專利名稱：口服給藥的水溶性藥物納米顆粒組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及口服給藥的納米顆粒組合物及其制備方法，所述組合物包含胃腸吸收率提高的水溶性藥物。特別是，本發(fā)明涉及口服給藥的納米顆粒組合物及其制備方法，該納米顆粒組合物在由脂質(zhì)和聚合物組成的納米顆粒內(nèi)水溶性藥物的包載率提高，而且對脂肪酶穩(wěn)定，其中通過將水溶性藥物與抗衡離子物質(zhì)結(jié)合，并加入脂質(zhì)、聚合物和乳化劑來制備該納米顆粒。
背景技術(shù)：
包括生理活性劑的水溶性藥物、蛋白類藥物在胃腸道中穩(wěn)定性低且對腸道壁的透過性低，因此這些藥物通常使用靜脈注射劑。但是，對于日常生活中的大多數(shù)患者來說，靜脈注射劑不方便，所以在將水溶性藥物制備成口服給藥制劑方面已進(jìn)行了很多努力。
水溶性藥物一旦口服給藥，這些藥物將在化學(xué)上被pH和消化酶的作用降解，其在胃腸道中的穩(wěn)定性下降。因此，施用的這些藥物的大多數(shù)或一部分不能發(fā)揮其作用，則在口服給藥中其藥理學(xué)作用不能充分表現(xiàn)。特別是，當(dāng)這些藥物隨著pH改變穩(wěn)定性下降或者被降解時(shí)，通過胃腸道酶的作用它們喪失了效力，而且生物利用度極低。為了解決這些問題，已在制備水溶性藥物制劑方面進(jìn)行了研究，其中通過將這些藥物包載在對生物膜具有高親和力的脂質(zhì)或聚合物內(nèi)，不使這些藥物暴露在外部化學(xué)環(huán)境，例如pH或消化酶中。
例如，現(xiàn)有技術(shù)中已知應(yīng)用w/o或w/o/w乳化劑或者脂質(zhì)體的水溶性藥物口服給藥制劑。但是，它們的缺點(diǎn)是沒有足夠的藥物包載率并且穩(wěn)定性低。
美國專利6,004,534公開了通過應(yīng)用靶向脂質(zhì)體，使這些水溶性藥物作為疫苗或變應(yīng)原靶向于特殊組織。但是，其問題是藥物在脂質(zhì)體中的包載率低，約為35％。
美國專利6,191,105公開了胰島素聚合物w/o微乳制劑的制備。但是，一旦進(jìn)入體內(nèi)，此w/o乳劑結(jié)構(gòu)通?？杀幌嘧兎至眩虼巳芙庠谒嘀械乃幬锊荒艿玫接拖嗟谋Ｗo(hù)，而直接暴露于機(jī)體。
美國專利6,277,413公開了w/o/w乳劑的制備，其中將水溶性藥物加入內(nèi)層水相。但在此專利中，所制備乳劑的粒徑非常大，為10-20微米，而且在其制備過程中，包載在內(nèi)層水相中的藥物可能會(huì)釋放至外層水相中，因此該乳劑的藥物包載率低。
公開的韓國專利No.2002-66776描述了胰島素口服給藥制劑，它應(yīng)用了500nm或更小的單酸甘油酯脂質(zhì)載體。但是，該載體僅由脂質(zhì)組成，因此在體內(nèi)可被脂肪酶降解。
《控釋雜志》69期283-295頁(2000)公開了含有胰島素的PLGA微球體，其藥物包載率小于50％，粒徑大于5微米。據(jù)報(bào)告，100納米大小顆粒在腸道內(nèi)的吸收是微米級(jí)顆粒的15-250倍，而微米級(jí)顆粒不能在腸道內(nèi)吸收，一般情況下可在腸的上皮細(xì)胞表面找到它們[Pharm.Res.13(12)p 1838-1845(1996)]。因此，5μm大的PLGA微球體的胰島素包載率很低，其傳送胰島素的有效性小于納米級(jí)顆粒。
另外，美國專利5,962,024公開了通過制備顆粒劑或用腸溶聚合物包裹該顆粒劑，在pH 6.5或更高條件下溶解藥物，所述聚合物例如為琥珀酸羥丙基甲基纖維素乙酸酯或甲基丙烯酸甲基異丁烯酸酯共聚物。但是，僅由腸溶聚合物形成的微球體存在缺陷，即它不能使在胃腸道中不穩(wěn)定的藥物得到穩(wěn)定，因?yàn)樵摼酆衔镌谀c道中被溶解，微球體中包載的藥物則暴露于腸道中。
另一方面，因?yàn)樗苄运幬锱c親脂性物質(zhì)或聚合物組成的載體親和力低，所以它們只有小部分被包載在載體中，因此去除它們的電荷應(yīng)當(dāng)會(huì)降低它們的水溶解度，這樣可提高它們在載體中的包載率。
WO 94/08599公開了絡(luò)合物的制備，其中胰島素與十二烷基硫酸鈉離子化結(jié)合。此制備方法將胰島素-十二烷基硫酸鈉絡(luò)合物溶解在有機(jī)溶劑中，并將該溶液用作肺制劑或栓劑。但是，一旦口服給藥，此藥物將直接暴露于胃腸道中，因此不能保持穩(wěn)定。
另外，美國專利5,858,410公開了通過研磨和使用微流化儀的納米顆?；乃蝗苄运幬?，但是其缺陷是不適于在體內(nèi)不穩(wěn)定的水溶性藥物，例如蛋白類藥物，因?yàn)檫@些藥物直接暴露于體內(nèi)環(huán)境。
由上可見，對于在體內(nèi)不穩(wěn)定的水溶性藥物(包括蛋白類藥物)的口服給藥來說，應(yīng)當(dāng)設(shè)計(jì)對胃腸道脂肪酶穩(wěn)定的納米顆粒，而且應(yīng)當(dāng)將水溶性藥物高效包載于藥物載體中。下面是達(dá)到這些目的的技術(shù)要求。
首先，為了保持納米顆粒所包載藥物的穩(wěn)定，不在胃腸道中發(fā)生降解，脂質(zhì)納米顆粒應(yīng)當(dāng)含有適量的聚合物，以提高它們在體內(nèi)的穩(wěn)定性。
其次，通過將水溶性藥物與抗衡離子物質(zhì)制備成絡(luò)合物，并選擇具有相似親和力的脂質(zhì)/聚合物系統(tǒng)，通過修改水溶性藥物使其與親脂性載體具有親和力，這樣來提高水溶性藥物在親脂性載體中的包載率。
第三，應(yīng)當(dāng)使脂質(zhì)/聚合物納米顆粒的粒徑最小化，此納米顆粒含有水溶性藥物和抗衡離子物質(zhì)的絡(luò)合物。另外，還應(yīng)當(dāng)制備納米顆粒，以便將這些藥物包載在其中，這樣不會(huì)使它們暴露于外部環(huán)境，而且可在保持其最大活性的情況下被吸收至體內(nèi)。
發(fā)明公開本發(fā)明人已進(jìn)行了重復(fù)而廣泛的研究，以解決上述難題并開發(fā)符合上述技術(shù)要求的藥物載體。結(jié)果本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，由水溶性藥物-抗衡離子物質(zhì)絡(luò)合物與一定比例的脂質(zhì)和聚合物等制備可口服給藥的納米顆粒組合物，使其粒徑為500nm或更小，這樣可提高藥物包載率和對體內(nèi)降解酶的抵抗性，由此完成了本發(fā)明。
本發(fā)明的目的是提供可口服給藥的納米顆粒組合物及其制備方法，通過含有水溶性藥物和抗衡離子物質(zhì)的絡(luò)合物，提高了藥物包載率和對脂肪酶的抵抗性，由此提高了體內(nèi)口服吸收度。
附圖簡要說明附

圖1顯示本發(fā)明的可口服給藥的納米顆粒組合物的穩(wěn)定性，該組合物中包含胰島素，在實(shí)驗(yàn)2中作為抗胰酶(蛋白酶/脂肪酶)的活性成分。
-◆-實(shí)施例1-■-比較實(shí)施例1-▲-比較實(shí)施例2
-×-比較實(shí)施例3-*-實(shí)施例1a附圖2顯示腸內(nèi)應(yīng)用本發(fā)明可口服納米顆粒組合物后的相對血糖濃度，該組合物中包含胰島素在實(shí)驗(yàn)3(2)中作為治療大鼠I型糖尿病的活性成分。
-◆-參考組(含胰島素的緩沖液，pH 7.4，胰島素劑量3IU/kg)-■-實(shí)施例1(胰島素劑量3IU/kg)附圖3顯示腸內(nèi)應(yīng)用本發(fā)明可口服納米顆粒組合物后的相對血糖濃度，該組合物中包含胰島素在實(shí)驗(yàn)3(3)1)中作為治療大鼠I型糖尿病的活性成分。
-◆-參考組1(含胰島素的緩沖液，pH 7.4，胰島素劑量20IU/kg)-■-實(shí)施例1(胰島素劑量20IU/kg)-▲-比較實(shí)施例1(胰島素劑量20IU/kg)-×-實(shí)施例1a(胰島素劑量20IU/kg)附圖4顯示腸內(nèi)應(yīng)用本發(fā)明可口服納米顆粒組合物后的相對血糖濃度，該組合物中包含胰島素在實(shí)驗(yàn)3(3)1)中作為治療大鼠I型糖尿病的活性成分。
-◆-實(shí)施例1(胰島素劑量20IU/kg)-■-參考組2(胰島素注射液，皮下注射，胰島素劑量0.2IU/kg)附圖5顯示腸內(nèi)應(yīng)用本發(fā)明可口服納米顆粒組合物后的胰島素濃度，該組合物中包含胰島素在實(shí)驗(yàn)3(3)2)中作為治療大鼠I型糖尿病的活性成分。
-◆-對照組(不含胰島素的口服納米顆粒組合物)-■-實(shí)施例1(胰島素劑量20IU/kg)-▲-比較實(shí)施例1(胰島素劑量20IU/kg)
-×-實(shí)施例1a(胰島素劑量20IU/kg)附圖6顯示腸內(nèi)應(yīng)用本發(fā)明可口服納米顆粒組合物后的胰島素濃度，該組合物中包含胰島素在實(shí)驗(yàn)3(3)2)中作為治療大鼠I型糖尿病的活性成分。
-◆-實(shí)施例1(胰島素劑量20IU/kg)-■-參考組(胰島素注射液，皮下注射，胰島素劑量0.2IU/kg)附圖7顯示十二指腸內(nèi)應(yīng)用本發(fā)明可口服納米顆粒組合物后的頭孢曲松濃度，該組合物中包含頭孢曲松在實(shí)驗(yàn)4(1)1)中作為給予正常大鼠的活性成分。
-◆-實(shí)施例6(頭孢曲松劑量40mg/kg)-■-實(shí)施例7(頭孢曲松劑量40mg/kg)-▲-比較實(shí)施例5(頭孢曲松劑量40mg/kg)-×-參考組1(含頭孢曲松的水溶液，頭孢曲松劑量40mg/kg)附圖8顯示十二指腸內(nèi)應(yīng)用本發(fā)明可口服納米顆粒組合物后的頭孢曲松濃度，該組合物中包含頭孢曲松在實(shí)驗(yàn)4(1)1)中為給予正常大鼠的活性成分。
-◆-實(shí)施例6(頭孢曲松劑量40mg/kg)-■-實(shí)施例7(頭孢曲松劑量40mg/kg)-▲-參考組2(頭孢曲松注射液，靜脈注射，頭孢曲松劑量20mg/kg)本發(fā)明最佳實(shí)施方式本發(fā)明提供一種口服給藥組合物，它含有粒徑為500nm或更小的納米顆粒，該組合物包括0.1-30％(重量)的水溶性藥物和抗衡離子物質(zhì)的絡(luò)合物，在此絡(luò)合物中帶電水溶性藥物與抗衡離子物質(zhì)結(jié)合；0.5-80％(重量)的脂質(zhì)；0.5-80％(重量)的聚合物；以及1-80％(重量)的乳化劑，其中脂質(zhì)與聚合物的重量比為1∶0.05-3。所述脂質(zhì)和聚合物的重量比優(yōu)選為1∶0.2-1。
另外，本發(fā)明提供一種制備本發(fā)明可口服給藥納米顆粒組合物的方法，其步驟包括(a)將帶電水溶性藥物與抗衡離子物質(zhì)進(jìn)行離子化結(jié)合，形成水溶性藥物和抗衡離子物質(zhì)的絡(luò)合物；(b)將脂質(zhì)、聚合物和增溶劑加入所得絡(luò)合物中，并溶解整個(gè)混合物，然后將所得溶液引入含有乳化劑的水溶液，以獲得均勻的液相；(c)去除步驟(b)所得混合物中的增溶劑；和(d)任選地，應(yīng)用一種微流化儀將粒徑最小化。
按照本發(fā)明，將水溶性藥物包載于這種納米顆粒組合物中，包載率為70％或更高，而且在胰酶溶液存在的情況下其包載率可保持在80％或更高。
另外，本發(fā)明還提供一種制備本發(fā)明可口服給藥納米顆粒組合物的方法，其步驟包括(a)將帶電水溶性藥物與抗衡離子物質(zhì)進(jìn)行離子化結(jié)合，形成水溶性藥物和抗衡離子物質(zhì)的絡(luò)合物；(b)將脂質(zhì)和增溶劑加入所得絡(luò)合物中，并溶解整個(gè)混合物，然后將所得溶液引入含有乳化劑和聚合物的水溶液，獲得均勻的液相；(c)去除步驟(b)所得混合物中的增溶劑；和(d)任選地，應(yīng)用一種微流化儀將粒徑最小化。
下面將對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)描述。
本發(fā)明的口服給藥納米顆粒組合物包括水溶性藥物和抗衡離子物質(zhì)的絡(luò)合物，占0.1-30％(重量)，在此絡(luò)合物中帶電水溶性藥物與抗衡離子物質(zhì)離子化結(jié)合；脂質(zhì)，占0.5-80％(重量)；聚合物，占0.5-80％(重量)；以及乳化劑，占1-80％(重量)，其中脂質(zhì)與聚合物的重量比為1∶0.05-3，該組合物還包括粒徑為500nm或更小的納米顆粒。所述脂質(zhì)和聚合物的重量比優(yōu)選為1∶0.2-1。
通過帶電藥物與抗衡離子物質(zhì)反應(yīng)而獲得水溶性藥物和抗衡離子物質(zhì)的絡(luò)合物。用作活性成分的水溶性藥物可為在水溶液中帶電的藥物，優(yōu)選為在水中帶電的藥物，它們選自肽/蛋白類藥物，諸如胰島素、紅細(xì)胞生成素、降鈣素、生長激素、干擾素、生長抑素等；肝素；頭孢類抗生素；阿侖膦酸鈉；依替膦酸鈉；帕米膦酸鈉等。
可與帶正電荷的藥物離子化結(jié)合的帶負(fù)電荷物質(zhì)可優(yōu)選選自C8-18脂肪酸的鈉鹽，諸如油酸鈉、十二烷基硫酸鈉、己酸鈉、月桂酸鈉等；膽汁酸的鈉鹽；藻酸鈉；和羧甲基纖維素鈉?？膳c帶負(fù)電荷的藥物離子化結(jié)合的帶正電荷物質(zhì)可優(yōu)選選自季銨化合物，諸如肉堿鹽、苯扎氯銨、溴化十六烷基三甲銨等。
此水溶性藥物和抗衡離子物質(zhì)的絡(luò)合物的含量優(yōu)選為納米顆粒組合物總重量的0.1-30％(重量)。
當(dāng)水溶性藥物與抗衡離子物質(zhì)形成絡(luò)合物時(shí)，該水溶性藥物的初始電荷被除去或削弱，因此提高了其與親脂性載體的親和力。結(jié)果，該水溶性藥物可被更多地包載于親脂性載體中。如下面實(shí)驗(yàn)1的表4所示，本發(fā)明組合物的藥物包載率高。
根據(jù)水溶性藥物的離子數(shù)，可對水溶性藥物和抗衡離子物質(zhì)的絡(luò)合物中水溶性藥物與抗衡離子物質(zhì)的摩爾比進(jìn)行調(diào)節(jié)，優(yōu)選為1∶0.1-20，更優(yōu)選為1∶3-10。
所述脂質(zhì)可優(yōu)選為選自下列脂肪醇的一種或多種諸如單酸甘油酯、甘油二酯、脂肪酸的丙二醇酯(Capriol等)、脂肪酸的甘油酯(GELucier等)、十六醇十八醇混合物、十六醇等，而且所述脂質(zhì)含量優(yōu)選為納米顆粒組合物總重量的0.5-80％(重量)，更優(yōu)選為0.5-30％(重量)。
所述聚合物可優(yōu)選為選自下列的一種或多種腸溶聚合物，諸如甲基丙烯酸共聚物、鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素、乙酸丁二酸羥丙基甲基纖維素、乙酸鄰苯二甲酸纖維素等；紫膠、殼聚糖、羥丙基甲基纖維素及其衍生物、乙基纖維素、甲基纖維素、聚乙烯醇、藻酸鈉和卡波姆，而且所述聚合物的含量可優(yōu)選為納米顆粒組合物總重量的0.5-80％(重量)，更優(yōu)選為0.5-30％(重量)。特別是，如果使用腸溶聚合物，在胃酸中不穩(wěn)定的藥物(例如蛋白質(zhì))不會(huì)被分解，而且可根據(jù)腸溶聚合物的組合物的不同，它們易于被小腸或大腸選擇性地吸收。
所述聚合物不溶于水，或者溶解于水中時(shí)變得具有粘性，因此被加入脂質(zhì)納米顆粒時(shí)可被緩慢地降解，由此可控制包載于納米顆粒中的水溶性藥物的溶出率。另外，該聚合物包繞于脂質(zhì)納米顆粒的表面，并被插于脂質(zhì)分子中間，因此使此納米顆粒具有酶抵抗性。也就是說，加入聚合物可阻止脂肪酶作用所致脂質(zhì)的降解，該脂質(zhì)是此納米顆粒中的結(jié)構(gòu)成分，因此可保持該納米顆粒的結(jié)構(gòu)，而且也可明顯改善包載于納米顆粒中的水溶性藥物的化學(xué)穩(wěn)定性。
在將聚合物加入脂質(zhì)納米顆粒組合物中時(shí)，可根據(jù)聚合物的含量來改變此脂質(zhì)納米顆粒的大小，而且應(yīng)當(dāng)對脂質(zhì)與聚合物的比例進(jìn)行適當(dāng)調(diào)節(jié)，以獲得500nm或更小的納米顆粒。
所述乳化劑優(yōu)選為選自下列的一種或多種聚氧乙烯聚氧丙烯共聚物(商品名PoloxamerTM)、聚乙二醇烷基醚(商品名BrisTM)、聚氧乙烯蓖麻油(商品名TweenTM)、聚氧乙烯脫水山梨醇脂肪酸酯(商品名SpanTM)、天然植物油甘油三酯和聚亞烷基多元醇的酯交換產(chǎn)物(商品名LabrafilTM、LabrasolTM)、甘油脂肪酸酯(商品名PlurolTMoleique)、維生素E聚丁二酸乙二醇酯(維生素E聚丁二酸乙二醇酯)、卵磷脂、十二烷基硫酸鈉和膽汁酸及其衍生物，而且所述乳化劑的含量可優(yōu)選為納米顆粒組合物總重量的1-80％(重量)。更優(yōu)選的是，該乳化劑的含量占30-80％(重量)。當(dāng)將所制備的脂質(zhì)/聚合物納米顆粒分散于水溶液中時(shí)，該乳化劑使此分散體穩(wěn)定。
所述增溶劑可優(yōu)選為選自下列的一種或多種C1-8醇、二甲亞砜、二氯甲烷、甲苯、丙二醇、聚乙二醇和12-羥硬脂酸酯(商品名SolutolTM)。在制備納米顆粒的同時(shí)消除此增溶劑，因此最終納米顆粒組合物中的增溶劑含量優(yōu)選為50％(重量)或更小。另外，如果單獨(dú)的增溶劑不能溶解或分散水溶性藥物和抗衡離子物質(zhì)的絡(luò)合物、聚合物、脂質(zhì)等，則可將上述乳化劑加入其中以獲得均勻的溶液。
另外，該組合物可含有慣用的口服吸收增強(qiáng)劑，含量為0-20％(重量)，所述口服吸收增強(qiáng)劑優(yōu)先選自p-糖蛋白抑制劑、肉堿鹽、螯合劑等。
另外，可將本發(fā)明組合物進(jìn)行冷凍干燥，優(yōu)選含有0.1-30％(重量)的冷凍保護(hù)劑，所以可被制備成粉末，然后再制備成常規(guī)的口服劑型，諸如膠囊或片劑。冷凍保護(hù)劑可優(yōu)選為糖類，諸如葡萄糖、甘露醇、山梨醇、海藻糖；氨基酸，諸如精氨酸；蛋白，諸如白蛋白，等等。
通過下面方法制備本發(fā)明可口服給藥納米顆粒組合物，其方法包括下列步驟(a)將帶電水溶性藥物與抗衡離子物質(zhì)進(jìn)行離子化結(jié)合，以形成水溶性藥物和抗衡離子物質(zhì)的絡(luò)合物；(b)將脂質(zhì)、聚合物和增溶劑加入所得絡(luò)合物中，以溶解整個(gè)混合物，然后將所得溶液加入含有乳化劑的水溶液，以獲得均勻的液相；(c)去除步驟(b)所得混合物中的增溶劑；和(d)任選地，應(yīng)用微流化儀將粒徑最小化。
上述步驟(a)中，通過將藥物溶解在水或適宜緩沖液中，獲得含有該藥物的水溶液，然后使抗衡離子物質(zhì)與該藥物溶液進(jìn)行反應(yīng)，由此制備水溶性藥物和抗衡離子物質(zhì)的絡(luò)合物。
根據(jù)此藥物的離子數(shù)，在摩爾比為1∶0.1-20的范圍內(nèi)調(diào)節(jié)該水溶性藥物和抗衡離子物質(zhì)的最佳比例，并通過分析上述反應(yīng)中未反應(yīng)的藥物而確定。優(yōu)選用水將所得水溶性藥物和抗衡離子物質(zhì)的絡(luò)合物沖洗3遍或3遍以上，以除去未反應(yīng)的藥物。
特別是，在制備蛋白類藥物和抗衡離子物質(zhì)的絡(luò)合物中，可使用pH調(diào)節(jié)劑，使此蛋白類藥物具有電荷。該pH調(diào)節(jié)劑可選自酸化劑，諸如鹽酸、磷酸、碳酸、枸櫞酸等；堿化劑，諸如氫氧化鈉、磷酸一氫鈉/鉀、磷酸二氫鈉/鉀、磷酸鈉、枸櫞酸鈉等；或者由它們的混合物組成的緩沖液，而且此pH調(diào)節(jié)劑的用量可為該藥物的0.1-10倍。
在上述步驟(b)-(c)中，將水溶性藥物和抗衡離子物質(zhì)的絡(luò)合物及脂質(zhì)溶解在增溶劑中，然后，將該溶液加入含有聚合物的水溶液中，攪拌此混合物，然后從中去除增溶劑。在此步驟中，為了提高此聚合物的溶解度，可在其中加入酸、堿和乳化助劑，占0.5-50％(重量)，并可將此混合物進(jìn)行加熱，優(yōu)選加熱至30-70℃。
在上述步驟(c)中，如果此增溶劑是高度揮發(fā)的，則可通過注射氮?dú)饣蛘呤褂谜婵照舭l(fā)器將其除去。如果它揮發(fā)性不高，可通過滲析將其除去。
在上述步驟(d)中，優(yōu)選應(yīng)用微流化儀在100MPa下將此溶液環(huán)化3-10遍。如果需要，可通過加熱將此納米顆粒的粒徑進(jìn)一步減小。加熱溫度優(yōu)選為30-70℃。
另一種制備本發(fā)明可口服給藥組合物的方法包括以下步驟(a)將帶電水溶性藥物與抗衡離子物質(zhì)進(jìn)行離子化結(jié)合，以形成水溶性藥物和抗衡離子物質(zhì)的絡(luò)合物；(b)將脂質(zhì)和增溶劑加入其中，以溶解整個(gè)混合物，然后將所得溶液加入含有聚合物和乳化劑的水溶液，以獲得均勻的液相；(c)去除步驟(b)所得混合物中的增溶劑；和(d)任選地，應(yīng)用微流化儀將粒徑最小化。
所得納米顆粒組合物是液體的，如果需要，可加入冷凍保護(hù)劑將其冷凍干燥，以獲得粉末。所述冷凍保護(hù)劑用于防止冷凍干燥過程中該組合物中的成分變性。此冷凍保護(hù)劑的用量優(yōu)選占納米顆粒組合物總重量的0.1-30％(重量)。此冷凍保護(hù)劑可優(yōu)選為糖，諸如乳糖、甘露醇、海藻糖等；氨基酸，諸如精氨酸；蛋白質(zhì)，諸如白蛋白等等。
通過簡單的物理混合，例如通過用手搖動(dòng)，可易于將如上獲得的液體和粉末組合物分散于水中，而且根據(jù)所用乳化劑或藥物的特性，形成此分散系的粒徑為500nm或更小，它比先前的口服給藥制劑更小。優(yōu)選地，此口服給藥納米顆粒組合物的粒徑為20-300nm。
密封在室溫或更低的溫度下，本發(fā)明納米顆粒粉末組合物可長時(shí)間地穩(wěn)定貯存，而且可在使用前將水加入其中，以制備其分散溶液。
另外，通過加入其他的吸收增強(qiáng)劑，可將本發(fā)明納米顆粒組合物制備為溶液、懸浮液、膠囊、片劑等，而且在固體制劑情況下，通過常規(guī)制備技術(shù)，例如腸溶衣等，還可進(jìn)一步提高其口服生物利用度。
下面將根據(jù)實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行更詳細(xì)描述，但是不應(yīng)當(dāng)認(rèn)為它們將對本發(fā)明的范圍進(jìn)行任何限制。
實(shí)施例實(shí)施例1含胰島素的可口服給藥納米顆粒組合物的制備(1)胰島素和抗衡離子物質(zhì)絡(luò)合物的制備將50mg胰島素(Sigma)溶解在pH 3的20ml枸櫞酸鹽緩沖液中，并將溶解在80ml pH 3的枸櫞酸鹽緩沖液中的多庫酯鈉(Aldrich)與其反應(yīng)，與1摩爾胰島素的摩爾比為1∶3、1∶6和1∶9，以獲得胰島素和抗衡離子物質(zhì)的絡(luò)合物。一完成此反應(yīng)，即按照美國藥典中所述的胰島素分析方法分析上清液中的胰島素，以獲得下面表1所示的結(jié)果。
表1胰島素和抗衡離子物質(zhì)絡(luò)合物的反應(yīng)比

如上表1所示，當(dāng)胰島素與多庫酯鈉的摩爾比為1∶6或以上時(shí)，大部分胰島素與抗衡離子物質(zhì)形成絡(luò)合物。之后，用pH 3的枸櫞酸鹽緩沖液和水將摩爾比為1∶6的胰島素和抗衡離子物質(zhì)制備的絡(luò)合物各沖洗3遍，留待在下面步驟中使用。
(2)含胰島素的可口服給藥納米顆粒組合物的制備將15mg胰島素-多庫酯鈉絡(luò)合物和60mg甘油一油酸酯(TCI)溶解在10ml乙醇中。將此溶液加入20ml含20mg殼聚糖(韓國殼聚糖)和200mg Poloxamer 407TM(BASF)的水溶液中，對整個(gè)混合物進(jìn)行攪拌，以獲得均勻的溶液，然后通過注入氮?dú)舛鴱钠渲谐ヒ掖?。在其中加?％的枸櫞酸，作為提高殼聚糖溶解度的添加劑。應(yīng)用一種微流化儀，EmulsiFlex-C5TM(Avestin)，在室溫100MPa下將此脂質(zhì)/聚合物納米顆粒環(huán)化10遍，以獲得含有胰島素的可口服給藥納米顆粒組合物。
(3)粒徑和分布的測定將200μl所得液體組合物分散在1ml蒸餾水中，然后按照光子分光術(shù)(ELS-8000TM，Otsuka electronics)測定該組合物的粒徑和分散度。結(jié)果，實(shí)施例1液體組合物的平均粒徑為83.0nm，分散度為0.300。
比較實(shí)施例1按照與實(shí)施例1相同的方法制備液體組合物，但用胰島素代替胰島素-抗衡離子物質(zhì)絡(luò)合物，而且既不使用聚合物也不使用微流化儀。按照實(shí)施例1的方法測定其粒徑和分散度，結(jié)果，平均粒徑為117.4nm，分散度為0.251。
比較實(shí)施例2按照與實(shí)施例1相同的方法制備液體組合物，但用胰島素代替胰島素-抗衡離子物質(zhì)絡(luò)合物，而且不使用微流化儀。按照實(shí)施例1的方法測定其粒徑和分散度，結(jié)果，平均粒徑為241.8nm，分散度為0.090。
比較實(shí)施例3
在50℃下將按照實(shí)施例1獲得的15mg胰島素-抗衡離子物質(zhì)絡(luò)合物和60mg甘油一油酸酯超聲處理1小時(shí)，然后加入20ml其中含有20mg殼聚糖和200mg Poloxamer407TM的1％枸櫞酸鹽水溶液，并將它們再一次進(jìn)行30分鐘的超聲處理。然后在100MPa、室溫下應(yīng)用微流化儀將此混合物環(huán)化10遍，以獲得含有胰島素絡(luò)合物的液體組合物。按照實(shí)施例1的方法測定粒徑和分散度，結(jié)果，其平均粒徑為211.6nm，分散度為0.213。
實(shí)施例1a按照與實(shí)施例1相同的方法制備液體組合物，但不使用微流化儀。按照實(shí)施例1的方法測定其粒徑和分散度，結(jié)果平均粒徑為234.3nm，分散度為0.291。
實(shí)施例2含胰島素可口服給藥納米顆粒粉末制劑的制備在固化實(shí)施例1所得的可口服給藥納米顆粒液體制劑中，通過將5％甘露醇加入此可口服給藥納米顆粒液體制劑而使該納米粒徑的增加最小化，然后在不同的冷凍干燥條件下固化此液體制劑，并將其分散在水中以測定粒徑。結(jié)果見下面表2。
表2

由上面表2可見，為使粒徑的變化最小化，在＜0℃條件下冷凍干燥是優(yōu)選的。
將甘露醇分別以0.5％、1％、2％、4％和5％加入可口服給藥納米顆粒液體制劑中，然后在-25℃下將此混合物固化6小時(shí)，隨后再在20℃下進(jìn)行6小時(shí)。將所得固體分散在水中，然后按照實(shí)施例1的方法測定粒徑。所得結(jié)果見下面表3。
表3

由測定結(jié)果可見，當(dāng)冷凍保護(hù)劑的濃度約為5％時(shí)，粒徑的變化可被最小化。
實(shí)施例3含胰島素的可口服給藥納米顆粒制劑的制備2在實(shí)施例1中，用十二烷基硫酸鈉(Sigma)代替多庫酯鈉，比例是1∶7，以獲得胰島素與抗衡離子物質(zhì)的絡(luò)合物。對胰島素與抗衡離子物質(zhì)的絡(luò)合物、甘油一油酸酯和聚乙二醇2000進(jìn)行稱重，分別為15mg、45mg和90mg，并將它們?nèi)芙庠?0ml乙醇中。按照相同方法，制備含胰島素的可口服給藥納米顆粒組合物。
按照實(shí)施例1的方法測定其粒徑和分散度，結(jié)果其平均粒徑為121nm，分散度為0.314。
實(shí)施例4含胰島素的可口服給藥納米顆粒組合物的制備3按照與實(shí)施例1相同的方法制備含胰島素的可口服給藥納米顆粒組合物，但使用LabrafacTM(Gattefosse)代替甘油一油酸酯。按照實(shí)施例1的方法測定其粒徑和分散度，結(jié)果平均粒徑為129.4nm，分散度為0.227。
實(shí)施例5含胰島素的可口服給藥納米顆粒組合物的制備4按照與實(shí)施例1相同的方法制備含胰島素的可口服給藥納米顆粒組合物，但使用60mg EudragitTM(Rohm)和EudragitSTM(Rohm)1∶1的的混合物代替殼聚糖。按照實(shí)施例1的方法測定其粒徑和分散度，結(jié)果平均粒徑為194.2nm，分散度為0.128。
比較實(shí)施例4按照與實(shí)施例5相同的方法制備此液體制劑，但既不使用甘油一油酸酯，也不使用微流化儀。按照實(shí)施例1的方法測定其粒徑和分散度，結(jié)果平均粒徑為350.9nm，分散度為0.009。
實(shí)施例6含頭孢曲松的可口服給藥納米顆粒的制備(1)頭孢曲松和抗衡離子物質(zhì)絡(luò)合物的制備將100mg頭孢曲松(Hawon fine chemical)溶解在20ml蒸餾水中，對苯扎氯銨(Sigma)進(jìn)行稱重，其與頭孢曲松的摩爾比為1∶2，并將其溶解在蒸餾水中，然后在4℃進(jìn)行反應(yīng)。收集上清液，并按照美國藥典中所述頭孢曲松的分析方法分析頭孢曲松。結(jié)果確認(rèn)99.9％的頭孢曲松與抗衡離子物質(zhì)形成了絡(luò)合物。
(2)含頭孢曲松口服液體制劑的制備將120mg頭孢曲松和抗衡離子物質(zhì)的絡(luò)合物、60mg甘油一油酸酯和30mg Eudragit LTM和Eudragit STM1∶1的混合物溶解在15ml乙醇中。將此溶液加入30ml含375mg LabrasolTM(Gattefosse)和300mgPoloxamer 407TM的水溶液中，對整個(gè)混合物進(jìn)行攪拌，以獲得均勻的溶液。按照實(shí)施例1的方法，制備含頭孢曲松的可口服給藥納米顆粒制劑。按照實(shí)施例1的方法，測定其粒徑和分散度，結(jié)果其平均粒徑為199.0nm，分散度為0.135。
比較實(shí)施例5按照與實(shí)施例6相同的方法制備液體制劑，但用頭孢曲松代替頭孢曲松-抗衡離子物質(zhì)絡(luò)合物，而且既不使用聚合物也不使用微流化儀。按照實(shí)施例1的方法測定其粒徑和分散度，結(jié)果平均粒徑為149.4nm，分散度為0.124。
實(shí)施例7含頭孢曲松的可口服給藥納米顆粒制劑的制備將240mg頭孢曲松-抗衡離子物質(zhì)的絡(luò)合物和1200mg CapryolTM(Gattefosse)溶解在15ml乙醇中。將此溶液加入30ml含240mgLabrasolTM、30mg殼聚糖和300mg Poloxamer 407TM的水溶液中，對整個(gè)混合物進(jìn)行攪拌。然后按照實(shí)施例1的方法，制備含頭孢曲松的可口服給藥納米顆粒制劑。加入300mg枸椽酸，作為添加劑以增加殼聚糖的溶解度。按照實(shí)施例1的方法，測定其粒徑和分散度，結(jié)果其平均粒徑為290.1nm，分散度為0.197。
實(shí)驗(yàn)1藥物包載率的測定將上面實(shí)施例1和實(shí)施例1a至7，以及比較實(shí)施例1至5中制備的500μl液體制劑分散至500μl蒸餾水中。然后，將此分散體加入Centricon YM-30TM(fractionation MW30,000，Millipore)，并以1500g的相對離心力離心60分鐘。分析上面分離濾液中的藥物，計(jì)算該納米顆粒中的藥物包載率。所得結(jié)果見下面表4。
表4可口服給藥納米顆粒制劑中的藥物包載率

實(shí)驗(yàn)2酶降解性的評(píng)價(jià)-通過蛋白酶/脂肪酶，胰酶的降解脂肪酶存在于體內(nèi)，而且由脂質(zhì)組成的納米顆粒應(yīng)當(dāng)對脂肪酶穩(wěn)定，這樣包載于脂質(zhì)納米顆粒中的胰島素才不會(huì)暴露于外部，而且這樣不會(huì)被蛋白酶所降解。檢測實(shí)施例和比較實(shí)施例制劑對體內(nèi)酶的穩(wěn)定性，這些酶可降解蛋白和脂質(zhì)，如胰酶。
將上面實(shí)施例1、1a和3至5，以及比較實(shí)施例1至4中制備的5ml液體制劑加入到15ml含0.0067％胰酶(USP級(jí))的緩沖液中，其pH為7.4。在37℃將此反應(yīng)進(jìn)行0、1、3和5小時(shí)，測定胰島素的剩余量，結(jié)果見下面表5。
表5含胰島素的可口服給藥納米顆粒制劑對胰酶的穩(wěn)定性

如上面表4和5所示，實(shí)施例1至5含胰島素-抗衡離子絡(luò)合物和脂質(zhì)/聚合物的制劑具有較高的藥物包載率和酶穩(wěn)定性。相反，僅含脂質(zhì)的比較實(shí)施例1的制劑和僅含聚合物的比較實(shí)施例4的制劑對酶的穩(wěn)定性極低，即5小時(shí)后胰島素對胰酶的穩(wěn)定性甚至小于20％。
特別是，由胰島素制備，而不是由胰島素-抗衡離子絡(luò)合物制備的比較實(shí)施例1和2的納米顆粒制劑具有較低的藥物包載率。如表5所示，含聚合物的比較實(shí)施例2制劑對酶的穩(wěn)定性高于不含聚合物的比較實(shí)施例1的制劑。
在制備納米顆粒制劑中僅使用微流化儀而制備的比較實(shí)施例3制劑具有較低的胰島素-抗衡離子絡(luò)合物包載率，而且它對酶的穩(wěn)定性比實(shí)施例1制劑低，實(shí)施例1的制劑是通過首先使用這種為乙醇的增溶劑，然后再使用微流化儀而制備的。使用增溶劑而不使用微流化儀所制備的實(shí)施例1a的納米顆粒制劑具有較高的藥物包載率，其對酶的穩(wěn)定性與實(shí)施例1制劑相似。
如上所述，由胰島素而不是由胰島素-抗衡離子絡(luò)合物制備的納米顆粒制劑具有較低的藥物包載率，而由脂質(zhì)和聚合物組成的納米顆粒制劑對酶具有較高的穩(wěn)定性。另外，僅應(yīng)用微流化儀是不充分的，應(yīng)用增溶劑初步形成的納米顆粒對于獲得具有高藥物包載率和對酶穩(wěn)定性的納米顆粒制劑是必須的。
所以，通過形成藥物-抗衡離子絡(luò)合物，并將此絡(luò)合物包載于由脂質(zhì)和聚合物組成的載體中而制備的本發(fā)明的納米顆粒被證明不僅具有優(yōu)良的藥物包載率，而且對脂肪酶和蛋白酶還具有優(yōu)良的穩(wěn)定性。
實(shí)驗(yàn)3對動(dòng)物效力的評(píng)價(jià)1應(yīng)用實(shí)施例1所制備的可口服給藥納米顆粒液體制劑進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。
(1)誘發(fā)糖尿病給重量約180-220g的正常雄性Spraque Dawley大鼠腹膜內(nèi)注射45mg/kg鏈脲霉素(Sigma)2次，之間間隔2天，以產(chǎn)生I型糖尿病大鼠。1周后，給大鼠禁食12小時(shí)，然后采血，并測定血糖。結(jié)果血糖為300mg/dl或以上的大鼠被認(rèn)為是I型糖尿病大鼠，在下面實(shí)驗(yàn)中使用這些大鼠。應(yīng)用Glucotrand2TM(Roche)測定血糖。
(2)測定可口服給藥納米顆粒液體制劑中胰島素的生理學(xué)活性將2ml實(shí)施例1制備的納米顆粒液體制劑分散在2ml生理鹽水中，并以3IU/kg胰島素給I型糖尿病大鼠進(jìn)行肌注。
以3IU/kg胰島素將稀釋于pH7.4緩沖液中的胰島素肌注給I型糖尿病大鼠，以此作為參考組。在給定的時(shí)間間隔從尾靜脈采血。
如附圖2所示，將本發(fā)明可口服給藥納米顆粒液體制劑與胰島素溶液中的胰島素生理學(xué)活性進(jìn)行比較，證實(shí)本發(fā)明納米顆粒液體制劑可完整地保持胰島素的生理學(xué)活性。因此，下面應(yīng)用本發(fā)明液體制劑進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。
(3)可口服給藥納米顆粒液體制劑的胃腸道吸收試驗(yàn)1)血糖的測定將I型糖尿病大鼠進(jìn)行乙醚麻醉，打開腹腔。取出小腸并將含胰島素的液體制劑應(yīng)用于闌尾頂部上面5cm處，給藥劑量為20/kg。然后縫合切口，使此糖尿病大鼠可自由活動(dòng)飲水。
試驗(yàn)組應(yīng)用實(shí)施例1、比較實(shí)施例1和實(shí)施例1a的制劑。比較實(shí)施例1的制劑是既不含胰島素-抗衡離子物質(zhì)絡(luò)合物，也不含聚合物的納米顆粒制劑，所以其藥物包載率和酶穩(wěn)定性均低于實(shí)施例1的制劑。實(shí)施例1a的制劑藥物包載率和酶穩(wěn)定性均高，但由于未使用微流化儀，其粒徑大于實(shí)施例1的制劑。通過與實(shí)施例1相同的途徑應(yīng)用pH7.4的含胰島素的磷酸鹽緩沖液，給藥劑量為20IU/kg，它們作為參考組1；皮下注射胰島素注射液，給藥劑量為0.2IU/kg，它們作為參考組2。
在給藥后0、0.5、1、1.5、2、3、5和7小時(shí)在尾靜脈采血，測定血糖。將給藥前的起始值作為100％，以此為基礎(chǔ)測定血糖值。
如附圖3所示，在施用實(shí)施例1制劑的情況下，血糖下降約73％，但在施用比較實(shí)施例1制劑的情況下，血糖幾乎不下降。另外，省略通過微流化儀而制備的實(shí)施例1a制劑的降糖面積約為實(shí)施例1的70％。
如上所述，僅在脂質(zhì)載體中包載胰島素而不含胰島素-抗衡離子物質(zhì)絡(luò)合物的納米顆粒制劑，在體內(nèi)幾乎未顯示出降糖活性。另外，在制備脂質(zhì)納米顆粒制劑期間通過微流化儀減小粒徑，可將降糖活性提高約40％。
如附圖4所示，施用實(shí)施例1制劑與皮下注射0.2IU/kg胰島素的降糖活性非常相似。
2)胰島素血濃度的測定按照上述方法測定血糖。應(yīng)用實(shí)施例1、比較實(shí)施例1和實(shí)施例1a制劑進(jìn)行實(shí)驗(yàn)；而按照實(shí)施例1相同的途徑應(yīng)用不含胰島素的口服給藥納米顆粒液體制劑，以此作為對照組；皮下注射0.2IU/kg胰島素注射液，此作為參考組。
在給藥后0、0.5、1、1.5、2、3和5小時(shí)從尾靜脈采血，應(yīng)用胰島素分析盒(Coat-a-countTM，Diagnostic Products Corporation)測定胰島素血濃度。
如附圖5所示，未含胰島素的對照組中胰島素血濃度小于20μIU/ml，但在實(shí)施例1制劑中胰島素最大血濃度約為170μIU/ml，因此胰島素吸收率高。僅在脂質(zhì)載體中包載胰島素而無胰島素-抗衡離子絡(luò)合物的比較實(shí)施例1制劑在最大血濃度時(shí)胰島素的吸收率僅約為15μIU/ml。未通過微流化儀的實(shí)施例1a制劑在最大血濃度時(shí)胰島素吸收率約為70μIU/ml。另外，按照時(shí)間相對于初始胰島素濃度，比較胰島素增大的面積(AUC)，實(shí)施例1制劑與實(shí)施例1a制劑相比AUC增大了約140％。這與按照時(shí)間比較血濃度減小面積的結(jié)果相似。
證實(shí)在含有聚合物的脂質(zhì)載體中包載胰島素-抗衡離子物質(zhì)絡(luò)合物，而且通過高壓均化器減小粒徑，這樣對于提高I型糖尿病大鼠的胰島素吸收率很有效。
如附圖6所示，施用實(shí)施例1制劑，其胰島素血濃度曲線與皮下注射0.2IU/kg胰島素相似，皮下注射0.2IU/kg胰島素可應(yīng)用于早期的糖尿病患者。
實(shí)驗(yàn)4對動(dòng)物效力的評(píng)價(jià)2應(yīng)用實(shí)施例6和7，以及比較實(shí)施例5所制備的含頭孢曲松可口服給藥納米顆粒液體制劑進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。
(1)可口服給藥納米顆粒液體制劑的胃腸道吸收試驗(yàn)1)血糖的測定對正常大鼠(Sprague Dawley，雄性，體重約200g)進(jìn)行乙醚麻醉，打開腹腔。取出十二指腸，并將含頭孢曲松的納米顆粒液體制劑施用于其上，給藥劑量為40mg/kg頭孢曲松。
將實(shí)施例6和實(shí)施例7，以及比較實(shí)施例5的制劑用作試驗(yàn)組。比較實(shí)施例5的制劑既不含頭孢曲松-抗衡離子物質(zhì)絡(luò)合物，也不含聚合物，所以與實(shí)施例6的制劑相比，比較實(shí)施例5制劑的藥物包載率較低，而且不能控制藥物的溶出。
在給藥后0、0.5、1、1.5、2、3和4小時(shí)從尾靜脈采血，按照美國藥典中頭孢曲松分析方法進(jìn)行分析。在3000rpm將血離心10分鐘，加入等量乙腈進(jìn)行預(yù)處理。
通過與實(shí)施例6相同的途徑施用溶于水的頭孢曲松，給藥劑量為40mg/kg，此作為參考組1。
靜脈注射溶于生理鹽水的頭孢曲松，給藥劑量為20mg/kg，此作為參考組2。
如附圖7和8所示，與靜脈注射相比，在施用實(shí)施例6和7制劑的情況下，其生物利用度分別為22.8％和35.1％。相反，在施用頭孢曲松水溶液的參考組1中，頭孢曲松在體內(nèi)幾乎不吸收，而與施用實(shí)施例制劑的組相比，施用比較實(shí)施例5制劑的組中最大血濃度較低，生物利用度僅約為12.4％，在比較實(shí)施例5制劑中頭孢曲松僅包載于脂質(zhì)中。在施用實(shí)施例6和7制劑的情況下，頭孢曲松血濃度比施用比較實(shí)施例5的制劑下降慢。特別是，在1.5小時(shí)后藥物血濃度保持較高，而起始藥物濃度低于參考組2，此參考組2采用靜脈注射頭孢曲松。由此結(jié)果可以認(rèn)為，本發(fā)明的組合物可減小高起始血濃度所帶來的副作用，而且比靜脈注射具有更長時(shí)間的藥理學(xué)作用。
如上所述，本發(fā)明組合物具有納米顆粒中高的水溶性藥物包載率，可在體內(nèi)保護(hù)藥物免受脂肪酶或蛋白酶的作用，而且在胃腸道中具有較高的吸收率，因此具有較高的藥物血濃度。
工業(yè)應(yīng)用如上所述，本發(fā)明可口服給藥納米顆粒組合物具有納米顆粒中高的水溶性藥物包載率，可保護(hù)不穩(wěn)定的藥物免受胃腸道酶的作用，而且對于胃腸道粘膜具有較高的吸收率。因此對于因?yàn)殡姾蓡栴}而致口服給藥受限的水溶性藥物來說，本發(fā)明組合物作為藥物傳送系統(tǒng)在提高這些水溶性藥物的生物利用度方面非常有用。
權(quán)利要求
1.一種含有納米顆粒的可口服給藥組合物，此納米顆粒的粒徑為500nm或更小，該組合物包括水溶性藥物和抗衡離子物質(zhì)的絡(luò)合物，占0.1-30％重量，在此絡(luò)合物中帶電水溶性藥物與抗衡離子物質(zhì)結(jié)合；脂質(zhì)，占0.5-80％重量；聚合物，占0.5-80％重量；以及乳化劑，占1-80％重量，其中所述脂質(zhì)與所述聚合物的重量比為1∶0.05-3。
2.權(quán)利要求1的組合物，其中70％或以上的水溶性藥物包載于此納米顆粒中。
3.權(quán)利要求1的組合物，其中此水溶性藥物的80％或以上在胰酶存在的情況下被保留。
4.權(quán)利要求1的組合物，其中該水溶性藥物為蛋白/肽類藥物，它選自胰島素、紅細(xì)胞生成素、降鈣素、生長激素、干擾素和生長抑素。
5.權(quán)利要求1的組合物，其中該水溶性藥物為在水中帶電的藥物，它選自肝素、頭孢類抗生素、阿侖膦酸鈉、依替膦酸鈉和帕米膦酸鈉。
6.權(quán)利要求1的組合物，其中抗衡離子物質(zhì)為陰離子化合物，它選自C8-18脂肪酸的鈉鹽、膽汁酸的鈉鹽、藻酸鈉、羧甲基纖維素鈉及其混合物。
7.權(quán)利要求6的組合物，其中脂肪酸的鈉鹽選自油酸鈉、十二烷基硫酸鈉、己酸鈉和月桂酸鈉。
8.權(quán)利要求1的組合物，其中抗衡離子物質(zhì)為陽離子化合物，它選自肉堿鹽、苯扎氯銨、溴化十六烷基三甲銨及其混合物。
9.權(quán)利要求1的組合物，其中水溶性藥物和抗衡離子物質(zhì)的摩爾比為1∶0.1-20。
10.權(quán)利要求9的組合物，其中水溶性藥物和抗衡離子物質(zhì)的摩爾比為1∶3-10。
11.權(quán)利要求1的組合物，其中脂質(zhì)和聚合物的重量比為1∶0.2-1。
12.權(quán)利要求1的組合物，其中該脂質(zhì)為脂肪醇，它選自單酸甘油酯、甘油二酯、脂肪酸丙二醇酯、脂肪酸甘油酯、十六醇十八醇混合物、十六醇及其混合物。
13.權(quán)利要求1的組合物，其中該聚合物選自甲基丙烯酸共聚物、鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素、乙酸丁二酸羥丙基甲基纖維素、乙酸鄰苯二甲酸纖維素、紫膠、殼聚糖、羥丙基甲基纖維素及其衍生物、乙基纖維素、甲基纖維素、聚乙烯醇、藻酸鈉、卡波姆及其混合物。
14.權(quán)利要求1的組合物，其中該乳化劑選自聚氧乙烯聚氧丙烯共聚物、聚乙二醇烷基醚、聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯脫水山梨醇脂肪酸酯、天然植物油甘油三酯和聚亞烷基多元醇的酯交換產(chǎn)物、甘油脂肪酸酯、維生素E聚丁二酸乙二醇酯、卵磷脂、十二烷基硫酸鈉、膽汁酸及其衍生物，以及它們的混合物。
15.權(quán)利要求1的組合物，它還包括50％重量或以下的增溶劑。
16.權(quán)利要求15的組合物，其中該增溶劑選自C1-8醇、二甲亞砜、二氯甲烷、甲苯、丙二醇、聚乙二醇和12-羥硬脂酸酯。
17.權(quán)利要求1的組合物，它還包括0.1-30％重量的冷凍保護(hù)劑。
18.權(quán)利要求17的組合物，其中冷凍保護(hù)劑選自葡萄糖、甘露醇、山梨醇、海藻糖、氨基酸、白蛋白及其混合物。
19.權(quán)利要求1的組合物，其中該納米顆粒的粒徑為20-300nm。
20.權(quán)利要求1的可口服給藥納米顆粒組合物的制備方法，該方法包括以下步驟(a)將帶電水溶性藥物與抗衡離子物質(zhì)進(jìn)行離子化結(jié)合，以形成水溶性藥物和抗衡離子物質(zhì)的絡(luò)合物；(b1)將脂質(zhì)、聚合物和增溶劑加入步驟(a)所得絡(luò)合物中，并將它們?nèi)芙?，然后將所得溶液加入含有乳化劑的水溶液中，以獲得均勻的液相；或者(b2)將脂質(zhì)和增溶劑加入所得絡(luò)合物中，并將它們?nèi)芙猓缓髮⑺萌芤杭尤牒芯酆衔锖腿榛瘎┑乃芤褐?，以獲得均勻的液相；和(c)去除步驟(b1)或(b2)所得混合物中的增溶劑。
21.權(quán)利要求20的方法，還包括步驟(d)，即應(yīng)用微流化儀將粒徑最小化。
22.權(quán)利要求20的方法，其中在步驟(a)中通過用pH調(diào)節(jié)劑處理水溶性藥物，使其帶有電荷，以此獲得帶電的水溶性藥物。
23.權(quán)利要求22的方法，其中pH調(diào)節(jié)劑選自鹽酸、磷酸、碳酸、枸櫞酸、氫氧化鈉、磷酸一氫鈉/鉀、磷酸二氫鈉/鉀、磷酸鈉、枸櫞酸鈉及其混合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種含有納米顆粒的可口服給藥組合物，此納米顆粒的粒徑為500nm或更小，該組合物包括水溶性藥物和抗衡離子物質(zhì)的絡(luò)合物，占0.1－30％(重量)，在此絡(luò)合物中帶電水溶性藥物與抗衡離子物質(zhì)結(jié)合；脂質(zhì)，占0.5－80％(重量)；聚合物，占0.5－80％(重量)；以及乳化劑，占1－80％(重量)，其中脂質(zhì)與聚合物的重量比為1∶0.05－3，本發(fā)明還涉及此組合物的制備方法。本發(fā)明的組合物在口服給藥后具有高胃腸吸收率，在納米顆粒中具有高藥物包載率，而且還對脂肪酶穩(wěn)定。
文檔編號(hào)A61K31/727GK1897975SQ200480038663
公開日2007年1月17日 申請日期2004年12月24日 優(yōu)先權(quán)日2003年12月24日
發(fā)明者裵哲民, 閔美泓, 黃俊碩, 趙慶美 申請人:株式會(huì)社三養(yǎng)社