專利名稱：皺紋改善劑、脂肪分解促進(jìn)劑、皮膚外用組合物及飲食物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明關(guān)于改善隨著老化，尤其在露出部位所發(fā)生的皺紋的效果優(yōu)異、具有保持皮膚于皮膚科學(xué)上及美容上健康狀態(tài)的效果的皺紋改善劑，及配合該皺紋改善劑的皮膚外用組合物。
本發(fā)明也關(guān)于由促進(jìn)全身或局部的脂肪組織減少，而改善肥胖體質(zhì)，或由防止該組織的增大，而有效地抑制或防止肥胖的皮膚外用組合物及飲食品組合物。
背景技術(shù)：
以人為始的所有的生物臟器是誕生成長后，隨著年齡增加而逐漸衰退，而終至功能停止，功能停止部分到一定程度以上時(shí)就死亡。該功能逐漸衰退的狀態(tài)，稱為老化。皮膚是受周圍環(huán)境直接影響，雖具有維持生物體內(nèi)部環(huán)境的重要功能，因此不至于功能完全停止，但為容易顯現(xiàn)皺紋、黑斑、暗沈、松弛等的老化現(xiàn)象的臟器，在曝露于日光下的露出部位上這些特別明顯。
皮膚在老化時(shí)，對于氧化等刺激的防御能力變?nèi)酰鋵⒊蔀槠つw內(nèi)部環(huán)境紊亂的原因，使老化更加速進(jìn)行。尤其，因?yàn)槁冻霾课唤?jīng)常曝露于由紫外線照射等而引起的強(qiáng)氧化環(huán)境中，老化進(jìn)行得顯著。將這樣得皮膚的變化稱為光老化，這樣得皮膚因占據(jù)真皮大部分構(gòu)成成分的膠原蛋白減少，而于皮膚表面發(fā)生皺紋變深且大等，因此不美觀。
作為對光老化進(jìn)行結(jié)果所產(chǎn)生的皺紋具有改善效果的物質(zhì)，美國雖使用維生素A酸(retinoic acid)作為處方箋藥，但副作用強(qiáng)，安全性也有問題，所以至今仍未為日本所承認(rèn)。另外，雖作為改善皺紋的物質(zhì)提出了被認(rèn)為發(fā)揮吸收于體內(nèi)后轉(zhuǎn)換成維生素A酸的效果的視黃醇(維生素A)、或具有抗氧化及促進(jìn)膠原蛋白合成效果的抗壞血酸(維生素C)、抗氧化效果強(qiáng)的生育酚(維生素E)等作為皺紋改善物質(zhì)，但這些有不能得到充分滿足的效果的缺點(diǎn)。因此，至今仍無顯示充分的效果而且也具有安全性的改善皺紋的物質(zhì)。
另外，傳統(tǒng)的皺紋改善劑，大多為化學(xué)合成物，就安全性方面也有許多問題。另一方面，關(guān)于不易發(fā)生安全性問題的天然物質(zhì)，除了維生素類以外，幾乎未為人知，而且未得到充分地發(fā)揮效果者。另外，視黃醇等的天然皺紋改善劑多為明顯地欠缺光安定性，即使具有效果，也幾乎都是于制劑中迅速地分解等，而難以配合于制劑的物質(zhì)。
另一方面，體內(nèi)脂肪是攝取能量對于消耗能量的過剩部分作為脂肪堆積于存在內(nèi)臟周圍或皮下的白色脂肪組織中而形成的。體內(nèi)脂肪堆積過剩的所謂的肥胖，不僅影響外觀，也引起動(dòng)脈硬化等的各種疾病，于健康上也不適宜。最近，因過度飲食、運(yùn)動(dòng)不足、壓力等而肥胖的人增加，減少體內(nèi)脂肪或防止堆積成為重要的問題。尤其女性具有強(qiáng)烈地渴望苗條的身材的趨向。
作為防止肥胖作用的物質(zhì)，已知辣椒等所含的辣椒素類與血液中的白蛋白鍵結(jié)，增進(jìn)使來自副腎的能量代謝得以促進(jìn)的激素的分泌，活化肝臟或脂肪細(xì)胞中的脂肪分解(參考非專利文獻(xiàn)1)。然而，因?yàn)槔苯匪仡惥哂袕?qiáng)烈刺激，所以有其用途或使用量受到限制的問題。
本發(fā)明者等發(fā)現(xiàn)覆盆子酮(raspberry ketone)或姜酮及其衍生物促進(jìn)堆積于脂肪組織的脂肪的分解，有效地抑制肥胖或改善肥胖體質(zhì)(參考專利文獻(xiàn)1)。然而，因?yàn)楦才枳油蚪哂刑赜械姆枷?，就配合量或廣效性方面，并不能滿足。
另一方面，姜科植物的非洲豆蔻(Aframomum melegueta)是自然生長于以西非為中心的熱帶地方，已知“melegueta”或“天堂籽(Grains ofparadise)”等的名稱，作為香辛料使用。非洲豆蔻雖然作為添加料理風(fēng)味或香料使用，但未曾研究過關(guān)于使用其萃取物的皺紋改善劑或皮膚外用組合物報(bào)告指出豆蔻液(Parador)[1-(4’-羥基-3’-甲氧基苯基)-3-癸酮]是上述非洲豆蔻種子萃取物的特定分離部分中所含的成分，其化學(xué)式為
(參考專利文獻(xiàn)2)。專利文獻(xiàn)2中，雖提出豆蔻液與其它類似化合物共同作為白蟻防除劑，但未記載有關(guān)皺紋改善效果、脂肪分解促進(jìn)效果或瘦身效果等，至今也未研究它們的效果。
至今有關(guān)姜萃取物中的姜酮、姜烯酚，提出以這些作為有效成分的角層修復(fù)促進(jìn)劑(參考專利文獻(xiàn)3)。然而，本發(fā)明中的豆蔻液是如上所述，為特定的姜科植物所含的成分，一般的姜幾乎不含有，所以未提出作為一般姜的有效成分。
于上述情況，要求開發(fā)一種因老化尤其在露出部位明顯存在的皺紋的改善效果優(yōu)異，美容上保持健康皮膚的效果也優(yōu)異，安全性或安定性也優(yōu)異的皺紋改善劑及皮膚外用組合物。另外，要求開發(fā)一種具有有效的脂肪分解促進(jìn)效果，而且不具有刺激或特有的芳香，自由設(shè)定配合量或用途的脂肪分解促進(jìn)劑、及脂肪分解效果優(yōu)異，在香味或芳香等的嗜好性方面也優(yōu)異的皮膚外用組合物及飲食物組合物。
專利文獻(xiàn)1特開2000-169325號(hào)公報(bào)專利文獻(xiàn)2特開平10-152404號(hào)公報(bào)專利文獻(xiàn)3特許第3164455號(hào)說明書非專利文獻(xiàn)1巖井和夫及中谷延二著，「香辛料成分的食品功能」，97頁，1989年本發(fā)明者等有鑒于上述情況，努力進(jìn)行研究的結(jié)果，發(fā)現(xiàn)自姜科植物的非洲豆蔻(Aframomum melegueta)，尤其自其種子所得的萃取物及其?；幚砦铮约白鳛樵撦腿∥锼煞值亩罐⒁杭捌漉；苌锸菍τ陔S著老化，尤其在露出部位所發(fā)生的皺紋的改善效果優(yōu)異，具有使皮膚在皮膚科學(xué)上及美容上保持健康狀態(tài)的效果，以及安全性或安定性也優(yōu)異，并且，由促進(jìn)全身或局部的脂肪組織減少而改善肥胖體質(zhì)，或由防止該組織的增大而有效地抑制或防止肥胖，并且抑制損害嗜好性的刺激或芳香的優(yōu)異素材，而完成本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容
也即，本發(fā)明是關(guān)于以下述通式(1) [式中，R是氫原子或碳原子數(shù)為2至20個(gè)的?；鵠所表示的化合物為有效成分的皺紋改善劑，以及以由非洲豆蔻得到的萃取物及/或該萃取物的?；幚砦餅橛行С煞值陌櫦y改善劑。
本發(fā)明又關(guān)于以上述通式(1)所表示的化合物為有效成分的脂肪分解促進(jìn)劑，以及以得自非洲豆蔻的萃取物及/或該萃取物的?；幚砦餅橛行С煞值闹痉纸獯龠M(jìn)劑。
本發(fā)明又關(guān)于含有上述通式(1)所表示的化合物的皮膚外用組合物，以及含有得自非洲豆蔻的萃取物及/或該萃取物的酰化處理物的皮膚外用組合物。
本發(fā)明又關(guān)于含有上述通式(1)所表示的化合物的飲食品組合物，以及含有得自非洲豆蔻的萃取物及/或該萃取物的?；幚砦锏娘嬍称方M合物。
本發(fā)明的皺紋改善劑及皮膚外用組合物是對于隨著老化，尤其在露出部位所發(fā)生的皺紋的改善效果優(yōu)異，具有皮膚科學(xué)上及美容上保持皮膚健康狀態(tài)的效果，同時(shí)安全性或安定性也優(yōu)異。另外，本發(fā)明的脂肪分解促進(jìn)劑、皮膚外用組合物及飲食品組合物是由促進(jìn)全身或局部的脂肪組織減少而改善肥胖體質(zhì)，或由防止該組織的增大而有效地抑制或防止肥胖，并且因?yàn)橐种茡p害嗜好性的刺激或芳香，不僅瘦身效果優(yōu)異，就使用感或嗜好性方面也明顯地優(yōu)異。另外，本發(fā)明中所使用的豆蔻液，因?yàn)榭扇菀鬃苑侵薅罐⒌鹊奶烊晃锊牧陷腿【?，所以也可得到安全性方面上也?yōu)異的組合物。


圖1是精制豆蔻液的質(zhì)譜圖。
圖2是表示精制豆蔻液的13C-NMR(核磁共振)光譜(100MHz，CDCl3)的圖。
具體實(shí)施例方式
詳細(xì)說明本發(fā)明如下。本發(fā)明所使用的作為姜科植物的非洲豆蔻(Aframomum melegueta)是自長于以西非為中心的熱帶地方，以「melegueta」或「天堂籽(Grains of paradise)」等的名稱被人們所知，作為香辛料使用。本發(fā)明中所使用的萃取物是以非洲豆蔻的植物體，尤其以種子作為萃取材料，可由已知的方法萃取而得的萃取物。作為萃取所使用的溶劑雖無特別的限制，可使用如甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丁醇等的低級醇或含水低級醇、或1，3-丁二醇等的多元醇或含水多元醇，或丙酮、醋酸乙酯、己烷等的各種有機(jī)溶劑。
作為萃取材料所使用的植物體部位雖無特別的限制，但為更有效率地得到目的的萃取物，以使用種子為宜。
所得的萃取物是可直接使用，也可因應(yīng)需要，由濃縮或干固，或利用稀釋等的操作，作成所需形態(tài)或性狀。
另外，萃取物的?；幚砦锸菍⑤腿∥秕；玫降?，所以可使用如后述通式(1)所示化合物的制法中所記載的酰化反應(yīng)，從非洲豆蔻萃取物中獲得。
本發(fā)明所使用的上述通式(1)所示的化合物中的R是氫原子的化合物即，豆蔻液[1-(4’-羥基-3’-甲氧基苯基)-3-癸酮]是如上述，用式
所示的化合物，為非洲豆蔻萃取物所含的成分。本發(fā)明所使用的豆蔻液是使用一般有機(jī)合成法自姜酮合成以外，也可由氫化姜烯酚而得的(東化理科報(bào)I，16，589，1927)，關(guān)于合成方法并無特別的限制。
另外，豆蔻液是以非洲豆蔻，尤其以其種子作為萃取材料，由已知的方法萃取、精制而可得的。如上所述，非洲豆蔻是自生于以西非為中心的熱帶地方，可作為香辛料而取得。作為萃取溶劑是與上述同樣地，可使用有機(jī)溶劑，如甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丁醇等的低級醇或含水低級醇、或1，3-丁二醇等的多元醇或含水多元醇，或丙酮、醋酸乙酯、己烷等的各種有機(jī)溶劑。尤其為提升萃取物中的豆蔻液濃度，以使用低極性溶劑，例如己烷、庚烷、辛烷等為宜。
自所得的非洲豆蔻萃取物精制豆蔻液的方法，使用已知的精制方法即可，例如可使用硅膠層析法等而精制。
另外，上述通式(1)所示的化合物中的R是碳原子數(shù)為2至20個(gè)的?；幕衔镏校^碳原子數(shù)為2至20個(gè)的?；侵窻′-CO-基，在此，R′是表示可具有不飽和鍵的碳原子數(shù)為1至19個(gè)的直鏈或支鏈的烷基、或苯基、萘基等的芳基，或含有選自氮原子、硫原子及氧原子的雜原子為環(huán)原子的吡啶基、咪唑基、噻嗯基、呋喃基等的雜芳基。這些基也可為具有氨基等的官能基。作為碳原子數(shù)為2至20個(gè)的?；?，具體上可舉例如乙酰基、丙?；?、丁?；惗□；⑽祯；?、己?；?、月桂酰基、棕櫚?；?、油?；龋砸阴；燃?。像這樣的R是碳原子數(shù)為2至20個(gè)的?；氖?1)的化合物，可使用已知方法?；椒踊衔锒铣伞＠缬扇缟鲜龅姆椒ㄋ玫亩罐⒁篬1-(4’-羥基-3’-甲氧基苯基)-3-癸酮]與具有所需?；乃崧然锘蛩狒谶拎ぶ蟹磻?yīng)，而可容易得到。另外，也可于存在催化劑量的堿下，與羧酸反應(yīng)。
進(jìn)而，利用已知的方法將豆蔻液衍生物化后得到的物質(zhì)，例如于芳香環(huán)的第4位的羥基部分糖苷化后得到的物質(zhì)、將酮基還原后得到的物質(zhì)等也屬于豆蔻液，可于本發(fā)明中使用。
本發(fā)明中，上述通式(1)所示的化合物以及得自非洲豆蔻，尤其其種子的萃取物及/或該萃取物的?；幚砦?，可作為皺紋改善劑使用。使用萃取物時(shí)，可直接使用，也可因應(yīng)需要，由濃縮或干固，或稀釋等的操作，作成所需形態(tài)或性狀。
在本發(fā)明中的以通式(1)所示的化合物以及得自非洲豆蔻，尤其其種子的萃取物及/或該萃取物的?；幚砦铮鳛榘櫦y改善劑配合于皮膚外用組合物時(shí)，其配合量是以皮膚外用組合物的總量為基準(zhǔn)，換算成豆蔻液時(shí)的配合量是以0.001至10.0質(zhì)量％(以下僅記為％)為宜，以0.01至8.0％尤佳，以0.05至5％更好，以0.1至3％最好。當(dāng)配合量小于0.001％時(shí)，本發(fā)明預(yù)期的效果不足，另一方面，配合量超過10.0％時(shí)，未提升相對其增加部分的效果，所以不適宜。
另外，在作為皺紋改善劑配合于皮膚外用組合物時(shí)，若并用已知具有改善皺紋效果的視黃醇、抗壞血酸、生育酚等的成分時(shí)，互補(bǔ)改善皺紋效果，或可期待協(xié)同效果，所以適宜。
本發(fā)明中，上述通式(1)所示的化合物以及得自非洲豆蔻尤其其種子的萃取物及/或該萃取物的?；幚砦铮勺鳛榇龠M(jìn)脂肪分解的脂肪分解促進(jìn)劑配合于皮膚外用組合物或飲食品組合物中。
通式(1)所示的化合物以及得自非洲豆蔻尤其其種子的萃取物及/或該萃取物的酰化處理物，作為促進(jìn)脂肪分解劑配合于皮膚外用組合物及飲食品組合物時(shí)，其配合量雖依制劑的形態(tài)，而有各種不同，不能一致地規(guī)定，但例如以該組合物的總量為基準(zhǔn)時(shí)，換算成豆蔻液，是以0.001至10.0質(zhì)量％(以下僅記為％)為宜，以0.01至8.0％尤佳，以0.05至5％更好，以0.1至3％最好。小于0.001質(zhì)量％的配合量，有時(shí)不能達(dá)成本發(fā)明的效果，超過10.0質(zhì)量％配合時(shí)，刺激感變強(qiáng)，將損及官能特性或嗜好性。另外，尤其于飲食品組合物，每位成人的攝取量，換算成豆蔻液為20至1000mg，以100至200mg為宜。
另外，作為本發(fā)明的脂肪分解促進(jìn)劑的皮膚外用組合物或飲食品組合物，也可適當(dāng)?shù)亟M合其它的作為具有抑制或防止肥胖作用的成分的覆盆子酮、姜酮、4-(3’，4’-二羥基苯基)-2-丁酮、欣樂芬素(synephrine)等而配合，增強(qiáng)或補(bǔ)強(qiáng)其效果等。
另外，作為本發(fā)明的脂肪分解促進(jìn)劑的皮膚外用組合物及飲食品組合物，也可配合butopamine、isoproterenol等的β腎上腺素作用興奮劑，育亨賓(Yohimbine)、麥角毒堿(Ergotoxine)等的α2腎上腺素作用抑制劑，茶堿(Theophylline)、咖啡因等的黃嘌呤衍生物，Milrinone、Amrinone等的聯(lián)二吡啶衍生物等。
進(jìn)而，于本發(fā)明的皮膚外用組合物及飲食品組合物，因應(yīng)需要，于不損及本發(fā)明的效果的范圍，可配合通常所使用的各種成分。皮膚外用組合物時(shí)，可配合例如油分、顏料、香料、表面活性劑、保濕劑、紫外線吸收劑、抗炎癥劑、殺菌劑、色素、防腐劑、抗氧化劑等的通常配合于皮膚外用組合物的成分，飲食品組合物時(shí)，可配合例如賦形劑、結(jié)合劑、增黏劑、乳化劑、著色劑、香料、食品添加物、調(diào)味料等的成分。
作為本發(fā)明的皮膚外用組合物，皮膚化妝料是當(dāng)然的，也包含醫(yī)藥品或入浴劑。劑型并非特別限定，但于皮膚外用組合物時(shí)，可舉例如化妝水(lotion)、皮膚涂布用、浴用或洗凈用等的乳霜、乳液、凝膠、面膜、條狀物、薄片、糊、粉末、液體、顆粒等。飲食品組合物時(shí)，可舉例如錠劑、錠果、丸劑、糖衣錠、粉末狀、顆粒狀、茶狀、茶包狀、硬膠囊、軟膠囊、口香糖、巧克力、糖果、軟糖、飲料、湯、冰淇淋、面類、烘焙食品等。
實(shí)施例以下是基于實(shí)施例及比較例而詳細(xì)地說明本發(fā)明，本發(fā)明并不局限于這些實(shí)施例。另外，實(shí)施例中的％，除非特別例外，全為質(zhì)量％。制造例1(制造非洲豆蔻萃取物)以攪拌器粉碎2g的非洲豆蔻(Aframomum melegueta)的干燥種子后，浸漬于20ml的丙酮，萃取24小時(shí)。于減壓下濃縮、干固所得的萃取液，得到0.1g得自非洲豆蔻種子的萃取物。以下稱本萃取物為「非洲豆蔻萃取物」。由HPLC分析的結(jié)果，此非洲豆蔻萃取物含有55％的豆蔻液。
制造例2(制造豆蔻液)以攪拌器粉碎100g的非洲豆蔻(Aframomum melegueta)的干燥種子后，浸漬于2L的己烷24小時(shí)。于減壓下濃縮、干固所得的萃取液，得到2.0g的萃取物。再將萃取物，由使用關(guān)東化學(xué)社制硅膠60N(100-210μm)的硅膠層析儀(己烷/醋酸乙酯(9∶1))分離，而得約500mg的精制豆蔻液。
(豆蔻液的鑒定)精制豆蔻液是由GC-MS(氣相層析質(zhì)譜分析儀)及13C-NMR(核磁共振)(100MHz，CDCl3)確認(rèn)，得到如下結(jié)果。
由GC-MS，確認(rèn)分子離子峰(M+)[m/z；278](參考圖1)。由13C-NMR檢測出下述信號(hào)[δ(ppm)；14.0、22.5、23.7、29.1、29.4、31.2、43.0、44.5、55.7、111.1、114.3、120.6、133.0、143.8、146.4、210.7](參考圖2)。
制造例3(制造乙酰化非洲豆蔻萃取物)混合1.0g的制造例1所得的非洲豆蔻萃取物、1.0ml的吡啶及30ml的醋酸酐，于室溫下攪拌24小時(shí)。然后，加水后，用醋酸乙酯萃取，而得1.2g的乙酰化處理萃取物。以下稱本處理物為「乙?；侵薅罐⑤腿∥铩埂?br> 制造例4(制造豆蔻液)將10g(6.5mmol)的香草醛與9.3g(6.5 mmol)的2-壬酮于30ml的己烷、20ml的二乙醚中攪拌、溶解。再加入3.9g的醋酸后，加入4.6ml(6.5mmol)的哌啶，攪拌6小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，用碳酸氫鈉水溶液除去未反應(yīng)的香草醛，用二乙醚萃取。用無水硫酸鎂干燥后，餾去溶劑，而得20.2g的粗生成物。將粗生成物用柱層析儀(SiO2/CHCl3)精制，得到(E)-1-(4’-羥基-3’-甲氧基-苯基)癸-1-烯-3-酮(17.94g，產(chǎn)率為90％)。
進(jìn)而，溶解10g(36mmol)所得的(E)-1-(4’-羥基-3’-甲氧基-苯基)癸-1-烯-3-酮于100mL的乙醇中，向該溶液加入1g的碳鈀(5％的鈀)，于氫氣氛下(常壓)，在常溫下攪拌一夜。過濾不溶解物后，將濾液以減壓濃縮，得到9.8g的粗產(chǎn)物。粗產(chǎn)物以柱層析儀(SiO2/CHCl3)精制，得到1-(4’-羥基-3’-甲氧基苯基)-3-癸酮(5.6g，收率為58％)。
實(shí)施例1至3(非洲豆蔻萃取物、豆蔻液、乙?；侵薅罐⑤腿∥锏陌櫦y改善效果)將制造例1至3所得的非洲豆蔻萃取物、豆蔻液或乙酰化非洲豆蔻萃取物，以50％乙醇水溶液為基劑，分別調(diào)制各配合1.0％的試樣(實(shí)施例1、2或3)，由以下試驗(yàn)方法調(diào)查對光老化皮膚的皺紋改善效果。
(試驗(yàn)方法)1、試驗(yàn)動(dòng)物試驗(yàn)開始時(shí)，使用10周齡大的裸鼠1組10只。
2、皺紋改善效果的評估方法2-1、光老化條件照射UVA及UVB，1日1次，每周5次，共8周，誘發(fā)光老化。照射量是UVA為20J/cm2、25J/cm2、30J/cm2，UVB為20J/cm2、30J/cm2、40J/cm2，每1周增加照射量，第3周以后，照射最大量。
2-2、評估方法由皺紋評分及真皮膠原蛋白量評估皺紋改善效果。皺紋評分是依據(jù)Bissett等人的方法(Photochem Photobiol，46:367-378，1987)評分。也即，用肉眼綜合性評估皺紋的大小及深淺，以「可確認(rèn)大且深的皺紋」為3，「可確認(rèn)皺紋」為2，「不能確認(rèn)皺紋」為1，「觀察到正常紋理」為0的4個(gè)水平評分。真皮膠原蛋白量是采取全層皮膚，以POLYTRON均質(zhì)機(jī)(KINEMATICA社制)粉碎后，萃取膠原蛋白分離部分，酸解后，使用氨基酸分析裝置(日本分光制)，由定量羥基脯氨酸含量而測定。以每1cm2的羥基脯氨酸量作為真皮膠原蛋白量的相對指標(biāo)。
3、試驗(yàn)操作以50％乙醇水溶液為基劑，分別調(diào)制按照非洲豆蔻萃取物(制造例1)、豆蔻液(制造例2)或乙?；侵薅罐⑤腿∥?制造例3)達(dá)到1.0％(作為豆蔻液濃度為0.55％、0.8％，作為乙酰豆蔻液濃度為0.5％)的方式配合的試樣(實(shí)施例1、2或3)。另外，以僅基劑者為比較例。將0.1ml的這些評估試樣，以1天1次，1周5次的頻率，自開始照射UV后第5周起至照射結(jié)束后第4周，涂布于裸鼠背部皮膚(直徑約為2.5cm)上。接著，最終涂布結(jié)束后，進(jìn)行皺紋評分。屠殺后，采取皮膚，測定膠原蛋白含量(每1cm2的羥基脯氨酸量)。
(試驗(yàn)結(jié)果)由皺紋評分值及真皮膠原蛋白量評估實(shí)施例1至3的皺紋改善劑的皺紋改善效果，結(jié)果如下所述。
(皺紋評分評估結(jié)果1)

以實(shí)施例1至3的非洲豆蔻萃取物、豆蔻液或乙?；侵薅罐⑤腿∥餅橛行С煞值陌櫦y改善劑涂布組，與比較例1或2的僅涂布基劑的組比較，顯示低的皺紋評分值，表明本發(fā)明的皺紋改善劑是有效的。
(膠原蛋白含量評價(jià)結(jié)果)

以實(shí)施例1的非洲豆蔻萃取物為有效成分的皺紋改善劑涂布組與僅基劑的比較例1涂布組比較，顯示高膠原蛋白含量(羥基脯氨酸量)，對于因光老化所減少的真皮膠原蛋白量，表明本發(fā)明的皺紋改善劑是有效的。
由上述試驗(yàn)結(jié)果表明，以實(shí)施例1至3的非洲豆蔻萃取物、豆蔻液、乙酰化非洲豆蔻萃取物為有效成分的本發(fā)明的皺紋改善劑，具有改善因光老化所引起的皺紋的效果。
另外，使用制造例4所得的豆蔻液以取代制造例2所得的豆蔻液，以與上述相同的方法進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)，得到相同的效果。
實(shí)施例4評價(jià)辣味關(guān)于制造例2所制造、精制的豆蔻液的辣味，進(jìn)行感覺評估。使用辣椒的辣味成分的辣椒素作為比較對象。以蒸餾水稀釋豆蔻液及辣椒素，制作10-8mol/L至10-3mol/L的試驗(yàn)液。將這些以濃度從低往高的順序，進(jìn)行感覺評價(jià)，感到辣味的濃度為閥值。由下述結(jié)果可知，相對于辣椒素的閥值為10-7mol/L附近，而豆蔻液為10-4mol/L，可知豆蔻液辣味是辣椒素辣味的1/1000程度的微弱辣味。此結(jié)果顯示，本發(fā)明的飲食品組合物是適合于飲食。

(注)+++ 感到明顯強(qiáng)烈的辣味++ 感到相當(dāng)辛辣
+稍感到辣味± 感到微辣-未感到辣味另外，使用制造例4所得的豆蔻液以取代制造例2所得的豆蔻液，以與上述相同的方法進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)，得到相同的效果。
實(shí)施例5脂肪分解促進(jìn)效果(試驗(yàn)方法)將自大日本制藥(股)購入的小鼠3T3-L1細(xì)胞，依據(jù)Ensler等人的方法(Ensler K.et al.，Biochim.Biophys.Acta.，158136-48(2002))，于24孔培養(yǎng)皿，在5％(v/v)CO2的氣氛下，以37℃培養(yǎng)，將其作為成熟脂肪細(xì)胞，使用于試驗(yàn)。添加所定濃度的試驗(yàn)試樣于添加了牛血清白蛋白及降腎上腺素(最終濃度3×10-8mol/L)的DMEM培養(yǎng)基(Dulbecco’s Modified Eagle Media)，調(diào)制試驗(yàn)培養(yǎng)基，使上述成熟脂肪細(xì)胞于試驗(yàn)培養(yǎng)基中反應(yīng)90分鐘。反應(yīng)后，對培養(yǎng)基中游離的甘油，使用F試劑組·甘油(Roche社制)，由酶免疫測定法定量。
以甘油的定量值為依據(jù)，根據(jù)下式算出脂肪分解促進(jìn)率，將其作為脂肪分解促進(jìn)效果的指標(biāo)。
脂肪分解促進(jìn)率(％)＝[A/B]×100(A添加試驗(yàn)試樣時(shí)的甘油量，B對照組(未添加試驗(yàn)試樣)的甘油量)(試驗(yàn)結(jié)果)將制造例1及2所制造的非洲豆蔻萃取物及豆蔻液的脂肪分解促進(jìn)效果，通過上述脂肪分解試驗(yàn)所評價(jià)的結(jié)果如下所示。使用姜酮及咖啡因作為比較對照。


制造例1所得的非洲豆蔻萃取物及制造例2所得的豆蔻液的脂肪分解促進(jìn)率，明顯地比比較例所使用的姜酮及咖啡因高，表明非洲豆蔻萃取物及豆蔻液具有高脂肪分解促進(jìn)作用。
另外，使用制造例4所得的豆蔻液以取代制造例2所得的豆蔻液，用與上述相同的方法進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)，得到相同的效果。
實(shí)施例6抑制體重增加的試驗(yàn)(試驗(yàn)方法)使用2組的每1組6只ICR系小鼠(公，4周齡大)，對照組是給與如下述配合組成的高脂肪飼料，試驗(yàn)組是給與配合1質(zhì)量％的制造例1所得的非洲豆蔻萃取物于高脂肪飼料中的試驗(yàn)試樣，分別飼育6周。測定試驗(yàn)開始時(shí)及開始后第6周的體重，以體重增加量為指標(biāo)，評價(jià)組間的差異，判定抑制體重增加的效果。另外，飼料及水是自由攝取。
(高脂肪飼料配合組成)

*1礦物質(zhì)混合物(ICN社制)*2維生素混合物(ICN社制)
(試驗(yàn)結(jié)果)結(jié)果如下所示。

由上述結(jié)果表明，攝取高脂肪食的體重增加量，通過在高脂肪飼料中配合作為本發(fā)明的脂肪分解促進(jìn)劑的非洲豆蔻萃取物，顯示有意義地降低。
本發(fā)明中，通過配合通式(1)所示的化合物、得自非洲豆蔻萃取物，尤其其種子的萃取物及/或該萃取物的酰化處理物，可提供各種皮膚外用組合物及飲食物組合物。以下雖舉該例，但本發(fā)明并不局限于這些。實(shí)施例7、8、比較例3(潤膚液)依據(jù)常法調(diào)制下述組成的潤膚液，以其作為試樣，由下述操作評價(jià)皺紋改善效果。有魚尾紋的健康者(女性，41至65歲，分別對實(shí)施例7或?qū)嵤├?各10名)作為試驗(yàn)者，分別將實(shí)施例7或?qū)嵤├?及比較例3的潤膚液，在左右任一側(cè)，在早上洗臉后及傍晚洗澡后的1天2次，連續(xù)2個(gè)月(60天)，涂布約0.2ml于眼尾部分(各試樣均以眼尾為中心，約4cm2，2×2cm)。接著，在最后涂布后，回答關(guān)于左右眼尾部分皮膚(皺紋)狀態(tài)的問卷。
(組成)


以問卷結(jié)果為根據(jù)，在關(guān)于皮膚(皺紋)狀態(tài)的各評價(jià)項(xiàng)目，回答實(shí)施例7或?qū)嵤├?的潤膚液比比較例3有效的人數(shù)如下所示。

由本試驗(yàn)結(jié)果，實(shí)施例7及實(shí)施例8的潤膚液與比較例3比較，明顯地改善皺紋，進(jìn)而也改善由光老化而惡化的柔軟性或色調(diào)。另外，認(rèn)為無因本發(fā)明的潤膚液所引起的刺激或發(fā)癢等的皮膚異常。
另外，使用制造例4所得的豆蔻液以取代制造例2所得的豆蔻液，以與上述相同的方法進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)，得到相同的效果。
實(shí)施例9(潤膚霜)事先問卷調(diào)查因有眼尾紋的而煩惱的20名健康者(女性，50至55歲)，使用由常法調(diào)制了配合有下述組成的非洲豆蔻萃取物及豆蔻液或乙酰化非洲豆蔻萃取物的潤膚霜，讓上述健康者每1天使用約0.5g上述潤膚霜1周以上，進(jìn)行問卷調(diào)查。
組成

問卷調(diào)查的結(jié)果如下所示。另外，結(jié)果是以各項(xiàng)目，與使用前比較，使用后認(rèn)為如此的人數(shù)。

由本試驗(yàn)結(jié)果顯示，對實(shí)施例9的潤膚霜，幾乎全體試驗(yàn)者認(rèn)為與使用前比較，覺得皺紋變得不明顯，其主要原因是與皺紋數(shù)量相比通過減輕皺紋大小，因光老化而引起的皺紋得以改善。另外，認(rèn)為無因本發(fā)明的潤膚霜所引起的刺激或發(fā)癢等的皮膚異常。
另外，使用制造例4所得的豆蔻液以取代制造例2所得的豆蔻液，以與上述相同的方法進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)，得到相同的效果。
實(shí)施例10、11、比較例4至7(口香糖)制造下述組成的口香糖，讓20歲左右的體內(nèi)脂肪率為35％以上的女性各組30名，攝取口香糖1個(gè)月(15g/天)，體內(nèi)脂肪率比原本的體內(nèi)脂肪率降低5％以上時(shí)，則評價(jià)為體內(nèi)脂肪減少者。


*1「絲蘭皂角苷50M」(常盤植物化學(xué)研究所制)(含有45～50質(zhì)量％的皂角苷)另外，使用制造例4所得的豆蔻液以取代制造例2所得的豆蔻液，以與上述相同的方法進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)，得到相同的效果。
實(shí)施例12(錠果)制造下述組成的錠果，1天3錠(0.5g/錠)，以與上述實(shí)施例10及11相同的條件，使試驗(yàn)者攝取后進(jìn)行評價(jià)。


*1「絲蘭皂角苷50M」(常盤植物化學(xué)研究所制)(含有45～50質(zhì)量％的皂角苷)由上述評估結(jié)果表明，上述實(shí)施例的飲食品組合物(口香糖及錠果)，顯示明顯的降低體內(nèi)脂肪的作用。另外，本發(fā)明的飲食品組合物容易攝取，嗜好性優(yōu)異，即使長期也不厭倦，為適合連續(xù)食用的飲食品組合物。
另外，使用制造例4所得的豆蔻液以取代制造例2所得的豆蔻液，以與上述相同的方法進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)，得到相同的效果。
實(shí)施例13、14、比較例8、9(凝膠狀瘦身用皮膚化妝品)依據(jù)常法，以如下所示的組成，分別地混合溶解A、B各成分后，由添加、攪拌B成分于A成分，調(diào)制凝膠狀瘦身用皮膚化妝品。


將上述凝膠狀瘦身用皮膚化妝品，分別涂布于試驗(yàn)評價(jià)者各組20名的腹部及大腿部約2g，1天2次，連續(xù)使用3周，對于瘦身效果，進(jìn)行問卷調(diào)查。如上述評價(jià)結(jié)果，與連續(xù)使用前相比較，回答腹部、大腿部變緊實(shí)的人數(shù)是在使用本發(fā)明的凝膠狀瘦身用皮膚化妝品的小組中明顯為多。另外，關(guān)于使用時(shí)的芳香等的嗜好性、刺激等，本發(fā)明的凝膠狀瘦身用皮膚化妝品并無特別的問題。
另外，使用制造例4所得的豆蔻液以取代制造例2所得的豆蔻液，以與上述相同的方法進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)，得到相同的效果。
本實(shí)驗(yàn)例所使用的香料的組成如下述表1所示。


產(chǎn)業(yè)上利用性由本發(fā)明提供改善隨著老化，尤其在露出部位所發(fā)生的皺紋的改善效果優(yōu)異，具有使皮膚保持在皮膚科學(xué)上及美容上健康狀態(tài)的效果，同時(shí)安全性或安定性也優(yōu)異的皺紋改善劑，及配合該皺紋改善劑的皮膚外用組合物，以及促進(jìn)全身或局部的脂肪組織的減少而改善肥胖體質(zhì)，或由防止該組織的增大而有效地抑制或防止肥胖，并且抑制損害嗜好性的刺激或芳香的脂肪分解促進(jìn)劑，配合了該脂肪分解促進(jìn)劑的皮膚外用組合物及飲食品組合物。
權(quán)利要求
1.一種皺紋改善劑，其特征為，以通式(1) [式中，R是氫原子或碳原子數(shù)為2至20個(gè)的?；鵠所表示的化合物為有效成分。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的皺紋改善劑，其中R為氫原子。
3.一種皺紋改善劑，其特征為，以得自非洲豆蔻的萃取物及/或該萃取物的?；幚砦餅橛行С煞?。
4.一種脂肪分解促進(jìn)劑，其特征為，以通式(1) [式中，R是氫原子或碳原子數(shù)為2至20個(gè)的?；鵠。所表示的化合物為有效成分。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的促進(jìn)脂肪分解劑，其中R為氫原子。
6.一種脂肪分解促進(jìn)劑，其特征為，以得自非洲豆蔻的萃取物及/或該萃取物的?；幚砦餅橛行С煞?。
7.一種皮膚外用組合物，其特征為，含有通式(1) [式中，R是氫原子或碳原子數(shù)為2至20個(gè)的酰基]所表示的化合物。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的皮膚外用組合物，其中R為氫原子。
9.一種皮膚外用組合物，其特征為，含有得自非洲豆蔻的萃取物及/或該萃取物的酰化處理物。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的皮膚外用組合物，其中萃取物及/或酰化處理物含有權(quán)利要求7所述的化合物。
11.根據(jù)權(quán)利要求7～10中任一項(xiàng)所述的皮膚外用組合物，其中皮膚外用組合物是改善皺紋用皮膚外用組合物。
12.根據(jù)權(quán)利要求7～10中任一項(xiàng)所述的的皮膚外用組合物，其中皮膚外用組合物是瘦身用皮膚外用組合物。
13.一種飲食品組合物，其特征為，含有通式(1) [式中，R是氫原子或碳原子數(shù)為2至20個(gè)的?；鵠所表示的化合物。
14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的飲食品組合物，其中R為氫原子。
15.一種飲食品組合物，其特征為，含有得自非洲豆蔻的萃取物及/或該萃取物的?；幚砦?。
16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的飲食品組合物，其中萃取物及/或酰化處理物含有權(quán)利要求13所述的化合物。
17.根據(jù)權(quán)利要求13～16中任一項(xiàng)所述的飲食品組合物，其中飲食品組合物是瘦身用飲食品組合物。
全文摘要
以通式(1)[式中，R是氫原子或碳原子數(shù)為2至20個(gè)的?；鵠。所表示的化合物，或得自非洲豆蔻(Aframomum melegueta)的萃取物及/或該萃取物的?；幚砦餅橛行С煞值陌櫦y改善劑、脂肪分解促進(jìn)劑、皮膚外用組合物及飲食用組合物。
文檔編號(hào)A61K8/97GK101018537SQ20058002921
公開日2007年8月15日 申請日期2005年8月29日 優(yōu)先權(quán)日2004年8月30日
發(fā)明者杉田淳, 池本毅, 赤澤裕見子, 小林友里惠, 三谷光正, 原武昭憲, 小宮亞矢 申請人:花王株式會(huì)社