專利名稱：用作超聲造影劑的可重建微球組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明要求2003年10月31日提交的根據(jù)35U.S.C.§119(e)的美國臨時專利申請60/517,219的優(yōu)先權(quán)，其內(nèi)容被納入本文作為參考。
背景技術(shù)：
實芯和空芯微米顆粒和納米粒被越來越多地應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、藥學(xué)和診斷領(lǐng)域。當(dāng)注入血流時，這些顆?？捎米鞒暬夭栌嫵上裨煊皠詭椭庋塾^察內(nèi)部結(jié)構(gòu)如心臟和血管。這種造影劑還可用于檢查器官灌注例如評價梗死造成的損傷，用于檢查器官如肝，或用于區(qū)分正常和異常組織如腫瘤和囊腫。
當(dāng)兩種材料間界面處的聲阻抗不同時，可實現(xiàn)超聲造影。超聲成像法和用作造影劑的顆粒組合物更具體的描述參見(例如)，超聲造影劑、基本原理與臨床應(yīng)用(Ultrasound Contrast Agents，Basic Principles and ClinicalApplications)，Golderg等編，第2版，2001，Martin Dunitz Ltd。描述了用作超聲造影劑的實芯顆粒(也稱為“骨架”顆粒)例如參見美國專利5,558,857、美國專利5,670,135、美國專利5,674,468、美國專利6,264,959、美國專利6,177,062和美國專利5,565,215。
用作造影劑的空芯顆粒參見(例如)美國專利No.6,193,951、美國專利6,200,548、美國專利6,123,922、美國專利6,333,021、美國專利6,063,362、美國專利6,022,252、美國專利6,569,405、美國專利6,045,777和目前待批美國專利申請序列號09/637,516?？招竞蛯嵭绢w粒都可用于將藥學(xué)產(chǎn)品如藥物和/或其它治療或診斷組合物遞送至體內(nèi)靶器官或組織。通過擴散、通過顆粒的降解和通過用超聲能量原位破裂顆粒，藥物從顆粒中釋放。
用于可注射的超聲造影劑及藥物遞送顆粒的公知穩(wěn)定方法是冷凍干燥，也稱為凍干法。過去已經(jīng)描述了多種冷凍干燥然后穩(wěn)定和儲存顆粒懸浮液的方法，例如美國專利6,165,442中所述。然而，凍干過程中(或儲存過程中)懸浮液中的顆粒常常聚集。這種聚集是不希望的，尤其是在將凍干顆粒組合物通過靜脈注射給予患者的情況下。
對于由蛋白質(zhì)組成的顆粒，或具有蛋白質(zhì)外包衣的顆粒來說，聚集問題尤其尖銳。由合成聚合物和/或合成聚合物與蛋白質(zhì)的混合物構(gòu)成的顆粒也會遇到聚集問題。制備和凍干注射用顆粒的其它固有問題包括除去加工過程中使用的一種或多種有機溶劑。這在形成和制備空芯顆粒組合物中尤其重要。
因此，需要改進凍干微米顆粒和納米粒的制備和處理的方法，以降低聚集并更有效和方便地提供可重建的組合物。
發(fā)明概述本發(fā)明解決了這些和其它需要，在某些方面，提供了顆粒懸浮液和制備干燥顆粒組合物的方法，凍干、儲存和重建期間降低顆粒聚集或“粘在一起”的傾向。還提供了用水重建時可容易地分散的干燥顆粒組合物。
本發(fā)明部分基于兩個重要的發(fā)現(xiàn)。第一，申請人發(fā)現(xiàn)，在包含蛋白質(zhì)外包衣的聚合物顆粒懸浮液中加入特定量的無定形糖可大大降低顆粒粘在一起的趨勢，尤其是在顆粒懸浮液的凍干期間。然而，觀察到如果無定形糖存在的濃度足以降低或避免凍干顆粒組合物凍干或儲存時顆粒的聚集，阻礙了除去顆粒制造中使用的溶劑。第二，申請人發(fā)現(xiàn)在包含次優(yōu)化濃度(濃度足夠低以很好地除去溶劑，但太低以致于不完全抑制聚集)的無定形糖的顆粒懸浮液中加入特定量的叔丁醇有助于在顆粒懸浮液的凍干期間除去溶劑，尤其有助于從空芯顆粒的空芯中除去溶劑，并提供顆粒聚集極少或不聚集的穩(wěn)定的干燥凍干顆粒組合物。包含特定量的叔丁醇和/或無定形糖的懸浮液制備的干燥顆粒組合物用水重建時可容易地分散，使其理想地適合于診斷和/或治療應(yīng)用。因為這種易分散性，本文所述凍干顆粒懸浮液制備的干燥顆粒組合物尤其適合通過靜脈注射給予動物或人。
因此，一方面，本發(fā)明提供用于制備適合重建和體內(nèi)給予動物或人的干燥顆粒組合物的水性顆粒懸浮液，與常規(guī)懸浮液相比，該水性顆粒懸浮液克服了凍干期間顆粒的聚集傾向。懸浮液通常包含0.3-4mg的空芯顆粒(基于殼材料重量的重量)/毫升(mL)懸浮液，或0.3-56mg的實芯顆粒/毫升(mL)懸浮液，及一種或兩種以下成分叔丁醇和/或無定形糖(或兩種或多種無定形糖的混合物)。構(gòu)成懸浮液的叔丁醇和/或無定形糖的量取決于懸浮液是空芯顆粒還是實芯顆粒。對于實芯顆粒，懸浮液通常包含重量比(叔丁醇∶顆粒)范圍約2.14∶1到43∶1的叔丁醇，和/或重量比(總的無定形糖∶顆粒)范圍約0.02∶1到0.86∶1的無定形糖(或無定形糖的混合物)。對于空芯顆粒，懸浮液通常包含重量比(叔丁醇∶顆粒)范圍約30∶1到600∶1的叔丁醇，和/或重量比(總的無定形糖∶顆粒)范圍約0.3∶1到12∶1的無定形糖(或無定形糖的混合物)。
一般來說，大部分懸浮液是水。然而，懸浮液也可包含其它溶劑，例如通常在制備顆粒期間使用的溶劑和/或溶劑混合物，和/或一種或多種輔料，例如，緩沖劑、調(diào)節(jié)滲量濃度和張力的試劑以及填充劑。懸浮液還可包含一種或多種表面活性劑。然而，本文所述懸浮液一個重要的優(yōu)點是能夠處理和凍干懸浮液而顆粒不明顯聚集。因此，雖然懸浮液可包含表面活性劑和其它常規(guī)抗聚集劑，這些試劑的使用不是必需的。
在一個實施方式中，懸浮液包含叔丁醇和無定形糖。
另一方面，本發(fā)明提供制備加水時容易重建和分散的干燥顆粒組合物的方法。一方面，該方法包括將包含叔丁醇和/或一種或多種無定形糖的水性顆粒懸浮液冷凍至干燥，如上所述。通常在形成聚合物顆粒和/或蛋白質(zhì)顆粒之后和凍干之前，將叔丁醇和/或無定形糖(及任何任選的輔料和/或表面活性劑)加入到顆粒懸浮液中。例如，可使用常規(guī)技術(shù)，結(jié)合包含叔丁醇、無定形糖和/或任何需要的任選輔料和/或表面活性劑的水性輔料組合物，它們的濃度適合產(chǎn)生上述水性顆粒懸浮液，并將該懸浮液冷凍至干燥，以制備實芯或空芯顆粒。需要時，可在與水性輔料組合物混合之前，通過過濾或其它方式(例如離心)收集顆粒。需要或必需時，與水性輔料組合物混合之前，例如可通過滲濾或其它常規(guī)方式進行溶劑交換而不收集顆粒。
雖然該方法可用于具有聚集和/或粘在一起傾向的基本上任何類型的顆粒，發(fā)現(xiàn)該方法在制備雙層、空芯顆粒干燥組合物，例如美國專利6,193,951和共同待批美國專利申請序列號09/637,516(WO01/12071)所述的聚合物納米和/或微米顆粒包覆的雙層蛋白質(zhì)中尤其有利，它們的內(nèi)容被納入本文作為參考。
在本發(fā)明一個具體的實施方式中，在凍干懸浮液之前，將叔丁醇和一種或多種無定形糖單獨或與一種或多種輔料混合加入到上述形成的雙層空芯顆粒的水性懸浮液中。然后，將該懸浮液冷凍至干燥，得到加水時易于分散的干燥的顆粒組合物。如本領(lǐng)域已知的那樣，通過用特定氣體或氣體填充含干燥顆粒組合物的凍干室，包含干燥組合物的空芯顆?？商畛溆刑囟ǖ臍怏w或氣體混合物，例如氮氣(N2)、空氣或全氟碳。
另一方面，本發(fā)明提供干燥、易于分散和/或可重建的顆粒組合物。通過凍干包含本文所述叔丁醇和/或無定形糖的水性顆粒懸浮液，形成干燥的組合物，該干燥組合物通常包含顆粒及無定形糖或重量比約為0.3∶1到12∶1(對于空芯顆粒)或0.02∶1到0.86∶1(對于實芯顆粒)的兩種或多種無定形糖的混合物。干燥組合物可任選地包含一種或多種輔料和/或表面活性劑，如上所述?？稍趦龈芍皩⑤o料加到懸浮液中，或?qū)⑤o料加入到干燥、凍干的組合物中。當(dāng)輔料包含在組合物中時，通常使用治療和/或診斷應(yīng)用的顆粒組合物中常規(guī)用量的輔料。在一個具體的實施方式中，組合物包含以下成分，并指明大約的重量比(成分重量∶顆粒重量)
可將干燥組合物保裝于任何方便的包裝容器中，取決于具體應(yīng)用。例如，可成批包裝干燥組合物，允許根據(jù)需要測出所需的量。一般，將干燥組合物以單次用量包裝于密封的玻璃小瓶中，該玻璃XP的尺寸和構(gòu)型適合直接在小瓶中用水重建組合物以維持無菌條件?？蓪⒖招尽⑻畛錃怏w的顆粒的小瓶儲存在含填充氣體的頂空下的小瓶或其它類似容器中，以使芯中氣體在儲存期間不擴散出來。
附圖簡要說明

圖1A提供了柱形圖，說明如實施例1所述制備的空芯微球組合物的峰直徑；圖1B提供了柱形圖，說明如實施例1所述制備的空芯微球組合物的平均直徑；圖1C提供了柱形圖，說明如實施例1所述制備的空芯微球組合物的中位直徑；
圖1D提供了柱形圖，說明如實施例1所述制備的空芯組合物中直徑大于7微米的微球的體積百分比；圖2A提供了柱形圖，說明如實施例2所述制備的實芯微球組合物的峰直徑；圖2B提供了柱形圖，說明如實施例2所述制備的實芯微球組合物的平均直徑；圖2C提供了柱形圖，說明如實施例2所述制備的實芯微球組合物的中位直徑；圖2D提供了柱形圖，說明如實施例2所述制備的實芯組合物中直徑大于10微米的微球的體積百分比；發(fā)明詳述本發(fā)明提供形成顆粒組合物的方法和懸浮液，其顆粒聚集傾向比目前使用的方法和/或組合物低。該方法和懸浮液在形成顆粒組合物中是有用的，用于診斷成像、藥物遞送及其它醫(yī)學(xué)和藥學(xué)應(yīng)用。還提供了由這些方法形成的干燥顆粒組合物。這種干燥組合物在水中易于分散，使其理想地適用于診斷和治療應(yīng)用。這些方法尤其有利于處理含聚合物和/或蛋白質(zhì)的顆粒懸浮液，以及其它凍干、儲存和/或重建期間具有聚集或“粘在一起”傾向的顆粒。在它們的許多潛在應(yīng)用中，方法和懸浮液可用于制備含聚合物和/或蛋白質(zhì)的實芯或“骨架”顆粒，例如美國專利5,558,857、美國專利5,670,135、美國專利5,674,468、美國專利6,264,959、美國專利6,177,062和美國專利No.5,565,215中所述，可用于制備含聚合物和/或蛋白質(zhì)的空芯顆粒，例如美國專利6,193,951、美國專利6,200,548、美國專利6,123,922、美國專利6,333,021、美國專利6,063,362、美國專利6,022,252、美國專利6,569,405、美國專利6,045,777及共同待批美國專利申請序列號09/637,516(WO 01/12071)中所述。無論是實芯顆粒還是空芯顆粒，一般具有適合通過循環(huán)系統(tǒng)(避免被RES蓄積)的粒徑范圍。一般，顆粒粒徑小于10μm，收集構(gòu)成一種組合物的顆粒將具有較窄的平均粒徑分布。適合通過靜脈注射給予的顆粒一般大于95％的顆粒具有數(shù)均粒徑3-3.5微米，優(yōu)選大于99％的顆粒粒徑小于7微米。
這些方法廣泛應(yīng)用于制備含各種重建顆粒的干燥組合物。通常，提供了制備水性顆粒懸浮液的方法，該方法顯著地降低了顆粒聚集問題。該方法可用于凍干、儲存和/或重建期間具有聚集傾向的任何顆粒，通常包括將每毫升懸浮液含約0.3-4mg空芯顆粒(重量基于材料的重量)、或每毫升懸浮液含約0.3-56mg實芯顆粒及特定重量比(取決于懸浮液含空芯顆粒還是含實芯顆粒)的叔丁醇和無定形糖(或兩種或多種無定形糖的混合物)的一種或兩種的水性懸浮液冷凍至干燥。對于空芯顆粒，懸浮液中通常含有重量比(總重量無定形糖∶顆粒重量)約為0.3∶1到12∶1的無定形糖，和/或懸浮液中含有重量比(叔丁醇重量∶顆粒重量)約為30∶1到600∶1的叔丁醇。在特定的實施方式中，總的無定形糖的重量比約為0.75∶1到3∶1和/或叔丁醇的重量比約為60∶1到150∶1。
對于實芯顆粒，懸浮液中通常含有重量比約為0.02∶1到0.86∶1的無定形糖，和/或懸浮液中含有重量比約為2.14∶1到43∶1的叔丁醇。在特定的實施方式中，總的無定形糖的重量比約為0.07∶1到0.36∶1和/或叔丁醇的重量比約為4∶1到11∶1。
在特定的實施方式中，懸浮液包含上述重量比的叔丁醇和無定形糖。
“無定形糖”在這里是指雖然能夠結(jié)晶，但凍干時可獲得非結(jié)晶、無定形狀態(tài)的糖。如果暴露于超過其玻璃態(tài)轉(zhuǎn)變溫度(Tg)的溫度時，這些凍干的無定形糖自發(fā)地轉(zhuǎn)化為結(jié)晶形式。因此，本發(fā)明使用的無定形糖是具有較高玻璃態(tài)轉(zhuǎn)變溫度(Tg)，通常高于約20℃的無定形糖。適合用于本發(fā)明的無定形糖的具體例子包括但不限于，蔗糖、海藻糖和乳糖。顆粒形成或純化過程期間，可將無定形糖和/或叔丁醇作為添加劑加入到一種或多種帶有顆?；蚱渌纬深w粒的水性化合物的溶液中。更典型地，加入無定形糖和/或叔丁醇作為顆粒形成后與顆粒懸浮液混合的輔料或組合物溶液的一部分。
所述濃度范圍內(nèi)的無定形糖用作凍干、儲存和/或重建過程中的聚集抑制劑。在顯著低于所述范圍的無定形糖濃度下，顆粒聚集可在形成離散、可重建的顆粒組合物時導(dǎo)致問題。如果無定形糖濃度太高，則不能接受地阻礙了溶劑的除去。溶劑除去困難是制備空芯顆粒，例如雙層空芯蛋白質(zhì)包衣的聚合物顆粒中主要考慮的問題，如美國專利6,193,951和共同待批美國專利申請序列號09/637,516(WO01/12071)中所述。
使用所述濃度范圍的叔丁醇具有雙重優(yōu)點。在所述濃度范圍中，叔丁醇起降低顆粒聚集傾向同時增加溶劑除去的作用。當(dāng)叔丁醇與上述無定形糖聯(lián)用時，聚集效果降低最明顯。通常，凍干期間，叔丁醇幾乎可完全從懸浮液中除去，使其尤其適合用作制備適合動物和人體內(nèi)給予的干燥顆粒組合物的非聚集劑。也可使用DMSO、或DMSO和叔丁醇的混合物，達到類似效果。
水性顆粒懸浮液中也可加入其它輔料，作為輔料溶液的另一組成，或在顆粒形成后、形成期間或形成前加入。這些輔料可包括表面活性劑，例如泊洛沙姆或吐溫；填充劑如甘露醇、乳糖或甘氨酸；緩沖劑如醋酸鹽、檸檬酸鹽或磷酸鹽；坍塌溫度改性劑如右旋糖酐、聚乙二醇或糖類；結(jié)晶骨架成分如甘露醇或甘氨酸；張力和滲量濃度調(diào)節(jié)劑如甘露醇、甘氨酸或氯化鈉等。
可將形成的含上述重量比范圍的無定形糖和/或叔丁醇的顆粒懸浮液凍干，以形成干燥的、可重建顆粒組合物。凍干除去大部分水和叔丁醇及懸浮液中或顆粒內(nèi)存在的其它加工溶劑。通過將氣體注入凍干室中，空芯顆?？商畛溆袣怏w或氣體混合物。凍干組合物可方便地在小瓶或一些其它合適的容器中儲存和/或運輸。如果顆粒填充有氣體，可在填充顆粒所使用的氣體下儲存顆粒。使用前，可用水重建組合物，以形成具有生理上相容的滲量濃度和pH的離散的顆粒懸浮液。
在一個實施方式中，重建的懸浮液宜包含每毫升約0.3-6mg空芯顆?；蛎亢辽s0.3-84mg實芯顆粒(對于空芯顆粒，重量基于顆粒殼重量)的懸浮的顆粒。在另一個實施方式中，水性顆粒懸浮液、干燥凍干顆粒組合物和重建的顆粒組合物除顆粒外，還包含以下濃度比例的無定形糖和/或叔丁醇(對于水性顆粒懸浮液)、甘氨酸、聚乙二醇和/或泊洛沙姆188
本文所述方法尤其適合用于制備具有蛋白質(zhì)外層或殼的空芯、雙層顆粒，例如美國專利6,193,951和共同待批美國專利申請序列號09/637,516(WO01/12071)中所述，其內(nèi)容被納入本文作為參考。下述具體的示例性應(yīng)用集中在上述參考文獻中所述的可注射的微粒和納米粒組合物。然而，一般來說，可制備易于受不良的顆粒聚集引起的問題的任何類型的顆粒懸浮液，尤其是任何生物相容顆粒懸浮液，如本文所述。
在一個示例性實施方式中，構(gòu)成可凍干的水性懸浮液和干燥、可重建的組合物的顆粒具有封裝空芯的雙層殼。殼的外層可由蛋白質(zhì)或其它生物相容兩親材料如交聯(lián)白蛋白構(gòu)成。外層形成接觸血液和體內(nèi)組織的顆粒表面。內(nèi)層可由合成聚合物或合成的可生物降解聚合物如聚(D，L-丙交酯)構(gòu)成。為用作超聲造影劑，用氣體如空氣、氮氣、全氟碳填充顆粒的芯。構(gòu)成顆粒，使得構(gòu)成懸浮液或組合物的大部分顆粒具有約1-10微米范圍內(nèi)的粒徑，以通過體內(nèi)毛細血管系統(tǒng)?；蛘?，可構(gòu)成粒徑低于1μm的顆粒，例如200-800nm，用于成像或?qū)⑺幬锘钚詣┻f送至淋巴結(jié)系統(tǒng)。
由于這些顆粒具有構(gòu)成外層和內(nèi)層的殼，可處理層用作不同功能。暴露的外層用作顆粒與人體間的生物界面。因此，外層通常包含兩性(即具有疏水性和親水性)生物相容材料。外層也可由一種或多種合成的可生物降解聚合物構(gòu)成。除具有兩性外，外層還具有允許電荷和化學(xué)修飾的化學(xué)特征。內(nèi)層包含可生物降解聚合物，可以是合成的可生物降解聚合物。內(nèi)層提供或增加外層提供不足的顆粒的機械性質(zhì)或藥物遞送性質(zhì)。因為外層提供了生物相容界面，可選擇聚合物而不受表面性質(zhì)需要的限制?？筛鶕?jù)限定所需機械性質(zhì)的彈性模量和伸長度來選擇聚合物。典型的適合用作雙層顆粒內(nèi)層的可生物降解聚合物如美國專利6,193,951和共同待批美國專利申請序列號09/637,516(WO 01/12071)所述，其內(nèi)容被納入本文作為參考。其它合適的可生物降解聚合物如Langer等(1983)Macromol.Chem.Phys.C23，61-125所述，被納入本文作為參考。這些聚合物也可用于制備實芯顆粒，任選地用上述生物相容、任選地兩性材料的外層包覆。
對于用作超聲造影劑或靶向、超聲釋放藥物載體試劑的顆粒，內(nèi)層厚度通常不大于滿足最小機械性質(zhì)或藥物攜帶/遞送性質(zhì)的必需厚度。這可最大程度地增加顆粒的內(nèi)部氣體體積。顆粒內(nèi)氣體體積越大，顆?；夭òl(fā)生性質(zhì)越好。顆粒外層和內(nèi)層的組合厚度部分取決于顆粒所需的機械性質(zhì)和藥物攜帶/遞送性質(zhì)，但一般總的殼厚度范圍為10-750nm。
簡言之，可通過包括以下一般步驟的方法形成顆粒。制備兩種溶液，第一種是外層生物材料的水溶液。第二種是用于形成內(nèi)層的聚合物的溶液(“聚合物溶液”)，在用于聚合物的溶劑(“聚合物溶劑”)的相對揮發(fā)性水不混溶液體中，和用于聚合物的非溶劑(“聚合物非溶劑”)的相對非揮發(fā)性水不混溶液體中。聚合物溶劑通常是C5-C7酯，例如醋酸異丙酯。聚合物非溶劑通常是C6-C20烴，例如癸烷、十三烷、環(huán)己烷、環(huán)辛烷等。在聚合物溶液中，將聚合物和水不混溶溶劑混合在一起，攪拌以使聚合物充分溶解且兩種溶劑混溶。將聚合物溶液(有機相)緩慢加入生物材料溶液(水相)中，攪拌以形成乳劑。該步驟中采用的溶液的相對濃度和有機相與水相的比率以及攪拌程度基本上決定了最終的顆粒粒徑和殼厚度。乳劑完全混合后，將其分散在水中，通常輕微攪拌下加熱至約30-35℃。將交聯(lián)劑如碳二亞胺或雙官能團醛如戊二醛加入到混合物中，與生物材料外膜反應(yīng)，使其水不溶性并穩(wěn)定外層。
新形成的外層的內(nèi)芯包含含有聚合物、聚合物溶劑和聚合物非溶劑的溶液，各個具有不同的揮發(fā)性。揮發(fā)性更高的聚合物溶劑蒸發(fā)或被稀釋，在揮發(fā)性較低的非溶劑存在下聚合物沉淀。因此，在具有生物材料(外)層的內(nèi)表面的界面形成沉淀的薄膜。隨著稀釋、蒸發(fā)等導(dǎo)致?lián)]發(fā)性更高的聚合物溶劑濃度的降低，沉淀形成顆粒的內(nèi)層。形成的顆粒芯主要包含聚合物非溶劑。
在這一階段，收集形成的顆粒，并將其配制入含有空芯顆粒所述濃度范圍的叔丁醇和一種或多種無定形糖中的一種或兩種、以及任何任選所需的輔料和/或表面活性劑的水懸浮液中?？蓪㈦x心、過濾或其它方式收集的形成顆粒懸浮在含所需量的叔丁醇、無定形糖及任選地輔料和表面活性劑的水溶液中，制備水懸浮液。或者，例如通過滲濾或稀釋(或其它方式或方式的組合)，將形成顆粒的溶劑系統(tǒng)改為懸浮介質(zhì)，和溶解在水性溶劑系統(tǒng)中的叔丁醇、無定形糖和任何所需的輔料和/或表面活性劑，以提供本發(fā)明水性顆粒懸浮液。
然后冷凍干燥該水懸浮液，得到通常為凍干塊形式的干燥、可重建的顆粒組合物。凍干的含水顆粒懸浮液中包括無定形糖可將凍干產(chǎn)物中的顆粒聚集減至最低程度。包含叔丁醇可進一步阻制凍干、干燥組合物重建后發(fā)生的顆粒聚集。無定形糖保留在干燥、凍干顆粒組合物中，而大部分叔丁醇被除去。無論是在顆粒形成、懸浮液加工期間或是剛好在凍干前加入到顆粒懸浮液中作為輔料，這些添加劑的使用傾向于提供具有高孔隙率和表面積的凍干塊。這些添加劑還可通過提供待除去的水和溶劑通道，增加凍干期間的干燥速率。它們還可使凍干塊具有比不含它們制備的凍干產(chǎn)物高的表面積，有利于后續(xù)的重建步驟。
如美國專利6,193,951和共同待批美國專利申請序列號09/637,516(WO01/12071)所述，通過將形成外表面的生物材料的pH維持在高于或低于等電點(Pi)至少一個到兩個pH單位，可進一步將形成顆粒期間這些雙層顆粒的聚集減至最低程度?；蛘撸墒褂帽砻婊钚詣┰赑i或接近Pi配制顆粒，以穩(wěn)定抵抗過度聚集。在任一種情況下，注射入受試者的干燥、凍干組合物的緩沖系統(tǒng)應(yīng)是生理學(xué)上相容的。
可以每容器含總重量約1-50mg空芯顆?；?-700mg實芯顆粒的單位容器形式提供干燥、凍干的顆粒組合物。用作超聲造影劑成像循環(huán)系統(tǒng)的顆粒通常具有平均粒徑約3微米，粒徑范圍約1-10微米。通常，不到5％的顆粒粒徑大于約10微米?；蛘撸糜诔暢上窳馨拖到y(tǒng)的顆粒具有平均粒徑范圍約200-800nm，如共同待批美國專利申請序列號09/637,516(WO01/12071)中所述。
本發(fā)明一個具體實施例中的顆粒具有交聯(lián)白蛋白的外層。白蛋白可以是與二醛交聯(lián)劑如戊二醛交聯(lián)的人血清白蛋白。顆粒還具有聚(D，L-丙交酯)的內(nèi)層，包封填充有氣體或氣體混合物(例如，空氣、氮氣、全氟碳等)的空芯。為了諸如遞送藥物或一些其它藥物活性劑的應(yīng)用，芯可填充有藥物?；蛘?，內(nèi)層還可包含藥物，如果藥物可在形成內(nèi)層期間與可生物降解的聚合物共沉淀，如下所述。
在一個具體的實施方式中，將戊二醛交聯(lián)的白蛋白/聚丙交酯顆粒配制入含所述重量比的叔丁醇、所述重量比的蔗糖和聚乙二醇、甘氨酸和泊洛沙姆(重量比如下所述)的水性懸浮液中，使得凍干后，干燥凍干組合物中的顆粒包含在聚乙二醇、甘氨酸、蔗糖和泊洛沙姆(如泊洛沙姆188)的骨架中。泊洛沙姆是與數(shù)字后綴聯(lián)用的非專有名詞，用于食品、藥品或化妝品中各種獨特的產(chǎn)物鑒定。
重建時，產(chǎn)物通常每毫升包含約0.3-6mg的空芯顆粒或0.3-84mg的實芯顆粒，然而應(yīng)理解，可加入任何量的重建介質(zhì)以提供超過本文所述的濃度范圍。重建介質(zhì)還可以是等滲的，使得重建產(chǎn)物的最終滲量濃度基本上不取決于使用的重建介質(zhì)的體積。
在形成具有交聯(lián)白蛋白外層和聚(D，L-丙交酯)內(nèi)層的空芯顆粒的一個具體實施方式
中，首先制備包含構(gòu)成外層的白蛋白的pH調(diào)節(jié)的水溶液。在一個實施方式中，pH約為3-9，更優(yōu)選約為4。白蛋白可以是人血清白蛋白?？杉尤胨?，例如鹽酸來調(diào)節(jié)pH。白蛋白濃度通常約為4-10重量％。白蛋白濃度超過約4重量％時，有利于形成單分散乳劑。白蛋白濃度超過10重量％時，所得顆粒的聚集可成為問題。
然后，制備包含聚(D，L-丙交酯)和溶解在醋酸異丙酯(聚合物溶劑)中的環(huán)辛烷(聚合物非溶劑)的有機溶劑，并乳化入水溶液中。在一個具體的實施方式中，聚(D，L-丙交酯)的固有粘度應(yīng)大于約0.15d Lg-1(0.5％氯仿溶液，30℃)，以維持顆粒完整性。聚(D，L-丙交酯)的濃度約為溶液重量的0.2-3％，以維持足夠的顆粒壁強度，不導(dǎo)致凍干期間除去環(huán)辛烷聚合物非溶劑的過度困難。醋酸異丙酯與環(huán)辛烷的重量比約為30∶1到3∶1。較高的比率有利于較厚和/或較強的顆粒壁。然而，比率太高可導(dǎo)致壁太厚而影響空芯顆粒的芯的形成。使用過量的環(huán)辛烷可導(dǎo)致過度易碎的顆粒壁，在循環(huán)系統(tǒng)的流體靜力環(huán)境中破裂。
使用標(biāo)準(zhǔn)乳化技術(shù)如膜乳化，將有機溶液乳化入水溶液中。通常，約30℃，在足以提供約4微米大小(測量容積的)微滴的流速和壓力條件下進行乳化。有機與水成分的比率約為0.3∶1到3∶1，更優(yōu)選約為1.62∶1。接近該范圍上限的比率有利于顆粒單分散性。然而，使用過高的比率可產(chǎn)生對于加工來說是太厚的乳劑。在下限以下，所需容器的體積成為限制因素，雖然如果可獲得合適的容器，可使用更低的比率。
然后，將該乳劑稀釋約3-18倍，優(yōu)選約4-6倍(攪拌)，形成含交聯(lián)劑如戊二醛的第二水溶液。第二水溶液中包含的交聯(lián)劑的濃度足以使所得稀釋的懸浮液中重量比(交聯(lián)劑∶白蛋白)約為0.05∶1到1∶1。對于戊二醛，最終交聯(lián)劑與白蛋白的重量比約為0.2∶1產(chǎn)生良好結(jié)果。將該水溶液的pH調(diào)節(jié)至所需用途，例如pH約為6-10，優(yōu)選約為pH 7-8。
稀釋后，30℃下繼續(xù)攪拌直到醋酸異丙酯通過蒸發(fā)基本上除去。然后，將泊洛沙姆188溶解在水懸浮液中，一般溶解到濃度約為0.25重量％。
然后，將懸浮液最后過濾以除去聚集物和聚合物碎片，并用含水泊洛沙姆188溶液(0.25重量％)滲濾以除去未反應(yīng)的戊二醛和未結(jié)合的白蛋白。
可用含水泊洛沙姆188溶液稀釋來調(diào)節(jié)懸浮液的體積，以達到所需的顆粒濃度范圍0.09-1.2重量％(0.9-12mg/ml懸浮液)。在一個具體的實施方式中，將顆粒濃度調(diào)節(jié)至0.5重量％。
單獨制備濃縮的水性輔料溶液，并加入到顆粒懸浮液中，產(chǎn)生本發(fā)明水性顆粒懸浮液。水性輔料溶液包含叔丁醇和/或一種或多種無定形糖，在一個具體的實施方式中是蔗糖，濃度足以使所得重量比(成分重量∶顆粒重量)為30∶1到600∶1(叔丁醇)和0.3∶1到12∶1(蔗糖)，如上所述。在一個具體的實施方式中，水性輔料溶液包含重量比分別為105∶1和1.5∶1的叔丁醇和蔗糖。
水性輔料溶液還包含一種或多種輔料和/或表面活性劑，如上所述。在一個具體的實施方式中，濃縮的水性輔料溶液還包含平均分子量約為2200-8000(優(yōu)選約為3400；PEG3350)的聚乙二醇(PEG)、泊洛沙姆(優(yōu)選泊洛沙姆188)和甘氨酸，濃度足以使所得水性懸浮液中的重量比(成分∶顆粒)分別約為6∶1到300∶1(PEG)，0∶1到60∶1(泊洛沙姆)和0∶1到75∶1(甘氨酸)。在一個具體的實施方式中，濃縮的水性輔料溶液中包含這些輔料，以使所得水性顆粒懸浮液中的重量比分別為17.3∶1(PEG)、3.6∶1(泊洛沙姆)和7.2∶1(谷氨酸)。
冷卻條件下，按照約1份懸浮液對2份濃縮的輔料溶液的比例，將顆粒懸浮液和濃縮的輔料溶液混合到一起。然而，將懸浮液分裝入容器如小瓶中，冷凍至干燥，降低的氮氣壓力下塞蓋。小瓶通常包含有用單位量的顆粒，通常約為2-200mg的空芯顆?；?-2800mg的實芯顆粒/克干燥、凍干組合物。
加水(或其它生理學(xué)上可接受的緩沖液)可重建凍干組合物，形成滲量濃度約為200-300mOs/kg的生理學(xué)上可接受的、可注射的微粒懸浮液。包含空芯顆粒的本實施方式干燥、凍干的組合物具有以下組分的濃度比率
典型的包含有用單位量的空芯顆粒的干燥、凍干組合物具有以下組成
小瓶或其它包含干燥、凍干顆粒組合物的封閉和/或密封容器具有良好的儲存期，用水易于重建以形成可注射的超聲成像劑。對于空芯顆粒來說，重建的懸浮液可包含以下濃度的以下成分
優(yōu)選通過推注或通過輸注將重建的產(chǎn)物注射入受試者的血流中，然后與一種或多種診斷成像和/或靶向藥物或藥物遞送方法聯(lián)合使用。
實施例以示例性方式提供下面的實施例，而不是限制本發(fā)明。
實施例1本實施例說明無定形糖蔗糖和/或叔丁醇降低空芯的戊二醇交聯(lián)的白蛋白/聚丙交酯微球在凍干和重建期間聚集的能力。
制備環(huán)辛烷填充的空芯白蛋白/聚丙交酯微球通過將聚合物溶解在溶劑混合物中，制備包含48.4gm聚(D，L-丙交酯)(0.5％氯仿中的固有粘度0.41dL/gm，30℃)、0.666kg環(huán)辛烷和4.450kg醋酸異丙酯的有機溶液。攪拌下，將該有機溶液緩慢加入到3.25kg已用10％HCl調(diào)節(jié)pH至4.0的5重量％USP級人血清白蛋白溶液中。保持溫度30℃，將所得混合液循環(huán)通過燒結(jié)的不銹鋼濾器板(frit)。該過程產(chǎn)生平均體積液滴大小約為4微米的水包油乳劑。制備含30kg 0.1％戊二醛水溶液的水溶液。用1NNaOH將pH調(diào)節(jié)至7.2-8.0。然后，攪拌下，將約6.8kg乳劑加入到浴中。于30℃連續(xù)攪拌浴，干燥氮氣流越過混合物，直到通過蒸發(fā)基本上除去醋酸異丙酯(過夜)。除去醋酸異丙酯后，將懸浮液冷卻至18℃，將泊洛沙姆188加入到所得懸浮液中，加入的量足以產(chǎn)生最終濃度0.25重量％。深層過濾該懸浮液，以除去微囊聚集物和聚合物碎片。為除去過量的戊二醛、形成的鹽和未結(jié)合的白蛋白，濃縮懸浮液，然后使用0.65微米中空纖維TFF，通過對約7體積0.25重量％的泊洛沙姆188水溶液進行滲濾來洗滌。用水性泊洛沙姆188(0.25重量％)稀釋滲濾的懸浮液，產(chǎn)生微球濃度為5mg微球殼重量/克懸浮液的懸浮液。用Malvern 2000粒徑分析儀測定稀釋的懸浮液中微球的粒徑分布，發(fā)現(xiàn)體積峰粒徑為3.86微米。
空芯微球制劑和凍干使用下表所列的成分和濃度(按重量計)，分別制備四種不同的水溶液用作凍干輔料。
然后，以1份重量懸浮液對2份重量輔料溶液的比率，用四種制備的輔料配制稀釋的微球懸浮液。將所得制劑各自以3ml/小瓶分裝入10ml血清瓶中，然后用FTS Dura-Stop凍干機且氮氣下加蓋，凍干形成干燥塊。該凍干過程中，微球的環(huán)辛烷芯被除去，形成空芯氮氣填充的微球。
現(xiàn)在干燥的懸浮物的小瓶在2ml去離子水中重建，然后用Malvern 2000粒徑分析儀測定懸浮液中微球的粒徑分布。粒徑測定的結(jié)果如下表所示。表中衍生的統(tǒng)計學(xué)數(shù)據(jù)是基于微球粒徑的體積頻率直方圖并代表3個小瓶的平均值。
結(jié)果微球的聚集物將被粒徑分析儀表示為單個較大的微球。如果微球的聚集物減少，這將被粒徑測定反映為向下位移。比較表中的粒徑直方圖統(tǒng)計學(xué)數(shù)據(jù)(見圖1A-1D)，揭示向較小粒徑微球的趨勢，因而在含蔗糖或叔丁醇的懸浮液制劑(制劑2和3)中的聚集比不含上述成分的制劑(制劑4)中的聚集少。而且，當(dāng)同時存在蔗糖和叔丁醇(制劑1)時，對降低微球聚集似乎有附加的作用。
對制劑1和制劑4的顯微鏡觀察定性地證實制劑4中存在的微球聚集度比制劑1要大得多。
實施例2本實施例證明無定形糖蔗糖和/或叔丁醇降低實芯、白蛋白包覆的聚丙交酯微球在凍干和重建期間聚集的能力。
制備白蛋白包覆的實芯聚丙交酯微球用去離子水稀釋，從25％USP級人血清白蛋白(HAS)溶液制備6％水溶液。用6M HCl將溶液的pH調(diào)節(jié)至4。獨立地，通過將聚合物溶解于醋酸異丙酯中，制備10％的聚(D，L-丙交酯)溶液。保持溫度30℃，攪拌下將42mL有機溶液緩慢加入到25ml制備的HAS溶液中。然后，將所得粗o/w乳劑循環(huán)通過不銹鋼燒結(jié)的金屬濾器。接著，用去離子水將乳劑稀釋成4倍體積，攪拌下加入到400ml保持于30℃的去離子水中。加入稀釋的乳劑時，將1ml 25％的戊二醛和2ml 1當(dāng)量的NaOH立即加入到攪拌浴中。繼續(xù)攪拌約3小時，直到醋酸異丙酯蒸發(fā)。3小時后，將5ml 15％的泊洛沙姆188溶液加入到微球懸浮液中。離心收集微球，并用0.25％泊洛沙姆188水溶液洗滌3次。用Malvern 2000粒徑分析儀測定微球的粒徑，發(fā)現(xiàn)體積峰粒徑為4.34微米。
實芯聚丙交酯微球制劑和凍干用0.25％泊洛沙姆188稀釋實芯聚丙交酯微球懸浮液，得到濃度約為2.5E+9顆粒/ml的微球。獨立地，用下表所列的成分和濃度(按重量計)，制備4種不同的水溶液用作凍干輔料。
然后，以1份重量懸浮液對2份重量輔料溶液的比率，用4種制備的輔料配制稀釋的微球懸浮液。將所得制劑各自分裝入10ml血清瓶中，然后用FTSDura-Stop凍干機且氮氣下加蓋，凍干形成干燥塊。
粒徑測定凍干后，將小瓶在2ml去離子水中重建，用Malvern 2000粒徑分析儀測定懸浮液中微球的粒徑分布。粒徑測定的結(jié)果如下表所示。表中衍生的統(tǒng)計學(xué)數(shù)據(jù)是基于微球粒徑的體積頻率直方圖并代表3個小瓶的平均值。
結(jié)果微球的聚集物將被粒徑分析儀表示為單個較大的微球。如果微球的聚集物減少，這將被粒徑測定反映為向下位移。比較表中的粒徑直方圖統(tǒng)計學(xué)數(shù)據(jù)(見圖2A-2D)，揭示向較小粒徑微球的趨勢，因而在含蔗糖或叔丁醇的懸浮液制劑(制劑2和3)中的聚集比不含上述成分的制劑(制劑4)中的聚集少。而且，當(dāng)同時存在蔗糖和叔丁醇(制劑1)時，對降低微球聚集似乎有附加的作用。
實施例3本實施例證明蔗糖濃度對從空芯微球的芯中除去殘留溶劑的作用。
如實施例1所述制備環(huán)辛烷填充的微球。使用下表所列成分和濃度(按重量計)，蔗糖濃度增加，分別制備4種水溶液用作凍干輔料。
然后，以1份重量懸浮液對2份重量輔料溶液的比率，用4種制備的輔料配制稀釋的微球懸浮液。將所得制劑各自以3ml/小瓶分裝入10ml血清瓶中，然后用FTS Dura-Stop凍干機且氮氣下加蓋，凍干形成干燥塊。該凍干過程中，微球的環(huán)辛烷芯被除去，形成空芯氮氣填充的微球。
氣相色譜法分析產(chǎn)物小瓶中殘留的環(huán)辛烷。結(jié)果如下表所示
實施例4本實施例證明示叔丁醇對從空芯微球的芯中除去殘留溶劑的作用。
如實施例1所述制備環(huán)辛烷填充的微球。使用下表所列成分和濃度(按重量計)，叔丁醇濃度增加，分別制備5種水溶液用作凍干輔料。
然后，以1份重量懸浮液對2份重量輔料溶液的比率，用5種制備的輔料配制稀釋的微球懸浮液。將所得制劑各自以3ml/小瓶分裝入10ml血清瓶中，然后用Virtis Ultra-35XL凍干機且氮氣下加蓋，凍干形成干燥塊。該凍干過程中，微球的環(huán)辛烷芯被除去，形成空芯氮氣填充的微球。
氣相色譜法分析產(chǎn)物管中殘留的環(huán)辛烷。結(jié)果如下所示
提出上述本發(fā)明具體實施方式
和實施例是為了示例和說明的目的，雖然已由某些上述實施例闡明本發(fā)明，不應(yīng)理解為被這些實施例所限制。它們不是排它性的或?qū)⒈景l(fā)明限于所述的精確形式，很明顯根據(jù)上述說明，許多改進、實施方式和變化是可能的。本發(fā)明的范圍包括本文所述類別領(lǐng)域，由所附權(quán)利要求書及其等價形式限定。
權(quán)利要求
1.一種水性顆粒懸浮液，所述顆粒懸浮液包含許多顆粒，量為0.3-4毫克/毫升懸浮液；一種或多種無定形糖，與空芯顆粒的總重量比(無定形糖重量∶顆粒重量)為0.3∶1到12∶1(基于顆粒的殼重量)，或與實芯顆粒的總重量比為0.02∶1到0.86∶1；和叔丁醇，與空芯顆粒的重量比(叔丁醇∶顆粒)為30∶1到600∶1，與實芯顆粒的重量比為2∶1到43∶1。
2.如權(quán)利要求1所述的顆粒懸浮液，其特征在于，所述無定形糖選自蔗糖、海藻糖、乳糖及其組合。
3.如權(quán)利要求1所述的顆粒懸浮液，還包含表面活性劑，所述表面活性劑與空芯顆粒的重量比(表面活性劑∶顆粒)為0.01∶1到60∶1，或與實芯顆粒的重量比為0.01∶1到4.5∶1。
4.如權(quán)利要求1所述的顆粒懸浮液，還包含水溶性聚合物，所述水溶性聚合物與空芯顆粒的重量比(水溶性聚合物∶顆粒)為6∶1到300∶1，或與實芯顆粒的重量比為0.4∶1到22∶1。
5.如權(quán)利要求1所述的顆粒懸浮液，還包含滲量濃度調(diào)節(jié)劑，所述滲量濃度調(diào)節(jié)劑與空芯顆粒的重量比(試劑∶顆粒)為0.01∶1到75∶1，或與實芯顆粒的重量比為0.01∶1到6∶1。
6.如權(quán)利要求1所述的顆粒懸浮液，其中所述顆粒是空芯的，所述組合物還包含重量比(聚合物∶顆粒)為6∶1到300∶1的水溶性聚合物；重量比(表面活性劑∶顆粒)為0∶1到60∶1的表面活性劑；和重量比(試劑∶顆粒)為0∶1到75∶1的滲量濃度調(diào)節(jié)劑。
7.如權(quán)利要求4或6所述的顆粒懸浮液，其特征在于，所述水溶性聚合物選自中等分子量的聚乙二醇、低到中等分子量的聚乙烯吡咯烷酮及其組合。
8.如權(quán)利要求3或6所述的顆粒懸浮液，其特征在于，所述表面活性劑是泊洛沙姆。
9.如權(quán)利要求5或6所述的顆粒懸浮液，其特征在于，所述滲量濃度調(diào)節(jié)劑是甘氨酸。
10.如權(quán)利要求1或6所述的顆粒懸浮液，其特征在于，所述顆粒是空芯雙層顆粒。
11.如權(quán)利要求10所述的顆粒懸浮液，其特征在于，所述空芯雙層顆粒包括包封空芯的殼，其中，所述殼包括可生物降解聚合物的內(nèi)層和交聯(lián)兩性材料的外層。
12.如權(quán)利要求11所述的顆粒懸浮液，其特征在于，所述外層包含戊二醛交聯(lián)白蛋白。
13.如權(quán)利要求11所述的顆粒懸浮液，其特征在于，所述內(nèi)層包含聚(D，L-丙交酯)。
14.如權(quán)利要求11所述的顆粒懸浮液，其特征在于，所述空芯雙層顆粒的平均粒徑約為1-10微米。
15.如權(quán)利要求11所述的顆粒懸浮液，其特征在于，所述空芯雙層顆粒的平均粒徑約為200-800納米。
16.如權(quán)利要求11所述的顆粒懸浮液，其特征在于，所述內(nèi)層包含聚(D，L-丙交酯)；所述外層包含戊二醛交聯(lián)白蛋白；和所述空芯雙層顆粒的平均粒徑約為1-10微米。
17.如權(quán)利要求11所述的顆粒懸浮液，其特征在于，所述內(nèi)層包括聚(D，L-丙交酯)；所述外層包括戊二醛交聯(lián)白蛋白；和所述空芯雙層顆粒的平均粒徑約為200-800納米。
18.通過將權(quán)利要求1-17中任一項所述的顆粒懸浮液冷凍至干燥制備的顆粒組合物。
19.一種干燥組合物，所述組合物包含許多空芯微粒，含量為3.3重量％；聚乙二醇3350，含量為56.6重量％；泊洛沙姆188，含量為11.7重量％；蔗糖，含量為4.9重量％；和甘氨酸，含量為23.5％。
20.如權(quán)利要求19所述的干燥組合物，其特征在于，所述空芯微粒包括雙層殼，所述雙層殼包括聚(D，L)丙交酯的內(nèi)層和戊二醛交聯(lián)白蛋白的外層。
21.如權(quán)利要求19或20所述的干燥組合物，其特征在于，所述空芯微粒的空芯填充有氣體或氣體混合物。
22.如權(quán)利要求21所述的干燥組合物，其特征在于，所述氣體是氮氣。
23.如權(quán)利要求22所述的干燥組合物，其特征在于，所述干燥組合物被包裝在氮氣下密封的具塞玻璃小瓶中。
24.如權(quán)利要求23所述的干燥組合物，其特征在于，所述玻璃小瓶包含2.5-7毫克微粒、86.7毫克聚乙二醇3350、18毫克泊洛沙姆188、7.5毫克蔗糖和36毫克甘氨酸。
25.制造聚合物和/或蛋白質(zhì)顆粒的干燥組合物的方法，所述方法包括將權(quán)利要求1-17中任一項所述的顆粒懸浮液冷凍至干燥。
26.一種制造適用于超聲成像的空芯雙層微球的干燥組合物的方法，所述方法包括以下步驟(i)將包含0.9重量％聚(D，L-丙交酯)、12.9重量％環(huán)辛烷和86.2重量％醋酸異丙酯的有機溶液用包含5重量％人血清白蛋白的第一水溶液乳化，得到水包油乳劑；(ii)將所述乳劑用包含戊二醛的第二水溶液稀釋3-18倍，戊二醛的量足以使重量比(戊二醛重量∶白蛋白重量)為0.2∶1；(iii)攪拌步驟(ii)的結(jié)果直到基本上除去醋酸異丙酯；(iv)將泊洛沙姆188加入到(iii)的結(jié)果中，加入的量足以產(chǎn)生0.25重量％的濃度；(v)用泊洛沙姆188的水溶液(0.25重量％)對(iv)的結(jié)果進行滲濾，以除去戊二醛和未結(jié)合的白蛋白；(vi)用泊洛沙姆188的水溶液(0.25重量％)稀釋(v)的結(jié)果，以產(chǎn)生微球濃度為2.5-7毫克微球(基于其殼重量)/克懸浮液的懸浮液；(vii)在步驟(vi)的結(jié)果中加入包含26.25重量％叔丁醇、0.375重量％蔗糖、1.8重量％甘氨酸、4.335重量％聚乙二醇3350和0.775重量％泊洛沙姆188的水性輔料溶液，加入量足以產(chǎn)生包含1.7毫克微粒(基于微球殼重量)/克懸浮液的水性微粒懸浮液；和(viii)將步驟(vii)的水性微粒懸浮液冷凍至干燥。
27.如權(quán)利要求26所述的方法，還包括用氮氣回填微球的步驟。
全文摘要
提供了用于制備易于重建的微球或納米球的干燥組合物的方法和懸浮液。該干燥組合物可用于診斷應(yīng)用如超聲成像。該懸浮液包含特定量的叔丁醇和/或無定形糖(或無定形糖的混合物)作為關(guān)鍵成分，以降低構(gòu)成懸浮液的顆粒的聚集。
文檔編號A61K9/127GK1893877SQ200480032532
公開日2007年1月10日 申請日期2004年11月1日 優(yōu)先權(quán)日2003年10月31日
發(fā)明者T·B·奧托波尼, R·E·肖特 申請人:博英特生物醫(yī)藥股份有限公司