專利名稱：抗癌活性成分丹皮酚衍生物的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種抗癌藥物，尤其是涉及一種抗癌活性成分丹皮酚衍生物的制備方法。
背景技術(shù)：
癌癥，已成為現(xiàn)代社會人類面臨的主要殺手之一，由于環(huán)境污染、不良生活習(xí)慣以及各種壓力導(dǎo)致了人類不得不與各種癌癥作不懈的斗爭。但迄今為止，人類使用的抗癌藥物還不盡如人意，其治療效果仍達不到人們的滿意。據(jù)文獻報道，目前公認(rèn)的抗癌活性較強的藥物紫杉醇對胃癌細(xì)胞株SGC-7901細(xì)胞有明顯的抑制作用，且隨培養(yǎng)基中紫杉醇濃度增加和培養(yǎng)時間的延長，抑制作用逐漸增強，紫杉醇對SCG-7901細(xì)胞的生長抑制率目前在34.7％--63.0％。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種能更有效的抑制癌細(xì)胞的抗癌活性成分丹皮酚衍生物的制備方法。
為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明可采取下述技術(shù)方案本發(fā)明所述的抗癌活性成分丹皮酚衍生物的制備方法，是由原料丹皮酚200-400g，分子式為C9H10O3；對氨基苯胂酸500g，分子式為C6H8O3NAS；按照下述步驟制備而成第一步、稱取對氨基苯胂酸500g，溶于5-50L濃度為0.5-2Mol/L的鹽酸溶液中，在0-5℃緩緩加入20-1000ml濃度為10-45％，W/V的亞硝酸鈉溶液，在0-5℃時攪拌10分鐘-3小時，濾過，沉淀物依次用稀鹽酸和水洗滌，備用；第二步、稱取丹皮酚200-400g和第一步制得的沉淀物溶于4-20L濃度為2-10％，W/V的氫氧化鈉溶液中，于0-5℃攪拌；調(diào)節(jié)pH值至8-14，在0-5℃攪拌0.5-6小時，加稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1-3，0-5℃放置0.5-6小時；第三步、將第二步所得物濾過，用稀鹽酸、水依次洗滌沉淀物后，分取沉淀物，加濃度為2-10％的氫氧化鈉溶液溶解，濾過，在濾液中滴加稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1-3，于0-5℃放置0.5-6小時，濾過，所得沉淀物在50-100℃條件下干燥，重結(jié)晶，得合成物丹皮酚重氮胂酸鹽，即2-甲氧基-4-羥基-5-乙酰基偶氮苯’-胂酸，分子式為C15H15O6N2As。
本發(fā)明所述的制備方法，可按照下述步驟制備而成
第一步、稱取對氨基苯胂酸500g，溶于5L濃度為0.5Mol/L的鹽酸溶液中，在0℃緩緩加入20ml濃度為10％，W/V的亞硝酸鈉溶液，在0℃時攪拌3小時，濾過，沉淀物依次用稀鹽酸和水洗滌，備用；第二步、稱取丹皮酚200g和第一步制得的沉淀物溶于4L濃度為2％，W/V的氫氧化鈉溶液中，于0℃攪拌；調(diào)節(jié)pH值至8，在0℃攪拌6小時，加稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1，0℃放置6小時；第三步、將第二步所得物濾過，用稀鹽酸、水依次洗滌沉淀物后，分取沉淀物，加濃度為2％的氫氧化鈉溶液溶解，濾過，在濾液中滴加稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1，于0℃放置6小時，濾過，所得沉淀物在50℃條件下干燥，重結(jié)晶，得合成物丹皮酚重氮胂酸鹽，即2-甲氧基-4-羥基-5-乙?；嫉健?胂酸，分子式為C15H15O6N2As。
本發(fā)明所述的制備方法，也可按照下述步驟制備而成第一步、稱取對氨基苯胂酸500g，溶于30L濃度為1.2Mol/L的鹽酸溶液中，在3℃緩緩加入500ml濃度為30％，W/V的亞硝酸鈉溶液，在3℃時攪拌1小時，濾過，沉淀物依次用稀鹽酸和水洗滌，備用；第二步、稱取丹皮酚300g和第一步制得的沉淀物溶于12L濃度為6％，W/V的氫氧化鈉溶液中，于3℃攪拌；調(diào)節(jié)pH值至11，在3℃攪拌2小時，加稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至2，3℃放置1小時；第三步、將第二步所得物濾過，用稀鹽酸、水依次洗滌沉淀物后，分取沉淀物，加濃度為6％的氫氧化鈉溶液溶解，濾過，在濾液中滴加稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至2，于3℃放置3小時，濾過，所得沉淀物在70℃條件下干燥，重結(jié)晶，得合成物丹皮酚重氮胂酸鹽，即2-甲氧基-4-羥基-5-乙?；嫉健?胂酸，分子式為C15H15O6N2As。
本發(fā)明所述的制備方法，還可按照下述步驟制備而成第一步、稱取對氨基苯胂酸500g，溶于50L濃度為2Mol/L的鹽酸溶液中，在5℃緩緩加入1000ml濃度為45％，W/V的亞硝酸鈉溶液，在5℃時攪拌10分鐘，濾過，沉淀物依次用稀鹽酸和水洗滌，備用；第二步、稱取丹皮酚400g和第一步制得的沉淀物溶于20L濃度為10％，W/V的氫氧化鈉溶液中，于5℃攪拌；調(diào)節(jié)pH值至14，在5℃攪拌0.5小時，加稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至3，5℃放置0.5小時；第三步、將第二步所得物濾過，用稀鹽酸、水依次洗滌沉淀物后，分取沉淀物，加濃度為10％的氫氧化鈉溶液溶解，濾過，在濾液中滴加稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至3，于5℃放置0.5小時，濾過，所得沉淀物在100℃條件下干燥，重結(jié)晶，得合成物丹皮酚重氮胂酸鹽，即2-甲氧基-4-羥基-5-乙?；嫉健?胂酸，分子式為C15H15O6N2As。
本發(fā)明的優(yōu)點在于按照該方法制備的合成物丹皮酚重氮胂酸鹽，通過藥理實驗結(jié)果表明，合成物丹皮酚重氮胂酸鹽(2-甲癢基-4-羥基-5-乙?；嫉?4’-胂酸C15H15O6N2AS)可抑制人大腸癌細(xì)胞株HT-29、人肝癌細(xì)胞株HepG2和人胃癌細(xì)胞株BGC-823的細(xì)胞生長，且抑制作用與藥物濃度及作用時間呈正相依賴關(guān)系，最高抑制率達92％；而且丹皮酚重氮胂酸鹽的作用明顯強于丹皮酚和對氨基苯胂酸的單獨作用。且其抗癌作用和給藥濃度相關(guān)，大劑量給藥可誘使胃癌細(xì)胞凋亡，其凋亡率最高可達30％；而同時進行實驗的合成原料丹皮酚和對氨基苯胂酸對人胃癌細(xì)胞株的生長抑制率最高分別為65％和78％。使得制備的丹皮酚重氮胂酸鹽衍生物在抗癌活性上有了很大的提高。


圖1為本發(fā)明所述合成物丹皮酚重氮胂酸鹽的分子式結(jié)構(gòu)圖。
具體實施例方式
實施例1本發(fā)明所述的制備方法，是按照下述步驟制備而成第一步、稱取對氨基苯胂酸500g，溶于5L濃度為0.5Mol/L的鹽酸溶液中，在0℃緩緩加入20ml濃度為10％，W/V的亞硝酸鈉溶液，在0℃時攪拌3小時，濾過，沉淀物依次用稀鹽酸和水洗滌，備用；第二步、稱取丹皮酚200g和第一步制得的沉淀物溶于4L濃度為2％，W/V的氫氧化鈉溶液中，于0℃攪拌；調(diào)節(jié)pH值至8，在0℃攪拌6小時，加稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1，0℃放置6小時；第三步、將第二步所得物濾過，用稀鹽酸、水依次洗滌沉淀物后，分取沉淀物，加濃度為2％的氫氧化鈉溶液溶解，濾過，在濾液中滴加稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1，于0℃放置6小時，濾過，所得沉淀物在50℃條件下干燥，重結(jié)晶，得合成物丹皮酚重氮胂酸鹽，即2-甲氧基-4-羥基-5-乙?；嫉健?胂酸，分子式為C15H15O6N2As。
實施例2本發(fā)明所述的制備方法，是按照下述步驟制備而成
第一步、稱取對氨基苯胂酸500g，溶于30L濃度為1.2Mol/L的鹽酸溶液中，在3℃緩緩加入500ml濃度為30％，W/V的亞硝酸鈉溶液，在3℃時攪拌1小時，濾過，沉淀物依次用稀鹽酸和水洗滌，備用；第二步、稱取丹皮酚300g和第一步制得的沉淀物溶于12L濃度為6％，W/V的氫氧化鈉溶液中，于3℃攪拌；調(diào)節(jié)pH值至11，在3℃攪拌2小時，加稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至2，3℃放置1小時；第三步、將第二步所得物濾過，用稀鹽酸、水依次洗滌沉淀物后，分取沉淀物，加濃度為6％的氫氧化鈉溶液溶解，濾過，在濾液中滴加稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至2，于3℃放置3小時，濾過，所得沉淀物在70℃條件下干燥，重結(jié)晶，得合成物丹皮酚重氮胂酸鹽，即2-甲氧基-4-羥基-5-乙酰基偶氮苯’-胂酸，分子式為C15H15O6N2As。
實施例3本發(fā)明所述的制備方法，是按照下述步驟制備而成第一步、稱取對氨基苯胂酸500g，溶于50L濃度為2Mol/L的鹽酸溶液中，在5℃緩緩加入1000ml濃度為45％，W/V的亞硝酸鈉溶液，在5℃時攪拌10分鐘，濾過，沉淀物依次用稀鹽酸和水洗滌，備用；第二步、稱取丹皮酚400g和第一步制得的沉淀物溶于20L濃度為10％，W/V的氫氧化鈉溶液中，于5℃攪拌；調(diào)節(jié)pH值至14，在5℃攪拌0.5小時，加稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至3，5℃放置0.5小時；第三步、將第二步所得物濾過，用稀鹽酸、水依次洗滌沉淀物后，分取沉淀物，加濃度為10％的氫氧化鈉溶液溶解，濾過，在濾液中滴加稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至3，于5℃放置0.5小時，濾過，所得沉淀物在100℃條件下干燥，重結(jié)晶，得合成物丹皮酚重氮胂酸鹽，即2-甲氧基-4-羥基-5-乙?；嫉健?胂酸，分子式為C15H15O6N2As。
權(quán)利要求
1.一種抗癌活性成分丹皮酚衍生物的制備方法，其特征在于它是由原料丹皮酚200-400g，分子式為C9H10O3；對氨基苯胂酸500g，分子式為C6H8O3NAs；按照下述步驟制備而成第一步、稱取對氨基苯胂酸500g，溶于5-50L濃度為0.5-2Mol/L的鹽酸溶液中，在0-5℃緩緩加入20-1000ml濃度為10-45％，W/V的亞硝酸鈉溶液，在0-5℃時攪拌10分鐘-3小時，濾過，沉淀物依次用稀鹽酸和水洗滌，備用；第二步、稱取丹皮酚200-400g和第一步制得的沉淀物溶于4-20L濃度為2-10％，W/V的氫氧化鈉溶液中，于0-5℃攪拌；調(diào)節(jié)pH值至8-14，在0-5℃攪拌0.5-6小時，加稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1-3，0-5℃放置0.5-6小時；第三步、將第二步所得物濾過，用稀鹽酸、水依次洗滌沉淀物后，分取沉淀物，加濃度為2-10％的氫氧化鈉溶液溶解，濾過，在濾液中滴加稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1-3，于0-5℃放置0.5-6小時，濾過，所得沉淀物在50-100℃條件下干燥，重結(jié)晶，得合成物丹皮酚重氮胂酸鹽，即2-甲氧基-4-羥基-5-乙?；嫉健?胂酸，分子式為C15H15O6N2As。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是按照下述步驟制備而成第一步、稱取對氨基苯胂酸500g，溶于5L濃度為0.5Mol/L的鹽酸溶液中，在0℃緩緩加入20ml濃度為10％，W/V的亞硝酸鈉溶液，在0℃時攪拌3小時，濾過，沉淀物依次用稀鹽酸和水洗滌，備用；第二步、稱取丹皮酚200g和第一步制得的沉淀物溶于4L濃度為2％，W/V的氫氧化鈉溶液中，于0℃攪拌；調(diào)節(jié)pH值至8，在0℃攪拌6小時，加稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1，0℃放置6小時；第三步、將第二步所得物濾過，用稀鹽酸、水依次洗滌沉淀物后，分取沉淀物，加濃度為2％的氫氧化鈉溶液溶解，濾過，在濾液中滴加稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1，于0℃放置6小時，濾過，所得沉淀物在50℃條件下干燥，重結(jié)晶，得合成物丹皮酚重氮胂酸鹽，即2-甲氧基-4-羥基-5-乙?；嫉健?胂酸，分子式為C15H15O6N2As。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是按照下述步驟制備而成第一步、稱取對氨基苯胂酸500g，溶于30L濃度為1.2Mol/L的鹽酸溶液中，在3℃緩緩加入500ml濃度為30％，W/V的亞硝酸鈉溶液，在3℃時攪拌1小時，濾過，沉淀物依次用稀鹽酸和水洗滌，備用；第二步、稱取丹皮酚300g和第一步制得的沉淀物溶于12L濃度為6％，W/V的氫氧化鈉溶液中，于3℃攪拌；調(diào)節(jié)pH值至11，在3℃攪拌2小時，加稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至2，3℃放置1小時；第三步、將第二步所得物濾過，用稀鹽酸、水依次洗滌沉淀物后，分取沉淀物，加濃度為6％的氫氧化鈉溶液溶解，濾過，在濾液中滴加稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至2，于3℃放置3小時，濾過，所得沉淀物在70℃條件下干燥，重結(jié)晶，得合成物丹皮酚重氮胂酸鹽，即2-甲氧基-4-羥基-5-乙酰基偶氮苯’-胂酸，分子式為C15H15O6N2As。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是按照下述步驟制備而成第一步、稱取對氨基苯胂酸500g，溶于50L濃度為2Mol/L的鹽酸溶液中，在5℃緩緩加入1000ml濃度為45％，W/V的亞硝酸鈉溶液，在5℃時攪拌10分鐘，濾過，沉淀物依次用稀鹽酸和水洗滌，備用；第二步、稱取丹皮酚400g和第一步制得的沉淀物溶于20L濃度為10％，W/V的氫氧化鈉溶液中，于5℃攪拌；調(diào)節(jié)pH值至14，在5℃攪拌0.5小時，加稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至3，5℃放置0.5小時；第三步、將第二步所得物濾過，用稀鹽酸、水依次洗滌沉淀物后，分取沉淀物，加濃度為10％的氫氧化鈉溶液溶解，濾過，在濾液中滴加稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至3，于5℃放置0.5小時，濾過，所得沉淀物在100℃條件下干燥，重結(jié)晶，得合成物丹皮酚重氮胂酸鹽，即2-甲氧基-4-羥基-5-乙?；嫉健?胂酸，分子式為C15H15O6N2As。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種抗癌活性成分丹皮酚衍生物的制備方法是按照下述步驟制備而成1.取對氨基苯胂酸500g溶于鹽酸溶液中，在0－5℃緩緩加入亞硝酸鈉溶液，在0－5℃時攪拌，濾過，所得沉淀物用稀鹽酸、水依次洗滌，備用；2.取丹皮酚和第一步制得的沉淀物溶于氫氧化鈉溶液中，于0－5℃攪拌；調(diào)節(jié)pH值至8－14，在0－5℃攪拌后，加稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1－3，0－5℃放置；3.將第二步所得物濾過，用稀鹽酸、水依次洗滌沉淀物后，分取沉淀物，加氫氧化鈉溶液溶解，濾過，在濾液中滴加稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1－3，于0－5℃放置，濾過，所得沉淀物干燥、重結(jié)晶得合成物丹皮酚重氮胂酸鹽。本發(fā)明優(yōu)點在于可抑制人大腸癌細(xì)胞株、人肝癌細(xì)胞株和人胃癌細(xì)胞株的細(xì)胞生長，最高抑制率達92％。
文檔編號A61P35/00GK1772756SQ200510048489
公開日2006年5月17日 申請日期2005年11月3日 優(yōu)先權(quán)日2005年11月3日
發(fā)明者張留記, 屠萬倩, 侯惠鳴, 李向陽 申請人:河南省中醫(yī)藥研究院