專利名稱：刺蒺藜提取物的新用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種刺蒺藜提取物的新用途。
背景技術(shù)：
中藥刺蒺藜為蒺藜科(Zygophyllaceae)、蒺藜屬(Tritulus)植物蒺藜(Tritulus terrestris)的干燥成熟果實(shí)，又名蒺藜、白蒺藜，蒺藜子，硬蒺藜。性味辛、苦，微溫，有小毒，入肝、肺經(jīng)，具有散風(fēng)、明目、下氣、行血、補(bǔ)腎益精之功效。刺蒺藜在我國民間有悠久的用藥歷史，《神農(nóng)本草經(jīng)》將“蒺藜子”列為上品藥物，言其“主惡血，破癥結(jié)積聚，喉痹，乳難，久服長肌肉，明目，輕身”。中國藥典記載其功能“平肝解郁，活血祛風(fēng)，明目，止癢。用于頭痛眩暈，胸脅脹痛，乳閉乳癰，目赤翳障，風(fēng)疹瘙癢”。
近年來，各國對(duì)該植物研究未艾。研究表明，刺蒺藜提取物包括刺蒺藜甾體皂苷(皂甙)、黃酮、多糖及生物堿等成分，其中，可由不同方法提取分離到主要成分為皂苷(金京玲等.大孔吸附樹脂法提取蒺藜總皂甙.延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)學(xué)報(bào).3月，1999.22(1)29-31)，黃酮類(師勤等.反相高效液相色譜法測定蒺藜類3種水解黃酮苷元的含量.藥物分析雜質(zhì)；1999，19(2)75～78或吳瓊詩等.蒺藜全草中總黃酮的含量測定.廣東藥學(xué)院學(xué)報(bào)；1998，14(4)273～275)或多糖類(師勤等.比色法測定蒺藜中多糖的含量.中國藥科大學(xué)學(xué)報(bào)；1997，28(5)291～293)的刺蒺藜提取物。國外以刺蒺藜為原料開發(fā)出了用于增強(qiáng)性功能的“Tribustan”和“Vitanone”及軟化血管的“Tribusaponin”等制劑，我國亦用蒺藜的莖葉為原料開發(fā)出“心腦舒通”治療心血管疾病。但至今未有關(guān)于刺蒺藜提取物治療抑郁癥的報(bào)導(dǎo)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題即是上述課題，提供一種刺蒺藜提取物的新用途，即刺蒺藜提取物在制備治療或預(yù)防抑郁癥的藥品、保健食品或食品中的用途。
根據(jù)本發(fā)明，術(shù)語刺蒺藜同中國藥典，是指蒺藜果實(shí)。而本發(fā)明的刺蒺藜提取物是指各種從植物蒺藜的果實(shí)中提取的粗提物(用水或乙醇等提取后，不再進(jìn)一步分離純化而制得，包括甾體皂苷類、黃酮類、多糖類及生物堿等多種成分)或各種純度的刺蒺藜甾體皂苷精提物(上述粗提物經(jīng)各種不同分離、純化甾體皂苷方法制得)；其中，總甾體皂苷類重量含量≥50％的刺蒺藜提取物，本發(fā)明又簡稱為刺蒺藜總皂苷，其含有刺蒺藜總螺甾皂苷和刺蒺藜總呋甾皂苷。
根據(jù)本發(fā)明，優(yōu)選的刺蒺藜提取物為刺蒺藜總皂苷。
其中，上述藥品的活性成分除刺蒺藜提取物或其總皂苷外，還可以含有其他的治療或預(yù)防抑郁癥的有效物質(zhì)，如目前用于抗抑郁的各類藥物，例如氟西汀、帕羅西汀或舍曲林等。
該藥品或保健品可為片劑、顆粒劑、丸劑、散劑、膠囊劑、口服液、混懸液或乳劑等。
本發(fā)明的積極進(jìn)步效果在于本發(fā)明通過大鼠抑郁模型對(duì)刺蒺藜提取物抗抑郁活性進(jìn)行了研究，并且測定了大鼠大腦神經(jīng)遞質(zhì)的含量。結(jié)果表明刺蒺藜提取物能明顯改善大鼠的抑郁狀態(tài)，其中高劑量組刺蒺藜總皂苷(200mg/kg)還能明顯提高大鼠大腦中5-HT(5-羥色胺)含量和5-HIAA(5-羥吲哚乙酸)含量，故其有效活性成分為總皂苷。因此，本發(fā)明刺蒺藜提取物，尤其是刺蒺藜總皂苷可以用于制備抗抑郁藥品、保健食品或食品，也可用于抑郁癥病人的輔助治療。
具體實(shí)施例方式
下面用實(shí)施例及效果實(shí)施例來進(jìn)一步說明本發(fā)明。其中刺蒺藜粗提物及刺蒺藜總皂苷可為市售產(chǎn)品。
實(shí)施例1刺蒺藜粗提物的制備取原料蒺藜果實(shí)1kg，五倍水回流提取3次，每次1小時(shí)，提取液經(jīng)過噴霧干燥即得刺蒺藜粗提物。經(jīng)測定，該刺蒺藜粗提物含總皂苷類20％(香草醛-高氯酸法)，含多糖類2％，含總黃酮類1％。
實(shí)施例2刺蒺藜總皂苷的制備取原料蒺藜果實(shí)1kg，用八倍量75％乙醇回流提取3次，每次2.5小時(shí)，提取液合并，過濾，濾液在陰涼處(溫度小于10℃)放置12小時(shí)，4000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘后，取上清液，回收乙醇，濃縮至干浸膏，用水溶解成溶液后經(jīng)過大孔吸附樹脂柱(HPD100)。上柱后，先用水洗至無色后，再用30％乙醇洗至無色，然后用70％乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇至無醇味，噴霧干燥成干粉，即得刺蒺藜總皂苷，其純度為60％。
實(shí)施例3刺蒺藜總黃酮的制備刺蒺藜果實(shí)1kg，用5倍量水回流提取3次，以乙醇沉淀后，濾去沉淀，濾液上聚酰胺柱，以水洗脫至無色后，以丙酮洗脫，收集丙酮洗脫液，揮干丙酮，干燥即得蒺藜果實(shí)總黃酮。含量測定參照上述文獻(xiàn)(師勤等.反相高效液相色譜法測定蒺藜類3種水解黃酮苷元的含量.藥物分析雜質(zhì)；1999，19(2)75～78及吳瓊詩等.蒺藜全草中總黃酮的含量測定.廣東藥學(xué)院學(xué)報(bào)；1998，14(4)273～275)，其純度經(jīng)測定為52％。
實(shí)施例4刺蒺藜多糖的制備根據(jù)上述文獻(xiàn)(師勤等.比色法測定蒺藜中多糖的含量.中國藥科大學(xué)學(xué)報(bào)；1997，28(5)291～293)制備。
蒺藜果實(shí)1kg，經(jīng)95％乙醇回流提取后，殘?jiān)?倍量的水煎煮3次，每次1h，合并水提取液。取水提液1500mL，加氯仿300提取液。取水提液1500mL，加氯仿300mL，正丁醇100mL，磁力攪拌10-15h，置分液漏斗中，放置使分層，除去氯仿層(含蛋白質(zhì))。然后將水層置透析袋中透析72h(除去小分子雜質(zhì)及有機(jī)溶劑)。透析結(jié)束后，將透析液冷凍干燥，得到精制的刺蒺藜多糖。
效果實(shí)施例1刺蒺藜提取物及刺蒺藜總皂苷對(duì)抑郁模型大鼠抗抑郁作用-強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)①造模wistar大鼠(200-220g)放入內(nèi)徑20cm、高40cm的玻璃圓缸中，每缸1只，缸中水深24cm，水溫28℃-29℃(每缸水僅用1次)。實(shí)驗(yàn)第一天，每只大鼠預(yù)游15min，隨后取出，于燈下擦干，放入籠中，24h后進(jìn)行測試。大鼠重新放入水缸中，連續(xù)觀察5min，累計(jì)大鼠在水中停止掙扎、呈漂浮直立狀態(tài)、僅有偶爾的肢體運(yùn)動(dòng)以保持頭部浮在水面的持續(xù)時(shí)間(不動(dòng)時(shí)間)，連續(xù)十六天強(qiáng)迫游泳。以不動(dòng)時(shí)間超過150s者定為抑郁模型動(dòng)物。
②灌胃給藥以實(shí)施例1的刺蒺藜粗提物、實(shí)施例2的刺蒺藜總皂苷作為樣品，分高劑量組(200mg/kg)及低劑量組(100mg/kg)；以鹽酸舍曲林(上海醫(yī)藥工業(yè)研究院生產(chǎn))作為對(duì)照組(4.5mg/kg)；以生理鹽水為空白對(duì)照(5ml/只)。每只大鼠給藥3次，測定不動(dòng)時(shí)間前24h、5h、1h灌胃給藥。
③游泳實(shí)驗(yàn)灌胃給藥后按①的步驟要求進(jìn)行強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)，計(jì)錄每只wistar大鼠5min內(nèi)游泳不動(dòng)時(shí)間，結(jié)果見表1。
④監(jiān)測游泳結(jié)束后處死大鼠，取出大腦，采用熒光法測定大鼠腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)，5-羥色胺(5-HT)(sigma提供)、5-羥吲哚乙酸(5-HIAA)(sigma提供)、多巴胺(DA)(sigma提供)及去甲腎上腺素(NA)(sigma提供)，結(jié)果見表2。
表1 wistar大鼠強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間

與空白組相比*p＜0.01表2 熒光法測定wistar大鼠腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)

與空白組相比*p＜0.01，**p＜0.05效果實(shí)施例2抗抑郁作用的比較取ICR小鼠(20-22g)，以實(shí)施例2、3和4分別制得的刺蒺藜總皂苷(143.6mg/kg)、刺蒺藜多糖類(14.4mg/kg)、蒺藜總黃酮類(7.2mg/kg)作為樣品、舍曲林作為對(duì)照組(5.92mg/kg)、生理鹽水為空白對(duì)照(0.5ml/只)，連續(xù)灌胃14天，第14天灌胃后，強(qiáng)迫游泳6分鐘，計(jì)算后4分鐘內(nèi)游泳不動(dòng)時(shí)間，結(jié)果見表3。其中，按實(shí)施例1中提取的刺蒺藜粗提物中含皂苷、多糖和黃酮類的比例約為10∶1∶0.5，而設(shè)定試驗(yàn)中上述三者的劑量比例。
表3 ICR小鼠強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間

與空白組相比*p＜0.01上述效果實(shí)施例1、2通過大鼠抑郁模型對(duì)刺蒺藜提取物抗抑郁活性進(jìn)行了研究，并且測定了大鼠大腦神經(jīng)遞質(zhì)的含量。結(jié)果表明刺蒺藜提取物能明顯改善大鼠的抑郁狀態(tài)，其中高劑量組刺蒺藜總皂苷(200mg/kg)還能明顯提高大鼠大腦中5-HT(5-羥色胺)含量和5-HIAA(5-羥吲哚乙酸)含量，但對(duì)DA、NE的含量無影響，其作用結(jié)果與第三類抗抑郁藥舍曲林相類似。進(jìn)一步通過對(duì)刺蒺藜中黃酮成分和多糖成分的抗抑郁的活性研究，結(jié)果表明兩者都不具有抗抑郁作用。
權(quán)利要求
1.刺蒺藜提取物在制備治療或預(yù)防抑郁癥的藥品、保健食品或食品中的用途。
2.如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于該刺蒺藜提取物為刺蒺藜總皂苷。
全文摘要
本發(fā)明公開了刺蒺藜提取物在制備治療或預(yù)防抑郁癥的藥品、保健品或食品中的用途。本發(fā)明通過大鼠抑郁模型對(duì)刺蒺藜提取物，特別是其總皂苷的抗抑郁活性進(jìn)行了研究，結(jié)果表明刺蒺藜提取物能明顯改善大鼠的抑郁狀態(tài)，其有效活性成分為總皂苷；其中高劑量組刺蒺藜總皂苷200mg/kg還能明顯提高大鼠大腦中5－HT含量和5－HIAA含量，而刺蒺藜中黃酮成分和多糖成分則沒有抗抑郁的活性。
文檔編號(hào)A61P25/24GK1830458SQ20051002433
公開日2006年9月13日 申請(qǐng)日期2005年3月11日 優(yōu)先權(quán)日2005年3月11日
發(fā)明者李明, 奉建芳 申請(qǐng)人:上海醫(yī)藥工業(yè)研究院