專利名稱：一種治療心血管疾病的藥物組合物及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療心血管疾病的藥物組合物，具體地，是由沙棘為原料提取的有效部位組合制備而成的藥物組合物，屬藥物領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
心血管疾病是全球衛(wèi)生保健和衛(wèi)生資源的巨大負擔。根據(jù)2000年公布的最近的世界衛(wèi)生報告，全世界每年有1700萬人死于心血管疾病，到2020年心血管死亡將比該數(shù)字增加50％，高達2500萬。目前西藥主要為對癥治療，中藥雖在標本兼治上有特色，但多為復(fù)方制劑，受制劑工藝和質(zhì)量標準的制約，難以被國際市場所接受。
沙棘是具有中醫(yī)藥特色，中藥、藏藥、蒙藥交叉應(yīng)用歷史悠久的藥材，自公元8世紀以來的《月王藥珍》、《四部醫(yī)典》和《晶珠本草》等著名醫(yī)藥典籍中均有用沙棘治療疾病記載，現(xiàn)收載于《中國藥典》2005年版一部。
心達康片(收載于部頒標準中藥成方制劑第十四冊)由沙棘Hippophae rhamnoidesL.單味中藥提取物(沙棘總黃酮)組成，具有化瘀通脈的功效。經(jīng)5000例臨床研究證明，心達康片使心功能改善率達86.9％，缺血性心電圖改善總有效率71.8％，治療缺血性心臟病有效率可達81.4％，單純緩解15.7％，總有效率達97.1％，優(yōu)于西藥消心痛，被認為是治療缺血性心臟病標本兼治很有前途的藥物。心達康片長期應(yīng)用于臨床，療效肯定，主要用于冠心病心絞痛的治療，能改善缺血性心肌的血液循環(huán)，增加心肌的血流量，降低心肌的耗氧量，消除氧自由基，提高耐氧能力，并能促進和改善心肌的側(cè)支循環(huán)；同時能降低血脂，防止血細胞凝聚，降低毛細血管的通透性和脆性，對治療和預(yù)防多種心血管疾病均安全、有效，無明顯毒副反應(yīng)，值得臨床進一步推廣應(yīng)用。但現(xiàn)有心達康片是以沙棘總黃酮單一有效部位組成，其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究較欠缺，定量分析僅采用分光光度法測定總黃酮，質(zhì)量標準研究水平不高，而且崩解時間較長，起效較慢，服用時間長和次數(shù)較多等缺點。
沙棘油是沙棘中的有效成分，其中含有亞油酸、胡蘿卜素、類胡蘿卜素、維生素E等，久用可降血脂、軟化血管、擴張血管，有心肌和血管舒張作用，保障心肌自身營養(yǎng)和周圍的冠脈供血、供氧，減少了心絞痛發(fā)生的機會。
目前尚無將沙棘總黃酮、沙棘油配伍使用治療心血管疾病的相關(guān)報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的技術(shù)方案是提供了一種治療心血管疾病的藥物組合物，它是由沙棘為原料提取的有效部位組合制備而成的藥物組合物，本發(fā)明的另一技術(shù)方案是提供了該藥物組合物的制備方法和用途。
本發(fā)明提供了一種治療心血管疾病的藥物組合物，它是含有下述重量配比的原料制備而成的藥劑沙棘總黃酮1～3份、沙棘油1～99份。
進一步地，它是由下述重量配比的原料制備而成的藥劑沙棘總黃酮1～3份、沙棘油1～99份。
更進一步地，它是由下述重量配比的原料制備而成的藥劑沙棘總黃酮1～3份、沙棘油1～9份。
更進一步地，它是由下述重量配比的原料制備而成的藥劑沙棘總黃酮3份、沙棘油7份。
其中，所述的沙棘總黃酮中含總黃酮以異鼠李素計算的重量百分含量為10％以上，所述的沙棘油中含總脂肪酸以亞油酸計算，重量百分含量為70％以上。
本發(fā)明藥物組合物是由沙棘總黃酮、沙棘油為活性成分，加上藥學上可接受的輔料或輔助性成分制備而成的藥劑。
其中，所述的藥劑是軟膠囊、膠囊劑、片劑、丸劑、顆粒劑、注射劑。
本發(fā)明還提供了制備該藥物組合物的方法，它包括如下步驟a、取沙棘果實或種籽或果實與種籽的混合物粉碎，用溶劑法回流提取、超臨界流體提取或壓榨離心法任一種方法提取，收集沙棘油；沙棘油是由沙棘果油或沙棘籽油或沙棘果油與沙棘籽油按一定比例制成的混合油。
b、取沙棘果實粉碎，用85％以上的乙醇加熱回流提取，濃縮至稠膏，用水沉淀，過濾，濾餅用石油醚脫脂，沉淀減壓干燥，粉碎，得沙棘總黃酮；或取沙棘藥材正己烷或固相萃取脫脂，加入80％乙醇回流，回收乙醇，加硅藻土拌勻、抽洗后蒸干，再加醋酸乙酯回流提取，回收醋酸乙酯，脫脂，即得沙棘總黃酮；c、取a、b步驟制備的沙棘總黃酮、沙棘油，按如下重量配比制備成藥學上常用的藥劑沙棘總黃酮1～3份、沙棘油1～99份。
本發(fā)明還提供了該藥物組合物在制備治療冠心病心絞痛的藥物中的用途。
本發(fā)明藥物原料按一定比例配比的黃酮和脂肪油二者復(fù)合物，其抗心肌缺血藥效作用較單獨以沙棘總黃酮為原料的“心達康片”更好。并提供了沙棘油和沙棘總黃酮最佳配伍配比，沙棘油、沙棘總黃酮發(fā)揮了協(xié)同增效的作用，本發(fā)明藥物強化主效應(yīng)，克服副效應(yīng)，融整合調(diào)節(jié)為一體，達到高效、低毒、安全、可控目標，以明顯提高心達康制劑的療效，同時還可提高該制劑工藝和質(zhì)量控制水平，提高了沙棘的藥理作用和臨床療效，同時降低了雜質(zhì)含量，可制成各種制劑，用于治療冠心病、心絞痛、高脂血癥等，藥物分散均勻、溶出釋放和顯效迅速，運輸、貯存、攜帶方便，適于患者服用，為臨床提供了一種新的選擇。
顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容，按照本領(lǐng)域的普通技術(shù)知識和慣用手段，在不脫離本發(fā)明上述基本技術(shù)思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。
以下通過實施例形式的具體實施方式
，對本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進一步的詳細說明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。
具體實施例方式
實施例1本發(fā)明藥物原料沙棘油的提取沙棘的提取方法一取沙棘果實或種籽或果實與種籽的混合物粉碎，溶劑法回流提取，用正庚烷，加熱回流提取2次，每次4小時，回收溶劑，收集沙棘油；沙棘的提取方法二取沙棘果實或種籽或果實與種籽的混合物粉碎，超臨界CO2流體提取，經(jīng)一級分離器收集沙棘油；其中，萃取壓力為40MPa，萃取溫度為65℃，萃取流量為18L/h，一級分離壓力為6.5MPa，一級分離溫度為36℃。
沙棘的提取方法三壓榨離心法提取取沙棘果實或種籽或果實與種籽的混合物，壓榨離心法提取，采用機械壓榨后，得沙棘粗油，離心法分離，收集沙棘油；實施例2本發(fā)明藥物原料沙棘總黃酮的制備制備工藝一取沙棘粉碎成粗粉，用85％以上的乙醇分三次加熱回流提取，每次2小時，濾過，合并濾液，回收乙醇，濃縮至稠膏，用水沉淀，過濾，濾餅用石油醚脫脂，沉淀減壓干燥，粉碎。(沙棘總黃酮含量大于10％)制備工藝二沙棘藥材正己烷或固相萃取(SPE)脫脂后，10倍80％乙醇回流提取兩次，回收率乙醇，加藥材量1/4的硅藻土拌勻，20倍量沸水抽洗后蒸干，8倍量醋酸乙酯回流提取兩次，回收醋酸乙酯，少量石油醚脫脂，即得。(沙棘總黃酮含量大于50％)實施例3本發(fā)明藥物軟膠囊的制備1、制劑處方原料沙棘總黃酮150g 沙棘油350g輔料蜂蠟20g以上共制成1000粒軟膠囊(每粒裝0.52g)2、制法以上兩味，加蜂蠟，于膠體磨研磨混勻，壓制成1000粒軟膠囊，即得。
軟膠囊劑具有以下特點，是本品的最適宜的劑型1.整潔、美觀、容易吞服，攜帶輕巧，使用方便。
2.相對用藥劑量準確，精確度較高。
3.醋柳黃酮難溶于水，制備軟膠囊時不需要加粘合劑和壓力，基本屬于溶解或細微粉分散于內(nèi)容物中，一旦崩解就一同釋放，顯效迅速，比片劑明顯快并吸收要好。
4.沙棘油中含有容易氧化的成分，制備成添加遮光劑的軟膠囊，防護藥物受濕和空氣中氧、光線的作用，從而提高其穩(wěn)定性。
5.本品處方中含沙棘油量高，不易制成固體藥物，制成軟膠囊劑，能彌補其他固體劑型的不足。
綜上所述，本品因含有非水溶性的固體藥物和液體藥物，液體藥物用量較高，兩相混懸制成的稠厚液體，適宜的劑型為軟膠囊。本品制成軟膠囊，在利用醋柳黃酮的基礎(chǔ)上，同時配伍使用沙棘油，彌補硬膠囊劑、片劑在臨床應(yīng)用中的起效慢，作用較弱等缺點，服用后在胃中囊殼可迅速崩解，且運輸、貯存、攜帶方便，適于患者服用。
實施例4本發(fā)明藥物固體制劑的制備①沙棘油的固化加入其它制劑，將沙棘油制成固體粉末，如加入淀粉吸收后，制成油脂粉末加入明膠固化包裹，制成油脂微囊加入蜂蠟固化，制成油脂化固體，粉碎加入環(huán)狀糊精固化吸收，粉碎等②藥物混合將沙棘油固體粉末與沙棘總黃酮混合均勻，加入適當制劑輔料，制成片劑、膠囊劑、顆粒劑、丸劑、混懸劑、散劑、滴丸劑等固體制劑實施例5本發(fā)明藥物液體制劑的制備①解決沙棘黃酮混懸穩(wěn)定性，如單一或合并使用以下方法加入油溶性表面活性劑，制成微乳態(tài)；加入增稠混懸劑，超微粉碎和可濕性等②藥物混合加入制劑輔料，制成混懸微乳劑、油溶性液體等。
實施例6本發(fā)明藥物顆粒的制備稱取實施例1、例2制備的原料沙棘總黃酮300g 沙棘油700g，混合，加入淀粉，制粒、整粒、得顆粒劑。
實施例7本發(fā)明藥物片劑的制備稱取實施例1、例2制備的原料沙棘總黃酮300g 沙棘油700g，混合，加入淀粉，制粒、整粒、加入硬脂酸鎂，壓片，得片劑。
實施例8本發(fā)明藥物口服液的制備稱取實施例1、例2制備的原料沙棘總黃酮300g 沙棘油700g，加入混懸劑、矯味劑，膠體磨混合，得口服液。
實施例9本發(fā)明藥物顆粒的制備稱取實施例1、例2制備的原料沙棘總黃酮10g 沙棘油990g，混合，加入淀粉，制粒、整粒、得顆粒劑。
實施例10本發(fā)明藥物片劑的制備稱取實施例1、例2制備的原料沙棘總黃酮30g 沙棘油990g，混合，加入淀粉，制粒、整粒、加入硬脂酸鎂，壓片，得片劑。
實施例11本發(fā)明藥物口服混懸劑的制備稱取實施例1、例2制備的原料沙棘總黃酮300g 沙棘油300g，加入混懸劑、矯味劑，膠體磨混合，得口服混懸劑。
實施例12本發(fā)明藥物口服混懸劑的制備稱取實施例1、例2制備的原料沙棘總黃酮300g 沙棘油900g，加入混懸劑、矯味劑，膠體磨混合，得口服混懸劑。
上述制備制備均按常規(guī)的制劑工藝、選擇常規(guī)的輔料制備。
通過比較，固體制劑的穩(wěn)定性優(yōu)于液體制劑實施例13本發(fā)明藥物質(zhì)量控制本發(fā)明中，沙棘總黃酮應(yīng)符合國家藥品標準-醋柳黃酮(WS-10001-(HD-1311)-2003)項下的有關(guān)規(guī)定，沙棘油應(yīng)符合行業(yè)標準-沙棘油(HB/QS001-94、HB/QS002-94)及沙棘油原料藥品標準項下的有關(guān)規(guī)定。
沙棘油總脂肪酸含量沙棘油總脂肪酸含量(國家標準GB/T17376動植物油脂脂肪酸甲酯制備，GB/T17377動植物油脂脂肪酸甲酯的氣相色譜分析，氣相色譜法；國家標準GB/T15688-1995動植物油脂中不溶性雜質(zhì)含量的測定，重量法)為70％以上，結(jié)果見表1。
總脂肪酸相對含量按GB/T17376、GB/T17377，氣相色譜法測定，峰面積歸一化法計算相對含量(峰面積歸一化法含量以100％計算)。
亞油酸相對含量按GB/T17376、GB/T17377，氣相色譜法測定，亞油酸峰面積在峰面積歸一化法中的相對含量。
亞油酸含量按GB/T17376、GB/T17377，氣相色譜法測定，亞油酸在沙棘油中的重量含量。
沙棘總黃酮含量總黃酮含量(國家藥品標準WS-10001-(HD-1311)-2003，醋柳黃酮原料藥，分光光度法，按干燥品計算，含總黃酮苷元以異鼠李素計)為10％以上，結(jié)果見表2。
有效部位含量計算方法有效部位含量(％)＝沙棘總黃酮含量×其比例分數(shù)+沙棘油總脂肪酸含量×其比例分數(shù)×100總比例分數(shù)經(jīng)計算本發(fā)明藥物的有效部位平均含量為50％以上，結(jié)果見表3。
為驗證沙棘有效部位組合物的有效性、安全性，對其進行了藥效學試驗、急性毒性試驗試驗例1本發(fā)明藥物原料沙棘有效部位的藥效學篩選試驗(一)對冠脈結(jié)扎致心肌缺血大鼠心電圖的影響1材料與方法1.1動物Wistar大鼠，全雄，由成都中醫(yī)藥大學實驗動物中心提供，動物合格證號川實動管第11號。
1.2藥品和實驗分組沙棘總黃酮為黃棕褐色干燥浸膏(批號030901，總黃酮含量為11.5％)，由四川美大康藥業(yè)股份有限公司提供；沙棘油為橘紅色油狀物(批號031001，總脂肪酸含量為83.8％)，由四川美大康藥業(yè)股份有限公司提供。用菜籽油配制各組藥物，實驗分組如下，各設(shè)高、低劑量組。模型對照組灌服等容積的菜籽油。
試驗分組S0 S1 S2S3S4S5S6沙棘油比例 0 50％60％ 70％ 80％ 90％ 100％沙棘總黃酮比例 100％ 50％40％ 30％ 20％ 10％ 01.3試劑紅四氮唑(TTC)，批號F20030920，中國醫(yī)藥(集團)上?；瘜W試劑公司生產(chǎn)。
1.4儀器BL-420E四道生理記錄儀，HX-200動物呼吸機，成都泰盟科技有限公司。
2實驗方法與結(jié)果2.1心肌缺血造模取健康Wistar雄性大鼠120只，按體重隨機分組如下表，叉開時間給藥，連續(xù)灌胃給藥4天，造模前禁食不禁水12小時，術(shù)次給藥60分鐘后用10％烏拉坦1.0ml/100g腹腔注射麻醉，仰位固定于大鼠手術(shù)板上，記錄其正常心電圖。完畢后頸部作一切口，分離組織，行氣管插管術(shù)，接動物呼吸機，頻率50次/分，潮氣量8～10ml，吸呼比為2∶1。左鎖骨中線第4～5肋間開胸，暴露心臟，以眼科鑷輕提起心包膜，小心撕開，在左心耳下用針(3×6，3/8○)，000號絲線，于冠狀溝處結(jié)扎左冠狀動脈前降支。然后縫合關(guān)閉胸腔，記錄結(jié)扎后5分鐘、10分鐘、15分鐘、30分鐘的心電圖，比較結(jié)扎前后各時間段J點(ST段)的變化，以其變化值作為統(tǒng)計指標。冠脈結(jié)扎4h后處死動物，開胸取出心臟。將其用鹽水沖洗，剔除非心臟組織和左右心耳，用吸水紙吸去水份，在電子天平上稱量，即為全心室重量，從心尖到心底部平行將心臟切成0.1cm厚心肌片，鹽水沖洗心肌片后，吸干水份，將心肌片放入1％TTC溶液中。置于37℃恒溫水浴槽中孵浴5～7min，孵浴中不斷搖動，以保證心肌均勻充分染色。然后取出心肌片，用生理鹽水沖洗去掉多余TTC溶液，吸干水份后，剪去染色部分心肌。未染色部分稱重，即得梗死心肌重量，求梗死心肌占全心重的百分比進行統(tǒng)計處理。
試驗結(jié)果見表4、5。
以上實驗結(jié)果表明，與模型對照組比較，七種配比中S0、S1、S2、S3、S4有明顯降低大鼠冠脈結(jié)扎導致的J點升高作用(P＜0.05～0.01)，提示S0～S4具有保護冠脈結(jié)扎所致的心肌梗塞作用，其中以S3(沙棘油∶沙棘總黃酮＝70％∶30％)，S4(沙棘油∶沙棘總黃酮＝80％∶20％)作用最為明顯。
以上結(jié)果表明，七種配比中S0(沙棘油∶沙棘總黃酮＝0∶100％)、S1(沙棘油∶沙棘總黃酮＝50％∶50％)、S2(沙棘油∶沙棘總黃酮＝60％∶40％)、S3(沙棘油∶沙棘總黃酮＝70％∶30％)、S4(沙棘油∶沙棘總黃酮＝80％∶20％)與模型對照組比較，均能明顯減少心肌梗塞范圍(P＜0.05～0.01)，說明S0～S4能減輕冠脈結(jié)扎所致大鼠心肌梗死。
(二)對垂體后葉素致心肌缺血大鼠的影響1材料與方法1.1動物Wistar大鼠，雌雄各半，由成都中醫(yī)藥大學實驗動物中心提供，動物合格證號川實動管第11號。
1.2藥品與分組同上。
1.3試劑垂體后葉素，批號20030802，中美合資沈陽濟世制藥有限公司生產(chǎn)。
1.4儀器BL-420E四道生理記錄儀，成都泰盟科技有限公司生產(chǎn)。
2.實驗方法實驗前進行預(yù)篩，將對垂體后葉素不敏感大鼠剔除，取合格者110只，隨機分組，連續(xù)灌胃給藥4天，于末次給藥后半小時10％烏拉坦腹腔注射麻醉，固定，皮下插入心電圖電極記錄II導聯(lián)心電圖。穩(wěn)定記錄一段時間后由尾靜脈注射給予垂體后葉素0.5U/Kg，15s推完。連續(xù)記錄20min的心電圖。以出現(xiàn)下列一項指征者為陽性心肌缺血①T波低平(降低原T波高度50％以上)、雙向、倒置②J點升高1.5mv以上，ST水平下移0.5mv③心律不齊。未出現(xiàn)這些改變者為陰性。以各組心肌缺血陽性率進行x2檢驗。
試驗結(jié)果見表6。
以上結(jié)果表明，七種配比中S0、S1、S2、S3、S4、S5與模型對照組比較，均可明顯降低靜注垂體后葉素導致的心肌缺血陽性大鼠數(shù)目(p＜0.05)，S0高(沙棘油∶沙棘總黃酮＝0∶100％)、S1高(沙棘油∶沙棘總黃酮＝50％∶50％)、S3高(沙棘油∶沙棘總黃酮＝70％∶30％)、S4(沙棘油∶沙棘總黃酮＝80％∶20％)高劑量組作用尤為明顯(p＜0.01)，說明對垂體后葉素所致心肌缺血具有保護作用。
(三)對急性高血脂模型小鼠血脂的影響1實驗材料1.1動物昆明種小鼠，雌雄各半，由由成都中醫(yī)藥大學實驗動物中心提供，動物合格證號川實動管第11號。
1.2藥品與分組同上。
1.3試劑甘油三酯(GPO-PAP法檢測)試劑盒，批號030906，總膽固醇(GOD-CE-PAP法檢測)試劑盒，批號030910，均購自成都邁克科技有限公司。
2實驗方法與結(jié)果造摸方法取18～22g小鼠150只，雌雄各半，隨機分組，連續(xù)給藥7天，第6天腹腔注射75％蛋黃乳0.5ml/只造成高血脂模型。20小時后摘眼球取血，離心分離血清，測血清中甘油三酯(TG)和總膽固醇(TC)含量。
試驗結(jié)果見表7。
以上試驗結(jié)果表明，七種配比中S2、S3、S4、S5、S6組具有明顯的降低高脂大鼠血清中甘油三酯、總膽固醇含量，其中S3(沙棘油∶沙棘總黃酮＝70％∶30％)、S4(沙棘油∶沙棘總黃酮＝80％∶20％)、S5(沙棘油∶沙棘總黃酮＝90％∶10％)、S6(沙棘油∶沙棘總黃酮＝100％∶0)組降脂作用最為明顯。
(四)有效部位組合物的藥效篩選試驗結(jié)論通過以上兩種抗心肌缺血實驗和降血脂實驗，結(jié)果顯示，S0、S1、S2、S3、S4組對冠脈結(jié)扎所致的大鼠心肌缺血和垂體后葉素所致的大鼠心肌缺血均具有明顯的保護作用，其中以S3組作用最強；而S2、S3、S4、S5、S6具有明顯的降血脂作用。
以上結(jié)果表明，沙棘總黃酮是抗心肌缺血的主要有效部位，而沙棘油是降血脂的主要有效部位，二者以一定的配伍配比S3(沙棘油∶沙棘總黃酮＝70％∶30％)綜合作用最為突出，既具有明顯的抗心肌缺血作用，又具有明顯的降血脂作用，充分發(fā)揮兩類有效部位的作用，結(jié)合本品的功能與主治(主要用于治療冠心病心絞痛)，本品的最佳處方配伍配比為沙棘油∶沙棘總黃酮＝7∶3。
試驗例2本發(fā)明藥物原料的藥效學試驗為了研究沙棘有效部位組合物的最佳原料處方配比在治療缺血性心臟病方面的藥理作用，采用注射垂體后葉素和冠脈結(jié)扎兩種方法制備急性心肌缺血大鼠模型，冠脈結(jié)扎制備心肌缺血犬模型，通過觀察預(yù)防給藥分別對兩種模型動物心電圖ST段、T波變化、血流動力學、心肌收縮性能和舒張性能、血清中相關(guān)酶(CK、LDH、MDA、SOD、NO)的水平四個方面的影響，探討沙棘有效部位組合物對抗心肌缺血的作用及其作用機制；通過對高脂飼料喂飼性高血脂大鼠和急性血瘀模型大鼠的觀察，考察沙棘有效部位組合物的調(diào)血脂作用和對血液流變學的影響。
結(jié)果(1)沙棘有效部位組合物能顯著改善注射垂體后葉素和冠脈結(jié)扎兩種方法導致的大鼠心電圖ST段、T波缺血性變化(p＜0.01)(2)沙棘有效部位組合物可以減慢心率，降低血壓，改善急性心肌缺血大鼠血流動力學(p＜0.01或p＜0.05)(3)沙棘有效部位組合物對急性心肌缺血大鼠心肌收縮性能沒有明顯影響(p＞0.05)；沙棘有效部位組合物能夠降低急性心肌缺血大鼠左室舒張末期壓力(LVEDP)，升高左室壓力最大下降速率(-dp/dtmax)，明顯改善急性心肌缺血大鼠的心肌舒張性能(p＜0.01或p＜0.05)。
(4)沙棘有效部位組合物可以減慢心率，降低血壓，而對心肌收縮性能沒有明顯影響，表明沙棘有效部位組合物可降低急性心肌缺血大鼠的心肌耗氧量，有利于緩解心臟缺血性病變。
(5)沙棘有效部位組合物能夠顯著降低急性心肌缺血大鼠血清中CK、LDH、MDA的水平，提高SOD、NO的活性，穩(wěn)定心肌細胞結(jié)構(gòu)及其功能，對抗缺血性損害(p＜0.01或p＜0.05)。
(6)沙棘有效部位組合物能夠降低高血脂大鼠血清中TC、TG、LDL的水平，升高HDL水平(p＜0.01或p＜0.05)，表明具有很好的調(diào)血脂作用。
(7)沙棘有效部位組合物可以顯著降低急性血淤模型大鼠高、中、低切全血粘度，高、低切全血還原粘度，紅細胞聚集指數(shù)(p＜0.01或p＜0.05)，顯示沙棘有效部位組合物能夠改善血液流變學。
(8)沙棘有效部位組合物對結(jié)扎冠脈致心肌缺血犬心外膜心電圖∑-ST及N-ST變化的影響與模型對照組相比，沙棘有效部位組合物高、中、低劑量組、心達康片劑對照組以及硝苯地平組均可顯著對抗結(jié)扎冠脈導致心肌缺血犬心外膜心電圖∑-ST及N-ST變化(p＜0.05或p＜0.01)，而沙棘有效部位組合物低劑量組僅有對抗結(jié)扎冠脈導致結(jié)扎冠脈導致心肌缺血犬心外膜心電圖∑-ST及N-ST變化的趨勢(p＞0.05)(9)沙棘有效部位組合物對結(jié)扎冠脈致心肌缺血犬血流動力學指標的影響結(jié)扎冠脈誘發(fā)的急性心肌缺血犬血流動力學變化結(jié)扎冠脈后MAP、HR先是略下降，然后恢復(fù)原水平或稍微加快；LVEDP明顯升高；LVSP、+DP/Dtmax、-DP/DTmax下降，以上各指標變化表明心肌缺血引起心臟功能受損。
由結(jié)果可知，沙棘有效部位組合物各劑量組、心達康片劑對照組以及硝苯地平組在結(jié)扎冠脈后各時點心率HR均有不同程度下降，沙棘有效部位組合物高、中、低劑量組、心達康片劑對照組在結(jié)扎冠脈后30分鐘時HR下降即跟模型對照組有差異(p＜0.01)；沙棘有效部位組合物高、中、低劑量組、心達康片劑對照組和硝苯地平組在結(jié)扎冠脈后30分鐘時MAP即跟模型對照組有差異(p＜0.01或p＜0.05)，而沙棘有效部位組合物高、中、低劑量組和心達康片劑對照組在MAP下降幅度上又與硝苯地平組有著顯著差異(p＜0.01)；對LVSP的影響沙棘有效部位組合物高、中、低劑量組、心達康片劑對照組和硝苯地平組在結(jié)扎冠脈后各時點均與模型對照組相比有顯著差異(p＜0.01)，這與其降低血壓作用有關(guān)。
(10)沙棘有效部位組合物對結(jié)扎冠脈致心肌缺血犬心肌收縮性能和舒張性能的影響對于+DP/DTmax，沙棘有效部位組合物各劑量組、心達康片劑對照組以及硝苯地平組在結(jié)扎冠脈后與模型對照組相比均無顯著差異(p＞0.05)。與模型對照組相比，沙棘有效部位組合物各劑量組、心達康片劑對照組以及硝苯地平組在結(jié)扎后對Vce40沒有顯著影響(p＞0.05)；對于-DP/Dtmax和LVEDP的影響，沙棘有效部位組合物高、中劑量組、心達康片劑對照組及硝苯地平組均分別在結(jié)扎后與模型對照組有顯著差異(p＜0.05或p＜0.01)，提示改善左心室舒張功能，減少回心血量，降低前負荷。
(11)沙棘有效部位組合物對結(jié)扎冠脈致心肌缺血犬心肌耗氧量的影響結(jié)果顯示沙棘有效部位組合物、心達康片劑對照組和硝苯地平組可減慢心率，降低血壓，而對心肌收縮性能沒有影響，根據(jù)心肌耗氧量二項乘積“心率×血壓”可推斷沙棘有效部位組合物可以心肌耗氧量，改善梗塞心肌的能量供求關(guān)系，緩解缺血性損害。
(12)沙棘有效部位組合物對結(jié)扎冠脈致心肌缺血犬血清酶和心肌酶水平的影響模型組犬在結(jié)扎冠脈后血清中CK、LDH、MDA顯著升高，NO、SOD明顯降低；心肌組織中MDA顯著升高，NO、SOD明顯降低(與假手術(shù)組相比p＜0.01)，沙棘有效部位組合物高、中劑量組、心達康片劑對照組以及硝苯地平組犬結(jié)扎冠脈后血清和心肌組織中CK、LDH、MDA升高幅度，NO、SOD降低幅度，與模型組大鼠有顯著差異(p＜0.05或p＜0.01)，沙棘有效部位組合物低劑量有對抗這種變化的趨勢(p＞0.05)。
(13)沙棘有效部位組合物對結(jié)扎冠脈致心肌缺血犬心肌梗塞范圍的影響沙棘有效部位組合物高、中劑量組、心達康片劑對照組以及硝苯地平組犬心肌梗塞范圍與與模型組大鼠有極顯著差異(p＜0.01)，沙棘有效部位組合物低劑量組沒有顯著差異(p＞0.05)。
結(jié)論以上試驗結(jié)果表明沙棘有效部位組合物具有較強的心肌缺血保護作用和明顯的調(diào)血脂作用，能夠改善血液流變學，在治療缺血性心臟病方面具有很好的開發(fā)利用前景。
試驗例3本發(fā)明藥物急性毒性試驗沙棘有效部位組合物的最佳原料處方配比流浸膏最大濃度、最大容積給小鼠一次灌胃38g/Kg，給藥10分鐘后，部分動物表現(xiàn)為靜伏少動，30分鐘后逐漸恢復(fù)正常。動物的大小便及其顏色、被毛、膚色、鼻、眼、口腔分泌物均未見異常，試驗后小鼠體重有所增長，未見動物死亡，故本品一次灌胃小鼠的最大給藥量為38g生藥/Kg(相當于成人臨床每日最大推薦劑量的1520倍)。
沙棘有效部位組合物的最佳原料處方配比流浸膏最大濃度、最大容積給大鼠一次灌胃38g/Kg，給藥10分鐘后，部分動物表現(xiàn)為靜伏少動，30分鐘后逐漸恢復(fù)正常。動物的大小便及其顏色、被毛、膚色、鼻、眼、口腔分泌物均未見異常，試驗后小鼠體重有所增長，未見動物死亡，故本品一次灌胃小鼠的最大給藥量為19g生藥/Kg(相當于成人臨床每日最大推薦劑量的760倍)。
結(jié)論從本品的急性毒性所試劑量與給藥后動物反應(yīng)判斷，本品屬無明顯毒性藥物。
表1、沙棘油中總脂肪酸含量測定結(jié)果

表2、沙棘總黃酮中總黃酮含量測定結(jié)果

表3、組合物有效部位含量測定結(jié)果

表4、對冠脈結(jié)扎模型大鼠心電圖J點(mv)變化的影響(x±s)

注與模型對照組比較，*p＜0.05，**p＜0.01表5、對冠脈結(jié)扎模型大鼠心肌梗塞區(qū)重量百分比的影響(X±S)

注與模型對照組比較，*p＜0.05；**p＜0.01
表6 對垂體后葉素致大鼠急性心肌缺血的影響

注與模型對照組比較，*p＜0.05；**p＜0.01表7 小鼠血清甘油三酯含量(TG)、總膽固醇(TC)含量

注與模型對照組比較*p＜0.05，*p＜0.0權(quán)利要求
1.一種治療心血管疾病的藥物組合物，其特征在于它是含有下述重量配比的原料制備而成的藥劑沙棘總黃酮1～3份、沙棘油1～99份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述治療心血管疾病的藥物組合物，其特征在于它是由下述重量配比的原料制備而成的藥劑沙棘總黃酮1～3份、沙棘油1～99份。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的治療心血管疾病的藥物組合物，其特征在于它是由下述重量配比的原料制備而成的藥劑沙棘總黃酮1～3份、沙棘油1～9份。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的治療心血管疾病的藥物組合物，其特征在于它是由下述重量配比的原料制備而成的藥劑沙棘總黃酮3份、沙棘油7份。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項所述的治療心血管疾病的藥物組合物，其特征在于所述的沙棘總黃酮中含總黃酮以異鼠李素計算，重量百分含量為10％以上，所述的沙棘油中含總脂肪酸以亞油酸計算，重量百分含量為70％以上。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的治療心血管疾病的藥物組合物，其特征在于它是由沙棘總黃酮、沙棘油為活性成分，加上藥學上可接受的輔料或輔助性成分制備而成的藥劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的治療心血管疾病的藥物組合物，其特征在于所述的藥劑是軟膠囊、膠囊劑、片劑、丸劑、顆粒劑、注射劑。
8.一種制備權(quán)利要求2所述的治療心血管疾病的藥物組合物的方法，它包括如下步驟a、取沙棘果實或種籽或果實與種籽的混合物粉碎，用溶劑法回流提取、超臨界流體提取或壓榨離心法任一種方法提取，收集沙棘油；b、取沙棘果實粉碎，用85％以上的乙醇加熱回流提取，濃縮至稠膏，用水沉淀，過濾，濾餅用石油醚脫脂，沉淀減壓干燥，粉碎，得沙棘總黃酮；c、取a、b步驟制備的沙棘總黃酮、沙棘油，按如下重量配比制備成藥學上常用的藥劑沙棘總黃酮1～3份、沙棘油1～99份。
9.一種制備權(quán)利要求2所述的治療心血管疾病的藥物組合物的方法，它包括如下步驟a、取沙棘果實或種籽或果實與種籽的混合物粉碎，用溶劑法回流提取、超臨界流體提取或壓榨離心法任一種方法提取，收集沙棘油；b、取沙棘果實粉碎，用正己烷或固相萃取脫脂，加入80％乙醇回流，回收乙醇，加硅藻土拌勻、抽洗后蒸干，再加醋酸乙酯回流提取，回收醋酸乙酯，脫脂，即得沙棘總黃酮；c、取a、b步驟制備的沙棘總黃酮、沙棘油，按如下重量配比制備成藥學上常用的藥劑沙棘總黃酮1～3份、沙棘油1～99份。
10.權(quán)利要求1～7任一項所述的藥物組合物在制備治療冠心病心絞痛的藥物中的用途。
11.權(quán)利要求1～7任一項所述的藥物組合物在制備治療高脂血癥的藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種治療心血管疾病的藥物組合物，它是含有沙棘總黃酮、沙棘油為活性成分制備而成的藥劑。本發(fā)明還提供了該藥物組合物的制備方法。本發(fā)明藥物原料沙棘總黃酮、沙棘油發(fā)揮了協(xié)同增效的作用，強化主效應(yīng)，克服副效應(yīng)，達到高效、低毒、安全、目標可控，用于治療冠心病、心絞痛、高脂血癥等，藥物分散均勻、溶出釋放和顯效迅速，運輸、貯存、攜帶方便，適于患者服用，為臨床提供了一種新的選擇。
文檔編號A61K9/08GK1730018SQ20051002141
公開日2006年2月8日 申請日期2005年8月4日 優(yōu)先權(quán)日2005年8月4日
發(fā)明者張藝, 魏旭曄, 孟憲麗, 張祝君, 賴先榮, 秦方云, 古銳, 王平 申請人:成都中醫(yī)藥大學, 四川美大康藥業(yè)股份有限公司