專利名稱：一種殼聚糖甲基睪酮緩釋藥條的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種殼聚糖甲基睪酮緩釋藥條的制備方法，通過該方法制備的藥條可以用于促進魚類性腺發(fā)育，尤其是涉及恢復(fù)因促性腺激素(gonadotropin，GtH)分泌不足而導(dǎo)致不育、或者是性腺發(fā)育延滯魚類的育性。
背景技術(shù)：
下丘腦-垂體-性腺是調(diào)控脊椎動物生殖活動的內(nèi)分泌中樞，在硬骨魚類，下丘腦合成的促性腺激素釋放激素(gonadotropin-releasing hormone，GnRH)直接通過神經(jīng)軸突末梢作用于垂體前葉的促性腺激素細胞，與其膜上分布的受體結(jié)合后刺激垂體合成和釋放促性腺激素(GtH)，在促性腺激素分泌緩慢而穩(wěn)定增加的促進作用下，魚類性腺發(fā)育成熟，進而排卵、產(chǎn)精。根據(jù)魚類性腺發(fā)育與性成熟的原理，傳統(tǒng)的魚類人工繁殖技術(shù)通常采用多次、直接注射外源性激素或類固醇激素的方式，進行親魚性腺發(fā)育催熟，盡管注射方式操作簡便，但存在作用時間短，操作次數(shù)過多，親魚受傷嚴重，甚至產(chǎn)后死亡等諸多問題。而且，對于因促性腺激素分泌不足而導(dǎo)致不育、或性腺發(fā)育延滯的魚類而言，期望傳統(tǒng)的注射外源性激素方法來促進其性腺發(fā)育并不合適。因此，迫切需要新的作用時間長、作用效果穩(wěn)定，并對魚體損傷輕微的新方法，以恢復(fù)這類魚類的性腺發(fā)育，保證物種的延續(xù)及優(yōu)良性狀的傳遞；同時，這一技術(shù)也可便利地應(yīng)用于魚類性成熟的催產(chǎn)。
殼聚糖(chitosan)是自然界中僅次于纖維素的第二大生物多糖，具有生物相容性、生物可降解性以及低毒性等優(yōu)點。根據(jù)殼聚糖的特性已知，在微酸性條件下，殼聚糖能均勻的溶解；而在微堿性條件下，殼聚糖能很快析出。為此，本發(fā)明利用上述特性，采用殼聚糖為載藥體和沉淀劑，制備殼聚糖-甲基睪酮緩釋藥條。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種殼聚糖(chitosan)甲基睪酮(methyl-testosterone，MT)(以下簡稱為chitosan-MT)緩釋藥條的制備方法，采用該方法制備的藥條能促進魚類性腺發(fā)育，而且作用效果穩(wěn)定，作用時間長，能應(yīng)用于有效恢復(fù)因促性腺激素(gonadotropin，GtH)分泌不足而導(dǎo)致不育或者是性腺發(fā)育延滯魚類的育性，同時也可用于魚類性成熟催產(chǎn)。
為了達到上述目的，本發(fā)明采用了以下技術(shù)措施制備殼聚糖甲基睪酮藥條A殼聚糖用1.5-2％的醋酸溶液(醋酸與水的體積比)配成質(zhì)量與體積比濃度為2％的水溶液，過濾；B將殼聚糖溶液與甲基睪酮按體積與質(zhì)量比為2-3∶1充分混勻；C用注射器推入5％的NaOH凝固液中，放置時間10-15分鐘后，小心取出；D連續(xù)用蒸餾水漂洗6-8次后，在58-60℃烘烤16-24小時，即成殼聚糖甲基睪酮藥條。該藥條能用于因性腺發(fā)育延滯而導(dǎo)致不育的魚類繁殖功能恢復(fù)，也可用于魚類性成熟催產(chǎn)。
藥條的皮下埋植鯉魚用丁香酚(Eugenol)麻醉后稱重，然后采用皮下埋植殼聚糖-MT藥條，埋植劑量控制在30-80mg/500g魚體重范圍內(nèi)。根據(jù)埋植藥條的大小，用解剖刀順著鱗片在背部肌肉上劃開約0.8-2厘米的口子，用鑷子把藥條小心插入表皮下方，傷口涂上四環(huán)素以防感染。
本發(fā)明的優(yōu)點是采用埋植chitosan-MT緩釋藥條，能避免傳統(tǒng)的注射催產(chǎn)方式中多次注射等反復(fù)操作對魚體的傷害，同時MT持續(xù)釋放能發(fā)揮MT的長效性作用。更為重要的是，殼聚糖的低毒性不會對埋植個體的正常發(fā)育和生活帶來不利的影響。埋植一次緩釋藥條，其中的激素在魚體內(nèi)的作用效果持續(xù)15天以上，可使魚體的GtH含量提高2.74-4.53倍。
具體實施例方式
其步驟是制備殼聚糖甲基睪酮藥條A殼聚糖用1.5-2％的醋酸溶液(醋酸與水的體積比)配成質(zhì)量與體積比濃度為2％的水溶液，過濾；B將殼聚糖溶液與甲基睪酮按體積與質(zhì)量比為2-3∶1充分混勻；C用注射器推入5％的NaOH凝固液中，放置10或11或12或13或15分鐘后，小心取出；D連續(xù)用蒸餾水漂洗6或7或8次后，在58-60℃烘烤16或17或18或19或20或22或24小時，即成殼聚糖甲基睪酮藥條。
藥條的皮下埋植鯉魚用丁香酚(Eugenol)麻醉后取血樣并稱重，然后采用皮下埋植殼聚糖-MT藥條，埋植劑量控制在30-80mg/500g魚體重范圍內(nèi)。用解剖刀順著鱗片在背部肌肉上劃開約0.8-2厘米大小的口子，用鑷子把藥條小心插入表皮下方，傷口涂上四環(huán)素以防感染。埋植一次緩釋藥條，其中的激素在魚體內(nèi)的作用效果持續(xù)15天以上，可使魚體的GtH含量提高2.74-4.53倍。
權(quán)利要求
1.一種殼聚糖甲基睪酮緩釋藥條的制備方法，它包括下列步驟A、殼聚糖用1.5-2％的醋酸溶液配成質(zhì)量與體積比濃度為2％的水溶液，過濾；B、將殼聚糖溶液與甲基睪酮按體積與質(zhì)量比為2-3∶1混勻；C、用注射器推入5％的NaOH凝固液中，放置時間10-15分鐘后，取出；D、連續(xù)用蒸餾水漂洗6-8次后，在58-60℃烘烤16-24小時，即成殼聚糖甲基睪酮藥條。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種殼聚糖甲基睪酮緩釋藥條的制備方法，其步驟是A.將殼聚糖配成水溶液，過濾；B.將殼聚糖溶液與甲基睪酮按一定比例混勻；C.用注射器推入NaOH凝固液中，放置一定時間后，取出；D.連續(xù)用蒸餾水漂洗，烘烤，即成殼聚糖甲基睪酮藥條。該方法制備的藥條能促進魚類性腺發(fā)育，效果穩(wěn)定，作用時間長，能應(yīng)用于有效恢復(fù)因促性腺激素分泌不足導(dǎo)致不育或者是性腺發(fā)育延滯魚類的育性，同時可用于魚類性成熟催產(chǎn)。
文檔編號A61P15/00GK1679618SQ200510018148
公開日2005年10月12日 申請日期2005年1月13日 優(yōu)先權(quán)日2005年1月13日
發(fā)明者胡煒, 朱作言, 黎雙飛, 汪亞平 申請人:中國科學(xué)院水生生物研究所