專利名稱：治療心腦血管疾病的中藥組合物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種治療心腦血管疾病的中藥組合物及其制備方法。
背景技術：
根據我國流行病學調查，近五十年來不論在農村或城市，心腦血管疾病的發(fā)病率和死亡率均呈上升趨勢。50～60年代我國人口死亡原因中心血管病和腦血管病分別居第五六位，1975年以后則分別上升至第二三位，心腦血管疾病死亡者已占全部疾病死因第一位。我國因心腦血管疾病死亡者占總死亡人口的百分比，已由1957年的12.07％上升到2001年的42.6％，每年死于心腦血管疾病者達200萬另有部分患者雖經搶救而幸存，但多數留下殘疾，生活不能自理，給親屬及社會造成嚴重負擔。心腦血管疾病也是西方國家人群死亡的主要原因。根據目前已有的流行病學資料推測，疾病的發(fā)展趨勢是到2020年，人類疾病死因排列順序將有重大變化，但是冠心病和腦卒中仍將是人類死因的第一位和第二位。到那時，估算全球冠心病死亡人數將自1990年的630萬增至1100萬；腦卒中自440萬增至770萬。30年中循環(huán)系統(tǒng)死因構成將增高59.6％，冠心病和腦卒中分別增高74.6％和75％。這些資料充分說明，心腦血管疾病不僅是危害人類健康的主要疾病，更是目前和未來20年內人類致死、致殘的“頭號殺手”。
在心腦血管疾病的治療藥物中，中西藥的應用各有側重，中藥以其副作用小的優(yōu)勢也占據較大的市場份額。在目前眾多治療心腦血管疾病的中成藥中，復方丹參制劑占有重要的位置，另外以有效部位為主要活性成分如三七總皂苷、丹參總酚酸、葛根黃酮、絞股藍總苷等的中成藥也愈來愈受到人們的重視。治療心腦血管疾病的各種中藥有效部位的功效各有不同和側重，臨床上存在聯(lián)合用藥的巨大需求，因此，以有效部位制備的復方丹參制劑將具有劑量小、療效好、質量穩(wěn)定等特點，有著廣闊的市場前景。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的是提供一種量小高效的中藥組合物。
本發(fā)明的另一目的是提供該組合物的制備方法。
本發(fā)明通過下述技術方案予以實施。
本發(fā)明的中藥有效部位組合物，按重量百分比包括下列組分含55％～85％丹參酮的丹參酮提取物 2.5％～12.0％，含70％～98％丹參總酚酸的丹參總酚酸提取物 57.0％～90.0％，含70％～98％三七總皂苷的三七提取物2.5％～25.0％，天然冰片或降香油 2.5％～15.0％。
本發(fā)明的中藥有效部位組合物，優(yōu)選為按重量百分比包括下列組分含55％～85％丹參酮的丹參酮提取物 3.0％～8.0％，含70％～98％丹參總酚酸的丹參總酚酸提取物 72.0％～82.0％，含70％～98％三七總皂苷的三七提取物6.0％～15.0％，天然冰片或降香油 4.0％～10.0％。
本發(fā)明的中藥有效部位組合物，更優(yōu)選為按重量百分比包括下列組分含55％～85％丹參酮的丹參酮提取物 4％，含70％～98％丹參總酚酸的丹參總酚酸提取物 76％，含70％～98％三七總皂苷的三七提取物13％，天然冰片或降香油 7％。
上述含55％～85％丹參酮的丹參酮提取物，可用下述方法獲得(1)CO2萃取法取粉碎后的丹參投入CO2萃取設備中的萃取釜，當系統(tǒng)各部分均達到設定溫度后，將萃取釜升壓至設定壓力。將75％～95％乙醇溶液按設定的流量加入體系，與CO2混合后在整個體系中循環(huán)進行動態(tài)萃??；萃取的條件為萃取壓力15MPa～25Mpa，萃取和分離溫度30℃～55℃，分離溫度低于萃取溫度，乙醇流量0.5mL/min～1.5mL/min；萃取完成后，放出提取液，濃縮，真空干燥，得丹參酮提取物，其總丹參酮含量在55％以上。提取后的藥材殘渣備用。
(2)醇提水沉法取丹參飲片或粉碎的丹參，加85～95％乙醇浸泡2小時，然后在65～85℃下回流提取3次，每次溶劑量為生藥重量的5倍，每次提取時間0.5～1.5小時，提取后的藥材殘渣備用；合并提取液，提取液在50℃以下減壓濃縮至原體積的1/35～1/45，得濃縮液；濃縮液中加入2～4倍體積的水，放置6～24小時，濾過；濾液于50℃以下干燥，得丹參酮提取物，其總丹參酮含量在55％以上。
取上述丹參酮提取物，用適量乙醇溶解，加入到飽和的羥丙基β-環(huán)糊精溶液中，25～50℃攪拌均勻后，再攪拌0.5～2小時，冷藏過夜，抽濾，濾液低溫干燥，得丹參酮提取物和羥丙基β-環(huán)糊精的包合物粉末。
上述丹參酮提取物中總丹參酮的含量測定(紫外分光光度法)方法如下儀器島津UV-250分光光度計對照品溶液的制備取丹參酮IIA10mg用甲醇配制濃度為1，2，4，6，8ug/ml的標準溶液。
標準曲線的制備以相應的試劑為空白在268nm波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標，丹參酮IIA的濃度為橫坐標，繪制標準曲線。
測定法取提取物20mg用甲醇定容至100ml，精密移取5ml至100ml定容。照標準曲線的制備項下的方法測定樣品吸光度，計算。
上述含70％～98％丹參總酚酸的丹參總酚酸提取物的制備，可用下述方法獲得取上述提取丹參酮后的藥材殘渣，按中國專利申請CN1459448A或CN1384090A中實施例一的方法制備。上述丹參總酚酸含量測定及丹酚酸B含量測定參見中國專利CN1600318A。
上述含70％～98％三七總皂苷的三七提取物可用下述方法獲得取粉碎的三七，加水浸泡，用酸調pH3～5.5，以每克生藥加入5～15U的量加入纖維素酶，充分攪拌，置30～60℃水浴2～4h，提取液備用；提取后殘渣再加水或者加10％～90％乙醇加熱回流提取或超聲提取1～3次，合并前后提取液；提取液減壓濃縮至藥材1～3倍量體積，離心或濾過，取澄清液或濾液；澄清液或濾液上陰離子交換樹脂柱，用40％～70％乙醇洗脫，收集洗脫液；洗脫液上大孔樹脂柱，先用水沖洗，再用40～70％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液；洗脫液減壓濃縮，干燥，得含70％～98％三七總皂苷的三七提取物。上述三七提取物制備方法中的上柱順序可以調換，即三七提取物也可用下述方法獲得取粉碎的三七，加水浸泡，用酸調pH3～5.5，以每克生藥加入5～15U的量加入纖維素酶，充分攪拌，置30～60℃水浴2～4h，提取液備用；提取后殘渣再加水或者加10％～90％乙醇加熱回流提取或超聲提取1～3次，合并前后提取液；提取液減壓濃縮至藥材1～3倍量體積，離心或濾過，取澄清液或濾液；澄清液或濾液上大孔樹脂柱，先用水沖洗，再用40～70％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液；乙醇洗脫液上陰離子交換樹脂柱，用40％～70％乙醇洗脫，收集洗脫液；洗脫液減壓濃縮，干燥，得含70％～98％三七總皂苷的三七提取物。三七提取物中三七皂苷R1含量為2％～10％，人參皂苷Re含量為2％～6％，人參皂苷Rg1含量為15％～40％，人參皂苷Rb1含量為15％～40％，人參皂苷Rd含量為5％～12％。
上述大孔樹脂為非極性或弱極性的大孔樹脂，優(yōu)選為D101、AB-8或ZTC型大孔樹脂，最佳為AB-8型大孔樹脂。上述陰離子交換樹脂為弱堿性陰離子交換樹脂，最佳為D-941離子交換樹脂。
上述三七總皂苷含量(以人參皂苷Re計)測定方法如下1.儀器與試劑1.1儀器紫外可見分光光度計。層析柱。
1.2標準品、供試品及試劑標準品人參皂苷Re中國藥品生物制品檢定所供試品三七總皂苷提取物試劑AB-8大孔樹脂或G..D.X-101大孔樹脂(60～80目，天津化學試劑二廠)乙醇分 析純香草醛溶液 稱取5g香草醛，加冰乙酸溶解并定容至100ml。
高氯酸 分析純冰乙酸 分析純人參皂苷Re標準溶液精密稱取人參皂苷Re標準品0.0100g，用甲醇溶解并定容至10ml，即每毫升含人參皂苷Re1.0mg。
2.實驗2.1樣品處理取2mg三七總皂苷，用一定量水稀釋(稀釋至50ml左右)。
2.2柱層析用10mL注射器作層析管，內裝4cm AB-8大孔樹脂，先用20mL95％乙醇洗柱，棄去洗脫液，再用25mL水洗柱，棄去洗脫液。精密加入已處理好的樣品溶液(見2.1)，流速控制在1mL/min左右。先用15mL水洗柱，棄去洗脫液，再用20mL95％乙醇洗脫三七皂苷，收集洗脫液于蒸發(fā)皿中，置于75℃水浴揮干。以此作顯色用。
2.3空白樣品的制備在潔凈蒸發(fā)皿中準確加入0.2mL5％香草醛冰乙酸溶液，轉動蒸發(fā)皿，使殘渣都溶解，再加0.8mL高氯酸，混勻后移入10mL帶塞刻度離心管中；蒸發(fā)皿中再加入0.2mL冰乙酸，轉動蒸發(fā)皿，使殘液溶解，再移入上述離心管中，60℃水浴上加熱10min，取出，冰浴冷卻后，準確加入冰乙酸5.0mL，搖勻后，即得空白樣品。
2.4顯色在上述已揮干的蒸發(fā)皿中準確加入0.2mL5％香草醛冰乙酸溶液，轉動蒸發(fā)皿，使殘渣都溶解，再加0.8mL高氯酸，混勻后移入10mL帶塞刻度離心管中；蒸發(fā)皿中再加入0.2mL冰乙酸，轉動蒸發(fā)皿，使殘液溶解，再移入上述離心管中，60℃水浴上加熱10min，取出，冰浴冷卻后，準確加入冰乙酸5.0mL，搖勻后，以1cm比色池于560nm波長處與標準管一起進行比色測定(以空白樣品對紫外可見分光光度計進行回零后，再進行測定)。
2.5標準管吸取人參皂苷Re標準溶液(1.0mg/mL)0.1mL，用一定量水稀釋(10ml左右)，以下操作從“A2.2柱層析…”起，與樣品相同，測定吸光度值。
3計算C樣＝(A1×C標×100)/(A2×6)式中C樣提取物中三七總苷的量(以人參皂苷Re計)，mg/100mLA1被測液的吸光度值，A2標準液的吸光度值，C標標準液的濃度，mg/mL計算結果保留三位有效數字。
上述70％～98％三七總皂苷的三七提取物中人參皂苷Re、人參皂苷Rd、三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1的含量測定方法見中國專利CN1600318A。
上述中藥組合物中的天然冰片應符合中國藥典標準。天然冰片可用符合中國藥典標準的冰片代替。
上述中藥組合物中的降香油為降香藥材經蒸餾所得。
本發(fā)明的中藥組合物，可與任何一種或一種以上藥劑學上輔料如淀粉、糊精、乳糖、微晶纖維素、羥丙甲基纖維素、聚乙二醇、硬脂酸鎂、微粉硅膠、木糖醇、乳糖醇、葡萄糖、甘氨酸、甘露醇、甘氨酸等混合制成的各種劑型，例如，可制成水針劑、片劑、緩釋片、滴丸、顆粒劑、粉針劑、膠囊劑、微粒劑。優(yōu)選劑型為滴丸、粉針劑。
本發(fā)明的中藥組合物滴丸的制備按規(guī)定比例取上述丹參酮提取物、丹參總酚酸提取物、三七提取物和天然冰片(或降香油)，與藥物總重量2～4倍的聚乙二醇-6000或者聚乙二醇-4000或者兩者的混合物混合均勻，加熱熔融，化料后移至滴丸機滴罐中，藥液滴至6～8℃液體石蠟或甲基硅油中，除油，即得。
本發(fā)明的中藥組合物粉針劑的制備按規(guī)定比例取上述丹參酮提取物、丹參總酚酸提取物、三七提取物和天然冰片，加入適量的輔料，混勻后冷凍干燥，即得。
本發(fā)明中藥組合物原料來源易得，易于產業(yè)化；可根據需要制成各種劑型，為臨床提供更加方便、更加有效、質量更加可控的現代中藥，為患者帶來更多的利益，從而產生巨大的社會效益。
本發(fā)明采用三氯化鐵局部貼敷大腦中動脈造成局灶性腦缺血損傷模型，通過對模型大鼠神經癥狀和腦梗塞范圍的測定，比較了本發(fā)明中藥組合物、丹參酮提取物、丹參總酚酸提取物、三七提取物的抗腦缺血作用。結果顯示，本發(fā)明中藥組合物具有明顯的抗腦缺血作用，其療效優(yōu)于單獨使用丹參酮提取物、丹參總酚酸提取物、三七提取物，表明本發(fā)明中藥有效部位組合物具有較強的協(xié)同作用。
實驗例1幾種中藥提取組合物對大鼠局灶性腦缺血的影響(一)實驗材料1、動物SD大鼠，雄性，體重180g～200g，合格證號SCXK(京)2002-0003，由北京維通利華實驗動物技術有限公司提供。
2、藥品與試劑受試藥實施例一的中藥組合物，實施例二的中藥組合物，實施例一的丹參酮提取物，實施例一的丹參總酚酸提取物，實施例一的三七提取物。
試劑紅四氮唑(TTC)，為淡黃色粉末，北京馬氏精細化學品有限公司產品，批號011102。
3、儀器XTT實體顯微鏡，云南光學儀器廠產品；AEG-220型電子分析天平，日本Shimadzu公司產品；307-6臺式牙科車，上海齒科醫(yī)械廠產品；HZQ-C空氣浴振蕩器，哈爾濱東明醫(yī)療儀器廠產品。
(二)實驗方法和結果1、分組及給藥實驗動物按體重隨機分組。各組動物均于術后30分鐘舌下靜脈給藥，術后2小時和23小時腹腔注射給藥二次。各藥物均以生理鹽水稀釋至所需濃度，注射劑量采用0.4ml/100g體重。
2、大腦中動脈血栓模型制作大鼠腹腔注射10％水合氯醛溶液(350mg/kg)麻醉，右側臥位固定，在眼外眥和外耳道連線中點作一弧形切口，長約1.5cm，夾斷顳肌并切除，暴露顳骨，于實體顯微鏡下，用牙科鉆在顴骨與顳鱗骨接合處靠近口側1mm處作一直徑2.5mm的骨窗，清理殘渣，暴露大腦中動脈(位于嗅束及大腦下靜脈之間)，置一小片塑料薄膜保護血管周圍組織。將吸有50％氯化鐵溶液10μL的小片定量濾紙敷在此段大腦中動脈上，30min后取下濾紙，用生理鹽水沖洗局部組織，逐層縫合，回籠飼養(yǎng)。室溫控制在24℃。
3、神經癥狀評分標準對試驗動物在術后24h，進行行為檢測。評分標準①提鼠尾觀察前肢屈曲情況，如雙前肢對稱前伸，記為0分；如手術對側前肢出現肩屈曲、肘屈曲、肩內旋或兼具，記為1分。②將動物置于平面上，分別推雙肩向對側移動，檢查阻力。如雙側阻力對等且有力，記為0分；如手術對側阻力下降，記為1分。③將動物兩前肢置一金屬網上，觀察肌張力。雙側肌張力對等且有力為0分；手術對側前肢肌張力下降記為1分。④提鼠尾，動物有不停地向手術對側旋轉者，記為1分。根據以上標準評分，滿分為4分，分數越高，動物的行為障礙越嚴重。
4、腦梗塞范圍的測定動物經行為評分后，斷頭取腦。去掉嗅球、小腦和低位腦干后的剩余部分在4℃以下冠狀切成5片，并迅速將腦片置于TTC染液中(每5ml染液中含4％TTC 1.5ml，1M K2HPO40.1ml，其余加蒸餾水至刻度)，37℃避光溫孵30分鐘，取出后置于10％甲醛液中避光保存24h。經染色后非缺血區(qū)為玫瑰紅色，梗塞區(qū)為白色。將白色組織仔細挖下稱重，以梗塞組織重量占全腦重量及患側腦重量的百分比作為腦梗塞范圍。
5、結果上述實驗結果用x±s表示，統(tǒng)計學檢驗采用組間比較t檢驗，結果見表1和表2。
表1幾種中藥提取物對MCAO大鼠神經癥狀的影響(x±s)

注與模型組相比，*P＜0.05，**P＜0.01；與丹參酮提取物組相比，#P＜0.05，##P＜0.01；與丹參總酚酸提取物組相比，&P＜0.05，&&P＜0.01；與三七提取物組相比，@P＜0.05，@@P＜0.01表2幾種中藥提取物對MCAO大鼠腦梗塞范圍的影響(x±s)

注與模型組相比，*P＜0.05，**P＜0.01；與丹參酮提取物組相比，#P＜0.05，##P＜0.01；與丹參總酚酸組相比，&P＜0.05，&&P＜0.01；與三七提取物組相比，@P＜0.05，@@P＜0.01以上表1及表2的結果顯示，各給藥組都具有明顯的抗腦缺血作用，而本發(fā)明組合物的療效最好。
本發(fā)明采用大鼠實驗性心肌梗死模型及體外灌流法，比較了本發(fā)明中藥組合物、丹參酮提取物、丹參總酚酸提取物、三七提取物的抗心肌缺血作用。結果顯示，本發(fā)明中藥組合物具有明顯的抗心肌缺血作用，其療效優(yōu)于單獨使用丹參酮提取物、丹參總酚酸提取物、三七提取物，表明本發(fā)明中藥組合物具有較強的協(xié)同作用。
實驗例2幾種中藥提取物抗心肌缺血作用的實驗研究1、分組及給藥Wister雄性大鼠70只，體重250.8±24.6，按體重隨機分為7組生理鹽水對照組；實施例二的丹參酮提取物組；實驗例二的丹參總酚酸提取物組；實驗例二的三七提取物組；實施例一的中藥組合物；實施例二的中藥組合物。各藥物均以生理鹽水稀釋至所需濃度，給藥量為4ml/kg，尾靜脈給藥。
2、方法(1)、大鼠實驗性心肌梗死模型動物戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉(45mg/kg)，仰位固定。氣管插管，在胸骨左側作2cm的縱切口，近胸骨側剪斷第3、第4勒軟骨，打開胸腔后，連接人工呼吸機(通氣量2ml/100g，50次/min)。剪開心包膜，暴露心臟，冠狀動脈左前降支根部穿線以備結扎，記錄標準II導聯(lián)心電圖，穩(wěn)定10分鐘，結扎冠狀動脈左前降支，關閉胸腔。用針筒吸出動物喉部分泌物，使動物恢復自主呼吸。結扎冠狀動脈15min后，靜脈給藥。結扎冠狀動脈4小時后，摘取心臟，在結扎線以下橫切5片，進行氯化硝基四氮唑藍(NBT)染色，計算心肌梗死區(qū)面積占心室及心臟面積的百分比，并進行統(tǒng)計學處理(t檢驗)。
(2)、離體langendorff心臟灌流法參考藥理實驗方法學第三版進行。
3、結果(1)、對大鼠實驗性心肌梗塞范圍的影響，結果見表3。
表3各種提取物對大鼠實驗性心肌梗塞范圍的影響(x±s)


注與模型組相比，*P＜0.05，**P＜0.01；與丹參酮提取物組相比，#P＜0.05，##P＜0.01；與丹參總酚酸提取物組相比，&P＜0.05，&&P＜0.01；與三七提取物組相比，@P＜0.05，@@P＜0.01(2)、對離體豚鼠心臟冠脈流量及心率的影響，結果見表4。
表4各種提取物對離體豚鼠心臟冠脈流量及心率的影響(x±s)

注與丹參酮提取物組相比，*P＜0.05，**P＜0.01；與丹參總酚酸提取物組相比，，#P＜0.05，##P＜0.01；與三七提取物組相比，&P＜0.05，&&P＜0.01。
以上表3及表4的結果顯示，各給藥組都具有明顯的抗心肌缺血作用，而本發(fā)明有效部位組合物的療效最好。
具體實施例方式
參考下列實施例將更易于理解本發(fā)明，給出實施例是為了闡明本發(fā)明，而不是為了限制本發(fā)明的范圍。
實施例一含55％～85％丹參酮的丹參酮提取物的制備取粉碎后的丹參投入CO2萃取設備中的萃取釜，當系統(tǒng)各部分均達到設定溫度后，將萃取釜升壓至設定壓力。將95％乙醇溶液按設定的流量加入體系，與CO2混合后在整個體系中循環(huán)進行動態(tài)萃??；萃取的條件為萃取壓力20MPa，萃取溫度45℃，分離溫度35℃，乙醇流量1.0mL/min；萃取完成后，放出提取液，濃縮，真空干燥，得丹參酮提取物，其總丹參酮含量64％。提取后的藥材殘渣備用。
含70％～98％丹參總酚酸的丹參總酚酸提取物的制備取提取丹參酮后的藥材殘渣，按中國專利申請CN1459448A中實施例一的制備方法獲得，其丹參總酚酸含量為82.13％，丹酚酸B為52.24％。
三七提取物的制備取三七飲片，粉碎，加生藥重量3倍量的水浸泡，用酸調pH4.0，以每克生藥加入10U的量加入纖維素酶，充分攪拌，置40℃水浴3h，提取液備用；提取后殘渣再加水在90℃下回流提取兩次，第一次為生藥重量7倍量水，第二次為6倍量生藥重量水，每次2小時，合并前后提取液，棄去殘渣；提取液在70℃減壓濃縮至藥材1倍量體積，濾過；濾液加水稀釋至藥材2倍量體積，離心，取澄清液；澄清液上D-941離子交換樹脂(山東魯抗樹脂分廠)柱，用藥材2.5倍量體積50％乙醇洗脫，收集洗脫液；洗脫液再上AB-8型大孔樹脂(天津南開大學樹脂廠生產)柱，先用藥材4倍量體積的水沖洗，棄去，再用藥材4倍量體積的50％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液；洗脫液于70℃減壓濃縮至比重為1.15的浸膏，干燥，得三七提取物，其三七總皂苷含量為83.7％，三七皂苷R1含量為6.8％，人參皂苷Re含量為3.8％，人參皂苷Rg1含量為34.3％，人參皂苷Rb1含量為30.1％，人參皂苷Rd含量為8.8％。
取上述含55％～85％丹參酮的丹參酮提取物0.3g，上述含70％～98％丹參總酚酸的丹參總酚酸提取物5.3g、上述三七提取物0.9g、天然冰片0.5g，混合均勻，冷凍干燥，得中藥組合物。
實施例二含55％～85％丹參酮的丹參酮提取物的制備取丹參飲片或粉碎的丹參，加95％乙醇浸泡2小時，然后在75℃下回流提取3次，每次溶劑量為生藥重量的5倍，提取時間分別為60分鐘、30分鐘和30分鐘；合并提取液，提取液在50℃以下減壓濃縮至原體積的1/40，得濃縮液；濃縮液中加入3倍體積的水，放置12小時，濾過；濾液于50℃以下干燥，得丹參酮提取物，其總丹參酮含量61％。提取后的藥材殘渣備用。
含70％～98％丹參總酚酸的丹參總酚酸提取物的制備取提取丹參酮后的藥材殘渣，按中國專利申請CN1384090A中實施例一的制備方法獲得，其丹參總酚酸含量為80.35％，丹酚酸B為51.33％。
三七提取物的制備取三七飲片，粉碎，加生藥重量3.5倍量的水浸泡，用酸調pH4.5，以每克生藥加入12U的量加入纖維素酶，充分攪拌，置40℃水浴3h，提取液備用；提取后殘渣再加75％乙醇在90℃下回流提取兩次，第一次為生藥重量7倍量的75％乙醇，第二次為6倍量75％乙醇，每次2小時，合并前后提取液，棄去殘渣；提取液在70℃減壓濃縮至藥材2倍量體積，濾過；濾液上D-941離子交換樹脂(山東魯抗樹脂分廠)柱，用藥材2.5倍量體積60％乙醇洗脫，收集洗脫液；洗脫液再上D101型大孔樹脂(天津南開大學樹脂廠生產)柱，先用藥材4倍量體積的水沖洗，棄去，再用藥材4倍量體積的60％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液；洗脫液于70℃減壓濃縮至比重為1.15的浸膏，干燥，得三七提取物，其三七總皂苷含量為81.5％，三七皂苷R1含量為6.9％，人參皂苷Re含量為3.4％，人參皂苷Rg1含量為32.2％，人參皂苷Rb1含量為30.2％，人參皂苷Rd含量為8.7％。
取上述含55％～85％丹參酮的丹參酮提取物0.3g，上述含70％～98％丹參總酚酸的丹參總酚酸提取物5.3g、上述三七提取物0.9g、降香油0.5g，加9.0g聚乙二醇-6000混合均勻，熔融，冷卻后得中藥組合物。
實施例三含55％～85％丹參酮的丹參酮提取物的制備取粉碎后的丹參投入CO2萃取設備中的萃取釜，當系統(tǒng)各部分均達到設定溫度后，將萃取釜升壓至設定壓力。將90％乙醇溶液按設定的流量加入體系，與CO2混合后在整個體系中循環(huán)進行動態(tài)萃?。惠腿〉臈l件為萃取壓力250MPa，萃取溫度45℃，分離溫度35℃，乙醇流量0.8mL/min；萃取完成后，放出提取液，濃縮，真空干燥，得丹參酮提取物，其總丹參酮含量59％。提取后的藥材殘渣備用。
含70％～98％丹參總酚酸的丹參總酚酸提取物的制備取提取丹參酮后的藥材殘渣，按中國專利申請CN1459448A中實施例一的制備方法獲得，其丹參總酚酸含量為81.97％，丹酚酸B為52.56％。
三七提取物的制備取三七飲片，粉碎，加生藥重量3.5倍量的水浸泡，用酸調pH4.5，以每克生藥加入10U的量加入纖維素酶，充分攪拌，置40℃水浴3.5h，提取液備用；提取后殘渣再加水在90℃下超聲提取兩次，第一次為生藥重量7倍量水，第二次為6倍量水，每次30分鐘，合并前后提取液，棄去殘渣；提取液在70℃減壓濃縮至藥材2倍量體積，離心；澄清液上AB-8型大孔樹脂(天津南開大學樹脂廠生產)柱，先用藥材4倍量體積的水沖洗，棄去，再用藥材4倍量體積的65％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液；洗脫液再上D-941離子交換樹脂(山東魯抗樹脂分廠)柱，用藥材2.5倍量體積65％乙醇洗脫，收集洗脫液；洗脫液于70℃減壓濃縮至比重為1.15的浸膏，干燥，得三七提取物，其三七總皂苷含量為82.9％，三七皂苷R1含量為6.2％，人參皂苷Re含量為3.1％，人參皂苷Rg1含量為33.4％，人參皂苷Rb1含量為31.2％，人參皂苷Rd含量為8.9％。
取上述含55％～85％丹參酮的丹參酮提取物0.3g，上述含70％～98％丹參總酚酸的丹參總酚酸提取物6.6g、上述三七提取物0.8g、天然冰片0.5g，混合均勻，冷凍干燥，得中藥組合物。
實施例四取實施例一的含55％～85％丹參酮的丹參酮提取物0.4g，實施例一的含70％～98％丹參總酚酸的丹參總酚酸提取物5.3g、實施例二的三七提取物1.0g、天然冰片0.4g；丹參酮提取物用適量乙醇溶解，加入到飽和的羥丙基β-環(huán)糊精溶液中，攪拌均勻后，再攪拌1小時，冷藏過夜，抽濾，濾液低溫干燥，得丹參酮提取物和羥丙基β-環(huán)糊精的包合物粉末。丹參酮提取物和羥丙基β-環(huán)糊精的包合物粉末與丹參總酚酸提取物、三七提取物、天然冰片混合均勻，冷凍干燥，得中藥組合物。
實施例五取實施例一的含55％～85％丹參酮的丹參酮提取物0.3g，實施例一的含70％～98％丹參總酚酸的丹參總酚酸提取物4.8g、實施例三的三七提取物0.8g、天然冰片0.5g；丹參酮提取物用適量乙醇溶解，加入到飽和的羥丙基β-環(huán)糊精溶液中，攪拌均勻后，再攪拌1小時，冷藏過夜，抽濾，濾液低溫干燥，得丹參酮提取物和羥丙基β-環(huán)糊精的包合物粉末。丹參酮提取物和羥丙基β-環(huán)糊精的包合物粉末與丹參總酚酸提取物、三七提取物、天然冰片混合均勻，冷凍干燥，得中藥組合物。
實施例六取實施例一的含55％～85％丹參酮的丹參酮提取物0.4g，實施例一的含70％～98％丹參總酚酸的丹參總酚酸提取物8.5g、實施例二的三七提取物0.8g、降香油0.4g，加12.0g聚乙二醇-6000混合均勻，熔融，冷卻后得中藥組合物。
實施例七取實施例一的含55％～85％丹參酮的丹參酮提取物0.3g，實施例一的含70％～98％丹參總酚酸的丹參總酚酸提取物5.3g、實施例一的三七提取物0.9g、天然冰片0.5g；丹參酮提取物用適量乙醇溶解，加入到飽和的羥丙基β-環(huán)糊精溶液中，攪拌均勻后，再攪拌1小時，冷藏過夜，抽濾，濾液低溫干燥，得丹參酮提取物和羥丙基β-環(huán)糊精的包合物粉末。丹參酮提取物和羥丙基β-環(huán)糊精的包合物粉末與丹參總酚酸提取物、三七提取物、天然冰片以及18.5g聚乙二醇-6000混合均勻，加熱熔融，化料后移至滴丸機滴罐中，藥液滴至6～8℃液體石蠟中，除油，制得滴丸1000粒。
實施例八取實施例二的含55％～85％丹參酮的丹參酮提取物0.3g，實施例二的含70％～98％丹參總酚酸的丹參總酚酸提取物5.9g、實施例二的三七提取物0.8g、天然冰片0.5g；丹參酮提取物用適量乙醇溶解，加入到飽和的羥丙基β-環(huán)糊精溶液中，攪拌均勻后，再攪拌1小時，冷藏過夜，抽濾，濾液低溫干燥，得丹參酮提取物和羥丙基β-環(huán)糊精的包合物粉末。丹參酮提取物和羥丙基β-環(huán)糊精的包合物粉末與丹參總酚酸提取物、三七提取物、天然冰片以及18.0g聚乙二醇-4000混合均勻，加熱熔融，化料后移至滴丸機滴罐中，藥液滴至6～8℃液體石蠟中，除油，制得滴丸1000粒。
實施例九取實施例三的含55％～85％丹參酮的丹參酮提取物0.3g，實施例三的含70％～98％丹參總酚酸的丹參總酚酸提取物4.9g、實施例一的三七提取物1.0g、天然冰片0.5g；丹參酮提取物用適量乙醇溶解，加入到飽和的羥丙基β-環(huán)糊精溶液中，攪拌均勻后，再攪拌1小時，冷藏過夜，抽濾，濾液低溫干燥，得丹參酮提取物和羥丙基β-環(huán)糊精的包合物粉末。丹參酮提取物和羥丙基β-環(huán)糊精的包合物粉末與丹參總酚酸提取物、三七提取物、天然冰片以及19.0g聚乙二醇-6000混合均勻，加熱熔融，化料后移至滴丸機滴罐中，藥液滴至6～8℃甲基硅油中，除油，制得滴丸1000粒。
實施例十取實施例一的含55％～85％丹參酮的丹參酮提取物0.3g，實施例一的含70％～98％丹參總酚酸的丹參總酚酸提取物6.5g、實施例二的三七提取物0.9g、天然冰片0.5g；丹參酮提取物用適量乙醇溶解，加入到飽和的羥丙基β-環(huán)糊精溶液中，攪拌均勻后，再攪拌1小時，冷藏過夜，抽濾，濾液低溫干燥，得丹參酮提取物和羥丙基β-環(huán)糊精的包合物粉末。丹參酮提取物和羥丙基β-環(huán)糊精的包合物粉末與丹參總酚酸提取物、三七提取物、天然冰片以及3.5g聚乙二醇-4000和14.0g聚乙二醇-6000混合均勻，加熱熔融，化料后移至滴丸機滴罐中，藥液滴至6～8℃液體石蠟中，除油，制得滴丸1000粒。
實施例十一取實施例三的含55％～85％丹參酮的丹參酮提取物0.4g，實施例三的含70％～98％丹參總酚酸的丹參總酚酸提取物7.5g、實施例一的三七提取物0.8g、天然冰片0.5g；丹參酮提取物用適量乙醇溶解，加入到飽和的羥丙基β-環(huán)糊精溶液中，攪拌均勻后，再攪拌1小時，冷藏過夜，抽濾，濾液低溫干燥，得丹參酮提取物和羥丙基β-環(huán)糊精的包合物粉末。丹參酮提取物和羥丙基β-環(huán)糊精的包合物粉末與丹參總酚酸提取物、三七提取物、天然冰片以及16.5g聚乙二醇-6000混合均勻，加熱熔融，化料后移至滴丸機滴罐中，藥液滴至6～8℃液體石蠟中，除油，制得滴丸1000粒。
實施例十二取實施例三的含55％～85％丹參酮的丹參酮提取物0.3g，實施例三的含70％～98％丹參總酚酸的丹參總酚酸提取物5.7g、實施例二的三七提取物0.8g、冰片0.4g；丹參酮提取物用適量乙醇溶解，加入到飽和的羥丙基β-環(huán)糊精溶液中，攪拌均勻后，再攪拌1小時，冷藏過夜，抽濾，濾液低溫干燥，得丹參酮提取物和羥丙基β-環(huán)糊精的包合物粉末。丹參酮提取物和羥丙基β-環(huán)糊精的包合物粉末與丹參總酚酸提取物、三七提取物、天然冰片以及18.5g聚乙二醇-6000混合均勻，加熱熔融，化料后移至滴丸機滴罐中，藥液滴至6～8℃液體石蠟中，除油，制得滴丸1000粒。
實施例十三取實施例一的含55％～85％丹參酮的丹參酮提取物0.3g，實施例一的含70％～98％丹參總酚酸的丹參總酚酸提取物5.3g、實施例一的三七提取物0.9g、降香油0.5g；丹參酮提取物用適量乙醇溶解，加入到飽和的羥丙基β環(huán)糊精溶液中，攪拌均勻后，再攪拌1小時，冷藏過夜，抽濾，濾液低溫干燥，得丹參酮提取物和羥丙基β-環(huán)糊精的包合物粉末。丹參酮提取物和羥丙基β-環(huán)糊精的包合物粉末與丹參總酚酸提取物、三七提取物、降香油以及18.5g聚乙二醇-6000混合均勻，加熱熔融，化料后移至滴丸機滴罐中，藥液滴至6～8℃甲基硅油中，除油，制得滴丸1000粒。
實施例十四取實施例二的含55％～85％丹參酮的丹參酮提取物0.3g，實施例二的含70％～98％丹參總酚酸的丹參總酚酸提取物5.9g、實施例二的三七提取物0.8g、降香油0.5；丹參酮提取物、降香油用適量乙醇溶解，加入到飽和的羥丙基β-環(huán)糊精溶液中，攪拌均勻后，再攪拌1小時，冷藏過夜，抽濾，濾液低溫干燥，得丹參酮提取物、降香油和羥丙基β-環(huán)糊精的包合物粉末。上述包合物粉末與丹參總酚酸提取物、三七提取物以及3.5g聚乙二醇-4000和14.5g聚乙二醇-6000混合均勻，加熱熔融，化料后移至滴丸機滴罐中，藥液滴至6～8℃液體石蠟中，除油，制得滴丸1000粒。
實施例十五取實施例一的含55％～85％丹參酮的丹參酮提取物0.8g，實施例一的含70％～98％丹參總酚酸的丹參總酚酸提取物15.4g、實施例一的三七提取物2.5g、天然冰片1.2g；丹參酮提取物用適量乙醇溶解，加入到飽和的羥丙基β-環(huán)糊精溶液中，攪拌均勻后，再攪拌1小時，冷藏過夜，抽濾，濾液低溫干燥，得丹參酮提取物和羥丙基β-環(huán)糊精的包合物粉末。丹參酮提取物和羥丙基β-環(huán)糊精的包合物粉末與丹參總酚酸提取物、三七提取物、天然冰片以及甘露醇5.5g、依地酸鈣鈉0.9g和蒸餾水1ml，上述組分混勻后，冷凍干燥，分裝1000支，即得。
實施例十六取實施例二的含55％～85％丹參酮的丹參酮提取物0.8g，實施例二的含70％～98％丹參總酚酸的丹參總酚酸提取物14.7g、實施例二的三七提取物2.9g、天然冰片1.2g；丹參酮提取物用適量乙醇溶解，加入到飽和的羥丙基β-環(huán)糊精溶液中，攪拌均勻后，再攪拌1小時，冷藏過夜，抽濾，濾液低溫干燥，得丹參酮提取物和羥丙基β-環(huán)糊精的包合物粉末。丹參酮提取物和羥丙基β-環(huán)糊精的包合物粉末與丹參總酚酸提取物、三七提取物、天然冰片以及低分子右旋糖酐5.5g、依地酸鈣鈉0.9g和蒸餾水1ml，上述組分混勻后，冷凍干燥，分裝1000支，即得。
實施例十七取實施例三的含55％～85％丹參酮的丹參酮提取物0.9g，實施例三的含70％～98％丹參總酚酸的丹參總酚酸提取物15.6g、實施例一的三七提取物1.9g、冰片1.2g；丹參酮提取物用適量乙醇溶解，加入到飽和的羥丙基β-環(huán)糊精溶液中，攪拌均勻后，再攪拌1小時，冷藏過夜，抽濾，濾液低溫干燥，得丹參酮提取物和羥丙基β-環(huán)糊精的包合物粉末。丹參酮提取物和羥丙基β環(huán)糊精的包合物粉末與丹參總酚酸提取物、三七提取物、天然冰片以及葡萄糖5.5g、硫代硫酸鈉0.9g和蒸餾水1ml，上述組分混勻后，冷凍干燥，分裝1000支，即得。
實施例十八取實施例一的含55％～85％丹參酮的丹參酮提取物0.8g、降香油1.5g，加入到13ml飽和的羥丙基β-環(huán)糊精溶液中，攪拌溶解，濾過，濾液低溫干燥，得丹參酮提取物、降香油和羥丙基β-環(huán)糊精的包合物粉末。除上述包合物粉末外，再取實施例一的含70％～98％丹參總酚酸的丹參總酚酸提取物15.6g、實施例一的三七提取物2.5g、甘露醇5.5g、依地酸鈣鈉0.9g和蒸餾水2ml，上述組分混勻后，冷凍干燥，分裝1000支，即得。
實施例十九取實施例一的含55％～85％丹參酮的丹參酮提取物0.6g，實施例一的含70％～98％丹參總酚酸的丹參總酚酸提取物11.7g、實施例一的三七提取物1.2g、冰片0.8g；丹參酮提取物用適量乙醇溶解，加入到飽和的羥丙基β-環(huán)糊精溶液中，攪拌均勻后，再攪拌1小時，冷藏過夜，抽濾，濾液低溫干燥，得丹參酮提取物和羥丙基β-環(huán)糊精的包合物粉末。丹參酮提取物和羥丙基β-環(huán)糊精的包合物粉末與丹參總酚酸提取物、三七提取物、天然冰片以及210g微晶纖維素混合均勻，加3％聚維酮乙醇溶液制軟材，過18目篩制顆粒，60℃干燥30～45分鐘，整粒，加入24g滑石粉，混勻，充于1000粒膠囊中，即得。
實施例二十取實施例一的含55％～85％丹參酮的丹參酮提取物0.6g，實施例一的含70％～98％丹參總酚酸的丹參總酚酸提取物11.7g、實施例二的三七提取物1.2g、天然冰片0.8g；丹參酮提取物用適量乙醇溶解，加入到飽和的羥丙基β-環(huán)糊精溶液中，攪拌均勻后，再攪拌1小時，冷藏過夜，抽濾，濾液低溫干燥，得丹參酮提取物和羥丙基β-環(huán)糊精的包合物粉末。丹參酮提取物和羥丙基β-環(huán)糊精的包合物粉末與丹參總酚酸提取物、三七提取物、天然冰片以及與64g微晶纖維素和20g硬脂酸鎂混合均勻，壓制成1000片，即得。
權利要求
1.一種治療心腦血管疾病的中藥組合物，按重量百分比由下列組分組成含55％～85％丹參酮的丹參酮提取物 2.5％～12.0％，含70％～98％丹參總酚酸的丹參總酚酸提取物 57.0％～90.0％，含70％～98％三七總皂苷的三七提取物2.5％～25.0％，天然冰片或降香油 2.5％～15.0％。
2.根據權利要求1所述中藥組合物，其特征在于，所述各組分的重量百分比為含55％～85％丹參酮的丹參酮提取物 3.0％～8.0％，含70％～98％丹參總酚酸的丹參總酚酸提取物 72.0％～82.0％，含70％～98％三七總皂苷的三七提取物6.0％～15.0％，天然冰片或降香油 4.0％～10.0％。
3.根據權利要求1所述中藥組合物，其特征在于，所述各組分的重量百分比為含55％～85％丹參酮的丹參酮提取物 4％，含70％～98％丹參總酚酸的丹參總酚酸提取物 76％，含70％～98％三七總皂苷的三七提取物13％，天然冰片或降香油 7％。
4.根據權利要求1～3任一權利要求所述的中藥組合物，其特征在于，用丹參酮提取物和羥丙基β-環(huán)糊精的包合物替代所述含55％～85％丹參酮的丹參酮提取物；所述丹參酮提取物和羥丙基β-環(huán)糊精的包合物用下述方法制備取權利要求規(guī)定重量百分比的含55％～85％丹參酮的丹參酮提取物，用適量乙醇溶解，加入到飽和的羥丙基β-環(huán)糊精溶液中，25～50℃攪拌均勻后，再攪拌0.5～2小時，冷藏過夜，抽濾，濾液低溫干燥，得丹參酮提取物和羥丙基β-環(huán)糊精的包合物粉末。
5.根據權利要求1～3任一權利要求所述的中藥組合物，其特征在于，所述丹參酮提取物由下述方法制備取粉碎后的丹參投CO2萃取設備中的萃取釜，當系統(tǒng)各部分均達到設定溫度后，將萃取釜升壓至設定壓力。將75％～95％乙醇溶液按設定的流量加入體系，與CO2混合后在整個體系中循環(huán)進行動態(tài)萃??；萃取的條件為萃取壓力15MPa～25Mpa，萃取和分離溫度30℃～55℃，分離溫度低于萃取溫度，乙醇流量0.5mL/min～1.5mL/min；萃取完成后，放出提取液，濃縮，真空干燥，得丹參酮提取物。
6.根據權利要求1～3任一權利要求所述的中藥組合物，其特征在于，所述丹參酮提取物由下述方法制備取丹參飲片或粉碎的丹參，加85～95％乙醇浸泡2小時，然后在65～85℃下回流提取3次，每次溶劑量為生藥重量的5倍，每次提取時間0.5～1.5小時；合并提取液，提取液在50℃以下減壓濃縮至原體積的1/35～1/45，得濃縮液；濃縮液中加入2～4倍體積的水，放置6～24小時，濾過；濾液于50℃以下干燥，得丹參酮提取物。
7.根據權利要求1～3任一權利要求所述的中藥組合物，其特征在于，所述三七提取物由下述方法制備取粉碎的三七，加水浸泡，用酸調pH3～5.5，以每克生藥加入5～15U的量加入纖維素酶，充分攪拌，置30～60℃水浴2～4h，提取液備用；提取后殘渣再加水或者加10％～90％乙醇加熱回流提取或超聲提取1～3次，合并前后提取液；提取液減壓濃縮至藥材1～3倍量體積，離心或濾過，取澄清液或濾液；澄清液或濾液上陰離子交換樹脂柱，用40％～70％乙醇洗脫，收集洗脫液；洗脫液上大孔樹脂柱，先用水沖洗，再用40～70％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液；洗脫液減壓濃縮，干燥，得三七提取物。
8.根據權利要求7所述的中藥組合物，其特征在于，所述陰離子交換樹脂為D-941離子交換樹脂；所述大孔樹脂為D101、AB-8或ZTC型大孔樹脂。
9.根據權利要求1～3任一權利要求所述的中藥組合物為活性成分制成的滴丸，其特征在于，所述滴丸由如下方法制備而成按規(guī)定比例取上述丹參酮提取物、丹參總酚酸提取物、三七提取物和天然冰片或者降香油，與藥物總重量2～4倍的聚乙二醇-6000或者聚乙二醇-4000或者兩者的混合物混合均勻，加熱熔融，化料后移至滴丸機滴罐中，藥液滴至6～8℃液體石蠟中，除油，即得。
10.根據權利要求1～3任一權利要求所述的中藥組合物為活性成分制成的粉針劑。
全文摘要
本發(fā)明公開一種治療心腦血管疾病的中藥組合物，它由含55％～85％丹參酮的丹參酮提取物2.5％～12.0％，含70％～98％丹參總酚酸的丹參總酚酸提取物57.0％～90.0，含70％～98％三七總皂苷的三七提取物2.5％～25.0％，天然冰片或降香油2.5％～15.0％組成，具有明顯的抗腦缺血、心肌缺血作用，其療效優(yōu)于單獨使用丹參酮提取物、丹參總酚酸提取物或三七提取物，為臨床提供了一種療效更好、更加方便的中藥組合物及其制劑。
文檔編號A61K9/20GK1919242SQ20051001484
公開日2007年2月28日 申請日期2005年8月24日 優(yōu)先權日2005年8月24日
發(fā)明者葉正良, 李旭, 張文生, 魏峰, 李德坤 申請人:天津天士力現代中藥研究開發(fā)有限公司