專(zhuān)利名稱：用于治療屈光手術(shù)導(dǎo)致的眼表面干燥的化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及人和獸醫(yī)醫(yī)學(xué)，特別涉及用于治療眼睛疾病的化合物。
現(xiàn)有技術(shù)屈光(photorefractive)手術(shù)是用于校正人眼中屈光缺陷的手術(shù)方法，其基于改變角膜的前表面形狀。受激子激光屈光性角膜切除術(shù)(excimer laserphotorefractive keratectomy)(PRK)和激光原位角膜磨鑲術(shù)(laser-assistedin situ keratomileusis)(LASIK)是現(xiàn)今最常用于校正近視的方法。干眼癥狀是經(jīng)歷該類(lèi)型手術(shù)的患者描述的最常見(jiàn)的主觀長(zhǎng)期問(wèn)題。Hovanesian(參見(jiàn)，Hovanesian JA，Shah SS，Maloney RK.(2001)Symptoms of dry eye andrecurrent erosion syndrome after refractive surgery.J.Cataract Refract.Surg.27577-584)對(duì)231名PRK患者和550名LASIK患者進(jìn)行的研究表明這些患者中干眼癥狀的發(fā)病率分別為43％和48％，所述癥狀主要在早晨醒來(lái)后出現(xiàn)。
經(jīng)歷LASIK手術(shù)的患者中干眼的主觀癥狀的高發(fā)生率已經(jīng)被解釋成由于這些患者中反射淚液分泌減少的原因。不同作者已經(jīng)測(cè)量了LASIK后淚液產(chǎn)生和淚液清除速率(參考Benitez-del-Castillo JM，del Rio T，Iradier T，Hernandez JL，Castillo A和Garcia-Sanchez J.(2001)Decrease in tearsecretion and corneal sensitivity after laser in situ Keratomileusis.Cornea 2030-32.Toda I，Asano-Kato N，Komai-Hori Y，Tsubota K.(2001)Dry eye after laser in situ keratomileusis.Am J Ophthalmol.1321-7)。
在所有病例中都觀察到淚液產(chǎn)生的輕微減少，但是淚液膜的穩(wěn)定性保持不變。通常認(rèn)為通過(guò)起源于分布在眼睛表面的神經(jīng)末梢的神經(jīng)沖動(dòng)部分保持基本淚液分泌(參考Lamberts DW，F(xiàn)oster CS，Perry HD.(1979)Schirmer test aftertopical anesthesia and the tear meniscus height in normal eyes.ArchOphthalmol.971082-1085)。當(dāng)這些組織受到刺激性刺激物刺激時(shí)，達(dá)到腦的神經(jīng)沖動(dòng)的頻率顯著增加并且它們?cè)跍I液分泌中產(chǎn)生反射增加。從而眼睛表面和主要淚腺的結(jié)構(gòu)可以因此被說(shuō)成形成了具有將它們相互連接的神經(jīng)結(jié)構(gòu)的反射功能單位(參考Stern ME，Gao J，Siemasko KF，Beuerman RW，PflugfelderSC.(2004)The role of the lacrimal functional unit in the pathophysiologyof dry eye.Exp Eye Res.78409-416)。
通常認(rèn)為屈光手術(shù)產(chǎn)生的去神經(jīng)減小了角膜感覺(jué)，因此減小了反射淚液分泌。因此，在經(jīng)歷該手術(shù)的患者中觀察到的干眼癥狀歸因于角膜中神經(jīng)損傷導(dǎo)致的一般神經(jīng)活性減少引起的減小的淚液分泌(參考Patel S，Perez-SantonjaJJ，Alio JL，Murphy PJ.(2001)Corneal sensitivity and some propertiesof the tear film after laser in situ keratomileusis.J Refract Surg.1717-24)。
為了減輕前面提到的屈光手術(shù)導(dǎo)致的眼睛表面干燥癥狀，當(dāng)前使用的治療是人工淚液，即含有生理鹽水和粘彈性添加劑(甲基纖維素、透明質(zhì)酸等等)的溶液。它們的目的是盡可能長(zhǎng)地濕潤(rùn)眼睛表面。這些治療的主要局限是它們的低功效，因?yàn)樗鼈儾恢苯幼饔糜趩?wèn)題的原因。此外，它們是姑息療法，因此當(dāng)治療暫停時(shí)癥狀將再次出現(xiàn)。
因此，希望提供用于治療屈光手術(shù)導(dǎo)致的干眼的治療劑。
發(fā)明簡(jiǎn)述本發(fā)明人令人驚奇地發(fā)現(xiàn)屈光手術(shù)后干眼的感覺(jué)發(fā)生于神經(jīng)瘤性神經(jīng)末梢產(chǎn)生的異常神經(jīng)活動(dòng)和手術(shù)破壞的角膜神經(jīng)的再生。他們還發(fā)現(xiàn)描述為“干眼”或者“眼干燥”的感覺(jué)可能沒(méi)有反應(yīng)真正的干燥，而是患者對(duì)該異常神經(jīng)活動(dòng)產(chǎn)生的感覺(jué)給出的主觀解釋?zhuān)霎惓Ｉ窠?jīng)活動(dòng)產(chǎn)生于受破壞并且正在再生的角膜神經(jīng)纖維。其他原因可以引發(fā)這些干燥感覺(jué)，所述原因?yàn)橹T如局部存在炎癥的介體，眨眼的刺激或者輕微眼干燥，其在正常情況下將不足以激活完整的神經(jīng)末梢。
這些事實(shí)使得神經(jīng)瘤的受損的神經(jīng)末梢是屈光手術(shù)導(dǎo)致的眼睛表面干燥的治療的治療靶標(biāo)。本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)阻斷神經(jīng)瘤的受損的神經(jīng)末梢的電活性的活性劑是可以用于所述治療的治療劑。
從而，本發(fā)明涉及阻斷神經(jīng)瘤的受損的神經(jīng)末梢的電活性的活性劑的用途，用于制備治療屈光手術(shù)導(dǎo)致的人眼表面干燥的藥品。在本發(fā)明的具體實(shí)施方案中，屈光手術(shù)是受激子激光屈光性角膜切除術(shù)和激光原位角膜磨鑲術(shù)。本發(fā)明還提供了治療遭受屈光手術(shù)導(dǎo)致的眼睛表面干燥的哺乳動(dòng)物(包括人類(lèi))的方法，其包括經(jīng)眼施用阻斷神經(jīng)瘤的受損的神經(jīng)末梢的電活性的活性劑，以及適量的可藥用賦形劑以構(gòu)成局部制劑。
在該說(shuō)明書(shū)中，“阻斷神經(jīng)瘤的受損的神經(jīng)末梢的電活性的活性劑”指能夠防止皮膚或者其他組織的感覺(jué)神經(jīng)纖維中自發(fā)的或者機(jī)械、化學(xué)或者熱刺激引起的神經(jīng)沖動(dòng)的釋放或者減小該釋放的發(fā)展的化合物，所述防止或者減小是由于這些物質(zhì)對(duì)離子通道的阻斷作用，產(chǎn)生膜的穩(wěn)定和控制神經(jīng)元的興奮性。
在本發(fā)明的特定實(shí)施方案中，阻斷劑選自對(duì)依賴電壓的鈉、鈣、氯和鉀通道發(fā)揮作用的那些阻斷劑。具體地，阻斷劑選自抗癲癇藥、抗驚厥藥、抗心律不齊藥、三環(huán)抗抑郁劑和局部麻醉劑和它們的組合。
在更具體的實(shí)施方案中，阻斷劑選自利多卡因、妥卡尼、諸如妥卡尼的化合物的正芐基類(lèi)似物、美西律、拉莫三嗪、卡馬西平、苯妥英(5，5-去苯基乙內(nèi)酰脲)、阿米替林、N-苯基乙基阿米替林、地昔帕明、加巴噴丁、尼非卡蘭、文拉法辛、萘法唑酮、普加巴林，和其可藥用鹽(例如，尼非卡蘭鹽酸鹽)。該列表包括同樣公知的阻斷神經(jīng)瘤中神經(jīng)纖維的電活性的活性劑，即上市或者已經(jīng)測(cè)試作為阻斷神經(jīng)瘤中活性離子通道的那些活性劑，但是當(dāng)前為了該目的上市的活性劑列表不意在限制可以用于本發(fā)明實(shí)際應(yīng)用的化合物的范圍。阻斷或者減弱已經(jīng)受損并且正在再生的神經(jīng)纖維的異常興奮性的任意活性劑都可以根據(jù)本發(fā)明使用。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明在屈光手術(shù)后的日子里，在受損的角膜中分布的神經(jīng)纖維中觀察到的增加的自發(fā)活動(dòng)和對(duì)機(jī)械和化學(xué)刺激物的異常反應(yīng)類(lèi)似于正常眼中眼睛表面的干燥引起的現(xiàn)象。本發(fā)明的阻斷劑減弱了手術(shù)后角膜的神經(jīng)中的異?；钚圆⑶覝p弱了經(jīng)歷屈光手術(shù)的患者中眼干燥癥狀。
本發(fā)明還提供了用于經(jīng)眼應(yīng)用的藥物組合物，其包含治療有效量的阻斷劑，如上面描述的那些，以及適量的用于組成眼的制劑的可藥用賦形劑。
取決于環(huán)境，本領(lǐng)域技術(shù)人員將選擇適于經(jīng)眼施用這些組合物的釋放系統(tǒng)。所陳述的活性劑的阻斷活性將在一種化合物與另一種化合物之間明顯不同。當(dāng)我們考慮治療干眼的局部施用時(shí)，有效劑量關(guān)于它的治療功效以在寬范圍內(nèi)變動(dòng)。該值將由多種因素決定，這些因素包括所述藥物的內(nèi)在活性、它在其中施用的載體、待治療的面積大小，它的滲透和生物利用率和感覺(jué)強(qiáng)度。本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠確定任何所選化合物的有效劑量。對(duì)于經(jīng)眼應(yīng)用，以這種方式制備優(yōu)選的溶液使得阻斷劑在作為主要載體的鹽水溶液中的量為0.0005到1％(w/v)，更尤其0.0005到0.1％。
在本發(fā)明的實(shí)際應(yīng)用中，以這種方式施用阻斷劑使得將藥物直接應(yīng)用于產(chǎn)生異常電活性的部位。預(yù)期這將是緊靠損傷的區(qū)域。例如，可以局部應(yīng)用藥物，或者通過(guò)一些類(lèi)似的方式將藥物直接應(yīng)用于眼睛表面的受累區(qū)域。不計(jì)劃將通過(guò)這種方式施用藥物來(lái)實(shí)施本發(fā)明以確保藥物到達(dá)中樞神經(jīng)系統(tǒng)。實(shí)際上，那樣將會(huì)使本發(fā)明的目的失效，本發(fā)明的目的集中于治療問(wèn)題的根源。
這些眼的溶液的pH應(yīng)該優(yōu)選用適宜的緩沖液保持在6.5到7.2。制劑還可以含有常規(guī)的、可藥用的防腐劑、穩(wěn)定劑和/或滲透增強(qiáng)劑以及人工淚液制劑中包括的粘彈性物質(zhì)。
用于本發(fā)明的眼的溶液中的優(yōu)選載體是純化水并且優(yōu)選是生理鹽水溶液。其他額外載體包括，但不限于，粘性劑，如聚乙烯醇、聚維酮；羥丙基甲基纖維素、泊洛沙姆、羧甲基纖維素、卡波姆、羥乙基纖維素、透明質(zhì)酸和它們的衍生物。用于本發(fā)明的眼的制劑的優(yōu)選的防腐劑包括，但不限于，苯扎氯銨、氯代丁醇、硫柳汞、醋酸苯汞和硝酸苯汞。
滲透增強(qiáng)劑可以是例如，表面活性劑，某些有機(jī)溶劑，如二甲基亞砜和其他亞砜，二甲基乙酰胺和吡咯烷酮；雜環(huán)胺的某些酰胺，二醇(例如，丙二醇)；碳酸丙烯；油酸；烷基胺和衍生物；多種陽(yáng)離子、陰離子和非離子表面活性劑、兼性表面活性劑等等。
如果必要或者適宜將加入張力調(diào)節(jié)劑。這些包括，但不限于，鹽，特別是氯化鈉、氯化鉀、甘露醇和甘油和任何其他眼的上可接受的張力調(diào)節(jié)劑。將可能使用用于調(diào)節(jié)pH的多種緩沖劑和介質(zhì)，條件是所得制劑是眼科上可接受的?；诖耍彌_劑將包括眼科使用的乙酸鹽、檸檬酸鹽、磷酸鹽和硼酸鹽緩沖劑。類(lèi)似地，用于本發(fā)明的眼科上可接受的抗氧化劑包括，但不限于，偏亞硫酸氫鈉、硫代硫酸鈉、乙?；腚装彼?、丁基化羥基苯甲醚和丁基化的羥基甲苯。
可以包括在眼的制劑中的其他組分是螯合劑。優(yōu)選的螯合劑是EDTA二鈉，但是可以用其他螯合劑代替或者與該螯合劑聯(lián)合使用。
在說(shuō)明書(shū)和權(quán)利要求書(shū)全文中，詞語(yǔ)“包含”和其變體不意在排除其他技術(shù)特征、添加劑、組分或者步驟。對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員，將部分從本說(shuō)明書(shū)并且部分從本發(fā)明的實(shí)際應(yīng)用出現(xiàn)本發(fā)明的其他目的、優(yōu)點(diǎn)和特征。使用用于本發(fā)明的局部制劑的組分和它們用于治療干眼的用途的具體說(shuō)明，本領(lǐng)域技術(shù)人員將具有足夠知識(shí)來(lái)開(kāi)發(fā)其他制劑和將所述治療(制劑、劑量等)適應(yīng)于具體情況。作為闡明提供下面的具體實(shí)施方案，并且它們將不限制本發(fā)明。
本發(fā)明實(shí)施方案的詳細(xì)描述研究1進(jìn)行臨床研究來(lái)比較對(duì)LASIK型屈光手術(shù)后出現(xiàn)的眼干燥的感覺(jué)局部施用卡馬西平和安慰劑產(chǎn)生的減輕效果。該研究包括124名受試者，他們是年齡為21-45歲的男人和女人，經(jīng)歷了常規(guī)、選擇性的和單側(cè)LASIK手術(shù)用以校正近視。以0.01％的眼的溶液施用卡馬西平。手術(shù)后，受試者在動(dòng)手術(shù)的眼中接受1滴研究藥物，每天2次，連續(xù)14天。在第1、3、7和14天進(jìn)行手術(shù)后檢查。通過(guò)測(cè)量眼干燥的感覺(jué)、疼痛強(qiáng)度和總的止痛功效，施用獨(dú)立的視覺(jué)類(lèi)比尺度評(píng)估治療的功效。還記錄了眼睛炎癥、灼傷/刺痛感覺(jué)、流淚等癥狀。
該研究的結(jié)果表明與用安慰劑治療的患者相比，在用卡馬西平治療的患者中眼干燥癥狀的發(fā)生率下降更多，差異是統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著的。整天干燥癥狀的發(fā)生率也顯著更低。
研究2對(duì)用戊巴比妥鈉(Nembutal，40mg/kg腹膜內(nèi)(i.p.))麻醉的3只成年貓進(jìn)行PRK型屈光手術(shù)。還通過(guò)局部滴注0.1％丁卡因和0.4％鹽酸奧布卡因麻醉兩只眼的角膜。手工除去角膜上皮并施用單束受激子激光在直徑6mm深70μm的角膜中心進(jìn)行切除，所述激光的發(fā)射波長(zhǎng)為193nm，脈沖重復(fù)頻率為10Hz，射線照射為180mJ/cm2。
手術(shù)后12-48小時(shí)進(jìn)行神經(jīng)記錄實(shí)驗(yàn)。將動(dòng)物用Nembutal(40mg/kg，i.p.)麻醉并在實(shí)驗(yàn)期間通過(guò)在隱靜脈中靜脈內(nèi)灌注稀Nembutal(5mg/kg)將動(dòng)物保持在無(wú)反射狀態(tài)。通過(guò)氣管套管讓動(dòng)物自發(fā)呼吸。連續(xù)監(jiān)視呼吸的CO2、直腸溫度和動(dòng)脈壓并使它們保持穩(wěn)定。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)用過(guò)量Nembutal處死動(dòng)物。
使用如以前描述的氯化銀電極和常規(guī)電生理裝置對(duì)從眼的纖毛神經(jīng)得到的分布在角膜的分離的神經(jīng)纖維進(jìn)行細(xì)胞外記錄(參考Belmonte，C.，Gallar，J.，Pozo，M.A.，Rebollo，I.(1991)Excitation by irritant chemical substanceof sensory afferent units in the cat’s cornea.J.Physiol.437709-725)。
角膜感覺(jué)纖維通過(guò)它們對(duì)用濕刷子進(jìn)行的輕微機(jī)械刺激的反應(yīng)來(lái)鑒定。用具有12號(hào)纖維(0.1-0.9mN)和校準(zhǔn)的von Frey毛發(fā)(0.002-2.0N)的Cochet-Bonnet觸覺(jué)測(cè)量器測(cè)量機(jī)械閾值。用域上力(suprathreshold force)毛發(fā)對(duì)受體域作圖。通過(guò)對(duì)受體域以80ml/min的流速應(yīng)用含有98％CO2的氣體脈沖30秒來(lái)研究對(duì)化學(xué)刺激物的敏感性。
通過(guò)觀察對(duì)用相距3-5mm的一對(duì)銀電極對(duì)應(yīng)用于受體域的電休克(0.1-0.5ms，0.5-3.0mA)的潛伏觀察所記錄的纖維的傳導(dǎo)速度。用位于神經(jīng)途徑上的0.8G的絲線估計(jì)傳導(dǎo)距離。
在FM磁帶記錄儀上記錄神經(jīng)放電和刺激脈沖，并用適當(dāng)?shù)能浖?CED1401plus and Spike2 for Windows)進(jìn)行離線計(jì)算機(jī)分析。測(cè)量多種刺激導(dǎo)致的自發(fā)活性(每秒脈沖中平均放電頻率)和放電的改變。根據(jù)它們?cè)谑荏w域中的位置將纖維分類(lèi)為外周和中樞的(見(jiàn)表1)。所進(jìn)行手術(shù)的角膜中記錄的多數(shù)纖維在所處理的區(qū)內(nèi)外面和里面有受體域。僅僅一個(gè)纖維應(yīng)答于恰好在損傷內(nèi)的刺激。取決于受體域的位置，可以將纖維分類(lèi)為具有遠(yuǎn)離切除，接近切除的、在切除內(nèi)和外，和恰好在切除內(nèi)的域的纖維。
在進(jìn)行手術(shù)的角膜中角膜神經(jīng)纖維的平均機(jī)械閾值較高(見(jiàn)表2)。具有外周受體域的7根纖維的三根和具有中心域的26根纖維的13根顯示出在進(jìn)行手術(shù)的區(qū)中范圍外的機(jī)械刺激閾值。按照百分?jǐn)?shù)，具有自發(fā)活性的纖維數(shù)目在進(jìn)行手術(shù)的角膜中顯著更高。因此在中心手術(shù)區(qū)和外周中具有受體域的纖維中該自發(fā)活性的平均頻率也更高(見(jiàn)表1)。
研究了在損傷內(nèi)部、邊緣和遠(yuǎn)離損傷處具有受體域的纖維中多形性傷害感受器對(duì)CO2刺激的反應(yīng)。所有它們對(duì)CO2的刺激的反應(yīng)比未進(jìn)行手術(shù)的角膜的纖維中的反應(yīng)具有更低幅度和更長(zhǎng)的潛伏期，特別當(dāng)位于進(jìn)行手術(shù)的區(qū)中的受體域的區(qū)受到刺激尤其如此。此外，用CO2刺激引起的后放電在刺激手術(shù)的角膜中的纖維中顯著更大(見(jiàn)表3)。
結(jié)果表明PRK后24小時(shí)，分布在受損區(qū)的神經(jīng)纖維顯示出明顯的自發(fā)活性和對(duì)機(jī)械和化學(xué)刺激的異常反應(yīng)，它們的持續(xù)的后放電尤其如此。具有遠(yuǎn)離損傷的受體域的纖維的反應(yīng)與對(duì)照角膜的相似(參考Chen，X.，Gallar，J.，Pozo，M.A.，Baeza，M.and Belmonte，C.(1995)CO2stimulation of the corneaAcomoparison between human sensation and nerve activity in polymodalnociceptive afferents of the cat.Eur.J.Neurosci.71154-1163)，只是它們具有更高的后放電。
總之，這些結(jié)果表明進(jìn)行手術(shù)的角膜中所有纖維的功能性質(zhì)(在它們的受體域中有或沒(méi)有直接傷害)當(dāng)與對(duì)照比較時(shí)都受到手術(shù)的影響。機(jī)械閾值增加，表明高的自發(fā)活性和刺激后延長(zhǎng)的后放電。
表1.PRK后記錄的角膜傷害感受纖維的受體域
表2.角膜傷害感受纖維的功能性質(zhì)兩個(gè)星號(hào)表示Chen，X.，Gallar，J.，Pozo，M.A.，Baeza，M.and Belmonte，C.(1995)CO2stimulation of the corneaA comoparison between humansensation and nerve activity in polymodal nociceptive afferents of thecat.Eur.J.Neurosci.71154-1163的對(duì)照數(shù)據(jù)，其是髓鞘纖維和無(wú)髓鞘纖維的平均值。
符號(hào)表示p＜0.001，一個(gè)星號(hào)表示p＜0.05 t-檢驗(yàn)。
表3.多覺(jué)傷害感受纖維對(duì)應(yīng)用于它們的受體域的不同區(qū)域的CO2的反應(yīng)。符號(hào)表示p＜0.001，一個(gè)星號(hào)表示p＜0.05 t-檢驗(yàn)，與對(duì)照的差異。
研究3對(duì)用戊巴比妥鈉(Nembutal，40mg/kg，i.p.)麻醉的兩種性別的15只成年貓進(jìn)行試驗(yàn)。通過(guò)滴注0.1％丁卡因和0.4％鹽酸奧布卡因局部麻醉兩只眼的角膜。
用直徑5mm的環(huán)鉆在角膜中心產(chǎn)生環(huán)狀傷口，該環(huán)鉆刺入前界層(Bowmanmembrane)下40-50μm。將動(dòng)物用抗生素局部和全身處理，讓它們恢復(fù)1-2周。
手術(shù)后7和15天進(jìn)行記錄試驗(yàn)。將動(dòng)物用Nembutal(40mg/kg，i.p.)麻醉動(dòng)物并在實(shí)驗(yàn)期間通過(guò)在隱靜脈中靜脈內(nèi)灌注稀Nembutal(5mg/kg)將動(dòng)物保持在無(wú)反射狀態(tài)。通過(guò)氣管套管讓動(dòng)物自發(fā)呼吸。連續(xù)監(jiān)視呼吸的CO2、直腸溫度和動(dòng)脈壓并使它們保持穩(wěn)定。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)用過(guò)量Nembutal處死動(dòng)物。
使用如以前描述的銀/氯化銀電極和常規(guī)電生理裝置對(duì)從眼的纖毛神經(jīng)得到的從角膜分離的神經(jīng)纖維進(jìn)行細(xì)胞外記錄(參考Belmonte，C.，Gallar，J.，Pozo，M.A.，Rebollo，I.(1991)Excitation by irritant chemical substanceof sensory afferent units in the cat’s cornea.J.Physiol.437709-725)。
角膜感覺(jué)纖維通過(guò)它們對(duì)用濕刷子進(jìn)行的輕微機(jī)械刺激的反應(yīng)來(lái)鑒定。用具有12號(hào)纖維(0.1-0.9mN)和校準(zhǔn)的von Frey毛發(fā)(0.002-2.0N)的Cochet-Bonnet觸覺(jué)測(cè)量器測(cè)量機(jī)械閾值。用域上力毛發(fā)對(duì)受體域作圖。通過(guò)對(duì)受體域以80ml/min的流速應(yīng)用含有98％CO2的氣體脈沖30秒來(lái)研究對(duì)化學(xué)刺激物的敏感性。
通過(guò)觀察對(duì)用相距3-5mm的一對(duì)銀電極對(duì)應(yīng)用于受體域的電休克(0.1-0.5ms，0.5-3.0mA)的潛伏觀察傳導(dǎo)速度。用位于神經(jīng)途徑上的0.8G的絲線估計(jì)傳導(dǎo)距離。
在FM磁帶記錄儀上記錄神經(jīng)放電和刺激脈沖，并用適當(dāng)?shù)能浖?CED1401plus and Spike2 for Windows)進(jìn)行離線計(jì)算機(jī)分析。測(cè)量多種刺激導(dǎo)致的自發(fā)活性(每秒脈沖中平均放電頻率)和放電的改變。
根據(jù)它們?cè)谑荏w域中的位置將纖維分類(lèi)為外周和中樞的。受損的角膜中記錄的多數(shù)傷害感受單位在傷口外和其邊緣上都有受體域。取決于受體域的位置，可以將纖維分類(lèi)為遠(yuǎn)離傷口或者接近傷口或者與傷口相鄰。從完整角膜得到對(duì)照數(shù)據(jù)。
刺激角膜的纖維的自發(fā)放電的頻率大于完整角膜中的頻率。研究了受體域接觸受損區(qū)的纖維中和受體域在損傷外和遠(yuǎn)離損傷的纖維中多覺(jué)傷害感受纖維對(duì)化學(xué)刺激的反應(yīng)。測(cè)量了在局部應(yīng)用卡馬西平(0.001-0.1％)、苯妥英(5，5-二苯基海因)(0.001-0.1％)、美西律(0.001-0.1％)、和妥卡尼(tocaidine)(0.001-0.1％)之前和之后纖維的自發(fā)活性和響應(yīng)CO2刺激放電。所有這些物質(zhì)都產(chǎn)生分布在損傷周?chē)膮^(qū)中纖維的自發(fā)活性的劑量依賴性降低和對(duì)這些區(qū)的30s的CO2脈沖引起的反應(yīng)的劑量依賴性降低。
權(quán)利要求
1.神經(jīng)瘤的受損的神經(jīng)末梢的電活性阻斷劑在用于制備治療屈光手術(shù)導(dǎo)致的人眼表面干燥的藥品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的用途，其中屈光手術(shù)是受激子激光屈光性角膜切除術(shù)或激光原位角膜磨鑲術(shù)。
3.根據(jù)前面權(quán)利要求任一項(xiàng)的用途，其特征是阻斷劑選自對(duì)依賴電壓的鈉通道、鈣通道、氯通道和鉀通道產(chǎn)生作用的那些阻斷劑。
4.根據(jù)前面權(quán)利要求任一項(xiàng)的用途，其特征是阻斷劑選自抗癲癇藥、抗驚厥藥、抗心律不齊藥、三環(huán)抗抑郁劑和局部麻醉劑和它們的組合。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的用途，其特征是阻斷劑選自利多卡因、妥卡尼、諸如妥卡尼的化合物的正芐基類(lèi)似物、美西律、拉莫三嗪、卡馬西平、苯妥英、阿米替林、N-苯基乙基阿米替林、地昔帕明、加巴噴丁、尼非卡蘭、文拉法辛、萘法唑酮、普加巴林，和其藥用鹽。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的用途，其特征是阻斷劑是卡馬西平。
7.根據(jù)權(quán)利要求5的用途，其特征是阻斷劑是苯妥英。
8.根據(jù)權(quán)利要求5的用途，其特征是阻斷劑是美西律。
9.根據(jù)權(quán)利要求5的用途，其特征是阻斷劑是利多卡因。
10.根據(jù)權(quán)利要求5的用途，其特征是阻斷劑是妥卡尼。
11.根據(jù)權(quán)利要求5的用途，其特征是阻斷劑是普加巴林。
12.用于眼的應(yīng)用的藥物組合物，其包含治療有效量的如前面權(quán)利要求任一項(xiàng)描述的阻斷劑，以及適量的用于構(gòu)成眼的制劑的藥用賦形劑。
13.根據(jù)權(quán)利要求12的組合物，其特征是阻斷劑的量為0.0005-1％(w/v)。
14.根據(jù)權(quán)利要求13的組合物，其特征是阻斷劑的量為0.0005-0.1％(w/v)。
15.患有屈光手術(shù)導(dǎo)致的眼表面干燥的包括人的哺乳動(dòng)物的治療方法，其包括眼的施用用于阻斷神經(jīng)瘤的受損的神經(jīng)末梢的電活性的活性劑，和適量的用于構(gòu)成局部制劑的藥用賦形劑。
16.根據(jù)權(quán)利要求15的方法，其特征是屈光手術(shù)是受激子激光屈光性角膜切除術(shù)或激光原位角膜磨鑲術(shù)。
17.根據(jù)權(quán)利要求15-16任一項(xiàng)的方法，其特征是阻斷劑選自對(duì)依賴電壓的鈉通道、鈣通道、氯通道和鉀通道產(chǎn)生作用的那些阻斷劑。
18.根據(jù)權(quán)利要求15-17任一項(xiàng)的方法，其特征是阻斷劑選自抗癲癇藥、抗驚厥藥、抗心律不齊藥、三環(huán)抗抑郁劑和局部麻醉劑和它們的組合。
19.根據(jù)權(quán)利要求18的方法，其特征是阻斷劑選自利多卡因、妥卡尼、諸如妥卡尼的化合物的正芐基類(lèi)似物、美西律、拉莫三嗪、卡馬西平、苯妥英、阿米替林、N-苯基乙基阿米替林、地昔帕明、加巴噴丁、尼非卡蘭、文拉法辛、萘法唑酮、普加巴林，和其藥用鹽。
20.根據(jù)權(quán)利要求19的方法，其特征是阻斷劑是卡馬西平。
21.根據(jù)權(quán)利要求19的方法，其特征是阻斷劑是苯妥英。
22.根據(jù)權(quán)利要求19的方法，其特征是阻斷劑是美西律。
23.根據(jù)權(quán)利要求19的方法，其特征是阻斷劑是利多卡因。
24.根據(jù)權(quán)利要求19的方法，其特征是阻斷劑是妥卡尼。
25.根據(jù)權(quán)利要求19的方法，其特征是阻斷劑是普加巴林。
全文摘要
神經(jīng)瘤的受損的神經(jīng)末梢的電活性的阻斷劑，可以用于治療屈光手術(shù)如受激子激光屈光性角膜切除術(shù)或激光原位角膜磨鑲術(shù)導(dǎo)致的眼睛表面的干燥。所述阻斷劑的施用可以有效減小眼干燥的感覺(jué)，所述阻斷劑包括抗癲癇藥、抗驚厥藥、抗心律不齊藥、三環(huán)抗抑郁劑和局部麻醉劑，具體地，包括利多卡因、妥卡尼、苯妥英、卡馬西平、拉莫三嗪、美西律和普加巴林。
文檔編號(hào)A61K9/08GK1889997SQ200480036796
公開(kāi)日2007年1月3日 申請(qǐng)日期2004年12月9日 優(yōu)先權(quán)日2003年12月9日
發(fā)明者C·貝爾蒙特馬蒂內(nèi), J·加利亞爾馬蒂內(nèi), M·阿科斯塔博赫 申請(qǐng)人:米格爾－埃耐德斯大學(xué)