專(zhuān)利名稱：鄰位取代的芳基或雜芳基酰胺化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的鄰位取代的芳基或雜芳基酰胺化合物。這些化合物適合用作前列腺素E2受體的拮抗劑，因而適用于病痛和炎癥及其它炎癥相關(guān)病癥的治療或緩解。本發(fā)明還涉及包含上述化合物的藥物組合物。
背景技術(shù)：
前列腺素是與炎癥相關(guān)的疼痛、發(fā)熱和其它癥狀的介導(dǎo)體。前列腺素E2(PGE2)是在發(fā)炎癥狀中檢測(cè)到的主要類(lèi)二十烷酸。另外，它還與各種生理的和/或病理的狀況有關(guān)，例如痛覺(jué)過(guò)敏、子宮收縮、消化蠕動(dòng)、覺(jué)醒(awakeness)、胃酸分泌抑制、血壓、血小板功能、骨骼代謝、血管生成等。
對(duì)四種呈現(xiàn)不同藥理性質(zhì)的PGE2受體亞型(EP1、EP2、EP3和EP4)進(jìn)行了克隆。EP4亞型(Gs偶聯(lián)受體)促進(jìn)cAMP產(chǎn)生，并且廣泛分布于各種組織中，在PGE2介導(dǎo)的生物事件中扮演重要角色。
WO03/016254和WO00/20371描述了作為前列腺素受體拮抗劑的羧酸化合物。
盡管鄰?fù)檠趸郊柞０坊衔镌贒E2517229、DE2532420、DE2604560、DE2500157、DE2639935和EP23569中有所描述，但是它們僅涉及降血糖或降血脂的治療。此外，WO98/45268和EP1229034公開(kāi)了取代的煙酰胺化合物，但是它們僅涉及磷酸二酯酶4同功酶的抑制劑。另外，DE 2706977描述了適用于糖尿病的治療的苯甲基氧煙酰胺化合物。此外，Journal of the Institution of Chemists 69(2)，p.59-60，(1988)中也描述了適合用作止痛劑的鄰?fù)檠趸郊柞０坊衔铩?br> 期望能夠提供一種通過(guò)系統(tǒng)給藥具有強(qiáng)大結(jié)合活性、并且同時(shí)具有強(qiáng)大的EP4受體結(jié)合活性以及代謝穩(wěn)定性的新型EP4選擇性拮抗劑。

發(fā)明內(nèi)容
現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，特定的鄰位取代的芳基或雜芳基酰胺化合物是通過(guò)系統(tǒng)給藥具有止痛活性的EP4受體選擇性拮抗劑。
本發(fā)明的化合物毒性小、吸收和分布良好、溶解性佳、不易與蛋白質(zhì)結(jié)合、藥物交互作用小、對(duì)HERG通道的抑制活性低并且代謝穩(wěn)定性好。特別地，本發(fā)明的化合物呈現(xiàn)提高的半衰期。
本發(fā)明提供了下式(I)的化合物或這種化合物的藥物上可接受的酯或其藥物上可接受的鹽 其中，X表示-CH-或氮原子；Y表示NR4、氧原子或硫原子；R4表示氫原子或具有1-3個(gè)碳原子的烷基；Z表示氫原子或鹵原子；R1表示具有1-6個(gè)碳原子的烷基，可選地用1-2個(gè)獨(dú)立地選自具有1-6個(gè)碳原子的烷氧基、三氟甲基、具有2-5個(gè)碳原子的烷?；?、具有3-7個(gè)碳原子的環(huán)烷基、苯基、苯氧基、雜環(huán)基和雜芳基的基團(tuán)取代；具有3-7個(gè)碳原子的環(huán)烷基，可選地用具有1-3個(gè)碳原子的烷基取代；或者雜環(huán)基；R2和R3獨(dú)立地表示氫原子或具有1-3個(gè)碳原子的烷基；或R2和R3一起形成具有3-6個(gè)碳原子的亞烷基鏈；所述雜芳基為4-7元芳環(huán)系，其具有或者1-4個(gè)環(huán)氮雜原子或者0-2個(gè)氮環(huán)雜原子和1個(gè)氧或1個(gè)硫環(huán)雜原子；所述雜環(huán)基為4-7元飽和環(huán)系，其具有或者1-4個(gè)環(huán)氮雜原子或者0-2個(gè)氮環(huán)雜原子和1個(gè)氧或1個(gè)硫環(huán)雜原子；R1的定義中的所述苯基、苯氧基和所述雜芳基是未被取代的或被選自取代基α的至少一個(gè)取代基取代；所述取代基α選自鹵原子、具有1-4個(gè)碳原子的烷基、具有1-4個(gè)碳原子的鹵烷基、羥基、具有1-4個(gè)碳原子的烷氧基、具有1-4個(gè)碳原子的鹵烷氧基、氰基、具有1-4個(gè)碳原子的羥基烷基、在烷氧基和烷基中具有1-4個(gè)碳原子的烷氧烷基、具有1-4個(gè)碳原子的烷基磺?；?、具有2-5個(gè)碳原子的烷?；?、具有2-4個(gè)碳原子的烯基、具有2-4個(gè)碳原子的炔基、具有1-4個(gè)碳原子的烷基硫基、硝基、氨基、具有1-4個(gè)碳原子的單或二烷基氨基、氨基磺?；⒕哂?-4個(gè)碳原子的烷氧羰基、具有1-4個(gè)碳原子的烷基磺酰基氨基、具有3-7個(gè)碳原子的環(huán)烷基和具有1-6個(gè)碳原子的單或二烷基氨基羰基；本發(fā)明的鄰位取代的芳基或雜芳基酰胺化合物對(duì)于前列腺素具有拮抗作用，因而具有治療用途，特別是用于治療下列病癥或癥狀疼痛、神經(jīng)性疼痛、與風(fēng)濕熱相關(guān)的發(fā)熱或發(fā)炎、流感或其它病毒感染、普通感冒、下腰痛和頸痛、骨痛、產(chǎn)后疼痛、痛經(jīng)、頭痛、偏頭痛、牙痛、扭傷和拉傷、肌炎、神經(jīng)痛、纖維肌痛、滑膜炎、關(guān)節(jié)炎(包括風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎)、變性關(guān)節(jié)病(骨關(guān)節(jié)炎)、痛風(fēng)和強(qiáng)直性脊柱炎、粘液囊炎、燒傷(包括輻射和腐蝕性化學(xué)損傷)、曬傷、外科和牙科手術(shù)后的疼痛、骨折、免疫和自身免疫疾?。患?xì)胞瘤樣改變或繼發(fā)性腫瘤生長(zhǎng)；糖尿病性視網(wǎng)膜病、腫瘤血管生成；前列腺素類(lèi)誘發(fā)的與痛經(jīng)相關(guān)的平滑肌收縮、早產(chǎn)、過(guò)敏性鼻炎、特異反應(yīng)性皮炎、哮喘或嗜曙紅細(xì)胞相關(guān)的失調(diào)癥、hyperimmunoglobulinaemia、Castleman病、骨髓瘤；Alzheimer病、睡眠失調(diào)癥、內(nèi)分泌紊亂；青光眼；促進(jìn)骨骼形成；消化性潰瘍中的細(xì)胞保護(hù)、胃炎、局限性回腸炎、潰瘍性結(jié)腸炎、憩室炎或其它腸胃病變；腸胃出血和患者進(jìn)行化療；選自前凝血酶減少癥、血友病、其它出血問(wèn)題的凝固失調(diào)癥；血栓形成；閉塞性脈管病；預(yù)手術(shù)；抗凝；交感神經(jīng)痛；截肢導(dǎo)致的疼痛、皮膚病(例如濕疹、牛皮癬)；眼病例如青光眼、視網(wǎng)膜炎、視網(wǎng)膜病、眼色素層炎和對(duì)眼部組織的急性損傷(例如結(jié)膜炎)；肺病(例如支氣管炎、肺氣腫、過(guò)敏性鼻炎、呼吸困難綜合征、飼?shū)澱叻尾?、農(nóng)民肺、COPD)；腸胃道疾病(例如，口瘡性潰瘍、克羅恩氏病(Crohn’sdisease)、特異反應(yīng)性胃炎、gastritis varialoforme、潰瘍性結(jié)腸炎、腹腔病、局限性回腸炎、腸易激綜合征、炎癥性腸病、腸胃反流病)；器官移植；其它具有發(fā)炎成分的癥狀，例如血管病、偏頭痛、結(jié)節(jié)性動(dòng)脈周?chē)?、甲狀腺炎、再生障礙性貧血、淋巴肉芽腫病(Hodgkin’s disease)、sclerodoma、myaesthenia gravis、多發(fā)性硬化、肉狀瘤病、腎病變綜合征、白塞氏綜合征、多肌炎、齦炎、心肌缺血、發(fā)熱、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、腱炎、粘液囊炎和干燥綜合征；血小板功能異常(例如閉塞性血管病)；利尿作用；陽(yáng)痿或勃起功能障礙；特征為骨骼代謝或再吸收異常的骨骼疾病，例如骨質(zhì)疏松病、高鈣血病、甲狀旁腺功能亢進(jìn)、Paget骨病、骨質(zhì)溶解、伴隨或不伴隨骨轉(zhuǎn)移的惡性高鈣血病、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牙周炎、骨關(guān)節(jié)炎、骨痛、骨質(zhì)缺乏癥、cancer cacchexia、結(jié)石癥、結(jié)石病(特別是尿石病)、實(shí)性癌、痛風(fēng)和強(qiáng)直性脊柱炎、腱炎和滑囊炎；NSAID和COX-2的血液動(dòng)力學(xué)抑制劑的副作用、心血管病、高血壓或心肌缺血；功能性或器質(zhì)性靜脈功能不全；曲張治療；痔瘡；動(dòng)脈壓顯著下降引起的休克狀態(tài)(例如膿毒性休克)；神經(jīng)變性病和神經(jīng)變性，例如癡呆、特別是變性癡呆(包括老年癡呆、Alzheimer病、Pick病、Huntingdon舞蹈病、Parkinson病和Creutzfeldt-Jakob病、ALS、運(yùn)動(dòng)神經(jīng)病)；血管性癡呆(包括多梗死性癡呆)；以及與顱內(nèi)占位性病變相關(guān)的癡呆；外傷；感染及其相關(guān)病癥(包括HIV感染)；代謝；毒素；缺氧和維生素缺乏；與老化相關(guān)的輕度認(rèn)知損傷、特別是年齡相關(guān)記憶損傷；神經(jīng)保護(hù)、撞擊后的神經(jīng)變性、心博停止、心肺旁通、外傷性大腦損傷、脊髓損傷；耳鳴、1型糖尿病并發(fā)癥(例如糖尿病微血管病、糖尿病腎病、黃斑部變性、青光眼)、腎病綜合征、再生障礙性貧血、葡萄膜炎、川崎氏病和伯克氏?。荒I功能障礙(例如腎炎特別是系膜增生性血管球性腎炎、腎炎并發(fā)癥)、肝功能障礙(肝炎、肝硬化)、胃腸功能失調(diào)(腹瀉)、酒精性肝硬化、淀粉樣變性、動(dòng)脈粥樣硬化、心臟病、硬化、器官移植反應(yīng)、糖皮質(zhì)激素引發(fā)的骨質(zhì)疏松、牙缺失、骨折、多發(fā)性骨髓瘤、各類(lèi)水腫、高血壓、經(jīng)期前緊張、尿路結(jié)石、少尿、高磷酸鹽尿癥、prutitus蕁麻疹、接觸型皮炎、漆性皮炎、尿頻、學(xué)習(xí)障礙、牙齦炎、predontitis、肺損傷、肝損傷和便秘，或哺乳動(dòng)物特別是人類(lèi)的其它類(lèi)似疾病。
式(I)的化合物還適用于防止或降低對(duì)引起依賴的藥劑的依賴性，或防止或減少對(duì)其的耐藥性或逆轉(zhuǎn)對(duì)其的耐藥性。引起依賴的藥劑的例子包括鴉片(例如嗎啡)、CNS抑制劑(例如乙醇)、精神興奮劑(例如可卡因)和尼古丁。
式(I)的化合物還具有擁有各種特性的利尿活性，例如相對(duì)于促尿鈉效應(yīng)的低促尿鉀活性、較大的磷排泄。
優(yōu)選地，本發(fā)明的鄰位取代的芳基或雜芳基酰胺化合物具有對(duì)前列腺素的拮抗作用，因而適合治療用途，特別是治療下列疾病和病癥與風(fēng)濕熱相關(guān)的疼痛或發(fā)炎、流感或其它病毒感染、普通感冒、下腰痛和頸痛、骨痛、痛經(jīng)、頭痛、偏頭痛、牙痛、扭傷和拉傷、肌炎、神經(jīng)痛、纖維肌痛、滑膜炎、關(guān)節(jié)炎(包括風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎)、變性關(guān)節(jié)病(骨關(guān)節(jié)炎)、痛風(fēng)和強(qiáng)直性脊柱炎、粘液囊炎、燒傷(包括輻射和腐蝕性化學(xué)損傷)、曬傷、外科和牙科手術(shù)后的疼痛、骨折、免疫和自身免疫疾??；細(xì)胞瘤樣改變或繼發(fā)性腫瘤生長(zhǎng)；糖尿病性視網(wǎng)膜病、腫瘤血管生成；前列腺素類(lèi)誘發(fā)的與痛經(jīng)相關(guān)的平滑肌收縮、早產(chǎn)、過(guò)敏性鼻炎、特異反應(yīng)性皮炎、哮喘或嗜曙紅細(xì)胞相關(guān)的失調(diào)癥、皮膚病(例如濕疹、牛皮癬)；肺病(例如支氣管炎、肺氣腫、過(guò)敏性鼻炎、呼吸困難綜合征、飼?shū)澱叻尾　⑥r(nóng)民肺、COPD)；腸胃道疾病(例如，口瘡性潰瘍、克羅恩氏病(Crohn’sdisease)、特異反應(yīng)性胃炎、gastritis varialoforme、潰瘍性結(jié)腸炎、腹腔病、局限性回腸炎、腸易激綜合征、炎癥性腸病、腸胃反流病)；利尿作用；特征為骨骼代謝或再吸收異常的骨骼疾病，例如骨質(zhì)疏松病、高鈣血病、甲狀旁腺功能亢進(jìn)、Paget骨病、骨質(zhì)溶解、伴隨或不伴隨骨轉(zhuǎn)移的惡性高鈣血病、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牙周炎、骨關(guān)節(jié)炎、骨痛、骨質(zhì)缺乏癥和cancer cacchexia。
本發(fā)明的化合物可用于疼痛，特別是炎性或神經(jīng)性疼痛的一般治療。生理學(xué)疼痛是一種重要的保護(hù)機(jī)制，它被設(shè)計(jì)成對(duì)來(lái)自外界的潛在有害刺激的危險(xiǎn)產(chǎn)生警告。該系統(tǒng)通過(guò)一組特定的主感覺(jué)神經(jīng)元運(yùn)轉(zhuǎn)，并且專(zhuān)門(mén)由有害刺激經(jīng)外圍傳感機(jī)制所激活(詳細(xì)內(nèi)容可參見(jiàn)Millan 1999 Prog.Neurobio.571-164)。這些感覺(jué)纖維被稱為傷害感受器，表現(xiàn)為傳導(dǎo)速度低的小直徑軸突。傷害感受器對(duì)有害刺激的強(qiáng)度、持續(xù)時(shí)間和性質(zhì)進(jìn)行編碼，并且通過(guò)其到脊髓上的經(jīng)拓?fù)浣M織的突起編碼刺激的位置。傷害感受器存在于有疼痛反應(yīng)的神經(jīng)纖維上，所述神經(jīng)纖維具有兩種類(lèi)型A-δ纖維(有髓纖維)和C纖維(無(wú)髓纖維)。經(jīng)過(guò)背角中的復(fù)雜處理之后，傷害感受器輸入所產(chǎn)生的活性被直接或經(jīng)由腦干中繼核傳遞至腹側(cè)丘腦，然后傳遞至皮質(zhì)，在皮質(zhì)上產(chǎn)生痛覺(jué)。
劇烈急性疼痛和慢性疼痛可以包括由病理學(xué)過(guò)程驅(qū)動(dòng)的相同徑路，其本身停止提供保護(hù)機(jī)制，而是促進(jìn)緩解與大量疾病狀態(tài)相關(guān)的癥狀。疼痛是許多外傷和疾病狀態(tài)的特征。當(dāng)對(duì)機(jī)體組織產(chǎn)生實(shí)質(zhì)性損傷(由于疾病或外傷)時(shí)，傷害感受器激活特性被改變。在損傷外圍、局部附近以及傷害感受器終止的中心形成敏感區(qū)域。這導(dǎo)致?lián)p傷位置處及其鄰近正常組織中的過(guò)敏性。對(duì)于急性疼痛，這些機(jī)制是有利的并且可以引發(fā)修復(fù)過(guò)程，而且一旦損傷痊愈，過(guò)敏性即恢復(fù)正常。然而，對(duì)于許多慢性疼痛狀態(tài)，過(guò)敏性的持續(xù)時(shí)間遠(yuǎn)大于愈合過(guò)程，并且通常導(dǎo)致神經(jīng)系統(tǒng)損傷。這種損傷常常造成傳入纖維適應(yīng)不良(Woolf & Salter 2000 Science 2881765-1768)。如果患者癥狀中存在不適和反常敏感性，則出現(xiàn)臨床疼痛?；颊咄鶃?lái)源混雜而且具有各種疼痛癥狀。疼痛存在一些典型的亞型1)自發(fā)性疼痛，可以是麻木、灼痛或刺痛；2)夸大的有害刺激激發(fā)的疼痛(痛覺(jué)過(guò)敏)；3)正常的無(wú)害刺激產(chǎn)生的疼痛(異常疼痛)(Meyer等，1994 Textbook of Pain 13-44)。盡管具有背痛、關(guān)節(jié)炎痛、CNS外傷或神經(jīng)性疼痛的患者可以具有類(lèi)似的癥狀，但是隱含的機(jī)制是有差異的，因而需要不同的治療方案。因此，根據(jù)病理生理學(xué)上的差異，疼痛可分為許多不同范疇，包括傷害感受性疼痛、炎性疼痛、神經(jīng)性疼痛等。應(yīng)當(dāng)注意到，某些類(lèi)型的疼痛具有多個(gè)病因，因而可歸入不止一個(gè)范疇，例如背痛、癌癥疼痛既具有傷害感受性也具有神經(jīng)性。
傷害感受性疼痛是通過(guò)組織損傷或通過(guò)可能造成損傷的劇烈刺激而引起的。疼痛傳入是通過(guò)傷害傳感器在損傷位置的刺激傳導(dǎo)而被激活的，并且在其末端水平對(duì)脊髓進(jìn)行敏化。然后通過(guò)脊柱通道傳遞至感知疼痛的大腦(Meyer等，1994 Textbook of Pain 13-44)。傷害感受器的活化激活了兩類(lèi)傳入神經(jīng)纖維。有髓性A-δ纖維快速傳輸并對(duì)劇烈和刺穿痛感作出應(yīng)答，而無(wú)髓性C纖維以較慢速度傳輸并傳達(dá)隱痛。中度至劇烈急性傷害感受性疼痛是以下疼痛(但不限于以下疼痛)的主要特征拉傷/扭傷導(dǎo)致的疼痛、手術(shù)后疼痛(任何類(lèi)型的外科手術(shù)后的疼痛)、外傷后疼痛、灼痛、心肌梗塞、急性胰腺炎和腎絞痛。而且，癌癥相關(guān)急性疼痛綜合征一般歸因于治療交互作用，例如化療毒性、免疫療法、激素療法和放射療法。中度至劇烈急性傷害感受性疼痛是以下疼痛(但不限于以下疼痛)的主要特征可以是腫瘤相關(guān)疼痛(例如骨痛、頭痛和面部疼痛、放射后綜合征)或與癌癥治療相關(guān)(例如化療后綜合征、慢性外科手術(shù)后疼痛綜合征、放射后綜合征)的癌癥疼痛、可由椎間盤(pán)突出或破裂或lumber facet關(guān)節(jié)、骶骨關(guān)節(jié)、脊柱旁肌或后縱向韌帶異常引起的背痛。
神經(jīng)性疼痛被定義為由神經(jīng)系統(tǒng)的主要損害或功能障礙引發(fā)或?qū)е碌奶弁?IASP定義)。神經(jīng)損傷可由外傷和疾病引起，因此術(shù)語(yǔ)“神經(jīng)性疼痛”包括具有不同病原的許多疾病。這些疾病包括但不限于，糖尿病性神經(jīng)病、皰疹后神經(jīng)痛、背痛、癌癥神經(jīng)病、HIV神經(jīng)病、幻肢痛、腕管綜合征、慢性酒精中毒、甲狀腺機(jī)能減退、三叉神經(jīng)痛、尿毒癥或維生素缺乏。神經(jīng)性疼痛由于不具保護(hù)作用，因而是病態(tài)的。它通常在初始原因剛剛消失后出現(xiàn)，一般持續(xù)數(shù)年，極大地降低了患者的生活質(zhì)量(Woolf和Mannion 1999 Lancet 3531959-1964)。神經(jīng)性疼痛的癥狀難以治療，原因在于它們種類(lèi)繁多，甚至在患有同樣疾病的患者之間也存在差異(Woolf &Decosterd 1999 Pain Supp.6S141-S147；Woolf和Mannion 1999 Lancet 3531959-1964)。神經(jīng)性疼痛包括自發(fā)性疼痛，可以是連續(xù)性或突發(fā)性和異常激發(fā)的疼痛，例如痛覺(jué)過(guò)敏(對(duì)有害刺激的敏感性提高)和異常性疼痛(對(duì)正常的無(wú)害刺激敏感)。
發(fā)炎過(guò)程是對(duì)組織損傷或外來(lái)物質(zhì)的存在進(jìn)行響應(yīng)而激發(fā)的一系列復(fù)雜的生化和細(xì)胞事件，可導(dǎo)致腫脹和疼痛(Levine和Taiwo 1994Textbookof Pain 45-56)。關(guān)節(jié)炎性疼痛構(gòu)成了發(fā)炎性疼痛的大部分。類(lèi)風(fēng)濕病是發(fā)達(dá)國(guó)家中常見(jiàn)的一種慢性炎癥，并且類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎是導(dǎo)致殘疾的常見(jiàn)原因。類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的準(zhǔn)確病因是未知的，但是目前的假說(shuō)認(rèn)為遺傳因素和微生物因素二者都是重要的(Grennan & Jayson 1994 Textbook of Pain 397-407)。已有估計(jì)，約有1600萬(wàn)美國(guó)人患有癥狀性骨關(guān)節(jié)炎(OA)或變性關(guān)節(jié)病，其中大多數(shù)患者年齡超過(guò)60歲，而且隨著人口老齡化，這一數(shù)字有望增至4000萬(wàn)，使之成為嚴(yán)重的公共健康問(wèn)題(Houge & Mersfelder2002 Ann Pharmacother.36679-686；McCarthy等，1994 Textbook of Pain387-395)。大部分OA患者由于疼痛而尋求藥物幫助。關(guān)節(jié)炎對(duì)社會(huì)心理和身體功能具有顯著影響，而且是今后生活中導(dǎo)致殘疾的首要原因。其它類(lèi)型的炎性疼痛包括但不限于炎性腸疾病(IBD)。
其它類(lèi)型的疼痛包括但不限于-肌-骨骼疾病，包括但不限于，肌痛、纖維肌痛、脊椎炎、血清陰性(非風(fēng)濕性)關(guān)節(jié)病、非關(guān)節(jié)風(fēng)濕病、抗肌萎縮蛋白病、糖原分解、多肌炎、膿性肌炎。
-中樞疼痛或“丘腦性疼痛”，其定義為神經(jīng)系統(tǒng)損傷或功能障礙引起的疼痛，包括但不限于，中樞撞擊后疼痛、多發(fā)性硬化癥、脊髓損傷、Parkinson癥和癲癇癥。
-心臟和血管疼痛，包括但不限于，心絞痛、心肌梗塞、二尖瓣狹窄、心包炎、Raynaud現(xiàn)象、scleredoma、骨骼肌缺血。
-內(nèi)臟疼痛和腸胃疾病。內(nèi)臟包括腹腔的器官。這些器官包括性器官、脾臟和部分消化系統(tǒng)。與內(nèi)臟相關(guān)的疼痛可分為消化內(nèi)臟疼痛和非消化內(nèi)臟疼痛。常見(jiàn)的腸胃(GI)疾病包括功能型腸疾病(FBD)和炎性腸疾病(IBD)。這些GI疾病包括大量目前僅受到適度控制的疾病狀態(tài)，對(duì)于FBD，包括胃食管反流病、消化不良、腸易激綜合征(IBS)和功能性腹部疼痛綜合征(FAPS)；對(duì)于IBD，包括Crohn病、回腸炎和潰瘍性結(jié)腸炎，這些均有規(guī)律地造成內(nèi)臟疼痛。其它類(lèi)型的內(nèi)臟疼痛包括但不限于與痛經(jīng)、盆腔疼痛和胰腺炎相關(guān)的疼痛。
-頭痛，包括但不限于，偏頭痛、有先兆偏頭痛、無(wú)先兆偏頭痛、集束性頭痛、緊縮性頭痛。
-口面疼痛，包括但不限于，牙痛、顳下頜肌膜疼痛。
本發(fā)明提供了用于治療哺乳動(dòng)物對(duì)象體內(nèi)的由前列腺素介導(dǎo)的疾病病癥的藥物組合物，包括向所述對(duì)象施用治療有效量的式(I)的化合物。
此外，本發(fā)明還提供了一種組合物，其包括治療有效量的式(I)的鄰位取代的芳基和雜芳基酰胺化合物或其藥物上可接受的鹽以及藥物上可接受的載劑。其中，所述組合物優(yōu)選用于治療以上定義的疾病。
而且，本發(fā)明提供了式(I)的化合物，或者這種化合物的藥物上可接受的酯或其藥物上可接受的鹽作為藥物的用途。
而且，本發(fā)明提供了治療以上定義的疾病病癥的方法，其包括向所述對(duì)象施用治療有效量的式(I)的化合物。
另外，本發(fā)明提供了治療哺乳動(dòng)物(優(yōu)選人類(lèi))體內(nèi)的以上定義的疾病病癥的方法，其包括向所述對(duì)象施用治療有效量的式(I)的化合物。
此外，本發(fā)明提供了治療有效量的式(I)的化合物在制備治療以上定義的疾病病癥的藥物中的用途。
具體實(shí)施例方式
本文所用術(shù)語(yǔ)“鹵素”，是指氟、氯、溴和碘，優(yōu)選氟和氯。
本文所用術(shù)語(yǔ)“烷基”，是指直鏈或支鏈的飽和基，包括但不限于，甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基。
本文所用術(shù)語(yǔ)“亞烷基”，是指從每個(gè)末端碳去除一個(gè)氫原子的飽和烷烴(直鏈或支鏈)，例如亞甲基、亞乙基、甲基亞乙基、亞丙基、亞丁基、亞戊基、亞己基等。
本文所用術(shù)語(yǔ)“烯基”，是指具有至少一個(gè)雙鍵的烴基，包括但不限于，乙烯基、丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基等。
本文所用術(shù)語(yǔ)“炔基”，是指具有至少一個(gè)三鍵的烴基，包括但不限于，乙炔基、丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基等。
本文所用術(shù)語(yǔ)“烷氧基”，是指烷基-O-，包括但不限于，甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基。
本文所用術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基”，是指3-7個(gè)碳原子的飽和碳環(huán)狀基，包括但不限于，環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)己基、環(huán)庚基等。
本文所用術(shù)語(yǔ)“烷?；?，是指具有例如R’-C(O)-(其中R’為C1-4烷基或C3-4環(huán)烷基)的羰基的基團(tuán)，包括但不限于，甲?；?、乙?；?、乙基-C(O)-、正丙基-C(O)-、異丙基-C(O)-、正丁基-C(O)-、異丁基-C(O)-、仲丁基-C(O)-、叔丁基-C(O)-、環(huán)丙基-C(O)-、環(huán)丁基-C(O)-等本文所用術(shù)語(yǔ)“鹵烷基”，是指被如上定義的鹵原子取代的烷基，包括但不限于，氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、2-氟乙基、2，2-二氟乙基、2，2，2-三氟乙基、2，2，2-三氯乙基、3-氟丙基、4-氟丁基、氯甲基、三氯甲基、碘甲基和溴甲基等。
本文所用術(shù)語(yǔ)“鹵烷氧基”，是指鹵烷基-O-，包括但不限于，氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、2-氟乙氧基、2，2-二氟乙氧基、2，2，2-三氟乙氧基、2，2，2-三氯乙氧基、3-氟丙氧基、4-氟丁氧基、氯甲氧基、三氯甲氧基、碘甲氧基、和溴甲氧基等。
本文所用術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)”，是指4-7元飽和雜單環(huán)，其包含或者1-4個(gè)環(huán)氮雜原子或者0-2個(gè)氮環(huán)雜原子和1個(gè)氧或1個(gè)硫環(huán)雜原子。這樣的雜環(huán)的例子包括但不限于，哌啶基、哌啶代、吡咯烷基、吡咯烷代、四氫呋喃基、哌嗪基、嗎啉基、嗎啉代或四氫吡喃基。
本文所用術(shù)語(yǔ)“雜芳基”，是指4-7元芳族雜單環(huán)，其包含或者1-4個(gè)環(huán)氮雜原子或者0-2個(gè)氮環(huán)雜原子和1個(gè)氧或1個(gè)硫環(huán)雜原子。這樣的雜芳基的例子包括但不限于，吡唑基、呋喃基、噻吩基、噁唑基、四唑基、噻唑基、咪唑基、噻二唑基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、噻吩基(thiophenyl)、吡嗪基、噠嗪基、異噁唑基、異噻唑基、三唑基或呋咱基。
如果式(I)的化合物包含羥基，則它們可形成酯。這樣的酯的例子包括與羥基的酯和與羧基的酯。酯殘基可以是普通的保護(hù)基或可在體內(nèi)通過(guò)例如水解的生物方法分解的保護(hù)基。
術(shù)語(yǔ)“酯”是指可在體內(nèi)通過(guò)例如水解的生物方法分解并形成其游離酸或鹽的保護(hù)基。可通過(guò)以下方法確定化合物是否為這樣的衍生物通過(guò)靜脈注射對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(例如大鼠或小鼠)給藥該化合物，然后研究該動(dòng)物的體液，確定是否可以檢測(cè)到所述化合物或其藥物上可接受的鹽。
用于羧基或羥基的酯的基團(tuán)的優(yōu)選例子包括(1)脂族烷酰基，例如烷?；?，例如甲酰基、乙?；?、丙酰基、丁?；?、異丁?；⑽祯；⑻匚祯；?、戊酰基、異戊?；?、辛?；?、壬?；?、癸?；?、3-甲基壬酰基、8-甲基壬酰基、3-乙基辛酰基、3，7-二甲基辛?；?、十一?；?、十二酰基、十三?；?、十四?；?、十五酰基、十六?；?、1-甲基十五酰基、14-甲基十五?；?、13，13-二甲基十四酰基、十七?；?、15-甲基十六酰基、十八?；?、1-甲基十七酰基、十九?；⒍；投货；畸u化烷基羰基，例如氯乙酰基、二氯乙酰基、三氯乙?；腿阴；?；烷氧基烷酰基，例如甲氧基乙酰基；不飽和烷酰基，例如丙烯?；?、丙炔?；?、甲基丙烯?；投辊；?、異巴豆酰基和(E)-2-甲基-2-丁烯?；?；(2)芳族烷?；?，例如芳基羰基，例如苯甲?；?、α-萘甲?；挺?萘甲?；畸u化芳基羰基，例如2-溴苯甲酰基和4-氯苯甲?；?；烷基化芳基羰基，例如2，4，6-三甲基苯甲?；?-甲苯酰基；烷氧基化芳基羰基，例如4-茴香?；?；硝化芳基羰基，例如4-硝基苯甲酰基和2-硝基苯甲?；?；烷氧基羰基化芳基羰基，例如2-(甲氧基羰基)苯甲酰基；芳化芳基羰基，例如4-苯基苯甲酰基；(3)烷氧基羰基，例如烷氧基羰基，例如甲氧基羰基、乙氧基羰基、丙氧基羰基、丁氧基羰基、仲丁氧基羰基、叔丁氧基羰基和異丁氧基羰基；鹵素取代或三(烷基)甲硅烷基取代的烷氧基羰基，例如2，2，2-三氯乙氧基羰基和2-三甲基甲硅烷基乙氧基羰基；四氫吡喃基和四氫噻喃基，例如四氫吡喃-2-基、3-溴四氫吡喃-2-基、4-甲氧基四氫吡喃-4-基、四氫噻喃-2-基和4-甲氧基四氫噻喃-4-基；四氫呋喃基和四氫噻吩基，例如四氫呋喃-2-基和四氫噻吩-2-基；(5)甲硅烷基，例如三(烷基)甲硅烷基，例如三甲基甲硅烷基、三乙基甲硅烷基、異丙基二甲基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基、甲基二異丙基甲硅烷基、甲基二叔丁基甲硅烷基和三異丙基甲硅烷基；被一個(gè)和多個(gè)芳基和烷基取代的甲硅烷基，例如二苯基甲基甲硅烷基、二苯基丁基甲硅烷基、二苯基異丙基甲硅烷基和苯基二異丙基甲硅烷基；(6)烷氧基甲基，例如烷氧基甲基，例如甲氧基甲基、1，1-二甲基-1-甲氧基甲基、乙氧基甲基、丙氧基甲基、異丙氧基甲基、丁氧基甲基和叔丁氧基甲基；烷氧基化烷氧基甲基，例如2-甲氧基乙氧基甲基；鹵(烷氧基)甲基，例如2，2，2-三氯乙氧基甲基和二(2-氯乙氧基)甲基；(7)取代的乙基，例如烷氧基化乙基，例如1-乙氧基乙基和1-(異丙氧基)乙基；鹵化乙基，例如2，2，2-三氯乙基；(8)芳烷基，例如被1-3個(gè)芳基取代的烷基，例如苯甲基、α-萘甲基、β-萘甲基、二苯基甲基、三苯基甲基、α-萘二苯基甲基和9-蒽甲基；被1-3個(gè)取代的芳基取代的烷基(其中一個(gè)或多個(gè)芳基被一個(gè)或多個(gè)烷基、烷氧基、硝基、鹵素或氰基取代)，例如4-甲基苯甲基、2，4，6-三甲基苯甲基、3，4，5-三甲基苯甲基、4-甲氧基苯甲基、4-甲氧基苯基二苯基甲基、2-硝基苯甲基、4-硝基苯甲基、4-氯苯甲基、4-溴苯甲基和4-氰基苯甲基；烯基氧羰基，例如乙烯基氧羰基；芳基氧羰基，例如苯氧基羰基；芳烷基氧羰基(其中芳環(huán)可被1或2個(gè)烷氧基或硝基取代)，例如苯甲基氧羰基、4-甲氧基苯甲基氧羰基、3，4-二甲氧基苯甲基氧羰基、2-硝基苯甲基氧羰基和4-硝基苯甲基氧羰基。
本文所用術(shù)語(yǔ)“治療”，是指使疾病或病癥，或者這樣的疾病或病癥的一種或多種癥狀得到好轉(zhuǎn)、緩解、抑制發(fā)展或預(yù)防。本文所用術(shù)語(yǔ)“療效”是指以上定義的“治療”的效果。
一種優(yōu)選的本發(fā)明的式(I)的化合物是Y表示NR4或氧原子，并且R4表示具有1-3個(gè)碳原子的烷基。更優(yōu)選地，Y表示NCH3或氧原子。最優(yōu)選地，Y表示氧原子。
一種優(yōu)選的本發(fā)明的式(I)的化合物是其中Z表示鹵原子。更優(yōu)選地，Z表示氯原子。
一種優(yōu)選的本發(fā)明的式(I)的化合物是其中R1表示具有1-6個(gè)碳原子的烷基，可選地用1-2個(gè)獨(dú)立地選自具有1-6個(gè)碳原子的烷氧基、具有3-7個(gè)碳原子的環(huán)烷基、苯基、苯氧基和雜芳基的基團(tuán)取代；所述雜芳基為5-6元芳環(huán)系，其具有或者1-2個(gè)環(huán)氮雜原子或者1或2個(gè)氮環(huán)雜原子和1個(gè)氧或1個(gè)硫環(huán)雜原子；R1的定義中的所述苯基和所述雜芳基未被取代或被選自取代基α的至少一個(gè)取代基取代；所述取代基α選自鹵原子、具有1-4個(gè)碳原子的烷基、具有1-4個(gè)碳原子的鹵烷基、羥基、具有1-4個(gè)碳原子的烷氧基、具有1-4個(gè)碳原子的鹵烷氧基、氰基、具有1-4個(gè)碳原子的羥基烷基、在烷氧基和烷基中具有1-4個(gè)碳原子的烷氧烷基、具有1-4個(gè)碳原子的烷基磺?；途哂?-5個(gè)碳原子的烷酰基。更優(yōu)選地，R1表示具有1-6個(gè)碳原子的烷基，可選地用1-2個(gè)獨(dú)立地選自具有1-3個(gè)碳原子的烷氧基、具有4-6個(gè)碳原子的環(huán)烷基、苯基、噁唑基、異噁唑基和苯氧基的基團(tuán)取代；所述苯基、噁唑基、異噁唑基和苯氧基未被取代或被選自取代基α的至少一個(gè)取代基取代；所述取代基α選自鹵原子、具有1-2個(gè)碳原子的烷基和氰基。更優(yōu)選地，R1表示具有1-6個(gè)碳原子的烷基，可選地用1-2個(gè)獨(dú)立地選自具有4-6個(gè)碳原子的環(huán)烷基、苯基和苯氧基的基團(tuán)取代；所述苯基未被取代或被選自取代基α的至少一個(gè)取代基取代；所述取代基α選自鹵原子、具有1-2個(gè)碳原子的烷基和氰基。更優(yōu)選地，R1表示具有1-6個(gè)碳原子的烷基，可選地用1-2個(gè)獨(dú)立地選自具有4-5個(gè)碳原子的環(huán)烷基、苯基和苯氧基的基團(tuán)取代；所述苯基未被取代或被選自取代基α的至少一個(gè)取代基取代；所述取代基α選自鹵原子(例如氟原子和氯原子)、具有1-2個(gè)碳原子的烷基和氰基。更優(yōu)選地，R1表示戊基、苯甲基、苯乙基、苯氧基乙基和環(huán)丁基甲基；所述苯基可選地被1-2個(gè)獨(dú)立地選自氟原子、氯原子、氰基和甲基的基團(tuán)取代。
一種優(yōu)選的本發(fā)明的式(I)的化合物是其中R2和R3獨(dú)立地表示氫原子或具有1-3個(gè)碳原子的烷基。更優(yōu)選地，R2表示氫原子并且R3表示甲基。
特別優(yōu)選的本發(fā)明的化合物包括式(I)的每個(gè)變量均選自每個(gè)變量的優(yōu)選組的那些化合物。更優(yōu)選的本發(fā)明的化合物包括式(I)的每個(gè)變量均選自每個(gè)變量的更優(yōu)選組的那些化合物。
優(yōu)選的本發(fā)明的單個(gè)化合物選自以下4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(2-氯苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸；4-[(1S)-1-({5-氯-2-[2-(2-甲基苯基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸；4-[(1S)-1-({5-氯-2-[2-(4-甲基苯基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸；4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(3-氯苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸；4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(4-氯苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸；4-((1S)-1-{[5-氯-2-(環(huán)丁基甲氧基)苯甲?；鵠氨基}乙基)苯甲酸；
4-((1S)-1-{[5-氯-2-(環(huán)己基氧)苯甲?；鵠氨基}乙基)苯甲酸；4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(2-氰基苯甲基)氧]苯甲酰基}氨基)乙基]苯甲酸；4-[(1S)-1-({5-氯-2-[2-(4-氟苯基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸；4-((1S)-1-{[5-氯-2-(3-甲基丁氧基)苯甲酰基]氨基}乙基)苯甲酸；4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(4-氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸；4-[(1S)-1-({5-氯-2-[2-(2-氟苯基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸；4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(2，5-二氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸；4-[({5-氯-2-[2-(2-甲基苯基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)甲基]苯甲酸；4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(2-氯-4-氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸；4-((1S)-1-{[5-氯-2-(2-苯氧基乙氧基)苯甲酰基]氨基}乙基)苯甲酸；4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(3，4-二氟苯甲基)氧]苯甲酰基}氨基)乙基]苯甲酸；4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(4-氯-2-氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸；4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[(4-氯苯甲基)氧]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸；4-((1S)-1-{[2-(苯甲基氧)-5-氯苯甲?；鵠氨基}乙基)苯甲酸；4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[(2-氯苯甲基)氧]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸；4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[2-(4-氯苯基)乙氧基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸；4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(3，5-二氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸；和4-[(1S)-1-({5-氯-2-[2-(2，6-二氟苯基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸；或這樣的化合物的藥物上可接受的酯；或其藥物上可接受的鹽。
通用合成本發(fā)明的式(I)的化合物可以根據(jù)已知的制備方法，或者以下反應(yīng)路線所示的通用過(guò)程或制備方法來(lái)制備。除非另有說(shuō)明，反應(yīng)路線及隨后討論中R1-R3以及X、Y和Z定義如上。下文所用術(shù)語(yǔ)“保護(hù)基”，是指羥基或氨基保護(hù)基，其選自T.W.Greene等編輯的Protective Groups in OrganicSynthesis(John Wiley & Sons，1999)中所描述的典型的羥基或氨基保護(hù)基。
下面的反應(yīng)路線示出了式(I)的化合物的制備。
反應(yīng)路線1此路線示出了式(I)的化合物的制備。
路線1 在上式中，Ra表示具有1-4個(gè)碳原子的烷基。L1表示離去基團(tuán)。合適的離去基團(tuán)的例子包括鹵原子，例如氯、溴和碘；磺酸酯，例如TfO(三氟磺酸酯)、MsO(甲磺酸酯)；或硼酸基團(tuán)。
步驟1A在此步驟中，通過(guò)式1-1的酯化合物與式R1-YH的化合物在惰性溶劑中的偶聯(lián)反應(yīng)，可以制備式1-3的化合物。
偶聯(lián)反應(yīng)可以在反應(yīng)惰性溶劑中或不用溶劑，在不存在或存在堿的條件下進(jìn)行。優(yōu)選的堿選自例如堿金屬或堿土金屬氫氧化物、醇鹽、碳酸鹽或氫化物，例如氫氧化鈉、氫氧化鉀、甲醇鈉、乙醇鈉、叔丁醇鉀、碳酸鈉、碳酸銫或碳酸鉀、2-叔丁基亞氨基-2-二乙基氨基-1，3-二甲基-全氫-1，3，2-二氮磷雜苯(BEMP)、叔丁基亞氨基-三(吡咯烷)正膦(BTPP)、氟化銫(CsF)、氟化鉀、氫化鈉或氫化鉀，或者胺，例如三乙胺、三丁胺、二異丙基乙胺、2，6-二甲基吡啶、吡啶或二甲基氨基吡啶。優(yōu)選的反應(yīng)惰性溶劑包括例如乙酮、苯、甲苯、二甲苯、鄰二氯苯、硝基苯、硝基甲烷、吡啶、二氯甲烷、二氯乙烷、四氫呋喃、二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基乙酰胺(DMA)、二噁烷、二甲基亞砜(DMSO)、乙腈、環(huán)丁砜、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、甲基乙基甲酮(2-丁酮)、四氫呋喃(THF)、二甲氧基乙烷(DME)或其混合物。反應(yīng)溫度通常在0-200℃的范圍內(nèi)，優(yōu)選在室溫至150℃的范圍內(nèi)。一般而言，反應(yīng)時(shí)間為1分鐘至1天，優(yōu)選1小時(shí)至10小時(shí)。如果需要，反應(yīng)可以在例如銅(例如青銅或碘化亞銅)和鎳的金屬催化劑的存在下進(jìn)行。
當(dāng)L1表示硼酸基團(tuán)時(shí)，反應(yīng)可在合適的催化劑的存在下進(jìn)行以形成式1-3的化合物，可以通過(guò)技術(shù)人員可從文獻(xiàn)獲知的適用于結(jié)構(gòu)相關(guān)化合物的任何合成過(guò)程來(lái)實(shí)施該反應(yīng)(所述文獻(xiàn)例如，Lam，P.Y.S.；Clark，C.G.；Saubem，S；Adams，J；Winters，M.P.；Chan，D.M.T.；Combs，A.，TetrahedronLett.，1998，39，2941-2944.，Kiyomori，A.；Marcoux，J.；Buchwald，S.L.，Tetrahedron Lett.，1999，40，2657-2660.，Lam，P.Y.S.；Deudon，S.；Averill，K.M.；Li，R.；He，M.Y.；DeShong，P.；Clark，C.G.，J Am.Chem.Soc.，2000，122，7600-7601.，Collman，J.P.；Zhong，M.，Org.Lett.，2000，2，1233-1236)。優(yōu)選的反應(yīng)催化劑選自例如四(三苯基膦)-鈀、氯化二(三苯基膦)鈀(II)、銅(0)、乙酸銅(I)、溴化銅(I)、氯化銅(I)、碘化銅(I)、氧化銅(I)、三氟甲烷磺酸銅(I)、乙酸銅(II)、溴化銅(II)、氯化銅(II)、碘化銅(II)、氧化銅(II)和三氟甲烷磺酸銅(II)。
步驟1B
在此步驟中，也可以通過(guò)式1-2的酯化合物與式R1-L1的化合物的偶聯(lián)反應(yīng)來(lái)制備式1-3的酯化合物。此反應(yīng)基本上與

圖1的步驟1A相同，并且可以以同樣的方式進(jìn)行，而且使用相同的試劑和反應(yīng)條件。
步驟1C在此步驟中，可通過(guò)式1-3的酯化合物在溶劑中的水解來(lái)制備式1-4的酸化合物。
水解可通過(guò)常規(guī)過(guò)程進(jìn)行。在典型的過(guò)程中，水解在堿性條件下進(jìn)行，例如在氫氧化鈉、氫氧化鉀和氫氧化鋰的存在下進(jìn)行。合適的溶劑包括例如醇，例如甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、2-甲氧基乙醇和乙二醇；醚，例如四氫呋喃(THF)、1，2-二甲氧基乙烷(DME)和1，4-二噁烷；酰胺，例如N，N-二甲基甲酰胺(DMF)和六甲基磷三酰胺；亞砜，例如二甲基亞砜(DMSO)。此反應(yīng)可在-20℃-100℃、通常20℃-75℃的溫度范圍內(nèi)進(jìn)行30分鐘至48小時(shí)、通常60分鐘至30小時(shí)。
水解還可以在酸性條件下進(jìn)行，例如在以下物質(zhì)的存在下進(jìn)行鹵化氫，例如氯化氫和溴化氫；磺酸，例如對(duì)甲苯磺酸和苯磺酸；對(duì)甲苯磺酸吡啶；羧酸，例如乙酸和三氟乙酸。合適的溶劑包括例如醇，例如甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、2-甲氧基乙醇和乙二醇；醚，例如四氫呋喃(THF)、1，2-二甲氧基乙烷(DME)和1，4-二噁烷；鹵化烴，例如二氯甲烷、1，2-二氯乙烷；酰胺，例如N，N-二甲基甲酰胺(DMF)和六甲基磷三酰胺；亞砜，例如二甲基亞砜(DMSO)。此反應(yīng)可在-20℃-100℃、通常0℃-65℃的溫度范圍內(nèi)進(jìn)行30分鐘至24小時(shí)、通常60分鐘至10小時(shí)。
步驟1D在此步驟中，通過(guò)式1-5的胺化合物與式1-4的酸化合物在存在或不存在偶聯(lián)劑的條件下在惰性溶劑中的偶聯(lián)反應(yīng)，可以制備式1-6的酰胺化合物。如果需要，此反應(yīng)可在存在或不存在添加劑的條件下進(jìn)行，所述添加劑例如1-羥基苯并三唑(HOBt)或1-羥基氮雜苯并三唑。合適的溶劑的例子包括乙酮、硝基甲烷、N，N-二甲基甲酰胺(DMF)、環(huán)丁砜、二甲基亞砜(DMSO)、1-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)、2-丁酮、乙腈；鹵化烴，例如二氯甲烷、1，2-二氯乙烷、氯仿；醚，例如四氫呋喃和1，4-二噁烷。此反應(yīng)可在-20℃-100℃、更優(yōu)選約0℃-60℃的溫度范圍內(nèi)進(jìn)行5分鐘至1星期、更優(yōu)選30分鐘至24小時(shí)。合適的偶聯(lián)劑是那些通常用于肽合成的偶聯(lián)劑，包括例如二酰亞胺(例如二環(huán)己基碳二酰亞胺(DCC)、水溶性碳二酰亞胺(WSC))、六氟磷酸o-苯并三唑-1-基-N，N，N′，N′-四甲基脲(HBTU)、2-乙氧基-N-乙氧羰基-1，2-二氫喹啉、四氟硼酸2-溴-1-乙基吡啶鎓(BEP)、氯化2-氯-1，3-二甲基咪唑啉鎓、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧-三(二甲基氨基)鏻(BOP)、偶氮二羧酸二乙酯-三苯基膦、氰基磷酸二乙酯、二乙基磷酰基疊氮化物、碘化2-氯-1-甲基吡啶鎓、N，N’-羰基二咪唑、苯并三唑-1-基二乙基磷酸酯、氯甲酸乙基酯和氯甲酸異丁基酯。如果需要，反應(yīng)可在堿的存在下進(jìn)行，所述堿例如N，N-二異丙基乙胺、N-甲基嗎啉、4-(二甲基氨基)吡啶和三乙胺。式(I)的酰胺化合物可經(jīng)由酰基鹵形成，所述?；u可通過(guò)與例如草酰氯、磷酰氯和亞硫酰氯的鹵化劑的反應(yīng)得到。通過(guò)在與此步驟所述類(lèi)似的條件下用式1-13的胺化合物進(jìn)行處理，可將所得的?；u轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的酰胺化合物。
步驟1E在此步驟中，式(I)的化合物可通過(guò)式1-6的酯化合物的水解來(lái)制備。此反應(yīng)基本上與圖1的步驟1C相同，并且可以以同樣的方式進(jìn)行，而且使用相同的試劑和反應(yīng)條件。
步驟1F在此步驟中，通過(guò)式1-7的酸化合物與式1-5的胺化合物在惰性溶劑的偶聯(lián)反應(yīng)，可以制備式1-8的化合物。
此反應(yīng)基本上與圖1的步驟1D相同，并且可以以同樣的方式進(jìn)行，而且使用相同的試劑和反應(yīng)條件。
步驟1G作為可替代方法，在此步驟中，通過(guò)在偶氮二羧酸二烷基酯的存在下在反應(yīng)惰性溶劑中式1-8的化合物與式R1-OH的化合物的Mitsunobu反應(yīng)，也可以制備式1-6的化合物。在例如偶氮二羧酸二乙酯物(DEAD)和例如三苯基膦的膦劑的存在下，可用式R1-OH的化合物對(duì)式1-6的化合物進(jìn)行處理。優(yōu)選地，此反應(yīng)可在反應(yīng)惰性溶劑中進(jìn)行。優(yōu)選的反應(yīng)惰性溶劑包括但不限于，四氫呋喃(THF)、二乙基醚、二甲基甲酰胺(DMF)、苯、甲苯、二甲苯、鄰二氯苯、硝基苯、二氯甲烷、1，2-二氯乙烷、二甲氧基乙烷(DME)，或其混合物。此反應(yīng)可在-50℃-200℃、通常0℃-80℃的溫度范圍內(nèi)進(jìn)行5分鐘至72小時(shí)、通常30分鐘至24小時(shí)。
在上述圖1中，合適的溶劑的例子包括每個(gè)步驟中所述的溶劑的任意兩種和多種的混合物。
上述通用合成中的起始物料可以購(gòu)得或通過(guò)本領(lǐng)域的技術(shù)人員已知的常規(guī)方法獲得。
式(I)的化合物以及上述制備方法的中間體可通過(guò)例如重結(jié)晶或色譜純化的常規(guī)過(guò)程來(lái)分離和純化。
上述各種通用方法可用于在分步形成所需化合物的任意階段引入期望的基團(tuán)，并且這些通用方法還可以以不同的方式結(jié)合到這樣的多階段工藝中。當(dāng)然，應(yīng)當(dāng)選擇多階段工藝中的反應(yīng)的順序，以使所用的反應(yīng)條件不對(duì)最終產(chǎn)品中所需的分子中的基團(tuán)產(chǎn)生影響。
(a)評(píng)價(jià)生物活性的方法體外分析人類(lèi)EP受體細(xì)胞膜結(jié)合分析人類(lèi)胚胎腎臟(HEK 293)細(xì)胞系中的人類(lèi)EP1、2、3和4受體的穩(wěn)定表達(dá)通過(guò)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)，由大鼠腎臟或心臟cDNA庫(kù)(Clontech)獲得人類(lèi)EP1、2、3和4受體的cDNA克隆。
根據(jù)the journal of biological chemistry第271卷No.39，第23642-23645頁(yè)的文獻(xiàn)所描述的方法，人類(lèi)胚胎腎臟細(xì)胞(HEK 293)被人類(lèi)EP1、2、3和4受體的表達(dá)載體穩(wěn)定地轉(zhuǎn)染。
制備膜片段在37℃下，在5％的CO2在空氣中的濕潤(rùn)氣氛中，EP1、2、3和4轉(zhuǎn)染子在杜爾貝科變法伊格爾培養(yǎng)基(Dulbecco’s modified Eagle’s medium)中生長(zhǎng)，所述培養(yǎng)基包含10％的胎牛血清、50U/ml的青霉素、50μg/ml的鏈霉素和500μg/ml的G418(選擇培養(yǎng)基)。為了膜制備，用磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)收獲細(xì)胞，并在400g下離心5分鐘。球粒懸浮于產(chǎn)物PBS(4℃)中，所述產(chǎn)物PBS包含1/100體積的蛋白酶抑制劑混合物(SIGMA)(1mM(4-(2-氨基乙基)-苯磺?；?AEBSF))、0.8μM抑肽酶(Aprotinin)、22μM亮抑肽酶(Leupeptin)、40μM抑氨肽酶(Bestatin)、15μM胃蛋白酶抑制劑A(Pepstatin A)和14μM E-64)。用超聲波細(xì)胞破碎儀進(jìn)行60秒的超聲波分解以使細(xì)胞溶解。然后將細(xì)胞混合物在1000g下離心10分鐘。在4℃下，在160000g下將上層清液離心30分鐘。將球粒再次懸浮于分析緩沖液中(10mM 2-嗎啉代乙烷磺酸(MES)-KOH、1mM乙二胺四乙酸(EDTA)、10mM MgCl2，pH6.0)，并且通過(guò)Bradford方法(Bio-Rad分析)測(cè)定蛋白質(zhì)濃度。此膜制品被保存在-80℃的冷凍器中，直到用于結(jié)合分析。
結(jié)合分析膜結(jié)合分析[3H]-PGE2膜結(jié)合分析在以下反應(yīng)混合物中進(jìn)行10mM MES/KOH(pH6.0)、10mM MgCl2、1mM EDTA、1nM[3H]-PGE2(AmershamTRK431，164Ci/mmol)、2-10g來(lái)自膜片段(人類(lèi)EP1、2、3和4/HEK293轉(zhuǎn)染子)的蛋白質(zhì)和測(cè)試化合物(在96孔聚丙烯板中的總體積為0.1ml)。在快速過(guò)濾通過(guò)玻璃纖維過(guò)濾器(Printed Filtermat B，1205-404，玻璃纖維，雙倍厚度，尺寸102×258mm，Wallac inc.，在0.2％聚乙烯亞胺中預(yù)浸)分離結(jié)合的和游離的放射配體之前，在室溫下進(jìn)行培養(yǎng)60分鐘。用分析緩沖液洗滌過(guò)濾器，并且通過(guò)液體閃爍計(jì)數(shù)器(1205 BetaplateTM)測(cè)定結(jié)合至過(guò)濾器的殘余[3H]-PGE2。特異結(jié)合被定義為全部結(jié)合與非特異結(jié)合之間的差，其在10μM PGE2的存在下測(cè)定。
人類(lèi)EP4轉(zhuǎn)染子中的cAMP分析表達(dá)人類(lèi)EP4受體的HEK293細(xì)胞(hEP4細(xì)胞)被保持在含有10％FBS和500μg/ml遺傳霉素(geneticin)的DMEM中。為了收獲hEP4細(xì)胞，抽出培養(yǎng)基，并用10ml磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)在75cm3的燒瓶中洗滌細(xì)胞。向細(xì)胞加入另外10ml PBS，并在室溫下培養(yǎng)20分鐘。通過(guò)吸管獲得人類(lèi)EP4細(xì)胞，將其在300g下離心4分鐘。在PCR管中將細(xì)胞以7×105細(xì)胞/ml的密度再次懸浮于不含中性紅的DMEM中，然后在37℃下培養(yǎng)10分鐘，其中所述DMEM包含0.2mM IBMX(PDE抑制劑)，1nM PGE2和測(cè)試化合物。通過(guò)在100℃下用熱循環(huán)器加熱10分鐘，以使反應(yīng)終止。用SPA cAMP成套設(shè)備(Amersham)或cAMP ScreenTM(Applied Biosystems)，按照制造商的說(shuō)明來(lái)確定反應(yīng)混合物中的cAMP濃度。
參考文獻(xiàn)Eur.J.Pharmacol.340(1997)227-241體內(nèi)分析由角叉菜膠引發(fā)的大鼠的機(jī)械性痛覺(jué)過(guò)敏對(duì)4周大的雄性SD大鼠進(jìn)行通宵禁食。通過(guò)足底注射λ-角叉菜膠(在鹽水中的0.1ml 1％w/v的懸浮液，Zushikagaku)引發(fā)痛覺(jué)過(guò)敏。在注射角叉菜膠之后5.5小時(shí)，口服測(cè)試化合物(1ml 0.1％甲基纖維素/100g體重)。用壓痛儀(Ugo Basile)在注射角叉菜膠后4、5、6.5和7.5小時(shí)測(cè)量機(jī)械性疼痛閾值，并計(jì)算疼痛閾值的變化。
參考文獻(xiàn)Randall L.O.和Selitto I.J.，Arch.Int.Pharmacodyn.111，409-419，1957由前列腺素E2(PGE2)引發(fā)的大鼠的熱痛覺(jué)過(guò)敏
對(duì)4周大的雄性SD大鼠進(jìn)行通宵禁食。通過(guò)將0.05％乙醇/鹽水(100μl)中的100ng PGE2足底注射到大鼠的右后爪中，引發(fā)痛覺(jué)過(guò)敏。在注射PGE2之前，分別向動(dòng)物口服或靜脈注射載劑(po0.1％甲基纖維素，iv10％DMSO/鹽水)或測(cè)試化合物。將大鼠置于足底測(cè)試裝置(UgoBasile)的塑料籠中，并使移動(dòng)輻射熱源聚焦在大鼠的右后爪。在注射15分鐘后測(cè)量熱縮爪潛伏期(秒)。
參考文獻(xiàn)Hargreaves K.等，Pain 32，77-88，1988.
由CFA引發(fā)的大鼠負(fù)重缺失對(duì)7周大的雄性SD大鼠進(jìn)行通宵禁食。CFA(100μL液體石蠟(Wako)中的300μg Mycobacterium Tuberculosis H37 RA(DifcoLaboratories))被注射進(jìn)大鼠的右后足墊。施用CFA兩天后，使用LintonIncapacitance測(cè)試儀(Linton Instrumentation，UK)來(lái)測(cè)量作為疼痛指數(shù)的左肢(同側(cè))與右肢(對(duì)側(cè))之間的后爪重量分布變化。以1mL/100g體重的體積口服懸浮于0.1％MC(Wako)中的測(cè)試化合物。在給藥后1、2和4小時(shí)，將每只動(dòng)物置于儀器中，并測(cè)量右后爪施加的重量負(fù)載。
由福爾馬林引發(fā)的大鼠的舔/咬行為對(duì)4周大的雄性SD大鼠進(jìn)行通宵禁食。在測(cè)試之前使動(dòng)物熟悉觀察室至少15分鐘。通過(guò)足底注射福爾馬林(0.05ml的2％w/v的鹽水溶液，37％的甲醛溶液，Wako Chemicals)。在注射福爾馬林前1小時(shí)口服測(cè)試化合物(1ml的0.1％甲基纖維素/100g體重)。在注射福爾馬林后，用攝影機(jī)記錄動(dòng)物行為45分鐘。用秒表計(jì)數(shù)對(duì)注射爪進(jìn)行舔或咬的時(shí)間，在45分鐘內(nèi)以5分鐘為單位進(jìn)行加和。結(jié)果以早期(0-10分鐘)和晚期(10-45分鐘)的舔/咬時(shí)間表示。
由福爾馬林引發(fā)的小鼠的舔/咬行為使用4周大的雄性ddY小鼠。在測(cè)試之前使動(dòng)物熟悉觀察室至少30分鐘。通過(guò)足底注射福爾馬林(0.02ml的2％w/v的鹽水溶液，37％的甲醛溶液，Wako Chemicals)。在注射福爾馬林前1小時(shí)口服測(cè)試化合物(0.05ml的0.1％甲基纖維素/100g體重)。在注射福爾馬林后，用攝影機(jī)記錄動(dòng)物行為45分鐘。用秒表計(jì)數(shù)對(duì)注射爪進(jìn)行舔或咬的時(shí)間，在45分鐘內(nèi)以5分鐘為單位進(jìn)行加和。結(jié)果以早期(0-10分鐘)和晚期(10-45分鐘)的舔/咬時(shí)間表示。
在下文進(jìn)行的實(shí)施例中制備的大多數(shù)化合物對(duì)于EP4受體的親合性高于對(duì)EP1、2和3受體的親合性。
Caco-2滲透性根據(jù)Shiyin Yee，Pharmaceutical Research，763(1997)中描述的方法測(cè)量Caco-2滲透性。
Caco-2細(xì)胞在過(guò)濾器支座(Falcon HTS多孔進(jìn)樣系統(tǒng))上生長(zhǎng)14天。從頂端和底端隔室去除培養(yǎng)基，并在37℃下在以50周期/分鐘的振蕩水浴中用預(yù)熱的0.3ml頂端緩沖液和0.1ml底端緩沖液對(duì)單層預(yù)培養(yǎng)0.75小時(shí)。頂端緩沖液由Hanks平衡鹽溶液、25mM右旋葡萄糖單水合物、20mM MES生物緩沖液、1.25mM CaCl2和0.5mM MgCl2(pH 6.5)組成。底端緩沖液由Hanks平衡鹽溶液、25mM右旋葡萄糖單水合物、20mMHEPES生物緩沖液、1.25mM CaCl2和0.5mM MgCl2(pH 7.4)組成。在預(yù)培養(yǎng)結(jié)束時(shí)，移除培養(yǎng)基并將緩沖液中的測(cè)試化合物溶液(10μM)添加至頂端隔室中。進(jìn)樣移到含有新鮮底端緩沖液的孔中，并培養(yǎng)1小時(shí)。用LC/MS分析測(cè)量緩沖液中的藥物濃度。
由接收器一側(cè)的底物累積出現(xiàn)次數(shù)曲線的斜率來(lái)計(jì)算流率(F，質(zhì)量/時(shí)間)，由下式計(jì)算表觀滲透系數(shù)(Papp)Papp(cm/sec)＝(F*VD)/(SA*MD)其中SA為運(yùn)輸表面積(0.3cm2)，VD為供體體積(0.3ml)，MD為t＝0時(shí)供體側(cè)的藥物總量。全部數(shù)據(jù)為兩次樣品的平均值。通過(guò)熒光黃運(yùn)輸來(lái)確定單層完整性。
人體多菲利特結(jié)合表達(dá)HERG產(chǎn)物的HEK-293細(xì)胞的細(xì)胞糊劑可懸浮于10倍體積的50mM Tris緩沖液中，該緩沖液在25℃下用2M HCl將pH調(diào)節(jié)為7.5，包含1mM MgCl2、10mM KCl。用Polytron均化器(以最大功率進(jìn)行20秒)將細(xì)胞均化，并在4℃下以48000g離心。球粒以同樣方式再次懸浮、均化和離心。去除得到的上層清液，并將最終的球粒再次懸浮(10倍體積的50mM Tris緩沖液)并在最大功率下均化20秒。將膜均漿分份并在-80℃下保存，直到使用。將其中一份用于通過(guò)蛋白質(zhì)快速分析儀器和ARVOSX平板讀取器(Wallac)測(cè)定蛋白質(zhì)濃度。在整個(gè)過(guò)程中將全部操作、原料溶液和設(shè)備保持在冰上。為了飽和分析，實(shí)驗(yàn)在200μl的總體積中進(jìn)行。對(duì)于總結(jié)合或非特異結(jié)合，分別在最終濃縮液(20μl)中在不存在或存在10μM多菲利特的條件下，通過(guò)在室溫下對(duì)20μl的[3H]-多菲利特和160μl的膜均漿(20-30μg蛋白質(zhì)/孔)進(jìn)行培養(yǎng)來(lái)測(cè)定飽和度。通過(guò)PEI浸泡的玻璃纖維過(guò)濾紙上的快速真空過(guò)濾，使用Skatron細(xì)胞采集器終止全部培養(yǎng)，然后用50mM Tris緩沖液(25℃下pH 7.5)洗滌兩次。使用Packard LS計(jì)數(shù)器，通過(guò)液體閃爍計(jì)數(shù)來(lái)定量受體結(jié)合放射性。
對(duì)于競(jìng)爭(zhēng)分析，將化合物以半對(duì)數(shù)格式中的4點(diǎn)稀釋在96孔聚丙烯板中稀釋。全部稀釋首先在DMSO中進(jìn)行，然后轉(zhuǎn)移至含1mM MgCl2、10mM KCl的50mM Tris緩沖液(25℃下pH 7.5)中，以使最終的DMSO濃度等于1％。在分析板中將化合物分成三份(4μl)。分別在6個(gè)孔中作為載劑和10μM最終濃度的多菲利特設(shè)置總結(jié)合孔和非特定結(jié)合孔。制備5.6倍最終濃度的放射性配體，并將此溶液加到每個(gè)孔中(36μl)。通過(guò)添加YSi聚左旋賴氨酸SPA小珠(50μl，1mg/孔)和膜(110μl，20μg/孔)以初始化分析。在室溫下繼續(xù)培養(yǎng)60分鐘。在室溫下培養(yǎng)平板另外3小時(shí)以使小珠沉淀。通過(guò)用Wallac MicroBeta平板計(jì)數(shù)器進(jìn)行計(jì)數(shù)來(lái)定量受體結(jié)合放射性。
IHERG分析穩(wěn)定表達(dá)HERG鉀通道的HEK 293被用于電生理研究。HEK細(xì)胞中的鉀通道的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法可在Z.Zhou等.，1998，Biophysical Journal，74，第230-241頁(yè)中找到。在實(shí)驗(yàn)日期之前，從培養(yǎng)瓶中收獲細(xì)胞，并將其涂在含10％FCS的標(biāo)準(zhǔn)MEM培養(yǎng)基中的載玻片(coverslip)上。在37℃的維持95％O2/5％CO2的氣氛的培養(yǎng)器中保存被涂的細(xì)胞。在收獲細(xì)胞后的15-28小時(shí)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行研究。
使用標(biāo)準(zhǔn)膜片鉗技術(shù)在完整細(xì)胞模式下對(duì)HERG電流進(jìn)行研究。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，將以下組成(mM)的標(biāo)準(zhǔn)外部溶液澆蓋到細(xì)胞上NaCl，130；KCl，4；CaCl2，2；MgCl2，1；葡萄糖，10；HEPES，5；pH 7.4(用NaOH調(diào)節(jié))。用標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)部溶液填充的電阻為1-3兆歐(MΩ)的膜片鉗放大器和膜片吸管進(jìn)行全細(xì)胞記錄，該內(nèi)部溶液具有以下組成(mM)KCl，130；MgATP，5；MgCl2，1.0；HEPES，10；EGTA 5，pH 7.2(用KOH調(diào)節(jié))。只有那些進(jìn)入電阻低于15MΩ且封閉電阻大于1GΩ的細(xì)胞被用于進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)。使用最大值的80％的串聯(lián)電阻補(bǔ)償。不減少漏電。然而，可接受的進(jìn)入電阻取決于記錄電流的大小和可安全使用的串聯(lián)電阻補(bǔ)償?shù)乃?。在達(dá)到完整細(xì)胞設(shè)置和用吸管溶液進(jìn)行細(xì)胞透析的充足時(shí)間(＞5min)之后，對(duì)細(xì)胞施加標(biāo)準(zhǔn)電壓協(xié)議(voltage protocol)以激發(fā)膜電流。電壓協(xié)議如下。將膜去極化，從-80mV的保持電壓變?yōu)?40mV并持續(xù)1000ms。然后電壓遞減(速率0.5mV msec-1)至保持電壓。在這個(gè)實(shí)驗(yàn)中，每4秒(0.25Hz)對(duì)細(xì)胞連續(xù)施加電壓協(xié)議。對(duì)電壓遞減過(guò)程中在-40mV附近引發(fā)的峰電流的振幅進(jìn)行測(cè)量。一旦在外部溶液中得到穩(wěn)定的激發(fā)電流響應(yīng)，則通過(guò)蠕動(dòng)泵泵送載劑(標(biāo)準(zhǔn)外部溶液中的0.5％DMSO)10-20分鐘。如果在載劑控制條件下，激發(fā)的電流響應(yīng)的振幅存在最小變化，則施加0.3、1、3、10μM中之一的測(cè)試化合物10分鐘。該10分鐘包括供給溶液從溶液貯存器經(jīng)由泵流過(guò)管進(jìn)入記錄室的時(shí)間。細(xì)胞與化合物溶液的接觸時(shí)間在室中的藥物濃度剛達(dá)到期望濃度之后超過(guò)5分鐘。接著，需要10-20分鐘的洗滌期以評(píng)價(jià)可逆性。最后，細(xì)胞暴露于高劑量的多菲利特(特異的IKr阻斷劑)(5μM)中，以估計(jì)不敏感的內(nèi)生電流。
全部實(shí)驗(yàn)在室溫(23±1℃)下進(jìn)行。使用膜片鉗放大器和特定的數(shù)據(jù)分析軟件，在計(jì)算機(jī)上對(duì)誘發(fā)的膜電流進(jìn)行在線記錄，在500-1KHz(Bessel-3dB)下濾波，并以1-2KHz采樣。在計(jì)算機(jī)上離線測(cè)量-40mV左右產(chǎn)生的峰電流振幅。
計(jì)算在載劑控制的條件下和存在藥物下的10個(gè)振幅的算術(shù)平均值。通過(guò)用公式IN＝(1-ID/IC)*100對(duì)電流值進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化來(lái)獲得每次實(shí)驗(yàn)中的IN下降百分比。對(duì)于每一藥物濃度或時(shí)間匹配控制，進(jìn)行獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)，并將每次實(shí)驗(yàn)的算術(shù)平均值作為研究的結(jié)果。
藥物交互作用分析本方法基本上包括對(duì)于3μM的每種化合物由熒光探針確定抑制產(chǎn)物形成的百分比。
更具體地，此分析如下進(jìn)行。用重組體CYPs、100mM磷酸鉀緩沖液和熒光探針作為底物對(duì)化合物進(jìn)行預(yù)培養(yǎng)5分鐘。通過(guò)添加熱NADPH生成系統(tǒng)來(lái)開(kāi)始反應(yīng)，該生成系統(tǒng)由0.5mM NADP(期望；對(duì)于2D6為0.03mM)、10mM MgCl2、6.2mM DL-異檸檬酸和0.5U/ml異檸檬酸脫氫酶(ICD)組成。在37℃下(期望；對(duì)于1A2和3A4在30℃下)培養(yǎng)分析板，并在20-30分鐘內(nèi)每分鐘讀取熒光數(shù)據(jù)。
如下進(jìn)行數(shù)據(jù)計(jì)算1.在線性區(qū)域計(jì)算斜率(時(shí)間相對(duì)于熒光單元)2.由下式計(jì)算化合物中的抑制百分比{(vo-vi)/vo}×100＝抑制％其中vo＝控制反應(yīng)的速率(無(wú)抑制劑)vi＝存在化合物的反應(yīng)的速率表1.藥物交互作用分析條件


人體肝臟微粒體中的半衰期(HLM)在37℃下，在96深孔板上，用3.3mM MgCl2和0.78mg/mL HLM(HL101)在100mM磷酸鉀緩沖液(pH 7.4)的溶液來(lái)培養(yǎng)測(cè)試化合物。反應(yīng)混合物被分成兩組非P450組和P450組。僅在P450組的反應(yīng)混合物中加入NADPH。在0、10、30和60分鐘的時(shí)間點(diǎn)收集P450組的樣品，其中0分鐘時(shí)間點(diǎn)表示NADPH加入P450組的反應(yīng)混合物的時(shí)間。在-10和65分鐘的時(shí)間點(diǎn)收集非P450組的樣品。收集的樣品用含內(nèi)標(biāo)的乙腈溶液萃取。在離心機(jī)(2000rpm，15min)中將沉淀的蛋白質(zhì)旋轉(zhuǎn)分離。用LC/MS/MS系統(tǒng)測(cè)量上層清液中的化合物濃度。
通過(guò)繪制化合物/內(nèi)標(biāo)的峰面積比的自然對(duì)數(shù)相對(duì)時(shí)間的圖線，得到半衰期數(shù)值。通過(guò)數(shù)據(jù)點(diǎn)的最佳擬合線的斜率得出代謝速率(k)。用下面公式將其轉(zhuǎn)換為半衰期半衰期＝ln 2/k式(I)的化合物的藥物上可接受的鹽包括其酸加成鹽和堿鹽。
合適的酸加成鹽由形成非毒性鹽的酸形成。例子包括乙酸鹽、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、碳酸氫鹽/碳酸鹽、硫酸氫鹽/硫酸鹽、硼酸鹽、右旋樟腦磺酸鹽、檸檬酸鹽、乙二磺酸鹽、乙磺酸鹽、甲酸鹽、延胡索酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡糖酸鹽、葡糖醛酸鹽、六氟磷酸鹽、海苯酸鹽、氯化氫/氯化物、溴化氫/溴化物、碘化氫/碘化物、羥乙基磺酸鹽、乳酸鹽、蘋(píng)果酸鹽、馬來(lái)酸鹽、丙二酸鹽、甲磺酸鹽、甲基硫酸鹽、萘酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、硝酸鹽、乳清酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、雙羥萘酸鹽、磷酸鹽/磷酸氫鹽/磷酸二氫鹽、糖質(zhì)酸鹽、硬脂酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、甲苯磺酸鹽和三氟乙酸鹽。
合適的堿鹽由形成非毒性鹽的堿形成。例子包括鋁鹽、精氨酸鹽、芐星鹽、鈣鹽、膽堿鹽、二乙胺鹽、二醇胺鹽、甘氨酸鹽、賴氨酸鹽、鎂鹽、葡甲胺鹽、醇胺鹽、鉀鹽、鈉鹽、氨基丁三醇鹽和鋅鹽。
關(guān)于合適的鹽，可參見(jiàn)Stahl和Wermuth的“Handbook ofPharmaceutical SaltsProperties，Selection，and Use”(Wiley-VCH，Weinheim，Germany，2002)。
式(I)的化合物的藥物上可接受的鹽可以通過(guò)適當(dāng)?shù)貙⑹?I)的化合物與期望的酸或堿的溶液混合在一起而方便地制備。鹽可從溶液沉淀并通過(guò)過(guò)濾收集，或可以通過(guò)蒸發(fā)溶劑而回收。鹽中的離子化程度可從完全離子化到未離子化變化。
本發(fā)明的化合物可以以非溶劑化和溶劑化形式存在。本文采用術(shù)語(yǔ)“溶劑化物”來(lái)描述包含本發(fā)明的化合物與一個(gè)或多個(gè)藥物上可接受的溶劑分子(例如乙醇)的分子絡(luò)合物。當(dāng)所述溶劑為水時(shí)，使用術(shù)語(yǔ)“水合物”。
本發(fā)明的范圍包括絡(luò)合物，例如包合物、藥物-宿主包絡(luò)物，其中相對(duì)于上述溶劑化物，藥物和宿主是以化學(xué)劑量或非化學(xué)計(jì)量存在。本發(fā)明還包括含化學(xué)計(jì)量或非化學(xué)計(jì)量的兩種或多種有機(jī)和/或無(wú)機(jī)組分的藥物的絡(luò)合物。所得的絡(luò)合物可以是離子化的、部分離子化的或未離子化的。Haleblian在J Pharm Sci，64(8)，1269-1288(August 1975年8月)發(fā)表論文總結(jié)了這樣的絡(luò)合物。
在下文中，提及式(I)的化合物時(shí)總是還包括其鹽、溶劑化物和絡(luò)合物以及其鹽的溶劑化物和絡(luò)合物。
本發(fā)明的化合物包括上文定義的式(I)的化合物、下文定義的多晶型物、前藥及其異構(gòu)體(包括光學(xué)、幾何和互變異構(gòu)體)以及同位素標(biāo)記的式(I)的化合物。
本發(fā)明包括上文定義的式(I)的化合物的全部多晶型物。
本發(fā)明的范圍還包括所謂的式(I)的化合物的“前藥”。因此，在向體內(nèi)或體表給藥時(shí)，式(I)的化合物的本身具有很小藥理活性或沒(méi)有藥理活性的特定衍生物可通過(guò)例如水解轉(zhuǎn)化為具有期望活性的式(I)的化合物。這樣的衍生物被稱為“前藥”。關(guān)于前藥的用途的其它信息可參見(jiàn)“Pro-drugsas Novel Delivery Systems”，Vol.14，ACS Symposium Series(T Higuchi和WStella)和“Bioreversible Carriers in Drug Design”，Pergamon Press，1987(ed.EB Roche，American Pharmaceutical Association)。
本發(fā)明的前藥可例如通過(guò)用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的特定部分取代式(I)的化合物中存在的相應(yīng)官能團(tuán)來(lái)制備，所述特定部分在例如HBundgaard的″Design of Prodrugs″(Elsevier，1985)被描述為“前體部分”。
本發(fā)明的前藥的例子包括(i)如果式(I)的化合物包含羧酸官能團(tuán)(-COOH)，則例如用(C1-C8)烷基取代氫所形成的酯；(ii)如果式(I)的化合物包含醇官能團(tuán)(-OH)，則例如用(C1-C6)烷?；B(yǎng)甲基取代氫所形成的醚；(iii)如果式(I)的化合物包含伯氨或仲氨官能團(tuán)(-NH2或-NHR且R≠H)，則例如用(C1-C10)烷?；〈粋€(gè)或兩個(gè)氫所形成的酰胺。
以上例子和其它前藥類(lèi)型的例子的取代基的其它例子可參見(jiàn)上述文獻(xiàn)。
最后，特定的式(I)的化合物本身可作為其它的式(I)的化合物的前藥。
包含一個(gè)或多個(gè)不對(duì)稱碳原子的式(I)的化合物可以以兩種或多種立體異構(gòu)體存在。當(dāng)式(I)的化合物包含烯基或亞烯基時(shí)，可以是幾何順/反(或Z/E)異構(gòu)體。如果化合物包含例如酮基或肟基或芳族部分，則可存在互變異構(gòu)體(“互變異構(gòu)”)。單一化合物可呈現(xiàn)超過(guò)一種的異構(gòu)現(xiàn)象也是可以的。
本發(fā)明的范圍包括式(I)的化合物的所有立體異構(gòu)體、幾何異構(gòu)體和互變異構(gòu)體(包括具有超過(guò)一種異構(gòu)類(lèi)型的化合物)以及其中的一種或多種的混合物。本發(fā)明的范圍還包括反離子具有光學(xué)活性的酸加成鹽或堿鹽，例如D-乳酸鹽、L-賴氨酸，或是例如DL-酒石酸鹽或DL-精氨酸的外消旋體。
順/反異構(gòu)體可通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的常規(guī)技術(shù)分離，例如通過(guò)色譜和分級(jí)結(jié)晶。
制備/分離單一對(duì)映體的常規(guī)技術(shù)包括從合適的光學(xué)純前體來(lái)手性合成，或采用例如手性高壓氣相色譜(HPLC)拆分外消旋物(或鹽或衍生物的外消旋物)。
或者，外消旋物(或外消旋前體)可與合適的光學(xué)活性化合物(例如醇)反應(yīng)，或者在式(I)的化合物包含酸性或堿性部分的情況下與酸或堿(例如酒石酸或1-苯基乙胺)反應(yīng)。得到的非對(duì)映混合物可通過(guò)色譜和/或分級(jí)結(jié)晶分離，并且通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法將非對(duì)映異構(gòu)體中的一種或兩種轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的純對(duì)映體。
通過(guò)非對(duì)稱樹(shù)脂上的色譜(通常為HPLC)可得到對(duì)映體富集形式的本發(fā)明的手性化合物(及其手性前體)，其中色譜的流動(dòng)相由烴(通常為庚烷或己烷)組成，包含0-50％的異丙醇(通常為2-20％)和0-5％的烷基胺(通常為0.1％的二乙胺)。洗脫液的濃度導(dǎo)致了富集的混合物。
可通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的常規(guī)技術(shù)來(lái)分離立體異構(gòu)聚集體，例如參見(jiàn)E L Eliel的“Stereochemistry of Organic Compounds”(Wiley，New York，1994)。
本發(fā)明包括所有藥物上可接受的同位素標(biāo)記的式(I)的化合物，即其中一個(gè)或多個(gè)原子被與自然中常見(jiàn)的原子相比具有相同原子序數(shù)但原子質(zhì)量或質(zhì)量數(shù)不同的原子取代。
本發(fā)明的化合物包括的合適的同位素的例子包括氫同位素，例如2H和3H；碳同位素，例如11C，13C和14C；氯同位素，例如36Cl；氟同位素，例如18F；碘同位素，例如123I和125I；氮同位素，例如13N和15N；氧同位素，例如15O，17O和18O；磷同位素，例如32P；硫同位素，例如35S。
特定的同位素標(biāo)記的式(I)的化合物(例如加入了放射性同位素的化合物)可用于藥物和/或底物組織分布研究。由于易于加入且檢測(cè)手段方便，放射性同位素氚(即3H)和碳-14(即14C)特別適用于此目的。
用例如氘(即2H)的較重的同位素取代可提供由更大的代謝穩(wěn)定性得到的特定治療優(yōu)勢(shì)，例如增長(zhǎng)的體內(nèi)半衰期或減小的所需劑量，因此在某些情形下，這種取代是優(yōu)選的。
用正電子發(fā)射同位素(例如11C，18F，13O和13N)的取代可用于檢驗(yàn)底物受體占有率的正電子發(fā)射斷層掃描(PET)研究。
一般地，通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的常規(guī)方法，或通過(guò)與所附實(shí)施例和制備實(shí)驗(yàn)描述的工藝類(lèi)似的工藝，用適當(dāng)?shù)耐凰貥?biāo)記試劑代替先前使用的未標(biāo)記試劑，可以制備同位素標(biāo)記的式(I)的化合物。
本發(fā)明的藥物上可接受的溶劑化物包括其中結(jié)晶溶劑被同位素取代(例如D2O、d6-乙酮、d6-DMSO)的溶劑化物。
期望用作藥物的本發(fā)明的化合物可作為結(jié)晶或無(wú)定型產(chǎn)品給藥。通過(guò)例如沉淀、結(jié)晶、冷凍干燥、噴霧干燥或蒸發(fā)干燥的方法，可以得到例如固體栓、粉末或膜形式的本發(fā)明的化合物。微波或射頻干燥可用于此目的。
本發(fā)明的化合物可以單獨(dú)給藥，或與一種或多種其它的本發(fā)明的化合物組合給藥，或與一種或多種其它藥物組合給藥(或上述任意組合)。通常，本發(fā)明的化合物可以作為與一種或多種藥物上可接受的賦形劑結(jié)合的制劑來(lái)給藥。本文使用術(shù)語(yǔ)“賦形劑”來(lái)描述除本發(fā)明的化合物之外的任何成分。賦形劑的選擇在很大程度上取決于例如具體給藥方式、賦形劑對(duì)溶解性和穩(wěn)定性的影響以及劑型的性質(zhì)等因素。
本發(fā)明的化合物可以與一種或多種其它的藥理上的活性劑組合給藥、分別給藥、同時(shí)或順序給藥。合適的試劑(特別是對(duì)于治療疼痛)包括(i)阿片樣鎮(zhèn)痛藥，例如嗎啡、海洛因、氫嗎啡酮、氧嗎啡酮、羥甲左嗎喃、羥丙左嗎喃、美沙酮、，哌替啶、芬太尼、可卡因、可待因、二氫可待因、氧可酮、氫可酮、丙氧芬、納美芬、納洛芬、納洛酮、納曲酮、丁丙諾啡、布托諾啡、納布啡和鎮(zhèn)痛新；(ii)非甾族抗發(fā)炎藥物(NSAIDs)，例如阿司匹林、雙氯芬酸、diflusinal、依托度酸(etodolac)、苯酮酸、非諾洛芬、氟苯沙酸、氟比洛芬、布洛芬、茚甲新、酮洛芬、酮咯酸、甲氯滅酸、甲滅酸、萘丁美酮、萘普生(naproxen)、噁丙嗪、苯丁唑酮、吡羅昔康(piroxicam)、舒林酸(sulindac)、托爾米丁(tolmetin)、佐美酸，及其藥物上可接受的鹽；(iii)巴比妥酸鹽鎮(zhèn)靜藥，例如異戊巴比妥、阿普比妥、仲丁比妥、丁巴比妥、甲苯比妥、甲巴比妥、美索比妥、戊巴比妥、苯巴比妥、司可巴比妥、他布酮、theamylal、硫噴妥及其藥物上可接受的鹽；(iv)具有鎮(zhèn)靜作用的苯并二氮雜卓類(lèi)藥，例如利眠寧(chlordiazepoxide)、氯卓酸鹽、安定(diazepam)、氟胺安定、氯羥安定、去甲羥安定、甲羥安定、三唑安定及其藥物上可接受的鹽；(v)具有鎮(zhèn)靜作用的H1拮抗藥，例如苯海拉明(diphenhydramine)、吡拉明、異丙嗪、氯苯那敏、氯環(huán)嗪及其藥物上可接受的鹽；(vi)混合鎮(zhèn)靜藥，例如苯乙哌啶酮、氨甲丙二酯、甲苯喹唑酮、氯醛比林及其藥物上可接受的鹽；(vii)骨骼肌松弛藥，例如巴氯芬、肌安定、氯羥苯噁唑、環(huán)苯扎林、美索巴莫、orphrenadine及其藥物上可接受的鹽；(viii)α-2-δ配體，例如加巴噴丁(gabapentin)和pregabalin；(ix)α-腎上腺素活性化合物，例如多沙唑嗪(doxazosin)、坦索羅辛(tamsulosin)、氯壓定和4-氨基-6，7-二甲氧基-2-(5-甲烷磺酰胺基-1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基)-5-(2-吡啶基)喹唑啉；(x)三環(huán)抗抑郁藥，例如去甲丙咪嗪、丙咪嗪、amytriptiline和nortriptiline；(xi)抗驚厥藥，例如酰胺咪嗪和丙基戊酸鈉；(xii)血清素再攝取抑制劑，例如氟苯氧丙胺、帕羅西汀、西酞普蘭和舍曲林；(xiii)混合血清素-去甲腎上腺素再攝取抑制劑，例如米那普侖(milnacipran)、維拉法辛(venlafaxine)和度洛西汀(duloxetine)；(xiv)去甲腎上腺素再攝取抑制劑，例如瑞波西汀(reboxetine)；(xv)速激肽(Tachykinin)(NK)拮抗劑，特別是NK-3，NK-2和NK-1拮抗劑，例如(αR，9R)-7-[3，5-二(三氟甲基)苯甲基]-8，9，10，11-四氫-9-甲基-5-(4-甲基苯基)-7H-[1，4]二吖辛因并[2，1-g][1，7]二氮雜萘-6，13-二酮(TAK-637)、5-[[(2R，3S)-2-[(1R)-1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基-3-(4-氟苯基)-4-嗎啉基]甲基]-1，2-二氫-3H-1，2，4-三唑-3-酮(MK-869)、lanepitant、達(dá)齊胺(dapitant)和3-[[2-甲氧基-5-(三氟甲氧基)苯基]甲基氨基]-2-苯基-哌啶(2S，3S)；(xvi)毒蕈堿拮抗劑，例如奧昔布寧(oxybutin)、托特羅定(tolterodine)、丙哌維林(propiverine)、tropsium chloride和達(dá)非那新(darifenacin)；(xvii)COX-2抑制劑，例如塞來(lái)昔布(celecoxib)、羅非昔布(rofecoxib)和伐地昔布(valdecoxib)；(xviii)非選擇性COX抑制劑(優(yōu)選用GI保護(hù))，例如硝基氟比洛芬(HCT-1026)；(xix)煤焦油鎮(zhèn)痛劑，特別是撲熱息痛(paracetamol)；(xx)安定藥，例如氟哌利多；(xxi)辣椒辣素受體促效藥，例如resinferatoxin；(xxii)β-腎上腺素化合物，例如普萘洛爾(propranolol)；(xxiii)局部麻醉劑，例如美西律(mexiletine)；(xxiv)類(lèi)固醇，例如地塞米松(dexamethasone)；(xxv)血清素受體促效藥和拮抗劑；(xxvi)膽堿能(煙堿)鎮(zhèn)痛劑；(xxvii)混合鎮(zhèn)痛劑，例如Tramadol；(xxviii)NMDA受體拮抗劑，例如美沙芬((+)-3-羥基-N-甲基嗎啡喃)及其代謝產(chǎn)物右嗎喃((+)-3-羥基-N-甲基嗎啡喃)、氯胺酮、美金剛胺(memantine)、吡咯喹啉醌和順-4-(膦?；谆?-2-哌啶羧酸及其藥物上可接受的鹽；(xxix)PDEV抑制劑，例如西地那非(sildenafil)、伐地那非(vardenafil)或taladafil。
因此，本發(fā)明還提供了包含本發(fā)明的化合物或其藥物上可接受的鹽、溶劑化物或其前藥以及選自上面(i)-(xxix)的一種化合物或一類(lèi)化合物的混合物。本發(fā)明還提供了包含這樣的混合物以及藥物上可接受的賦形劑、稀釋劑或載劑的藥物組合物，特別適用于治療EP4拮抗劑相關(guān)的疾病。
適于輸送本發(fā)明化合物的藥物組合物及其制備方法對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員是顯而易見(jiàn)。這樣的組合物及其制備方法可在例如“Remington’sPharmaceutical Sciences”，第19版(Mack Publishing Company，1995)中找到。
口腔給藥本發(fā)明的化合物可以口腔給藥?？谇唤o藥可包括可使化合物進(jìn)入胃腸道的吞服，或者采用可使化合物直接從口腔進(jìn)入血流的頰部或舌下給藥。
適于口腔給藥的制劑包括固體制劑，例如片劑、含顆粒的膠囊、液體、粉末、錠劑(包括液體填充的錠劑)、嚼片、多顆?；蚣{米顆粒、凝膠、固溶液、脂質(zhì)體、膜(包括粘質(zhì)粘結(jié)劑)、丸劑、噴霧劑和液體制劑。
液體制劑包括懸浮液、溶液、糖漿和酏劑。這樣的制劑可用作軟或硬膠囊中的填料，并且通常包含例如水、乙醇、聚乙二醇、丙二醇、甲基纖維素或合適的油的載劑以及一種或多種乳化劑和/或懸浮劑。液體制劑還可通過(guò)固體重組(從例如香囊(sachet))來(lái)制備。
本發(fā)明的化合物還可用于快速溶解、快速分解的劑型，例如ExpertOpinion in Therapeutic Patents，11(6)，981-986by Liang和Chen(2001)中所述的劑型。
對(duì)于片劑劑型，根據(jù)劑量，藥物可構(gòu)成該劑型的1wt％-80wt％，更典型地構(gòu)成劑型的5wt％-60wt％。除藥物以外，片劑通常包含分解劑。分解劑的例子包括羥乙酸鈉淀粉、羧甲基纖維素鈉、羧甲基纖維素鈣、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、交聯(lián)聚維酮、聚乙烯吡咯烷酮、甲基纖維素、微晶纖維素、低級(jí)烷基取代羥丙基纖維素、淀粉、預(yù)凝膠淀粉和藻酸鈉。通常，分解劑占劑型的1wt％-25wt％，優(yōu)選5wt％-20wt％。
粘合劑通常被用來(lái)賦予片劑制劑粘結(jié)性質(zhì)。合適的粘合劑包括微晶纖維素、明膠、糖、聚乙二醇、天然和合成的膠質(zhì)、聚乙烯吡咯烷酮、預(yù)凝膠淀粉、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素。片劑還可包含稀釋劑，例如乳糖(單水合乳糖、噴霧干燥的單水合乳糖、無(wú)水乳糖等)、甘露醇、木糖醇、右旋葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、微晶纖維素、淀粉和磷酸氫鈣二水合物。
片劑還可以可選地包含例如月桂基硫酸鈉和聚山梨醇酯80的表面活性劑以及例如二氧化硅和滑石的助流劑。當(dāng)存在表面活性劑時(shí)，其量可占片劑的0.2wt％-5wt％；當(dāng)存在助流劑時(shí)，其量可占片劑的0.2wt％-1wt％。
片劑通常還包含潤(rùn)滑劑，例如硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、硬脂酸鋅、硬脂基延胡索酸鈉以及硬脂酸鎂與月桂基硫酸鈉的混合物。潤(rùn)滑劑通常占片劑的0.25wt％-10wt％，優(yōu)選0.5wt％-3wt％。
其它可存在的成分包括抗氧化劑、著色劑、調(diào)味劑、防腐劑和掩味劑。
示例性的片劑包含約80％的藥物、約10wt％-約90wt％的粘合劑、約0wt％-約85wt％的稀釋劑、約2wt％-約10wt％的分解劑和約0.25wt％-約10wt％的潤(rùn)滑劑。
片劑混合物可被直接壓制或用壓輥壓制以形成片劑?；蛘?，片劑混合物或混合物的一部分可在形成片劑之前被濕法、干法、或熔融?；⑷廴趦鼋Y(jié)或擠出。最終制劑可包含一個(gè)或多個(gè)層并且可以被包衣或未被包衣，甚至可以被封裝。
H.Lieberman和L.Lachman的“Pharmaceutical Dosage FormsTablets，Vol.1”，Marcel Dekker，N.Y.，N.Y.，1980(ISBN 0-8247-6918-X)中討論了片劑的制劑。
用于口腔給藥的固體制劑可被配制成立即釋放和/或改進(jìn)的受控釋放。改進(jìn)釋放的制劑包括延遲釋放、持續(xù)釋放、脈沖釋放、受控釋放、靶向釋放和程序釋放。
適于本發(fā)明的改進(jìn)釋放制劑在US Patent No.6,106,864中有所描述。關(guān)于其它合適的釋放技術(shù)(例如高能分散和滲透和被包衣顆粒)，可參見(jiàn)Verma等，Pharmaceutical Technology On-line，25(2)，1-14(2001)。WO00/35298中描述了使用口香糖來(lái)實(shí)現(xiàn)受控釋放。
腸胃外給藥本發(fā)明的化合物還可直接給藥至血流、肌肉或內(nèi)臟器官。腸胃外給藥的合適方法包括靜脈內(nèi)給藥、動(dòng)脈內(nèi)給藥、腹腔內(nèi)給藥、鞘內(nèi)給藥、心室內(nèi)給藥、尿道內(nèi)給藥、胸骨內(nèi)給藥、顱骨內(nèi)給藥、肌內(nèi)給藥和皮下給藥。用于腸胃外給藥的合適設(shè)備包括針(包括微針)注射器、無(wú)針注射器和注入技術(shù)。
腸胃外制劑通常為水溶液，可包含例如鹽、碳水化合物和緩沖劑(pH優(yōu)選3-9)的賦形劑，對(duì)于某些應(yīng)用，腸胃外制劑更適合作為消毒無(wú)水溶液或粉末干燥形式被配制，以便與合適的例如消毒劑、無(wú)熱原水之類(lèi)的載劑一起使用。
消毒條件(例如通過(guò)冷凍干燥)下的腸胃外制劑的制備可采用本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的標(biāo)準(zhǔn)制藥技術(shù)而方便地完成。
通過(guò)采用合適的配制技術(shù)，例如加入增溶劑，可以提高用于制備腸胃外溶液的式(I)的化合物的溶解度。用于無(wú)針注射給藥的制劑包含粉末形式的本發(fā)明的化合物以及例如消毒劑、無(wú)熱原水之類(lèi)的合適載劑。
用于腸胃外給藥的制劑可被配制成立即釋放和/或改進(jìn)的受控釋放。改進(jìn)釋放的制劑包括延遲釋放、持續(xù)釋放、脈沖釋放、受控釋放、靶向釋放和程序釋放。因而，本發(fā)明的化合物可被配制成固體、半固體或觸變液體，以便作為可改進(jìn)釋放活性化合物的植入性補(bǔ)給而給藥。這樣的制劑的例子包括涂布藥物的支架(drug-coated stent)和PGLA微球。
局部給藥本發(fā)明的化合物也可局部給藥至皮膚或黏膜，即皮膚給藥或透皮給藥。用于此目的的典型制劑包括凝膠、水凝膠、洗劑、溶液、膏、軟膏、撲粉、敷料、泡沫、膜、皮膚貼片、膠片、植入物、海綿體、纖維、繃帶和微乳液。也可使用脂質(zhì)體。典型的載劑包括醇、水、礦物油、液體礦脂、白礦脂、甘油、聚乙二醇和丙二醇?？梢约尤朐鐾竸?，參見(jiàn)例如JPharm Sci，88(10)，955-958，F(xiàn)innin和Morgan(1999年8月)。
其它局部給藥方法包括通過(guò)電穿孔、離子透入、聲波透入、超聲波透入和微針或無(wú)針(例如PowderjectTM、BiojectTM等)注射的輸送。
用于局部給藥的制劑可被配制成立即釋放和/或改進(jìn)的受控釋放。改進(jìn)釋放的制劑包括延遲釋放、持續(xù)釋放、脈沖釋放、受控釋放、靶向釋放和程序釋放。
吸入/鼻內(nèi)給藥本發(fā)明的化合物還可鼻內(nèi)給藥或通過(guò)吸入給藥，通常以來(lái)自干燥粉末吸入器的干燥粉末形式(單獨(dú)地、作為混合物(例如在與乳糖的干燥混合物中)或者作為混合的組分顆粒(例如，與例如卵磷脂的磷脂混合))，或者作為來(lái)自加壓容器、泵、噴霧器、霧化器(優(yōu)選利用電流體力學(xué)以生成細(xì)霧的霧化器)或噴灑器的噴霧劑，可以使用或不使用合適的推進(jìn)劑(例如1，1，1，2-四氟乙烷或1，1，1，2，3，3，3-六氟丙烷)。對(duì)于鼻內(nèi)使用，粉末可包含生物粘結(jié)劑，例如殼聚糖或環(huán)糊精。
加壓容器、泵、噴霧器、霧化器或噴灑器內(nèi)含有本發(fā)明的化合物的溶液或懸浮液，所述溶液或懸浮液包含例如乙醇、含水乙醇或用于分散、溶解或延長(zhǎng)活性物質(zhì)釋放的可選試劑、作為溶劑的推進(jìn)劑以及可選的表面活性劑(例如去水山梨糖醇三油酸酯、油酸或低聚乳酸)。
在用于干燥粉末或懸浮液制劑之前，將藥物產(chǎn)品微粒化，使其尺寸適于通過(guò)吸入給藥(通常小于5微米)。這可通過(guò)任何合適的粉碎方法實(shí)現(xiàn)，所述粉碎方法例如螺旋噴流研磨、流化床噴流研磨、可形成納米顆粒的超臨界流體處理、高壓均化或噴霧干燥。
可以配制在吸入器或吹入器中使用的膠囊(例如由明膠或HPMC制成)、泡囊(blister)和藥盒，使其包含本發(fā)明的化合物、合適的粉末基質(zhì)(例如乳糖或淀粉)和改性劑(例如l-亮氨酸、甘露醇或硬脂酸鎂)的粉末混合物。乳糖可以是無(wú)水形式或者一水合物形式，優(yōu)選后者。其它合適的賦形劑包括右旋葡萄糖、葡萄糖、麥芽糖、山梨糖醇、木糖醇、果糖、蔗糖和海藻糖。
在利用電流體力學(xué)生成細(xì)霧的霧化器中使用的合適的溶液制劑可包含1μg-20mg的本發(fā)明的化合物(每次動(dòng)作)，每次動(dòng)作噴出的體積可為1μl-100μl。典型的制劑可包含式(I)的化合物、丙二醇、消毒水、乙醇和氯化鈉?？商娲嫉娜軇┌ǜ视秃途垡叶肌?br> 在用于吸入/鼻內(nèi)給藥的本發(fā)明的制劑中，可以添加合適的調(diào)味劑(例如薄荷醇和左旋薄荷醇)或甜味劑(例如糖精或糖精鈉)。
用于吸入/鼻內(nèi)給藥的的制劑可被配制成立即釋放和/或改進(jìn)的受控釋放(例如用聚DL-乳酸-羥基乙酸(PGLA))。改進(jìn)釋放的制劑包括延遲釋放、持續(xù)釋放、脈沖釋放、受控釋放、靶向釋放和程序釋放。
在干燥粉末吸入器和氣霧劑的情況下，通過(guò)可計(jì)量給藥的閥來(lái)確定劑量單元。本發(fā)明所用的劑量單元通常包含1μg-10mg的式(I)的化合物。每日劑量通常在1μg-10mg的范圍內(nèi)，可在一天中作為一次劑量給藥或更普遍地分多次劑量給藥。
直腸/陰道內(nèi)給藥本發(fā)明的化合物可例如以栓劑、陰道環(huán)或灌腸劑的形式直腸給藥或陰道給藥?？煽芍浅Ｒ?guī)的栓劑基質(zhì)，但也可使用其它合適的可替代物。
用于直腸/陰道給藥的制劑可被配制成立即釋放和/或改進(jìn)的受控釋放。改進(jìn)釋放的制劑包括延遲釋放、持續(xù)釋放、脈沖釋放、受控釋放、靶向釋放和程序釋放。
眼部/耳部給藥本發(fā)明的化合物可直接對(duì)眼睛或耳朵給藥，通常以等滲壓的、調(diào)節(jié)pH的消毒鹽水中的微?；瘧腋∫夯蛉芤旱囊旱蔚男问?。其它適合眼部和耳部給藥的制劑包括軟膏、可生物降解脂(例如可吸收的凝膠海綿、膠原)的和不可生物降解(例如聚硅酮)的植入物、膠片、晶狀體以及粒狀或泡狀系統(tǒng)，例如膠體微囊(niosome)或脂質(zhì)體。聚合物可以與防腐劑(例如苯扎氯銨)一起加入，所述聚合物例如交聯(lián)聚丙烯酸、聚乙烯醇、透明質(zhì)酸、纖維素聚合物(例如羥丙基甲基纖維素、羥乙基纖維素或甲基纖維素)或雜聚糖聚合物(例如結(jié)冷膠)。這樣的制劑也可通過(guò)離子電滲法給藥。
用于眼部/耳部給藥的制劑可被配制成立即釋放和/或改進(jìn)的受控釋放。改進(jìn)釋放的制劑包括延遲釋放、持續(xù)釋放、脈沖釋放、受控釋放、靶向釋放和程序釋放。
其它技術(shù)本發(fā)明的化合物可與可溶性大分子實(shí)體(例如環(huán)糊精及其合適的衍生物或含聚乙二醇的聚合物)組合，以改善其溶解性、溶解速率、掩味性、生物有效性和/或穩(wěn)定性，使其適用于任意上述給藥方式。
藥物-環(huán)糊精絡(luò)合物被發(fā)現(xiàn)通常適用于大多數(shù)劑型和給藥途經(jīng)?？梢允褂冒j(luò)配合物和非包絡(luò)配合物。除了可直接藥物絡(luò)合，環(huán)糊精還可用作輔助添加劑(載劑、稀釋劑或增溶劑)。用于此目的最常見(jiàn)的是α-環(huán)糊精、β-環(huán)糊精和γ-環(huán)糊精，其例子可參見(jiàn)國(guó)際專(zhuān)利申請(qǐng)WO 91/11172，WO94/02518和WO 98/55148。
藥包(KIT-OF-PARTS)由于可能期望對(duì)活性化合物的混合物進(jìn)行給藥(例如為了治療特定的疾病或病癥)，本發(fā)明的范圍還包括，可以以適合共同給藥的藥包(kit)的形式將兩種或多種藥物組合物(其中至少一種包含本發(fā)明的化合物)方便地組合。
因此，本發(fā)明的藥包包括兩種或多種獨(dú)立的藥物組合物(其中至少一種包含本發(fā)明的式(I)的化合物)以及分別保存所述組合物的裝置(例如容器、分開(kāi)式藥瓶或分開(kāi)式箔包)。這樣的藥包的例子是常見(jiàn)的用于包裝片劑、膠囊等的泡式包裝。
本發(fā)明的藥包特別適合進(jìn)行不同劑型的給藥(例如口腔給藥和腸胃外給藥)、以不同的劑量間隔對(duì)獨(dú)立的多種組合物進(jìn)行給藥、或?qū)Κ?dú)立的多種組合物進(jìn)行彼此滴定。為了便于使用，藥包通常包括給藥的說(shuō)明并且具有所謂的記憶輔助工具。
劑量對(duì)于人類(lèi)患者的給藥，本發(fā)明的化合物的每日總劑量通常為0.1mg-3000mg，優(yōu)選1mg-500mg，當(dāng)然這依賴于給藥方式。例如，口腔給藥可能需要0.1mg-3000mg、優(yōu)選1mg-500mg的每日總劑量，而靜脈內(nèi)給藥的劑量可能僅需0.1mg-1000mg、優(yōu)選0.1mg-300mg。每日總劑量可以一次給藥或多次給藥。
這些劑量是基于體重為約65kg-70kg的普通人類(lèi)對(duì)象。對(duì)于體重不在此范圍的對(duì)象(例如嬰兒和老人)，醫(yī)生可以容易地確定相應(yīng)的劑量。
為了不引起歧義，本文所稱“治療”包括治療性治療、緩解性治療和預(yù)防性治療。
實(shí)施例通過(guò)以下非限制性實(shí)施例來(lái)闡述本發(fā)明，在這些實(shí)施例中，除非另有說(shuō)明，所有的操作均在室溫或環(huán)境溫度(即，18-25℃)下進(jìn)行；溶劑的蒸發(fā)使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器在減壓下進(jìn)行，并且浴溫度可達(dá)60℃；通過(guò)薄層色譜(TLC)監(jiān)測(cè)反應(yīng)；給出的熔點(diǎn)(mp)并未校正；所有分離的化合物的結(jié)構(gòu)和純度通過(guò)至少一種以下技術(shù)來(lái)確定TLC(Merck硅膠60F254預(yù)涂的TLC板或Merck NH2(胺涂硅膠)F254s預(yù)涂的TLC板)、質(zhì)譜、核磁共振譜(NMR)、紅外吸收譜(IR)或微分析。僅為了說(shuō)明目的而給出收率。通過(guò)以甲醇預(yù)處理的SCX盒(Varian BondElute)，用陽(yáng)離子交換柱進(jìn)行檢查。使用Merck硅膠60(63-200μm)、Wako硅膠300HG(40-60μm)、Fuji Silysia NH凝膠(胺涂硅膠)(30-50μm)、Biotage KP-SIL(32-63μm)或Biotage AMINOSILICA(胺涂硅膠)(40-75μm)進(jìn)行快速柱色譜。使用Merck硅膠60F254預(yù)涂的TLC板(0.5或1.0mm厚)進(jìn)行制備性TLC。在Integrity(Waters)質(zhì)譜儀上得到低分辨率的質(zhì)譜數(shù)據(jù)(EI)。在ZMD(Micromass)質(zhì)譜儀上得到低分辨率的質(zhì)譜數(shù)據(jù)(ESI)。在270MHz(JEOL JNM-LA 270光譜儀)、300MHz(JEOLJNM-LA300光譜儀)、600MHz(Bruker AVANCE 600光譜儀)下測(cè)定NMR數(shù)據(jù)，除非另有說(shuō)明，使用含氘的氯仿(99.8％D)或二甲基亞砜(99.9％D)作為溶劑，四甲基硅烷(TMS)作為內(nèi)標(biāo)，以ppm計(jì)；所用的常規(guī)縮寫(xiě)為s＝單峰，d＝雙峰，t＝三重峰，q＝四重峰，quint＝五重峰，m＝多重峰，br.＝寬峰，等等。通過(guò)Shimazu紅外光譜儀(IR-470)測(cè)定IR譜?；瘜W(xué)符號(hào)具有其通常含義；bp(沸點(diǎn))，mp(熔點(diǎn))，L(升)，mL(毫升)，g(克)，mg(毫克)，mol(摩爾)，mmol(毫摩爾)，eq.(當(dāng)量)，quant.(定量收率)。
實(shí)施例1-4的合成過(guò)程根據(jù)以下過(guò)程制備下文公開(kāi)的化合物 在以上結(jié)構(gòu)中，n表示0、1、2、3、4或5。
步驟1.4-{[(5-氯-2-羥基苯甲?；?氨基]甲基}苯甲酸叔丁酯向5-氯-2-羥基苯甲酸(0.57g，3.3mmol)和4-(氨基甲基)苯甲酸叔丁酯(0.72g，3.5mmol)在二氯甲烷(5mL)中的攪拌溶液中，連續(xù)添加1-(3-二甲基氨丙基)-3-乙基碳二亞胺氫氯化物(EDCI)(0.95g，5.0mmol)、1-羥基苯并三唑水合物(HOBT)(0.76g，5.0mmol)和三乙胺(0.46mL，3.3mmol)。通宵攪拌之后，將反應(yīng)混合物倒入碳酸氫鈉水溶液(50mL)。分離有機(jī)層，并用二氯甲烷(20mL×2)萃取水層。將合并的有機(jī)層用鹽水(50mL)洗滌、干燥(硫酸鎂)并蒸發(fā)。通過(guò)快速柱色譜在用己烷/乙酸乙酯(10/1)洗脫的硅膠上對(duì)殘余物進(jìn)行純化，得到0.57g(48％)的白色固體狀4-{[(5-氯-2-羥基苯甲?；?氨基]甲基}苯甲酸叔丁酯1H-NMR(CDCl3)δ12.12(1H，s)，7.99(2H，d，J＝7.9Hz)，7.47-7.30(4H，m)，6.97(1H，d，J＝8.4Hz)，6.67-6.52(1H，m)，4.68(2H，d，J＝5.7Hz)，1.59(9H，s).
步驟2.4-[({[5-氯-2-(取代苯氧基)吡啶-3-基]苯甲酰基}氨基)甲基]苯甲酸向取代醇(0.10mmol)的溶液中，添加四氫呋喃(0.5mL)中的4-{[(5-氯-2-羥基苯甲酰基)氨基]甲基}苯甲酸叔丁酯(步驟1，0.05mmol)、聚苯乙烯(PS-PPh3，0.15mmol)上的三苯基膦和四氫呋喃(0.2mL)中的偶氮二羧酸二叔丁酯(0.10mmol)的溶液。然后，在室溫下整夜攪拌化合物，然后過(guò)濾掉PS-PPh3。在真空中濃縮該溶液，并用乙酸乙酯(0.65mL)溶解殘余物，然后用水(0.45mL)洗滌。在真空中濃縮有機(jī)層。通過(guò)用水/甲醇/1％甲酸水溶液(90/5/5-0/95/5)洗脫的制備性液相色譜質(zhì)譜(LCMS)(XTerraC18，20×50mm)對(duì)粗產(chǎn)品進(jìn)行純化。在向已純化的材料中添加1∶1的三氟乙酸和二氯乙烷的混合物(0.6mL)之后，在室溫下靜置混合物1小時(shí)。然后在真空中濃縮混合物以得到期望產(chǎn)品。
實(shí)施例14-({[5-氯-2-(2-苯基乙氧基)苯甲?；鵠氨基}甲基)苯甲酸 MS(ESI)觀測(cè)值m/z 409.99(M+H)+C23H20ClNO4準(zhǔn)確質(zhì)量計(jì)算值m/z 409.11實(shí)施例24-[({5-氯-2-[2-(2-氯苯基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)甲基]苯甲酸 MS(ESI)觀測(cè)值m/z 443.92(M+H)+C23H19Cl2NO4準(zhǔn)確質(zhì)量計(jì)算值m/z 443.07實(shí)施例34-[({5-氯-2-[2-(4-氟苯基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)甲基]苯甲酸
MS(ESI)觀測(cè)值m/z 427.96(M+H)+C23H19ClFNO4準(zhǔn)確質(zhì)量計(jì)算值m/z 427.10實(shí)施例44-[({5-氯-2-[2-(4-氯苯基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)甲基]苯甲酸 MS(ESI)觀測(cè)值m/z 443.93(M+H)+C23H19Cl2NO4準(zhǔn)確質(zhì)量計(jì)算值m/z 443.07實(shí)施例54-[({5-氯-2-(環(huán)己基乙氧基)苯甲酰基}氨基)甲基]苯甲酸 根據(jù)實(shí)施例1-4的合成過(guò)程的步驟2中所述的方法，由4-{[(5-氯-2-羥基苯甲?；?氨基]甲基}苯甲酸叔丁酯(實(shí)施例l-4的步驟1)和2-環(huán)己基乙醇來(lái)制備標(biāo)題化合物。
MS(ESI)觀測(cè)值m/z 387.98(M+H)+C21H22ClNO4準(zhǔn)確質(zhì)量計(jì)算值m/z 387.12
實(shí)施例64-[({5-氯-2-[(4-氯苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)甲基]苯甲酸 根據(jù)實(shí)施例1-4的合成過(guò)程的步驟2中所述的方法，由4-{[(5-氯-2-羥基苯甲酰基)氨基]甲基}苯甲酸叔丁酯(實(shí)施例1-4的步驟1)和4-氯苯基甲醇來(lái)制備標(biāo)題化合物。
MS(ESI)觀測(cè)值m/z 429.91(M+H)+C22H17Cl2NO4準(zhǔn)確質(zhì)量計(jì)算值m/z 429.05實(shí)施例74-[({5-氯-2-[2-(2-甲基苯基)乙氧基]苯甲酰基}氨基)甲基]苯甲酸 步驟1.4-[({5-氯-2-[2-(2-甲基苯基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)甲基]苯甲酸叔丁酯在室溫下，向4-{[(5-氯-2-羥基苯甲?；?氨基]甲基}苯甲酸叔丁酯(實(shí)施例1-4的合成過(guò)程的步驟1，0.21g，0.58mmol)、2-(2-甲基苯基)乙醇(0.16g，1.2mmol)和三苯基膦(0.30g，1.2mmol)在四氫呋喃(5mL)中的攪拌溶液中，添加偶氮二羧酸二叔丁酯(0.27g，1.2mmol)。通宵攪拌之后，通過(guò)添加碳酸氫鈉水溶液使反應(yīng)終止。用乙酸乙酯萃取水層，將合并的有機(jī)層用鹽水洗滌、干燥(硫酸鎂)并蒸發(fā)。通過(guò)快速柱色譜在用己烷/乙酸乙酯(5/1)洗脫的硅膠上對(duì)殘余物進(jìn)行純化，得到0.21g(76％)的無(wú)色油狀標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ8.20(1H，d，J＝2.8Hz)，7.99(1H，t，J＝5.9Hz)，7.91(2H，d，J＝8.2Hz)，7.38(1H，dd，J＝8.7，2.8Hz)，7.25(2H，d，J＝8.2Hz)，7.16-7.03(4H，m)，6.93(1H，d，J＝8.7Hz)，4.52(2H，d，J＝5.9Hz)，4.34(2H，t，J＝6.8Hz)，3.04(2H，t，J＝6.8Hz)，2.25(3H，s)，1.59(9H，s)MS(ESI)m/z 480(M+H)+.
步驟2.4-[({5-氯-2-[2-(2-甲基苯基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)甲基]苯甲酸在室溫下，向4-[({5-氯-2-[2-(2-甲基苯基)乙氧基]苯甲酰基}氨基)甲基]苯甲酸叔丁酯(步驟1，0.21g，0.45mmol)在二氯甲烷(2ml)的攪拌溶液中，添加三氟乙酸(2mL)。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物1小時(shí)，然后蒸發(fā)。將殘余固體用醚洗滌，然后通過(guò)過(guò)濾收集，得到0.18g(95％)白色固體狀標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ12.86(1H，br.s)，8.60(1H，t，J＝6.1Hz)，7.89(2H，d，J＝8.4Hz)，7.66(1H，d，J＝2.8Hz)，7.50(1H，dd，J＝8.9，2.8Hz)，7.40(2H，d，J＝8.4Hz)，7.25(1H，d，J＝8.9Hz)，7.22-7.04(4H，m)，4.50(2H，d，J＝6.1Hz)，4.32(2H，t，J＝6.9Hz)，3.06(2H，t，J＝6.9Hz)，2.26(3H，s)MS(ESI)m/z 424(M+H)+，422(M-H)-.
實(shí)施例84-[(1S)-1-({5-氯-2-[2-(2，6-二氟苯基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸 步驟1.[(1S)-1-(4-溴苯基)乙基]氨基甲酸叔丁酯在室溫下攪拌[(1S)-1-(4-溴苯基)乙基]胺(10.00g，50.0mmol)和二碳酸二叔丁酯(11.45g，52.5mmol)、三乙胺(7.66mL，55.0mmol)在二氯甲烷(200mL)中的混合物1小時(shí)。將混合物用二氯甲烷(500mL)稀釋?zhuān)⒂?M鹽酸(300mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(300mL)和鹽水(300mL)洗滌。在硫酸鎂上干燥有機(jī)層，并在減壓下濃縮。用冷己烷洗滌殘余物，得到14.73g(98％)白色固體狀標(biāo)題化合物
1H-NMR(CDCl3)δ7.47-7.42(2H，m)，7.18(2H，d，J＝8.4Hz)，5.30(2H，br.s)，1.41(12H，br.s~)步驟2.4-{(1S)-1-[(叔丁氧基羰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯在80℃下，在一氧化碳?xì)夥罩?，攪拌[(1S)-1-(4-溴苯基)乙基]氨基甲酸叔丁酯(步驟1，14.73g，49.1mmol)、1，3-二(二苯基膦基)丙烷(2.03g，4.91mmol)、乙酸鈀(II)(1.10g，4.91mmol)、三乙胺(20.5mL，147mmol)、N，N-二甲基甲酰胺(120mL)和甲醇(180mL)的混合物16小時(shí)。冷卻至室溫之后，將混合物用醚(800mL)稀釋并用水(500mL×3)洗滌。有機(jī)相在硫酸鎂上干燥，然后蒸發(fā)。通過(guò)快速柱色譜在用己烷/乙酸乙酯(5/1)洗脫的硅膠上對(duì)殘余物進(jìn)行純化，得到12.83g(94％)白色固體狀標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ8.02-7.99(2H，m)，7.37(2H，d，J＝8.4Hz)，4.83(2H，br.s)，3.91(3H，s)，1.46-1.42(12H，m~)步驟3.4-[(1S)-1-氨基乙基]苯甲酸甲酯氯化氫在室溫下，用三氟乙酸(100mL)和二氯甲烷(100mL)處理4-{(1S)-1-[(叔丁氧羰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯(步驟2，12.83g，45.9mmol)16小時(shí)。去除溶劑之后，用10％的氯化氫在甲醇(100mL)中的溶液稀釋殘余物。在減壓下濃縮混合物，并用乙酸乙酯洗滌殘余物，得到9.40g(95％)白色固體狀標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ8.67(2H，br.s)，8.01(2H，d，J＝8.4Hz)，7.68(2H，d，J＝8.4Hz)，4.49(1H，q，J＝6.9Hz)，3.87(3H，s)，1.53(3H，d，J＝6.9Hz~)步驟4.4-{(1S)-1-[(5-氯-2-羥基苯甲?；?氨基]乙基}苯甲酸甲酯向5-氯-2-羥基苯甲酸(1.2g，7.0mmol)和4-[(1S)-1-氨基乙基]苯甲酸甲酯氯化氫(步驟3，1.5g，7.0mmol)在二氯甲烷(18mL)中的攪拌溶液中，連續(xù)添加1-(3-二甲基氨丙基)-3-乙基碳二亞胺氯化氫(EDCI)(2.0g，10mmol)、1-羥基苯并三唑水合物(HOBT)(1.6g，10mmol)和三乙胺(1.0mL，7.3mmol)。在攪拌5小時(shí)之后，將反應(yīng)混合物倒入碳酸氫鈉水溶液(100mL)。分離有機(jī)層，并用二氯甲烷(50mL×2)萃取水層。將合并的有機(jī)層用鹽水(100mL)洗滌、干燥(硫酸鎂)并蒸發(fā)。通過(guò)快速柱色譜在用己烷/乙酸乙酯(5/1)洗脫的硅膠上對(duì)殘余物進(jìn)行純化，得到1.8g(76％)的白色固體狀標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ12.08(1H，s)，8.03(2H，d，J＝8.4Hz)，7.47-7.30(4H，m)，6.93(1H，d，J＝8.7Hz)，6.59(1H，d，J＝7.3Hz)，5.12(1H，dq，J＝7.3，6.9Hz)，3.92(3H，s)，1.63(3H，d，J＝6.9Hz)MS(ESI)m/z 334(M+H)+，332(M-H)-.
步驟5.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[2-(2，6-二氟苯基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯在室溫下，向4-{(1S)-1-[(5-氯-2-羥基苯甲?；?氨基]乙基}苯甲酸甲酯(步驟4，0.12g，0.36mmol)、2-(2，6-二氟苯基)乙醇(0.12g，0.78mmol)和三苯基膦(0.19g，0.72mmol)在四氫呋喃(2mL)中的攪拌溶液中，添加偶氮二羧酸二叔丁酯(0.17g，0.72mmol)。在通宵攪拌之后，將反應(yīng)混合物濃縮。向殘余物中加入三氟乙酸(2mL)和二氯甲烷(2mL)，攪拌溶液1小時(shí)，然后蒸發(fā)。通過(guò)快速柱色譜在用己烷/乙酸乙酯(5/1)洗脫的硅膠上對(duì)殘余物進(jìn)行純化，得到016g(84％)的白色固體狀標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ8.17(1H，d，J＝7.3Hz)，8.15(1H，d，J＝2.8Hz)，8.01(2H，d，J＝8.4Hz)，7.41(2H，d，J＝8.4Hz)，7.37(1H，dd，J＝8.7，2.8Hz)，7.28-7.15(1H，m)，6.92(1H，d，J＝8.7Hz)，6.91-6.80(2H，m)，5.36(1H，dq，J＝7.3，6.9Hz)，4.34(2H，t，J＝7.1Hz)，3.91(3H，s)，3.19(2H，t，J＝7.1Hz)，1.57(3H，d，J＝6.9Hz)MS(ESI)m/z 474(M+H)+.
步驟6.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[2-(2，6-二氟苯基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸向4-[(1S)-1-({5-氯-2-[2-(2，6-二氟苯基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯(步驟5，0.16g，0.34mmol)在甲醇(2mL)和四氫呋喃(3mL)中的攪拌溶液中，添加2N氫氧化鈉水溶液(2mL)。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物3小時(shí)，然后蒸發(fā)。將殘余物分配到乙酸乙酯(30mL)和10％檸檬酸水溶液中(30mL)。分離有機(jī)層，并用乙酸乙酯(30mL)萃取水層。將合并的有機(jī)萃取相用鹽水(50mL)洗滌、干燥(硫酸鎂)，然后濃縮。殘余固體用醚洗滌，并在真空中干燥，得到0.10g(65％)白色固體狀標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ8.53(1H，d，J＝7.6Hz)，7.90(2H，d，J＝8.2Hz)，7.54(1H，d，J＝2.8Hz)，7.51-7.43(3H，m)，7.42-7.30(1H，m)，7.22(1H，d，J＝8.9Hz)，7.14-7.01(2H，m)，5.13(1H，dq，J＝7.6，7.1Hz)，4.30(2H，t，J＝6.9Hz)，3.13(2H，t，J＝6.9Hz)，1.41(3H，d，J＝7.1Hz)MS(ESI)m/z 460(M+H)+，458(M-H)-.
實(shí)施例94-{(1S)-1-[({5-氯-2-[2-(4-氟苯基)乙氧基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸 步驟1.5-氯-2-[2-(4-氟苯基)乙氧基]煙酸在油浴中，在90℃下加熱2，5-二氯煙酸(0.30g，1.6mmol)、2-(4-氟苯基)乙醇(0.23mL，1.9mmol)和油中的氫化鈉在油(0.15g，3.7mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(2mL)中的混合物3小時(shí)。將反應(yīng)混合物倒入10％檸檬酸水溶液(50mL)，并用乙酸乙酯(50mL×2)萃取。將合并的有機(jī)層用水(50mL×2)和鹽水(50mL)洗滌、干燥(硫酸鎂)，然后蒸發(fā)。將粗制固體用乙烷/醚(10/1)洗滌，然后在真空中干燥，得到0.31g(68％)白色固體狀標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ8.41(1H，d，J＝2.8Hz)，8.31(1H，d，J＝2.8Hz)，7.27-7.20(2H，m)，7.08-6.98(2H，m)，4.78(2H，t，J＝6.8Hz)，3.15(2H，t，J＝6.8Hz)；MS(ESI)m/z 294(M-H)-.
步驟2.4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[2-(4-氟苯基)乙氧基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例8的步驟4中所述的過(guò)程，由5-氯-2-[2-(4-氟苯基)乙氧基]煙酸(步驟1)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ8.45(1H，d，J＝2.8Hz)，8.20(1H，d，J＝2.8Hz)，8.03-7.94(3H，m)，7.27(2H，d，J＝8.3Hz)，7.18-7.08(2H，m)，7.00-6.92(2H，m)，5.25(2H，t，J＝7.2Hz)，4.76(1H，dq，J＝6.8，2.8Hz)，3.92(3H，s)，3.10(2H，t，J＝7.2Hz)，1.39(3H，d，J＝6.8Hz).
MS(ESI)m/z 457(M+H)+.
步驟3.4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[2-(4-氟苯基)乙氧基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中所述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[2-(4-氟苯基)乙氧基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯(步驟2)制備標(biāo)題化合物1H-NMR((DMSO-d6)δ8.54(1H，d，J＝7.7Hz)，8.36(1H，d，J＝2.8Hz)，8.04(1H，d，J＝2.8Hz)，7.89(2H，d，J＝8.3Hz)，7.43(2H，d，J＝8.3Hz)，7.33-7.24(2H，m)，7.12-7.02(2H，m)，5.12(1H，dq，J＝7.7，6.8Hz)，4.60(2H，t，J＝6.6Hz)，3.07(2H，t，J＝6.6Hz)，1.37(3H，d，J＝6.8Hz).
MS(ESI)m/z 443(M+H)+，441(M-H)-.
實(shí)施例104-[(1S)-1-({5-氯-2-[2-(2-氟苯基)乙氧基]苯甲酰基}氨基)乙基]苯甲酸 步驟1.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[2-(2-氟苯基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例8的步驟5中所述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[(5-氯-2-羥基苯甲酰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯(實(shí)施例8的步驟4)和2-(2-氟苯基)乙醇制備標(biāo)題化合物MS(ESI)m/z 456(M+H)+.
步驟2.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[2-(2-氟苯基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中所述的過(guò)程，由4-[(1S)-1-({5-氯-2-[2-(2-氟苯基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯(步驟1)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ8.49(1H，d，J＝7.5Hz)，7.82(2H，d，J＝8.3Hz)，7.57(1H，d，J＝2.8Hz)，7.49(1H，dd，J＝9.0，2.8Hz)，7.43(2H，d，J＝8.3Hz)，7.39-7.22(3H，m)，7.21-7.08(2H，m)，5.12(1H，dq，J＝7.5，7.0Hz)，4.36(2H，t，J＝6.8Hz)，3.12(2H，t，J＝6.8Hz)，1.36(3H，d，J＝7.0Hz)MS(ESI) m/z 442(M+H)+，440(M-H)-.
實(shí)施例114-[(1S)-1-({5-氯-2-[2-(2-甲基苯基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸 步驟1.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[2-(2-甲基苯基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例8的步驟5中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[(5-氯-2-羥基苯甲?；?氨基]乙基}苯甲酸甲酯(實(shí)施例8的步驟4)和2-(2-甲基苯基)乙醇來(lái)制備標(biāo)題化合物MS(ESI)m/z 452(M+H)+.
步驟2.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[2-(2-甲基苯基)乙氧基]苯甲酰基}氨基)乙基]苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-[(1S)-1-({5-氯-2-[2-(2-甲基苯基)乙氧基]苯甲酰基}氨基)乙基]苯甲酸甲酯(步驟1)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ8.50(1H，d，J＝7.6Hz)，7.88(2H，d，J＝8.2Hz)，7.58(1H，d，J＝2.8Hz)，7.49(1H，dd，J＝8.9，2.8Hz)，7.42(2H，d，J＝8.2Hz)，7.25(1H，d，J＝8.9Hz)，7.24-7.06(4H，m)，5.11(1H，dq，J＝7.6，7.1Hz)，4.34(2H，t，J＝6.9Hz)，3.06(2H，t，J＝6.9Hz)，2.28(3H，s)，1.33(3H，d，J＝7.1Hz)MS(ESI)m/z 438(M+H)+，436(M-H)-.
實(shí)施例124-[(1S)-1-({5-氯-2-[2-(4-甲基苯基)乙氧基]苯甲酰基}氨基)乙基]苯甲酸 步驟1.4-[(1S)-1-1-({5-氯-2-[2-(4-甲基苯基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例8的步驟5描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[(5-氯-2-羥基苯甲?；?氨基]乙基}苯甲酸甲酯(實(shí)施例8的步驟4)和2-(4-甲基苯基)乙醇來(lái)制備標(biāo)題化合物MS(ESI)m/z 452(M+H)+.
步驟2.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[2-(4-甲基苯基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-[(1S)-1-({5-氯-2-[2-(4-甲基苯基)乙氧基]苯甲酰基}氨基)乙基]苯甲酸甲酯(步驟1)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ8.44(1H，d，J＝7.6Hz)，7.88(2H，d，J＝8.2Hz)，7.60(1H，d，J＝2.8Hz)，7.50(1H，dd，J＝8.9，2.8Hz)，7.40(2H，d，J＝8.2Hz)，7.23(1H，d，J＝8.9Hz)，7.14(2H，d，J＝8.1Hz)，7.07(2H，d，J＝8.1Hz)，5.12(1H，dq，J＝7.6，6.9Hz)，4.34(2H，t，J＝6.6Hz)，3.04(2H，t，J＝6.6Hz)，2.24(3H，s)，1.36(3H，d，J＝6.9Hz)MS(ESI)m/z 438(M+H)+，436(M-H)-.
實(shí)施例134-((1S-1-{[5-氯-2-(環(huán)己基氧)苯甲?；鵠氨基}乙基)苯甲酸 步驟1.4-((1S)-1-{[5-氯-2-(環(huán)己基氧)苯甲酰基]氨基}乙基)苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例8的步驟5中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[(5-氯-2-羥基苯甲?；?氨基]乙基}苯甲酸甲酯(實(shí)施例8的步驟4)和環(huán)己醇來(lái)制備標(biāo)題化合物MS(ESI)m/z416(M+H)+，414(M-H)-.
步驟2.4-((1S)-1-{[5-氯-2-(環(huán)己基氧)苯甲酰基]氨基}乙基)苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-((1S)-1-{[5-氯-2-(環(huán)己基氧)苯甲?；鵠氨基}乙基)苯甲酸甲酯(步驟1)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ8.60(1H，d，J＝7.6Hz)，7.91(2H，d，J＝8.2Hz)，7.60(1H，d，J＝2.8Hz)，7.51(2H，d，J＝8.2Hz)，7.47(1H，dd，J＝8.9，2.8Hz)，7.23(1H，d，J＝8.9Hz)，5.17(1H，dq，J＝7.6，7.1Hz)，4.59-4.44(1H，m)，2.05-1.85(2H，m)，1.70-1.10(8H，m)，1.48(3H，d，J＝7.1Hz)MS(ESI)m/z 402(M+H)+，400(M-H)-.
實(shí)施例144-((1S)-1-{[5-氯-2-(3-甲基丁氧基)苯甲?；鵠氨基}乙基)苯甲酸
步驟1.4-((1S)-1-{[5-氯-2-(3-甲基丁氧基)苯甲酰基]氨基}乙基)苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例8的步驟5中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[(5-氯-2-羥基苯甲?；?氨基]乙基}苯甲酸甲酯(實(shí)施例8的步驟4)和3-甲基丁-1-醇來(lái)制備標(biāo)題化合物MS(ESI)m/z 404(M+H)+.
步驟2.4-((1S)-1-{[5-氯-2-(3-甲基丁氧基)苯甲?；鵠氨基}乙基)苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-((1S)-1-{[5-氯-2-(3-甲基丁氧基)苯甲?；鵠氨基}乙基)苯甲酸甲酯(步驟1)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ8.57(1H，d，J＝7.6Hz)，7.92(2H，d，J＝8.1Hz)，7.58(1H，d，J＝2.6Hz)，7.55-7.46(3H，m)，7.20(1H，d，J＝8.9Hz)，5.16(1H，dq，J＝7.6，6.9Hz)，4.09(2H，t，J＝6.3Hz)，1.76-1.54(3H，m)，1.46(3H，d，J＝6.9Hz)，0.87(3H，d，J＝6.1Hz)，0.86(3H，d，J＝6.1Hz)MS(ESI)m/z 390(M+H)+，388(M-H)-.
實(shí)施例154-{(1S)-1-[({5-氯-2-[2-(4-氯苯基)乙氧基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸 步驟1.5-氯-2-[2-(4-氯苯基)乙氧基]煙酸根據(jù)實(shí)施例9的步驟1中描述的過(guò)程，由2，5-二氯煙酸和2-(4-氯苯基)乙醇來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ8.38(1H，d，J＝2.8Hz)，8.29(1H，d，J＝2.8Hz)，7.35-7.12(4H，m)，4.75(2H，t，J＝6.8Hz)，3.13(2H，t，J＝6.8Hz~)
步驟2.4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[2-(4-氯苯基)乙氧基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例8的步驟4中描述的過(guò)程，由5-氯-2-[2-(4-氯苯基)乙氧基]煙酸(步驟1)和4-[(1S)-1-氨基乙基]苯甲酸甲酯氯化氫(實(shí)施例8的步驟3)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ8.44(1H，d，J＝2.8Hz)，8.19(1H，d，J＝2.8Hz)，8.01-7.95(2H，m)，7.95-7.88(1H，m)，7.30-7.18(4H，m)，7.12-7.04(2H，m)，5.30-5.15(1H，m)，4.84-4.67(2H，m)，3.90(3H，s)，3.08(2H，t，J＝6.6Hz)1.37(3H，d，J＝7.0Hz~)步驟3.4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[2-(4-氯苯基)乙氧基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[2-(4-氯苯基)乙氧基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯(步驟2)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ8.51(1H，d，J＝7.7Hz)，8.34(1H，d，J＝2.8Hz)，8.02(1H，d，J＝2.8Hz)，7.88(2H，d，J＝8.4Hz)，7.40(2H，d，J＝8.4Hz)，7.30-7.20(4H，m)，5.09(1H，dq，J＝7.7，7.0Hz)，4.59(2H，t，J＝6.4Hz)，3.05(2H，t，J＝6.4Hz)，1.35(3H，d，J＝7.0Hz)MS(ESI)m/z 459(M+H)+，457(M-H)-.
實(shí)施例164-{(1S)-1-[({5-氯-2-[甲基(2-苯基乙基)氨基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸 步驟1.4-((1S)-1-{[(2，5-二氯吡啶-3-基)羰基]氨基}乙基)苯甲酸甲酯向2，5-二氯煙酸(Syn.Commun.1989，19，553-9，2.0g，10.4mmol)和4-[(1S)-1-氨基乙基]苯甲酸甲酯氯化氫(實(shí)施例8的步驟3，2.35g，10.9mmol)在二氯甲烷(10mL)中的攪拌溶液中，分小份添加1，1’-羰基二咪唑(CDI)(1.77g，10.9mmol)。在通宵攪拌之后，將反應(yīng)化合物倒入水(80mL)中。通過(guò)過(guò)濾收集沉淀的固體，然后干燥。通過(guò)快速柱色譜在用二氯甲烷/乙酸乙酯(20/1)洗脫的硅膠(100g)上對(duì)粗產(chǎn)品進(jìn)行純化，得到3.4g(93％)白色固體狀的標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ8.42(1H，d，J＝2.6Hz)，8.10(1H，d，J＝2.6Hz)，8.04(2H，d，J＝8.6Hz)，7.46(2H，d，J＝8.6Hz)，6.82(1H，d，J＝7.3Hz)，5.40-5.30(1H，m)，3.92(3H，s)，1.64(3H，d，J＝7.0Hz)MS(ESI)m/z 353(M+H)+，351(M-H)-.
步驟2.4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[甲基(2-苯基乙基)氨基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯在100℃下，加熱4-((1S)-1-{[(2，5-二氯吡啶-3-基)羰基]氨基}乙基)苯甲酸甲酯(步驟1，150mg，0.43mmol)、[2-(4-氯苯基)乙基]胺(64mg，0.47mmol)和碳酸鉀(88mg，0.64mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(1.5mL)中的混合物18小時(shí)。冷卻之后，混合物在乙酸乙酯和水之間分配。分離有機(jī)層，用鹽水洗滌，在硫酸鈉上干燥，然后蒸發(fā)。通過(guò)快速柱色譜在用己烷/乙酸乙酯(3/1)洗脫的硅膠上對(duì)殘余物進(jìn)行純化，得到140mg(72％)的標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ8.40-8.22(2H，m)，8.17(1H，d，J＝2.8Hz)，7.96(2H，d，J＝8.4Hz)，7.30-7.00(7H，m)，5.35-5.15(1H，m)，3.90(3H，s)，3.63-3.38(2H，m)，2.80(2H，t，J＝7.0Hz)，2.62(3H，s)，1.33(3H，d，J＝6.9Hz).
步驟3.4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[甲基(2-苯基乙基)氨基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[甲基(2-苯基乙基)氨基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯(步驟2)來(lái)制備標(biāo)題化合物
1H-NMR(DMSO-d6)δ9.06(1H，d，J＝8.1Hz)，8.15(1H，d，J＝2.6Hz)，7.88(2H，d，J＝8.4Hz)，7.55(1H，d，J＝2.6Hz)，7.47(2H，d，J＝8.4Hz)，7.30-7.10(5H，m)，5.06(1H，dq，J＝8.1，7.3Hz)，3.64-3.44(2H，m)，2.80-2.70(5H，m)，1.40(3H，d，J＝7.3Hz)；MS(ESI)m/z 438(M+H)+，436(M-H)-.
實(shí)施例174-[(1S)-1-({5-氯-2-[(順-4-甲基環(huán)己基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸 步驟1.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(順-4-甲基環(huán)己基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯和4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(反-4-甲基環(huán)己基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例8的步驟5中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[(5-氯-2-羥基苯甲?；?氨基]乙基}苯甲酸甲酯(實(shí)施例8的步驟4)和4-甲基環(huán)己醇來(lái)制備標(biāo)題化合物順式異構(gòu)體；1H-NMR(CDCl3)δ8.43(1H，d，J＝7.4Hz)，8.19(1H，d，J＝2.8Hz)，8.00(2H，d，J＝8.4Hz)，7.45(2H，d，J＝8.4Hz)，7.43(1H，dd，J＝8.9，2.8Hz)，6.89(1H，d，J＝8.9Hz)，5.40(1H，dq，J＝7.4，7.0Hz)，4.75-4.63(1H，m)，3.89(3H，s)，2.10-1.02(9H，m)，1.61(3H，d，J＝7.0Hz)，0.82(3H，d，J＝6.2Hz)MS(ESI)m/z 430(M+H)+，428(M-H)-；反式異構(gòu)體；1H-NMR(CDCl3)δ8.46(1H，d，J＝7.4Hz)，8.19(1H，d，J＝2.9Hz)，8.02(2H，d，J＝8.3Hz)，7.43(2H，d，J＝8.3Hz)，7.34(1H，dd，J＝8.9，2.9Hz)，6.93(1H，d，J＝8.9Hz)，5.33(1H，dq，J＝7.4，6.8Hz)，4.39-4.22(1H，m)，3.91(3H，s)，2.25-2.08(2H，m)，1.87-1.72(2H，m)，1.58(3H，d，J＝6.8Hz)，1.50-1.26(3H，m)，1.15-0.96(2H，m)，0.93(3H，d，J＝6.4Hz)MS(ESI)m/z 430(M+H)+，428(M-H)-.
步驟2.4-[(1S)-1-({5-氯2-[(順-4-甲基環(huán)己基)氧]苯甲酰基}氨基)乙基]苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-[(1S)-1-({5-氯2-[(順-4-甲基環(huán)己基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯(步驟1)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ8.58(1H，d，J＝7.4Hz)，7.91(2H，d，J＝8.0Hz)，7.62(1H，d，J＝2.6Hz)，7.51(2H，d，J＝8.0Hz)，7.49(1H，dd，J＝9.1，2.6Hz)，7.19(1H，d，J＝9.1Hz)，5.20(1H，dq，J＝7.4，6.9Hz)，4.83-4.68(1H，m)，1.98-1.82(2H，m)，1.68-0.96(7H，m)，1.49(3H，d，J＝6.9Hz)，0.77(3H，d，J＝6.1Hz)MS(ESI)m/z 416(M+H)+，414(M-H)-.
實(shí)施例184-[(1S)-1-({5-氯-2-[(反-4-甲基環(huán)己基)氧]苯甲酰基}氨基)乙基]苯甲酸 步驟1.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(反-4-甲基環(huán)己基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(反-4-甲基環(huán)己基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯(實(shí)施例17的步驟1)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ8.58(1H，d，J＝7.6Hz)，7.91(2H，d，J＝8.3Hz)，7.60(1H，d，J＝2.8Hz)，7.51(2H，d，J＝8.3Hz)，7.46(1H，dd，J＝9.1，2.8Hz)，7.25(1H，d，J＝9.1Hz)，5.15(1H，dq，J＝7.6，6.9Hz)，4.48-4.30(1H，m)，2.18-1.98(2H，m)，1.77-1.62(2H，m)，1.47(3H，d，J＝6.9Hz)，1.42-1.20(3H，m)，1.15-0.95(2H，m)，0.88(3H，d，J＝6.4Hz)
MS(ESI)m/z 416(M+H)+，414(M-H)-.
實(shí)施例194-{(1S)-1-[({5-氯-2-[2-(2-甲基苯基)乙氧基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸 步驟1.5-氯-2-[2-(2-甲基苯基)乙氧基]煙酸根據(jù)實(shí)施例9的步驟1中描述的過(guò)程，由2，5-二氯煙酸和2-(2-甲基苯基)乙醇來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ8.42(1H，d，J＝2.8Hz)，8.31(1H，d，J＝2.8Hz)，7.25-7.15(4H，m)，4.78(2H，t，J＝7.2Hz)，3.19(2H，t，J＝7.2Hz)，2.39(3H，s)MS(ESI)m/z 292(M+H)+，290(M-H)-.
步驟2.4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[2-(2-甲基苯基)乙氧基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例8的步驟4中描述的過(guò)程，由5-氯-2-[2-(2-甲基苯基)乙氧基]煙酸(步驟1)和4-[(1S)-1-氨基乙基]苯甲酸甲酯氯化氫(實(shí)施例8的步驟3)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ8.44(1H，d，J＝2.8Hz)，8.20(1H，d，J＝2.8Hz)，8.10-8.00(1H，m)，7.96(2H，d，J＝8.4Hz)，7.30-7.10(6H，m)，5.30-5.10(1H，m)，4.87-4.65(2H，m)，3.96(3H，s)，3.10(2H，t，J＝6.6Hz)，2.30(3H，s)，1.34(3H，d，J＝6.9Hz).
步驟3.4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[2-(2-甲基苯基)乙氧基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[2-(2-甲基苯基)乙氧基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯(步驟2)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ8.57(1H，d，J＝7.7Hz)，8.33(1H，d，J＝2.8Hz)，8.01(1H，d，J＝2.8Hz)，7.87(2H，d，J＝8.3Hz)，7.41(2H，d，J＝8.3Hz)，7.20-7.05(4H，m)，5.15-5.01(1H，m)，4.57(2H，t，J＝6.8Hz)，3.03(2H，t，J＝6.8Hz)，2.25(3H，s)，1.33(3H，d，J＝7.0Hz)MS(ESI)m/z 439(M+H)+，437(M-H)-.
實(shí)施例204-((1S)-1-{{5-氯-2-(3-甲氧基-3-甲基丁氧基)苯甲?；鵠氨基}乙基)苯甲酸 步驟1.4-((1S)-1-{[5-氯-2-(3-甲氧基-3-甲基丁氧基)苯甲?；鵠氨基}乙基)苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例8的步驟5中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[(5-氯-2-羥基苯甲?；?氨基]乙基}苯甲酸甲酯(實(shí)施例8的步驟4)和3-甲氧基-3-甲基丁-1-醇來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ8.32(1H，d，J＝6.8Hz)，8.14(1H，d，J＝2.8Hz)，8.02(2H，d，J＝8.4Hz)，7.45(2H，d，J＝8.4Hz)，7.37(1H，dd，J＝8.9，2.8Hz)，6.93(1H，d，J＝8.9Hz)，5.35(1H，dq，J＝6.9，6.8Hz)，4.25-4.10(2H，m)，3.91(3H，s)，3.15(3H，s)，1.98-1.83(2H，m)，1.59(3H，d，J＝6.9Hz)，1.19(3H，s)，1.18(3H，s)MS(ESI)m/z 434(M+H)+，432(M-H)-.
步驟2.4-((1S)-1-{[5-氯-2-(3-甲氧基-3-甲基丁氧基)苯甲酰基]氨基}乙基)苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-((1S)-1-{[5-氯-2-(3-甲氧基-3-甲基丁氧基)苯甲?；鵠氨基}乙基)苯甲酸甲酯(步驟1)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ12.87(1H，br.s)，8.60(1H，d，J＝7.5Hz)，7.92(2H，d，J＝8.4Hz)，7.56(1H，d，J＝2.8Hz)，7.52(2H，d，J＝8.4Hz)，7.48(1H，dd，J＝9.0，2.8Hz)，7.20(1H，d，J＝9.0Hz)，5.16(1H，dq，J＝7.5，7.0Hz)，4.18-4.06(2H，m)，3.06(3H，s)，1.97-1.78(2H，m)，1.46(3H，d，J＝7.0Hz)，1.11(3H，s)，1.10(3H，s)MS(ESI)m/z 420(M+H)+，418(M-H)-.
實(shí)施例214-((1S)-1-{[5-氯-2-(2-異丙氧基乙氧基)苯甲?；鵠氨基}乙基)苯甲酸 步驟1.4-((1S)-1-{[5-氯-2-(2-異丙氧基乙氧基)苯甲酰基]氨基}乙基)苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例8的步驟5中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[(5-氯-2-羥基苯甲酰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯(實(shí)施例8的步驟4)和2-異丙氧基乙醇來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ8.44(1H，d，J＝7.7Hz)，8.15(1H，d，J＝2.8Hz)，8.01(2H，d，J＝8.2Hz)，7.47(2H，d，J＝8.2Hz)，7.37(1H，dd，J＝8.9，2.8Hz)，6.90(1H，d，J＝8.9Hz)，5.38(1H，dq，J＝7.7，7.1Hz)，4.28-4.20(2H，m)，3.90(3H，s)，3.82-3.75(2H，m)，3.58(1H，sep，J＝6.1Hz)，1.58(3H，d，J＝7.1Hz)，1.13(3H，d，J＝6.1Hz)，1.11(3H，d，J＝6.1Hz)MS(ESI)m/z 420(M+H)+，418(M-H)-.
步驟2.4-((1S)-1-{[5-氯-2-(2-異丙氧基乙氧基)苯甲?；鵠氨基}乙基)苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-((1S)-1-{[5-氯-2-(2-異丙氧基乙氧基)苯甲?；鵠氨基}乙基)苯甲酸甲酯(步驟1)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ12.88(1H，br.s)，8.60(1H，d，J＝7.7Hz)，7.91(2H，d，J＝8.3Hz)，7.69(1H，d，J＝2.8Hz)，7.53(1H，dd，J＝9.0，2.8Hz)，7.50(2H，d，J＝8.3Hz)，7.22(1H，d，J＝9.0Hz)，5.19(1H，dq，J＝7.7，7.1Hz)，4.29-4.20(2H，m)，3.78-3.70(2H，m)，3.58(1H，sep，J＝6.1Hz)，1.47(3H，d，J＝7.1Hz)，1.04(6H，d，J＝6.1Hz)MS(ESI)m/z 406(M+H)+，404(M-H)-.
實(shí)施例224-[(1S)-1-({5-氯-2-[(2-氯苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸 步驟1.4-[(1S-1-({5-氯-2-[(2-氯苯甲基)氧]苯甲酰基}氨基)乙基]苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例8的步驟5中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[(5-氯-2-羥基苯甲?；?氨基]乙基}苯甲酸甲酯(實(shí)施例8的步驟4)和(2-氯苯基)甲醇來(lái)制備標(biāo)題化合物MS(ESI)m/z 458(M+H)+，456(M-H)-.
步驟2.4-[(1S)-1-({5-氯-2[(2-氯苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(2-氯苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯(步驟1)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ8.51(1H，d，J＝8.6Hz)，7.78(2H，d，J＝8.3Hz)，7.73-7.51(4H，m)，7.50-7.30(3H，m)，7.28(2H，d，J＝8.3Hz)，5.29(2H，s)，5.08(1H，dq，J＝8.6，7.0Hz)，1.26(3H，d，J＝7.0Hz)MS(ESI)m/z 444(M+H)+，442(M-H)-.
實(shí)施例23
4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(3-氯苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸 步驟1.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(-氯苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例8的步驟5中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[(5-氯-2-羥基苯甲酰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯(實(shí)施例8的步驟4)和(3-氯苯基)甲醇來(lái)制備標(biāo)題化合物MS(ESI)m/z 458(M+H)+，456(M-H)-.
步驟2.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(3-氯苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(3-氯苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯(步驟1)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ8.63(1H，d，J＝7.5Hz)，7.80(2H，d，J＝8.4Hz)，7.60-7.39(5H，m)，7.34(2H，d，J＝8.4Hz)，7.29(2H，d，J＝8.4Hz)，5.22(2H，s)，5.09(1H，dq，J＝7.5，6.8Hz)，1.33(3H，d，J＝6.8Hz)MS(ESI)m/z 444(M+H)+，442(M-H)-.
實(shí)施例244-[(1S)-1-({5-氯-2-[(4-氯苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸 步驟1.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(4-氯苯甲基)氧]苯甲酰基}氨基)乙基]苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例8的步驟5中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[(5-氯-2-羥基苯甲酰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯(實(shí)施例8的步驟4)和(4-氯苯基)甲醇來(lái)制備標(biāo)題化合物MS(ESI)m/z 458(M+H)+，456(M-H)-.
步驟2.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(4-氯苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(4-氯苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯(步驟1)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ8.61(1H，d，J＝7.8Hz)，7.81(2H，d，J＝8.4Hz)，7.62-7.48(4H，m)，7.44(2H，d，J＝8.4Hz)，7.34(2H，d，J＝8.2Hz)，7.29(1H，d，J＝8.9Hz)，5.20(2H，s)，5.09(1H，dq，J＝7.8，6.8Hz)，1.32(3H，d，J＝6.8Hz)MS(ESI)m/z 444(M+H)+，442(M-H)-.
實(shí)施例254-[(1S)-1-({5-氯-2-[(4-氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸 步驟1.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(4-氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例8的步驟5中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[(5-氯-2-羥基苯甲酰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯(實(shí)施例8的步驟4)和(4-氟苯基)甲醇來(lái)制備標(biāo)題化合物MS(ESI)m/z 442(M+H)+，440(M-H)-.
步驟2.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(4-氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(4-氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯(步驟1)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ8.58(1H，d，J＝7.5Hz)，7.78(2H，d，J＝8.3Hz)，7.60-7.50(4H，m)，7.30(3H，d，J＝8.3Hz)，7.20(2H，t，J＝8.8Hz)，5.17(2H，s)，5.07(1H，dq，J＝7.5，7.0Hz)，1.28(3H，d，J＝7.0Hz)MS(ESI)m/z 428(M+H)+，426(M-H)-.
實(shí)施例264-((1S)-1-{[5-氯-2-(2-苯氧基乙氧基)苯甲?；鵠氨基}乙基)苯甲酸 步驟1.4-((1S)-1-{[5-氯-2-(2-苯氧基乙氧基)苯甲?；鵠氨基}乙基)苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例8的步驟5中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[(5-氯-2-羥基苯甲?；?氨基]乙基}苯甲酸甲酯(實(shí)施例8的步驟4)和2-苯氧基乙醇來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ8.32(1H，d，J＝7.6Hz)，8.18(1H，d，J＝2.8Hz)，7.85(2H，d，J＝8.4Hz)，7.40(1H，dd，J＝8.7，2.8Hz)，7.35-7.26(4H，m)，7.04-6.95(1H，m)，6.92(1H，d，J＝8.7Hz)，6.89-6.81(2H，m)，5.31(1H，dq，J＝7.6，6.9Hz)，4.50-4.40(2H，m)，4.37-4.26(2H，m)，3.89(3H，s)，1.38(3H，d，J＝6.9Hz)MS(ESI)m/z 454(M+H)+，452(M-H)-.
步驟2.4-((1S)-1-{[5-氯-2-(2-苯氧基乙氧基)苯甲?；鵠氨基}乙基)苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-((1S)-1-{[5-氯-2-(2-苯氧基乙氧基)苯甲?；鵠氨基}乙基)苯甲酸甲酯(步驟1)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ12.84(1H，br.s)，8.59(1H，d，J＝7.5Hz)，7.81(2H，d，J＝8.3Hz)，7.69(1H，d，J＝2.8Hz)，7.56(1H，dd，J＝8.8，2.8Hz)，7.39(2H，d，J＝8.3Hz)，7.33-7.23(3H，m)，6.99-6.90(3H，m)，5.12(1H，dq，J＝7.5，7.0Hz)，4.54-4.45(2H，m)，4.43-4.24(2H，m)，1.30(3H，d，J＝7.0Hz)MS(ESI)m/z 440(M+H)+，438(M-H)-.
實(shí)施例274-((1S)-1-{[5-氯-2-(2-甲氧基-2-苯基乙氧基)苯甲酰基]氨基}乙基)苯甲酸 步驟1.4-((1S)-1-{[5-氯-2-(2-甲氧基-2-苯基乙氧基)苯甲酰基]氨基}乙基)苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例8的步驟5中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[(5-氯-2-羥基苯甲酰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯(實(shí)施例8的步驟4)和2-甲氧基-2-苯基乙醇來(lái)制備標(biāo)題化合物MS(ESI)m/z 468(M+H)+，466(M-H)-.
步驟2.4-((1S)-1-{[5-氯-2-(2-甲氧基-2-苯基乙氧基)苯甲?；鵠氨基}乙基)苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-((1S)-1-{[5-氯-2-(2-甲氧基-2-苯基乙氧基)苯甲?；鵠氨基}乙基)苯甲酸甲酯(步驟1)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ12.88(1H，br.s)，8.73-8.63(1H，m)，7.99-7.89(2H，m)，7.76-7.70(1H，m)，7.56-7.46(3H，m)，7.45-7.34(5H，m)，7.26(1H，d，J＝9.0Hz)，5.32-5.17(1H，m)，4.77-4.65(1H，m)，4.36-4.26(2H，m)，3.13 and 3.12(total 3H，each s)，1.55-1.45(3H，m)；MS(ESI)m/z 454(M+H)+，452(M-H)-.
實(shí)施例284-[(1S)-1-({5-氯-2-[2-(4-氟苯氧基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸
步驟1.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[2-(4-氟苯氧基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例8的步驟5中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[(5-氯-2-羥基苯甲?；?氨基]乙基}苯甲酸甲酯(實(shí)施例8的步驟4)和2-(4-氟苯氧基)乙醇來(lái)制備標(biāo)題化合物MS(ESI)m/z 472(M+H)+，470(M-H)-.
步驟2.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[2-(4-氟苯氧基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-[(1S)-1-({5-氯-2-[2-(4-氟苯氧基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯(步驟1)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ8.58(1H，d，J＝7.4Hz)，7.80(2H，d，J＝8.1Hz)，7.68(1H，d，J＝2.8Hz)，7.56(1H，dd，J＝8.9，2.8Hz)，7.40(2H，d，J＝8.1Hz)，7.27(1H，d，J＝8.9Hz)，7.15-7.05(2H，m)，7.02-6.93(2H，m)，5.12(1H，dq，J＝7.4，6.9Hz)，4.52-4.43(2H，m)，4.40-4.31(2H，m)，1.31(3H，d，J＝6.9Hz)MS(ESI)m/z 458(M+H)+，456(M-H)-.
實(shí)施例294-((1S)-1-{[5-氯-2-(環(huán)丁基甲氧基)苯甲酰基]氨基}乙基)苯甲酸 步驟1.4-((1S)-1-{[5-氯-2-(環(huán)丁基甲氧基)苯甲?；鵠氨基}乙基)苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例8的步驟5中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[(5-氯-2-羥基苯甲?；?氨基]乙基}苯甲酸甲酯(實(shí)施例8的步驟4)和環(huán)丁基甲醇來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ8.29(1H，d，J＝7.3Hz)，8.17(1H，d，J＝2.8Hz)，8.02(2H，d，J＝8.4Hz)，7.43(2H，d，J＝8.4Hz)，7.37(1H，dd，J＝8.9，2.8Hz)，6.90(1H，d，J＝8.9Hz)，5.35(1H，dq，J＝7.3，6.9Hz)，4.07(2H，d，J＝7.1Hz)，3.91(3H，s)，2.86-2.66(1H，m)，2.20-1.75(6H，m)，1.57(3H，d，J＝6.9Hz)MS(ESI)m/z 402(M+H)+，400(M-H)-.
步驟2.4-((1S)-1-{[5-氯-2-(環(huán)丁基甲氧基)苯甲?；鵠氨基}乙基)苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-((1S)-1-{[5-氯-2-(環(huán)丁基甲氧基)苯甲?；鵠氨基}乙基)苯甲酸甲酯(步驟1)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ12.87(1H，br.s)，8.53(1H，d，J＝7.4Hz)，7.92(2H，d，J＝8.2Hz)，7.61(1H，d，J＝2.8Hz)，7.55-7.46(3H，m)，7.19(1H，d，J＝8.9Hz)，5.16(1H，dq，J＝7.4，6.9Hz)，4.08(2H，d，J＝6.8Hz)，2.80-2.65(1H，m)，2.10-1.70(6H，m)，1.47(3H，d，J＝6.9Hz)MS(ESI)m/z 388(M+H)+，386(M-H)-.
實(shí)施例304-((1S)-1-[(5-氯-2-異丁氧基苯甲?；?氨基]乙基}苯甲酸 步驟1.4-((1S)-1-[(5-氯-2-異丁氧基苯甲?；?氨基]乙基}苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例8的步驟5中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[(5-氯-2-羥基苯甲?；?氨基]乙基}苯甲酸甲酯(實(shí)施例8的步驟4)和2-甲基丙-1-醇來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ8.31(1H，d，J＝7.3Hz)，8.17(1H，d，J＝2.8Hz)，8.01(2H，d，J＝8.4Hz)，7.44(2H，d，J＝8.4Hz)，7.36(1H，dd，J＝8.9，2.8Hz)，6.88(1H，d，J＝8.9Hz)，5.37(1H，dq，J＝7.3，6.9Hz)，3.91(3H，s)，3.87(2H，d，J＝6.3Hz)，2.20-1.96(1H，m)，1.59(3H，d，J＝6.9Hz)，1.03(3H，d，J＝6.8Hz)，0.99(3H，d，J＝6.8Hz)MS(ESI)m/z 390(M+H)+，388(M-H)-.
步驟2.4-{(1S)-1-[(5-氯-2-異丁氧基苯甲?；?氨基]乙基}苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[(5-氯-2-異丁氧基苯甲?；?氨基]乙基}苯甲酸甲酯(步驟1)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ12.88(1H，br.s)，8.58(1H，d，J＝7.5Hz)，7.91(2H，d，J＝8.0Hz)，8.58(1H，d，J＝2.8Hz)，7.54-7.44(3H，m)，7.17(1H，d，J＝9.0Hz)，5.17(1H，dq，J＝7.5，7.0Hz)，3.87(2H，d，J＝6.4Hz)，2.15-1.95(1H，m)，1.47(3H，d，J＝7.0Hz)，0.95(3H，d，J＝7.0Hz)，0.92(3H，d，J＝7.0Hz)MS(ESI)m/z 376(M+H)+，374(M-H)-.
實(shí)施例314-[(1S)-1-({[5-氯-2-(3-甲基丁氧基)吡啶-3-基]羰基}氨基)乙基]苯甲酸 步驟1.5-氯-2-(3-甲基丁氧基)煙酸根據(jù)實(shí)施例9的步驟1中描述的過(guò)程，由2，5-二氯煙酸和3-甲基丁-1-醇來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ8.43(1H，d，J＝2.8Hz)，8.32(1H，d，J＝2.8Hz)，4.62(2H，t，J＝6.6Hz)，1.97-1.70(3H，m)，1.00(6H，d，J＝6.4Hz~)步驟2.4-[(1S)-1-({[5-氯-2-(3-甲基丁氧基)吡啶-3-基]羰基}氨基)乙基]苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例8的步驟4中描述的過(guò)程，由5-氯-2-(3-甲基丁氧基)煙酸(步驟1)和4-[(1S)-1-氨基乙基]苯甲酸甲酯氯化氫(實(shí)施例8的步驟3)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ8.46(1H，d，J＝2.8Hz)，8.40-8.28(1H，m)，8.19(1H，d，J＝2.8Hz)，8.04(2H，d，J＝8.4Hz)，7.44(2H，d，J＝8.4Hz)，5.45-5.25(1H，m)，4.50(2H，t，J＝6.3Hz)，3.91(3H，s)，1.84-1.52(6H，m)，0.94(6H，d，J＝5.6Hz~)步驟3.4-[(1S)-1-({[5-氯-2-(3-甲基丁氧基)吡啶-3-基]羰基}氨基)乙基]苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-[(1S)-1-({[5-氯-2-(3-甲基丁氧基)吡啶-3-基]羰基}氨基)乙基]苯甲酸甲酯(步驟2)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ8.66(1H，d，J＝7.5Hz)，8.32(1H，d，J＝2.8Hz)，8.00(1H，d，J＝2.8Hz)，7.90(2H，d，J＝8.3Hz)，7.50(2H，d，J＝8.3Hz)，5.09(1H，dq，J＝7.5，6.8Hz)，4.35(2H，t，J＝6.3Hz)，1.70-1.50(3H，m)，1.40(3H，d，J＝6.8Hz)，0.85(6H，d，J＝6.3Hz)MS(ESI)m/z 391(M+H)+，389(M-H)-.
實(shí)施例324-[(1S)-1-({5-氯-2-[(2，5-二氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸 步驟1.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(2，5-二氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯在室溫下，通宵攪拌4-{(1S)-1-[(5-氯-2-羥基苯甲?；?氨基]乙基}苯甲酸甲酯(實(shí)施例8的步驟4，100mg，0.30mmol)、2-(溴甲基)-1，4-二氟苯(62mg，0.30mmol)和碳酸鉀(83mg，0.60mmol)在N，N-二甲基甲酰胺中的混合物。向混合物中添加水，將所得的混合物用乙酸乙酯萃取。將有機(jī)層用鹽水洗滌、在硫酸鈉上干燥，然后蒸發(fā)。通過(guò)快速柱色譜在用己烷/乙酸乙酯(3/1)洗脫的硅膠上對(duì)殘余物進(jìn)行純化，得到130mg(94％)標(biāo)題化合物MS(ESI)m/z 460(M+H)+，458(M-H)-.
步驟2.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(2，5-二氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(2，5-二氟苯甲基)氧]苯甲酰基}氨基)乙基]苯甲酸甲酯(步驟1)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ8.57(1H，d，J＝7.7Hz)，7.78(2H，d，J＝8.1Hz)，7.55(1H，s)，7.51-7.43(2H，m)，7.40-7.20(5H，m)，5.23(2H，s)，5.07(1H，dq，J＝7.7，7.0Hz)，1.30(3H，d，J＝7.0Hz)MS(ESI)m/z 446(M+H)+，444(M-H)-.
實(shí)施例334-[(1S)-1-({5-氯-2-[(3，4-二氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸 步驟1.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(3，4-二氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例32的步驟1中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[(5-氯-2-羥基苯甲酰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯(實(shí)施例8的步驟4)和4-(溴甲基)-1，2-二氟苯來(lái)制備標(biāo)題化合物MS(ESI)m/z 460(M+H)+，458(M-H)-.
步驟2.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(3，4-二氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(3，4-二氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯(步驟1)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ8.61(1H，d，J＝7.5Hz)，7.76(2H，d，J＝8.3Hz)，7.64-7.23(8H，m)，5.15(2H，s)，5.02(1H，dq，J＝7.5，7.0Hz)，1.31(3H，d，J＝7.0Hz)MS(ESI)m/z 446(M+H)+，444(M-H)-.
實(shí)施例344-[(1S)-1-({5-氯-2-[2-(4-氟苯基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸 步驟1.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[2-(4-氟苯基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯在室溫下，向4-{(1S)-1-[(5-氯-2-羥基苯甲?；?氨基]乙基}苯甲酸甲酯(實(shí)施例8的步驟4，73mg，0.22mmol)、2-(4-氟苯基)乙醇(46mg，0.33mmol)和三丁基膦(0.14mL，0.55mmol)在四氫呋喃(2mL)中的攪拌溶液中，添加N，N，N’，N’-四甲基偶氮二羧基酰胺(95mg，0.55mmol)。在攪拌3天之后，通過(guò)添加碳酸氫鈉水溶液(30mL)使反應(yīng)終止。用乙酸乙酯(20mL×2)萃取水層，將合并的有機(jī)相用鹽水洗滌、干燥(硫酸鎂)，然后蒸發(fā)。通過(guò)快速柱色譜在用己烷/乙酸乙酯(5/1)洗脫的硅膠上對(duì)殘余物進(jìn)行純化，得到無(wú)色油狀的標(biāo)題化合物和2-(4-氟苯基)乙醇的混合物(0.13g)MS(ESI)m/z 456(M+H)+.
步驟2.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[2-(4-氟苯基)乙氧基]苯甲酰基}氨基)乙基]苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟3中描述的過(guò)程，由4-[(1S)-1-({5-氯-2-[2-(4-氟苯基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯(步驟1)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ8.47(1H，d，J＝7.6Hz)，7.89(2H，d，J＝8.1Hz)，7.58(1H，d，J＝2.6Hz)，7.49(1H，dd，J＝8.7，2.6Hz)，7.43(2H，d，J＝8.1Hz)，7.33-7.17(3H，m)，7.13-7.02(2H，m)，5.12(1H，dq，J＝7.6，6.9Hz)，4.34(2H，t，J＝6.6Hz)，3.07(2H，t，J＝6.6Hz)，1.37(3H，d，J＝6.9Hz)MS(ESI)m/z 442(M+H)+，440(M-H)-.
實(shí)施例35
4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(2，4-二氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸 步驟1.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(2，4-二氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例32的步驟1中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[(5-氯-2-羥基苯甲?；?氨基]乙基}苯甲酸甲酯(實(shí)施例8的步驟4)和1-(溴甲基)-2，4-二氟苯來(lái)制備標(biāo)題化合物MS(ESI)m/z 460(M+H)+，458(M-H)-.
步驟2.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(2，4-二氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(2，4-二氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯(步驟1)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ8.50(1H，d，J＝7.7Hz)，7.77(2H，d，J＝8.4Hz)，7.64(1H，q，J＝6.6Hz)，7.60-7.50(2H，m)，7.38-7.24(4H，m)，7.13-7.04(1H，m)，5.21(2H，s)，5.05(1H，dq，J＝7.7，7.0Hz)，1.27(3H，d，J＝7.0Hz)MS(ESI)m/z 446(M+H)+，444(M-H)-.
實(shí)施例364-[(1S)-1-({5-氯-2-[(2-氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸 步驟1.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(2-氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例32的步驟1中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[(5-氯-2-羥基苯甲酰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯(實(shí)施例8的步驟4)和1-(溴甲基)-2-氟苯來(lái)制備標(biāo)題化合物MS(ESI)m/z 442(M+H)+，440(M-H)-.
步驟2.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(2-氟苯甲基)氧]苯甲酰基}氨基)乙基]苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(2-氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯(步驟1)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ12.9-12.8(1H，br.s)，8.53(1H，d，J＝7.4Hz)，7.79(2H，d，J＝8.1Hz)，7.67-7.51(3H，m)，7.50-7.18(6H，m)，5.29(2H，s)，5.08(1H，dq，J＝7.4，6.6Hz)，1.28(3H，d，J＝6.6Hz)；MS(ESI)m/z 428(M+H)+，426(M-H)-.
實(shí)施例374-[(1S)-1-({5-氯-2-[(3，5-二氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸 步驟1.4-[(1S)1-({5-氯-2-[(3，5-二氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例32的步驟1中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[(5-氯-2-羥基苯甲?；?氨基]乙基}苯甲酸甲酯(實(shí)施例8的步驟4)和1-(溴甲基)-3，5-二氟苯來(lái)制備標(biāo)題化合物MS(ESI)m/z 460(M+H)+，458(M-H)-.
步驟2.4-[(1S)-1-({5-氯-2[(3，5-二氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(3，5-二氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯(步驟1)來(lái)制備標(biāo)題化合物
1H-NMR(DMSO-d6)δ12.9-12.8(1H，br.s)，8.67(1H，d，J＝7.6Hz)，7.79(2H，d，J＝8.2Hz)，7.60-7.48(2H，m)，7.37(2H，d，J＝8.2Hz)，7.30-7.13(4H，m)，5.20(2H，s)，5.05(1H，dq，J＝7.6，7.1Hz)，1.34(3H，d，J＝7.1Hz)MS(ESI)m/z 446(M+H)+，444(M-H)-.
實(shí)施例384-((1S)-1-{[2-(苯甲基氧)-5-氯苯甲酰基]氨基}乙基)苯甲酸 步驟1.4-((1S)-1-{[2-(苯甲基氧)-5-氯苯甲?；鵠氨基}乙基)苯甲酸根據(jù)實(shí)施例32的步驟1和實(shí)施例8的步驟6中描述的二個(gè)步驟過(guò)程制備標(biāo)題化合物。首先，通過(guò)苯甲基溴將4-{(1S)-1-[(5-氯-2-羥基苯甲?；?氨基]乙基}苯甲酸甲酯(實(shí)施例8的步驟4)苯甲基化。接著，將粗產(chǎn)品水解成相應(yīng)的羧酸1H-NMR(DMSO-d6)δ12.9-12.8(1H，br.s)，8.61(1H，d，J＝7.9Hz)，7.78(2H，d，J＝8.4Hz)，7.62-7.46(4H，m)，7.45-7.25(6H，m)，5.20(2H，s)，5.07(1H，dq，J＝7.9，6.9Hz)，1.27(3H，d，J＝6.9Hz)MS(ESI)m/z 410(M+H)+，408(M-H)-.
實(shí)施例394-{(1S)-1-[({5-氯-2-[(2-氯苯甲基)氧]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸 步驟1.5-氯-2-[(2-氯苯甲基)氧]煙酸根據(jù)實(shí)施例9的步驟1中描述的過(guò)程，由2，5-二氯煙酸和(2-氯苯基)甲醇來(lái)制備標(biāo)題化合物
MS(ESI)m/z 298(M+H)+，296(M-H)-.
步驟2.4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[(2-氯苯甲基)氧]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例8的步驟4中描述的過(guò)程，由5-氯-2-[(2-氯苯甲基)氧]煙酸(步驟1)和4-[(1S-1-氨基乙基]苯甲酸甲酯氯化氫(實(shí)施例8的步驟3)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ8.17(1H，d，J＝2.8Hz)，8.02-7.95(1H，m)，7.91(2H，d，J＝8.3Hz)，7.43(1H，dd，J＝8.8，2.8Hz)，7.30-7.07(5H，m)，7.04(1H，d，J＝8.6Hz)，5.32-5.16(3H，m)，3.91(3H，s)，1.36(3H，d，J＝7.0Hz)MS(ESI)m/z 459(M+H)+，457(M-H)-.
步驟3.4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[(2-氯苯甲基)氧]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[(2-氯苯甲基)氧]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯(步驟2)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ12.9-12.8(1H，br.s)，8.70(1H，d，J＝7.7Hz)，8.41(1H，dd，J＝2.8，1.1Hz)，8.08(1H，dd，J＝2.8，1.1Hz)，7.76(2H，d，J＝8.4Hz)，7.64-7.58(1H，m)，7.56-7.50(1H，m)，7.45-7.30(4H，m)，5.52(2H，s)，5.12(1H，dq，J＝7.7，7.0Hz)，1.36(3H，d，J＝7.0Hz)MS(ESI)m/z 445(M+H)+，443(M-H)-.
實(shí)施例404-{(1S)-1-[({5-氯-2-[(4-氯苯甲基)氧]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸 步驟1.5-氯-2-[(4-氯苯甲基)氧]煙酸根據(jù)實(shí)施例9的步驟1中描述的過(guò)程，由2，5-二氯煙酸和(4-氯苯基)甲醇來(lái)制備標(biāo)題化合物MS(ESI)m/z 298(M+H)+，296(M-H)-.
步驟2.4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[(4-氯苯甲基)氧]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例8的步驟4中描述的過(guò)程，由5-氯-2-[(4-氯苯甲基)氧]煙酸(步驟1)和4-[(1S)-1-氨基乙基]苯甲酸甲酯氯化氫(實(shí)施例8的步驟3)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ8.49(1H，d，J＝2.8Hz)，8.23(1H，d，J＝2.8Hz)，8.18-8.08(1H，m)，7.93(2H，d，J＝8.4Hz)，7.39-7.30(4H，m)，7.20(2H，d，J＝8.6Hz)，5.42(2H，s)，5.33-5.16(1H，m)，3.93(3H，s)，1.40(3H，d，J＝7.0Hz)MS(ESI)m/z 459(M+H)+，457(M-H)-.
步驟3.4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[(4-氯苯甲基)氧]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[(4-氯苯甲基)氧]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯(步驟2)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ8.74(1H，d，J＝7.3Hz)，8.40-8.36(1H，m)，8.07-8.03(1H，m)，7.82(2H，d，J＝7.0Hz)，7.52(2H，d，J＝7.3Hz)，7.44(2H，d，J＝7.0Hz)，7.37(2H，d，J＝7.3Hz)，5.42(2H，s)，5.11(1H，dq，J＝7.3，7.0Hz)，1.37(3H，d，J＝7.0Hz)MS(ESI)m/z 445(M+H)+，443(M-H)-.
實(shí)施例414-[(1S)-1-({5-氯-2-[(2-氰基苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸
步驟1.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(2-氰基苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例32的步驟1中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[(5-氯-2-羥基苯甲?；?氨基]乙基}苯甲酸甲酯(實(shí)施例8的步驟4)和2-(溴甲基)苯甲腈來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ8.13(1H，d，J＝2.8Hz)，7.92-7.80(3H，m)，7.74-7.68(1H，m)，7.65-7.46(3H，m)，7.42(1H，dd，J＝2.8，8.8Hz)，7.21(2H，d，J＝8.3Hz)，7.04(1H，d，J＝8.8Hz)，5.36-5.22(3H，m)，3.91(3H，s)，1.37(3H，d，J＝7.0Hz).
步驟2.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(2-氰基苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(2-氰基苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯(步驟1)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ8.14(1H，d，J＝2.8Hz)，7.93(2H，d，J＝8.2Hz)，7.86(1H，d，J＝7.3Hz)，7.72(1H，d，J＝7.7Hz)，7.67-7.48(3H，m)，7.43(1H，dd，J＝2.8，8.7Hz)，7.27(2H，d，J＝8.2Hz)，7.05(1H，d，J＝8.7Hz)，5.39-5.22(3H，m)，1.39(3H，d，J＝6.9Hz)MS(ESI)m/z 435(M+H)+，433(M-H)-.
實(shí)施例424-[(1S)-1-({5-氯-2-[2-(四氫-2H-吡喃-4-基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸 步驟1.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[2-(四氫-2H-吡喃-4-基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例8的步驟5中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[(5-氯-2-羥基苯甲?；?氨基]乙基}苯甲酸甲酯(實(shí)施例8的步驟4)和2-(四氫-2H-吡喃-4-基)乙醇來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ8.23(1H，d，J＝7.4Hz)，8.17(1H，d，J＝2.8Hz)，8.02(2H，d，J＝8.4Hz)，7.44(2H，d，J＝8.4Hz)，7.37(1H，dd，J＝8.9，2.8Hz)，6.90(1H，d，J＝8.9Hz)，5.37(1H，dq，J＝7.4，7.1Hz)，4.14(2H，t，J＝6.4Hz)，3.98-3.88(2H，m)，3.91(3H，s)，3.38-3.22(2H，m)，1.80-1.20(7H，m)，1.59(3H，d，J＝7.1Hz)MS(ESI)m/z 446(M+H)+，444(M-H)-.
步驟2.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[2-(四氫-2H-吡喃-4-基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-[(1S)-1-({5-氯-2-[2-(四氫-2H-吡喃-4-基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯(步驟1)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ12.86(1H，br.s)，8.58(1H，d，J＝7.3Hz)，7.92(2H，d，J＝8.3Hz)，7.58(1H，d，J＝2.8Hz)，7.52(2H，d，J＝8.4Hz)，7.49(1H，dd，J＝8.8，2.8Hz)，7.19(1H，d，J＝8.8Hz)，5.16(1H，dq，J＝7.3，7.0Hz)，4.12(2H，t，J＝5.7Hz)，3.84-3.73(2H，m)，3.25-3.10(2H，m)，1.70-1.44(5H，m)，1.47(3H，d，J＝7.0Hz)，1.26-1.06(2H，m)MS(ESI)m/z 432(M+H)+，430(M-H)-.
實(shí)施例434-[(1S)-1-({5-氯-2-[(3-氟苯甲基)氧]苯甲酰基}氨基)乙基]苯甲酸
步驟1.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(3-氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例32的步驟1中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[(5-氯-2-羥基苯甲?；?氨基]乙基}苯甲酸甲酯(實(shí)施例8的步驟4)和1-(溴甲基)-3-氟苯來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3).8.19(1H，d，J＝2.8Hz)，8.16-8.05(1H，m)，7.91(2H，d，J＝8.3Hz)，7.46-7.33(2H，m)，7.24-7.04(5H，m)，7.00(1H，d，J＝8.6Hz)，5.33-5.17(1H，m)，5.11(2H，s)，3.91(3H，s)，1.33(3H，d，J＝7.0Hz)MS(ESI)m/z 442(M+H)+，440(M-H)-.
步驟2.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(3-氟苯甲基)氧]苯甲酰基}氨基)乙基]苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(3-氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯(步驟1)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ8.25-8.05(2H，m)，7.97(2H，d，J＝8.4Hz)，7.47-7.33(2H，m)，7.33-7.06(5H，m)，7.01(1H，d，J＝9.0Hz)，5.40-5.20(1H，m)，5.12(2H，s)，1.33(3H，d，J＝7.0Hz)MS(ESI)m/z 428(M+H)+，426(M-H)-.
實(shí)施例444-[(1S)-1-({5-氯-2-[(5-甲基異噁唑-3-基)甲氧基]苯甲酰基}氨基)乙基]苯甲酸 步驟1.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(5-甲基異噁唑-3-基)甲氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例32的步驟1中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[(5-氯-2-羥基苯甲酰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯(實(shí)施例8的步驟4)和3-(氯甲基)-5-甲基異噁唑來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ8.35(1H，d，J＝7.3Hz)，8.19(1H，d，J＝2.8Hz)，7.98(2H，d，J＝8.4Hz)，7.45-7.37(3H，m)，6.99(1H，d，J＝8.8Hz)，5.95(1H，s)，5.35(1H，dq，J＝7.3，7.0Hz)，5.21(2H，s)，3.90(3H，s)，2.43(3H，s)，1.54(3H，d，J＝7.0Hz~)步驟2.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(5-甲基異噁唑-3-基)甲氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(5-甲基異噁唑-3-基)甲氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯(步驟1)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ13.0-12.8(1H，br)，8.74(1H，d，J＝7.5Hz)，7.84(2H，d，J＝8.3Hz)，7.60(1H，d，J＝2.8Hz)，7.55(1H，dd，J＝8.8，2.8Hz)，7.43(2H，d，J＝8.3Hz)，7.32(1H，d，J＝8.8Hz)，6.28(1H，s)，5.28(2H，s)，5.15(1H，dq，J＝7.5，7.0Hz)，2.40(3H，s)，1.40(3H，d，J＝7.0Hz)MS(ESI)m/z 415(M+H)+，413(M-H)-.
實(shí)施例454-[(1S)-1-({5-氯-2-[(4-氯-2-氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸 步驟1.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(4-氯-2-氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例8的步驟5中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[(5-氯-2-羥基苯甲?；?氨基]乙基}苯甲酸甲酯(實(shí)施例8的步驟4)和(4-氯-2-氟苯基)甲醇來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ8.17(1H，d，J＝2.8Hz)，8.03-7.95(1H，m)，7.92(2H，d，J＝8.3Hz)，7.46-7.07(6H，m)，7.02(1H，d，J＝8.6Hz)，5.32-5.17(1H，m)，5.15(2H，s)，3.92(3H，s)，1.37(3H，d，J＝7.0Hz~)
步驟2.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(4-氯-2-氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(4-氯-2-氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯(步驟1)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ8.54(1H，d，J＝7.5Hz)，7.80(2H，d，J＝8.1Hz)，7.65-7.50(4H，m)，7.37-7.28(4H，m)，5.25(2H，s)，5.08(1H，dq，J＝7.5，6.8Hz)，1.36(3H，d，J＝6.8Hz)MS(ESI)m/z 462(M+H)+，460(M-H)-.
實(shí)施例464-[(1S)-1-({5-氯-2-[(2-氯-4-氟苯甲基)氧]苯甲酰基}氨基)乙基]苯甲酸 步驟1.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(2-氯-4-氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例8的步驟5中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[(5-氯-2-羥基苯甲?；?氨基]乙基}苯甲酸甲酯(實(shí)施例8的步驟4)和(2-氯-4-氟苯基)甲醇來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ8.16(1H，d，J＝2.8Hz)，8.10-7.98(1H，m)，7.89(2H，d，J＝8.3Hz)，7.48-7.36(2H，m)，7.24-7.10(3H，m)，7.08-6.95(2H，m)，5.32-5.10(3H，m)，3.92(3H，s)，1.34(3H，d，J＝7.0Hz)MS(ESI)m/z 476(M+H)+，474(M-H)-.
步驟2.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(2-氯-4-氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(2-氯-4-氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯(步驟1)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ8.49(1H，d，J＝7.5Hz)，7.83-7.65(3H，m)，7.64-7.50(3H，m)，7.42-7.20(4H，m)，5.25(2H，s)，5.08(1H，dq，J＝7.5，6.8Hz)，1.28(3H，d，J＝6.8Hz)MS(ESI)m/z 462(M+H)+，460(M-H)-.
實(shí)施例474-[(1S)-1-({5-氯-2[(3-氯吡啶-2-基)甲氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸 步驟1.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(3-氯吡啶-2-基)甲氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例8的步驟5中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[(5-氯-2-羥基苯甲酰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯(實(shí)施例8的步驟4)和(3-氯吡啶-2-基)甲醇來(lái)制備標(biāo)題化合物MS(ESI)m/z 459(M+H)+，457(M-H)-.
步驟2.4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(3-氯吡啶-2-基)甲氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(3-氯吡啶-2-基)甲氧基]苯甲酰基}氨基)乙基]苯甲酸甲酯(步驟1)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ9.26(1H，d，J＝7.7Hz)，8.48(1H，d，J＝4.4Hz)，8.05(1H，d，J＝8.1Hz)，7.87-7.73(3H，m)，7.59(1H，dd，J＝8.8，2.8Hz)，7.52-7.36(4H，m)，5.55(2H，s)，5.24(1H，dq，J＝7.7，6.8Hz)，1.45(3H，d，J＝6.8Hz)MS(ESI)m/z 445(M+H)+，443(M-H)-.
實(shí)施例484-{(1S)-1-[({5-氯-2[(2-氯苯甲基)(甲基)氨基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸
步驟1.4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[(2-氯苯甲基)(甲基)氨基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例16的步驟2中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[甲基(2-苯基乙基)氨基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯(實(shí)施例16的步驟1)和(2-氯苯甲基)甲基胺來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ8.54(1H，d，J＝8.1Hz)，8.30(1H，d，J＝2.7Hz)，8.18(1H，d，J＝2.7Hz)，7.88(2H，J＝8.3Hz)，7.46-7.16(6H，m)，5.38-5.25(1H，m)，4.55(1H，d，J＝13.6Hz)，4.40(1H，d，J＝13.6Hz)，3.90(3H，s)，2.53(3H，s)，1.47(3H，d，J＝7.2Hz).
步驟2.4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[(2-氯苯甲基)(甲基)氨基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[(2-氯苯甲基)(甲基)氨基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯(步驟1)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ8.59(1H，d，J＝8.1Hz)，8.31(1H，d，J＝2.8Hz)，8.19(1H，d，J＝2.8Hz)，7.93(2H，J＝8.3Hz)，7.43-7.36(1H，m)，7.34-7.18(5H，m)，5.40-5.25(1H，m)，4.54(1H，d，J＝13.5Hz)，4.42(1H，d，J＝13.5Hz)，2.55(3H，s)，1.48(3H，d，J＝7.0Hz)；MS(ESI)m/z 458(M+H)+，456(M-H)-.
實(shí)施例494-((1S)-1-{[5-氯-2-(四氫呋喃-2-基甲氧基)苯甲酰基]氨基}乙基)苯甲酸
步驟1.4-((1S)-1-{[5-氯-2-(四氫呋喃-2-基甲氧基)苯甲?；鵠氨基}乙基)苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例8的步驟5中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[(5-氯-2-羥基苯甲?；?氨基]乙基}苯甲酸甲酯(實(shí)施例8的步驟4)和四氫呋喃-2-基甲醇來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ8.74-8.60(1H，m)，8.15-8.11(1H，m)，8.01 and 7.99(total2H，each d，J＝8.3Hz)，7.50 and 7.48(total 2H，each d，J＝8.3Hz)，7.35(1H，dd，J＝8.8，2.8Hz)，6.89 and 6.87(total 1H，each d，J＝8.8Hz)，5.38(1H，dq，J＝7.9，7.0Hz)，4.36-4.18(2H，m)，3.94-3.70(3H，m)，3.90and 3.89(total 3H，each s)，2.14-1.86(3H，m)，1.70-1.55(1H，m)，1.57 and 1.56(total 3H，each d，J＝7.0Hz)；MS(ESI)m/z 418(M+H)+，416(M-H)-.
步驟2.4-((1S)-1-{[5-氯-2-(四氫呋喃-2-基甲氧基)苯甲?；鵠氨基}乙基)苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-((1S)-1-{[5-氯-2-(四氫呋喃-2-基甲氧基)苯甲?；鵠氨基}乙基)苯甲酸甲酯(步驟1)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(DMSO-d6)δ8.82-8.72(1H，m)，7.91 and 7.90(total 2H，each d，J＝8.3Hz)，7.68(1H，d，J＝2.8Hz)，7.60-7.46(3H，m)，7.23 and 7.22(total 1H，each d，J＝8.8Hz)，5.28-5.10(1H，m)，4.32-4.16(2H，m)，4.03-3.92(1H，m)，3.83-3.60(2H，m)，2.05-1.76(3H，m)，1.70-1.55(1H，m)，1.46 and 1.45(total3H，each d，J＝6.9Hz)；MS(ESI)m/z 404(M+H)+，402(M-H)-.
實(shí)施例504-{(1S)-1-[({5-氯-2-[(2-氟苯甲基)(甲基)氨基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸 步驟1.4-{(1S)-1-[(5-氯-2-[(2-氟苯甲基)(甲基)氨基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯在油浴中，在150℃下將4-((1S)-1-{[(2，5-二氯吡啶-3-基)羰基]氨基}乙基)苯甲酸甲酯(實(shí)施例16的步驟1，204mg，0.58mmol)、(2-氟苯甲基)甲基胺(264mg，1.9mmol)和二異丙基乙胺(167mg，1.3mmol)在二甲基亞砜(5mL)中的混合物加熱24小時(shí)。將反應(yīng)混合物倒入水中，并用乙酸乙酯萃取水性混合液。將有機(jī)萃取相用鹽水洗滌、干燥(硫酸鈉)，然后濃縮。通過(guò)快速柱色譜在用己烷/乙酸乙酯(4/1-2/1)洗脫的硅膠上對(duì)殘余物進(jìn)行純化，得到222mg(86％)標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ8.98(1H，d，J＝7.9Hz)，8.30(1H，d，J＝2.6Hz)，8.20(1H，d，J＝2.6Hz)，7.93(2H，d，J＝8.3Hz)，7.33(2H，d，J＝8.3Hz)，7.40-7.14(2H，m)，7.12-6.96(2H，m)，5.40-5.20(1H，m)，4.41(2H，s)，3.89(3H，s)，2.57(3H，s)，1.49(3H，d，J＝7.0Hz).
步驟2.4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[(2-氟苯甲基)(甲基)氨基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[(2-氟苯甲基)(甲基)氨基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯(步驟1)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ9.08(1H，d，J＝7.5Hz)，8.33(1H，d，J＝2.8Hz)，8.25(1H，d，J＝2.8Hz)，8.00(2H，d，J＝8.3Hz)，7.37(2H，d，J＝8.3Hz)，7.35-7.19(2H，m)，7.12-6.99(2H，m)，5.40-5.25(1H，m)，4.43(2H，s)，2.60(3H，s)，1.51(3H，d，J＝7.0Hz)；MS(ESI)m/z 442(M+H)+，440(M-H)-.
實(shí)施例514-{(1S)-1-[({5-氯-2-[(4-氯苯甲基)(甲基)氨基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸 步驟1.4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[(4-氯苯甲基)(甲基)氨基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例50的步驟1中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[甲基(2-苯基乙基)氨基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯(實(shí)施例16的步驟1)和(4-氯苯甲基)甲基胺1H-NMR(CDCl3)δ8.69(1H，d，J＝7.7Hz)，8.27(1H，d，J＝2.6Hz)，8.16(1H，d，J＝2.6Hz)，7.98(2H，d，J＝8.4Hz)，7.35(2H，d，J＝8.4Hz)，7.21(2H，d，J＝8.4Hz)，7.06(2H，d，J＝8.4Hz)，5.37-5.23(1H，m)，4.34-4.29(2H，brs)，3.91(3H，s)，2.59(3H，s)，1.53(3H，d，J＝7.0Hz).
步驟2.4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[(4-氯苯甲基)(甲基)氨基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[(4-氯苯甲基)(甲基)氨基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯(步驟1)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ8.78(1H，d，J＝7.7Hz)，8.31(1H，d，J＝2.6Hz)，8.22(1H，d，J＝2.6Hz)，8.06(2H，d，J＝8.2Hz)，7.39(2H，d，J＝8.2Hz)，7.24(2H，d，J＝8.3Hz)，7.09(2H，d，J＝8.3Hz)，5.37-5.27(1H，m)，4.33(2H，s)，2.62(3H，s)，1.55(3H，d，J＝7.0Hz)；MS(ESI)m/z 458(M+H)+，456(M-H)-.
實(shí)施例524-{(1S)-1-[({5-氯-2-[(3-氯苯甲基)(甲基)氨基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸 步驟1.4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[(3-氯苯甲基)(甲基)氨基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例50的步驟1中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[甲基(2-苯基乙基)氨基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯(實(shí)施例16的步驟1)和(3-氯苯甲基)甲基胺制備標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ8.67(1H，d，J＝7.7Hz)，8.28(1H，d，J＝2.6Hz)，8.17(1H，d，J＝2.6Hz)，7.96(2H，d，J＝8.3Hz)，7.35(2H，d，J＝8.3Hz)，7.29-7.16(3H，m)，7.05(1H，d，J＝7.3Hz)，5.40-5.24(1H，m)，4.38(1H，d，J＝14.1Hz)，4.31(1H，d，J＝14.1Hz)，3.90(3H，s)，2.58(3H，s)，1.53(3H，d，J＝7.0Hz).
步驟2.4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[(3-氯苯甲基)(甲基)氨基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[(3-氯苯甲基)(甲基)氨基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯(步驟1)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ8.76(1H，d，J＝7.9Hz)，8.31(1H，d，J＝2.6Hz)，8.22(1H，d，J＝2.6Hz)，8.04(2H，d，J＝8.3Hz)，7.40(2H，d，J＝8.3Hz)，7.32-7.18(3H，m)，7.07(1H，d，J＝7.2Hz)，5.39-5.26(1H，m)，4.39(1H，d，J＝14.3Hz)，4.34(1H，d，J＝14.3Hz)，2.60(3H，s)，1.55(3H，d，J＝6.8Hz)MS(ESI)m/z 458(M+H)+，456(M-H)-.
實(shí)施例534-{(1S)-1-[({5-氯-2-[(3-氟苯甲基)(甲基)氨基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸
步驟1.4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[(3-氟苯甲基)(甲基)氨基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例50的步驟1中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[甲基(2-苯基乙基)氨基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯(實(shí)施例16的步驟1)和(3-氟苯甲基)甲基胺1H-NMR(CDCl3)δ8.67(1H，d，J＝7.6Hz)，8.29(1H，d，J＝2.3Hz)，8.20-8.15(1H，m)，7.98(2H，d，J＝8.2Hz)，7.36(2H，d，J＝8.2Hz)，7.24(1H，dd，J＝7.4，13.8Hz)，7.03-6.86(3H，m)，5.40-5.25(1H，m)，~~(1H，d，J＝14.3Hz)，4.34(1H，d，J＝14.3Hz)，3.90(3H，s)，2.60(3H，s)，1.53(3H，d，J＝6.9Hz).
步驟2.4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[(3-氟苯甲基)(甲基)氨基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[(3-氟苯甲基)(甲基)氨基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯(步驟1)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ8.76(1H，d，J＝8.1Hz)，8.31(1H，d，J＝2.6Hz)，8.21(1H，d，J＝2.6Hz)，8.04(2H，d，J＝8.3Hz)，7.39(2H，d，J＝8.3Hz)，7.32-7.20(1H，m)，7.03-6.88(3H，m)，5.40-5.28(1H，m)，4.37(2H，s)，2.62(3H，s)，1.55(3H，d，J＝7.0Hz)MS(ESI)m/z 442(M+H)+，440(M-H)-.
實(shí)施例544-{(1S)-1-[({5-氯-2-[(4-氟苯甲基)(甲基)氨基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸
步驟1.4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[(4-氟苯甲基)(甲基)氨基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯根據(jù)實(shí)施例50的步驟1中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[甲基(2-苯基乙基)氨基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯(實(shí)施例16的步驟1)和(4-氟苯甲基)甲基胺制備標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ8.99(1H，d，J＝7.9Hz)，8.30(1H，d，J＝2.6Hz)，8.21(1H，d，J＝2.6Hz)，7.93(2H，d，J＝8.3Hz)，7.33(2H，d，J＝8.3Hz)，7.30-7.16(2H，m)，7.10-6.96(2H，m)，5.40-5.20(1H，m)，4.41(2H，s)，3.89(3H，s)，2.57(3H，s)，1.49(3H，d，J＝7.0Hz).
步驟2.4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[(4-氟苯甲基)(甲基)氨基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸根據(jù)實(shí)施例8的步驟6中描述的過(guò)程，由4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[(4-氟苯甲基)(甲基)氨基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸甲酯(步驟1)來(lái)制備標(biāo)題化合物1H-NMR(CDCl3)δ8.89(1H，d，J＝7.5Hz)，8.32(1H，d，J＝2.6Hz)，8.23(1H，d，J＝2.6Hz)，8.05(2H，d，J＝8.1Hz)，7.38(2H，d，J＝8.3Hz)，7.18-7.08(2H，m)，7.02-6.90(2H，m)，5.38-5.26(1H，m)，4.33(2H，s)，2.61(3H，s)，1.54(3H，d，J＝7.0Hz).
MS(ESI)m/z 442(M+H)+，440(M-H)-.
實(shí)驗(yàn)實(shí)施例用上面所述方法進(jìn)行人類(lèi)EP4轉(zhuǎn)染子中的cAMP分析。這些研究的結(jié)果列于表1。
表1.人類(lèi)EP4轉(zhuǎn)染子中的cAMP分析結(jié)果





IC50減少50％的配體的量所需的單獨(dú)的化合物的濃度
權(quán)利要求
1.具有如式(I)的結(jié)構(gòu)的化合物，所述化合物的藥物上可接受的酯或其藥物上可接受的鹽 式中，X表示-CH-或氮原子；Y表示NR4、氧原子或硫原子；R4表示氫原子或具有1-3個(gè)碳原子的烷基；Z表示氫原子或鹵原子；R1表示具有1-6個(gè)碳原子的烷基，可選地用1-2個(gè)獨(dú)立地選自具有1-6個(gè)碳原子的烷氧基、三氟甲基、具有2-5個(gè)碳原子的烷?；⒕哂?-7個(gè)碳原子的環(huán)烷基、苯基、苯氧基、雜環(huán)基和雜芳基的基團(tuán)取代；具有3-7個(gè)碳原子的環(huán)烷基，可選地用具有1-3個(gè)碳原子的烷基取代；或者雜環(huán)基；R2和R3獨(dú)立地表示氫原子或具有1-3個(gè)碳原子的烷基；或R2和R3一起形成具有3-6個(gè)碳原子的亞烷基鏈；所述雜芳基為4-7元芳環(huán)系，其具有或者1-4個(gè)環(huán)氮雜原子或者0-2個(gè)氮環(huán)雜原子和1個(gè)氧或1個(gè)硫環(huán)雜原子；所述雜環(huán)基為4-7元飽和環(huán)系，其具有或者1-4個(gè)環(huán)氮雜原子或者0-2個(gè)氮環(huán)雜原子和1個(gè)氧或1個(gè)硫環(huán)雜原子；R1的定義中的所述苯基、苯氧基和所述雜芳基是未被取代的或被選自取代基α的至少一個(gè)取代基取代；所述取代基α選自鹵原子、具有1-4個(gè)碳原子的烷基、具有1-4個(gè)碳原子的鹵烷基、羥基、具有1-4個(gè)碳原子的烷氧基、具有1-4個(gè)碳原子的鹵烷氧基、氰基、具有1-4個(gè)碳原子的羥基烷基、在烷氧基和烷基中具有1-4個(gè)碳原子的烷氧烷基、具有1-4個(gè)碳原子的烷基磺?；⒕哂?-5個(gè)碳原子的烷?；?、具有2-4個(gè)碳原子的烯基、具有2-4個(gè)碳原子的炔基、具有1-4個(gè)碳原子的烷基硫基、硝基、氨基、具有1-4個(gè)碳原子的單或二烷基氨基、氨基磺酰基、具有1-4個(gè)碳原子的烷氧羰基、具有1-4個(gè)碳原子的烷基磺?；被?、具有3-7個(gè)碳原子的環(huán)烷基和具有1-6個(gè)碳原子的單或二烷基氨基羰基。
2.如權(quán)利要求1的化合物，其中X表示氮原子。
3.如權(quán)利要求1的化合物，其中X表示-CH-。
4.如權(quán)利要求1-3中任何一項(xiàng)的化合物，其中Y表示NR4或氧原子；并且R4表示具有1-3個(gè)碳原子的烷基。
5.如權(quán)利要求1-4中任何一項(xiàng)的化合物，其中Y表示氧原子。
6.如權(quán)利要求1-5中任何一項(xiàng)的化合物，其中Z表示鹵原子。
7.如權(quán)利要求1-6中任何一項(xiàng)的化合物，其中R1表示具有1-6個(gè)碳原子的烷基，可選地用1-2個(gè)獨(dú)立地選自具有1-6個(gè)碳原子的烷氧基、具有3-7個(gè)碳原子的環(huán)烷基、苯基、苯氧基和雜芳基的基團(tuán)取代；所述雜芳基為5-6元芳環(huán)系，其具有或者1-2個(gè)環(huán)氮雜原子或者1或2個(gè)氮環(huán)雜原子和1個(gè)氧或1個(gè)硫環(huán)雜原子；R1的定義中的所述苯基和所述雜芳基未被取代或被選自取代基α的至少一個(gè)取代基取代；所述取代基α選自鹵原子、具有1-4個(gè)碳原子的烷基、具有1-4個(gè)碳原子的鹵烷基、羥基、具有1-4個(gè)碳原子的烷氧基、具有1-4個(gè)碳原子的鹵烷氧基、氰基、具有1-4個(gè)碳原子的羥基烷基、在烷氧基和烷基中具有1-4個(gè)碳原子的烷氧烷基、具有1-4個(gè)碳原子的烷基磺?；途哂?-5個(gè)碳原子的烷酰基。
8.如權(quán)利要求1-7中任何一項(xiàng)的化合物，其中R1表示具有1-6個(gè)碳原子的烷基，可選地用1-2個(gè)獨(dú)立地選自具有4-6個(gè)碳原子的環(huán)烷基、苯基和苯氧基的基團(tuán)取代；所述苯基未被取代或被選自取代基α的至少一個(gè)取代基取代；所述取代基α選自鹵原子、具有1-2個(gè)碳原子的烷基和氰基。
9.如權(quán)利要求1-8中任何一項(xiàng)的化合物，其中R1表示戊基、苯甲基、苯乙基、苯氧基乙基或環(huán)丁基甲基；所述苯基可選地被1-2個(gè)獨(dú)立地選自氟原子、氯原子、氰基和甲基的基團(tuán)取代。
10.如權(quán)利要求1-9中任何一項(xiàng)的化合物，其中R2和R3獨(dú)立地表示氫原子和具有1-3個(gè)碳原子的烷基。
11.如權(quán)利要求1-10中任何一項(xiàng)的化合物，其中R2表示氫原子；并且R3表示甲基。
12.如權(quán)利要求1的化合物，所述化合物選自4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(2-氯苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸；4-[(1S)-1-({5-氯-2-[2-(2-甲基苯基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸；4-[(1S)-1-({5-氯-2-[2-(4-甲基苯基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸；4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(3-氯苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸；4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(4-氯苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸；4-((1S)-1-{[5-氯-2-(環(huán)丁基甲氧基)苯甲?；鵠氨基}乙基)苯甲酸；4-((1S)-1-{[5-氯-2-(環(huán)己基氧)苯甲?；鵠氨基}乙基)苯甲酸；4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(2-氰基苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸；4-[(1S)-1-({5-氯-2-[2-(4-氟苯基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸；4-((1S)-1-{[5-氯-2-(3-甲基丁氧基)苯甲?；鵠氨基}乙基)苯甲酸；4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(4-氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸；4-[(1S)-1-({5-氯-2-[2-(2-氟苯基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸；4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(2，5-二氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸；4-[({5-氯-2-[2-(2-甲基苯基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)甲基]苯甲酸；4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(2-氯-4-氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸；4-((1S)-1-{[5-氯-2-(2-苯氧基乙氧基)苯甲?；鵠氨基}乙基)苯甲酸；4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(3，4-二氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸；4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(4-氯-2-氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸；4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[(4-氯苯甲基)氧]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸；4-((1S)-1-{[2-(苯甲基氧)-5-氯苯甲酰基]氨基}乙基)苯甲酸；4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[(2-氯苯甲基)氧]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸；4-{(1S)-1-[({5-氯-2-[2-(4-氯苯基)乙氧基]吡啶-3-基}羰基)氨基]乙基}苯甲酸；4-[(1S)-1-({5-氯-2-[(3，5-二氟苯甲基)氧]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸；和4-[(1S)-1-({5-氯-2-[2-(2，6-二氟苯基)乙氧基]苯甲?；鶀氨基)乙基]苯甲酸；或這樣的化合物的藥物上可接受的酯；或其藥物上可接受的鹽。
13.一種藥物組合物，其包含權(quán)利要求1-12中任何一項(xiàng)的化合物，或這種化合物的藥物上可接受的酯或其藥物上可接受的鹽，以及合適的藥物上可接受的載劑。
14.一種用于治療哺乳動(dòng)物對(duì)象體內(nèi)的由前列腺素介導(dǎo)的疾病病癥的藥物組合物，其包含治療有效量的權(quán)利要求1-12中任何一項(xiàng)的化合物，或這種化合物的藥物上可接受的酯或其藥物上可接受的鹽，以及合適的藥物上可接受的載劑。
15.一種用于治療哺乳動(dòng)物對(duì)象體內(nèi)的由前列腺素介導(dǎo)的疾病病癥的方法，其包括向所述對(duì)象施用治療有效量的權(quán)利要求1-12中任何一項(xiàng)的化合物，或這種化合物的藥物上可接受的酯或其藥物上可接受的鹽。
16.如權(quán)利要求1-12中任何一項(xiàng)的化合物，或這種化合物的藥物上可接受的酯或其藥物上可接受的鹽作為藥物的用途。
17.如權(quán)利要求1-12中任何一項(xiàng)的化合物，或這種化合物的藥物上可接受的酯或其藥物上可接受的鹽在制備用于治療哺乳動(dòng)物對(duì)象體內(nèi)的由前列腺素介導(dǎo)的疾病病癥的藥物中的用途。
18.如權(quán)利要求1-12中任何一項(xiàng)所定義的式(I)的化合物與另一種藥物活性劑的組合物。
全文摘要
本發(fā)明提供了式(I)的化合物其中X表示碳原子等；Y表示亞氨基等；Z表示氫原子等；R
文檔編號(hào)A61K31/195GK1950334SQ200580014322
公開(kāi)日2007年4月18日 申請(qǐng)日期2005年4月22日 優(yōu)先權(quán)日2004年5月4日
發(fā)明者小池廣記, 松元由香里, 山岸龍也, 奧村祥征, 中尾一成 申請(qǐng)人:輝瑞有限公司