專利名稱：速釋玉泉微丸的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療糖尿病的中藥制劑，即中藥微丸制劑，具體而言，本發(fā)明涉及一種治療糖尿病的速釋玉泉微丸及其制備方法。
背景技術(shù)：
糖尿病為內(nèi)分泌科常見病、多發(fā)病，亦稱成人發(fā)病型糖尿病，多在35～40歲之后發(fā)病，占糖尿病患者90％以上，近年來有逐漸上升趨勢。臨床以高血糖為主要標(biāo)志，久病可引起全身多個(gè)系統(tǒng)的損害。具有難治愈、復(fù)發(fā)率高、終身服藥、并發(fā)癥多、病死率高等特點(diǎn)。
常用降糖西藥因其作用局限而起不到綜合性治療作用，同時(shí)亦存在毒副作用。若長期服用降糖西藥，導(dǎo)致較大毒副作用的蓄積而引起患者產(chǎn)生耐藥性及依賴性，久而久之，又提高了糖尿病腎病、視網(wǎng)膜病變、神經(jīng)病變、糖尿病足等并發(fā)癥的發(fā)生率。而經(jīng)現(xiàn)代藥理研究證明具有明確的降血糖、胰島素增敏的中藥(尤其是復(fù)方制劑)除不易產(chǎn)生耐藥性外，還有較輕的毒性、副作用的優(yōu)點(diǎn)。
玉泉丸由清·葉天士《種福堂公選良方》玉泉散改劑而成，是一經(jīng)典名方，具有養(yǎng)陰清熱，生津止渴之功效。臨床用于輕、中型2型糖尿病患者療效確切，能有效緩解糖尿病之多飲，多食，多尿，體乏，形體消瘦等癥狀。但其存在生物利用度低，藥物吸收不完全，用藥量大且外觀粗、大、黑等缺點(diǎn)。本發(fā)明人對(duì)玉泉丸的制備進(jìn)行了潛心研究，在傳統(tǒng)名方玉泉丸的基礎(chǔ)上進(jìn)行劑型工藝改進(jìn)，通過正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，篩選出優(yōu)化的制備工藝，由此完成了本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供了一種治療糖尿病的速釋玉泉微丸及其制備方法。
本發(fā)明的目的是通過下列技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的本發(fā)明的速釋玉泉微丸通過如下的方法制備，其中處方葛根 5-25重量份五味子 5-25重量份甘草 1-10重量份天花粉 5-25重量份地黃 5-25重量份麥冬5-25重量份制法
將葛根、五味子、甘草、天花粉4味藥粉碎成粗粉，地黃切成小塊，麥冬塊根備用；葛根，五味子中加入相當(dāng)于生藥量4～8倍重量的60～95％、優(yōu)選70～90％乙醇(V/V)加熱回流提取1～3次，每次1～3小時(shí)，濾過，合并濾液；葛根與五味子濾渣揮去乙醇后，并入天花粉、麥冬、甘草、地黃4味藥中，加入相當(dāng)于處方6味生藥量重量的6～10倍水煎煮1～3次，每次1～2小時(shí)，濾過，合并煎液；減壓濃縮至含固量為15～17％，優(yōu)選16％(W/W)；將所得提取液噴霧干燥，進(jìn)口溫度設(shè)定為170～180℃，出口溫度設(shè)定為80～90℃，得到干浸膏；按照干浸膏粉末∶微晶纖維素重量比為68～40∶32～60(W/W)的比例投入流化床造粒包衣機(jī)中，用5～10％聚乙烯吡咯烷酮或3～6％羥丙甲纖維素水溶液(W/V)作為粘合劑由頂噴或者側(cè)噴制粒。
本發(fā)明優(yōu)選的技術(shù)方案是處方葛根 15重量份五味子 15重量份甘草 5重量份 天花粉 15重量份地黃 15重量份麥冬15重量份制法將葛根、五味子、甘草、天花粉4味藥粉碎成粗粉，地黃切成小塊，麥冬塊根備用；葛根，五味子中加入相當(dāng)于生藥量8倍重量的80％乙醇(V/V)加熱回流提取2次，每次2小時(shí)，濾過，合并濾液；葛根與五味子濾渣揮去乙醇后，并入天花粉、麥冬、甘草、地黃4味藥中，加入相當(dāng)于處方6味生藥量重量的8倍水煎煮2次，每次2小時(shí)，濾過，合并煎液；減壓濃縮至含固量為15～17％，優(yōu)選16％(W/W)；將所得提取液噴霧干燥，進(jìn)口溫度設(shè)定為170～180℃，出口溫度設(shè)定為80～90℃，得到干浸膏；按照干浸膏粉末∶微晶纖維素重量比為40∶60(W/W)的比例投入流化床造粒包衣機(jī)中，由頂噴5％聚乙烯吡咯烷酮水溶液(W/V)制粒，收集30～60目顆粒。
本發(fā)明制備得到的速釋玉泉微丸療效高、使用劑量小、藥物吸收完全、生物利用度高、服用方便、便于貯存保管。
本發(fā)明所制備的速釋玉泉微丸制劑可用于消渴病之陰虛熱盛證的治療，相當(dāng)于西醫(yī)之2型糖尿病，癥見多飲，多食，多尿，體乏，形體消瘦等。
下面通過實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明。應(yīng)該理解的是，本發(fā)明的實(shí)施例是用于說明本發(fā)明而不是對(duì)本發(fā)明的限制。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)質(zhì)對(duì)本發(fā)明進(jìn)行的簡單改進(jìn)都屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。另外，在本發(fā)明中，(v/v)表示體積比濃度或者體積比；(w/w)表示重量比濃度或者重量比；(w/v)表示重量/體積比濃度或者重量/體積比，其對(duì)應(yīng)的單位是(克/毫升)。
實(shí)施例1玉泉微丸干浸膏提取工藝研究1.1葛根、五味子、甘草、天花粉、地黃、麥冬提取的工藝條件研究由于處方中葛根的有效成分葛根素，五味子中的甲素、乙素在乙醇中溶解度較大，麥冬、天花粉、地黃中的多糖、甘草中的甘草酸均是水溶性的。為了最大限度地利用各味藥的有效成份，我們考慮前二者用高濃度的醇來提取，其余的水煎，設(shè)計(jì)了八個(gè)工藝。具體如下工藝一六味藥全部水煎，第一次10倍量，1小時(shí)；第二次8倍量，1小時(shí)。
工藝二全部30％醇提(V/V)，第一次10倍量，1小時(shí)；第二次8倍量，1小時(shí)。
工藝三全部60％醇提(V/V)，第一次8倍量，1小時(shí)；第二次6倍量，1小時(shí)。
工藝四全部95％醇提(V/V)，第一次8倍量，1小時(shí)；第二次6倍量，1小時(shí)。
工藝五葛根、五味子80％醇提(V/V)，兩次，1小時(shí)/次，第一次8倍量，第二次6倍量，藥渣棄去；地黃、麥冬、甘草、天花粉水煎，兩次，1小時(shí)/次。
工藝六葛根、五味子80％醇提(V/V)，兩次，1小時(shí)/次，第一次8倍量，第二次6倍量；藥渣并入其余四味藥水煎，第一次10倍量，1小時(shí)；第二次8倍量，1小時(shí)。
工藝七葛根、五味子、麥冬80％醇提(V/V)，兩次，1小時(shí)/次，第一次8倍量，第二次6倍量；藥渣合并入地黃、甘草、天花粉水煎，2次，1小時(shí)/次，第一次10倍量，第二次8倍量。
工藝八麥冬、天花粉水煎醇沉，水煎第一次10倍量，1小時(shí)，第二次8倍量，1小時(shí)，合并提取液并濃縮至1∶1(W/V)，加95％乙醇(V/V)使溶液濃度達(dá)到80％(V/V)，然后靜置過夜，多糖析出，過濾后溶液棄去；甘草、地黃水煎，第一次10倍量，小時(shí)，第二次8倍量，1小時(shí)；葛根、五味子80％醇提(V/V)，第一次8倍量，1小時(shí)，第二次6倍量，1小時(shí)，藥液合并后濃縮成浸膏并與得到的多糖混勻。
每個(gè)工藝的提取液減壓回收，真空干燥。所得浸膏量見表1表1.不同提取工藝干浸膏得率


對(duì)其活性成分進(jìn)行評(píng)分，所得結(jié)果見表2表2.不同工藝中各活性指標(biāo)成分綜合評(píng)分

評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)*規(guī)定葛根素、五味子甲素、乙素、甘草酸、總多糖滿分分別為50分、7分、7分、6分和30分。葛根素最高含量為730.5mg，記為50分，其它值記為A/730.5×50；甲素、乙素最高含量分別為42.07mg和77.97mg，他們分別記為7分，其它值則記為B/42.17×7和B/77.97×7；甘草酸最高含量為202mg，記為6分，則其它值分別記為C/202×6；總多糖最高含量為13.29mg，記為30分，則其它值分別記為D/13.29×30?？傆浄譃锳/730.5×50+B/42.17×7+B/77.97×7+C/202×6+D/13.29×30。
為求最佳工藝，配合工藝研究。對(duì)八種不同工藝制備的玉泉微丸提取物進(jìn)行了藥效學(xué)試驗(yàn)，觀察了其對(duì)腎上腺素及四氧嘧啶小鼠高血糖模型血糖的影響，結(jié)果如下①對(duì)腎上腺素所致高血糖小鼠血糖含量的影響根據(jù)《中國生化藥物雜志》，2002，23(3)，第112-114頁“五味子中α-葡萄糖苷酶制劑對(duì)小鼠的降血糖作用”中描述的方法，取正常小鼠120只，分為12組，正常對(duì)照組與模型對(duì)照組灌胃生理鹽水，其余10組分別給不同工藝提取的藥物(6g/kg)，0.1ml/10g，連續(xù)8天。末次給藥后禁食3小時(shí)，除正常組外，其余各組腹腔注射腎上腺素100ug/kg。于30分鐘后分別取血采用葡萄糖GOD-PAP法測定血糖值，結(jié)果見表3表3.對(duì)腎上腺素所致高血糖小鼠血糖含量的影響(x±S)

“*”表示與模型對(duì)照組比較P＜0.05，“**”表示與模型對(duì)照組比較P＜0.01(以下各表同)②對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖含量的影響根據(jù)《中國生化藥物雜志》，2002，23(3)，第112-114頁“五味子中α-葡萄糖苷酶制劑對(duì)小鼠的降血糖作用”中描述的方法，四氧嘧啶糖尿病小鼠由正常小鼠腹腔注射四氧嘧啶(200mg/kg)，72小時(shí)后測空腹血糖，選取血糖值在11.0mmol/L以上者。分組時(shí)各組動(dòng)物平均血糖值之差不大于0.5mmol/L。取四氧嘧啶糖尿病小鼠110只，隨機(jī)分成11組，分別為模型組及10種不同工藝的給藥組，不同工藝給藥組分別以6g/kg劑量給藥，0.1ml/10g，模型組給等容積的生理鹽水，連續(xù)7天，末次給藥后禁食3小時(shí)，取血采用葡萄糖GOD-PAP法測定血糖值。結(jié)果見表4表4.對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖含量的影響(x±S)


綜合兩試驗(yàn)結(jié)果，認(rèn)為第1、4和6號(hào)工藝對(duì)糖尿病小鼠的降血糖效果較佳，均可選擇。結(jié)合活性指標(biāo)成分綜合評(píng)分結(jié)果，工藝6綜合評(píng)分最高，為最佳選擇，即葛根、五味子80％醇提(V/V)，兩次，1小時(shí)/次，第一次8倍量，第二次6倍量；藥渣并入其余四味藥水煎，第一次10倍量，1小時(shí)；第二次8倍量，1小時(shí)。
1.2玉泉微丸的醇提工藝優(yōu)選采用正交實(shí)驗(yàn)法來確定葛根、五味子醇提最佳工藝條件，選擇乙醇濃度、加醇量、提取時(shí)間和提取次數(shù)4個(gè)因素作為考察因素，每個(gè)因素選擇3個(gè)水平進(jìn)行考察，如下表表5.因素水平表

按照處方比例稱取葛根、五味子各15g，共30g，稱9份，按照正交實(shí)驗(yàn)方案表進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，分析結(jié)果如表6表6.正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)分析結(jié)果序號(hào) 乙醇濃度 提取時(shí)間 提取量 提取次數(shù) 葛根素含量 甲素含量 乙素含量 綜合評(píng)分A(％) (小時(shí)) (倍)(次) (mg) (mg) (mg)1 70 1 4 1 251.3112.324 32.5875 60.442 70 2 6 2 366.9222.57 51.24 93.323 70 3 8 3 336.3424.628 47.6185 88.99
4 80 1 6 3 393.8819.746 45.222892.895 80 2 8 1 315.1917.501 49.063 80.516 80 3 4 2 317.6817.893249.927881.537 90 1 8 2 335.0720.936453.523688.008 90 2 4 3 356.5420.930053.653691.319 90 3 6 1 282.8110.114534.930564.32K1242.75 241.33 233.28 205.27K2254.93 265.14 250.53 262.85K3243.63 234.84 257.5 273.19K1258927.5625 58240.1689 54419.5584 42135.7729K2264989.3649 70299.2196 62765.2809 69090.1225K2259355.5769 55149.8256 66306.2500 74632.7761R 4.06 10.1 8.07 22.64評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)*評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定葛根素和五味子甲素、乙素滿分各為60分、20分、20分，葛根素最高含量為393.88mg，記為60分，其它值記分為N/393.88×60；甲素、乙素最高含量分別為24.628mg和53.6536mg，它們分別記為20分，其它分別記分為N/24.628×20和N/53.6538×20，總記分為M/393.88×60+N/24.628×20+N/53.6538×20。方差分析結(jié)果見表7表7.方差分析結(jié)果

F0.1(2，8)＝3.1F0.05(2，8)＝4.46F0.01(2，8)＝8.65通過對(duì)上述結(jié)果進(jìn)行方差分析，結(jié)果可見，D因素(提取次數(shù))和B因素(提取時(shí)間)對(duì)結(jié)果有顯著性影響，A、C兩因素對(duì)結(jié)果無顯著性影響。最優(yōu)組合應(yīng)為A2B2C3D3。將提取兩次與提取三次所得的數(shù)據(jù)作比較，提取兩次的數(shù)據(jù)占提取三次的數(shù)據(jù)的90％以上，故可以認(rèn)為提取兩次成分已基本提取完全，故選擇D2。由于提取倍數(shù)無顯著性差別，根據(jù)常規(guī)故選擇8倍量提取，為C2。
根據(jù)方差分析結(jié)果，結(jié)合生產(chǎn)實(shí)際，本著成本低的原則，確定了醇提工藝最佳條件用80％乙醇(V/V)提取兩次，第一次8倍量，2個(gè)小時(shí)；第二次8倍量，2小時(shí)。取葛根30g、五味子30g，按照確定的最佳工藝條件進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)。則得其中有效成分含量如下表8所示。
表8.醇提工藝驗(yàn)征試驗(yàn)

驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)表明優(yōu)選出的工藝合理可行。
1.3玉泉微丸的水提工藝優(yōu)選采用正交實(shí)驗(yàn)法來確定最佳水提工藝條件，選擇加水量、煎煮時(shí)間、煎煮次數(shù)3個(gè)因素作為考察因素，每個(gè)因素選擇3個(gè)水平進(jìn)行考察，如表9所示表9.因素水平表

按處方比例稱取麥冬、天花粉、地黃各270g，甘草90g，共九份。每份另加葛根、五味子醇提后藥渣按正交設(shè)計(jì)條件進(jìn)行水提，結(jié)果見表10表10.正交設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)分析結(jié)果序號(hào) 乙醇濃度 提取時(shí)間 提取量 提取次數(shù) 葛根素含量 甲素含量 乙素含量 綜合評(píng)分A(％) (小時(shí)) (倍)(次) (mg) (mg) (mg)1 70 1 4 1 251.31 12.324 32.587560.442 70 2 6 2 366.92 22.5751.24 93.323 70 3 8 3 336.34 24.628 47.618588.994 80 1 6 3 393.88 19.746 45.222892.895 80 2 8 1 315.19 17.501 49.063 80.516 80 3 4 2 317.68 17.8932 49.927881.537 90 1 8 2 335.07 20.9364 53.523688.008 90 2 4 3 356.54 20.9300 53.653691.31
9 90 3 6 1 282.8110.114534.930564.32K1242.75 241.33 233.28 205.27K2254.93 265.14 250.53 262.85K3243.63 234.84 257.5 273.19K1258927.5625 58240.1689 54419.5584 42135.7729K2264989.3649 70299.2196 62765.2809 69090.1225K2259355.5769 55149.8256 66306.2500 74632.7761R 4.0610.18.0722.64評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)*與表2的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)同。
方差分析見下表11表11.方差分析結(jié)果

F0.1(2，8)＝3.1F0.05(2，8)＝4.46F0.01(2，8)＝8.65結(jié)合藥效學(xué)試驗(yàn)，觀察了不同正交設(shè)計(jì)工藝對(duì)腎上腺素及四氧嘧啶小鼠高血糖模型血糖的影響，結(jié)果如下①對(duì)腎上腺素所致高血糖小鼠血糖含量的影響根據(jù)《中國生化藥物雜志》，2002，23(3)，第112-114頁“五味子中α-葡萄糖苷酶制劑對(duì)小鼠的降血糖作用”中描述的方法，參照“實(shí)施例1.1中①中的方法”測定血糖值，結(jié)果見表12表12.對(duì)腎上腺素所致高血糖小鼠血糖含量的影響(x±S)


#實(shí)施例1項(xiàng)下的1.1中“工藝6”，下同。
②對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠糖含量的影響根據(jù)《中國生化藥物雜志》，2002，23(3)，第112-114頁“五味子中α-葡萄糖苷酶制劑對(duì)小鼠的降血糖作用”中描述的方法，參照“實(shí)施例1.2中②的方法”測定血糖值，結(jié)果見表13表13.對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖含量的影響(x±S)

從以上兩試驗(yàn)結(jié)果可見，第1、5、6、7、9號(hào)工藝及原6號(hào)工藝組給藥組藥物對(duì)腎上腺素所致小鼠高血糖的降血糖作用明顯(P＜0.05或0.01)，且第6、7號(hào)工藝及原6號(hào)工藝藥物對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖含量降血糖效果顯著(P＜0.05或0.01)，綜合兩試驗(yàn)結(jié)果，認(rèn)為第6、7號(hào)工藝對(duì)糖尿病小鼠的降血糖效果較佳，均可選擇。
由表10、表11綜合分析來看，A因素?zé)o顯著性，且A2與A3數(shù)值基本接近無明顯差異，從節(jié)能角度考慮，A因素取A2即可；B因素也無顯著性，且從數(shù)據(jù)上來看，B2與B3也無明顯差異，基本相同，為保證提取盡可能完全，取B3；C因素有顯著性，但第二次提取率占第三次提取的93％以上，從節(jié)約成本和工業(yè)大生產(chǎn)的方面考慮，選擇C2，故最佳工藝條件為A2B3C2。即8倍量水提取，提取兩次，每次兩小時(shí)。從藥效上看，工藝6和7均可以選擇，但從理論上分析，工藝6僅提取1次，是無法提取完全的；工藝7提取3次，提取倍數(shù)也較高，能源耗費(fèi)比較大，且周期長。結(jié)合化學(xué)指標(biāo)成分分析和藥效學(xué)，可以認(rèn)為A2B3C2是最佳選擇。因?yàn)樗坏从沉嘶钚灾笜?biāo)成分含量測定的結(jié)果同時(shí)也兼顧了工藝6和工藝7，即尊重了藥效學(xué)的結(jié)果。
綜上所述，正交實(shí)驗(yàn)經(jīng)活性成分綜合評(píng)分、方差分析及藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)，確定水提最佳工藝為8倍量水，每次2小時(shí)，共兩次。
驗(yàn)證試驗(yàn)按上述所選擇的最佳工藝，即葛根、五味子各30g，即兩個(gè)處方量，用80％乙醇(V/V)提取，8倍量，每次2小時(shí)，共兩次；藥渣揮干乙醇后，并入甘草10g，天花粉、地黃、麥冬各30g，一并水提，8倍量，每次2小時(shí)，共兩次。進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，測得其活性成分含量如表14表14.驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)(n＝3)

注單位均為毫克，為兩個(gè)處方量共160g生藥所對(duì)應(yīng)浸膏所含的總量。
由所測得的數(shù)據(jù)可以看出，含量基本上均高于正交試驗(yàn)的數(shù)據(jù)，可以認(rèn)為是最佳工藝條件。
實(shí)驗(yàn)例2.玉泉微丸的制備方法取粉碎成粗粉的葛根、五味子、天花粉各17公斤，地黃17公斤切塊，粉碎成粗粉的甘草5.7公斤，麥冬塊根17公斤，按最終確定工藝將葛根、五味子投入提取罐，加80％乙醇(V/V)8倍量(272L)，加熱回流提取兩個(gè)小時(shí)，放出提取液后，重新加入同等量80％乙醇(V/V)，加熱回流提取兩個(gè)小時(shí)。藥渣揮干乙醇后，將其它藥材一并投入，分別加水8倍量725.6L，提取兩個(gè)小時(shí)，共兩次。
合并乙醇提取液與水提取液，減壓，濃縮至含固量約為16％(W/W)。將所得提取液噴霧干燥，進(jìn)口溫度設(shè)定為180℃，出口溫度設(shè)定為90℃。最終得到藥粉29.95公斤，含水量為4.2％，得膏率為33.02％(W/W)。按照干浸膏粉末∶微晶纖維素為55～40∶45～60(W/W)的比例，以5％聚乙烯吡咯烷酮水溶液或3％HPMC水溶液(W/V)為粘合劑，進(jìn)風(fēng)溫度67～71℃，片床溫度40℃，霧化壓力3bar，流化床頂噴或者側(cè)噴造粒，滾圓；使用18％OPADRY II(85G64874)(上?？房蛋录夹g(shù)有限公司生產(chǎn))(W/V)防潮包衣液包衣，流化床溫度45～50℃，霧化壓力0.8～1kg/cm2。本方法制備的微丸為20～80目，優(yōu)選30～60目，光滑，圓整的球形小丸。
實(shí)驗(yàn)例3.制備玉泉微丸取粉碎成粗粉的葛根、五味子、天花粉各17公斤，地黃17公斤切塊，粉碎成粗粉的甘草5.7公斤，麥冬塊根17公斤，按最終確定工藝將葛根、五味子投入提取罐，加80％乙醇(V/V)8倍量(272L)，加熱回流提取兩個(gè)小時(shí)，放出提取液后，重新加入同等量80％乙醇(V/V)，加熱回流提取兩個(gè)小時(shí)。藥渣揮干乙醇后，將其它藥材一并投入，分別加水8倍量725.6L，提取兩個(gè)小時(shí)，共兩次。
合并乙醇提取液與水提取液，減壓，濃縮至含固量約為16％(W/W)。將所得提取液噴霧干燥，進(jìn)口溫度設(shè)定為180℃，出口溫度設(shè)定為90℃。最終得到藥粉30.63公斤，含水量為4.5％，得膏率為33.77％(W/W)。按照干浸膏粉末∶微晶纖維素40∶60(W/W)的比例，以5％聚乙烯吡咯烷酮水溶液(W/V)為粘合劑，進(jìn)風(fēng)溫度67～71℃，片床溫度40℃，霧化壓力3bar，流化床頂噴造粒，滾圓；使用18％OPADRYII(85G64874)(上?？房蛋录夹g(shù)有限公司生產(chǎn))(W/V)防潮包衣液包衣，流化床溫度45～50℃，霧化壓力0.8～1kg/cm2。本方法制備的微丸為30～60目，光滑，圓整的球形小丸。
實(shí)驗(yàn)例4.制備玉泉微丸取粉碎成粗粉的葛根、五味子、天花粉各0.45公斤，地黃0.45公斤切塊，粉碎成粗粉的甘草0.15公斤，麥冬塊根0.45公斤，按最終確定工藝將葛根、五味子投入提取罐，加80％乙醇(V/V)8倍量，加熱回流提取兩個(gè)小時(shí)，放出提取液后，重新加入同等量80％乙醇(V/V)，加熱回流提取兩個(gè)小時(shí)。藥渣揮干乙醇后，將其它藥材一并投入，分別加水8倍量，提取兩個(gè)小時(shí)，共兩次。
合并乙醇提取液與水提取液，減壓，濃縮至含固量約為16％(W/W)。將所得提取液噴霧干燥，進(jìn)口溫度設(shè)定為180℃，出口溫度設(shè)定為90℃。最終得到藥粉0.816公斤，含水量為4.1％，得膏率為34.00％(W/W)。按照干浸膏粉末∶微晶纖維素為68∶32(W/W)的比例，以10％聚乙烯吡咯烷酮水溶液(W/V)為粘合劑，進(jìn)風(fēng)溫度67～71℃，片床溫度40℃，霧化壓力3bar，流化床側(cè)噴造粒，滾圓；使用18％OPADRY II(85G64874)(上?？房蛋录夹g(shù)有限公司生產(chǎn))(W/V)防潮包衣液包衣，流化床溫度35～40℃，霧化壓力0.8～1kg/cm2。本方法制備的微丸為30～60目，光滑，圓整的球形小丸。
實(shí)驗(yàn)例5制備玉泉微丸取粉碎成粗粉的葛根、五味子、天花粉各10公斤，地黃8公斤切塊，粉碎成粗粉的甘草3公斤，麥冬塊根8公斤，按最終確定工藝將葛根、五味子投入提取罐，加90％乙醇(V/V)6倍量，加熱回流提取3個(gè)小時(shí)，放出提取液后，重新加入同等量90％乙醇(V/V)，加熱回流提取2個(gè)小時(shí)。藥渣揮干乙醇后，將其它藥材一并投入，分別加水10倍量，提取1個(gè)小時(shí)，共3次。
合并乙醇提取液與水提取液，減壓，濃縮至含固量約為17％(W/W)。將所得提取液噴霧干燥，進(jìn)口溫度設(shè)定為175℃，出口溫度設(shè)定為85℃。最終得到干浸膏藥粉15.72公斤，含水量為4.3％，得膏率為32.08％(W/W)。按照干浸膏粉末∶微晶纖維素為50∶50(w/w)的比例，以6％羥丙甲基纖維素水溶液(W/V)為粘合劑，進(jìn)風(fēng)溫度70℃，片床溫度42℃，霧化壓力3bar，流化床造粒，滾圓；使用18％OPADRY II(85G64874)(上?？房蛋录夹g(shù)有限公司生產(chǎn))(W/V)防潮包衣液包衣，流化床溫度42～48℃，霧化壓力1kg/cm2。本方法制備的微丸為30～60目，光滑，圓整的球形小丸。
實(shí)驗(yàn)例6.制備玉泉微丸取粉碎成粗粉的葛根、五味子、天花粉地黃各1公斤，地黃1公斤切塊，粉碎成粗粉的甘草0.2公斤，麥冬塊根1公斤，按最終確定工藝將葛根、五味子投入提取罐，加90％乙醇(V/V)6倍量，加熱回流提取3個(gè)小時(shí)，放出提取液后，重新加入同等量90％乙醇(V/V)，加熱回流提取2個(gè)小時(shí)。藥渣揮干乙醇后，將其它藥材一并投入，分別加水10倍量，提取1個(gè)小時(shí)，共3次。
合并乙醇提取液與水提取液，減壓，濃縮至含固量約為17％(W/W)。將所得提取液噴霧干燥，進(jìn)口溫度設(shè)定為175℃，出口溫度設(shè)定為85℃。最終得到干浸膏藥粉1.64公斤，含水量為4.0％，得膏率為31.63％(W/W)。按照干浸膏粉末∶微晶纖維素為50∶50(w/w)的比例，以7.5％聚乙烯吡咯烷酮水溶液(W/V)為粘合劑，進(jìn)風(fēng)溫度70℃，片床溫度39℃，霧化壓力3bar，流化床側(cè)噴造粒，滾圓；使用18％OPADRY II(85G64874)(上?？房蛋录夹g(shù)有限公司生產(chǎn))(W/V)防潮包衣液包衣，流化床溫度42～45℃，霧化壓力21kg/cm2。本方法制備的微丸為30～60目，光滑，圓整的球形小丸。
實(shí)驗(yàn)例7.制備玉泉微丸取粉碎成粗粉的葛根、五味子、天花粉各2公斤，地黃2公斤切塊，粉碎成粗粉的甘草0.8公斤，麥冬塊根2公斤，按最終確定工藝將葛根、五味子投入提取罐，加90％乙醇(V/V)6倍量，加熱回流提取3個(gè)小時(shí)，放出提取液后，重新加入同等量90％乙醇(V/V)，加熱回流提取2個(gè)小時(shí)。藥渣揮干乙醇后，將其它藥材一并投入，分別加水10倍量，提取1個(gè)小時(shí)，共3次。
合并乙醇提取液與水提取液，減壓，濃縮至含固量約為15％(W/W)。將所得提取液噴霧干燥，進(jìn)口溫度設(shè)定為175℃，出口溫度設(shè)定為85℃。最終得到干浸膏藥粉3.51公斤，含水量為3.9％，得膏率為32.46％(W/W)。按照干浸膏粉末∶微晶纖維素為60∶40(w/w)的比例，以9％聚乙烯吡咯烷酮水溶液(W/V)為粘合劑，進(jìn)風(fēng)溫度70℃，片床溫度42℃，霧化壓力3bar，流化床側(cè)噴造粒，滾圓；使用18％OPADRY II(85G64874)(上海卡樂康包衣技術(shù)有限公司生產(chǎn))(W/V)防潮包衣液包衣，流化床溫度39～44℃，霧化壓力1kg/cm2。本方法制備的微丸為30～60目，光滑，圓整的球形小丸。
實(shí)施例8.實(shí)施例3制備得到的玉泉微丸主要藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)藥品與試劑如下玉泉微丸，按照實(shí)施例3方法制備，上海醫(yī)藥工業(yè)研究院提供，批號(hào)040309，臨用前加適量蒸餾水配成合適濃度，即1g/ml。
四氧嘧啶(Alloxan)，美國Fluka公司生產(chǎn)，批號(hào)445307/131603091玉泉丸，0.15g/丸，成都金鼎藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號(hào)020725。
降糖靈片，25mg/片，山東省莒南制藥廠生產(chǎn)，批號(hào)020607。
鹽酸腎上腺素注射液，1mg/ml，武漢諾佳藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司，批號(hào)011001多烯康膠丸，山東禹王制藥有限公司產(chǎn)品，批號(hào)011021，實(shí)驗(yàn)時(shí)制成乳劑。
甲苯磺丁脲，江蘇長江藥業(yè)有限公司產(chǎn)品，批號(hào)020217。
葡萄糖檢測試劑盒，四川省邁克科技有限公司生產(chǎn)，批號(hào)1103041具體實(shí)驗(yàn)如下8.1腎上腺素所致高血糖小鼠血糖含量的影響根據(jù)《中國生化藥物雜志》，2002，23(3)，第112-114頁“五味子中α-葡萄糖苷酶制劑對(duì)小鼠的降血糖作用”中描述的方法，取正常小鼠70只，隨機(jī)分成7組，每組10只，正常對(duì)照組與模型對(duì)照組灌胃同體積生理鹽水，其余各組如表15所示劑量給藥，每天一次，連續(xù)11天。末次給藥后禁食3小時(shí)，除正常組對(duì)照組外，其余各組腹腔注射腎上腺素100ug/kg。于注射后30分鐘后分別斷頭取血，采用葡萄糖GOD-PAP法測定血糖含量。結(jié)果見表15表15.對(duì)腎上腺素所致高血糖小鼠血糖含量的影響(x±S)

“*”表示與模型對(duì)照組比較P＜0.05，“**”表示與模型對(duì)照組比較P＜0.01，“▲”表示與正常對(duì)照組比較P＜0.05，“▲▲”表示與正常對(duì)照組比較P＜0.01，以下各表同。
結(jié)果表明，模型對(duì)照組小鼠血糖值顯著高于正常對(duì)照組，說明造模成功；玉泉微丸小、中、大劑量給藥組藥物降血糖作用明顯，與模型對(duì)照組相比差異有顯著性(P＜0.05或0.01)，中劑量組降血糖作用與玉泉丸原劑型組相比降血糖作用略優(yōu)于玉泉丸原劑型組，但無顯著性差異。
8.2對(duì)四氧嘧啶糖尿病大鼠血糖含量的影響取正常大鼠，按200mg/kg劑量腹腔注射四氧嘧啶，72小時(shí)后剪尾采血測空腹血糖，選取血糖值在11.1mmol/L以上者為模型動(dòng)物。取四氧嘧啶糖尿病鼠60只，隨機(jī)分成6組，分組時(shí)各組動(dòng)物平均血糖值之差不大于0.5mmol/L。按表16示劑量灌胃給藥，1ml/100g體重，模型組給等容積的生理鹽水，每天一次，連續(xù)14天，未次給藥后禁食12小時(shí)，心臟取血，采用葡萄糖GOD-PAP法測定血糖值。結(jié)果見表16表16.對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖含量的影響(x±S)

結(jié)果顯示，各給藥組降血糖效果顯著，與模型組相比差異顯著(P＜0.01)，玉泉微丸給藥組與原劑型相比無顯著性差異。
8.3對(duì)葡萄糖引起大鼠血糖升高的影響取正常大鼠70只，隨機(jī)分為7組，每組10只。按表17所示劑量灌胃給藥，正常對(duì)照組及葡萄糖模型組給予等容積的生理鹽水，1ml/100g，每天一次，連續(xù)14天。未次給藥后禁食10小時(shí)，除正常對(duì)照組外，其余動(dòng)物腹腔注射葡萄糖溶液2g/kg，分別于注射后30，60和120分鐘后眶靜脈取血，采用葡萄糖GOD-PAP法測定血糖值。結(jié)果見表17表17.對(duì)葡萄糖性高血糖大鼠血糖含量的影響(x±S)

從表17結(jié)果可見，玉泉微丸對(duì)外源性葡萄糖引起的大鼠高血糖具有明顯的降低血糖作用，效果優(yōu)于原劑型組，但無顯著性差異，在第120分鐘作用較為明顯，玉泉微丸各給藥組與模型組相比差異有顯著性(P＜0.05)，而原劑型組與模型組相比則無顯著性差異。
8.4對(duì)正常大鼠血糖值的影響取正常大鼠60只，隨機(jī)分為6組，每組10只。按表18所示劑量灌胃給藥，正常對(duì)照組給予等容積的生理鹽水，1ml/100g，每天一次，連續(xù)10天。未次給藥后禁食3小時(shí)，心臟取血，采用葡萄糖GOD-PAP法測定血糖值。結(jié)果見表18表18.對(duì)正常大鼠血糖值的影響(x±S)


表18結(jié)果顯示，玉泉微丸各劑量組均明顯降低正常大鼠血糖的作用(P＜0.01)，且降糖作用與玉泉丸原劑型相比有增強(qiáng)作用但不及陽性對(duì)照藥。
8.5對(duì)小鼠血清甘油三酯及總膽固醇含量的影響取小鼠60只，雌雄各半，按體重隨機(jī)分為6組空白組、多烯康、玉泉微丸三個(gè)劑量組和玉泉丸組。連續(xù)給藥10天，末次給藥后禁食10小時(shí)，眼眶取血測血清中甘油三酯(TG)及血清總膽固醇(TC)含量。結(jié)果見表19表19.對(duì)小鼠血清脂質(zhì)含量的影響(x±S)

表19結(jié)果顯示，玉泉微丸各劑量組及玉泉丸組對(duì)正常小鼠血清TG及TC均無明顯影響，多烯康對(duì)其有明顯降低作用。
8.6對(duì)蛋黃引起的高脂血癥小鼠血清脂質(zhì)的影響取雄性小鼠70只，按體重隨機(jī)分為7組正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、多烯康組、玉泉微丸三個(gè)劑量組和玉泉丸組，連續(xù)灌胃給藥10天，兩個(gè)對(duì)照組均給予每只鼠0.5ml蒸餾水。末次給藥后除正常對(duì)照組外，其余每鼠均腹腔注射70％蛋菌乳劑0.5ml。禁食16小時(shí)后于眼眶取血測TC及TG。結(jié)果見表20表20.對(duì)蛋黃引起的高脂血癥小鼠血清脂質(zhì)的影響(x±S)

表20結(jié)果顯示，玉泉微丸各劑量組及玉泉丸組對(duì)對(duì)蛋黃引起的高脂血癥小鼠TC及TG均有明顯降低作用，其作用與多烯康相當(dāng)。
綜合上表可以得出玉泉微丸可明顯降低腎上腺素性高血糖小鼠的血糖水平，降低四氧嘧啶性糖尿病大鼠的血糖含量，降低正常大鼠血糖的作用，對(duì)正常大鼠的葡萄糖糖耐量有明顯的改善與同劑量玉泉丸原劑型相比玉泉微丸有較強(qiáng)降血糖作用趨勢；對(duì)正常小鼠血清TG及TC均無明顯影響；對(duì)蛋黃引起的高脂血癥小鼠TC及TG均有明顯降低作用。
實(shí)施例9.實(shí)施例3制備得到的玉泉微丸的長期毒性試驗(yàn)分別以對(duì)應(yīng)于36g(生藥)/kg(體重)，18g(生藥)/kg(體重)，9g(生藥)/kg(體重)的實(shí)施例3的玉泉微丸的劑量對(duì)大鼠進(jìn)行灌胃給藥，對(duì)照組給予等體積蒸餾水，連續(xù)26周，每日觀察一般狀況，每星期測量體重1次。給藥13周后，每組處死12只(雄6雌6)動(dòng)物進(jìn)行病理、血液學(xué)檢查、血液生化檢查。給藥26周后，每組再次處死18只(雄9雌9)動(dòng)物進(jìn)行病理、血液學(xué)檢查、血液生化檢查。剩余動(dòng)物停藥后繼櫝觀察3周，再次進(jìn)行血液學(xué)、病理學(xué)及血液生化檢查。結(jié)果大鼠活動(dòng)正常，未出現(xiàn)明顯異常或死亡；血液學(xué)檢查、血液生化學(xué)檢查、尿常規(guī)檢查、病理學(xué)檢查等結(jié)果表明玉泉微丸連續(xù)給藥13周后與給藥26周后，給藥組血糖值(GLU)均明顯降低(P＜0.01)；給藥26周后，大劑量組脾指數(shù)增加明顯(P＜0.05)；停藥繼續(xù)觀察3周后，各組動(dòng)物血液學(xué)、血液生化學(xué)檢查、病理學(xué)檢查指標(biāo)與對(duì)照組相比均無顯著性差異(P＞0.05)。病理學(xué)檢查結(jié)果顯示肺間質(zhì)性炎癥均見于對(duì)照組和給藥組，其可能與環(huán)境等飼養(yǎng)條件有關(guān)。少數(shù)大鼠可見肝灶性炎細(xì)胞浸潤、腎皮髓質(zhì)和脾髓質(zhì)有充血也同時(shí)存在于對(duì)照組及給藥組，且無明顯差異。所有病理學(xué)檢查結(jié)果顯示，未發(fā)現(xiàn)與藥物毒性有關(guān)的病理變化。
綜上所述，大鼠連續(xù)灌服玉泉微丸26周，未見與藥物有關(guān)的不可逆毒性反應(yīng)。
實(shí)施例10.實(shí)施例3的玉泉微丸急性毒性試驗(yàn)實(shí)施例3的玉泉微丸對(duì)小鼠的最大給藥量為192g(生藥)/kg，按體重計(jì)，其劑量相當(dāng)于人臨床一日用量(60kg計(jì))的320倍，說明在此劑量內(nèi)玉泉微丸較為安全。
實(shí)施例11.實(shí)施例3的玉泉微丸與原玉泉丸溶出試驗(yàn)結(jié)果比較按中國藥典(2000年版二部附錄XC)溶出度測定法第三法，150ml水為介質(zhì)，100rpm測定溶出成分的含量，計(jì)算出實(shí)施例3的玉泉微丸和市售的玉泉丸(四川成都九芝堂金鼎藥業(yè)有限公司生產(chǎn))每個(gè)時(shí)間的溶出度并加以比較。情況見表21、22。
表21.玉泉微丸和玉泉丸葛根素溶出比較

表22.玉泉微丸和玉泉丸中甘草酸溶出比較


上述數(shù)據(jù)可以看出，玉泉微丸中葛根素和甘草酸均在2～5分鐘內(nèi)即完全釋放，而玉泉丸中的葛根素480分鐘內(nèi)尚未完全釋放(94.26％)，甘草酸360分鐘方釋放完全。結(jié)果表明體外釋放玉泉微丸明顯優(yōu)于玉泉丸。
綜上所述，由本發(fā)明制備的速釋玉泉微丸具有比原劑型玉泉丸療效好、奏效快、使用劑量小、藥物吸收完全、生物利用度高的優(yōu)點(diǎn)。本配方科學(xué)合理，其中生地養(yǎng)陰生津清熱，善滋腎水。五味子，固腎斂肺，生津縮尿，不使水液急于下趨。葛根生津解肌退熱；天花粉生津止渴，清熱潤燥；麥冬養(yǎng)陰潤肺、益胃生津。生甘草瀉火解毒，益氣和中，調(diào)和諸藥。六藥相配，以養(yǎng)陰清熱為核心，生津則渴自止。可用于消渴病屬陰虛燥熱證的治療，相當(dāng)于西醫(yī)之2型糖尿病。能夠有效治療糖尿病之多飲，多食，多尿，體乏，形體消瘦等臨床癥狀。
權(quán)利要求
1.一種治療糖尿病的速釋玉泉微丸，其特征在于由下列方法制成其中原料為葛根 5-25重量份五味子 5-25重量份甘草 1-10重量份天花粉 5-25重量份地黃 5-25重量份麥冬 5-25重量份制法將葛根、五味子、甘草、天花粉4味藥粉碎成粗粉，地黃切成小塊，麥冬塊根備用；葛根，五味子中加入相當(dāng)于生藥量4～8倍重量的60～95％乙醇(V/V)加熱回流提取1～3次，每次1～3小時(shí)，濾過，合并濾液；葛根與五味子濾渣揮去乙醇后，并入天花粉、麥冬、甘草、地黃4味藥中，加入相當(dāng)于處方6味生藥量重量的6～10倍水煎煮1～3次，每次1～2小時(shí)，濾過，合并煎液；減壓濃縮至含固量為15～17％(W/W)；將所得提取液噴霧干燥，得到干浸膏；按照干浸膏粉末微晶纖維素重量比為68～40∶32～60(W/W)的比例投入流化床造粒包衣機(jī)中，用5～10％聚乙烯吡咯烷酮水溶液或3～6％羥丙甲基纖維素水溶液(W/V)為粘合劑，采用側(cè)噴或頂噴制粒，滾圓，包衣。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的速釋玉泉微丸，其中所述制法中，葛根，五味子中加入相當(dāng)于生藥量4～8倍重量的70～90％乙醇(V/V)加熱回流提取。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的速釋玉泉微丸，其中原料為葛根 15重量份五味子 15重量份甘草 5重量份 天花粉 15重量份地黃 15重量份麥冬 15重量份。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3之一的速釋玉泉微丸，其中所述制法中，將葛根、五味子、甘草、天花粉4味藥粉碎成粗粉，地黃切成小塊，麥冬塊根備用；葛根，五味子中加入相當(dāng)于生藥量8倍重量的80％乙醇(V/V)加熱回流提取2次，每次2小時(shí)，濾過，合并濾液；葛根與五味子濾渣揮去乙醇后，并入天花粉、麥冬、甘草、地黃4味藥中，加入相當(dāng)于處方6味生藥量重量的8倍水煎煮2次，每次2小時(shí)，濾過，合并煎液；減壓濃縮至含固量為16％(W/W)；將所得提取液噴霧干燥，進(jìn)口溫度設(shè)定為170～180℃，出口溫度設(shè)定為80～90℃，得到干浸膏。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的速釋玉泉微丸，其中所述制法中，按照干浸膏粉末微晶纖維素重量比為40∶60(W/W)的比例投入流化床造粒包衣機(jī)中。
6.根據(jù)權(quán)利要求4的速釋玉泉微丸，其中所述制法中，按照干浸膏粉末微晶纖維素重量比為68∶32(W/W)的比例投入流化床造粒包衣機(jī)中。
7.根據(jù)權(quán)利要求5的速釋玉泉微丸，其中所述制法中，由頂噴5％聚乙烯吡咯烷酮水溶液(W/V)制粒，使用18％OPADRY II(W/V)防潮包衣液包衣。
8.根據(jù)權(quán)利要求6的速釋玉泉微丸，其中所述制法中，由側(cè)噴10％聚乙烯吡咯烷酮水溶液(W/V)制粒，使用18％OPADRY II(W/V)防潮包衣液包衣。
9.根據(jù)權(quán)利要求7或8的速釋玉泉微丸，其中所述制法中，造粒流化床溫度40～50℃，霧化壓力0.8～1kg/cm2。
10.根據(jù)權(quán)利要求9的速釋玉泉微丸，其中所述制法制備的微丸為30～60目光滑圓整的球形小丸。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種治療糖尿病的速釋玉泉微丸及其制備方法。該方法是葛根，五味子用乙醇加熱回流提??；提取后的殘?jiān)⑷胩旎ǚ?、麥冬、甘草、地黃4味藥中，加入水煎煮，濾過；水醇提取液減壓濃縮至含固量約為16％(W/W)，將所得提取液噴霧干燥得到干浸膏；按照干浸膏粉末微晶纖維素重量比為68～40∶32～60(W/W)的比例投入流化床造粒包衣機(jī)中，由頂噴5％聚乙烯吡咯烷酮水溶液(W/V)或側(cè)噴10％聚乙烯吡咯烷酮水溶液(W/V)制粒，滾圓；收集30～60目微丸，包衣。由本發(fā)明制備的速釋玉泉微丸具有比原劑型玉泉丸療效好、奏效快、使用劑量小、藥物吸收完全、生物利用度高的優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)A61K9/16GK1682935SQ20051005154
公開日2005年10月19日 申請(qǐng)日期2005年3月4日 優(yōu)先權(quán)日2005年3月4日
發(fā)明者楊義芳, 喬艷紅 申請(qǐng)人:浙江海正藥業(yè)股份有限公司, 上海醫(yī)藥工業(yè)研究院