專利名稱：羥乙基淀粉的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種羥乙基淀粉和制備這種羥乙基淀粉的方法。此外，本發(fā)明涉及一種含有羥乙基淀粉的藥劑，這種藥劑用于制備容量代用品，血漿代用品或血漿增容劑的用途，以及這種藥劑用于保持血量正常和/或用于改進(jìn)大循環(huán)和微循環(huán)和/或用于改進(jìn)營(yíng)養(yǎng)氧供應(yīng)和/或用于穩(wěn)定血液動(dòng)力學(xué)和/或用于改進(jìn)容量效率和/或用于降低血漿粘度和/或用于提高耐貧血癥性和/或用于在被擾亂的血液供應(yīng)和動(dòng)脈、特別是外周動(dòng)脈性閉塞病中進(jìn)行血液稀釋、特別是治療性血液稀釋的用途。
在預(yù)防和治療血容量過低中使用血管內(nèi)液是最重要的措施，而不管是否血容量過低是否因在大循環(huán)和微循環(huán)(如膿血癥)間被擾亂的分布或因血管舒張(例如，在麻醉開始期間)而造成的血液或體液立即損失(在出血，外傷，手術(shù)，燒傷)。適于這種癥狀的灌輸液被認(rèn)為可以恢復(fù)血量正常并保持灌注重要器官和外周血流。同時(shí)，這種溶液必須不能過度地壓迫循環(huán)，并且它們必須沒有副作用。就這一點(diǎn)而言，目前使用的所有容量代用品都有優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)。盡管所謂的晶體溶液(電解質(zhì)溶液)基本上沒有立即的副作用，但它們僅能保證血管內(nèi)容量和血液動(dòng)力學(xué)在短期內(nèi)穩(wěn)定，并且穩(wěn)定不充分。在明顯或持續(xù)血容量過低的情況下，必須灌輸過量晶體溶液，因?yàn)樗鼈儾荒苋勘Ａ粼谘軆?nèi)，而是快速地在血管外空間中消散。然而，快速流進(jìn)血管外空間不僅限制了晶體溶液的循環(huán)填充作用，而且有發(fā)生外周和肺水腫的可能。除了出現(xiàn)肺水腫的致命威脅外，還導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)氧供應(yīng)的惡化，這也受到外周水腫的影響。
相比而言，膠體容量代用品，不管其中所含的膠體是天然來源還是合成來源的，都具有更可靠的作用。這是由于如下原因因?yàn)槟z體具有膠體-滲透作用，所以與晶體相比，它們可以在循環(huán)中保留供應(yīng)的液體更久，這樣可防止液體流進(jìn)空隙中。另一方面，與晶體溶液相比，膠體容量代用品引起更高程度的不需要的反應(yīng)。這樣，天然膠體清蛋白，如所有的血液或血漿衍生物，都有被病毒疾病感染的可能；此外，可以與其他藥物相互作用，例如，ACE抑制劑；最后，清蛋白的實(shí)用性受到限制，并且它作為容量代用品的用途不成比例地昂貴。清蛋白用作容量代用品的其他疑問是從外部加入時(shí)清蛋白內(nèi)生合成的抑制以及易于外血管化。這意味著從循環(huán)進(jìn)入血管外空間，并在那里由于清蛋白的膠體-滲透作用發(fā)生不需要的和持續(xù)的液體積聚。
在合成膠體中，嚴(yán)重過敏反應(yīng)和血凝物的嚴(yán)重抑制使右旋糖苷制劑在治療中幾乎完成消失。盡管羥乙基淀粉(HES)溶液也有引發(fā)過敏反應(yīng)和影響血凝物的可能，但是與右旋糖苷相比，這種可能程度更小。與右旋糖苷相比，使用HES溶液時(shí)幾乎觀察不到嚴(yán)重過敏反應(yīng)(嚴(yán)重度III和IV的反應(yīng))，并且近年來通過進(jìn)一步研究HES溶液，高分子量HES溶液固有的對(duì)血凝物的影響也明顯降低。與明膠溶液(也用作血漿代用品并且基本上不影響血凝物)相比，至少高和中分子量實(shí)施方案的HES溶液具有更長(zhǎng)血漿停留時(shí)間和有效性的優(yōu)點(diǎn)。
EP-A-0 402 724公開了一種羥乙基淀粉的制備和用途，其平均分子量Mw為60,000～600,000，摩爾取代MS為0.15～0.5，和取代度DS為0.15～0.5。其中披露了快速(6～12小時(shí))和完全降解羥乙基淀粉，并用作血漿增容劑。在平均分子量為100,000～300,000的優(yōu)選范圍內(nèi)，明確測(cè)試了平均分子量為234,000的羥乙基淀粉。
US-A-5,502,043公開了羥乙基淀粉用于改進(jìn)外周動(dòng)脈閉塞病中的大循環(huán)的用途，其平均分子量Mw為110,000～150,000，摩爾取代MS為0.38～0.5，和取代度DS為0.32～0.45。此外，該文獻(xiàn)教導(dǎo)了使用低分子量(Mw 110,000～150,000)羥乙基淀粉，由于低分子量，這種羥乙基淀粉使血漿粘度低，并確保改進(jìn)血流中的大循環(huán)。然而，該文獻(xiàn)中反對(duì)使用較高分子量羥乙基淀粉，如Mw為500,000的羥乙基淀粉，因?yàn)樗鼈儠?huì)提高血漿粘度，從而盡管它們較低的摩爾取代(MS＝0.28)也會(huì)惡化大循環(huán)。
在世界范圍內(nèi)，目前使用不同的HES制劑作為膠體容量代用品，并主要通過分子量來區(qū)分，也通過與羥乙基的醚化程度和其他參數(shù)來區(qū)分。最具有低表性的這類物質(zhì)是所謂的Heta淀粉(HES 450/0.7)和Penta淀粉(HES 200/0.5)。后都是當(dāng)前最廣泛使用的″標(biāo)準(zhǔn)HES″。此外，HES 200/0.62和HES 70/0.5也有一點(diǎn)作用。涉及到分子量和涉及到其他參數(shù)的公開信息是平均量，其中分子量是以道爾頓計(jì)的重均(Mw)值(例如，HES 200,000)或簡(jiǎn)寫作千道爾頓(例如，HES 200)。與羥乙基的醚化程度以摩爾取代MS表征(例如，在HES 200/0.5為0.5；MS＝羥乙基與脫水葡萄糖單元的平均摩爾比)，或以取代度表征(DS＝單或多羥乙基化的葡萄糖與總脫水葡萄糖單元的比)。根據(jù)分子量，在臨床應(yīng)用中將HES溶液分成高分子量(450kD)，中分子量(200-250kD)和低分子量(70-130kD)制劑。
至于HES溶液的凝結(jié)作用，分成非特異性和特異性影響。對(duì)血凝物的非特異性影響是對(duì)血液進(jìn)行稀釋(血液稀釋)的結(jié)果，這在將溶液和其他容量代用品灌輸進(jìn)循環(huán)中時(shí)出現(xiàn)。這種血液稀釋也影響凝結(jié)因子，其濃度隨灌輸而對(duì)血液和血漿蛋白的稀釋程度和時(shí)間而下降。相應(yīng)地，較大或持續(xù)作用可以導(dǎo)致低凝結(jié)，這可以實(shí)驗(yàn)室診斷檢測(cè)到，并且在極端情況下，是臨床相關(guān)的。
此外，羥乙基淀粉可以對(duì)血凝物產(chǎn)生特異性影響，并對(duì)幾種因子起作用。因而，在某些條件下或在使用某些HES制劑時(shí)，發(fā)現(xiàn)凝結(jié)蛋白因子VIII(F VIII)和血管性血友病因子(vWF)下降，并且由于血液稀釋的原因大于血漿蛋白的常見降低。這種比預(yù)期更大的降低是否因FVIII/vWF的形成下降或釋放所引起的，如因HES對(duì)血管內(nèi)皮的涂覆作用或其他機(jī)制所引起的，還不十分清楚。
然而，HES不僅影響所述凝結(jié)因子的濃度，而且也影響血小板功能。這完全或部分地由于HES與血小板表面結(jié)合的原因，從而抑制配體進(jìn)入血小板的纖維蛋白原受體。
當(dāng)使用高分子量HES(例如，HES 450/0.7)時(shí)，盡管它們沒有起到中分子量(例如，HES 250/0.5)或低分子量HES(例如，HES 130/0.4或HES 70/0.5)那樣的大作用，但是HES對(duì)血凝物的特異性作用特別明顯(J.Treib等人，Intensive Care Med.(1999)，pp.258～268；0.Langeron等人，Anesth.Analg.(2001)，pp.855～862；R.G.Strauss等人，Transfusion(1988)，pp.257-260；M.Jamnicki等人，Anesthesiology(2000)，pp.1231～1237)。
如果將高分子量HES的風(fēng)險(xiǎn)分布與中和低分子量制劑相比，后者的風(fēng)險(xiǎn)明顯降低，即不僅與血凝物相互作用，而且具有特定的藥物動(dòng)力學(xué)性能。因此，高分子量HES溶液在循環(huán)中表現(xiàn)出較高的積聚，盡管這種缺點(diǎn)在中分子量HES中降低，并且在低分子量制劑中基本上不存在積聚。低分子量HES溶液如HES 130/0.4中沒有更多積聚的事實(shí)是一種相關(guān)治療過程，因?yàn)镠ES的血漿水平不能在臨床途徑中檢測(cè)到，因此沒有發(fā)現(xiàn)在數(shù)天內(nèi)用高分子量溶液得到的極端濃度。在這種情況下，使用者不能知道在循環(huán)中積聚的″殘余HES″量，但仍然影響額外灌輸?shù)腍ES的動(dòng)力學(xué)和行為，在循環(huán)中仍存在不清楚的量。因此，現(xiàn)有技術(shù)中高分子量HES的作用不可計(jì)算；在大多數(shù)情況下，出于治療原因，在循環(huán)中比所需要的或所期望的持續(xù)時(shí)間更長(zhǎng)，并且代謝過程不清楚。
相比而言，在灌輸后的約20～24小時(shí)內(nèi)低分子量HES完全從循環(huán)中消失。這避免了積壓作用，并且不發(fā)生積聚，特別是對(duì)于反復(fù)灌輸而言。與高分子量淀粉相比，低分子量淀粉的藥物動(dòng)力學(xué)行為是可計(jì)算的，因此易于控制。在循環(huán)中沒有出現(xiàn)過高負(fù)載或清除機(jī)制。
然而，與高分子量制劑相比，低分子量HES的行為是有利的，其血漿半衰期明顯較短。低分子量HES的血漿半衰期僅約為HES 200的一半或更少(J.Waitzinger等人，Clin.Drug Invest.(1998)，pp.151～160)，并且在明膠制劑的半衰期范圍內(nèi)，而明膠制劑被定級(jí)為決定性的短期效力。盡管容量代用品的短半衰期不利于分類，因?yàn)橥ㄟ^更頻繁或更高劑量地給予容量代用品可以進(jìn)行補(bǔ)償，但是在嚴(yán)重或持續(xù)血容量過低中，短半衰期和短有效期的容量代用品可能導(dǎo)致循環(huán)填充不足(更象晶體溶液)，或者，在相應(yīng)地提高劑量以補(bǔ)償這種缺點(diǎn)時(shí)，間質(zhì)液可能過載。
在這種背景之下，需要一種容量代用品，一方面其積聚趨勢(shì)低和對(duì)血凝物的影響低(如低分子量HES)，另一方面，與低分子量HES溶液相比，半衰期更長(zhǎng)，其性能接近于晶體溶液。
目前正在尋找具有這種性能的羥乙基淀粉，已發(fā)現(xiàn)與已知低分子量HES溶液相比具有更長(zhǎng)血漿半衰期的羥乙基淀粉HES溶液，這些可以被制備，并且令人驚訝地是，本發(fā)明的高分子量溶液沒有現(xiàn)有高分子量溶液的缺點(diǎn)，如在循環(huán)中積聚的性能或?qū)ρ锩黠@的抑制。
因此，在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種羥乙基淀粉，其平均分子量Mw大于或等于500,000，摩爾取代MS為0.25～0.5，優(yōu)選0.35～0.50(0.35≤MS≤0.50)，和C2/C6比為2～小于8。
本發(fā)明的羥乙基淀粉受摩爾取代MS影響。摩爾取代MS定義作每個(gè)脫水葡萄糖單元的羥乙基的平均數(shù)量(Sommermeyer等人，Krankenhauspharmazie(1987)，pp.271～278)。摩爾取代可以根據(jù)Ying-Che Lee等人，Anal.Chem.(1983)55，334，和K.L.Hodges等人，Anal.Chem.(1979)51，2171進(jìn)行測(cè)定。在此方法中，通過加入二甲苯中的己二酸和氫碘酸(HI)使已知量的HES進(jìn)行醚解。隨后，使用內(nèi)標(biāo)(甲苯)和外標(biāo)(碘乙烷校準(zhǔn)溶液)，通過氣相色譜量化釋放的碘乙烷。摩爾取代MS影響本發(fā)明的羥乙基淀粉的作用。如果MS選擇的過高，那么當(dāng)羥乙基淀粉用作容量代用品時(shí)，可能在循環(huán)中引起積聚作用。另一方面，如果MS選擇的過低，這會(huì)使羥乙基淀粉在循環(huán)中降解過快，從而降低所需的血漿半衰期時(shí)間。有利的摩爾取代MS為0.35～0.5(0.35≤MS≤0.50)，優(yōu)選為0.39～小于或等于0.45(0.39≤MS≤0.45)，特別是MS大于0.4～0.44(0.4＜MS≤0.44)。
本發(fā)明的羥乙基淀粉屬于高分子量羥乙基淀粉，優(yōu)選其平均分子量(Mw)為大于600,000～1,500,000，更優(yōu)選620,000～1,200,000，特別是700,000～1,000,000。由于制備條件的原因，羥乙基淀粉不是處于均勻分子量的物質(zhì)形式，而是不同大小的分子混合物的形式，并且也羥乙基的取代也不相同。因此，這種混合物的表征需要借助于統(tǒng)計(jì)平均量。因此，使用重均分子量(Mw)來表征平均分子量，這種平均值的一般定義陳述于Sommermeyer等人，Krankenhauspharmazie(1987)，pp.271～278中。
可以使用GPC柱TSKgel G 6000PW，G 5000PW，G 3000PW和G 2000PW(7.5mm×30cm)，MALLS檢測(cè)器(DAWN-EOS；WyattDeutschland GmbH，Woldert)和RI檢測(cè)器(Optilab DSP；WyattDeutschland GmbH，Woldert)，利用GPC-MALLS進(jìn)行分子量測(cè)定，其中流速為1.0ml/分鐘，50mM磷酸鹽緩沖液，pH7.0。使用ASTRA軟件(Wyatt Deutschland GmbH，Woldert)進(jìn)行分析。
優(yōu)選的是從天然或部分水解的谷類或馬鈴薯淀粉得到的羥乙基淀粉。由于支鏈淀粉含量較高，因此使用從相應(yīng)植物的蠟質(zhì)品種(存在時(shí)(例如，蠟質(zhì)玉米，蠟質(zhì)大米))得到的淀粉是特別優(yōu)選的。
本發(fā)明的羥乙基淀粉還用在脫水葡萄糖單元的C2取代與C6取代的比描述。在本發(fā)明內(nèi)這種比例也簡(jiǎn)寫作C2/C6比，是指在羥乙基淀粉的2位取代的脫水葡萄糖單元的數(shù)量與在羥乙基淀粉的6位取代的脫水葡萄糖單元的數(shù)量的比。HES的C2/C6比可以根據(jù)羥乙基化中所用的氫氧化鈉水溶液的量大范圍的變化，如表1和表2所示。使用的NaOH量越高，淀粉的脫水葡萄糖中6位的羥基被羥乙基化活化的程度越大。因此，隨著NaOH濃度增大，羥乙基化中的C2/C6比下降。測(cè)定按Sommermeyer等人，Krankenhauspharmazie(1987)，pp.271～278所述的進(jìn)行。使用給定順序的增大，C2/C6比優(yōu)選為3～小于8，2～7，3～7，2.5～小于或等于7，2.5～6，或4～6。在本發(fā)明的較高分子量HES中，C2/C6比是實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的的另一貢獻(xiàn)。
由于在人或動(dòng)物有機(jī)體中優(yōu)異的耐受性和易于降解性，本發(fā)明的羥乙基淀粉適用于各種藥劑中。
在特別的實(shí)施方案中，本發(fā)明的HES其平均分子量為700,000～1,000,000，摩爾取代為大于0.4～0.44(0.4＜MS≤0.44)，和C2/C6比為2～7，優(yōu)選3～7，特別是2.5～6。
本發(fā)明還涉及制備羥乙基淀粉的方法，優(yōu)選制備本發(fā)明的羥乙基淀粉。優(yōu)選地，該方法包括如下步驟(i)使懸浮于水中的淀粉，優(yōu)選玉米淀粉，更優(yōu)選地部分水解的，所謂的稀糊，蠟質(zhì)玉米淀粉，與環(huán)氧乙烷反應(yīng)；和(ii)使用酸、優(yōu)選鹽酸部分水解得到的淀粉衍生物，直到羥乙基淀粉到達(dá)所需的平均分子量范圍。
原則上，所有已知淀粉都適于制備本發(fā)明的羥乙基淀粉，主要是天然或部分水解的淀粉，優(yōu)選谷類或馬鈴薯淀粉，特別是具有高含量支鏈淀粉的那些。在本發(fā)明方法的特別實(shí)施方案中，使用蠟質(zhì)品種的淀粉，特別是蠟質(zhì)玉米和/或蠟質(zhì)大米。在特別實(shí)施方案中，通過使懸浮于水中的谷類和/或馬鈴薯淀粉，優(yōu)選稀糊蠟質(zhì)玉米淀粉，與環(huán)氧乙烷反應(yīng)，來制備HES。有利的是，通過加入堿化劑催化反應(yīng)，優(yōu)選堿金屬氫氧化物，例如，氫氧化鈉或氫氧化鉀。因此，在本發(fā)明方法的優(yōu)選實(shí)施方案中，還將堿化劑，優(yōu)選氫氧化鈉，加到懸浮于水中的淀粉中。堿化劑加到懸浮淀粉中的方式，優(yōu)選使得堿化劑與淀粉的摩爾比大于0.2，優(yōu)選為0.25～1，特別是0.3～0.8。通過在羥乙基化步驟中環(huán)氧乙烷與淀粉的比，可以在所需MS范圍內(nèi)任意地控制摩爾取代，即羥乙基與脫水葡萄糖單元的摩爾比。優(yōu)選地，環(huán)氧乙烷和懸浮的淀粉間的反應(yīng)在30～70℃下進(jìn)行，優(yōu)選35～45℃。通常，在反應(yīng)后除去任何殘余的環(huán)氧乙烷。在反應(yīng)后的第二步驟中，衍生的淀粉進(jìn)行酸性部分水解?！宀糠炙狻逯傅矸鄣摩?糖苷互聯(lián)的葡萄糖單元的水解。原則上，本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟悉的所有酸都可用于酸水解，但優(yōu)選是無機(jī)酸，特別是鹽酸。水解也可以使用市售淀粉酶在酶作用下進(jìn)行。
在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的方法還包括如下步驟(iii)滅菌過濾和可選擇地(iv)超濾。如果在本發(fā)明方法中進(jìn)行上述過濾，那么原料HES的酸性部分水解被進(jìn)行到平均分子量略低于所需的目標(biāo)分子量。通過超濾，可以除去低分子量反應(yīng)副產(chǎn)物，主要是乙二醇，由于低分子量HES成分的部分去除，平均分子量略有增加。
優(yōu)選地，衍生于制備方法的溶液隨后稀釋到所需HES濃度，通過加入鹽調(diào)節(jié)到所需滲透壓力，進(jìn)行滅菌過濾，并加到適合容器中?？蛇x擇地，可以進(jìn)行滅菌，優(yōu)選通過流通蒸汽。
因此，本發(fā)明還涉及一種含有一種或多種本發(fā)明的羥乙基淀粉的藥劑。原則上，本發(fā)明的藥劑可以是任何可能的劑型。在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥劑可以靜脈內(nèi)注射或灌輸。因此，藥劑優(yōu)選是水溶液或膠體水溶液形式。優(yōu)選地，制劑所含的本發(fā)明的羥乙基淀粉濃度達(dá)到20％，更優(yōu)選0.5～15％，更優(yōu)選2～12％，特別是4～10％，例如，6％。
除非另有所指，各量以％計(jì)，在本發(fā)明范圍內(nèi)應(yīng)被理解成指g/100ml溶液。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥劑還含有氯化鈉，優(yōu)選0.6～2％，更優(yōu)選0.9％。氯化鈉的0.9％水溶液也稱作″生理鹽水″。其具有與血清相同的滲透壓，因此適于用作靜脈注射或灌輸?shù)牡葷B壓溶液。任何其他滲透有效物質(zhì)都可用于等滲透作用，只要它們是生理安全的并且具有良好耐受性，如葡萄糖，葡萄糖取代物(果糖，山梨糖醇，木糖醇)或甘油。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，藥劑還可含有調(diào)節(jié)血漿的電解質(zhì)。這種等滲壓制劑的制備對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員是已知的。具有調(diào)節(jié)血漿的電解質(zhì)的等滲壓溶液的例子是所謂的Tyrode溶液。其在100ml蒸餾水中含有0.8g NaCl，0.02g KCl，0.02g CaCl2，0.01g MgCl2，0.005g NaH2PO4，0.1g NaHCO3和0.1g葡萄糖。另一個(gè)例子是所謂的Ringer溶液，其含有0.8％氯化鈉，0.02％氯化鉀，0.02％氯化鈣和0.1％碳酸氫鈉。當(dāng)然，電解質(zhì)的陰離子也可以被能夠代謝的陰離子代替；因此，例如，Ringer溶液中的碳酸氫鈉可以被0.3或0.6％的乳酸鈉代替。本領(lǐng)域技術(shù)人員將相應(yīng)的電解質(zhì)組合物或溶液稱作″Ringer乳酸鹽″?？梢詥为?dú)使用或混合使用的能夠代謝的陰離子是乙酸鹽(例如，″Ringer乙酸鹽″)或蘋果酸鹽。
在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，藥劑也可以是高滲溶液形式。高滲溶液是比人血具有更高滲透壓的溶液。在某些臨床癥狀中使用高滲藥劑是有利的。通過加入相應(yīng)量的滲透有效物質(zhì)，例如，氯化鈉，調(diào)節(jié)高滲溶液的所需滲透壓，為此其濃度可達(dá)到7.5％和更大。
為避免并減小感染的可能，本發(fā)明的藥劑優(yōu)選進(jìn)行滅菌過濾或熱滅菌。對(duì)本發(fā)明的含水或膠體含水藥劑特別適合的滅菌過濾是細(xì)孔過濾柱，如以商品名SARTPORE由Sartorius公司提供的那些。例如，孔徑為0.2μm的過濾柱是適合的。此外，本發(fā)明的藥劑還可進(jìn)行熱滅菌，而對(duì)羥乙基淀粉沒有不利影響。優(yōu)選地，熱滅菌在高于100℃的溫度下進(jìn)行，更優(yōu)選105～150℃，特別是110～130℃，例如，121℃，進(jìn)行達(dá)到30分鐘，優(yōu)選達(dá)到25分鐘，特別是18～22分鐘。
在優(yōu)選的實(shí)施方案中，藥劑是容量代用品。容量代用品用于代替動(dòng)物和人有機(jī)體中的血管內(nèi)液。容量代用品特別用于血容量過低的預(yù)防和治療中。血容量過低是否起因于血液或體液的立即損失，如在急性出血，外傷，手術(shù)，燒傷等中，或起因于大循環(huán)和微循環(huán)間的被擾亂的分布，如在膿血癥中，或起因于血管舒張，如在麻醉開始期間，這不是關(guān)鍵的。容量代用品進(jìn)一步分成所謂的血漿代用品和所謂的血漿增容劑。對(duì)于血漿代用品，血管內(nèi)應(yīng)用的試劑體積與供應(yīng)到血管的體積相應(yīng)。相比而言，對(duì)于血漿增容劑，血管內(nèi)應(yīng)用的膨脹劑液體體積低于實(shí)際供應(yīng)到血管的體積。這種現(xiàn)象是由于使用血漿增容劑擾亂了血管內(nèi)和血管外空間之間的腫脹平衡，并且額外的液體體積從血管外空間流進(jìn)待治療的血管系統(tǒng)。
血漿增容劑與血漿代用品的區(qū)別基本上如下其中所含的本發(fā)明的羥乙基淀粉的濃度增大，和/或各電解質(zhì)的濃度引起腫脹和/或滲透不平衡。
本發(fā)明的藥劑還可含有藥學(xué)活性成分或活性成分的組合物，從而用作給予其中所含的活性成分的介質(zhì)，特別是通過注射和灌輸給予。
本發(fā)明還涉及本發(fā)明的藥劑用于制備容量代用品或血漿代用品或血漿增容劑的用途。
更優(yōu)選地，本發(fā)明的藥劑可用作容量代用品或血漿代用品或血漿增容劑。優(yōu)選地，這種藥劑用于保持血量正常。保持血量正常對(duì)于血液動(dòng)力學(xué)穩(wěn)定性是特別重要的，這對(duì)于人或動(dòng)物有機(jī)體有重要影響，例如，在血壓，排尿速率或心率方面。為了盡快地補(bǔ)償血管內(nèi)液體損失和恢復(fù)血量正常，本發(fā)明的藥劑是特別有利的，因?yàn)榕c現(xiàn)有技術(shù)中的血漿代用品相比，特別是低分子量HES溶液，如HES 130/0.4，它們具有更長(zhǎng)的血漿半衰期，特別是在灌輸后的關(guān)鍵階段中。本發(fā)明的藥劑也是特別有利的，因?yàn)榱钊梭@訝的發(fā)現(xiàn)，在使用這種組合物時(shí)，與U.S.5,502,043中所述的高分子量HES相比，血液和/或血漿粘度沒有增大，并且也因?yàn)榕c其他高分子量制劑相比，血凝物受到的抑制較少。血漿粘度令人驚訝地沒有增大的事實(shí)也改進(jìn)了大循環(huán)和改進(jìn)了向血管的營(yíng)養(yǎng)氧供應(yīng)。
本發(fā)明還涉及本發(fā)明的藥劑用于保持血量正常和/或用于改進(jìn)大循環(huán)和微循環(huán)和/或用于改進(jìn)營(yíng)養(yǎng)氧供應(yīng)和/或用于穩(wěn)定血液動(dòng)力學(xué)和/或用于改進(jìn)容量效率和/或用于降低血漿粘度和/或用于提高耐貧血癥性和/或用于在被擾亂的血液供應(yīng)和動(dòng)脈、特別是外周動(dòng)脈性閉塞病中進(jìn)行血液稀釋、特別是治療性血液稀釋的用途。
本發(fā)明的藥劑或本發(fā)明的羥乙基淀粉優(yōu)選用于制備藥物，特別是用于保持血量正常和/或用于改進(jìn)大循環(huán)和微循環(huán)和/或用于改進(jìn)營(yíng)養(yǎng)氧供應(yīng)和/或用于穩(wěn)定血液動(dòng)力學(xué)和/或用于改進(jìn)容量效率和/或用于降低血漿粘度和/或用于提高耐貧血癥性和/或用于在被擾亂的血液供應(yīng)和動(dòng)脈、特別是外周動(dòng)脈性閉塞病中進(jìn)行血液稀釋、特別是治療性血液稀釋的藥物。
此外，本發(fā)明的藥劑或本發(fā)明的羥乙基淀粉優(yōu)選用于處理保持血量正常和/或用于改進(jìn)大循環(huán)和微循環(huán)和/或用于改進(jìn)營(yíng)養(yǎng)氧供應(yīng)和/或用于穩(wěn)定血液動(dòng)力學(xué)和/或用于改進(jìn)容量效率和/或用于降低血漿粘度和/或用于提高耐貧血癥性和/或用于在被擾亂的血液供應(yīng)和動(dòng)脈、特別是外周動(dòng)脈性閉塞病中進(jìn)行血液稀釋、特別是治療性血液稀釋的方法中。
本發(fā)明還涉及一種藥盒，單獨(dú)地包括(i)本發(fā)明的羥乙基淀粉；(ii)無菌溶液，優(yōu)選氯化鈉溶液；和可選擇地(iii)藥學(xué)活性成分或活性成分組合物。
在優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥盒包括在多隔室袋中的分開的隔室內(nèi)的各成分(i)，(ii)和可選擇地(iii)，其中所有成分可以分離，或某些成分，如(i)和(ii)，可以包括在一個(gè)容器中。
通過下面實(shí)施例進(jìn)一步闡述本發(fā)明。
HES原料的制備實(shí)施例實(shí)施例1制備具有相同MS和C2/C6比但不同分子量的HES原料通過部分水解從一次反應(yīng)料制備體內(nèi)研究的實(shí)驗(yàn)部分中所述的HES物質(zhì)。為此，采用下面的過程。劇烈攪拌下，將30kg稀糊蠟質(zhì)玉米淀粉懸浮在室溫下的52.2kg wfi(注射用水)中。為了優(yōu)化水合淀粉，隨后通過將懸浮液加熱到至少85℃進(jìn)行凝膠化。通過噴入氮?dú)?0min，然后抽空，反復(fù)惰化懸浮液，通過加入5.1kg NaOH使淀粉活化。隨后，將液體形式的4.159kg冷環(huán)氧乙烷加到反應(yīng)器中，溫度緩慢升至40℃，反應(yīng)混合物在此溫度下放置2小時(shí)，同時(shí)保持?jǐn)嚢琛Ｍㄟ^反復(fù)進(jìn)行上述惰化，從反應(yīng)料中除去環(huán)氧乙烷。然后，通過逐步酸水解從該原料HES中制備具有相同Mw和C2/C6比但不同MS的三種HES制劑。為減小分子量，用20％HCl將溶液調(diào)節(jié)到pH 2.0，加熱到75±1℃，并在此溫度放置，直到根據(jù)GPC-MALLS測(cè)定的HES膠體的平均分子量Mw下降到865kD。從反應(yīng)器中取出三分之一的水解物，并立即冷卻到溫度低于50℃。通過用活性碳處理使溶液脫色后，用市售預(yù)濾器和滅菌過濾器過濾溶液，通過超濾(UF)稀釋到12％后，純化。因而，使用Millipore公司的截流10kD的聚醚砜膜。在UF過程中，由于低分子量HES成分的部分去除，Mw略有增大。這種增大取決于膠體制劑的起始Mw，但主要取決于所用UF膜的標(biāo)示截流以及所用UF膜的規(guī)格。為在UF后得到所需的目標(biāo)分子量，在UF中Mw變化必須主要是根據(jù)所用UF膜的規(guī)格而實(shí)驗(yàn)性建立的。也應(yīng)該注意到，水解從用于測(cè)定酸水解中的Mw的取樣時(shí)間持續(xù)進(jìn)行到已得到建立的Mw值。因此，在全部水解過程中系統(tǒng)地監(jiān)測(cè)Mw下降，并通過隨時(shí)間外推Mw估計(jì)到達(dá)目標(biāo)Mw的時(shí)間。然后，在外推的時(shí)間處停止水解。除去第一個(gè)三分之一量后余下的水解物繼續(xù)保持，直到平均分子量Mw下降到460kD。隨后，按與第一個(gè)三分之一量相同的方式處理第二個(gè)三分之一量。同樣，余下的三分之一進(jìn)一步水解到Mw為95kD，并進(jìn)行與其他兩部分物質(zhì)相同的處理過程。從部分物質(zhì)1，可以得到HES 900/0.42(C2/C6比＝4.83)，從部分物質(zhì)2，可以得到HES 500/0.42(C2/C6比＝4.83)，從部分物質(zhì)3，可以得到HES 130/0.42(C2/C6比＝4.83)。
超濾完成后，將膠體濃度調(diào)節(jié)到6％，pH值調(diào)節(jié)到5.5，通過加入NaCl使溶液等滲壓化，裝入500ml玻璃瓶中，在121℃下滅菌20分鐘。
實(shí)施例2制備其他HES原料為制備具有其他摩爾取代和C2/C6比的HES膠體，按相同規(guī)模進(jìn)行了多次實(shí)驗(yàn)，其中改變環(huán)氧乙烷的量。此外，當(dāng)?shù)竭_(dá)不同Mw(目標(biāo)Mw)時(shí)停止酸水解。這些實(shí)驗(yàn)總結(jié)在下表1中表1
實(shí)施例3在羥乙基化中NaOH與淀粉的摩爾比對(duì)C2/C6比的影響為證實(shí)NaOH與淀粉的脫水葡萄糖單元的摩爾比對(duì)C2/C6比的控制能力，將30kg稀糊蠟質(zhì)玉米淀粉與不同量的NaOH混合，并在40℃下與環(huán)氧乙烷反應(yīng)。在表2中，列出了所用試劑的量和C2/C6比以及此反應(yīng)所得HES產(chǎn)物的MS?？梢钥闯?，C2/C6比隨NaOH與淀粉的比增大而下降。這是由于，低NaOH濃度下的淀粉堿催化的羥乙基化優(yōu)選在脫水葡萄糖單元的2位中的羥乙基處進(jìn)行，而這是最具有反應(yīng)性的。使用較高NaOH濃度，本身反應(yīng)性不高的C6羥基也可被充分活化，從而被充分羥乙基化。
表2在羥乙基化中控制C2/C6比
HES終產(chǎn)品的制備實(shí)施例在下表3中，列出用于制備各種HES溶液的制劑。HES用作超濾后的HES濃縮物。通過三次計(jì)算規(guī)則測(cè)定制備6％或10％HES溶液所需的HES濃縮物的量。另一種可能是使用噴干的HES，這不會(huì)對(duì)備有噴干塔的本領(lǐng)域技術(shù)人員造成任何困難。所用的HES其分子量為900kD，MS為0.42。
在200l反應(yīng)槽中，稱重表中列出的所需量的HES濃縮物和所需量的鹽和NaOH溶液，攪拌下使鹽溶解。將溶液1，4，5，7和8的pH調(diào)節(jié)到5.5，將溶液2，3，6的pH調(diào)節(jié)到6.0，加入注射用水(WFI)，使得到達(dá)按照規(guī)格的理論Na濃度。
本領(lǐng)域技術(shù)人員很清楚，通過改變所述活性成分或助劑的比例以及活力或加入其他物質(zhì)，可以改變制劑，并且如果使用其他HES物質(zhì)，也可制備相應(yīng)的溶液。
表3
應(yīng)用實(shí)施例的測(cè)量方法下面說明檢測(cè)血液和血漿樣品的測(cè)量方法。
天然血液測(cè)量在實(shí)驗(yàn)室中處理加入有檸檬酸鹽的血液樣品，如下立即測(cè)量樣品的血液粘度(Rheostress1，Thermo-Haake，Karlsruhe，Germany)，其中線性增大的剪切速率為1～240/秒。在剪切速1/秒和128/秒時(shí)檢測(cè)粘度。在Thromboelastograph(TEG，Haemoscope Corporation，Niles，Illinois)上進(jìn)行分析之前，血液樣品在37℃水浴中培養(yǎng)1小時(shí)。按照制造商的指示進(jìn)行血液鈣化和TEG測(cè)量。測(cè)定凝結(jié)指數(shù)(CI)，其綜合了凝血彈性描記法的幾種部分功能。
血漿測(cè)量血液樣品在4℃和3000rpm(Rotana/RP，Hettich，Bch，Switzerland)下離心15分鐘。根據(jù)上述血液測(cè)定測(cè)量血漿粘度。
通過自動(dòng)化的凝結(jié)分析儀(BCS，Dade Behring，Marburg，Germany)，使用含有重組組織因子的PT試劑(Innovin，Dade Behring)和含有鞣花酸的aPTT試劑(Actin FS，Dade Behring)，測(cè)量凝血素時(shí)間(PT)和活化的部分促凝血酶原激酶時(shí)間(aPTT)。基于供應(yīng)商提供的ISI值，將PT值轉(zhuǎn)化成INR值。通過自動(dòng)化的凝結(jié)分析儀(BCS，DadeBehring)中的市售瑞斯西丁素輔助因子陣列(vWF RCA，Dade Behring)測(cè)定血管性血友病因子(vWF)的功能活性。通過在瑞斯西丁素存在下，凝結(jié)人凝血細(xì)胞的能力來建立vWF活性。通過使用凝結(jié)分析儀進(jìn)行渾濁測(cè)量來測(cè)定凝結(jié)。根據(jù)制造商的指示使用市售ELISA藥盒(Asserachrom vWF antigenic，Roche Diagnostics，Rotkreuz，Switzerland)檢測(cè)抗原vWF。
從血液血漿萃取并水解進(jìn)葡萄糖單體單元后，量化HES濃度(H.Frster等人，Infusionstherapie 1981；288-94)。與0.5ml KOH溶液35％(w/w)(Fluka，Buchs，Switzerland)混合后，血漿樣品(1ml)在100℃下培養(yǎng)60分鐘。通過將10ml冰冷無水乙醇(Fluka，Buchs，Switzerland)加到反應(yīng)混合物的上清液中，然后在2N HCl(Fluka，Buchs，Switzerland)中在100℃下酸水解60分鐘，使HES沉淀。使用基于己糖激酶/葡萄糖6-磷酸酯酶(Boehringer Mannheim，Darmstadt，Germany)的酶測(cè)試藥盒進(jìn)行葡萄糖測(cè)定。
使用實(shí)際劑量和灌輸時(shí)間，在恒定灌輸速率下，假設(shè)兩容器模型，計(jì)算藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)(WinNonlin，Version 4.1，Pharsight Corp.，Mountainview，CA)。
統(tǒng)計(jì)分析各值以平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差表示。利用JMP 5.1統(tǒng)計(jì)包(SASInstitute，Inc.，Cary，NC)，比較具有較高分子量(500和900kD)的兩種HES溶液與低分子量(130kD)溶液。結(jié)合Bonferroni修正利用兩側(cè)ANOVA分析測(cè)試溶液和時(shí)間效果的相互作用。為統(tǒng)計(jì)分析藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)，使用Student未配對(duì)t測(cè)試。p＜0.05被認(rèn)為具有統(tǒng)計(jì)顯著性。
應(yīng)用實(shí)施例為進(jìn)下述體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，使用平均分子量(Mw)為500,000和900,000道爾頓和相同摩爾取代(MS＝0.42)和相同C2/C6比(4.83)的本發(fā)明的羥乙基淀粉(在下面的應(yīng)用實(shí)施例中，分別稱作HES 500/0.42和HES900/0.42)(參見HES原料的制備實(shí)施例)。使用0.2μm過濾柱(Sartpore；Sartorius)將兩種羥乙基淀粉(HES 900/0.42和HES 500/0.42)溶解在0.9％鹽水中，濃度為6％，進(jìn)行滅菌過濾，裝入玻璃瓶中，在121℃下熱滅菌15分鐘。具有相同MS和C2/C6比的低分子量羥乙基淀粉(Mw＝130,000道爾頓)(在下面的應(yīng)用實(shí)施例中，稱作HES 130/0.42)用作對(duì)比溶液，也在0.9％鹽水中達(dá)到6％濃度。如上所述按與本發(fā)明的高分子量淀粉相同的反應(yīng)得到，因此僅分子量有區(qū)別。
檢測(cè)血漿去除及其對(duì)血凝物的影響將30頭豬隨機(jī)分成3組，每組10頭。一組靜脈灌輸HES 900/0.42，另一組灌輸HES 500/0.42，第三組灌輸HES 130/0.42作為對(duì)比。在所有情況下，劑量是每kg體重20ml HES溶液，每種溶液都是6％，灌輸30分鐘。為進(jìn)行灌輸和隨后血液取樣，麻醉動(dòng)物(氟烷麻醉)和進(jìn)行控制呼吸。在灌輸開始之前，灌輸5，20，40，60，120和240分鐘之后，以及灌輸結(jié)束后24小時(shí)，進(jìn)行血液取樣。在得到的血液樣品和血漿樣品中，測(cè)定下列參數(shù)血液和血漿粘度，HES濃度，凝血素時(shí)間，部分促凝血酶原激酶時(shí)間，血管性血友病因子，因子VIII和瑞斯西丁素輔助因子以及通常的凝血彈性描記特征。從灌輸結(jié)束到其后24h的HES濃度過程，計(jì)算濃度對(duì)時(shí)間曲線下的面積(＝AUC，曲線下的面積)，α和β半衰期以及去除率。根據(jù)log-線性梯形規(guī)則計(jì)算AUC，基于兩容器模型計(jì)算其余藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)。得到2個(gè)半衰期α和β，α半衰期指HES從中央容器(基本上相應(yīng)于血管內(nèi)空間)轉(zhuǎn)移到外容器，β半衰期指相反方向的反向分布。
HES濃度和藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)過程表明高分子量變體(HES 900/0.42和HES 500/0.42)比低分子量HES(HES 130/0.42)具有更長(zhǎng)的血漿停留時(shí)間。因此，與低分子量對(duì)照相比，高分子量變體中AUC明顯更大，α半衰期明顯更長(zhǎng)；因此，高分子量HES類型的去除率明顯低于低分子量HES。
然而，令人驚訝和先前完全不可能知道的中或高分子量HES(HES200/0.5；HES 200/0.6；HES 450/0.7)，在本發(fā)明的高分子量變體和低分子量對(duì)比溶液(參見

圖1)間，″在灌輸后24小時(shí)″時(shí)血漿濃度沒有相關(guān)差異。這意味著在灌輸后的階段內(nèi)，本發(fā)明的高分子量羥乙基淀粉具有比低分子量對(duì)比HES明顯長(zhǎng)的血漿停留時(shí)間，這對(duì)容量效率很關(guān)鍵，但與先前已知的高分子量HES相比，它們沒有在循環(huán)中積聚的趨勢(shì)。相反，本發(fā)明的HES變體，象低分子量對(duì)比HES一樣，灌輸后循環(huán)24小時(shí)，基本上完全消失。
表4
表4濃度對(duì)時(shí)間曲線下的面積(AUC)，去除率(CL)，在豬中灌輸20ml/kg的6％HES 130/0.42，6％HES 500/0.42和6％HES 900/0.42后的α和β半衰期(t1/2α和t1/2β)。
使用Student未配對(duì)t測(cè)試在HES 500和HES 900間進(jìn)行顯著性測(cè)試，并與HES 130/0.42比較；*p＜0.01；**p＜0.001。
與低分子量物質(zhì)(HES 130/0.42)，高分子量HES物質(zhì)(HES 500/0.42和HES 900/0.42)表現(xiàn)出更大的濃度對(duì)時(shí)間曲線下的面積(AUC)，相應(yīng)于血管內(nèi)空間中的更長(zhǎng)停留時(shí)間，明顯更長(zhǎng)的初始血漿半衰期(t1/2α)和明顯更低的去除率。
圖1表明在豬中灌輸20ml/kg的各HES溶液之后，低分子量HES(HES 130/0.42)和高分子量HES(HES 500/0.42和HES 900/0.42)在血漿中的濃度過程。開始時(shí)，與HES 130/0.42相比(也參見表4藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù))，HES 500/0.42和HES 900/0.42從血管內(nèi)空間的去除更慢；然而，在去除結(jié)束階段，即灌輸結(jié)束后24h，在血漿濃度間不再有相關(guān)差異(平均濃度低于0.2g/l，在測(cè)定限制的范圍內(nèi))。
因此，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，一方面本發(fā)明的羥乙基淀粉與現(xiàn)有低分子量參照溶液(HES 130/0.42)相比具有更長(zhǎng)的初始血漿半衰期，但是另一方面，其可在灌輸后24小時(shí)內(nèi)從循環(huán)中去除，就象低分子量對(duì)比制劑一樣容易，這一點(diǎn)很有利。
此外，進(jìn)行的凝結(jié)分析(血漿凝結(jié)測(cè)試，凝血彈性描記法，測(cè)定vWF濃度)得到出乎意料的結(jié)果，因?yàn)榻Y(jié)果完全不同于以前用高分子量HES制劑所得到的結(jié)果。盡管與低分子量HES溶液相比，中分子量和具有更明顯程度的高分子量羥乙基淀粉經(jīng)常先前在抑制凝結(jié)能力方面表現(xiàn)出更強(qiáng)的血凝物損害(J.Treib等人，Intensive Care Med.(1999)，pp.258～268；R.G.Strauss等人，Transfusion(1988)，pp.257-260)，但是在本發(fā)明的高分子量HES制劑和已知的低分子量對(duì)比溶液間沒有發(fā)現(xiàn)明顯差異(參見表5)。
表5
表5表明在豬中分別灌輸20ml/kg的6％HES 130/0.42，6％HES500/0.42和6％HES 900/0.42后，血漿凝結(jié)參數(shù)凝血素時(shí)間(PT)，活化部分促凝血酶原激酶時(shí)間(aPTT)，血管性血友病因子功能活性(vWFfunctional)和血管性血友病因子抗原濃度(vWF antigenic)的時(shí)間過程以及凝血彈性描記法的凝結(jié)指數(shù)(CI)的時(shí)間過程。使用兩側(cè)ANOVA，在HES 500/0.42和HES 900/0.42間進(jìn)行統(tǒng)計(jì)顯著性測(cè)試(溶液和時(shí)間效果的相互作用)，分別與HES 130/0.42比較。盡管在血漿中具有較高分子量，較高濃度和較長(zhǎng)停留時(shí)間(參見圖1和表4)，但是本發(fā)明的高分子量HES物質(zhì)(HES 500/0.42和HES 900/0.42)不會(huì)象低分子量HES(HES130/0.42)一樣有任何高程度地影響血凝物。
換句話說，盡管通過增大分子量得到了更長(zhǎng)的血漿停留時(shí)間，但是本發(fā)明的羥乙基淀粉沒有表現(xiàn)出已知高分子量溶液的缺點(diǎn)，如損害血凝物。
此外，在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中令人驚訝地發(fā)現(xiàn)，與低分子量HES和已知的高分子量羥乙基淀粉相比，本發(fā)明的高分子量羥乙基淀粉不會(huì)增大血液和血漿粘度。在低剪切力下，在本發(fā)明的羥乙基淀粉中比低分子量HES具有更低的粘度(參見表6血漿粘度)。
表6
表6表明在豬中分別灌輸20ml/kg的6％HES 130/0.42，6％HES500/0.42和6％HES 900/0.42后，低和高剪切力下的血漿粘度(γ＝1/s和γ＝128/s)的時(shí)間過程。使用兩側(cè)ANOVA，在HES 500/0.42和HES900/0.42間進(jìn)行統(tǒng)計(jì)顯著性測(cè)試(溶液和時(shí)間效果的相互作用)，分別與HES 130/0.42比較，在高分子量HES物質(zhì)(HES 900和HES 500)和低分子量HES(HES 130)間沒有任何差異。在低剪切力下，在血漿粘度中溶液和時(shí)間效果的相互作用在高分子量HES物質(zhì)(HES 500/0.42和HES900/0.42)中比低分子量HES(HES 130/0.42)更低。然而，這是由于時(shí)間原因而不是溶液作用。在高剪切力下，沒有差異；特別地，血漿粘度在高分子量HES物質(zhì)(HES 900/0.42和HES 500/0.42)間沒有比低分子量HES(HES 130/0.42)更高。
因此，血漿粘度在本發(fā)明的HES溶液中沒有增大。血漿粘度沒有增大的事實(shí)是令人驚訝的，因?yàn)楣_在US-A-5,502,043(比較例3)中的可相比分子量為500,000的羥乙基淀粉中血漿粘度增大。如果粘度沒有增大，這將導(dǎo)致未受擾亂的毛細(xì)灌注(大循環(huán))和向組織改進(jìn)的營(yíng)養(yǎng)氧供應(yīng)。
除了上述體內(nèi)研究外，也進(jìn)行體外研究，其中特別測(cè)試了C2/C6比對(duì)血凝物的影響，即使用凝血彈性描記法。為此，制備低MS(0.4)和低(3∶1)，中(7∶1)或高(12∶1)C2/C6比的三種高分子量HES溶液(Mw800kD)，并檢測(cè)如下。從30個(gè)男性和女性外科患者(排除標(biāo)準(zhǔn)已知的凝結(jié)紊亂，用血凝物抑制劑處理，手術(shù)之前的5天內(nèi)吸收乙酰基水楊酸或其他非膽固醇類抗炎藥物)，在麻醉開始階段采集血液樣品。在每一血液樣品中，用凝血彈性描記法測(cè)量凝結(jié)，即未稀釋的血液和用三種HES溶液(HES 800/0.4/3∶1；HES 800/0.4/7∶1和HES 800/0.4/12∶1)的每一種體外血液稀釋(20％，40％和60％)。與體內(nèi)研究中相同，測(cè)定的參數(shù)是凝結(jié)指數(shù)(CI)，綜合了凝血彈性描記法的各部分功能。CI值的平均值(±SD)列于下表7中，即偏離未稀釋血液樣品的CI。
表7
在所有血液稀釋階段，相對(duì)于天然血液而言，CI下降較少，即血凝物影響越小，用于血液稀釋的HES的C2/C6比越低。血液稀釋系列間的溶液作用具有顯著差異(p＜0.05；ANOVA)。結(jié)果表明，羥乙基淀粉的C2/C6比降低有利于對(duì)血凝物的影響，即在這種情況下，與高C2/C6比相比，低C2/C6比抑制血凝物更小。因這使用HES溶液，所以這很重要，尤其是在創(chuàng)傷或手術(shù)引起的出血后作為血漿代用品，在這種情況下，不必須抑制血凝物加到血液損失中。上述研究結(jié)果進(jìn)一步表明，HES溶液的C2/C6比對(duì)血凝物具有固有影響，與HES的其他分子參數(shù)和其在循環(huán)中的行為無關(guān)。這在以前是未知的。
權(quán)利要求
1.一種羥乙基淀粉，其平均分子量Mw大于或等于500,000，特征在于摩爾取代的MS為0.25-0.5，和C2/C6比為2-小于8。
2.如權(quán)利要求1所述的羥乙基淀粉，特征在于所述摩爾取代的MS為0.35-0.5，優(yōu)選為0.39-小于或等于0.45，特別是大于0.4到0.44。
3.如權(quán)利要求1和2中任一項(xiàng)所述的羥乙基淀粉，特征在于所述平均分子量為大于600,000到1,500,000，優(yōu)選620,000-1,200,000，更優(yōu)選700,000-1,000,000。
4.如權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的羥乙基淀粉，特征在于所述C2/C6比為2-7，優(yōu)選2.5-小于或等于7，更優(yōu)選2.5-6，再更優(yōu)選4-6。
5.如權(quán)利要求1～4中任一項(xiàng)所述的羥乙基淀粉，特征在于從蠟質(zhì)玉米淀粉中得到。
6.一種藥劑，含有如權(quán)利要求1～5中任一項(xiàng)所述的羥乙基淀粉。
7.如權(quán)利要求6所述的藥劑，特征在于是水溶液或膠體水溶液形式。
8.如權(quán)利要求6或7中任一項(xiàng)所述的藥劑，特征在于所述羥乙基淀粉濃度達(dá)到20％，優(yōu)選0.5-15％，更優(yōu)選2-12％，特別是4-10％，例如，6％。
9.如權(quán)利要求6-8中任一項(xiàng)所述的藥劑，特征在于還含有氯化鈉，優(yōu)選濃度為0.9％。
10.如權(quán)利要求6-9中任一項(xiàng)所述的藥劑，特征在于還包括調(diào)節(jié)血漿的電解質(zhì)。
11.如權(quán)利要求6-10中任一項(xiàng)所述的藥劑，特征在于是緩沖溶液形式和/或含有能夠代謝的陰離子的溶液形式。
12.如權(quán)利要求6-11中任一項(xiàng)所述的藥劑，特征在于是高滲溶液形式。
13.如權(quán)利要求6-12中任一項(xiàng)所述的藥劑，特征在于經(jīng)滅菌過濾或熱滅菌。
14.如權(quán)利要求6-13中任一項(xiàng)所述的藥劑，特征在于是容量代用品。
15.如權(quán)利要求6-14中任一項(xiàng)所述的藥劑，特征在于含有藥學(xué)活性成分或活性成分組合物。
16.如權(quán)利要求6-15中任一項(xiàng)所述的藥劑，用于制備血漿代用品或血漿增容劑的用途。
17.一種制備羥乙基淀粉的方法，優(yōu)選制備如權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的羥乙基淀粉，特征在于(i)使懸浮于水中的淀粉，優(yōu)選玉米淀粉，與環(huán)氧乙烷反應(yīng)；和(ii)使用酸、優(yōu)選鹽酸，部分水解得到的淀粉衍生物，直到羥乙基淀粉達(dá)到所需的平均分子量范圍。
18.如權(quán)利要求17所述的方法，特征在于將堿化劑，優(yōu)選NaOH，加到所述懸浮于水中的淀粉中。
19.如權(quán)利要求17或18中任一項(xiàng)所述的方法，特征在于堿化劑加到所述懸浮淀粉中，所述的量要使堿化劑與淀粉的摩爾比大于0.2，優(yōu)選為0.25-1，特別是0.3-0.8。
20.如權(quán)利要求17-19中任一項(xiàng)所述的方法，特征在于還包括如下步驟(iii)滅菌過濾，和可選擇地(iv)超濾。
21.如權(quán)利要求6-15中任一項(xiàng)所述的藥劑，用于保持血量正常和/或用于改進(jìn)大循環(huán)和微循環(huán)和/或用于改進(jìn)營(yíng)養(yǎng)氧供應(yīng)和/或用于穩(wěn)定血液動(dòng)力學(xué)和/或用于改進(jìn)容量效率和/或用于降低血漿粘度和/或用于提高耐貧血癥性和/或用于在被擾亂的血液供應(yīng)和動(dòng)脈、特別是外周動(dòng)脈閉塞性疾病中進(jìn)行血液稀釋、特別是治療性血液稀釋中的用途。
22.一種藥盒，各自包括(i)如權(quán)利要求1-5中所述的羥乙基淀粉；(ii)無菌鹽溶液，優(yōu)選氯化鈉溶液；和可選擇地(iii)藥學(xué)活性成分或活性成分組合物。
23.如權(quán)利要求22所述的藥盒，特征在于各成分(i)，(ii)和可選擇地(iii)位于多隔室袋中的分開的隔室內(nèi)。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種羥乙基淀粉，其制備方法，含有這種羥乙基淀粉的藥劑，這種藥劑用于制備容量代用品，血漿代用品或血漿增容劑的用途，以及這種藥劑用于保持血量正常和/或用于改進(jìn)大循環(huán)和微循環(huán)和/或用于改進(jìn)營(yíng)養(yǎng)氧供應(yīng)和/或用于穩(wěn)定血液動(dòng)力學(xué)和/或用于改進(jìn)容量效率和/或用于降低血漿粘度和/或用于提高耐貧血癥性和/或用于在被擾亂的血液供應(yīng)，和動(dòng)脈、特別是外周動(dòng)脈閉塞性疾病中進(jìn)行血液稀釋、特別是治療性血液稀釋中的用途。
文檔編號(hào)A61K47/36GK1926155SQ200580006765
公開日2007年3月7日 申請(qǐng)日期2005年3月1日 優(yōu)先權(quán)日2004年3月1日
發(fā)明者邁克爾·博爾, 安德烈亞斯·菲施, 多納特·R·施潘 申請(qǐng)人:B·布朗·梅爾松根有限公司