專利名稱：嘧啶－2,4,6－三酮的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明包含嘧啶-2，4，6-三酮(三氧嘧啶)的藥物組合物，其生產(chǎn)方法及其用途。
基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)是能夠降解細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)與基底膜的鋅和鈣依賴蛋白酶家族(Egeblad，M.，and Werb，Z.，Nat.Rev.Cancer 2(2002)161-174；Overall，C.M.，and Lopez-Otin，C.，Nat.Rev.Cancer 2(2002)657-672)。據(jù)信它們在胚胎發(fā)育和生長中(Holmbeck，K.，et al.，Cell 99(1999)81-92；Vu，T.H.，et al.，Cell 93(1998)411-422)以及組織重塑和修復(fù)中(Shapiro，S.D.，Curr.Opin.Cell Biol.10(1998)602-608；Lund，L.R.，et al.，EMBO J.18(1999)4645-4656)扮演著重要的角色。MMPs過量或者不當(dāng)?shù)谋磉_(dá)可能因此與許多組織重塑進(jìn)程的發(fā)病機(jī)理相關(guān)，包括腫瘤發(fā)展(Egeblad，M.，and Werb，Z.，Nat.Rev.Cancer 2(2002)161-174；Overall，C.M.，and Lopez-Otin，C.，Nat.Rev.Cancer 2(2002)657-672)和動(dòng)脈瘤形成(Carmeliet，P.，et al.，Nat.Genet.17(1997)439-444)。MMP的作用還遠(yuǎn)不只限于ECM降解(Chang，C.，and Werb，D.，Trends Cell Biol.11(2001)S37-43)。被ECM蛋白包裹的肽生長因子在ECM被MMP-9降解后就可以被利用了。(Manes，S.，et al.，J.Biol.Chem.274(1999)6935-6945)。MMPs可以增加VEGF的生物利用度(Bergers，G.，et al.，Nat.Cell Biol.2(2000)737-744)，還可以通過切割血纖維蛋白溶酶原產(chǎn)生血管生成抑制劑如血管抑素(Dong，Z.，et al.，Cell 88(1997)801-810)。MMPs被認(rèn)為參與骨髓干細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)(Janowska-Wieczorek，A.，et al.，Blood 93(1999)3379-3390)。在G-CSF誘導(dǎo)的HPC運(yùn)動(dòng)中觀察到了高濃度的MMP9(Carstanjen，D.，et al.，Transfusion 42(2002)588-596)。
三氧嘧啶是來自一個(gè)眾所周知的結(jié)構(gòu)類別的化合物。這些化合物被描述在例如美國專利Nos.6,242,455和6,110,924；WO 97/23465，WO 98/58915，WO 01/25217中，在此將其加入作為參考，以及描述在Grams，F(xiàn).，等的Biol.Chem.382(2001)1277-1285，其對于MMP-2，MMP-9，和MMP-14有效且高度選擇。
環(huán)糊精是衍生自淀粉的環(huán)碳水化合物。它們之間的區(qū)別在于其結(jié)構(gòu)中吡喃型葡萄糖單元的數(shù)量。母體環(huán)糊精含有6，7和8個(gè)吡喃型葡萄糖單元，這些環(huán)糊精分別叫做α，β，和γ環(huán)糊精。通過酶淀粉轉(zhuǎn)換制備的α，β，或者γ環(huán)糊精其疏水空穴的直徑不同，并且它們通常適于包涵許多親脂物質(zhì)。
作為高效MMP抑制劑的三氧嘧啶，其很難溶于水和基于水的溶劑。因此，本發(fā)明的目標(biāo)是提供一種水性組合物，其中該三氧嘧啶是可溶的，并且該三氧嘧啶的水性組合物可以被用于藥物組合物。
發(fā)明簡述令人驚訝地發(fā)現(xiàn)，由下述式(I)描述的三氧嘧啶衍生物和水溶性環(huán)糊精(進(jìn)一步縮寫成CD)形成的三氧嘧啶-環(huán)糊精復(fù)合物顯示出增強(qiáng)的水溶性，良好的穩(wěn)定性，和低局部刺激，其可被用作治療劑。
進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)該具有環(huán)糊精和佐劑例如L-賴氨酸或者L-精氨酸的三氧嘧啶復(fù)合物顯示出改善的水溶性和生物利用度，良好的穩(wěn)定性，和低局部刺激，其可以被用作治療劑。因此，本發(fā)明提供了由三氧嘧啶衍生物或其鹽和環(huán)糊精形成的三氧嘧啶-環(huán)糊精復(fù)合物，所述環(huán)糊精優(yōu)選α-，β-或者γ-環(huán)糊精或者水溶性環(huán)糊精衍生物(水溶性被定義為在25℃下至少0.5gr/100ml水的溶解度)，其中的三氧嘧啶衍生物由式(I)表示。
此外，本發(fā)明提供了由式(I)代表的三氧嘧啶衍生物或其鹽和環(huán)糊精于存在佐劑例如L-賴氨酸或者L-精氨酸、優(yōu)選L-賴氨酸情況下形成的三氧嘧啶-環(huán)糊精復(fù)合物，所述環(huán)糊精優(yōu)選α-，β-或者γ-環(huán)糊精或者水溶性環(huán)糊精衍生物(水溶性被定義為在25℃下至少0.5gr/100ml水的溶解度)。
本發(fā)明的該復(fù)合物是三氧嘧啶-環(huán)糊精的包含復(fù)合物，并且以液體或者固體形式提供。
在本發(fā)明的復(fù)合物中，優(yōu)選1mol的三氧嘧啶被大約1-2mol的優(yōu)選為β-或者γ-環(huán)糊精或其衍生物的環(huán)糊精所復(fù)合和封閉。
本發(fā)明還提供了用于治療需要治療患者的藥物制劑，優(yōu)選用于治療支氣管炎癥疾病，該藥物制劑以藥物有效量含有作為活性組分的本發(fā)明的三氧嘧啶-環(huán)糊精復(fù)合物。
本發(fā)明的藥物制劑可以用于治療、預(yù)防或者防治很重要的或者不合適的MMP表達(dá)引起的病理學(xué)。優(yōu)選地，這種治療是對下列疾病的治療，預(yù)防或者防治類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，腫瘤，轉(zhuǎn)移性侵襲，骨質(zhì)疏松，黃斑變性，糖尿病視網(wǎng)膜病，角膜潰爛，動(dòng)脈粥樣硬化，支氣管炎癥疾病，支氣管炎癥疾病如哮喘，慢性阻塞性肺病或者肺氣腫。
本發(fā)明還提供了一種注射制劑，該制劑以藥物有效量含有本發(fā)明的三氧嘧啶-環(huán)糊精復(fù)合物。
本發(fā)明的又一目的是本發(fā)明復(fù)合物的液體水性制劑，藥用載體是水，給予的組合物是水溶液。本發(fā)明的活性物質(zhì)隨后通過包涵在水溶液的環(huán)糊精中處于復(fù)合物狀態(tài)。
本發(fā)明的另一目的是在L-賴氨酸存在的情況下(L-賴氨酸濃度介于10mM和1000mM，優(yōu)選介于10mM和500mM，更優(yōu)選介于10mM和100mM)的本發(fā)明復(fù)合物的液體水性制劑，藥用載體是水，給予的組合物是水溶液。本發(fā)明的活性物質(zhì)隨后在L-賴氨酸存在的情況下通過包涵在水溶液的環(huán)糊精中處于復(fù)合物狀態(tài)。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是固體狀態(tài)的本發(fā)明復(fù)合物，該復(fù)合物是可溶于水的粉末形式，其在溶解后給予或者以其本身直接被給予。
本發(fā)明的另一目的是被依照給予所需的形式被包含在不同蓋侖制劑形式中的復(fù)合物，給予的形式可以是用于腸胃外給予的片劑、膠囊、復(fù)合顆粒體系、口服溶液、口服懸浮液、溶液、懸浮液，和植入物，用于吸入的溶液或者粉末，用于局部、經(jīng)皮的或者陰道用的親水或者親脂類型的乳膏和油膏、水性或者水-醇膠體、洗劑，子宮內(nèi)裝置；用于眼使用的溶液、懸浮液、植入物，用于直腸使用的栓劑、懸浮液、噴劑、溶液和泡沫。
本發(fā)明還提供了以藥物有效量的這種藥物制劑在患有該疾病，優(yōu)選為支氣管炎癥疾病的患者中治療該疾病的應(yīng)用。本發(fā)明的復(fù)合物優(yōu)選以局部、經(jīng)皮、經(jīng)皮膚、口服或者腸胃外水平給予。
本發(fā)明還提供了用于生產(chǎn)藥物制劑的方法，優(yōu)選用于治療這些疾病，優(yōu)選支氣管炎癥疾病，特征在于通過以藥物有效量在水中或者緩沖的水性溶液中復(fù)合三氧嘧啶和環(huán)糊精，所述的水或者緩沖的水性溶液優(yōu)選地含有額外的輔助物質(zhì)，緩沖劑，防腐劑，溶劑和/或粘度調(diào)節(jié)劑。
優(yōu)選的環(huán)糊精是-α-環(huán)糊精及其合成的衍生物例如HPαCD，甲基化的αCD，羥基丁基αCD，麥芽糖基αCD，葡萄糖基αCD。
-β-環(huán)糊精及其合成的衍生物例如HPβCD，SBEβCD，RMβCD，DIMEβCD，TRIMEβCD，羥基丁基βCD，葡萄糖基βCD，麥芽糖基βCD。
-γ-環(huán)糊精及其合成的衍生物例如HPγCD，RMγCD和DIMEγCD，羥基丁基γCD，葡萄糖基γCD，麥芽糖基γCD。
本發(fā)明還涉及治療有效量的藥物組合物在制備用于治療、預(yù)防或者防治上述疾病的藥物中的應(yīng)用，所述的藥物組合物包括嘧啶-2，4，6-三酮和至少一種環(huán)糊精以及，可能地，藥用載體。
本發(fā)明還涉及治療有效量的藥物組合物在制備產(chǎn)用于治療、預(yù)防或者防治上述疾病的藥物中的應(yīng)用，所述的藥物組合物包括a)嘧啶-2，4，6-三酮，b)至少一種環(huán)糊精，c)L-賴氨酸或者；L-精氨酸，優(yōu)選L-賴氨酸，以及d)可能地，藥用載體。
發(fā)明詳述本發(fā)明的嘧啶-2，4，6-三酮(三氧嘧啶)是式(I)的那些 其中R1是C3-C20烷基，其可以任選地被-S-，-O-或者-NH-間斷一次或者幾次；或者，基團(tuán)W-V，其中W是化學(xué)鍵或者苯基；并且V是苯基，苯氧基，苯硫基，苯基亞磺?；?phenylsulfinyl)，苯基磺?；蛘弑交被?，其中苯基部分可以是未取代的或者被鹵素，羥基，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，C1-C6-烷硫基，C1-C6烷基亞磺?；?，C1-C6-烷基氨基，氰基，硝基或者C1-C6-烷基磺?；〈淮位蛘邘状?；和R2是C1-C10烷基，其中烷基是未取代的或者被羥基或者氨基取代一或者二次，并且可以被-S-，-O-或者-NH-任選地間斷一次或者幾次；苯甲?；鶊F(tuán)，其可以是未取代的或者被鹵素，羥基，硝基，C1-C6-烷氧基，C1-C6-烷基氨基，C1-C6-烷硫基，C1-C6-烷基亞磺?；珻1-C6-烷基磺?；０被酋；珻1-C6-烷基酰氨磺?；?，二-C1-C6-烷基酰氨-磺?；〈淮位蛘邘状危环枷汶s環(huán)?；鶊F(tuán)，或者苯基-或者雜芳基基團(tuán)，其是未取代的或者被鹵素，羥基，C1-C6-烷氧基，C1-C6-烷基氨基，C1-C6-二烷基氨基，氰基，C1-C6-烷基，C2-C6鏈烯基，C2-C6-炔基，C1-C6-?；珻1-C6-烷硫基，C1-C6-烷基磺?；?，C1-C6-烷基亞磺?；?，C1-C6--烷基氨基羰基，氨基羰基，C1-C6-烷基酰氨基磺?；０被酋；?C1-C6-烷基酰氨基磺?；?，硝基，C1-C6-烷氧基羰基，羧基取代一次或者幾次。
本發(fā)明的一個(gè)目的是式(I)化合物，以及其藥用鹽，對映異構(gòu)型，非對映異構(gòu)型和外消旋物在制備新藥物制劑中的應(yīng)用。
對于本發(fā)明中使用的R1，術(shù)語C3-C20烷基代表線性的或者支化的飽和烴，其含有3-20個(gè)，優(yōu)選4-12個(gè)，更優(yōu)選8-12個(gè)碳原子。實(shí)例是丁基，己基，辛基，癸基，2-乙基己基，2-乙基辛基。優(yōu)選的C3-C20烷基殘基是n-辛基和n-癸基。C3-C20烷基基團(tuán)可以被-S-，-O-或者-NH-，優(yōu)選被-O-間斷一次或者幾次。這些C3-C20烷基基團(tuán)的實(shí)例是5-乙氧基-n-戊基，9-甲氧基-n-癸基。
苯基部分的取代基“V”優(yōu)選位于鄰和/或間位。
優(yōu)選的基團(tuán)“W-V”是p-丁氧基苯基，聯(lián)苯基，苯氧基苯基，p-氯-苯氧基苯基，p-溴-苯氧基苯基，3，4二氯-苯氧基苯基。
R2中術(shù)語“C1-C10-烷基”代表線性的或者支化的飽和烴，其含有1-10，優(yōu)選1-6，更優(yōu)選1-4個(gè)碳原子。所述的C1-C10-烷基可以被-S-，-O-或者-NH-，優(yōu)選地被-O-間斷一次或者多次，更優(yōu)選地，被如此地間斷以提供由乙烯氧基片段組成的基團(tuán)。優(yōu)選的C1-C10-烷基基團(tuán)的實(shí)例是羥乙基；羥丙基；乙氧基乙基；1，2-二乙氧基乙基；1，2-二-羥基-乙基。
這里使用的術(shù)語芳香雜環(huán)如R2中的“芳香雜環(huán)?；鶊F(tuán)”表示5或者6元的芳香環(huán)，其中1，2或者3個(gè)環(huán)原子是氧，氮或者硫，其余的環(huán)原子是碳原子。所述的芳香雜環(huán)基團(tuán)可以與另一苯環(huán)融合。這樣的芳香雜環(huán)?；鶊F(tuán)的實(shí)例是呋喃羧基，硫苯羧基，4-咪唑基羧基，3-苯硫苯羧基，吡啶基羧基。優(yōu)選的實(shí)例是呋喃羧基和硫苯羧基。
這里使用的術(shù)語“雜芳基”指的是如上定義的芳香雜環(huán)。優(yōu)選的雜芳基基團(tuán)是缺電子的殘基例如含有氮的6元環(huán)如吡啶，嘧啶，吡嗪或者1，3，5-三嗪。特別優(yōu)選的是雜芳基基團(tuán)嘧啶基和吡嗪基。
在R2的苯基或者雜芳基基團(tuán)上可以出現(xiàn)的取代基主要是位于適于各自取代反應(yīng)的任何位置。優(yōu)選的一個(gè)或者兩個(gè)取代基以鄰位和/或間位存在。
在此單獨(dú)或者與C1-C6-烷氧基，C1-C6-烷基氨基，C1-C6-二烷基氨基，C1-C6-?；?，C1-C6-烷硫基，C1-C6-烷基磺酰基，C1-C6-烷基亞磺酰基C1-C6-烷基氨基羰基，C1-C6-烷基酰氨基磺酰基，二-C1-C6-烷基酰氨基磺酰基或者C1-C6-烷氧基羰基結(jié)合使用的術(shù)語C1-C6-烷基指線性的或者支化的飽和烴，其含有1-6，優(yōu)選1-4個(gè)碳原子。優(yōu)選的實(shí)例是甲基，乙基，丙基，異丙基，或者叔丁基。
在此使用的術(shù)語“C2-C6-鏈烯基”指的是線性的或者支化的不飽和烴，其含有2-6，優(yōu)選2-5個(gè)碳原子，和一個(gè)或者兩個(gè)雙鍵。如果存在兩個(gè)雙鍵，它們可以是分離的或者共軛的雙鍵，優(yōu)選共軛雙鍵。優(yōu)選的實(shí)例是烯丙基或者戊二烯(pentadienyl)。
在此使用的術(shù)語“C2-C6-炔基”指的是線性的或者支化的烴，其含有2-6，優(yōu)選2-4個(gè)碳原子。優(yōu)選的實(shí)例是炔丙基。
術(shù)語“鹵素”表示氟、氯、溴、碘，優(yōu)選氯或溴。
本發(fā)明使用的術(shù)語“幾次”指的是一次，二次，三次或者4次，優(yōu)選一或者二次。
本發(fā)明使用的術(shù)語“藥用鹽”指的是常規(guī)的、保持式(I)化合物生物有效性和性質(zhì)的酸加合鹽或者堿加合鹽，其形成自合適的無毒有機(jī)或者無機(jī)酸或者有機(jī)或者無機(jī)堿。樣品酸加合鹽包括那些衍生于無機(jī)酸如氫氯酸，氫溴酸，氫碘酸，硫酸，氨基磺酸，磷酸，和硝酸，和那些衍生自有機(jī)酸如p-甲苯磺酸，水楊酸，甲烷磺酸，草酸，琥珀酸，檸檬酸，馬來酸，乳酸，延胡索酸等等。樣品堿加合鹽包括那些來自銨，鉀，鈉和季銨氫氧化物，例如諸如氫氧化四甲基銨。將藥物化合物(即藥物)化學(xué)修飾成鹽的方法以獲得化合物的改善理化穩(wěn)定性，吸濕性，流動(dòng)性和溶解性的技術(shù)對藥劑師來說是熟知的。(見，例如Ansel，H.，et.al.，Pharmaceutical DosageForms and Drug Delivery Systems，6th ed.，(1995)，pp.196 and 1456-1457)。
本發(fā)明的化合物可以如EP 0 869 947和WO 01/25217所述的那樣制備。
依照本發(fā)明，下面的化合物是特別優(yōu)選的5-聯(lián)苯-4-基-5-[4-(4-硝基-苯基)-哌嗪-1-基]嘧啶-2，4，6-三酮(化合物I)5-(4-苯氧基-苯基)-5-(4-嘧啶-2-基-哌嗪-1-基)-嘧啶-2，4，6-三酮(化合物II)5-[4-(4-氯-苯氧基)-苯基]-5-(4-嘧啶-2-基-哌嗪-1-基)-嘧啶-2，4，6-三酮(化合物III)5-[4-(3，4-二氯-苯氧基)-苯基]-5-(4-嘧啶-2-基-哌嗪-1-基)-嘧啶-2，4，6-三酮(化合物IV)5-[4-(4-溴-苯氧基)-苯基]-5-(4-嘧啶-2-基-哌嗪-1-基)-嘧啶-2，4，6-三酮(化合物V).
同樣明顯當(dāng)三氧嘧啶衍生物(I)含有酸性部分例如羧基基團(tuán)或者磺?；鶊F(tuán)的時(shí)候，衍生物可以與堿經(jīng)由酸性部分形成鹽。
除了上述加合型鹽，三氧嘧啶可以采用水合形式或者溶劑化形式。水合物和溶劑化物包括式(I)的自由化合物以及式(I)化合物的鹽。其還包括式(I)化合物的互變異構(gòu)體。
依照本發(fā)明的環(huán)糊精(CD)是通過酶解淀粉生產(chǎn)的環(huán)寡聚糖，其由多為6，7或者8的可變數(shù)目的吡喃型葡萄糖單元組成這些環(huán)糊精分別叫做α，β，和γ環(huán)糊精(αCD，βCD和γCD)。依照本發(fā)明的環(huán)糊精是環(huán)糊精本身或環(huán)糊精衍生物，其在25℃下至少以0.5gr/100ml的量溶于水。
本發(fā)明優(yōu)選使用的水溶性環(huán)糊精指的是至少具有β-環(huán)糊精水溶性的環(huán)糊精。這種水溶性環(huán)糊精的實(shí)例是硫代丁基環(huán)糊精，羥基丙基環(huán)糊精，麥芽糖基環(huán)糊精，及其鹽。特別地，硫代丁基-β-環(huán)糊精，羥基丙基-β-環(huán)糊精，麥芽糖基-β-環(huán)糊精，及其鹽。
本發(fā)明優(yōu)選的環(huán)糊精還是甲基環(huán)糊精(環(huán)糊精甲基化的產(chǎn)物)，二甲基環(huán)糊精(DIMEB)(優(yōu)選地在2和6位取代)，三甲基環(huán)糊精(優(yōu)選地在2，3，和位取代)，“隨機(jī)甲基化的”環(huán)糊精(優(yōu)選地隨機(jī)在2，3，和6位取代，但吡喃型葡萄糖單元具有大量1,7到1,9甲基，RMβCD)，羥基丙基環(huán)糊精(HPCD，羥基丙基化的環(huán)糊精，優(yōu)選主要隨機(jī)在位置2和3取代(HP-βCD，HP-γCD))，硫代丁醚環(huán)糊精(SBECD)，羥基乙基-環(huán)糊精，羰基甲基乙基環(huán)糊精，乙基環(huán)糊精，通過在羥基基團(tuán)中接枝烴化鏈獲得的、能夠形成納米顆粒的兩親環(huán)糊精，通過接枝單氨化的環(huán)糊精(具有間隔臂)獲得的膽固醇環(huán)糊精和甘油三酯環(huán)糊精。
本發(fā)明的佐劑是L-賴氨酸或者L-精氨酸，優(yōu)選L-賴氨酸。這些佐劑可以用于通過形成三元復(fù)合物增加酸性組分的溶解度。本發(fā)明的三氧嘧啶-環(huán)糊精復(fù)合物可以通過生產(chǎn)含有三氧嘧啶或其鹽和水溶性環(huán)糊精的水溶液來獲得。所使用水溶環(huán)糊精的量優(yōu)選為1mol或者更多，基于1mol/mol三氧嘧啶或其鹽，更優(yōu)選1-10mol，特別優(yōu)選1-2mol環(huán)糊精/mol三氧嘧啶。
水溶性環(huán)糊精的濃度越高，三氧嘧啶的溶解度增加得越多。制造所述水溶液的方法沒有具體的限制，例如通過使用水或者溫度范圍大約從-5℃-35℃的緩沖液生產(chǎn)。
當(dāng)攪動(dòng)具有過量式I三氧嘧啶的環(huán)糊精水溶液的時(shí)候，在這兩個(gè)分子間形成復(fù)合物。但是大約需要至少幾天才能達(dá)到平衡，這樣，在幾個(gè)小時(shí)后甚至在一天后也觀察不到依照本發(fā)明的增加溶解度的三氧嘧啶。過濾該溶液容許在過濾物中以溶液形式回收該復(fù)合物，所述的復(fù)合物是溶于水的。該復(fù)合物也可以通過計(jì)算適當(dāng)比例、通過水溶液中混合溶解的已知量的式I的三氧嘧啶和溶解的已知量的CD獲得。
另一種獲得復(fù)合物的方法是向環(huán)糊精水溶液中添加溶劑(如醇、丙酮等)中的式I三氧嘧啶溶液?？梢栽诔浞值臄嚢韬笳舭l(fā)溶劑，或者甚至在溶劑存在的情況下形成該復(fù)合物。
在所有這些獲得三氧嘧啶-CD復(fù)合物的方法中，L-賴氨酸或者L-精氨酸溶液(氨基酸濃度介于10mM和1000mM，優(yōu)選介于10mM和500mM，更優(yōu)選介于10mM和100mM)可以被用作佐劑。L-賴氨酸溶液是優(yōu)選用作佐劑的。
本發(fā)明復(fù)合物溶液的凍干或者霧化容許該復(fù)合物以固體形式獲得。由此可以獲得無定形粉末形式的復(fù)合物。也可能以這樣的方式獲得固體狀態(tài)的該復(fù)合物在適當(dāng)有機(jī)溶劑中溶解CD和式I三氧嘧啶后再將溶劑蒸發(fā)。
其它方法可以被用來制備固體復(fù)合物，它們是在非常少量的水中激烈攪拌式I的三氧嘧啶和CD的懸浮液，隨后在干燥或者使用超臨界狀態(tài)CO2以在超臨界狀態(tài)CO2存在時(shí)混合式I的三氧嘧啶和CD后收集復(fù)合物。
本發(fā)明的復(fù)合物可以例如以本身已知的方式從溶液中制備，也可以使用糊劑法，對于分子量大約1300的環(huán)糊精，環(huán)糊精對三氧嘧啶的重量比應(yīng)該介于2(2∶1)-540(540∶1)，優(yōu)選介于2-25，特別優(yōu)選在2.6-3.5(對1∶1的環(huán)糊精復(fù)合)或者5.2-6.2(對1∶2的環(huán)糊精復(fù)合)。
優(yōu)選從濃縮的、水性環(huán)糊精制劑中制備復(fù)合物。制劑的環(huán)糊精濃度優(yōu)選50-400mM。優(yōu)選100-250mM的環(huán)糊精濃度。取決于一致性，混合物被激烈地?cái)嚢杌蛘吣蠛?。環(huán)糊精的重量百分比是基于水性環(huán)糊精制劑的總重量。
更優(yōu)選在L-賴氨酸溶液(L-賴氨酸濃度介于10mM和1000mM，優(yōu)選10mM和500mM，更優(yōu)選10mM和100mM)存在的情況下，從濃縮的、水性環(huán)糊精制劑中制備復(fù)合物。制劑的環(huán)糊精濃度優(yōu)選介于50-400mM。優(yōu)選100-250mM的環(huán)糊精濃度。取決于一致性，混合物被激烈地?cái)嚢杌蛘吣蠛稀－h(huán)糊精的重量百分比是基于水性環(huán)糊精制劑的總重量。
反應(yīng)溫度通常介于20℃和80℃之間，優(yōu)選介于20℃和60℃之間，特別優(yōu)選介于25℃和45℃之間。反應(yīng)時(shí)間取決于溫度，并且至少是一些天。優(yōu)選的反應(yīng)時(shí)間是至少7天以使復(fù)合物形成達(dá)到平衡。隨后，如果未溶解的材料仍然存在，則過濾反應(yīng)混合物，如果完全溶解了，則直接使用。如果需要，可以用例如色譜方法分離復(fù)合物。優(yōu)選地，三氧嘧啶和環(huán)糊精的濃度和比率要使復(fù)合物形成發(fā)生完全(達(dá)到平衡)并且無可檢測到的未溶解或未復(fù)合的三氧嘧啶。
依照本發(fā)明，已經(jīng)確立式I三氧嘧啶和環(huán)糊精的復(fù)合物驚人地增加了三氧嘧啶在水中的溶解度。同樣發(fā)現(xiàn)，復(fù)合物的形成并沒有干擾三氧嘧啶的藥理學(xué)性質(zhì)。
依照本發(fā)明，已經(jīng)確立式I三氧嘧啶，環(huán)糊精，和佐劑如L-賴氨酸或者L-精氨酸的復(fù)合物驚人地增加了三氧嘧啶在水中的溶解度。同樣發(fā)現(xiàn)，復(fù)合物的形成并沒有干擾三氧嘧啶的藥理學(xué)性質(zhì)。
所有這些性質(zhì)容許制備液體制劑以作為用于注射或者噴霧的溶液，并且容許生物利用度的改善，特別是口服。本發(fā)明的三氧嘧啶-環(huán)糊精復(fù)合物可以被如此應(yīng)用或者以粉末形式應(yīng)用，粉末形式是通過去除共存的水獲得的。用來移除水的方法包括在減壓下凍干和干燥。由凍干獲得的粉末產(chǎn)品是特別優(yōu)選的。
本發(fā)明的三氧嘧啶-環(huán)糊精化合物通過口服給予或者腸胃外給予表現(xiàn)出了其效果，其優(yōu)選被形成到用于腸胃外給予的制劑中，特別優(yōu)選用于注射劑或者局部給予，特別是氣溶膠制劑。
本發(fā)明復(fù)合物的劑量可以依照年齡、體重和患者癥狀的嚴(yán)重程度適當(dāng)?shù)卣{(diào)節(jié)，并且可以單次或者分多次給予該復(fù)合物。制劑形式的實(shí)例包括片劑，膠囊，粉劑和粒劑。這些可以通過已知的技術(shù)通過使用典型添加劑例如賦形劑，潤滑劑和粘合劑生產(chǎn)。
本發(fā)明涉及通過將藥物有效量的本發(fā)明復(fù)合物施用于患者，用于在需要該治療的宿主哺乳動(dòng)物中治療支氣管炎癥疾病如尤其是哮喘和慢性阻塞性肺病(COPD)的方法。哮喘是一種與過敏原暴露相關(guān)或者不相關(guān)的支氣管樹炎癥疾病。該炎癥通過刺激支氣管平滑肌收縮、增強(qiáng)黏液分泌和被認(rèn)為對疾病進(jìn)程是惡化因素的誘導(dǎo)支氣管形態(tài)學(xué)變化，在患者中引發(fā)癥狀。氣道高響應(yīng)性(Aireway hyperesponsiveness)是該疾病的特征并且是多數(shù)癥狀形成的原因。支氣管樹是一個(gè)具有許多細(xì)胞類型(上皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、炎癥細(xì)胞、神經(jīng)、黏液產(chǎn)生細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等)的非常復(fù)雜的組織，而且包含許多方面的支氣管重塑事件主要在于將細(xì)胞外基質(zhì)組分沉積到支氣管壁和粘膜產(chǎn)生細(xì)胞的過度增生。使用本發(fā)明的復(fù)合物抑制了炎癥細(xì)胞流入支氣管肺泡灌洗室和支氣管周圍組織，并且抑制了被定義為對刺激劑如乙酰甲基膽堿異常反應(yīng)的高反應(yīng)性。該疾病及當(dāng)前的治療被綜述在例如GINA Workshop Report，Global Strategy for Asthma Managementand Prevention(NIH Publication No.02-3659)。
本發(fā)明因此還涉及一種使用本發(fā)明的復(fù)合物在需要慢性阻塞性肺病治療的宿主哺乳動(dòng)物中治療或預(yù)防該病的方法。在該疾病中，支氣管是發(fā)炎的并且黏液腺體是增生的并產(chǎn)生大量黏液。支氣管壁異常并且異常細(xì)胞外基質(zhì)組分的沉積增加了對氣流的阻力。該疾病和當(dāng)前的治療被描述在例如Fabbri，L.M.，and Hurd，S.S.，Eur.Respir.J.22(2003)1-2中。
本發(fā)明因此還涉及一種使用本發(fā)明的復(fù)合物在需要肺氣腫治療的宿主哺乳動(dòng)物中治療或預(yù)防該病的方法。在該疾病中，肺泡壁被蛋白水解過程所破壞并且這一破壞損害了氧氣到血液的傳遞。由于通過引起呼吸肌功能喪失的引起通氣系統(tǒng)異常的衍生的膨脹過度并且由于導(dǎo)致心臟在晚期衰竭的肺動(dòng)脈高血壓，也出現(xiàn)了生理學(xué)的問題。
依照本發(fā)明，三氧嘧啶-環(huán)糊精復(fù)合物優(yōu)選經(jīng)由數(shù)月或者數(shù)年給予需要該治療的患者。優(yōu)選通過液體或者粉劑的氣霧化使用將復(fù)合物以介于微摩爾和納摩爾濃度/kg和天之間的無毒性劑量范圍進(jìn)行施與。
本發(fā)明復(fù)合物的確切劑量會變化，但可容易地確定。通常，復(fù)合物的日劑量介于1μmol/kg和天-100nmol/kg和天的范圍(復(fù)合物中三氧嘧啶的濃度)。
藥物組合物是優(yōu)選具有生理相容性的水性組合物。另外，組合物還優(yōu)選地包括藥用添加劑如緩沖液，防腐劑，和/或輔助物質(zhì)。合適的緩沖系統(tǒng)是基于磷酸鈉，醋酸鈉或者硼酸鈉。需要防腐劑來防止藥物組合物使用中的微生物污染。合適的防腐劑是例如苯扎氯銨，三氯叔丁醇，羥苯甲酯(methylparabene)，羥苯丙酯(propylparabene)，苯乙醇，山梨酸。這些防腐劑通常以0.01-1％重量/體積的量使用。
合適的輔助物質(zhì)和藥學(xué)制劑被描述在Remington的PharmaceuticalSciences，16th ed.，1980，Mack Publishing Co.，edited by Oslo et al.中。通常，在制劑中使用合適量的藥用鹽從而使制劑等滲。藥用物質(zhì)的實(shí)例包括鹽水，Ringer′s溶液，和葡萄糖溶液。溶液的pH值優(yōu)選從大約5-大約8，更有選大約7-大約7.5。
如果L-賴氨酸或者L-精氨酸被用作佐劑用于復(fù)合物形成，溶液的pH優(yōu)選從大約6到大約8.5，更優(yōu)選從大約7.5到大約8.5。
本發(fā)明優(yōu)選的制劑是可注射的或者可霧化的制劑，其優(yōu)選制備自1∶500摩爾比的CD和三氧嘧啶。
通過將CD溶于水，加入式I三氧嘧啶，和水浴中加熱直到后者完全溶解來制備該復(fù)合物。優(yōu)選地，用過濾來對溶液滅菌。優(yōu)選地，溶液具有200-400的重量摩爾滲透壓濃度，優(yōu)選為大約300mOs/kg。pH是大約7.2。三氧嘧啶和/或者CD的濃度可以依照需要調(diào)節(jié)。優(yōu)選通過加入NaCl調(diào)節(jié)張力。
優(yōu)選的用于霧化的制劑含有三氧嘧啶，CD，NaCl和水。特別優(yōu)選的是下列的組合(對200ml的溶液)三氧嘧啶0.05-0.2g，優(yōu)選0.1g；10-50g CD，優(yōu)選20g CD，優(yōu)選HPβCD；氯化鈉1.2-1.5g優(yōu)選1.42g(等滲性)和水，優(yōu)選無熱原、無菌、純化的水，加到200ml。
通過將CD溶于100ml純化的水中，攪拌加入三氧嘧啶和NaCl以使其溶解并用水補(bǔ)足以得到200ml溶液而制備該溶液。優(yōu)選的溶液被通過0.22μm聚丙烯膜過濾除菌或者通過蒸氣滅菌法消毒。
其它優(yōu)選的制劑是眼用制劑，口用制劑，子宮內(nèi)裝置。也可以考慮與其它系統(tǒng)聯(lián)系，例如納米顆?；蛘呶⒚最w?；蛘咧|(zhì)體。
以下的實(shí)施例，參考文獻(xiàn)和圖僅提供用于理解本發(fā)明，其真正的保護(hù)范圍在后附的權(quán)利要求中提出。應(yīng)該理解可以在不離開本發(fā)明精神的情況下對所提出的步驟進(jìn)行修飾。
附圖描述

圖1顯示對于RMβCD和HP-β-CD獲得的化合物I的溶解度。相溶解度圖表都是Ap型，其表示CDs形成化學(xué)計(jì)量(stoechiometry)1∶1和1∶2的復(fù)合物。隨后計(jì)算穩(wěn)定性常數(shù)，其數(shù)值見表6。
圖2化合物I和DIMEβCD復(fù)合物(上部分)和單獨(dú)DIMEβCD(下部分)的NMR光譜。
圖3化合物I(頂部)，DIMEβCD(右手側(cè))和T-ROESY(中間)的NMR光譜。
圖4.腹膜內(nèi)注射化合物I懸浮液對BAL嗜曙紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(圖2a)和支氣管周炎癥記分(圖2b)的影響。對照是僅暴露于PBS而不是過敏原的小鼠(PBS)以及通過吸入暴露于ova和腹膜內(nèi)注射安慰劑的小鼠(OVA)。
圖5.短期(5天)經(jīng)氣溶膠給予過敏原暴露模型化合物I-HP-β-CD復(fù)合物，氟替卡松(fluticasone)，和安慰劑(PLAC)對BAL嗜曙紅細(xì)胞(5a)，支氣管周炎癥記分(5b)，和組織嗜曙紅細(xì)胞浸潤記分(5c)的治療性作用。
圖6.長期(11周)經(jīng)氣溶膠給予過敏原保露模型化合物I-HP-β-CD復(fù)合物，氟替卡松，和安慰劑(PBS)對BAL嗜曙紅細(xì)胞(6a)，支氣管周炎癥記分(6b)，和組織嗜曙紅細(xì)胞浸潤記分(6c)的治療性作用。通過PBS吸入對敏化但是未暴露于過敏原的小鼠(PBS)和敏化并且暴露于OVA的小鼠(PLAC)進(jìn)行處理。
圖7.化合物I與HP-β-CD在純化水(●)，L-賴氨酸50mM(x)或L-賴氨酸500mM(▲)中的相溶解度圖表。
圖8.靜脈給予(5mg/kg)綿羊(n＝6)后，化合物I血清濃度平均值(±S.D.)(a)或者化合物I血清濃度平均值的對數(shù)(b)相對時(shí)間的曲線。
圖9.口服給予(15mg/kg)綿羊(對溶液n＝5，對懸浮液n＝6)溶液(▲)和懸浮液(●)后，化合物I血清濃度平均值(±S.D.)(a)或者化合物I血清濃度平均值的對數(shù)(b)相對時(shí)間的曲線。
縮寫CD 環(huán)糊精βCDβ-環(huán)糊精γCDγ-環(huán)糊精DIMEβCD二甲基β-環(huán)糊精HPβCD 羥丙基β-環(huán)糊精RMβCD 隨機(jī)甲基化的β-環(huán)糊精I(xiàn).V.靜脈內(nèi)實(shí)施例1化合物I與環(huán)糊精(CD)可溶性復(fù)合物的制備1.1稱重20mg的化合物I。加入2ml 200mM HPβCD溶液。在37℃攪動(dòng)24小時(shí)。經(jīng)Millipore filter Millex HV 0.45μm過濾。過濾后獲得的溶液溶液形式的化合物I-CD復(fù)合物。
1.2稱重2.5mg的化合物I。加入2ml 200mM HPβCD溶液。在37℃攪動(dòng)24小時(shí)或者直到化合物I完全溶解。如此獲得的溶液含有化合物I-CD復(fù)合物。
實(shí)施例2相溶解度研究在復(fù)合物形成時(shí)，實(shí)踐上不溶于水的化合物I(＜0.6μg/ml，MW485)顯著溶解?；衔颕溶解度的增加因此是化合物I和CD間形成復(fù)合物的證據(jù)。發(fā)現(xiàn)復(fù)合物形成和平衡的實(shí)現(xiàn)1天后是20％，4天后是40％，7天后達(dá)到100％。通過將過量化合物I加入到增加濃度的CD溶液中得到溶解度圖表(圖1)。在37℃下的恒溫控制浴中激烈攪拌7天后，過濾這些溶液并且用HPLC確定溶解的化合物I的量。βCD和γCD以及其合成的衍生物已經(jīng)容許具有化合物I的復(fù)合物形成。β-CD和HPβCD來自ROQUETTE(法國)，RMβCD和γCD已由Wacker(德國)提供。
CD水溶液的制備-βCD溶液含有2，4，8，10，12，16mM。
-HPβCD溶液含有10，25，50，75，100，150，200mM。
-RMβCD溶液含有10，25，50，75，100，150，200mM。
-γCD溶液含有10，25，50，100，75，150mM。
復(fù)合物形成含有化合物I和環(huán)糊精的燒瓶被放置并在恒溫控制浴中在37℃攪動(dòng)7天，從而達(dá)到復(fù)合平衡。此后，將懸浮液用0.22μm PVDF毫孔過濾器過濾并且將濾液以流動(dòng)相溶解在DMSO中以獲得濃度樣品，其被置于基準(zhǔn)線上。隨后對其依照有效的HPLC方法如下所述定量。
化合物I的劑量HPLC方法設(shè)備Merck-Hitachi model L-7100泵，Merck-Hitachi L-7200采樣器，Merck-Hitachi L-7350爐，Merck-Hitachi Diode array detector L-7455檢測器，接口D-7000，用Merck-Hitachi提供的″Chromatography Data Station Software″數(shù)據(jù)獲取軟件來引導(dǎo)該裝置。
固定相填充了辛基硅烷C8 LiChorspher60RP-Select B(5μm)Merck固定相的Lichrocart柱(125×4mmd.i.)。
色譜條件流動(dòng)相磷酸緩沖液0,05M-pH＝3和甲醇(30/70，v/v)的混合物。通過超聲途徑提取氣體15分鐘。輸出1ml/分鐘，U.V.檢測的λ265nm，工作溫度30℃，注射體積20μl。
每種環(huán)糊精的化合物I HPLC劑量的結(jié)果列于下表(表1-表4)。
沒有環(huán)糊精所獲得的溶解度是0.56μg/ml。
表1
HPβCD存在時(shí)化合物I的溶解度
表2HPβCD存在時(shí)化合物I的溶解度
表3RMβCD存在時(shí)化合物I的溶解度
表4γCD存在時(shí)化合物I的溶解度
化合物I與所有研究的環(huán)糊精形成復(fù)合物，因?yàn)橛^察到了溶解度的增加。還可以直接觀察到化合物I和Rameb之間形成的復(fù)合物相當(dāng)?shù)夭⑶彝耆鋈艘饬系卦龃罅嘶衔颕的水溶解度。這一觀察結(jié)果對于HP-β-CD也是一樣。表5總結(jié)了在最大測試濃度對每種環(huán)糊精所得到的溶解度結(jié)果。相比于化合物I在水中(沒有環(huán)糊精)的已被確定為0.56μg/ml的溶解度，計(jì)算溶解度的增加。
基于這些結(jié)果，依照Higuchi，T.，and Connors，K.A.，Advances inAnalytical Chemistry and Instrumentation 4(1965)117-212構(gòu)建相溶解度圖表。
表5對每種環(huán)糊精所獲得的化合物I溶解度的最大增加
表6
高的K1∶1值表明，在純化的水中，β-CD衍生物的空穴很好地容納包含在包涵物中的化合物I分子部分。從0-4mM的βCD濃度，化合物I的溶解度增加并達(dá)到了平穩(wěn)期，達(dá)到8mM的βCD。超過8mM的βCD濃度形成了具有較低溶解度(1.5μg/ml)的1∶2化學(xué)計(jì)量的額外復(fù)合物(Cpd.IβCD)。所得到的相圖表因此是AL圖表。對于γ-CD，HP-βCD和RMβCD，得到Ap型圖表。計(jì)算出的346M-1的穩(wěn)定常數(shù)表明CD空穴過大而無法獲得充分的相互作用。
當(dāng)化合物I處于復(fù)合物形式或者不是時(shí)，其具有不同的溶解度。例如，化合物I在乙腈中顯示出良好的溶解度(±700μg/ml)，而HP-β-CD與化合物I-CD復(fù)合物在此溶劑中是不溶的。在這些條件下，被包含的藥物保持被限制并且在該溶劑中變得不溶。游離形式的化合物I或者復(fù)合形式的化合物I之間不同溶解度的技術(shù)可以被用來評價(jià)復(fù)合的百分比。
實(shí)施例3HPβCD存在時(shí)各種三氧嘧啶的溶解度根據(jù)實(shí)施例1和2研究溶解度。結(jié)果見表7。
表7
實(shí)施例4L-賴氨酸溶液作為佐劑的相溶解度研究溶解度研究如Higuchi，T.，和Connors，K.A.的Advances in AnalyticalChemistry and Instrumentation 4(1965)117-212所描述的那樣進(jìn)行。將過量的化合物I加入到5ml溶解介質(zhì)中增加濃度的HP-β-CD(0-200mM)中，所述的介質(zhì)是純化的水或者L-賴氨酸溶液(50mM或500mM)。密封玻璃容器并且在25℃水浴中振蕩懸浮液直到達(dá)到復(fù)合平衡(7天)。將等份試樣濾過0.45μm的PVDF膜濾器并且通過有效的液相色譜(LC)方法測定化合物I的含量。
圖7顯示了在25℃于純化水、50mM L-賴氨酸溶液和500mM L-賴氨酸溶液中HP-β-CD存在的情況下獲得的化合物I的相溶解度圖表。在這三種情況下，化合物I的水中溶解度作為CD濃度的函數(shù)增加。不存在L-賴氨酸時(shí)獲得的溶解度圖表證實(shí)了以前提到的結(jié)果化合物I在200mMHP-β-CD溶液中的溶解度是大約5.5mg/ml(11mM)，這相應(yīng)于化合物I水中溶解度的大約10,000倍的增加。
在L-賴氨酸存在時(shí)，化合物I在HP-β-CD溶液中的溶解度甚至更高。200mM HP-β-CD溶液的溶解度在存在50mM和500mM L-賴氨酸的時(shí)候分別增加了約2和7倍。表8顯示了化合物I在不同介質(zhì)中的溶解度數(shù)據(jù)。結(jié)果顯示了L-賴氨酸和HP-β-CD間的協(xié)同效應(yīng)。在500mM L-賴氨酸和200mM HP-β-CD(38.14mg/ml)存在時(shí)的溶解度高于通過分別加入HP-β-CD和L-賴氨酸(5.53mg/ml和0.09mg/ml)所預(yù)計(jì)的值。這種L-賴氨酸和HP-β-CD之間的協(xié)同效應(yīng)容許化合物I水中溶解度重要的增加。(70,000-倍，對于500mM L-賴氨酸和200mM HP-β-CD)。
表8有或者沒有HP-β-CD(200mM)的純化水和L-賴氨酸(50mM和500mM)中化合物I[mg/ml]的溶解度
實(shí)施例5NMR研究DIME-β-CD溶液在D2O中以10mM的濃度制備。由于化合物I的水溶解度太低，無法在D2O中測出單獨(dú)化合物I的光譜。對于質(zhì)子的測定，化合物I的NMR譜在DMSO中操作。所有的對質(zhì)子的NMR實(shí)驗(yàn)都在Bruker DRX500分光計(jì)中在500MHz操作。溫度設(shè)定在298K。通過將溶劑的殘基共振用作HDO的第二參考來實(shí)現(xiàn)校準(zhǔn)。對于T-ROESY實(shí)驗(yàn)，使用300msec的混和時(shí)間。所有操作均使用Bruker的WINNMR程序在Silicon Graphics INDY數(shù)據(jù)站進(jìn)行。單獨(dú)化合物I NMR譜與存在過量DIMEβCD之間的比較容許注意到相應(yīng)于H-3和H-5質(zhì)子的信號被上移到高磁場(shifted up feild)。這一移動(dòng)(shift)組成了包含體的證據(jù)。T-ROESY譜分析表明化合物I被包含在CD空穴中。分子的兩個(gè)不同部分可適應(yīng)于CD空穴。
實(shí)施例6分子模擬研究使用Cambridge Data Base的β-CD的POBRON晶體結(jié)構(gòu)，用Gaussian94進(jìn)行分子模擬計(jì)算。計(jì)算化合物I的兩種極端空間構(gòu)象。所得到的結(jié)果顯示所述的包含體在能量上是可行的而且非常穩(wěn)定。該穩(wěn)定性可以通過氫鍵形成來解釋，所述的氫鍵形成在位于CD外的醇和巴比妥核(barbituric nucleus)的氮的質(zhì)子和氧間。本發(fā)明的結(jié)構(gòu)預(yù)料到了包括化合物I和環(huán)糊精(優(yōu)選βCD，γCD及其合成衍生物)的復(fù)合形式或者相聯(lián)系形式的所有藥物組合物，無論是它們的形式還是它們的治療應(yīng)用。事實(shí)上，即使在制劑中化合物I和CDs不是復(fù)合形式，該形式也易于在原位形成。
實(shí)施例7藥物組合物例如，非詳盡性地例舉不同的制劑的組合物。
可注射制劑的優(yōu)選實(shí)例是-HP-βCD 200mM；化合物I 1mg/ml；適量注射用無菌水。
對于25ml的溶液a)溶液制備稱重6.77g的HPβCD(4.2％H2O)并通過注射將其溶解到25ml水中。加入25mg化合物I并在水浴中加熱直到后者完全溶解。通過過濾滅菌溶液。
b)溶液特性溶液的重量摩爾滲透壓濃度是308mOs/kg。pH是7.2。
化合物I和/或CD的濃度可以依照需要修改。優(yōu)選通過加入NaCl調(diào)節(jié)等滲性。
優(yōu)選的霧化制劑是對于200ml溶液-化合物I 0.1g(MW485)
-沒有熱原的(pyrogenic)HPβCD 20.15g(MW1,300)-氯化鈉 1.42g(等滲性)-無熱源，無菌，純化的水，適量，加至200mla)稱重20.15g的沒有熱原的HPβCD(3.2％H2O，ROQUETTE)并將其溶解到100ml純化的水中。
b)稱重0.1g的化合物I，和1.42g的氯化鈉，并將其通過積極攪動(dòng)加入到溶液中以使其溶解。
c)補(bǔ)足水以獲得200ml的溶液。
d)通過0.22μm的聚丙烯膜過濾除菌。
實(shí)施例8對生物利用度的藥物動(dòng)力學(xué)研究開發(fā)具有HP-β-CD和L-賴氨酸組合的用于藥物動(dòng)力學(xué)研究的溶液，其容許具有生物相容pH值的高化合物I濃度。
劑型制劑通過將化合物I(10mg/ml)溶解在含有HP-β-CD(200mM)，L-賴氨酸(20mM)和注射用水的溶液中獲得化合物I/HP-β-CD靜脈內(nèi)溶液。該溶液的重量摩爾滲透壓濃度(大約325mOsmol/kg)和pH值(大約8.2)與靜脈內(nèi)注射是相容的。將該溶液通過0.20μm無菌醋酸纖維素濾器在無菌條件下消毒。
通過將化合物I(15mg/ml)溶解到含有HP-β-CD(200mM)，L-賴氨酸(50mM)和水的溶液中制備化合物I/HP-β-CD口服溶液。
化合物I懸浮液由化合物I(15mg/ml)，作為濕潤劑的聚山梨酯80(0.1mg/ml)，作為稠化劑的硅鎂鋁(VEEGUM HV，1％m/v)和甲基纖維素(METHOCEL A400，0.4％m/v)組成。
動(dòng)物試驗(yàn)方案和藥物給予6只健康的綿羊(2雄和4雌)被用作實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，其體重范圍為45-82kg。在測試中，這些動(dòng)物隨意進(jìn)食和進(jìn)水。
按照下表9方案而實(shí)現(xiàn)的該試驗(yàn)研究，包括隨機(jī)雙向交叉(two-waycross-over)設(shè)計(jì)以用于口服給予，而后通過靜脈給予。每次給予之間，容許3周的清除期。
表9用于給予含有化合物I的溶液和懸浮液的動(dòng)物試驗(yàn)設(shè)計(jì)
對于口服劑型，每個(gè)動(dòng)物從兩種制劑中接受等于15mg/kg體重的化合物I劑量。為了適應(yīng)劑型體積，將這些綿羊在藥物給予的那天稱重。經(jīng)口給予前和0.25，0.5，1，1.5，2，3，4，6，8，10，12，24，28，32，48，72，96，120，144，168小時(shí)后從頸靜脈抽取血樣。
對于靜脈內(nèi)劑型，所有6只綿羊均接受5mg化合物I/kg體重。將溶液通過左頸靜脈給予，并且在開始靜脈給予前和5，10，15，20，30，45分鐘，1，1.5，2，3，4，6，8，10，12，24，28，32，48，72，96，120，144，168小時(shí)后從右頸靜脈抽取血樣。
將所有血樣離心并且將血清儲存在-80℃下直到測試。
生物分析方法開發(fā)了全自動(dòng)的方法來在血清中LC確定該化合物。通過在線將填充了限制存取材料(restricted access material，RAM)即LiChrospher RP-8ADS(alkyl diol silica)的前置柱與分析柱通過柱轉(zhuǎn)換技術(shù)偶聯(lián)來凈化樣品。ADS吸附劑屬于內(nèi)表面反相支柱的組，并且其已經(jīng)被成功用于在LC分析前凈化生物樣品(Yu，Z.，and Westerlund，D.，Chromatographia44(1997)589-594；Hubert，Ph.，et al.，S.T.P.Pharma Pratiques 9(1999)160-180；Souverain，S.，et al.，Journal of Chromatography B 801(2004)141-156)。操作條件描述在先前的文章中(Chiap，P.，et al.，Journal ofChromatography B 817(2005)，109-117)。根據(jù)基于考慮到全部測量誤差的準(zhǔn)確測量的新方法，該方法被證明是完全有效的(Hubert，P.，et al.，Analytica Chimica Acta 391(1999)135-148；Hubert，Ph.，et al.，S.T.P.Pharma Pratiques 13(2003)27-64；Hubert，Ph.，et al.，J Pharm Biomed.Anal.36(2004)579-586。
對于生物分析研究，因?yàn)橐淮_定的高濃度，所述方法的劑量范圍必須增加到50μg/ml。進(jìn)行部分重新生效測定，反應(yīng)功能、真實(shí)度、精確度、準(zhǔn)確度和線性度均得到了良好的結(jié)果。
藥物動(dòng)力學(xué)和統(tǒng)計(jì)學(xué)分析對于靜脈內(nèi)給予研究，對每個(gè)動(dòng)物使用具有一級分布和消除的線性兩室模型確定藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)(Boroujerdi，M.，Pharmacokinetics，Principlesand Applications.McGrow-Hill Companies，USA，2002)。在取樣時(shí)期，用線性梯形法則計(jì)算曲線值下的區(qū)域(AUCs0-168)。使用與化區(qū)分析相關(guān)的常規(guī)方程式計(jì)算外推的AUC到無限值(AUCs0-∞)，全身清除值(Clt)，生物半衰期(T1/2β)期，和分布的總體積(Vdt)(Boroujerdi，M.，Pharmacokinetics，Principles and Applications，McGrow-Hill Companies，USA，2002)。
對于口服給予研究，使用具有一級輸入和一級輸出的線性一室模型對每個(gè)動(dòng)物和對懸浮液和溶液確定藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)。(Boroujerdi，M.，Pharmacokinetics，Principles and Applications.McGrow-Hill Companies，USA，2002)。如上所述通過梯形求和計(jì)算AUCs0-168。AUCs0-∞用下面的方程式估算(方程式1)AUC0-∞=C0(1K-1ka)]]>方程式1其中K和ka分別是總消除率常數(shù)和吸收率常數(shù)，C0是從起點(diǎn)外推的濃度。
用兩種不同的方法確定每只動(dòng)物血漿中藥物的最大濃度(Cmax)和相應(yīng)的時(shí)間(Tmax)直接從濃度-時(shí)間表(C最大實(shí)驗(yàn)的和T最大實(shí)驗(yàn)的)，和使用下列方程式(方程式2和3)計(jì)算(C最大計(jì)算的和T最大計(jì)算的)Cmaxcalculated=C0(e-KTmax-e-kaTmax)]]>方程式2Tmaxcalculated=2.303ka-KlogkaK]]>方程式3絕對生物利用度(Fabsol)使用下面的關(guān)系估算(方程式4)Fabsol=AUCoral.DIVAUCIV.Doral]]>方程式4其中Doral和DI.V.分別是經(jīng)口和I.V.給予藥量。
除了計(jì)算自平均AUC0-∞的絕對生物利用度，所有的藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)被報(bào)道為平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差。
當(dāng)單獨(dú)的AUC值比平均值±2標(biāo)準(zhǔn)偏差高或者低的時(shí)候，數(shù)據(jù)被認(rèn)為是異常的?；诖?，在口服溶液給予后，一只綿羊被排除出藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)確定和統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
使用方差雙向分析(雙向ANOVA)來比較兩個(gè)口服劑型的藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)。對數(shù)轉(zhuǎn)化以將分布標(biāo)準(zhǔn)化后，比較每個(gè)算出的參數(shù)的平均值。在5％的臨界水平，結(jié)果被認(rèn)為是顯著的(p＜0.05)。
靜脈內(nèi)給予后化合物I的藥物動(dòng)力學(xué)單次給予綿羊靜脈溶液(5mg/kg)后獲得的平均化合物I血清濃度相對時(shí)間曲線被報(bào)道在圖9a。圖9b中(平均化合物I血清濃度相對時(shí)間曲線的對數(shù))，其顯示化合物I的藥物動(dòng)力學(xué)遵循兩室模型。在該靜脈內(nèi)給予后計(jì)算的不同藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)列于表10。
表10靜脈內(nèi)(5mg/kg)給予綿羊(n＝6)后獲得的化合物I藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)(平均值±S.D.)
分布期是短的(大約30分鐘)，表明化合物I快速分布在有機(jī)體中。總分布體積是小的(大約8升)，表明化合物I分布將被限制到細(xì)胞外流體中并且化合物I擴(kuò)散到組織將不是非常重要的。另一方面，化合物I的生物半衰期是長的(大約15.5小時(shí))，因此，藥物清除非常慢。考慮到其小的分布體積，有機(jī)體內(nèi)的累積將不會是通過如脂肪中存儲引起的，而可能是通過強(qiáng)力結(jié)合血漿中的蛋白或者其它組分所致。全身清除值也被算出，大約是358.5ml/h。
口服懸浮液和溶液后后化合物I的藥物動(dòng)力學(xué)口服單一劑量化合物I(15mg/kg)溶液和懸浮液后獲得的化合物I的平均血清濃度相對時(shí)間分布見圖10a。在對數(shù)轉(zhuǎn)化平均血清濃度后，看起來口服給予后的藥物動(dòng)力學(xué)將遵循一室模型(圖10b)。藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)總結(jié)在表11中。
表11口服給予(15mg/kg)綿羊后獲得的化合物I藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)(平均值±S.D.，除了F)
給予溶液后化合物I的血清濃度明顯高于用等劑量懸浮液給予獲得的那些。對溶液所觀察到的吸收期(大約4小時(shí))要比給予懸浮液后所達(dá)到的吸收期(大約10小時(shí))短。還可以看到溶液和懸浮液的藥物動(dòng)力學(xué)有顯著差別(p＜0.05)(表11)。分別給予溶液和懸浮液后，平均化合物I血清峰濃度是大約54和5μg/ml。溶液的Cmax是大約比懸浮液的高10倍。用溶液(大約3.8h)獲得了比用懸浮液(大約11h)早3倍的Tmax。AUC值遵循相同的趨勢，Cmax值也是給予溶液后的AUC是大約10倍高于給予懸浮液后的AUC。因此，在與I.V.溶液比較后，溶液的絕對生物利用度(80％)要比懸浮液(8％)高得多。
實(shí)施例9體內(nèi)實(shí)驗(yàn)(抑制血管生成)為了研究化合物I-環(huán)糊精復(fù)合物的可能作用，使用新血管生成(neovascularisation)模型。切除主動(dòng)脈環(huán)并置于培養(yǎng)基中。該培養(yǎng)基含有以下任一種-沒有活性成分-化合物I-環(huán)糊精復(fù)合物(終濃度10-6M，10-7M)-在DMSO的輔助下溶解在DMSO中的化合物I(終濃度10-6，10-7M)在沒有基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑化合物I的時(shí)候，觀察到新血管形成(血管生成)。在化合物I單獨(dú)存在、溶于DMSO、或者以在環(huán)糊精中包涵復(fù)合物形式存在的時(shí)候，血管生成被顯著抑制。
實(shí)施例10含有化合物I和HPβCD的制劑在哮喘小鼠模型中用于治療過敏原誘導(dǎo)的氣道炎癥和支氣管超響應(yīng)性的應(yīng)用材料HP-β-CD(取代度＝0.64)源自Roquette(法國)。無熱原的磷酸緩沖液(PBS)購自Bio-Wittaker(Verviers，Belgium)，乙酰甲基膽堿購自Sigma-Aldrich(Germany)。所有其它材料都是分析級的。注射用無菌水在該研究中貫穿使用。無菌的、無熱原的和等滲的CD溶液被制備成20，50和75mM。用于吸入的可商購的氟替卡松溶液(Flixotide1mg/ml)購自Glaxo-Smithkline(Genval，Belgium)。
敏化，過敏原暴露和治療方案為了研究腹膜內(nèi)注射化合物I對氣道炎癥的調(diào)節(jié)，在第0和7天腹膜內(nèi)注射10μg的吸附了alumin的卵清蛋白(ovalbumin alumin-adsorbed)(aluminject，perbio，Erembodegem，Belgium)將小鼠敏化，隨后從21-24天，將其暴露于1％卵清蛋白(OVA)或者PBS氣溶膠30分鐘。腹膜內(nèi)注射在OVA吸入前30分鐘進(jìn)行。不同的注射制劑是cremophor 10％-DMSO 10％-PBS 80％-化合物I 30mg/kg(懸浮液)；cremophor 10％-DMSO10％-PBS 80％-化合物I 3.75mg/kg(溶液)；HPβCD 200mM化合物I7.5mg/kg(溶液)；HPβCD 200mM。所有的結(jié)果都與被OVA敏化并暴露于PBS和腹膜內(nèi)注射PBS處理的OVA的小鼠進(jìn)行比較。為了研究吸入化合物I對氣道炎癥的調(diào)節(jié)，將小鼠按照前述敏化。使用被稱為短暴露激發(fā)和長期暴露激發(fā)的兩種方法。在短暴露激發(fā)中，在Plexilgas暴露室(30×20×15cm)中從21-27天將小鼠暴露于以下濃度的化合物I-復(fù)合物的氣溶膠水溶液中0.03和0.3mg/ml的活性化合物?；衔颕吸入后，從23-27天將小鼠暴露于OVA氣溶膠中30分鐘。在所謂的長期吸入激發(fā)中，將小鼠暴露于復(fù)合了水溶液中HPβCD的濃度為0.03和0.3mg/ml的化合物I的氣溶膠中30分鐘，奇數(shù)周5天，暴露于OVA氣溶膠奇數(shù)周3天，持續(xù)11周。偶數(shù)周不進(jìn)行吸入。
通過使用ultrasonic nebuliser SYSTAM(Système Assistance Medical，LeLedat，F(xiàn)rance)生產(chǎn)氣溶膠，其振蕩率頻率是2.4MHz，具有可變的振動(dòng)強(qiáng)度和通風(fēng)水平。將振蕩強(qiáng)度固定在位置6并且通風(fēng)水平是25(V1/2)l/min。
氣道響應(yīng)性測量最后的過敏原暴露后24小時(shí)，如Hamelmann，E.，等，Am.J Respir.Crit.Care Med.156(1997)766-775)提出的那樣使用氣壓計(jì)體積變動(dòng)記錄儀(barometric plethysmograph)測量Penh來確定支氣管超響應(yīng)性。在基線以及吸入增加劑量(25，50，75和100mM)的乙酰甲基膽堿(Mch)后5分鐘測量Penh。
支氣管肺泡灌洗(BAL)和組織學(xué)在評價(jià)氣道響應(yīng)性后即刻處死小鼠，1ml無離子化鈣和鎂但補(bǔ)充了0.05mM鈉EDTA的PBS被經(jīng)由氣管套管滴入4次并通過輕柔的手工抽氣回收。將回收的支氣管肺泡灌洗流體(BAL)離心(4℃1800rpm 10分鐘)。將細(xì)胞沉淀清洗兩次并最終重懸于1ml PBS中。在Thoma室中進(jìn)行總細(xì)胞計(jì)數(shù)，并且在用Diff-Quick(Dade，Germany)染色后，使用標(biāo)準(zhǔn)的形態(tài)學(xué)標(biāo)準(zhǔn)在細(xì)胞離心的制劑(Cytospin 2；Cytospin，Shandon td.，Runcorn，Cheshire，U.K.)上對至少400細(xì)胞進(jìn)行不同的細(xì)胞計(jì)數(shù)。BAL后，將胸廓打開并將左主支氣管夾住。將左肺切除并立刻冷凍在液氮中用于蛋白質(zhì)化學(xué)和mRNA提取，而將右肺用于組織學(xué)。如前所述(Cataldo，D.D.，et al，Am.J.Pathol.161(2002)491-498)，用4％多聚甲醛灌注右肺并包埋于石蠟。將來自所有肺葉的5μm厚度的切片用蘇木精和曙紅染色。用炎癥記分來估計(jì)支氣管周浸潤的程度。將切片編碼并且以盲法的方式使用其它處描述的可重現(xiàn)的評分系統(tǒng)(Cataldo，D.D.，et al，Am.J.Pathol.161(2002)491-498)對支氣管周炎癥進(jìn)行打分。將從0到3的每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的值賦予每個(gè)評分的組織部分。當(dāng)沒有可以檢測到炎癥的時(shí)候，給予0的值；偶爾出現(xiàn)炎癥細(xì)胞的用1的值；當(dāng)多數(shù)支氣管被一薄層(1-5個(gè)細(xì)胞)炎癥細(xì)胞環(huán)繞的時(shí)候用2的值；當(dāng)多數(shù)支氣管被一厚層(大于5個(gè)細(xì)胞)炎癥細(xì)胞環(huán)繞的時(shí)候用3的值。由于每只小鼠有5-7個(gè)隨機(jī)選擇的組織切片被記分，炎癥記分可以被表達(dá)成平均值/動(dòng)物，而且可以被組間比較。另一個(gè)記分被稱為組織嗜曙紅細(xì)胞浸潤記分，其特別地反映了嗜曙紅細(xì)胞浸潤支氣管壁的量，其被測定如下剛果紅染色后，對每個(gè)小鼠的7個(gè)支氣管進(jìn)行研究。在支氣管周圍氣道壁的限度內(nèi)計(jì)數(shù)嗜曙紅細(xì)胞，測量上皮基膜的周長并將結(jié)果表達(dá)為嗜曙紅細(xì)胞/mm基膜的數(shù)量。將左肺快速冷凍在液氮中并用Mikro-Dismembrator S(BraunBiotech International，Melsungen，Germany)碾壓，研究前將提取物儲存在-80℃。將腎臟切除并用石蠟包埋，用蘇木精和曙紅染色5μm的切片。通過心臟穿刺對血液取樣并且將血清儲存在-80℃直到進(jìn)行分析。
所有的體內(nèi)操作均通過地方獸醫(yī)道德委員會的批準(zhǔn)。
化合物I的腹膜內(nèi)注射與安慰劑相比(圖aa)，劑量為3.75-30mg/kg的化合物I(溶液或者沉淀)的腹膜內(nèi)注射在BAL中降低了過敏原誘導(dǎo)的氣道嗜曙紅細(xì)胞炎癥。在相同的劑量，化合物I同樣顯著降低了支氣管周炎癥記分，所有測試的制劑具有相同的效力(圖4b)。組織嗜曙紅細(xì)胞浸潤記分被劑量為7.5和25mg/kg的化合物I腹膜內(nèi)注射顯著地降低了。
對化合物I和化合物I-HPβCD復(fù)合物的吸入暴露通過在短期暴露中使用純DMSO中40mg/ml化合物I溶液，化合物I的內(nèi)在活性首先被評價(jià)為局部活性的抗炎制劑。當(dāng)與單獨(dú)DMSO吸入比較的時(shí)候，該制劑的吸入導(dǎo)致BAL嗜曙紅細(xì)胞(p＜0.005)，支氣管周炎癥記分(p＜0.01)，以及支氣管超響應(yīng)性(p＜0.05)的顯著減少。
在短期暴露方案中，我們評價(jià)了含有HP-β-CD化合物I復(fù)合物的制劑對氣道炎癥和超響應(yīng)性的作用。將含有HP-β-CD化合物I復(fù)合物的制劑的吸入效果與作為參照治療的安慰劑(PBS)或者氟替卡松(1mg/ml)的效果比較。當(dāng)與安慰劑比較時(shí)，以0.03和0.3mg/ml的劑量吸入那些含有化合物I的制劑在BAL中誘導(dǎo)嗜曙紅細(xì)胞炎癥的顯著降低，其程度相當(dāng)于氟替卡松(p＜0.0001)(圖aa)。當(dāng)與安慰劑比較時(shí)，支氣管周炎癥記分也降低(p＜0.0001)(圖5b)，組織嗜曙紅細(xì)胞浸潤記分也一樣(p＜0.01)(圖5c)。
長期過敏原暴露后，BAL嗜曙紅細(xì)胞在被含有HP-β-CD化合物I復(fù)合物的制劑吸入處理后顯著降低(p＜0.001)，其程度相當(dāng)于氟替卡松(圖6a)。支氣管周圍炎癥記分同樣被吸入含有HP-β-CD化合物I復(fù)合物的制劑所顯著降低，氟替卡松也一樣(p＜0.0001)(圖6b)。在被化合物I吸入處理后，組織嗜曙紅細(xì)胞浸潤記分也被降低，其程度相當(dāng)于氟替卡松處理的小鼠(p＜0.01)(圖6c)。
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1.由三氧嘧啶衍生物或其鹽和水溶性環(huán)糊精形成的三氧嘧啶-環(huán)糊精復(fù)合物，其中的三氧嘧啶衍生物由式(I)表示 其中R1是C3-C20烷基，其可以任選地被-S-，-O-或者-NH-間斷一次或者幾次；或者基團(tuán)W-V，其中W是化學(xué)鍵或者苯基；并且V是苯基，苯氧基，苯硫基，苯基亞磺?；交酋；蛘弑交被?，其中苯基部分可以是未取代的或者被鹵素，羥基，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，C1-C6-烷硫基，C1-C6烷基亞磺酰基，C1-C6-烷基氨基，氰基，硝基或者C1-C6-烷基磺?；〈淮位蛘邘状?；和R2是C1-C10烷基，其中烷基是未取代的或者被羥基或者氨基取代一或者二次，并且可以被-S-，-O-或者-NH-任選地間斷一次或者幾次；苯甲?；鶊F(tuán)，其可以是未取代的或者被鹵素，羥基，硝基，C1-C6-烷氧基，C1-C6-烷基氨基，C1-C6-烷硫基，C1-C6-烷基亞磺酰基，C1-C6-烷基磺?；?，酰氨磺?；?，C1-C6-烷基酰氨磺酰基，二-C1-C6-烷基酰氨-磺?；〈淮位蛘邘状?；芳香雜環(huán)?；鶊F(tuán)，或者苯基-或者雜芳基基團(tuán)，其是未取代的或者被鹵素，羥基，C1-C6-烷氧基，C1-C6-烷基氨基，C1-C6-二烷基氨基，氰基，C1-C6-烷基，C2-C6鏈烯基，C2-C6-炔基，C1-C6-?；?，C1-C6-烷硫基，C1-C6-烷基磺?；?，C1-C6-烷基亞磺?；?，C1-C6--烷基氨基羰基，氨基羰基，C1-C6-烷基酰氨基磺?；０被酋；?，二-C1-C6-烷基酰氨基磺酰基，硝基，C1-C6-烷氧基羰基，羧基取代一次或者幾次。
2.權(quán)利要求1的三氧嘧啶-環(huán)糊精復(fù)合物，其中L-賴氨酸或者L-精氨酸被添加為佐劑。
3.權(quán)利要求1-2中任何一項(xiàng)的三氧嘧啶-環(huán)糊精復(fù)合物，其中的三氧嘧啶衍生物是5-聯(lián)苯-4-基-5-[4-(4-硝基-苯基)-哌嗪-1-基]嘧啶-2，4，6-三酮5-(4-苯氧基-苯基)-5-(4-嘧啶-2-基-哌嗪-1-基)-嘧啶-2，4，6-三酮5-[4-(4-氯-苯氧基)-苯基]-5-(4-嘧啶-2-基-哌嗪-1-基)-嘧啶-2，4，6-三酮5-[4-(3，4-二氯-苯氧基)-苯基]-5-(4-嘧啶-2-基-哌嗪-1-基)-嘧啶-2，4，6-三酮5-[4-(4-溴-苯氧基)-苯基]-5-(4-嘧啶-2-基-哌嗪-1-基)-嘧啶-2，4，6-三酮或其鹽。
4.權(quán)利要求1-3中任何一項(xiàng)的三氧嘧啶-環(huán)糊精復(fù)合物，其中的水溶性環(huán)糊精是β-環(huán)糊精。
5.權(quán)利要求1-3中任何一項(xiàng)的三氧嘧啶-環(huán)糊精復(fù)合物，其中的水溶性環(huán)糊精是羥丙基化的環(huán)糊精。
6.權(quán)利要求1-3中任何一項(xiàng)的三氧嘧啶-環(huán)糊精復(fù)合物，其中的水溶性環(huán)糊精是隨機(jī)甲基化的環(huán)糊精。
7.權(quán)利要求1-3中任何一項(xiàng)的三氧嘧啶-環(huán)糊精復(fù)合物，其中的水溶性環(huán)糊精是硫代丁基-β-環(huán)糊精。
8.權(quán)利要求1-3中任何一項(xiàng)的三氧嘧啶-環(huán)糊精復(fù)合物，其中的水溶性環(huán)糊精是γ-環(huán)糊精。
9一種藥物制劑，其含有權(quán)利要求1-8中任何一項(xiàng)中定義的三氧嘧啶-環(huán)糊精復(fù)合物。
10.權(quán)利要求9的藥物制劑，其含有藥用添加劑。
全文摘要
由三氧嘧啶衍生物或其鹽和水溶性環(huán)糊精衍生物形成的三氧嘧啶－環(huán)糊精復(fù)合物具有增強(qiáng)的溶解度。
文檔編號A61K47/18GK1950110SQ200580010831
公開日2007年4月18日 申請日期2005年3月31日 優(yōu)先權(quán)日2004年4月1日
發(fā)明者P·巴爾奇, D·卡塔爾多, R·恩德勒, B·埃夫拉爾, J-M·福伊達(dá)特, H-W·克雷爾, G·齊默爾曼 申請人:霍夫曼-拉羅奇有限公司, 列日大學(xué)