專利名稱：一種使大鼠具有急性高脂血癥病理特征的方法
技術領域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥模型技術領域，具體涉及一種使大鼠具有急性高脂血癥病理特征的方法，以便將具有急性高脂血癥病理特征的大鼠用于篩選調血脂藥物。
背景技術：
心腦血管疾病是一類嚴重威脅人類健康的常見病和多發(fā)病，具有發(fā)病率、致殘率和死亡率高的特點。高脂血癥是指血漿(或血清)中一種或多種脂質的含量超過正常高限時的病癥。該病一般以總膽固醇、總甘油三酯、低密度脂蛋白增高，高密度脂蛋白降低為主要特征，它作為心腦血管疾病的獨立危險因素，一直是人們研究心腦血管疾病發(fā)病機制和尋找有效防治措施的突破口；動物模型在疾病的機制研究、藥物的藥效評價中占有重要地位，目前常采用膽固醇等高脂食物為誘發(fā)劑制作高脂血癥動物模型，通過喂飼該類食物可引起大鼠高脂血癥，但由于大鼠無膽囊，對膽固醇等脂質吸收少，因此飼料中還需添加膽酸鈉以增加大鼠小腸對膽固醇的吸收量；同時添加甲巰嘧啶以抑制甲狀腺功能、減少對膽固醇的代謝，該類模型制作方法雖可用于制備更接近于人類發(fā)病狀態(tài)的全身性高脂血癥，但所需周期長，影響因素較多，模型制備復雜，且成模率不高，動物易死亡，嚴重制約了研究人員大規(guī)模篩選治療調血脂藥物。

發(fā)明內容
誘發(fā)性疾病動物模型具有能在短時間內復制出大量疾病模型，并能嚴格控制各種條件使復制出的疾病模型適合研究目的需要等特點，因而為近代醫(yī)學研究所常用，特別是藥物篩選研究工作所首選。
本發(fā)明的目的在于提供一種制作周期短、成本低、病理狀態(tài)與人體相似的誘發(fā)大鼠全身高脂血癥病理特征的方法。
Triton WR-1339(tyloxapol，對甲辛基聚氧乙烯醇)是一種表面活化劑。50年代初就發(fā)現(xiàn)它可抑制脂蛋白脂酶、與血漿脂蛋白結合形成triton復合物從而阻塞膽總管，誘發(fā)兔、小鼠的血脂升高，以后在其他動物中發(fā)現(xiàn)它亦有該作用，可應用于降脂藥物的篩選。
本發(fā)明人所構建的靜脈注射Triton WR-1339誘導的模型是一種使大鼠具有高脂血癥病理特征的方法，它所建立的動物模型可以快速、簡便的評價藥物的降血脂作用，可用于降脂藥物的初篩；食餌性高脂血癥大鼠模型是一種經典的藥篩模型，因為它所形成的模型與人體病理變化相似，評價結果更為完整、可靠。這兩種模型相互補充，可以豐富降血脂藥物的藥效平臺研究。
本發(fā)明使大鼠具有急性高脂血癥病理特征的方法如下一種使大鼠具有急性高脂血癥病理特征的方法，包括所用實驗用動物、誘發(fā)藥物、操作方法，其特征在于所用動物為實驗用雄性大鼠；誘發(fā)藥物為TritonWR-1339；操作方法為將Triton WR-1339配置濃度為10-40％，靜脈注射于大鼠，劑量為0.5-1ml/100g(BW)(100-400mg·Kg-1)。
按中華醫(yī)學會檢驗學會血脂測定推薦方法測定各項血脂水平。
本發(fā)明方法，采用生化檢查結果表明該法可誘發(fā)高血脂病理改變，其病變與人類發(fā)病狀態(tài)相似，因此可用于調血脂藥物的篩選。
本發(fā)明與傳統(tǒng)的高脂血癥模型相比，可較好地模擬其生化過程，且克服了傳統(tǒng)造模方法需要預先制備高脂飼料、造模周期長、成模率不高等缺點，具有方法簡單、周期短、重現(xiàn)性好等優(yōu)點。


圖1為大鼠造模誘發(fā)后各項血脂水平的時效曲線圖。
圖2為血脂康對造模誘發(fā)24h后大鼠高脂血癥的治療作用具體實施方式
現(xiàn)結合實施例，對本發(fā)明動物模型構建方法及調血脂藥物對模型動物的治療效果作詳細描述。
實施例11.實驗動物與材料SD(Sprague-Dawley)大鼠(雄性，體重180±20g，SPF級)，購自第二軍醫(yī)大學實驗動物中心，動物合格證號SCXK(滬)2002-0026。
誘發(fā)藥物triton--WR 1339(Sigma公司)，使用時以生理鹽水稀釋成20％。血脂各項分析測定試劑盒血清總甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)分析測定盒。
藥物血脂康膠囊(北京北大維信生物科技有限公司)，藥物濃度為1mg/ml。
2.實驗方法SD大鼠按血脂水平隨機分為3組，分別為正常對照組6只，模型組、血脂康組(100mg·kg-1)各12只。按常規(guī)飼養(yǎng)，7天后禁食18h，期間自由飲水，眼眶靜脈叢取血，按中華醫(yī)學會檢驗學會血脂測定推薦方法及試劑盒說明書測定各項血脂水平，包括TG、TC、HDL和LDL作為基礎值。除正常組(尾靜脈注射等體積生理鹽水)外，各組大鼠尾靜脈注射20％triton WR 1339生理鹽水溶液(200mg·Kg-1)，血脂康組按100mg·kg-1灌胃給藥1ml，正常對照組、模型組則給予等體積的生理鹽水。分別在給藥后6h、24h、48h、72h眼眶靜脈從取血。
3.實驗結果大鼠各項血脂水平測定結果如圖1所示給藥6h時大鼠血清TC、TG、LDL已開始升高，而HDL也表現(xiàn)為一定程度的下降；給藥24h時大鼠血清TC、TG、LDL升高至所觀測時段的最高值，而HDL下降到最低值；給藥48h時TG接近正常，而TC、LDL仍升高，而HDL下降值也逐漸減少；至72h，各項指標均趨于正常。結果表明在給藥24h，血脂各項指標變化穩(wěn)定，為血脂變化的峰值，差異與基礎值相比均有顯著性差異，說明triton誘導大鼠高脂血癥的最佳時間是24h左右。
大鼠給予血脂康測定各項血脂水平。與模型組相比，由圖2可見尾靜脈注射Triton WR-1339 24h時，模型組大鼠血清TC、TG、LDL分別升高約2.8倍、6.15倍和2.6倍，而HDL下降了51.7％，表明模型成功建立；而藥物組大鼠血清TC、TG、LDL分別較模型組有不同程度的下降，而HDL較之相比有一定的升高。上述指標與模型組相比均呈顯著性差異(p＜0.05)。
本發(fā)明使大鼠具有急性高脂血癥病理特征的方法所復制的模型近似于人類疾病的情況，具有相似性；所復制的動物模型是可重復的，甚至是可以標準化的，具有重復性好的優(yōu)點；復制的動物模型能可靠地反映人類該種疾病的主要癥狀和體征，具有可靠性；所復制的模型動物模型，考慮到了今后臨床應用和便于控制其疾病的發(fā)展，以利于研究的開展，具有適用性和可控性；在復制動物模型時，造模周期短、重現(xiàn)性好，所采用的方法做到了容易執(zhí)行和合乎經濟原則，具有易行性和經濟性，符合動物模型的設計原則，本發(fā)明構建方法所建立的大鼠高血脂癥動物模型能較好的模擬高血脂癥生化過程，故可用于調血脂藥物的篩選。
權利要求
1.一種使大鼠具有急性高脂血癥病理特征的方法，包括所用實驗用動物、誘發(fā)藥物、操作方法，其特征在于所用動物為實驗用雄性大鼠；誘發(fā)藥物為TritonWR-1339，操作方法為將Triton WR-1339配置濃度為10-40％，靜脈注射于大鼠，劑量為0.5-1ml/100g(BW)(100-400mg·Kg-1)。
全文摘要
本發(fā)明屬于醫(yī)藥模型技術領域，具體涉及一種使大鼠具有急性高脂血癥病理特征的方法，包括所用實驗用動物、誘發(fā)藥物、操作方法，其特征在于所用動物為實驗用雄性大鼠；誘發(fā)藥物為Triton WR－1339；操作方法為將TritonWR－1339配置濃度為10－40％，靜脈注射于大鼠，劑量為0.5－1ml/100g
文檔編號A61K49/00GK1695741SQ20051002540
公開日2005年11月16日 申請日期2005年4月26日 優(yōu)先權日2005年4月26日
發(fā)明者胡晉紅, 王晶 申請人:中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學