專利名稱：一種中藥制劑顆粒及其鑒別、含量測(cè)定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種維血寧顆粒制劑，同時(shí)還涉及維血寧顆粒制劑的鑒別、含量測(cè)定方法，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
維血寧顆粒是一種具有滋補(bǔ)肝腎、涼血清熱功效的經(jīng)典中藥制劑，主治血小板減少癥及血熱所致的出血。其主要成分在中國(guó)藥典以及申請(qǐng)?zhí)枮?1100251.4、名稱為《納米維血寧制劑藥物》的中國(guó)專利申請(qǐng)中均有記載，包括仙鶴草、虎杖、熟地黃、太子參、雞血藤、地黃、白芍、墨蓮旱。在將其制成顆粒劑時(shí)，長(zhǎng)期以來一直采用加入蔗糖的方法，制成的維血寧顆粒檢測(cè)項(xiàng)目只有粒度、水分、裝量差異、微生物限度等常規(guī)項(xiàng)目，無法切實(shí)控制其質(zhì)量。并且由于加入蔗糖，因此糖尿病或高脂血癥患者始終是禁忌對(duì)象，此外還加大了包裝量(每袋20克)。鑒于存在以上問題，因此原劑型存在質(zhì)量難以控制、適用范圍受限、服用劑量大等問題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的要解決的技術(shù)問題是針對(duì)以上現(xiàn)有技術(shù)存在的缺點(diǎn)，研制出一種便于采取科學(xué)鑒別測(cè)定手段控制其質(zhì)量的維血寧顆粒，并且該維血寧顆粒應(yīng)當(dāng)適用范圍較廣，同時(shí)本發(fā)明還給出具有專屬性、可以切實(shí)控制維血寧顆粒制備質(zhì)量的鑒別、含量測(cè)定方法。
為了解決以上技術(shù)問題，本發(fā)明的維血寧顆粒包括如下中藥成分混合、煎煮、濃縮、醇沉濃縮后所得到的中藥浸膏仙鶴草、虎杖、熟地黃、太子參、雞血藤、地黃、白芍、墨旱蓮，還包括加入所述中藥浸膏的輔料，所述輔料為至少乳糖、甘露醇、可溶性淀粉中的一種，所述中藥浸膏與輔料的重量比例為1∶1～10。
經(jīng)驗(yàn)表明，乳糖、甘露醇或可溶性淀粉作為輔料不影響某些特定鑒別測(cè)定方法的準(zhǔn)確性。經(jīng)反復(fù)實(shí)驗(yàn)摸索，申請(qǐng)人找到本發(fā)明維血寧顆粒的下述三種可行鑒別方法。
鑒別方法之一的步驟為A、制備供試品溶液1)、取維血寧顆粒3～10g，最好為5g，分別加水及1～5mol/L硫酸溶液3～10ml，最好為5ml；2)、置水浴上加熱，回流提取，放冷、濾過；3)、濾液用氯仿提取，分取氯仿液，蒸干；4)、殘?jiān)勇确?～3ml，最好為1ml溶解，作為供試品；B、制備對(duì)照品溶液5)、取大黃素1～10mg，最好為5mg，加甲醇制成溶液1～10ml，最好為5ml，作為對(duì)照品溶液；C、照薄層色譜法試驗(yàn)鑒別6)、吸取上述兩種溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上；7)、以苯—甲酸乙酯—甲酸為展開劑，展開、取出晾干；8)、通過照薄層色譜法對(duì)照試驗(yàn)鑒別；步驟8)的具體作法為以下步驟之一a、直接比對(duì)供試品色譜，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的黃色斑點(diǎn)，判定為合格；b、置于紫外燈光下檢視，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，判定為合格。
鑒別方法之二的步驟為A、制備供試品溶液
1)、取維血寧顆粒5～15g，最好為10g，研細(xì)，加乙醇20～40ml，最好為30ml，超聲處理10～30分鐘后，最好為20分鐘，濾出；2)、濾液蒸干，殘?jiān)右掖?～5ml，最好為2ml使溶解，作為供試品；B、制備對(duì)照溶液3)、取芍藥甙1～10mg，最好為5mg，加乙醇1～10ml，最好為5ml，制成溶液，作為對(duì)照溶液；C、照薄層色譜法試驗(yàn)鑒別4)、吸取上述兩種溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上；5)、以氯仿—醋酸乙酯—甲醇—甲酸為展開劑，展開、取出晾干；6)、噴以香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰；7)、直接比對(duì)供試品色譜，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，判定為合格。
鑒別方法之三的步驟為A、制備供試品溶液1)、取維血寧顆粒5～15 g，最好為10g，研細(xì)，用石油醚(60℃～90℃)20～40ml，最好為30ml，超聲提取二次(30ml/20分鐘、30ml/15分鐘)、合并石油醚提取液、過濾；2)、濾液蒸干，殘?jiān)勇确?～5ml，最好為1ml，使溶解，作為供試品溶液；B、制備對(duì)照溶液3)另取仙鶴草對(duì)照藥材2～10g，最好為4.5g，加水，煎煮，放冷、濾過，濾液用石油醚(60℃～90℃)超聲提取二次(30ml/20分鐘、30ml/15分鐘)，合并石油醚提取液、過濾，蒸干，殘?jiān)勇确?～5ml，最好為1ml，制成對(duì)照藥材溶液。
4)、照薄層色譜法(參見中國(guó)藥典2000年版一部附錄)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上；5)、以正己烷—醋酸乙酯—冰醋酸為展開劑，展開、涼干；6)、噴以20％硫酸乙醇溶液，置加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色得斑點(diǎn)，判定為合格。
此外，申請(qǐng)人還研究出維血寧顆粒中白藜蘆醇含量的測(cè)定方法，其步驟如下A、供試品溶液的制備1)、精密稱取本品8g，研細(xì)；2)、加醋酸乙酯，超聲提取5次(25ml/20分鐘、25ml/10分鐘、25ml/10分鐘、20ml/10分鐘、20ml/10分鐘)，合并醋酸乙酯提取液；3)、將醋酸乙酯提取液置水浴上蒸干；4)、殘?jiān)蛹状际谷芙?，并轉(zhuǎn)移至5ml容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻；5)、用0.45um的濾膜濾過，棄去初濾液，收集續(xù)濾液，即得；B、對(duì)照品溶液的制備6)、精密稱取白藜蘆醇對(duì)照品適量，通常為10～25mg，加甲醇制成每1ml含0.24mg的溶液，即得。
C、測(cè)定7)、分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀中測(cè)定峰面積，檢測(cè)波長(zhǎng)為303nm；8)、本品每1ml含虎杖以白藜蘆醇(C20H22O8)計(jì)，不得少于15ug，理論板數(shù)按白藜蘆醇峰計(jì)算應(yīng)不低于5000。
以上過程中，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈—水—冰醋酸(22∶85∶1)為流動(dòng)相。
本發(fā)明通過對(duì)維血寧顆粒劑型的改進(jìn)，尋找到可以切實(shí)控制其制備質(zhì)量、具有專屬性的鑒別及含量測(cè)定方法，從而實(shí)現(xiàn)了以科學(xué)手段控制其質(zhì)量的目的，并且由于以乳糖、甘露醇或可溶性淀粉取代蔗糖，因此本發(fā)明的維血寧顆粒打破了對(duì)糖尿病或高血脂患者的禁忌，解決了長(zhǎng)期以來適用范圍受限的問題。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明。
實(shí)施例一本實(shí)施例的維血寧顆粒稱取仙鶴草625克、虎杖500克、熟地黃500克、太子參250克、雞血藤625克、地黃500克、白芍312克、墨旱蓮187克，加水煎煮二次，每次2小時(shí)，合并煎煮液，濾過，濾液濃縮成相對(duì)密度1.10(80℃)，放冷，加乙醇使含醇量至70％，攪勻，靜置，濾取上清液，回收乙醇并濃縮至相對(duì)密度1.20(80℃)，加入1～10倍清膏重量的乳糖，制粒，干燥，得黃棕色、味微苦的維血寧顆粒1000克。
之后按照以下步驟進(jìn)行檢測(cè)鑒別制備供試品溶液1)、取維血寧顆粒5g，分別加水及1～5mol/L硫酸溶液5ml；2)、置水浴上加熱，回流提取，放冷、濾過；3)、濾液用氯仿提取，分取氯仿液，蒸干；4)、殘?jiān)勇确?ml；溶解，作為供試品；制備對(duì)照品溶液
5)、取大黃素為5mg，加甲醇5ml；制成溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)鑒別6)、吸取上述兩種溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上；7)、以苯—甲酸乙酯—甲酸為展開劑，展開、取出晾干；8)、通過照薄層色譜法對(duì)照試驗(yàn)鑒別，可以選擇如下步驟之一A、直接比對(duì)供試品色譜，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的黃色斑點(diǎn)，判定為合格；B、置于紫外燈光下檢視，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，判定為合格。
實(shí)施例二本實(shí)施例的維血寧顆粒與實(shí)施例一的不同之處在于用甘露醇取代乳糖或用乳糖和甘露醇按一定比例作為輔料來制劑，以改善口味。之后按以下步驟鑒別制備供試品溶液1)、取維血寧顆粒10g，研細(xì)，加乙醇30ml，超聲處理20分鐘后濾過；2)、濾液蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品；制備對(duì)照溶液3)取芍藥甙5mg，加乙醇5 ml制成溶液，作為對(duì)照溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)鑒別4)、吸取上述兩種溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上；5)、以氯仿—醋酸乙酯—甲醇—甲酸為展開劑，展開、取出晾干；6)、噴以香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰；7)、直接比對(duì)供試品色譜，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，判定為合格。
實(shí)施例三本實(shí)施例的維血寧顆粒與實(shí)施例一、例二的不同之處在于用可溶性淀粉取代乳糖、甘露醇或乳糖和甘露醇按一定比例的混合物為輔料來制劑，以改善口味。之后按以下步驟進(jìn)行鑒別和含量測(cè)定制備供試品溶液1)、取維血寧顆粒10g，研細(xì)，用石油醚(60℃-90℃)30ml，超聲提取二次(30ml/20分鐘、30ml/15分鐘)、合并石油醚提取液、過濾；2)、濾液蒸干，殘?jiān)勇确?ml使溶解，作為供試品溶液；制備對(duì)照溶液3)另取仙鶴草對(duì)照藥材4.5g，加水50ml煎煮30分鐘，放冷，濾過，濾液用石油醚(60℃-90℃)30ml，超聲提取二次(30ml/20分鐘、30ml/15分鐘)，合并石油醚提取液、過濾，蒸干，殘?jiān)勇确?ml，制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄)試驗(yàn)4)吸取上述兩種溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上；5)、以正己烷—醋酸乙酯—冰醋酸為展開劑，展開；6)、取出，晾干，噴以20％硫酸乙醇溶液，置加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)得位置上，顯相同顏色得斑點(diǎn)，判定為合格。
此外，當(dāng)需要對(duì)維血寧顆粒中白藜蘆醇含量進(jìn)行測(cè)定時(shí)，步驟如下1.色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈—水—冰醋酸(22∶85∶1)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為303nm。理論板數(shù)按白藜蘆醇峰計(jì)算應(yīng)不低于5000。
2.對(duì)照品溶液的制備精密稱取白藜蘆醇對(duì)照品適量，通常為10～25mg，加甲醇制成每1ml含0.24mg的溶液，即得。
3.供試品溶液的制備3.1精密稱取本品8g，研細(xì)；3.2加醋酸乙酯，超聲提取5次(25ml/20分鐘、25ml/10分鐘、25ml/10分鐘、20ml/10分鐘、20ml/10分鐘)，合并醋酸乙酯提取液。
3.3醋酸乙酯提取液，置水浴上蒸干；3.4殘?jiān)蛹状际谷芙?，并轉(zhuǎn)移至5ml容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻；3.5.用0.45um的濾膜濾過，棄去初濾液，收集續(xù)濾液，即得；4.測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
5.本品每1ml含虎杖以白藜蘆醇(C20H22O8)計(jì)，不得少于15ug。
除上述實(shí)施例外，本發(fā)明還可以有其他實(shí)施方式。凡采用等同替換或等效變換形成的技術(shù)方案，均落在本發(fā)明要求的保護(hù)范圍。
權(quán)利要求
1.一種維血寧顆粒，包括仙鶴草、虎杖、熟地黃、太子參、雞血藤、地黃、白芍、墨旱蓮8味中藥經(jīng)過煎煮、濃縮、醇沉濃縮后所得到的中藥浸膏，以及輔料，其特征在于所述輔料為至少乳糖、甘露醇、可溶性淀粉中的一種，所述中藥浸膏與輔料的重量比例為1∶1～10。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述維血寧顆粒的鑒別方法，其特征在于包括以下步驟A、制備供試品溶液1)、取維血寧顆粒3～10g，分別加水及1～5mol/L硫酸溶液3～10ml；2)、置水浴上加熱，回流提取，放冷、濾過；3)、濾液用氯仿提取，分取氯仿液，蒸干；4)、殘?jiān)勇确?～3ml溶解，作為供試品；B、制備對(duì)照品溶液5)、取大黃素1～10mg，加甲醇制成溶液1～10ml，作為對(duì)照品溶液；C、照薄層色譜法試驗(yàn)鑒別6)、吸取上述兩種溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上；7)、以苯-甲酸乙酯-甲酸為展開劑，展開、取出晾干；8)、通過照薄層色譜法對(duì)照試驗(yàn)鑒別。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述維血寧顆粒的鑒別方法，其特征在于所述步驟8)的具體作法為直接比對(duì)供試品色譜，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的黃色斑點(diǎn)，判定為合格。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述維血寧顆粒的鑒別方法，其特征在于所述步驟8)的具體作法為置于紫外燈光下檢視，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，判定為合格。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述維血寧顆粒的鑒別方法，其特征在于包括以下步驟A、制備供試品溶液1)、取維血寧顆粒5～15g，研細(xì)，加乙醇20～40ml，超聲處理10～30分鐘后，濾出；2)、濾液蒸干，殘?jiān)右掖?～5ml，作為供試品；B、制備對(duì)照溶液3)、取芍藥甙1～10mg，加乙醇1～10ml，制成溶液，作為對(duì)照溶液；C、照薄層色譜法試驗(yàn)鑒別4)、吸取上述兩種溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上；5)、以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸為展開劑，展開、取出晾干；6)、噴以香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰；7)、直接比對(duì)供試品色譜，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，判定為合格。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述維血寧顆粒的鑒別方法，其特征在于包括以下步驟A、制備供試品溶液1)、取維血寧顆粒5～15g，研細(xì)，用石油醚20～40ml，超聲提取二次、合并石油醚提取液、過濾；2)、濾液蒸干，殘?jiān)勇确?～5ml使溶解，作為供試品溶液；B、制備對(duì)照溶液3)另取仙鶴草對(duì)照藥材2～10g，加水，煎煮，放冷、濾過，濾液用石油醚超聲提取二次，合并石油醚提取液、過濾，蒸干，殘?jiān)勇确?～5ml，制成對(duì)照藥材溶液。C、照薄層色譜法試驗(yàn)鑒別4)、照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上；5)、以正己烷-醋酸乙酯-冰醋酸為展開劑，展開、涼干；6)、噴以20％硫酸乙醇溶液，置加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色得斑點(diǎn)，判定為合格。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述維血寧顆粒中白藜蘆醇含量的測(cè)定方法，其特征在于包括以下步驟A、供試品溶液的制備1)、精密稱取本品8g，研細(xì)；2)、加醋酸乙酯，超聲提取5次，合并醋酸乙酯提取液；3)、將醋酸乙酯提取液置水浴上蒸干；4)、殘?jiān)蛹状际谷芙猓⑥D(zhuǎn)移至5ml容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻；5)、用0.45um的濾膜濾過，棄去初濾液，收集續(xù)濾液，即得；B、對(duì)照品溶液的制備6)、精密稱取白藜蘆醇對(duì)照品10～25mg，加甲醇制成每1ml含0.24mg的溶液，即得；C、測(cè)定7)、分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀中測(cè)定峰面積，檢測(cè)波長(zhǎng)為303nm；8)、本品每1ml含虎杖以白藜蘆醇(C20H22O8)計(jì)，不少于15ug，理論板數(shù)按白藜蘆醇峰計(jì)算不低于5000為合格。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述維血寧顆粒中白藜蘆醇含量的測(cè)定方法，其特征在于以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水-冰醋酸22∶85∶1為流動(dòng)相。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種維血寧顆粒制劑，同時(shí)還涉及維血寧顆粒制劑的鑒別、含量測(cè)定方法，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。該顆粒制劑包括如下中藥成分混合、煎煮、濃縮、醇沉濃縮后所得到的中藥浸膏仙鶴草、虎杖、熟地黃、太子參、雞血藤、地黃、白芍、墨旱蓮，還包括加入所述中藥浸膏的輔料，所述輔料為至少乳糖、甘露醇、可溶性淀粉中的一種，中藥浸膏與輔料的重量比例為1∶1－10。通過制備供試品溶液、制備對(duì)照溶液、照薄層色譜法試驗(yàn)鑒別等步驟即可鑒別測(cè)定。本發(fā)明實(shí)現(xiàn)了以科學(xué)手段控制其質(zhì)量的目的，并且由于以乳糖、甘露醇或可溶性淀粉取代蔗糖，因此本發(fā)明的維血寧顆粒打破了對(duì)糖尿病或高血脂患者的禁忌，解決了長(zhǎng)期以來適用范圍受限的問題。
文檔編號(hào)A61P7/04GK1759869SQ20051003789
公開日2006年4月19日 申請(qǐng)日期2005年2月28日 優(yōu)先權(quán)日2005年2月28日
發(fā)明者朱正順, 華新農(nóng), 吳文英 申請(qǐng)人:江蘇天士力制藥有限公司