專利名稱：一種含有當(dāng)歸的中藥注射用微球及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種含有當(dāng)歸的中藥緩釋注射用微球及其制備方法。
背景技術(shù)：
白芍的止痛作用，最早見于《本經(jīng)》，謂其“主邪氣腹痛……止痛”。現(xiàn)代藥理研究也證實(shí)，白芍中所含的白芍總苷小鼠肌內(nèi)注射呈劑量依賴性鎮(zhèn)痛作用，芍藥苦也有明顯的鎮(zhèn)痛效果。除此以外、白芍還具有多方面的藥理作用，如鎮(zhèn)靜、解痙、抗炎、抗應(yīng)激等等，使其得以廣泛地應(yīng)用于各種疼痛病癥。
一直以來有關(guān)中藥的注射制劑主要為凍干粉針制劑。但由于體內(nèi)的半衰期較短，使得普通的口服制劑面臨著一系列的問題，如臨床給藥次數(shù)頻繁，使用不方便，患者的順應(yīng)性(compliance)差等。
發(fā)明人經(jīng)過多年的研究發(fā)現(xiàn)將當(dāng)歸、白芍等中藥經(jīng)適當(dāng)提取后與適當(dāng)輔料制成微球，可以達(dá)到緩慢地非恒速釋放，減少服用次數(shù)，提高患者順應(yīng)性的目的。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供了一種全新的緩釋、高生物利用度的注射用中藥微球。
本發(fā)明的另一目的在于提供了這種注射用微球的制備方法。
本發(fā)明所述的藥物組合物的組方為(以重量百分含量計(jì))當(dāng)歸4～9％川芎4～9％白芍2～8％熟地2～8％勾藤10～15％雞血藤10～15％夏枯草10～15％決明子10～15％珍珠母10～15％元胡4～9％細(xì)辛0.5～2％。
選處方配比為(以重量百分含量計(jì))當(dāng)歸6.75％川芎6.75％白芍5.4％熟地5.4％勾藤13.5％雞血藤13.5％夏枯草13.5％決明子13.5％珍珠母13.5％元胡6.75％細(xì)辛1.34％。
上述藥物處方配比為所使用生藥的重量配比，如果將其制成制劑需要對(duì)所述藥材進(jìn)一步加工與適當(dāng)輔料制成微球。
其中可以選擇將當(dāng)歸、白芍、川芎藥材的單獨(dú)或混合提取加工制成提取物其中的提取方法選自(但并不限于此)水提醇沉法、超聲提取法、超臨界萃取法等。
優(yōu)選方法為白芍單獨(dú)提取，將其余藥材水提取，濃縮后乙醇沉淀，回收乙醇，得藥物提取物；或者將所有藥材直接水提取，濃縮后乙醇沉淀，回收乙醇，得藥物提取物。
為了便于理解，現(xiàn)將白芍、川芎以及當(dāng)歸三味藥材的提取方法舉例描述如下，但并不限于此。
白芍超聲提取法取白芍藥材，粉碎，加水超聲提取，濃縮得白芍提取物。
白芍醇提取法取白芍藥材，粉碎，加乙醇回流提取，濃縮回收乙醇，繼續(xù)濃縮得白芍提取物。
當(dāng)歸超臨界萃取法取當(dāng)歸藥材，適當(dāng)條件下采用二氧化碳超臨界萃取，過濾得當(dāng)歸提取物。
當(dāng)歸水提取加樹脂法取當(dāng)歸的水煮酵沉淀物加熱蒸餾水溶解，用氫氧化鈣飽和液調(diào)pH值，放置過夜抽濾，濾液用硫酸調(diào)pH5-6，冰存過夜，抽濾，濾液通過陰陽(yáng)離子混合樹脂交換，交換液濃縮至一定體積，加乙醇沉淀，冰存過夜抽濾，將醇沉物揮于乙醇并濃縮得當(dāng)歸提取物。
當(dāng)歸蒸餾提取法稱取當(dāng)歸粉于燒瓶中，用蒸餾水進(jìn)行回流浸提，然后將原料及浸液在一定條件下，減壓蒸餾，得當(dāng)歸餾出液，然后加入適量的NaCl靜置分層，用分灑漏斗將當(dāng)歸揮發(fā)油分離出，濃縮得當(dāng)歸提取物。
川芎乙醇加樹脂法取川芎飲片，粉碎，乙醇于索氏回流提取裝置中回流提取，抽濾，抽濾液減壓濃縮至干，再加適量水，加熱使溶解，濾過，濾液加到已處理好的大孔樹脂柱上，先用水洗脫，再用乙醇洗脫，回收乙醇后，繼續(xù)濃縮得川芎提取物。
川芎乙醇提取法取川芎藥材，適當(dāng)粉碎，加乙醇提取若干次，合并提取液，濾過，回收乙醇，濃縮得川芎提取物。
除上述藥材單獨(dú)提取外，所述川芎、當(dāng)歸和白芍還可以混合提取，主要為取經(jīng)粉碎的白芍、川芎和當(dāng)歸藥材，沸水煮提，濾過，合并濾液，并將濾液適當(dāng)濃縮；在濃縮液中加入乙醇進(jìn)行醇沉，靜置，上清液回收乙醇，濃縮成浸膏，得藥材提取物。
本發(fā)明所述注射用微球直徑為1～250μm，由微球總重量0.2％～50％(w/w)的活性成分及其衍生物和微球總重量50～99.8％(w/w)的分子量在5000～1000000道爾頓的可生物降解的高分子藥用輔料組成。其中所述的可生物降解的高分子藥用輔料選自于聚丙交酯、乙交酯、聚乳酸、聚乙醇酸、聚-3-羥基丁酸酯、聚乳酸-聚羥乙酸、聚乳酸、乙醇酸、聚鄰酯、聚內(nèi)酯、聚酐、聚羥基丁酸酯-羥基戊酸酯共聚物、聚乙醇酸、聚丙烯葡聚糖、羥基乙酸、聚乳酸-聚乙二醇、聚羥乙酸、聚乙二醇其中的一種；優(yōu)選聚丙交酯-乙交酯、聚乳酸、聚乳酸、聚羥乙酸、聚乳酸、乙醇酸、聚羥基丁酸酯-羥基戊酸酯共聚物，最佳為聚丙交酯、乙交酯，分子量為12000～15000道爾頓；丙交酯-乙交酯的聚合比例為40∶60-60∶40。
本發(fā)明所述的微球可以采用微球的常規(guī)制備方法制得，如采用乳化分散法、噴霧干燥法和溶劑揮發(fā)法，優(yōu)選噴霧干燥法。當(dāng)用乳化分散法制備本發(fā)明的微球時(shí)，用二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、二氧六環(huán)、乙醚、丙酮、四氫呋喃、冰醋酸以及由它們所組成的混合酸把石杉?jí)A甲或其衍生物和可生物降解的藥用輔料溶解配制成有機(jī)相，其中藥用輔料在有機(jī)溶劑中的重量體積百分?jǐn)?shù)為1～30％，有機(jī)相采用的乳化劑為HBL＝4.5～6.0的非離子型乳化劑，用量為有機(jī)相的0.01-12％；另外用聚乙烯醇、聚乙烯基吡咯烷酮、聚甲基丙烯酸鈉、聚丙烯酸鈉、羧甲基纖維素鈉水溶液配制連續(xù)水相，其中它們?cè)谒嘀械闹亓堪俜謹(jǐn)?shù)為0.01～10.0％，水相中的乳化劑為HLB＝14.0～15.5的非離子型乳化劑，用量為水相的0.01～12％；有機(jī)相與水相的體積比為1∶4～100；將有機(jī)相通過細(xì)管慢慢注入到連續(xù)相中，充分乳化后，過篩分離所形成的微球，干燥即得。當(dāng)采用溶劑揮發(fā)法時(shí)，是在分散相通過細(xì)管慢慢注入到連續(xù)相中充分乳化后，減壓揮發(fā)溶劑，離心分離得到所形成的微球，干燥即得。
當(dāng)采用噴霧干燥法制備微球時(shí)，是用二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、二氧六環(huán)、乙醚、丙酮、四氫呋喃、冰醋酸以及由它們所組成的混合酸把中藥提取物和可生物降解的藥用輔料充分溶解配制成有機(jī)溶液；過濾，噴霧干燥制成微球。
本發(fā)明所述的微球是將制好的微球無菌粉末先在無菌的0.9％的生理鹽水溶劑中混懸，均勻后肌注來給藥的。
祖國(guó)醫(yī)學(xué)中對(duì)丸劑有“丸者緩也，舒緩而治之……”的記載(李杲，1180-1251)。可見我國(guó)古代醫(yī)藥家早已認(rèn)識(shí)到并應(yīng)用了藥劑學(xué)方法，來達(dá)到平穩(wěn)持久療效的目的。
傳統(tǒng)劑型，大多數(shù)的釋藥過程均按一級(jí)動(dòng)力學(xué)進(jìn)行，其藥物的血藥濃度有可能低于最低有效血藥濃度和在治療濃度內(nèi)維持時(shí)間短的缺點(diǎn)。為達(dá)到治療目的和降低副作用常采取多次服藥方式，這樣使得患者服藥的依從性下降。緩釋制劑正是克服了傳統(tǒng)制劑的不足，提供了平穩(wěn)、持久的血藥濃度。
本發(fā)明中藥微球采用了西藥緩釋制劑的設(shè)計(jì)原理在輔料選擇、質(zhì)量評(píng)價(jià)等方面取得了成果，為中藥緩釋制劑的研究借鑒。
以下通過體外釋放試驗(yàn)說明微球的有益效果實(shí)驗(yàn)樣品根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例1、2、3所述的方法制備的微球。
實(shí)驗(yàn)試劑一定PH值的緩沖溶液(4.0、5.5)。
實(shí)驗(yàn)儀器恒溫振蕩器、離心機(jī)。
實(shí)驗(yàn)條件溫度37±10℃；轉(zhuǎn)速30rp/分鐘。
實(shí)驗(yàn)方法精密稱取實(shí)驗(yàn)樣品約10mg置于容積為15ml的具蓋塑料離心管中，加5ml釋放介質(zhì)(PH＝4.0和5.5磷酸緩沖溶液)置于恒溫振蕩器中，保持一定的溫度和轉(zhuǎn)速按時(shí)取樣。
取樣方法3600轉(zhuǎn)條件下離心50min，精取3ml溶液，再補(bǔ)加3ml的釋放介質(zhì)，取出液用HPLC檢測(cè)。具體檢測(cè)指標(biāo)為芍藥甙，檢測(cè)波長(zhǎng)281nm。
取樣時(shí)間點(diǎn)(天)0、1、2、4、6、8、10、12、14、16、18、20。
試驗(yàn)結(jié)果控釋微球體外釋放試驗(yàn)結(jié)果表1。
表1、微球中芍藥甙體外釋放結(jié)果


具體實(shí)施方式
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說明，下述該實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明而對(duì)本發(fā)明沒有限制。
實(shí)施例1取下述藥材當(dāng)歸80g，川芎80g，白芍80g，熟地80g，勾藤120g，雞血藤120g，夏枯草120g，決明子120g，珍珠母120g，元胡70g，細(xì)辛10g；白芍的提取取上述白芍藥材80g，粉碎過篩，加水超聲提取2次，第一次加水量體積為生藥量的10倍，超聲頻率為5MHz，時(shí)間為50min，第二次提取為生藥量的8倍，超聲頻率為5Mhz，時(shí)間為40min，合并提取液，濃縮，得白芍提取物。
其它藥材的提取上述其它藥材混合均勻，加水提取2次，第一次加水量為生藥的8倍，提取時(shí)間2小時(shí)，第二次為生藥量的6倍，提取時(shí)間1.5小時(shí)，合并提取液，濃縮至相對(duì)密度為1.10(W/W)，得藥材提取物。
微球的制備將上述100mg提取物、200mg聚丙交酯-乙交酯溶于3ml二氯甲烷中，用針筒在激烈攪拌下將其滴至裝有300ml內(nèi)含3.5Ghlb＝14乳化劑的10％PVA的三頸瓶中，充分乳化1小時(shí)后，在30℃0.03MPa的壓力下，揮發(fā)溶劑1.5小時(shí)，離心分離，用蒸餾水洗反應(yīng)物三次，在30℃真空烘箱內(nèi)烘干，用環(huán)氧乙烷在30℃滅菌48小時(shí)，確保殘留環(huán)氧乙烷含量在5ppm以下，灌裝。
實(shí)施例2取下述藥材當(dāng)歸80g，川芎80g，白芍80g，熟地80g，勾藤120g，雞血藤120g，夏枯草120g，決明子120g，珍珠母120g，元胡70g，細(xì)辛10g；白芍藥材的提取取白芍生藥，粉碎，過120目篩，加入80％的乙醇回流提取2次，第一次為生藥量的8倍，第二次為生藥量5倍，分別提取2小時(shí)和1小時(shí)，合并提取液，靜置過夜，濾過，離心(12000r/min)后過濾，回收乙醇，繼續(xù)濃縮得到白芍提取物。
其它藥材的提取上述其它藥材混合均勻，加水提取2次，第一次加水量為生藥的8倍，提取時(shí)間2小時(shí)，第二次為生藥量的6倍，提取時(shí)間1.5小時(shí)，合并提取液，濃縮至相對(duì)密度為1.10(W/W)，得藥材提取物。
微球的制備將上述100mg提取物、200mg聚丙交酯-乙交酯溶于3ml二氯甲烷中，用針筒在激烈攪拌下將其滴至裝有300ml內(nèi)含3.5Ghlb＝14乳化劑的10％PVA的三頸瓶中，充分乳化1小時(shí)后，在30℃0.03MPa的壓力下，揮發(fā)溶劑1.5小時(shí)，離心分離，用蒸餾水洗反應(yīng)物三次，在30℃真空烘箱內(nèi)烘干，用環(huán)氧乙烷在30℃滅菌48小時(shí)，確保殘留環(huán)氧乙烷含量在5ppm以下，灌裝。
實(shí)施例3取下述藥材當(dāng)歸67.5g，川芎67.5g，白芍54g，熟地54g，勾藤135g，雞血藤135g，夏枯草135g，決明子135g，珍珠母135g，元胡67.5g，細(xì)辛14.5g；川芎的提取取67.5g川芎藥材，用8倍70％乙醇回流提取3次，第一次和第二次為2小時(shí)，第三次為1.5小時(shí)，合并提取液，濾過，回收乙醇，繼續(xù)濃縮得川芎提取物。
其它藥材的提取上述其它藥材混合均勻，加水提取2次，第一次加水量為生藥的8倍，提取時(shí)間2小時(shí)，第二次為生藥量的6倍，提取時(shí)間1.5小時(shí)，合并提取液，濃縮至相對(duì)密度為1.10(W/W)，得藥材提取物。
微球的制備稱取上述得到的提取物100mg，聚丙交酯-乙交酯(丙交酯∶乙交酯＝50∶50)，2.0g于小燒杯中，加二氯甲烷31.5ml，電磁攪拌至充分溶解，用微孔濾膜過濾，采用噴霧干燥法制備微球，測(cè)得粒徑5～80gm，滅菌，分裝。
實(shí)施例4取下述藥材當(dāng)歸67.5g，川芎67.5g，白芍54g，熟地54g，勾藤135g，雞血藤135g，夏枯草135g，決明子135g，珍珠母135g，元胡67.5g，細(xì)辛14.5g；川芎藥材的提取取川芎藥材67.5g，稍粉碎，用95％乙醇于索氏回流提取裝且中回流提取9小時(shí)溶媒用量為8-10倍。提取液用布氏抽濁器抽濾，抽濾液減壓濃縮至于，再加適量水，加熱使溶解，抽濾，濾液加到已處理好的大孔樹脂柱(干膏和樹脂的比例為1∶15)上，水洗脫，再用70％乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，繼續(xù)濃縮得川芎提取物。
其它藥材的提取上述其它藥材混合均勻，加水提取2次，第一次加水量為生藥的8倍，提取時(shí)間2小時(shí)，第二次為生藥量的6倍，提取時(shí)間1.5小時(shí)，合并提取液，濃縮至相對(duì)密度為1.10(W/W)，得藥材提取物。
微球的制備稱取取上述的提取物共100mg(比例為1∶1)，聚丙交酯-乙交酯(丙交酯∶乙交酯＝60∶40)，4.0g于小燒杯中，加二氯甲烷41ml，電磁攪拌至充分溶解，采用噴霧干燥法制備微球，測(cè)得粒徑1～50μm，平均粒徑13.26μm，滅菌，分裝。
實(shí)施例5取下述藥材當(dāng)歸67.5g，川芎67.5g，白芍54g，熟地54g，勾藤135g，雞血藤135g，夏枯草135g，決明子135g，珍珠母135g，元胡67.5g，細(xì)辛14.5g；當(dāng)歸藥材的提取稱取當(dāng)歸粉67.5g于燒瓶中，用蒸餾水預(yù)浸脹24h(室溫)后，進(jìn)行回流浸提(可用電攪拌助浸)，然后將原料及浸液在(50-60)℃，0.09MPa條件下，減壓蒸餾，餾出液的流速(2-3)mL/min，餾出液約為浸提液的四分之一時(shí)停止蒸餾。然后加入相當(dāng)于餾出液質(zhì)量10％的NaCl靜置分層，濃縮得當(dāng)歸提取物。
其它藥材的提取上述其它藥材混合均勻，加水提取2次，第一次加水量為生藥的8倍，提取時(shí)間2小時(shí)，第二次為生藥量的6倍，提取時(shí)間1.5小時(shí)，合并提取液，濃縮至相對(duì)密度為1.10(W/W)，得藥材提取物。
微球的制備將提取物100mg，聚丙交酯-乙交酯(丙交酯∶乙交酯＝50∶50)1.0g共置于小燒杯中，加冰醋酸22ml，電磁攪拌至充分溶解，采用噴霧干燥法制備微球，測(cè)得粒徑1～100μm，滅菌，分裝。
權(quán)利要求
1.一種含有當(dāng)歸緩釋微球，包括0.2～50％的由中藥材的提取物為活性成分和微球重量的50～99.8％的分子量范圍在5,000～1,000,000之間的可生物降解的藥用高分子輔料組成，其中藥材的組成按重量配比為當(dāng)歸4～9％川芎4～9％白芍2～8％熟地2～8％勾藤10～15％雞血藤10～15％夏枯草10～15％決明子10～15％珍珠母10～15％元胡4～9％細(xì)辛0.5～2％
2.權(quán)利要求1所述的微球，其中所述的藥用高分子輔料選自于聚丙交酯-乙交酯、聚乳酸、聚乙醇酸、聚-3-羥基丁酸酯、聚乳酸-聚羥乙酸、聚乳酸.乙醇酸、聚鄰酯、聚內(nèi)酯、聚酐、聚羥基丁酸酯-羥基戊酸酯共聚物、聚乙醇酸、聚丙烯葡聚糖、羥基乙酸、聚乳酸-聚乙二醇、聚羥乙酸.聚乙二醇其中的一種或其中的兩種或兩種以上混合。
3.權(quán)利要求1所述的微球，其中所述的藥用高分子輔料選自于聚丙交酯-乙交酯、聚乳酸、聚乳酸.聚羥乙酸、聚乳酸-乙醇酸、聚羥基丁酸酯-羥基戊酸酯共聚物其中的一種或其中的兩種或兩種以上的混合。
4.權(quán)利要求1所述的微球，其中藥用高分子輔料為聚丙交酯-乙交酯。
5.權(quán)利要求1所述的微球，其中所述聚丙交酯-乙交酯其分子量在12000～15000道爾頓之間。
6.權(quán)利要求1所述的微球，其中聚丙交酯-乙交酯中丙交酯和乙交酯聚合比例在40∶60～60∶40之間。
7.權(quán)利要求1所述的微球，其中的活性成分原藥材的重量百分含量為當(dāng)歸6.75％ 川芎6.75％ 白芍5.4％ 熟地5.4％ 勾藤13.5％ 雞血藤13.5％ 夏枯草13.5％ 決明子13.5％ 珍珠母13.5％ 元胡6.75％ 細(xì)辛1.34％。
8.權(quán)利要求1所述微球的制備方法，它是采用乳化分散法制成，其特征在于用二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、二氧六環(huán)、乙醚、丙酮、四氫呋喃、冰醋酸以及由它們所組成的混合酸把藥材提取物和可生物降解的藥用輔料溶解，其中藥用輔料在有機(jī)溶劑中的重量體積百分?jǐn)?shù)為1～30％，有機(jī)相采用的乳化劑為HLB＝4.5～6.0的非離子型乳化劑，用聚乙烯醇、聚乙烯基吡咯烷酮、用量為有機(jī)相的0.01～12％；另外聚甲基丙烯酸鈉、聚丙烯酸鈉、羧甲基纖維素鈉水溶液，配制連續(xù)水相，其中它們?cè)谒嘀械闹亓堪俜謹(jǐn)?shù)為0.01～10.0，水相中的乳化劑為HLB＝14.0～15.5的非離子型乳化劑，用量為水相的0.01～12％；將分散相通過細(xì)管慢慢注入到連續(xù)相中，乳化，然后過篩，干燥即得。
9.權(quán)利要求1所述微球的制備方法，它是采用溶劑揮發(fā)法制成，其特征在于用二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、二氧六環(huán)、乙醚、丙酮、四氫呋喃、冰醋酸以及由它們所組成的混合酸把藥材提取物和可生物降解的藥用輔料溶解，其中藥用輔料在有機(jī)溶劑中的重量體積百分?jǐn)?shù)為1～30％，有機(jī)相采用的乳化劑為HLB＝4.5～6.0的非離子型乳化劑，用量為有機(jī)相的0.01～12％；另外用聚乙烯醇、聚乙烯基吡咯烷酮、聚甲基丙烯酸鈉、聚丙烯酸鈉、羧甲基纖維素鈉水溶液，配制連續(xù)水相，其中它們?cè)谒嘀械闹亓堪俜謹(jǐn)?shù)為0.01～10.0，水相中的乳化劑為HLB＝14.0～15.5的非離子型乳化劑，用量為水相的0.01～12％；將分散相通過細(xì)管慢慢注入到連續(xù)相中，充分乳化，然后減壓揮發(fā)溶劑，離心分離，干燥即得。
10.權(quán)利要求1所述微球的制備方法，它是采用噴霧干燥法制成，其特征在于用二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、二氧六環(huán)、乙醚、丙酮、四氫呋喃、冰醋酸以及由它們所組成的混合酸溶解0.2～50％藥材提取物及其衍生物和50～99.8％的分子量在5000～1000000道爾頓的可生物降解的高分子藥用輔料，攪拌充分溶解后，過濾，采用噴霧干燥法制得微球。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種注射用微球，包括當(dāng)歸4～9％、川芎4～9％、白芍2～8％、熟地2～8％、勾藤10～15％、雞血藤10～15％、夏枯草10～15％、決明子10～15％、珍珠母10～15％、元胡4～9％、細(xì)辛0.5～2％為活性成分和微球重量的50～99.8％的分子量范圍在5,000～1,000,000之間的可生物降解的藥用高分子輔料組成，本發(fā)明還公開了其制備方法。
文檔編號(hào)A61K9/16GK1872212SQ200510013678
公開日2006年12月6日 申請(qǐng)日期2005年6月3日 優(yōu)先權(quán)日2005年6月3日
發(fā)明者鄭永鋒, 范立君 申請(qǐng)人:天津天士力制藥股份有限公司