專(zhuān)利名稱(chēng)：一種抗腫瘤的中藥凍干粉針劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬中藥制藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種抗腫瘤的中藥凍干粉針劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
腫瘤病嚴(yán)重威脅人類(lèi)的身體健康，不僅是一個(gè)巨大的醫(yī)療問(wèn)題，也是一個(gè)巨大的社會(huì)問(wèn)題，由于腫瘤病發(fā)病率高且來(lái)勢(shì)兇猛所以一般地說(shuō)沒(méi)有特別有效的治療藥物和方法；現(xiàn)有技術(shù)中用西藥結(jié)合放、化療對(duì)此類(lèi)疾病進(jìn)行治療，由于西藥的副作用特別大，所以患者身體難于承受，惡性腫瘤的一個(gè)特點(diǎn)是腫瘤細(xì)胞容易擴(kuò)散，手術(shù)后容易復(fù)發(fā)，腫瘤之所以難治，與此不無(wú)關(guān)系。目前應(yīng)用中醫(yī)藥治療腫瘤方面已經(jīng)取得了很大的進(jìn)展。
得力生注射液是人參、黃芪、斑蝥、蟾酥的全成份提取液，具有益氣扶正，消癥散結(jié)功效，用于中晚期原發(fā)性肝癌氣虛瘀滯證，癥見(jiàn)右肋腹積塊，疼痛不移，腹脹食少，倦怠乏力等。得力生注射液由毒性中藥蟾酥、斑蝥和扶正補(bǔ)益藥人參、黃芪相須配伍，使抑制殺滅癌細(xì)胞和提高人體免疫力功能的功效并存，降低了抗癌中藥的毒性，提高了抗癌的療效。該藥具有直接抑制殺傷癌細(xì)胞、促進(jìn)癌細(xì)胞再分化、協(xié)同化療增效減毒以及止痛抗應(yīng)激等藥理作用。在給藥上采用目前國(guó)際醫(yī)學(xué)界流行的鎖骨下靜脈給藥的途徑，既提高了藥物的生物利用度，又減輕了病人的用藥痛苦，使臨床用藥更加安全可靠。得力生注射液借助組方的優(yōu)勢(shì)，以毒攻毒，攻補(bǔ)兼施，含有人參、黃茂等益氣固本之品，不但能減輕腫瘤病人因放、化療所造成的不良反應(yīng)，而且，能夠調(diào)整機(jī)體免疫功能，固本培元，調(diào)動(dòng)人體自身的防御系統(tǒng)。專(zhuān)利(ZL94101456)公開(kāi)了一種含有上述藥味的中藥注射劑及其制備方法。
但是由于該注射液含有斑蝥、蟾酥兩味毒性較強(qiáng)的藥，兩者所含的有效成分同時(shí)又是毒性成分，因而使用時(shí)不良反應(yīng)多，除了較強(qiáng)的皮膚血管刺激性外，對(duì)肝腎和泌尿系統(tǒng)都也有影響，用藥不當(dāng)甚至?xí)鹚劳?；該注射液制備工藝黃芪和斑蝥采用石硫醇法提取精制，由于石硫醇法處理的藥液無(wú)機(jī)鹽含量比較高，制成的注射液往往產(chǎn)生疼痛，因而也加大了注射液對(duì)肌肉和血管的刺激性。另由于斑蝥素?fù)]發(fā)性較強(qiáng)，蟾蜍毒素穩(wěn)定性差，這些因素使得制劑質(zhì)量也不易控制；同時(shí)由于是注射液，它的攜帶、使用均不方便，容易受到污染，藥品的穩(wěn)定性比較差、易出現(xiàn)沉淀，同時(shí)運(yùn)輸不方便，配制的方法也比較復(fù)雜，這些都限制了其在臨床上的進(jìn)一步廣泛應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容
基于上述原因，為了彌補(bǔ)上述制劑的不足，本發(fā)明研究人員經(jīng)反復(fù)研究，對(duì)提取工藝進(jìn)行了改變，確定了本發(fā)明的制備方法，并將蟾酥和斑蝥提取物進(jìn)行包合，大大降低了制劑的毒性。增加了斑蝥和蟾酥提取物的穩(wěn)定性，人參、黃芪提取物和斑蝥、蟾酥提取物包合物與適宜輔料制備成凍干粉針劑。
本發(fā)明的目的是公開(kāi)一種療效好、毒性小、穩(wěn)定性好、方便使用的抗腫瘤的中藥凍干粉針制劑。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供上述凍干粉針制劑的制備方法。
本發(fā)明通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)。
一、制備方法(1)原料藥重量份組成人參50份、黃芪150份、蟾酥1份、斑蝥5份。
(2)取人參、黃芪，加6倍量30-50％的乙醇回流提取三次，每次回流時(shí)間為2-3小時(shí)，乙醇回流液減壓回收乙醇并濃縮成浸膏，加4-8水稀釋?zhuān)o置，過(guò)濾，濾液減壓濃縮并干燥，得干浸膏A；取人參、黃芪藥渣，以6倍量的水煎煮三次，每次煮沸1小時(shí)，合并三次水煎液，減壓濃縮，加乙醇使含醇量達(dá)60％，過(guò)濾，沉淀加水溶解，離心，離心液減壓濃縮，加乙醇使含醇量達(dá)80％，低溫靜置，過(guò)夜，傾出上清液，沉淀加乙醇攪拌，過(guò)濾，醇洗，真空干燥，與干浸膏A合并得人參、黃芪提取物。
(3)取斑蝥，置入10倍量0.5％NaOH溶液中。用800kHz超聲波提取30min，濾過(guò)，殘?jiān)偌?0倍量上述溶劑，同法提取15min，濾過(guò)，合并濾液，將之濃縮成每10ml相當(dāng)于1.0g生藥備用；取蟾酥，加10倍以上的95％的乙醇，浸泡24小時(shí)以上，過(guò)濾，棄去殘?jiān)?，然后揮發(fā)盡乙醇；合并斑蝥和蟾酥提取液。真空干燥，得斑蝥、蟾酥提取物。
(4)取斑蝥、蟾酥提取物加乙醇溶解，稱(chēng)取羥丙基-β-環(huán)糊精，加蒸餾水加熱溶解，配成飽和溶液，冷至室溫，按照斑蝥、蟾酥提取物∶羥丙基-β-環(huán)糊精＝1∶10-25的比例加入斑蝥、蟾酥提取物，邊加邊攪拌，攪拌時(shí)間1小時(shí)，溫度控制30℃-45℃，靜置，離心，濾過(guò)，低溫干燥，得到斑蝥、蟾酥提取物包合物。
(5)制劑處方人參、黃芪提取物35-45重量份， 斑蝥、蟾酥提取物包合物8-12重量份，藥用輔料47-102重量份。
(6)取上述人參、黃芪提取物與斑蝥、蟾酥提取物包合物和藥用輔料，加注射用水溶解，加注射用水至規(guī)定量，調(diào)節(jié)pH值至6.0-7.0，微孔濾膜濾過(guò)，灌裝，冷凍干燥，即得。
本發(fā)明根據(jù)藥物有效成分的性質(zhì)，改變了原制劑的提取方法，使得提取的有效成分更全面，純度更高，并對(duì)黃芪、斑蝥的石硫醇的純化方法進(jìn)行了改變，使提取物中無(wú)機(jī)鹽含量減少，降低了制劑的刺激性。
羥丙基-β-環(huán)糊精水溶性、穩(wěn)定性和安全性都比較好，本發(fā)明斑蝥、蟾酥提取物用羥丙基-β-環(huán)糊精包合，包合率可以達(dá)到90％，包合效率高，用本發(fā)明方法將斑蝥、蟾酥提取物包合后，不僅可以增加斑蝥、蟾酥提取物的穩(wěn)定性，且顯著降低了斑蝥、蟾酥提取物的刺激性和毒副作用，使臨床用藥安全性大大提高。藥理實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明的中藥復(fù)方凍干粉針劑具有更好的藥理作用。
二、斑蝥、蟾酥提取物包合工藝的優(yōu)選為了進(jìn)一步篩選本發(fā)明羥丙基-β-環(huán)糊精包合的最佳用量，根據(jù)上述試驗(yàn)用飽和水溶液法以下述試驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)包合工藝最佳用量進(jìn)行了進(jìn)一步確定，分別測(cè)定包合率和斑蝥、蟾酥提取物利用率，結(jié)果見(jiàn)表1。
表1 不同羥丙基-β-環(huán)糊精用量包合效果比較

由以上試驗(yàn)結(jié)果可知，羥丙基-β-環(huán)糊精包合斑蝥、蟾酥提取物，具有很強(qiáng)的選擇性，客體的投入量對(duì)包合率有較大的影響，其中斑蝥、蟾酥提取物∶羥丙基-β-環(huán)糊精比例為1∶10時(shí)比1∶8時(shí)包合率顯著提高，繼續(xù)增加比例至1∶25時(shí)，包合率都在85％以上，且比較穩(wěn)定，而羥丙基-β-環(huán)糊精比例增加至1∶30后包合率反而顯著降低，因此說(shuō)明本發(fā)明斑蝥、蟾酥提取物用羥丙基-β-環(huán)糊精包合時(shí)的最佳用量為1∶10至1∶25，尤其是1∶10-1∶15。
三、穩(wěn)定性比較實(shí)驗(yàn)藥物本發(fā)明凍干粉針劑(廣東天之驕藥物開(kāi)發(fā)有限公司實(shí)驗(yàn)室提供)；市售得力生注射液(北京凱環(huán)制藥廠)。
實(shí)驗(yàn)方法采用加速實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)，將市售得力生注射液和本發(fā)明凍干粉針劑放置在室溫37℃，相對(duì)濕度為75％的條件保存，由于制劑中所含藥物斑蝥素具有揮發(fā)性、穩(wěn)定性相對(duì)較差，因此以斑蝥素的含量為指標(biāo)對(duì)制劑的穩(wěn)定性進(jìn)行考察進(jìn)行了測(cè)定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。
表2 各組制劑的含量變化(mg/支)

結(jié)論通過(guò)上述穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)我們可以觀察到本發(fā)明凍干粉針劑的斑蝥素含量在6個(gè)月內(nèi)基本沒(méi)有變化較小，而得力生注射液的斑蝥素含量稍有下降，充分說(shuō)明本發(fā)明凍干粉針劑穩(wěn)定性更好。
三、藥理毒理實(shí)施例試藥與動(dòng)物得力生注射液(北京凱環(huán)制藥廠)；本發(fā)明凍干粉針劑(廣東天之驕藥物開(kāi)發(fā)有限公司實(shí)驗(yàn)室提供，按本發(fā)明制備方法制備)；昆明種小鼠，體重18-22g，由上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物室提供；小鼠肉瘤S180、小鼠腹水型肝癌HepA小鼠移植性肝癌H22等瘤株，由中科院上海藥物研究所引進(jìn)；1.對(duì)小鼠S180肉瘤的影響實(shí)驗(yàn)方法取健康、腫瘤生長(zhǎng)旺盛的肉瘤S180荷瘤小鼠，處死后取出瘤塊，在勻漿器中加入生理鹽水，制成腫瘤勻漿液，再以生理鹽水1∶3稀釋?zhuān)缓笕?.2ml注入小鼠左腋下皮下，24小時(shí)稱(chēng)重，取實(shí)驗(yàn)藥物，注射給藥劑量為5g生藥/kg，每日小鼠尾靜脈給藥一次，對(duì)照組尾靜脈給藥注射0.2ml生理鹽水，連續(xù)給藥10天。停藥次日處死小鼠，稱(chēng)體重并小心剝離皮下瘤塊，于EM50電子天平稱(chēng)取瘤重。結(jié)果見(jiàn)表3。
表3 對(duì)小鼠肉瘤S180的生長(zhǎng)抑制作用

注與生理鹽水組比較**P＜0.01，與陽(yáng)性對(duì)照組比較ΔP＜0.052.對(duì)移植性肝癌H22的抑瘤作用無(wú)菌抽取接種后第7d的H22荷瘤小鼠腹水，加4倍量生理鹽水混勻，立即接種于小鼠右前肢腋窩處皮下，每只接種0.2ml，接種后24h隨機(jī)分組，尾靜脈注射給藥，給藥劑量同上，每日給藥1次，連續(xù)給藥10d，于末次給藥后24h脫頸處死小鼠，剝?nèi)∧[瘤稱(chēng)重，按照公式(對(duì)照組平均瘤重-給藥組平均瘤重)×100％/對(duì)照組瘤重，求出抑瘤率，所用小鼠均為雄性。結(jié)果見(jiàn)表4。
表4 對(duì)移植性肝癌H22的抑瘤作用

注與生理鹽水組比較**P＜0.01，與陽(yáng)性對(duì)照組比較ΔP＜0.053.對(duì)小鼠腹水型肝癌HepA的影響無(wú)菌抽取HepA腹水，以生理鹽水1∶2倍稀釋?zhuān)渴蟾骨唤臃N0.2ml，24h后分組稱(chēng)體重并給藥，分組和給藥劑量同前，連續(xù)10d，以后觀察小鼠的死亡時(shí)間(以天計(jì)算)，結(jié)果用平均存活天數(shù)和生命延長(zhǎng)率表示。試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表5。
表5 對(duì)移植性肝癌H22的抑瘤作用

注*p＜0.05，**p＜0.01結(jié)論由上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明本發(fā)明凍干粉針劑具有比得力生注射液更顯著的抗腫瘤作用。
4.長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)取健康大鼠60只(wistar種)，分得力生注射液組、本發(fā)明凍干粉針劑組和空白對(duì)照組3組，每組20只，雌雄各半，每天尾靜脈給藥一次，給藥7天后停一天，繼續(xù)給藥，連續(xù)給藥7周，對(duì)照組給予生理鹽水，觀察給藥前期、中期、后期、停藥15天后的外觀行為、活動(dòng)、毛皮、食量、分辯等變化，并進(jìn)行血常規(guī)化驗(yàn)及肝、腎功能檢查，記錄心電圖、每隔10天稱(chēng)重，調(diào)整給藥劑量，各組實(shí)驗(yàn)大鼠分批處死，第一批停藥后2天處死一半，其余停藥后15天處死，處死后取心肝脾胃肺腎腎上腺淋巴結(jié)胰胸腺和睪丸或子宮、卵巢等器官，并常規(guī)石蠟切片，HE染色的病理切片進(jìn)行光鏡檢查，結(jié)果表明，本發(fā)明凍干粉針劑組血液生化指標(biāo)、肝腎功能及各器官組織切片與對(duì)照組比較，均屬正常范圍，未見(jiàn)明顯中毒病變，而得力生注射液組與對(duì)照組比較，其中3只小鼠肝腎組織有明顯病變。
四、刺激性試驗(yàn)血管刺激性試驗(yàn)取家兔8只，隨機(jī)均分2組，每組4只，分別于左耳把家兔置于固定器中，且頭用兔頭固定儀固定，耳緣靜脈滴注得力生注射液和本發(fā)明凍干粉，滴注速度為20滴/min，每天上午滴注1次(相當(dāng)于60kg人1次靜滴量的3倍)，連續(xù)1周。觀察耳緣靜脈反應(yīng)，每日觀察注射部位血管有無(wú)發(fā)紅、水腫、周?chē)袩o(wú)滲血，觸摸血管有無(wú)變硬現(xiàn)象，左右耳比較觀察。于末次給藥后24h，將動(dòng)物處死，取下左耳，進(jìn)行組織切片檢查，切片部位為進(jìn)針部位的向心端，距進(jìn)針部位1-4cm，分1-2.5cm和2.5-4cm兩段取樣。
觀察指標(biāo)及評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)觀察方法包括肉眼觀察和顯微鏡下病理觀察。觀察給藥血管及其周?chē)M織的變化，顯微鏡下觀察耳緣靜脈有無(wú)血栓形成、內(nèi)皮損傷及血管周?chē)M織的病理變化情況。對(duì)各項(xiàng)指標(biāo)評(píng)分。①血管變化。肉眼觀察無(wú)明顯充血記0分，輕度充血發(fā)紅、紋路清晰記1分，充血發(fā)紅、紋路不清記2分，重度充血、呈紫紅色記3分；顯微鏡觀察血管內(nèi)皮及血管壁完整記0分，有內(nèi)皮損傷記1分，有血栓栓塞記2分，血管破裂記3分。②血管周?chē)M織變化。肉眼觀察無(wú)明顯水腫記0分，輕微水腫記1分，明顯水腫記2分，嚴(yán)重水腫記3分；顯微鏡觀察周?chē)M織正常記0分，水腫記1分，出血記2分，有炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)記3分。將每組4只家兔各項(xiàng)觀察指標(biāo)得分累加，計(jì)算各組平均得分值。
表6 刺激性試驗(yàn)結(jié)果

由以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知本發(fā)明凍干粉針劑與得力生注射液比較刺激性具有明顯改善。
五、制備實(shí)施例實(shí)施例1(1)原料藥組成人參100g、黃芪300g、蟾酥2g、斑蝥10g。
(2)取人參、黃芪，加6倍50％的乙醇回流提取三次，每次回流時(shí)間為2小時(shí)，乙醇回流液減壓回收乙醇并濃縮，濃縮液加4倍量水稀釋?zhuān)瑪噭颍o置，過(guò)濾，濾液減壓濃縮并干燥，得干浸膏A。
(3)取人參、黃芪藥渣，以6倍量的水煎煮三次，每次煮沸1小時(shí)，合并三次水煎液，減壓濃縮，加乙醇使含醇量達(dá)60％，過(guò)濾，沉淀加水溶解，離心，離心液減壓濃縮，加乙醇使含醇量達(dá)80％，低溫靜置，過(guò)夜，傾出上清液，沉淀加乙醇攪拌，過(guò)濾，醇洗，真空干燥，與干浸膏A合并，得人參、黃芪提取物38g。
(4)取斑蝥，置入10倍量0.5％NaOH溶液中。用800kHz超聲波提取30min，濾過(guò)，殘?jiān)偌?0倍量上述溶劑，同法提取15min，濾過(guò)，合并濾液，將之濃縮成每10ml相當(dāng)于1.0g生藥備用；取蟾酥，加10倍以上的95％的乙醇，浸泡24小時(shí)以上，過(guò)濾，棄去殘?jiān)?，然后揮發(fā)盡乙醇；合并斑蝥和蟾酥提取液。真空干燥，得斑蝥、蟾酥提取物0.8g。
(5)取斑蝥、蟾酥提取物加乙醇溶解，稱(chēng)取羥丙基-β-環(huán)糊精，加蒸餾水加熱溶解，配成飽和溶液，冷至室溫，按照斑蝥、蟾酥提取物∶羥丙基-β-環(huán)糊精＝1∶10的比例加入斑蝥、蟾酥提取物，邊加邊攪拌，攪拌時(shí)間1小時(shí)，溫度控制30℃-45℃，靜置，離心，濾過(guò)，低溫干燥，得到斑蝥、蟾酥提取物包合物8.2g。
(6)制劑處方人參、黃芪提取物38g，斑蝥、蟾酥提取物包合物8.2g，甘露醇53.8g。
(7)取上述人參、黃芪提取物與斑蝥、蟾酥提取物包合物和甘露醇，加注射用水溶解，加注射用水至規(guī)定量，調(diào)節(jié)pH值至6.0-7.0，微孔濾膜濾過(guò)，灌裝，冷凍干燥，即得。
實(shí)施例2(1)原料藥組成人參100g、黃芪300g、蟾酥2g、斑蝥10g。
(2)取人參、黃芪，加6倍量40％的乙醇回流提取三次，每次回流時(shí)間為2.5小時(shí)，乙醇回流液減壓回收乙醇并濃縮，濃縮液加6倍量水稀釋?zhuān)瑪噭颍o置，過(guò)濾，濾液減壓濃縮并干燥，得干浸膏A。
(3)取人參、黃芪藥渣，以6倍量的水煎煮三次，每次煮沸1小時(shí)，合并三次水煎液，減壓濃縮，加乙醇使含醇量達(dá)60％，過(guò)濾，沉淀加水溶解，離心，離心液減壓濃縮，加乙醇使含醇量達(dá)80％，低溫靜置，過(guò)夜，傾出上清液，沉淀加乙醇攪拌，過(guò)濾，醇洗，真空干燥，與干浸膏A合并，得人參、黃芪提取物39.5。
(4)取斑蝥，置入10倍量0.5％NaOH溶液中。用800kHz超聲波提取30min，濾過(guò)，殘?jiān)偌?0倍量上述溶劑，同法提取15min，濾過(guò)，合并濾液，將之濃縮成每10ml相當(dāng)于1.0g生藥備用；取蟾酥，加10倍以上的95％的乙醇，浸泡24小時(shí)以上，過(guò)濾，棄去殘?jiān)?，然后揮發(fā)盡乙醇；合并斑蝥和蟾酥提取液。真空干燥，得斑蝥、蟾酥提取物0.78g。
(5)取斑蝥、蟾酥提取物加乙醇溶解，稱(chēng)取羥丙基-β-環(huán)糊精，加蒸餾水加熱溶解，配成飽和溶液，冷至室溫，按照斑蝥、蟾酥提取物∶羥丙基-β-環(huán)糊精＝1∶12的比例加入斑蝥、蟾酥提取物，邊加邊攪拌，攪拌時(shí)間1小時(shí)，溫度控制30℃-45℃，靜置，離心，濾過(guò)，低溫干燥，得到斑蝥、蟾酥提取物包合物8.5g。
(6)制劑處方人參、黃芪提取物39.5g，斑蝥、蟾酥提取物包合物8.5g，乳糖52g。
(7)取上述人參、黃芪提取物與斑蝥、蟾酥提取物包合物和乳糖，加注射用水溶解，加注射用水至規(guī)定量，調(diào)節(jié)pH值至6.0-7.0，微孔濾膜濾過(guò)，灌裝，冷凍干燥，即得。
實(shí)施例3(1)原料藥組成人參100g、黃芪300g、蟾酥2g、斑蝥10g。
(2)取人參、黃芪，加6倍30％的乙醇回流提取三次，每次回流時(shí)間為3小時(shí)，乙醇回流液減壓回收乙醇并濃縮，濃縮液加8倍量水稀釋?zhuān)瑪噭?，靜置，過(guò)濾，濾液減壓濃縮并干燥，得干浸膏A。
(3)取人參、黃芪藥渣，以6倍量的水煎煮三次，每次煮沸1小時(shí)，合并三次水煎液，減壓濃縮，加乙醇使含醇量達(dá)60％，過(guò)濾，沉淀加水溶解，離心，離心液減壓濃縮，加乙醇使含醇量達(dá)80％，低溫靜置，過(guò)夜，傾出上清液，沉淀加乙醇攪拌，過(guò)濾，醇洗，真空干燥，與干浸膏A合并，得人參、黃芪提取物35g。
(4)稱(chēng)取斑蝥，置入10倍量0.5％NaOH溶液中。用800kHz超聲波提取30min，濾過(guò)，殘?jiān)偌?0倍量上述溶劑，同法提取15min，濾過(guò)，合并濾液，將之濃縮成每10ml相當(dāng)于1.0g生藥備用；取蟾酥，加10倍以上的95％的乙醇，浸泡24小時(shí)以上，過(guò)濾，棄去殘?jiān)?，然后揮發(fā)盡乙醇；合并斑蝥和蟾酥提取液。真空干燥，得斑蝥、蟾酥提取物0.82g。
(5)取斑蝥、蟾酥提取物加乙醇溶解，稱(chēng)取羥丙基-β-環(huán)糊精，加蒸餾水加熱溶解，配成飽和溶液，冷至室溫，按照斑蝥、蟾酥提取物∶羥丙基-β-環(huán)糊精＝1∶15的比例加入斑蝥、蟾酥提取物，邊加邊攪拌，攪拌時(shí)間1小時(shí)，溫度控制30℃-45℃，靜置，離心，濾過(guò)，低溫干燥，得到斑蝥、蟾酥提取物包合物12g。
(6)制劑處方人參、黃芪提取物35g，斑蝥、蟾酥提取物包合物12g，右旋糖酐53g。
(7)取上述人參、黃芪提取物與斑蝥、蟾酥提取物包合物和右旋糖酐，加注射用水溶解，加注射用水至規(guī)定量，調(diào)節(jié)pH值至6.0-7.0，微孔濾膜濾過(guò)，灌裝，冷凍干燥，即得。
實(shí)施例4(1)原料藥組成人參100g、黃芪300g、蟾酥2g、斑蝥10g。
(2)取人參、黃芪，加6倍量50％的乙醇回流提取三次，每次回流時(shí)間為2-小時(shí)，乙醇回流液減壓回收乙醇并濃縮，濃縮液加4倍量水稀釋?zhuān)瑪噭?，靜置，過(guò)濾，濾液減壓濃縮并干燥，得干浸膏A。
(3)取人參、黃芪藥渣，以6倍量的水煎煮三次，每次煮沸1小時(shí)，合并三次水煎液，減壓濃縮，加乙醇使含醇量達(dá)60％，過(guò)濾，沉淀加水溶解，離心，離心液減壓濃縮，加乙醇使含醇量達(dá)80％，低溫靜置，過(guò)夜，傾出上清液，沉淀加乙醇攪拌，過(guò)濾，醇洗，真空干燥，與干浸膏A合并，得人參、黃芪提取物45g。
(4)取斑蝥，置入10倍量0.5％NaOH溶液中。用800kHz超聲波提取30min，濾過(guò)，殘?jiān)偌?0倍量上述溶劑，同法提取15min，濾過(guò)，合并濾液，將之濃縮成每10ml相當(dāng)于1.0g生藥備用；取蟾酥，加10倍以上的95％的乙醇，浸泡24小時(shí)以上，過(guò)濾，棄去殘?jiān)?，然后揮發(fā)盡乙醇；合并斑蝥和蟾酥提取液。真空干燥，得斑蝥、蟾酥提取物0.75g。
(5)取斑蝥、蟾酥提取物加乙醇溶解，稱(chēng)取羥丙基-β-環(huán)糊精，加蒸餾水加熱溶解，配成飽和溶液，冷至室溫，按照斑蝥、蟾酥提取物∶羥丙基-β-環(huán)糊精＝1∶10的比例加入斑蝥、蟾酥提取物，邊加邊攪拌，攪拌時(shí)間1小時(shí)，溫度控制30℃-45℃，靜置，離心，濾過(guò)，低溫干燥，得到斑蝥、蟾酥提取物包合物8.0g；(6)制劑處方人參、黃芪提取物45g，斑蝥、蟾酥提取物包合物8.0g，葡聚糖47g。
(7)取上述人參、黃芪提取物與斑蝥、蟾酥提取物包合物和葡聚糖，加注射用水溶解，加注射用水至規(guī)定量，調(diào)節(jié)pH值至6.0-7.0，微孔濾膜濾過(guò)，灌裝，冷凍干燥，即得。
實(shí)施例5(1)原料藥組成人參100g、黃芪300g、蟾酥2g、斑蝥10g。
(2)取人參、黃芪，加6倍量50％的乙醇回流提取三次，每次回流時(shí)間為2.5小時(shí)，乙醇回流液減壓回收乙醇并濃縮，濃縮液加4倍量水稀釋?zhuān)瑪噭?，靜置，過(guò)濾，濾液減壓濃縮并干燥，得干浸膏A。
(3)取人參、黃芪藥渣，以6倍量的水煎煮三次，每次煮沸1小時(shí)，合并三次水煎液，減壓濃縮，加乙醇使含醇量達(dá)60％，過(guò)濾，沉淀加水溶解，離心，離心液減壓濃縮，加乙醇使含醇量達(dá)80％，低溫靜置，過(guò)夜，傾出上清液，沉淀加乙醇攪拌，過(guò)濾，醇洗，真空干燥，與干浸膏A合并，得人參、黃芪提取物40g。
(4)取斑蝥，置入10倍量0.5％NaOH溶液中。用800kHz超聲波提取30min，濾過(guò)，殘?jiān)偌?0倍量上述溶劑，同法提取15min，濾過(guò)，合并濾液，將之濃縮成每10ml相當(dāng)于1.0g生藥備用；取蟾酥，加10倍以上的95％的乙醇，浸泡24小時(shí)以上，過(guò)濾，棄去殘?jiān)?，然后揮發(fā)盡乙醇；合并斑蝥和蟾酥提取液。真空干燥，得斑蝥、蟾酥提取物0.73g。
(5)取斑蝥、蟾酥提取物加乙醇溶解，稱(chēng)取羥丙基-β-環(huán)糊精，加蒸餾水加熱溶解，配成飽和溶液，冷至室溫，按照斑蝥、蟾酥提取物∶羥丙基-β-環(huán)糊精＝1∶10的比例加入斑蝥、蟾酥提取物，邊加邊攪拌，攪拌時(shí)間1小時(shí)，溫度控制30℃-45℃，靜置，離心，濾過(guò)，低溫干燥，得到斑蝥、蟾酥提取物包合物8g。
(6)制劑處方人參、黃芪提取物40g，斑蝥、蟾酥提取物包合物8g，葡萄糖102g。
(7)取上述人參、黃芪提取物與斑蝥、蟾酥提取物包合物和葡萄糖，加注射用水溶解，加注射用水至規(guī)定量，調(diào)節(jié)pH值至6.0-7.0，微孔濾膜濾過(guò)，灌裝，冷凍干燥，即得。
實(shí)施例6(1)原料藥組成人參100g、黃芪300g、蟾酥2g、斑蝥10g。
(2)取人參、黃芪，加6倍量50％的乙醇回流提取三次，每次回流時(shí)間為2.5小時(shí)，乙醇回流液減壓回收乙醇并濃縮，濃縮液加4倍量水稀釋?zhuān)瑪噭?，靜置，過(guò)濾，濾液減壓濃縮并干燥，得干浸膏A。
(3)取人參、黃芪藥渣，以6倍量的水煎煮三次，每次煮沸1小時(shí)，合并三次水煎液，減壓濃縮，加乙醇使含醇量達(dá)60％，過(guò)濾，沉淀加水溶解，離心，離心液減壓濃縮，加乙醇使含醇量達(dá)80％，低溫靜置，過(guò)夜，傾出上清液，沉淀加乙醇攪拌，過(guò)濾，醇洗，真空干燥，與干浸膏A合并，得人參、黃芪提取物40g。
(4)取斑蝥，置入10倍量0.5％NaOH溶液中。用800kHz超聲波提取30min，濾過(guò)，殘?jiān)偌?0倍量上述溶劑，同法提取15min，濾過(guò)，合并濾液，將之濃縮成每10ml相當(dāng)于1.0g生藥備用；取蟾酥，加10倍以上的95％的乙醇，浸泡24小時(shí)以上，過(guò)濾，棄去殘?jiān)?，然后揮發(fā)盡乙醇；合并斑蝥和蟾酥提取液。真空干燥，得斑蝥、蟾酥提取物0.72g。
(5)取斑蝥、蟾酥提取物加乙醇溶解，稱(chēng)取羥丙基-β-環(huán)糊精，加蒸餾水加熱溶解，配成飽和溶液，冷至室溫，按照斑蝥、蟾酥提取物∶羥丙基-β-環(huán)糊精＝1∶25的比例加入斑蝥、蟾酥提取物，邊加邊攪拌，攪拌時(shí)間1小時(shí)，溫度控制30℃-45℃，靜置，離心，濾過(guò)，低溫干燥，得到斑蝥、蟾酥提取物包合物20g。
(6)制劑處方人參、黃芪提取物40g，斑蝥、蟾酥提取物包合物20g，葡萄糖90g。
(7)取上述人參、黃芪提取物與斑蝥、蟾酥提取物包合物和葡萄糖，加注射用水溶解，加注射用水至規(guī)定量，調(diào)節(jié)pH值至6.0-7.0，微孔濾膜濾過(guò)，灌裝，冷凍干燥，即得。
權(quán)利要求
1.一種抗腫瘤的中藥凍干粉針劑，其特征在于它是由人參、黃芪提取物35-45重量份，斑蝥、蟾酥提取物包合物8-20重量份和藥用輔料47-102重量份制成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種抗腫瘤的中藥凍干粉針劑，其制備方法包括以下步驟(1)原料藥重量份組成人參50份、黃芪150份、蟾酥1份、斑蝥5份。(2)取人參、黃芪，用6倍量30％-50％的乙醇回流提取三次，每次回流時(shí)間為2-3小時(shí)，回流液減壓回收乙醇并濃縮成浸膏，浸膏加4-8倍量水稀釋?zhuān)o置，過(guò)濾，濾液減壓濃縮并干燥，得干浸膏A；取人參、黃芪藥渣，以6倍量的水煎煮三次，每次煮沸1小時(shí)，合并三次水煎液，減壓濃縮，加乙醇使含醇量達(dá)60％，過(guò)濾，沉淀加水溶解，離心，離心液減壓濃縮，加乙醇使含醇量達(dá)80％，低溫靜置，過(guò)夜，傾出上清液，沉淀加乙醇攪拌，過(guò)濾，醇洗，真空干燥，與干浸膏A合并得人參、黃芪提取物。(3)取斑蝥，置入10倍量0.5％NaOH溶液中。用800kHz超聲波提取30min，濾過(guò)，殘?jiān)偌?0倍量上述溶劑，同法提取15min，濾過(guò)，合并濾液，將之濃縮成每10ml相當(dāng)于1.0g生藥備用；取蟾酥，加10倍以上的95％的乙醇，浸泡24小時(shí)以上，過(guò)濾，棄去殘?jiān)?，然后揮發(fā)盡乙醇；合并斑蝥和蟾酥提取液。真空干燥，得斑蝥、蟾酥提取物。(4)取斑蝥、蟾酥提取物加乙醇溶解，稱(chēng)取羥丙基-β-環(huán)糊精，加蒸餾水加熱溶解，配成飽和溶液，冷至室溫，按照斑蝥、蟾酥提取物羥丙基-β-環(huán)糊精＝1∶10-25的比例加入斑蝥、蟾酥提取物，邊加邊攪拌，攪拌時(shí)間1小時(shí)，溫度控制30℃-45℃，靜置，離心，濾過(guò)，低溫干燥，得到斑蝥、蟾酥提取物包合物。(5)按處方取上述人參、黃芪提取物與斑蝥、蟾酥提取物包合物和藥用輔料，加注射用水適量溶解，調(diào)pH值至6.0-7.0，微孔濾膜濾過(guò)，灌裝，冷凍干燥，即得。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種抗腫瘤的中藥凍干粉針劑及其制備方法。它是由人參、黃芪提取物，斑蝥、蟾酥提取物包合物和藥用輔料制備而成，人參、黃芪先醇提再水提，斑蝥和蟾酥分別提取后用羥丙基－β－環(huán)糊精進(jìn)行包合得到包合物，本發(fā)明制劑穩(wěn)定性好，刺激性和毒副作用小，藥理實(shí)驗(yàn)證明本發(fā)明凍干粉針劑藥理作用更強(qiáng)。
文檔編號(hào)A61K9/19GK1682826SQ20051000876
公開(kāi)日2005年10月19日 申請(qǐng)日期2005年2月25日 優(yōu)先權(quán)日2005年2月25日
發(fā)明者張海峰 申請(qǐng)人:張海峰