專利名稱：含有滲透促進(jìn)劑丙二醇的睪丸激素凝膠的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及含睪丸激素的藥物組合物和凝膠，以及它們的使用方法。
背景技術(shù)：
男性體內(nèi)的睪丸激素睪丸激素，男性體內(nèi)循環(huán)的主要雄激素，是由膽固醇合成的。試驗(yàn)中約500百萬個(gè)睪丸間質(zhì)細(xì)胞分泌每天所生成的6-7mg睪丸激素中的95％以上。由腦垂體生成的兩種激素，促黃體生成激素(“LH”)和促卵泡激素(“FSH”)，是發(fā)展和維持睪丸功能以及負(fù)調(diào)節(jié)睪丸激素生成所需要的。循環(huán)的睪丸激素通過兩種不同的途徑代謝為各種17-酮類固醇。睪丸激素可由5-alpha-還原酶代謝為雙氫睪丸酮(“DHT”)或由芳香化酶絡(luò)合物代謝為雌二醇(“E2”)。血液中循環(huán)的睪丸激素有98％與蛋白質(zhì)結(jié)合。男性中，約40％與高親合力性激素結(jié)合蛋白(“SHBG”)結(jié)合。其余60％與白蛋白弱結(jié)合。因此，許多用于睪丸激素的測(cè)定從臨床實(shí)驗(yàn)室獲得。
來自加利福尼亞州立大學(xué)洛杉磯分校-港灣醫(yī)療中心(UCLA-Harbor Medical Center)的下表總結(jié)了正常成年男性的激素濃度正常男性體內(nèi)的激素水平 激素正常范圍睪丸激素(總量)298到1043ng/dL游離睪丸激素 3.5到17.9ng/dLDHT 31到193ng/dLDHT/T比率 0.052到0.33DHT+T 372到1349ng/dLSHBG 10.8到46.6nmol/L
LH1.0到8.ImILVmLE217.1到46.1pg/mL文獻(xiàn)所報(bào)道的睪丸激素的半衰期有著相當(dāng)大的變化，從10到100分鐘。然而，研究員認(rèn)為正常年輕男性體內(nèi)循環(huán)的睪丸激素每日變化。最高水平發(fā)生在上午大約6:00到8:00，然后整個(gè)白天該水平下降。特征曲線中睪丸激素的最大水平為720ng/dL，最低水平為430ng/dL。然而，這種日循環(huán)的生理意義，如果有的話，還尚未清楚。
女性體內(nèi)的睪丸激素成年女性尿中雄性類固醇的排泄在50多年前被證實(shí)。因?yàn)槟菚r(shí)候，生理學(xué)家和臨床醫(yī)生已研究了女性體內(nèi)睪丸激素和其他內(nèi)源性的雄性激素的來源和生物功能?，F(xiàn)在知道，雄激素由女性的卵巢素和腎上腺兩者分泌。每個(gè)來源貢獻(xiàn)約50％(直接地和通過前體)到約300μg的健康“循環(huán)”女性每日生成的睪丸激素。當(dāng)雄激素過量生成(如發(fā)生在多囊卵巢綜合癥和某些產(chǎn)生雄激素的腫瘤)的副作用已經(jīng)充分描述時(shí)，雄激素在女性中的正常生理效應(yīng)卻不被更多人理解。從動(dòng)物研究、男性生理和雄激素生成缺乏的女性癥狀推斷，雄激素在正常女性中的主要生理效應(yīng)包括但不限于肌肉、皮膚、毛發(fā)和骨的合成代謝效應(yīng)；紅血球生成的刺激效應(yīng)；免疫功能的調(diào)節(jié)效應(yīng)；和情緒、健康和性功能的心理效應(yīng)。
另外，內(nèi)源性雄激素對(duì)陰毛的生長(zhǎng)很重要，并被認(rèn)為可調(diào)節(jié)各種生殖靶組織上的雌激素和孕激素的效應(yīng)。人們還相信，雄激素在調(diào)節(jié)淚腺的分泌功能中起重要作用。
百分之五十循環(huán)的睪丸激素源自于在促黃體生成激素支配下卵泡膜細(xì)胞中直接的卵巢分泌。另一半源自于腎上腺雄激素前體脫氫表雄酮、雄甾烯二酮和硫酸脫氫表雄酮的外部轉(zhuǎn)化。睪丸激素還可以轉(zhuǎn)化為雙氫睪丸酮或雌二醇。因此，睪丸激素作為激素和前激素。
血液中循環(huán)的睪丸激素有98％與蛋白質(zhì)結(jié)合。女性中，約66％與高親合力性激素結(jié)合蛋白結(jié)合。其余34％與白蛋白弱結(jié)合。因此，許多用于睪丸激素的測(cè)定從臨床實(shí)驗(yàn)室獲得。
大多數(shù)通過性激素結(jié)合蛋白強(qiáng)烈結(jié)合的類固醇的親合力順序是雙氫睪丸酮＞睪丸激素＞雄甾烯二酮＞雌二醇＞雌激素酮。性激素結(jié)合蛋白與雙氫睪丸酮而不是硫酸雙氫睪丸酮弱結(jié)合。下表顯示了正常絕經(jīng)前女性的近似激素水平。
正常絕經(jīng)前女性體內(nèi)的激素水平激素 平均值+/-標(biāo)準(zhǔn)差 中值范圍睪丸激素(nmol/L) 1.20+/-0.69 0.980.4-2.7游離睪丸激素(pmol/L) 12.80+/-5.59 12.53 4.1-24.2總睪丸激素中的游離睪丸激素％1.4+/-1.11.1 0.4-6.3促黃體生成激素(IU/L) 7.2+/-3.36.7 3.0-18.7促卵泡激素(IU/L) 4.7+/-3.64.2 1.5-21.4性激素結(jié)合蛋白(nmol/L)66.1+/-22.7 71.017.8-114.0與其他激素缺乏狀況相比，女性的睪丸激素不足作為一種臨床實(shí)體已被大大地忽視。然而，存在雄激素生成明顯缺乏且相關(guān)的癥狀已經(jīng)描述的定義明確的患者人群，例如包括，使用雌激素替代治療的年輕的卵巢切除/子宮切除女性、絕經(jīng)后女性，使用口服避孕藥的女性，患腎上腺功能紊亂的女性，患皮質(zhì)類固醇誘導(dǎo)的腎上腺抑制的女性，以及人類免疫缺陷性病毒陽性的女性。
因?yàn)樯叩牟G丸激素濃度被證明可改變性能力和性欲，研究人員研究了將睪丸激素釋放給男性以及女性的方法。這些方法包括肌肉注射、口服代替、顆粒植入和透皮貼片。然而，這些釋放睪丸激素的方法有著一種或多種缺點(diǎn)。例如，皮下顆粒植入和酯注射很疼痛，并需要外科過程和/或大夫就診。此外，在性腺機(jī)能減退的男性體內(nèi)，植入療法包括擠壓的風(fēng)險(xiǎn)(8.5％)、出血的風(fēng)險(xiǎn)(2.3％)、或感染的風(fēng)險(xiǎn)(0.6％)。許多這些方法，例如口服/舌下/口含制劑，有著不符合要求的藥代動(dòng)力學(xué)曲線，其產(chǎn)生超生理性的睪丸激素濃度，然后回到基線。透皮貼片不能提供最佳的藥代動(dòng)力學(xué)特征，這使得透皮貼片不能用于多數(shù)患者，并且貼片還與明顯的皮膚刺激有關(guān)。另外，貼片不能提供劑量靈活性，這可能造成視覺的無吸引力，并且貼片可能有脫落的傾向，特別是在劇烈體育活動(dòng)過程中。口服給藥在患者體內(nèi)產(chǎn)生不適當(dāng)?shù)牟G丸激素水平和不可預(yù)見的吸收模式。此外，因?yàn)楦闻K代謝該制劑，因此有著肝臟毒性的風(fēng)險(xiǎn)，更不用說首過代謝了。
最近，一種百分之一睪丸激素凝膠已被批準(zhǔn)用于男性，其提供劑量靈活性，且極少皮膚刺激。該凝膠可從美國(guó)Unimed Pharmaceuticals，Inc，Inc.，Deerfield，111.，SolvayPharmaceuticals，Inc.Co.，Marietta，GA30062買到，商標(biāo)為AndroGel。
AndroGel的成分為

*相當(dāng)于67g無水乙醇。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供含睪丸激素的藥物組合物和凝膠，以及它們的使用方法。更具體地，本發(fā)明提供含睪丸激素的水醇/醇的藥物組合物和凝膠，其適于局部和透皮應(yīng)用，其中所述組合物包含丙二醇。除了可實(shí)現(xiàn)非常有效的睪丸激素釋放外，本發(fā)明組合物是美學(xué)觀點(diǎn)上非常具有吸引力的。丙二醇被證明是本發(fā)明組合物中的一種非常有效的滲透促進(jìn)劑，其單獨(dú)作為滲透促進(jìn)劑使用或與其他滲透促進(jìn)劑結(jié)合，例如與十四烷酸異丙酯結(jié)合。
本發(fā)明涉及一種藥物組合物，該藥物組合物包含睪丸激素、至少一種C2-C6醇、至少一種膠凝劑、至少一種滲透促進(jìn)劑、和水。
所述藥物組合物可被制成各種劑型，例如凝膠、溶液、霜?jiǎng)?、洗液、噴霧劑、軟膏劑、氣溶膠。優(yōu)選地，所述藥物組合物是凝膠。
下文所使用的術(shù)語“睪丸激素”不僅指睪丸激素本身，而且指其對(duì)映體、異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、鹽、螯合物、酯、酰胺、衍生物、和前藥及其前體，例如DHT(雙氫睪丸酮)、17-甲基睪丸激素、17[alpha]-甲基-睪丸激素3-環(huán)戊基烯醇醚、庚酸睪丸激素、γ-環(huán)戊丙酸睪丸甾酮(testosterone cypionate)、十一酸睪丸激素、環(huán)糊精睪丸激素、正丁基環(huán)己基羧酸睪丸激素(testosterone buciclate)。根據(jù)本發(fā)明，睪丸激素可以是天然來源，或源于半合成或合成方法。
C2-C6醇是本領(lǐng)域所公知的。這樣的醇包括乙醇、正丙醇、異丙醇(丙-2-醇)、n-正丙醇(丙-1-醇)、丁醇、丁-1-醇、丁-2-醇、叔-丁醇、戊醇、己醇。乙醇是優(yōu)選的，因?yàn)樗唤?jīng)與皮膚接觸就迅速蒸發(fā)，可有效幫助睪丸激素經(jīng)皮透過。
膠凝劑是本領(lǐng)域公知的。術(shù)語“膠凝劑”通常指一種可能為聚合物性質(zhì)的化合物，當(dāng)其與一種特定的溶劑例如水接觸時(shí)，具有成膠的能力。膠凝劑可以增加本發(fā)明藥物組合物的粘度，還可以作為增溶劑。膠凝劑的例子包括陰離子聚合物，例如基于丙烯酸的聚合物(包括聚丙烯酸聚合物，例如B.F.Goodrich Specialty Polymers和ChemicalsDivision of Cleveland，Ohio生產(chǎn)的CARBOPOL，纖維素衍生物，泊洛沙姆和poloxamines，更確切地說，Carbomers或基于丙烯酸的聚合物，例如Carbopol980或940、981或941、1382或1382、5984、2984、934或934P(Carbopol通常是丙烯酸與烯丙基蔗糖或烯丙基季戊四醇交聯(lián)的聚合物)，Pemulen TR1或TR2，Ultrez，Synthalen CR，等等)；纖維素衍生物，例如乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥乙基纖維素、羥丙基甲基纖維素(HPMC)、羧甲基纖維素(CMC)等等；泊洛沙姆或聚乙烯-聚丙烯共聚物，例如Lutrol68或127級(jí)，poloxamines及其他膠凝劑例如殼聚糖、低分子右旋糖酐、膠質(zhì)和天然膠。所有的這些膠凝劑，單獨(dú)或組合，可用于本發(fā)明的藥物組合物。可根據(jù)本發(fā)明組合物的pH以及所需的粘度來選擇所述膠凝劑。
根據(jù)本發(fā)明，羥丙基纖維素、Carbopol980和Lutrol是特別優(yōu)選的。
滲透促進(jìn)劑也是本領(lǐng)域已知的。“滲透促進(jìn)劑”通常是一種可促進(jìn)藥物或活性成分透皮釋放的試劑。這些試劑還被稱為透皮加速劑、活化劑和吸收增進(jìn)劑。該類試劑包括那些具有不同作用機(jī)理、那些具有改善藥物溶解度和擴(kuò)散性的功能、和那些通過改變角質(zhì)層性能以保持濕度、軟化皮膚、改善皮膚的滲透率、用作透皮助劑或毛囊開啟劑或暫時(shí)改變皮膚例如邊界層的狀態(tài)來改善透皮吸收的試劑。
除非另有說明，百分比(％)指基于組合物總重量的重量份。
根據(jù)一個(gè)方面，所述藥物組合物包含0.5到5.0％(w/w)，優(yōu)選0.5到2.5％(w/w)，更優(yōu)選0.6到2.0％(w/w)，更優(yōu)選0.7到1.5％(w/w)，更優(yōu)選0.75到1.25％(w/w)，更優(yōu)選0.8到1.2％(w/w)，更優(yōu)選0.9到1.1％(w/w)，最優(yōu)選約1.0％(w/w)的睪丸激素。
根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)方面，所述藥物組合物包含0.5到5.0％(w/w)，優(yōu)選0.5到2.5％(w/w)，更優(yōu)選0.75到2.25％(w/w)，更優(yōu)選0.9到2.0％(w/w)，更優(yōu)選1.0到1.8％(w/w)，更優(yōu)選1.25到1.75％(w/w)，更優(yōu)選1.3到1.6％(w/w)，最優(yōu)選約1.5％(w/w)的睪丸激素。
根據(jù)另一個(gè)方面，所述藥物組合物包含40.0到75.0％(w/w)，優(yōu)選40.0到70.0％(w/w)，更優(yōu)選45.0到65.0％(w/w)，更優(yōu)選50.0到60.0(w/w)，更優(yōu)選52.0到58.0％(w/w)，更優(yōu)選53.0到57.0％(w/w)，更優(yōu)選54.0到56.0％(w/w)，最優(yōu)選約56％(w/w)的至少一種C2-C6醇。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，所述C2-C6醇選自下組乙醇、丙-1-醇和丙-2-醇，及其混合物。優(yōu)選地，所述C2-C6醇是乙醇。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，所述藥物組合物包含0.1到5.0％(w/w)，優(yōu)選0.15到4.5％(w/w)，更優(yōu)選0.2到4.0％(w/w)，更優(yōu)選0.25到3.5％(w/w)，更優(yōu)選0.3到3.0％(w/w)，更優(yōu)選0.4到2.5％(w/w)，更優(yōu)選0.5到2.0％(w/w)，最優(yōu)選約0.5到1.0％(w/w)的至少一種膠凝劑。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，所述膠凝劑選自下組基于丙烯酸的聚合物，包括纖維素，包括纖維素酯和衍生物(纖維素衍生物例如是乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥乙基纖維素、羥丙基甲基纖維素(HPMC)、羧甲基纖維素(CMC)等等)；Carbomers例如Carbopol聚合物，例如Carbopol980或940、981或941、1382或1382、5984、2984、934或934P、Pemulen TR1或TR2、Ultrez、Synthalen CR等等；poloxamines，泊洛沙姆或聚乙烯-聚丙烯共聚物，例如Lutrol68或127級(jí)，poloxamines或其他膠凝劑，例如脫乙酰殼聚糖、低分子右旋糖酐、果膠和天然膠，及其混合物。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，所述藥物組合物包括0.1到5.0％(w/w)，優(yōu)選0.15到4.5％(w/w)，更優(yōu)選0.2到4.0％(w/w)，更優(yōu)選0.3到3.5％(w/w)，更優(yōu)選0.4到3.0％(w/w)，更優(yōu)選0.5到2.5％(w/w)，最優(yōu)選0.5到2.0％(w/w)的丙二醇。根據(jù)本發(fā)明，有利地，對(duì)于本發(fā)明的睪丸激素含量和組分來說，發(fā)現(xiàn)丙二醇是一種非常有效和相容的滲透促進(jìn)劑。另外，根據(jù)本發(fā)明，丙二醇的使用導(dǎo)致藥物組合物具有非常有吸引力的外觀。本發(fā)明的藥物組合物是非常透明的，視覺上吸引人的，且具有非常舒適的質(zhì)地，這改善了患者的使用。另外，本發(fā)明的藥物組合物需要低級(jí)醇含量。此外，本發(fā)明的組合物是很穩(wěn)定的，且丙二醇被證明是與標(biāo)準(zhǔn)中和劑例如三乙醇胺相容的。本發(fā)明組合物可包含幾種滲透促進(jìn)劑。
任選地，根據(jù)本發(fā)明，所述藥物組合物還包含水。
在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供一種藥物組合物，包含-0.5到5.0％(w/w)的睪丸激素，-40.0到75.0％(w/w)的至少一種C2-C6醇，-0.1到5.0％(w/w)的至少一種膠凝劑，-0.1到5.0％(w/w)的丙二醇，-任選地，水。
在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供一種藥物組合物，包含-0.75到1.25％(w/w)的睪丸激素，-50.0到70.0％(w/w)的至少一種C2-C6醇，-0.1到4.0％(w/w)的至少一種膠凝劑，-0.2到4.0％(w/w)的丙二醇，-任選地，水。
在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供一種藥物組合物，包含-0.8到1.2％(w/w)的睪丸激素，
-50.0到70.0％(w/w)的至少一種C2-C6醇，-0.1到3.0％(w/w)的至少一種膠凝劑，-0.3到3.0％(w/w)的丙二醇，-任選地，水。
在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供一種藥物組合物，包含-0.9到1.1％(w/w)的睪丸激素，-50.0到70.0％(w/w)的至少一種C2-C6醇，-0.1到2.5％(w/w)的至少一種膠凝劑，-0.4到2.5％(w/w)的丙二醇，-任選地，水。
在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供一種藥物組合物，包含-約1.0％(w/w)的睪丸激素，-50.0到70.0％(w/w)的至少一種C2-C6醇，-0.1到2.5％(w/w)的至少一種膠凝劑，-0.4到2.5％(w/w)的丙二醇，-任選地，水。
在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供一種藥物組合物，包含-1.0到2.0％(w/w)的睪丸激素，-50.0到75.0％(w/w)的至少一種C2-C6醇，-0.1到5.0％(w/w)的至少一種膠凝劑，-0.2到5.0％(w/w)的丙二醇，-任選地，水。
在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供一種藥物組合物，包含-1.25到1.75％(w/w)的睪丸激素，-50.0到70.0％(w/w)的至少一種C2-C6醇，-0.1到4.0％(w/w)的至少一種膠凝劑，-0.2到4.0％(w/w)的丙二醇，-任選地，水。
在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供一種藥物組合物，包含-1.4到1.6％(w/w)的睪丸激素，
-50.0到70.0％(w/w)的至少一種C2-C6醇，-0.1到3.0％(w/w)的至少一種膠凝劑，-0.3到3.0％(w/w)的丙二醇，-任選地，水。
在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供一種藥物組合物，包含-約1.5％(w/w)的睪丸激素，-50.0到70.0％(w/w)的至少一種C2-C6醇，-0.1到2.5％(w/w)的至少一種膠凝劑，-0.4到2.5％(w/w)的丙二醇，-任選地，水。
所述藥物組合物適于睪丸激素的控制透皮釋放。因此，所述藥物組合物可由患者他/她自己給藥，而不需要在給藥過程中存在醫(yī)生。而且，該給藥不需要外科手術(shù)或注射。
根據(jù)本發(fā)明，有利地，丙二醇作為睪丸激素的非常有效的滲透促進(jìn)劑，特別是與本發(fā)明組合物的睪丸激素劑量和膠凝劑結(jié)合。
另一方面，本發(fā)明的藥物組合物還包含一種堿。有利的，所述堿是藥學(xué)上可接受的，并優(yōu)選選自下組三乙醇胺、氫氧化鈉、氫氧化銨、氫氧化鉀、精氨酸、氨基甲基丙醇或氨基丁三醇(tromethamine)、及其混合物。當(dāng)所述藥物組合物的pH對(duì)于透皮給藥不是最佳的時(shí)，例如，其中所述膠凝劑包含至少一種基于丙烯酸的聚合物，所述堿用于中和在局部應(yīng)用到人類皮膚上的所述藥物組合物。此外，在中和電荷以及聚合物鹽的形成過程中，所述堿(中和劑)允許聚合物鏈的最優(yōu)溶脹。特別是，當(dāng)所述膠凝劑包含基于丙烯酸的聚合物時(shí)，所述堿優(yōu)選包含三乙醇胺。它還允許本發(fā)明的藥物組合物實(shí)現(xiàn)最優(yōu)粘度。本領(lǐng)域的技術(shù)人員知道如何選擇組合物中適量的所述堿，特別是根據(jù)存在于其中的所述膠凝劑的性質(zhì)，和該組合物的酒精含量，以達(dá)到該組合物所需的最后的pH。例如，使用卡波姆和/或存在高的醇含量時(shí)，可以使用氨基丁三醇和/或NaOH作為堿，所選擇的用量為可以達(dá)到組合物所需的最后的pH。或者，在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的藥物組合物包含0.1到5.0％(w/w)，優(yōu)選0.1 5到4.5％(w/w)，更優(yōu)選0.2到4.0％(w/w)，更優(yōu)選0.25到3.5％(w/w)，更優(yōu)選0.3到3.0％(w/w)，更優(yōu)選0.4到2.5％(w/w)，更優(yōu)選0.5到2.0％(w/w)，最優(yōu)選0.5到1.0％(w/w)的三乙醇胺。
優(yōu)選地，本發(fā)明的藥物組合物的pH為2到9，優(yōu)選為3到8，更優(yōu)選為3到7。根據(jù)本發(fā)明的另一方面，所述藥物組合物還包含十四烷酸異丙酯。有利地，根據(jù)本發(fā)明，出乎意料地顯示，當(dāng)十四烷酸異丙酯與丙二醇聯(lián)用，作為另一個(gè)滲透促進(jìn)劑時(shí)，十四烷酸異丙酯的添加導(dǎo)致顯著改善的結(jié)果。優(yōu)選地，所述藥物組合物包含0.05到5.0％(w/w)，更優(yōu)選0.1到4.0％(w/w)，更優(yōu)選0.15到3.0％(w/w)，更優(yōu)選0.25到2.5％(w/w)，更優(yōu)選0.25到2.0％(w/w)，更優(yōu)選0.25到1.5％(w/w)，更優(yōu)選0.25到1.0％(w/w)，最優(yōu)選0.5到0.75％(w/w)的十四烷酸異丙酯。
因此，在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供一種藥物組合物，含有-0.5到5.0％(w/w)的睪丸激素，-40.0到75.0％(w/w)的至少一種C2-C6醇，-0.1到5.0％(w/w)的至少一種膠凝劑，-0.1到5.0％(w/w)的丙二醇，-0.1到4.0％(w/w)的十四烷酸異丙酯，-任選地，水。
在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供一種藥物組合物，含有-0.75到1.25％(w/w)的睪丸激素，-50.0到70.0％(w/w)的至少一種C2-C6醇，-0.1到4.0％(w/w)的至少一種膠凝劑，-0.2到4.0％(w/w)的丙二醇，-0.15到2.0％(w/w)的十四烷酸異丙酯，-任選地，水。
在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供一種藥物組合物，含有-0.8到1.2％(w/w)的睪丸激素，-50.0到70.0％(w/w)的至少一種C2-C6醇，-0.1到3.0％(w/w)的至少一種膠凝劑，
-0.3到3.0％(w/w)的丙二醇，-0.35到1.5％(w/w)的十四烷酸異丙酯，-任選地，水。
在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供一種藥物組合物，含有-0.9到1.1％(w/w)的睪丸激素，-50.0到70.0％(w/w)的至少一種C2-C6醇，-0.1到2.5％(w/w)的至少一種膠凝劑，-0.4到2.5％(w/w)的丙二醇，-0.4到1.0％(w/w)的十四烷酸異丙酯，-任選地，水。
在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供一種藥物組合物，含有-約1.0％(w/w)的睪丸激素，-50.0到70.0％(w/w)的至少一種C2-C6醇，-0.1到2.5％(w/w)的至少一種膠凝劑，-0.4到2.5％(w/w)的丙二醇，-約0.5％(w/w)的十四烷酸異丙酯，-任選地，水。
在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供一種藥物組合物，含有-1.0到2.0％(w/w)的睪丸激素，-50.0到70.0％(w/w)的至少一種C2-C6醇，-0.1到5.0％(w/w)的至少一種膠凝劑，-0.1到5.0％(w/w)的丙二醇，-0.1到4.0％(w/w)的十四烷酸異丙酯，-任選地，水。
在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供一種藥物組合物，含有-1.25到1.75％(w/w)的睪丸激素，-50.0到70.0％(w/w)的至少一種C2-C6醇，-0.1到4.0％(w/w)的至少一種膠凝劑，-0.2到4.0％(w/w)的丙二醇，-0.15到2.0％(w/w)的十四烷酸異丙酯，
-任選地，水。
在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供一種藥物組合物，含有-1.4到1.6％(w/w)的睪丸激素，-50.0到70.0％(w/w)的至少一種C2-C6醇，-0.1到3.0％(w/w)的至少一種膠凝劑，-0.3到3.0％(w/w)的丙二醇，-0.35到1.5％(w/w)的十四烷酸異丙酯，-任選地，水。
在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供一種藥物組合物，含有-約1.5％(w/w)的睪丸激素，-50.0到70.0％(w/w)的至少一種C2-C6醇，-0.1到2.5％(w/w)的至少一種膠凝劑，-0.4到2.5％(w/w)的丙二醇，-0.4到1.0％(w/w)的十四烷酸異丙酯，-任選地，水。
另外，所述藥物組合物可以包含常用的藥物添加劑，包括鹽、軟化劑、穩(wěn)定劑、抗菌劑、香精、和/或推進(jìn)劑。所述藥物組合物還可以包括至少一種其他活性成分，例如另一種激素。
本發(fā)明還提供可用于經(jīng)皮或透皮釋放的凝膠，該凝膠包含根據(jù)本發(fā)明的所述藥物組合物。因此，本發(fā)明還涉及一種含睪丸激素的水-醇凝膠。
根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，本發(fā)明提供一種劑量包裝、單劑量包裝或多劑量包裝，該劑量包裝包含所述藥物組合物或所述水醇凝膠。有利地，所述藥物組合物的這種狀態(tài)使得患者更易于應(yīng)用。因此，這些包裝形式可以反映應(yīng)用的時(shí)間表，例如每日或每周給藥。
根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方式，本發(fā)明提供一種分配器，例如帶手泵或閥門，該分配器包含所述的藥物組合物或所述的水醇凝膠。這種分配器允許給藥劑量的靈活性，劑量作為需要應(yīng)用的組合物量的函數(shù)。
根據(jù)一種實(shí)施方式，所述包裝或分配器可以附有藥物使用方法的說明書。
本發(fā)明的藥物組合物、凝膠、包裝和容器用于治療睪丸激素不足，和治療和/或預(yù)防睪丸激素不足相關(guān)病癥和/或紊亂。
本發(fā)明所使用的術(shù)語“治療”或“治療”指任何哺乳動(dòng)物的病癥、紊亂、或與抑郁癥有關(guān)的疾病的治療，并包括但不限于，預(yù)防該病癥、紊亂、或一患者出現(xiàn)的疾病，該患者可能易于患該病癥、紊亂、或疾病，但是還沒有診斷為患有該病癥、紊亂或疾??；抑制該病癥、紊亂、或疾病，例如，阻止該病癥、紊亂、或疾病的發(fā)展；減輕該病癥、紊亂、或疾病，例如，促使該病癥、紊亂、或疾病的衰退；或減輕由疾病或紊亂所引起的癥狀，例如，停止該疾病或紊亂的癥狀。
與病癥、紊亂、或疾病有關(guān)的術(shù)語“預(yù)防”或“預(yù)防”是指，如果沒有人出現(xiàn)，就不存在病癥、紊亂、或疾病發(fā)展，或者，如果已經(jīng)有該病癥、紊亂、或疾病的存在，則沒有進(jìn)一步的病癥、紊亂、或疾病發(fā)展。
本發(fā)明所使用的“睪丸激素不足”是指與同歲的健康的患者的中值血清水平相比，患者體內(nèi)游離睪丸激素的較低的血清水平。例如，正常循環(huán)女性每天產(chǎn)生約300μg睪丸激素。它們的總血清睪丸激素水平通常的范圍為約20ng/dL到約80ng/dL，平均值為約40ng/dL。在健康年輕女性體內(nèi)，例如，平均游離睪丸激素水平通常是約3.6pg/mL。然而，幾個(gè)因素可以影響總睪丸激素血清水平和游離睪丸激素血清水平兩者。例如，在正常的排卵女性體內(nèi)，在月經(jīng)周期的中間的三分之一時(shí)期內(nèi)，血漿睪丸激素水平存在一小的但是明顯的增加。然而，在黃體期和卵泡期，平均睪丸激素水平(1.2nmol/L或33ng/dL)和平均游離的睪丸激素水平(12.8pmo/L或3.6pg/mL)沒有顯著的不同。另外，在30歲之后，睪丸激素的產(chǎn)生量連續(xù)下降，因此在一位60歲女性體內(nèi)，血清睪丸激素水平僅有年輕的30歲女性的50％水平。盡管游離睪丸激素的百分比通常不隨年齡而變化，已經(jīng)觀察到游離睪丸激素的絕對(duì)下降。這種下降不是在絕經(jīng)期驟然發(fā)生，相反，它作為與年齡相關(guān)的腎上腺和卵巢雄激素產(chǎn)生的減少的結(jié)果，是逐漸和連續(xù)地發(fā)生的。因此，在接近絕經(jīng)前的數(shù)年內(nèi)，女性開始遭遇與絕經(jīng)有關(guān)的癥狀。繼絕經(jīng)之后，睪丸激素的下降由卵巢衰竭、腎分泌減少和外部轉(zhuǎn)化的組合而產(chǎn)生。而且，例如，在卵巢切除之后，睪丸激素濃度減少約50％。睪丸激素不足的診斷為醫(yī)學(xué)相關(guān)領(lǐng)域開業(yè)的一般水平的醫(yī)生所知。
本發(fā)明的藥物組合物和凝膠還用于治療許多男性或女性的與睪丸激素不足有關(guān)的生理性和心理上的參數(shù)和/或病癥。例如，本發(fā)明的藥物組合物和凝膠用于-提高性欲和改善性功能和/或治療性功能障礙；校正性腺機(jī)能減退；-增加骨礦物密度和相關(guān)標(biāo)識(shí)物，增加瘦人的體重和減少胖人的體重，改善肌塊和性能；-校正葡萄糖水平；改善糖尿病性視網(wǎng)膜病以及降低糖尿病患者的胰島素需求；治療、預(yù)防或減少白內(nèi)障發(fā)?。?治療、預(yù)防或減少心血管疾病的發(fā)病，包括校正高血壓，和治療肥胖病；校正膽固醇含量；校正患者的異常心電圖和治療、預(yù)防或減少血管擴(kuò)張癥狀；-預(yù)防人類免疫缺陷性病毒消耗綜合征；-預(yù)防骨質(zhì)疏松癥、骨質(zhì)減少、陰道干澀，和使陰道壁變薄；減輕絕經(jīng)期癥狀和潮熱；治療經(jīng)前期綜合征；-治療、預(yù)防或減少阿爾茨海默病、癡呆病的發(fā)??；-改善認(rèn)知，改善情緒和自尊，治療和/或預(yù)防抑郁癥；治療、預(yù)防或減少認(rèn)知功能紊亂；-治療自身免疫性疾病。
本發(fā)明的藥物組合物和凝膠還可以用于“聯(lián)合療法”，與另一種激素或類固醇，或能增加患者的睪丸激素水平的藥劑，或一種雌激素，或另一種藥劑例如一種抗抑郁藥合用。
根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明還涉及制備藥物組合物的方法，該藥物組合物例如凝膠或溶液形式。
一方面，所述方法包含攪拌下，在至少一種C2-C6醇和至少一種滲透促進(jìn)劑(例如丙二醇，和/或十四烷酸異丙酯)的溶劑中溶解睪丸激素的步驟。
另一方面，所述方法包含攪拌下往所得混合物中加水的步驟。
當(dāng)需要凝膠劑時(shí)，則將至少一種膠凝劑，例如Carbopol在攪拌下加入混合物中。
任選地，將一種堿/中和劑例如三乙醇胺在攪拌下加入混合物中。
另一方面，本發(fā)明涉及制備根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物或凝膠的方法，該方法包括下列步驟-制備一種混合物，該混合物包含至少一種C2-C6醇，至少一種滲透促進(jìn)劑(例如丙二醇，和/或十四烷酸異丙酯)和睪丸激素；-任選添加水，并攪拌，-任選往該混合物中添加膠凝劑，并攪拌；-任選添加堿，并再次攪拌。
一方面，本發(fā)明還涉及根據(jù)本發(fā)明的凝膠或溶液在制備治療與雄激素/睪丸激素不足有關(guān)的生理病癥的用于透皮應(yīng)用的藥物產(chǎn)品中的應(yīng)用。
另一方面，本發(fā)明涉及一種治療方法。
在一個(gè)實(shí)施方式中，所述方法包含將睪丸激素給藥予需要它的患者的步驟。
根據(jù)一個(gè)方面，本發(fā)明的藥物組合物或凝膠涂敷在健康皮膚上，例如涂敷在肩部，或涂敷在手臂、股或腿的外部。
為測(cè)量和確定要遞送給需要它的患者的睪丸激素的量，使用標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)技術(shù)測(cè)定血清睪丸激素濃度。
由此，本領(lǐng)域的技術(shù)人員將知道如何根據(jù)所述藥物組合物的準(zhǔn)確的睪丸激素劑量，來確定需要給藥的組合物的量。
一般而言，根據(jù)本發(fā)明的凝膠或溶液形式的藥物組合物的常用的日劑量為每天使用制劑的2.5g到5g。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)將從以下實(shí)施例中顯現(xiàn)，所述如下實(shí)施例僅是舉例說明而非限制性的。本領(lǐng)域的技術(shù)人員將理解，本發(fā)明可以結(jié)合任何數(shù)量的上述優(yōu)選特征。
所有這里提及的文獻(xiàn)全部在此引入作為參考。這里不再介紹本發(fā)明的其他實(shí)施方式，這些實(shí)施方式對(duì)本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說是顯而易見的，因此也落在本發(fā)明的范圍和精神之內(nèi)。除非另有說明，本發(fā)明的實(shí)施將使用藥學(xué)和藥劑學(xué)的常規(guī)方法，其屬于現(xiàn)有技術(shù)。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1使用放射性標(biāo)記(14C)睪丸激素和液體閃爍滴定，在動(dòng)物和人類皮膚上進(jìn)行睪丸激素凝膠劑的透皮釋放研究。這些研究給出動(dòng)力學(xué)參數(shù)(在24小時(shí)之后的釋放量和流量)。研究了如下兩個(gè)方面-物理-化學(xué)研究(睪丸激素溶解度和凝膠粘度)-透皮釋放(睪丸激素濃度、膠凝劑性質(zhì)、滲透促進(jìn)劑的存在的影響)原料和方法1.原料化學(xué)制品睪丸激素(Fluka)14C睪丸激素(Amersham)膠凝劑Carbopol934P(Carb.934P)(Polyplastic)Carbopol980(Carb.980)(Lot 4419，Laboratoires Besins Iscovesco)Klucel中和劑三乙醇胺(lot 4343，Laboratoires Besins Iscovesco)滲透促進(jìn)劑Transcutanol(Gattefosse)油酸(OA)(Prolabo)丙二醇(PG)(Gattefosse)雙壬酸丙二醇酯(PGDP)(Gattefosse)動(dòng)物皮膚模型雄性裸鼠，5周人類皮膚模型腹部活組織，白種女性，35歲
2.放射性標(biāo)記的睪丸激素凝膠的制備在需要的水量中，使膠凝劑(聚合物)溶脹過夜。將標(biāo)記和非-標(biāo)記的睪丸激素(可與滲透促進(jìn)劑一起)溶解在乙醇里，混合水相和醇相，然后與三乙醇胺中和。用刮刀進(jìn)行混合，直至達(dá)到完美的均勻。評(píng)估十七個(gè)制劑的透皮釋放。下表給出了其組分(以基于制劑總重量的％重量)。制劑13和14相當(dāng)于非凝膠溶液。
表1

(Carb.＝Carbopol)
3.透皮動(dòng)力學(xué)方案3.1透皮試樣盒使用含有兩個(gè)不相等的隔室的靜態(tài)流動(dòng)試樣盒(

圖1)上部的圓柱狀(截面2.54cm2)供體隔室1允許制劑(溶液或局部形式)涂敷到皮膚2上。該上部的隔室1用金屬環(huán)安裝到下隔室4上。
下部受體隔室4(平均體積10mL)也具有一上部的2.54cm2的開口。一配備有針和導(dǎo)管系統(tǒng)的側(cè)向刷辮5可以取樣。用一磁性攪拌器3實(shí)現(xiàn)該下隔室中介質(zhì)的均化。(參見圖1)3.2生物膜動(dòng)物皮膚在腹部水平取樣雄性裸鼠皮膚(IOPS老鼠，5周)的皮膚活體組織。去除位于內(nèi)表面的脂肪組織，將皮膚切成面積大于2.54cm2的樣本。每個(gè)樣本粘到下隔室上，皮膚外表面朝上。
人類皮膚在從一個(gè)35歲的白種女性腹部水平取樣的外科塑料上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。取樣之后立即使用樣本并切成約250μm的厚度。
3.3研究方案透皮試樣盒的兩個(gè)隔室1、4與皮膚片段2安裝在一起。接受隔室4充滿著精確測(cè)定體積的0.5％的白蛋白溶液。然后將試樣盒置于攪拌平臺(tái)上的37℃的恒溫槽內(nèi)15小時(shí)，以達(dá)到皮膚和接受介質(zhì)之間的平衡。
將制劑涂敷到皮膚2上后開始動(dòng)力學(xué)。涂敷約20mg到2.54cm2的皮膚上。在24小時(shí)內(nèi)，在平均間隔的時(shí)點(diǎn)，將2mL樣本從接受隔室4中取出，并將2mL新鮮的白蛋白溶液立即加到隔室中，以使其體積保持恒定。每一制劑使用5個(gè)透皮試驗(yàn)池。低溫儲(chǔ)藏之后，通過液體閃爍滴定樣本。
4.14C睪丸激素的滴定將樣本分成兩份1mL，每份加入4mL閃爍液(Pico Fluor 40)，測(cè)量時(shí)間是5分鐘。
然后，使用β分光光度儀，通過液體閃爍滴定樣本。對(duì)于閃爍，猝滅導(dǎo)致降低的檢測(cè)效率，這是精確評(píng)估建立的校準(zhǔn)曲線，稱為猝滅曲線。對(duì)于每個(gè)樣本，使用外標(biāo)準(zhǔn)源計(jì)算取決于猝滅的測(cè)定收率，并測(cè)定實(shí)際放射性。
結(jié)果1.睪丸激素溶解度37℃下，在密閉的Erlenmeyer中攪拌已知量的溶劑(2mL)。從已知量的睪丸激素開始，分批逐漸加入。稱重睪丸激素的余量，以確定Erlenmeyer中的量(通過差值)。
通過增量法測(cè)定睪丸激素在37℃的水/乙醇混合物和各種滲透促進(jìn)劑中的溶解度，滲透促進(jìn)劑例如丙二醇(PG)、油酸(OA)、雙壬酸酯丙二醇(PGDP)、乙二醇單乙基醚(transcutol)。
表2睪丸激素在各種溶媒中的溶解度

還評(píng)估了睪丸激素作為醇含量的函數(shù)的溶解度。
表3睪丸激素在水/乙醇混合物中的溶解度


參見圖2中的圖表2.凝膠粘度用Carri-Med控制壓力流變儀表現(xiàn)凝膠流變學(xué)的特征，測(cè)量幾何結(jié)構(gòu)平面/平面，直徑2cm，間隙1mm，溫度20℃。
按照以下確定的剪應(yīng)周期繪制流變圖-上相剪應(yīng)力在2分鐘里從0增加到300N/m2；-平臺(tái)期恒應(yīng)力300N/m2，保持1分鐘；-下相剪應(yīng)力在2分鐘里從300N/m2減小到0。
所有凝膠具有剪切軟化(假塑料)性能，沒有任何滯后周期。
進(jìn)行兩種流變學(xué)研究-乙醇含量對(duì)Carbopol934凝膠粘度的影響，-聚合物含量對(duì)Carbopol980凝膠粘度的影響。
2.1Carbopol934P水醇凝膠粘度通過將95％乙醇的含量從50％變化到70％，來研究乙醇含量對(duì)Carbopol水醇凝膠的影響。
表4

55％以上的乙醇，粘度較小，且有著與乙醇含量相關(guān)的強(qiáng)烈變化。對(duì)于50％乙醇，粘度增大。
2.2Carbopol980凝膠粘度通過將Carbopol980的含量從0.3％變化到0.70％，來研究聚合物含量對(duì)含40％乙醇的水醇凝膠的影響。
在300N/m2應(yīng)力的平臺(tái)期下1分鐘，測(cè)量粘度。
表5

3.睪丸激素制劑在大鼠皮膚上的透皮性在大鼠皮膚上體外評(píng)估表1中制劑的透皮性。由于異質(zhì)性(相分離)，不能評(píng)估制劑25。下表給出了在24h時(shí)的釋放量和釋放速率的結(jié)果。
表6


制劑11-27涂敷8mg/cm24.睪丸激素在人類皮膚上的透皮性制劑26和27在人類皮膚上進(jìn)行評(píng)估，同時(shí)制劑15作為參考。祥細(xì)結(jié)果如下制劑265個(gè)試驗(yàn)池的透皮參數(shù)平均值

圖3給出了平均動(dòng)力學(xué)曲線平均流量0.26μg/cm2.h制劑275個(gè)試驗(yàn)池的透皮參數(shù)平均值


圖4給出了平均動(dòng)力學(xué)曲線平均流量0.39μg/cm2.h制劑15(參考)5個(gè)試驗(yàn)池的透皮參數(shù)平均值

圖5給出了平均動(dòng)力學(xué)曲線平均流量0.15μg/cm2.h實(shí)施例2原料和方法1.原料[1，2，6，7-3H]睪丸激素(Amersham實(shí)驗(yàn)室)MW295，1mCi/mL(37MBq/mL)的乙醇溶液；比活性99Ci/mmol(3.66TBq/mmol)，即336mCi/mg(批號(hào)t18)。
無水乙醇Carlo Erba批號(hào)V4N051154N由Besins實(shí)驗(yàn)室控制的原料Carbopol980批號(hào)92010/4420Carbopol934批號(hào) /3898睪丸激素 批號(hào)92039/4461十四烷酸異丙酯 批號(hào)91169/5781三乙醇胺 批號(hào)9304020/5721丙二醇(PG)
涂敷到皮膚上的制劑(100g最后制劑重)

制劑如下制備制劑1如下制備1g放射性標(biāo)記的凝膠。
-將100μL(100μCi)放射性注記的睪丸激素溶液(3H)干燥，并與下列物質(zhì)再懸浮-595mg溶液，該溶液包含57g無水乙醇中的2.5g睪丸激素，-391.5mg基質(zhì)凝膠，由1gCarbopol934在38.15g水中溶脹所得；在完全溶脹后且在使用前，該粘液用超-turax均質(zhì)化幾秒鐘。
-13.5mgTEA。
制劑的放射性濃度100μCi/g凝膠即1.77cm2、8mg(約10μL)的每個(gè)試驗(yàn)池裝入0.8μCi和200μg睪丸激素制劑2根據(jù)如下方案制備1g放射性標(biāo)記的凝膠。
-將100μL(100μCi)放射性注記的睪丸激素溶液(3H)干燥，并與下列物質(zhì)再懸浮-595mg溶液，該溶液包含58g無水乙醇中的1g睪丸激素和0.5gPG，
-393mg基質(zhì)凝膠，由0.6gCarbopol980在38.7g水中溶脹所得；在完全溶脹后且在使用前，該粘液用超-turax均質(zhì)化幾秒鐘。
-半稀釋于水中的12mgTEA。
制劑的放射性濃度100μCi/g凝膠即8mg(約10μL)的每個(gè)試驗(yàn)池中裝入0.8μCi和80μg睪丸激素制劑3根據(jù)如下方案制備1g放射性標(biāo)記的凝膠。
-將100μL(100μCi)放射性注記的睪丸激素溶液(3H)干燥，并與下列物質(zhì)再懸浮-595mg溶液，該溶液包含58g無水乙醇中的1g睪丸激素和0.5gPG，-389mg基質(zhì)凝膠，由0.8gCarbopol980在38.1g水中溶脹所得；在完全溶脹后且在使用前，該粘液用超-turax均質(zhì)化幾秒鐘。
-半稀釋于水中的16mgTEA。
制劑的放射性濃度100μCi/g凝膠即8mg(約10μL)的每個(gè)試驗(yàn)池中裝入0.8μCi和80μg睪丸激素制劑4根據(jù)如下方案制備1g放射性標(biāo)記的凝膠。
-將100μL(100μCi)放射性注記的睪丸激素溶液(3H)干燥，并與下列物質(zhì)再懸浮-685mg溶液，該溶液包含67g無水乙醇中的1g睪丸激素和0.5g十四烷酸異丙酯，-267.75mg基質(zhì)凝膠，由0.9gCarbopol980在25.875g水中溶脹所得；在完全溶脹后且在使用前，該粘液用超-turax均質(zhì)化幾秒鐘。
-47.25mgNaOH(0.1M)。
制劑的放射性濃度100μCi/g凝膠即8mg(約10μL)的每個(gè)試驗(yàn)池中裝入0.8μCi和80μg睪丸激素制劑5根據(jù)如下方案制備1g放射性標(biāo)記的凝膠。
-將100μL(100μCi)放射性注記的睪丸激素溶液(3H)干燥，并與下列物質(zhì)再懸浮-685mg溶液，該溶液包含67g無水乙醇中的1g睪丸激素和0.5g十四烷酸異丙酯，-305mg基質(zhì)凝膠，由0.5gCarbopol980在30g水中溶脹所得；在完全溶脹后且在使用前，該粘液用超-turax均質(zhì)化幾秒鐘。
-半稀釋于水中的10mgTEA。
制劑的放射性濃度100μCi/g凝膠即8mg(約10μL)的每個(gè)試驗(yàn)池中裝入0.8μCi和80μg睪丸激素2.方法體外皮膚吸收原理在置于靜態(tài)擴(kuò)散池(Franz池)中的人類腹側(cè)部皮區(qū)活組織切片上定量研究體外透皮吸收，其允許皮膚與存活液(受體液)接觸，在存活液中發(fā)生透皮吸收。
將一塊皮膚活組織切片水平保持在池的兩部分之間，因此限定了兩個(gè)隔室-一個(gè)表皮隔室由玻璃汽缸組成，其精確確定的面積為1.77cm2，置于皮膚的上側(cè)；-另一個(gè)隔室，應(yīng)用于外皮下表面的皮膚，包含一個(gè)具有固定體積且?guī)в幸粋€(gè)側(cè)向收集孔的儲(chǔ)庫。
這兩個(gè)組件通過一個(gè)夾子組裝。
下隔室(皮膚的)充滿著存活液，存活液由9g/L的氯化鈉溶液組成，并以15g/L的牛血清清蛋白補(bǔ)充。在每一時(shí)間點(diǎn)，存活液通過側(cè)向收集孔全部取出，并用新鮮液體替代。
池的下部調(diào)節(jié)在恒溫37℃。通過攪拌(磁性攪拌器)保持受體液中溫度和含量的均質(zhì)。
上部(表皮隔室)朝外打開，因此將皮膚表面暴露到實(shí)驗(yàn)室的空氣中。
人類腹部皮膚活組織切片的制備這些樣本來自整形外科的白種供體者的人類腹部皮膚。使用前，將皮膚保持在-20℃。用解剖刀去除粘附著的皮下脂肪，并用皮刀將皮膚切成約0.5mm的厚度。對(duì)于每個(gè)試驗(yàn)，各種皮膚樣本等同分布在所有批號(hào)之間。
一般方案Franz池通常在裝載要研究的制劑前一天安裝。表皮隔室與實(shí)驗(yàn)室的空氣接觸，皮膚隔室調(diào)節(jié)到恒溫37℃，且皮膚與變性的生理血清接觸約17小時(shí)。在這些條件下，皮膚是高度水合的。
用微量吸液管將10μL溶液(約8μL，約8μCi)吸到由玻璃汽缸限定的表皮的整個(gè)表面上。在時(shí)間點(diǎn)2h、4h、6h、8h和24h，通過側(cè)向收集孔進(jìn)行包含于皮膚隔室中的液體的取樣。在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)，將存活液全部取出，用新鮮液體替換。在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，用200L的根據(jù)以下方案的各種溶劑洗滌經(jīng)處理的皮膚表面-第1次洗滌Cetavlon/水(1/9，v/v)；-第2次洗滌水；-第3次洗滌Cetavlon/水(1/9，v/v)；-第4次洗滌水；-第5次洗滌水。
然后用Q-tip擦拭應(yīng)用區(qū)域。然后用解剖刀機(jī)械分離表皮和真皮，并分別溶解在1mL和3mLSoluene(Packard)里。
放射性檢測(cè)使用微粒計(jì)數(shù)Packard-tricarb 4530通過液體閃爍進(jìn)行檢測(cè)。
放射性樣品的制備將從擴(kuò)散池的下隔室中取樣的存活液直接加入15mL的液體閃爍雞尾酒(Picofluor 40R，Packard)中用于放射性檢測(cè)。
將洗脫液和Q-tips引入含有約30mL95°乙醇的小瓶中并精確稱重。在4℃下培育過夜后，按照用于存活液的相同方法測(cè)定來自該稀釋液的精確稱重的試樣量的放射性。
表皮和真皮首先必須溶解在有機(jī)強(qiáng)堿里。通過在37℃下與Soluene 350Packard(每100mg組織1mL)接觸24h，該Soluene350Packard加入15mL液體閃爍雞尾酒(Hionic Fluor 30，Packard)，它們?nèi)芙馊缓笥?jì)量。
放射性檢測(cè)就所涉及的猝滅而言，通過外校準(zhǔn)法得到的計(jì)量速率是正確的，以得到說明每個(gè)樣本的實(shí)際活性的每分鐘衰變數(shù)(dpm)?？鄢齝pm中每個(gè)樣本的基數(shù)。每一閃爍液確定了特定的猝滅曲線。
以相對(duì)于給藥量的樣品中發(fā)現(xiàn)的物質(zhì)的重量或百分比表示結(jié)果，該結(jié)果由適當(dāng)稀釋校準(zhǔn)的計(jì)量速度確定。
透皮吸收透皮吸收的強(qiáng)度通過計(jì)算裝載量(Qi)作為時(shí)間函數(shù)的吸收百分比(％)來評(píng)估％＝(Qt/Qi)×100其中Qt是時(shí)間點(diǎn)t的吸收量。
還測(cè)定了每一時(shí)間間隔的平均流量和吸收量，分別以ng/cm2/h和ng表示。
平均結(jié)果相當(dāng)于6-8次實(shí)驗(yàn)測(cè)定，并和標(biāo)準(zhǔn)偏差(Sd)相關(guān)。
通過方差分析進(jìn)行平均結(jié)果的對(duì)比。
3.結(jié)果以百分比表示的濃度為100g最后制劑的物質(zhì)重量。
體外Franz池中睪丸激素透皮(累積值)平均值+/-Sd作為時(shí)間的函數(shù)


@不同于參照(方差分析，F(xiàn)isher檢驗(yàn)顯著差異，p＜5％)*不同于參照(變量分析；Fisher和ScheffeF檢驗(yàn)，顯著差異，p＜5％)回收量(累積值)



E表皮，D真皮，C池，W洗脫液，T總數(shù)@不同于參照(方差分析，F(xiàn)isher測(cè)試顯著差異，p＜5％)°不同于制劑2、3和4(變量分析；Fisher檢驗(yàn)，p＜5％)*不同于參照(變量分析；Fisher和ScheffeF檢驗(yàn)，顯著差異，p＜5％)體外Franz池中睪丸激素透皮(非累積值)平均值+/-Sd作為時(shí)間的函數(shù)



@不同于參照(方差分析，F(xiàn)isher檢驗(yàn)顯著差異，p＜5％)*不同于參照(變量分析；Fisher和Scheffe F檢驗(yàn)，顯著差異，p＜5％)
權(quán)利要求
1.藥物組合物，包含-0.5到5.0％(w/w)的睪丸激素，-40.0到75.0％(w/w)的至少一種C2-C6醇，-0.1到5.0％(w/w)的至少一種膠凝劑，-0.1到5.0％(w/w)的丙二醇，-任選地，水。
2.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中所述的C2-C6醇選自下組乙醇、丙-1-醇和丙-2-醇，及其混合物。
3.如權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物，其中所述的膠凝劑選自下組基于丙烯酸的聚合物、羧甲基纖維素、羥丙基纖維素、羥乙基纖維素、纖維素，及其混合物。
4.如權(quán)利要求1到3中任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其中所述的膠凝劑包含至少一種選自卡波姆的膠凝劑，例如Carbopol980、Carbopol934P、Carbopol1342、Carbopol1382及其混合物。
5.如權(quán)利要求1到4中任一項(xiàng)所述的藥物組合物，還包含堿，該堿優(yōu)選選自下組三乙醇胺、氫氧化鈉、氫氧化銨、氫氧化鉀、精氨酸、氨基甲基丙醇、氨基丁三醇、及其混合物。
6.如權(quán)利要求1到5中任一項(xiàng)所述的藥物組合物，還包含十四烷酸異丙酯。
7.用于透皮或經(jīng)皮釋放的凝膠，其包含權(quán)利要求1到6中任一項(xiàng)所述的藥物組合物。
8.包含權(quán)利要求1到6中任一項(xiàng)所述藥物組合物或權(quán)利要求7所述凝膠的劑量包裝、單劑量包裝或多劑量包裝。
9.分配器，例如帶有手泵，其包含權(quán)利要求1到6中任一項(xiàng)所述的藥物組合物或權(quán)利要求7所述的凝膠。
10.制備權(quán)利要求1到6中任一項(xiàng)所述藥物組合物或權(quán)利要求7所述凝膠的方法，包括下列步驟-制備混合物，該混合物包含至少一種C2-C6醇，至少一種滲透促進(jìn)劑和睪丸激素；-任選地添加水，并混合，-任選地往該混合物中添加膠凝劑，并混合；-任選地添加堿，并再次混合。
全文摘要
本發(fā)明涉及含睪丸激素的藥物組合物和凝膠，以及它們的使用方法。
文檔編號(hào)A61K31/568GK101018542SQ200580030119
公開日2007年8月15日 申請(qǐng)日期2005年9月7日 優(yōu)先權(quán)日2004年9月9日
發(fā)明者多米尼克·薩林－德魯安 申請(qǐng)人:法國(guó)法杏大藥廠