專(zhuān)利名稱(chēng)：：某些化學(xué)品、組合物及方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及化學(xué)品，其為一或多個(gè)有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白的抑制劑，并且被用于治療細(xì)胞增殖性疾病，例如癌癥、增生、再狹窄、心肥大、免疫疾病、真菌病癥及炎癥。
背景技術(shù)：
：在用于治療癌癥的治療劑當(dāng)中，紫杉醇類(lèi)(taxanes)及長(zhǎng)春花屬生物堿是作用在微管上。微管是有絲分裂紡錘體的主要結(jié)構(gòu)元素。有絲分裂紡錘體是負(fù)責(zé)基因組之復(fù)制品各分布到兩個(gè)由細(xì)胞分裂所造成的子細(xì)胞上。假設(shè)有絲分裂紡錘體被這些藥物分解，造成癌癥細(xì)胞分裂的抑制及癌癥細(xì)胞死亡的誘發(fā)。然而，微管形成其他類(lèi)型的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，包括在神經(jīng)進(jìn)程中細(xì)胞內(nèi)傳遞的路徑。因?yàn)檫@些藥物不是特異性地以有絲分裂紡錘體為目標(biāo)，所以其具有限制其用處的副作用。在用于治療癌癥之藥物特異性上的改進(jìn)是相當(dāng)引人注意的，這是因?yàn)槿襞c給藥這些藥物相關(guān)的副作用可被減少，則可實(shí)現(xiàn)治療效益。傳統(tǒng)上，在治療癌癥上的不同尋常的改進(jìn)是與鑒別出經(jīng)由新機(jī)制作用的治療藥物相關(guān)。此之實(shí)例不只包括紫杉醇類(lèi)，還包括拓樸異構(gòu)酶(topoisomerase)I抑制劑的喜樹(shù)堿(camptothecin)類(lèi)。從這兩個(gè)觀點(diǎn)看，有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白是有吸引力的新抗癌藥物目標(biāo)。有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白基本上是有絲分裂紡錘體之組合及功能的酶，但通常不是其他微管結(jié)構(gòu)的一部份，如在神經(jīng)流程中。有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白在有絲分裂的所有階段期間扮演必要的角色。這些酶是“分子馬達(dá)”，其轉(zhuǎn)變由ATP水解所釋放出的能量成為機(jī)械力，該機(jī)械力則驅(qū)動(dòng)細(xì)胞物件沿著微管的方向性移動(dòng)。對(duì)于該任務(wù)足夠的催化區(qū)域是約340個(gè)氨基酸的緊密結(jié)構(gòu)。在有絲分裂期間，驅(qū)動(dòng)蛋白組織微管成為為有絲分裂紡錘體的兩極性結(jié)構(gòu)。驅(qū)動(dòng)蛋白調(diào)節(jié)染色體沿紡錘體微管的移動(dòng)、及在有絲分裂紡錘體上與細(xì)胞有絲分裂之特定相相關(guān)的結(jié)構(gòu)改變。有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白功能的實(shí)驗(yàn)擾動(dòng)導(dǎo)致有絲分裂紡錘體畸形或機(jī)能障礙，經(jīng)常造成細(xì)胞循環(huán)停止及細(xì)胞死亡。
發(fā)明內(nèi)容在一個(gè)方面中，本發(fā)明涉及用于治療細(xì)胞增殖性疾病的方法、及通過(guò)抑制一種或多種有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白的活性來(lái)治療紊亂的方法。本發(fā)明提供選自式I化合物的至少一種化學(xué)品及其藥物學(xué)可接受的鹽、溶劑化物、螯合物、非共價(jià)復(fù)合物、前藥及混合物式I其中R1為任選取代的芳基、任選取代的雜環(huán)烷基、或任選取代的雜芳基；X為-CO或-SO2-；R2為氫或任選取代的低級(jí)烷基；W為-CR4-、-CH2CR4-或N；R3為-CO-R7-、氫、任選取代的烷基、任選取代的雜環(huán)基、氰基、任選取代的磺?；?、或任選取代的芳基；R4為氫或任選取代的烷基；R5為氫、羥基、任選取代的氨基、任選取代的雜環(huán)基、或任選取代的低級(jí)烷基；R6為氫、任選取代的烷基、任選取代的烷氧基、任選取代的芳氧基、任選取代的雜芳基氧基、任選取代的烷氧基羰基、任選取代的氨基羰基、任選取代的芳基、任選取代的雜芳基、任選取代的雜環(huán)基、或任選取代的烷芳基；及R7為任選取代的低級(jí)烷基、任選取代的芳基、羥基、任選取代的氨基、任選取代的芳烷基氧基、或任選取代的烷氧基。在一些具體實(shí)施方案中，若W為N，則R5不是羥基或任選取代的氨基，并且R6不是任選取代的烷氧基、任選取代的芳烷基氧基、任選取代的雜芳烷氧基、或任選取代的氨基。本發(fā)明還提供選自式II化合物的至少一種化學(xué)品及其藥物學(xué)可接受的鹽類(lèi)、溶劑化物、螯合物、非共價(jià)復(fù)合物、前藥及混合物(式II)其中R2、R3、R5、R6及W如對(duì)式I化合物所述，并且R11為任選取代的雜環(huán)基、任選取代的低級(jí)烷基、硝基、氰基、氫、磺?；螓u素；R12為氫、鹵素、任選取代的烷基、任選取代的氨基、任選取代的硫烷基、任選取代的烷氧基、任選取代的芳氧基、任選取代的雜環(huán)基或任選取代的雜芳氧基；及R13為氫、酰基、任選取代的烷基-、任選取代的烷氧基、鹵素、羥基、硝基、氰基、任選取代的氨基、烷基磺?；⑼榛鶃喕酋０被?、烷基磺酰基、羧基烷基、氨基羰基、任選取代的芳基或任選取代的雜芳基。本發(fā)明還提供選自式III化合物的至少一種化學(xué)品及其藥物學(xué)可接受的鹽類(lèi)、溶劑化物、螯合物、非共價(jià)復(fù)合物、前藥及混合物(式III)其中R2、R3、R6、R11、R12及R13是如對(duì)式II化合物所述。本發(fā)明還提供選自式IV化合物的至少一種化學(xué)品及其藥物學(xué)可接受的鹽類(lèi)、溶劑化物、螯合物、非共價(jià)復(fù)合物、前藥及混合物(式IV)其中R2、R6、R11、R12及R13是如對(duì)式III化合物所述。本發(fā)明還提供選自式V化合物的至少一種化學(xué)品及其藥物學(xué)可接受的鹽類(lèi)、溶劑化物、螯合物、非共價(jià)復(fù)合物、前藥及混合物(式V)其中R2、R3、R11、R12及R13是如對(duì)式III化合物所述，并且其中R14為任選取代的雜芳基；及R15是選自氫、鹵素、羥基及低級(jí)烷基。本發(fā)明還提供選自式VI合物的至少一種化學(xué)品及其藥物學(xué)可接受的鹽類(lèi)、溶劑化物、螯合物、非共價(jià)復(fù)合物、前藥及混合物(式VI)其中R2、R6、R11、R12及R13是如對(duì)式III化合物所述。本發(fā)明還提供選自式VII化合物的至少一種化學(xué)品及其藥物學(xué)可接受的鹽類(lèi)、溶劑化物、螯合物、非共價(jià)復(fù)合物、前藥及混合物(式VII)其中R2、R6、R11、R12及R13是如對(duì)式III化合物所述，并且其中R9是選自任選取代的氨基及任選取代的低級(jí)烷基。本發(fā)明還提供一種組合物，其包含一個(gè)藥物賦形劑及至少一種在此所述之化學(xué)品。本發(fā)明還提供一種調(diào)節(jié)CENP-E驅(qū)動(dòng)蛋白活性的方法，其包括將該驅(qū)動(dòng)蛋白與有效量的至少一種在此所述的化學(xué)品接觸。本發(fā)明還提供一種抑制CENP-E的方法，其包括將該驅(qū)動(dòng)蛋白與有效量的至少一種在此所述的化學(xué)品接觸。本發(fā)明還提供一種治療細(xì)胞增殖性疾病的方法，其包括對(duì)有此需要的患者給藥至少一種在此所述之化學(xué)品。本發(fā)明還提供一種治療細(xì)胞增殖性疾病的方法，其包括對(duì)有此需要的患者給藥一種包含藥物賦形劑及至少一種在此所述之化學(xué)品的組合物。本發(fā)明還提供至少一種在此所述之化學(xué)品在制備用于治療細(xì)胞增殖性疾病之藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明還提供至少一種在此所述之化學(xué)品在制備用于治療與CENP-E驅(qū)動(dòng)蛋白活性相關(guān)的疾病的藥物中的應(yīng)用。如在本說(shuō)明書(shū)中所用，下列字詞通常意欲具有下列所示的意義，除了文中另有說(shuō)明以外。下列縮寫(xiě)及術(shù)語(yǔ)整個(gè)具有所指出的意義如在此所用，當(dāng)在化學(xué)式中任何變化發(fā)生多于一次時(shí)，其定義在各發(fā)生處獨(dú)立為在每次其另外發(fā)生處的定義。下列縮寫(xiě)及術(shù)語(yǔ)整個(gè)具有所指出的意義Ac＝乙?；鵅oc＝t-丁氧基羰基Bu＝丁基c-＝環(huán)CBZ＝芐氧基羰基DBU＝二氮雜二環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯DCM＝二氨甲烷CH2Cl2DCE＝二氨乙烯DEAD＝二乙基偶氮二羧酸酯DIC＝二異丙基碳化二亞胺DIEA＝N，N-二異丙基乙基胺DMAP＝4-N，N-二甲基氨基吡啶DMF＝N，N-二甲基甲酰胺DMSO＝二甲基亞砜Et＝乙基Fmoc＝9-芴基甲氧基羰基GC＝氣相色譜HATU＝O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基六氟磷酸尿HOAc＝乙酸HOBt＝羥基苯并三唑LAH＝氫化鋰鋁Me＝甲基mesyl＝甲磺?；鵑CS＝N-氯琥珀酰亞胺Ph＝苯基Py＝吡啶rt＝室溫Sat’d＝飽和s-＝二級(jí)t-＝三級(jí)TES＝三乙基硅烷T(mén)FA＝三氟乙酸THF＝四氫呋喃TMS＝三甲基甲硅烷基tosyl＝對(duì)甲苯磺?；辉趦蓚€(gè)字母或符號(hào)之間的破折號(hào)(“-”)被用于指出取代基的連接點(diǎn)。例如-CONH2經(jīng)由碳原子連接。“任選的”或“任選地”意為后續(xù)敘述的事件或環(huán)境有可能發(fā)生或有可能不發(fā)生，并且該敘述包括其中該事件或環(huán)境發(fā)生的例子及其不發(fā)生的例子。例如，“任選經(jīng)取代的烷基”包括如下定義之“烷基”及“經(jīng)取代的烷基”兩者。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)理解的是，對(duì)于包含一個(gè)或多個(gè)取代基的任何基團(tuán)，此類(lèi)基團(tuán)不意欲導(dǎo)入立體上不實(shí)際、合成上不可行和/或天然上不穩(wěn)定的任何取代或取代型式?！巴榛卑ň哂兴笖?shù)目之碳原子的直鏈及有支鏈，通常是從1至20個(gè)碳原子，例如1至8個(gè)碳原子，如1至6個(gè)碳原子。例如C1-C6烷基包含從1至6個(gè)碳原子之直鏈及支鏈烷基兩者。烷基的實(shí)例包括甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、2-戊基、異戊基、新戊基、己基、2-己基、3-己基、3-甲基戊基及類(lèi)似物等。亞烷基是烷基的另一個(gè)次族，意指如烷基的相同殘基，但具有兩個(gè)連接點(diǎn)。亞烷基通常具有從2至20個(gè)碳原子，例如2至8個(gè)碳原子，如從2至6個(gè)碳原子。例如C0亞烷基是指一個(gè)共價(jià)鍵，而C1亞烷基為亞甲基。當(dāng)具有特定數(shù)目碳原子的烷基殘基被指稱(chēng)時(shí)，所有具有該碳原子數(shù)目之幾何異構(gòu)體被意欲包含之；因此，例如“丁基”意為包括正丁基、仲丁基、叔丁基，“丙基”包括正丙基及異丙基?！暗图?jí)烷基”意指具有一至四個(gè)碳原子”的烷基?！碍h(huán)烷基”意指飽和烴環(huán)基團(tuán)，具有特定數(shù)目的碳原子，通常是從3至7個(gè)碳原子。環(huán)烷基的實(shí)例包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基及環(huán)己基、和架橋及籠狀飽和環(huán)基團(tuán)，如冰片烷。“烷氧基”意指經(jīng)由氧架橋連接之所指數(shù)目碳原子的烷基，例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、2-戊氧基、異戊氧基、新戊氧基、己氧基、2-己氧基、3-己氧基、3-甲基戊氧基及類(lèi)似物等。烷氧基團(tuán)通常具有從1至6個(gè)經(jīng)由氧架橋連接的碳原子，“低級(jí)烷氧基”意指具有一至四個(gè)碳原子的烷氧基?！磅；币庵?烷基)-C(O)-、(環(huán)烷基)-C(O)-、(芳基)-C(O)-、(雜芳基)-C(O)-及(雜環(huán)烷基)-C(O)-基團(tuán)，其中該基團(tuán)上通過(guò)羰基官能團(tuán)連接在母體結(jié)構(gòu)上，并且其中烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基及雜環(huán)烷基是如在此所述。?；哂兴笖?shù)目的碳原子，其中酮基團(tuán)的碳被包括在所數(shù)的碳原子中。例如C2?；鶠榫哂惺紺H3(C＝O)-的乙?；！巴檠趸驶币庵附?jīng)由羰基碳連接的式(烷氧基)(C＝O)-的酯基團(tuán)，其中烷氧基具有所指數(shù)目的碳原子。因此，C1-C6烷氧基羰基是具有從1至6個(gè)經(jīng)由其氧到羰基連接基團(tuán)而連接的碳原子?！鞍被币庵?NH2基團(tuán)。術(shù)語(yǔ)“氨基羰基”意指-CONRbRc，其中Rb是選自H、任選取代的C1-C6烷基、任選取代的芳基及任選取代的雜芳基；并且Rc是選自氫及任選取代的C1-C4烷基；或Rb及Rc與鍵結(jié)其上的氮一起形成任選取代的5-至7-員含氮雜環(huán)烷基，其任選地在雜環(huán)烷基環(huán)中包括1或2個(gè)選自O(shè)、N及S的額外雜原子；其各取代的基團(tuán)獨(dú)立以一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自以下的取代基取代C1-C4烷基、芳基、雜芳基、芳基-C1-C4烷基、雜芳基-C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基-、-OC1-C4烷基、-OC1-C4烷基苯基、-C1-C4烷基-OH、-OC1-C4鹵代烷基-、鹵素、-OH、-NH2、C1-C4烷基-NH2、-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)、-NH(C1-C4烷基)、-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基苯基)、-NH(C1-C4烷基苯基)、氰基、硝基、氧代(對(duì)雜芳基的取代基)、-CO2H、-C(O)OC1-C4烷基、-CON(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)、-CONH(C1-C4烷基)、-CONH2、-NHC(O)(C1-C4烷基)、-NHC(O)(苯基)、-N(C1-C4烷基)C(O)(C1-C4烷基)、N(C1-C4烷基)C(O)(苯基)、-C(O)C1-C4烷基、-C(O)C1-C4苯基、-C(O)C1-C4鹵代烷基、-OC(O)C1-C4烷基、-SO2(C1-C4烷基)、-SO2(苯基)、-SO2(C1-C4鹵代烷基)、-SO2NH2、-SO2NH(C1-C4烷基)、-SO2NH(苯基)、-NHSO2(C1-C4烷基)、-NHSO2(苯基)及-NHSO2(C1-C4鹵代烷基)?！胺蓟卑?-及6-員碳環(huán)芳香環(huán)，例如苯；雙環(huán)環(huán)系統(tǒng)，其中至少一個(gè)環(huán)為碳環(huán)且芳香的，例如萘、茚滿(mǎn)、及四氫萘(tetralin)；及三環(huán)環(huán)系統(tǒng)，其中至少一環(huán)為碳環(huán)且芳香的，例如芴。例如芳基包括稠合在包含1或多個(gè)選自O(shè)、N及S之雜原子的5-至7-員雜環(huán)烷基環(huán)上的5-及6-員碳環(huán)芳香環(huán)。對(duì)此類(lèi)其中只有一個(gè)環(huán)為碳環(huán)芳香環(huán)的稠合雙環(huán)環(huán)系統(tǒng)，連接點(diǎn)可在碳環(huán)芳香環(huán)或雜環(huán)烷基環(huán)。由經(jīng)取代的苯衍生物形成并且在環(huán)原子處具有游離價(jià)數(shù)的二價(jià)基團(tuán)，被稱(chēng)為經(jīng)取代的亞苯基。衍生自單價(jià)多環(huán)命名尾端為“yl”之烴基團(tuán)的二價(jià)基團(tuán)，是自具游離價(jià)數(shù)之碳原子移除氫原子，被命名以加上“-idene”到其相對(duì)應(yīng)單價(jià)基團(tuán)的名稱(chēng)上，例如具有兩個(gè)連接點(diǎn)之萘基團(tuán)被稱(chēng)為亞萘基。然而，芳基不包括在下另外定義的雜芳基或以任何方式與雜芳基重復(fù)。因此，若一或多個(gè)碳環(huán)芳香環(huán)與雜環(huán)烷基芳香環(huán)稠合，所得環(huán)系統(tǒng)為雜芳基，不是芳基，如在此所定義的。術(shù)語(yǔ)“芳氧基”意指-O-芳基。術(shù)語(yǔ)“烷芳基”意指其中芳基部分經(jīng)由烷基連接于母體結(jié)構(gòu)的基團(tuán)。實(shí)例包括芐基-、苯乙基-、苯基乙烯基-、苯基烯丙基-及類(lèi)似物。術(shù)語(yǔ)“雜芳烷基”意指其中雜芳基部分經(jīng)由烷基連接于母體結(jié)構(gòu)的基團(tuán)。實(shí)例包括呋喃基甲基-、吡啶基甲基-、嘧啶基乙基及類(lèi)似物。術(shù)語(yǔ)“鹵代”意指氟、氯、溴及碘，并且術(shù)語(yǔ)“鹵素”意指氟、氯、溴及碘。“鹵代烷基”意指如上定義之具有所特定數(shù)目碳原子的烷基，以1或多個(gè)鹵素原子取代，高至最大可容許數(shù)目的鹵素原子。鹵代烷基的實(shí)例包括但不限于三氟甲基、二氟甲基、2-氟乙基及五氟乙基?！半s芳基”包含5-至7-員芳香、單環(huán)狀環(huán)，包含一或多個(gè)選自N、O及S的雜原子，例如從1至4個(gè)、或在某些具體實(shí)施方案中從1至3個(gè)，所余環(huán)原子為碳；及雙環(huán)雜環(huán)烷基環(huán)，包含一或多個(gè)選自N、O及S的雜原子，例如從1至4個(gè)、或在某些具體實(shí)施方案中從1至3個(gè)，所余環(huán)原子為碳，并且其中至少一個(gè)雜原子存在于芳香環(huán)中。例如雜芳基包括稠合在5-至7-員環(huán)烷基環(huán)上的5-至7-員雜環(huán)烷基的芳香環(huán)。對(duì)此類(lèi)其中只有一個(gè)環(huán)包含一或多個(gè)雜原子的稠合雙環(huán)雜芳基系統(tǒng)，連接點(diǎn)可在雜芳香環(huán)或環(huán)烷基環(huán)上。當(dāng)在雜芳基中的S及O原子總數(shù)超過(guò)1時(shí)，那些雜原子不互相鄰近。在某些具體實(shí)施方案中，在雜芳基中的S及O原子總數(shù)不多于2。在某些具體實(shí)施方案中，在芳香雜環(huán)中的S及O原子總數(shù)不多于1。在某些具體實(shí)施方案中，雜芳基之實(shí)例包括但不限于(假設(shè)從連接位置被定為優(yōu)先1為編號(hào))2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2，3-吡嗪基、3，4-吡嗪基、2，4-嘧啶基、3，5-嘧啶基、2，3-吡唑啉基、2，4-咪唑啉基、異噁唑啉基、噁唑啉基、噻唑啉基、噻二唑啉基、四唑基、噻吩基、苯并噻吩基、呋喃基、苯并呋喃基、苯并咪唑啉基、二氫吲哚基、pyridizinyl、三唑基、喹啉基、吡唑基、咪唑并吡啶基及5，6，7，8-四氫異喹啉。由命名尾端為“yl”的單價(jià)雜芳基衍生的二價(jià)基團(tuán)，是自具游離價(jià)數(shù)之原子移除一個(gè)氫原子，被命名以加上“-idene”到其相對(duì)應(yīng)單價(jià)基團(tuán)的名稱(chēng)上，例如具有兩個(gè)連接點(diǎn)之吡啶基被稱(chēng)為亞吡啶基。雜芳基不包含上述定義的芳基或與之重復(fù)。在術(shù)語(yǔ)“雜芳烷基”中，雜芳基及烷基是如在此定義的，并且連接點(diǎn)是在烷基上。此術(shù)語(yǔ)包括但不限于吡啶基甲基、噻吩基甲基及(吡咯基)-乙基?！半x去基團(tuán)”或“原子”是在反應(yīng)條件下可由起始物脫除并由此在特定的部位處促進(jìn)反應(yīng)的任意基團(tuán)或原子。除非另有說(shuō)明，此等基團(tuán)的合適例子是鹵原子、甲磺酰氧基、對(duì)硝基苯磺酰氧基或甲苯磺酰氧基。“任選”是指隨后所述的事件或環(huán)境可能發(fā)生或也可能不發(fā)生，且該表述包括所述事件或環(huán)境發(fā)生的情況和它不發(fā)生的情況。例如，“任選取代的烷基”包括本文定義的“烷基”和“取代的烷基”。關(guān)于含有一個(gè)或多個(gè)取代基的任何基團(tuán)，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解的是，這種基團(tuán)不意在引入立體上不實(shí)際的和/或合成上不實(shí)際的和/或本身不穩(wěn)定的任何取代或者取代方式?！氨Ｗo(hù)基”具有與其通常在有機(jī)合成中有關(guān)的含義，即選擇性阻斷多官能化合物的一個(gè)或多個(gè)反應(yīng)部位，從而使化學(xué)反應(yīng)可以選擇性地在另一個(gè)未受保護(hù)的反應(yīng)部位進(jìn)行并可以在選擇性反應(yīng)完成之后容易地除去的基團(tuán)。許多保護(hù)基已在諸如以下的文獻(xiàn)中公開(kāi)T.H.Greene和P.G.M.Wuts，ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis，ThirdEdition，JohnWiley&amp;Sons，NewYork(1999)，該文獻(xiàn)的全部?jī)?nèi)容在此引入作為參考。例如，在羥基保護(hù)形式中，化合物中存在的至少一個(gè)羥基被羥基保護(hù)基保護(hù)。同樣，胺和其它反應(yīng)基團(tuán)可以類(lèi)似地保護(hù)?！半s環(huán)烷基”意指單一脂族環(huán)，通常有3至7個(gè)環(huán)原子，除了1-3個(gè)獨(dú)立選自氧、硫及氮的雜原子之外，包含至少2個(gè)碳原子及包含至少一種前述雜原子的組合。適當(dāng)雜環(huán)烷基包括例如(假設(shè)從連接位置被定為優(yōu)先1為編號(hào))2-吡咯啉基、2，4-咪唑烷基、2，3-吡唑烷基、2-哌啶基、3-哌啶基、4-哌啶基及2，5-哌嗪基。嗎啉基也被考慮，包括2-嗎啉基及3-嗎啉基(其中氧定為優(yōu)先1的編號(hào))。如在此所用，“調(diào)節(jié)”意指在CENP-E活性上的改變，作為對(duì)至少一種在此所述之化學(xué)品存在的直接或間接反應(yīng)，相對(duì)于化學(xué)品不存在的CENP-E活性。該改變可在活性上增加或在活性上減少，并且可由于與CENP-E之化學(xué)品的直接相互作用、或由于化合物與一或多個(gè)依序影響CENP-E活性之其他因素的相互作用。術(shù)語(yǔ)“硫烷基”包括-S-(任選取代的(C1-C6)烷基)、-S-(任選取代的芳基)、-S-(任選取代的雜芳基)及-S-(任選取代的雜環(huán)烷基)的基團(tuán)。因此，硫烷基包括C1-C6烷基硫烷基。術(shù)語(yǔ)“亞磺?；卑?S(O)-H、-S(O)-(任選取代的(C1-C6)烷基)、-S(O)-(任選取代的芳基)、-S(O)-(任選取代的雜芳基)、-S(O)-(任選取代的雜環(huán)烷基)及-S(O)-(任選取代的氨基)的基團(tuán)。術(shù)語(yǔ)“磺?；卑?S(O2)-H、-S(O2)-(任選取代的(C1-C6)烷基)、-S(O2)-(任選取代的芳基)、-S(O2)-(任選取代的雜芳基)、-S(O2)-(任選取代的雜環(huán)烷基)、-S(O2)-(任選取代的烷氧基)、-S(O2)-(任選取代的芳氧基)、-S(O2)-(任選取代的雜芳氧基)、-S(O2)-(任選取代的雜環(huán)烷氧基)及-S(O2)-(任選取代的氨基)的基團(tuán)。如在此所用，術(shù)語(yǔ)“經(jīng)取代”意為在所定之原子或基團(tuán)上的任何一或多個(gè)氫被來(lái)自所指出基團(tuán)中的選擇所置換，其限制條件為所定之原子的正常價(jià)數(shù)不會(huì)超過(guò)。當(dāng)取代基為氧代(即＝O)時(shí)，則在原子上的2個(gè)原子被置換。取代基和/或變化的組合是可允許的，只要此類(lèi)組合造成穩(wěn)定的化合物或有用合成中間體。穩(wěn)定的化合物或穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)意為暗示化合物是夠強(qiáng)到從反應(yīng)混合物及在后續(xù)制劑分離中留存，做為具有至少實(shí)際用途的藥物。除非另述，取代基被命名為核心結(jié)構(gòu)。例如要了解，當(dāng)(環(huán)烷基)烷基被列做可能的取代基時(shí)，此取代基對(duì)核心結(jié)構(gòu)的連接點(diǎn)是在烷基部份。除非另外表現(xiàn)定義，術(shù)語(yǔ)“經(jīng)取代的”烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)烷基及雜芳基意指其中一或多個(gè)(如高至5，例如高至3個(gè))氫原子被獨(dú)立地選自下列組中的取代基取代的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)烷基及雜芳基-Ra、-ORb、-O(C1-C2烷基)O-(例如亞甲基二氧基-)、-SRb、胍基、其中一或多個(gè)胍基氫被低級(jí)烷基置換的胍基、-NRbRc、鹵素、氰基、硝基、-CORb、-CO2Rb、-CONRbRc、-OCORb、-OCO2Ra、-OCONRbRc、-NRcCORb、-NRCCO2Ra、-NRcCONRbRc、-OCO2Rb、-CONRbRc、-NRCCORb、-SORa、-SO2Ra、-SO2NRbRc及-NRcSO2Ra，其中Ra是選自任選取代的C1-C6烷基、任選取代的芳基及任選取代的雜芳基；Rb是選自H、任選取代的C1-C6烷基、任選取代的芳基及任選取代的雜芳基；且Rc是選自氫及任選取代的C1-C4烷基；其中各任選取代的基團(tuán)是未經(jīng)取代或者獨(dú)立被一或多個(gè)、如一、二或三個(gè)獨(dú)立地選自以下組中的取代基取代C1-C4烷基、芳基、雜芳基、芳基-C1-C4烷基、雜芳基-C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、-OC1-C4烷基、-OC1-C4烷基苯基、-C1-C4烷基-OH、-OC1-C4鹵代烷基、鹵素、-OH、-NH2、-C1-C4烷基-NH2、-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)、-NH(C1-C4烷基)、-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基苯基)、-NH(C1-C4烷基苯基)、氰基、硝基、氧代(做為雜芳基之取代基)、-CO2H、-C(O)OC1-C4烷基、-CON(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)、-CONH(C1-C4烷基)、-CONH2、-NHC(O)(C1-C4烷基)、-NHC(O)(苯基)、-N(C1-C4烷基)C(O)(C1-C4烷基)、-N(C1-C4烷基)C(O)(苯基)、-C(O)C1-C4烷基、-C(O)C1-C4苯基、-C(O)C1-C4鹵代烷基、-OC(O)C1-C4烷基、-SO2(C1-C4烷基)、-SO2(苯基)、-SO2(C1-C4鹵代烷基)、-SO2NH2、-SO2NH(C1-C4烷基)、-SO2NH(苯基)、-NHSO2(C1-C4烷基)、-NHSO2(苯基)及-NHSO2(C1-C4鹵代烷基)。術(shù)語(yǔ)“經(jīng)取代的酰基”意指(經(jīng)取代的烷基)-C(O)-、(經(jīng)取代的環(huán)烷基)-C(O)-、(經(jīng)取代的芳基)-C(O)-、(經(jīng)取代的雜芳基)-C(O)-及(經(jīng)取代的雜環(huán)烷基)-C(O)-的基團(tuán)，其中該基團(tuán)是經(jīng)由羰基官能基附于母體結(jié)構(gòu)，并且其中經(jīng)取代的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基及雜環(huán)烷基分別意指其中一或多個(gè)(如高至5，例如高至3個(gè))氫原子被獨(dú)立選自以下組中的取代基置換的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基及雜環(huán)烷基-Ra、-ORb、-O(C1-C2烷基)O-(例如亞甲基二氧基-)、-SRb、胍基、其中一或多個(gè)胍基氫被低級(jí)烷基置換的胍基、-NRbRc、鹵素、氰基、硝基、-CORb、-CO2Rb、-CONRbRc、-OCORb、-OCO2Ra、-OCONRbRc、-NRCCORb、-NRCCO2Ra、-NRcCONRbRc、-OCO2Rb、-CONRbRc、-NRcCORb、-SORa、-SO2Ra、-SO2NRbRc及-NRcSO2Ra，其中Ra是選自任選取代的C1-C6烷基、任選取代的芳基及任選取代的雜芳基；Rb是選自H、任選取代的C1-C6烷基、任選取代的芳基及任選取代的雜芳基；且Rc是選自氫及任選取代的C1-C4烷基；其中各任選取代的基團(tuán)是未經(jīng)取代或者獨(dú)立被一或多個(gè)、如一、二或三個(gè)獨(dú)立地選自以下組中的取代基取代C1-C4烷基、芳基、雜芳基、芳基-C1-C4烷基-、雜芳基-C1-C4烷基-、C1-C4鹵代烷基-、-OC1-C4烷基、-OC1-C4烷基苯基、-C1-C4烷基-OH、-OC1-C4鹵代烷基、鹵素、-OH、-NH2、-C1-C4烷基-NH2、-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)、-NH(C1-C4烷基)、-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基苯基)、-NH(C1-C4烷基苯基)、氰基、硝基、氧代(做為雜芳基之取代基)、-CO2H、-C(O)OC1-C4烷基、-CON(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)、-CONH(C1-C4烷基)、-CONH2、-NHC(O)(C1-C4烷基)、-NHC(O)(苯基)、-N(C1-C4烷基)C(O)(C1-C4烷基)、-N(C1-C4烷基)C(O)(苯基)、-C(O)C1-C4烷基、-C(O)C1-C4苯基、-C(O)C1-C4鹵代烷基、-OC(O)C1-C4烷基、-SO2(C1-C4烷基)、-SO2(苯基)、-SO2(C1-C4鹵代烷基)、-SO2NH2、-SO2NH(C1-C4烷基)、-SO2NH(苯基)、-NHSO2(C1-C4烷基)、-NHSO2(苯基)及-NHSO2(C1-C4鹵代烷基)。術(shù)語(yǔ)“經(jīng)取代的烷氧基”意指其中烷基組份被取代的烷氧基(即-O-(經(jīng)取代的烷基))，其中“經(jīng)取代的烷基”意指其中一或多個(gè)(如高至5，例如高至3個(gè))氫原子被獨(dú)立地選自以下組中的取代基置換的烷基-Ra、-ORb、-O(C1-C2烷基)O-(例如亞甲基二氧基-)、-SRb、胍基、其中一或多個(gè)胍基氫被低級(jí)烷基置換的胍基、-NRbRc、鹵素、氰基、硝基、-CORb、-CO2Rb、-CONRbRc、-OCORb、-OCO2Ra、-OCONRbRc、-NRCCORb、-NRCCO2Ra、-NRCCONRbRc、-OCO2Rb、-CONRbRc、-NRcCORb、-SORa、-SO2Ra、-SO2NRbRc及-NRCSO2Ra，其中Ra是選自任選取代的C1-C6烷基、任選取代的芳基及任選取代的雜芳基；Rb是選自H、任選取代的C1-C6烷基、任選取代的芳基及任選取代的雜芳基；且Rc是選自氫及任選取代的C1-C4烷基；其中各任選取代的基團(tuán)是未經(jīng)取代或者獨(dú)立被一或多個(gè)、如一、二或三個(gè)獨(dú)立地選自以下組中的取代基取代C1-C4烷基、芳基、雜芳基、芳基-C1-C4烷基-、雜芳基-C1-C4烷基-、C1-C4鹵代烷基-、-OC1-C4烷基、-OC1-C4烷基苯基、-C1-C4烷基-OH、-OC1-C4鹵代烷基、鹵素、-OH、-NH2、-C1-C4烷基-NH2、-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)、-NH(C1-C4烷基)、-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基苯基)、-NH(C1-C4烷基苯基)、氰基、硝基、氧代(做為雜芳基之取代基)、-CO2H、-C(O)OC1-C4烷基、-CON(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)、-CONH(C1-C4烷基)、-CONH2、-NHC(O)(C1-C4烷基)、-NHC(O)(苯基)、-N(C1-C4烷基)C(O)(C1-C4烷基)、-N(C1-C4烷基)C(O)(苯基)、-C(O)C1-C4烷基、-C(O)C1-C4苯基、-C(O)C1-C4鹵代烷基、-OC(O)C1-C4烷基、-SO2(C1-C4烷基)、-SO2(苯基)、-SO2(C1-C4鹵代烷基)、-SO2NH2、-SO2NH(C1-C4烷基)、-SO2NH(苯基)、-NHSO2(C1-C4烷基)、-NHSO2(苯基)及-NHSO2(C1-C4鹵代烷基)。在一些具體實(shí)施方案中，經(jīng)取代的烷氧基是”聚烷氧基”或-O-(任選取代的亞烷基)-(任選取代的烷氧基)，并且包括如-OCH2CH2OCH3及如聚乙二醇及-O(CH2CH2O)xCH3之二醇醚類(lèi)殘基的基團(tuán)，其中x是2-20的整數(shù)，如2-10，并且例如2-5。另一個(gè)經(jīng)取代的烷氧基是羥基烷氧基或-OCH2(CH2)yOH，其中y是1-10的整數(shù)，如1-4。術(shù)語(yǔ)“經(jīng)取代的烷氧基羰基”意指(經(jīng)取代的烷基)-O-C(O)-的基團(tuán)，其中該基團(tuán)是經(jīng)由羰基官能基附于母體結(jié)構(gòu)，并且其中經(jīng)取代的意指其中一或多個(gè)(如高至5，例如高至3個(gè))氫原子被獨(dú)立地選自以下組中的取代基置換的烷基-Ra、-ORb、-O(C1-C2烷基)O-(例如亞甲基二氧基-)、-SRb、胍基、其中一或多個(gè)胍基氫以低級(jí)烷基置換的胍基、-NRbRc、鹵素、氰基、硝基、-CORb、-CO2Rb、-CONRbRc、-OCORb、-OCO2Ra、-OCONRbRc、-NRCCORb、-NRCCO2Ra、-NRcCONRbRc、-OCO2Rb、-CONRbRc、-NRCCORb、-SORa、-SO2Ra、-SO2NRbRc及-NRcSO2Ra，其中Ra是選自任選取代的C1-C6烷基、任選取代的芳基及任選取代的雜芳基；Rb是選自H、任選取代的C1-C6烷基、任選取代的芳基及任選取代的雜芳基；且Rc是選自氫及任選取代的C1-C4烷基；其中各任選取代的基團(tuán)是未經(jīng)取代或者獨(dú)立被一或多個(gè)、如一、二或三個(gè)獨(dú)立地選自以下組中的取代基取代C1-C4烷基、芳基、雜芳基、芳基-C1-C4烷基-、雜芳基-C1-C4烷基-、C1-C4鹵代烷基-、-OC1-C4烷基、-OC1-C4烷基苯基、-C1-C4烷基-OH、-OC1-C4鹵代烷基、鹵素、-OH、-NH2、-C1-C4烷基-NH2、-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)、-NH(C1-C4烷基)、-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基苯基)、-NH(C1-C4烷基苯基)、氰基、硝基、氧代(做為雜芳基之取代基)、-CO2H、-C(O)OC1-C4烷基、-CON(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)、-CONH(C1-C4烷基)、-CONH2、-NHC(O)(C1-C4烷基)、-NHC(O)(苯基)、-N(C1-C4烷基)C(O)(C1-C4烷基)、-N(C1-C4烷基)C(O)(苯基)、-C(O)C1-C4烷基、-C(O)C1-C4苯基、-C(O)C1-C4鹵代烷基、-OC(O)C1-C4烷基、-SO2(C1-C4烷基)、-SO2(苯基)、-SO2(C1-C4鹵代烷基)、-SO2NH2、-SO2NH(C1-C4烷基)、-SO2NH(苯基)、-NHSO2(C1-C4烷基)、-NHSO2(苯基)及-NHSO2(C1-C4鹵代烷基)。術(shù)語(yǔ)“經(jīng)取代的氨基”意指-NHRd或-NRdRd的基團(tuán)，其中各Rd是獨(dú)立選自經(jīng)取代的烷基、任選取代的環(huán)烷基、任選取代的酰基、任選取代的芳基、任選取代的雜芳基、任選取代的雜環(huán)烷基、烷氧基羰基、亞磺?；盎酋；?，其中經(jīng)取代的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)烷基及雜芳基分別意指其中一或多個(gè)(如高至5，例如高至3個(gè))氫原子被獨(dú)立地選自以下組中的取代基置換的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)烷基及雜芳基-Ra、-ORb、-O(C1-C2烷基)O-(例如亞甲基二氧基-)、-SRb、胍基、其中一或多個(gè)胍基氫被低級(jí)烷基置換的胍基、-NRbRc、鹵素、氰基、硝基、-CORb、-CO2Rb、-CONRbRc、-OCORb、-OCO2Ra、-OCONRbRc、-NRcCORb、-NRcCO2Ra、-NRcCONRbRc、-OCO2Rb、-CONRbRc、-NRcCORb、-SORa、-SO2Ra、-SO2NRbRc及-NRcSO2Ra，其中Ra是選自任選取代的C1-C6烷基、任選取代的芳基及任選取代的雜芳基；Rb是選自H、任選取代的C1-C6烷基、任選取代的芳基及任選取代的雜芳基；且Rc是選自氫及任選取代的C1-C4烷基；其中各任選取代的基團(tuán)是未經(jīng)取代或者獨(dú)立被一或多個(gè)、如一、二或三個(gè)獨(dú)立地選自以下組中的取代基取代C1-C4烷基、芳基、雜芳基、芳基-C1-C4烷基-、雜芳基-C1-C4烷基-、C1-C4鹵代烷基-、-OC1-C4烷基、-OC1-C4烷基苯基、-C1-C4烷基-OH、-OC1-C4鹵代烷基、鹵素、-OH、-NH2、-C1-C4烷基-NH2、-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)、-NH(C1-C4烷基)、-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基苯基)、-NH(C1-C4烷基苯基)、氰基、硝基、氧代(做為雜芳基之取代基)、-CO2H、-C(O)OC1-C4烷基、-CON(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)、-CONH(C1-C4烷基)、-CONH2、-NHC(O)(C1-C4烷基)、-NHC(O)(苯基)、-N(C1-C4烷基)C(O)(C1-C4烷基)、-N(C1-C4烷基)C(O)(苯基)、-C(O)C1-C4烷基、-C(O)C1-C4苯基、-C(O)C1-C4鹵代烷基、-OC(O)C1-C4烷基、-SO2(C1-C4烷基)、-SO2(苯基)、-SO2(C1-C4鹵代烷基)、-SO2NH2、-SO2NH(C1-C4烷基)、-SO2NH(苯基)、-NHSO2(C1-C4烷基)、-NHSO2(苯基)及-NHSO2(C1-C4鹵代烷基)；并且其中任選取代的?；?、烷氧基、亞磺酰基及磺?；侨缭诖硕x的。術(shù)語(yǔ)“經(jīng)取代的氨基”也意指-NReRf的基團(tuán)，其中Re及Rf與鍵結(jié)其上的氮一起形成任選取代的5-至7-員含氮、非芳香雜環(huán)，其任選地包含1或2個(gè)選自氮、氧及硫的額外雜原子。式I-XIII的化合物包括但不限于式I-XIII化合物之光學(xué)異構(gòu)體、外消旋物及它們的其他混合物。在那些情形下，單一對(duì)映異構(gòu)體或非對(duì)映異構(gòu)體，即光學(xué)活性形式，可以不對(duì)稱(chēng)合成或外消旋物的拆分獲得。外消旋物的拆分可以例如如在拆分劑存在下結(jié)晶或色譜分析的常規(guī)方法完成，使用例如對(duì)手性高壓液態(tài)色譜分析(HPLC)柱。另外，式I-XIII化合物包括有碳-碳雙鍵的Z-及E-形式(或順-及反-形式)的化合物。其中式I-XIII化合物以各種互變形式存在，本發(fā)明之化學(xué)品包括化合物的所有互變異構(gòu)體形式。式I-XIII化合物也包括如多晶形物及包合物的結(jié)晶形式。本發(fā)明之化學(xué)品包括但不限于式I-XIII化合物及其所有藥物學(xué)可接受的形式。在此所引述之化合物的藥物學(xué)可接受的形式包括其藥物學(xué)可接受的鹽類(lèi)、溶劑化物、螯合物、非共價(jià)復(fù)合物、前藥及混合物。在某些具體實(shí)施方案中，在此敘述之化合物是其藥物學(xué)可接受的鹽類(lèi)的形式。因此，術(shù)語(yǔ)“化學(xué)品”也包含藥物學(xué)可接受的鹽類(lèi)、溶劑化物、螯合物、非共價(jià)復(fù)合物、前藥及混合物。“藥物學(xué)可接受的鹽類(lèi)”包括但不限于與無(wú)機(jī)酸的鹽類(lèi)，如鹽酸鹽、磷酸鹽、二磷酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、磺酸鹽、硝酸鹽及類(lèi)似物；以及與有機(jī)酸的鹽類(lèi)，如蘋(píng)果鹽、順丁烯二酸鹽、反丁烯二酸鹽、酒石酸鹽、丁二酸鹽、檸檬酸鹽、醋酸鹽、乳酸鹽、甲烷磺酸鹽、對(duì)-甲苯磺酸鹽、2-羥乙基磺酸鹽、苯甲酸鹽、水楊酸鹽、硬脂酸鹽及烷酸鹽，如醋酸鹽、HOOC-(CH2)n-COOH，其中n為0-4；及類(lèi)似鹽類(lèi)。類(lèi)似地，藥物學(xué)可接受的陽(yáng)離子包括但不限于鈉、鉀、鈣、鋁、鋰及銨。另外，若式I-XIII化合物以酸加成鹽獲得，游離堿可以通過(guò)堿化酸鹽溶液而獲得。相反地，若產(chǎn)物為游離堿，加成鹽、特別是藥物學(xué)可接受的加成鹽，可以根據(jù)用于從游離堿制備酸加成鹽的常規(guī)步驟如下制備在適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶劑中溶解游離堿，并且以酸處理。本領(lǐng)域技術(shù)人員會(huì)認(rèn)知各種可用于制備無(wú)毒藥物學(xué)可接受的加成鹽類(lèi)的合成方法。如上所注，前藥也落在化學(xué)品的范疇，例如式I-XIII化合物的酯或酰胺衍生物。術(shù)語(yǔ)”前藥”包括當(dāng)給藥于患者時(shí)變成式I-XIII化合物的任何化合物，例如在前藥的代謝過(guò)程中。前藥的實(shí)例包括但不限于醋酸酯、甲酸酯及苯甲酸酯和在式I-XIII化合物中之官能基團(tuán)(如醇或氨基團(tuán))的類(lèi)似衍生物。在一些具體實(shí)施方案中，前藥是磷酸酯。前藥的完整討論被提供于T.Higuchi及V.Stella的Pro-drugsasNovelDeliverySystems，A.C.S.研討會(huì)系列的第14冊(cè)；EdwardB.Roche編輯的BioreversibleCarriersinDrugDesign，AmericanpharmaceuticalAssociationandPergamonPress，1987；及DesignofProdrugs，編輯H.Bundgaard，Elsevier，1985中；其整體在此并于本文作為參考。術(shù)語(yǔ)“溶劑化物”意指由溶劑及化合物之相互作用形成的化學(xué)品。適當(dāng)?shù)娜軇┗餅樗幬飳W(xué)可接受的的溶劑化物，如水合物，包括單水合物及半水合物。術(shù)語(yǔ)“螯合物”意指由化合物及金屬在兩(或多)點(diǎn)之配位所形成的化學(xué)品。術(shù)語(yǔ)“非共價(jià)復(fù)合物”意指由化合物及另一分子之相互作用形成的化學(xué)品，其中共價(jià)鍵不在化合物及該分子之間形成。例如復(fù)合作用可經(jīng)由vanderWaals相互作用、氫鍵及靜電相互作用(也稱(chēng)為離子鍵結(jié))而發(fā)生。術(shù)語(yǔ)“活性劑”被用于指出具有生物活性的化學(xué)品。在某些具體實(shí)施方案中，“活性劑”是具有醫(yī)藥用途的化合物。例如活性劑可為抗癌治療劑。術(shù)語(yǔ)“抗有絲分裂劑”是指用于例如通過(guò)使中期細(xì)胞分裂停止而抑制或防止有絲分裂的藥物。一些抗腫瘤藥物阻斷增殖作用，并且被認(rèn)為是抗有絲分裂劑。術(shù)語(yǔ)本發(fā)明之化學(xué)品的“治療有效量”，意為當(dāng)給藥于人類(lèi)或非人類(lèi)患者時(shí)提供如改善癥狀、減緩疾病進(jìn)展或預(yù)防疾病之治療益處的有效量，例如治療有效量可為足以減輕對(duì)CENP-E抑制反應(yīng)之疾病癥狀的量。在一些具體實(shí)施方案中，治療有效量是足以減少癌癥癥狀的量。在某些具體實(shí)施方案中，治療有效量是足以減少在器官中可檢測(cè)癌癥細(xì)胞數(shù)目、可檢測(cè)緩慢或停止癌癥腫瘤生長(zhǎng)的量。在一些具體實(shí)施方案中，治療有效量是足以縮小癌癥腫瘤的量。術(shù)語(yǔ)“抑制”指出生物活性或過(guò)程之基線活性重大減少。“抑制CENP-E活性”意指作為直接或間接對(duì)至少一種在此所述之化學(xué)品存在的反應(yīng)，相對(duì)于無(wú)至少一種該化學(xué)品存在的CENP-E活性，CENP-E活性減少?；钚缘臏p少可由于該化學(xué)品與CENP-E的直接相互作用、或由于在此所述之化學(xué)品與一或多個(gè)依序影響CENP-E活性之其他因素的相互作用。例如該化學(xué)品的存在會(huì)借著直接鍵結(jié)到CENP-E而減少CENP-E活性、(直接或間接)導(dǎo)致另一個(gè)因素來(lái)減少CENP-E活性、或(直接或間接)減少存在于細(xì)胞或器官中存在之CENP-E量?！皩?duì)CENP-E抑制的疾病”為其中抑制CENP-E的疾病，提供如改善癥狀、減緩疾病進(jìn)展、預(yù)防或延遲疾病開(kāi)始、或抑制某些細(xì)胞類(lèi)型之異?；钚缘闹委熞嫣??！爸委煛币鉃樵诨颊呱系娜魏渭膊√幚?，包括a)預(yù)防疾病，也就是導(dǎo)致疾病之臨床癥狀不發(fā)展；b)抑制疾??；c)減緩或阻止臨床癥狀的發(fā)展；和/或d)減輕疾病，也就是導(dǎo)致臨床癥狀的復(fù)原。“患者”意指一種已或?qū)橹委?、觀察或?qū)嶒?yàn)?zāi)繕?biāo)的動(dòng)物，如哺乳動(dòng)物。本發(fā)明的方法可用于人類(lèi)治療及獸醫(yī)用途。在某些具體實(shí)施方案中，患者為哺乳動(dòng)物；在某些具體實(shí)施方案中，患者為人類(lèi)；并且在某些具體實(shí)施方案中，患者是選自貓及狗。本發(fā)明指出一類(lèi)新穎化學(xué)品，其為一或多個(gè)有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白的抑制劑。根據(jù)某些具體實(shí)施方案，在此所述之化學(xué)品抑制有絲分裂、CENP-E，特別是人類(lèi)的CENP-E。CENP-E是增加端導(dǎo)向之微管上的原動(dòng)力，對(duì)于實(shí)現(xiàn)細(xì)胞分裂中期染色體的排列上必要的。CENP-E在分裂期間累積，并且在有絲分裂完成之后分解。抗CENP-E的抗體的微注射、或CENP-E主要負(fù)面突變種的過(guò)度表達(dá)，導(dǎo)致有絲分裂停止，細(xì)胞分裂中期染色體分散在兩極紡錘體上。CENP-E之尾部區(qū)域調(diào)節(jié)局部化到著絲點(diǎn)(kinetochores)，并也與有絲分裂查核點(diǎn)激酶hBubR1相互作用。CENP-E也與MAP激酶的活性形式相關(guān)。人類(lèi)CENP-E的復(fù)制已被報(bào)告(Yen等人，Nature，359(6395)436-9(1992))。在Thrower等人EMBOJ.，14918-26(1995)中報(bào)告了部份純化天然人類(lèi)CENP-E。再者，有研究報(bào)道CENP-E是減少端導(dǎo)向之微管上的原動(dòng)力。Wood等人之Cell，91；357-66(1997)揭示在大腸桿菌上表達(dá)的XenopusCENP-E，并且XCENP-E具有能動(dòng)性為在試管中之增加端導(dǎo)向的原動(dòng)力。CENP-E見(jiàn)PCT公開(kāi)WO99/13061號(hào)，其在此并于本文作為參考。在某些具體實(shí)施方案中，該化學(xué)品抑制有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白、CENP-E，并調(diào)節(jié)一或多個(gè)選自HSET(見(jiàn)美國(guó)專(zhuān)利6,361,993號(hào)，其在此并于本文作為參考)；MCAK(見(jiàn)美國(guó)專(zhuān)利6,331,424號(hào)，其在此并于本文作為參考)；RabK-6(見(jiàn)美國(guó)專(zhuān)利6,544,766號(hào)，其在此并于本文作為參考)；Kif4(見(jiàn)美國(guó)專(zhuān)利6,440,684號(hào)，其在此并于本文作為參考)；MKLP1(見(jiàn)美國(guó)專(zhuān)利6,448,025號(hào)，其在此并于本文作為參考)；Kif15(見(jiàn)美國(guó)專(zhuān)利6,355,466號(hào)，其在此并于本文作為參考)；Kid(見(jiàn)美國(guó)專(zhuān)利6,387,644號(hào)，其在此并于本文作為參考)；Mppl、CMKrp、KinI-3(見(jiàn)美國(guó)專(zhuān)利6,461,855號(hào)，其在此并于本文作為參考)；Kip3a(見(jiàn)PCT出版WO01/96593號(hào)，其在此并于本文作為參考)；Kip3d(見(jiàn)美國(guó)專(zhuān)利6,492,151號(hào)，其在此并于本文作為參考)及KSP(見(jiàn)美國(guó)專(zhuān)利6,617,115號(hào)，其在此并于本文作為參考)的人類(lèi)有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白。抑制有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白的方法包括將本發(fā)明之抑制劑與一或多個(gè)有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白或其片斷或變體接觸，特別是人類(lèi)的驅(qū)動(dòng)蛋白。抑制可為有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白的ATP水解活性和/或有絲分裂紡錘體形成活性，使得有絲分裂紡錘體被中斷。本發(fā)明提供一或多個(gè)有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白的抑制劑，特別是一或多個(gè)人類(lèi)有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白，用于治療與細(xì)胞增生相關(guān)的失調(diào)。在此所述之化學(xué)品組合物及方法可在其選擇性上不同，并且用于治療細(xì)胞增殖性疾病，包括但不限于癌癥、增生、再狹窄、心肥大、免疫疾病、真菌性疾病及炎癥。因此，本發(fā)明提供至少一種選自式I化合物的化學(xué)品及其藥物學(xué)可接受的鹽類(lèi)、溶劑化物、螯合物、非共價(jià)復(fù)合物、前藥及混合物式I其中R1為任選取代的芳基、任選取代的雜環(huán)烷基、或任選取代的雜芳基；X為-CO或-SO2-；R2為氫或任選取代的低級(jí)烷基；W為-CR4-、-CH2CR4-或N；R3為-CO-R7-、氫、任選取代的烷基、任選取代的雜環(huán)基、氰基、任選取代的磺?；?、或任選取代的芳基；R4為氫或任選取代的烷基；R5為氫、羥基、任選取代的氨基、任選取代的雜環(huán)基、或任選取代的低級(jí)烷基；R6為氫、任選取代的烷基、任選取代的烷氧基、任選取代的芳氧基、任選取代的雜芳基氧基、任選取代的烷氧基羰基-、任選取代的氨基羰基-、任選取代的芳基、任選取代的雜芳基、任選取代的雜環(huán)基、或任選取代的烷芳基；及R7為任選取代的低級(jí)烷基、任選取代的芳基、羥基、任選取代的氨基、任選取代的芳烷基氧基、或任選取代的烷氧基；其限制條件為若W為N，則R5不是羥基或任選取代的氨基，并且R6不是任選取代的烷氧基、任選取代的芳烷基氧基、任選取代的雜芳基烷氧基、或任選取代的氨基。在一些具體實(shí)施方案中，R1為任選取代的芳基。在一些具體實(shí)施方案中，R1為任選取代的苯基。在一些具體實(shí)施方案中，R1為任選被一、二或三個(gè)獨(dú)立選自任選取代的雜環(huán)基、任選取代的烷基、磺?；Ⅺu素、任選取代的氨基、任選取代的硫烷基、任選取代的烷氧基、任選取代的芳氧基、任選取代的雜芳基氧基、?；?、羥基、硝基、氰基、任選取代的芳基及任選取代的雜芳基-之基團(tuán)取代的苯基。在一些具體實(shí)施方案中，R1為3-鹵素-4-異丙氧基-苯基、3-氰基-4-異丙氧基-苯基、3-氰基-4-異丙基氨基-苯基、3-氯-4-異丙基氨基-苯基、3-氰基-4-三氟異丙氧基-苯基、3-氯-4-三氟異丙氧基-苯基、3-氰基-4-環(huán)丁基氧基-苯基、3-氯-4-環(huán)丁基氧基-苯基、3-氰基-4-環(huán)丙基氧基-苯基、和3-氯-4-環(huán)丙基氧基-苯基。在一些具體實(shí)施方案中，R1為3-鹵素-4-異丙氧基-苯基或3-氰基-4-異丙氧基-苯基。在一些具體實(shí)施方案中，R2為氫。在一些具體實(shí)施方案中，X為-CO-。在一些具體實(shí)施方案中，W為-CR4-并且R4為氫。在一些具體實(shí)施方案中，在此所述之化合物擁有一個(gè)有潛力的手性中心，例如W為-CR4-。本發(fā)明考慮純對(duì)映異構(gòu)體及對(duì)映異構(gòu)體混合物的用途，包括消旋混合物，雖然大致為光學(xué)純之對(duì)映異構(gòu)體的用途通常上優(yōu)選的。術(shù)語(yǔ)“大致為光學(xué)純的”或“對(duì)映異構(gòu)體純的”意為具有至少約95％之所述對(duì)映異構(gòu)體，無(wú)單一雜質(zhì)大于約1％，并且特別是至少約97.5％對(duì)映異構(gòu)過(guò)量。在一些具體實(shí)施方案中，在W之立體中心如下所示在一些具體實(shí)施方案中，R3為-CO-R7-、氫、任選取代的低級(jí)烷基、氰基、任選取代的磺酰基、任選取代的芳基、或任選取代的雜環(huán)基。在一些具體實(shí)施方案中，R3為任選取代的低級(jí)烷基。在一些具體實(shí)施方案中，R3為任選被羥基或其磷酸酯取代的低級(jí)烷基，任選地被低級(jí)烷氧基取代的低級(jí)烷基，任選被任選取代的氨基取代的低級(jí)烷基，或任選被CO-R8取代的低級(jí)烷基，其中R8為羥基或?yàn)槿芜x取代的氨基。在一些具體實(shí)施方案中，R5為氫、羥基或任選取代的低級(jí)烷基。在一些具體實(shí)施方案中，R5為氫。在一些具體實(shí)施方案中，當(dāng)R5不為氫時(shí)，在此所述之化合物擁有一個(gè)有潛力的手性中心。本發(fā)明考慮純對(duì)映異構(gòu)體及對(duì)映異構(gòu)體混合物的用途，包括消旋混合物，雖然大致為光學(xué)純之對(duì)映異構(gòu)體的用途通常是優(yōu)選的。術(shù)語(yǔ)”大致為光學(xué)純的”或?qū)τ钞悩?gòu)體純的”意為具有至少約95％之所述對(duì)映異構(gòu)體，無(wú)單一雜質(zhì)大于約1％，并且特別是至少約97.5％對(duì)映異構(gòu)過(guò)量。在一些具體實(shí)施方案中，R6為任選取代的芳基、任選取代的雜芳基、任選取代的雜環(huán)基、或任選取代的烷基(如其中烷基被任選取代的氨基取代，或其中烷基被任選取代的環(huán)烷基-取代)。在一些具體實(shí)施方案中，R6為被一或兩個(gè)下列取代基取代的苯基任選取代的雜芳基、任選取代的氨基、芳烷氧基、鹵素、羥甲基-、羥基、氰基、烷氧基、苯基、苯氧基、亞甲基二氧基、亞乙二氧基、磺?；?、氨基羰基、羧基、烷氧基羰基、硝基、雜芳烷氧基、芳烷氧基及任選取代的雜環(huán)基。本發(fā)明還提供選自式II化合物的至少一種化學(xué)品及其藥物學(xué)可接受的鹽類(lèi)、溶劑化物、螯合物、非共價(jià)復(fù)合物、前藥及混合物其中R2、R3、R5、R6及W如對(duì)式I化合物所述，并且其中R11為任選取代的雜環(huán)基、任選取代的低級(jí)烷基、硝基、氰基、氫、磺?；螓u素；R12為氫、鹵素、任選取代的烷基、任選取代的氨基、任選取代的硫烷基、任選取代的烷氧基、任選取代的芳氧基、任選取代的雜環(huán)基或任選取代的雜芳氧基；及R13為氫、酰基、任選取代的烷基-、任選取代的烷氧基、鹵素、羥基、硝基、氰基、任選取代的氨基、烷基磺?；?、烷基磺酰氨基-、烷基磺?；?、羧基烷基-、氨基羰基-、任選取代的芳基或任選取代的雜芳基-。在一些具體實(shí)施方案中，R11為氫、氰基、硝基或鹵素。在一些具體實(shí)施方案中，R11為氯或氰基。在一些具體實(shí)施方案中，R12為任選取代的低級(jí)烷氧基、任選取代的低級(jí)烷基或任選取代的氨基。在一些具體實(shí)施方案中，R12選自于異丙氧基、異丙基氨基、三氟異丙氧基、環(huán)丁氧基、以及環(huán)丙氧基。在一些具體實(shí)施方案中，R12為低級(jí)烷基(如丙氧基)或2，2，2-三氟-1-甲基-乙氧基。在一些具體實(shí)施方案中，R12不是-O-(CH2)nNH2或-O-(CH2)4NH(CH3)，其中n為4或5。在一些具體實(shí)施方案中，R11及R12一起形成任選取代的碳環(huán)或雜環(huán)。在一些具體實(shí)施方案中，R11及R12一起形成亞甲基二氧基或亞乙二氧基環(huán)。在一些具體實(shí)施方案中，R12及R13一起任選取代的碳環(huán)或雜環(huán)。在一些具體實(shí)施方案中，R11及R13一起形成任選取代的碳環(huán)或雜環(huán)。在一些具體實(shí)施方案中，R13為氫。在一些具體實(shí)施方案中，R12及R13一起形成任選取代的碳環(huán)或雜環(huán)，即R1、X、N及R2一起形成任選取代的碳環(huán)或雜環(huán)。在某些具體實(shí)施方案中，形成經(jīng)取代的2，4-二氧代-1，4-二氫-2H-喹唑啉-3-基環(huán)，例如其中苯環(huán)是任選經(jīng)取代的。在一些具體實(shí)施方案中，形成4-氧代-4H-喹唑啉-3-基環(huán)，例如其中苯環(huán)是任選經(jīng)取代的。在某些具體實(shí)施方案中，形成4-氧代-4H-吡啶并嘧啶-3-基環(huán)，例如其中R、S、T及U之一為氮，其他為-CH，并且其中吡啶環(huán)是任選經(jīng)取代的。本發(fā)明還提供選自式III化合物的至少一種化學(xué)品及其藥物學(xué)可接受的鹽類(lèi)、溶劑化物、螯合物、非共價(jià)復(fù)合物、前藥及混合物其中R2、R3、R6、R11、R12及R13是如對(duì)式II化合物所述。本發(fā)明還提供選自式IV化合物的至少一種化學(xué)品及其藥物學(xué)可接受的鹽類(lèi)、溶劑化物、螯合物、非共價(jià)復(fù)合物、前藥及混合物(式IV)其中R2、R6、R11、R12及R13是如對(duì)式III化合物所述。本發(fā)明還提供選自式V化合物的至少一種化學(xué)品及其藥物學(xué)可接受的鹽類(lèi)、溶劑化物、螯合物、非共價(jià)復(fù)合物、前藥及混合物(式V)其中R2、R3、R11、R12及R13是如對(duì)式III化合物所述，并且其中R14為任選取代的雜芳基；及R15是選自氫、鹵素、羥基及低級(jí)烷基。在一些具體實(shí)施方案中，R14是選自7，8-二氫-咪唑并[1，2-c][1，3]噁嗪-2-基、3a，7a-二氫-1H-苯并咪唑-2-基、咪唑并[2，1-b]噁唑-6-基、噁唑-4-基、5，6，7，8-四氫-咪唑并[2，1-b]吡啶-2-基、1H-[1，2，4]-三唑-3-基、2，3-二氫-咪唑-4-基、1H-咪唑-4-基、咪唑并[2，1-b]吡啶-2-基、噻唑-2-基、噻唑-4-基、吡唑-3-基、及1H-咪唑4-基，其各任選被一、二或三個(gè)選自任選取代的低級(jí)烷基、鹵素、?；?、磺?；⑶杌?、硝基、任選取代的氨基及任選取代的雜芳基取代。在一些具體實(shí)施方案中，R14是選自1H-咪唑-2-基、咪唑并[2，1-b]吡啶-2-基及1H-咪唑-4-基，其各任選以一或二個(gè)選自任選取代的低級(jí)烷基、鹵素及酰基取代。在一些具體實(shí)施方案中，R15是選氫。本發(fā)明還提供選自式VI化合物的至少一種化學(xué)品及其藥物學(xué)可接受的鹽類(lèi)、溶劑化物、螯合物、非共價(jià)復(fù)合物、前藥及混合物(式VI)其中R2、R6、R11、R12及R13是如對(duì)式III化合物所述。本發(fā)明還提供選自式VII化合物的至少一種化學(xué)品及其藥物學(xué)可接受的鹽類(lèi)、溶劑化物、螯合物、非共價(jià)復(fù)合物、前藥及混合物(式VII)其中R2、R6、R11、R12及R13是如對(duì)式III化合物所述，及其中R9是選自任選取代的烷氧基、任選取代的環(huán)烷氧基、任選取代的芳烷氧基、任選取代的氨基及任選取代的低級(jí)烷基。在一些具體實(shí)施方案中，R9是任選經(jīng)羥基取代或任選經(jīng)取代之氨基取代的低級(jí)烷基。在一些具體實(shí)施方案中，R9是被羥基、氨基、N-甲氨基、或N，N-二甲基氨基取代的低級(jí)烷基。本發(fā)明還提供選自式VIII化合物的至少一種化學(xué)品及其藥物學(xué)可接受的鹽類(lèi)、溶劑化物、螯合物、非共價(jià)復(fù)合物、前藥及混合物(式VIII)其中R1、X、W、R3、R4、R6及R7是如對(duì)式I化合物所定義的，并且其中R2及R5與鍵結(jié)其上之原子一起形成任選取代的5-至7-員雜環(huán)，其任選地可包括一或兩個(gè)額外雜原子。在一些具體實(shí)施方案中，R2與R5一起形成任選取代的吡咯烷基環(huán)或任選經(jīng)羥基取代之哌啶環(huán)。本發(fā)明還提供選自式IX化合物的至少一種化學(xué)品及其藥物學(xué)可接受的鹽類(lèi)、溶劑化物、螯合物、非共價(jià)復(fù)合物、前藥及混合物(式IX)其中R1、X、W、R2、R3、R4及R7是如對(duì)式I化合物所定義的，并且其中R5及T6與鍵結(jié)其上的原子一起形成任選取代的5-至7-員雜環(huán)，其任選地可包括一或兩個(gè)額外雜原子。在一些具體實(shí)施方案中，R5與R6與它們所連接的原子一起形成任選取代的2H-[1，2，3]-三唑-4-基、任選取代的1H-苯并咪唑-2-基、任選取代的哌嗪環(huán)、任選取代的嗎啉環(huán)、或任選取代的1H-咪唑-4-基環(huán)、任選取代的異噁唑-4-基環(huán)。本發(fā)明還提供選自式X化合物的至少一種化學(xué)品及其藥物學(xué)可接受的鹽類(lèi)、溶劑化物、螯合物、非共價(jià)復(fù)合物、前藥及混合物(式X)其中R1、X、W、R4、R5、R6及R7是如對(duì)式I化合物所定義的，并且其中R2及R3與它們所連接的原子一起形成任選取代的3-至7-員雜環(huán)。在一些具體實(shí)施方案中，R2與R3與它們所連接的原子一起形成任選取代的3-至7-員雜環(huán)。在一些具體實(shí)施方案中，其形成吖丙啶基環(huán)。本發(fā)明還提供選自式XI化合物的至少一種化學(xué)品及其藥物學(xué)可接受的鹽類(lèi)、溶劑化物、螯合物、非共價(jià)復(fù)合物、前藥及混合物(式XI)其中W、R3、R4、R5、R6及R7是如對(duì)式I化合物所定義的，并且其中R1、X、N及R2一起形成經(jīng)取代的2，4-二氧代-1，4-二氫-2H-喹唑啉-3-基、4-氧代-4H-喹唑啉-3-基或4-氧代-4H-吡啶并嘧啶-3-基環(huán)。本發(fā)明還提供選自式XII化合物的至少一種化學(xué)品及其藥物學(xué)可接受的鹽類(lèi)、溶劑化物、螯合物、非共價(jià)復(fù)合物、前藥及混合物(式XII)其中R1、W、R4、R5及R6是如對(duì)式I化合物所定義的，并且其中-X-N(R2)-是-C＝N-；及X與R3一起形成任選取代的雜環(huán)；在各情況下，其限制條件為若W為N，則R5不是羥基或任選取代的氨基，并且R6不是任選取代的烷氧基、任選取代的芳烷氧基、任選取代的雜芳烷氧基或任選取代的氨基。在某些具體實(shí)施方案中，-X-N(R2)-是-C＝N-；且X與R3一起形成任選取代的雜環(huán)，包括但不限于3H-[1，3，4]-噁二唑-2-酮、4，5-二氫-噁唑、三唑、咪唑、3，5-二氫-咪唑-4-酮、或3H-嘧啶-4-酮，其各任選為經(jīng)取代的。本發(fā)明還提供選自式XIII化合物的至少一種化學(xué)品及其藥物學(xué)可接受的鹽類(lèi)、溶劑化物、螯合物、非共價(jià)復(fù)合物、前藥及混合物(式XIII)其中R1、X、W、R2、R4、R5及R7是如對(duì)式I化合物所定義的，并且其中R3及R6與鍵結(jié)其上之原子一起形成任選取代的5-至7-員雜環(huán)，其任選地可包括一或兩個(gè)額外雜原子。在一些具體實(shí)施方案中，R3與R6與它們所連接的原子一起形成任選取代的吡咯烷基環(huán)、任選取代的哌啶環(huán)、或任選取代的1，2，3，4-四氫-喹啉-3-基環(huán)。本發(fā)明還提供選自表1、2、3、4、5或6中的化合物的至少一種化學(xué)品及其藥物學(xué)可接受的鹽類(lèi)、溶劑化物、螯合物、非共價(jià)復(fù)合物、前藥及混合物?；衔锟杀幻?，并使用AutoNom2.1版、ChemDrawUltra6.0、Cambridgesoft，Cambridge，MA；ChemDrawUltra9.0Cambridgesoft，Cambridge，MA的Struct&lt;＝&gt;Name邏輯、或ISIS-DRAW。表1(S)-3-氯-N-(1-(4-(1-乙基-2-(2-羥基丙烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)苯基-4-羥基丁烷-2-基)-4-異丙氧基苯甲酰胺(S)-N-(1-(4-(2-乙?；?1-乙基-1H-咪唑-4-基)苯基-4-羥基丁烷-2-基)-3-氯-4-異丙氧基苯甲酰胺N-((S)-1-(4-(1-乙酰氨基乙基)-1-乙基-1H-咪唑-4-基)苯基)-4-羥基丁烷-2-基)-3-氯-4-異丙氧基苯甲酰胺3-氯-N-((S)-1-(4-(1-乙基-2-(2-羥基丙烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-4-羥基丁烷-2-基)-4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基氧基)苯甲酰胺N-((S)-1-(4-(1-乙酰氨基乙基)-1-乙基-1H-咪唑-4-基)苯基)-4-羥基丁烷-2-基)-3-氯-4-(1，1，1-三氟丙烷-2-基氧基)苯甲酰胺(S)-N-(1-(4-(2-乙?；?1-(2，2，2-三氟乙基)-1H-咪唑-4-基)苯基)-4-羥基丁烷-2-基)-3-氯-4-異丙氧基苯甲酰胺3-氯-N-((S)-4-羥基-1-(4-(8-(1-羥基乙基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基)-丁烷-2-基)-4-異丙氧基苯甲酰胺(S)-3-氯-N-(1-(2-(二甲基氨基)乙酰酰氨基-3-(4-(8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基)丙烷-2-基)-4-異丙氧基苯甲酰胺3-氯-N-((S)-(1-(2-(二甲基氨基)乙酰酰氨基-3-(4-(8-羥乙基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基)丙烷-2-基)-4-異丙氧基苯甲酰胺3-氰基-N-((1S)-3-羥基-1-{[4-(8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}丙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺；3-氯-N-[(1S)-3-羥基-1-({4-[8-(1-羥乙基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}丙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-[(1S)-2-[(N，N-二甲基甘氨酰基(glycyl)氨基]-1-({4-[8-(1-羥乙基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基}甲基)乙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺N-((1S)-2-(D-丙氨酰基(alanyl)氨基)-1-{[4-(8溴咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}乙基)-3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-[(1S)-2-[(2-甲基丙氨?；?氨基]-1-{[4-(8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}乙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-[(1S)-2-[(N，N-二甲基甘氨?；?氨基]-1-{[4-(8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}乙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺N-[(1R)-4-氨基-1-{[4-(8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}-4-氧代丁基)-3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺N-((1R)-{[4-(2-乙酰基-1-甲基-1H-咪唑-4-基)苯基]甲基}-4-氨基-4-氧代丁基)-3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氰基-N-[(1S)-3-羥基-1-({4-[8-(1-羥乙基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基}甲基)丙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-((1S)-3-羥基-1-{[4-(8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}丙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氰基-N-[(1S)-2-[(N，N-二甲基甘氨酰基)氨基]-1-({4-[8-(1-羥乙基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基}甲基)乙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氰基-N-((1S)-2-[(N，N-二甲基甘氨?；?氨基]-1-{[4-(8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}乙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺；N-((1R)-{[4-(2-乙?；?1-甲基-1H-咪唑-4-基)苯基]甲基}-4-氨基-4-氧代丁基)-3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺N-[(1R)-4-氨基-1-({4-[2-(1-羥基-1-甲基乙基)-1-甲基-1H-咪唑-4-基]苯基}甲基)-4-氧代丁基]-3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺N-((1S)-2-(D-丙氨?；被?-1-({4-[1-(2-氨基乙基)-2-(1，1-二甲基乙基)-1H-咪唑-4-基]苯基}甲基)乙基]-3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺N-((1S)-2-{4-[1-(2-氨基乙基)-2-(1，1-二甲基乙基)-1H-咪唑-4-基]苯基}-1-{[2-(甲基丙氨?；?氨基]甲基}乙基)-3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺N-((1S)-2-{4-[1-(2-氨基乙基)-2-(1，1-二甲基乙基)-1H-咪唑-4-基]苯基}-1-{[(羥基乙?；?氨基]甲基}乙基)-3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺N-((1S)-2-{4-[1-(2-氨基乙基)-2-(1，1-二甲基乙基)-1H-咪唑-4-基]苯基}-1-{[(2-甲基丙氨酰基)氨基]甲基}乙基)-3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺N-((1S)-2-{4-[1-(2-氨基乙基)-2-(1，1-二甲基乙基)-1H-咪唑-4-基]苯基}-1-{[(N，N-二甲基甘氨?；?氨基]甲基}乙基)-3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-[(1S)-2-{4-[8-(1-羥乙基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基}-1-({[(2R)-2-羥基丙?；鵠氨基}甲基)乙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺N-((1S)-2-[(4-氨基羰基)氨基]-1-{[4-(8-溴咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}乙基)-3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺N-{(1S)-2-[4-(8-溴咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]-1-[(2-氧代四氫-1(2H)-嘧啶基)甲基]乙基}-3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺N-{(1S)-2-[4-(8-溴咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]-1-[(2-氧代四氫-1H-1，3-二氮雜環(huán)庚烷-1-基)甲基]乙基}-3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺N-((1S)-2-[(氨基碳硫?；?氨基]-1-{[4-(8-溴咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}乙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺2-(4-{(2S)-2-[({3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}羰基)氨基]-3-[(1，2，3-噻二唑-4-基羰基)氨基]丙基}苯基)咪唑并[1，2-a]吡啶-8-甲酰胺N-((1S)-2-[(氨基磺?；?氨基]-1-{[4-(8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}乙基)-3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺(3S)-3-[({3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}氨基]-4-{4-[2-(1，1-二甲基乙基)-1-甲基-1H-咪唑-4-基]苯基}丁酸N-[(1S)-2-[(氨基磺酰基)氨基]-1-({4-[2-(1，1-二甲基乙基)-1-甲基-1H-咪唑-4-基]苯基}甲基)乙基]-3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺N-((1S)-1-{[4-(1H-苯并咪唑-2-基)苯基]甲基}-3-羥丙基)-3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-[(1S)-3-羥基-1-({4-[5-(三氟甲基)-1H-苯并咪唑-2-基]苯基}甲基)丙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-((1S)-1-{[4-(5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基)苯基]甲基}-3-羥丙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-[(1S)-3-羥基-1-({4-[5-(甲氧基)-1H-苯并咪唑-2-基]苯基}甲基)丙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-((1S)-1-{[4-(5-氯-1H-苯并咪唑-2-基)苯基]甲基}-3-羥丙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-((1S)-1-{[4-(4-甲基-1H-苯并咪唑-2-基)苯基]甲基}丙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-((1S)-1-{[4-(6-氯-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基)苯基]甲基}-3-羥丙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺2-(4-{(2S)-2-[({3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}羰基)氨基]-4-羥丁基}苯基)-1H-苯并咪唑-5-羧酸乙酯2-(4-{(2S)-2-[({3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}羰基)氨基]-4-羥丁基}苯基)-1H-苯并咪唑-5-羧酸N-((1S)-3-氨基-1-{[4-(1H-苯并咪唑-2-基)苯基]甲基}丙基)-3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氰基-N-((1S)-1-([4-(8-氰基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基])甲基}-3-羥丙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺N-((1S)-1-{[4-(8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}-3-羥丙基)-3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氰基-N-[(1S)-3-羥基-1-({4-[8-(三氟甲基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基}甲基)丙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氰基-N-((1S)-3-羥基-1-{[4-(8-羥基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}丙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺2-(4-{(2S)-2-[({3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}羰基)氨基]-4-羥丁基}苯基)咪唑并[1，2-a]吡啶-7-甲酰胺2-(4-{(2S)-2-[({3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}羰基)氨基]-4-羥丁基}苯基)咪唑并[1，2-a]吡啶-7-羧酸乙酯3-氰基-N-((1S)-3-羥基-1-{[4-(8-硝基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}丙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺N-((1S)-1-{[4-(8-氨基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}-3-羥丙基)-3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺2-(4-{(2S)-2-[({3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}羰基)氨基]-4-羥丁基}苯基)咪唑并[1，2-a]吡啶-8-甲酰胺3-氰基-N-[(1S)-3-羥基-1-({4-(8-羥基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基}甲基)丙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺N-[(1S)-1-({4-(8-氨基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基}甲基)-3-羥丙基]-3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺N-((1S)-1-{[4-(8-乙酰基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}-3-羥丙基)-3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氰基-N-[(1S)-3-羥基-1-({4-[8-(1-羥基-1-甲基乙基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基}甲基)丙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氰基-N-[(1S)-3-羥基-1-({4-[8-(1-羥基乙基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基}甲基)丙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氰基-N-[(1S)-3-羥基-1-{[4-(8-甲基-5，6，7，8-四氫咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}丙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氰基-N-[(1S)-({4-[2-(1，1-二甲基乙基)-1-(2-羥乙基)-1H-咪唑-4-基]苯基}甲基)-3-羥丙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺N-[(1S)-1-({4-[1-[2-(乙?；被?乙基]-2-(1，1-二甲基乙基)-1H-咪唑-4-基]苯基}甲基)-3-羥丙基)-3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氰基-N-{(1S)-3-羥基-1-[(4-{8-[(1R)-1-羥乙基]咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基}苯基)甲基]丙基}-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氰基-N-{(1S)-3-羥基-1-[(4-{8-[(1S)-1-羥乙基]咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基}苯基)甲基]丙基}-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-[(1S)-3-羥基-1-({4-[8-(1-羥丙基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基}甲基)丙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺N-[(1S)-1-{[4-(8-溴咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}-3-羥丙基]-3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-((1S)-1-{[4-(8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}-3-羥丙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-[(1S)-3-羥基-1-({4-[8-(1-羥基-2-甲基丙基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基}甲基)丙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺N-[(1R)-4-氨基-1-({4-[8-(1-羥乙基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基}甲基)-4-氧代丁基]-3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺N-[(1R)-4-氨基-1-({4-[8-(1-羥乙基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基}甲基)-4-氧代丁基]-3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-((1S)-1-{[4-(3-氟-8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}-3-羥丙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氰基-N-[(1S)-1-{[4-(3-氟-8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}-3-羥丙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-((1S)-2-羥基-1-{[4-(8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}-乙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]-N-[(1S)-2-[4-(8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]-1-(4-嗎啉基甲基)乙基]苯甲酰胺3-氯-N-((1S)-2-(4-羥基-1-哌啶基)-1-{[4-(8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}乙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-((1S)-2-(3-氟-1-吡咯烷基)-1-{[4-(8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}乙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-((1S)-2-[(2S)-2-羥甲基-1-吡咯烷基)-1-{[4-(8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}乙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-((1S)-2-[(2R)-2-羥甲基-1-吡咯烷基)-1-{[4-(8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}乙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]-N-((1S)-2-[4-(8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]-1-{[(2，2，2-三氟乙基)氨基]甲基}乙基)苯甲酰胺3-氯-N-((1S)-2-[(2-羥乙基)氨基]-1-{[4-(8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}乙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氰基-N-((1S)-{[4-(8-乙基-5-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}-3-羥丙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺(3S)-3-[({3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}羰基)氨基]-4-{4-[(苯基羰基)氨基]苯基}丁酮甲酯3-氯-N-[(1S)-3-羥基-1-({4-[(苯基羰基)氨基]苯基}甲基)丙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-{(1S)-1-[(4-{[(4-氯苯基)羰基]氨基}苯基)甲基]-3-羥丙基}-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺(4-{(2S)-2-[({3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}羰基)氨基]-4-羥丁基}苯基)胺甲酸苯基甲酯3-氯-N-((1S)-3-羥基-1-{[4-({[2-(甲氨基)苯基]羰基}氨基)苯基]甲基}丙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺N-(4-{(2S)-2-[({3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}羰基)氨基]-4-羥丁基}苯基)-4-吡啶羧酰胺3-氯-N-[(1S)-1-({4-[(環(huán)己基羰基)氨基]苯基}甲基)-3-羥丙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-[(1S)-({4-[(3，3-二甲基丁?；?氨基]苯基}甲基)-3-羥丙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-[(1S)-3-羥基-1-({4-[(苯基乙酰基)氨基]苯基}甲基)丙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-{(1S)-3-羥基-1-[(4-{[(苯基氨基)羰基]氨基}苯基)甲基]丙基}-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氰基-N-((1S)-3-羥基-1-{[4-(8-甲基-5-氧代-5，6-二氫咪唑并[1，2-c]嘧啶-2-基)苯基]甲基}丙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氰基-N-((1S)-3-羥基-1-{[4-(1-甲基-3-氧代-2，3-二氫-1H-咪唑并[1，2-a]咪唑-6-基)苯基]甲基}丙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氰基-N-((1S)-3-羥基-1-{[4-(8-氧代-7，8-二氫咪唑并[1，2-c]吡嗪-2-基)苯基]甲基}丙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺2，3-二氯-N-((1S)-3-羥基-1-{[4-(8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}丙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺N-((1S)-3-羥基-{[4-(8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}丙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]-3-硝基苯甲酰胺3-氯-N-[(1S)-2-[(羥基乙?；?氨基]-1-({4-[8-(1-羥乙基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基}甲基)乙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-[(1S)-2-{4-[8-(1-羥基乙基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基}-1-({[(2R)-2-羥基丙?；鵠氨基}甲基)乙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-[(1S)-2-{4-[8-(1-羥基乙基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基}-1-({[(2S)-2-羥基丙?；鵠氨基}甲基)乙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-[(1S)-2-[(N，N-二甲基甘氨?；?氨基]-1-({4-[8-(1-羥乙基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基}甲基)乙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺N-[(1S)-2-(D-丙氨?；被?-1-({4-[8-(1-羥乙基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基}甲基)乙基]-3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-[(1S)-3-羥基-1-({4-[8-(1-羥乙基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基}甲基)丙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-((1S)-2-{4-[8-(1-羥乙基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基}-1-{[(2-甲基丙氨?；?氨基]甲基}乙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺(3S)-3-[({3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}羰基)氨基]-4-{4-[(苯基羰基)氨基]苯基}丁酸3-氯-N-{(1S)-3-羥基-1-{(4-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-基苯基)甲基}丙基}-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-[(1S)-1-({4-[2-(1，1-二甲基乙基)咪唑并[1，2-a]吡啶-6-基]苯基}甲基)-3-羥丙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-{(1S)-3-羥基-1-[(4-咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基苯基)甲基]丙基}-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-{(1S)-3-羥基-1-[(4-咪唑并[1，2-a]嘧啶-2-基苯基)甲基]丙基}-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-((1S)-3-羥基-1-{[4-(5-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}丙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-((1S)-3-羥基-1-{[4-(7-甲基咪唑并[1，2-a]嘧啶-2-基)苯基]甲基}丙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氰基-N-{(1S)-3-羥基-1-[(4-咪唑并[2，1-b][1，3]噻唑-6-基苯基)甲基]丁基}-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氰基-N-((1S)-3-羥基-1-{[4-(3-甲基咪唑并[2，1-b][1，3]噻唑-6-基)苯基]甲基}丁基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氰基-N-((1S)-1{[4-(2，3-二氫咪唑并[2，1-b][1，3]噻唑-6-基)苯基]甲基}-3-羥丁基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氰基-N-((1S)-1-{[4-(1，1-dioxido-2，3-二氫咪唑并[2，1-b][1，3]噻唑-6-基)苯基]甲基}-3-羥丁基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺N-[(1S)-1-({4-[1-(3-氨基丙基)-2-(1，1-二甲基乙基)-1H-咪唑-4-基]苯基}甲基)-3-羥丙基]-3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]-N-[(1S)-2-[4-(8-甲基咪唑并[2，1-a]吡啶-2-基)苯基]-1-(5-甲基-1，2，4-噁二唑-3-基)乙基]苯甲酰胺3-氰基-N-[(1S)-1-({4-[8-(3，5-二甲基-4-異噁唑基)咪唑并[2，1-a]吡啶-2-基]苯基}甲基)-3-羥丙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氰基-N-((1S)-3-羥基-1-{[4-[8-苯基咪唑并[2，1-a]吡啶-2-基]苯基]甲基}丙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氰基-N-[(1S)-3-羥基-1-({4-[8-(1H-吡唑-4-基)咪唑并[2，1-a]吡啶-2-基]苯基}甲基)丙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氰基-N-[(1S)-3-羥基-1-({4-[8-(4-異噁唑基)咪唑并[2，1-a]吡啶-2-基]苯基}甲基)丙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺N-((1S)-1-{[4-[8-乙?；溥虿2，1-a]吡啶-2-基]苯基]甲基}-3-羥丙基)-3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺(2E)-3-[2-(4-{(2S)-2-[({3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}羰基)氨基]-4-羥丁基}苯基)咪唑并[2，1-a]吡啶-8-基]-2-丙烯酸乙酯(2E)-3-[2-(4-{(2S)-2-[({3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}羰基)氨基]-4-羥丁基}苯基)咪唑并[2，1-a]吡啶-8-基]-2-丙烯酸N-{(1S)-1-[(4-{8-[(1E)-氨基-3-氧代-1-丙烯-1-基]咪唑并[2，1-a]吡啶-2-基}苯基)甲基]-3-羥丙基}-3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺N-[(1S)-1-({4-[8-(3-氨基-3-氧代丙基)咪唑并[2，1-a]吡啶-2-基]苯基}甲基)-3-羥丙基]-3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-((1S)-1-{[4-(3-氯-8-甲基咪唑并[2，1-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}-3-羥丙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺N-((1S)-1-{[4-(3-氯-8-甲基咪唑并[2，1-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}-3-羥丙基)-3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氰基-N-[(1S)-({3-氟-4-[2-(1-羥基-1-甲基乙基)-1-甲基-1H-咪唑-4-基]苯基}甲基)-3-羥丙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-((1S)-2-羥基-1-{[5-(8-甲基咪唑并[2，1-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}乙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-((1S)-2-羥基-1-{[5-(8-甲基咪唑并[2，1-a]吡啶-2-基)吩基]甲基}乙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-[(1S)-1-({4-[2-(1，1-二甲基乙基)-1-甲基-1H-咪唑-4-基]-2-氟苯基}甲基)-3-羥丙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-[(1S)-1-({4-[2-(1，1-二甲基乙基)-1-甲基-1H-咪唑-4-基]-2，6-二氟苯基}甲基)-3-羥丙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-[(1S)-1-({2-氯-4-[2-(1，1-二甲基乙基)-1-甲基-1H-咪唑-4-基]苯基)甲基)-3-羥丙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-[(1S)-1-({5-[2-(1，1-二甲基乙基)-1-甲基-1H-咪唑-4-基]-2-吡啶基}甲基)-3-羥丙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-((1S)-1-{[2-氯-4-(8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}-3-羥丙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-((1S)-1-{[2-氯-4-(8-氯咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}-3-羥丙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-((1S)-{[2，5-二氟-4-(8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}-3-羥丙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-((1S)-{[3-氯-4-(8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}-3-羥丙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-[(1S)-({4-[2-(1，1-二甲基乙基)-1-甲基-1H-咪唑-4-基]苯基}甲基)-3-(甲氨基)-3-氧代丙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氰基-N-[(1S)-2-{4-[2-(1，1-二甲基乙基)-1-甲基-1H-咪唑-4-基]苯基}-1-({[(苯基氨基)羰基]氨基}甲基)乙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氰基-N-[(1S)-2-{4-[2-(1，1-二甲基乙基)-1-甲基-1H-咪唑-4-基]苯基}-1-({[(乙氨基)羰基]氨基}甲基)乙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺N-[(1S)-2-(4-氨基磺?；?-1-({4-[2-(1，1-二甲基乙基)-1-甲基-1H-咪唑-4-基]苯基}甲基)乙基]-3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氰基-N-((1S)-2-{4-[2-(1，1-二甲基乙基)-1-甲基-1H-咪唑-4-基]苯基}-1-({[(甲基磺?；?氨基]甲基}乙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氰基-N-{(1S)-2-{4-[2-(1，1-二甲基乙基)-1-甲基-1H-咪唑-4-基]苯基}-1-[({[(2-羥乙基)氨基]羰基}氨基)甲基]乙基}-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺N-[(S)-1-[4-(2-叔丁基-1-甲基-1H-咪唑-4-基)-芐基]-2-(2-甲氧基-乙酰基氨基)-乙基]-3-氰基-4-異丙氧基-苯甲酰胺(4R)-4-[({3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}羰基)氨基]-5-{4-[2-(1，1-二甲基乙基)-1-甲基-1H-咪唑-4-基]苯基}戊酸N-((1S)-2-氨基-1-{[4-(8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}乙基)-3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺N-((1S)-2-(乙?；被?-1-{[4-(8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}乙基)-3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-((1S)-2-{[(2R)-2-羥基丙?；鵠氨基}-1-{[4-(8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}乙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-[(1S)-2-[(N，N-二甲基甘氨?；?氨基]-1-({4-[2-(1-羥基-1-甲基乙基)-1-甲基-1H-咪唑-4-基]苯基}甲基)乙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氰基-N-[(1S)-2-[(N，N-二甲基甘氨?；?氨基]-1-({4-[2-(1-羥基-1-甲基乙基)-1-甲基-1H-咪唑-4-基]苯基}甲基)乙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-((S)-4-羥基-1-(4-(1-甲基-2-((R)-1-(2-氧代吡咯烷-1-基)乙基)-1H-咪唑-4-基)苯基)丁烷-2-基)-4-異丙氧基苯甲酰胺3-氯-N-((S)-4-羥基-1-(4-(1-甲基-2-((R)-1-(2-氧代吡咯烷-1-基)乙基)-1H-咪唑-4-基)苯基)丁烷-2-基)-(1，1，1-三氟丙烷-2-基氧基)苯甲酰胺3-氯-N-((S)-4-羥基-1-(4-(1-甲基-2-((R)-1-(2-氧代噁唑烷-3-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)丁烷-2-基)-4-異丙氧基苯甲酰胺3-氯-N-((S)-4-羥基-1-(4-(1-甲基-2-((R)-1-(2-氧代噁唑烷-3-基)乙基)-1H-咪唑-4-基)苯基)丁烷-2-基)-(1，1，1-三氟丙烷-2-基氧基)苯甲酰胺。特別化合物包括顯示于下表中的那些表2表3表4表5表6在一些具體實(shí)施方案中，化學(xué)品是列于表1、2、3、4、5或6中化合物之一的前藥，如磷酸酯。在一些具體實(shí)施方案中，該化學(xué)品是選自(3S)-4-[4-(2-乙酰基-1-甲基-1H-咪唑-4-基)苯基]-3-[({3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}羰基)氨基]丁基二氫磷酸酯；及(3S)-3-[({3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}羰基)氨基]-4-[4-(8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)-芐基]丁基二氫磷酸酯。在此敘述之化學(xué)品可通過(guò)例如在PCTWO99/13061、US專(zhuān)利6,420,561號(hào)及PCTWO98/56756中描述的方法來(lái)制備，這些文獻(xiàn)在此并于本文作為參考。起始物質(zhì)及其他反應(yīng)物為商業(yè)可獲得的，例如AldrichChemicalCompany，Wilwaukee，WI，或是本領(lǐng)域技術(shù)人員使用一般所用合成方法而容易制備。除非另外說(shuō)明，術(shù)語(yǔ)“溶劑”、“惰性有機(jī)溶劑”或“惰性溶劑”是指在相關(guān)描述的反應(yīng)條件下為惰性的溶劑，例如包括苯、甲苯、乙腈、四氫呋喃(″THF″)、二甲基甲酰胺(″DMF″)、氯仿、二氯甲烷(或甲叉二氯)、乙醚、甲醇、吡啶等。除非有相反的說(shuō)明，用于本發(fā)明的反應(yīng)中的溶劑是惰性有機(jī)溶劑。一般而言，羧酸的酯可以通過(guò)常規(guī)酯化方法來(lái)制備，例如烷基酯可以通過(guò)用適宜的鏈烷醇，通常在酸性條件下處理所需的羧酸來(lái)制備。同樣，酰胺可以使用常規(guī)酰胺化方法來(lái)制備，例如酰胺可以通過(guò)用適宜的胺處理相關(guān)的羧酸來(lái)制備。或者，可以任選在三甲基鋁存在下，根據(jù)TetrahedronLett.48，4171-4173，1977所述的方法，用胺處理諸如酸的甲酯的低級(jí)烷基酯，得到所需的酰胺。羧基可以以烷基酯如甲酯的形式得到保護(hù)，所述的酯可以用常規(guī)的方法制備和除去，一種用于將甲酯基轉(zhuǎn)化成羧基的方便的方法是使用氫氧化鋰水溶液。本文提及的鹽類(lèi)和溶劑化物可以根據(jù)需要用本領(lǐng)域中的常規(guī)方法生產(chǎn)。例如，如果本發(fā)明的化合物為酸，則可以通過(guò)用無(wú)機(jī)或有機(jī)堿，如胺(伯、仲或叔)、堿金屬或堿土金屬氫氧化物等處理游離酸來(lái)制備所需的堿加成鹽。適宜的鹽的例示性實(shí)例包括由以下物質(zhì)衍生的有機(jī)鹽氨基酸如甘氨酸和精氨酸；氨；伯、仲和叔胺；如乙二胺，和環(huán)胺如環(huán)己胺、哌啶、嗎啉和哌嗪；以及由鈉、鈣、鉀、鎂、錳、鐵、銅、鋅、鋁和鋰衍生的無(wú)機(jī)鹽。如果化合物為堿，則所需的酸加成鹽可以通過(guò)本領(lǐng)域中已知的任何適宜的方法制備，包括用無(wú)機(jī)酸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等，或者用有機(jī)酸如乙酸、馬來(lái)酸、琥珀酸、苦杏仁酸、富馬酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、乙醇酸、水楊酸、吡喃糖苷酸如葡糖醛酸或半乳糖醛酸、α-羥基酸如檸檬酸或酒石酸、氨基酸如天門(mén)冬氨酸或谷氨酸、芳族酸如苯甲酸或肉桂酸、磺酸如對(duì)甲苯磺酸、甲磺酸、乙磺酸等處理游離堿。如果需要的話，本文所述的化合物和中間體的分離和純化可以通過(guò)任何適宜的分離或純化方法來(lái)實(shí)現(xiàn)，例如過(guò)濾、萃取、結(jié)晶、柱色譜法、薄層色譜法或厚層色譜法或者這些方法的組合?？梢詤⒖急疚囊韵碌膶?shí)施例來(lái)具體例示適宜的分離方法。但是，其它等同的分離方法當(dāng)然也可以使用。反應(yīng)流程1參考反應(yīng)流程1、步驟1，對(duì)在如DCM之惰性溶劑中的式103化合物溶液，在0℃下添加過(guò)量(如約1.2當(dāng)量)的五氟三氟醋酸酯及如三乙基胺的堿。反應(yīng)混合物被攪拌約1小時(shí)。產(chǎn)物式105化合物被分離及純化。參考反應(yīng)流程1、步驟2，對(duì)在極性非質(zhì)子溶劑中的式105化合物溶液，添加過(guò)量(如約1.2當(dāng)量)的式R7(CO)-CH(NHR2)-CH(R5)(R6)化合物及如N，N-二異丙基乙基胺的堿。反應(yīng)以例如LC/MS監(jiān)測(cè)，產(chǎn)生式107化合物，其中R7為NH2，其被分離并且任選地被純化。反應(yīng)流程2參考反應(yīng)流程2，對(duì)在如DMF之極性非質(zhì)子溶劑中的式201化合物溶液，在室溫下添加過(guò)量(如約1.2當(dāng)量)的式105化合物及如二異丙基乙基胺的堿。反應(yīng)混合物以例如LC/MS監(jiān)測(cè)。在完成時(shí)，在如THF之惰性溶劑中的一級(jí)或二級(jí)胺及HBTU被添加到反應(yīng)溶液中。反應(yīng)混合物被攪拌約2天。產(chǎn)物式203化合物被分離并且純化，其中R7為任選取代的胺。在一些具體實(shí)施方案中，式203化合物中的R6為鹵化物、烷基鹵化物或芳基鹵化物。此鹵化物可使用各種反應(yīng)、使用本領(lǐng)域中已知及在另于下列實(shí)施例中敘述的技術(shù)，轉(zhuǎn)化成各種其他取代基。在其他具體實(shí)施方案中，式203化合物中之R6為烷基或芳基胺。再者，胺部分可使用此藝中已知及在另于下列敘述的技術(shù)，被烷化、?；⑥D(zhuǎn)化成磺酰胺及類(lèi)似物。在另外具體實(shí)施方案中，式203化合物中之R6為烷基醇或芳基醇。羥基部分可使用此藝中已知的技術(shù)，轉(zhuǎn)化成相對(duì)應(yīng)的醚或酯。反應(yīng)流程3參考反應(yīng)流程3，對(duì)在如DMF之極性非質(zhì)子溶劑中的式301化合物溶液，添加甘氨酰胺鹽酸鹽、如二異丙基乙基胺的堿及HBTU。反應(yīng)混合物被攪拌約15小時(shí)。產(chǎn)物式303化合物被分離并且純化。反應(yīng)流程4參考反應(yīng)流程4，對(duì)在如THF之惰性溶劑中的式401化合物攪拌溶液，其中n為0、1或2，在約0℃下添加過(guò)量(如約1.2當(dāng)量)的LAH(在THF中之1.0摩爾濃度)。在攪拌約2小時(shí)之后，產(chǎn)物式403化合物被分離并且被使用而無(wú)進(jìn)一步純化。參考反應(yīng)流程4、步驟2，對(duì)在如THF之惰性溶劑中的式403化合物攪拌溶液，添加過(guò)量(如約1.1當(dāng)量)的異吲哚-1，3-二酮及三苯基膦。然后逐滴添加過(guò)量(如約1.1當(dāng)量)的DEAD，并且反應(yīng)被攪拌約30分鐘。產(chǎn)物，式405化合物被分離并且純化。參考反應(yīng)流程4、步驟3，然后Boc保護(hù)基團(tuán)被移除，形成相對(duì)應(yīng)的游離胺。本領(lǐng)域技術(shù)人員會(huì)明白此必須以留下其他經(jīng)保護(hù)胺完整的方式完成。例如在室溫下對(duì)在如DCM之極性非質(zhì)子溶劑中的式405化合物溶液，添加如TFA的酸。反應(yīng)混合物被攪拌約20分鐘。產(chǎn)物式407化合物被分離并且被使用而無(wú)進(jìn)一步純化。參考反應(yīng)流程4、步驟4，在室溫下對(duì)在如DMF之惰性溶劑中的式407化合物溶液，添加式105化合物及如二異丙基乙基胺的堿。反應(yīng)混合物被攪拌過(guò)夜。產(chǎn)物式409化合物被分離并且純化。參考反應(yīng)流程4、步驟5，然后PG胺保護(hù)基團(tuán)被移除。若胺保護(hù)基團(tuán)PG為鄰苯二甲硫亞胺，其可如下被移除。對(duì)在如甲醇之極性質(zhì)子溶劑中的式409化合物溶液，添加過(guò)量(如約10當(dāng)量)的水合肼。反應(yīng)混合物在約50℃下被攪拌約5小時(shí)，并且然后冷卻到室溫。移除其他保護(hù)基團(tuán)的條件對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員為已知的。式411化合物的游離胺可使用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的技術(shù)被烷化、?；?、還原性烷化或磺?；?。反應(yīng)流程5在本發(fā)明的某些化合物中，特別的立體構(gòu)型對(duì)式I-XIII化合物可為優(yōu)選的。為對(duì)式I-XIII化合物合成之所余敘述簡(jiǎn)化的緣故，必須了解可使用單一異構(gòu)體或異構(gòu)體的混合物以產(chǎn)生相對(duì)應(yīng)產(chǎn)物。特別的立體異構(gòu)體可從混合物中使用本領(lǐng)域已知之技術(shù)獲得。例如一些具體實(shí)施方案中，式605游離胺被溶解于惰性溶劑中(如IPA)并且加溫到60℃。在分別的容器中，拆分劑(如二苯甲?；?D-酒石酸)被溶解在如相同加溫的溶劑中，并且然后快速添加(有攪拌)到加溫的胺溶液中。反應(yīng)混合物被留下連續(xù)攪拌16小時(shí)，以冷卻到室溫而結(jié)晶。所要之異構(gòu)體被分離并且以通常的方式純化。在一些具體實(shí)施方案中，式607之光學(xué)活性胺可從相對(duì)應(yīng)的芳基醛制備，如反應(yīng)流程5所示。參考反應(yīng)流程5、步驟1，在硝基乙烷中之式601化合物及過(guò)量醋酸銨溶液，被加熱至約回流約8小時(shí)。產(chǎn)物式603化合物被分離并且任選被純化。參考反應(yīng)流程5、步驟2，對(duì)在如四氫呋喃之惰性溶劑中、如硼氫化鈉之還原劑的約0℃溶液，添加過(guò)量(如約1.2當(dāng)量)的硼烷-四氫呋喃復(fù)合物。所得溶液在室溫下攪拌約15分鐘。在如四氫呋喃之惰性溶劑中的式603化合物被逐滴添加，并且所得溶液被回流約4小時(shí)。產(chǎn)物式605化合物被分離并且任選被純化。然后式605胺可使用本領(lǐng)域已知之技術(shù)被拆分。例如在如醋酸乙酯之惰性溶劑中的式605胺0℃溶液，以氫氯酸(氣體)飽和。所得鹽以過(guò)濾收集并且在真空中干燥。L-N-乙?；涟匪徕c鹽被緩慢添加到在水中的前述攪拌溶液。過(guò)夜形成結(jié)晶，并且以過(guò)濾移除、以小量水洗滌，并且從絕對(duì)甲醇中結(jié)晶。式607a的結(jié)晶鹽被分離并且任選被純化。富含式607b化合物的母液被混合、成強(qiáng)堿性，并且以二乙醚洗滌三次。經(jīng)合并的有機(jī)層以水洗滌，并且在硫酸鈉上干燥。氫氯酸通過(guò)溶液，直到鹽酸鹽沉淀完全。上述之相同步驟被用于D-N-乙酰基亮胺酸鹽。式607b之結(jié)晶化合物被分離并且任選被純化。反應(yīng)流程6參考反應(yīng)流程6、步驟1，對(duì)在如甲醇之極性質(zhì)子溶劑中的式701化合物溶液，添加過(guò)量(如約2當(dāng)量)的SOCl2。在室溫下攪拌過(guò)夜之后，產(chǎn)物式703化合物被分離并且被使用而無(wú)進(jìn)一步純化。參考反應(yīng)流程6、步驟2，對(duì)在如乙醇之極性質(zhì)子溶劑中的式703化合物溶液，添加過(guò)量(如約5當(dāng)量)的N2H4·H2O。反應(yīng)混合物被加熱至回流，并且攪拌約3小時(shí)。在冷卻時(shí)，產(chǎn)物式705化合物被分離并且純化。參考反應(yīng)流程6、步驟3，對(duì)在如THF之惰性溶劑中的式705化合物溶液，添加過(guò)量(如約1.1當(dāng)量)的羰基二咪唑。反應(yīng)混合物被加熱至回流，并且攪拌約1.5小時(shí)。在冷卻時(shí)，產(chǎn)物式707化合物被分離并且純化。參考反應(yīng)流程6、步驟4，對(duì)在如腈之惰性溶劑中的式707化合物溶液，添加過(guò)量(如約1.1當(dāng)量)的R5R6CH-Z及如K2CO3的堿，其中Z為離去基團(tuán)。反應(yīng)混合物在微波輻射下被加熱約30分鐘至約80℃，續(xù)以過(guò)濾并且在真空中濃縮。產(chǎn)物式709化合物被分離并且任選被純化。參考反應(yīng)流程6、步驟5，對(duì)在如THF之惰性溶劑中的式709化合物溶液，添加過(guò)量一級(jí)胺。反應(yīng)混合物在微波輻射下被加熱約4小時(shí)至約100℃。產(chǎn)物式711化合物被分離并且純化。反應(yīng)流程7參考反應(yīng)流程7、步驟1，使用本領(lǐng)域已知并且如下在實(shí)施例中進(jìn)一步描述的方法活化鋅粉在無(wú)水且脫氣的極性非質(zhì)子溶劑如DMF中的懸浮體。在氮?dú)庀聦?，2-二溴乙烷添加至該鋅粉溶液中。使用加熱槍將該混合物加熱約30秒，直至氣體開(kāi)始由溶液中產(chǎn)生，表明鋅的活化。使該混合物冷卻至室溫，隨后添加TMSCl，然后在室溫下攪拌30分鐘。向該鋅溶液內(nèi)添加式701化合物在無(wú)水且脫氣的極性非質(zhì)子溶劑如DMF中的溶液內(nèi)，并且該反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。702的溶液用于下一步中。參考反應(yīng)流程7、步驟2，向702的溶液內(nèi)添加式703化合物在無(wú)水且脫氣的極性非質(zhì)子溶劑如DMF中的溶液、以及鈀催化劑和配體如Pd2(dba3)、和三鄰甲苯基膦。反應(yīng)混合物攪拌3小時(shí)。產(chǎn)物式704化合物被分離并且純化。制備后，本發(fā)明的化學(xué)品可用于各種涉及改變有絲分裂的應(yīng)用中。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解的是，有絲分裂可通過(guò)多種方法來(lái)改變；也就是說(shuō)，可通過(guò)增加或者降低有絲分裂途徑中的組分的活性來(lái)改變。不同的是，有絲分裂可通過(guò)抑制或者活化某些組分干擾其平衡來(lái)影響(如被破壞)。類(lèi)似的方法也可用于改變減數(shù)分裂。在一些具體實(shí)施方案中，本發(fā)明的化學(xué)品用于抑制有絲分裂紡錘體的形成，由此導(dǎo)致延長(zhǎng)有絲分裂中細(xì)胞周期休止。在此所用術(shù)語(yǔ)“抑制”是指降低或者干擾有絲分裂紡錘體的形成或者使有絲分裂紡錘體發(fā)生功能障礙。在此所用術(shù)語(yǔ)“有絲分裂紡錘體的形成”是指通過(guò)有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白將微管組合成雙極結(jié)構(gòu)。在此所用術(shù)語(yǔ)“有絲分裂紡錘體功能障礙”是指有絲分裂停止。本發(fā)明的化學(xué)品可用于與有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白結(jié)合和/或抑制其活性。在一個(gè)實(shí)施方案中，有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白是人的有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白，但也可使化合物結(jié)合或者抑制來(lái)源于其他生物體的有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白。在本發(fā)明中，“抑制”是指增加或者降低紡錘極分離，導(dǎo)致有絲分裂紡錘極的畸形(如張開(kāi))，或者對(duì)有絲分裂紡錘體產(chǎn)生形態(tài)干擾。為此目的，有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白的定義中還包括此等蛋白的變體和/或片段，更特別是此蛋白的運(yùn)動(dòng)域。本發(fā)明的化學(xué)品用于治療細(xì)胞增殖性疾病?？捎帽景l(fā)明的化學(xué)品治療的疾病狀態(tài)包括但不限于癌癥(進(jìn)一步如下所述)、自體免疫性疾病、真菌性疾病、關(guān)節(jié)炎、移植物排斥反應(yīng)、炎性腸疾病、醫(yī)療過(guò)程(包括但不限于手術(shù)、血管成形術(shù)等)誘發(fā)的增殖作用。治療包括抑制細(xì)胞增殖作用?？梢岳斫獾氖?，在某些情況下，細(xì)胞有可能不是處于異常狀態(tài)，而且仍需要治療。因此，在一些具體實(shí)施方案中，本發(fā)明包括應(yīng)用于罹患這些疾病之一的細(xì)胞或者個(gè)體或者防止其罹患這些疾病之一。本發(fā)明的化學(xué)品、組合物和方法對(duì)于治療癌癥被認(rèn)為是特別有用的，包括實(shí)體瘤，如皮膚、乳腺、腦、子宮頸癌、睪丸癌等。更具體而言，可治療的癌癥包括但不限于心肉瘤(血管肉瘤、纖維肉瘤、橫紋肌肉瘤、脂肉瘤)、粘液瘤、橫紋肌瘤、纖維瘤、脂瘤和畸胎瘤；肺支氣管癌(鱗狀細(xì)胞、未分化小細(xì)胞、未分化大細(xì)胞、腺癌)、肺泡(細(xì)支氣管)癌、支氣管腺瘤、肉瘤、淋巴瘤、軟骨錯(cuò)構(gòu)瘤、間皮瘤；胃腸道食管(鱗狀細(xì)胞癌、腺癌、平滑肌肉瘤、淋巴瘤)，胃(癌、淋巴瘤、平滑肌肉瘤)，胰(胰管腺癌、胰島瘤、高血糖素瘤、胃泌素瘤、類(lèi)癌瘤、胰腺瘤)，小腸(腺癌、淋巴瘤、類(lèi)癌瘤、卡波濟(jì)肉瘤、平滑肌瘤、血管瘤、脂瘤、神經(jīng)纖維瘤、纖維瘤)，大腸(腺癌、管腺瘤、絨毛腺瘤、錯(cuò)構(gòu)瘤、平滑肌瘤)；生殖泌尿道腎(腺癌、維爾姆斯腫瘤[腎胚細(xì)胞瘤]、淋巴瘤、白血病)，膀胱和尿道(鱗狀細(xì)胞癌、過(guò)渡細(xì)胞癌、腺癌)，前列腺(腺癌、肉瘤)，睪丸(精原細(xì)胞瘤、畸胎瘤、胚胎癌、畸胎癌、絨膜癌、肉瘤、間質(zhì)細(xì)胞癌、纖維瘤、纖維腺瘤、腺瘤樣腫瘤、脂瘤)；肝臟肝細(xì)胞瘤(肝細(xì)胞癌)、膽管癌、肝胚細(xì)胞瘤、血管肉瘤、肝細(xì)胞腺瘤、血管瘤；骨成骨肉瘤(骨肉瘤)、纖維肉瘤、惡性纖維組織細(xì)胞瘤、軟骨肉瘤、尤因肉瘤、惡性淋巴瘤(網(wǎng)狀細(xì)胞肉瘤)、多發(fā)性脊髓瘤、惡性巨細(xì)胞腫瘤脊索瘤、軟骨骨瘤(骨軟骨外生骨疣)、良性軟骨瘤、成軟骨細(xì)胞瘤、軟骨粘液纖維瘤、骨樣骨瘤和巨細(xì)胞腫瘤；神經(jīng)系統(tǒng)顱骨(骨瘤、血管瘤、肉芽瘤、黃瘤、畸形性骨炎)，腦膜(腦膜瘤、腦膜肉瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤病)，腦(星形細(xì)胞瘤、成神經(jīng)管細(xì)胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、室管瘤、胚組織瘤(松果體瘤)、多形性成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、少突神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤、神經(jīng)鞘瘤、成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤、先天性腫瘤)，脊索(神經(jīng)纖維瘤、腦膜瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、肉瘤)；婦科子宮(子宮腦膜癌)，子宮頸(子宮頸癌、腫瘤前子宮頸發(fā)育異常)，卵巢(卵巢癌[漿液囊腺癌、假粘液性囊腺癌、未分類(lèi)的癌]、粒層-膜細(xì)胞腫瘤、塞爾托利-萊迪希細(xì)胞腫瘤、無(wú)性細(xì)胞瘤、惡性畸胎瘤)，外陰(鱗狀細(xì)胞癌、上皮內(nèi)癌、腺癌、纖維肉瘤、黑素瘤)，陰道(透明細(xì)胞癌、鱗狀細(xì)胞癌、葡萄簇狀肉瘤[胚胎橫紋肌肉瘤])，輸卵管(癌)；血液血液(髓細(xì)胞樣白血病[急性和慢性]、急性成淋巴細(xì)胞性白血病、慢性淋巴細(xì)胞性白血病、骨髓及外骨髓增殖性疾病、多發(fā)性骨髓瘤、脊髓發(fā)育不良綜合癥)，何杰金病、非何杰金淋巴瘤(惡性淋巴瘤)；皮膚惡性黑素瘤、基底細(xì)胞癌、鱗狀細(xì)胞癌、卡波濟(jì)肉瘤、痣發(fā)育不良痣、脂瘤、血管瘤、皮膚纖維瘤、瘢痕瘤、牛皮癬；以及腺體成神經(jīng)細(xì)胞瘤。如在此所用，癌癥的治療包括癌細(xì)胞治療，包括受到任何一種如上所述的病癥影響的細(xì)胞。因此，在此所用術(shù)語(yǔ)“癌細(xì)胞”包括受到任何一種如上所述的病癥影響的細(xì)胞。本發(fā)明的另一個(gè)有用的方面是具有至少一種在此所述之化學(xué)品、及包裝插入物或其他標(biāo)簽的試劑盒，所述包裝插入物或其他標(biāo)簽包括通過(guò)給藥有效量的至少一種化學(xué)品來(lái)治療細(xì)胞增殖性疾病的指示。在本發(fā)明之試劑盒中的至少一種化學(xué)品是特別提供用做細(xì)胞增殖性疾病之治療期間的一或多個(gè)劑量，各劑量為包括藥物賦形劑及至少一種在此所述的化學(xué)品的藥物制劑。對(duì)于有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白調(diào)節(jié)活性的分析，有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白或者本發(fā)明的化學(xué)品通常非可擴(kuò)散地結(jié)合在不溶性載體上，該載體具有分開(kāi)的樣品接受區(qū)域(如微量滴定板、陣列(array)等)。不溶性載體可由任何本發(fā)明的化合物可結(jié)合于其上的材料制成，易于與可溶性材料分離，或者與總的篩選方法相配適。此等載體的表面可以是固體或者多孔性的，而且可以是任何形狀的。合適的不溶性載體的例子包括微量滴定板、陣列、膜和珠。這些材料通常是由玻璃、塑料(如聚苯乙烯)、多糖、尼龍或者硝基纖維素、TeflonTM等制成。微量滴定板和陣列是特別方便的，因?yàn)槭褂蒙倭康脑噭┖蜆悠房赏瑫r(shí)進(jìn)行大量的測(cè)試。本發(fā)明化合物的具體結(jié)合方式不是關(guān)鍵性的，只要其與試劑以及本發(fā)明的總方法相匹配，保持樣品的活性而且不可擴(kuò)散即可。優(yōu)選的結(jié)合方法包括使用抗體(當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)結(jié)合于載體上時(shí)，其不會(huì)立體地阻斷配體結(jié)合位點(diǎn)或者活化序列)，直接結(jié)合在“粘性”或者離子載體上，化學(xué)交聯(lián)，在表面上合成蛋白質(zhì)或藥物等。在結(jié)合蛋白質(zhì)或者藥物后，通過(guò)洗滌除去過(guò)量的未結(jié)合材料。樣品接受區(qū)域然后可通過(guò)與牛血清白蛋白(BSA)、酪蛋白、或者其他接種蛋白或者其他物質(zhì)保溫而被阻斷。本發(fā)明的化學(xué)品可單獨(dú)使用以抑制有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白的活性。在一些具體實(shí)施方案中，本發(fā)明的化學(xué)品與有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白混合，然后分析有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白的活性。驅(qū)動(dòng)蛋白的活性在本領(lǐng)域中是已知的，而且包括一種或者多種驅(qū)動(dòng)蛋白活性。驅(qū)動(dòng)蛋白活性包括影響ATP水解的能力；微管結(jié)合；滑行以及聚合/解聚(對(duì)微管動(dòng)力學(xué)的影響)；與紡錘體其他蛋白質(zhì)的結(jié)合；與細(xì)胞周期控制中涉及的蛋白質(zhì)結(jié)合；作為其他酶的底物；如激酶或者蛋白酶；以及特異性的驅(qū)動(dòng)蛋白細(xì)胞活性如紡錘極分離。進(jìn)行分析的方法對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是眾所周知的(例如參見(jiàn)Hall等人(1996)，Biophys.J.，713467-3476；Turner等人，1996，AnalBiochem.242(1)20-5；Gittes等人，1996，Biophys.J.70(1)418-29；Shirakawa等人，1995，J.Exp.Biol1981809-15；Winkelmann等人，1995，Biophys.J.682444-53；Winkelmann等人，1995，Biophys.J.6872S)。也可使用本領(lǐng)域中已知的測(cè)定ATP酶水解活性的方法。優(yōu)選地，使用以溶液為基礎(chǔ)的實(shí)驗(yàn)。美國(guó)專(zhuān)利6,410,254(其內(nèi)容在此并入作為參考)描述了此等實(shí)驗(yàn)。或者，使用常規(guī)的方法。例如，可對(duì)驅(qū)動(dòng)蛋白中的Pi釋放進(jìn)行定量。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，ATP酶水解活性實(shí)驗(yàn)使用0.3M的PCA(高氯酸)和孔雀綠試劑(8.27mM鉬(II)酸鈉、0.33mM的孔雀綠草酸鹽、以及0.8mM的TritonX-100)。在進(jìn)行該實(shí)驗(yàn)時(shí)，10μl的反應(yīng)混合物在90μl的冷0.3MPCA中淬滅。使用磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)物，所以可將數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)化為mM所釋放的無(wú)機(jī)磷酸鹽。當(dāng)所有的反應(yīng)物和標(biāo)準(zhǔn)物都已在PCA中淬滅時(shí)，在例如微量滴定板的相關(guān)孔中添加100μl的孔雀綠試劑。使混合物顯色10-15分鐘，然后讀取板在650nm處的吸光度。如果使用磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)物，則可將吸光度讀數(shù)轉(zhuǎn)化為mMPi，并相對(duì)時(shí)間作圖。另外，本領(lǐng)域中已知的ATP酶實(shí)驗(yàn)包括熒光素酶實(shí)驗(yàn)。驅(qū)動(dòng)蛋白運(yùn)動(dòng)域的ATP酶活性也可用于監(jiān)測(cè)藥劑的作用。在一些具體實(shí)施方案中，在沒(méi)有微管存在下進(jìn)行驅(qū)動(dòng)蛋白ATP酶實(shí)驗(yàn)。在一些具體實(shí)施方案中，在有微管存在時(shí)進(jìn)行ATP酶實(shí)驗(yàn)。在上述實(shí)驗(yàn)中可檢測(cè)不同類(lèi)型的藥劑。在一些具體實(shí)施方案中藥劑的作用不依賴(lài)于微管和ATP的濃度。在一些具體實(shí)施方案中，通過(guò)增加ATP、微管或者這兩者的濃度，可降低調(diào)節(jié)劑對(duì)驅(qū)動(dòng)蛋白ATP酶的作用。在一些具體實(shí)施方案中，通過(guò)增加ATP、微管或者這兩者的濃度，可增加藥劑的作用。體外抑制有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白的生化活性的化學(xué)品可接著在體內(nèi)進(jìn)行篩選。體內(nèi)的篩選方法包括有關(guān)細(xì)胞周期分布、細(xì)胞存活率、或者有絲分裂紡錘體之存在、形態(tài)、活性、分布或者量的實(shí)驗(yàn)。例如通過(guò)流動(dòng)細(xì)胞計(jì)監(jiān)測(cè)細(xì)胞數(shù)量在細(xì)胞周期中的分布的方法對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員是已知的，測(cè)量細(xì)胞存活率的方法也是如此。例如參見(jiàn)美國(guó)專(zhuān)利6,437,115，其內(nèi)容在此并入作為參考。監(jiān)測(cè)紡錘體的形成和畸形的顯微鏡法對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員也是已知的(例如參見(jiàn)Whitehead和Rattner(1998)，J.CellSci.1112551-61；Galgio等人，(1996)J.CellBiol.，135399-414)，該文獻(xiàn)中的全部?jī)?nèi)容在此并入作為參考。本發(fā)明的化學(xué)品抑制有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白。抑制作用的一個(gè)量度是IC50，其定義為KSP的活性相對(duì)于對(duì)照被降低50％時(shí)的化合物濃度。在一些具體實(shí)施方案中，至少一種化學(xué)品的IC50優(yōu)選低于約1mM。在一些具體實(shí)施方案中，至少一種化學(xué)品的IC50低于約100μM。在一些具體實(shí)施方案中，至少一種化學(xué)品的IC50低于約10μM。在一些具體實(shí)施方案中，至少一種化學(xué)品的IC50低于約1μM。在一些具體實(shí)施方案中，至少一種化學(xué)品的IC50低于約100nM。在一些具體實(shí)施方案中，至少一種化學(xué)品的IC50低于約10nM。IC50的測(cè)量是用例如在此描述的ATP酶實(shí)驗(yàn)進(jìn)行的。另一個(gè)抑制作用的量度為Ki。對(duì)IC50低于約1μM濃度的化學(xué)品，Ki或Kd被定義為在此所述之化合物與有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白之相互作用的解離速率常數(shù)。在一些具體實(shí)施方案中，至少一種化學(xué)品具有Ki低于約100μM濃度。在一些具體實(shí)施方案中，至少一種化學(xué)品具有Ki低于約10μM濃度。在一些具體實(shí)施方案中，至少一種化學(xué)品具有Ki低于約1μM濃度。在一些具體實(shí)施方案中，至少一種化學(xué)品具有Ki低于約100nM濃度。在一些具體實(shí)施方案中，至少一種化學(xué)品具有Ki低于約10nM濃度?；瘜W(xué)品的Ki是根據(jù)三個(gè)假設(shè)和Michaelis-Menten等式由IC50測(cè)定的。第一，僅一個(gè)化合物分子結(jié)合在酶上，而且沒(méi)有合作性。第二，活性酶的濃度和測(cè)試化合物是已知的(例如，在制劑中沒(méi)有顯著量的雜質(zhì)或者失活形式)。第三，酶-抑制劑復(fù)合物的酶促速率是零。速率(即化合物濃度)的數(shù)據(jù)擬合于以下等式中V=VmaxE0[I-(E0+I0+Kd)-(E0+I0+Kd)2-4E0I02E0]]]>其中V是觀察速率，Vmax是游離酶的速率，I0是抑制劑濃度，E0是酶濃度，而Kd是酶-抑制劑復(fù)合物的解離常數(shù)。抑制作用的另一個(gè)量度為GI50，定義為造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率減少50％時(shí)的化學(xué)品濃度。在一些具體實(shí)施方案中，至少一種化學(xué)品具有GI50低于約1mM濃度。。在一些具體實(shí)施方案中，至少一種化學(xué)品具有GI50低于約20μM濃度。在一些具體實(shí)施方案中，至少一種化學(xué)品具有GI50低于約10μM濃度。在一些具體實(shí)施方案中，至少一種化學(xué)品具有GI50低于約1μM濃度。在一些具體實(shí)施方案中，至少一種化學(xué)品具有GI50低于約100nM濃度。在一些具體實(shí)施方案中，至少一種化學(xué)品具有GI50低于約10nM濃度。GI50是通過(guò)使用例如在此描述的細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)來(lái)測(cè)定的。發(fā)現(xiàn)該類(lèi)化學(xué)品抑制細(xì)胞增殖。小分子抑制劑的體外效力是例如通過(guò)分析人卵巢癌細(xì)胞(SKOV3)在接觸一系列9個(gè)點(diǎn)稀釋的化合物72小時(shí)后的存活率來(lái)測(cè)定的。細(xì)胞存活率是通過(guò)測(cè)量生物還原市售試劑MTS/PMS時(shí)形成的產(chǎn)物formazon的吸光度來(lái)測(cè)定的。劑量-應(yīng)答曲線上所計(jì)算的每個(gè)點(diǎn)是未經(jīng)處理的對(duì)照細(xì)胞在72小時(shí)時(shí)的百分?jǐn)?shù)減去背景吸收(完全細(xì)胞殺死)。已成功地在臨床中用于治療癌癥的抗增殖化合物(癌癥化療劑)具有變化較大的GI50。例如，在A549細(xì)胞中，紫杉醇GI50是4nM，多柔比星是63nM，5-氟尿嘧啶是1μM，而羥基脲是500μM(數(shù)據(jù)是由NationalCancerInstitute，DevelopmentalTherapeuticProgram提供的，http://dtp.nci.nih.gov/)。因此，抑制細(xì)胞增殖的化合物，無(wú)論該濃度是否表現(xiàn)出抑制作用，都具有潛在的臨床應(yīng)用。在用于篩選結(jié)合有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白的化合物的方法中使用本發(fā)明的化學(xué)品時(shí)，將有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白結(jié)合在載體上，然后在實(shí)驗(yàn)中添加本發(fā)明的化合物?；蛘?，將本發(fā)明的化學(xué)品結(jié)合在載體上，然后添加有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白?？稍谄渲袑で笮碌慕Y(jié)合劑的化合物類(lèi)別包括特異性抗體、在化學(xué)文庫(kù)的篩選中已鑒別的非天然結(jié)合劑、肽類(lèi)似物等。篩選出對(duì)于人細(xì)胞具有低毒性的候選藥物是篩選實(shí)驗(yàn)特別有用的一個(gè)方面。為此目的可使用多種實(shí)驗(yàn)，包括體外標(biāo)記的蛋白-蛋白結(jié)合實(shí)驗(yàn)，電泳移動(dòng)性位移實(shí)驗(yàn)，用于蛋白結(jié)合的免疫實(shí)驗(yàn)，官能團(tuán)實(shí)驗(yàn)(磷酸化實(shí)驗(yàn)等)，等等?？梢远喾N方法測(cè)定本發(fā)明化學(xué)品與有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白的結(jié)合。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物例如用熒光或者放射活性基團(tuán)標(biāo)記，然后直接測(cè)量結(jié)合。例如，這可如下進(jìn)行將所用或者部分的有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白連接在固體載體上，添加經(jīng)標(biāo)記的測(cè)試化合物(例如其中至少一個(gè)原子被可檢測(cè)的同位素替換的本發(fā)明化合物)，洗滌掉過(guò)量的試劑，然后測(cè)定固體載體上存在的標(biāo)記物的量。本發(fā)明所用術(shù)語(yǔ)“標(biāo)記”是指化合物直接或者間接地用可提供檢測(cè)信號(hào)的標(biāo)記物標(biāo)記，所述標(biāo)記物例如是放射同位素、熒光標(biāo)記、酶、抗體、顆粒(如磁性顆粒)、化學(xué)發(fā)光標(biāo)記、或者特異性結(jié)合分子等。特異性結(jié)合分子包括一對(duì)物質(zhì)，如生物素和抗生蛋白鏈菌素，地高辛和抗地高辛等。對(duì)于特異性結(jié)合物，根據(jù)如上所述的已知方法，互補(bǔ)一方通常與待檢測(cè)的分子結(jié)合。標(biāo)記物可直接或者間接提供可檢測(cè)的信號(hào)。在一些具體實(shí)施方案中，僅標(biāo)記其中一個(gè)化合物。例如，可用125I或者熒光團(tuán)在酪氨酸位置處標(biāo)記驅(qū)動(dòng)蛋白?；蛘?，用不同的標(biāo)記物標(biāo)記一個(gè)以上的組分，例如蛋白質(zhì)用125I，而抗有絲分裂劑用熒光團(tuán)。本發(fā)明的化學(xué)品也可用作篩選其他候選藥物時(shí)的競(jìng)爭(zhēng)劑。在此所用的術(shù)語(yǔ)“候選藥物”或者“藥物候選者”或者語(yǔ)法上等同的詞是指待檢測(cè)其生物活性的任何分子，如蛋白質(zhì)、寡肽、小的有機(jī)分子、多糖、多核苷酸等。它們可直接或者間接改變細(xì)胞增殖表型或者細(xì)胞增殖序列的表達(dá)，所述細(xì)胞增殖序列包括核酸序列和蛋白序列。在其他情況下，篩選改變細(xì)胞增殖蛋白結(jié)合和/或活性。該類(lèi)型的篩選可在有或者沒(méi)有微管存在時(shí)進(jìn)行。在篩選蛋白結(jié)合或活性時(shí)，優(yōu)選的實(shí)施方案不包括任何已知可以結(jié)合具體的蛋白的分子，例如聚合物結(jié)構(gòu)(如微管)以及能量源(如ATP)。實(shí)驗(yàn)的優(yōu)選實(shí)施方案包括在其內(nèi)源天然狀態(tài)下不結(jié)合分子增殖蛋白的候選藥物(在此稱(chēng)為“外源性”藥物)。在一些具體實(shí)施方案中，外源性藥物進(jìn)一步排除有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白的抗體。候選藥物可包括多種類(lèi)別的化學(xué)品類(lèi)，但通常是分子量為100-2500道爾頓的小有機(jī)分子。候選藥物包括與蛋白的結(jié)構(gòu)相互作用所必需的官能團(tuán)，特別是氫鍵和親脂性結(jié)合的官能團(tuán)，其通常至少包括胺、羰基、羥基、醚、或者羧基，優(yōu)選官能團(tuán)中至少有兩個(gè)。候選藥物經(jīng)常包括環(huán)狀碳或者雜環(huán)結(jié)構(gòu)和/或芳香或者多芳香結(jié)構(gòu)，它們被一個(gè)或者多個(gè)上述官能團(tuán)取代。候選藥物還可在生物分子中選擇，所述生物分子包括肽、糖、脂肪酸、甾體化合物、嘌呤、嘧啶、以及它們的衍生物、結(jié)構(gòu)類(lèi)似物或者組合。候選藥物是由包括合成或者天然化合物的文庫(kù)的多種來(lái)源得到的。例如，隨機(jī)可有多種方式，而且涉及多種有機(jī)化合物及生物分子的合成，包括隨機(jī)寡核苷酸的表達(dá)。或者，細(xì)菌、真菌、植物和動(dòng)物提取物形式的天然化合物文庫(kù)也是可以利用或者容易產(chǎn)生的。另外，天然或者合成的文庫(kù)及化合物可容易地通過(guò)常規(guī)的化學(xué)、物理和生物化學(xué)方法進(jìn)行改性。已知的藥物可進(jìn)行針對(duì)性或者隨機(jī)的化學(xué)改性，如酰基化、烷基化、酯化、酰胺化，以產(chǎn)生結(jié)構(gòu)類(lèi)似物。競(jìng)爭(zhēng)性篩選實(shí)驗(yàn)可通過(guò)在第一個(gè)樣品中混合有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白以及候選藥物來(lái)進(jìn)行。第二個(gè)樣品包括本發(fā)明的化學(xué)品、有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白以及候選藥物。這可在有或者沒(méi)有微管存在時(shí)進(jìn)行。測(cè)定這兩個(gè)樣品中的候選藥物結(jié)合，而兩個(gè)樣品之間的結(jié)合變化或者不同表明存在能夠結(jié)合有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白并潛在抑制其活性的藥物。也就是說(shuō)，如果第二個(gè)樣品中候選藥物的結(jié)合不同于第一個(gè)樣品中的，則表明候選藥物能夠結(jié)合有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白。在一些具體實(shí)施方案中，候選藥物與有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白的結(jié)合是通過(guò)使用競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合實(shí)驗(yàn)來(lái)測(cè)定。在一些具體實(shí)施方案中，競(jìng)爭(zhēng)劑是已知與有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白結(jié)合的結(jié)合物質(zhì)，如抗體、肽、結(jié)合配偶體、配體等。在某些情況下，例如在候選藥物和結(jié)合物質(zhì)之間，用結(jié)合物質(zhì)置換候選藥物，可存在競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合。在一些具體實(shí)施方案中，候選藥物是經(jīng)過(guò)標(biāo)記的。該候選藥物或者競(jìng)爭(zhēng)劑或者它們兩個(gè)，首先添加至有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白中，其時(shí)間足以進(jìn)行結(jié)合?？稍谌魏斡欣谧罴鸦钚缘臏囟认逻M(jìn)行保溫，通常在4-40℃之間。保溫的時(shí)間根據(jù)最佳活性來(lái)選擇，但也可進(jìn)行最佳化，以有利于快速高輸出篩選。通常0.1-1小時(shí)是足夠的。過(guò)量的試劑通常被除去或者洗掉。接著添加第二組分，然后是有或者沒(méi)有經(jīng)過(guò)標(biāo)記的組分，以表明結(jié)合。在一些具體實(shí)施方案中，首先添加競(jìng)爭(zhēng)劑，然后添加候選藥物。競(jìng)爭(zhēng)劑的替換是候選藥物與有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白結(jié)合并由此能夠結(jié)合以及潛在抑制有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白活性的指標(biāo)。在該實(shí)施方案中，組分可進(jìn)行標(biāo)記。因此，例如，如果競(jìng)爭(zhēng)劑是經(jīng)過(guò)標(biāo)記的，則在洗滌溶液中存在標(biāo)記物表明被藥物替換?；蛘?，如果候選藥物被標(biāo)記，在載體上存在標(biāo)記物表明進(jìn)行了替換。在一些具體實(shí)施方案中，候選藥物首先添加，并進(jìn)行保溫和洗滌，然后是競(jìng)爭(zhēng)劑。不存在競(jìng)爭(zhēng)劑的結(jié)合表明候選藥物以更高的親和性與有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白結(jié)合。因此，如果候選藥物是標(biāo)記的，在載體上存在標(biāo)記物，沒(méi)有競(jìng)爭(zhēng)劑的結(jié)合，有可能表明候選藥物能夠與有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白結(jié)合。抑制作用是通過(guò)篩選能夠抑制有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白活性的候選藥物來(lái)測(cè)試的，其包括以下步驟如上所述混合候選藥物和有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白，然后測(cè)定有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白生物活性的變化。因此，在該實(shí)施方案中，候選藥物應(yīng)與有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白結(jié)合(雖然這不是必須的)，并改變其在此定義的生物或者生化活性。該方法包括細(xì)胞的體外篩選法和體內(nèi)篩選法，其中包括細(xì)胞周期分布、細(xì)胞存活率、有絲分裂紡錘體是否存在、形態(tài)、活性、分布或者量的變化?；蛘?，可使用不同的篩選，以鑒別出與天然有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白結(jié)合但不與改性有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白結(jié)合的候選藥物?？稍趯?shí)驗(yàn)中使用陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照。合適地，所有的對(duì)照和測(cè)試樣品都進(jìn)行至少三次，以得到統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著的結(jié)果。所有樣品的保溫時(shí)間應(yīng)足以使藥物與蛋白質(zhì)結(jié)合。在保溫后，洗滌所有的樣品，使得沒(méi)有非特異性結(jié)合的材料，然后測(cè)定結(jié)合而且通常被標(biāo)記的藥物的量。例如，當(dāng)使用放射性標(biāo)記物時(shí)，樣品可在閃爍計(jì)數(shù)器中計(jì)數(shù)，以測(cè)定結(jié)合化合物的量。在篩選實(shí)驗(yàn)中可包括多種其他試劑。這些試劑包括例如鹽、中性蛋白質(zhì)(如白蛋白)、洗滌劑等，它們可有利于最佳的蛋白-蛋白結(jié)合和/或降低非特異性或者背景相互作用。還可使用可提高使用效率的試劑，如蛋白酶抑制劑、核酸酶抑制劑、殺微生物劑等?？梢匀魏雾樞蛱砑咏M分的混合物，以提供所需的結(jié)合。因此，本發(fā)明的化學(xué)品可給藥于細(xì)胞。術(shù)語(yǔ)“給藥”是指向細(xì)胞培養(yǎng)基以及患者中的細(xì)胞給藥治療有效量的至少一種本發(fā)明化學(xué)品。術(shù)語(yǔ)“治療有效量”是指可對(duì)給藥個(gè)體產(chǎn)生作用的劑量。精確的劑量取決于治療目的，而且可由本領(lǐng)域技術(shù)人員通過(guò)已知的方法來(lái)確定。本領(lǐng)域眾所周知的是，必需根據(jù)全身與局部給藥、年齡、體重、總的健康狀況、性別、飲食、給藥時(shí)間、藥物的相互作用以及疾病的嚴(yán)重程度，對(duì)給藥劑量進(jìn)行調(diào)整，而且可由本領(lǐng)域技術(shù)人員用常規(guī)的實(shí)驗(yàn)來(lái)確定。在此所用術(shù)語(yǔ)“細(xì)胞”是指可改變其中有絲分裂或者減數(shù)分裂的任何細(xì)胞。在本發(fā)明中，“患者”包括人和其他動(dòng)物(特別是哺乳動(dòng)物)以及其他生物體。因此，本發(fā)明的方法可應(yīng)用于人的治療和獸醫(yī)領(lǐng)域中。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，患者是哺乳動(dòng)物，而在最優(yōu)選的實(shí)施方案中，患者是人。在一些具體實(shí)施方案中，具有所希望的藥理活性的本發(fā)明化學(xué)品可以包含藥物學(xué)上可接受的載體的藥物組合物的形式給藥于患者。根據(jù)引入的方式，本發(fā)明的化合物可以如下所述多種方法進(jìn)行配制。治療活性化合物在制劑中的濃度可為0.1-100重量％。藥物可單獨(dú)或者與其他治療(如放射療法)或者其他化學(xué)治療劑(如似乎作用于微管形成的紫杉烷類(lèi)藥物或作為拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制劑的喜樹(shù)堿類(lèi)藥物)組合進(jìn)行。如果使用，其他化學(xué)治療劑的給藥可在至少一種本發(fā)明的化學(xué)品給藥之前、同時(shí)或者之后進(jìn)行。在本發(fā)明的一個(gè)方面中，至少一種本發(fā)明的化學(xué)品與一種或者多種其他化學(xué)治療劑共同給藥。術(shù)語(yǔ)“共同給藥”是指至少一種本發(fā)明的化學(xué)品給藥于患者，使得本發(fā)明的化合物以及共同給藥的化合物可同時(shí)存在于患者的血液中，無(wú)論這些化合物實(shí)際上是合適給藥的，包括同時(shí)給藥。本發(fā)明的化學(xué)品可通過(guò)多種途徑進(jìn)行給藥，包括但不限于口服、皮下、靜脈內(nèi)、鼻內(nèi)、透皮、腹膜內(nèi)、肌肉內(nèi)、肺內(nèi)、陰道、直腸、或者眼內(nèi)。在某些情況下，例如在治療傷口和炎癥時(shí)，本發(fā)明的化合物或者組合物可直接以溶液或者噴霧劑給藥。藥物劑型包括至少一種在此描述的化學(xué)品以及一種或多種藥用賦形劑。如本領(lǐng)域中已知，藥用賦形劑是輔助成分，其功能是促使或促進(jìn)各種劑型(例如口服劑型如片劑、膠囊劑和液體；局部劑型如皮膚、眼睛和耳用劑型；栓劑；注射劑；呼吸用劑型等)的藥劑或藥物的遞送。藥用賦形劑包括惰性或非活性成分、增效劑或?qū)嵸|(zhì)上有助于活性成分的醫(yī)療效果的化學(xué)物質(zhì)。例如，藥用賦形劑可以用于改善流動(dòng)特征、產(chǎn)品均勻性、穩(wěn)定性、味道或外觀，以使劑量操作和給藥容易，從而方便使用，或者控制生物利用度。雖然藥用賦形劑常被描述為惰性或無(wú)活性，但在本領(lǐng)域中可以認(rèn)識(shí)到在藥用賦形劑的性質(zhì)和含有它們的劑型之間存在一定的關(guān)系。適用作載體或稀釋劑的藥用賦形劑在本領(lǐng)域中是已知的，并且用于多種配方。例如參見(jiàn)Remington′sPharmaceuticalSciences，第18版，A.R.Gennaro編輯，MackPublishingCompany(1990)；RemingtonTheScienceandPracticeofPharmacy，第20版，A.R.Gennaro，編輯，LippincottWilliams&amp;Wilkins(2000)；HandbookofPharmaceuticalExcipients，第3版，A.H.Kibbe編輯，AmericanPharmaceuticalAssociation，andPharmaceuticalPress(2000)；和HandbookofPharmaceuticalAdditives，compiledbyMichaelandIreneAsh，Gower(1995)，以上各文獻(xiàn)均在此引入作為參考?？诜腆w劑型如片劑通常包含一種或多種藥用賦形劑，它們例如可以有助于賦予令人滿(mǎn)意的加工和壓縮特征，或者給片劑提供附加的所需物理特征。這些藥用賦形劑可以選自稀釋劑、粘合劑、助流劑、潤(rùn)滑劑、崩解劑、著色劑、調(diào)味劑、甜味劑、聚合物、蠟或其它延遲溶解的物質(zhì)。用于靜脈內(nèi)給藥的組合物一般包含靜脈內(nèi)液體，即簡(jiǎn)單化學(xué)物質(zhì)如糖、氨基酸或電解質(zhì)的無(wú)菌溶液，它們可以容易地被循環(huán)系統(tǒng)遞送和消化這些液體可以用注射USP用水制備。用于非胃腸道給藥的組合物一般包含靜脈內(nèi)液體，即簡(jiǎn)單化學(xué)物質(zhì)如糖、氨基酸或電解質(zhì)的無(wú)菌溶液，它們可以容易地被循環(huán)系統(tǒng)遞送和消化。這些液體可以用注射USP用水制備。常用于靜脈內(nèi)(IV)的液體公開(kāi)在Remington，theScienceandPracticeofPharmacy[前面提供的完整引文]中，并包括醇，例如5％醇(例如在右旋糖和水(″D/W″)中或在生理鹽水溶液(″NSS″)中的D/W，包括在5％右旋糖和水(″D5/W″)中，或在NSS中的D5/W)；合成氨基酸如氨基syn、FreAmine、Travasol，例如分別為3.5或7；8.5；3.5、5.5或8.5％；氯化銨，例如2.14％；葡聚糖40，在NSS中，例如10％，或者在D5/W中，例如10％；葡聚糖70，在NSS中，例如6％，或者在D5/W中，例如6％；右旋糖(葡萄糖，D5/W)，例如2.5-50％；右旋糖和氯化鈉，例如5-20％右旋糖和0.22-0.9％NaCl；乳酸化Ringer′s(Hartmann′s)，例如NaCl0.6％、KCl0.03％、CaCl20.02％；乳酸鹽0.3％；甘露糖醇，例如5％，任選與右旋糖，例如10％，或者NaCl，例如15或20％組合；多種含有電解質(zhì)、右旋糖、果糖、轉(zhuǎn)化糖Ringer′s的不同組合的電解質(zhì)溶液，例如NaCl0.86％、KCl0.03％、CaCl20.033％；碳酸氫鈉，例如5％；氯化鈉，例如0.45、0.9、3或5％；乳酸鈉，例如1/6M；和無(wú)菌注射用水。這些液體的pH可變化，而且如本領(lǐng)域已知的，通常在3.5-8之間變化。本發(fā)明的化學(xué)品可單獨(dú)給藥或與其他治療組合，其他治療例如是輻射或其他治療劑，如紫杉醇類(lèi)的藥物，其出現(xiàn)是作用在微管形成；或喜樹(shù)堿類(lèi)的拓樸異構(gòu)酶I抑制劑。當(dāng)如此使用時(shí)，其他治療藥物可在本發(fā)明之活性藥物給藥之前、同時(shí)(不論分別劑量形式或組合劑量形式)或之后給藥。以下實(shí)施例用于更詳細(xì)地描述實(shí)施本發(fā)明的方式，以及實(shí)施本發(fā)明各方面的最佳方式。應(yīng)理解的是，這些實(shí)施例絕不是對(duì)本發(fā)明真實(shí)范圍的限制，而僅是用于說(shuō)明目的。在此引用的所有參考文獻(xiàn)都全文引入作為參考。實(shí)施例以下實(shí)施例用于更詳細(xì)地描述實(shí)施本發(fā)明的方式，以及實(shí)施本發(fā)明各方面的最佳方式。應(yīng)理解的是，這些實(shí)施例絕不是對(duì)本發(fā)明真實(shí)范圍的限制，而僅是用于說(shuō)明目的。在此引用的所有參考文獻(xiàn)都全文引入作為參考。實(shí)施例1對(duì)在DMF(150毫升)中之4-異丙氧基苯甲酸(25克、140毫摩爾)溶液，添加NCS(24克，182毫摩爾)。反應(yīng)混合物被攪拌過(guò)夜。H2O(500毫升)被添加到反應(yīng)混合物中。沉淀被收集并且以水洗滌，并且在真空下干燥，產(chǎn)生為白色固體的2(26.4克，88％)，其被使用于下一步而無(wú)進(jìn)一步純化。LRMS(M+H+)m/z213.0。對(duì)在DCM中之2(20克，93毫摩爾)溶液，在0℃下添加五氟三氟醋酸酯(20毫升、112毫摩爾)及三乙基胺(17毫升、112毫摩爾)。溶液被濃縮，并且混合物以快速柱色譜分析(100％DCM)純化，產(chǎn)生為白色固體的3(35克，全量)。LRMS(M+H+)m/z586.3。對(duì)在DMF(2.0摩爾濃度)中之3溶液，添加氨基酸(1.2當(dāng)量)及N，N-二異丙基乙基胺(3當(dāng)量)。反應(yīng)以LC/MS監(jiān)測(cè)。在完成時(shí)，甲基胺(在THF中之2摩爾濃度、1.5當(dāng)量)及HBTU(1.5當(dāng)量)被添加到反應(yīng)溶液中。反應(yīng)混合物攪拌4小時(shí)。產(chǎn)物以HPLC或快速柱色譜分析純化，產(chǎn)生4。實(shí)施例2對(duì)在DMF(20毫升)中之H-Phe-(4-Br)-OH(2，2.5克，10毫摩爾)溶液，在室溫下添加3(4.7克，12毫摩爾)及二異丙基乙基胺(5.4毫升，30毫摩爾)。反應(yīng)混合物以LC/MS監(jiān)測(cè)。在完成時(shí)，甲基胺(在THF中之2摩爾濃度、7.7毫升，15毫摩爾)及HBTU(5.8毫升，15毫摩爾)被添加到反應(yīng)溶液中。反應(yīng)混合物被攪拌2天。混合物被過(guò)濾，并且濾液以RP-HPLC、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生4(2.3克，50％)。LRMS(M+H+)m/z455.0。對(duì)在二噁烷(1毫升)中之4(71毫克，0.16毫摩爾)的懸浮液，添加哌嗪(16毫克，0.19毫醋酸鈀(II)(4毫克，0.016毫摩爾)、二環(huán)己基膦基-2’-(N，N’-二甲基氨基)-聯(lián)苯基(6毫克，0.016毫摩爾)及碳酸銫(104毫克，0.32毫摩爾)。所得混合物在110℃下攪拌36小時(shí)。反應(yīng)混合物以EtOAc稀釋。有機(jī)層以飽和NaHCO3(20毫升)及鹽水洗滌、在Na2SO4上干燥并且濃縮。殘余物以RP-HPLC、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生1a(6毫克，8％)。LRMS(M+H+)m/z459.2。實(shí)施例3對(duì)在DMF(5毫升)中之H-Tyr-NH2HCl(2,830毫克，3.8毫摩爾)溶液，在室溫下添加3(1.8克，4.5毫摩爾)及二異丙基乙基胺(3.4毫升，19毫摩爾)。反應(yīng)被攪拌20小時(shí)，并且在添加水之后過(guò)濾。白色沉淀在DCM及甲醇中再結(jié)晶，產(chǎn)生為白色結(jié)晶的4(1.120克，78％)。LRMS(M+H+)m/z377.1。對(duì)在DMF(1毫升)中之4(50毫克，0.13毫摩爾)溶液，添加(s)-(+)-3-溴-2-甲基-1-丙醇(0.083毫升，0.8毫摩爾)及碳酸鉀(110毫克，0.8毫摩爾)。所得混合物在0℃下被攪拌15小時(shí)?；旌衔锉贿^(guò)濾，并且濾液以RP-HPLC、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生1b(30毫克，51％)。LRMS(M+H+)m/z499.1。實(shí)施例4對(duì)在DMF(50毫升)中之H-Tyr-OBut(2，1.9克，8毫摩爾)溶液，在室溫下添加3(2.4克，6.2毫摩爾)及二異丙基乙基胺(3.3毫升，19毫摩爾)。反應(yīng)被攪拌2小時(shí)。所得溶液以EtOAc(200毫升)稀釋?zhuān)⑶乙燥柡蚇aHCO3(50毫升)洗滌。有機(jī)層被分離、以鹽水洗滌、在Na2SO4上干燥并且濃縮，產(chǎn)生黃色固體。對(duì)在二氯甲烷(10毫升)中的黃色固體添加三氟醋酸(30毫升)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?2小時(shí)，并且然后在減壓下被濃縮。殘余物在真空中干燥，產(chǎn)生4(3.1克)，其被使用于下一步而無(wú)進(jìn)一步純化。LRMS(M+H+)m/z376.1。對(duì)在DMF(25毫升)中之4(3.1克，8毫摩爾)溶液，添加甘氨酰胺(3.6克，9.6毫摩爾)、二異丙基乙基胺(7毫升，40毫摩爾)及HBTU(3.6克，9.6毫摩爾)。反應(yīng)混合物被攪拌15小時(shí)，之后溶液以醋酸乙酯稀釋?zhuān)⑶乙燥柡蚇aHCO3洗滌。有機(jī)層被分離、以鹽水洗滌、在Na2SO4上干燥并且濃縮。所得粗制物在RP-HPLC上、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生5(38毫克，35％)。LRMS(M+H+)m/z434.1。對(duì)在DMF(1毫升)中之5(100毫克，0.23毫摩爾)溶液，添加環(huán)丙基甲基溴(0.18毫升，1.84毫摩爾)及碳酸鉀(317毫克，2.3毫摩爾)。所得混合物在80℃下被攪拌10小時(shí)?；旌衔锉贿^(guò)濾，并且濾液在RP-HPLC上、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生1c(36毫克，34％)。LRMS(M+H+)m/z488.1。實(shí)施例5對(duì)在DMF(1毫升)中之4(80毫克，0.2毫摩爾)溶液，添加(±)-3-溴-1-苯基-2-四氫吡咯烷酮(250毫克，1毫摩爾)及碳酸鉀(235毫克，1.7毫摩爾)。所得混合物在110℃下被攪拌10小時(shí)?；旌衔锉贿^(guò)濾，并且濾液在RP-HPLC上、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生5(38毫克，35％)。LRMS(M+H+)m/z536.1。實(shí)施例6對(duì)在DMF(1毫升)中之4(70毫克，0.19毫摩爾)溶液，添加3-(羥基甲基)吡啶(0.023毫升，0.23毫摩爾)、三苯基膦(100毫克，0.38毫摩爾)及二異丙基偶氮二羧酸酯(0.055毫升，0.38毫摩爾)。所得混合物在室溫下被攪拌20小時(shí)。反應(yīng)混合物被過(guò)濾，并且經(jīng)由快速柱色譜分析、使用醋酸乙酯及己烷混合物為洗脫液純化，產(chǎn)生1f(22毫克，25％)。LRMS(M+H+)m/z468.2。實(shí)施例7對(duì)在甲苯(2毫升)中之4(50毫克，0.12毫摩爾)溶液，添加2-(氟苯基)硼酸(20毫克，0.14毫摩爾)、肆(三苯基膦)鈀(0)(42毫克，0.04毫摩爾)及2摩爾濃度碳酸鈉(0.18毫升，0.36毫摩爾)。反應(yīng)混合物在100℃下被攪拌90分鐘。所得溶液在RP-HPLC上、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生5(22毫克，40％)。LRMS(M+H+)m/z469.2。實(shí)施例8對(duì)在DMF(1毫升)中之4(45毫克，0.1毫摩爾)溶液，添加雙(吡哪酸(pinacolate))二硼(30毫克，0.12摩爾)、1，1’-雙(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)二氯甲烷絡(luò)合物(17毫克，0.02毫摩爾)及醋酸鉀(39毫克，0.4毫摩爾)。反應(yīng)混合物在80℃下被攪拌1小時(shí)。所得混合物被添加4-溴-3，5-二甲基異噁唑(35毫克，0.2毫摩爾)及2摩爾濃度碳酸鈉(0.4毫升，0.8毫摩爾)。反應(yīng)混合物在80℃下被攪拌90分鐘。所得殘余物被過(guò)濾，并且濾液在RP-HPLC上、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生1h(23毫克，49％)。LRMS(M+H+)m/z470.1。實(shí)施例9對(duì)在DMF(1毫升)中之4(62毫克，0.14毫摩爾)溶液，添加雙(吡哪酸)二硼(42毫克，0.16摩爾)、1，1’-雙(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)二氯甲烷絡(luò)合物(34毫克，0.04毫摩爾)及醋酸鉀(54毫克，0.55毫摩爾)。反應(yīng)混合物在80℃下被攪拌1小時(shí)。所得混合物被添加N-甲基-2-溴苯并咪唑(58毫克，0.27毫摩爾)及2摩爾濃度碳酸鈉(0.54毫升，1.08毫摩爾)?；旌衔镌?0℃下被攪拌60分鐘。所得溶液以醋酸乙酯(20毫升)稀釋?zhuān)⑶乙燥柡蚇aHCO3(20毫升)洗滌。有機(jī)層被分離、以鹽水洗滌、在Na2SO4上干燥并且濃縮。所得殘余物在RP-HPLC上、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生1i(44毫克，64％)。LRMS(M+H+)m/z505.1。實(shí)施例10對(duì)在DMF(1毫升)中之4(50毫克，0.13亳摩爾)溶液，添加雙(吡哪酸)二硼(34毫克，0.13摩爾)、1，1’-雙(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)二氯甲烷絡(luò)合物(27毫克，0.03毫摩爾)及醋酸鉀(43毫克，0.44毫摩爾)。反應(yīng)混合物在80℃下被攪拌1小時(shí)。所得混合物被添加3-溴吩-2-碳(41毫克，0.22毫摩爾)及2摩爾濃度碳酸鈉(0.44毫升，0.88毫摩爾)?；旌衔镌?0℃下被攪拌90分鐘。所得殘余物被過(guò)濾，并且濾液以RP-HPLC、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生5(20毫克，37％)。LRMS(M+H+)m/z482.1。實(shí)施例11對(duì)在甲苯(2毫升)中之4(85毫克，0.2毫摩爾)溶液，添加1-叔丁基-1，3-二氫-咪唑-2-酮(53毫克，0.4毫摩爾)、碘化亞銅(I)(18毫克，0.1毫摩爾)、反-1，2-二氨基-環(huán)己烷(11毫克，0.1毫摩爾)及碳酸銫(124毫克，0.4毫摩爾)。反應(yīng)混合物在100℃下被攪拌4小時(shí)?；旌衔锉贿^(guò)濾，并且濾液以RP-HPLC、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生1k(27毫克，28％)。LRMS(M+H+)m/z513.1。實(shí)施例12對(duì)在二噁烷(2毫升)中之4(100毫克，0.2毫摩爾)溶液，添加苯并咪唑(39毫克，0.33毫摩爾)、碘化亞銅(I)(8.4毫克，0.04毫摩爾)、1，10-鄰菲咯啉(16毫克，0.1毫摩爾)及碳酸銫(144毫克，0.44毫摩爾)。反應(yīng)混合物在100℃下被攪拌15小時(shí)。混合物被過(guò)濾，并且濾液被濃縮。所得殘余物被過(guò)濾，并且濾液在RP-HPLC上、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生1l(5.7毫克，6％)。LRMS(M+H+)m/z491.1。實(shí)施例13對(duì)在甲苯(1毫升)中之4(60毫克，0.16毫摩爾)溶液，添加2-氯苯并咪唑(50毫克，0.32毫摩爾)、碘化亞銅(I)(9毫克，0.05毫摩爾)及碳酸銫(105毫克，0.32毫摩爾)。反應(yīng)混合物在110℃下被攪拌28小時(shí)?；旌衔锉贿^(guò)濾，并且濾液在RP-HPLC上、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生1m(8毫克，10％)。LRMS(M+H+)m/z493.0。實(shí)施例14對(duì)在甲苯(1毫升)中之4(50毫克，0.1毫摩爾)溶液，添加酚(21毫克，0.2毫摩爾)、碘化亞銅(I)(6毫克，0.03毫摩爾)及碳酸銫(72毫克，0.2毫摩爾)。反應(yīng)混合物在115℃下被攪拌5小時(shí)。混合物被過(guò)濾，并且濾液被濃縮。所得殘余物經(jīng)由快速柱色譜分析、使用醋酸乙酯及己烷混合物為洗脫液純化，產(chǎn)生1n(23毫克，45％)。LRMS(M+H+)m/z467.1。實(shí)施例15對(duì)在DMF(30毫升)中之1(2.3克，12.6毫摩爾)溶液，添加2(4.0克，10.5毫摩爾)及N，N-二異丙基乙基胺(5.2毫升，30毫摩爾)。反應(yīng)以LC/MS監(jiān)測(cè)。所得溶液被用于下一步而無(wú)進(jìn)一步純化。LRMS(M+H+)m/z377.1。對(duì)在DMF(6毫升，～2毫摩爾)中之粗制3溶液，添加甘氨酰胺HCl(330毫克，3毫摩爾)、HBTU(1.14毫克，3毫摩爾)及N，N-二異丙基乙基胺(522微升，3毫摩爾)。反應(yīng)被攪拌過(guò)夜。所得粗制產(chǎn)物經(jīng)由RP-HPLC、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生4(600毫克，從2為69％)。LRMS(M+H+)m/z433.1。實(shí)施例16對(duì)在DMF(15毫升，～5.25毫摩爾)中之粗制3溶液，添加甲基胺(在THF中2摩爾濃度，4毫升，8毫摩爾)及HBTU(3克，7.9毫摩爾)。反應(yīng)被攪拌過(guò)夜?；旌衔镆源姿嵋阴?200毫升)稀釋。有機(jī)層以H2O、鹽水洗滌、在硫酸鈉上干燥并且濃縮。所得粗制產(chǎn)物5被用于下一步而無(wú)進(jìn)一步純化。LRMS(M+H+)m/z390.1。對(duì)在DCM(2毫升)中之粗制5溶液，添加芐?；?23微升，0.2毫摩爾)及N，N-二異丙基乙基胺(35微升，0.2毫摩爾)。反應(yīng)混合物被攪拌過(guò)夜。溶液被濃縮，并且在RP-HPLC上使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生6(36毫克，從2為40％)。LRMS(M+H+)m/z494.1。實(shí)施例17對(duì)在DCM(2毫升)中之5(75毫克，～0.2毫摩爾)溶液，添加異氰酸苯酯(26微升，0.24毫摩爾)。反應(yīng)混合物被攪拌過(guò)夜。所得溶液被濃縮，并且在RP-HPLC上、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生7(40毫克，從2為39％)。LRMS(M+H+)m/z509.1。實(shí)施例18對(duì)在DCM(3毫升)中之5(75毫克，0.19毫摩爾)溶液，添加氯甲酸異丁酯(38微升，0.29毫摩爾)及N，N-二異丙基乙基胺(50微升，0.29毫摩爾)。反應(yīng)混合物被攪拌過(guò)夜。溶液被濃縮，并且在RP-HPLC上、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生8(45毫克，從2為48％)。LRMS(M+H+)m/z490.1。實(shí)施例19對(duì)在DCM(5毫升)中之5(75毫克，0.19毫摩爾)溶液，添加二甲基氨磺酰氯(30微升，0.29毫摩爾)、N，N-二異丙基乙基胺(50微升，0.29毫摩爾)及DMAP(50毫克，0.4毫摩爾)。反應(yīng)混合物被攪拌過(guò)夜。反應(yīng)混合物被加熱到30℃，并且繼續(xù)攪拌8小時(shí)。所得溶液被濃縮，并且在RP-HPLC上、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生9(30毫克，30％)。LRMS(M+H+)m/z497.1。實(shí)施例20對(duì)在醋酸乙酯(60毫升)及水(20毫升)中之H-Phe-(4-COOtBu)-OH(5.8克，22毫摩爾)溶液，添加氧化鉑(IV)(400毫克，1.8毫摩爾)及醋酸(50毫升)。反應(yīng)混合物在H2流(60psi)下攪拌20小時(shí)。催化劑經(jīng)PTFE(0.45微米)濾器以過(guò)濾移除，并且溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生2(5.9克)，其被用于下一步而無(wú)進(jìn)一步純化。LRMS(M+H+)m/z272.1。對(duì)在DMF(30毫升)中之2(6.9克，18毫摩爾)溶液，添加3(5.9克，21.8毫摩爾)及二異丙基乙基胺(9.5毫升，54.3毫摩爾)。反應(yīng)以LC/MS監(jiān)測(cè)。在完成時(shí)，在THF中之2摩爾濃度甲基胺(13.6毫升，27毫摩爾)、HOBt(4克，27毫摩爾)及HBTU(10克，27毫摩爾)被添加到反應(yīng)溶液中。反應(yīng)被攪拌4小時(shí)?；旌衔镆源姿嵋阴?60毫升)稀釋?zhuān)⑶乙燥柡蚇aHCO3(20毫升)洗滌。有機(jī)層被分離，并且水相以醋酸乙酯(2×50毫升)萃取。經(jīng)合并的有機(jī)層以鹽水洗滌、在硫酸鈉上干燥并且濃縮。所得粗制產(chǎn)物以快速柱色譜分析、使用醋酸乙酯及己烷混合物為洗脫液純化，產(chǎn)生4(順異構(gòu)體808毫克，1.68毫摩爾，反異構(gòu)體300毫克，0.64毫摩爾)。LRMS(M+H+)m/z481.1。對(duì)在二氯甲烷(20毫升)中之4(290毫克，0.6毫摩爾)的溶液，添加三氟醋酸(5毫升)。所得溶液在室溫下被攪拌1小時(shí)，并且然后在減壓下被濃縮。殘余物經(jīng)由快速柱色譜分析、使用99％醋酸乙酯及1％醋酸為洗脫液純化，產(chǎn)生為白色固體的5(140毫克，55％)。LRMS(M+H+)m/z425.1。對(duì)在DMSO(5毫升)中之5(330毫克，0.7毫摩爾)的溶液，添加氯化銨(83毫克，1.5毫摩爾)、二異丙基乙基胺(0.27毫升、1.5毫摩爾)及HBTU(580毫克，1.5毫摩爾)。所得混合物在室溫下攪拌15小時(shí)。添加額外的氯化銨(37毫克，0.7毫摩爾)、二異丙基乙基胺(0.12毫升、0.75毫摩爾)及HBTU(266毫克，0.7毫摩爾)。再繼續(xù)攪拌5小時(shí)，并且混合物以醋酸乙酯(50毫升)稀釋?zhuān)⑶乙燥柡蚇aHCO3(20毫升)洗滌。有機(jī)層被分離，并且水相以醋酸乙酯(2×50毫升)萃取。經(jīng)合并的有機(jī)層以鹽水洗滌、在硫酸鈉上干燥并且濃縮成微黃色粗制物。殘余物在RP-HPLC上、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生6(128毫克，30％)。LRMS(M+H+)m/z424.1。對(duì)在DMF(2毫升)中之6(94毫克，0.2毫摩爾)的溶液，在0℃下添加氰酸氯(45毫克，0.2毫摩爾)，并且反應(yīng)混合物在氮?dú)庀聰嚢琛Ｔ?小時(shí)之后，反應(yīng)溶液被濃縮，產(chǎn)生7(79毫克)，其被使用于下一步而無(wú)進(jìn)一步純化。LRMS(M+H+)m/z406.1。對(duì)在甲醇(2毫升)中之7(17毫克，0.04毫摩爾)的溶液，在HCl流下攪拌15分鐘。然后在氮?dú)庀卤淮蹬莸椒磻?yīng)混合物中。在1小時(shí)之后，反應(yīng)溶液被濃縮，產(chǎn)生8，其被使用于下一步而無(wú)進(jìn)一步純化。LRMS(M+H+)m/z438.1。對(duì)在醋酸(2毫升)中之粗制8(17毫克，～0.04毫摩爾)的溶液，添加鄰-亞苯基二胺(50毫克，0.46毫摩爾)，并且所得溶液在80℃流下攪拌1小時(shí)。反應(yīng)混合物被濃縮，并且經(jīng)由制備性薄層色譜分析、使用在二氯甲烷中之5％甲醇為洗脫液純化，產(chǎn)生為白色固體。該固體在RP-HPLC上、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生9(9毫克，45％)。LRMS(M+H+)m/z497.1。實(shí)施例21對(duì)在DMF(1毫升)中之5(50毫克，0.12毫摩爾)的溶液，添加芐基胺(16毫克，0.14毫摩爾)及HATU(57毫克，0.14毫摩爾)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3小時(shí)。所得溶液被過(guò)濾，并且濾液以RP-HPLC、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生6(16毫克，26％)。LRMS(M+H+)m/z514.1。實(shí)施例22-24對(duì)在乙醇(60毫升)、甲醇(20毫升)、醋酸(60毫升)及水(30毫升)中之H-Phe(4-NHBoc)-OH(4.8克，17.1毫摩爾)溶液，添加氧化鉑(IV)(360毫克，1.6毫摩爾)。反應(yīng)混合物在H2流(45psi)下攪拌20小時(shí)。催化劑經(jīng)PTFE(0.45微米)濾器以過(guò)濾移除，并且溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生2(5克)，其被用于下一步而無(wú)進(jìn)一步純化。LRMS(M+H+)m/z287.1。對(duì)在DMF(20毫升)中之粗制2(3.2克，11.2毫摩爾)溶液，添加3(3.8克，10毫摩爾)及N，N-二異丙基乙基胺(5.2毫升，30毫摩爾)。反應(yīng)以LC/MS監(jiān)測(cè)。在完成時(shí)，甲基胺(在THF中之2摩爾濃度、7.5毫升、15毫摩爾)及HBTU(5.7克，15毫摩爾)被添加到反應(yīng)溶液中。反應(yīng)被攪拌過(guò)夜。混合物以醋酸乙酯(60毫升)稀釋?zhuān)⑶乙燥柡蚇aHCO3(20毫升)洗滌。有機(jī)層被分離，并且水相以醋酸乙酯(2×50毫升)萃取。經(jīng)合并的有機(jī)層以鹽水洗滌、在硫酸鈉上干燥并且濃縮。所得粗制物經(jīng)由RP-HPLC、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生4(1.0毫克，從1為18％)。LRMS(M+H+)m/z496.1。對(duì)在二氯甲烷(25毫升)中之4(1.0毫克，2.0毫摩爾)的溶液，添加三氟醋酸(8毫升)。所得溶液在室溫下被攪拌4小時(shí)，并且然后在減壓下被濃縮。殘余物經(jīng)由RP-HPLC、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生5(820毫克，79％)。LRMS(M+H+)m/z396.1。對(duì)在THF(3毫升)中之5(75毫克，0.16毫摩爾)溶液，添加4-氟芐酰基氯(28微升，0.23毫摩爾)及N，N-二異丙基乙基胺(100微升，0.57毫摩爾)。反應(yīng)混合物被攪拌過(guò)夜。所得溶液被濃縮，并且在RP-HPLC上、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生6(65毫克，78％)。LRMS(M+H+)m/z518.1。對(duì)在THF(3毫升)中之5(75毫克，0.16毫摩爾)溶液，添加氯甲酸異丁酯(30微升，0.23毫摩爾)及N，N-二異丙基乙基胺(100微升，0.57毫摩爾)。反應(yīng)混合物被攪拌過(guò)夜。所得溶液被濃縮，并且在RP-HPLC上、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生7(62毫克，78％)。LRMS(M+H+)m/z496.1。對(duì)在THF(3毫升)中之5(75毫克，0.16毫摩爾)溶液，添加異氰酸叔丁酯(26微升，0.23毫摩爾)及N，N-二異丙基乙基胺(100微升，0.57毫摩爾)。反應(yīng)混合物被攪拌過(guò)夜。所得溶液被濃縮，并且在RP-HPLC上、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生7(55毫克，69％)。LRMS(M+H+)m/z495.1。實(shí)施例25對(duì)在乙腈(5毫升)中之Boc-L-絲氨酸-β-內(nèi)酯(200毫克，1.07毫摩爾)溶液，添加29(154毫克，1.07毫摩爾)?；旌衔镌?6℃下被攪拌過(guò)夜。在減壓下被濃縮，產(chǎn)生30。粗制30被溶液于DMF(1毫升)中，以甲基胺(在THF中之2摩爾濃度)(0.54毫升，1.08毫摩爾)及HBTU(404毫克，1.07毫摩爾)處理。混合物被攪拌1小時(shí)，之后其被過(guò)濾，并且濾液以反相HPLC(C18)、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生31(50.0克，14％)。對(duì)在DCM(5毫升)中之31(50.0克，0.145毫摩爾)溶液，在室溫下添加TFA(5毫升)。反應(yīng)混合物被攪拌20分鐘。溶劑在減壓下被蒸發(fā)，并且再懸浮于DMF(100毫升)中、續(xù)以在室溫下添加6(66.3毫克，0.174毫摩爾)及二異丙基乙基胺(51微升，0.290毫摩爾)。反應(yīng)混合物被攪拌1小時(shí)，然后在減壓下濃縮，并且以快速硅膠(己烷∶EtOAc，1∶1)純化，產(chǎn)生32(50.0毫克，78.2％)。LRMS(M+H+)m/z441.1。實(shí)施例26對(duì)在水(1毫升)及甲醇(1毫升)中之40(50.0克，0.0874毫摩爾)溶液，添加EDTA鈉(88.1毫克，0.262毫摩爾)及HOAc(83.7毫克，0.262毫摩爾)。反應(yīng)混合物在100℃下攪拌1小時(shí)，并且然后在減壓下濃縮。殘余物以快速硅膠柱(DCM∶MeOH，10∶1)純化，產(chǎn)生41(29.6毫克，71％)。LRMS(M+H+)m/z472.4。實(shí)施例27對(duì)在DMF(20毫升)中之51(1.0克，8.76毫摩爾)溶液，在室溫下添加6(3.34克，8.76毫摩爾)及二異丙基乙基胺(2.30毫升，13.1毫摩爾)。反應(yīng)混合物以反相HPLC/MS監(jiān)測(cè)。在完成時(shí)，在THF中之2摩爾濃度甲基胺(8.8毫升，17.5毫摩爾)及HBTU(4.97克，13.1毫摩爾)被添加到反應(yīng)溶液中。在攪拌1小時(shí)之后，反應(yīng)混合物被濃縮，并且以快速硅膠柱(己烷∶EtOAc，1∶1)純化，產(chǎn)生53(1.0克，35.3％)。對(duì)在乙醇(20毫升)中之53(1.0克，3.09毫摩爾)溶液，添加三乙基胺(0.517毫升、3.17毫摩爾)及鹽酸羥胺(258毫克，3.71毫摩爾)。在回流下攪拌24小時(shí)之后，溶劑在減壓下被蒸發(fā)。殘余物在反相HPLC(C18)上純化、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生54(280毫克，25％)。對(duì)在THF(50毫升)中之54(280毫克，0.875毫摩爾)溶液，在室溫下添加二異丙基乙基胺(64微升，0.942毫摩爾)及芐酰基氯(100微升，0.864毫摩爾)。在攪拌30分鐘之后，反應(yīng)混合物被濃縮，殘余物被溶解于HOAc(100毫升)中，并且混合物在回流下攪拌5小時(shí)。溶劑在減壓下被移除，并且殘余物在快速硅膠柱(己烷∶EtOAc，1∶1)上純化，產(chǎn)生56(49毫克，14.1％)。LRMS(M+H+)m/z443.1。實(shí)施例28對(duì)在DMF(50毫升)中之57(3.0克，10.4毫摩爾)溶液，添加58(1.69克，12.4毫摩爾)及HBTU(5.92克，15.6毫摩爾)。反應(yīng)混合物以反相HPLC/MS監(jiān)測(cè)。在攪拌5小時(shí)之后，溶劑在減壓下被蒸發(fā)，并且殘余物在快速硅膠柱(己烷∶EtOAc，1∶1)上純化，產(chǎn)生59(3.50克，82％)。對(duì)在甲苯(5毫升)中之59(200毫克，0.491毫摩爾)溶液，添加Lawesson’s試劑(109毫克，0.270毫摩爾)。在100℃下攪拌30分鐘之后，溶劑在減壓下被蒸發(fā)。殘余物在快速硅膠柱(己烷∶EtOAc，1∶1)上純化，產(chǎn)生60(160毫克，80％)。對(duì)在DCM(5毫升)中之60(150毫克，0.431毫摩爾)溶液，在室溫下添加TFA(5毫升)。反應(yīng)混合物被攪拌2小時(shí)。溶劑在減壓下被蒸發(fā)，并且殘余物在真空中干燥過(guò)夜。對(duì)在DMF(5毫升)中之61(0.395毫摩爾)溶液，在室溫下添加6(180毫克，0.473毫摩爾)及二異丙基乙基胺(138微升，0.970毫摩爾)。反應(yīng)混合物以HPLC/MS監(jiān)測(cè)。在完成時(shí)，在THF中之2摩爾濃度甲基胺(395微升，0.970毫摩爾)及HBTU(225毫克，0.593毫摩爾)被添加到反應(yīng)溶液中。反應(yīng)混合物被攪拌30分鐘，之后混合物被過(guò)濾，并且濾液以反相HPLC(C18)、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生62(70.0毫克，38.6％)。LRMS(M+H+)m/z469.0。實(shí)施例29在MeOH(25毫升)中之腈1(640毫克，1.6毫摩爾)的溶液，在0℃下以HCl氣體飽和。反應(yīng)容器被容許加溫到23℃。在23℃下2小時(shí)之后，反應(yīng)混合物在真空中被濃縮，并且所得殘余物2被使用而無(wú)進(jìn)一步純化。粗制imidate2(50毫克，0.12毫摩爾)、2-氨基-3-甲基-丙醇(36毫克，0.35毫摩爾)及THF(1毫升)的溶液，在80℃下被攪拌30分鐘。然后反應(yīng)混合物在真空中被濃縮，并且所得殘余物被溶解于EtOAc(10毫升)中，并且以1當(dāng)量濃度NaOH(5毫升)及鹽水(5毫升)洗滌。有機(jī)相被干燥(MgSO4)、過(guò)濾并且在真空中濃縮。所得殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，100％EtOAc)，產(chǎn)生為25毫克的噁唑3(43％)。LRMS(M+H+)m/z486.3。實(shí)施例30粗制imidate2(50毫克，0.12毫摩爾)、亞苯基二胺(36毫克，0.32毫摩爾)及醋酸(1毫升)的溶液，在80℃下被攪拌30分鐘。然后反應(yīng)混合物在真空中被濃縮，并且所得殘余物被溶解于EtOAc(10毫升)中，并且以1當(dāng)量濃度NaOH(5毫升)及鹽水(5毫升)洗滌。有機(jī)相被干燥(MgSO4)、過(guò)濾并且在真空中濃縮。所得殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，1∶3己烷∶EtOAc)，產(chǎn)生為20毫克(34％)的苯并咪唑3。LRMS(M+H+)m/z491.2。實(shí)施例31溴化物4(500毫克，1.1毫摩爾)、4-甲基-1-戊炔-3-醇(0.15毫升、1.32毫摩爾)、氯化雙(三苯基膦基)鈀(II)(390毫克，0.55毫摩爾)、碘化亞銅(52毫克，0.28毫摩爾)、三乙基胺(5毫升)及DMF(10毫升)溶液，在100℃下被攪拌3小時(shí)。然后反應(yīng)混合物在真空中被濃縮，并且所得殘余物被溶解于EtOAc(50毫升)中，并且以1當(dāng)量濃度HCl(3×20毫升)及鹽水(20毫升)洗滌。有機(jī)層被干燥(MgSO4)、過(guò)濾并且在真空中濃縮。所得殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，1∶1己烷∶EtOAc)，產(chǎn)生為200毫克(42％)的乙炔5。LRMS(M+H+)m/z471.2。醇5(50毫克，0.12毫摩爾)、Dess-Martinperiodinane(90毫克，0.21毫摩爾)及CH2Cl2(3毫升)溶液，在23℃下被攪拌2小時(shí)。反應(yīng)混合物以EtOAc(20毫升)稀釋?zhuān)⑶乙燥柡蚇aHCO3(10毫升)及鹽水(20毫升)洗滌。有機(jī)層被干燥(MgSO4)、過(guò)濾并且在真空中濃縮。所得殘余物被直接使用。粗制酮6(30毫克，0.06毫摩爾)、聯(lián)氨(0.13毫升，在THF中之1.0摩爾濃度)及DMF(1毫升)溶液，在23℃下被攪拌12小時(shí)。然后反應(yīng)混合物以EtOAc(10毫升)稀釋?zhuān)⑶乙?.1當(dāng)量濃度HCl(5毫升)及鹽水(5毫升)洗滌。有機(jī)相被干燥(MgSO4)、過(guò)濾并且在真空中濃縮。所得殘余物以反相HPLC(C18、乙腈/水)純化，產(chǎn)生5毫克(18％)的吡嗪7。LRMS(M+H+)m/z483.2。實(shí)施例32溴化物4(500毫克，1.1毫摩爾)、雙(吡哪酸)二硼(420毫克，1.65毫摩爾)、醋酸鉀(433毫克，4.4毫摩爾)、[1，1’-雙(二苯基膦基)二茂鐵]-二氯合鈀(II)(180毫克，0.22毫摩爾)及DMF(5毫升)溶液，在80℃下被攪拌3分鐘。然后添加溴化物9(366毫克，4.65毫摩爾)及Na2CO3(4.4毫升，在H2O中之2.0摩爾濃度)，并且混合物在80℃下攪拌2小時(shí)。然后反應(yīng)混合物以EtOAc(50毫升)稀釋?zhuān)瑢臃蛛x，并且有機(jī)相以0.1當(dāng)量濃度HCl(10毫升)及鹽水(10毫升)洗滌。有機(jī)層被干燥(MgSO4)、過(guò)濾并且在真空中濃縮。所得殘余物以反相HPLC(C18、乙腈/水)純化，產(chǎn)生165毫克(28％)的三唑10。LRMS(M+H+)m/z531.2。酯10(165毫克，0.31毫摩爾)、氫氧化鈉(35毫克，0.62毫摩爾)、H2O(1毫升)、MeOH(1毫升)及THF(2毫升)溶液，在50℃下被攪拌2小時(shí)。然后反應(yīng)混合物以EtOAc(20毫升)稀釋?zhuān)⑶乙?當(dāng)量濃度HCl(5毫升)及鹽水(10毫升)洗滌。有機(jī)層被干燥(MgSO4)、過(guò)濾并且在真空中濃縮。所得殘余物被直接使用。酸11(140毫克，0.28毫摩爾)、五氟酚三氟醋酸酯12(96微升，0.56毫摩爾)、三乙基胺(77微升，0.56毫摩爾)及DMF(4毫升)溶液，在23℃下攪拌2小時(shí)。然后反應(yīng)混合物以EtOAc(20毫升)稀釋?zhuān)⑶乙?當(dāng)量濃度HCl(5毫升)及飽和水性NaHCO3(5毫升)及鹽水(10毫升)洗滌。有機(jī)層被干燥(MgSO4)、過(guò)濾并且在真空中濃縮。所得殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，1∶1己烷∶EtOAc)，產(chǎn)生為80毫克的酯13。酯13(20毫克，0.03毫摩爾)、異丙基胺(5微升，0.06毫摩爾)及THF(1毫升)溶液，在23℃下攪拌12小時(shí)。然后反應(yīng)混合物以EtOAc(20毫升)稀釋?zhuān)⑶乙?當(dāng)量濃度HCl(5毫升)、飽和水性NaHCO3(5毫升)及鹽水(10毫升)洗滌。有機(jī)層被干燥(MgSO4)、過(guò)濾并且在真空中濃縮。所得殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，1∶3己烷∶EtOAc)，產(chǎn)生為9毫克的酰胺14。LRMS(M+H+)m/z543.2。實(shí)施例33在MeOH(10毫升)中之imidate2(1.6克，4.0毫摩爾)及2.0摩爾濃度NH3的溶液，在23℃下攪拌12小時(shí)。然后反應(yīng)混合物在真空中濃縮，并且所得殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，1∶10CH2Cl2∶MeOH)，產(chǎn)生為1.3克(78％)的脒17。LRMS(M+H+)m/z417.2。脒17(50毫克，0.12毫摩爾)、異丁酰基醋酸甲酯(17微升，0.12毫摩爾)及NaOMe(在MeOH中0.5摩爾濃度，0.72毫升)，在120℃下攪拌1小時(shí)。然后反應(yīng)混合物在真空中濃縮，并且所得殘余物以反相HPLC(C18、乙腈/水)純化，產(chǎn)生10毫克(16％)的嘧啶18。LRMS(M+H+)m/z511.2。實(shí)施例34溴化物4(1.0克，2.20毫摩爾)、二氯雙(三苯基膦)鈀(II)(154毫克，0.220摩爾)、三丁基(1-乙氧基乙烯基)錫(1.49毫升、4.41毫摩爾)及甲苯(15毫升)溶液，在N2下、100℃攪拌6小時(shí)。在完成時(shí)，以LCMS監(jiān)測(cè)，反應(yīng)混合物被冷卻、經(jīng)由Celite過(guò)濾，并且在真空中濃縮。所得殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，2∶1∶0.1EtOAc∶己烷∶三乙基胺)，產(chǎn)生540毫克(55％)的苯乙烯19。LRMS(M+H+)m/z445.2?；衔?9(540毫克，1.21毫摩爾)、THF∶H2O(3∶1，12毫升)中與N-溴-琥珀酰亞胺(216毫克，1.21毫摩爾)溶液，在23℃下攪拌15分鐘。然后反應(yīng)混合物在真空下濃縮，并且粗制物以EtOAc(30毫升)稀釋?zhuān)喳}水(10毫升)洗滌、并且在真空下濃縮。所得殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，1∶1EtOAc∶己烷)，產(chǎn)生210毫克(35％)的溴酮20。LRMS(M+H+)m/z495.1。溴酮20(210毫克，0.42毫摩爾)、K2CO3(174毫克，1.26毫摩爾)、叔丁基胍鹽酸鹽(115毫克，0.84毫摩爾)及DMF(4毫升)溶液在23℃、N2下攪拌18小時(shí)。反應(yīng)混合物在高真空(0.1毫米Hg)中濃縮，并且所得殘余物以柱色譜分析(硅膠，4∶1EtOAc∶己烷)，產(chǎn)生50毫克(24％)的咪唑21。LRMS(M+H+)m/z497.2。實(shí)施例35溴酮20(25毫克，0.05毫摩爾)、K2CO3(14毫克，0.1毫摩爾)、乙酰胺(6毫克，0.1毫摩爾)及DMF(1毫升)溶液在100℃下攪拌4小時(shí)。反應(yīng)混合物以EtOAc(15毫升)稀釋?zhuān)喳}水(3×10毫升)洗滌、并且在真空下濃縮。所得殘余物以柱色譜分析(硅膠，2∶1EtOAc∶己烷)，產(chǎn)生5毫克(22％)的噁唑22。LRMS(M+H+)m/z446.2。實(shí)施例36溴酮20(25毫克，0.05毫摩爾)、K2CO3(14毫克，0.1毫摩爾)、氰基硫代乙酰胺(10毫克，0.1毫摩爾)及DMF(1毫升)溶液在100℃下攪拌4小時(shí)。反應(yīng)混合物以EtOAc(15毫升)稀釋?zhuān)喳}水(3×10毫升)洗滌、并且在真空下濃縮。所得殘余物以反相HPLC(C18，乙腈及H2O)純化，產(chǎn)生5毫克(20％)的噻唑23。LRMS(M+H+)m/z497.2。實(shí)施例37溴酮20(30毫克，0.06毫摩爾)、K2CO3(25毫克，0.18毫摩爾)、苯基硫基尿素(18毫克，0.12毫摩爾)及DMF(1毫升)溶液在100℃下攪拌4小時(shí)。反應(yīng)混合物以EtOAc(15毫升)稀釋?zhuān)喳}水(3×10毫升)洗滌、并且在真空下濃縮。所得殘余物以反相HPLC(C18，乙腈/水)純化，產(chǎn)生10毫克(30％)的氨基噻唑24。LRMS(M+H+)m/z549.2。實(shí)施例38苯胺25(100毫克，0.25毫摩爾)、濃HCl(1毫升)及AcOH(1毫升)溶液被冷卻到-5℃。然后在1分鐘內(nèi)緩慢添加NaNO2(20毫克，0.29毫摩爾)到該溶液中。反應(yīng)溶液在-5℃下攪拌45分鐘，以提供二偶氮鹽溶液。在另一個(gè)反應(yīng)容器中，SO2吹經(jīng)AcOH(1毫升)及氯化亞銅(I)(6毫克，0.06毫摩爾)溶液中，直到藍(lán)綠色持續(xù)。然后該二偶氮鹽溶液在1分鐘內(nèi)緩慢添加到SO2/CuCl溶液中。反應(yīng)溶液之內(nèi)部溫度在低于30℃下攪拌。然后所得反應(yīng)溶液被倒入冷H2O(10毫升)中，以二乙醚(3×10毫升)萃取，并且有機(jī)層被干燥(MgSO4)、過(guò)濾并且在真空中濃縮。粗制磺?；?6被使用而無(wú)進(jìn)一步純化。磺?；?6(74毫克，0.16毫摩爾)、二異丙基乙基胺(81毫升，0.16毫摩爾)、芐基胺(17毫升，0.16毫摩爾)及THF(1毫升)溶液，在23℃下攪拌18小時(shí)。反應(yīng)混合物以EtOAc(15毫升)稀釋?zhuān)⑶乙喳}水(3×10毫升)洗滌并且在真空中濃縮。所得殘余物以柱色譜分析(硅膠，1∶1EtOAc/己烷)，產(chǎn)生為25毫克的磺酰胺27。LRMS(M+H+)m/z544.2。實(shí)施例39對(duì)氨基酸64(2.20克，8.27毫摩爾)、五氟苯基酯28(3.0克，7.88毫摩爾)、二異丙基乙基胺(5.5毫升，31.5毫摩爾)及DMF(30毫升)溶液，在23℃下攪拌。在18小時(shí)之后，添加H2NMe(在THF中之2.0摩爾濃度，3.94毫升)、O-苯并三唑-N，N，N’，N’-四甲基-脲-六氟-磷酸鹽(HBTU，6.0克、15.75毫摩爾)。在4小時(shí)之后，反應(yīng)溶液被溶解于HOAc(200毫升)中，以鹽水(3×200毫升)洗滌并且在真空中濃縮。所得殘余物以柱色譜分析(硅膠，2∶1EtOAc/己烷)，產(chǎn)生為3.5克(93％)的酰胺30。LRMS(M+H+)m/z475.2。酯66(3.5克，7.36毫摩爾)、TFA∶H2O(97.5；2.5，10毫升)中與CH2Cl2(10毫升)溶液，在23℃下攪拌3小時(shí)。反應(yīng)溶液在真空下濃縮，并且所得殘余物被置于高真空下2小時(shí)，并且然后被使用而無(wú)進(jìn)一步純化。酸67(4.7克，11.2毫摩爾)、五氟酚三氟醋酸酯12(3.86毫升，22.4毫摩爾)、三乙基胺(4.7毫升，33.6毫摩爾)及DMF(25毫升)溶液，在23℃下攪拌18小時(shí)。然后反應(yīng)混合物以EtOAc(200毫升)稀釋?zhuān)⑶乙?當(dāng)量濃度HCl(50毫升)及飽和水性NaHCO3(50毫升)及鹽水(100毫升)洗滌。有機(jī)層被干燥(MgSO4)、過(guò)濾并且在真空中濃縮。所得殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，2∶1己烷∶EtOAc)，產(chǎn)生為1.1克(17％)的酯68。酯68(20毫克，0.03毫摩爾)、芐基胺(6微克，0.05毫摩爾)及THF(0.5毫升)的溶液，在23℃下攪拌18小時(shí)。然后反應(yīng)混合物以EtOAc(10毫升)稀釋?zhuān)⑶乙?當(dāng)量濃度HCl(5毫升)、飽和水性NaHCO3(5毫升)及鹽水(5毫升)洗滌。有機(jī)層被干燥(MgSO4)、過(guò)濾并且濾液在真空中濃縮。所得殘余物以反相HPLC(C18、乙腈/水)純化，產(chǎn)生13毫克(85％)的酰胺14。LRMS(M+H+)m/z508.2。實(shí)施例40酯66(50毫克，0.1毫摩爾)、LiAlH4(在THF中1.0摩爾濃度，0.21毫升)及THF(1毫升)溶液在23℃下攪拌2小時(shí)。反應(yīng)混合物以MeOH(1毫升)中止反應(yīng)，然后以EtOAc(10毫升)稀釋、以1當(dāng)量濃度HCl(5毫升)及鹽水(5毫升)洗滌。有機(jī)層被干燥(MgSO4)、過(guò)濾，并且濾液在真空中濃縮。所得殘余物以反相HPLC(C18，乙腈/水)純化，產(chǎn)生2毫克(5％)的醇70。LRMS(M+H+)m/z405.2。實(shí)施例4171(108毫克，0.27毫摩爾)、LiAlH4(在THF中1.0摩爾濃度，1.0毫升)及THF(2毫升)溶液在23℃下攪拌2小時(shí)。反應(yīng)混合物以MeOH中止反應(yīng)，然后以EtOAc(10毫升)稀釋、以1當(dāng)量濃度HCl(5毫升)及鹽水(5毫升)洗滌。有機(jī)層被干燥(MgSO4)、過(guò)濾，并且濾液在真空中濃縮。所得殘余物以反相HPLC(C18，乙腈/水)純化，產(chǎn)生30毫克(28％)的胺72。LRMS(M+H+)m/z404.2。胺72(10毫克，0.22毫摩爾)、芐?；?2.3微升、0.03毫摩爾)、三乙基胺(50微升、0.36毫摩爾)及CH2Cl2(0.5毫升)溶液在23℃下攪拌2小時(shí)。反應(yīng)混合物以EtOAc(15毫升)稀釋?zhuān)⒁?當(dāng)量濃度HCl(2毫升)、飽和水性NaHCO3(2毫升)及鹽水(5毫升)洗滌。有機(jī)層被干燥(MgSO4)、過(guò)濾并且在真空中濃縮。所得殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，2∶1己烷類(lèi)∶EtOAc)，產(chǎn)生5毫克(49％)的酰胺73。LRMS(M+H+)m/z508.2。實(shí)施例4271(300毫克，0.75毫摩爾)、鹽酸羥胺(156毫克，2.25毫摩爾)、K2CO3(726毫克，5.25毫摩爾)及EtOH(10毫升)溶液在80℃下攪拌18小時(shí)。反應(yīng)混合物在真空中濃縮。所得殘余物以EtOAc(15毫升)稀釋?zhuān)⒁喳}水(15毫升)洗滌。有機(jī)層被干燥(MgSO4)、過(guò)濾并且濾液在真空中濃縮。所得殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，1∶20MeOH∶EtOAc)，產(chǎn)生80毫克(25％)的羥基脒74。LRMS(M+H+)m/z433.2。羥基脒74(20毫克，0.05毫摩爾)、羰基二咪唑(CDI、15毫克，0.09毫摩爾)、三乙基胺(13微升、0.09毫摩爾)及DMF(1毫升)溶液在100C下攪拌2小時(shí)。有機(jī)層被干燥(MgSO4)、過(guò)濾并且在真空中濃縮。所得殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，1∶20MeOH∶EtOAc)，產(chǎn)生10毫克(44％)的噁二唑酮75。LRMS(M+H+)m/z459.2。實(shí)施例43羥基脒74(20毫克，0.05毫摩爾)、三乙基胺(13微升、0.09毫摩爾)、醋酸酐(0.5毫升)及DMF(0.5毫升)溶液在100℃下攪拌2小時(shí)。所得殘余物以EtOAc(15毫升)稀釋?zhuān)⒁喳}水(3×5毫升)洗滌。有機(jī)層被干燥(MgSO4)、過(guò)濾并且在真空中濃縮。所得殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，1∶20MeOH∶EtOAc)，產(chǎn)生13毫克(67％)的噁二唑75。LRMS(M+H+)m/z457.2。實(shí)施例44對(duì)在DCM(10毫升)中之63(100毫克，0.367毫摩爾)溶液，添加苯甲酰氯(93.8微升、0.808毫摩爾)及二異丙基乙基胺(192微升、1.10毫摩爾)在攪拌10分鐘之后，添加在THF中之2當(dāng)量濃度甲基胺(550微升、1.10毫摩爾)到反應(yīng)溶液中。反應(yīng)混合物被攪拌30分鐘并且濃縮。殘余物在快速硅膠柱(己烷∶EtOAc1∶1)上純化，產(chǎn)生66(100毫克，70％)。對(duì)在DCM(5毫升)中之66(100毫克，0.257毫摩爾)溶液，在室溫下添加TFA(5毫升)。反應(yīng)混合物被攪拌100分鐘。溶劑在減壓下蒸發(fā)，并且殘余物在高真空下干燥過(guò)夜。殘余物被溶解于DCM(2毫升)中，然后與6(117毫克，0.308毫摩爾)及二異丙基乙基胺(90微升、0.515毫摩爾)在室溫下攪拌。反應(yīng)混合物以反相HPLC/MS監(jiān)測(cè)。反應(yīng)混合物被攪拌30分鐘，之后其被過(guò)濾并濾液以反相HPLC(C18)、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生67(100毫克，52.9％)。LRMS(M+H+)m/z486.2。實(shí)施例45對(duì)在DCM(10毫升)中之68(500毫克，1.23毫摩爾)溶液，在室溫下添加TFA(5毫升)。反應(yīng)混合物被攪拌10分鐘，并且溶劑在減壓下蒸發(fā)，對(duì)其添加6(562毫克，1.48毫摩爾)及二異丙基乙基胺(429微升、2.46毫摩爾)在室溫下攪拌。反應(yīng)混合物以反相HPLCMS監(jiān)測(cè)。在起始物質(zhì)不再被觀察到之后，對(duì)溶液添加在THF中之2當(dāng)量濃度甲基胺(1.23毫升、2.46毫摩爾)及HBTU(702毫克、1.85毫摩爾)到溶液中。在攪拌30分鐘之后，溶劑在減壓下蒸發(fā)，并且殘余物快速柱色譜分析(己烷∶EtOAc，1∶1)上純化，產(chǎn)生69(450毫克，71％)。LCMS(M+H+)m/z516.2。69(400毫克，0.775毫摩爾)被溶解于HBr/HOAc溶液(10毫升)中。在被攪拌10分鐘之后，殘余物被溶解于碳酸氫鈉溶液(50毫升)中，并以DCM(50毫升)萃取三次。經(jīng)組合之DCM層在硫酸鈉上干燥并且過(guò)濾，并且濾液在減壓下濃縮，產(chǎn)生70(285毫克，96％)。對(duì)溶液70(82.5毫克，0.216毫摩爾)添加芐基溴(30.8微升、0.259毫摩爾)及二異丙基乙基胺(75.3微升、0.432毫摩爾)。反應(yīng)混合物以反相HPLC/MS監(jiān)測(cè)。在被攪拌2小時(shí)之后，混合物被過(guò)濾并且濾液以反相HPLC(C18)、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生71(183毫克，90％)。LCMS(M+H+)m/z472.1。對(duì)在水(1毫升)及甲醇(1毫升)中之71(128毫克，0.271毫摩爾)溶液，添加EDTA(273毫克，0.814毫摩爾)、HOAc(20微升)及Hg(OAc)2(259毫克，0.814毫摩爾)。反應(yīng)混合物在100℃下攪拌8小時(shí)，之后溶劑在減壓下蒸發(fā)。殘余物被再溶解于DMF(2毫升)中、被過(guò)濾并濾液以反相HPLC(C18)、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生72(37.6毫克，28.5％)。LCMS(M+H+)m/z486.1。實(shí)施例46對(duì)在甲醇/水(2/1，20毫升)中之42(1.0克，3.24毫摩爾)溶液，添加碳酸氫鈉溶液(327毫克，3.24毫摩爾)。當(dāng)在冰浴上攪拌時(shí)，逐滴添加溴(200微升，3.89毫摩爾)到反應(yīng)混合物中。反應(yīng)混合物以反相HPLCMS監(jiān)測(cè)。在起始物質(zhì)不再被觀察到之后，溶劑在減壓下蒸發(fā)。殘余物被溶解于水(100毫升)中，并以DCM(50毫升)萃取三次。經(jīng)組合之DCM層在硫酸鈉上干燥、混合物被過(guò)濾，并且濾液被濃縮，產(chǎn)生43。對(duì)在甲醇(50毫升)中之粗制43(3.24毫摩爾)溶液，添加二異丙基乙基胺(1.14毫升、6.4毫摩爾)及芐基硫代酰胺44(445毫克，3.24毫摩爾)。在回流24小時(shí)之后，溶劑在減壓下蒸發(fā)。殘余物以反相HPLC/MS監(jiān)測(cè)。反應(yīng)混合物被攪拌30分鐘，之后其被過(guò)濾并濾液以反相HPLC(C18)、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生45(200毫克，18％)。對(duì)在DCM(5毫升)中之45(150毫克，0.431毫摩爾)溶液，在室溫下添加TFA(5毫升)。反應(yīng)混合物被攪拌10分鐘。然后溶劑在減壓下蒸發(fā)，并且殘余物46(107毫克，100％)在高真空下干燥過(guò)夜。對(duì)在DMF(20毫升)中之46(0.431毫摩爾)攪拌溶液，在室溫下添加6(197毫克，0.517毫摩爾)及二異丙基乙基胺(150微升、0.862毫摩爾)。反應(yīng)混合物以反相HPLC/MS監(jiān)測(cè)。在起始物質(zhì)不再被觀察到之后，對(duì)溶液添加在THF中之2當(dāng)量濃度甲基胺(0.431毫升、0.862毫摩爾)及HBTU(245毫克、0.647毫摩爾)到溶液中。反應(yīng)混合物被攪拌30分鐘，之后混合物被過(guò)濾，并濾液以反相HPLC(C18)、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生47(80.0毫克，40.5％)。LCMS(M+H+)m/z458.1。相同步驟被用于47，用于制造50(58.3毫克)。LCMS(M+H+)m/z441.4。實(shí)施例47對(duì)在THF(200毫升)中之Boc-對(duì)-聯(lián)苯基丙氨酸(3.0克，8.79毫摩爾)在冰浴上的攪拌溶液，添加LAH(在THF中1.0摩爾濃度，17.6毫升，17.6毫摩爾)。在攪拌2小時(shí)之后，反應(yīng)混合物以MeOH(10毫升)中止反應(yīng)，續(xù)以NaOH溶液(17.6毫升、35.1毫摩爾)?；旌衔锝?jīng)過(guò)Celite過(guò)濾，并且濾液在減壓下濃縮。殘余物被溶解于水(200毫升)中，并以DCM(200毫升)萃取三次。經(jīng)組合之DCM層被干燥(Na2SO4)、過(guò)濾并且在減壓下被濃縮，產(chǎn)生10(2.85克，98％)。對(duì)在THF(250毫升)中之10(2.85毫克、8.70毫摩爾)的攪拌溶液逐滴添加11(1.54毫克、10.4毫摩爾)及三苯基膦(2.51毫克、9.57毫摩爾)、DEAD(1.49毫升、9.57毫摩爾)，并且反應(yīng)混合物被攪拌30分鐘、在真空中濃縮，并且殘余物在快速硅膠柱(己烷∶EtOAc，6∶1)上純化，獲得產(chǎn)物12(2.0克，50％)。對(duì)在DCM(50毫升)中之12(2.0克，4.38毫摩爾)溶液，在室溫下添加TFA(05毫升)。反應(yīng)混合物被攪拌20分鐘，并且然后溶劑在真空中濃縮，產(chǎn)生13(1.56克，100％)。對(duì)在DMF(100毫升)中之13溶液，在室溫下添加6(2.0克，4.38毫摩爾)及二異丙基乙基胺(1.53毫升、8.72毫摩爾)。反應(yīng)混合物被攪拌過(guò)夜。溶劑在減壓下蒸發(fā)，并且殘余物在硅膠(己烷∶EtOAc，1∶1)上純化，產(chǎn)生14(1.5克，61.9％)。LCMS(M+H+)m/z553.1。對(duì)在甲醇(20毫升)中之14(1.5克，2.71毫摩爾)溶液添加聯(lián)胺水合物(0.845毫升、27.1毫摩爾)。反應(yīng)混合物在0℃下攪拌5小時(shí)，并冷卻到室溫。固體被過(guò)濾掉，并且濾液在減壓下濃縮，產(chǎn)生15(1.0克，87.2％)。LCMS(M+H+)m/z423.1。實(shí)施例48對(duì)在DCM(10毫升)中之15(20.0毫克，0.0473毫摩爾)溶液，添加二異丙基乙基胺(24.7微升、0.142毫摩爾)及乙?；?5.0微升、0.0709毫摩爾)。反應(yīng)混合物被攪拌10分鐘，然后在減壓下濃縮，并以反相HPLC(C18，乙腈/水)純化，產(chǎn)生16(8.0毫克，36.4％)。LCMS(M+H+)m/z465.2。對(duì)在DCM(2毫升)中之15(60.0毫克，0.142毫摩爾)溶液，添加二異丙基乙基胺(49.5微升、0.282毫摩爾)、17(32.2毫克，0.170毫摩爾)及HBTU(80.8毫克、0.213毫摩爾)。反應(yīng)混合物被攪拌10分鐘，并且然后在減壓下濃縮，并且產(chǎn)物以反相HPLC(C18，乙腈/水)純化，產(chǎn)生19(25.0毫克，35.6％)。LCMS(M+H+)m/z494.2。對(duì)在DCM(2毫升)中之15(35.0毫克，0.0828毫摩爾)溶液，添加二異丙基乙基胺(28.8微升、0.166毫摩爾)及甲基磺?；?9.64微升、0.124毫摩爾)。反應(yīng)混合物被攪拌10分鐘，并且然后在減壓下濃縮，并且產(chǎn)物以反相HPLC(C18，乙腈/水)純化，產(chǎn)生20(25.0毫克，60.3％)。LCMS(M+H+)m/z501.2。對(duì)在DCM(2毫升)中之15(60.0毫克，0.142毫摩爾)溶液，添加二異丙基乙基胺(49.5微升、0.282毫摩爾)及三甲基甲硅烷基異氰化物(19.6毫克、0.170毫摩爾)。反應(yīng)混合物被攪拌10分鐘，并且然后在減壓下濃縮，并且產(chǎn)物以反相HPLC(C18，乙腈/水)純化，產(chǎn)生21(20.6毫克，31.1％)。LCMS(M+H+)m/z466.1。對(duì)在DCM(2毫升)中之15(60.0毫克，0.142毫摩爾)溶液，添加二異丙基乙基胺(49.5微升、0.282毫摩爾)及氯甲酸甲酯(13.1微升、0.170毫摩爾)。反應(yīng)混合物被攪拌10分鐘，然后在減壓下濃縮，并且殘余物以反相HPLC(C18，乙腈/水)純化，產(chǎn)生22(19.9毫克，29.1％)。LCMS(M+H+)m/z481.1。實(shí)施例49硝基乙烷(50.0克)中之4-溴苯甲醛(14.8克、80毫摩爾)及醋酸銨(14.0克，180毫摩爾)被加熱至回流8小時(shí)。然后被冷卻到室溫、在二氯甲烷(150毫升)及水(30毫升)中分布。相分離，之后有機(jī)層并且在真空中濃縮。殘余物向下通過(guò)一著硅膠柱(醋酸乙酯/己烷為洗脫液)，續(xù)以從甲醇中再結(jié)晶，產(chǎn)生中間體2(9.8克，51％)，其被測(cè)量為夠純而用于后續(xù)的轉(zhuǎn)化(LC/MSLRMS(M+H+)m/z240.97)。對(duì)在四氫呋喃(100毫升)中之硼氫化鈉(4.6克，124毫摩爾)的0℃溶液，添加硼-四氫呋喃絡(luò)合物(150毫升、150毫摩爾，1.0摩爾濃度)。然后所得溶液在室溫下再攪拌15分鐘。在四氫呋喃(30毫升)中之中間體2(6.5克，27毫摩爾)被逐滴添加，并且所得溶液被回流4小時(shí)。冷卻到室溫，并且反應(yīng)以水中止，并且以二氯甲烷(3×80毫升)萃取。經(jīng)合并的有機(jī)層在硫酸鈉上干燥并且在真空中濃縮，且殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，己烷/醋酸乙酯)純化，提供中間體3(5.2克，90％)，其以LC/MS(LRMS(M+H+)m/z213.02進(jìn)行表征。在醋酸乙酯(30毫升)中之胺3(4.0克，16毫摩爾)的0℃溶液，以氫氯酸(氣體)飽和。所得鹽以過(guò)濾收集并且在真空下干燥。L-N-乙酰基亮氨酸鈉鹽(8.0毫摩爾)(以1當(dāng)量濃度氫氧化鈉溶液添加到在5毫升水中之L-N-乙?；涟彼?1.39克，8.0毫摩爾)懸浮物直到pH＝7而制備)，被緩慢添加到前述3鹽酸鹽在水(10毫升)中之?dāng)嚢枞芤?。過(guò)夜形成結(jié)晶，并且以過(guò)濾移除，以小量水洗滌，并且從絕對(duì)甲醇中結(jié)晶。結(jié)晶4a被收集并且在真空下干燥。富含(S)-3之母液被混合，以5當(dāng)量濃度氫氧化鈉溶液成強(qiáng)堿性，并且以二乙醚洗滌三次。經(jīng)合并的有機(jī)層以水洗滌，并且在硫酸鈉上干燥。在移除硫酸鈉之后，氫氯酸通過(guò)溶液，直到鹽酸鹽的制備完成。上述相同的步驟被用于D-N-乙酰基亮氨酸鹽。結(jié)晶4b被收集并且在真空下干燥。各對(duì)映異構(gòu)體之非對(duì)映異構(gòu)鹽被分布于20毫升水之間，以5當(dāng)量濃度氫氧化鈉溶液成強(qiáng)堿性，并且以二乙醚萃取。經(jīng)合并的有機(jī)層以水洗滌，并且在硫酸鈉上干燥。溶劑被移除，并且兩種產(chǎn)物被測(cè)量為夠純而用于后續(xù)的轉(zhuǎn)化(4a1.3克，32％，4b0.9克，22％)。(1H-NMR及LC/MSLRMS(M+H+)m/z213.02)。毛細(xì)管電泳指出＞98.0％e.e.。對(duì)在二甲基甲酰胺(50毫升)中之胺4(111毫克，0.52毫摩爾)的室溫溶液，添加在二甲基甲酰胺(5毫升)中之二異丙基乙基胺(99微升、0.57毫摩爾)。所得溶液被攪拌5分鐘，并且添加中間體5(217毫克，0.57毫摩爾)。反應(yīng)混合物在氮?dú)鈮合卤粩嚢?0分鐘。并且溶劑在真空中被移除。殘余物被分布于醋酸乙酯(20毫升)及檸檬酸水溶液(20毫升，10％)之間。層分離，并且有機(jī)相以檸檬酸水溶液(20毫升，10％)及氫氧化鉀水溶液(2×20毫升)洗滌。然后其在硫酸鈉上干燥，其被測(cè)量為夠純而用于后續(xù)的轉(zhuǎn)化(LRMS(M+H+)m/z410.1。對(duì)在二噁烷(10毫升)中之溴化物6(212毫克，0.53毫摩爾)的室溫溶液，連續(xù)添加反-二氯雙(三苯基膦)鈀(II)(37毫克，10摩爾％)及1-乙氧基乙烯基-正丁基錫(481毫克，1.33毫摩爾)。所得溶液被加熱到100℃4小時(shí)。其被冷卻到室溫，并且溶劑在真空中被移除。殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，醋酸乙酯加5％三乙基胺)提供中間體7(250毫克)，其為不穩(wěn)定的，并且被測(cè)量為夠純而用于后續(xù)的轉(zhuǎn)化(LC/MSLRMS(M+H+)m/z402.8)。中間體7在四氫呋哺(10毫升)及水(3毫升)中與N-溴琥珀酰亞胺(190毫克、1.1毫摩爾)在50℃下攪拌2小時(shí)。溶劑在真空中被移除，并以醋酸乙酯(3×50毫升)萃取。經(jīng)合并的有機(jī)層在硫酸鈉上干燥并且在真空中濃縮。殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，己烷/醋酸乙酯)純化，提供中間體8(55毫克，23％)，其以LC/MS(LRMS(M+H+)m/z452.1進(jìn)行表征。對(duì)在二甲基甲酰胺(3毫升)中之中間體9(55毫克，0.24毫摩爾)的室溫溶液，添加碳酸鉀(34毫克、0.24毫摩爾)及叔丁基carb脒(31毫克、0.30毫摩爾)。反應(yīng)混合物在氮?dú)鈮骸?0℃下被攪拌1.5小時(shí)。其被冷卻到室溫，并且溶劑在真空中被移除。殘余物被分布于醋酸乙酯(15毫升)及水(15毫升)之間。層分離并且水相以醋酸乙酯(2×20毫升)萃取。經(jīng)合并的有機(jī)層在硫酸鈉上干燥并且在真空中濃縮。然后殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，己烷/醋酸乙酯)純化，提供中間體9(35毫克，67％)，其以1H-NMR及LC/MS(LRMS(M+H+)m/z452.1)進(jìn)行表征。實(shí)施例50對(duì)在甲醇(15毫升)中之酸1(2.98克，9.2毫摩爾)的室溫溶液，逐滴添加在己烷中的TMS二偶氮基甲烷(9.2毫升、18.4毫摩爾，2.0摩爾濃度)溶液，并且溶劑在真空中被移除。殘余粘稠油狀物2(3.10克，8.0毫摩爾)被干燥，并且被測(cè)量為夠純而用于后續(xù)的轉(zhuǎn)化(LC/MSLRMS(M+H+)m/z339.10)。在甲醇(30毫升)中之中間體2(3.10克，8.0毫摩爾)與碳上鈀(310毫克)混合物，在室溫、氫氣攪拌2小時(shí)。其經(jīng)過(guò)Celite過(guò)濾并且濃縮，提供為粘稠油狀物之苯胺3(2.47克，8.0毫摩爾)，其被測(cè)量為夠純而用于后續(xù)的轉(zhuǎn)化(LC/MSLRMS(M+H+)m/z309.20)。對(duì)在二氯甲烷(20毫升)中之苯胺3(2.47克，8.0毫摩爾)的室溫溶液添加三氟醋酸(20毫升)。所得溶液被攪拌45分鐘，并且溶劑在真空中被移除。殘余物被分布于二氯甲烷(75毫升)及飽和碳酸氫鈉水溶液(25毫升)之間，并且層分離。水相以氯化鈉飽和，并且以二氯甲烷(3×75毫升)及四氫呋喃(2×50毫升)萃取。經(jīng)合并的有機(jī)層在硫酸鈉上干燥并且在真空中濃縮，提供為粘稠油狀物之4(1.30克，6.3毫摩爾)，其以LC/MS(LRMS(M+H+)m/z290.30)進(jìn)行表征。對(duì)在二甲基甲酰胺(20毫升)中之苯胺4(1.30克，6.25毫摩爾)的溶液，在室溫下與二異丙基乙基胺(3.27毫升、18.80摩爾)攪拌5分鐘，續(xù)以添加中間體5(2.38克，6.25毫摩爾)。反應(yīng)混合物再被攪拌30分鐘，溶劑在真空中被移除。殘余物被分布于醋酸乙酯(50毫升)及水(50毫升)之間。層分離并且水相以醋酸乙酯(3×50毫升)萃取。經(jīng)合并的有機(jī)層在硫酸鈉上干燥并且在真空中濃縮。殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，己烷/醋酸乙酯)純化，提供為泡沫狀白色固體的6(1.47克，58％)，其以LC/MS(LRMS(M+H+)m/z405.15)進(jìn)行表征。對(duì)在四氫呋喃(5毫升)中之苯胺6(131毫克，0.32毫摩爾)的室溫溶液，添加二異丙基乙基胺(85微升、0.48摩爾)、4-(二甲基氨基)啶(15毫克，0.12毫摩爾)及碳酸二叔丁酯(851毫克，0.39毫摩爾)。所得溶液被攪拌過(guò)夜，并且以醋酸乙酯(20毫升)稀釋、以氫氯酸水溶液(2×15毫升，1.0摩爾濃度)洗滌，并且在硫酸鈉上干燥。移除溶劑，產(chǎn)生為玻璃狀固體的氨基甲酸酯7(139毫克，88％)，其被測(cè)量為夠純而用于后續(xù)的轉(zhuǎn)化(LC/MSLRMS(M+H+)m/z505/10)。對(duì)在甲醇(2毫升)及四氫呋喃(2毫升)中之氨基甲酸酯7(139毫克，0.28毫摩爾)的室溫溶液，添加硼氫化鈉(261毫克，6.9毫摩爾)。所得混合物被分布于醋酸乙酯(15毫升)及水(15毫升)之間。層分離，并且水相以醋酸乙酯(3×15毫升)萃取。經(jīng)合并的有機(jī)層在硫酸鈉上干燥并且在真空中濃縮。然后殘余物以反相HPLC、使用乙腈及水梯度為流動(dòng)相純化。純的產(chǎn)物8被分離，并且以1H-NMR及LC/MS(LRMS(M+H+)m/z477.20)進(jìn)行表征。對(duì)在四氫呋喃(15毫升)中之三光氣(37毫克，0.13毫摩爾)的0℃溶液，逐滴添加在四氫呋哺(5毫升)中之6及二異丙基乙基胺(130微升、0.75毫摩爾)溶液。所得混合物被保持在氮?dú)鈮杭跋嗤瑴囟认?0分鐘，并且以甲基-叔丁基胺(215微升、1.80毫摩爾)中止反應(yīng)。反應(yīng)混合物再攪拌30分鐘，續(xù)以在真空中移除溶劑。殘余物被分布于醋酸乙酯(15毫升)及氫氯酸水溶液(15毫升，0.1摩爾濃度)之間，層分離，并且水相以醋酸乙酯(2×15毫升)萃取。經(jīng)合并的有機(jī)層在硫酸鈉上干燥并且在真空中濃縮，產(chǎn)生為玻璃狀固體之尿素，其被測(cè)量為夠純而用于后續(xù)的轉(zhuǎn)化(LRMS(M+H+)m/z518.2)。對(duì)在甲醇(2毫升)及四氫呋喃(2毫升)中之尿素9(150毫克，0.29毫摩爾)的室溫溶液，添加硼氫化鈉(260毫克，6.90毫摩爾)。所得混合物在氮?dú)鈮杭笆覝叵聰嚢?小時(shí)。移除溶劑并且殘余物被分布于醋酸乙酯(15毫升)及水(15毫升)之間。層分離，并且水相以醋酸乙酯(3×15毫升)萃取。經(jīng)合并的有機(jī)層在硫酸鈉上干燥并且在真空中濃縮。然后殘余物以反相HPLC、使用乙腈及水梯度為流動(dòng)相純化。純的產(chǎn)物10(4毫克，28％)被分離，并且以1H-NMR及LC/MS(LRMS(M+H+)m/z490.1)進(jìn)行表征。實(shí)施例51對(duì)在無(wú)水二乙醚(200毫升)中之羧酸1(10.0克，28毫摩爾)的溶液，在0℃下逐滴添加在四氫呋喃中之氫化鋁鋰(40毫升，40毫摩爾，1摩爾濃度)溶液。然后所得溶液在相同溫度下再攪拌2小時(shí)。小心以水(2.5毫升)、氫氧化鈉水溶液(2.5毫升，1摩爾濃度)、水(3.0毫升)中止反應(yīng)。然后溶液在硫酸鈉上干燥并且移除溶劑，產(chǎn)生中間體2(9.2克，96％)，其被測(cè)量為夠純而用于后續(xù)的轉(zhuǎn)化(1H-NMR及LC/MS(LRMS(M+H+)m/z344.08)。對(duì)在無(wú)水二噁烷(200毫升)中之中間體2的室溫溶液，添加三乙基胺(6毫升、40毫摩爾)及叔丁基二甲基甲硅烷基三氟甲烷磺酸酯(8.6克，32毫摩爾)。然后所得溶液被攪拌過(guò)夜，并以飽和碳酸氫鈉溶液中止反應(yīng)。其以二氯甲烷(3×100毫升)萃取，并且經(jīng)合并的有機(jī)層在硫酸鈉上干燥，并在真空中濃縮。殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，己烷/醋酸乙酯)，提供中間體3(9.2克，整體為72％)，其以LC/MS(LRMS(M+H+)m/z458.16)進(jìn)行表征。對(duì)在二噁烷(100毫升)中之溴化物3的室溫溶液，連續(xù)添加反-二氯雙(三苯基膦)鈀(I)(500毫克)及1-乙氧基乙烯基-正丁基錫(12.3克，34毫摩爾)。所得溶液被加熱到100℃4小時(shí)。在真空中移除溶劑，續(xù)以快速柱色譜分析(硅膠，己烷/醋酸乙酯加上5％三乙基胺)，提供中間體4(5.4克)，其以LC/MS(LRMS(M+H+)m/z450.30)進(jìn)行表征。產(chǎn)物被發(fā)現(xiàn)為不穩(wěn)定的，并且立刻被用于后續(xù)的轉(zhuǎn)化。在甲醇(100毫升)及水(50毫升)中之中間體4，與N-溴琥珀酰亞胺(5.9克，33毫摩爾)在50℃下攪拌4小時(shí)。在真空中移除溶劑，并且所得殘余物以醋酸乙酯(3×50毫升)萃取。經(jīng)合并的有機(jī)層在硫酸鈉上干燥并且在真空中濃縮。然后殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，己烷/醋酸乙酯)，提供中間體5(4.5克，整體為69％)，其以LC/MS(LRMS(M+H+)m/z500.54)進(jìn)行表征。在氮?dú)鈮合?，以附?50毫升燒瓶之等壓滴定漏斗將在二氯甲烷(40毫升)中之溴甲基酮5(2.5克，5.0毫摩爾)進(jìn)料，該燒瓶包含甲基胺(15毫升、30毫摩爾，在THF中1摩爾濃度)。燒瓶被冷卻到0℃，并且溴溶液在2小時(shí)內(nèi)被逐滴添加。所得溶液再被攪拌1小時(shí)，之后添加在二氯甲烷(10毫升)中之三乙基胺(1毫升)及三甲基乙酰基氯(4.8毫升，40毫摩爾)溶液。所得混合物再被攪拌2小時(shí)，并且然后以飽和碳酸氫鈉溶液中止反應(yīng)?；旌衔镆源姿嵋阴?3×50毫升)萃取，并且經(jīng)合并的有機(jī)層在硫酸鈉上干燥并且在真空中濃縮。然后殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，醋酸乙酯/己烷)純化，提供酯6(1.3克，整體為49％)，其以1H-NMR及LC/MS分析(LRMS(M+H+)m/z535.35)進(jìn)行表征。在過(guò)量醋酸銨中之甲酰胺(10毫升)的6(1.3克，2.6毫摩爾)溶液，在氮?dú)鈮合卤患訜岬?30℃3小時(shí)。所得混合物被冷卻到室溫、在水中分布，被以二氯甲烷(3×50毫升)萃取。經(jīng)合并的有機(jī)層在硫酸鈉上干燥并且在真空中濃縮。然后殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，醋酸乙酯/己烷)純化，提供咪唑7(0.8克，60％)，其以1H-NMR及LC/MS分析(LRMS(M+H+)m/z516.35)進(jìn)行表征。對(duì)在四氫呋喃(10毫升)中之7(800毫克，1.55毫摩爾)的溶液，與在二噁烷中之氯化氫(10毫升，4.0摩爾濃度)在室溫下攪拌一小時(shí)。在真空中移除溶劑，并且殘余物在高真空中被干燥過(guò)夜，產(chǎn)生中間體8(600毫克)，其被測(cè)量為夠純而用于下一個(gè)轉(zhuǎn)化(1H-NMR及LC/MS(LRMS(M+H+)m/z302.22))。對(duì)在二甲基甲酰胺(3毫升)中之胺8(60毫克，0.02毫摩爾)的室溫溶液，添加在二異丙基乙基胺(53微升、0.30毫摩爾)，并且所得溶液在室溫下被攪拌5分鐘。然后添加中間體9(23毫克，0.06毫摩爾)，并且反應(yīng)混合物在氮?dú)鈮合卤粩嚢?0分鐘。溶劑在真空中被移除，并且殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，甲醇/二氯甲烷)純化，提供為玻璃狀固體的10(25毫克，26％)，其以1H-NMR及LC/MS分析(LRMS(M+H+)m/z489.28)進(jìn)行表征。實(shí)施例52對(duì)在甲醇(15毫升)中之1(4.96克，17毫摩爾)的室溫溶液，逐滴添加在己烷中的TMS二偶氮基甲烷(17.0毫升、34毫摩爾，2摩爾濃度)溶液。所得黃色溶液在室溫下被攪拌30分鐘。溶劑在真空中被移除，并粘稠油狀物2(5.19克，17毫摩爾)在高真空下被干燥，并且被測(cè)量為夠純而用于后續(xù)轉(zhuǎn)化(LC/MS(LRMS(M+H+)m/z305.3))。中間體2(5.19克，17毫摩爾)與在甲醇(50毫升)及四氫呋喃(50毫升)中之硼氫化鈉(3.23克，85毫摩爾)在室溫下攪拌2小時(shí)。溶劑在真空中被移除，并且殘余物被分布于醋酸乙酯(50毫升)及水(50毫升)之間。層分離，并且水相以醋酸乙酯(3×50毫升)萃取，并且經(jīng)合并的有機(jī)層在硫酸鈉上干燥并且在真空中濃縮。產(chǎn)生為白色固體之3(4.71克，17毫摩爾)，其被測(cè)量為夠純而用于后續(xù)轉(zhuǎn)化(LC/MS(LRMS(M+H+)m/z277.3)。3(1.92克，6.9毫摩爾)與在甲醇中之甲氧化鈉(27.7毫升，13.9毫摩爾，0.5摩爾濃度及鹽酸羥胺(964毫克，13.9毫摩爾)，在氮?dú)鈮骸?0℃下被攪拌2小時(shí)。然后冷卻到室溫，并且溶劑在真空中被移除。殘余物被分布于飽和氯化銨水溶液(30毫升)及醋酸乙酯(30毫升)之間。層分離，并且水相以醋酸乙酯(2×30毫升)萃取。經(jīng)合并的有機(jī)層在硫酸鈉上干燥并且在真空中濃縮，并且殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，己烷/醋酸乙酯)純化，提供中間體4(1.08克，51％)，其以1H-NMR及LC/MS(LRMS(M+H+)m/z310.2)進(jìn)行表征。對(duì)在甲醇(30毫升)中之4(1.08克，3.5毫摩爾)的室溫溶液，添加Raney鎳(200毫克)及醋酸(1毫升)。所得混合物在氮?dú)鈮?、室溫下被攪?小時(shí)。其經(jīng)過(guò)Celite過(guò)濾，并且在真空中濃縮。提供為白色固體的中間體5(1.02克，100％)，其被測(cè)量為夠純而用于后續(xù)的轉(zhuǎn)化(LC/MSLRMS(M+H+)m/z294.3))。對(duì)在無(wú)水乙醇(15毫升)中之脒(304毫克、1.0毫摩爾)的室溫溶液，添加1，8-二偶氮雙環(huán)[5.4.0]十一烷-7-烯(622微升、4.2毫摩爾)及3-溴-1，1，1-三氟-2-丁酮(424毫克、2.1毫摩爾)。所得混合物在氮?dú)鈮骸?15℃下被攪拌30分鐘。然后其被冷卻到室溫，并且溶劑在真空中被移除。殘余物以反相HPLC、使用乙腈及水梯度為流動(dòng)相純化。化合物6(76毫克，20％)被分離，并且以1H-NMR及LC/MS(LRMS(M+H+)m/z400.1)進(jìn)行表征。在二氯甲烷(2毫升)中之6(76毫克，0.2毫摩爾)的溶液，與三氟醋酸(2毫升)在室溫下攪拌45分鐘。溶劑在真空中被移除，提供為7(57毫克，100％)，其被測(cè)量為夠純而用于后續(xù)的轉(zhuǎn)化(LC/MSLRMS(M+H+)m/z300.3))。對(duì)在二甲基甲酰胺(3毫升)中之胺7(25毫克，0.08毫摩爾)的室溫溶液，添加在二異丙基乙基胺(87微升、0.50毫摩爾)。所得溶液在室溫下被攪拌5分鐘，并且添加中間體8(32毫克，0.08毫摩爾)。反應(yīng)混合物在氮?dú)鈮合卤粩嚢?0分鐘，并且溶劑在真空中被移除。殘余物被分布于醋酸乙酯(5毫升)及水(5毫升)之間，之后層分離，并且水相以醋酸乙酯(3×10毫升)萃取。經(jīng)合并的有機(jī)層在硫酸鈉上干燥并且在真空中濃縮。殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，醋酸乙酯)純化，提供為玻璃狀固體的9(7毫克，18％)，其以1H-NMR及LC/MS(LRMS(M+H+)m/z496.64)進(jìn)行表征。實(shí)施例53對(duì)在二甲基甲酰胺(3毫升)中之苯胺1(500毫克，1.3毫摩爾)的室溫溶液，添加碳酸鉀(1.5克)及1-溴頻那酮(pinacolone)(500毫克、2.8毫摩爾)。反應(yīng)混合物在50℃下被攪拌4小時(shí)，并且溶劑在真空中被移除。殘余物被分布于醋酸乙酯(3×50毫升)萃取。經(jīng)合并的有機(jī)層在硫酸鈉上干燥并且在真空中濃縮。殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，醋酸乙酯)純化，提供2(320毫克，51％)，其以1H-NMR及LC/MS(LRMS(M+H+)m/z479.74)進(jìn)行表征。對(duì)在原甲酸三乙酯(20毫升)中之2(307毫克，0.64毫摩爾)的室溫溶液，添加濃水性HCl(25微升)。所得混合物在90℃下被攪拌3小時(shí)，并且然后冷卻到室溫。溶劑在真空中被移除，并且殘余物被分布于水(15毫升)及醋酸乙酯(50毫升)之間。層分離，并且有機(jī)層以水(3×20毫升)及鹽水(3×20毫升)洗滌，并在硫酸鈉上干燥。溶劑被移除，產(chǎn)生為粘稠油狀的中間體3(326毫克，100％)，其以LC/MS(LRMS(M+H+)m/z507.1)進(jìn)行表征。中間體3(207毫克，0.41毫摩爾)與在甲酰胺中之醋酸銨在氮?dú)鈮骸?30℃下被攪拌4.5小時(shí)。所得溶液被冷卻到室溫，并且被分布于醋酸乙酯(50毫升)及水(50毫升)之間。層分離，有機(jī)層以水(4×10毫升)及鹽水(20毫升)洗滌，并在硫酸鈉上干燥。溶劑在真空中被移除，并且殘余物以反相HPLC、使用乙腈及水梯度為流動(dòng)相純化，產(chǎn)生咪唑4(159毫克，80％)，其被分離，并且以1H-NMR及LC/MS(LRMS(M+H+)m/z488.2)進(jìn)行表征。對(duì)在二氯甲烷(4毫升)中之4(159毫克，0.33毫摩爾)的室溫溶液添加三氟醋酸(4毫升)，并且所得溶液在室溫下被攪拌過(guò)夜。溶劑在真空中被移除，提供為玻璃狀固體的胺5(89毫克)，其被測(cè)量為夠純而用于后續(xù)的轉(zhuǎn)化(LC/MSLRMS(M+H+)m/z274.1)。粗制胺(72毫克，0.26毫摩爾)與對(duì)在二甲基甲酰胺(3毫升)中之二異丙基乙基胺(197微升、1.1毫摩爾)在室溫下攪拌5分鐘，之后添加中間體6(100毫克，0.26毫摩爾)。所得混合物再被攪拌30分鐘，并且溶劑在真空中被移除。粗制殘余物以反相HPLC、使用乙腈及水梯度為流動(dòng)相純化，產(chǎn)生為玻璃狀固體的化合物7(10毫克，8％)，其以1H-NMR及LC/MS(LRMS(M+H+)m/z470.2)進(jìn)行表征。實(shí)施例54對(duì)在苯(50毫升)中之醇1(2.59克，9.4毫摩爾)的室溫溶液，添加在2，2-二甲氧基丙烷(1.75毫升、14.1毫摩爾)及對(duì)-甲苯磺酸(179毫克，0.94毫摩爾)。所得溶液在氮?dú)鈮骸?10℃下被攪拌1.5小時(shí)。溶劑在真空中被移除，并且殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，醋酸乙酯/己烷)純化，提供2(756毫克，27％)，其以LC/MS(LRMS(M+H+)m/z317.4)進(jìn)行表征。2(765毫克，2.4毫摩爾)與在甲醇(10.0毫升，5.0毫摩爾，0.5摩爾濃度)中之鹽酸羥胺(336毫克，4.8毫摩爾)在氮?dú)鈮骸?0℃下攪拌2小時(shí)。然后其被冷卻到室溫，并且溶劑在真空中被移除。殘余物被分布于飽和氯化銨水溶液(30毫升)及醋酸乙酯(30毫升)之間，層分離，并且水相以醋酸乙酯(2×30毫升)萃取。經(jīng)合并的有機(jī)層在硫酸鈉上干燥并且在真空中濃縮。殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，己烷/醋酸乙酯)純化，提供中間體3(314毫克，38％)，其以1H-NMR及LC/MS(LRMS(M+H+)m/z350.1)進(jìn)行表征。對(duì)在甲醇(15毫升)中之3(314毫克，0.9毫摩爾)的室溫溶液，添加Raney鎳(50毫克)及醋酸(300微升)。所得混合物在氮?dú)鈮骸⑹覝叵卤粩嚢?小時(shí)。其經(jīng)過(guò)Celite過(guò)濾，并且在真空中濃縮，提供為白色固體的4(275毫克，0.83毫摩爾)，其被測(cè)量為夠純而用于后續(xù)的轉(zhuǎn)化(LC/MSLRMS(M+H+)m/z414.1))。對(duì)在無(wú)水乙醇(15毫升)中之脒4(138毫克、0.4毫摩爾)的室溫溶液，添加1，8-二偶氮雙環(huán)[5.4.0]十一烷-7-烯(622微升、4.2毫摩爾)及3-溴-1，1，1-三氟-2-丁酮(84微升、0.6毫摩爾)。所得混合物在氮?dú)鈮骸?15℃下被攪拌30分鐘。然后其被冷卻到室溫，并且溶劑在真空中被移除。殘余物以反相HPLC、使用乙腈及水梯度為流動(dòng)相純化，產(chǎn)生化合物5(29毫克，17％)，其以1H-NMR及LC/MS(LRMS(M+H+)m/z414.1)進(jìn)行表征。對(duì)在無(wú)水二甲基甲酰胺(5毫升)中之咪唑5(29毫克，0.07毫摩爾)的溶液，添加碳酸鉀(39毫克，0.28毫摩爾)及二甲基硫酸鹽(133微升、1.40毫摩爾)。所得混合物在50℃下被攪拌24小時(shí)，之后溶劑在真空中被移除。殘余物使用快速柱色譜分析(硅膠，醋酸乙酯/己烷)純化，提供為玻璃狀固體的6(15毫克，43％)，其以1H-NMR及LC/MS(LRMS(M+H+)m/z428.3)進(jìn)行表征。在無(wú)水甲醇(3毫升)中之6(15毫克，0.04毫摩爾)的溶液，與DOWEX50WX8-400離子交換樹(shù)脂(100毫克)在室溫下攪拌16小時(shí)。樹(shù)脂以過(guò)濾被移除，并且以三乙基胺(3毫升)洗滌。溶劑在高真空下被移除，提供7(12毫克，0.04毫摩爾)，其被測(cè)量為夠純而用于下一個(gè)轉(zhuǎn)化(LRMS(M+H+)m/z288.2)。對(duì)在二甲基甲酰胺(3毫升)中之胺7(12毫克，0.04毫摩爾)的室溫溶液，添加在二異丙基乙基胺(20微升、0.10毫摩爾)。所得溶液在室溫下被攪拌5分鐘，之后添加中間體8(16毫克，0.04毫摩爾)。反應(yīng)混合物再被攪拌30分鐘。溶劑在真空中被移除，并且殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，甲醇/二氯甲烷)純化，提供為玻璃狀固體的9(10毫克，50％)，其以1H-NMR及LC/MS分析(LRMS(M+H+)m/z484.2)進(jìn)行表征。實(shí)施例55對(duì)在甲醇(200毫升)中之Boc-L-β-高酪氨酸(5克，13毫摩爾)的溶液，逐滴添加三甲基甲硅烷基二偶氮甲烷(在己烷中之2摩爾濃度，40毫升，78毫摩爾)。若需要，試劑被連續(xù)添加，直到氣泡停止。混合物被濃縮，產(chǎn)生2(5.5克)，其被用于下一步而無(wú)進(jìn)一步純化。LRMS(M+H+)m/z300.3。對(duì)在THF(100毫升)中之2(5.5克，13.76毫摩爾)的溶液，添加LAH(在THF中1.0摩爾濃度，13.7毫升，13.7毫摩爾)。所得溶液被攪拌2小時(shí)，并且以添加MeOH(～20毫升)來(lái)中止反應(yīng)。然后溶劑被蒸發(fā)，獲得微黃色固體，其以醋酸乙酯稀釋?zhuān)⑶乙燥柡蚇aHCO3洗滌。有機(jī)層以鹽水洗滌、在Na2SO4上被干燥并且在減壓下被濃縮，殘余物經(jīng)由沖刷柱色譜分析、使用醋酸乙酯及己烷類(lèi)混合物為洗脫液，產(chǎn)生為白色固體的3(3.5克，70％)，LRMS(M+H+)m/z394.4。在MeOH(40毫升)中之3(1.9克，5毫摩爾)的溶液，在H2流(50psi)、10％Pd/C存在下攪拌30小時(shí)。催化劑經(jīng)PTFE(0.45微米)濾器以過(guò)濾移除，并且溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生白色固體(1.5克)，其在TFA(1毫升)及DCM(9毫升)混合物中攪拌2小時(shí)。所得溶液被濃縮，并且被用于下一步而無(wú)進(jìn)一步純化。LRMS(M+H+)m/z182.3。對(duì)在THF(10毫升)中之4(926毫克、5毫摩爾)的溶液，添加5(950毫克、2.6毫摩爾)及N，N-二異丙基乙基胺(4.5毫升、25.5毫摩爾)。反應(yīng)混合物在室溫下被攪拌10小時(shí)?；旌衔锉粷饪s，并且在高真空上干燥。所得粗制產(chǎn)物經(jīng)由快速硅膠柱、使用醋酸乙酯為洗脫液，產(chǎn)生6(710毫克，74％)，LRMS(M+H+)m/z370.4。對(duì)在DMF(1毫升)中之6(70毫克，0.2毫摩爾)的溶液，添加4-氟芐基溴(0.15毫升、1.2毫摩爾)及碳酸鉀(166毫克、1.2毫摩爾)。所得混合物在室溫下被攪拌12小時(shí)?；旌衔锉贿^(guò)濾，并且濾液在RP-HPLC上、使用乙腈及水的混合物純化。產(chǎn)生1c(35毫克，37％)。LRMS(M+H+)m/z477.5。實(shí)施例56imidate15(20毫克，0.05毫摩爾)、新戊酸酰肼(hydrazide)(9毫克，0.08毫摩爾)及醋酸(1毫升)溶液在80℃下攪拌1小時(shí)。然后反應(yīng)混合物在真空中濃縮。所得殘余物以反相HPLC(C18，乙腈/水)純化，產(chǎn)生10毫克(43％)的四唑16。LRMS(M+H+)m/z471.2。實(shí)施例57五氟苯基酯29(1.0克，2.62毫摩爾)、胺29(0.49毫升、3.15毫摩爾)及THF(10毫升)溶液在23℃下攪拌4小時(shí)。反應(yīng)溶液在真空中濃縮，并且所得殘余物以柱色譜分析(硅膠，1∶1EtOAc∶己烷)，產(chǎn)生1.1克(88％)的酰胺30。LRMS(M+H+)m/z396.1。溴化物30(200毫克，0.51毫摩爾)、二氯雙(三苯基膦)鈀(II)(35毫克，0.05摩爾)、三丁基(1-乙氧基乙烯基)錫(0.34毫升、1.0毫摩爾)及甲苯(2毫升)溶液在N2下、100℃攪拌4小時(shí)。在完成時(shí)，以LCMS監(jiān)測(cè)，反應(yīng)混合物被冷卻、經(jīng)由棉花過(guò)濾，并且在真空中濃縮。所得殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，1∶4∶0.1EtOAc∶己烷類(lèi)∶三乙基胺)，產(chǎn)生100毫克(52％)的苯乙烯31。LRMS(M+H+)m/z388.2。化合物31(100毫克，0.25毫摩爾)、THF∶H2O(3∶1，4毫升)及N-溴琥珀酰亞胺(46毫克、0.25毫摩爾)在23℃下攪拌15分鐘。然后反應(yīng)混合物在真空中濃縮，并且粗制殘余物以EtOAc(30毫升)稀釋、以水(10毫升)洗滌，并且在真空中濃縮。所得殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，4∶1EtOAc∶己烷類(lèi))，產(chǎn)生50毫克(46％)的溴酮32。LRMS(M+H+)m/z438.1。溴酮32(50毫克，0.11毫摩爾)、K2CO3(47毫克，0.34毫摩爾)、叔丁基脒鹽酸鹽(21毫克、0.23毫摩爾)及DMF(2毫升)溶液在23℃下攪拌18小時(shí)。反應(yīng)混合物在高真空(0.1毫米Hg)下濃縮，并且所得殘余物以柱色譜分析(硅膠，2∶1EtOAc∶己烷類(lèi))純化，產(chǎn)生35毫克(72％)的咪唑34。LRMS(M+H+)m/z440.2。實(shí)施例58氯仿(20毫升)在2小時(shí)內(nèi)被緩慢添加到在H2O(400毫升)中之Boc-酪氨酸(20克，71毫摩爾)及10％NaOH溶液中。在共4小時(shí)之后，反應(yīng)溶液以3當(dāng)量濃度HCl(200毫升)酸化，并以EtOAc(3×150毫升)萃取。有機(jī)層被干燥(MgSO4)、過(guò)濾，并且在真空中濃縮。所得殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，1∶1∶0.1己烷類(lèi)∶EtOAc∶AcOH)，產(chǎn)生6.3克的醛35及一些回收的34。醛35(有34污染，6.3克，20毫摩爾)、K2CO3(5.8克，42毫摩爾)、芐基溴(5.0毫升、42毫摩爾)及DMF(100毫升)溶液在23℃下攪拌18小時(shí)。反應(yīng)混合物以EtOAc(200毫升)稀釋?zhuān)⒁?當(dāng)量濃度HCl(3×200毫升)及鹽水(3×200毫升)洗滌、過(guò)濾，并且在真空中濃縮。所得殘余物以柱色譜分析(硅膠，1∶4EtOAc∶己烷)，產(chǎn)生2.2克(22％)的酯36。LRMS(M+H+)m/z490.2。醛36(570毫克，1.16毫摩爾)、KMnO4(368毫克，2.32毫摩爾)、二噁烷(3毫升)及水(10毫升)溶液在23℃下攪拌3小時(shí)。反應(yīng)混合物在真空中濃縮，并且所得殘余物以柱色譜分析(硅膠，1∶1EtOAc∶己烷)，產(chǎn)生350毫克(60％)的酸37。LRMS(M+H+)m/z506.2。酸37(115毫克，0.23毫摩爾)、二甲基胺(0.23毫升、在THF中2.0摩爾濃度)、1-乙基-3-(3-二甲基胺丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(65毫克，0.34毫摩爾)、二異丙基乙基胺(0.12毫升、0.68毫摩爾)及CH2Cl2(1毫升)溶液在23℃下攪拌4小時(shí)。然后反應(yīng)混合物以EtOAc(10毫升)稀釋?zhuān)⒁?當(dāng)量濃度HCl(5毫升)及鹽水(5毫升)洗滌。有機(jī)層被干燥(MgSO4)、過(guò)濾并且在真空中濃縮。所得殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，1∶1己烷類(lèi)∶EtOAc)，產(chǎn)生60毫克(49％)的酰胺38。LRMS(M+H+)m/z533.3。酰胺38(60毫克，0.11毫摩爾)、TFA∶H2O(97.5∶2.5，1毫升)及CH2Cl2(1毫升)溶液在23℃下攪拌30分鐘。反應(yīng)溶液在真空中濃縮，并且所得殘余物被置于高真空中2小時(shí)，并然后被使用而無(wú)進(jìn)一步純化。胺39(69毫克，0.16毫摩爾)、五氟苯基酯40(71毫克，0.19毫摩爾)、二異丙基乙基胺(83微升、0.68毫摩爾)及DMF(10毫升)溶液在23℃下攪拌4小時(shí)。然后反應(yīng)溶液以醋酸乙酯(10毫升)稀釋?zhuān)⒁?當(dāng)量濃度HCl(5毫升)及鹽水(5毫升)洗滌。有機(jī)層被干燥(MgSO4)、過(guò)濾，并且濾液在真空中濃縮。所得殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，1∶1己烷類(lèi)∶EtOAc)，產(chǎn)生60毫克(60％)的酯酰胺41。LRMS(M+H+)m/z620.3。酯41(50毫克，0.08毫摩爾)、NaBH4(24毫克，0.63毫摩爾)、THF(1毫升)及MeOH(1毫升)溶液在23℃下攪拌18小時(shí)。然后反應(yīng)混合物以EtOAc(10毫升)稀釋?zhuān)⒁?當(dāng)量濃度HCl(5毫升)及鹽水(5毫升)洗滌。有機(jī)層被干燥(MgSO4)、過(guò)濾，并且濾液在真空中濃縮。所得殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，1∶50MeOH∶EtOAc)，產(chǎn)生31毫克(75％)的醇42。LRMS(M+H+)m/z516.3。實(shí)施例59酸43(300毫克，1.0毫摩爾)、K2CO3(276毫克，2.0毫摩爾)、芐基溴(0.24毫升、2.0毫摩爾)及DMF(4毫升)溶液在23℃下攪拌18小時(shí)。反應(yīng)混合物以EtOAc(30毫升)稀釋?zhuān)⒁?當(dāng)量濃度HCl(10毫升)及鹽水(3×15毫升)洗滌。有機(jī)層被干燥(MgSO4)、過(guò)濾，并且濾液在真空中濃縮。所得殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，1∶3EtOAc∶己烷類(lèi))，產(chǎn)生400毫克(83％)的酯44。LRMS(M+H+)m/z480.2。酯44(100毫克，0.21毫摩爾)、NaBH4(30毫克，0.81毫摩爾)、THF(0.5毫升)及MeOH(0.5毫升)溶液在23℃下攪拌2小時(shí)。然后反應(yīng)溶液以EtOAc(10毫升)稀釋?zhuān)⒁?當(dāng)量濃度HCl(5毫升)及鹽水(5毫升)洗滌。有機(jī)層被干燥(MgSO4)、過(guò)濾，并且濾液在真空中濃縮。所得殘余物被使用而無(wú)進(jìn)一步純化。醇45(100毫克，0.27毫摩爾)及TFA∶H2O(97.5∶2.5，1毫升)溶液在23℃下攪拌30分鐘。反應(yīng)溶液在真空中濃縮，并且所得殘余物被置于高真空中2小時(shí)，并然后被使用而無(wú)進(jìn)一步純化。胺46(40毫克，0.15毫摩爾)、五氟苯基酯40(43毫克，0.12毫摩爾)、三乙基胺(51微升、0.29亳摩爾)及DMF(0.6毫升)溶液在23℃下攪拌4小時(shí)。然后反應(yīng)溶液以EtOAc(10毫升)稀釋?zhuān)⒁?當(dāng)量濃度HCl(5毫升)及鹽水(5毫升)洗滌。有機(jī)層被干燥(MgSO4)、過(guò)濾，并且濾液在真空中濃縮。所得殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，1∶2己烷類(lèi)∶EtOAc)，產(chǎn)生30毫克(43％)的酯酰胺47。LRMS(M+H+)m/z463.2。實(shí)施例60醛36(300毫克，0.6毫摩爾)、二甲基酰肼(47微升、0.6毫摩爾)及MeOH(2.5毫升)溶液在0℃下攪拌2小時(shí)，然后容許加溫到23℃，并且再攪拌15小時(shí)。反應(yīng)溶液在真空中濃縮，并且所得殘余物被使用而無(wú)進(jìn)一步純化。對(duì)在-5℃粗制腙(hydrazone)48(325毫克，0.6毫摩爾)及CHCl3(2毫升)溶液，逐滴添加間-氯過(guò)氧基苯甲酸(212毫克，1.23毫摩爾)及CHCl3(2毫升)。反應(yīng)混合物被容許加溫到23℃，并且再攪拌2天。然后反應(yīng)混合物以EtOAc(10毫升)稀釋?zhuān)⒁燥柡退訬aHCO3(5毫升)及鹽水(5毫升)洗滌。有機(jī)層被干燥(MgSO4)、過(guò)濾并且在真空中濃縮。所得殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，1∶2己烷類(lèi)∶EtOAc)，產(chǎn)生100毫克(34％)的腈49。LRMS(M+H+)m/z487.2。腈49(60毫克，0.27毫摩爾)及TFA∶H2O(97.5∶2.5，2毫升)溶液在23℃下攪拌30分鐘。反應(yīng)溶液在真空中濃縮，并且所得殘余物被置于高真空中2小時(shí)，并然后被使用而無(wú)進(jìn)一步純化。胺50(100毫克，0.25毫摩爾)、五氟苯基酯40(85毫克，0.22毫摩爾)、三乙基胺(96微升、0.74毫摩爾)及DMF(1毫升)溶液在23℃下攪拌4小時(shí)。然后反應(yīng)混合物以EtOAc(10毫升)稀釋?zhuān)⒁?當(dāng)量濃度HCl(5毫升)及鹽水(5毫升)洗滌。有機(jī)層被干燥(MgSO4)、過(guò)濾并且在真空中濃縮。所得殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，1∶1己烷類(lèi)∶EtOAc)，產(chǎn)生60毫克(42％)的51。LRMS(M+H+)m/z574.2。酯51(60毫克，0.1毫摩爾)、NaBH4(12毫克，0.3毫摩爾)、THF(1毫升)及MeOH(1毫升)溶液，被維持在23℃下18小時(shí)。然后反應(yīng)混合物以EtOAc(10毫升)稀釋?zhuān)⒁?當(dāng)量濃度HCl(5毫升)及鹽水(5毫升)洗滌。有機(jī)層被干燥(MgSO4)、過(guò)濾，并且濾液在真空中濃縮。所得殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，1∶2己烷類(lèi)∶EtOAc)，產(chǎn)生30毫克(64％)的醇52。LRMS(M+H+)m/z470.2。實(shí)施例61酰胺52(1.6克，4.38毫摩爾)及二乙基苯胺(5毫升)溶液，被維持在240℃下18小時(shí)。反應(yīng)混合物被冷卻到23℃、以EtOAc(30毫升)稀釋?zhuān)⒁?當(dāng)量濃度HCl(3×50毫升)及鹽水(2×50毫升)洗滌。有機(jī)層被干燥(MgSO4)、過(guò)濾，并且濾液在真空中濃縮。所得殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，2∶1己烷類(lèi)∶EtOAc)，產(chǎn)生1克(63％)的酚56。LRMS(M+H+)m/z365.2。酚56(700毫克，1.92毫摩爾)、Cs2CO3(1.25毫克，3.84毫摩爾)、芐基溴(0.46毫升、3.84毫摩爾)及DMF(10毫升)溶液在50℃下攪拌2小時(shí)。反應(yīng)混合物以EtOAc(30毫升)稀釋、以1當(dāng)量濃度HCl(20毫升)及鹽水(3×30毫升)洗滌。有機(jī)層被干燥(MgSO4)、過(guò)濾，并且濾液在真空中濃縮。所得殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，1∶3EtOAc∶己烷類(lèi))，產(chǎn)生500毫克(57％)的酰胺57。LRMS(M+H+)m/z455.2。酰胺57(150毫克，0.33毫摩爾)、四氧化鋨(8毫克，0.03毫摩爾)、N-甲基嗎啉-N-氧化物(182毫克，1.55毫摩爾)、吡啶(2.4微升、0.03毫摩爾)、THF(2毫升)及H2O(2毫升)的溶液，被維持在23℃下。在2小時(shí)之后，添加Celite(1克)、NaHSO3(1克)及EtOAc(20毫升)，并且所得溶液被攪拌。在30分鐘之后，反應(yīng)混合物被過(guò)濾并且所得濾液在真空中濃縮。所得殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，3∶1EtOAc/己烷類(lèi))，產(chǎn)生100毫克(62％)的二醇58。LRMS(M+H+)m/z489.2。二醇58(52毫克，0.11毫摩爾)、Pb(OAc)4及CH2Cl2(2毫升)溶液在23℃下攪拌30分鐘。然后反應(yīng)混合物以一柱Celite過(guò)濾并且所得濾液被濃縮，提供無(wú)色油狀物的醛。粗制醛(～50毫克，～0.11亳摩爾)、NaBH4(24毫克，0.63毫摩爾)、THF(1毫升)及MeOH(1毫升)的溶液在23℃下維持30分鐘。然后反應(yīng)混合物以EtOAc(10毫升)稀釋、以1當(dāng)量濃度HCl(5毫升)及鹽水(5毫升)洗滌。有機(jī)層被干燥(MgSO4)、過(guò)濾，并且濾液在真空中濃縮。所得殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，2∶1EtOAc/己烷類(lèi))，產(chǎn)生20毫克(40％)的二醇59。LRMS(M+H+)m/z459.2。實(shí)施例62苯乙二醇(190毫克，0.54毫摩爾)、硼-THF(1.0摩爾濃度、0.54毫升)的溶液在23℃下維持2小時(shí)。然后添加額外份量的硼-THF(0.54毫升)。再2小時(shí)之后，添加第三部份(0.54毫升)。反應(yīng)溶液被維持18小時(shí)、冷卻到0℃，然后添加3當(dāng)量濃度NaOH(0.5毫升)及H2O2(0.5毫升)。在23℃下2小時(shí)之后，反應(yīng)混合物以EtOAc(20毫升)稀釋?zhuān)⑶乙喳}水(20毫升)洗滌。有機(jī)層被干燥(MgSO4)、過(guò)濾，并且濾液在真空中濃縮。所得殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，2∶1EtOAc/己烷類(lèi))，產(chǎn)生150毫克(75％)的醇61。LRMS(M+H+)m/z372.2。醇61(120毫克，0.32毫摩爾)、TFA∶H2O(97.5∶2.5，4毫升)溶液在23℃下維持30分鐘。反應(yīng)溶液在真空中濃縮，并且所得殘余物被置于高真空中2小時(shí)，并然后被使用而無(wú)進(jìn)一步純化。上述胺(50毫克，0.18毫摩爾)、五氟苯基酯(82毫克，0.22毫摩爾)、三乙基胺(96微升、0.55毫摩爾)及DMF(1毫升)溶液在23℃下維持2小時(shí)。然后反應(yīng)混合物以EtOAc(10毫升)稀釋?zhuān)⒁?當(dāng)量濃度HCl(5毫升)及鹽水(5毫升)洗滌。有機(jī)層被干燥(MgSO4)、過(guò)濾并且在真空中濃縮。所得殘余物以反相HPLC(C18，乙腈/水)純化，產(chǎn)生6毫克(7％)的胺63。LRMS(M+H+)m/z459.2實(shí)施例63對(duì)在DCM(100毫升)中之10(1.15克，2.71毫摩爾)溶液，添加Dess-Martin聚乙烯基吡咯烷酮(periodinane)(2.30克，5.24毫摩爾)。反應(yīng)混合物被攪拌1小時(shí)，之后DCM溶液以硫代硫酸鈉溶液及碳酸氫鈉溶液洗滌，并且在硫酸鈉上干燥?；旌衔锉贿^(guò)濾并且濾液在減壓下濃縮，產(chǎn)生23(1.0克，87％)。對(duì)在DCM(2毫升)中之23(30.0毫克，0.0711毫摩爾)溶液，添加二異丙基乙基胺(37.0微升、0.213毫摩爾)、24(12.9微升、0.213毫摩爾)及二乙酰氧基硼氫化鈉(20.0毫克，0.142毫摩爾)。反應(yīng)混合物被攪拌過(guò)夜，然后在減壓下濃縮。殘余物在反相HPLC(C18)、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生25(5.6毫克，16.9％)。LRMS(M+H+)m/z467.4。對(duì)在甲醇(2毫升)中之23(50.0毫克、0.119毫摩爾)溶液，添加二異丙基乙基胺(62.0微升、0.356毫摩爾)、26(31.1微升、0.356毫摩爾)及氰基硼氫化鈉(22.4毫克、0.356毫摩爾)。反應(yīng)混合物被攪拌過(guò)夜，然后在減壓下濃縮，并且殘余物在反相HPLC(C18)、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生27(31.0毫克，22.9％)。LRMS(M+H+)m/z518.5。實(shí)施例64對(duì)在甲醇(10.0毫升)中之1(1.0克、4.66毫摩爾)溶液，添加SOCl2(0.68毫升、9.32毫摩爾)。在室溫下攪拌過(guò)夜之后，溶液在真空中被濃縮，并且無(wú)純化地被采用。對(duì)在EtOH(1.5毫升)中之2(～1.065毫克粗制、4.66毫摩爾)溶液，添加N2H4·H2O(1.13毫升、2.3.3毫摩爾)。反應(yīng)混合物被加熱至回流，并且攪拌3小時(shí)。在冷卻時(shí)，溶液以H2O處理，以EtOAc萃取兩次，在MgSO4上干燥、過(guò)濾并且濃縮。從CH2Cl2中再結(jié)晶，產(chǎn)生為無(wú)色結(jié)晶之1.01克3；兩步驟95％產(chǎn)率。在THF(8.0毫升)中之3(0.477克，2.09毫摩爾)溶液，被添加羰基二咪唑(0.379克，2.29毫摩爾)。在冷卻時(shí)，溶液在真空中濃縮，并經(jīng)由快速柱色譜分析(10-40％，EtOAc/Hex)純化，產(chǎn)生為白色固體0.515克的4；97％產(chǎn)率。對(duì)在CH3CN(2.0毫升)中之4(1.0當(dāng)量；一般0.3-1.0毫摩爾)溶液，添加親電子基(1.1當(dāng)量)及K2CO-3(1.1當(dāng)量)。反應(yīng)混合物在微波輻射下被加熱到80℃30分鐘，續(xù)以過(guò)濾并在真空中濃縮。產(chǎn)物無(wú)純化被采用，或經(jīng)由快速柱色譜純化(一般10-40％EtOAc/Hex)純化，提供一般＞90％產(chǎn)率的5。對(duì)5(1.0當(dāng)量；一般0.3-1.0毫摩爾)添加甲基胺(在THF中2.0摩爾濃度，10.0當(dāng)量)。反應(yīng)混合物在微波輻射下被加熱到100℃4小時(shí)，續(xù)以在真空中濃縮。產(chǎn)物經(jīng)由快速柱色譜純化(一般40-80％EtOAc/Hex)純化，提供一般＞70-85％產(chǎn)率的6。實(shí)施例65對(duì)在DCM(50毫升)中之2-氨基乙腈亞硫酸氫鹽(2.9克，0.013摩爾)攪拌溶液，添加二苯甲酮(3.48毫升、0.0208摩爾)，續(xù)以DIEA(4.53毫升、0.026摩爾)。在攪拌18小時(shí)之后，DCM溶液以水(50毫升)洗滌、在硫酸鈉上干燥、過(guò)濾、并且在減壓下濃縮。殘余物在快速硅膠柱(己烷類(lèi)∶EtOAc，1∶1)上純化，產(chǎn)生3(2.40克，80％)。在THF(50毫升)中之雙(三甲基甲硅烷基)酰胺鋰(在THF中1.0摩爾濃度)溶液，在丙酮-干冰浴上、氮?dú)鈮合?，被緩慢添加到在THF(50毫升)中之3(1.2克，0.00545摩爾)及對(duì)-苯基芐基溴(1.08克，0.00436摩爾)攪拌溶液中。在1小時(shí)之后，反應(yīng)以添加甲醇中止反應(yīng)，并且溶劑在減壓下被蒸發(fā)。殘余物在快速硅膠柱(己烷類(lèi)∶EtOAc，1∶1)上純化，獲得4。4被懸浮在EtOAc(100毫升)中，并且以濃HCl(5毫升)處理。在攪拌1小時(shí)之后，溶劑在減壓下被蒸發(fā)，并且所得固體5以二乙醚(50毫升)洗滌三次，并且在真空下干燥(0.39克，32.1％)。對(duì)在DMF(10毫升)中之5(0.39克，1.75毫摩爾)溶液，在室溫下添加6(0.801克，2.11毫摩爾)及二異丙基乙基胺(0.61毫升、3.5毫摩爾)。反應(yīng)混合物被攪拌過(guò)夜。然后溶劑在減壓下被蒸發(fā)，并且殘余物在快速硅膠柱(己烷類(lèi)∶EtOAc，3∶1)上純化，產(chǎn)生7(0.40克，54.5％)。LCMS(M+H+)m/z419.1。對(duì)在DMF(2毫升)中之7(50毫克，0.119毫摩爾)溶液，添加疊氮化鈉(15.5毫克，0.239毫摩爾)及氯化銨(12.8毫克、0.238毫摩爾)。反應(yīng)混合物在80℃被攪拌過(guò)夜，并且過(guò)濾。濾液在反相HPLC(C18)上、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生8(6.40毫克，11.6％)。LCMS(M+H+)m/z462.4。實(shí)施例66流程A3-氰基-4-[1-(甲基乙基)氧基]苯甲酸甲酯對(duì)在二甲基甲酰胺(80毫升)中之3-氰基-4-羥基苯甲酸甲酯(82克，463毫摩爾；J.Med.Chem.2002，45，5769)的溶液，添加2-碘丙烷(93毫升、926毫摩爾)及碳酸鉀(190克、1.4摩爾)。所得混合物在50℃下加熱16小時(shí)，在當(dāng)時(shí)其被容許冷卻到室溫。反應(yīng)被過(guò)濾，并且母液以0.5當(dāng)量濃度氫氧化鈉(1升)稀釋。所得混合物以醚(2×1升)萃取，并且有機(jī)物以1當(dāng)量濃度HCl(1升)及鹽水(700毫升)洗滌、干燥(MgSO4)并且濃縮，產(chǎn)生100克(～100％)為黃色固體的3-氰基-4-[1-(甲基乙基)氧基]苯甲酸甲酯。3-氰基-4-[1-(甲基乙基)氧基]苯甲酸對(duì)在四氫呋喃(500毫升)中之3-氰基-4-[1-(甲基乙基)氧基]苯甲酸甲酯(100克，463毫摩爾)的0℃溶液，添加10％氫氧化鉀(500毫升)。所得溶液被容許加溫到室溫，并且維持16小時(shí)，在當(dāng)時(shí)其被濃縮，以移除四氫呋喃。殘余物以水(500毫升)稀釋?zhuān)⒁悦?2×500毫升)洗滌。然后水層以3當(dāng)量濃度HCl酸化，并且靜置2小時(shí)。固體以過(guò)濾收集，并且以水洗滌幾次，然后溶解在二氯甲烷(1升)中。大部份均相混合物經(jīng)過(guò)Celite過(guò)濾，并且濃縮到最小體積的二氯甲烷。固體以過(guò)濾收集，產(chǎn)生82克(86％)為白色固體的3-氰基-4-[1-(甲基乙基)氧基]苯甲酸。流程B試劑及條件a)4當(dāng)量濃度HCl/二噁烷，室溫；b)HTBU，i-Pr2NEt，DMF，室溫；c)1-乙氧基乙烯基-正丁基錫，PdCl2(PPh3)2、二噁烷、100℃；d)NBS、THF/H2O(3∶1)，室溫；e)2-氨基-3-甲基吡啶(picoline)，NaHCO3，i-PrOH，80℃。(3S)-3-氨基-4-(4-溴苯基)-1-丁醇鹽酸鹽{(3S)-1-[(4-溴苯基)甲基]-3-羥丙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙酯(4.4克，12.8毫摩爾)被溶解于4當(dāng)量濃度HCl/二噁烷(20毫升)。在2小時(shí)之后，反應(yīng)混合物在真空中濃縮，產(chǎn)生3.69克(94％)為白色固體的標(biāo)題化合物。LC/MS(ES)m/e244.0(M+H+)。N-{(1S)-1-[(4-溴苯基)甲基-3-羥丙基}-3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺對(duì)在干DMF(32毫升)中之(3S)-3-氨基-4-(4-溴苯基)-1-丁醇鹽酸鹽(1.80克、6.42毫摩爾)懸浮液，添加N，N-二異丙基乙基胺(2.49克，19.3毫摩爾)，并且所得澄清溶液被攪拌3分鐘。添加3-氰基-4-[1-(甲基乙基)氧基]苯甲酸(1.45克、7.06毫摩爾)及HBTU(2.68克、7.06毫摩爾)，并且反應(yīng)在室溫、氮?dú)庀聰嚢?。?.5小時(shí)之后，反應(yīng)混合物以水(50毫升)中止反應(yīng)，并且以EtOAc(3×30毫升)萃取。萃取物被干燥(Na2SO4)、過(guò)濾，并且在減壓下濃縮。殘余物以硅膠色譜分析(75％EtOAc/己烷類(lèi))純化，產(chǎn)生2.18克(78％)為白色固體的標(biāo)題化合物。LC/MS(ES)m/e431.2(M+H+)。N-((1S)-1-{[4-(溴苯基乙?；?苯基]甲基}-3-羥丙基}-3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺一個(gè)在氬氣下以加熱槍干燥的燒瓶，以N-{(1S)-1-[(4-溴苯基)甲基-3-羥丙基}-3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺(1.0克、2.32毫摩爾)、二氯雙(三苯基膦)-鈀(II)(81毫克，0.116毫摩爾)、三丁基(1-乙氧基乙烯基)錫(1.68克，4.64毫摩爾)及1，4-二噁烷(15毫升)進(jìn)料。混合物在100℃、氬氣下攪拌2小時(shí)。在完成時(shí)，以LCMS監(jiān)測(cè)，反應(yīng)在減壓下濃縮，并且殘余物立刻在不經(jīng)活化之硅膠上純化(65％EtOAc/己烷類(lèi)加5％三乙基胺)，產(chǎn)生720毫克為無(wú)色泡沫的烯醇醚中間體，其立刻被溶解于THF∶H2O(3∶1，18毫升)中，并且以N-溴琥珀酰亞胺(318毫克、1.79毫摩爾)。在室溫下15分鐘之后，反應(yīng)混合物在減壓下濃縮，并且粗制殘余物以EtOAc(30毫升)稀釋、以鹽水(10毫升)及水(10毫升)洗滌，并且在減壓下濃縮。殘余物以硅膠色譜分析(80％EtOAc/己烷類(lèi))純化，產(chǎn)生651毫克(59％)為白色粘稠固體的標(biāo)題化合物。LC/MS(ES)m/e473.2(M+H+)。3-氰基-N-((1S)-3-羥基-1-{[4-(8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}丙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺對(duì)在i-PrOH(6毫升)中之N-((1S)-1-{[4-(溴苯基乙?；?苯基]甲基}-3-羥丙基}-3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺(1.0克、2.32毫摩爾)溶液，添加2-氨基-3-甲基吡啶(Aldrich，69毫克，0.634毫摩爾)，續(xù)以固體NaHCO3(64毫克，0.761毫摩爾)。所得懸浮液被加熱到80℃。在7小時(shí)之后，大部份的i-PrOH在減壓下被移除，并且殘余物被溶解于3％MeOH/EtOAc(30毫升)中，并且以水(10毫升)及鹽水(10毫升)洗滌。經(jīng)組合之水層以3％MeOH/EtOAc(30毫升)萃取，并且經(jīng)組合之萃取物以水(10毫升)及鹽水(10毫升)洗滌。經(jīng)組合之水層萃取物被干燥(Na2SO4)、過(guò)濾并且在減壓下被濃縮。殘余物以反相HPLC(MeCN/H2O，有0.1％TFA)純化，并且澄清部份以飽和水性NaHCO3調(diào)整到pH～8，并且以3％MeOH/EtOAc(30毫升)萃取。萃取物被干燥(Na2SO4)、過(guò)濾并且在減壓下被濃縮，產(chǎn)生215毫克(70％)為灰黃色固體的標(biāo)題化合物。LC/MS(ES)m/e483.2(M+H+)。流程C1-(2-氨基-3-吡啶基)乙醇一個(gè)燒瓶(在氬氣下以加熱槍干燥)，經(jīng)由套管被添加干燥THF(400毫升)及MeLi-LiBr(在Et2O中1.5摩爾濃度中的137毫升)。當(dāng)在THF(150毫升)中之2-氨基啶-3-羧醛(10.0克、82.0毫摩爾)溶液被經(jīng)由壓力平衡添加漏斗于～45分鐘內(nèi)、有劇烈攪拌地逐滴添加(觀察到放熱，橘色維持)時(shí)，此溶液被冷卻到-78℃。在完成時(shí)，溶液被容許在-78℃攪拌1小時(shí)，在當(dāng)時(shí)TLC(有加熱下KMnO4染色)指出大部份的起始物質(zhì)被轉(zhuǎn)化成產(chǎn)物。反應(yīng)以水(200毫升，起初逐滴)小心地中止，以EtOAc(200毫升)萃取并容許加溫到室溫。層分離并且水層以3％MeOH/EtOAc萃取。組合之萃取物在硫酸鈉上干燥、過(guò)濾并且在減壓下被濃縮。殘余物以硅膠色譜分析(Analogix在EtOAc中0至5％MeOH)純化，產(chǎn)生7.78克(68％)為黃色油狀的所要消旋產(chǎn)物，其在高真空下固化幾天。此物質(zhì)以SFC、chiralcelOD-H(20×250毫米)柱(10％EtOH/在庚烷中之0.1％異丙基胺/0.1％異丙基胺)被分離成其分別對(duì)映異構(gòu)體(＞98％ee)。流程D[(1S)-1-({4-[1-(乙氧基)乙烯基]苯基}甲基)-3-羥丙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙酯對(duì)在二噁烷(500毫升)中之{(1S)-1-[(4-溴苯基)甲基]-3-羥丙基}-氨基甲酸1，1-二甲基乙酯(20克、58毫摩爾)溶液，添加三丁基[1-(乙氧基)乙烯基]錫酸鹽(39毫升、116毫摩爾)及PdCl2(PPh3)2。所得溶液在100℃下加熱5小時(shí)。然后反應(yīng)物被濃縮，并且殘余物以快速柱色譜分析(47.5％EtOAc，47.5％己烷類(lèi)，5％三乙基胺)，產(chǎn)生15克(77％)為棕色固體的[(1S)-1-({4-[1-(乙氧基)乙烯基]苯基}甲基)-3-羥丙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙酯。甲基}-3-羥丙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙酯對(duì)四氫呋喃(450毫升)及水(150毫升)中之[(1S)-1-({4-[1-(乙氧基)乙烯基]苯基}甲基)-3-羥丙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙酯(15克、44毫摩爾)冷卻(0℃)溶液，添加N-溴琥珀酰亞胺。所得溶液被容許加溫到室溫，并且維持90分鐘。然后反應(yīng)物被濃縮，并且以醋酸乙酯稀釋(1升)。所得溶液以水(1升)及鹽水(500毫升)洗滌、干燥(MgSO4)并且被濃縮，產(chǎn)生19.5克(～100％)為微黃色固體的[(1S)-1-({4-[1-(溴乙?；?苯基]甲基}-3-羥丙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙酯。ESMS[M+H]+386.2。吡啶-2-基]苯基}甲基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙酯在異丙醇(25毫升)中之[(1S)-1-({4-[1-(溴乙?；?苯基]甲基}-3-羥丙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙酯(1.00克、2.59毫摩爾)、1-(2-氨基-3-吡啶基)乙醇(0.358克、2.59毫摩爾)及固體碳酸氫鈉(0.272克、3.24毫摩爾)混合物，在回流下加熱3.5小時(shí)，并且在真空中濃縮。殘余物被溶解于醋酸乙酯中、以水及鹽水洗滌、干燥(Na2SO4)且濃縮。所得黃色固體無(wú)進(jìn)一步純化被用于下一個(gè)反應(yīng)。MS(ES+)m/e426[M+H]+。3-氯-N-[(1S)-3-羥基-1-({4-[8-(1-羥乙基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基}甲基)丙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺[(1S)-3-羥基-1-({4-[8-(1-羥乙基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基}甲基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙酯(1.08克，2.54毫摩爾)及在1，4-二噁烷中之4當(dāng)量濃度HCl(8.0毫升、32毫摩爾)的混合物，在室溫下被攪拌30分鐘。反應(yīng)被濃縮至干、再溶解于DMF(25毫升)中，并且此溶液被添加N，N-二異丙基乙基胺(1.64克、12.7毫摩爾)及3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酸五氟苯基酯(0.963克、2.54毫摩爾)。混合物在室溫下被攪拌3.0小時(shí)、以水稀釋并以醋酸乙酯萃取。萃取物以水及飽和氯化鈉洗滌、干燥(Na2SO4)并且在真空中濃縮。殘余物以在硅膠上之快速色譜分析(2％MeOH∶EtOAc)純化，產(chǎn)生為灰黃色粉末的標(biāo)題化合物(0.7克、53％)。MS(ES+)m/e522[M+H]+。流程E[(1S)-2-(4-溴苯基)-1-(羥甲基)乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙酯對(duì)無(wú)水二乙醚(550毫升)中之4-溴N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-L-苯基丙氨酸(72.6毫摩爾)在0℃下的溶液，緩慢添加氫化鋁鋰95％(108.9毫摩爾)。所得溶液在0℃下再攪拌2小時(shí)。然后反應(yīng)被小心地以飽和碳酸氫鈉水溶液(73毫升)在室溫下攪拌半小時(shí)而中止。鋁鋰鹽類(lèi)被壓出溶液，其以過(guò)濾移除。濾液被濃縮并且真空泵24小時(shí)，提供為白色固體的標(biāo)題化合物(97％)。ESMS[M+H]+331.2。{(1S)-2-(4-溴苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙酯對(duì)在無(wú)水四氫呋喃(550毫升)中之[(1S)-2-(4-溴苯基)-1-(羥甲基)乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙酯(70.6毫摩爾)、三苯基膦(84.7毫摩爾)及鄰苯二甲硫亞胺(84.7毫摩爾)的0℃溶液，在10分鐘內(nèi)逐滴添加偶氮二羧酸二異丙酯(84.7毫摩爾)。反應(yīng)繼續(xù)攪拌，容許在5小時(shí)內(nèi)被加溫到室溫。然后反應(yīng)在真空中被濃縮，并且產(chǎn)物使用醋酸酯(500毫升)從溶液triarated出。沉淀被過(guò)濾、以醋酸乙酯(3×100毫升)萃取并且干燥，產(chǎn)生為白色固體的標(biāo)題化合物(57％)。ESMS[M+H]+460.4。{(1S)-2-[4-溴乙酰基)苯基]-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙酯{(1S)-2-(4-溴苯基)-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙酯(21.7毫摩爾)、1-乙氧基乙烯基-正丁基錫(43.5毫摩爾)及反-二氯雙(三苯基膦)鈀(II)(5摩爾％)的溶液，在無(wú)水二噁烷(300毫升)中、100℃下攪拌3小時(shí)。然后反應(yīng)在真空中被濃縮，并且再溶于四氫呋喃及水(3∶1，400毫升)中，并且以N-溴琥珀酰亞胺(108.8毫摩爾)處理，并且在室溫下攪拌半小時(shí)。然后反應(yīng)溶液被濃縮至干、再溶解于醋酸乙酯(150毫升)中，并且沉淀在添加己烷(350毫升)時(shí)被發(fā)現(xiàn)。沉淀被過(guò)濾并且干燥，產(chǎn)生為黃色固體的標(biāo)題化合物(71％)。ESMS[M+H]+502.4。{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-({4-[8-(1-羥乙基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基}甲基)乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙酯在異丙醇(24毫升)中之{(1S)-2-[4-溴乙?；?苯基]-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異-2-基)甲基]乙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙酯(1.90克、3.799毫摩爾)、1-(2-氨基-3-吡啶基)乙醇(0.523克、3.79毫摩爾)及固體碳酸氫鈉(0.398克、4.72毫摩爾)混合物，被回流3.0小時(shí)，并且在真空中濃縮。殘余物被溶解于醋酸乙酯中、以水及飽和氯化鈉洗滌、干燥(Na2SO4)且濃縮，產(chǎn)生為淺粉紅色固體的標(biāo)題化合物(1.79克，87％)。MS(ES+)m/e541[M+H]+。3-氯-N-[(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-({4-[8-(1-羥乙基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基}甲基)乙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-({4-[8-(1-羥乙基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基}甲基)乙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙酯(1.79克，3.31毫摩爾)及在1，4-二噁烷中之4當(dāng)量濃度HCl(20毫升、80毫摩爾)的混合物，在室溫下被攪拌45分鐘。反應(yīng)被濃縮至干、再溶解于DMF(30毫升)中，并且此溶液被添加N，N-二異丙基乙基胺(2.14克、16.55毫摩爾)及3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酸五氟苯基酯(1.36克、3.31毫摩爾)?；旌衔镌谑覝叵卤粩嚢柽^(guò)夜、以水稀釋并以醋酸乙酯萃取。萃取物以水洗滌、干燥(Na2SO4)并且在真空中濃縮，產(chǎn)生為茶色固體的標(biāo)題化合物(2.10克、100％)。MS(ES+)m/e637[M+H]+。N-[(1S)-2-氨基-1-({4-[8-(1-羥乙基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基}甲基)乙基]-3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺3-氯-N-[(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-({4-[8-(1-羥乙基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基}甲基)乙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺(2.10克，3.30毫摩爾)及在乙醇(30毫升)中之聯(lián)氨單水合物(0.83克，16.5毫摩爾)的混合物，在57℃下被攪拌過(guò)夜。反應(yīng)被冷卻、以乙醇稀釋、過(guò)濾并且濃縮，產(chǎn)生為灰黃色固體的標(biāo)題化合物(1.67克、100％)。MS(ES+)m/e507[M+H]+。3-氯-N-[(1S)-2-[(N，N-二甲基甘氨酰基)-1-({4-[8-(1-羥乙基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基}甲基)乙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺對(duì)在二氯甲烷(17毫升)中之N-[(1S)-2-氨基-1-({4-[8-(1-羥乙基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基}甲基)乙基]-3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺(0.912克，1.80毫摩爾)、EDCI(0.69克，3.6毫摩爾)、N，N-二異丙基乙基胺(0.466克，3.6毫摩爾)及N，N-二甲基丙氨酸(0.372克)的混合物，在室溫下被攪拌過(guò)夜。反應(yīng)以水稀釋、以鹽水洗滌、干燥(Na2SO4)并且濃縮。殘余物以在硅膠上之快速柱色譜分析(8％-10％MOH∶CH2Cl2)純化，產(chǎn)生為灰黃色固體的標(biāo)題化合物(0.515克、48％)。MS(ES+)m/e592[M+H]+。{(1S)-2-[4-[8-溴咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基]-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}氨基甲酸1.1-二甲基乙酯在異丙醇(70毫升)中之[(1S)-2-({4-[1-(溴乙?；?苯基]-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙酯(6.9毫摩爾)、3-溴-2-吡啶胺(8.4毫摩爾)及碳酸氫鈉(10.4毫摩爾)的溶液，在80℃下攪拌18小時(shí)。然后反應(yīng)被冷卻到室溫，并且形成之沉淀被過(guò)濾、以冷己烷(3×100毫升)洗滌并且干燥，產(chǎn)生為淺灰色固體的標(biāo)題化合物(72％)。ESMS[M+H]+576.2。((1S)-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[4-(8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}乙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙酯遵循上述的步驟，以3-甲基-2-吡啶胺而非3-溴-2-吡啶胺，提供為淺粉紅色固體的標(biāo)題產(chǎn)物。ESMS[M+H]+511.0。N-{(1S)-2-[4-[8-溴咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基]-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺{(1S)-2-[4-[8-溴咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基]-1-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}氨基甲酸1，1-二甲基乙酯(3.5毫摩爾)及在1，4-二噁烷中之氯化氫(20毫升、4.0摩爾濃度)的溶液，在室溫下被攪拌1小時(shí)。反應(yīng)被濃縮至干、再溶解于N，N-二甲基甲酰胺(35毫升)中。對(duì)此溶液添加二異丙基乙基胺(10.5毫摩爾)及3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酸五氟苯基酯(3.8毫摩爾)，其在室溫下被攪拌半小時(shí)。反應(yīng)被溶解于醋酸乙酯(80毫升)中，并且以水(3×50毫升)及鹽水(1×50毫升)洗滌。在沉淀形成時(shí)，為分離有機(jī)層，添加己烷(150毫升)、過(guò)濾、干燥，產(chǎn)生為灰白色固體的標(biāo)題化合物(65％)。ESMS[M+H]+672.2。3-氯-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[4-[8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基]甲基}乙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺遵循上述的步驟，以{(1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[4-(8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基]甲基}乙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙酯，提供為灰白色固體的標(biāo)題產(chǎn)物。ESMS[M+H]+608.2。N-((1S)-2-氨基-1-{[4-[8-溴咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基]甲基}乙基)-3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺在乙醇(10毫升)中之N-{(1S)-2-{[4-[8-溴咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基]-[(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)甲基]乙基}-3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺(1.5毫摩爾)溶液，添加聯(lián)氨單水合物(7.6毫摩爾)。反應(yīng)在50℃下攪拌18小時(shí)，形成沉淀并且過(guò)濾。濾液在真空中濃縮。所得淺黃色固體被直接用于下一個(gè)反應(yīng)而無(wú)進(jìn)一步純化。ESMS[M+H]+533.2。N-((1S)-2-氨基-1-{[4-[8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基]甲基}乙基)-3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺遵循上述的步驟，以3-氯-N-((1S)-2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-基)-1-{[4-(8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基]甲基}乙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺，提供為灰白色固體的標(biāo)題產(chǎn)物。ESMS[M+H]+478.2。N-((1S)-2-(D-丙氨?；被?-1-{[4-[8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基]甲基}乙基)-3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺對(duì)在二氯甲烷(2毫升)中之N-[(1S)-2-氨基-1-{[4-(8-溴咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}乙基)-3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺(0.28毫摩爾)、N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-D-丙氨酸(0.56毫摩爾)、EDCI(0.56毫摩爾)及TEA(1.12毫摩爾)的溶液，在室溫下被攪拌18小時(shí)。然后反應(yīng)以1，4-二噁烷(2毫升)中之4當(dāng)量濃度HCl處理，并且在室溫下被攪拌1小時(shí)，且在真空中濃縮、再溶解于醋酸乙酯(25毫升)中并且以飽和碳酸氫鈉水溶液(1×10毫升)洗滌。有機(jī)層在真空中濃縮。殘余物的純化是Gilson反相HPLC提供為白色固體的標(biāo)題產(chǎn)物(25％)。ESMS[M+H]+613.2。3-氯-N-((1S)-2-(甲基丙氨?；?氨基-1-{[4-[8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基]甲基}乙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺遵循上述的步驟，以N-((1S)-2-氨基-1-{[4-[8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基]甲基}乙基)-3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺及N-{[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}-2-甲基丙氨酸，提供為白色固體的標(biāo)題產(chǎn)物。ESMS[M+H]+563.2。3-氯-N-((1S)-2-[(N，N-二甲基甘氨?；?-1-{[4-(8-(1-羥乙基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基]甲基}乙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺遵循上述的步驟，以N-((1S)-2-氨基-1-{[4-[8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基]甲基}乙基)-3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺及N，N-二甲基丙氨酸，提供為白色固體的標(biāo)題產(chǎn)物。ESMS[M+H]+563.2。流程F2-溴-1-(4-碘苯基)乙酮在二噁烷(160毫升)中之1-(4-碘苯基)乙酮(55.9毫摩爾)的溶液，被冷卻到10℃。逐滴添加溴(1.1當(dāng)量，61.6摩爾％)到反應(yīng)混合物中。在10分鐘之后，冷卻浴被移除，并且反應(yīng)混合物在室溫下被攪拌。在1.5小時(shí)之后，反應(yīng)混合物在真空中被濃縮，倒入水(100毫升)中，并且以醋酸乙酯(3×100毫升)萃取。經(jīng)合并的有機(jī)層在硫酸鈉上干燥并且在真空中被濃縮成茶色固體(18.2克)，其被直接用于下一步。2-(4-碘苯基)-8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶在異丙醇(160毫升)中之粗制2-溴-1-(4-碘苯基)乙酮(18.2克)、2-氨基-3-甲基吡啶(1.1當(dāng)量，61.6毫摩爾)及碳酸氫鈉(1.3當(dāng)量，72.8毫摩爾)的混合物，在80℃下加熱16小時(shí)。在反應(yīng)混合物在真空中濃縮之后，添加水(100毫升)，并且所得茶色淤漿被過(guò)濾，以水(2×50毫升)洗滌。棕色固體被從異丙醇中再結(jié)晶，并且進(jìn)一步在真空中干燥，提供為棕色固體的標(biāo)題產(chǎn)物。ESMS[M+H]+335.0。流程G4-(4-溴苯基)-N，1-二甲基-N-(甲氧基)-1H-咪唑-2-甲酰胺在MeOH(38毫升)中之4-(4-溴苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-羧酸乙酯(1.66克，5.37毫摩爾)的溶液，添加1當(dāng)量濃度NaOH溶液(19毫升)。反應(yīng)轉(zhuǎn)成混濁白色，并且在室溫下攪拌30分鐘。反應(yīng)混合物在真空中被濃縮并且高真空泵過(guò)夜，產(chǎn)生為白色固體的4-(4-溴苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-羧酸鈉鹽。4-(4-溴苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-羧酸鈉鹽在氮?dú)狻?15℃(冰/甲醇浴)下被溶解于無(wú)水CH2Cl2(40毫升)中，并且添加甲基嗎(1.1當(dāng)量，5.91毫摩爾)，續(xù)以氯甲酸異丁酯(1.1當(dāng)量，5.91毫摩爾)。反應(yīng)混合物在-15℃下攪拌15分鐘，并且然后添加N，O-二甲基鹽酸羥胺(1.0當(dāng)量，5.37亳摩爾)。反應(yīng)被溶劑加溫到室溫，并且攪拌17小時(shí)。反應(yīng)以H2O(10毫升)中止反應(yīng)。產(chǎn)物以EtOAc(3×30毫升)萃取，并且經(jīng)合并的有機(jī)層以鹽水(20毫升)洗滌、在MgSO4上干燥并且在真空中濃縮。以硅膠色譜分析(AnalogixIF280，20-100％EtOAc/己烷類(lèi))，產(chǎn)生為茶色固體的標(biāo)題產(chǎn)物(32％)。ESMS[M+H]+324.2。流程H(4R)-4-({[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}氨基)-5-羥基戊酸1，1-二甲基乙酯三乙基胺(11.49毫升、82.4毫摩爾)及氯甲酸乙酯(8.27毫升、86.5毫摩爾)被以針筒在＜0℃(冰-鹽浴)下，連續(xù)添加到在THF(588毫升)中之N-第三-Boc-D-谷氨酸5-叔丁酯(25克，82.4毫摩爾)中。在冰浴上攪拌40分鐘之后，固體被過(guò)濾，并且以THF(150毫升)洗滌。濾液被轉(zhuǎn)移到250加液漏斗中，并且在0℃下、1小時(shí)內(nèi)添加到在H2O(114毫升)中之硼氫化鈉(8.42克，222.5毫摩爾)溶液中。反應(yīng)混合物被維持在0℃1.5小時(shí)，并且然而攪拌16小時(shí)(0℃到室溫)。在大量溶劑以轉(zhuǎn)動(dòng)蒸發(fā)移除之后，濃縮液以冰水(50毫升)及1當(dāng)量濃度HCl(50毫升)中止反應(yīng)。在以EtOAc(4×100毫升)萃取之后，萃取物以100毫升0.5摩爾濃度檸檬酸、飽和NaHCO3、H2O及鹽水洗滌，并且在真空中濃縮，產(chǎn)生標(biāo)題化合物，其被直接用于下一步。ESMS[M+H]+290.4[2M+H]+＝579.4(文獻(xiàn)制備J.Med.Chem.1999，42(1)，95-108為其他異構(gòu)體)。(4R)-4-({[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}氨基)-5-戊酸1，1-二甲基乙酯對(duì)在515毫升無(wú)水CH2Cl2中之(4R)-4-({[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}氨基)-5-羥基戊酸1，1-二甲基乙酯(23.8克、82.4毫摩爾)、三苯基膦(32.42克、123.6毫摩爾)及咪唑(8.41克、123.6毫摩爾)溶液，在N2、0℃下、15分鐘內(nèi)分部份添加碘。冰浴被移除，并且反應(yīng)容許加溫到室溫，并且攪拌30分鐘。反應(yīng)以200毫升H2O中止。水層以二乙醚(2×150毫升)萃取。經(jīng)合并的有機(jī)層以飽和水性Na2SO3溶劑(2×25毫升)及鹽水(25毫升)洗滌、在MgSO4上干燥并且在真空中濃縮。殘余物以硅膠色譜分析(AnalogixIF280，5％-50％EtOAc/Hex)，產(chǎn)生為白色固體的標(biāo)題產(chǎn)物(25.34克，77％)。ESMS[M+H]+400.4。(4R)-4-({[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}氨基)-5-[4-(8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]戊酸1，1-二甲基乙酯含鋅粉(6.0當(dāng)量，325篩，Strem)之燒瓶以加熱槍加熱，同時(shí)抽氣并且以氮?dú)獬涮?。在氮?dú)庀?，?jīng)脫氣之DMF(14毫升)經(jīng)由針筒被添加，續(xù)以1，2-二溴乙烷(0.35當(dāng)量)。灰色反應(yīng)混合物在100℃油浴中攪拌15分鐘，并且冷卻到室溫。經(jīng)由針筒添加氯三甲基胺(0.25當(dāng)量)到混合物中，并且反應(yīng)在室溫下攪拌30分鐘。經(jīng)由套管添加在經(jīng)脫氣之DMF(14毫升)中之(4R)-4-({[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}氨基)-5-碘戊酸1，1-二甲基乙酯(20克、1.2當(dāng)量)到反應(yīng)混合物中。含溶液之燒瓶以經(jīng)脫氣之DMF(4毫升)洗滌，并且插套管到反應(yīng)混合物。反應(yīng)在室溫下攪拌1小時(shí)。然后，經(jīng)由頂部一次添加參(二芐叉基丙酮)二鈀(0)(2.5摩爾％)、三-o-甲苯基膦(10摩爾％)及2-(4-碘苯基)-8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶(1.4克、1.0當(dāng)量)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌17小時(shí)。反應(yīng)以EtOAc(40毫升)稀釋?zhuān)⑶医?jīng)過(guò)Celite過(guò)濾。濾液以H2O(20毫升)及鹽水(20毫升)洗滌，并且有機(jī)層在MgSO4上干燥并且在真空中濃縮。以硅膠色譜分析(AnalogixIF280，5％-90％EtOAc/Hex)，產(chǎn)生為白色固體的標(biāo)題產(chǎn)物(90％)。ESMS[M+H]+480.4。(4R)-4-({[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}氨基)-5-[4-(1-甲基-2-{[甲基(甲氧基)氨基]羰基}-1H-咪唑-4-基)苯基]戊酸1，1-二甲基乙酯遵循上述的步驟，使用4-(4-溴苯基)-N，1-二甲基-N-(甲氧基)-1H-咪唑-2-甲酰胺，提供為固體的標(biāo)題化合物。ESMS[M+H]+＝517.2。(4R)-4-[({3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}羰基)氨基]-5-[4-(8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]戊酸對(duì)在CH2Cl2(14毫升)中之(4R)-4-({[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}氨基)-5-[4-(1-甲基-2-{[甲基(甲氧基)氨基]羰基}-1H-咪唑-4-基)苯基]戊酸1，1-二甲基乙酯(1.35克、2.82毫摩爾)溶液，添加三氟醋酸(10毫升)，續(xù)以三乙基硅烷(2.5當(dāng)量、7.05毫摩爾)。反應(yīng)在室溫下被攪拌45分鐘，并且在真空中被濃縮。添加DMF(35毫升)到殘余物中，續(xù)以在氮?dú)庀露惐一?14.7毫升、84.51毫摩爾)。反應(yīng)被攪拌5分鐘，并且添加3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酸五氟苯基酯(1.1當(dāng)量、3.10毫摩爾)。反應(yīng)被攪拌45分鐘，并且在真空中被濃縮。添加醋酸乙酯(50毫升)到殘余物中，并以H2O(30毫升)洗滌。水層以EtOAc(20毫升)萃取，并且經(jīng)合并的有機(jī)層在MgSO4上干燥，并且在真空中濃縮。以硅膠色譜分析(AnalogixIF280，25％-100％EtOAc/己烷類(lèi))，提供為白色泡沫狀固體的標(biāo)題化合物(61％)。ESMS[M+H]+520.2。(4R)-4-[({3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}羰基)氨基]-5-[4-(1-甲基-2-{[甲基(甲氧基)氨基]羰基}-1H-咪唑-4-基)苯基]戊酸遵循上述的步驟，以(4R)-4-({[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}氨基)-5-[4-(1-甲基-2-{[甲基(甲氧基)氨基]羰基}-1H-咪唑-4-基)苯基]戊酸1，1-二甲基乙酯及前述純化，提供為固體的標(biāo)題化合物。ESMS[M+H]+＝557.2。(4R)-5-[4-(2-乙酰基-1-甲基-1H-咪唑-4-基)苯基]-[({3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}羰基)氨基]戊酸對(duì)在THF(16毫升)中之粗制(4R)-4-[({3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}羰基)氨基]-5-[4-(1-甲基-2-{[甲基(甲氧基)氨基]羰基}-1H-咪唑-4-基)苯基]戊酸(3.18毫摩爾)在氮?dú)狻?℃下的溶液，經(jīng)由針筒逐滴添加溴化甲基鎂(10.6毫升，10當(dāng)量，在醚中3.0摩爾濃度)。反應(yīng)在0℃下被攪拌30分鐘，并且小心地以飽和NH4Cl水溶液(10毫升)中止，續(xù)以1當(dāng)量濃度HCl溶液(60毫升)，使得水層的pH～5.5。產(chǎn)物以EtOAc(4×40毫升)萃取，并且經(jīng)合并的有機(jī)層在MgSO4上干燥，并且在真空中濃縮，產(chǎn)生為白色標(biāo)題化合物，被直接用于下一個(gè)反應(yīng)。ESMS[M+H]+512.4。N-((1R)-4-氨基-1-{[4-(8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}-4-氧丁基)-3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺對(duì)在無(wú)水THF(12.4毫升)中之(4R)-4-[({3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}羰基)氨基]-5-[4-(1-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]戊酸(900毫克、1.73毫摩爾)在氮?dú)狻?℃下的溶液，添加三乙基胺(242微升、1.73毫摩爾)，續(xù)以氯甲酸甲酯(174微升、1.82毫摩爾)。反應(yīng)在0℃下被攪拌40分鐘，并且然后固體被過(guò)濾，并且以5毫升THF洗滌。濾液被添加到含NH4OH(5毫升)在室溫下的燒瓶中，并且反應(yīng)混合物被攪拌1小時(shí)。產(chǎn)物從反應(yīng)混合物中以EtOAc(50毫升)萃取。水層以EtOAc(20毫升)萃取，并且然后以1當(dāng)量濃度HCl溶液(30毫升)酸化，并且再以EtOAc(10毫升)萃取。經(jīng)合并的有機(jī)層在MgSO4上干燥，并且在真空中濃縮，產(chǎn)生白色固體。從異丙醇中再結(jié)晶的純化，提供產(chǎn)生為白色標(biāo)題化合物(90％)。ESMS[M+H]+＝519.4。N-(1R)-1-{[4-(2-乙?；?1-甲基-1H-咪唑-4-基)苯基]甲基}-4-氨基-4-氧代丁基)-3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺遵循上述的步驟，以(4R)-5-[4-(2-乙酰基-1-甲基-1H-咪唑-4-基)苯基]-4-[({3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}羰基)氨基]戊酸及以Gilson反相HPLC純化，提供為白色固體的標(biāo)題化合物。ESMS[M+H]+＝511.2。流程I(3S)-4-{[4-(2-乙?；?1-甲基-1H-咪唑-4-基)苯基]-3-[({3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}羰基)氨基]丁基二甲基磷酸酯在干燥CH2Cl2(10毫升)中之N-((1S)-1-{[4-(2-乙?；?1-甲基-1H-咪唑-4-基)苯基]甲基}-3-羥丙基)-3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺(500毫克、5.18毫摩爾)溶液，在室溫、N2下添加氯磷酸二甲酯(748毫克、5.18毫摩爾)，續(xù)以DMAP(660毫克、5.41毫摩爾)。在30分鐘之后，TLC(95∶5EtOAc/MeOH)顯示～50％轉(zhuǎn)化，故添加額外部份的氯磷酸二甲酯(748毫克、5.18毫摩爾)及DMAP(660毫克、5.41毫摩爾)。再30分鐘之后，反應(yīng)以飽和水性NH4Cl中止，并且CH2Cl2稀釋。水層以CH2Cl2反相萃取，并且經(jīng)合并的有機(jī)層被干燥(Na2SO4)、過(guò)濾并且在減壓下被濃縮。殘余物以硅膠色譜分析(100％EtOAc；在Analogix上等度)純化，產(chǎn)生475毫克(77％)為灰黃色油狀的標(biāo)題化合物。LC/MS(ES)m/e592.4(M+H+)。注意，產(chǎn)物被～1當(dāng)量的起始氯磷酸二甲酯/氫磷酸二甲酯試劑污染，在如此地進(jìn)行。(3S)-4-[4-(2-乙?；?1-甲基-1H-咪唑-4-基)苯基]-3-[({3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}羰基)氨基]丁基二氫磷酸酯在AcOH、30％HBr中之(3S)-4-[4-(2-乙酰基-1-甲基-1H-咪唑-4-基)苯基]-3-[({3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}羰基)氨基]丁基二甲基磷酸酯(475毫克、0.804毫摩爾)的黃色溶液，被置于預(yù)熱(60℃)浴10分鐘，然后立刻容許被冷卻到室溫。反應(yīng)混合物在減壓下被濃縮，并且殘余物被再溶解于DMSO(6毫升)中、過(guò)濾并且以Gilson反相HPLC(MeCN/H2O，有0.1％TFA)純化。澄清部份的MeCN在減壓下被移除，并且所余水溶液被冷凍，且凍干過(guò)夜，產(chǎn)生84毫克(19％)為黃色粉末的標(biāo)題化合物。LC/MS(ES)564.2(M+H)+。(3S)-3-[({3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}羰基)氨基]-4-[4-(8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}丁基二氫磷酸酯遵循上述的步驟，除了以3-氯-N-((1S)-3-羥基-1-{[4-(8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}丙基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺取代N-((1S)-1-{[4-(2-乙?；?1-甲基-1H-咪唑-4-基)苯基]甲基}-3-羥丙基-3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺，并以第三丁氧基鉀取代DMAP，標(biāo)題化合物被制備為白色粉末(35％產(chǎn)率)。LC/MS(ES)563(M+H)+。流程J3-氰基-N-[(1S)-1-({4-[8-(3，5-二甲基-4-異噁唑基)咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基]苯基}甲基)-3-羥丙基]-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺對(duì)在干燥DMF(2毫升)中之N-[(1S)-1-{[4-(8-溴咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}-3-羥丙基]-3-羥丙基)-3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺(200毫克、0.366毫摩爾)溶液，在室溫下連續(xù)添加3，5-二甲基-異噁唑基-4-硼酸(63毫克，0.439毫摩爾)、肆三苯基膦鈀(0)(21毫克、0.018毫摩爾)及2.0摩爾濃度水性K2CO3(0.46毫升)。反應(yīng)混合物在氬氣下排氣，并且加熱到100℃、攪拌22小時(shí)、冷卻到室溫、過(guò)濾并直接以反相HPLC(MeCN/H2O，有0.1％TFA)純化。澄清部份以飽和水性NaHCO3調(diào)整到pH～8，并且以3％MeOH/EtOAc(3×30毫升)萃取。萃取物被干燥(Na2SO4)、過(guò)濾并且在減壓下被濃縮，產(chǎn)生45毫克(22％)為灰白色固體的標(biāo)題化合物。LC/MS(ES)m/e564.2(M+H+)。流程K3-氯-N-[(1S)-1-{[3-氯-4-(8-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基)苯基]甲基}-3-羥丙基)-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰胺遵循在文獻(xiàn)(J.Org.Chem.2003，68，42；J.Org.Chem.2002，67，1738；J.Am.Chem.Soc.1972，946203)的步驟及上述的步驟，標(biāo)題化合物被制備為白色固體。LC/MS(ES)m/e526(M+H)+。下列化合物使用上述的步驟制備<tablesid="tabl0067"num="0067"></tables>實(shí)施例67對(duì)在二甲基甲酰胺(200毫升)中之化合物1(10.7克，61.37毫摩爾)、(R)-1，1，1-三氟丙醇(3.5克，30.68毫摩爾)的0℃溶液，在5分鐘內(nèi)添加氫化鈉(3.7克，92.05毫摩爾)部份。在10分鐘之后，冰浴被移除并且反應(yīng)混合物在加溫到室溫的同時(shí)被攪拌。反應(yīng)混合物被加熱到80℃，并且攪拌過(guò)夜。反應(yīng)以LC/MS監(jiān)測(cè)。在反應(yīng)完成之后，其被冷卻到室溫。反應(yīng)混合物以HCl(0.5當(dāng)量濃度，200毫升)中止反應(yīng)，并且以醋酸乙酯(3×250毫升)稀釋。有機(jī)層在硫酸鈉上干燥、過(guò)濾，并且濾液在真空中濃縮，產(chǎn)生粗制化合物2(8.2克)，其被直接用于下一步，而無(wú)進(jìn)一步純化。對(duì)在二氯甲烷(200毫升)中之化合物2(4.1克，15.34毫摩爾)、三乙基胺(6.4毫升、46.02毫摩爾)的0℃溶液，在3分鐘內(nèi)經(jīng)由針筒添加三氟醋酸五氟苯基酯(6.35毫升、36.82毫摩爾)。在5分鐘之后，冰浴被移除并且反應(yīng)混合物在加溫到室溫的同時(shí)再被攪拌2小時(shí)。反應(yīng)混合物在真空中濃縮。所得殘余物以快速色譜分析(硅膠，己烷類(lèi)/EtOAc＝1∶0，50；1)，產(chǎn)生化合物3(3.5克，50％產(chǎn)率)。實(shí)施例684-羥基-3-碘苯甲酸甲酯24-羥基苯甲酸甲酯(35.5克，0.233摩爾)被溶解于200毫升醋酸中，并且經(jīng)攪拌之混合物被加溫到65℃。在AcOH中之ICI溶液(37.8克，0.233摩爾)在40分鐘內(nèi)被逐滴添加?；旌衔镌?5℃下攪拌5小時(shí)，然后在室溫下再攪拌16小時(shí)。沉淀產(chǎn)物經(jīng)由過(guò)濾分離、以水洗滌，并且在真空中干燥，產(chǎn)生27.5克(以LCMS及HNMR為99％純)的所要產(chǎn)物。母液被蒸發(fā)，并且所得殘余物以水洗滌并且在真空中干燥，產(chǎn)生31克(以LCMS及HNMR為95％純)的所要產(chǎn)物。4-羥基-3-碘苯甲酸甲酯2的經(jīng)組合產(chǎn)率為58.85克(90.3％產(chǎn)率)。LCMSm/z＝。3-氰基-4-羥基-苯甲酸甲酯328克(0.1摩爾)的4-羥基-3-碘苯甲酸甲酯2被溶解于100毫升DMF中，以9.92克(0.11摩爾)CuCN及0.49克(0.11摩爾)NaCN處理。系統(tǒng)以氮?dú)鉀_刷，之后混合物被加溫到105℃，并且攪拌18小時(shí)?；旌衔锉蝗菰S冷卻到室溫，并且任何沉淀物經(jīng)由過(guò)濾被移除，并以EtOAc(2×200毫升)洗滌。經(jīng)組合層在硫酸鈉上干燥、過(guò)濾并且蒸發(fā)至干。在真空下干燥之后，所得18克(100％產(chǎn)率)的3，以LCMS及HNMR鑒定特征。3-氰基-4-異丙氧基苯甲酸甲酯43-氰基4-羥基-苯甲酸甲酯3(18克，0.1摩爾)被溶解于100毫升DMF中，以14.2毫升(0.15摩爾)2-溴丙烷及41.9克(0.3摩爾)無(wú)水碳酸鈉處理。系統(tǒng)以氮?dú)鉀_刷，并且混合物被加溫到90℃，并且攪拌過(guò)夜。在被冷卻到室溫之后，混合物以200毫升水稀釋?zhuān)訡H2Cl2(2×200毫升)萃取。經(jīng)組合有機(jī)層在硫酸鈉上干燥、過(guò)濾并且蒸發(fā)至干，產(chǎn)生20.5克(99％產(chǎn)率)為油狀的4，其以LCMS及HNMR鑒定特征。3-氰基-4-異丙氧基苯甲酸五氟苯酯620.5克(0.093摩爾)的3-氰基4-異丙氧基苯甲酸甲酯4被溶解于200毫升6∶4甲醇及水混合物中。對(duì)此添加5.61克(0.14摩爾)NaOH，并且混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。然后溶液以硅膠柱過(guò)濾，并且溶劑在真空中被移除。所得固體被再被溶解于200毫升CH2Cl2中，并且以19.3毫升(0.11摩爾)2，2，2-三氟醋酸五氟苯基酯及19.5毫升(0.14摩爾)三乙基胺處理。在攪拌過(guò)夜之后，溶液被過(guò)濾并且任何固體以CH2Cl2洗滌。經(jīng)組合有機(jī)層流經(jīng)一短硅膠柱，并且然后被蒸發(fā)至干，產(chǎn)生29克(83.5％產(chǎn)率)的6，其以LCMS及HNMR鑒定特征。實(shí)施例69對(duì)在DMF(10毫升)中之化合物1(200毫克、1.077毫摩爾)及2-碘丙烷(322微升、3.23毫摩爾)溶液，添加DIEA(750微升、4.31毫摩爾)。反應(yīng)混合物被加熱至80℃，并且攪拌過(guò)夜。反應(yīng)以LC/MS監(jiān)測(cè)。在反應(yīng)完成之后，其被冷卻到室溫。反應(yīng)混合物以HCl(0.5當(dāng)量濃度，30毫升)中止反應(yīng)，并且以醋酸乙酯(50毫升×3)萃取。有機(jī)層在硫酸鈉上干燥并且濃縮，并在高真空中干燥。所得殘余物以反相色譜分析(使用乙腈及水混合物)純化，產(chǎn)生化合物2(50毫克，20％)。對(duì)在MeOH(1.0毫升)中之化合物2(50毫克，0.22毫摩爾)溶液，添加在水中之NaOH(1.0摩爾濃度，330微升、0.330毫摩爾)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。反應(yīng)以LC/MS監(jiān)測(cè)?；旌衔镆訦Cl(0.5當(dāng)量濃度，5毫升)中止反應(yīng)，并且以醋酸乙酯(10毫升×3)萃取。有機(jī)層在硫酸鈉上干燥并且濃縮，產(chǎn)生2(45毫克)。LRMS(M-H+)m/z212.0。實(shí)施例70對(duì)在DMF(10毫升)中之化合物1(200毫克、1.077毫摩爾)及2-碘丙烷(322微升、3.23毫摩爾)溶液，添加DIEA(750微升、4.31毫摩爾)。反應(yīng)混合物被加熱至80℃，并且攪拌過(guò)夜。反應(yīng)以LC/MS監(jiān)測(cè)。在反應(yīng)完成之后，其被冷卻到室溫。反應(yīng)混合物以HCl(0.5當(dāng)量濃度，30毫升)中止反應(yīng)，并且以醋酸乙酯(50毫升×3)萃取。有機(jī)層在硫酸鈉上干燥并且濃縮，并在高真空中干燥。所得殘余物以反相色譜分析(使用乙腈及水混合物)純化，產(chǎn)生化合物2(50毫克，20％)。對(duì)在MeOH(1.0毫升)中之化合物2(50毫克，0.22毫摩爾)溶液，添加在水中之NaOH(1.0摩爾濃度，330微升、0.330毫摩爾)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。反應(yīng)以LC/MS監(jiān)測(cè)?；旌衔镆訦Cl(0.5當(dāng)量濃度，5毫升)中止反應(yīng)，并且以醋酸乙酯(10毫升×3)萃取。有機(jī)層在硫酸鈉上干燥并且濃縮，產(chǎn)生2(45毫克)。LRMS(M-H+)m/z212.0。實(shí)施例71化合物14-溴-2-氯酚(5.04克，24.3毫摩爾)被溶解于DMF(30毫升)，并且添加K2CO-3(10.10克，72.9毫摩爾)，續(xù)以2-氯乙基-對(duì)-甲苯磺酸鹽(4.86毫升，26.7毫摩爾)。所得混合物被加溫到60℃3小時(shí)，然后被冷卻到室溫。反應(yīng)以EtOAc(350毫升)稀釋?zhuān)⑶乙运?5×150毫升)洗滌。有機(jī)層被干燥(Na2SO4)并且濃縮成粘稠油狀，其在高真空下固化成固體?；衔?(6.46克，24.1毫摩爾，全量產(chǎn)率)使用1H-NMR鑒定特征，并且被用于后續(xù)步驟而無(wú)進(jìn)一步純化。化合物1(6.46克，24.1毫摩爾)被溶解于DMF(30毫升)，并且添加氫化鈉(1.94克，在礦物油中的60％分散液，48.6毫摩爾)。所得混合物在室溫下攪拌16小時(shí)。反應(yīng)以水(100毫升)及EtOAc(350毫升)稀釋。層分離，并且有機(jī)層以水(4×150毫升)洗滌。有機(jī)層被干燥(Na2SO4)并且濃縮成白色固體。化合物2(5.56克，24.0毫摩爾，全量產(chǎn)率)在高真空下干燥，并且使用1H-NMR鑒定特征。其被用于后續(xù)步驟而無(wú)進(jìn)一步純化?；衔?(5.56克，24.0毫摩爾)與氯碘甲烷(5.59毫升、76.8毫摩爾)組合，并且在氮?dú)鈮合卤蝗芙庥?，2-二氯乙烷(35毫升)中。溶液被以冰浴冷卻到0℃，并且在10分鐘內(nèi)添加二乙基鋅(38.4毫升、在己烷中1.0摩爾濃度，38.4毫摩爾)。所得混合物被攪拌30分鐘，并且溶劑加溫到室溫。其以冰浴被冷卻到0℃，并且添加飽和水性NH4Cl(150毫升)，續(xù)以濃水性NH4OH(25毫升)及EtOAc(200毫升)。層分離，并且水層以額外EtOAc(2×100毫升)萃取。有機(jī)層被組合、干燥(Na2SO4)并且濃縮成粗制油狀物，其使用硅膠(100％己烷)純化為無(wú)色油狀物之化合物3(1.76克，7.2毫摩爾，30％產(chǎn)率)使用1H-NMR鑒定特征。在高壓反應(yīng)器中，化合物3(1.76克，7.2毫摩爾)被溶解于EtOH(40毫升)中。添加三乙基胺(5.0毫升、35.8毫摩爾)、續(xù)以[1，1-雙(二苯基膦基)鈀二茂鐵]二氯鈀(II)(188毫克，0.36毫摩爾)。反應(yīng)容器以一氧化碳加壓(每平方時(shí)100磅)、抽氣，并再以一氧化碳(每平方時(shí)100磅)加壓。容器被抽氣，并再以一氧化碳(每平方時(shí)350磅)加壓。反應(yīng)被加熱到90℃，并且攪拌16小時(shí)。其被冷卻到室溫、減壓并且經(jīng)過(guò)Celite過(guò)濾。溶劑被蒸發(fā)，并且所余殘余物在二氯甲烷(150毫升)及1.0摩爾濃度水性KHSO4(75毫升)中分布。層分離，并且有機(jī)相以額外1摩爾濃度水性KHSO4(1×75毫升)洗滌。有機(jī)相被干燥(Na2SO4)并且濃縮成油狀物，其使用硅膠(EtOAc/己烷)純化，提供為白色固體之化合物4(648毫克，2.70毫摩爾，38％產(chǎn)率)，使用1H-NMR鑒定特征。對(duì)在二氯甲烷(3毫升)及EtOH(15毫升)中之化合物4(648毫克，2.70毫摩爾)溶液，添加1摩爾濃度水性KOH(7.0毫升、7毫摩爾)。所得混濁混合物被加熱到60℃1小時(shí)。二氯甲烷及EtOH在減壓下蒸發(fā)，并且所余水性溶液以濃HCl酸化。所得沉淀被過(guò)濾。經(jīng)過(guò)濾白色固體為純的化合物5(506毫克，2.39毫摩爾，88％產(chǎn)率)，使用LC/MS(LRMS(M-H)211.1m/z)鑒定特征。實(shí)施例72對(duì)在THF(8.5毫升、0.2摩爾濃度)中之胺(580毫克，1.7毫摩爾)及三乙基胺(449微升、3.4毫摩爾、2當(dāng)量)溶液，添加氯甲酸氯乙酯(278微升、2.6毫摩爾、1.5當(dāng)量)?；旌衔镌谑覝叵卤粩嚢?0分鐘。然后，其以醋酸乙酯稀釋、以1當(dāng)量濃度HCl及鹽水洗滌。有機(jī)層被干燥、過(guò)濾并且在真空中濃縮，產(chǎn)生為黃色油狀物之粗制物質(zhì)(900毫克)。對(duì)在DMF(10毫升)中之粗制物質(zhì)溶液，添加NaH(272毫克、6.8毫摩爾、4當(dāng)量)，并且在室溫下被攪拌16小時(shí)?；旌衔镆源姿嵋阴?100毫升)稀釋?zhuān)⑶乙喳}水(5×50毫升)洗滌。有機(jī)層被干燥、過(guò)濾并且在真空中濃縮，產(chǎn)生為油狀物之粗制物質(zhì)(900毫克)。以柱色譜分析(1∶1醋酸乙酯∶己烷類(lèi))，產(chǎn)生80毫克(24％)的所要產(chǎn)物。m/z(+1)＝398.0。實(shí)施例73(R)-4-氯-N-(1-(4-(4-碘苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)乙基)丁酰胺。對(duì)一個(gè)100毫升之圓底燒瓶，添加1-(4-(4-碘苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)乙基氨基甲酸(R)-芐酯(1.50克、3.27毫摩爾、1.0當(dāng)量)、CH3CN(20毫升)及TMSI(900微升、6.4毫摩爾、1.9當(dāng)量)。反應(yīng)混合物被加蓋，并且攪拌2小時(shí)。然后添加甲醇(40毫升)到燒瓶中，并且混合物被濃縮、溶解于EtOAc(100毫升)并以水洗滌。有機(jī)層在Na2SO4上干燥、過(guò)濾并且濃縮。殘余物被溶解于DCM中，并以硅膠色譜分析(35-60％CH3CN/CH2Cl2，然后20％MeOH/CH2Cl2)，提供950毫克(90％)為油狀物之所要主要胺(M+H(m/z)＝328。對(duì)此胺以逐滴方式添加CH2Cl2(20毫升)及吡啶(260微升、1.1當(dāng)量)，續(xù)以4-氯丁?；?344微升、1.05當(dāng)量)。反應(yīng)被攪拌15分鐘、續(xù)以添加EtOAc(50毫升)及水(10毫升)。有機(jī)層被分離、在Na2SO4上干燥、過(guò)濾并且濃縮。殘余物被溶解于DCM中，并以硅膠色譜分析(5-35％CH3CN/CH2Cl2，提供747毫克(60％)為灰白色固體之(R)-4-氯-N-(1-(4-(4-碘苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)乙基)丁酰胺(M+H(m/z)＝432)。實(shí)施例74(R)-1-(1-(4-(4-碘苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)乙基)四氫咯-2-酮。對(duì)一個(gè)20毫升7.5毫升小瓶，添加(R)-4-氯-N-(1-(4-(4-碘苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)乙基)丁酰胺及THF(10毫升)。然后該小瓶在氮?dú)鈮合卤焕鋮s到0℃，添加叔丁基鉀(214毫克、1.91毫摩爾)。反應(yīng)被攪拌1.5小時(shí)。對(duì)反應(yīng)混合物添加EtOAc(50毫升)及水(10毫升)。有機(jī)層被分離、在Na2SO4上干燥、過(guò)濾并且濃縮。然后殘余物被溶解于DCM中，并以硅膠色譜分析(5-50％CH3CN/CH2Cl2)，提供593毫克(86％)為為白色固體之(R)-1-(1-(4-(4-碘苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)乙基)四氫吡咯烷-2-酮(M+H(m/z)＝396)。實(shí)施例75對(duì)在DMF(150毫升)中之1(10克、45.7毫摩爾)溶液，在0℃下添加HBTU(26毫克、68.5毫摩爾)、二甲基羥基胺HCl鹽(5.35克，54.8毫摩爾)及DIEA(9.6毫升、55.0毫摩爾)。在被攪拌2小時(shí)之后，混合物被容許加溫到室溫。連續(xù)攪拌2天。反應(yīng)混合物在EtOAc(500毫升)及水(200毫升)中分布。有機(jī)層以NaOH(2當(dāng)量濃度、200毫升)、HCl(2當(dāng)量濃度、200毫升)、H2O、鹽水洗滌，在Na2SO4上干燥并且濃縮，產(chǎn)生2(9.6克)，其被使用而無(wú)進(jìn)一步純化。LRMS(M+H+)m/z262.0。在Et2O(100毫升)中之2(9.6克、～36.8毫摩爾)溶液，在0℃下添加MeMgBr(Et2O中3摩爾濃度中，27毫升)。所得混合物被攪拌4小時(shí)，同時(shí)容許加溫到室溫。反應(yīng)混合物以飽和NH4Cl(100毫升)中止。有機(jī)層以H2O、鹽水洗滌、在Na2SO4上干燥并且濃縮，產(chǎn)生3(7克，從1為71％)，以NMR鑒定特征。對(duì)在DCM(200毫升)及MeOH(100毫升)中之3(6.5克，30毫摩爾)溶液，添加三溴化四丁基銨(14.5克、30毫摩爾)。反應(yīng)混合物被攪拌14小時(shí)?；旌衔锉粷饪s，并且在高真空下干燥，產(chǎn)生5(以NMR鑒定特征)，其被使用而無(wú)進(jìn)一步純化。對(duì)在DCM(50毫升)中之4(5克，～16.9毫摩爾)溶液，添加六亞甲基四胺(2.6克、18.5毫摩爾)。反應(yīng)混合物被攪拌2小時(shí)。混合物以DCM(500毫升)稀釋。沉淀以過(guò)濾收集、以DCM(500毫升×2)洗滌，并且在高真空下干燥。對(duì)所得殘余物添加EtOH(60毫升)及濃HCl(30毫升)。反應(yīng)混合物被攪拌2小時(shí)。混合物被濃縮、干燥，產(chǎn)生5，其被使用而無(wú)進(jìn)一步純化。LRMS(M+H+)m/z231.9。對(duì)在二噁烷(50毫升)中之粗制5(～16.9毫摩爾)的溶液，添加NaOAc(6.93克，84.5毫摩爾)、HOAc(4.8毫升、84.5毫摩爾)及5.1.(5.93克，84.5毫摩爾)。在1小時(shí)之后，反應(yīng)混合物被加溫到80℃，并且攪拌3小時(shí)。反應(yīng)混合物被分布于EtOAc(500毫升)及飽和NaHCO3(200毫升)之間。水層以EtOAc(300毫升×2)萃取。經(jīng)合并的有機(jī)層以鹽水洗滌、在Na2SO4上干燥并且濃縮。所得殘余物在硅膠上(己烷/EtOAc1∶0、1∶2、1∶1、0∶1)純化，產(chǎn)生6(1.2克，從4為23％)。LRMS(M+H+)m/z312.9。實(shí)施例76對(duì)在二氯甲烷(400毫升)中之硫代草酸乙酯(10.0克，75毫摩爾)的溶液，在0℃下緩慢添加四氟硼酸三甲基鋨(13.1克，89毫摩爾)。溶劑被移除，產(chǎn)生為白色固體的18.0克產(chǎn)物2，其被使用而無(wú)進(jìn)一步純化。在二噁烷(70毫升)中之2-氨基-4’-溴苯乙酮鹽酸鹽(10.0克，40毫摩爾)、醋酸鈉(16.4克，200毫摩爾)、醋酸(11.5毫升，200毫摩爾)及化合物2(19.2克，80毫摩爾)混合物，在65℃攪拌，直到TLC顯示無(wú)化合物2殘留(約2小時(shí))。反應(yīng)混合物被小心以飽和NaHCO3溶液中和，以醋酸乙酯萃取。有機(jī)層在Na2SO4上干燥并且濃縮。以快速柱色譜分析(EtOAc∶Hex1∶1)純化，產(chǎn)生為白色固體的產(chǎn)物3(9.11克，79％)。在一個(gè)圓底燒瓶中，產(chǎn)物3(2.00克，6.8毫摩爾)被溶解于DMF(20毫升)中，續(xù)以添加碘甲烷(5.1毫升，10.1毫摩爾)及K2CO3(1.4克，10.1毫摩爾)?；旌衔锉蝗菰S在60℃拌3小時(shí)，直到以TLC為完全。溶液以鹽水中止反應(yīng)，以EtOAc萃取三次、在硫酸鈉上干燥并且濃縮。經(jīng)由柱色譜分析純化、使用EtOAc∶Hex1∶1，產(chǎn)生1.38克(66％)的產(chǎn)物4。對(duì)在DMF(15毫升)中之化合物3(3.174克，10.8毫摩爾)溶液，添加K2CO3(4.478克，32.4毫摩爾)及(2-溴乙氧基)-叔丁基二甲基硅烷(2.780毫升，13.0毫摩爾)。所得混合物在55℃下攪拌過(guò)夜。溶液被濃縮、以水稀釋?zhuān)⒁訣tOAc萃取(3×50毫升)。有機(jī)層被組合、在Na2SO4上干燥。溶劑被移除，產(chǎn)生為粘稠的油狀物(4.805克，10.6毫摩爾，98.4％)，其被用于后續(xù)步驟而無(wú)進(jìn)一步純化。對(duì)在無(wú)水THF(25毫升)中之化合物4(2.174克，4.8毫摩爾)溶液，在氮?dú)狻?℃下逐滴添加溴化甲基鎂(4.8毫升，在二乙醚中3摩爾濃度，14.4毫摩爾)。反應(yīng)在0℃下攪拌15分鐘。反應(yīng)被小心地以飽和氯化銨溶液(5毫升)及水(30毫升)中止反應(yīng)，并以EtOAc萃取(3×50毫升)。有機(jī)層被組合、在Na2SO4上干燥，并濃縮成粘稠的油狀物。以快速柱色譜分析純化(15％EtOAc∶己烷)，產(chǎn)生為白色無(wú)結(jié)晶性固體的所要產(chǎn)物5(1.371克，65％)。對(duì)在THF(5毫升)中之化合物5(1.371克，3.1毫摩爾)溶液，添加35毫升的HCl(在二噁烷中4摩爾濃度)。所得溶液在室溫下攪拌過(guò)夜。溶劑被移除，產(chǎn)生為白色固體的產(chǎn)物6(1.0克，99％)。在甲苯(60毫升)中之化合物6(0.5克，1.54毫摩爾)及1毫升TFA的混合物被回流過(guò)夜。固體6不溶解，直到近甲苯的沸點(diǎn)。溶劑被移除。殘余物以EtOAc稀釋?zhuān)訬aHCO3水溶液洗滌、在Na2SO4上被干燥并且濃縮。以快速柱色譜分析(EtOAc∶己烷1∶1)，產(chǎn)生為白色固體的產(chǎn)物7(0.348克，74％)。實(shí)施例771-(4-(4-碘苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)乙基)(甲基)氨基甲酸(R)-甲酯。對(duì)一個(gè)250毫升之圓底燒瓶，添加(R)-1-(4-(4-碘苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)-N-甲基乙烷胺(3.1克、9.1毫摩爾)、氯甲酸甲酯(0.84毫升、10.9毫摩爾)、Na2CO3(1.15克、10.9毫摩爾)及THF(100毫升)。反應(yīng)被攪拌2小時(shí)，續(xù)以添加EtOAc(50毫升)及水(10毫升)。有機(jī)層在Na2SO4上干燥、過(guò)濾并且濃縮，產(chǎn)生1.50克(41％)為灰白色固體之1-(4-(4-碘苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)乙基)(甲基)氨基甲酸(R)-甲酯(M+H(m/z)＝400)。實(shí)施例78參考J.Med.Chem.2001，44，2990-3000。對(duì)在冰浴上、二噁烷(200毫升)中之對(duì)-碘acetophenone1(30.0克，122毫摩爾)的攪拌溶液，添加溴(6.56毫升，128毫摩爾)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌并且以LC/MS監(jiān)測(cè)。在完成之后(約1小時(shí))，溶劑以轉(zhuǎn)動(dòng)蒸發(fā)移除，并且殘余物在真空中干燥，產(chǎn)生固體2(40克，100％)。(以J.Med.Chem.2001，44，2990-3000為基礎(chǔ))。對(duì)在NMP(100毫升)中之Cbz-D-Ala-OH3(5.0克，22.4毫摩爾)溶液，添加碳酸銫(3.72克，11.4毫摩爾)。在室溫下攪拌1小時(shí)之后，添加2(7.60克，22.4毫摩爾)。反應(yīng)混合物以二甲苯(100毫升)及醋酸銨(9.25克，120毫摩爾)稀釋?zhuān)⑶胰缓笤?20℃下攪拌4小時(shí)?？捎懈咧?0當(dāng)量醋酸銨被需要，取決于反應(yīng)的進(jìn)行。關(guān)鍵是看所有時(shí)間內(nèi)在燒瓶中的固體。在冷卻至室溫之后，反應(yīng)混合物以醋酸乙酯(200毫升)稀釋。EtOAc溶液以飽和碳酸氫鈉水溶液(200毫升)洗滌兩次，并且在硫酸鈉上干燥、然后過(guò)濾，并且濾液在減壓下濃縮。殘余物被溶解于DCM(100毫升)中、被攪拌1小時(shí)，產(chǎn)生沉淀，并且固體5(4.0克)被過(guò)濾掉，并且在真空中干燥。母液以轉(zhuǎn)動(dòng)蒸發(fā)濃縮，殘余物在Bio-tage上純化，產(chǎn)生5(己烷∶EtOAc1∶1至EtOAc100％)。兩個(gè)產(chǎn)物被組合，并且在真空中干燥產(chǎn)生5(5.8克，58％)。實(shí)施例791-(4-(4-碘苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)乙基)(甲基)氨基甲酸(R)-芐酯2對(duì)在55毫升之DMF中的1-(4-(4-碘苯基)-1-甲基-1H-咪唑-2-基)乙基)氨基甲酸(R)-芐酯1(55克、11毫摩爾)的攪拌混合物，被冷卻到0℃，并且以NaH(1.33克、11毫摩爾，在油中的60％分散液)小部份地處理，以避免泡沫。當(dāng)來(lái)自最后部份的氣泡停止時(shí)，一次添加所有的MeI(2.1毫升，34毫摩爾)，并且混合物再攪拌30分鐘。溶液在真空中被移除，并且殘余物被溶解于200毫升EtOAc中。溶液以飽和NH4Cl水溶液(4×100毫升)及NaCl(4×100毫升)洗滌，并且然后過(guò)濾，且被濃縮至干。粗制殘余物經(jīng)由柱色譜分析、在硅膠(60∶40EtOAc/己烷)上純化，產(chǎn)生5.13克(97％)的2，其以LCMS鑒定特征。實(shí)施例80乙?；?54.毫升，0.75毫摩爾)在0-5℃下被逐滴添加到乙醇(316毫升)中草藥。當(dāng)添加完成時(shí)，冰浴被移除，并且溶液被容許攪拌，同時(shí)加溫到室溫再30分鐘。然后添加D-天門(mén)冬氨酸1(25克、0.188摩爾)。反應(yīng)混合物被回流2小時(shí)。然后反應(yīng)溶液在真空中濃縮，并且被置于高真空(0.5毫米Hg)下過(guò)夜?；衔?以白色固體獲得(42克，99％)，并且直接被用于下一步。(BOC)2O(4.7克、0.21摩爾)在10分鐘內(nèi)被分部份添加到化合物1(42克、0.19摩爾)、三乙基胺(51.9毫升、0.37摩爾)、二噁烷(140毫升)及水(56毫升)的0℃溶液中。再10分鐘之后，冰浴被移除，并且反應(yīng)混合物被攪拌，同時(shí)加溫到室溫再2小時(shí)。反應(yīng)混合物以EtOAc(150毫升)稀釋?zhuān)⑶乙?.5當(dāng)量濃度HCl(200毫升×3)洗滌。有機(jī)層在硫酸鎂上干燥、過(guò)濾并且濾液在真空中濃縮，產(chǎn)生化合物3(52克，產(chǎn)率97％)，其直接被用于下一步。NaBH4(54.4克、1.44摩爾)在30分鐘內(nèi)被分部份添加到化合物3(52克、86.4毫摩爾)及乙醇(600毫升)的0℃溶液中。反應(yīng)混合物是極度放熱，并且在添加還原劑期間非常小心。在添加完成之后，反應(yīng)混合物被加熱至回流1小時(shí)。溶液被冷卻到室溫，并且反應(yīng)混合物固化。固體被打破成淤漿，其然后被倒入鹽水(250毫升)中。所得混合物被過(guò)濾，并且濾液在真空中濃縮。所得殘余物與醚(200毫升×5)被劇烈攪拌。醚層被連續(xù)從殘余物傾析。經(jīng)組合之醚層萃取物在硫酸鎂上干燥、過(guò)濾，并且濾液在真空中濃縮，產(chǎn)生為白色固體之化合物4(25.2克，產(chǎn)率68％)。[注意當(dāng)以25克(化合物3)規(guī)模進(jìn)行時(shí)，產(chǎn)率為89％]。將叔丁基二苯基氯硅烷(31.9毫升，0.123摩爾)添加至化合物4(25.2克，0.123摩爾)、二異丙基乙基胺(42.8毫升，0.245摩爾)及二氯甲烷(500毫升)的溶液內(nèi)。反應(yīng)液在室溫下攪拌24小時(shí)。反應(yīng)液隨后用0.5NHCl(150毫升×3)和鹽水(150毫升)洗滌。有機(jī)層在硫酸鎂上干燥、過(guò)濾，并且濾液在真空中濃縮。所得殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，4∶1己烷∶EtOAc)，產(chǎn)生為化合物5(42克，產(chǎn)率77％)。[注意當(dāng)以15克(化合物4)規(guī)模進(jìn)行時(shí)，產(chǎn)率為85％]。碘(24克、94.7毫摩爾)在15分鐘內(nèi)被分部份添加到化合物5(28克、63.1毫摩爾)、Ph3P(24.8克、94.7毫摩爾)、咪唑(6.4克、94.7毫摩爾)、二乙醚(450毫升)及乙腈(150毫升)的0℃溶液中。冰浴被移除，并且反應(yīng)溶液被容許在30分鐘內(nèi)加溫到室溫。反應(yīng)以TLC(4∶1己烷∶EtOAc)分析判斷完全。反應(yīng)以水(400毫升)中止。層分離，并且水層以二乙醚(100毫升)萃取。經(jīng)合并的有機(jī)層以飽和水性Na2SO3溶液(100×2)及鹽水(100毫升)洗滌。有機(jī)層在硫酸鎂上干燥、過(guò)濾并且濾液在真空中濃縮。所得殘余物以快速柱色譜分析(硅膠，4∶1己烷∶EtOAc)，產(chǎn)生為化合物6(32克，92％)。實(shí)施例81在冰浴下，對(duì)在甲醇(200毫升)中之D-天門(mén)冬氨酸1(59克、0.376摩爾)吹入HCl氣體10分鐘。在反應(yīng)溶液在室溫下攪拌過(guò)夜，溶液被蒸發(fā)。所得殘余物在真空中干燥，具有為HCl鹽之產(chǎn)物2(0.376摩爾)。對(duì)2(0.376毫摩爾)、DIEA(196毫升、1.13摩爾)及THF(200毫升)的攪拌溶液，滴入氯甲酸芐酯(59毫升、0.414摩爾)溶液。在反應(yīng)溶液于室溫下攪拌1小時(shí)之后，溶液在轉(zhuǎn)動(dòng)蒸發(fā)器上濃縮。然后殘余物被溶解于NaHCO3(300毫升)中，并且以DCM(100毫升×3)萃取。經(jīng)組合之DCM層在硫酸鈉上干燥、過(guò)濾并且濾液在真空中濃縮，具有產(chǎn)物3(0.376摩爾)。對(duì)3(0.376毫摩爾)、THF(200毫升)及水(100毫升)的溶液，添加氫氧化鋰(31.6克、0.752摩爾)，并且攪拌2小時(shí)。反應(yīng)混合物經(jīng)由硅膠柱過(guò)濾(濾液的pH約7)并且濃縮。殘余物在真空中干燥，產(chǎn)生4(0.376摩爾)。在4(0.376毫摩爾)及醋酸酐(200毫升)攪拌1小時(shí)之后，殘余物在真空中干燥，產(chǎn)生5(0.376摩爾)。在冰浴下，對(duì)在5(0.376摩爾)及THF(1000毫升)在30分鐘期間添加硼氫化鈉(14.2克，0.376摩爾)，并攪拌3小時(shí)。然后HCl(4當(dāng)量濃度)被滴入反應(yīng)溶液，直到pH約2。溶液被濃縮到約剩四分之一，以水(300毫升)稀釋?zhuān)⑶乙砸颐?200毫升×3)萃取。經(jīng)組合之醚溶液在硫酸鈉上干燥、過(guò)濾并且濾液在真空中濃縮。所得殘余物被溶解于苯(300毫升)中，并且添加TsOH(500毫克)。然后反應(yīng)混合物在回流下被攪拌3小時(shí)。溶液被濃縮成約100毫升，并添加醚(200毫升)以形成泡沫沉淀。白色固體6(57.5克，來(lái)自1為65％)被過(guò)濾出、以一些醚洗滌并且在真空中干燥。對(duì)在6(30.0克，0.128毫摩爾)及甲醇(200毫升)溶液，添加三乙基胺(142毫升、1.02摩爾)并且攪拌過(guò)夜。反應(yīng)混合物被濃縮。殘余物在真空中干燥，產(chǎn)生7(LC-MS顯示約20％摩爾的6留下)，其被直接用于下一步。在冰浴下，對(duì)化合物7(0.128摩爾)、Ph3P(50.4克、0.192摩爾)、咪唑(13.1克、0.192摩爾)及DCM(300毫升)的溶液攪拌10分鐘。碘(48.7克、0.192摩爾)在15分鐘內(nèi)分部份添加。冰浴被移除，并且反應(yīng)溶液被容許在1小時(shí)內(nèi)加溫到室溫。固體被過(guò)濾出。濾液以飽和水性Na2SO3(200毫升×2)及鹽水(200毫升)洗滌。有機(jī)層在硫酸鎂上干燥、過(guò)濾并且濾液被濃縮。所得殘余物以快速硅膠柱色譜分析(己烷∶EtOAc4∶1至1∶1)，產(chǎn)生為白色固體之化合物8(27.5克，從6為59.2％)。對(duì)鋅粉(Strem，10.1克，0.154摩爾)及DMF(15毫升)的混合物，在氮?dú)庀屡艢?0分鐘，并且添加1，2-二溴乙烷(0.758毫升、8.80毫摩爾)?；旌衔镆约訜針尲訜帷?分鐘，冷卻下來(lái)5分鐘，并且再以加熱槍加熱，然后被冷卻到室溫。添加TMSCl(128微升、2.20毫摩爾)到混合物中。在混合物攪拌30分鐘之后，添加8(9.98克，26.5毫摩爾)。在1小時(shí)之后，LCMS顯示8的完全消耗。對(duì)上述反應(yīng)溶液添加芳基碘(7.50克，22.0毫摩爾)、Pd2(dba)3(50.4毫克，0.55毫摩爾)及三-鄰-甲苯基膦(670毫克，2.20毫摩爾)。反應(yīng)混合物被在50℃下維持1小時(shí)(以在LC-MS監(jiān)測(cè))。反應(yīng)混合物被直接負(fù)載于硅膠柱上，并且以己烷∶EtOAc(3∶1至1∶1)洗滌，產(chǎn)生化合物10(5.0克，49％)。實(shí)施例82對(duì)一個(gè)烘箱干燥之圓底燒瓶，添加鋅粉(1753毫克，27毫摩爾)，續(xù)以DMF(15毫升)。燒瓶被加蓋，并且以氮?dú)馀艢?0分鐘。對(duì)該溶液添加1，2-二溴乙烷(0.139毫升、1.6毫摩爾)。然后混合物使用加熱槍加熱約30秒，直到氣體開(kāi)始釋出，指出鋅的活化?；旌衔锉蝗菰S冷卻，同時(shí)在其再以加熱槍加熱、直到氣體釋出之前，攪拌1分鐘。然后混合物被容許冷卻到室溫，續(xù)以添加TMSCl(0.042毫升、0.33毫摩爾)，并且攪拌30分鐘。然后試劑A被溶解于DMF中、以氮?dú)獯等搿⑻砑愉\溶液，并且在室溫下攪拌1小時(shí)。溴4(1.381克，4.5毫摩爾)被溶解于DMF中，氮?dú)獯等氩⑶易⑷肴芤褐?，續(xù)以添加Pd2(dba)3(102毫克，0.11毫摩爾)及三-鄰-甲苯基膦(136毫克，0.44毫摩爾)。溶液混合物被氮?dú)獯等?，并且維持在氮?dú)庀?，同時(shí)在室溫下攪拌1小時(shí)。在1小時(shí)之后，經(jīng)攪拌溶液被加熱到40℃2小時(shí)，直到以TLC及LC/MS為完全。溶液以鹽水中止反應(yīng)，并且使用EtOAc萃取五次。經(jīng)組合有機(jī)層在硫酸鈉上干燥并且濃縮。粗制產(chǎn)物5經(jīng)由柱色譜分析使用EtOAc∶Hex1∶1純化，獲得2.0克(70％產(chǎn)率)的純產(chǎn)物5。實(shí)施例83對(duì)在THF(5毫升)中之化合物6(940毫克，1.78毫摩爾)溶液，添加在1，4-二噁烷中之4當(dāng)量濃度HCl(20毫升、80亳摩爾)。所得混合物在室溫下被攪拌1小時(shí)。溶液被蒸發(fā)，并且所余化合物7(726毫克，1.78毫摩爾，全量產(chǎn)率)整個(gè)在高真空下干燥?；衔?使用LCMS(LRMS(MH)373m/z)為鑒定特征，并且被用于下一步而無(wú)進(jìn)一步純化。對(duì)在DMF(5毫升)中之化合物7(662毫克，1.62毫摩爾)溶液，添加DIEA(930微升、5.34毫摩爾)及化合物8(678毫克，1.78毫摩爾)。所得溶液在室溫下被攪拌1小時(shí)。DMF被蒸發(fā)，并且粗制殘余物被直接使用制備性HPLC純化，提供化合物9(425毫克，0.77毫摩爾，48％產(chǎn)率)，其以1HNMR及LCMS(LRMS(MH)569m/z)。化合物9(100毫克，0.176毫摩爾)與HATU(134毫克，0.352毫摩爾)、HOAT(48毫克，0.352毫摩爾)及NH4Cl(50毫克，0.944毫摩爾)組合。固體被溶解于N-甲基四氫咯酮(5毫升)，并且添加DIEA(93微升、0.528毫摩爾)。所得混合物在室溫下被攪拌2小時(shí)，并且然后直接使用制備性HPLC純化，提供為玻璃狀固體之化合物10(16毫克，0.028毫摩爾，16％產(chǎn)率)，其以1HNMR及LCMS(LRMS(MH)568m/z)?；衔?(91毫克，0.160毫摩爾)與HBTU(121毫克，0.320毫摩爾)及HOBt(43毫克，0.320毫摩爾)組合。固體被溶解于DMF(3毫升)，并且添加二甲基胺(400微升、0.800毫摩爾，在THF中2摩爾濃度)及DIEA(93微升、0.528毫摩爾)。所得溶液在室溫下被攪拌2小時(shí)。粗制產(chǎn)物直接使用制備性HPLC純化，提供為玻璃狀固體之化合物11(25毫克，0.042毫摩爾，26％產(chǎn)率)，其以1HNMR及LCMS(LRMS(MH)596m/z)。實(shí)施例84對(duì)在THF(250毫升)中之1(100毫克，117毫摩爾)及DIEA(11.4毫升、175毫摩爾)的0℃溶液，添加氯甲酸甲酯(21.2毫升、163毫摩爾)。所得混合物在室溫下被攪拌3小時(shí)。反應(yīng)以氣態(tài)氨排氣1小時(shí)，并且然后在室溫下被攪拌16小時(shí)。其以水(200毫升)、醋酸乙酯(200毫升)稀釋?zhuān)⑶疫^(guò)濾。白色、經(jīng)過(guò)濾固體為所要產(chǎn)物。額外的產(chǎn)物以轉(zhuǎn)移雙相濾液到分離漏斗并且分離層而獲得。水相以額外的醋酸乙酯(3×150毫升)萃取。有機(jī)層被組合、干燥(Na2SO4)并且濃縮成白色固體，其從醋酸乙酯中再結(jié)晶，提供所要產(chǎn)物。純產(chǎn)物2(20.6克，60毫摩爾)以1H-NMR及LC/MS(LRMS(MH)m/z343.1)進(jìn)行表征。酰胺2(18.1克，53毫摩爾)被懸浮于1，4-二噁烷(200毫升)及啶(10.7毫升、132毫摩爾)。添加三氟醋酸酐(22毫升、158毫摩爾)，并且白色經(jīng)懸浮固體立刻溶解。均相溶液在室溫下被攪拌30分鐘。溶劑在減壓下被移除，并且所余殘余物被溶解于醋酸乙酯(200毫升)中，并且以1摩爾濃度KHSO4(2×100毫升)及飽和水性NaHCO3(2×100毫升)洗滌。有機(jī)層在Na2SO4上被干燥并且在真空中被濃縮。所余的所要產(chǎn)物3(14.9克，46毫摩爾)被測(cè)定夠純而用于下一個(gè)轉(zhuǎn)化(LC/MS(LRMS(MH)m/z198.0))。腈3(14.9克，46毫摩爾)被溶解于1，4-二噁烷(100毫升)，并且添加三丁基(1-乙氧基乙烯基)錫(23.3毫升、69毫摩爾)、續(xù)以PdCl2(PPh3)2(1.6克，5摩爾％)。所得混合物被加熱到90℃，并且攪拌4小時(shí)。其被冷卻到室溫，并且溶劑在減壓下被移除。所余殘余物直接使用制備于使用95％己烷/三乙基胺之淤漿中的硅膠純化。洗脫是逐步的，以95％己烷/三乙基胺開(kāi)始，并且改變成50％醋酸乙酯/己烷/5％三乙基胺。所要產(chǎn)物4以后者流動(dòng)相洗脫，并且為粘稠黃色油狀物，以LC/MS(LRMS(MH)m/z371.1)進(jìn)行表征。產(chǎn)物被立刻用于下一個(gè)轉(zhuǎn)化。對(duì)乙烯基醚4在THF(60毫升)及水(20毫升)中的溶液，添加N-溴琥珀酰亞胺(12.3克、69毫摩爾)。所得混合物在50℃下攪拌30分鐘。其被冷卻至室溫，并且以2摩爾濃度Na2CO3稀釋?；旌衔镆源姿嵋阴?2×150毫升)萃取，有機(jī)萃取物經(jīng)組合，在Na2SO4上干燥并且濃縮成無(wú)結(jié)晶性固體，其以硅膠(二氯甲烷/醋酸乙酯)純化。為黃色固體之所要產(chǎn)物5(10.6克、29毫摩爾)以1H-NMR及LC/MS(LRMS(MH)m/z239.9進(jìn)行表征)。實(shí)施例85在1，4-二噁烷(50毫升)中之酮5(10.6克，29毫摩爾)的溶液，在0℃、45分鐘內(nèi)被滴入甲基胺(72毫升、144毫摩爾，在THF中2摩爾濃度)。所得混濁溶液被在室溫下攪拌15分鐘。THF及甲基胺在減壓下蒸發(fā)，并且小心地不蒸發(fā)1，4-二噁烷。對(duì)所得混合物在減壓下添加三乙基胺(12毫升、87毫摩爾)、續(xù)以三甲基乙酰基氯(15毫升、144毫摩爾)。所得懸浮液在室溫下攪拌30分鐘。其以水(125毫升)稀釋?zhuān)⑶乙訣tOAc(3×100毫升)萃取。有機(jī)相被組合、在Na2SO4上干燥并且在真空中濃縮。所得粗制產(chǎn)物6以LC/MS(LRMS(MH)m/z402.1進(jìn)行表征，并且往下進(jìn)行而無(wú)進(jìn)一步純化。酰胺6(11.6克，29毫摩爾)與醋酸銨(55克，723毫摩爾)及甲酰胺(150毫升)組合。所得混合物被加熱到100℃，并且攪拌3小時(shí)。其被冷卻到室溫，以醋酸乙酯(500毫升)稀釋?zhuān)⑶乙运?3×200毫升)洗滌。有機(jī)層在Na2SO4上干燥并且在減壓下濃縮。所余殘余物使用硅膠(二乙醚/己烷)純化，提供為泡沫黃色固體之純7(6.1克，16毫摩爾)，以1H-NMR及LC/MS(LRMS(MH)m/z383.2進(jìn)行表征。咪唑7(1.316克，3.4毫摩爾)與鹽酸羥胺(478毫克，6.9毫摩爾)組合，并且溶解于在甲醇(14毫升、69毫摩爾，0.5摩爾濃度)中之甲氧基鈉溶液。所得溶液在50℃下攪拌4小時(shí)。其在減壓下濃縮，并且直接使用硅膠(5％甲醇/二氯甲烷)純化，提供為泡沫白色固體之所要酰胺肟8(913毫克，2.2摩爾)，以LC/MS(LRMS(MH)m/z416.1進(jìn)行表征。對(duì)在甲醇(10毫升)中之酰胺肟8(652毫克，1.6毫摩爾)溶液，添加Raney鎳(50毫克)及醋酸(20微升)。混合物在每平方時(shí)60磅H2下攪拌3小時(shí)，并且然后經(jīng)過(guò)一床Celite過(guò)濾。在減壓下濃縮提供為白色固體之純脒9(638毫克，1.6毫摩爾)，使用LC/MS(LRMS(MH)m/z400.2進(jìn)行表征)。氯乙醛(360毫升、5.7毫摩爾)被添加到在DMF(4毫升)中之脒9(283毫克，0.71毫摩爾)及K2CO3(195毫克，1.4毫摩爾)溶液中?；旌衔锉患訜岬?0℃，并且攪拌4小時(shí)。反應(yīng)被過(guò)濾，并且直接反相HPLC、使用乙腈及水組成之流動(dòng)相梯度純化。純的產(chǎn)物10(25毫克，0.06亳摩爾)*為玻璃狀固體，以1H-NMR及LC/MS(LRMS(MH)m/z424.1)進(jìn)行表征。對(duì)在原乙酸三甲酯(5毫升)中之酰胺8(148毫克，0.35毫摩爾)溶液，添加冰醋酸(100微升)。所得溶液在50℃下攪拌16小時(shí)。溶劑在減壓下蒸發(fā)，并且殘余物直接經(jīng)硅膠(5％甲醇/二氯甲烷)純化，提供為玻璃狀固體之所要產(chǎn)物9，以LC/MS(LRMS(MH)m/z440.1進(jìn)行表征。實(shí)施例86對(duì)在THF(3毫升)中之1(200毫克，0.5毫摩爾)溶液，在室溫下添加Bu3P(150微升、0.6毫摩爾)及2-硝基苯基硒代氰酸鹽(136毫克，0.6毫摩爾)。反應(yīng)混合物被攪拌14小時(shí)?；旌衔镌贓tOAc(200毫升)及H2O(50毫升)中分布。有機(jī)層并且以鹽水洗滌、在Na2SO4上被干燥并且被濃縮。所得殘余物被使用而無(wú)進(jìn)一步純化。LRMS(M+H+)m/z587.1。對(duì)在DCM(5毫升)中之2(～0.5毫摩爾)溶液，添加水性KH2PO-4(2摩爾濃度、1毫升)及MCPBA(77％，135毫克，0.6毫摩爾)。反應(yīng)混合物被攪拌6小時(shí)。反應(yīng)混合物以Na2S2O4(10毫升)中止反應(yīng)。有機(jī)層以飽和水性NaHCO3、H2O及鹽水洗滌，在Na2SO4上干燥并且濃縮。殘余物在RP-HPLC上、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生3(150毫克，從1為65％)。LRMS(M+H+)m/z384.2。對(duì)在DCM(8毫升)中之3(150毫克，0.39毫摩爾)溶液，添加TFA(1毫升)。反應(yīng)混合物被攪拌4小時(shí)?；旌衔锉粷饪s，并且在高真空下干燥。對(duì)在THF(4毫升)中之所得殘余物(90毫克，0.32毫摩爾)添加DIEA(165微升、0.95摩爾)及4(140毫克，0.38毫摩爾)。所得混合物被攪拌14小時(shí)。反應(yīng)混合物被濃縮。殘余物在RP-HPLC上、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生5(120毫克，65％)。LRMS(M+H+)m/z471.2。對(duì)在THF/H2O(2毫升/2毫升)中之5(120毫克，0.19毫摩爾)溶液，添加OsO-4(4.8毫克，0.019毫摩爾)、NMO(117毫克，0.95毫摩爾)及啶(1.5微升、0.019摩爾)。所得混合物被攪拌6小時(shí)。添加HaHSO3(300毫克)。反應(yīng)混合物被濃縮。所得固體以EtOAc(100毫升×3)洗滌。濾液被濃縮。所得殘余物以制備性TLC板(硅膠，5∶1EtOAc/MeOH)純化，產(chǎn)生非對(duì)映異構(gòu)體6a(23毫克，24％)及6b(2毫克，2％)。LRMS(M+H+)m/z505.2。實(shí)施例87對(duì)在胺1(150毫克，0.309毫摩爾)、DCM(2毫升)及DIEA(53.8微升、0.309毫摩爾)溶液，添加乙?；?53.8微升、0.309毫摩爾)。所得溶液在室溫下攪拌10分鐘。溶劑被蒸發(fā)，并且所余殘余物在反相制備性HPLC(乙腈/水)上純化，提供2(42.7毫克，26.8％)。MS(MW+1)527.2。實(shí)施例88對(duì)在胺1(150毫克，0.309毫摩爾)、DCM(2毫升)及DIEA(53.8微升、0.309毫摩爾)溶液，添加異氰酸三甲基甲硅烷基酯(35.6微升、0.309毫摩爾)。所得溶液在室溫下攪拌過(guò)夜。溶劑被蒸發(fā)，并且所余殘余物在反相制備性HPLC(乙腈/水)上純化，提供3(30.3毫克，18.6％)。MS(MW+1)528.2。實(shí)施例89對(duì)在胺1(150毫克，0.309毫摩爾)、DCM(2毫升)及DIEA(53.8微升、0.309毫摩爾)溶液，添加甲烷磺酰基氯(24微升、0.309毫摩爾)。所得溶液在室溫下攪拌30分鐘。溶劑被蒸發(fā)，并且所余殘余物在反相制備性HPLC(乙腈/水)上純化，提供4(18.4毫克，10.6％)。MS(MW+1)563.1。實(shí)施例90對(duì)在胺1(150毫克，0.309毫摩爾)、DCM(2毫升)及DIEA(53.8微升、0.309毫摩爾)溶液，添加氯甲酸甲酯(24微升、0.309毫摩爾)。所得溶液在室溫下攪拌30分鐘。溶劑被蒸發(fā)，并且所余殘余物在反相制備性HPLC(乙腈/水)上純化，提供5(CK1828648)(25.7毫克，15.3％)。MS(MW+1)543.1。實(shí)施例91(S)-3-氯-N-(4-羥基-(1-(4-(2-(1-甲氧基亞氨基)乙基)-1-甲基-1H-咪唑-4-基)苯基)丁-2-基)-4-異丙氧基苯甲酰胺2在2毫升啶中之80毫克(0.031毫摩爾)(S)-N-(1-(4-羥基(2-乙?；?1-甲基-1H-咪唑-4-基)苯基)-4-羥基丁-2-基)-3-氯-4-異丙氧基苯甲酰胺，以27.6毫克(0.033毫摩爾)之羥基胺甲基醚鹽酸鹽處理。反應(yīng)被攪拌過(guò)夜，之后溶劑被蒸發(fā)，并且殘余物經(jīng)由反相HPLC(乙腈/水)純化。獲得11.2毫克(70％產(chǎn)率)的2，并且以LC/MS及HNMR鑒定特征。實(shí)施例92(S)-3-氯-N-(4-羥基-1-(4-(2-(1-羥基亞氨基)乙基)-1-甲基-1H-咪唑-4-基)苯基)丁-2-基)-4-異丙氧基苯甲酰胺3在2毫升吡啶中之100毫克(0.21毫摩爾)(S)-N-(1-(4-(2-乙酰基-1-甲基-1H-咪唑-4-基)苯基)-4-羥基丁-2-基)-3-氯-4-異丙氧基苯甲酰胺，以71.8毫克(1.0毫摩爾)之鹽酸羥胺處理。反應(yīng)被攪拌過(guò)夜，之后溶劑被蒸發(fā)，并且殘余物經(jīng)由反相HPLC(乙腈/水)純化。獲得69.7毫克(67％產(chǎn)率)的3，并且以LC/MS及HNMR鑒定特征。實(shí)施例93(S)-3-氯-N-(4-羥基-1-(4-(1-甲基-2-(2-甲基-1，3-間二氧雜環(huán)戊烷-2-基)-1H-咪唑-4-基)苯基)丁-2-基)-4-異丙氧基苯甲酰胺4在2毫升苯中之150毫克(0.31毫摩爾)(S)-N-(1-(4-(2-乙酰基-1-甲基-1H-咪唑-4-基)苯基)-4-羥基丁-2-基)-3-氯-4-異丙氧基苯甲酰胺，以34.6微升(0.62毫摩爾)之乙烷-1，2-二醇及59毫克(0.31毫摩爾)之對(duì)-甲苯磺酸單水合物處理。反應(yīng)在70℃下攪拌2小時(shí)，之后溶劑被蒸發(fā)，并且殘余物經(jīng)由反相HPLC(乙腈/水)純化。獲得25.5毫克(16％產(chǎn)率)的4，并且以LC/MS及HNMR鑒定特征。實(shí)施例94對(duì)在乙醇(5.0毫升)中之1(1.5克，2.29毫摩爾)溶液，添加NaOH(1.0摩爾濃度，3.7毫升、2.80毫摩爾)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。在反應(yīng)完成之后，其被濃縮，產(chǎn)生2(1.49克)，其被用于下一步而無(wú)進(jìn)一步純化。對(duì)在DMF(20毫升)中之2(1.49克、2.29毫摩爾)、HBTU(1.3克、3.44毫摩爾)、HOBt(530毫克，3.44毫摩爾)及N，O-二甲基羥基胺HCl鹽(340毫克、3.44毫摩爾)溶液，添加DIEA(785微升、4.58毫摩爾)。所得混合物在室溫下被攪拌2小時(shí)。反應(yīng)混合物被濃縮。所得殘余物使用硅膠(己烷/EtOAc＝1∶3)純化，產(chǎn)生為灰白色泡沫狀固體的純化合物3(1.20克，78％)。對(duì)在無(wú)水THF(20毫升)中之3(1.20克、1.79毫摩爾)的0℃溶液，添加溴化甲基鎂(Et2O中3摩爾濃度，2.38毫升)。反應(yīng)混合物在0℃下被攪拌1小時(shí)。反應(yīng)混合物以飽和NH4Cl(5毫升)及水(20毫升)中止反應(yīng)。添加EtOAc(50毫升)，并且層分離。水相以額外的EtOAc(50毫升×2)萃取。有機(jī)層被組合、干燥(Na2SO4)并且濃縮成粗制油狀物，其使用硅膠(50％EtOAc/己烷)純化。所要化合物(0.82克，73％)為粘稠油狀物，其在高真空下干燥期間變成泡沫狀固體。對(duì)在甲醇(10毫升)中之4(0.82克，1.31毫摩爾)溶液，添加HCl(在1，4-二噁烷中之4摩爾濃度，20毫升)。反應(yīng)在室溫下被攪拌過(guò)夜?；旌衔锉粷饪s，并且高真空下干燥，產(chǎn)生5，其被用于后續(xù)步驟而無(wú)進(jìn)一步純化。對(duì)在DMF(5毫升)中之5(350毫克、1.09毫摩爾)溶液，添加DIEA(280微升、1.63毫摩爾)及酯H(472毫克、1.09毫摩爾)。所得溶液在室溫下攪拌1小時(shí)。粗制溶液被過(guò)濾，并且然后以反相色譜分析(使用乙腈及水混合物)純化，提供為泡沫狀固體之CK1904250(400毫克，68％)。LRMS(M+H+)m/z538.1。酯D(10.2克，24.5毫摩爾)被溶解于EtOH(150毫升)及水(50毫升)中。添加氫氧化甲(4.1克，73.5毫摩爾)，并且反應(yīng)在室溫下攪拌過(guò)夜。反應(yīng)混合物被冷卻到0℃，并且以濃HCl中和。極小心地不容許pH在中和期間變成＜7。溶劑在真空中蒸發(fā)，且殘余物在高真空下干燥。酸E(9.5克，24.5毫摩爾)被用于下一步而無(wú)進(jìn)一步純化。酸E(9.5克，24.5毫摩爾)與HBTU(1.85克，48.7毫摩爾)、HOBt(6.6克，48.7毫摩爾)及N，O-二甲基羥基胺HCl鹽(4.8克，48.7毫摩爾)組合。所得混合物在室溫下被攪拌4小時(shí)。大部份的DMF被蒸發(fā)，并且所余殘余物以醋酸乙酯(300毫升)及水(300毫升)稀釋。層分離，并且水相以EtOAc(1×200毫升)萃取。有機(jī)層經(jīng)組合、以碳酸氫鈉水溶液(2×250毫升)洗滌、在Na2SO4上干燥。在減壓下濃縮，提供為灰白色泡沫狀固體的粗制酰胺E(6.73克，17.4毫摩爾)。對(duì)在無(wú)水THF(250毫升)中之酰胺E(6.73克，17.4毫摩爾)溶液，以冰浴冷卻成0℃。添加溴化甲基鎂(在二乙醚中3摩爾濃度，52.2毫升，156.6毫摩爾)，并且反應(yīng)在0℃下攪拌15分鐘。反應(yīng)被小心地以飽和氯化銨溶液(20毫升)及水(100毫升)中止反應(yīng)，并且層分離。水相以額外EtOAc(2×200毫升)萃取。有機(jī)層經(jīng)組合、干燥(Na2SO4)并且濃縮成粗制油狀物，其使用硅膠(50％EtOAc/己烷)純化。所要酮F(4.45克，11.5毫摩爾)為粘稠油狀物，其在高真空下干燥時(shí)變成白色泡沫狀固體。酮F(4.45克，11.5毫摩爾)被溶解于THF(25毫升)及在1，4-二噁烷中之4摩爾濃度HCl(75毫升)里。反應(yīng)在室溫下被攪拌1.5小時(shí)。溶劑在真空中蒸發(fā)，并且殘余物整體在高真空下干燥，提供胺G。胺G被用于后續(xù)步驟而無(wú)進(jìn)一步純化。對(duì)在DMF(50毫升)中之胺G(3.30克，11.5毫摩爾)的0℃溶液，添加DIEA(8.0毫升、46.0毫摩爾)及酯H(5.25克、13.8毫摩爾)。所得溶液在室溫下被攪拌1小時(shí)。大部份的DMF被蒸發(fā)，并且所余殘余物以EtOAc(250毫升)及水(200毫升)稀釋。層分離，并且有機(jī)相以額外的水(2×150毫升)及鹽水(2×150毫升)洗滌。有機(jī)相被干燥(Na2SO4)并且濃縮。所余粗制粘稠油狀物使用硅膠(100％己烷)純化，提出為泡沫狀固體的CK1317644(2.98克、6.2毫摩爾)。實(shí)施例95對(duì)在二氯甲烷(400毫升)中之硫代草酸乙酯(10.0克，75毫摩爾)的溶液，在0℃下緩慢添加四氟硼酸三甲基鋨(13.1克，89毫摩爾)。在10分鐘之后，冰浴被移除，并且反應(yīng)混合物被攪拌過(guò)夜。溶劑被移除，產(chǎn)生為白色固體的18.0克產(chǎn)物2，其被使用而無(wú)進(jìn)一步純化。在二噁烷(70毫升)中之2-氨基4’-溴苯乙酮鹽酸鹽(10.0克，40毫摩爾)、醋酸鈉(16.4克，200毫摩爾)、醋酸(11.5毫升，200毫摩爾)及化合物2(19.2克，80毫摩爾)混合物，在65℃攪拌，直到TLC顯示無(wú)化合物2殘留(約2小時(shí))。反應(yīng)混合物被小心以飽和NaHCO3溶液中和，并且以醋酸乙酯萃取。有機(jī)溶液在Na2SO4上干燥并且濃縮。以快速柱色譜分析(EtOAc∶Hexs1∶1)純化，產(chǎn)生為白色固體的產(chǎn)物3(9.11克，79％)。對(duì)在DMF(15毫升)中之化合物3(3.174克，10.8毫摩爾)溶液，添加K2CO-3(4.478克，32.4摩爾)及(2-溴乙氧基)-叔丁基二甲基甲硅烷(2.780毫升，13.0毫摩爾)。所得混合物在55℃下攪拌過(guò)夜。溶液被濃縮、以水稀釋并且以EtOAc(3×50毫升)萃取。有機(jī)層經(jīng)組合，并且在Na2SO4上干燥。溶劑被移除，產(chǎn)生粘稠油狀物(4.805克，10.6摩爾，98.4％)，其被用于后續(xù)步驟而無(wú)進(jìn)一步純化。對(duì)在無(wú)水THF(25毫升)中之化合物4(2.174克、4.8毫摩爾)的溶液，在0℃、氮?dú)庀轮鸬翁砑愉寤谆V(4.8毫升，在二乙醚中3摩爾濃度，14.4毫摩爾)。反應(yīng)在0℃下被攪拌15分鐘。反應(yīng)小心地以飽和氯化銨(5毫升)及水(30毫升)中止反應(yīng)，并且以EtOAc(3×50毫升)萃取。有機(jī)層被組合、在Na2SO4上干燥并且濃縮成粗制油狀物。以快速柱色譜分析(15％EtOAc/己烷)，產(chǎn)生為白色無(wú)結(jié)晶性固體的所要產(chǎn)物5(1.371克，65％)。對(duì)在THF(5毫升)中之化合物5(1.371克，3.1毫摩爾)溶液，添加35毫升HCl(在1，4-二噁烷中之4摩爾濃度)。所得溶液在室溫下被攪拌過(guò)夜。溶劑被移除，產(chǎn)生為白色固體之6(1.0克，99％)。在甲苯(60毫升)中之化合物6(0.5克，1.54毫摩爾)及1毫升TFA的混合物被回流過(guò)夜。固體6不溶解，直到近甲苯的沸點(diǎn)。溶劑被移除。殘余物以EtOAc稀釋?zhuān)訬aHCO3水溶液洗滌、在Na2SO4上被干燥并且濃縮。以快速柱色譜分析(EtOAc∶己烷1∶1)，產(chǎn)生為白色固體的產(chǎn)物7(0.348克，74％)。對(duì)在無(wú)水且脫氣的DMF(15毫升)中之鋅粉(255毫克，3.9摩爾)的懸浮液，在氮?dú)庀绿砑?，2-溴甲烷(0.020毫升、0.23毫摩爾)?；旌衔锸褂眉訜針尲訜峒s30秒，直到氣體開(kāi)始從溶液釋出，指出鋅的活化。然后混合物被容許冷卻到室溫，續(xù)以添加TMSCl(6微升、0.05毫摩爾)，并且容許在室溫下攪拌30分鐘。然后在脫氣DMF中之碘化合物溶液A被添加到鋅溶液，并且反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。然后在脫氣DMF中之化合物7(200毫克，0.65毫摩爾)經(jīng)由針筒被添加，續(xù)以添加Pd2(dba)3(14.9毫克，0.016毫摩爾)及三-鄰-甲苯基膦(19.8毫克，0.065毫摩爾)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)，然后在40℃下2小時(shí)。反應(yīng)被完全顯示在TLC上。反應(yīng)以鹽水中止反應(yīng)，并且使用EtOAc萃取(5×50毫升)。經(jīng)組合有機(jī)層在硫酸鈉上干燥并且濃縮。以快速柱色譜分析(EtOAc∶Hex1∶1)純化，產(chǎn)生無(wú)色油狀物的產(chǎn)物8(373毫克，88％產(chǎn)率)。對(duì)在甲醇(10毫升)中之化合物8(373毫克，0.57毫摩爾)溶液，添加2毫升HCl(在1，4-二噁烷中之4摩爾濃度)。溶液被容許在室溫下被攪拌2小時(shí)。溶劑被移除，產(chǎn)生粗制產(chǎn)物9(180毫克，99％)，其被使用而無(wú)進(jìn)一步純化。對(duì)在DMF(10毫升)中之化合物9(180毫克，0.57毫摩爾)及含三乙基胺(0.24毫升、1.71毫摩爾)之酯試劑B(260毫克，0.68毫摩爾)混合物，在室溫下被攪拌過(guò)夜。反應(yīng)溶液以鹽水稀釋?zhuān)⑶乙訣tOAc萃取(3×50毫升)。經(jīng)組合有機(jī)層在硫酸鈉上干燥并且濃縮。HPLC(C18柱)產(chǎn)生白色固體的的產(chǎn)物10(141毫克，50％產(chǎn)率)。對(duì)在DMF(15毫升)中之NaH(0.39克、9.3毫摩爾)的懸浮液，在氮?dú)狻?℃下添加在DMF(10毫升)中之3(1.9克、6.5毫摩爾)溶液。反應(yīng)被攪拌1.5小時(shí)，并且添加(2-溴乙氧基)-叔丁基二甲基硅烷(2.09毫升，9.7毫摩爾)。反應(yīng)混合物被攪拌過(guò)夜、以EtOAc稀釋、以氯化銨水溶液中止反應(yīng)，并且以EtOAc(3×50毫升)萃取。有機(jī)層被組合、在Na2SO4上干燥。以Biotage(EtOAc)，純化，產(chǎn)生為淺黃色固體的產(chǎn)物4(1.2克，41％)。對(duì)在脫氣DMF(15毫升)中之鋅粉(1.2克，18.4毫摩爾)的懸浮液，在氮?dú)庀绿砑?，2-溴甲烷(0.13毫升、1.5毫摩爾)?；旌衔锸褂眉訜針尲訜峒s30秒，直到氣體開(kāi)始從溶液釋出，指出鋅的活化。然后混合物被容許冷卻到室溫，續(xù)以添加TMSCl(100微升)，并且容許在室溫下攪拌30分鐘。然后在脫氣DMF中之碘化合物溶液A(1.71克，3.1毫摩爾)被添加到鋅溶液，并且反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。然后在脫氣IDMF中之化合物4(1.0克，2.2毫摩爾)經(jīng)由針筒被添加，續(xù)以添加Pd2(dba)3(0.14克，0.015毫摩爾)及三-鄰-甲苯基膦(1.8克，0.06毫摩爾)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌一小時(shí)，然后在60℃下過(guò)夜。反應(yīng)以鹽水中止反應(yīng)，并且以EtOAc萃取(5×50毫升)。經(jīng)組合有機(jī)層在硫酸鈉上干燥并且濃縮。以快速柱色譜分析(EtOAc∶Hex1∶1)純化，產(chǎn)生無(wú)色油狀物的產(chǎn)物5(346毫克，20％)。對(duì)在甲醇(10毫升)中之化合物7(346毫克)溶液，添加2毫升HCl(在1，4-二噁烷中之4摩爾濃度)。溶液被容許在室溫下被攪拌2小時(shí)。溶劑被移除，產(chǎn)生粗制產(chǎn)物7，其被使用于下一步而無(wú)進(jìn)一步純化。對(duì)在DMF(10毫升)中之化合物7及含三乙基胺(0.15毫升、1.08毫摩爾)之酯試劑B(200毫克，0.52毫摩爾)混合物，在室溫下被攪拌過(guò)夜。反應(yīng)溶液以鹽水稀釋?zhuān)⑶乙訣tOAc萃取(3×50毫升)。經(jīng)組合有機(jī)層在硫酸鈉上干燥并且濃縮。HPLC(C18柱)產(chǎn)生白色固體的的產(chǎn)物8(0.2克，87％)及白色固體的的內(nèi)酯產(chǎn)物9(15.4毫克，7.3％)。LC-MS(CI)m/z389.1(MH+)。實(shí)施例96對(duì)在二氯甲烷(400毫升)中之硫代草酸乙酯(10.0克，75毫摩爾)的溶液，在0℃下緩慢添加四氟硼酸三甲基鋨(13.1克，89毫摩爾)。在10分鐘之后，冰浴被移除，并且反應(yīng)混合物被攪拌過(guò)夜。溶劑被移除，產(chǎn)生為白色固體的18.0克產(chǎn)物2，其被使用而無(wú)進(jìn)一步純化。在二噁烷(70毫升)中之2-氨基-4’-溴苯乙酮鹽酸鹽(10.0克，40毫摩爾)、醋酸鈉(16.4克，200毫摩爾)、醋酸(11.5毫升，200毫摩爾)及化合物2(19.2克，80毫摩爾)混合物，在65℃攪拌，直到TLC顯示無(wú)化合物2殘留(約2小時(shí))。反應(yīng)混合物被小心以飽和NaHCO3溶液中和，以醋酸乙酯萃取。有機(jī)溶液在Na2SO4上干燥并且濃縮。以快速柱色譜分析(EtOAc∶Hex1∶1)純化，產(chǎn)生為白色固體的產(chǎn)物3(9.11克，79％)。對(duì)在DMF(15毫升)中之化合物3(5.307克，18毫摩爾)溶液，添加K2CO3(3.73克，27毫摩爾)及碘乙烷(3.5毫升，43.2毫摩爾)。所得混合物在60℃下攪拌三小時(shí)?；旌衔镆运♂?zhuān)⒁訣tOAc萃取(3×50毫升)。有機(jī)層被組合、在Na2SO4上干燥并且濃縮。以快速柱色譜分析(己烷/EtOAc50∶50)純化，產(chǎn)生白色固體的產(chǎn)物4(3.2克，55％)。對(duì)在干燥經(jīng)脫氣DMF(10毫升)中之鋅粉(3.90，49.6毫摩爾)的懸浮液，在氮?dú)庀绿砑?，2-溴甲烷(308微升、3.58毫摩爾)?；旌衔锸褂眉訜針尲訜峒s30秒，直到氣體開(kāi)始從溶液釋出，指出鋅的活化。然后混合物被容許冷卻到室溫，續(xù)以添加TMSCl(92微升、0.735毫摩爾)，并且容許在室溫下攪拌30分鐘。然后在脫氣DMF中之碘化合物溶液A(6.6克，11.9毫摩爾)被添加到鋅溶液，并且反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。然后在脫氣DMF中之化合物4(3.2克，9.93毫摩爾)經(jīng)由針筒被添加，續(xù)以添加Pd2(dba)3(223毫克，0.244毫摩爾)及三-鄰-甲苯基膦(302毫克，0.0992毫摩爾)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌一小時(shí)，然后在60℃下2小時(shí)。反應(yīng)如TLC上顯示為完全。溶液以鹽水中止反應(yīng)，并且以EtOAc萃取(3×80毫升)。經(jīng)組合有機(jī)層在硫酸鈉上干燥并且濃縮。以快速柱色譜分析(EtOAc∶Hex1∶1)純化，產(chǎn)生無(wú)色油狀物的產(chǎn)物5(5.43毫克，82％)。在THF(50毫升)中之化合物5(5.43克、8.1毫摩爾)溶液，在0℃、氮?dú)庀轮鸬翁砑釉诿阎兄甅eMgBr(9.0毫升、27毫摩爾)。反應(yīng)經(jīng)由TLC在10分鐘內(nèi)完成。溶液以氯化銨水溶液中止反應(yīng)，同時(shí)在冰中以EtOAc(3×60毫升)萃取。經(jīng)合并的有機(jī)層在硫酸鈉上干燥并且濃縮。以柱色譜分析(己烷/EtOAc1∶1)純化，產(chǎn)生無(wú)色油狀物的產(chǎn)物6(4.86克，91％)。對(duì)在MeOH(10.0毫升)中之化合物6(4.86克，7.4毫摩爾)及18毫升HCl(在1，4-二噁烷中之4摩爾濃度)在室溫下被攪拌1小時(shí)、續(xù)以在60℃下30分鐘。反應(yīng)經(jīng)由TLC及LC/MS為完成。溶劑被移除，產(chǎn)生產(chǎn)物7，其被使用而無(wú)進(jìn)一步純化。對(duì)在DMF(40毫升)中之酸B(677毫克、2.51毫摩爾)、HBTU(3.6克、9.49毫摩爾)、HOBT(1.45克，9.46毫摩爾)及DIEA(2.20毫升、12.6毫摩爾)的混合物，在室溫下被攪拌1分鐘，續(xù)以添加7(1.0克、3.14毫摩爾)。反應(yīng)經(jīng)由TLC及LC/MS在一小時(shí)內(nèi)完成。有機(jī)層在硫酸鈉上干燥并且濃縮下來(lái)。以HPLC純化，產(chǎn)生白色固體的產(chǎn)物8(390毫克)。對(duì)在DMF(15毫升)中之化合物3(2.66克，7.27毫摩爾)溶液，添加K2CO3(2.00克，15毫摩爾)及碘乙烷(1.61毫升，14.5毫摩爾)。所得混合物在60℃下攪拌三小時(shí)。混合物以水稀釋?zhuān)⒁訣tOAc萃取(3×50毫升)。有機(jī)層被組合、在Na2SO4上干燥并且濃縮。以柱色譜分析(己烷/EtOAc50∶50)純化，產(chǎn)生產(chǎn)物4(3.02克，91％)。對(duì)在MeOH(20毫升)中之化合物4(3.02克，6.7毫摩爾)的溶液，添加在1，4-二噁烷(7.0毫升)中之HCl(4摩爾濃度)，在60℃下被攪拌一小時(shí)?；旌衔锉粷饪s，并且無(wú)純化被進(jìn)行。所余油狀物被溶解于DMF(15毫升)、添加K2CO-3(2.0克，14.7毫摩爾)在60℃攪拌過(guò)夜。混合物以水(5×150毫升)稀釋?zhuān)⑶乙訣tOAc(3×50毫升)萃取。有機(jī)層被組合、在Na2SO4上干燥并且濃縮。以柱色譜分析(己烷/EtOAc50∶50)純化，產(chǎn)生產(chǎn)物5(1.80克，88％)。對(duì)在DMF(15毫升)中之化合物3(5.00克，17毫摩爾)溶液，添加K2CO3(3.51克，26毫摩爾)及Boc-2-氨基乙基溴(4.56克，20.35毫摩爾)。所得混合物在60℃下攪拌三小時(shí)?；旌衔镆运♂?zhuān)⒁訣tOAc萃取(3×50毫升)。有機(jī)層被組合、在Na2SO4上干燥并且濃縮。以柱色譜分析(己烷/EtOAc50∶50)純化，產(chǎn)生白色固體的產(chǎn)物4(4.08克，55％)。實(shí)施例97在MeOH/H2O(60毫升/20毫升)中之1(10.7克，34.6毫摩爾)的溶液，添加NaOH(2當(dāng)量濃度、20.8毫升、41.6毫摩爾)。反應(yīng)在50℃下攪拌2小時(shí)。然后溶液在高真空下被濃縮，產(chǎn)生為10.3克的淺黃色固體(LRMS(M-H+)m/z278.9)，其被使用而無(wú)進(jìn)一步純化。對(duì)在DMF(50毫升)中之粗制混合物溶液被連續(xù)添加N，O-二甲基鹽酸羥胺(4.0克，40.7毫摩爾)、HBTU(4.0克、40.7毫摩爾)、HOBt(6.2克，40.7毫摩爾)及DIEA(6.0毫升、47.0毫摩爾)。混合物在室溫下攪拌過(guò)夜。然后溶液在EtOAc及H2O中分布。有機(jī)層以NaOH(1當(dāng)量濃度)、鹽水洗滌，在Na2SO4上干燥、過(guò)濾并且濃縮。所得殘余物以快速柱色譜分析，使用己烷及EtOAc，產(chǎn)生2(8克，72％)。LRMS(M+H+)m/z324.0。在THF(40毫升)中之2(3.7克、11.4毫摩爾)溶液，在0℃下逐滴添加在Et2O中之MeMgBr(3摩爾濃度，11.4毫升、34.2毫摩爾)?；旌衔镌?℃下被攪拌30分鐘。溶液在0℃下以飽和NH4Cl中止反應(yīng)，并在EtOAc及H2O中分布。有機(jī)層以鹽水洗滌、在Na2SO4上干燥、過(guò)濾并且濃縮，無(wú)進(jìn)一步純化而產(chǎn)生3(3.0克，94％)。LRMS(M+H+)m/z279.0。對(duì)在THF/MeOH(10毫升/10毫升)中之3(3.0克，10.8毫摩爾)溶液，緩慢添加NaBH4(407毫克，10.8毫摩爾)?；旌衔锉粩嚢?0分鐘，以飽和NH4Cl中止反應(yīng)，并且被分布于EtOAc及H2O之間。有機(jī)層以飽和NaHCO3、鹽水洗滌、在Na2SO4上干燥并且濃縮，產(chǎn)生4(3.0克，99％)，其被使用而無(wú)進(jìn)一步純化。LRMS(M+H+)m/z281.0。對(duì)在DMF(20毫升)中之4(3.0克、10.7毫摩爾)的溶液，添加TBDMSCl(1.6克、10.7毫摩爾)及DMAP(271毫克、21.3毫摩爾)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢柽^(guò)夜。溶液被分布于EtOAc及H2O之間。有機(jī)層以飽和NaHCO3、H2O、鹽水洗滌、在Na2SO4上干燥、過(guò)濾并且濃縮。殘余物以快速柱色譜分析純化，使用己烷及EtOAc的混合物，產(chǎn)生產(chǎn)物5(3.5克，83％)。LRMS(M+H+)m/z395.1。對(duì)在DMF(20毫升)中之Zn(4.8克，74.4毫摩爾)的懸浮液，添加BrCH2CH2Br(320微升、3.7毫摩爾)?；旌衔锸褂眉訜針尲訜?分鐘。溶液被冷卻下來(lái)，添加三甲基硅烷(95微升、0.74毫摩爾)。在3分鐘之后，添加BOC-β-碘-Ala-OMe(5.2克，16.0毫摩爾)，并且反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。然后對(duì)此混合物添加Pd2(dba)3(243毫克，0.27毫摩爾)、(O-Tol)3P(269毫克，0.88毫摩爾)及5(3.5克，8.9毫摩爾)?；旌衔镌?0℃下攪拌2小時(shí)、冷卻下來(lái)并且經(jīng)過(guò)Celite過(guò)濾。溶液被分布于EtOAc及H2O之間。有機(jī)層以鹽水洗滌、在Na2SO4上干燥并且濃縮。殘余物以柱色譜分析、使用己烷及EtOAc的混合物純化，產(chǎn)生6(3.3克，72％)。LRMS(M+H+)m/z518.2。對(duì)在THF(20毫升)中之6(3.3克，6.4毫摩爾)的溶液，在0℃下緩慢添加LAH(1.0摩爾濃度，6.4毫升，6.4毫摩爾)?；旌衔镌?℃下攪拌20分鐘，以H2O(240微升)、NaOH(3當(dāng)量濃度、240微升)、H2O(720微升)中止反應(yīng)、過(guò)濾。有機(jī)層在Na2SO4上干燥、過(guò)濾并且濃縮。殘余物以快速柱色譜分析純化，使用己烷及EtOAc的混合物，產(chǎn)生產(chǎn)物7(1.57克，50％)。LRMS(M+H+)m/z490.2。對(duì)在THF(20毫升)中之7(1.57克、3.2毫摩爾)溶液，添加PPh3(1.0克、3.9毫摩爾)、DIAD(746微升、3.9毫摩爾)及鄰苯二甲硫亞胺(567毫克，3.9毫摩爾)。溶液在室溫℃下攪拌4小時(shí)之后，其以反相LCMS監(jiān)測(cè)，反應(yīng)被分布于EtOAc及H2O之間。有機(jī)層以鹽水洗滌、在Na2SO4上干燥并且濃縮。殘余物以柱色譜分析、使用己烷及EtOAc的混合物純化，產(chǎn)生8(2.0克，99％)。LRMS(M+H+)m/z619.2。對(duì)在MeOH(15毫升)中之7(2克，3.2毫摩爾)溶液，添加NH2-NH2(1.01毫升，32.3毫摩爾)。在反應(yīng)在室溫下被攪拌約4小時(shí)之后，溶液被沉淀、過(guò)濾并且以CH2Cl2、MeOH洗滌。有機(jī)層被濃縮，產(chǎn)生8(2.5克)，其被使用而無(wú)進(jìn)一步純化。LRMS(M+H+)m/z489.2。對(duì)在CH2Cl2/CH3CN(15毫升/15毫升)中之8(1.5克，3.1毫摩爾)溶液，添加DIEA(588微升、3.4毫摩爾)及氯乙酰基氯(269微升、3.4毫摩爾)。反應(yīng)在室溫下攪拌10分鐘之后，添加氮雜環(huán)丁烷(2毫升、30.7毫摩爾)及DIEA(2.7毫升、15.3毫摩爾)。反應(yīng)混合物被攪拌過(guò)夜。溶液被濃縮，并且稀釋于EtOAc及H2O之間。有機(jī)層以鹽水洗滌、在Na2SO4上干燥并且濃縮。殘余物以柱色譜分析、使用己烷及EtOAc的混合物純化，產(chǎn)生9(900毫克，51％)。LRMS(M+H+)m/z586.3。對(duì)在MeOH(1毫升)中之9(900毫克，1.3毫摩爾)溶液，添加在二噁烷中之HCl(4當(dāng)量濃度，2毫升)及在H2O中之HCl(2當(dāng)量濃度，1毫升)。反應(yīng)在室溫下被攪拌過(guò)夜、濃縮，產(chǎn)生白色固體并且導(dǎo)向下一個(gè)偶合步驟。對(duì)在DMF(10毫升)中之粗制化合物(655毫克、1.53毫摩爾)及DIEA(800微升、4.59毫摩爾)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?小時(shí)，并且被分布于EtOAc及H2O之間。有機(jī)層以鹽水洗滌、在Na2SO4上干燥并且濃縮。殘余物以反相HPLC純化，產(chǎn)生10(600毫克，64％)。LRMS(M+H+)m/z622.2。對(duì)在DCM(10毫升)中之10(160毫克、0.24毫摩爾)溶液，添加MnO2(416毫克、4.8毫摩爾)。該懸浮液被攪拌14小時(shí)。反應(yīng)混合物被過(guò)濾，并且濾液被濃縮，并且以反相HPLC、使用乙腈及H2O混合物純化，產(chǎn)生11(90毫克，60％)。LRMS(M+H+)m/z620.1。實(shí)施例98下列化合物使用上述的步驟制備實(shí)施例99用有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白抑制劑處理的腫瘤細(xì)胞系的細(xì)胞存活率的抑制原料和溶液·細(xì)胞SKOV3，卵巢癌(人)·培養(yǎng)基無(wú)酚紅RPMI+5％胎牛血清+2mML-谷氨酰胺·用于測(cè)定細(xì)胞存活率的比色劑PromegaMTS四唑鎓化合物·用于最大細(xì)胞殺傷的對(duì)照化合物Topotecan，1μM方法第1天-細(xì)胞鋪板用10mL的PBS洗滌粘附的SKOV3細(xì)胞，然后加入2mL0.25％胰蛋白酶，并在37℃下溫育5分鐘。用8mL培養(yǎng)基(無(wú)酚紅RPMI+5％FBS)從燒瓶中沖洗細(xì)胞，然后轉(zhuǎn)移至新的燒瓶中。用Coulter計(jì)數(shù)器測(cè)定細(xì)胞濃度，并計(jì)算獲得1000個(gè)細(xì)胞/100μL的合適細(xì)胞體積。將100μL培養(yǎng)基細(xì)胞懸浮液(調(diào)節(jié)至1000細(xì)胞/100μL)加入96孔平板的所有孔中，然后在37℃、100％濕度、以及5％CO2下溫育18-24小時(shí)，使細(xì)胞粘附在平板上。方法第2天-化合物加入向一排孔至經(jīng)過(guò)高壓滅菌的測(cè)定儲(chǔ)備液中以400×最大目標(biāo)濃度的量加入最初2.5μL的測(cè)試化合物。將1.25μL400×(400μM)Topotecan加入其它孔中(用這些孔的光密度減去死亡細(xì)胞和載體的背景吸光度)。將不含DMSO的500μL培養(yǎng)基加入含有測(cè)試化合物的孔中，并將250μL加入Topotecan孔中。將250μL培養(yǎng)基+0.5％DMSO加入其余的孔中，對(duì)孔中的測(cè)試化合物進(jìn)行系列稀釋。將來(lái)自測(cè)定儲(chǔ)備液的含化合物的培養(yǎng)基成行平板復(fù)制(平行兩份)至對(duì)應(yīng)的細(xì)胞平板。將細(xì)胞平板于37℃、100％濕度和5％CO2下溫育72小時(shí)。方法第4天-MTS加入和OD讀數(shù)從培養(yǎng)箱中取出平板，并在每個(gè)孔中加入40μL的MTS/PMS。平板在37℃、100％濕度、5％CO2的條件下下溫育120分鐘，然后在5秒的振蕩循環(huán)之后于96孔分光光度計(jì)中讀取490nm處的OD值。數(shù)據(jù)分析計(jì)算對(duì)照的歸一化的％(吸光度-背景)，并用XLfit作出劑量-應(yīng)答曲線，由該曲線測(cè)定抑制存活率50％時(shí)所需的化合物的濃度。在通過(guò)上述方法測(cè)試時(shí)，本發(fā)明的化合物表現(xiàn)出活性。實(shí)施例100有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白抑制劑的用途人腫瘤細(xì)胞Skov-3(卵巢)被板置于96孔板中，密度為每孔4,000個(gè)細(xì)胞，容許粘附24小時(shí)，并且以各種濃度的測(cè)試化合物處理24小時(shí)。細(xì)胞被固定于4％甲醛中，并且以微管蛋白抑制劑(antitubulin)抗體(后續(xù)使用熒光標(biāo)記的次要抗體識(shí)別)及Hoechst染料染色(其染色DNA)?？梢?jiàn)檢驗(yàn)顯示化合物導(dǎo)致細(xì)胞循環(huán)停止。實(shí)施例101在用有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白抑制劑處理的腫瘤細(xì)胞系中抑制細(xì)胞增殖以1000-2500個(gè)細(xì)胞/孔的密度將細(xì)胞放入96孔板的孔中，然后使它們粕附/生長(zhǎng)24小時(shí)。然后用多種濃度的藥物對(duì)它們處理48小時(shí)。添加化合物時(shí)的時(shí)間作為T(mén)0。使用試劑3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑鎓(MTS)的基于四唑鎓的測(cè)定(專(zhuān)利號(hào)5,185,450)(參見(jiàn)Promega產(chǎn)品目錄#G3580，CellTiter96AQueousOneSolutionCellProliferationAssay)，被用于測(cè)定T0時(shí)的細(xì)胞存活數(shù)量以及接觸化合物48小時(shí)后存活細(xì)胞的數(shù)量。48小時(shí)后存活的細(xì)胞數(shù)量與添加藥物時(shí)的存活細(xì)胞數(shù)量相比較，以計(jì)算生長(zhǎng)抑制作用。在僅用載體(0.25％DMSO)處理的對(duì)照孔中細(xì)胞在48小時(shí)后的生長(zhǎng)被認(rèn)為是100％的生長(zhǎng)，而添加化合物的孔中的細(xì)胞生長(zhǎng)與其進(jìn)行比較。有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白抑制劑抑制人卵巢腫瘤細(xì)胞系(SKOV-3)中的細(xì)胞增殖。GI50是通過(guò)化合物的濃度(μM)對(duì)處理孔中細(xì)胞生長(zhǎng)的百分比作圖而計(jì)算的。對(duì)于化合物計(jì)算的GI50是與對(duì)照組相比50％抑制生長(zhǎng)時(shí)的估計(jì)濃度，即、以下等式表示的時(shí)間的濃度100×[(處理48-T0)/(對(duì)照48-T0)]＝50其中處理48是48小時(shí)時(shí)處理細(xì)胞的值，而對(duì)照48是48小時(shí)時(shí)對(duì)照細(xì)胞的值。所有的化合物濃度測(cè)試雙份，而對(duì)照是12個(gè)孔的平均值。NationalCancerInstitute使用了非常類(lèi)似的96孔板方案和GI50計(jì)算方法(參見(jiàn)Monks等人，J.Natl.CancerInst.83757-766(1991))。但是，NationalCancerInstitute用于定量細(xì)胞數(shù)目的方法不是使用MTS，而是使用另外的方法。實(shí)施例102IC50的計(jì)算本發(fā)明化合物對(duì)KSP活性的IC50值是使用ATP酶實(shí)驗(yàn)來(lái)測(cè)定的。使用以下的溶液溶液1由3mM的磷烯酸醇丙酮酸鉀鹽(SigmaP-7127)、2mM的ATP(SigmaA-3377)、1mM的IDTT(SigmaD-9779)、5μM的紫杉醇(SigmaT-7402)、10ppm的消泡289(SigmaA-8436)、25mM的Pipes/KOHpH6.8(SigmaP6757)、2mM的氯化鎂(VWRJT400301)、以及1mM的EGTA(SigmaE3889)組成。溶液2由1mM的NADH(SigmaN8129)、0.2mg/ml的BSA(SigmaA7906)、丙酮酸激酶7U/ml、L-乳酸脫氫酶10U/ml(SigmaP0294)、100nM的KSP運(yùn)動(dòng)域、50μg/ml的微管、1mM的DTT(SigmaD9779)、5μM的紫杉醇(SigmaT-7402)、10ppm的消泡289(SigmaA-8436)、25mM的Pipes/KOHpH6.8(SigmaP6757)、2mM的氯化鎂(VWRJT4003-01)、以及1mM的EGTA(SigmaE3889)組成。使用溶液1在96孔板(CorningCostar3695)上制備化合物的系列稀釋液(8-12個(gè)2倍稀釋液)。在系列稀釋后，每個(gè)孔有50μl的溶液1。在每個(gè)孔中添加50μl的溶液2，由此使反應(yīng)開(kāi)始。這可通過(guò)手工使用多通道移液管或者用自動(dòng)液體處理裝置來(lái)實(shí)現(xiàn)。微量滴定板轉(zhuǎn)移至微板吸光度讀數(shù)器中，并以動(dòng)態(tài)讀取每個(gè)孔在340nm處的多個(gè)吸光度讀數(shù)。所觀察到的變化速率與ATP酶成正比，并繪制其隨化合物濃度變化的圖。對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)IC50測(cè)定，所需要的數(shù)據(jù)是通過(guò)以下4個(gè)參數(shù)的等式使用非線性擬合程序(如Grafit4)進(jìn)行擬合其中y是觀察到的速率，而x是化合物濃度。此類(lèi)化學(xué)品被發(fā)現(xiàn)抑制細(xì)胞增殖，雖然GI50值有變化。被測(cè)試之化學(xué)品的GI50值范圍是從200nM到大于測(cè)試最高濃度。由此，我們意為雖然大部份的抑制有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白活性的化學(xué)品生化上的確抑制細(xì)胞增殖，但是在測(cè)試的最高濃度(一般約20μM)下，對(duì)一些細(xì)胞生長(zhǎng)抑制低于50％。許多化學(xué)品具有GI50值低于10μM，并且?guī)讉€(gè)具有GI50值低于1μM。具有成功運(yùn)用于臨床來(lái)治療癌癥(癌癥化學(xué)治療)的抗增殖化合物，具有GI50變化很大。例如在A549細(xì)胞中，紫杉醇的GI50是4nM，多柔比星是63nM，5-氟尿嘧啶為1Mm，而羥基脲為500μM(資料由NationalCancerInstitute，DevelopmentTherapeuticProgram，http://dtp.nci.nih.gov/)提供。因此實(shí)際任何濃度的抑制細(xì)胞增殖的化合物可為有用的。權(quán)利要求1.至少一種選自式I化合物的化學(xué)品及其藥物學(xué)可接受的鹽類(lèi)、溶劑化物、螯合物、非共價(jià)復(fù)合物、前藥及混合物其中R1為任選取代的芳基、任選取代的雜環(huán)基或任選取代的雜芳基；X為-CO或-SO2-；R2為氫或任選取代的低級(jí)烷基；W為-CR4-、-CH2CR4-或N；R3為-CO-R7-、氫、任選取代的烷基、任選取代的雜環(huán)基、氰基、任選取代的磺?；?、或任選取代的芳基；R4為氫或任選取代的烷基；R5為氫、羥基、任選取代的氨基、任選取代的雜環(huán)基、或任選取代的低級(jí)烷基；R6為氫、任選取代的烷基、任選取代的烷氧基、任選取代的芳氧基、任選取代的雜芳基氧基、任選取代的烷氧基羰基、任選取代的氨基羰基、任選取代的芳基、任選取代的雜芳基、任選取代的雜環(huán)基、或任選取代的烷芳基；及R7為任選取代的低級(jí)烷基、任選取代的芳基、羥基、任選取代的氨基、任選取代的芳烷氧基、或任選取代的烷氧基；其限制條件為，若W為N，則R5不是羥基或任選取代的氨基，并且R6不是任選取代的烷氧基、任選取代的芳烷氧基、任選取代的雜芳烷氧基、或任選取代的氨基。2.如權(quán)利要求1的至少一種化學(xué)品，其中R1為任選取代的芳基。3.如權(quán)利要求2的至少一種化學(xué)品，其中R1為任選取代的苯基。4.如權(quán)利要求3的至少一種化學(xué)品，其中R1是被一、二或三個(gè)獨(dú)立選自以下組中的取代基取代的苯基選經(jīng)取代雜環(huán)基、任選經(jīng)取代的烷基、磺酰基、鹵素、任選經(jīng)取代的氨基、任選經(jīng)取代的硫烷基、任選經(jīng)取代的烷氧基、任選經(jīng)取代的芳氧基、任選經(jīng)取代的雜芳氧基、酰基、羥基、硝基、氰基、任選經(jīng)取代的芳基及任選取代的雜芳基。5.如權(quán)利要求4的至少一種化學(xué)品，其中R1是3-鹵素-4-異丙氧基-苯基或3-氰基-4-異丙氧基-苯基。6.如權(quán)利要求1至4之一的至少一種化學(xué)品，其中X是-CO-。7.如權(quán)利要求1的至少一種化學(xué)品，其中式I化合物是選自式II化合物其中R11為任選取代的雜環(huán)基、任選取代的低級(jí)烷基、硝基、氰基、氫、磺?；螓u素；R12為氫、鹵素、任選取代的烷基、任選取代的氨基、任選取代的硫烷基、任選取代的烷氧基、任選取代的芳氧基、任選取代的雜環(huán)基或任選取代的雜芳基氧基；及R13為氫、酰基、任選取代的烷基-、任選取代的烷氧基、鹵素、羥基、硝基、氰基、任選取代的氨基、烷基磺酰基-、烷基磺酰氨基-、羧基烷基-、氨基羰基-、任選取代的芳基或任選取代的雜芳基-。8.如權(quán)利要求1至7之一的至少一種化學(xué)品，其中W是-CR4-。9.如權(quán)利要求1至8之一的至少一種化學(xué)品，其中R4是氫。10.如權(quán)利要求1至9之一的至少一種化學(xué)品，其中R5是氫、羥基、或任選取代的低級(jí)烷基。11.如權(quán)利要求10的至少一種化學(xué)品，其中R5是氫。12.如權(quán)利要求7的至少一種化學(xué)品，其中式II化合物是選自式III化合物13.如權(quán)利要求1或12之一的至少一種化學(xué)品，其中R3是-CO-R7-、氫、任選取代的低級(jí)烷基、氰基、任選取代的磺?；⒒蛉芜x取代的芳基、或任選取代的雜環(huán)基。14.如權(quán)利要求13的至少一種化學(xué)品，其中其為任選取代的低級(jí)烷基。15.如權(quán)利要求14的至少一種化學(xué)品，其中R3是任選被羥基或其磷酸酯取代的低級(jí)烷基，任選被低級(jí)烷氧基取代的低級(jí)烷基，任選被任選取代的氨基團(tuán)取代的低級(jí)烷基，或任選被CO-R7取代的低級(jí)烷基，其中R7為羥基或任選取代的氨基。16.如權(quán)利要求15的至少一種化學(xué)品，其中R3是任選被羥基或其磷酸酯取代的低級(jí)烷基，或任選被任選取代的氨基團(tuán)取代的低級(jí)烷基。17.如權(quán)利要求12的至少一種化學(xué)品，其中式III化合物是選自式IV化合物18.如權(quán)利要求1至17之一的至少一種化學(xué)品，其中R6為任選取代的芳基、任選取代的雜芳基、任選取代的雜環(huán)基、或任選取代的烷基。19.如權(quán)利要求18的至少一種化學(xué)品，其中R6為被一或兩個(gè)下列取代基取代的苯基任選取代的雜芳基、任選取代的氨基、芳烷氧基、鹵素、羥甲基-、羥基、氰基、烷氧基、苯基、苯氧基、亞甲基二氧基、亞乙二氧基、磺酰基、氨基羰基、羧基、烷氧基羰基、硝基、雜芳烷氧基、芳烷氧基及任選取代的雜環(huán)基。20.如權(quán)利要求12的至少一種化學(xué)品，其中式III化合物是選自式V化合物其中R14為任選取代的雜芳基；及R15是選自氫、鹵素、羥基及低級(jí)烷基。21.如權(quán)利要求20的至少一種化學(xué)品，其中R14選自7，8-二氫-咪唑并[1，2-c][1，3]噁嗪-2-基、3a，7a-二氫-1H-苯并咪唑-2-基、咪唑并[2，1-b]噁唑-6-基、噁唑-4-基、5，6，7，8-四氫-咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基、1H-[1，2，4]-三唑-3-基、2，3-二氫-咪唑-4-基、1H-咪唑-2-基、咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基、噻唑-2-基、噻唑-4-基、吡唑-3-基、及1H-咪唑-4-基，其各任選被一、二或三個(gè)選自任選取代的低級(jí)烷基、鹵素、?；?、磺?；?、氰基、硝基、任選取代的氨基、及任選取代的雜芳基取代。22.如權(quán)利要求21的至少一種化學(xué)品，其中R14是選自1H-咪唑-2-基、咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基及1H-咪唑-4-基，其各任選被一或二個(gè)選自任選取代的低級(jí)烷基、鹵素及?；〈?。23.如權(quán)利要求20至22之一的至少一種化學(xué)品，其中R15是氫。24.如權(quán)利要求12的至少一種化學(xué)品，其中式II化合物是選自式VI化合物25.如權(quán)利要求12的至少一種化學(xué)品，其中式II化合物是選自式VII化合物其中R9是選自任選取代的烷氧基、任選取代的環(huán)烷氧基、任選取代的芳基烷氧基、任選取代的氨基及任選取代的低級(jí)烷基。26.如權(quán)利要求25的至少一種化學(xué)品，其中R9是經(jīng)羥基或任選取代的氨基取代的低級(jí)烷基。27.如權(quán)利要求26的至少一種化學(xué)品，其中R9是被羥基、氨基、N-甲基氨基、或N，N-二甲基氨基取代的低級(jí)烷基。28.如權(quán)利要求7至27之一的至少一種化學(xué)品，其中R11為氫、氰基、硝基或鹵素。29.如權(quán)利要求28的至少一種化學(xué)品，其中R11為氯或氰基。30.如權(quán)利要求7至29之一的至少一種化學(xué)品，其中R12為任選取代的低級(jí)烷氧基、任選取代的低級(jí)烷基、或任選取代的氨基-。31.如權(quán)利要求30的至少一種化學(xué)品，其中R12為低級(jí)烷氧基、或2，2，2-三氟-1-甲基-乙氧基。32.如權(quán)利要求31的至少一種化學(xué)品，其中R12為丙氧基、或2，2，2-三氟-1-甲基-乙氧基。33.如權(quán)利要求7至32之一的至少一種化學(xué)品，其中R13為氫。34.如權(quán)利要求1至33之一的至少一種化學(xué)品，其中R2為氫。35.選自表1、2、3、4、5或6中所述的化合物所請(qǐng)求保護(hù)的至少一種化學(xué)品及其藥物學(xué)可接受的鹽類(lèi)、溶劑化物、螯合物、非共價(jià)復(fù)合物、前藥及混合物。36.如權(quán)利要求35的至少一種化學(xué)品，其是選自表1、2、3、4、5或6中所述化合物的磷酸酯。37.一種組合物，其包含藥物賦形劑及如權(quán)利要求1至36之一的至少一種化學(xué)品。38.如權(quán)利要求37的組合物，其中該組合物進(jìn)一步包含非式I化合物的化學(xué)治療劑。39.如權(quán)利要求38的組合物，其中該組合物進(jìn)一步包含紫杉醇類(lèi)、長(zhǎng)春花屬生物堿或拓樸異構(gòu)酶I抑制劑。40.一種調(diào)節(jié)CENP-E驅(qū)動(dòng)蛋白活性的方法，其包括將該驅(qū)動(dòng)蛋白與有效量的如權(quán)利要求1至36之一的至少一種化學(xué)品接觸。41.一種抑制CENP-E的方法，其包括將該驅(qū)動(dòng)蛋白與有效量的如權(quán)利要求1至36之一的至少一種化學(xué)品接觸。42.一種治療細(xì)胞增殖性疾病的方法，其包括向有此需要的個(gè)體給藥如權(quán)利要求1至36之一的至少一種化學(xué)品。43.一種治療細(xì)胞增殖性疾病的方法，其包括向有此需要的個(gè)體給藥如權(quán)利要求37至39之一的組合物。44.如權(quán)利要求42或43的方法，其中該疾病選自以下組中癌癥、增生、再狹窄、心肥大、免疫疾病和炎癥。45.如權(quán)利要求1至36之一的至少一種化學(xué)品在制備用于治療細(xì)胞增殖性疾病的藥物中的應(yīng)用。46.如權(quán)利要求45的至少一種化學(xué)品的應(yīng)用，其是制備用于治療與CEMP-E驅(qū)動(dòng)蛋白活性相關(guān)的疾病的藥物。全文摘要本發(fā)明公開(kāi)用于通過(guò)調(diào)節(jié)一種或多種有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白的活性來(lái)治療細(xì)胞增殖性疾病及失調(diào)的化合物。文檔編號(hào)A61K31/165GK101023057SQ200580021899公開(kāi)日2007年8月22日申請(qǐng)日期2005年5月6日優(yōu)先權(quán)日2004年5月6日發(fā)明者錢(qián)向平,安德魯·I.·麥克唐納,周漢杰,盧克·W.·阿什克拉夫特,姚冰,姜紅霞,黃國(guó)珍,王建潮,小戴維·J.·摩根斯,布拉德利·P.·摩根,古斯塔夫·貝格內(nèi)斯,達(dá)什揚(yáng)特·德哈納克,史蒂文·D.·奈特,尼古拉斯·D.·亞當(dāng)斯,辛西婭·A.·帕理什,凱文·達(dá)菲,杜克·菲奇,羅莎娜·泰代斯科申請(qǐng)人:賽特凱恩蒂克公司,史克比徹姆公司