生的一種或多種級(jí)分或提取物，或者是乳、超免疫乳、初乳、或超免疫初乳中通常存在的組合物中具有抗細(xì)菌活性的任何成分，包括由乳、超免疫乳、初乳、或超免疫初乳充分純化得到的產(chǎn)品，或是通過(guò)重組DNA技術(shù)生成的產(chǎn)品。
用于測(cè)定由乳衍生的試劑的抗細(xì)菌特性的合適方法正如Korhonen等，1995，Journal of Applied Bacteriology 78655-662中所述。
例如，在本發(fā)明的多種形式中，由乳制品衍生的抗細(xì)菌劑可以是乳鐵蛋白、乳過(guò)氧化物酶、溶菌酶、或免疫球蛋白，包括IgG1、IgG2、IgA、IgM，或者是乳制品中存在的抗細(xì)菌肽或抗細(xì)菌糖。
應(yīng)當(dāng)理解，在本發(fā)明的多種形式中，抗細(xì)菌劑還可以衍生自并非由乳衍生的產(chǎn)品。例如，抗細(xì)菌劑可以是由超免疫卵黃衍生的IgY抗體(IgG1的等同物)。
優(yōu)選的是，由乳制品衍生的抗細(xì)菌劑指乳鐵蛋白。乳鐵蛋白可以是牛乳鐵蛋白、綿羊乳鐵蛋白、山羊乳鐵蛋白、豬乳鐵蛋白、馬乳鐵蛋白、或人乳鐵蛋白。最優(yōu)選的是，乳鐵蛋白是牛乳鐵蛋白。乳鐵蛋白可以是通過(guò)本領(lǐng)域已知的合適方法由初乳或乳分離得到的半純化或充分純化的形式?；蛘撸殍F蛋白可以是通過(guò)在合適表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)乳鐵蛋白基因而生成的重組乳鐵蛋白。
因此，在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中抑制粘液上皮的細(xì)菌定居的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和乳鐵蛋白。
在本發(fā)明的多種形式中，乳鐵蛋白還可以進(jìn)行進(jìn)一步處理以提高其抑制粘液上皮的細(xì)菌定居或感染的活性。例如，可以將乳鐵蛋白進(jìn)行蛋白水解消化，從而生成展示提高的抑制定居活性的蛋白質(zhì)片段或多肽。為了生產(chǎn)這種片段，可以使用蛋白酶諸如胃蛋白酶在酸性條件下消化乳鐵蛋白?；蛘?，可以通過(guò)酸性pH的熱滅活來(lái)處理乳鐵蛋白，或者可以通過(guò)重組方法生成特定的乳鐵蛋白片段。
在這個(gè)方面，還發(fā)現(xiàn)通過(guò)牛乳鐵蛋白的胃蛋白酶消化或酸性pH熱滅活生成的水解牛乳鐵蛋白在聯(lián)合粘液溶解劑諸如N-乙酰半胱氨酸使用時(shí)顯示提高的抑制粘液上皮幽門螺桿菌定居或感染的活性。
因此，在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中抑制粘液上皮的細(xì)菌定居的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和水解乳鐵蛋白。
應(yīng)當(dāng)理解，關(guān)于上文所述粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的施用的相同考慮還將應(yīng)用于粘液溶解劑和由初乳/乳衍生的抗細(xì)菌劑的施用。
本發(fā)明這種形式的方法還可包括其它試劑的施用，包括抗生素和酸抑制劑。
優(yōu)選的是，本發(fā)明這種形式的方法還包括抗生素的施用。合適抗生素的實(shí)例是阿莫西林。
因此，在另一種形式中，本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中抑制粘液上皮的細(xì)菌定居的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑、抗生素、和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠抑制細(xì)菌定居的成分。
在這個(gè)方面，本發(fā)明這種形式的方法還降低了使用抗生素療法時(shí)形成抗生素抗性的可能性。
因此，本發(fā)明還提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中減輕細(xì)菌形成抗生素抗性的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分。
本發(fā)明還提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中減輕粘液上皮細(xì)菌感染的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠減輕細(xì)菌感染的成分。
粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分減輕粘液上皮感染能力的測(cè)定可以通過(guò)本領(lǐng)域已知的合適方法得到確認(rèn)。例如，減輕感染的程度可以通過(guò)直接顯現(xiàn)暴露或不暴露于粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的具體粘液上皮樣品中的細(xì)菌數(shù)目來(lái)測(cè)定。在這種情況中，可以用用于檢測(cè)目的細(xì)菌的特異染色劑(例如幽門螺桿菌的姬姆薩染色)進(jìn)行染色來(lái)顯現(xiàn)細(xì)菌，正如《Saunders氏實(shí)驗(yàn)室醫(yī)學(xué)和技術(shù)字典和百科全書》“Saunders Dictionary and Encyclopedia of Laboratory Medicineand Technology”(Benington J.L)中所述。
或者，細(xì)菌感染可以通過(guò)暴露或不暴露于粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的具體粘液上皮樣品中炎性細(xì)胞對(duì)粘液樣品的浸潤(rùn)程度來(lái)測(cè)定，例如如《組織學(xué)課本和圖集》“Histology a Text and Atlas”(第三版；Ross，M.H.、Rommell，L.J.、Kaye，G.I.，1995，Williams and Wilkins，馬里蘭州，美國(guó))中所述。
用于測(cè)定粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分減輕粘液上皮感染能力的另一種方法是通過(guò)使用酶標(biāo)志物，諸如作為嗜中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)粘液上皮指標(biāo)的髓過(guò)氧化物酶，例如Krawisz，J.等，1984，Gastroenterology 871344-1350中所述。可以通過(guò)本領(lǐng)域已知的合適方法獲得用于測(cè)試的粘液上皮樣品，包括粘液上皮的活組織檢查。
優(yōu)選的是，減輕感染的程度是治療后單位面積的粘液上皮中的平均細(xì)菌數(shù)目與未治療受試者的單位面積中的平均細(xì)菌數(shù)目相比降低了50％或更多。更優(yōu)選的是，減輕感染的程度是治療后單位面積的粘液上皮中的平均細(xì)菌數(shù)目與未治療受試者的單位面積中的平均細(xì)菌數(shù)目相比降低了60％或更多。最優(yōu)選的是，減輕感染的程度是治療后單位面積的粘液上皮中的平均細(xì)菌數(shù)目與未治療受試者的單位面積中的平均細(xì)菌數(shù)目相比降低了80％或更多。
在一種特別優(yōu)選的形式中，本發(fā)明還提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中減輕粘液上皮的細(xì)菌感染的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的N-乙酰半胱氨酸和超免疫初乳。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明還提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中減輕粘液上皮的細(xì)菌感染的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和由乳衍生的抗細(xì)菌劑。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中減輕粘液上皮細(xì)菌感染的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和乳鐵蛋白。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中減輕粘液上皮的細(xì)菌感染的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和水解乳鐵蛋白。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中減輕粘液上皮細(xì)菌感染的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和一種或多種針對(duì)感染粘液上皮的細(xì)菌的特異性或交叉反應(yīng)性抗體。
如上所述，在本發(fā)明的多種形式中，粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分可以在適于產(chǎn)生期望效果的任何時(shí)間內(nèi)施用。例如，可以在粘液上皮感染發(fā)作前施用?；蛘撸梢栽谝呀?jīng)發(fā)生或檢測(cè)到粘液上皮感染的過(guò)程中或其后施用。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中預(yù)防粘液上皮的細(xì)菌感染的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠預(yù)防細(xì)菌感染的成分。
本發(fā)明這種形式的方法還可以包括其它試劑的施用，包括抗生素和酸抑制劑。
優(yōu)選的是，本發(fā)明這種形式的方法還包括抗生素的施用。合適抗生素的實(shí)例是阿莫西林。
因此，在另一種形式中，本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中減輕粘液上皮的細(xì)菌感染的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑、抗生素、和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠抑制細(xì)菌感染的成分。
本發(fā)明還提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中減輕與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮炎癥的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠減輕與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮炎癥的成分。
粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分減輕與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮炎癥能力的測(cè)定可以通過(guò)本領(lǐng)域已知的合適方法得到確認(rèn)。例如，炎癥的程度可以通過(guò)暴露或不暴露于粘液溶解劑和卵或卵成分的具體粘液上皮樣品中炎性細(xì)胞對(duì)粘液樣品的浸潤(rùn)程度來(lái)測(cè)定，正如《組織學(xué)課本和圖集》“Histology a Textand Atlas”(第三版；Ross，M.H.、Rommell，L.J.、Kaye，G.I.，1995，Williams and Wilkins，馬里蘭州，美國(guó))中所述。
或者，炎癥的程度可以通過(guò)使用酶標(biāo)志物來(lái)測(cè)定，諸如作為嗜中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)粘液上皮指標(biāo)的髓過(guò)氧化物酶，例如Krawisz，J.等，1984，Gastroenterology 871344-1350中所述?？梢酝ㄟ^(guò)本領(lǐng)域已知的合適方法獲得用于測(cè)試的粘液上皮樣品，包括粘液上皮的活組織檢查。
優(yōu)選的是，減輕炎癥的程度是治療后粘液上皮組織樣品中的髓過(guò)氧化物酶活性水平與未治療受試者的組織樣品中的髓過(guò)氧化物酶活性相比降低了50％或更多。更優(yōu)選的是，減輕炎癥的程度是治療后粘液上皮組織樣品中的髓過(guò)氧化物酶活性水平與未治療受試者的組織樣品中的髓過(guò)氧化物酶活性相比降低了65％或更多。
在本發(fā)明的多種形式中，與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮炎癥可以是任何粘液上皮炎癥，所述粘液上皮是一種或多種下列器官或組織的一部分胃，包括胃的賁門、胃底、胃體、胃竇、和幽門；十二指腸；回腸；小腸；大腸；結(jié)腸；腸；直腸；食道；口；舌；咽；泌尿生殖道；眼；以及呼吸道，包括鼻腔、口腔、喉、氣管、支氣管(包括細(xì)支氣管和肺泡)、和肺。優(yōu)選的是，與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮炎癥是動(dòng)物或人的粘液上皮炎癥。最優(yōu)選的是，粘液上皮炎癥是人的粘液上皮炎癥。
優(yōu)選的是，與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮炎癥是與下列疾病或狀況有關(guān)的粘液上皮炎癥胃部炎癥；胃或十二指腸潰瘍；非潰瘍性消化不良；與白細(xì)胞浸潤(rùn)有關(guān)的胃部狀況；尿道感染；鏈球菌性咽喉炎；傳染性心內(nèi)膜炎；細(xì)菌性肺炎；百日咳；齦炎；急性或慢性支氣管炎；(細(xì))支氣管擴(kuò)張；哮喘性支氣管炎；支氣管哮喘；細(xì)支氣管炎；囊腫性纖維化；咽喉炎；急性或慢性鼻炎。優(yōu)選的是，與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮炎癥是與下列疾病或狀況有關(guān)的粘液上皮炎癥胃部炎癥、胃或十二指腸潰瘍、非潰瘍性消化不良、或與淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)有關(guān)的胃部狀況。
在一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明還提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中減輕與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮炎癥的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和由乳制品衍生的抗細(xì)菌劑。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中減輕與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮炎癥的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和乳鐵蛋白。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中減輕與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮炎癥的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和水解乳鐵蛋白。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中減輕與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮炎癥的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和一種或多種針對(duì)感染粘液上皮的細(xì)菌的特異性或交叉反應(yīng)性抗體。
應(yīng)當(dāng)理解，關(guān)于上文所述粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分在抑制粘液上皮的細(xì)菌定居或感染方面的施用的相同考慮還將應(yīng)用于粘液溶解劑和由乳制品衍生的抗細(xì)菌劑、粘液溶解劑和乳鐵蛋白、或粘液溶解劑和水解乳鐵蛋白在減輕與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮炎癥方面的施用。
如上所述，在本發(fā)明的多種形式中，粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分可以在適于產(chǎn)生期望效果的任何時(shí)間內(nèi)施用。例如，可以在與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮炎癥發(fā)作前施用?；蛘?，可以在已經(jīng)發(fā)生或檢測(cè)到與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮炎癥的發(fā)作的過(guò)程中或其后施用。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中預(yù)防與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮炎癥的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠預(yù)防與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮炎癥的成分。
本發(fā)明這種形式的方法還可以包括其它試劑的施用，包括抗生素和酸抑制劑。
優(yōu)選的是，本發(fā)明這種形式的方法還包括抗生素的施用。合適抗生素的實(shí)例是阿莫西林。
因此，在另一種形式中，本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中減輕與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮炎癥的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑、抗生素、和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠減輕與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮炎癥的成分。
在這個(gè)方面，本發(fā)明這種形式的方法還降低了使用抗生素療法時(shí)形成抗生素抗性的可能性。
本發(fā)明還提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中減輕與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮損傷的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠減輕與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮損傷的成分。
粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分減輕與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮損傷能力的測(cè)定可以通過(guò)本領(lǐng)域已知的合適方法來(lái)確認(rèn)，例如《組織學(xué)課本和圖集》“Histology a Textand Atlas”(第三版；Ross，M.H.、Rommell，L.J.、Kaye，G.I.，1995，Williams and Wilkins，馬里蘭州，美國(guó))中所述。例如，損傷的程度可以通過(guò)暴露或不暴露于粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的組織樣品的組織病理學(xué)檢查來(lái)測(cè)定。
在本發(fā)明的多種形式中，與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮損傷可以是任何粘液上皮損傷，所述粘液上皮是一種或多種下列器官或組織的一部分胃腸道；胃，包括胃的賁門、胃底、胃體、胃竇、和幽門；十二指腸；回腸；小腸；大腸；結(jié)腸；腸；直腸；食道；口；舌；咽；泌尿生殖道；眼；以及呼吸道，包括鼻腔、口腔、喉、氣管、支氣管(包括細(xì)支氣管和肺泡)、和肺。優(yōu)選的是，與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮損傷是動(dòng)物或人的粘液上皮損傷。最優(yōu)選的是，粘液上皮損傷是人的粘液上皮損傷。
優(yōu)選的是，與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮損傷是與下列疾病或狀況有關(guān)的粘液上皮損傷胃部炎癥；胃或十二指腸潰瘍；非潰瘍性消化不良；與白細(xì)胞浸潤(rùn)有關(guān)的胃部狀況；尿道感染；鏈球菌性咽喉炎；傳染性心內(nèi)膜炎；細(xì)菌性肺炎；百日咳；齦炎；急性或慢性支氣管炎；(細(xì))支氣管擴(kuò)張；哮喘性支氣管炎；支氣管哮喘；細(xì)支氣管炎；囊腫性纖維化；咽喉炎；急性或慢性鼻炎。優(yōu)選的是，與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮損傷是與下列疾病或狀況有關(guān)的粘液上皮損傷胃部炎癥、胃或十二指腸潰瘍、非潰瘍性消化不良、或與淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)有關(guān)的胃部狀況。
在一種特別優(yōu)選的形式中，本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中減輕與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮損傷的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的N-乙酰半胱氨酸和超免疫初乳。
在一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明還提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中減輕與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮損傷的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和由乳制品衍生的抗細(xì)菌劑。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中減輕與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮損傷的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和乳鐵蛋白。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中減輕與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮損傷的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和水解乳鐵蛋白。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中減輕與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮損傷的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和一種或多種針對(duì)感染粘液上皮的細(xì)菌的特異性或交叉反應(yīng)性抗體。
應(yīng)當(dāng)理解，關(guān)于上文所述粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分在抑制粘液上皮的細(xì)菌定居或感染方面的施用的相同考慮也將應(yīng)用于粘液溶解劑和由乳制品衍生的抗細(xì)菌劑、粘液溶解劑和乳鐵蛋白、或粘液溶解劑和水解乳鐵蛋白在減輕與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮損傷方面的施用。
如上所述，在本發(fā)明的多種形式中，粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分可以在適于產(chǎn)生期望效果的任何時(shí)間內(nèi)施用。例如，可以在與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮損傷發(fā)作前施用?；蛘?，可以在已經(jīng)發(fā)生或檢測(cè)到與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮損傷的發(fā)作的過(guò)程中或其后施用。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中預(yù)防與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮損傷的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠預(yù)防與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮損傷的成分。
本發(fā)明這種形式的方法還可以包括其它試劑的施用，包括抗生素和酸抑制劑。
優(yōu)選的是，本發(fā)明這種形式的方法還包括抗生素的施用。合適抗生素的實(shí)例是阿莫西林。
因此，在另一種形式中，本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中減輕與粘液上皮的細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮損傷的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑、抗生素、和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠減輕與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮損傷的成分。
在這個(gè)方面，本發(fā)明這種形式的方法還降低了使用抗生素療法時(shí)形成抗生素抗性的可能性。
本發(fā)明還提供了用于在受試者中治療與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)受試者施用有效量的粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠治療與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況的成分。
在本發(fā)明的多種形式中，與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況可以是任何與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況，所述粘液上皮是一種或多種下列器官或組織的一部分胃腸道；胃，包括胃的賁門、胃底、胃體、胃竇、和幽門；十二指腸；回腸；小腸；大腸；結(jié)腸；腸；直腸；食道；口；舌；咽；泌尿生殖道；眼；以及呼吸道，包括鼻腔、喉、氣管、支氣管(包括細(xì)支氣管和肺泡)、和肺。優(yōu)選的是，與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況是與動(dòng)物或人的粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況。最優(yōu)選的是，與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況是與人的粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況。
優(yōu)選的是，與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況是下列疾病或狀況之一胃部炎癥；胃或十二指腸潰瘍；非潰瘍性消化不良；與白細(xì)胞浸潤(rùn)有關(guān)的胃部狀況；尿道感染；鏈球菌性咽喉炎；傳染性心內(nèi)膜炎；細(xì)菌性肺炎；百日咳；齦炎；急性或慢性支氣管炎；(細(xì))支氣管擴(kuò)張；哮喘性支氣管炎；支氣管哮喘；細(xì)支氣管炎；囊腫性纖維化；咽喉炎；急性或慢性鼻炎。最優(yōu)選的是，與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況是胃部炎癥、胃或十二指腸潰瘍、非潰瘍性消化不良、或與淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)有關(guān)的胃部狀況。
在本發(fā)明的多種形式中，受試者可以是易受與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況影響或患有與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況的任何動(dòng)物或人受試者。最優(yōu)選的是，生物學(xué)系統(tǒng)是正在遭受與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況的人受試者。
在一種特別優(yōu)選的形式中，本發(fā)明提供了用于在受試者中治療與粘液上皮的細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)受試者施用有效量的N-乙酰半胱氨酸和超免疫初乳。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明還提供了用于在受試者中治療與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)受試者施用有效量的粘液溶解劑和由乳衍生的抗細(xì)菌劑。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于在受試者中治療與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)受試者施用有效量的粘液溶解劑和乳鐵蛋白。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于在受試者中治療與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)受試者施用有效量的粘液溶解劑和水解乳鐵蛋白。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于在受試者中治療與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)受試者施用有效量的粘液溶解劑和一種或多種針對(duì)感染粘液上皮的細(xì)菌的特異性或交叉反應(yīng)性抗體。
應(yīng)當(dāng)理解，關(guān)于上文所述粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分在抑制粘液上皮的細(xì)菌定居或感染方面的施用的相同考慮還將應(yīng)用于用于治療與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)疾病或狀況的施用。
如上所述，在本發(fā)明的多種形式中，粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分可以在適于產(chǎn)生期望效果的任何時(shí)間內(nèi)施用。例如，可以在與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況發(fā)作前施用?；蛘撸梢栽谝呀?jīng)發(fā)生或檢測(cè)到與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況的發(fā)作的過(guò)程中或其后施用。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于在受試者中預(yù)防與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)受試者施用有效量的粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠預(yù)防與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況的成分。
在另一種形式中，本發(fā)明提供了有效量的粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分用于制備治療與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況的藥物的用途。
本發(fā)明這種形式的方法還可以包括其它試劑的施用，包括抗生素和酸抑制劑。
優(yōu)選的是，本發(fā)明這種形式的方法還包括抗生素的施用。合適抗生素的實(shí)例是阿莫西林。
因此，在另一種形式中，本發(fā)明提供了用于在受試者中預(yù)防和/或治療與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑、抗生素、和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠預(yù)防和/或治療與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病的成分。
在這個(gè)方面，本發(fā)明這種形式的方法還降低了使用抗生素療法時(shí)形成抗生素抗性的可能性。
本發(fā)明還提供了包含粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/超免疫乳成分的組合物。
將要在組合物中使用的粘液溶解劑的數(shù)量沒(méi)有特別限制，只要它是在對(duì)受試者施用組合物時(shí)通常將展示治療性效果的數(shù)量。
將要在組合物中使用的一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的數(shù)量也沒(méi)有特別限制，只要它是在對(duì)受試者施用組合物時(shí)通常將展示有益效果的數(shù)量。
在這個(gè)方面，可以根據(jù)所使用的具體粘液溶解劑和初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分、待抑制細(xì)菌定居或感染的程度、待減輕粘液上皮炎癥的程度、所定居或感染的組織或器官、待治療疾病或狀況的種類、受試者的年齡和體重、施用頻率、和存在的其它活性劑，適當(dāng)選擇組合物中使用的粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的劑量。
粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分可以在單一組合物中共施用，或者，作為分開(kāi)的組合物施用，從而在期望的作用部位發(fā)揮聯(lián)合作用。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于抑制粘液上皮的細(xì)菌定居和/或感染的組合物，所述組合物包含粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中能夠抑制粘液上皮的細(xì)菌定居和/或感染的成分。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于治療與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況的組合物，所述組合物包含粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中能夠治療與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病的成分。
對(duì)于適于為了抑制和/或預(yù)防胃腸道粘液上皮定居或感染(或治療與胃腸道細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況)而施用粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的組合物而言，優(yōu)選的是，組合物中的粘液溶解劑是N-乙酰半胱氨酸，而初乳是超免疫初乳。例如，為了抑制幽門螺桿菌定居胃腸道，組合物優(yōu)選包含N-乙酰半胱氨酸和來(lái)自經(jīng)過(guò)幽門螺桿菌免疫的母牛的超免疫初乳。
考慮到待施用粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的具體物理和化學(xué)特征，組合物還可以包含一種或多種可接受添加劑，包括鹽、氨基酸、多肽、聚合物、溶劑、緩沖劑、賦形劑、和填充劑。
例如，粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分可以配制成例如水溶液、油性制劑、脂肪乳劑、乳劑、凝膠等形式的多種制劑，而且這些制劑可以通過(guò)口服、吸附、吸收、局部、直腸、鼻、含服、陰道、或任何其它方便的劑量形式施用。
在口服施用的情況中，組合物可以是合適口服制劑的形式，包括液體制劑，諸如奶制品、糖漿、乳劑、或懸浮液，或是固體制劑，諸如片劑、膠囊、顆粒、或粉劑。
含有粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的組合物還可以含有防腐劑、穩(wěn)定劑、分散劑、pH控制劑、或等滲劑。合適防腐劑的實(shí)例是甘油、丙二醇、酚、或苯甲醇。合適穩(wěn)定劑的實(shí)例是右旋糖苷、明膠、α-醋酸生育酚、或α-硫代甘油。合適分散劑的實(shí)例包括聚氧乙烯(20)、失水山梨糖醇單油酸酯(吐溫80)、失水山梨糖醇倍半油酸酯(Span 30)、聚氧乙烯(160)聚氧丙烯(30)乙二醇(Pluronic F68)、或聚氧乙烯氫化蓖麻油60。合適的pH控制劑的實(shí)例包括氫氯酸、氫氧化鈉等等。合適等滲劑的實(shí)例是葡萄糖、D-山梨醇、或D-甘露醇。
考慮到所用具體粘液溶解劑和初乳形式的物理和化學(xué)特性，組合物還包含可接受載體、稀釋劑、賦形劑、懸浮劑、潤(rùn)滑劑、佐劑、媒介、投遞系統(tǒng)、乳化劑、崩解劑、吸收劑、防腐劑、表面活性劑、著色劑、食用香料、或增甜劑。
口服施用時(shí)，使用常規(guī)設(shè)備和本領(lǐng)域已知技術(shù)，常常將組合物配制成單位劑量形式，諸如液體(包括用于口服或局部施用的長(zhǎng)期保存液體配方、水性懸浮液、或溶液)、片劑、扁囊劑、粉劑、微粒、顆粒、咀嚼錠劑、食品添加劑、膠囊、或相似劑量形式。這些配方通常包含液體、固體、或半固體載體。例示性載體包括乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、淀粉、阿拉伯樹(shù)膠、磷酸鈣、礦物油、可可脂、可可油、藻酸鹽、黃芪膠、明膠、糖漿、甲基纖維素、聚氧乙烯山梨聚糖單月桂酸酯、羥基苯甲酸甲酯、羥基苯甲酸丙酯、滑石、硬脂酸鎂、諸如此類。
在以片劑施用的情況中，可以通過(guò)將活性成分與任選的一種或多種輔助成分壓縮或注模來(lái)生產(chǎn)片劑。可以通過(guò)在合適機(jī)器中壓縮易流形式(諸如粉末或微粒)的活性成分，任選與粘合劑、潤(rùn)滑劑、惰性稀釋劑、表面活性劑、或分散劑混合，來(lái)制備壓制片劑。可以通過(guò)在合適機(jī)器中將用惰性液體稀釋劑弄濕的粉狀活性成分與合適載體的混合物一起注模來(lái)生產(chǎn)模制片劑。
載體還可以包含少量添加劑，諸如提高溶解度、等滲性、和化學(xué)穩(wěn)定性的物質(zhì)，例如抗氧化劑、緩沖劑、和防腐劑。
組合物還可以包含容許受控或持續(xù)釋放粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的試劑。例如，關(guān)于試劑的持續(xù)釋放，可以與額外成分一起配制組合物，諸如植物油(例如大豆油、芝麻油、山茶油、蓖麻油、花生油、菜籽油)；中級(jí)脂肪酸甘油三酯；脂肪酸酯，諸如油酸乙酯；聚硅氧烷衍生物；或者，水溶性高分子量化合物，諸如透明質(zhì)酸或其鹽(重均分子量約80,000-2,000,000)、羧甲基纖維素鈉(重均分子量約20,000-400,000)、羥丙基纖維素(2％水溶液的粘性3-4,000cps)、atherocollagen(重均分子量約300,000)、聚乙二醇(重均分子量約400-20,000)、聚環(huán)氧乙烷(加權(quán)平均分子量約100,000-9,000,000)、羥丙基甲基纖維素(1％水溶性的粘性4-100,000cSt)、甲基纖維素(2％水溶液的粘性15-8,000cSt)、聚乙烯醇(粘性2-100cSt)、聚乙烯吡咯烷酮(重均分子量25,000-1,200,000)。
或者，組合物可以將粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分摻入疏水性聚合物基質(zhì)，用于在一段時(shí)間里受控釋放。然后可以將組合物注模成固體形式或外用貼片，適于在延長(zhǎng)的一段時(shí)間里提供有效濃度的粘液溶解劑和初乳而無(wú)需頻繁重復(fù)給藥。這種受控釋放薄膜在本領(lǐng)域是眾所周知的?？梢允褂玫那页３Ｓ糜诖四康牡木酆衔锏钠渌鼘?shí)例包括可以外用或內(nèi)用的不可降解的乙烯-乙酸乙烯共聚物和可降解的乳酸-乙醇酸共聚物。某些水凝膠，諸如聚羥基甲基丙烯酸乙酯或聚乙烯醇，也是有用的，但是用于比諸如上文所述其它聚合物釋放系統(tǒng)短的釋放周期。
載體還可以是固體生物可降解聚合物或具有合適時(shí)間釋放特征和釋放動(dòng)力學(xué)的生物可降解聚合物的混合物。然后可以將組合物注模成固體植物物，適合用于在延長(zhǎng)的一段時(shí)間里提供有效濃度的粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分而無(wú)需頻繁重復(fù)給藥?？梢砸员绢I(lǐng)域普通技術(shù)人員知道的任何合適方式將粘液溶解劑和/或一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分摻入生物可降解聚合物或聚合物混合物，并且可以與生物可降解聚合物形成均勻基質(zhì)，或者可以以某種方式封裝到聚合物中，或者可以注模成固體植入物。
依照本發(fā)明的組合物還可以包含其它試劑，包括抗生素和酸抑制劑。
優(yōu)選的是，組合物還包含抗生素的施用。合適抗生素的實(shí)例是阿奠西林。
在一種特別優(yōu)選的形式中，本發(fā)明提供了包含N-乙酰半胱氨酸和超免疫初乳的組合物。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明還提供了包含粘液溶解劑和由乳制品衍生的抗細(xì)菌劑的組合物。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于抑制粘液上皮的細(xì)菌定居和/或感染的組合物，所述組合物包含粘液溶解劑和由乳制品衍生的抗細(xì)菌劑。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于治療與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況的組合物，所述組合物包含粘液溶解劑和由乳制品衍生的抗細(xì)菌劑。
組合物中由乳制品衍生的抗細(xì)菌劑可以是由乳、初乳、超免疫初乳、或超免疫乳分離的任何成分或提取物，或者是乳、初乳、超免疫初乳、或超免疫初乳中通常存在的具有抗細(xì)菌活性的任何成分。這包括由乳、初乳、超免疫初乳、或超免疫初乳衍生的一種或多種級(jí)分或提取物，或者是通過(guò)本領(lǐng)域已知方法生產(chǎn)的乳、初乳、超免疫初乳、或超免疫初乳中通常存在的具有抗細(xì)菌活性的任何成分(例如充分純化得到的產(chǎn)品或通過(guò)重組DNA技術(shù)生產(chǎn)的通常存在的蛋白質(zhì))。
優(yōu)選的是，組合物中由乳制品衍生的抗細(xì)菌劑是乳鐵蛋白、乳過(guò)氧化物酶、溶菌酶、或免疫球蛋白，包括IgG1、IgG2、IgA、IgM，或者是乳制品中存在的抗細(xì)菌肽或抗細(xì)菌糖。更優(yōu)選的是，組合物中由乳制品衍生的抗細(xì)菌劑是乳鐵蛋白。更優(yōu)選的是，組合物中的乳鐵蛋白是牛乳鐵蛋白、綿羊乳鐵蛋白、豬乳鐵蛋白、馬乳鐵蛋白、或人乳鐵蛋白。最優(yōu)選的是，組合物中的乳鐵蛋白是牛乳鐵蛋白。組合物中的乳鐵蛋白可以是由乳制品分離得到的充分純化的形式，或者，是通過(guò)在合適表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)乳鐵蛋白基因而生成的重組乳鐵蛋白。
因此，在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明還提供了包含粘液溶解劑和乳鐵蛋白的組合物。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于抑制粘液上皮的細(xì)菌定居和/或感染的組合物，所述組合物包含粘液溶解劑和乳鐵蛋白。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于治療與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況的組合物，所述組合物包含粘液溶解劑和乳鐵蛋白。
在包含乳鐵蛋白的組合物用于抑制和/或預(yù)防粘液上皮幽門螺桿菌定居和/或感染、或用于治療和/或預(yù)防與粘液上皮幽門螺桿菌感染有關(guān)的疾病或狀況的情況中，組合物中存在的粘液溶解劑優(yōu)選是N-乙酰半胱氨酸。
組合物中存在的乳鐵蛋白可以是經(jīng)過(guò)進(jìn)一步處理以提高其抑制粘液上皮的細(xì)菌定居或感染活性的乳鐵蛋白。例如，可以將乳鐵蛋白進(jìn)行蛋白水解消化，從而生成在抑制定居方面展示提高的活性的蛋白質(zhì)片段或多肽。為了生產(chǎn)這種片段，可以使用蛋白酶諸如胃蛋白酶在酸性條件下消化乳鐵蛋白，或者通過(guò)本領(lǐng)域已知方法進(jìn)行酸性pH的熱滅活?；蛘?，可以通過(guò)重組方法生成特定的乳鐵蛋白片段。
因此，在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明還提供了包含粘液溶解劑和水解乳鐵蛋白的組合物。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于抑制粘液上皮的細(xì)菌定居和/或感染的組合物，所述組合物包含粘液溶解劑和水解乳鐵蛋白。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于治療與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況的組合物，所述組合物包括粘液溶解劑和水解乳鐵蛋白。
在包含乳鐵蛋白的組合物用于抑制和/或預(yù)防粘液上皮幽門螺桿菌定居和/或感染、或用于治療和/或預(yù)防與粘液上皮幽門螺桿菌感染有關(guān)的疾病或狀況的情況中，組合物中存在的粘液溶解劑優(yōu)選是N-乙酰半胱氨酸。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于抑制粘液上皮的細(xì)菌定居和/或感染的組合物，所述組合物包含粘液溶解劑和一種或多種針對(duì)定居和/或感染粘液上皮的細(xì)菌的特異性或交叉反應(yīng)性抗體。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于治療與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況的組合物，所述組合物包含粘液溶解劑和一種或多種針對(duì)感染粘液上皮的細(xì)菌的特異性或交叉反應(yīng)性抗體。
在包含一種或多種特異性或交叉反應(yīng)性抗體的組合物用于抑制粘液上皮幽門螺桿菌定居和/或感染、或用于治療與粘液上皮幽門螺桿菌感染有關(guān)的疾病或狀況的情況中，粘液溶解劑優(yōu)選是N-乙酰半胱氨酸。
本發(fā)明還提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中抑制粘液上皮的細(xì)菌定居的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和卵或卵中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠抑制細(xì)菌定居的成分。
優(yōu)選的是，卵是通過(guò)用細(xì)菌(或由細(xì)菌衍生的抗原)連續(xù)免疫鳥類而產(chǎn)生的超免疫卵，其中所述細(xì)菌的定居或感染需要抑制、與細(xì)菌感染有關(guān)的炎癥或損傷需要減輕、或與細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況需要治療。
例如，為了抑制幽門螺桿菌定居或感染胃腸道，可以使用來(lái)自經(jīng)過(guò)幽門螺桿菌接種的母雞的超免疫卵。
因此，在一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于抑制幽門螺桿菌定居胃腸道的方法，所述方法包括如下步驟施用有效量的粘液溶解劑和超免疫卵或超免疫卵成分。
在本發(fā)明的多種形式中，卵成分可以是由卵衍生的能夠在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)發(fā)揮抑制相關(guān)細(xì)菌定居或感染、減輕與相關(guān)細(xì)菌感染有關(guān)的炎癥或損傷、或治療與相關(guān)細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況的作用的一種或多種成分。應(yīng)當(dāng)理解，這種成分包括由卵衍生的任何級(jí)分或提取物，包括卵黃?？梢酝ㄟ^(guò)本領(lǐng)域已知方法生產(chǎn)卵成分，包括重組DNA技術(shù)，或者進(jìn)一步處理或修飾由卵衍生的任何成分。
優(yōu)選的是，卵成分是卵黃或一種或多種來(lái)自卵或卵黃的針對(duì)細(xì)菌的特異性或交叉反應(yīng)性抗體，包括IgY抗體。
因此，在一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中抑制粘液上皮的細(xì)菌定居的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和一種或多種針對(duì)定居粘液上皮的細(xì)菌的特異性或交叉反應(yīng)性IgY抗體。
例如，在抑制幽門螺桿菌定居胃腸道的情況中，可以聯(lián)合粘液溶解劑施用一種或多種幽門螺桿菌特異性IgY抗體，或者可以聯(lián)合粘液溶解劑施用一種或多種幽門螺桿菌交叉反應(yīng)性IgY抗體。
在這個(gè)方面，一種或多種特異性抗體可以存在于其它化合物的混合物中，諸如存在于卵黃或超免疫卵黃中?；蛘?，抗體可以是通過(guò)本領(lǐng)域已知方法諸如抗體親和純化由卵黃或超免疫卵黃純化得到的充分純化形式。
在本發(fā)明的多種形式中，將要施用的卵或卵成分的數(shù)量也沒(méi)有特別限制，只要它是通常展示有益效果的數(shù)量和形式。
在這個(gè)方面，可以根據(jù)所用的具體粘液溶解劑和卵或卵成分、待抑制細(xì)菌定居或感染的程度、待減輕粘液上皮炎癥或損傷的程度、所定居或感染的組織或器官、待治療疾病或狀況的種類、受試者的年齡和體重、施用頻率、或存在的其它活性劑，適當(dāng)選擇粘液溶解劑和卵或卵成分的劑量。
粘液溶解劑和卵或卵成分可以共施用，或者分開(kāi)施用(從而達(dá)到聯(lián)合作用的期望部位)，而且或是單獨(dú)使用或是聯(lián)合其它試劑以提高根除細(xì)菌的可能性。在用作附屬療法時(shí)，可能可以應(yīng)用較小劑量。
在本發(fā)明的多種形式中，粘液溶解劑和卵或卵成分可以在適于產(chǎn)生期望效果的任何時(shí)間內(nèi)施用。例如，可以在定居發(fā)作前施用，從而預(yù)防定居。或者，可以在已經(jīng)發(fā)生或檢測(cè)到粘液上皮定居的過(guò)程中或其后施用。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中預(yù)防粘液上皮的細(xì)菌定居的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和卵或卵中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠預(yù)防細(xì)菌定居的成分。
在人或動(dòng)物系統(tǒng)中，粘液溶解劑和卵或卵成分可以口服施用，或者通過(guò)任何其它合適手段，因此必須考慮粘液溶解劑和卵或卵成分的通過(guò)時(shí)間。優(yōu)選的是，粘液溶解劑和卵或卵成分的施用是通過(guò)口服施用。
對(duì)于為了抑制胃腸道粘液上皮定居或感染而口服施用粘液溶解劑和卵或卵成分而言，優(yōu)選的是，粘液溶解劑是N-乙酰半胱氨酸，而卵是超免疫卵。例如，為了抑制幽門螺桿菌定居胃腸道，粘液溶解劑優(yōu)選N-乙酰半胱氨酸，而卵是來(lái)自經(jīng)過(guò)幽門螺桿菌或其抗原免疫的母雞的超免疫卵。
在本發(fā)明的多種形式中，考慮到待施用粘液溶解劑和卵或卵成分的具體物理和化學(xué)特征，粘液溶解劑和卵或卵成分的施用還可以包括一種或多種可接受添加劑的使用，包括可接受鹽、氨基酸、多肽、聚合物、溶劑、緩沖劑、賦形劑、和填充劑。
例如，粘液溶解劑和卵或卵成分可以配制成食品添加劑、水溶液、油性制劑、脂肪乳劑、乳劑、凝膠等形式的多種制劑，而且這些制劑可以以含有常規(guī)無(wú)毒可接受載體的劑量配方或任何其它方便的劑量形式通過(guò)口服、吸附或吸收、局部、直腸、鼻、含服、或陰道施用。
在口服施用的情況中，可以以合適口服制劑的形式施用組合物，例如固體制劑，諸如片劑、膠囊、食品添加劑、顆粒、或粉劑；液體或半固體制劑，諸如卵黃制品、糖漿、乳劑、或懸浮液。
含有粘液溶解劑和卵或卵成分的組合物還可以含有防腐劑、穩(wěn)定劑、分散劑、pH控制劑、或等滲劑。合適防腐劑的實(shí)例是甘油、丙二醇、酚、或苯甲醇。合適穩(wěn)定劑的實(shí)例是右旋糖苷、明膠、α-醋酸生育酚、或α-硫代甘油。合適分散劑的實(shí)例包括聚氧乙烯(20)、山梨聚糖醇單油酸酯(吐溫80)、失水山梨糖醇倍半油酸酯(Span 30)、聚氧乙烯(160)聚氧丙烯(30)乙二醇(Pluronic F68)、或聚氧乙烯氫化蓖麻油60。合適pH控制劑的實(shí)例包括氫氯酸、氫氧化鈉、諸如此類。合適等滲劑的實(shí)例是葡萄糖、D-山梨醇、或D-甘露醇。
在本發(fā)明的多種形式中，考慮到所用具體粘液溶解劑和卵或卵成分的物理和化學(xué)特性，粘液溶解劑和卵或卵成分的施用還可以是含有可接受載體、稀釋劑、賦形劑、懸浮劑、潤(rùn)滑劑、佐劑、媒介、投遞系統(tǒng)、乳化劑、崩解劑、吸收劑、防腐劑、表面活性劑、著色劑、食用香料、或增甜劑的組合物的形式。
口服施用時(shí)，使用常規(guī)設(shè)備和本領(lǐng)域已知技術(shù)，常常將組合物配制成單位劑量形式，諸如液體(包括用于口服或局部施用的長(zhǎng)期保存液體配方、水性懸浮液、或溶液)、片劑、扁囊劑、粉劑、微粒、顆粒、咀嚼錠劑、食品添加劑、膠囊、或相似劑量形式。這些配方通常包含液體、固體、或半固體載體。例示性載體包括乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、淀粉、阿拉伯樹(shù)膠、磷酸鈣、礦物油、可可脂、可可油、藻酸鹽、黃芪膠、明膠、糖漿、甲基纖維素、聚氧乙烯山梨聚糖單月桂酸酯、羥基苯甲酸甲酯、羥基苯甲酸丙酯、滑石、硬脂酸鎂、諸如此類。
在以片劑施用組合物的情況中，可以通過(guò)將活性成分與任選包含的一種或多種輔助成分壓縮或注模來(lái)生產(chǎn)片劑?？梢酝ㄟ^(guò)在合適機(jī)器中壓縮易流形式(諸如粉末或微粒)的活性成分，任選與粘合劑、潤(rùn)滑劑、惰性稀釋劑、表面活性劑、或分散劑混合，來(lái)制備壓制片劑?？梢酝ㄟ^(guò)在合適機(jī)器中將用惰性液體稀釋劑弄濕的粉狀活性成分與合適載體的混合物一起注模來(lái)生產(chǎn)模制片劑。
載體還可以包含少量添加劑，諸如提高溶解度、等滲性、和化學(xué)穩(wěn)定性的物質(zhì)，例如抗氧化劑、緩沖劑、和防腐劑。
在本發(fā)明的多種形式中，粘液溶解劑和卵或卵成分的施用還可以利用受控釋放技術(shù)。粘液溶解劑和卵或卵成分還可以作為持續(xù)釋放產(chǎn)品施用。為了進(jìn)一步提高持續(xù)釋放效果，可以與額外成分一起配制組合物，諸如植物油(例如大豆油、芝麻油、山茶油、蓖麻油、花生油、菜籽油)；中級(jí)脂肪酸甘油三酯；脂肪酸酯，諸如油酸乙酯；聚硅氧烷衍生物；或者，水溶性高分子量化合物，諸如透明質(zhì)酸或其鹽(重均分子量約80,000-2,000,000)、羧甲基纖維素鈉(重均分子量約20,000-400,000)、羥丙基纖維素(2％水溶液的粘性3-4,000cps)、atherocollagen(重均分子量約300,000)、聚乙二醇(重均分子量約400-20,000)、聚環(huán)氧乙烷(重均分子量約100,000-9,000,000)、羥丙基甲基纖維素(1％水溶性的粘性4-100,000cSt)、甲基纖維素(2％水溶液的粘性15-8,000cSt)、聚乙烯醇(粘性2-100cSt)、聚乙烯吡咯烷酮(重均分子量25,000-1,200,000)。
在本發(fā)明的多種形式中，粘液溶解劑和卵或卵成分的施用還可以包括其它試劑的施用，包括抗生素和酸抑制劑。
粘液溶解劑和卵或卵成分抑制粘液上皮定居能力的測(cè)定可以通過(guò)本領(lǐng)域已知的合適方法得到確認(rèn)。例如，抑制定居的程度可以通過(guò)直接顯現(xiàn)暴露或不暴露于粘液溶解劑和卵或卵成分的具體粘液上皮樣品中的細(xì)菌數(shù)目來(lái)測(cè)定。在這種情況中，可以用用于檢測(cè)目的細(xì)菌的特異染色劑(例如幽門螺桿菌的姬姆薩染色)進(jìn)行染色來(lái)顯現(xiàn)細(xì)菌，例如《Saunders氏實(shí)驗(yàn)室醫(yī)學(xué)和技術(shù)字典和百科全書》“SaundersDictionary and Encyclopedia of Laboratory Medicine andTechnology”(Benington J.L)中所述。
或者，可以通過(guò)暴露或不暴露于粘液溶解劑和卵或卵成分的具體粘液上皮樣品中炎性細(xì)胞對(duì)粘液樣品的浸潤(rùn)程度來(lái)測(cè)定細(xì)菌定居，例如《組織學(xué)課本和圖集》“Histology a Text and Atlas”(第三版；Ross，M.H.、Rommell，L.J.、Kaye，G.I.，1995，Williams andWilkins，馬里蘭州，美國(guó))中所述。
用于測(cè)定粘液溶解劑和卵或卵成分抑制粘液上皮定居能力的另一種方法是通過(guò)使用酶標(biāo)志物，諸如作為嗜中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)粘液上皮指標(biāo)的髓過(guò)氧化物酶，例如Krawisz，J.等，1984，Gastroenterology 871344-1350中所述。可以通過(guò)本領(lǐng)域已知的合適方法獲得用于測(cè)試的粘液上皮樣品，包括粘液上皮的活組織檢查。
優(yōu)選的是，抑制定居的程度是治療后單位面積的粘液上皮中的平均細(xì)菌數(shù)目與未治療受試者的單位面積中的平均細(xì)菌數(shù)目相比降低了70％或更多。更優(yōu)選的是，抑制定居的程度是治療后單位面積的粘液上皮中的平均細(xì)菌數(shù)目與未治療受試者的單位面積中的平均細(xì)菌數(shù)目相比降低了85％或更多。最優(yōu)選的是，抑制定居的程度是治療后單位面積的粘液上皮中的平均細(xì)菌數(shù)目與未治療受試者的單位面積中的平均細(xì)菌數(shù)目相比降低了90％或更多。
本發(fā)明這種形式的方法還可包括其它試劑的施用，包括抗生素和酸抑制劑。
優(yōu)選的是，本發(fā)明這種形式的方法還包括抗生素的施用。合適抗生素的實(shí)例是阿莫西林。
因此，在另一種形式中，本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中抑制粘液上皮的細(xì)菌定居的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑、抗生素、和卵或卵中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠抑制細(xì)菌定居的成分。
在這個(gè)方面，本發(fā)明這種形式的方法還降低了使用抗生素療法時(shí)形成抗生素抗性的可能性。
因此，本發(fā)明還提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中減輕細(xì)菌形成抗生素抗性的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和卵或卵成分。
本發(fā)明還提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中減輕粘液上皮細(xì)菌感染的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和卵或卵中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠減輕細(xì)菌感染的成分。
粘液溶解劑和卵或卵成分減輕粘液上皮感染能力的測(cè)定還可以通過(guò)本領(lǐng)域已知的合適方法得到確認(rèn)。例如，減輕感染的程度可以通過(guò)直接顯現(xiàn)暴露或不暴露于粘液溶解劑和卵或卵成分的具體粘液上皮樣品中的細(xì)菌數(shù)目來(lái)測(cè)定。在這種情況中，可以用用于檢測(cè)目的細(xì)菌的特異染色劑(例如幽門螺桿菌的姬姆染色)進(jìn)行染色來(lái)顯現(xiàn)細(xì)菌，正如《Saunders氏實(shí)驗(yàn)室醫(yī)學(xué)和技術(shù)字典和百科全書》“SaundersDictionary and Encyclopedia of Laboratory Medicine andTechnology”(Benington J.L)中所述。
或者，可以通過(guò)暴露或不暴露于粘液溶解劑和卵或卵成分的具體粘液上皮樣品中炎性細(xì)胞對(duì)粘液樣品的浸潤(rùn)程度來(lái)測(cè)定細(xì)菌感染，例如《組織學(xué)課本和圖集》“Histology a Text and Atlas”(第三版；Ross，M.H.、Rommell，L.J.、Kaye，G.I.，1995，Williams andWilkins，馬里蘭州，美國(guó))中所述。
用于測(cè)定粘液溶解劑和卵或卵成分減輕粘液上皮感染能力的另一種方法是通過(guò)使用酶標(biāo)志物，諸如作為嗜中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)粘液上皮指標(biāo)的髓過(guò)氧化物酶，例如Krawisz，J.等，1984，Gastroenterology 871344-1350中所述?？梢杂杀绢I(lǐng)域已知的合適方法獲得用于測(cè)試的粘液上皮樣品，包括粘液上皮的活組織檢查。
優(yōu)選的是，減輕感染的程度是治療后單位面積的粘液上皮中的平均細(xì)菌數(shù)目與未治療受試者的單位面積中的平均細(xì)菌數(shù)目相比降低了50％或更多。更優(yōu)選的是，減輕感染的程度是治療后單位面積的粘液上皮中的平均細(xì)菌數(shù)目與未治療受試者的單位面積中的平均細(xì)菌數(shù)目相比降低了60％或更多。最優(yōu)選的是，減輕感染的程度是治療后單位面積的粘液上皮中的平均細(xì)菌數(shù)目與未治療受試者的單位面積中的平均細(xì)菌數(shù)目相比降低了80％或更多。
在一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中減輕粘液上皮細(xì)菌感染的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和一種或多種針對(duì)感染粘液上皮的細(xì)菌的特異性或交叉反應(yīng)性IgY抗體。
如上所述，在本發(fā)明的多種形式中，粘液溶解劑和卵或卵成分可以在適于產(chǎn)生期望效果的任何時(shí)間內(nèi)施用。例如，可以在粘液上皮感染發(fā)作前施用。或者，可以在已經(jīng)發(fā)生或檢測(cè)到粘液上皮感染的過(guò)程中或其后施用。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中預(yù)防粘液上皮細(xì)菌感染的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和卵或卵中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠預(yù)防細(xì)菌感染的成分。
本發(fā)明這種形式的方法還可以包括其它試劑的施用，包括抗生素和酸抑制劑。
優(yōu)選的是，本發(fā)明這種形式的方法還包括抗生素的施用。合適抗生素的實(shí)例是阿莫西林。
因此，在另一種形式中，本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中減輕粘液上皮細(xì)菌感染的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑、抗生素、和卵或卵中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠抑制細(xì)菌感染的成分。
本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中減輕與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮炎癥的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和卵或卵中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠減輕與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮炎癥的成分。
粘液溶解劑和卵或卵成分減輕與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮炎癥能力的測(cè)定可以通過(guò)本領(lǐng)域已知的合適方法得到確認(rèn)。例如，炎癥的程度可以通過(guò)暴露或不暴露于粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的具體粘液上皮樣品中炎性細(xì)胞對(duì)粘液樣品的浸潤(rùn)程度來(lái)測(cè)定，正如《組織學(xué)課本和圖集》“Histology a Textand Atlas”(第三版；Ross，M.H.、Rommell，L.J.、Kaye，G.I.，1995，Williams and Wilkins，馬里蘭州，美國(guó))中所述。
或者，炎癥的程度可以通過(guò)使用酶標(biāo)志物來(lái)測(cè)定，諸如作為嗜中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)粘液上皮指標(biāo)的髓過(guò)氧化物酶，例如Krawisz，J.等，1984，Gastroenterology 871344-1350中所述?？梢酝ㄟ^(guò)本領(lǐng)域已知的合適方法獲得用于測(cè)試的粘液上皮樣品，包括粘液上皮的活組織檢查。
優(yōu)選的是，減輕炎癥的程度是治療后粘液上皮組織樣品中的髓過(guò)氧化物酶活性水平與未治療受試者的組織樣品中的髓過(guò)氧化物酶活性相比降低了50％或更多。更優(yōu)選的是，減輕炎癥的程度是治療后粘液上皮組織樣品中的髓過(guò)氧化物酶活性水平與未治療受試者的組織樣品中的髓過(guò)氧化物酶活性相比降低了65％或更多。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中減輕與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮炎癥的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和一種或多種針對(duì)感染粘液上皮的細(xì)菌的特異性或交叉反應(yīng)性IgY抗體。
如上所述，在本發(fā)明的多種形式中，粘液溶解劑和卵或卵成分可以在適于產(chǎn)生期望效果的任何時(shí)間內(nèi)施用。例如，可以在與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮炎癥發(fā)作前施用。或者，可以在已經(jīng)發(fā)生或檢測(cè)到與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮炎癥的發(fā)作的過(guò)程中或其后施用。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中預(yù)防與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮炎癥的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和卵或卵中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠減輕與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮炎癥的成分。
本發(fā)明這種形式的方法還可以包括其它試劑的施用，包括抗生素和酸抑制劑。
優(yōu)選的是，本發(fā)明這種形式的方法還包括抗生素的施用。合適抗生素的實(shí)例是阿莫西林。
因此，在另一種形式中，本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中減輕與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮炎癥的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑、抗生素、和卵或卵中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠減輕與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮炎癥的成分。
在這個(gè)方面，本發(fā)明這種形式的方法還降低了使用抗生素療法時(shí)形成抗生素抗性的可能性。
本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中減輕與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮損傷的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和卵或卵中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠減輕與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮損傷的成分。
粘液溶解劑和卵或卵成分減輕與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮損傷能力的測(cè)定可以通過(guò)本領(lǐng)域已知的合適方法來(lái)確認(rèn)，例如《組織學(xué)課本和圖集》“Histology a Text and Atlas”(第三版；Ross，M.H.、Rommell，L.J.、Kaye，G.I.，1995，Williams and Wilkins，馬里蘭州，美國(guó))中所述。例如，損傷的程度可以通過(guò)暴露或不暴露于粘液溶解劑和卵或卵成分的組織樣品的組織病理學(xué)檢查來(lái)測(cè)定。
在一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中減輕與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮損傷的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑一種或多種針對(duì)感染粘液上皮的細(xì)菌的特異性或交叉反應(yīng)性IgY抗體。
如上所述，在本發(fā)明的多種形式中，粘液溶解劑和卵或卵成分可以在適于產(chǎn)生期望效果的任何時(shí)間內(nèi)施用。例如，可以在與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮損傷發(fā)作前施用?；蛘撸梢栽谝呀?jīng)發(fā)生或檢測(cè)到與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮損傷的發(fā)作的過(guò)程中或其后施用。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中預(yù)防與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮損傷的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和卵或卵中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠減輕與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮損傷的成分。
本發(fā)明這種形式的方法還可以包括其它試劑的施用，包括抗生素和酸抑制劑。
優(yōu)選的是，本發(fā)明這種形式的方法還包括抗生素的施用。合適抗生素的實(shí)例是阿莫西林。
因此，在另一種形式中，本發(fā)明提供了用于在生物學(xué)系統(tǒng)中減輕與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮損傷的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑、抗生素、和卵或卵中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠減輕與細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮損傷的成分。
在這個(gè)方面，本發(fā)明這種形式的方法還降低了使用抗生素療法時(shí)形成抗生素抗性的可能性。
本發(fā)明本發(fā)明提供了用于在受試者中治療與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)受試者施用有效量的粘液溶解劑和卵或卵中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠治療與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況的成分。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于在受試者中治療與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)受試者施用有效量的粘液溶解劑和一種或多種針對(duì)感染粘液上皮的細(xì)菌的特異性或交叉反應(yīng)性IgY抗體。
應(yīng)當(dāng)理解，關(guān)于上文所述粘液溶解劑和卵或卵成分在抑制粘液上皮的細(xì)菌定居或感染方面的施用的相同考慮還將應(yīng)用于用于治療與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)疾病或狀況的施用。
如上所述，在本發(fā)明的多種形式中，粘液溶解劑和卵或卵成分可以在適于產(chǎn)生期望效果的任何時(shí)間內(nèi)施用。例如，可以與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況在受試者中發(fā)作前施用?；蛘?，可以在已經(jīng)發(fā)生或檢測(cè)到與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況的發(fā)作的過(guò)程中或其后施用。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于在受試者中預(yù)防與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)受試者施用有效量的粘液溶解劑和卵或卵中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠預(yù)防與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況的成分。
本發(fā)明這種形式的方法還可以包括其它試劑的施用，包括抗生素和酸抑制劑。
優(yōu)選的是，本發(fā)明這種形式的方法還包括抗生素的施用。合適抗生素的實(shí)例是阿莫西林。
因此，在另一種形式中，本發(fā)明提供了用于在受試者中預(yù)防和/或治療與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑、抗生素、和卵或卵中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠預(yù)防和/或治療與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病的成分。
在這個(gè)方面，本發(fā)明這種形式的方法還降低了使用抗生素療法時(shí)形成抗生素抗性的可能性。
本發(fā)明還提供了有效量的粘液溶解劑和卵或卵成分用于制備治療與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況的藥物的用途。
本發(fā)明還提供了包含粘液溶解劑和卵或卵成分的組合物。
將要在組合物中使用的粘液溶解劑的數(shù)量沒(méi)有特別限制，只要它是在對(duì)受試者施用組合物時(shí)通常將展示治療效果的數(shù)量。
將要在組合物中使用的卵或卵成分的數(shù)量也沒(méi)有特別限制，只要它是在對(duì)受試者施用組合物時(shí)通常將展示有益效果的數(shù)量。
在這個(gè)方面，可以根據(jù)所使用的具體粘液溶解劑和卵或卵成分、待抑制細(xì)菌定居或感染的程度、待減輕粘液上皮炎癥的程度、所定居或感染的組織或器官、待治療疾病或狀況的種類、受試者的年齡和體重、施用頻率、和存在的其它活性劑，適當(dāng)選擇組合物中使用的粘液溶解劑和卵和卵成分的劑量。
粘液溶解劑和卵或卵成分可以在單一組合物中共施用，或者，作為分開(kāi)的組合物施用，從而在期望的作用部位發(fā)揮聯(lián)合作用。
在一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于抑制粘液上皮的細(xì)菌定居和/或感染的組合物，所述組合物包含粘液溶解劑和卵或卵中能夠預(yù)防粘液上皮的細(xì)菌定居和/或感染的成分。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于治療與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況的組合物，所述組合物包含粘液溶解劑和卵或卵中能夠治療與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病的成分。
對(duì)于適于為了抑制胃腸道粘液上皮定居或感染(或治療與胃腸道細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況)而施用粘液溶解劑和卵或卵成分的組合物而言，優(yōu)選的是，組合物中的粘液溶解劑是N-乙酰半胱氨酸，而卵是超免疫卵。例如，為了抑制幽門螺桿菌定居胃腸道，組合物優(yōu)選包含N-乙酰半胱氨酸和來(lái)自經(jīng)過(guò)幽門螺桿菌免疫的母雞的超免疫卵或超免疫卵成分。
考慮到待施用粘液溶解劑和卵或卵成分的具體物理和化學(xué)特征，組合物還可以包含一種或多種可接受添加劑，包括鹽、氨基酸、多肽、聚合物、溶劑、緩沖劑、賦形劑、和填充劑。
例如，粘液溶解劑和卵或卵成分可以配制成例如水溶液、油性制劑、脂肪乳劑、乳劑、凝膠等形式的多種制劑，而且這些制劑可以通過(guò)口服、吸附、吸收、局部、直腸、鼻、含服、陰道、或任何其它方便的劑量形式施用。
在口服施用的情況中，組合物可以是合適口服制劑的形式，包括液體制劑，糖漿、乳劑、或懸浮液，或者是固體制劑，諸如片劑、膠囊、顆粒、或粉劑。
含有粘液溶解劑和卵或卵成分的組合物還可以含有防腐劑、穩(wěn)定劑、分散劑、pH控制劑、或等滲劑。合適防腐劑的實(shí)例是甘油、丙二醇、酚、或苯甲醇。合適穩(wěn)定劑的實(shí)例是右旋糖苷、明膠、α-醋酸生育酚、或α-硫代甘油。合適分散劑的實(shí)例包括聚氧乙烯(20)、失水山梨糖醇單油酸酯(吐溫80)、失水山梨糖醇倍半油酸酯(Span 30)、聚氧乙烯(160)聚氧丙烯(30)乙二醇(Pluronic F68)、或聚氧乙烯氫化蓖麻油60。合適pH控制劑的實(shí)例包括氫氯酸、氫氧化鈉、諸如此類。合適等滲劑的實(shí)例是葡萄糖、D-山梨醇、或D-甘露醇。
考慮到所用具體粘液溶解劑和卵或卵成分的物理和化學(xué)特性，組合物還可以是含有可接受載體、稀釋劑、賦形劑、懸浮劑、潤(rùn)滑劑、佐劑、媒介、投遞系統(tǒng)、乳化劑、崩解劑、吸收劑、防腐劑、表面活性劑、著色劑、食用香料、或增甜劑的組合物的形式。
口服施用時(shí)，使用常規(guī)設(shè)備和本領(lǐng)域已知技術(shù)，常常將組合物配制成單位劑量形式，諸如液體(包括用于口服或局部施用的長(zhǎng)期保存液體配方、水性懸浮液、或溶液)、片劑、扁囊劑、粉劑、微粒、顆粒、咀嚼錠劑、食品添加劑、膠囊、或相似劑量形式。這些配方通常包含液體、固體、或半固體載體。例示性載體包括乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、淀粉、阿拉伯樹(shù)膠、磷酸鈣、礦物油、可可脂、可可油、藻酸鹽、黃芪膠、明膠、糖漿、甲基纖維素、聚氧乙烯山梨聚糖單月桂酸酯、羥基苯甲酸甲酯、羥基苯甲酸丙酯、滑石、硬脂酸鎂、諸如此類。
在以片劑施用的情況中，可以通過(guò)將活性成分與任選的一種或多種輔助成分壓縮或注模來(lái)生產(chǎn)片劑?？梢酝ㄟ^(guò)在合適機(jī)器中壓縮易流形式(諸如粉末或微粒)的活性成分，任選與粘合劑、潤(rùn)滑劑、惰性稀釋劑、表面活性劑、或分散劑混合，來(lái)制備壓制片劑?？梢酝ㄟ^(guò)在合適機(jī)器中將用惰性液體稀釋劑弄濕的粉狀活性成分與合適載體的混合物一起注模來(lái)生產(chǎn)模制片劑。
載體可以包含少量添加劑，諸如提高溶解度、等滲性、和化學(xué)穩(wěn)定性的物質(zhì)，例如抗氧化劑、緩沖劑、和防腐劑。
組合物還可以包含容許受控或持續(xù)釋放粘液溶解劑和卵或卵成分的試劑。例如，關(guān)于試劑的持續(xù)釋放，可以與額外成分一起配制組合物，諸如植物油(例如大豆油、芝麻油、山茶油、蓖麻油、花生油、菜籽油)；中級(jí)脂肪酸甘油三酯；脂肪酸酯，諸如油酸乙酯；聚硅氧烷衍生物；或者，水溶性高分子量化合物，諸如透明質(zhì)酸或其鹽(加重均分子量約80,000-2,000,000)、羧甲基纖維素鈉(重均分子量約20,000-400,000)、羥丙基纖維素(2％水溶液的粘性3-4,000cps)、atherocollagen(重均分子量約300,000)、聚乙二醇(重均分子量約400-20,000)、聚環(huán)氧乙烷(重均分子量約100,000-9,000,000)、羥丙基甲基纖維素(1％水溶性的粘性4-100,000cSt)、甲基纖維素(2％水溶液的粘性15-8,000cSt)、聚乙烯醇(粘性2-100cSt)、聚乙烯吡咯烷酮(重均分子量25,000-1,200,000)。
或者，組合物可以將粘液溶解劑和卵或卵成分摻入疏水性聚合物基質(zhì)，用于在一段時(shí)間里受控釋放。然后可以將組合物注模成固體形式，或外用貼片，適于在延長(zhǎng)的一段時(shí)間里提供有效濃度的粘液溶解劑和卵或卵成分而無(wú)需頻繁重復(fù)給藥。這種受控釋放薄膜在本領(lǐng)域是眾所周知的?？梢允褂玫那页３Ｓ糜诖四康牡木酆衔锏钠渌鼘?shí)例包括可以外用或內(nèi)用的不可降解的乙烯-醋酸乙烯共聚物和可降解的乳酸-乙醇酸共聚物。某些水凝膠，諸如聚羥基甲基丙烯酸乙酯或聚乙烯醇，也是有用的，但是用于比諸如上文所述其它聚合物釋放系統(tǒng)短的釋放周期。
載體還可以是固體生物可降解聚合物或具有合適時(shí)間釋放特征和釋放動(dòng)力學(xué)的生物可降解聚合物的混合物。然后可以將組合物注模成固體植物物，適合用于在延長(zhǎng)的一段時(shí)間里提供有效濃度的粘液溶解劑和卵或卵成分而無(wú)需頻繁重復(fù)給藥?？梢砸员绢I(lǐng)域普通技術(shù)人員知道的任何合適方式將粘液溶解劑和卵或卵成分摻入生物可降解聚合物或聚合物混合物，并且可以與生物可降解聚合物形成均勻基質(zhì)，或者可以以某種方式封裝到聚合物中，或者可以注模成固體植入物。
依照本發(fā)明的組合物還可包含其它試劑，包括抗生素和酸抑制劑。
優(yōu)選的是，組合物還包含抗生素的施用。合適抗生素的實(shí)例是阿莫西林。
在一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于抑制粘液上皮的細(xì)菌定居和/或感染的組合物，所述組合物包含粘液溶解劑和一種或多種針對(duì)定居和/或感染粘液上皮的細(xì)菌的特異性或交叉反應(yīng)性IgY抗體。
在另一種優(yōu)選形式中，本發(fā)明提供了用于治療與粘液上皮細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況的組合物，所述組合物包含粘液溶解劑和一種或多種針對(duì)感染粘液上皮的細(xì)菌的特異性或交叉反應(yīng)性IgY抗體。
在包含一種或多種特異性或交叉反應(yīng)性IgY抗體的組合物用于抑制和/或預(yù)防粘液上皮幽門螺桿菌定居和/或感染、或用于治療和/或預(yù)防與粘液上皮幽門螺桿菌感染有關(guān)的疾病或狀況的情況中，組合物中的粘液溶解劑優(yōu)選是N-乙酰半胱氨酸。
優(yōu)選實(shí)施方案的描述現(xiàn)在要描述體現(xiàn)上文本發(fā)明一般原理的實(shí)驗(yàn)。然而，應(yīng)當(dāng)理解，下文描述并非是要限制上文描述的一般性。
實(shí)施例1細(xì)菌定居的模型依照Lee等，1997，Gastroenterology 1121386-1397(將其完整公開(kāi)收入本文作為參考)，給約六周齡的雌性C57BL/6小鼠口服接種幽門螺桿菌悉尼菌株1(SS1)(在0.1ml 0.9％(w/v)氯化鈉中投遞1.0×10個(gè)細(xì)菌)，并由接種后4周開(kāi)始在21天里每天兩次通過(guò)口-胃管飼法進(jìn)行治療(下文方案1)。動(dòng)物飼養(yǎng)在婦幼醫(yī)院的動(dòng)物房。給所有動(dòng)物隨意供應(yīng)鼠糧和水。
方案1實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)治療(每天兩次)↓ ↓天數(shù)1_____________29_________________________49 50↑↑感染(1.0×10 SS1/ml)處死實(shí)施例2治療(a)測(cè)試樣品制備將N-乙酰半胱氨酸(NAC；Sigma化學(xué)藥品公司，圣路易斯，密蘇里州)以5％(w/v)的濃度溶于蒸餾水，并儲(chǔ)存于4℃直至使用。
通過(guò)合并擠奶來(lái)制備未免疫牛初乳。將凍干粉以20％(w/v)的濃度溶于蒸餾水，并在使用前儲(chǔ)存于-20℃。
將超免疫牛初乳(HBC；合并擠奶，凍干粉)以20％(w/v)的濃度溶于蒸餾水，并在使用前儲(chǔ)存于-20℃。
將牛乳鐵蛋白(DMV跨國(guó)公司，荷蘭)以3％(w/v)的濃度溶于蒸餾水，并儲(chǔ)存于-20℃直至使用。
通過(guò)豬胃蛋白酶對(duì)牛乳鐵蛋白的蛋白水解消化來(lái)制備牛乳鐵蛋白水解產(chǎn)物-A(BLc-A)。將牛乳鐵蛋白溶液的pH調(diào)至pH2.5，并添加豬胃蛋白酶(Sigma)至終濃度3％(w/w底物)。于37℃水解30分鐘，然后于80℃加熱15分鐘終止反應(yīng)。
通過(guò)將牛乳鐵蛋白于pH2.5于100℃熱滅活5分鐘來(lái)制備牛乳鐵蛋白水解產(chǎn)物-B(BLc-B)。
將牛水解乳鐵蛋白溶液冷卻至室溫，調(diào)至最初的pH，過(guò)濾(0.45μm)除去任何沉淀，并儲(chǔ)存于-20℃直至使用。
(b)治療方案治療方案顯示于表1。
表1治療方案
三聯(lián)療法包含檸檬酸鉍、甲硝噠唑、和四環(huán)素(tetracycleine)，正如Lee等，1997，Gastroenterology 1121386-1397中所述，只是檸檬酸鉍取代了SUB檸檬酸鉍。調(diào)整劑量(mg/kg/天)以投遞相同數(shù)量的鉍/天。
實(shí)施例3細(xì)菌定居和病理學(xué)的評(píng)估通過(guò)CO2窒息及后續(xù)頸部脫位處死小鼠，并采集胃組織用于組織學(xué)檢查、細(xì)菌培養(yǎng)、和生化分析，正如先前Lee等，1997，Gastroenterology1121386-1397和Krawisz等，1984，Gastroenterology 871344-1350中所述。
簡(jiǎn)而言之，切除胃，然后沿大彎剪開(kāi)，并在無(wú)菌鹽水中漂洗以清除胃內(nèi)容物。將-半組織在10％中性緩沖福爾馬林中固定，在石蠟中包埋，切成5μm切片，并用蘇木精和曙紅(H&E)染色(用于組織學(xué))或者用May-Grünwald-Giemsa(姬姆薩)染色(用于評(píng)估細(xì)菌定居)。將剩余組織置于2ml無(wú)菌鹽水中，稱重，并用Ultra-Turrax勻漿器(Janke & Kenkel，德國(guó))勻漿30秒鐘。
為了進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)，對(duì)組織勻漿進(jìn)行連續(xù)十倍稀釋，且每個(gè)稀釋度取200μl在螺桿菌選擇性瓊脂(HSA)上涂布兩份，HAS即在含有登特氏補(bǔ)充物(Oxoid有限公司；10mg/L萬(wàn)古霉素、5mg/L甲氧芐啶、5mg/L頭孢磺啶、和5mg/L兩性霉素)的哥倫比亞血瓊脂基質(zhì)(Oxoid有限公司，貝辛斯托克，英國(guó))中添加滅菌馬血(5％v/v)。將平板在設(shè)定為95％濕度的10％CO2溫箱中于37℃培養(yǎng)5-7天。
髓過(guò)氧化物酶(MPO)是在嗜中性粒細(xì)胞的顆粒體中發(fā)現(xiàn)的胞內(nèi)酶，因而可以用作組織嗜中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)的指標(biāo)。對(duì)200μl勻漿樣品測(cè)量MPO水平。將懸浮液在Mikro桌面離心機(jī)(Hettich，德國(guó))中以15,000g離心12分鐘，并丟棄上清液。將沉淀重懸于200μl溴化十六碳烷基三甲銨(Sigma)去污劑緩沖液(HTAB)中，旋渦震蕩2分鐘，并以15,000g離心2分鐘。收集上清液，并取50μl加到200μl反應(yīng)混合液(0.167mg/L鄰聯(lián)二茴香胺O-(dianiside)鹽酸鹽(Sigma)、0.05％過(guò)氧化氫(30％w/v)、和10％磷酸鹽緩沖液)中。使用Dynatech MR7000分光光度計(jì)(根西島，海峽群島)測(cè)量450nm吸光度的變化(ODmin-1)，并如下計(jì)算MPO活性MPO(單位)測(cè)量值＝ODmin-1/1.13×10-2，其中MPO單位＝1μmol H2O2分裂，引起OD變化＝1.13×10-2。MPO活性表述成MPO單位每克蛋白質(zhì)。胃組織勻漿中的蛋白質(zhì)濃度是使用Bio-Rad蛋白質(zhì)測(cè)定法(Bio-Rad Laboratories Pty有限公司，Hercules，加利福尼亞州)測(cè)定的。
實(shí)施例4用超免疫初乳或乳鐵蛋白治療的小鼠中的定居對(duì)姬姆薩染色切片的9-12個(gè)連續(xù)視野計(jì)數(shù)接種了幽門螺桿菌的小鼠的胃體、過(guò)渡區(qū)、和胃竇中的定居水平。
用鹽水(NaCl)、超免疫牛初乳(HBC)、或牛乳鐵蛋白(BLf)治療的小鼠的胃體中的定居水平顯示于圖1a。胃竇中的定居水平顯示于圖1b。整體考慮的小鼠胃中的定居水平顯示于圖1c。
可以由這些數(shù)據(jù)看出，用超免疫初乳或乳鐵蛋白治療的小鼠中的定居水平與單獨(dú)用鹽水治療的小鼠中的定居水平相比普遍降低了。
實(shí)施例5用乳鐵蛋白連同或不連同N-乙酰半胱氨酸治療的小鼠中的定居為了評(píng)估粘液溶解劑N-乙酰半胱氨酸聯(lián)合乳鐵蛋白對(duì)定居的效果，對(duì)姬姆薩染色切片的9-12個(gè)連續(xù)視野計(jì)數(shù)接種了幽門螺桿菌的小鼠的胃體、過(guò)渡區(qū)、和胃竇中的定居水平。
用水(H2O)、牛乳鐵蛋白(BLf)、或牛乳鐵蛋白連同N-乙酰半胱氨酸(BLf*)治療的小鼠中的整體定居水平顯示于圖2。
可以看出與單獨(dú)使用牛乳鐵蛋白的治療攝生法相比，在牛乳鐵蛋白的治療方案中添加溶液溶解劑N-乙酰半胱氨酸顯著降低定居水平。
實(shí)施例6用未免疫初乳、超免疫初乳、乳鐵蛋白、或乳鐵蛋白水解產(chǎn)物連同N-乙酰半胱氨酸治療的小鼠中的定居對(duì)姬姆薩染色切片的9-12個(gè)連續(xù)視野計(jì)數(shù)接種了幽門螺桿菌的小鼠的胃體、過(guò)渡區(qū)、和胃竇中的定居水平。
單獨(dú)用水(H2O)、單獨(dú)用N-乙酰半胱氨酸(NAC)、用牛乳鐵蛋白胃蛋白酶水解產(chǎn)物(BLc-A)、牛乳鐵蛋白酸水解產(chǎn)物(BLc-B)、未免疫牛初乳和N-乙酰半胱氨酸(NBC*)、超免疫牛初乳和N-乙酰半胱氨酸(HBC*)、牛乳鐵蛋白和N-乙酰半胱氨酸(BLf*)、牛乳鐵蛋白胃蛋白酶水解產(chǎn)物和N-乙酰半胱氨酸(BLc-A*)、牛乳鐵蛋白酸水解產(chǎn)物和N-乙酰半胱氨酸(BLc-B*)治療的小鼠或者用三聯(lián)治療攝生法(TT)治療的小鼠的胃體中的定居水平顯示于圖3a。
過(guò)渡區(qū)中的定居水平顯示于圖3b。胃竇中的定居水平顯示于圖4a。整體考慮的小鼠胃中的定居水平顯示于4b。
可以由這些數(shù)據(jù)看出單獨(dú)使用的N-乙酰半胱氨酸對(duì)定居水平?jīng)]有效果。
通過(guò)與圖1a、1b、和1c中所示數(shù)據(jù)進(jìn)行比較，可以看出，N-乙酰半胱氨酸提高了初乳降低定居水平的能力。與未免疫初乳相比，聯(lián)合N-乙酰半胱氨酸使用超免疫初乳進(jìn)一步提高了降低定居水平的能力。
還可以看出與單獨(dú)使用的水解產(chǎn)物相比，N-乙酰半胱氨酸的使用提高了乳鐵蛋白水解產(chǎn)物(胃蛋白酶衍生水解產(chǎn)物和酸衍生水解產(chǎn)物二者)降低定居水平的能力。
實(shí)施例7N-乙酰半胱氨酸聯(lián)合乳鐵蛋白對(duì)炎癥的效果對(duì)胃組織切片中胃體、過(guò)渡區(qū)、和胃竇的表面層、基底層、粘膜下層、肌肉層、和漿膜層測(cè)量接種了幽門螺桿菌的小鼠中的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)水平。
對(duì)切片檢查胃的結(jié)構(gòu)變化，并對(duì)正常構(gòu)造、淋巴聚集、囊的變化、特化細(xì)胞的損失、和腸組織變化的存在與否進(jìn)行評(píng)估(有1；無(wú)0)。
對(duì)用水(H2O)、牛乳鐵蛋白(BLf)、或牛乳鐵蛋白聯(lián)合N-乙酰半胱氨酸(BLf*)治療的小鼠測(cè)定慢性炎性細(xì)胞浸潤(rùn)(慢性胃炎)的整體水平。數(shù)據(jù)顯示于圖5。
可以看出與單獨(dú)使用的乳鐵蛋白相比，N-乙酰半胱氨酸的存在在與乳鐵蛋白聯(lián)合使用時(shí)降低慢性炎性水平浸潤(rùn)水平。
實(shí)施例8N-乙酰半胱氨酸聯(lián)合超免疫初乳、乳鐵蛋白、或乳鐵蛋白水解產(chǎn)物對(duì)炎癥的效果對(duì)胃組織切片中胃體、過(guò)渡區(qū)、和胃竇的表面層、基底層、粘膜下層、肌肉層、和漿膜層測(cè)量接種了幽門螺桿菌的小鼠中的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)水平。
測(cè)定單獨(dú)用水(H2O)、用超免疫牛初乳和N-乙酰半胱氨酸(HBC)、牛乳鐵蛋白和N-乙酰半胱氨酸(BLf)、牛乳鐵蛋白胃蛋白酶水解產(chǎn)物和N-乙酰半胱氨酸(BLc-A)、或牛乳鐵蛋白酸水解產(chǎn)物和N-乙酰半胱氨酸(BLc-B)治療的小鼠中的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)水平。
對(duì)切片檢查胃的結(jié)構(gòu)變化，并對(duì)正常構(gòu)造、淋巴聚集、囊的變化、特化細(xì)胞的損失、和腸組織變化的存在與否進(jìn)行評(píng)估(有1；無(wú)0)。
數(shù)據(jù)顯示于圖6a-6d?？梢钥闯雠cH2O對(duì)照組相比，所有治療組中的炎癥水平降低了。在檢查的其它區(qū)域沒(méi)有觀察到炎癥活性。
實(shí)施例9用乳鐵蛋白或乳鐵蛋白聯(lián)合N-乙酰半胱氨酸治療的小鼠中的MPO活性將在用牛乳鐵蛋白(BLf)或牛乳鐵蛋白聯(lián)合N-乙酰半胱氨酸(BLf*)治療的小鼠中檢測(cè)到的急性胃炎(MPO活性)水平與H2O對(duì)照小鼠中的急性胃炎(MPO活性)水平進(jìn)行比較。數(shù)據(jù)顯示于圖7。
可以看出與單獨(dú)使用的乳鐵蛋白相比，在聯(lián)合乳鐵蛋白使用N-乙酰半胱氨酸時(shí)急性胃炎的程度降低了。
實(shí)施例10用超免疫牛初乳、牛乳鐵蛋白、或牛乳鐵蛋白水解產(chǎn)物聯(lián)合N-乙酰半胱氨酸治療的小鼠中的MPO活性測(cè)定單獨(dú)用水(H2O)、用超免疫牛初乳和N-乙酰半胱氨酸(HBC)、牛乳鐵蛋白和N-乙酰半胱氨酸(BLf)、牛乳鐵蛋白胃蛋白酶水解產(chǎn)物和N-乙酰半胱氨酸(BLc-A)、或牛乳鐵蛋白酸水解產(chǎn)物和N-乙酰半胱氨酸(BLc-B)治療的小鼠中的急性胃炎(MPO活性)水平。數(shù)據(jù)顯示于圖8。
可以看出與對(duì)照相比，所有治療組中的急性胃炎的程度降低了。
實(shí)施例11超免疫初乳(HBC)和N-乙酰半胱氨酸(NAC)±阿莫西林對(duì)小鼠中幽門螺桿菌集群和相關(guān)胃炎的效果與陽(yáng)性(三聯(lián)療法)和陰性(H2O)治療組的比較如Lee等，1997，Gastroenterology 1121386-1397中所述，給約六周齡的雌性C57BL/6小鼠口服接種幽門螺桿菌悉尼菌株1(SS1)(在0.1ml 0.9％(w/v)氯化鈉中投遞1.0×108個(gè)細(xì)菌)，并由接種后7周開(kāi)始在14天里每天兩次通過(guò)口-胃管飼法進(jìn)行治療(下文方案2)。動(dòng)物飼養(yǎng)在婦幼醫(yī)院的動(dòng)物房。給所有動(dòng)物隨意供應(yīng)鼠糧和水。
方案2實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)治療(每天兩次)↓↓天數(shù)1_____________50________________________64 65↑↑感染(1.0×108SS1/ml) 處死測(cè)試材料N-乙酰半胱氨酸，50mg/ml(NAC；Sigma化學(xué)藥品公司，圣路易斯，密蘇里州)和奧美拉唑，0.83mg/ml(Losec；Astra.Zeneca Pty有限公司，新南威爾士，澳大利亞)都是每天新鮮配制的，并儲(chǔ)存于4℃直至使用。超免疫牛初乳，185mg/ml(HBC02A01，噴干粉)、阿莫西林，312.5mg/ml(Amox；Alphapharm Pty有限公司，QLD，澳大利亞)、和甲硝噠唑，25mg/ml(MTZ；Sigma)儲(chǔ)存于-20℃直至需要。阿莫西林在使用前(用HBC或MTZ溶液)十倍稀釋。所有試劑都在蒸餾水中配制，但是Losec溶于0.1M碳酸氫鈉。
治療方案治療概述于表2。
表2
*每個(gè)時(shí)間點(diǎn)(AM和PM)用兩種分開(kāi)的溶液(1和2)治療小鼠，每種溶液以每只小鼠0.1ml的體積投遞。
結(jié)果存活計(jì)數(shù)由H2O組的18/18只小鼠、用HBC和NAC治療的17/18只小鼠、用HBC、NAC、和阿莫西林治療的9/18只小鼠、以及用Losec、甲硝噠唑、和阿莫西林治療的只有1/18只小鼠回收得到SS1。由給予H2O的小鼠與用HBC、NAC、和阿莫西林或是用Losec、甲硝噠唑、和阿莫西林治療的小鼠回收得到的存活細(xì)菌數(shù)目中存在顯著差異(p＜0.05)。這兩個(gè)組還與只用HBC和NAC治療的動(dòng)物存在顯著差異(p＜0.05)。各組之間沒(méi)有觀察到其它差異。結(jié)果顯示于圖9的板塊A。
定居(Giemsa染色)對(duì)染色切片的9-12個(gè)連續(xù)視野計(jì)數(shù)胃體、過(guò)渡區(qū)、和胃竇中的定居水平。在胃體中，用BLf、BLc-A、或HBC治療的小鼠中的定居水平與H2O對(duì)照組有顯著差異(p＜0.05)。用HBC治療的小鼠還與用BLc-B治療的小鼠有顯著差異(p＜0.05)。在過(guò)渡區(qū)中觀察到相同差異；而在胃竇中，用BLf和HBC治療的小鼠(但不是用BLc治療的各組)與對(duì)照之間存在顯著差異(p＜0.05)。將不同部位的結(jié)果綜合在一起，所有治療組與H2O對(duì)照都是有差異的(p＜0.05)。
慢性炎癥(H&E)對(duì)胃組織切片中胃體、過(guò)渡區(qū)、和胃竇的表面層、基底層、粘膜下層、肌肉層、和漿膜層測(cè)量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。在胃粘膜的表面層和基底層中，對(duì)治療組與H2O對(duì)照組觀察到的炎癥水平之間存在一些差異。在表面層中，將胃體、過(guò)渡區(qū)、和胃竇綜合在一起，這只有在用BLf±酸水解治療的小鼠中是顯著的(p＜0.05)。在基底層中，對(duì)BLf±酸水解組在胃體中得到了相同結(jié)果，但是，在這種情況中，將評(píng)分綜合在一起，H2O對(duì)照與所有治療組之間的差異是顯著的(p＜0.05)。在檢查的其它區(qū)域沒(méi)有觀察到炎癥活性。整體考慮，與對(duì)照小鼠相比，所有治療組中的慢性炎性細(xì)胞響應(yīng)不夠劇烈。這在所有組中都是顯著的(p＜0.05)，除了用經(jīng)胃蛋白酶消化的BLf治療的小鼠。
還對(duì)切片檢查胃的結(jié)構(gòu)變化，并對(duì)正常構(gòu)造、淋巴聚集、囊的變化、特化細(xì)胞的損失、和腸組織變化的存在與否進(jìn)行評(píng)估(有1；無(wú)0)，盡管各組之間沒(méi)有觀察到差異。
急性炎癥(MPO)
MPO活性(U/mg蛋白質(zhì)/min)；結(jié)果顯示于圖9的板塊B。簡(jiǎn)而言之，在用兩種BLf水解產(chǎn)物治療的小鼠中檢測(cè)到的MPO水平相對(duì)于用H2O治療的受感染對(duì)照小鼠中測(cè)量到的水平降低了約60％，而且這是顯著的(p＜0.05)。與H2O對(duì)照小鼠相比，在用BLf和HBC治療的組中測(cè)量到的MPO也分別降低了23％和37％，但是這在統(tǒng)計(jì)學(xué)上不是顯著的。類似的，在用水解BLf治療的小鼠中檢測(cè)到的MPO比用HBC治療的小鼠低約40％，比用BLf治療的小鼠低約50％，但是這同樣不是顯著差異。還應(yīng)當(dāng)注意，實(shí)驗(yàn)的基數(shù)(power)(α0.050)比期望水平0.800低。一般而言，樣品的數(shù)量越大，則測(cè)試的基數(shù)越大。因此，為了在特定基數(shù)和顯著性水平檢測(cè)治療組之間的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，必需使用比此處所用容量更大的組。
最后，應(yīng)當(dāng)理解，本文所述本發(fā)明方法和組合物的多種修改和變更對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見(jiàn)的，而且不違背本發(fā)明的范圍和精神。盡管已經(jīng)結(jié)合具體的優(yōu)選實(shí)施方案描述了本發(fā)明，應(yīng)當(dāng)理解，所主張的本發(fā)明不應(yīng)當(dāng)過(guò)度限制于這些具體實(shí)施方案。實(shí)際上，對(duì)于染色體異常、產(chǎn)前診斷和胚胎植入前遺傳診斷、分子生物學(xué)、或相關(guān)領(lǐng)域的技術(shù)人員而言顯而易見(jiàn)的用于執(zhí)行本發(fā)明的所述方式的多種修改意欲屬于本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
1.用于在生物學(xué)系統(tǒng)中抑制粘液上皮的細(xì)菌定居的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠抑制細(xì)菌定居的成分。
2.如權(quán)利要求1的方法，其中對(duì)細(xì)菌定居的抑制發(fā)生在胃腸道中。
3.如權(quán)利要求2的方法，其中細(xì)菌定居是螺桿菌屬物種的定居。
4.如權(quán)利要求3的方法，其中螺桿菌屬物種是幽門螺桿菌。
5.如權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)的方法，其中粘液溶解劑是N-乙酰半胱氨酸。
6.如權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)的方法，其中初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分是牛初乳、牛超免疫乳、或牛初乳和/或牛超免疫乳成分。
7.如權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)的方法，其中初乳是超免疫初乳。
8.如權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)的方法，其中初乳和/或超免疫乳成分是乳鐵蛋白。
9.如權(quán)利要求8的方法，其中乳鐵蛋白是水解乳鐵蛋白。
10.如權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)的方法，其中初乳和/或超免疫乳成分是一種或多種針對(duì)定居于粘液上皮之細(xì)菌的特異性或交叉反應(yīng)性抗體。
11.如權(quán)利要求1-10任一項(xiàng)的方法，其中所述方法還包括施用抗生素。
12.如權(quán)利要求11的方法，其中抗生素是阿莫西林。
13.如權(quán)利要求1-12任一項(xiàng)的方法，其中生物學(xué)系統(tǒng)是人或動(dòng)物。
14.用于在生物學(xué)系統(tǒng)中減輕粘液上皮的細(xì)菌感染的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠減輕細(xì)菌感染的成分。
15.如權(quán)利要求14的方法，其中細(xì)菌感染的減輕發(fā)生在胃腸道中。
16.如權(quán)利要求15的方法，其中細(xì)菌感染是螺桿菌屬物種的感染。
17.如權(quán)利要求16的方法，其中螺桿菌屬物種是幽門螺桿菌。
18.如權(quán)利要求14-17任一項(xiàng)的方法，其中粘液溶解劑是N-乙酰半胱氨酸。
19.如權(quán)利要求14-18任一項(xiàng)的方法，其中初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分是牛初乳、牛超免疫乳、或牛初乳和/或牛超免疫乳成分。
20.如權(quán)利要求14-19任一項(xiàng)的方法，其中初乳是超免疫初乳。
21.如權(quán)利要求14-19任一項(xiàng)的方法，其中初乳和/或超免疫乳成分是乳鐵蛋白。
22.如權(quán)利要求21的方法，其中乳鐵蛋白是水解乳鐵蛋白。
23.如權(quán)利要求14-19任一項(xiàng)的方法，其中初乳和/或超免疫乳成分是一種或多種針對(duì)感染粘液上皮之細(xì)菌的特異性或交叉反應(yīng)性抗體。
24.如權(quán)利要求14-23任一項(xiàng)的方法，其中所述方法還包括施用抗生素。
25.如權(quán)利要求24的方法，其中抗生素是阿莫西林。
26.如權(quán)利要求14-25任一項(xiàng)的方法，其中生物學(xué)系統(tǒng)是人或動(dòng)物。
27.用于在生物學(xué)系統(tǒng)中減輕與粘液上皮的細(xì)菌感染有關(guān)的粘液上皮損傷的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠減輕細(xì)菌感染的成分。
28.如權(quán)利要求27的方法，其中損傷發(fā)生在胃腸道中。
29.如權(quán)利要求28的方法，其中細(xì)菌感染是螺桿菌屬物種的感染。
30.如權(quán)利要求29的方法，其中螺桿菌屬物種是幽門螺桿菌。
31.如權(quán)利要求27-30任一項(xiàng)的方法，其中粘液溶解劑是N-乙酰半胱氨酸。
32.如權(quán)利要求27-31任一項(xiàng)的方法，其中初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分是牛初乳、牛超免疫乳、或牛初乳和/或牛超免疫乳成分。
33.如權(quán)利要求27-32任一項(xiàng)的方法，其中初乳是超免疫初乳。
34.如權(quán)利要求27-32任一項(xiàng)的方法，其中初乳和/或超免疫乳成分是乳鐵蛋白。
35.如權(quán)利要求34的方法，其中乳鐵蛋白是水解乳鐵蛋白。
36.如權(quán)利要求27-32任一項(xiàng)的方法，其中初乳和/或超免疫乳成分是一種或多種針對(duì)感染粘液上皮之細(xì)菌的特異性或交叉反應(yīng)性抗體。
37.如權(quán)利要求27-36任一項(xiàng)的方法，其中所述方法還包括施用抗生素。
38.如權(quán)利要求37的方法，其中抗生素是阿莫西林。
39.如權(quán)利要求27-38任一項(xiàng)的方法，其中生物學(xué)系統(tǒng)是人或動(dòng)物。
40.用于在受試者中治療與粘液上皮的細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況的方法，所述方法包括如下步驟對(duì)受試者施用有效量的粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠治療與粘液上皮的細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況的成分。
41.如權(quán)利要求40的方法，其中所述疾病或狀況是與胃腸道細(xì)菌感染有關(guān)的疾病或狀況。
42.如權(quán)利要求41的方法，其中所述疾病或狀況是胃部炎癥、胃或十二指腸潰瘍、非潰瘍性消化不良、或與白細(xì)胞浸潤(rùn)有關(guān)的胃部狀況。
43.如權(quán)利要求40-42任一項(xiàng)的方法，其中細(xì)菌感染是螺桿菌屬物種的感染。
44.如權(quán)利要求43的方法，其中螺桿菌屬物種是幽門螺桿菌。
45.如權(quán)利要求40-44任一項(xiàng)的方法，其中粘液溶解劑是N-乙酰半胱氨酸。
46.如權(quán)利要求40-45任一項(xiàng)的方法，其中初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分是牛初乳、牛超免疫乳、或牛初乳和/或牛超免疫乳成分。
47.如權(quán)利要求40-46任一項(xiàng)的方法，其中初乳是超免疫初乳。
48.如權(quán)利要求40-46任一項(xiàng)的方法，其中初乳和/或超免疫乳成分是乳鐵蛋白。
49.如權(quán)利要求48的方法，其中乳鐵蛋白是水解乳鐵蛋白。
50.如權(quán)利要求40-46任一項(xiàng)的方法，其中初乳和/或超免疫乳成分是一種或多種針對(duì)感染粘液上皮之細(xì)菌的特異性或交叉反應(yīng)性抗體。
51.如權(quán)利要求40-50任一項(xiàng)的方法，其中所述方法還包括施用抗生素。
52.如權(quán)利要求51的方法，其中抗生素是阿莫西林。
53.如權(quán)利要求40-52任一項(xiàng)的方法，其中受試者是人或動(dòng)物。
54.包含粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的組合物。
55.如權(quán)利要求54的組合物，其中粘液溶解劑是N-乙酰半胱氨酸。
56.如權(quán)利要求54-55任一項(xiàng)的組合物，其中初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分是牛初乳、牛超免疫乳、或牛初乳和/或牛超免疫乳成分。
57.如權(quán)利要求54-56任一項(xiàng)的組合物，其中初乳是超免疫初乳。
58.如權(quán)利要求54-56任一項(xiàng)的組合物，其中初乳和/或超免疫乳成分是乳鐵蛋白。
59.如權(quán)利要求58的組合物，其中乳鐵蛋白是水解乳鐵蛋白。
60.如權(quán)利要求54-56任一項(xiàng)的組合物，其中初乳和/或超免疫乳成分是一種或多種針對(duì)定居于粘液上皮之細(xì)菌的特異性或交叉反應(yīng)性抗體。
61.如權(quán)利要求54-60任一項(xiàng)的組合物，其中所述組合物還包含抗生素。
62.如權(quán)利要求61的組合物，其中抗生素是阿莫西林。
63.如權(quán)利要求54-62任一項(xiàng)的組合物，其中所述組合物抑制粘液上皮被細(xì)菌定居和/或感染。
64.如權(quán)利要求63的組合物，其中細(xì)菌是螺桿菌屬物種。
65.如權(quán)利要求64的組合物，其中螺桿菌屬物種是幽門螺桿菌。
全文摘要
本發(fā)明涉及用于在生物學(xué)系統(tǒng)中抑制粘液上皮的細(xì)菌定居的方法。所述方法包括如下步驟對(duì)生物學(xué)系統(tǒng)施用有效量的粘液溶解劑和一種或多種初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在聯(lián)合粘液溶解劑時(shí)能夠抑制細(xì)菌定居的成分。
文檔編號(hào)A61K31/198GK1901924SQ200480027557
公開(kāi)日2007年1月24日 申請(qǐng)日期2004年8月9日 優(yōu)先權(quán)日2003年8月11日
發(fā)明者F·卡姆貝爾, R·布特勒, C·特蘭, H·胡恩, R·克珀 申請(qǐng)人:少年兒童及婦女健康服務(wù)公司, 阿德雷德研究創(chuàng)新股份有限公司