專利名稱：賴氨酸七葉皂苷及其制備方法和其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種低毒性和低刺激性的七葉皂苷賴氨酸鹽，及其制備方法和其用途。
背景技術(shù)：
七葉皂苷鈉是從七葉樹科七葉樹屬植物種子提取得到的總皂苷的鈉鹽?？偲呷~皂苷(Totalescin)鈉應(yīng)用于臨床，含有4種主要成分，我國國家標(biāo)準(zhǔn)按液相色譜出峰先后，依次命名為七葉皂苷A(即日本方面escin Ia)，七葉皂苷B(escin Ib)、七葉皂苷C(isoescin Ia)和七葉皂苷D(isoescin Ia)。七葉皂苷A和B是β-型七葉皂苷，它們的結(jié)構(gòu)基本相同，但與C21-羥基成酯的有機(jī)酸不同，是互為正反異構(gòu)體的巴豆油酸或當(dāng)歸酸，因而七葉皂苷A和B可合并用結(jié)構(gòu)式(1)來表示。七葉皂苷C和D分別是七葉皂苷A和B的C21-羥基上乙酸酯轉(zhuǎn)位至C28-羥基的異構(gòu)體；七葉皂苷C和D也互為異構(gòu)體，是Crypto-型(異型)七葉皂苷，可合并用結(jié)構(gòu)(2)來表示。

總七葉皂苷是同時(shí)含有β-七葉皂苷和異七葉皂苷的物質(zhì)，具有抗炎抗?jié)B出和改善血液循環(huán)的作用，已廣泛用于治療各種原因引起的腦水腫，創(chuàng)傷性水腫，靜脈回流障礙和燒傷等。但因七葉皂苷鈉對肌肉和黏膜刺激作用極強(qiáng)，不能用于肌肉注射，靜脈反復(fù)給藥時(shí)，也易引起靜脈炎，又因LD50比較小，Ti(相對治療指數(shù))僅為5左右，治療劑量和中毒劑量比較接近，限制了該藥在臨床上應(yīng)用。文獻(xiàn)CN1575797A公開了使用七葉皂苷治療手術(shù)后腸功能恢復(fù)。文獻(xiàn)CN1548052A公開了使用七葉皂苷治療肺部急性炎癥和水腫。
在此基礎(chǔ)上，又有多篇文獻(xiàn)公開了對七葉皂苷化合物的結(jié)構(gòu)修飾和通過異構(gòu)體成分的組合應(yīng)用。日本特開平10-17591公開了β-七葉皂苷的抗炎應(yīng)用。CN1073573C在此基礎(chǔ)上從β-七葉皂苷中分離出了具有低毒性的兩個(gè)在糖基上異構(gòu)化的單一化合物。CN1156278C公開了含有β-七葉皂苷和異-七葉皂苷異構(gòu)體。CN1376675A公開了通過在七葉皂苷的基礎(chǔ)上，用精氨酸鹽與七葉皂苷成鹽后以解決化合物溶解性和降低其血管痙攣的毒性。
文獻(xiàn)(Arzneim-Forsch 20(2)209～215，1970)用實(shí)驗(yàn)表明β-七葉皂苷在向異七葉皂苷異構(gòu)化過程中，一方面活性降低，其毒性也按比例降低，當(dāng)β-型和異型七葉皂苷的濃度比到達(dá)6∶4～5∶5范圍時(shí)(即α-七葉皂苷)，該混合物對大鼠蛋清所致腳爪腫有與β-七葉皂苷相等的治療指數(shù)；對燒傷腫脹，則比β-七葉皂苷高近1倍，文獻(xiàn)因此認(rèn)為兩類皂苷共存時(shí)活性有疊加作用。
目前仍缺乏一種能在保證七葉皂苷活性的基礎(chǔ)上，生產(chǎn)更低毒性和刺激性更小化合物的解決方法。

發(fā)明內(nèi)容
我們將七葉皂苷與賴氨酸成鹽以減輕七葉皂苷毒性和刺激性，提供了結(jié)構(gòu)式(I)和結(jié)構(gòu)式(II)的化合物。
本發(fā)明一方面提供了一種結(jié)構(gòu)式(I)所示的賴氨酸β-七葉皂苷化合物以及結(jié)構(gòu)式(II)所示的賴氨酸異七葉皂苷化合物。

本發(fā)明同時(shí)利用β-七葉皂苷和異-七葉皂苷共存時(shí)的疊加作用，制得賴氨酸β-七葉皂苷和賴氨酸異七葉皂苷的混合物，又稱賴氨酸總七葉皂苷。為了降低毒性和提高藥物活性，可將賴氨酸總七葉皂苷中的賴氨酸β-七葉皂苷與賴氨酸異七葉皂苷的重量比控制在3-9∶7-1，優(yōu)選重量比為5-8∶5-2，更優(yōu)選為5∶5～6∶4，最好為6∶4。
可通過以下方法制備獲得賴氨酸β-七葉皂苷、賴氨酸異七葉皂苷和賴氨酸總七葉皂苷。所述方法包括以下步驟1)將β-七葉皂苷、異七葉皂苷或總七葉皂苷溶解；所述溶解過程是指將β-七葉皂苷、異七葉皂苷或總七葉皂苷粉末中加入蒸餾水，再加入L-賴氨酸至溶液澄清。
2)用L-賴氨酸溶液調(diào)節(jié)pH值至5.0～7.5，優(yōu)選pH為5.0～7.0，更優(yōu)選pH為5.0～6.0，最優(yōu)選pH為5.5左右，再加入乙醇，使溶液的含醇量達(dá)到至少70％，優(yōu)選達(dá)到至少80％。
3)將步驟2)所得到醇溶液進(jìn)行濃縮?？筛鶕?jù)賴氨酸七葉皂苷的理化性質(zhì)來選擇濃縮溫度，其濃縮的溫度不宜過高，溫度過高易導(dǎo)致形成的鹽分解。因此，可選擇條件溫和的工藝方法進(jìn)行濃縮，例如真空干燥濃縮方法，以容易實(shí)現(xiàn)在較低的溫度下或在較短時(shí)間內(nèi)完成濃縮。較好的濃縮溫度控制在50℃以下，最好控制在40℃以下。在濃縮后的樣品中加入無水乙醇得到混合物，處理該混合物得到七葉皂苷的賴氨酸鹽。所述處理過程可通過本領(lǐng)域常規(guī)的方法得到其固體鹽，例如，降低溫度冷藏放置析出固體鹽、加入晶種結(jié)晶或冷凍干燥獲得賴氨酸鹽粉末等。
比較七葉皂苷鈉與賴氨酸七葉皂苷的藥理毒理作用，七葉皂苷賴氨酸鹽不僅能增加化合物的抗炎抗?jié)B出活性，且能降低化合物的毒性和刺激性，使其治療指數(shù)得到顯著提高。因此，本發(fā)明同時(shí)提供了賴氨酸β-七葉皂苷、賴氨酸異七葉皂苷和/或賴氨酸總七葉皂苷在制備藥物中的用途；所述藥物具有低刺激、高治療指數(shù)的特性，并具有抗炎、抗?jié)B出和改善血液循環(huán)的療效，例如可用于治療腦水腫、創(chuàng)傷性水腫、靜脈回流障礙、燒傷、手術(shù)后腸功能恢復(fù)、肺部急性炎癥或水腫。本發(fā)明通過使用賴氨酸成鹽降低其刺激性和毒副作用，因而，還可將其制備成軟膏、噴霧劑或凝膠劑等制劑，并可用以處理外傷傷口。
本發(fā)明進(jìn)一步提供一種藥物組合物，所述的藥物組合物含有賴氨酸β-七葉皂苷、賴氨酸異七葉皂苷和/或賴氨酸總七葉皂苷和藥物載體，所述的藥物載體選自谷胱甘肽、鹽酸賴氨酸、人白蛋白或甘露醇中的一種或幾種，優(yōu)選藥物載體為谷胱甘肽或鹽酸賴氨酸；優(yōu)選β-七葉皂苷、賴氨酸異七葉皂苷和/或賴氨酸總七葉皂苷與藥物載體的重量比為3～10∶1，更優(yōu)選重量比為6∶1。β-七葉皂苷、賴氨酸異七葉皂苷和/或賴氨酸總七葉皂苷與藥物載體的聯(lián)合應(yīng)用，不僅可降低化合物的毒性，且藥物載體能提高血腦屏障通透性，很好攜帶化合物透過血腦屏障，使藥物進(jìn)入腦內(nèi)，以用于治療腦部炎癥、腦部滲出或腦水腫。
本發(fā)明的另一方面是提供一種藥物組合物，含有賴氨酸β-七葉皂苷、賴氨酸異七葉皂苷和賴氨酸總七葉皂苷和藥學(xué)上可接受的載體。該藥物的劑型可根據(jù)本領(lǐng)域公知的制備藥物劑型的方法制備。本發(fā)明進(jìn)一步涉及適用于腸內(nèi)(例如口服或直腸給藥)、局部和腸胃外給藥、或通過吸入噴霧向哺乳動(dòng)物(包括人)給藥的藥物組合物，例如口服、注射、植入、外用等形式。其中口服包括片劑、膠囊劑、丸劑、口服液體制劑、顆粒劑、散劑等形式。注射劑包括注射液、注射用無菌粉末或無菌塊狀物、注射用濃溶液。特別是由于降低了藥物刺激性，使不適宜直接作用于外傷傷口的七葉皂苷可直接用于外傷傷口，用于治療外傷創(chuàng)傷性傷口炎癥、滲出、水腫等功效，因此，本發(fā)明所提供的藥物制劑還可制成常規(guī)的外用制劑，例如噴霧劑、膜劑、凝膠劑、貼劑等制劑形式。
本發(fā)明所述的藥物劑量或重量比均按照相應(yīng)的七葉皂苷作為計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行縱向比較而得，如將總七葉皂苷或其鹽進(jìn)行比較時(shí)，就以總七葉皂苷為計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)；如將β-七葉皂苷或其鹽進(jìn)行比較時(shí)，就以β-七葉皂苷為計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)；如將異七葉皂苷或其鹽進(jìn)行比較時(shí)，就以異七葉皂苷為計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)。
具體實(shí)施例方式
以下將結(jié)合實(shí)施例具體說明本發(fā)明，本發(fā)明的實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明的技術(shù)方案，并非限定本發(fā)明的實(shí)質(zhì)。
實(shí)施例1β-七葉皂苷和異-七葉皂苷的制備1.膽固醇沉淀法娑羅子細(xì)粉，用5倍量、濃度為50％～70v/v％稀乙醇攪拌提取三次，每次4小時(shí)，收集合并提取液，真空回收乙醇至一定體積，用高效液相色譜法測定提取濃縮液中β-七葉皂苷含量，然后以β-七葉皂苷∶膽固醇1∶1.2比例，在攪拌下加入膽固醇，加完后再攪拌2小時(shí)，放置過夜，次日收集膽固醇沉淀物，用水洗至無色，用離心機(jī)濾集并經(jīng)60℃烘干。沉淀物干后用氯仿或甲苯處理，使膽固醇溶入溶劑中，而七葉皂苷的鹽(鈉、鉀鹽)仍以固態(tài)形式存在。揮去殘留溶劑后，用水溶解，通過氫型陽離子交換樹脂柱，得乳白色膠體液，按溶液體積加入0.5％醋酸，冷藏，析出結(jié)晶，濾集后，用少量冷蒸溜水洗去醋酸，得以結(jié)構(gòu)式(1)表示的β-七葉皂苷結(jié)晶，經(jīng)多批不同原料試驗(yàn)收率為0.8～1.3％，其含量為90～95％。如將其再用快速液相色譜按2法條件制備分離，可得以結(jié)構(gòu)式(1)表示的β-七葉皂苷的純品，其含量為99.1％，理化特征見2法。
濾去膽固醇沉淀物的溶液，和濾除β-七葉皂苷后溶液合并，通過D101大孔吸附樹脂柱，用水洗去醋酸、無機(jī)鹽、色素后，用乙醇洗脫真空回收乙醇，冷藏，析出結(jié)晶，得率為0.2～0.7％，含量為88～93％。如將其再用快速液相色譜按2法條件制備分離得以結(jié)構(gòu)式(2)表示的異七葉皂苷純品，其含量為98.8％，理化特征見2法。
2.液相色譜法流動(dòng)相為甲醇-1％醋酸水液(7∶3)，將總七葉皂苷鈉溶于流動(dòng)相中，上反相ODS柱，用流動(dòng)相進(jìn)行高效液相色譜或快速液相色譜的制備分離。按七葉皂苷鈉國家標(biāo)準(zhǔn)所述順序依次截取七葉皂苷A和七葉皂苷B部位，以及七葉皂苷C和七葉皂苷D部位。前者含有以結(jié)構(gòu)式(1)表示的β-七葉皂苷，后者含有以結(jié)構(gòu)式(2)表示的異七葉皂苷。取兩個(gè)部位收集液，分別真空蒸溜，除去甲醇。
將β-七葉皂苷部位濃縮液在冷處放置，析出結(jié)晶，濾集，用蒸溜水洗滌，40℃真空干燥，得β-七葉皂苷。其理化特征如下mp.223～225℃
FAB-MS(m/z)1153(M+Na)+13C-NMR(δ/ppm)91.2(C3)，122.6(C12)，142.8(C13)，79.2(C21)，74.5(C22)，64.0(C28)；171.8(C6′)，171.0(C1″″)。
1H-NMR(δ/ppm)5.38(H-12)，4.42(H-16β)，2.97(H-18)，6.49(H-21)，6.13(H-22)將異七葉皂苷部位濃縮液進(jìn)行D101大孔吸附樹脂柱層析，吸附后，用蒸溜洗滌樹脂柱，除去醋酸或醋酸鈉后，用乙醇洗脫，洗脫液在50℃以下真空蒸去乙醇，得異七葉皂苷。其理化特征如下mp.217～219℃FAB-MS(m/z)1153(M+Na)+13C-NMR(δ/ppm)91.2(C3)，122.8(C12)，142.8(C13)，81.6(C21)，71.5(C22)，66.5(C28)；171.8(C6′)，170.6(C1)。
1H-NMR(δ/ppm)2.82(H-18)，4.47(H-22)，4.72(H-16β)，5.44(H-12)。
實(shí)施例2賴氨酸β-七葉皂苷和賴氨酸異-七葉皂苷的制備(1)賴氨酸β-七葉皂苷的制備將β-七葉皂苷結(jié)晶磨細(xì)，取細(xì)粉56.55g(0.05mol)，蒸溜水500ml，置1000ml三頸瓶中，在攪拌下緩緩加入L-賴氨酸溶液[50ml蒸溜水中含7.31g L-賴氨酸(0.05mol)]，β-七葉皂苷完全溶解后，用剩余賴氨酸溶液調(diào)節(jié)溶液pH至5.5～7.5(總消耗L-賴氨酸0.049mol)，然后將溶液加無水乙醇，使含醇量達(dá)80％，在50℃以下真空濃縮至約100ml，再加無水醇500ml，再真空濃縮成200ml，冷藏，得賴氨酸β-七葉皂苷57.95g，得率為90.7％，含量經(jīng)液相色譜測定為99.5％。理化特征mp.217～219.5℃13C-NMR(δ/ppm)91.2(C3)，122.5(C12)，142.8(C13)，79.1(C21)，74.3(C22)，64.2(C28)，171.2(C6′)(以上是皂苷部分)。175.4是賴氨酸的羧基碳的化學(xué)位移。
(2)賴氨酸異七葉皂苷的制備取異七葉皂苷56.55g(0.05mol)，蒸溜水200ml置500ml三頸瓶中，在攪拌下緩緩滴入L-賴氨酸溶液[50ml蒸溜水中含有7.31gL-賴氨酸(0.05mol)]，溶液澄清后，用剩余的L-賴氨酸溶液調(diào)節(jié)pH至5.5～7.5(約需L-賴氨酸0.049mol)加無水乙醇，使含醇量達(dá)約90％，在50℃以下溫度，真空濃縮至約50ml，加無水乙醇300ml，冷藏，得賴氨酸異七葉皂苷49.84g，收率為78.1％，經(jīng)用液相色譜測定，含量為98.9％。其理化特征如下mp.209～213℃13C-NMR(δ/ppm)91.2(C3)，122.6(C12)，142.7(C13)，81.6(C21)，71.6(C22)，66.6(C28)，171.8(C6′)，170.6(C1)，以上是皂苷部分。175.4是賴氨酸羧基碳的化學(xué)位移。
(3)賴氨酸總七葉皂苷的制備取總七葉皂苷鈉115.2g(0.1mol)，配成1∶10的蒸溜水溶液，通過氫型陽離交換柱后，得到游離的七葉皂苷乳濁液，用蒸溜水洗凈樹脂柱，洗液合并于原乳濁液中，在攪拌下，將L賴氨酸緩緩加入，使pH至5.5～7.5，約需消耗賴氨酸14.3g(0.098mol)，反應(yīng)完畢后，將溶液濾過，濾液加無水乙醇使含醇量達(dá)80％，在50℃真空濃縮成約300ml，再加無水乙醇800ml后真空濃縮成500ml，冷藏，得類白色賴氨酸總七葉皂苷118.5g，得率按理論量計(jì)算為92.7％。成品含量為98.5％，mp.為215～217℃。
(4)用凍干法制備賴氨酸β-七葉皂苷和賴氨酸總七葉皂苷取β-七葉皂苷(或總七葉皂苷)113.1g(0.1mol)，蒸溜水1000ml，置反應(yīng)瓶中，在攪拌下，緩緩加入L-賴氨酸溶液[50ml蒸溜水中含L-賴氨酸14.62g(0.1mol)]使β-七葉皂苷(或總七葉皂苷)完全溶解成澄清溶液后，調(diào)節(jié)pH至5.5～7.5，冷凍干燥后，得類白色賴氨酸β-七葉皂苷(或賴氨酸總七葉皂苷120.1g)粉末121.4g，收率為95.1％(或賴氨酸總七葉皂苷收率93.8％)。冷凍曲線如下-45℃預(yù)凍6小時(shí)；-45℃抽真空2小時(shí)；-35℃抽真空2小時(shí)；-20℃抽真空2小時(shí)；-10℃抽真空4小時(shí)；-5℃抽真空4小時(shí)；0℃抽真空4小時(shí)；10℃抽真空2小時(shí)；20℃抽真空2小時(shí)；30℃抽真空1小時(shí)；40℃抽真空1小時(shí)。
(5)用噴霧干燥法制備賴氨酸β-七葉皂苷和賴氨酸總七葉皂苷按凍干法(4)的方法配制賴氨酸β-七葉皂苷溶液或賴氨酸總七葉皂苷溶液(比重在1.1以上)，將溶液進(jìn)行噴霧干燥，預(yù)熱器溫度為280℃，干燥室溫度為120℃。
實(shí)施例3賴氨酸總七葉皂苷10mg注射用水適量將賴氨酸總七葉皂苷用注射用水溶解，按凍干粉針劑的常規(guī)工藝凍干即得。
實(shí)施例4賴氨酸β-七葉皂苷10mg注射用水 適量采用實(shí)施例1的方法制成凍干粉針劑。
實(shí)施例5賴氨酸β-七葉皂苷9mg賴氨酸異七葉皂苷 1mg注射用水 適量采用實(shí)施例1的方法制成凍干粉針劑。
實(shí)施例6賴氨酸β-七葉皂苷6mg賴氨酸異七葉皂苷 4mg注射用水 適量采用實(shí)施例1的方法制成凍干粉針劑。
實(shí)施例7賴氨酸總七葉皂苷 10mg鹽酸賴氨酸 30mg(或60或100mg)注射用水 適量采用實(shí)施例1的方法制成凍干粉針劑。
實(shí)施例8賴氨酸總七葉皂苷 10mg谷胱苷肽 30mg(或100mg)注射用水 適量采用實(shí)施例1的方法制成凍干粉針劑。
實(shí)施例9
賴氨酸總七葉皂苷10mg生理鹽水2ml采用常規(guī)注射液制備方法制成。
實(shí)施例10賴氨酸β-七葉皂苷 7mg賴氨酸異七葉皂苷3mg谷胱苷肽50mg生理鹽水2ml采用常規(guī)注射液制備方法制成。
實(shí)施例11賴氨酸總七葉皂苷或賴氨酸β-七葉皂苷 20mg(或10mg)淀粉50mg(或20mg)硬脂酸鎂5mg實(shí)施例12賴氨酸總七葉皂苷或賴氨酸異七葉皂苷 10mg0.9％生理鹽水 1000ml按滴眼劑常規(guī)生產(chǎn)工藝配成滴眼液。
實(shí)施例13賴氨酸總七葉皂苷或賴氨酸β-七葉皂苷 10g凝膠賦形劑 適量制成1000g將上述活性成分，加入凝膠賦形劑，制備得到其凝膠劑。
以下通過藥理活性測試試驗(yàn)來驗(yàn)證本發(fā)明化合物的優(yōu)異抗炎活性和較低毒性。
試驗(yàn)例1.抗炎活性的比較測定試驗(yàn)動(dòng)物25～30g健康雄性昆明小鼠。
給藥途徑 靜脈注射0.4ml。
溶劑 生理鹽水溶液。
劑量與分組 每個(gè)樣品按等比級數(shù)分成4個(gè)劑量組，劑量范圍為0.125～1.00mg·kg-1或0.075～0.60mg·kg-1，本發(fā)明所述的藥物劑量均按照相應(yīng)的七葉皂苷作為計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行縱向比較，并設(shè)等體積生理鹽水作為空白對照組。
試驗(yàn)方法 每組10只或12只小鼠，分別注射不同劑量的藥物溶液或生理鹽水，30分鐘后，每鼠右耳涂抹二甲苯0.06ml，再過2小時(shí)后，依次處死小鼠，用9.00mm打孔器打下雙耳圓片，稱重，求出各鼠的腫脹度(右耳減去左耳重)，結(jié)果如表1～表6。
(1)總七葉皂苷鈉與賴氨酸總七葉皂苷鈉的抗炎活性比較，參見表1和表2。
表1總七葉皂苷鈉的抗炎活性

備注與空白對照組比較，△示P＞0.05 *示P＜0.05 **示P＜0.01 ***示P＜0.001。
表2賴氨酸總七葉皂苷抗炎活性

備注與空白對照組比較△示p＞0.05；*示p＜0.05，**示p＜0.01；***示p＜0.001。
(2)β-七葉皂苷鈉與賴氨酸β-七葉皂苷的抗炎活性比較，參見表3和表4。
表3β-七葉皂苷鈉的抗炎活性


表4賴氨酸β-七葉皂苷的抗炎活性

備注與空白對照相比，*示P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001。
(3)異七葉皂苷鈉與賴氨酸異七葉皂苷的抗炎活性比較，參見表5和表6。
表5異七葉皂苷鈉的抗炎活性(劑量以異七葉皂苷計(jì))

表6賴氨酸異七葉皂苷的抗炎活性(劑量以異七葉皂苷計(jì))

備注*示P＜0.05 **示P＜0.01 ***示P＜0.001
結(jié)論從抗炎試驗(yàn)的三對比較結(jié)果來看，賴氨酸鹽與鈉鹽比較，可以提高七葉皂苷活性約30％左右，這為降低七葉皂苷用藥劑量提供了空間，有利于減少副作用。
試驗(yàn)例2.谷胱甘肽對賴氨酸總七葉皂苷抗炎活性的提高將谷胱甘肽∶賴氨酸總七葉皂苷的重量比為1∶1進(jìn)行混合，將混合后的藥物按試驗(yàn)例1中測定抗炎活性的方法進(jìn)行抗炎活性的測定。
表7谷胱甘肽對賴氨酸總七葉皂苷抗炎活性的影響

備注*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。
結(jié)論谷胱甘肽與賴氨酸總七葉皂苷聯(lián)合用藥，可將賴氨酸總七葉皂苷抗炎活性的ED50由0.54降為0.5，從而表現(xiàn)谷胱甘肽與賴氨酸總七葉皂苷聯(lián)合用藥間的協(xié)同作用。
試驗(yàn)例3 抗?jié)B出試驗(yàn)試驗(yàn)動(dòng)物 23～26g健康昆明小鼠，雌雄各半。
給藥途徑 靜脈注射藥物的生理鹽水溶液。
給藥劑量 0.8-1.5mg·kg-1(以相應(yīng)的七葉皂苷作為計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行縱向比較)試驗(yàn)方法 靜脈注射藥物溶液或生理鹽水各0.4ml，1小時(shí)后，靜脈注射1％伊文思芏生理鹽水溶液，同時(shí)腹膜內(nèi)注射1％醋酸溶液0.2ml，20分鐘后依次處死小鼠，剪開腹腔，用生理鹽水6ml，分次洗滌腹腔，將洗滌液合并，加生理鹽水10ml，離心3000rpm×20分鐘，取上清液，在590nm處測定吸光度值，結(jié)果參見表8。
表8各種七葉皂苷組合物的抗?jié)B出試驗(yàn)結(jié)果


備注**與對照組比較P＜0.01結(jié)論谷胱甘肽作為藥物載體與賴氨酸總七葉皂苷或賴氨酸β-七葉皂苷共用，可顯著提高其抗?jié)B出活性與抗炎活性，可提高20％左右。
試驗(yàn)例4賴氨酸七葉皂苷對實(shí)驗(yàn)性大鼠腦缺血保護(hù)作用試驗(yàn)動(dòng)物 150～200g健康Wistar大鼠。
給藥途徑 股靜脈注射給藥劑量 以總七葉皂苷計(jì)算，劑量為1mg·kg-1，其中Esc-Lys表示賴氨酸總七葉皂苷，Lys.HCl表示鹽酸賴氨酸。
試驗(yàn)方法 動(dòng)物分3組，每組10只。其中一組為腦缺血模型組，一組為治療組，另一組為假手術(shù)對照組。手術(shù)前，動(dòng)物先腹腔注射烏拉坦麻醉(1mg·kg-1)。在雙側(cè)頸動(dòng)脈結(jié)扎前5分鐘由股靜脈注射給藥。結(jié)扎3小時(shí)后將動(dòng)物處死，斷頭取腦稱重，然后在110℃烘至恒重。按照下述公式計(jì)算腦指數(shù)和腦含水量腦指數(shù)＝濕腦重×100/體重；腦含水量＝(濕重-干重)×100/濕重。
表9賴氨酸總七葉皂苷加3倍量鹽酸賴氨酸的組合物對腦缺血保護(hù)作用

注與假手術(shù)對照比較△△P＜0.01，與腦缺血組比較*P＜0.01**P＜0.01結(jié)論鹽酸賴氨酸作為藥物載體與賴氨酸總七葉皂苷聯(lián)合用藥，可提高藥物對腦水腫的抑制率?？偲呷~皂苷鈉對腦水腫的抑制率為42.6％，而賴氨酸總七葉皂苷的腦水腫抑制率為82.0％。
試驗(yàn)例5急性毒性試驗(yàn)試驗(yàn)劑量 選用4～6個(gè)劑量組，組間劑距由預(yù)試驗(yàn)結(jié)果決定。
給藥途徑 靜脈給藥。
試驗(yàn)方法 將動(dòng)物按體重隨機(jī)分成5～6個(gè)組，每組10～20只，雌雄各半。給藥后，觀察動(dòng)物反應(yīng)情況，記錄7天內(nèi)各組的動(dòng)物死亡數(shù)。結(jié)果參見表10-18。
表10總七葉皂苷鈉的LD50

A＝1.41 B＝5.74 r＝0.9659Y＝1.41+5.74XLD50＝4.20mg·kg-1(3.8～4.7mg·kg-1，P＝0.95)表11賴氨酸總七葉皂苷的LD50

A＝2.21 B＝3.36 r＝0.9987 Y＝3.36X+2.21LD50＝6.76mg·kg-1(8.26～5.43mg·kg-1，P＝0.95表12賴氨酸β-七葉皂苷的LD50


A＝2.20 B＝3.50 r＝0.9973 Y＝3.50X+2.20LD50＝6.27mg·kg-1(5.06～7.83mg·kg-1，P＝0.95)表13β-七葉皂苷鈉的LD50

A＝3.90 B＝2.46 r＝0.9925 Y＝2.46X+3.90LD50＝2.81mg·kg-1(2.99～2.65mg·kg-1，P＝0.95)表14異七葉皂苷的LD50

A＝-7.1 B＝8.21 r＝0.9980LD50＝30.04mg·kg-1(27.40～32.94mg·kg-1，P＝0.95)表15賴氨酸異七葉皂苷的LD50

A＝-3.60 B＝5.56 r＝0.9960LD50＝35.75mg·kg-1(31.17～41.02mg·kg-1，P＝0.95)表16以谷胱苷肽為載體的賴氨酸總七葉皂苷的LD50

表17賴氨酸總七葉皂苷與鹽酸賴氨酸的重量比為(1∶3)的LD50

A＝1.42 B＝4.25 r＝0.9984 y＝4.25X+1.42LD50為6.93mg·kg-1(8.53～5.65mg·kg-1p＝0.95)表18測得的LD50、ED50以及最小有效量綜合情況


從表18可以看出，賴氨酸鹽不僅能提高化合物的LD50，降低其毒性，而且還能提高活性和療效，降低最小有效量和半數(shù)有效量(ED50)，大大提高化合物的相對治療指數(shù)(LD50/ED50)，并能提高七葉皂苷類藥物的安全性能。此外，異七葉皂苷的LD50雖然是β-七葉皂苷的近10倍，但由于它的活性低，ED50大，所以治療指數(shù)并不比β-七葉皂苷高，如果異七葉皂苷用作藥物來治療，劑量小時(shí)無效，劑量大時(shí)照樣有副作用。從治療指數(shù)來看，通過七葉皂苷與賴氨酸成鹽后，總七葉皂苷或β-七葉皂苷的治療指數(shù)均比相應(yīng)的鈉鹽分別提高2.4或3.2倍，而相應(yīng)異七葉皂苷則比相應(yīng)的鈉鹽提高1.7倍。
根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)中的記載，β-七葉皂苷和異七葉皂苷在一定比例下具有較好的效果。因此，我們這次實(shí)驗(yàn)用的賴氨酸總七葉皂苷鈉含β-七葉皂苷62％，異七葉皂苷38％，即二者的重量比在6∶4范疇，其活性確有疊加作用，故賴氨酸總七葉皂苷和賴氨酸β-七葉皂苷有相近的治療指數(shù)。因此，我們認(rèn)為賴氨酸總七葉皂苷也是值得開發(fā)的一類新型藥物。
谷胱甘肽與賴氨酸總七葉皂苷(10∶1)聯(lián)用時(shí)，可以使LD50提高到14.2mg·kg-1，而其抗炎活性的ED50是0.5mg·kg-1，Ti為28.4。可見，谷胱甘肽作為載體是降低七葉皂苷毒性的有效手段。
試驗(yàn)例5肌肉刺激性試驗(yàn)試驗(yàn)動(dòng)物 2kg以上健康家兔。
給藥途徑 肌肉注射1ml溶液。
給藥劑量 ①七葉皂苷鈉的5mg·ml-1溶液1ml；②賴氨酸總七葉皂苷或賴氨酸β-七葉皂苷的5.5mg·ml-1溶液1ml；③谷胱苷肽或鹽酸賴氨酸5.5mg·kg-1與賴氨酸總七葉皂苷或賴氨酸七葉皂苷的組合物，不計(jì)谷胱苷肽或鹽酸賴氨酸重量，其劑量同②。
試驗(yàn)方法 每個(gè)品種，取家兔4只，按上述劑量注射于家兔四股頭肌，48小時(shí)后，處死動(dòng)物，解剖取出加股頭肌，縱向切開，觀察注射局部的刺激程度，并按下表換算或相應(yīng)的反應(yīng)級數(shù)。


表19肌肉刺激性試驗(yàn)結(jié)果

結(jié)論從對肌肉刺激性來看，七葉皂苷與賴氨酸成鹽后，其肌肉刺激性有顯著降低，并可見賴氨酸總七葉皂苷或賴酸酸七葉皂苷與鹽酸賴氨酸的組合物的刺激反應(yīng)總級分別為5和4，為輕度充血，可供肌肉注射用，這是很大的突破；而賴氨酸β-七葉皂苷的刺激反應(yīng)也比其相應(yīng)鈉鹽顯著減輕，刺激反應(yīng)總級是6，適用于靜脈給藥。
試驗(yàn)例6靜脈血管刺激性測試試驗(yàn)動(dòng)物 2公斤重家兔。
給藥途徑 靜脈給藥。
給藥劑量 每兔5mg，連續(xù)注射3天。
試驗(yàn)方法 家兔12只，分成四組，每組3只。
△第一組從一側(cè)耳緣靜脈緩慢注射賴氨酸總七葉皂苷1ml5mg。
△第二組從一側(cè)耳緣靜脈緩緩注射七葉皂苷鈉1ml5mg。
△第三組從一側(cè)耳緣靜脈注射生理鹽水1ml。
△第四組從一側(cè)耳緣靜脈緩緩注射賴氨酸β-七葉皂苷1ml5mg。
每組連續(xù)三天，每天都從同一耳緣靜脈注射。第四天將動(dòng)物處死，剪下給藥耳，觀察對耳朵的刺激反應(yīng)，并做病理切片檢查。
結(jié)果△第一組和△第四組的三只動(dòng)物的耳朵均未見明顯的刺激反應(yīng)，病理切片觀察結(jié)果基本與生理鹽水組相似，未見變性、壞死及明顯病理異常。
△第二組三只動(dòng)物出現(xiàn)嚴(yán)重充血水腫，大部份注射部位顯紫褐色，病理切片表明有嚴(yán)重變性，壞死和血栓形成。
△第三組三只動(dòng)物的耳朵均未見有明顯刺激反應(yīng)。病理切片顯示血管及血管周圍的細(xì)胞基本正常，未見病理異常的情況。
結(jié)論賴氨酸總七葉皂苷或賴氨酸β-七葉皂苷對靜脈血管幾無刺激作用。
試驗(yàn)例7增加靜脈張力的測試試驗(yàn)試驗(yàn)動(dòng)物 狗大隱靜脈條。
給藥途徑 離體給藥試驗(yàn)。
試驗(yàn)方法 成熟健康狗，苯巴比妥30mg·kg-1體重靜脈麻醉后，仔細(xì)分離狗隱靜脈，剪取近心端靜脈條約2cm長，小心分離其周圍筋膜及結(jié)締組織，制備成螺旋靜脈條，固定于新鮮配制的克-郭氏液的10ml離體器官浴槽中，控溫37℃±1℃并通入95％O2和5％CO2混合氣體。靜脈條經(jīng)張力換能器與平衡記錄儀相聯(lián)，且實(shí)驗(yàn)開始前，給靜脈加-50mg的前負(fù)荷。藥物對靜脈條張力的影響作用以對10-5mol/L去甲腎上腺素(NA)反應(yīng)的百分?jǐn)?shù)進(jìn)行表達(dá)即以1.0×10-5mol/L的NA引起的靜脈條收縮時(shí)的張力變化最大效應(yīng)為100，不同藥物濃度作用下，靜脈條張力變化與之進(jìn)行比較，計(jì)算出各劑量組作用下靜脈收縮張力變化的百分?jǐn)?shù)。每次給藥須在上一劑量反應(yīng)完全后再加入。總七葉皂苷鈉與賴氨酸總七葉皂苷對比試驗(yàn)的結(jié)果見表20。
表20賴氨酸總七葉皂苷與總七葉皂苷鈉增加靜脈張力的比較

結(jié)論賴氨酸總七葉皂苷具有增加靜脈張力的作用，其作用強(qiáng)度與總七葉皂苷鈉的基本相同。改善血液循環(huán)是七葉皂苷的重要生理活性，而增加靜脈張力是七葉皂苷改善血液循環(huán)重要?jiǎng)恿?，所以本?shí)驗(yàn)表明用賴氨酸鹽化七葉皂苷并沒有影響七葉皂苷改善血液循環(huán)的作用。
試驗(yàn)例8賴氨酸七葉皂苷鹽對兔眼的刺激性試驗(yàn)試驗(yàn)藥品 賴氨酸總七葉皂苷、賴氨酸β-七葉皂苷和總七葉皂苷鈉。
被試藥品的濃度與劑量本發(fā)明所述的藥物劑量均按照相應(yīng)的七葉皂苷作為計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行縱向比較，以滅菌生理鹽水為溶劑，溶液濃度為0.2w/w％溶液。對每只眼分別給藥0.1ml。
受試動(dòng)物2公斤重健康家兔。
給藥途徑眼內(nèi)給藥。
試驗(yàn)方法給藥前用放大鏡檢查每只家兔的眼球，應(yīng)確證試驗(yàn)前無炎癥，無角膜缺陷，無結(jié)膜損傷。然后將家兔分成賴氨酸總七葉皂苷組，賴氨酸β-七葉皂苷和總七葉皂苷鈉組，每組兩只家兔。均在左眼滴入藥液，右眼滴入滅菌生理鹽水作為對照。兔眼滴入藥液后，讓兔子被動(dòng)閉合10秒鐘，觀察1，24，48，72小時(shí)后兔眼的刺激反應(yīng)。
根據(jù)衛(wèi)生部藥政局頒發(fā)的《新藥(西藥)臨床前研究指導(dǎo)原則匯編》的眼刺激性試驗(yàn)方法判斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判斷，1小時(shí)后的結(jié)果見表21。表21所列結(jié)果均系兔子左眼給藥1小時(shí)后表現(xiàn)的刺激反應(yīng)，而其滴生理鹽水的右眼均無刺激反應(yīng)。24小時(shí)后，其左眼均恢復(fù)正常。
表21賴氨酸七葉皂苷鹽對兔眼的刺激性試驗(yàn)結(jié)果(給藥1小時(shí)后的觀察結(jié)果) 結(jié)論0.2％賴氨酸總七葉皂苷和0.2％賴氨酸β-七葉皂苷對兔眼球有輕度刺激作用；0.2％總七葉皂苷鈉對兔眼球有中度刺激作用。
試驗(yàn)例9谷胱甘肽與賴氨酸總七葉皂苷的不同重量比的組合物的抗炎活性研究結(jié)果及其對肌肉的刺激性作用選用試驗(yàn)例1的抗炎活性測定法和試驗(yàn)例5的肌肉刺激性方法，研究獲得谷胱甘肽與賴氨酸總七葉皂苷的不同重量比的組合物抗炎活性研究結(jié)果及其對肌肉的刺激性作用結(jié)果，參見表22。
表22谷胱甘肽和賴氨酸總七七葉苷的不同比值組合物的抗炎活性比較

**示P＜0.01結(jié)論谷胱甘肽與賴氨酸總七葉苷重量比為10∶1和6∶1的組合物的抗炎活性沒有顯著性差異，但10∶1和6∶1的抗炎活性略優(yōu)于3∶1。
表23谷胱甘肽和賴氨酸總七葉皂苷不同比值組合物的刺激性比較

結(jié)論谷胱甘肽與賴氨酸總七葉苷重量比為6∶1和3∶1的組合物對肌肉的刺激性較低，且低于10∶1的組合物。
試驗(yàn)例10賴氨酸總七葉皂苷與鹽酸賴氨酸的不同組合比對大鼠腦缺血保護(hù)作用試驗(yàn)方法同試驗(yàn)例3，結(jié)果見表24。
表24賴氨酸總七葉皂苷∶鹽酸賴氨酸的不同組合比對大鼠腦缺血保護(hù)作用

結(jié)論腦缺血模型組與假手術(shù)組的大鼠腦含水量有顯著性差異(P＜0.01)，說明模型成立。各給藥組大鼠的腦含水量與腦缺血模型組比較均有顯著性差異(P＜0.01)，說明上述各組合物均對缺血性腦水腫有治療作用。而1∶6組與1∶10組無顯著性差異(P＞0.05)，1∶6組、1∶10組與1∶3組比較也有顯著性差異(P＜0.01)?？紤]到肌肉注射給藥時(shí)的刺激性不僅與藥物性質(zhì)有關(guān)，還與注射劑含固體量有關(guān)，1∶10組合物的固體量大于1∶6，所以優(yōu)選1∶6組合物。
試驗(yàn)例11賴氨酸七葉皂苷與精氨酸七葉皂苷的活性、刺激性和毒性的比較按照CN137665A公開的方法制備得到精氨酸β-七葉皂苷、精氨酸異七葉皂苷和精氨酸總七葉皂苷。
抗炎活性測定方法同試驗(yàn)例1；靜脈血管刺激性用的測定方法同試驗(yàn)例6；LD50測定的測定方法同試驗(yàn)例5。
1.精氨酸七葉皂苷的抗炎活性測定結(jié)果表25精氨酸總七葉皂苷的抗炎活性測定

注與空白組對比，*示p＞0.05***示p＜0.001表26精氨酸β-七葉皂苷的抗炎恬性

注與空白組比較**示P＜0.01
表27精氨酸異七葉皂苷的抗炎活性

注**示與空白對照組比較，p＜0.01。
2、精氨酸總七葉皂苷與賴氨酸總七葉皂苷對靜脈血管刺激作用的對比試驗(yàn)結(jié)果試驗(yàn)動(dòng)物2公斤重健康家兔給藥途徑 靜脈給藥給藥劑量 每兔5mg(以總七葉皂計(jì))，連續(xù)注射3天。
試驗(yàn)方法 家兔9只，分成3組，每組3只。
△第一組 從一側(cè)耳緣靜脈注射賴氨酸總七葉皂苷溶液1ml，溶液中含總七葉皂苷5mg。
△第二組 從一側(cè)耳緣靜脈注射精氨酸總七葉皂苷溶液1ml，溶液中含總七葉皂苷5mg。
△第三組 從一側(cè)耳緣注射生理鹽水1ml。每組連續(xù)三天，每天都從同一耳緣注射，第四天將動(dòng)物處死，剪下給藥耳，觀察對耳朵刺激反應(yīng)，并做病理切片檢查。
結(jié)果△第一組為賴氨酸總七葉皂苷注射組，三只動(dòng)物耳緣靜脈均未見明顯的刺激反應(yīng)，病理切片觀察結(jié)果基本與生理鹽水組相似，未見變性、壞死及明顯病理異常。
△第二組為精氨酸總七葉皂苷注射組，三只家兔耳緣靜脈明顯充血，周圍紅腫，耳根水腫，病理切片表明有嚴(yán)重變性和壞死情況。
△第三組為注射生理鹽水組，三只家兔耳緣靜脈均未見有明顯刺激反應(yīng)。病理切片顯示血管及血管周圍的細(xì)胞基本正常，未見病理異常情況。
結(jié)論 賴氨酸總七葉皂苷的血管刺激作用明顯輕于精氨酸總七葉皂苷。
3、精氨酸七葉皂苷的LD50測定結(jié)果表28精氨酸總七葉皂苷的LD50測定結(jié)果

Y＝2.36X+2.83；LD50＝6.68(4.75～9.39mg.kg-1，p＝0.95)表29精氨酸β-七葉皂苷的LD50測定結(jié)果

Y＝4.10X+1.78；LD50＝6.11mg.kg-1(7.73～4.82mg.kg-1，p＝0.95)表30精氨酸異七葉皂苷的LD50

Y＝5.75-3.35X LD50＝28.37mg.kg-1(33.35～24.13mg.kg-1)4、七葉皂苷賴氨酸鹽與精氨酸藥理、毒理比較表31賴氨酸七葉皂苷鹽與精氨酸七葉皂苷鹽的比較


可見，賴氨酸七葉皂苷鹽與精氨酸七葉皂苷鹽有相類似的LD50，而賴氨酸鹽抗炎活性明顯高于精氨酸鹽，且賴氨酸鹽的相對治療指數(shù)顯著大于精氨酸鹽，而精氨酸鹽七葉皂苷的血管刺激反應(yīng)顯著大于其賴氨酸鹽，故賴氨酸七葉皂苷鹽更為安全有效?？赡苡捎诰彼嵩贜O合成酶作用下釋放NO，使機(jī)體的血管擴(kuò)張，可降低高血壓患者的血壓，解除冠心病患者的心肌痙攣和心血管的痙孿等治療作用。但NO會抑制線粒體產(chǎn)生能量，從而導(dǎo)致細(xì)胞死亡(福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2003，37(1)23～25；PediatrRes 1995，38(4)652～656)，在其它疾病的病理過程中起著負(fù)面影響，如NO在腦缺血發(fā)病過程中以及心肌缺血和腦組織缺血再灌注過程中，可損傷組織和細(xì)胞(Strke1993，24(8)，1709～1716；中國醫(yī)院藥學(xué)雜志，2005，25(6)485～487)。另外，NO具氧自由基性質(zhì)，本身有致炎作用。
綜上所述賴氨酸總七葉皂苷和賴氨酸β-七葉皂苷均是具有高治療指數(shù)，低肌肉刺激、無血管刺激的優(yōu)良藥物。它們保持了七葉皂苷所有有用的藥理性質(zhì)。而當(dāng)用谷胱甘肽為載體時(shí)，可進(jìn)一步提高賴氨酸總七葉皂苷的LD50，降低其毒性，并使治療指數(shù)擴(kuò)大到28.4。當(dāng)用鹽酸賴氨酸為載體時(shí)，可提高賴氨酸總七葉皂苷對腦水腫的抑制率由42.6％提高到82.0％。而賴氨酸鹽的抗炎抗?jié)B出活性明顯優(yōu)于精氨酸鹽，而血管刺激反應(yīng)顯著低于精氨酸鹽，賴氨酸七葉皂苷更為安全有效的藥物。
權(quán)利要求
1.一種賴氨酸β-七葉皂甙化合物，所述化合物具有下面結(jié)構(gòu)式(I)所示的結(jié)構(gòu)，
2.一種賴氨酸異七葉皂甙化合物，所述化合物具有下面結(jié)構(gòu)式(II)所示的結(jié)構(gòu)，
3.一種賴氨酸總七葉皂甙，所述的賴氨酸總七葉皂甙主要由權(quán)利要求1所述的賴氨酸β-七葉皂甙和權(quán)利要求2所述的賴氨酸異七葉皂甙組成。
4.如權(quán)利要求3所述的賴氨酸總七葉皂甙，其中所述的賴氨酸總七葉皂甙中賴氨酸β-七葉皂甙和賴氨酸異七葉皂甙的重量比為3-9∶7-1，較好的為5-8∶5-2，優(yōu)選5∶5～6∶4，特別優(yōu)選為6∶4。
5.一種制備賴氨酸七葉皂甙的方法，包括以下步驟1)將原料β-七葉皂甙、異七葉皂甙或總七葉皂甙溶解，優(yōu)選溶解過程為在β-七葉皂甙、異七葉皂甙或總七葉皂甙粉末中加入蒸餾水，再加入L-賴氨酸至溶液澄清；2)用L-賴氨酸溶液調(diào)節(jié)pH值至5.0～7.5后，加入乙醇至溶液的含醇量達(dá)到至少70％，優(yōu)選達(dá)到至少80％；3)將步驟2)所得到的產(chǎn)物進(jìn)行濃縮，在濃縮液中加入無水乙醇得到混合物，處理該混合物得到七葉皂甙的賴氨酸鹽。
6.如權(quán)利要求5所述的制備方法，其中步驟2)中用L-賴氨酸溶液調(diào)節(jié)pH值至5.0～7.0，優(yōu)選為5.0～6.0，特別是約5.5。
7.如權(quán)利要求5所述的制備方法，其中步驟3)中通過真空干燥的方法進(jìn)行濃縮。
8.如權(quán)利要求5或7所述的制備方法，其中步驟3)中濃縮的溫度條件控制在50℃以下，優(yōu)選40℃以下。
9.如權(quán)利要求5所述的制備方法，其中步驟3)中處理該混合物的方法為冷藏放置析晶、冷凍干燥或噴霧干燥直接得到賴氨酸鹽的粉末。
10.權(quán)利要求1-2中任意一項(xiàng)所述化合物在制備藥物中的用途。
11.權(quán)利要求3-4中任意一項(xiàng)所述賴氨酸總七葉皂甙在制備藥物中的用途。
12.如權(quán)利要求10或11所述的用途，其中所述藥物是一種低刺激、高治療指數(shù)的抗炎抗?jié)B出改善血液循環(huán)的藥物。
13.如權(quán)利要求10或11所述的用途，其中所述藥物用于治療腦水腫，創(chuàng)傷性水腫，靜脈回流障礙、燒傷、手術(shù)后腸功能恢復(fù)、肺部急性炎癥或水腫。
14.如權(quán)利要求10或11所述的用途，其中所述藥物用于治療、處理外傷的傷口。
15.如權(quán)利要求10或11所述的用途，其中所述藥物中含有谷胱甘肽、鹽酸賴氨酸、人白蛋白或甘露醇中的一種或幾種作為藥物載體。
16.如權(quán)利要求15所述的用途，其中所述藥物載體為谷胱甘肽或鹽酸賴氨酸。
17.如權(quán)利要求16所述的用途，其特征在于所述谷胱甘肽或鹽酸賴氨酸與β-七葉皂苷賴氨酸鹽、異七葉皂苷賴氨酸鹽或賴氨酸總七葉皂苷的的重量比為3～10∶1，優(yōu)選6∶1。
18.一種藥物組合物，其中含有權(quán)利要求1或2中任意一項(xiàng)所述的化合物和藥學(xué)上可接受的載體。
19.一種藥物組合物，其中含有權(quán)利要求3-4中任意一項(xiàng)所述的賴氨酸總七葉皂甙和藥學(xué)上可接受的載體。
20.如權(quán)利要求18或19所述的藥物組合物，其中所述組合物中含有谷胱甘肽、鹽酸賴氨酸、人白蛋白或甘露醇中的一種或幾種作為藥物載體。
21.如權(quán)利要求20所述的藥物組合物，其中所述組合物中含有谷胱甘肽或鹽酸賴氨酸作為藥物載體。
22.如權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其特征在于所述谷胱甘肽或鹽酸賴氨酸與β-七葉皂苷賴氨酸鹽、異七葉皂苷賴氨酸鹽或賴氨酸總七葉皂苷的重量比為3～10∶1，優(yōu)選為6∶1。
23.如權(quán)利要求18或19所述的藥物組合物，其中所述藥物組合物的劑型為片劑、膠囊劑、丸劑、口服液體制劑、顆粒劑、散劑或注射劑。
24.如權(quán)利要求18或19所述的藥物組合物，其中所述藥物組合物的劑型為外用制劑，優(yōu)選為噴霧劑、膜劑、凝膠劑或貼劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及賴氨酸七葉皂苷化合物的制備、制備方法、用途及其組合物的優(yōu)選。該類藥物組合物含有β－七葉皂苷賴氨酸鹽、異七葉皂苷賴氨酸鹽或其二者的混合物(即賴氨酸總七葉皂苷)和/或藥學(xué)上可以接受的載體。本發(fā)明的賴氨酸七葉皂苷較臨床使用的七葉皂苷鈉具有更好的抗炎、抗?jié)B出活性，其治療指數(shù)約是七葉皂苷鈉2～5倍，且成倍提高對腦水腫的抑制率；而具有更低毒性，對肌肉僅有輕微刺激作用，不會引起血管靜脈炎。賴氨酸七葉皂苷不僅提高了用藥安全性，并具有改善血液循環(huán)和增加靜脈張力的作用。
文檔編號A61K9/08GK1896092SQ20051010558
公開日2007年1月17日 申請日期2005年9月29日 優(yōu)先權(quán)日2005年7月15日
發(fā)明者李信炯, 林范天, 張麗新, 馬全發(fā), 劉偉, 馮宇, 董元偉, 陳伯安, 程正達(dá), 趙云霞, 施冬梅, 段術(shù)生, 陳平, 燕英 申請人:武漢愛民制藥有限公司, 李信炯