專利名稱：治療或預(yù)防的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明總地涉及用于預(yù)防和改善與神經(jīng)病相關(guān)的體征和癥狀的化合物。更具體說(shuō)，本發(fā)明涉及使用血管緊張素II受體2(AT2受體)拮抗劑治療、預(yù)防、逆轉(zhuǎn)神經(jīng)性疼痛和/或緩解其癥狀，神經(jīng)性疼痛包括脊椎動(dòng)物，尤其是人類對(duì)象的機(jī)械性痛覺(jué)過(guò)敏、熱或機(jī)械性異常性疼痛、糖尿病疼痛和牽扯痛。AT2受體拮抗劑可單獨(dú)或與其它化合物，如用于控制神經(jīng)病的化合物聯(lián)合提供。
背景技術(shù)：
周圍神經(jīng)系統(tǒng)或中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷后使周圍和/或中樞神經(jīng)系統(tǒng)敏感時(shí)，可能發(fā)生神經(jīng)性疼痛。與組織傷害引起的即發(fā)性疼痛(傷害性疼痛)相反，神經(jīng)性疼痛可能在外傷發(fā)生數(shù)天或數(shù)月后發(fā)生，常常為長(zhǎng)期或慢性疼痛。而且，神經(jīng)性疼痛可能自發(fā)發(fā)生或由通常不疼痛的刺激引起。神經(jīng)性疼痛的特征是感官過(guò)敏(對(duì)天然刺激的敏感性提高)、痛覺(jué)過(guò)敏(對(duì)疼痛異常敏感)、異常性疼痛(分布廣泛的壓痛，特征是對(duì)觸覺(jué)刺激過(guò)度敏感)和/或自發(fā)性灼痛。
神經(jīng)性疼痛的病因各種各樣，包括外傷和疾病。例如，腦或脊髓的外傷性神經(jīng)壓迫或壓傷和外傷性損傷是神經(jīng)性疼痛的常見(jiàn)原因。而且，外傷性神經(jīng)損傷也可引起神經(jīng)瘤形成，其中疼痛是由異常的神經(jīng)再生引起的。此外，當(dāng)腫瘤生長(zhǎng)壓迫相鄰神經(jīng)、腦或脊髓疼痛時(shí)引起癌癥相關(guān)性神經(jīng)性疼痛。神經(jīng)性疼痛也與全身性疾病如糖尿病、酒精中毒、帶狀皰疹、AIDS/HIV、梅毒和各種其它自身免疫病相關(guān)。
雖然有有效治療方案來(lái)治療傷害感受性疼痛，但神經(jīng)性疼痛常常對(duì)可用的藥物治療有抗性。此外，現(xiàn)有治療有嚴(yán)重的副作用，包括例如，認(rèn)知改變、鎮(zhèn)靜作用、惡心以及在麻醉藥的情況下產(chǎn)生耐受和依賴性?；加猩窠?jīng)性疼痛的許多患者是老年人，或者具有其它醫(yī)學(xué)病癥，這尤其限制了他們對(duì)與可用的藥物治療相關(guān)的副作用的耐受能力。
因此，需要提供一種能有效治療和/或預(yù)防與神經(jīng)性疼痛相關(guān)的疼痛癥狀并且不良副作用較少的藥物。
發(fā)明概述盡管在過(guò)去的15年中對(duì)血管緊張素II2型受體(AT2受體)的生物學(xué)作用進(jìn)行了深入研究，發(fā)表了2000篇以上論文，但仍然沒(méi)有明確證據(jù)證明該受體的治療應(yīng)用(參見(jiàn)例如，最近一篇綜述，Steckelings等，2005，Peptides 261401-1409)。然而令人驚訝的是，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，AT2受體拮抗劑能有效預(yù)防或減輕神經(jīng)病，包括原發(fā)性和繼發(fā)性神經(jīng)病的疼痛癥狀。因此，在一個(gè)方面，本發(fā)明提供了治療或預(yù)防對(duì)象的神經(jīng)病的方法。在一些實(shí)施方式中，通過(guò)給予對(duì)象有效量的AT2受體拮抗劑治療或預(yù)防神經(jīng)病。合適的AT2受體拮抗劑的非限制性例子包括小分子、核酸、肽、多肽、肽模擬物、糖、脂質(zhì)或其它有機(jī)(含碳)或無(wú)機(jī)分子，如本文進(jìn)一步所述。
以包含藥學(xué)上可接受的運(yùn)載體或稀釋劑的組合物形式適當(dāng)?shù)亟o予AT2受體拮抗劑?？赏ㄟ^(guò)注射、局部施用或口服途徑(包括持續(xù)釋放給藥模式)在一定時(shí)間內(nèi)給予一定量的所述組合物，給藥時(shí)間和給藥量應(yīng)能有效治療或預(yù)防神經(jīng)病。在一些實(shí)施方式中，由神經(jīng)的疾病產(chǎn)生神經(jīng)病(即原發(fā)性神經(jīng)病)。在其它實(shí)施方式中，由全身性疾病產(chǎn)生神經(jīng)病(即繼發(fā)性神經(jīng)病)。在特定實(shí)施方式中，神經(jīng)病是周圍神經(jīng)病，尤其在機(jī)械性神經(jīng)損傷或生化神經(jīng)損傷后，例如疼痛性糖尿病神經(jīng)病(PDN)或相關(guān)病癥。
按照本發(fā)明，AT2受體拮抗劑能預(yù)防或減輕神經(jīng)病相關(guān)性疼痛癥狀。因此，在另一方面，本發(fā)明提供了預(yù)防或減輕對(duì)象的神經(jīng)性疼痛，尤其是周圍神經(jīng)痛的方法。在一些實(shí)施方式中，通過(guò)給予對(duì)象有效量的AT2受體拮抗劑預(yù)防或減輕神經(jīng)性疼痛，所述AT2受體拮抗劑適合是包含藥學(xué)上可接受的運(yùn)載體或稀釋劑的組合物形式。
在一個(gè)相關(guān)方面，本發(fā)明提供了在對(duì)象，尤其是患有神經(jīng)病或處于發(fā)生神經(jīng)病風(fēng)險(xiǎn)中的對(duì)象中產(chǎn)生鎮(zhèn)痛作用的方法。這些方法通常包括給予對(duì)象有效量的AT2受體拮抗劑，所述拮抗劑適合是包含藥學(xué)上可接受的運(yùn)載體或稀釋劑的組合物形式。
在另一方面，本發(fā)明考慮了AT2受體拮抗劑用于制造在對(duì)象，尤其是患有神經(jīng)病或處于發(fā)生神經(jīng)病的風(fēng)險(xiǎn)中的對(duì)象中產(chǎn)生鎮(zhèn)痛作用的藥物的應(yīng)用。
任何AT2受體拮抗劑均可用于本發(fā)明組合物和方法。在一些實(shí)施方式中，AT2受體拮抗劑選自式(I)代表的化合物或其藥學(xué)相容性鹽 式中
R1和R2獨(dú)立地選自H、芐基、取代的芐基、苯基、取代的苯基、C1-6烷基、取代的C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、取代的C3-6環(huán)烷基或雜芳基，限制條件是R1和R2不同時(shí)為氫，R4選自羧酸酯、羧酸、硫酸酯、磷酸酯、磺酰胺、磷酰胺或酰胺，X選自CH、氮、硫或氧，限制條件是當(dāng)R4是硫或氧時(shí)，R1或R2之一不存在，Y選自硫、氧或N-RN，式中RN選自H、C1-6烷基、取代的C1-6烷基、芳基、取代的芳基、芐基、取代的芐基、C1-4烷基芳基、取代的C1-4烷基芳基、OH或NH2，G是五元或六元、同芳香性或不飽和、取代或未取代的雜環(huán)，包括但不限于以下環(huán)系統(tǒng) 式中符號(hào)‘*’表示該鍵為稠合環(huán)‘A’和‘G’之間共用，R5選自H、C1-6烷基、苯基、取代的苯基、取代的C1-6烷基、C1-6烷氧基或取代的C1-6烷氧基，R6和R8獨(dú)立地選自H、C1-6烷基、取代的C1-6烷基、C1-6烷氧基、取代的C1-6烷氧基、苯基、苯氧基、芐基、芐氧基、芐基氨基、聯(lián)苯基、取代的聯(lián)苯基、聯(lián)苯氧基、取代的聯(lián)苯氧基、萘基、取代的萘基，限制條件是R6或R8之一不是氫，和R7選自苯基、取代的苯基、芐基、取代的芐基、聯(lián)苯基、取代的聯(lián)苯基、聯(lián)苯基甲撐、取代的聯(lián)苯基甲撐、萘基、取代的萘基、萘基甲撐或取代的萘基甲撐。
在其它實(shí)施方式中，AT2受體拮抗劑選自式(II)代表的化合物或其藥學(xué)相容性鹽 式中R1和R2獨(dú)立地選自下組H、苯基、取代的苯基、芐基、取代的芐基、C1-6烷基、取代的C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、取代的C3-6環(huán)烷基、雜芳基和取代的雜芳基、取代的聯(lián)苯基甲撐以及飽和和不飽和的取代的聯(lián)苯基甲撐，限制條件是R1和R2之一不是氫，R4選自羧酸酯、羧酸、硫酸酯、磷酸酯、磺酰胺、磷酰胺或酰胺，X選自CH、氮、硫或氧，限制條件是當(dāng)R4是硫或氧時(shí)，R1或R2之一不存在，和Y選自硫、氧或N-RN，式中RN選自H、C1-6烷基、取代的C1-6烷基、芳基、取代的芳基、芐基、取代的芐基、C1-4烷基芳基、取代的C1-4烷基芳基、OH或NH2，在其它實(shí)施方式中，AT2受體拮抗劑選自式(III)代表的化合物或其藥學(xué)相容性鹽 式中R1、R2和R3獨(dú)立地選自H、苯基、取代的苯基、芐基、取代的芐基、C1-6烷基、取代的C1-6烷基，限制條件是R1或R2中至少一個(gè)不是氫，X選自CH、氮、硫或氧，限制條件是當(dāng)R4是硫或氧時(shí)，R1或R2之一不存在，或者X是芳基或雜芳基，限制條件是R1和R2都不存在，V選自CH或氮原子，Y選自硫、氧或N-RN，式中RN選自H、C1-6烷基、取代的C1-6烷基、芳基、取代的芳基、芐基、取代的芐基、C1-4烷基芳基、取代的C1-4烷基芳基、OH或NH2，R4選自羧酸酯、羧酸、硫酸酯、磷酸酯、磺酰胺、磷酰胺或酰胺，G是五元或六元、同芳香性或不飽和、取代或未取代的雜環(huán)，包括但不限于以下環(huán)系統(tǒng) 式中符號(hào)‘*’表示該鍵為稠合環(huán)‘A’和‘G’之間共用，
R5選自H、C1-6烷基、苯基、取代的苯基、取代的C1-6烷基或C1-6烷氧基，R6和R8獨(dú)立地選自H、C1-6烷基、取代的C1-6烷基、C1-6烷氧基、取代的C1-6烷氧基、苯基、苯氧基、芐基、芐氧基、芐基氨基、聯(lián)苯基、取代的聯(lián)苯基、聯(lián)苯氧基、取代的聯(lián)苯氧基、萘基、取代的萘基，限制條件是R6或R8之一不是氫，和R7選自苯基、取代的苯基、芐基、取代的芐基、聯(lián)苯基、取代的聯(lián)苯基、聯(lián)苯基甲撐、取代的聯(lián)苯基甲撐、萘基、取代的萘基、萘基甲撐和取代的萘基甲撐。
在其它實(shí)施方式中，AT2受體拮抗劑選自式(IV)代表的化合物或其藥學(xué)相容性鹽 式中R10選自H、鹵素、C1-6烷基、苯基、取代的苯基、取代的C1-6烷基或C1-6烷氧基，R9選自-NR13R14，式中R13和R14獨(dú)立地選自C1-6烷基、取代的C1-6烷基、芳基、取代的芳基、芐基、取代的芐基、C1-4烷基芳基、取代的C1-4烷基芳基、OH或NH2；五元或六元、飽和或不飽和、取代或未取代的碳環(huán)或雜環(huán)，包括但不限于 V選自CH或氮原子，Y選自硫、氧或N-RN，式中RN選自H、C1-6烷基、取代的C1-6烷基、芳基、取代的芳基、芐基、取代的芐基、C1-4烷基芳基、取代的C1-4烷基芳基、OH或NH2，G是五元或六元、同芳香性或雜環(huán)、不飽和、取代的環(huán)，包括但不限于以下環(huán)系統(tǒng)
式中符號(hào)‘*’表示該鍵為稠合環(huán)‘A’和‘G’之間共用，R5選自C1-6烷基、苯基、取代的苯基、取代的C1-6烷基、或C1-6烷氧基，W選自硫、氧或N-RN，式中RN選自H、C1-6烷基、取代的C1-6烷基、芳基、取代的芳基、芐基、取代的芐基、C1-4烷基芳基、取代的C1-4烷基芳基、OH或NH2，R6和R8獨(dú)立地選自H、C1-6烷基、取代的C1-6烷基、C1-6烷氧基、取代的C1-6烷氧基、苯基、苯氧基、芐基、芐氧基、芐基氨基、聯(lián)苯基、取代的聯(lián)苯基、聯(lián)苯氧基、取代的聯(lián)苯氧基、萘基、取代的萘基，限制條件是R6或R8之一不是氫，和R7選自苯基、取代的苯基、芐基、取代的芐基、聯(lián)苯基、取代的聯(lián)苯基、聯(lián)苯基甲撐、取代的聯(lián)苯基甲撐、萘基、取代的萘基、萘基甲撐或取代的萘基甲撐。
在其它實(shí)施方式中，AT2受體拮抗劑選自式(V)代表的化合物或其藥學(xué)相容性鹽 式中M是H或鹵素(氟、溴、碘、氯)，R5選自C1-6烷基、苯基、取代的苯基、取代的C1-6烷基或C1-6烷氧基，R16選自C1-6烷基氨基、C1-6二烷基氨基、取代的C1-6烷基氨基、取代的二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、取代的芳基氨基、取代的二芳基氨基、烷基芳基氨基、二烷基芳基氨基、取代的烷基芳基氨基、取代的二烷基芳基氨基、雜芳基氨基、取代的雜芳基氨基、環(huán)烷基氨基、二環(huán)烷基氨基、二雜芳基氨基、烷基羰基氨基、芳基羰基氨基、烷基芳基羰基氨基、環(huán)烷基羰基氨基，和R17選自C1-6烷基、取代的C1-6烷基、苯基、取代的苯基、芐基、取代的芐基、聯(lián)苯基、取代的聯(lián)苯基、聯(lián)苯基甲撐、取代的聯(lián)苯基甲撐、萘基、取代的萘基、雜芳基或取代的雜芳基。
在其它實(shí)施方式中，AT2受體拮抗劑選自AT2受體拮抗劑肽，其說(shuō)明性例子包括下式代表的六肽、七肽和八肽及其藥學(xué)相容性鹽R1-R2-R3-R4-R5-R6-Pro-R7(VIII)
式中R1不存在或選自氫、琥珀酰、L-天冬氨酰、肌氨酰、L-絲氨酰、琥珀酰胺酰、L-丙基、甘氨酰、L-酪氨酰、Nα-煙酰-酪氨酰或者D-或L-天冬酰胺酰；R2選自精氨?；騈-苯甲酰羰基精氨酰；R3不存在或是纈氨酰；R4不存在或選自L-苯丙氨?；騆-酪氨酰；R5選自纈氨酰、L-異亮氨酰、L-丙氨?；騆-賴氨酰；R6選自L-組氨酰、L-異亮氨酰、L-酪氨酰或?qū)Π被奖滨?；和R7選自L-丙氨酸、L-酪氨酸、L-或D-亮氨酸、甘氨酸、L-異亮氨酸或β-丙氨酸殘基。
在其它實(shí)施方式中，AT2受體拮抗劑選自與AT2受體多肽有免疫反應(yīng)活性的抗原結(jié)合分子。
在其它實(shí)施方式中，AT2受體拮抗劑選自抑制或降低AT2受體基因的表達(dá)產(chǎn)物的水平或功能活性的核酸分子，例如包括反義分子、核酶和RNAi分子。
另一方面，本發(fā)明提供了一種鑒定拮抗AT2受體的藥物的方法。這些方法一般包括將制備物與待測(cè)藥物接觸，其中所述制備物包含(i)包含至少對(duì)應(yīng)于AT2受體多肽的生物活性片段，或其變體或衍生物的氨基酸序列的多肽；或者(ii)包含調(diào)節(jié)編碼AT2受體多肽基因的表達(dá)的遺傳序列中至少一部分的多核苷酸，其中所述多核苷酸操作性連接于報(bào)道基因。AT2受體多肽的水平或功能活性或者報(bào)道基因的表達(dá)產(chǎn)物相對(duì)于在不存在待測(cè)藥物時(shí)的正常或參比水平或功能活性降低表明，該藥物是AT2受體拮抗劑。
在一些實(shí)施方式中，所述方法包括將表達(dá)AT2受體的第一細(xì)胞樣品與AT2受體配體相接觸，并測(cè)定標(biāo)記物；將表達(dá)AT2受體的第二細(xì)胞樣品與藥物和配體相接觸并測(cè)定標(biāo)記物；然后比較所述第一細(xì)胞樣品的標(biāo)記物與所述第二細(xì)胞樣品的標(biāo)記物。在說(shuō)明性實(shí)施例中，這些方法測(cè)定了各種標(biāo)記物的水平(如Zfhep表達(dá)；氧化氮水平或氧化氮合酶水平)或者與AT2受體活化或細(xì)胞增殖或分化相關(guān)的標(biāo)記物的組合。在這些實(shí)施例中，如果所述藥物能抑制Zfhep表達(dá)或者降低氧化氮水平或氧化氮合酶的水平或功能活性或者細(xì)胞的分化，則該藥物為測(cè)試陽(yáng)性。
本發(fā)明另一方面提供了生產(chǎn)在對(duì)象，尤其是患有神經(jīng)病或處于發(fā)生神經(jīng)病的風(fēng)險(xiǎn)中的對(duì)象中產(chǎn)生鎮(zhèn)痛作用的藥物的方法。這些方法通常包括測(cè)試懷疑能拮抗AT2受體的藥物，如上面廣泛地描述；并在測(cè)試為拮抗陽(yáng)性的基礎(chǔ)上合成所述藥物。適當(dāng)?shù)?，所述方法還包括衍生所述藥物，和任選地將所述衍生藥物與藥學(xué)上可接受的運(yùn)載體或稀釋劑配制在一起，以提高所述藥物治療或預(yù)防神經(jīng)病的功效。
附圖簡(jiǎn)要說(shuō)明
圖1顯示，靜脈內(nèi)(i.v.)單次推注劑量PD-123,319(0.1和0.3mg/kg)能劑量依賴性(A)緩解CCI大鼠(n＝2)同側(cè)后爪的觸覺(jué)異常性疼痛和(B)在同一動(dòng)物的對(duì)側(cè)后爪產(chǎn)生抗傷害感受作用。
圖2顯示，腹膜內(nèi)(i.p.)單次推注劑量PD-123,319(1-10mg/kg)能劑量依賴性(A)緩解CCI大鼠(n＝3-4)同側(cè)后爪的觸覺(jué)異常性疼痛和(B)在同一動(dòng)物的對(duì)側(cè)后爪產(chǎn)生抗傷害感受作用。相反，i.p.給予單次推注劑量的載體在同側(cè)和對(duì)側(cè)后爪并不分別產(chǎn)生顯著的抗異常性疼痛或抗傷害感受作用。
圖3顯示，i.v.單次推注劑量L-159,686(0.1-0.3mg/kg)能劑量依賴性(A)緩解CCI大鼠(n＝2)同側(cè)后爪的觸覺(jué)異常性疼痛和(B)在同一動(dòng)物的對(duì)側(cè)后爪產(chǎn)生抗傷害感受作用。
圖4顯示，i.p.單次推注劑量PD-123,319(0.3-3.0mg/kg)能劑量依賴性緩解STZ-糖尿病大鼠(n＝4)后爪的觸覺(jué)異常性疼痛。相反，i.p.單次推注劑量的載體不能顯著緩解STZ-糖尿病大鼠后爪的觸覺(jué)異常性疼痛。
圖5顯示，單次推注i.p.劑量PD-121,981(0.001-3μg/kg)能劑量依賴性緩解STZ-糖尿病大鼠的觸覺(jué)異常性疼痛。
圖6顯示，對(duì)于STZ-糖尿病大鼠的兩種給藥途徑，單次推注i.p.和口服劑量的PD-121,981(0.1μg/kg)產(chǎn)生的抗異常性疼痛作用的程度和持續(xù)時(shí)間相似。
圖7顯示，單次推注i.p.劑量PD-126,055(1.0-100ng/kg)能顯著緩解STZ-糖尿病大鼠的觸覺(jué)異常性疼痛。
圖8顯示，單次推注i.p.劑量L-161,638(鈉鹽)(0.0003-3mg/kg)能劑量依賴性緩解STZ-糖尿病大鼠的觸覺(jué)異常性疼痛。
圖9顯示，單次推注i.p.劑量L-163,579(0.1-10μg/kg)能劑量依賴性緩解STZ-糖尿病大鼠的觸覺(jué)異常性疼痛。進(jìn)一步提高L-163,579的劑量(30-100μg/kg)產(chǎn)生的反應(yīng)與10μg/kg劑量產(chǎn)生的反應(yīng)相似。
圖10顯示，單次推注i.p.劑量L-159,686(0.03-10μg/kg)能劑量依賴性緩解STZ-糖尿病大鼠的觸覺(jué)異常性疼痛。將劑量進(jìn)一步提高到30和100μg/kg不能顯著改變抗異常性疼痛作用的程度或持續(xù)時(shí)間。
圖11顯示(A)單次i.p.推注劑量的PD-121,981(0.03-3mg/kg)能劑量依賴性緩解CCI-大鼠同側(cè)后爪的觸覺(jué)異常性疼痛；和(B)相同劑量的PD-121,981在同一動(dòng)物的對(duì)側(cè)后爪中產(chǎn)生不顯著的抗傷害感受作用。
圖12顯示，對(duì)于CCI-大鼠的兩種給藥途徑，單次推注i.p.和口服劑量的PD-121,981(1mg/kg)產(chǎn)生的抗異常性疼痛作用的程度和持續(xù)時(shí)間相似。
圖13顯示(A)單次i.p.推注劑量的PD-126,055(3-30μg/kg)能劑量依賴性緩解CCI-大鼠同側(cè)后爪的觸覺(jué)異常性疼痛。(B)相反，相同劑量的PD-126,055在同一動(dòng)物的對(duì)側(cè)后爪中產(chǎn)生不顯著的抗傷害感受作用。
圖14顯示，對(duì)于CCI-大鼠的兩種給藥途徑，單次推注i.p.和口服劑量的PD-126,055(30μg/kg)產(chǎn)生的抗異常性疼痛作用的程度和持續(xù)時(shí)間相似。
圖15顯示，給予推注i.p.劑量的L-161,638(鈉鹽)(0.003-10mg/kg)能夠(A)劑量依賴性緩解同側(cè)后爪的觸覺(jué)異常性疼痛和(B)在同一動(dòng)物的對(duì)側(cè)后爪中引發(fā)不顯著的抗傷害感受作用。
圖16顯示，將推注i.p.劑量的L-163,579(0.01-0.3g/kg)給予CCI大鼠能劑量依賴性緩解同側(cè)后爪的觸覺(jué)異常性疼痛。
圖17顯示，將推注i.p.劑量的L-159,686(0.003-0.03mg/kg)給予CCI大鼠能劑量依賴性緩解同側(cè)后爪的觸覺(jué)異常性疼痛。
發(fā)明詳述定義除非另有說(shuō)明，本文所用的所有科技術(shù)語(yǔ)的含義與本發(fā)明所屬領(lǐng)域普通技術(shù)人員所共同理解的含義相同。雖然可采用與本文所述的方法和材料相似或等效的方法和材料實(shí)施或測(cè)試本發(fā)明，但描述了優(yōu)選的方法和材料。出于本發(fā)明目的，以下術(shù)語(yǔ)的定義如下。
本文所用冠詞“一個(gè)”和“一種”指一個(gè)或一個(gè)以上(即至少一個(gè))該冠詞的語(yǔ)法目標(biāo)。例如，“一種元素”指一種元素或一種以上的元素。
本文所用術(shù)語(yǔ)“約”指相對(duì)于參比的量、水平、值、尺寸、大小或含量，量、水平、值、尺寸、大小或含量的變化至多為30％、25％、20％、15％或10％。
除非另有說(shuō)明，屬于“?；敝负蠧＝O部分的基團(tuán)(不是羧酸、酯或酰胺)。優(yōu)選的酰基包括C(O)-R，式中R是氫或烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基或雜環(huán)基殘基，優(yōu)選C1-20殘基。?；睦影柞；?；直鏈或支鏈烷?；缫阴；?、丙?；?、丁?；?、2-甲基丙酰基、戊酰基、2，2-二甲基丙酰基、己?；?、庚酰基、辛?；?、壬?；?、癸酰基、十一?；⑹；⑹；⑹孽；?、十五?；?、十六?；?、十七?；?、十八?；?、十九?；投；?；環(huán)烷基羰基，如環(huán)丙基羰基、環(huán)丁基羰基、環(huán)戊基羰基和環(huán)己基羰基；芳酰基，如苯甲酰、甲苯?；洼刘；?；芳烷酰基，如苯基烷酰基(如苯基乙?；⒈交；?、苯基丁酰基、苯基異丁酰基、苯基戊?；捅交乎；?和萘基烷?；?如萘基乙酰基、萘基丙?；洼粱□；?；芳烯酰基，如苯基烯酰基(如苯基丙烯?；⒈交∠；⒈交谆；⒈交煜；捅交合；?和萘基烯?；?如萘基丙烯酰基、萘基丁烯?；洼粱煜；?；芳氧基烷?；绫窖趸阴；捅窖趸；?；芳硫基氨甲?；绫搅蚧奔柞；环蓟胰；?，如苯基乙醛?；洼粱胰；?；芳基磺?；绫交酋；洼粱酋；?；雜環(huán)羰基；雜環(huán)烷?；?，如噻吩基乙?；?、噻吩基丙酰基、噻吩基丁?；⑧绶曰祯；⑧绶曰乎；?、噻唑基乙酰基、噻二唑基乙酰基和四唑基乙?；浑s環(huán)烯?；珉s環(huán)丙烯?；?、雜環(huán)丁烯?；㈦s環(huán)戊烯?；碗s環(huán)己烯酰基；以及雜環(huán)乙醛酰基，如噻唑基乙醛酰基和噻吩基乙醛?；?。
如果沒(méi)有指定碳原子的數(shù)目，除非另有說(shuō)明，“烯基”指一種直鏈、支鏈或環(huán)狀的非芳族烴基，其含有2-10個(gè)碳原子和至少一個(gè)碳-碳雙鍵。優(yōu)選存在一個(gè)碳-碳雙鍵，至多可存在四個(gè)非芳族碳-碳雙鍵。因此，“C2-C6烯基”指含有2-6個(gè)碳原子的烯基。烯基包括但不限于乙烯基、丙烯基、丁烯基、2-甲基丁烯基和環(huán)己烯基。烯基的直鏈、支鏈或環(huán)狀部分可含有雙鍵，如果指明是取代的烯基，則所述烯基部分可被取代。
本文所用術(shù)語(yǔ)“亞烯基”指直鏈、支鏈或環(huán)狀，優(yōu)選直鏈或支鏈的二價(jià)脂族烴基，優(yōu)選含有2-約20個(gè)碳原子和至少一個(gè)雙鍵，更優(yōu)選含有2-12個(gè)碳，更優(yōu)選低級(jí)亞烯基。任選地，用一個(gè)或多個(gè)“烷基取代基”取代亞烯基?？裳貋喯┗芜x地插入一個(gè)或多個(gè)氧、硫或者取代或未取代的氮原子，其中氮取代基是如前所述的烷基。示范性亞烯基包括-CH＝CH-CH＝CH-和-CH＝CH-CH2-。術(shù)語(yǔ)“低級(jí)亞烯基”指含有2-6個(gè)碳的亞烯基。優(yōu)選的亞烯基是低級(jí)亞烯基，特別優(yōu)選3-4個(gè)碳原子的亞烯基。
術(shù)語(yǔ)“烷氧基”、“烯氧基”、“炔氧基”、“芳氧基”、“雜芳氧基”、“雜環(huán)氧基”和“酰氧基”分別指連接有氧的本文所述烷基、烯基、炔基芳基、雜芳基、雜環(huán)基和酰基。
除非另有說(shuō)明，“烷氧基”代表通過(guò)氧橋連接的環(huán)狀或非環(huán)狀烷基。因此，“烷氧基”包括以下烷基和環(huán)烷基的定義。例如，烷氧基包括但不限于甲氧基、氧乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、環(huán)戊氧基和環(huán)己氧基。
本文所用術(shù)語(yǔ)“烷基”旨在包括支鏈和直鏈的飽和脂族烴基，并可含有特定數(shù)量的碳原子。例如，“C1-C10烷基”中的C1-C10定義為包括直鏈或支鏈形式的含有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個(gè)碳的基團(tuán)。例如，“C1-C10烷基”特別包括但不限于甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、叔丁基、異丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基。
本文所用術(shù)語(yǔ)“烷撐(alkylene)”指直鏈、支鏈或環(huán)狀，優(yōu)選直鏈或支鏈的二價(jià)脂族烴基，優(yōu)選含有1-約20個(gè)碳原子，更優(yōu)選含有1-12個(gè)碳，更優(yōu)選為低級(jí)烷撐。任選的，用一個(gè)或多個(gè)“烷基取代基”取代烷撐。任選地，可沿烷撐任選地插入一個(gè)或多個(gè)氧、硫或者取代或未取代的氮原子，其中氮取代基是如前所述的烷基。示范性烷撐包括甲撐(-CH2-)、乙撐(-CH2CH2-)、丙撐(-(CH2)3-)、環(huán)己撐(-C6H10-)、甲二氧撐(-O-CH2-O-)和乙二氧撐(-O-(CH2)2-O-)。術(shù)語(yǔ)“低級(jí)烷撐”指含有1-6個(gè)碳的烷撐。優(yōu)選的烷撐是低級(jí)烷撐，特別優(yōu)選1-3個(gè)碳原子的烷撐。
本文所用術(shù)語(yǔ)“亞烷基(alkylidene)”指一種二價(jià)基團(tuán)，如＝CR′R″，其連接于另一個(gè)基團(tuán)的一個(gè)原子，形成雙鍵。示范性亞烷基是亞甲基(＝CH2)和亞乙基(＝CHCH3)。本文所用術(shù)語(yǔ)“芳基亞烷基”指R′或R″是芳基的亞烷基。本文所用術(shù)語(yǔ)“二芳基亞烷基”指R′和R″都是芳基的亞烷基?！岸s芳基亞烷基”指R′和R″都是雜芳基的亞烷基。
術(shù)語(yǔ)“炔基”指直鏈、支鏈或環(huán)狀烴基，其含有2-10個(gè)碳原子和至少一個(gè)碳碳三鍵。至多存在三個(gè)碳碳三鍵。因此，“C2-C6炔基”指含有2-6個(gè)碳原子的。炔基包括但不限于乙炔基、丙炔基、丁炔基、3-甲基丁炔基等。炔基的直鏈、支鏈或環(huán)狀部分可含有三鍵，如果指明是取代的炔基，則所述炔基部分可被取代。
在某些情況下，可用碳的范圍(包括零)來(lái)定義取代基，如(C0-C6)烷撐-芳基。如果芳基是苯基，此定義包括苯基本身，以及(例如)-CH2Ph、-CH2CH2Ph、CH(CH3)CH2CH(CH3)Ph。
本文所用術(shù)語(yǔ)“亞炔基”指直鏈、支鏈或環(huán)狀，優(yōu)選直鏈或支鏈的二價(jià)脂族烴基，優(yōu)選含有2-約20個(gè)碳原子和至少一個(gè)三鍵，更優(yōu)選含有2-12個(gè)碳，更優(yōu)選低級(jí)亞炔基。任選地，用一個(gè)或多個(gè)“烷基取代基”取代亞炔基?？裳貋喨不芜x地插入一個(gè)或多個(gè)氧、硫或者取代或未取代的氮原子，其中氮取代基是如前所述的烷基。示范性亞炔基包括-C≡C-C≡C-、-C≡C-和-C≡C-CH2-。術(shù)語(yǔ)“低級(jí)亞炔基”指含有2-6個(gè)碳的亞炔基。優(yōu)選的亞炔基是低級(jí)亞炔基，特別優(yōu)選3-4個(gè)碳原子的亞炔基。
本文所用術(shù)語(yǔ)“異常性疼痛”指無(wú)害刺激引起的疼痛，即由于通常不引起疼痛的刺激而產(chǎn)生的疼痛。異常性疼痛的例子包括但不限于冷異常性疼痛，觸覺(jué)異常性疼痛(輕微壓力或觸碰引起的疼痛)等。
本文所用術(shù)語(yǔ)“鎮(zhèn)痛”指疼痛感受降低的狀態(tài)，包括痛覺(jué)喪失以及對(duì)有害刺激的敏感性降低或消失的狀態(tài)。本領(lǐng)域眾所周知，這種疼痛感受降低或消失的狀態(tài)是通過(guò)給予鎮(zhèn)痛劑誘導(dǎo)的，是在無(wú)意識(shí)喪失的情況下發(fā)生的。術(shù)語(yǔ)鎮(zhèn)痛包括術(shù)語(yǔ)“抗傷害感受”，“抗傷害感受”在本領(lǐng)域中用于在動(dòng)物模型中定量衡量鎮(zhèn)痛或疼痛敏感性降低。
本文所用術(shù)語(yǔ)“拮抗劑”指能降低或抑制AT2基因(Agtr2基因)或其表達(dá)產(chǎn)物包括AT2受體多肽的生物學(xué)活性的物質(zhì)。
本文所用術(shù)語(yǔ)“AT2受體”指可結(jié)合血管緊張素II和/或一種或多種其它配體的血管緊張素II2型受體(AT2)受體多肽。術(shù)語(yǔ)“AT2受體”包括AT2受體家族成員的脊椎動(dòng)物同源物，包括但不限于哺乳動(dòng)物、爬行動(dòng)物和鳥(niǎo)類同源物。AT2受體家族成員的代表性哺乳動(dòng)物同源物包括但不限于鼠和人同源物。
本文所用術(shù)語(yǔ)“抗異常性疼痛”指疼痛感受降低的狀態(tài)，包括痛覺(jué)喪失以及對(duì)無(wú)害刺激的敏感性降低或消失的狀態(tài)。本領(lǐng)域眾所周知，這種疼痛感受降低或消失的狀態(tài)是通過(guò)給予鎮(zhèn)痛劑誘導(dǎo)的，是在無(wú)意識(shí)喪失的情況下發(fā)生的。
“抗原結(jié)合分子”指對(duì)靶抗原有結(jié)合親和力的分子。應(yīng)理解，該術(shù)語(yǔ)可延伸至具有抗原結(jié)合活性的免疫球蛋白、免疫球蛋白片段和非免疫球蛋白衍生的蛋白質(zhì)構(gòu)架。
“抗原或免疫原性活性”指本發(fā)明多肽、片段、變體或衍生物在給予的動(dòng)物(適合為哺乳動(dòng)物)中產(chǎn)生抗原性或免疫原性反應(yīng)的能力，其中所述反應(yīng)包括產(chǎn)生特異性結(jié)合所述多肽或其片段的元件。
除非另有說(shuō)明，本文所用術(shù)語(yǔ)“芳族”或“芳基”指每個(gè)環(huán)中至多有7個(gè)原子的穩(wěn)定的單環(huán)或雙環(huán)碳環(huán)，其中至少一個(gè)環(huán)是芳香環(huán)。所述芳基元件的例子包括但不限于苯基、萘基、四氫萘基、茚滿基、聯(lián)苯基、菲基、蒽基或苊基。
“芳烷基”指用上述芳基取代的上述烷基，如-CH2苯基、-(CH2)2苯基、-(CH2)3苯基、-H2CH(CH3)CH2苯基等和其衍生物。
本文所用術(shù)語(yǔ)“芳撐”指單環(huán)或多環(huán)，優(yōu)選單環(huán)二價(jià)芳基，優(yōu)選含有3-約20個(gè)碳原子和至少一個(gè)芳環(huán)，更優(yōu)選有3-12個(gè)碳，更優(yōu)選有低級(jí)芳撐。任選地，用一個(gè)或多個(gè)“烷基取代基”取代芳撐?？稍诜紦沃車芜x地插入一個(gè)或多個(gè)氧、硫或者取代或未取代的氮原子，其中氮取代基是如前所述的烷基。示范性芳撐包括1，2-、1，3-和1，4-苯撐。術(shù)語(yǔ)“低級(jí)芳撐”指含有5或6個(gè)碳的芳撐。優(yōu)選的芳撐是低級(jí)芳撐。
本文所用術(shù)語(yǔ)“亞芳基”指不飽和環(huán)狀二價(jià)基團(tuán)，連接的兩點(diǎn)都是在環(huán)的同一個(gè)原子上。示范性亞芳基包括但不限于具有下式的醌的甲基化物部分
式中X是O、S或NR′?！半s亞芳基”是環(huán)中一個(gè)或兩個(gè)，優(yōu)選兩個(gè)原子為雜原子，例如但不限于O、S和N的亞芳基。
本文所用術(shù)語(yǔ)“生物學(xué)活性”指AT2受體多肽和配體之間相互作用產(chǎn)生的可觀察效果。在本發(fā)明內(nèi)容中，生物學(xué)活性的代表性、但非限制性例子包括AT2受體與配體，包括內(nèi)源性配體如血管緊張素II或AT2受體拮抗劑的結(jié)合。術(shù)語(yǔ)“生物學(xué)活性”也包括抑制和誘導(dǎo)AT2受體多肽表達(dá)。而且，術(shù)語(yǔ)“生物學(xué)活性”包括配體與AT2受體多肽結(jié)合產(chǎn)生的任何和所有作用。
本文所用術(shù)語(yǔ)“灼痛”指外傷性神經(jīng)損傷后的燒灼痛、異常性疼痛和痛覺(jué)過(guò)度，常常伴有血管舒縮性和催汗性功能障礙和隨后的營(yíng)養(yǎng)改變。
“復(fù)雜性區(qū)域疼痛綜合征”指一種疼痛，包括但不限于反射性交感神經(jīng)性營(yíng)養(yǎng)不良、灼痛、交感神經(jīng)維持性疼痛等。
除非文中另有說(shuō)明，整個(gè)說(shuō)明書(shū)中的術(shù)語(yǔ)“包括”、“包含”應(yīng)被理解為暗指包括所述步驟或元件或者步驟或元件組，但不排除任何其它步驟或元件或者步驟或元件組。
“對(duì)應(yīng)于”指(a)一種多核苷酸，具有與全部或一部分參比多核苷酸序列基本相同或互補(bǔ)的核苷酸序列，或編碼與肽或蛋白質(zhì)中的氨基酸序列相同的氨基酸序列；或者(b)一種肽或多肽，具有與參比肽或蛋白質(zhì)中的氨基酸序列基本相同的氨基酸序列。
術(shù)語(yǔ)“環(huán)烯基”指單環(huán)不飽和的烴基，可含有特定數(shù)量的碳原子。例如，“環(huán)烯基”包括但不限于環(huán)丁烯基、環(huán)戊烯基、1-甲基環(huán)戊烯基、環(huán)己烯基和環(huán)己二烯基。
除非另有說(shuō)明，術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基”或“脂族環(huán)”指單環(huán)飽和的脂族烴基，可含有特定數(shù)量的碳原子。例如，“環(huán)烷基”包括但不限于環(huán)丙基、甲基-環(huán)丙基、2，2-二甲基-環(huán)丁基，2-乙基-環(huán)戊基、環(huán)己基。
用于肽和多肽時(shí)，“衍生物”指通過(guò)修飾，例如偶聯(lián)或與其它化學(xué)物質(zhì)復(fù)合或通過(guò)本領(lǐng)域所了解的翻譯后修飾技術(shù)從基本序列衍生的肽或多肽。術(shù)語(yǔ)“衍生物”的范圍也包括對(duì)母體序列進(jìn)行的改變，包括能提供功能等效分子的添加或缺失。
在疾病治療或預(yù)防的情形下，“有效量”指以單一劑量或作為一系列劑量的一部分，將這種量的活性物質(zhì)給予需要這種治療或預(yù)防的個(gè)體，能有效預(yù)防該疾病的癥狀的發(fā)生、控制這種癥狀和/或治療現(xiàn)有癥狀。有效量將取決于待治療個(gè)體的健康和身體情況、待治療個(gè)體的分類組別、組合物配方、對(duì)醫(yī)學(xué)狀況的評(píng)價(jià)和其它相關(guān)因素。預(yù)計(jì)該量將屬于可通過(guò)常規(guī)試驗(yàn)測(cè)定的相對(duì)寬的范圍。
本文所用術(shù)語(yǔ)“基因”指細(xì)胞基因組的任何和所有不連續(xù)的編碼區(qū)域，以及相關(guān)的非編碼和調(diào)節(jié)區(qū)域?；蛞仓妇幋a特定多肽的開(kāi)放閱讀框、內(nèi)含子和參與表達(dá)調(diào)節(jié)的相鄰的5’和3’非編碼核苷酸序列。在這個(gè)方面，基因還可含有與給定基因天然相關(guān)的控制信號(hào)如啟動(dòng)子、增強(qiáng)子、終止和/或聚腺苷酸化信號(hào)或者異源控制信號(hào)。DNA序列可以是cDNA或基因組DNA或其片段?？蓪⒒蛞牒线m的載體進(jìn)行染色體外維持或整合入宿主。
如本領(lǐng)域技術(shù)人員所理解，本文所用“鹵素”或“鹵原子”旨在包括氯、氟、溴和碘。
“雜芳烷基”指用雜芳基取代的上述烷基，如-CH2吡啶基、-(CH2)2嘧啶基、-(CH2)3咪唑基等，及其衍生物。
本文所用術(shù)語(yǔ)“雜芳基”或“雜芳”代表各環(huán)中至多有7個(gè)原子的穩(wěn)定的單環(huán)或雙環(huán)，其中至少一個(gè)環(huán)是芳香環(huán)并含有1-4個(gè)雜原子，雜原子選自O(shè)、N和S。這里定義的雜芳基包括但不限于吖啶基、咔唑基、噌啉基、喹喔啉基、吡唑基、吲哚基、苯并三唑基、呋喃基、噻吩基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、喹啉基、異喹啉基、唑基、異唑基、吲哚基、吡嗪基、噠嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、四氫喹啉。如以下的雜環(huán)定義所述，“雜芳基”也應(yīng)理解為包括任何含氮雜芳基的N-氧化物衍生物。
“雜芳基”和“雜環(huán)基”的其它例子包括但不限于苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并呋咱基(benzofurazanyl)、苯并吡唑基、苯并三唑基、苯并噻吩基(benzothiophenyl)、苯并唑基、咔唑基、咔啉基、噌啉基、呋喃基、咪唑基、二氫吲哚基、吲哚基、吲哚吖嗪基(indolazinyl)、吲唑基、異苯并呋喃基、異吲哚基、異喹啉基、異噻唑基、異唑基、萘吡啶基、二唑基、唑基、唑啉、異唑啉、氧雜環(huán)丁烷基、吡喃基、吡嗪基、吡唑基、噠嗪基、吡啶并吡啶基、噠嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、喹喔啉基、四氫吡喃基、四唑基、四唑并吡啶基、噻二唑基、噻唑基、噻吩基、三唑基、吖丁啶基、吖丙啶基、1，4-二烷基、六氫氮雜?；?、哌嗪基、哌啶基、吡咯烷基、嗎啉基、硫代嗎啉基、二氫苯并咪唑基、二氫苯并呋喃基、二氫苯并噻吩基、二氫苯并唑基、二氫呋喃基、二氫咪唑基、二氫吲哚基、二氫異唑基、二氫異噻唑基、二氫二唑基、二氫唑基、二氫吡嗪基、二氫吡唑基、二氫吡啶基、二氫嘧啶基、二氫吡咯基、二氫喹啉基、二氫四唑基、二氫噻二唑基、二氫噻唑基、二氫噻吩基、二氫三唑基、二氫吖丁啶基、甲二氧撐苯甲?；⑺臍溥秽退臍溧绶曰?，以及它們的N-氧化物?？赏ㄟ^(guò)碳原子或雜原子連接雜環(huán)基取代基。
除非另有說(shuō)明，本文所用術(shù)語(yǔ)“雜芳撐”指二價(jià)單環(huán)或多環(huán)系統(tǒng)，優(yōu)選約3-15個(gè)原子，環(huán)系統(tǒng)中一個(gè)或多個(gè)，優(yōu)選1-3個(gè)原子是雜原子，即非碳元素，如氮、氧和硫原子。可用一個(gè)或多個(gè)，優(yōu)選1-3個(gè)芳基取代基任選地取代雜芳撐。示范性雜芳撐包括例如，1，4-咪唑撐。
本文所用術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)”、“雜脂族”或“雜環(huán)基”指含有1-4個(gè)雜原子的5至10元非芳族雜環(huán)，所述雜原子選自O(shè)、N和S，并包括雙環(huán)基團(tuán)。
“雜環(huán)基烷基”指用雜環(huán)基取代的上述烷基，如-CH2吡咯烷-1-基、-(CH2)2哌啶-1-基等和其衍生物。
本文所用術(shù)語(yǔ)“雜交”指互補(bǔ)的核苷酸序列配對(duì)，以產(chǎn)生DNA-DNA雜交子或DNA-RNA雜交子。互補(bǔ)的堿基序列是通過(guò)堿基配對(duì)規(guī)則關(guān)聯(lián)在一起的序列。在DNA中，A與T配對(duì)，C與G配對(duì)。在RNA中，U與A配對(duì)，C與G配對(duì)。在這個(gè)方面，本文所用術(shù)語(yǔ)“匹配”和“錯(cuò)配”指互補(bǔ)的核酸鏈中配對(duì)核苷酸的雜交可能性。匹配的核苷酸能有效雜交，如經(jīng)典的A-T和G-C堿基配對(duì)，如上所述。錯(cuò)配是不能有效雜交的其它核苷酸組合。
本文所用術(shù)語(yǔ)“烴基”包括含有碳和氫的任何基團(tuán)，包括飽和、不飽和、芳族、直鏈或支鏈或環(huán)狀(包括多環(huán))基團(tuán)。烴基包括但不限于C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C10環(huán)烷基、芳基如苯基和萘基、Ar(C1-C8)烷基如芐基，它們可被任選取代。
“痛覺(jué)過(guò)敏”指對(duì)通常引起疼痛的刺激反應(yīng)增加。
本文所用術(shù)語(yǔ)“免疫反應(yīng)活性”包括分子之間的任何相互作用、反應(yīng)或其它形式的結(jié)合，尤其當(dāng)分子之一是或模擬了免疫系統(tǒng)的組件時(shí)。
“神經(jīng)性疼痛”指周圍或中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的原發(fā)性損傷或功能障礙引發(fā)或引起的任何疼痛綜合征。神經(jīng)性疼痛的例子包括但不限于熱或機(jī)械性痛覺(jué)過(guò)敏、熱或機(jī)械性異常性疼痛、糖尿病疼痛、牽扯痛等。
“傷害感受性疼痛”指在沒(méi)有致敏的情況下位于未損傷皮膚、內(nèi)臟和其它器官的傷害性感受器激活引起的正常急性痛覺(jué)。
本文所用術(shù)語(yǔ)“寡核苷酸”指由多個(gè)核苷酸殘基(脫氧核糖核苷酸或核糖核苷酸，或其相關(guān)的結(jié)構(gòu)變體或合成類似物)通過(guò)磷酸二酯鍵(或其相關(guān)的結(jié)構(gòu)變體或合成類似物)連接組成的聚合物。因此，雖然術(shù)語(yǔ)“寡核苷酸”一般指其中核苷酸殘基和它們之間的連接是天然產(chǎn)生的核苷酸聚合物，但應(yīng)理解，該術(shù)語(yǔ)的范圍也包括各種類似物，包括但不限于肽核酸(PNA)、氨基磷酸酯、硫代磷酸酯、甲基膦酸酯、2-O-甲基核糖核酸等。該分子的確切大小可取決于具體應(yīng)用。寡核苷酸一般長(zhǎng)度較短，通常約有10-30個(gè)核苷酸殘基，但該術(shù)語(yǔ)也可指任何長(zhǎng)度的分子，盡管術(shù)語(yǔ)“多核苷酸”或“核酸”一般用于較大的寡核苷酸。
“操作性連接”指轉(zhuǎn)錄和翻譯調(diào)節(jié)性多核苷酸與編碼多肽的多核苷酸的相對(duì)位置能使該多核苷酸轉(zhuǎn)錄并翻譯出多肽。
本文所用術(shù)語(yǔ)“疼痛”是其最廣泛的含義，包括與實(shí)際或潛在的組織損傷相關(guān)的不良感覺(jué)或情緒體驗(yàn)，或根據(jù)這種損傷表述，包括定位清晰或不清晰的不適、苦惱或痛苦的感覺(jué)，這是通過(guò)刺激專門的神經(jīng)末梢產(chǎn)生的。有許多類型的疼痛，包括但不限于閃痛、幻痛、射痛、急痛、炎性痛、神經(jīng)性疼痛、復(fù)雜性區(qū)域痛、神經(jīng)痛、神經(jīng)病等(Dorland’s Illustrated Medical Dictionary，第28版，W.B.Saunders Company，Philadelphia，Pa.)。本發(fā)明特別涉及減輕神經(jīng)病相關(guān)性疼痛。治療疼痛的目的是降低治療對(duì)象感覺(jué)到的疼痛嚴(yán)重程度。
“藥學(xué)上可接受的運(yùn)載體”指可安全用于局部或全身給藥的固體或液體填料、稀釋劑或包囊物質(zhì)。
在本文中術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)相容性鹽”和“藥學(xué)上可接受的鹽”可互換使用，指對(duì)于人或動(dòng)物給藥在毒理學(xué)上安全的鹽。這種鹽可選自鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、硝酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、酒石酸氫鹽、膦酸鹽、蘋(píng)果酸鹽、馬來(lái)酸鹽、萘磺酸鹽、延胡索酸鹽、琥珀酸鹽、乙酸鹽、對(duì)苯二酸鹽、棕櫚酸鹽(pamoate)和果膠酸鹽(pectinate)。藥學(xué)上可接受的鹽包括金屬(無(wú)機(jī))鹽和有機(jī)鹽；其非限制性列表見(jiàn)《雷明頓藥物科學(xué)》(Remington’s Pharmaceutical Sciences)，第17版，第1418頁(yè)(1985)。本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知，根據(jù)物理和化學(xué)穩(wěn)定性、流動(dòng)性、吸水性和溶解性選擇合適的鹽形式。
“苯基烷基”指用苯基取代的上述烷基，如-CH2苯基、-(CH2)2苯基、-(CH2)3苯基、CH3CH(CH3)CH2苯基等，和它們的衍生物。苯基烷基是芳烷基的子集。
術(shù)語(yǔ)“多核苷酸變體”和“變體”指與參比多核苷酸序列的基本相同的多核苷酸或在本領(lǐng)域已知的嚴(yán)格條件下與參比序列雜交的多核苷酸(參見(jiàn)例如Sambrook等，《分子克隆，實(shí)驗(yàn)室手冊(cè)》(Molecular Cloning，A Laboratory Manual)，Cold Spring HarborPress，1989)。這些術(shù)語(yǔ)也包括添加或缺失一個(gè)或多個(gè)核苷酸、或用不同的核苷酸取代的多核苷酸。在這個(gè)方面，本領(lǐng)域熟知，可對(duì)參比多核苷酸進(jìn)行包括突變、添加、缺失和取代在內(nèi)的某些改變，而改變的多核苷酸仍保留參比多核苷酸的生物學(xué)功能或活性。術(shù)語(yǔ)“多核苷酸變體”和“變體”也包括天然產(chǎn)生的等位基因變體。
在本文中，“多肽”、“肽”和“蛋白質(zhì)”可互換使用，指氨基酸殘基及其變體和合成類似物的聚合物。因此，這些術(shù)語(yǔ)可用于其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基是合成的非天然氨基酸，如對(duì)應(yīng)天然氨基酸的化學(xué)類似物的氨基酸聚合物，以及天然產(chǎn)生的氨基酸聚合物。
術(shù)語(yǔ)“多肽變體”指其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸被不同氨基酸取代的多肽。本領(lǐng)域熟知，一些氨基酸可改變?yōu)榫哂袕V泛相似特性的其它氨基酸，這種改變不會(huì)改變多肽活性的特性(保守取代)，如下所述。這些術(shù)語(yǔ)也包括其中添加或缺失了一個(gè)或多個(gè)氨基酸，或者用不同氨基酸取代的多肽。
術(shù)語(yǔ)“前藥”以其最廣泛的含義使用，包括在體內(nèi)能轉(zhuǎn)化為本發(fā)明AT2受體拮抗劑的化合物。本領(lǐng)域技術(shù)人員不難獲得這種化合物，包括例如游離羥基被轉(zhuǎn)化為酯衍生物的化合物。
本文所用術(shù)語(yǔ)“擬鹵化物”是行為上類似鹵化物的基團(tuán)。這種基團(tuán)可以與鹵化物相同的方式使用，并以與鹵化物相同的方式處理(X，其中X是鹵素，如Cl或Br)。擬鹵化物包括但不限于氰化物、氰酸鹽/酯、硫氰酸鹽/酯、硒氰酸鹽/酯、三氟甲基和疊氮化物。
在本文中術(shù)語(yǔ)“對(duì)象”或“個(gè)體”或“患者”可互換使用，指需要進(jìn)行治療或預(yù)防的任何對(duì)象，尤其是脊椎動(dòng)物對(duì)象，更具體是哺乳動(dòng)物對(duì)象。屬于本發(fā)明范圍的合適的脊椎動(dòng)物包括但不限于靈長(zhǎng)動(dòng)物、鳥(niǎo)類、家畜(如羊、牛、馬、驢、豬)、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(如兔、小鼠、大鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠)、伴侶動(dòng)物(如貓、犬)和捕獲的野生動(dòng)物(如狐貍、鹿、野狗)。優(yōu)選對(duì)象是需要治療或預(yù)防神經(jīng)病的人。然而應(yīng)理解，上述術(shù)語(yǔ)并不表明癥狀已存在。
“立體異構(gòu)體”指具有相同分子構(gòu)成、區(qū)別僅在于原子團(tuán)的空間三維排列的兩種或多種異構(gòu)體。立體異構(gòu)體可以是非對(duì)映異構(gòu)體或?qū)τ钞悩?gòu)體。應(yīng)了解，本文所述化合物可具有不對(duì)稱中心，因此能夠以一種以上的立體異構(gòu)體形式存在。因此，本發(fā)明也涉及就一個(gè)或多個(gè)不對(duì)稱中心而言基本純凈的異構(gòu)形式的化合物，如大于約90％ee，如約95％或97％ee，或大于99％ee，以及混合物，包括它們的外消旋混合物。這些異構(gòu)體可天然產(chǎn)生，或者可通過(guò)不對(duì)稱合成，例如用手性中間體或通過(guò)手性拆分制備。
除非另有說(shuō)明，本文所用術(shù)語(yǔ)“取代的”和其變體如“任選取代的”指可用一個(gè)或多個(gè)其它取代基進(jìn)一步取代取代基，這種取代可能是任選或非任選的。其它取代基的例子包括C1-C10烷基、C3-C10烯基、C3-C10炔基、芳基、-(C1-C4烷基)芳基、雜環(huán)基、雜芳基、C3-C7-環(huán)烷基、C1-C4-全氟烷基、-OH、-SH、-HN2、腈、C1-C10-烷氧基、鹵代C1-4烷基、羥基C1-4烷基、C1-C10-烷硫基、-CF3、鹵素(F、Cl、Br、I)、-NO2、-CO2R23、-NH2、C1-C4烷基氨基、C1-C4二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、芳基C1-4烷基氨基、芳基C1-4二烷基氨基、芳氧基、芳基C1-4烷氧基、甲?；?、C1-10烷基羰基和C1-10烷氧基羰基、-PO3H2、-CO2H、-CONHSO2R21、-CONHSO2NHR20、-NHCONHSO2R21、-NHSO2R21、-NHSO2NHCOR21、-SO2NHR20、-SO2NHCOR21、-SO2NHCONHR20、-SO2NHCO2R21、四唑基、-CHO、-CONH2、-NHCHO、-CO-(C1-C6全氟烷基)、-S(O)r-(C1-C6全氟烷基)，其中R20是H、C1-C5-烷基、芳基、-(C1-C4-烷基)-芳基、雜芳基；R21是芳基、C3-C7-環(huán)烷基、C1-C4-全氟烷基、C1-C4烷基，它們是用選自下組的取代基任選取代的芳基、雜芳基、-OH、-SH、C1-C4-烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷硫基、-CF3、鹵素、-NO2、-CO2R23、-NH2、C1-C4-烷基氨基、C1-C4-二烷基氨基、-PO3H2或雜芳基；R22選自C1-C6-烷基、C3-C6-環(huán)烷基、芳基、-(C1-C5-烷基)-芳基或雜芳基。
“載體”指多核苷酸分子，優(yōu)選獲自(例如)質(zhì)粒、噬菌體、酵母或病毒的DNA分子，其中可插入或克隆入多核苷酸。載體優(yōu)選含有一個(gè)或多個(gè)獨(dú)特的限制性位點(diǎn)，能夠在確定的宿主細(xì)胞，包括靶細(xì)胞或組織或者其祖細(xì)胞或組織中自主復(fù)制，或可整合入確定宿主的基因組中，以使克隆的序列可復(fù)制。因此，載體可以是自主復(fù)制型載體，即作為染色體外實(shí)體存在的載體，其復(fù)制不依賴染色體復(fù)制，如線性或閉合的環(huán)狀質(zhì)粒、染色體外元件、小染色體或人工染色體。載體可含有保證自身復(fù)制的任何元件?；蛘?，載體可以是引入宿主細(xì)胞時(shí)整合入基因組并與整合的染色體一起復(fù)制的載體。載體系統(tǒng)可包括一種載體或質(zhì)粒，兩種或多種載體或質(zhì)粒，它們一起含有準(zhǔn)備引入宿主細(xì)胞基因組的全部DNA或轉(zhuǎn)座子。載體的選擇一般取決于載體與準(zhǔn)備引入載體的宿主細(xì)胞的相容性。在本發(fā)明情況下，載體優(yōu)選為病毒或病毒衍生載體，它在動(dòng)物，優(yōu)選哺乳動(dòng)物細(xì)胞中有可操作功能。這種載體可衍生自痘病毒、腺病毒或酵母。載體也可包括可用于篩選合適轉(zhuǎn)化子的選擇標(biāo)記物，如抗生素抗性基因。本領(lǐng)域技術(shù)人員知道這種抗性基因的例子，包括產(chǎn)生抗生素卡那霉素和G418(遺傳霉素)抗性的nptII基因以及產(chǎn)生對(duì)潮霉素B抗性的hph基因。
縮寫(xiě)以下縮寫(xiě)用于整個(gè)申請(qǐng)d＝天h＝小時(shí)s＝秒i.v.＝靜脈內(nèi)i.p.＝腹膜內(nèi)s.c.＝皮下STZ＝鏈脲霉素CCI＝慢性壓迫性損傷治療或預(yù)防神經(jīng)病的組合物和方法本發(fā)明源自以下意外發(fā)現(xiàn)AT2受體拮抗劑能有效預(yù)防或減輕神經(jīng)病，包括原發(fā)性和繼發(fā)性神經(jīng)病的疼痛癥狀。這些發(fā)現(xiàn)基于一些臨床前數(shù)據(jù)，這些數(shù)據(jù)顯示給予坐骨神經(jīng)有機(jī)械性神經(jīng)損傷(涉及慢性壓迫性損傷(CCI))的大鼠或STZ-糖尿病大鼠各種AT2受體拮抗劑，能夠劑量依賴性減緩神經(jīng)性疼痛的定義性癥狀-觸覺(jué)(機(jī)械)異常性疼痛的發(fā)展。因此，本發(fā)明提供了治療或預(yù)防神經(jīng)病的方法，其中所述方法一般包括以合適的藥物組合物形式給予患有神經(jīng)病或處于發(fā)生神經(jīng)病的風(fēng)險(xiǎn)中的個(gè)體有效量的AT2受體拮抗劑。按照本發(fā)明，AT2受體拮抗劑可用于預(yù)防或減輕與神經(jīng)病相關(guān)的一種或多種癥狀，包括但不限于感覺(jué)過(guò)敏、痛覺(jué)過(guò)敏、異常性疼痛和/或自發(fā)性灼痛。在一些實(shí)施方式中，AT2受體拮抗劑用于預(yù)防或減輕與周圍神經(jīng)病相關(guān)的一種或多種癥狀，這些癥狀的說(shuō)明性例子包括麻木、虛弱、灼痛、射痛和反射消失。疼痛可能很嚴(yán)重并使人殘廢。在一些實(shí)施方式中，作為預(yù)防和/或減輕的對(duì)象的癥狀是疼痛。因此，在一個(gè)相關(guān)方面，本發(fā)明提供了預(yù)防和/或減輕個(gè)體的神經(jīng)性疼痛的方法，其包括以合適的藥物組合物形式給予所述個(gè)體疼痛-預(yù)防或減輕有效量的AT2受體拮抗劑。
神經(jīng)病有許多可能的原因，應(yīng)理解，本發(fā)明考慮了治療或預(yù)防任何神經(jīng)病，無(wú)論其原因是什么。在一些實(shí)施方式中，神經(jīng)病是神經(jīng)疾病的結(jié)果(原發(fā)性神經(jīng)病)，或者是全身性疾病引起的神經(jīng)病(繼發(fā)性神經(jīng)病)，例如但不限于糖尿病性神經(jīng)??；帶狀皰疹相關(guān)性神經(jīng)病；尿毒癥相關(guān)性神經(jīng)病；淀粉樣變神經(jīng)??；HIV感覺(jué)神經(jīng)病；遺傳性運(yùn)動(dòng)和感覺(jué)神經(jīng)病(HMSN)；遺傳性感覺(jué)神經(jīng)病(HSN)；遺傳學(xué)感覺(jué)和自主神經(jīng)??；潰瘍損害的遺傳性神經(jīng)病；呋喃妥因神經(jīng)病；腫瘤性(tumaculous)神經(jīng)??；營(yíng)養(yǎng)不良引起的神經(jīng)病和腎衰竭引起的神經(jīng)病。其它原因包括重復(fù)活動(dòng)，例如打字或在裝配線上工作；已知能引起周圍神經(jīng)病的藥物，如幾種抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥(ddC(扎西他濱)和ddI(去羥肌苷)、抗生素(用于克羅恩氏病的甲硝唑、用于結(jié)核病的異煙肼)、金化合物(用于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)、一些化療藥(如長(zhǎng)春新堿等)等等。也已知有些化合物能引起周圍神經(jīng)病，包括酒精、鉛、砷、汞和有機(jī)磷酸酯殺蟲(chóng)劑。一些周圍神經(jīng)病伴隨著感染過(guò)程(如Guillian-Barre綜合征)。在某些實(shí)施方式中，神經(jīng)病是周圍神經(jīng)病，它可能是機(jī)械性神經(jīng)損傷或疼痛性糖尿病神經(jīng)病(PDN)或相關(guān)病癥的繼發(fā)性疼痛。
神經(jīng)病可能是急性或慢性，在這個(gè)方面，本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)理解，神經(jīng)病的時(shí)程將取決于其根本原因。在外傷中，癥狀的發(fā)生可能很急或很突然；然而，大部分嚴(yán)重癥狀在一段時(shí)間內(nèi)發(fā)生并持續(xù)數(shù)年。炎性神經(jīng)病和一些代謝神經(jīng)病具有從數(shù)天至數(shù)周的亞急性時(shí)程。數(shù)周至數(shù)月的慢性時(shí)程通常表明是毒性或代謝性神經(jīng)病。持續(xù)多年的慢性、緩慢進(jìn)展的神經(jīng)病例如有疼痛性糖尿病神經(jīng)病或大部分遺傳性神經(jīng)病或稱為慢性炎性脫髓鞘多神經(jīng)根神經(jīng)病(CIDP)的病癥。癥狀復(fù)發(fā)和減輕的神經(jīng)病包括Guillian-Barre綜合征。
AT2受體拮抗劑包括結(jié)合于AT2受體亞型并通過(guò)此受體適當(dāng)?shù)匾种蒲芫o張素II信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的任何活性化合物，包括所述活性化合物的藥學(xué)相容性鹽。此分類包括具有不同結(jié)構(gòu)特征的化合物。例如，在一些實(shí)施方式中，AT2受體拮抗劑選自美國(guó)專利號(hào)5,798,415所列化合物，尤其是此專利要求權(quán)利的化合物。在這種類型的說(shuō)明性例子中，AT2受體拮抗劑選自具有式(Ia)的化合物或其藥學(xué)相容性鹽 式中Q是萘基、其中1-3個(gè)原子獨(dú)立地選自氮、氧或硫的5-7元雜環(huán)或其中1-4個(gè)原子獨(dú)立地選自氮、氧或硫的8-11元雜雙環(huán)，所述雜環(huán)或雜雙環(huán)是飽和、部分飽和或不飽和的，所述萘基、雜環(huán)或雜雙環(huán)被1-4個(gè)W1取代基任選取代；W1取代基各自獨(dú)立地選自鹵素、羥基、硝基、氰基、C1-C8烷基、C3-C7環(huán)烷基、C1-C7烷氧基、氨基、C1-C7烷基氨基、二(C1-C7烷基)氨基、C1-C7烷硫基、C1-C7烷基亞磺?；?、C1-C7烷基磺酰基、-CONRR、-COOR或苯基，所述烷基、環(huán)烷基、烷氧基、烷基氨基、二烷基氨基、烷硫基、烷基亞磺?；屯榛酋；杀灰粋€(gè)或多個(gè)W2取代基任選取代，所述苯基可被一個(gè)或多個(gè)W3取代基任選取代；
R各自獨(dú)立地是氫或C1-C8烷基，所述烷基可被一個(gè)或多個(gè)W2取代基任選取代；W2取代基各自獨(dú)立地選自鹵素，羥基，氧，C3-C7環(huán)烷基，C1-C7烷氧基，酰氧基，苯基或其中1-3個(gè)原子選自氮、氧或硫的5-7元雜環(huán)，所述苯基和雜環(huán)可被一個(gè)或多個(gè)W3取代基任選取代；W3取代基各自獨(dú)立地選自鹵素、羥基、硝基、C3-C7環(huán)烷基、C1-C7烷氧基、氨基、C1-C7烷基氨基、二(C1-C7烷基)氨基、C1-C7烷硫基、C1-C7烷基亞磺?；駽1-C7烷基磺?；环謩e來(lái)看，R1和R2各自獨(dú)立地選自氫、羥基、C1-C10烷基、C1-C7烷硫基、C1-C7烷基亞磺?；?、C1-C7烷基磺?；?、苯基或者其中1-3個(gè)原子選自氮、氧或硫的5-7元雜環(huán)或8-11元雜雙環(huán)，所述烷基、烷硫基、烷基亞磺?；屯榛酋；杀灰粋€(gè)或多個(gè)W4取代基任選取代，所述苯基和所述雜環(huán)和雜雙環(huán)可被1-5個(gè)W3取代基任選取代，其中W3取代基的定義如上所述，所述雜環(huán)是飽和、部分飽和或不飽和的雜環(huán)，限制條件是R1和R2不都是羥基；R1和R2與它們連接的碳原子一起形成C3-C7碳環(huán)，C7-C11碳雙環(huán)，其中1-3個(gè)原子獨(dú)立地選自氮、氧或硫的3-7元雜環(huán)基團(tuán)或其中1-4個(gè)原子獨(dú)立地選自氮、氧或硫的7-11元雜雙環(huán)基團(tuán)，所述碳環(huán)，碳雙環(huán)、雜環(huán)或雜雙環(huán)基團(tuán)是飽和、部分飽和或不飽和的基團(tuán)，可被1個(gè)或多個(gè)W5取代基任選取代；W4取代基各自獨(dú)立地選自鹵素、C3-C8環(huán)烷基、苯基或其中1-3個(gè)原子選自氮、氧或硫的5-7元雜環(huán)，所述苯基和雜環(huán)可被一個(gè)或多個(gè)選自下組的取代基任選取代鹵素、羥基、硝基、C1-C10烷基、C3-C7環(huán)烷基、C1-C7烷氧基、氨基、C1-C7烷基氨基和二(C1-C7烷基)氨基；W5取代基各自獨(dú)立地選自鹵素、羥基、硝基、氰基、氧、C1-C8烷基、C3-C7環(huán)烷基、C1-C7烷氧基、氨基、C1-C7烷基氨基、二(C1-C7烷基)氨基、C1-C7烷硫基、C1-C7烷基亞磺?；?、C1-C7烷基磺?；?、-CONRR、-COOR或苯基，所述烷基、環(huán)烷基、烷氧基、烷基氨基、二烷基氨基、烷硫基、烷基亞磺酰和烷基磺?；杀?個(gè)或多個(gè)W2取代基任選取代，所述苯基可被1個(gè)或多個(gè)W3取代基任選取代，其中W3取代基的定義如上所述；R3是-(CH2)n-COR4、四唑基、C1-C5烷基四唑基、三唑基、C1-C5烷基三唑基、-(CH2)nCH2OH、-SO2R4、-SO2NR5R6或-NHSO2R7；R4是氫、羥基、-NHSO2R7、C1-C10烷氧基、C1-C7烷硫基、-NR5R6、-NHSO2R7或-OY，所述烷氧基和烷硫基可被1個(gè)或多個(gè)W6取代基任選取代；
n是0-5的整數(shù)；Y是藥學(xué)上可接受的陽(yáng)離子或在生理?xiàng)l件下可水解的基團(tuán)；分別來(lái)看，R5和R6各自獨(dú)立地是氫、羥基、氰基、C1-C10烷基、C1-C8烷氧基、-COR、-CONRR、-COOR、苯氧基、-CO(C6H5)或其中1-4個(gè)原子選自氮、氧或硫的5-6元雜環(huán)，其中R的定義如上所述，所述烷基可被1個(gè)或多個(gè)W3取代基任選取代，其中W3取代基的定義如上所述，所述-CO(C6H5)可被1-3個(gè)W6取代基任選取代，所述雜環(huán)可被1個(gè)或多個(gè)W5取代基任選取代，其中W5取代基的定義如上所述；R4和R6與它們連接的氮原子一起形成其中含有1-3個(gè)氮原子和0-3個(gè)選自氧或硫的原子的3-7元環(huán)，所述環(huán)是飽和、部分飽和或不飽和的環(huán)，可被1個(gè)或多個(gè)W1取代基任選取代，其中W1取代基的定義如上所述；R7是C1-C10烷基或苯基，所述烷基可被1個(gè)或多個(gè)W6取代基任選取代，所述苯基可被1個(gè)或多個(gè)W3取代基任選取代，其中W3取代基的定義如上所述；X是具有下式的氮雜環(huán)基團(tuán) 分別來(lái)看，L1、L2、L3、L4和L5獨(dú)立地是氫、鹵素、硝基、C1-C6烷基、C1-C7環(huán)烷基、聚氟-C1-C4烷基、芳基、雜芳基、四唑-5-基、-COR8、-CO2R8、-CONHSO2R9、-CONR10R10、-CONH(四唑-5-基)、-OR9、-OCONR9R11、-NR8R9、-NHCOR9、-NHCO2R9、-NHCONR8R9、-NHSO2R9、-NHSO2NR9R11、-NHSO2-聚氟苯基、-SR9、-SOR9、-SO2R9、-SO2NHCN、-SO2NR11R12、-SO2NHCOR9、-SO2NH-雜芳基、-PO(OR8)2或-PO(OR8)R11，所述烷基、環(huán)烷基、芳基和雜芳基可被1個(gè)或多個(gè)選自下組的取代基任選取代羥基、鹵素、C1-C4全氟烷基、C1-C4烷氧基、芳基、雜芳基、胍基、嗎啉代、四唑-5-基、-COR8、-CO2R8、-CONHSO2R9、-CONR8R8、-O-COR8、-NR8R8、-NR12COOR9、-N(C1-C6烷基)哌嗪、-SR9、-SOR9、-SO2R9、-SO2NR8CN、-SO2NR8COR9、-SO2NR8-雜芳基、-PO(OR8)2和-PO(OR8)R13；L1和L2、L2和L3、L3和L4或L4和L5與它們連接的氮雜環(huán)基團(tuán)一起形成其中含有1-5個(gè)氮原子、0-3個(gè)選自氧或硫的原子的8-11元稠合氮雜雙環(huán)系統(tǒng)，所述氮雜雙環(huán)系統(tǒng)可被1-3個(gè)W6取代基任選取代；W6取代基各自獨(dú)立地是鹵素、硝基、氰基、C1-C6烷基、C3-C7環(huán)烷基、聚氟-C1-C4烷基、芳基、雜芳基、四唑-5-基、-COR8、-CO2R8、-CONR8SO2R9、-CONR9R10、-CONR8(四唑-5-基)、-OR9、-OCONR9R11、-NR8R9、-NR8COR9、-NR8CO2R9、-NR8CONR8R9、-NR8SO2R9、-NR8SO2NR9R11、-NR8SO2-聚氟苯基、-SR9、-SOR9、-SO2R9、-SO2NR8CN、-SO2NR9R12、-SONR8COR9、-SO2NR8-雜芳基、-PO(OR8)2或-PO(OR8)R11，所述烷基、環(huán)烷基、芳基和雜芳基可被1個(gè)或多個(gè)選自下組的取代基任選取代羥基、鹵素、C1-C4全氟烷基、C1-C4烷氧基、芳基、雜芳基、胍基、嗎啉代、四唑-5-基、-COR8、-CO2R8、-CONR8SO2R9、-CONR8R9、-O-COR8、-NR8R9、-NR12COOR9、-N(C1-C6烷基)哌嗪、-SR9、-SOR9、-SO2R9、-SO2NR8CN、-SO2NR8COR9、-SO2NR8-雜芳基、-PO(OR8)2和-PO(OR8)R13；R8各自獨(dú)立地是氫、C1-C6烷基、C3-C7環(huán)烷基、芳基、雜芳基或芳基(C1-C6)烷基；R9各自獨(dú)立地是氫、C1-C10烷基、C3-C7環(huán)烷基、芳基、雜芳基或聚氟(C1-C4)烷基，所述烷基和環(huán)烷基可被1個(gè)或多個(gè)選自下組的取代基任選取代鹵素、羥基、硝基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷硫基、-CO2R12、氨基、C1-C4烷基氨基、二(C1-C4)烷基氨基、芳基、雜芳基、-SH、-PO3H2、-P(O)(OH)(O-C1-C4烷基)、P(O)(OR8)(R11)或P(O)(OR14)(R15)；R10各自獨(dú)立地是氫、C1-C5烷基、芳基或-CH2-芳基；R11各自獨(dú)立地是氫、C1-C5烷基、C3-C7環(huán)烷基、芳基或-CH2-芳基；R12各自是氫或C1-C4烷基；R13各自獨(dú)立地是氫、C1-C5烷基、C2-C4烯基、C1-C4烷氧基(C1-C4)烷基或芐基，所述芐基可被1個(gè)或多個(gè)選自下組的取代基任選取代羥基、氨基、硝基和甲氧基；R14和R15一起形成其中1-3個(gè)原子獨(dú)立地選自氮、氧或硫的5-7元環(huán)；M1和M2一起形成-(CH2)m；和m是3-7的整數(shù)。
優(yōu)選化合物是式(I)化合物，式中X是 L1、L2和L4的定義如上；Q是噻吩、吡啶、嘧啶、萘基、苯并呋喃或用1或2個(gè)W1取代基取代的任何上述基團(tuán)；R1和R2一起考慮，定義如上；R3是-(CH2)nCOR4；n是0或1；R4是氫、羥基或-OY；Y是藥學(xué)上可接受的陽(yáng)離子或在生理?xiàng)l件下可水解的基團(tuán)；和W1各自獨(dú)立地是鹵素、羥基、C1-C8烷基、C3-C7環(huán)烷基、C1-C7烷氧基、氨基、C1-C7烷基氨基、二(C1-C7烷基)氨基、-CONRR或-COOR，其中R的定義如上。
尤其優(yōu)選的是X、Q、R3、R4、n和Y的定義如上所述的化合物，其中R1和R2一起形成C5-C6碳環(huán)，C8-C10碳雙環(huán)或其中1或2個(gè)原子獨(dú)立地選自氮、氧或硫的5-7元雜環(huán)，所述碳環(huán)、碳雙環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)是飽和、部分飽和或不飽和的；分別來(lái)看，L1和L2各自獨(dú)立地是氫、鹵素、C1-C6烷基、C3-C7環(huán)烷基、聚氟-C1-C4烷基或-CO2R8；L1和L2與它們連接的氮雜環(huán)基團(tuán)一起形成含有2-4個(gè)氮原子的8-10元稠合氮雜雙環(huán)系統(tǒng)，所述氮雜雙環(huán)系統(tǒng)可被1-3個(gè)W6取代基任選取代；L4是C1-C4烷基、C3-C5環(huán)烷基或C1-C3烷氧基；R8是氫、C1-C6烷基或C3-C7環(huán)烷基；和W6各自獨(dú)立地是鹵素、C1-C6烷基、C3-C7環(huán)烷基、聚氟-C1-C4烷基、-CO2R8、氨基、C1-C6烷基氨基、二(C1-C6)烷基氨基、?；被蚨；被?br>
尤其優(yōu)選的上述化合物是具有以下結(jié)構(gòu)的化合物
式中L4是C1-C4烷基或C3-C5環(huán)烷基；W6各自獨(dú)立地是C1-C6烷基、氨基、C1-C6烷基氨基、二(C1-C6)烷基氨基、酰基氨基或二?；被?；和R1和R2一起形成環(huán)戊烷、環(huán)己烷、環(huán)戊烯、四氫吡喃或茚滿，例如1-[5-(2-乙基-5，7-二甲基咪唑并[4.5-b]吡啶-3-基甲基)噻吩-2-基]-環(huán)戊-3-烯羧酸；1-[5-(5，7-二甲基-2-丙基咪唑并[4.5-b]吡啶-3-基甲基)噻吩-2-基]環(huán)戊-3-烯羧酸；1-[5-(2-環(huán)丙基-5，7-二甲基咪唑并[4.5-b]吡啶-3-基甲基)噻吩-2-基]環(huán)戊-3-烯羧酸；1-＞5-(2-環(huán)丙基-5，7-二甲基咪唑并[4.5-b]吡啶-3-基甲基)噻吩-2-基]環(huán)戊烷羧酸；4-[5-(2-乙基-5，7-二甲基咪唑并[4.5-b]吡啶-3-基甲基)噻吩-2-基]四氫吡喃-4-羧酸；2-[5-(2-乙基-5，7-二甲基咪唑并[4.5-b]吡啶-3-基甲基)噻吩-2-基]茚滿-2-羧酸；2-[5-(2-環(huán)丙基-5，7-二甲基咪唑并[4，5-b]吡啶-3-基甲基)噻吩-2-基]茚滿-2-羧酸；1-[5-(2-乙基-5，7-二甲基咪唑并[4，5-b]吡啶-3-基甲基)噻吩-2-基]環(huán)己烷羧酸；和1-[5-(2-環(huán)丙基-5，7-二甲基咪唑并[4.5-b]吡啶-3-基甲基)噻吩-2-基]環(huán)己烷羧酸。
特別優(yōu)選的上述化合物是具有以下結(jié)構(gòu)的化合物 式中
L4是C1-C4烷基或C3-C5環(huán)烷基；和R1和R2一起形成-CH2CH2CH2CH2-或-CH2CH＝CHCH2-，例如1-[5-(2-乙基-5，7-二甲基咪唑并[4.5-b]吡啶-3-基甲基)吡啶-2-基]環(huán)戊烷羧酸；1-[5-(2-環(huán)丙基-5，7-二甲基咪唑并[4.5-b]吡啶-3-基甲基)吡啶-2-基]環(huán)戊烷羧酸；1-[2-(2-乙基-5，7-二甲基咪唑并[4.5-b]吡啶-3-基甲基)嘧啶-5-基]環(huán)戊-3-烯羧酸；1-[2-(2-環(huán)丙基-5，7-二甲基咪唑并[4.5-b]吡啶-3-基甲基)嘧啶-5-基]環(huán)戊-3-烯羧酸；1-[6-(2-乙基-5，7-二甲基咪唑并[4.5-b]吡啶-3-基甲基)萘-2-基]環(huán)戊-3-烯羧酸；和1-[3-溴-5-(2-乙基-5，7-二甲基咪唑并[4.5-b]吡啶-3-基甲基)苯并呋喃-2-基]環(huán)戊烷羧酸。
特別優(yōu)選的上述化合物是具有以下結(jié)構(gòu)的化合物 式中Q是 分別來(lái)看，L1和L2各自獨(dú)立地是鹵素、C1-C6烷基或-CO2H；L4是C1-C4烷基；和R1和R2一起形成-CH2CH2CH2CH2-或-CH2CH＝CHCH2-，例如2-丁基-3-[5-(1-羧基環(huán)戊-3-烯基)噻吩-2-基甲基]-5-氯-3H-咪唑-4-羧酸；3-[5-(1-羧基環(huán)戊-3-烯基)噻吩-2-基甲基]-5-乙基-2-丙基-3H-咪唑-4-羧酸；和3-[5-(1-羧基環(huán)戊-3-烯基)噻吩-2-基甲基]-5-氯-2-丙基-3H-咪唑-4-羧酸。
特別優(yōu)選的上述化合物是具有以下結(jié)構(gòu)的化合物 式中
Q是 L4是C1-C4烷基；和R1和R2一起形成-CH2CH2CH2CH2-或-CH2CH＝CHCH2-，例如1-[5-(2-丁基-5-甲基-4-氧代-4H-喹唑啉-3-基甲基)吡啶-2-基]環(huán)戊烷羧酸；和1-[5-(2-丁基-5-甲基-4-氧代-4H-喹唑啉-3-基甲基)噻吩-2-基]環(huán)戊-3-烯羧酸。
特別優(yōu)選的上述化合物是具有以下結(jié)構(gòu)的化合物 式中分別來(lái)看，L1和L2各自獨(dú)立地是鹵素、C1-C6烷基、聚氟-C1-C6烷基或-CO2H；L4是C1-C4烷基；和R1和R2一起形成-CH2CH2CH2CH2-或-CH2CH＝CHCH2-，例如2，5-二丁基-4-[5-(1-羧基環(huán)戊-3-烯基)噻吩-2-基甲基]-2H-吡唑-3-羧酸；5-丁基-4-[5-(1-羧基環(huán)戊-3-烯基)噻吩-2-基甲基]-2-三氟甲基-2H-吡唑-3-羧酸；和5-丁基-4-[5-(1-羧基環(huán)戊-3-烯基)噻吩-2-基甲基]-2-丙基-2H-吡唑-3-羧酸。
其它優(yōu)選化合物包括與下述化合物通用類型相同的化合物1-[5-(2-環(huán)丙基-5，7-二甲基咪唑并[4.5-b]吡啶-3-基甲基)噻吩-2-基]環(huán)戊-3-烯羧酸苯磺酰胺；1-[5-(2-環(huán)丙基-5，7-二甲基咪唑并[4.5-b]吡啶-3-基甲基)噻吩-2-基]環(huán)戊-3-烯羧酸對(duì)甲苯磺酰胺；1-[5-(2-環(huán)丙基-5，7-二甲基咪唑并[4.5-b]吡啶-3-基甲基)噻吩-2-基]環(huán)戊-3-烯羧酸甲磺酰胺；和1-[5-(2-環(huán)丙基-5，7-二甲基咪唑并[4.5-b]吡啶-3-基甲基)噻吩-2-基]環(huán)戊-3-烯羧酸三氟甲磺酰胺。
各種中間體也屬于本發(fā)明范圍，包括1-噻吩-2-基-環(huán)戊-3-烯羧酸乙酯；1-(5-甲酰噻吩-2-基)環(huán)戊-3-烯羧酸乙酯；1-(5-氯甲基噻吩-2-基)環(huán)戊-3-烯羧酸乙酯；和
1-[5-(2-乙基-5，7-二甲基咪唑并[4，5-b]吡啶-3-基甲基)噻吩-2-基]環(huán)戊-2-3-烯羧酸乙酯。
在其它實(shí)施方式中，AT2受體拮抗劑選自美國(guó)專利號(hào)5,385,894所列的雙取代的6-氨基喹唑啉酮化合物，尤其是此專利要求權(quán)利的化合物。式(IIa)或其藥學(xué)相容性鹽代表了這種化合物的代表性例子 式中R1是(a)CO2R2，(b)四唑-5-基，(c)NHSO2CF3，(d)SO2NHCOR3，或(e)SO2NH-雜芳基；R2是(a)氫，或(b)C1-C6烷基；R3是(a)C1-C6烷基，(b)C3-C7環(huán)烷基，(c)苯基，(d)取代的苯基，其中取代基是F、Cl、Br、C1-C4烷氧基、全氟C1-C4烷基、二-(C1-C4-烷基)氨基或CO2R2，(e)取代的C1-C8烷基，其中取代基是C3-C7環(huán)烷基、C1-C4烷氧基、羥基、二-(C1-C4烷基)氨基、CO2R2、嗎啉基、C1-C4烷基哌嗪基、CF3、硫、C1-C4烷基亞磺?；1-C4烷基磺?；?、雜芳基、NH2或芳基，或
(f)雜芳基；R4是(a)C1-C6烷基，(b)取代的C1-C6烷基，其中取代基是C3-C7環(huán)烷基、C1-C4烷氧基、羥基、二-(C1-C4烷基)氨基、CO2R2、嗎啉基、C1-C4烷基哌嗪基、CF3、C1-C4烷硫基、C1-C4烷基亞磺?；1-C4烷基磺?；?、-CHO、O(C2-C3烷基-O-)nC1-C3烷基(n＝1-5)或NHCO2(C1-C6-烷基)。
(c)C2-C6烯基，(d)苯基C1-C6烷基，(e)取代的苯基C1-C6烷基，其中苯基上的取代基是羥基、C1-C4烷氧基、F、Cl、I、Br、NO2、氰基、CO2R2、二(C1-C4烷基)氨基、-O芐基、CF3、苯基-C1-C4-烷氧基、C1-C4烷硫基、C1-C4-烷基亞磺?；?OPO(O-芐基)2、或C1-C4烷基磺?；?、氨基、P(O)(OH)2、C1-C4烷基、-OPO(O-C1-C6烷基)2、OPO(OH)2、OCO(CH2)2COOH、OSO3H、或O(C2-C3烷基-O-)nC1-C3烷基，(f)雜芳基C1-C6烷基，或(g)取代的雜芳基C1-C6烷基，其中雜芳基上的取代基是F、Cl、NO2、CO2R2或二-(C1-C4烷基)氨基；R5是(a)CO2R7，(b)CONR8R9，(c)COR10，(d)SO2NR8R9，或(e)SO2R10；R6是(a)C1-C6烷基，(b)取代的C1-C6烷基，其中取代基是C3-C7環(huán)烷基、芐基或C1-C4-烷氧基，(c)環(huán)丙基；R7是(a)C1-C6烷基，(b)取代的C1-C6烷基，其中取代基是C1-C4烷氧基、羥基、二(C1-C4烷基)氨基、CO2R2、嗎啉基、C1-C4烷基哌嗪基、C1-C4烷基亞磺?；1-C4烷基磺?；騉(C2-C3烷基-O-)nC1-C3烷基，(c)苯基C1-C6烷基，(d)取代的苯基C1-C6烷基，其中苯基上的取代基是羥基、C1-C4烷氧基、F、Cl、NO2、氰基、CO2R2、二(C1-C4烷基)氨基、CF3、苯基C1-C4烷氧基、C1-C4烷硫基、C1-C4烷基亞磺酰基、C1-C4烷基磺?；騉(C2-C3烷基-O-)nC1-C3烷基，(e)雜芳基C1-C6烷基，或(f)取代的雜芳基C1-C6烷基，其中雜芳基上的取代基是F、Cl、NO2、CO2R2或二-(C1-C4烷基)氨基；R8是(a)氫，或(b)C1-C6烷基；R9是(a)C1-C6烷基，或(b)取代的C1-C6烷基，其中取代基是C1-C4烷氧基、羥基、二-(C1-C4烷基)氨基、CO2R2、嗎啉基、C1-C4烷基哌嗪基、C1-C4烷基亞磺?；駽1-C4烷基磺?；?，(c)全氟C1-C6烷基，(d)苯基，(e)雜芳基，或R8和R9一起形成嗎啉代， R10是(a)苯基，(b)取代的苯基，其中取代基是F、Cl、Br、I、C1-C4-烷氧基、C1-C4烷基、NO2、氰基、OC6H5、CO2R2、二(C1-C4烷基氨基)、CF3、C1-C4烷硫基、C1-C4烷基亞磺?；?、C1-C4烷基磺酰基、-OPO(OC1-C6-烷基)2、OPO(OH)2、OPO(O-芐基)2、OCO(CH2)2COOH、OSO2OH、-PO(OC1-C6-烷基)2、-PO(OH)2、OBn或O-(C2-C3烷基-O)nC1-C3烷基，(c)苯基C1-C6烷基，(d)雜芳基，(e)C1-C6烷基，
(f)取代的C1-C6烷基，其中取代基是C3-C7環(huán)烷基、C1-C4烷氧基、羥基、二-(C1-C4烷基)氨基、CO2R2、嗎啉基、C1-C4烷基哌嗪基、CF3、硫、C1-C4烷基亞磺?；?、C1-C4烷基磺酰基、咪唑基、-N(COC1-C6烷基)哌嗪基或N-芳基-哌嗪基(g)取代的苯基C1-C6烷基，其中苯基上的取代基是羥基、C1-C4烷氧基、F、Cl、NO2、氰基、CO2R2、二(C1-C4烷基)氨基、CF3、苯基C1-C4烷氧基、硫、C1-C4烷基亞磺?；駽1-C4-烷基磺酰基，或(h)C3-C7環(huán)烷基。
R11是(a)氫，(b)F、Cl、Br或I(c)C1-C4烷基，(d)C1-C4烷氧基，R12是(a)氫，(b)C1-C5烷基，(c)苯基，(d)取代的苯基，其中取代基是C1-C4烷氧基、F、Cl、CO2R2、二(C1-C4烷基)氨基、硫、C1-C4烷基亞磺?；?、C1-C4烷基磺?；?。
在一些上述實(shí)施方式中，術(shù)語(yǔ)雜芳基指未取代的、單取代的或雙取代的五元或六元芳香環(huán)，其中含有1-3個(gè)選自O(shè)、S或N的雜原子，取代基選自C1-C4烷基、F、Cl、CO2R2或二-(C1-C4烷基)氨基。
將下表所定義的縮寫(xiě)用于以表格形式說(shuō)明的特定實(shí)施方式
在式(IIa)化合物的第一種具體實(shí)施方式
中，R5是CO2R7。以下式(IIa)化合物代表了一類這種實(shí)施方式，式中R1是四唑-5-基或SO2NHCOR3或NHSO2CF3R3是a)苯基，b)取代的苯基，其中取代基是F、Cl、Br、I或C1-C4烷氧基，c)用二-(C1-C4-烷基)氨基或NH2取代的C1-C8烷基，或d)C3-C7-環(huán)烷基；R4是a)C2-C6烷基，b)取代的C2-C6烷基，其中取代基是CHO、CO2C1-C4烷基、CO2H、OC1-C4烷基、環(huán)己基、苯基、NHCO2tBu，c)芐基，d)取代的芐基，其中苯基上的取代基是F、Cl、Br、I、OH、OPO(OC1-C4烷基)2、OPO(O芐基)2、OPO(OH)2、-PO(OC1-C4烷基)2、-PO(O芐基)2、OPO(OH)2、NO2、NH2、N(C1-C4烷基)2、O芐基，e)CH2-雜芳基或f)C3-C6烯基；R6是a)C1-C6烷基，b)取代的C1-C6烷基，其中取代基是-芐基、-C1-C3烷基或-OC1-C4烷基，或c)環(huán)丙基；R7是a)C1-C6烷基，b)芐基，c)C2-C4烷基-O-C1-C4烷基或d)苯基；R11和R12是氫，這種實(shí)施方式的第一類化合物的說(shuō)明性例子是以下式(IIa)化合物(標(biāo)出了化合物編號(hào))
在式(IIa)化合物的第二種具體實(shí)施方式
中，R5是CONR8R9。以下式(IIa)化合物代表了一類這種實(shí)施方式，式中R1是四唑-5-基或SO2NHCOR3或NHSO2CF3，R3是a)苯基，b)取代的苯基，其中取代基是F、Cl、Br、I或C1-C4烷氧基，c)用二-(C1-C4-烷基)氨基或NH2取代的C1-C8烷基，或d)C3-C7-環(huán)烷基；R4是a)C2-C6烷基，b)取代的C2-C6烷基，其中取代基是CHO、CO2C1-C4烷基、CO2H、OC1-C4烷基、環(huán)己基、苯基或NHCO2Bu，c)芐基，d)取代的芐基，其中苯基上的取代基是F、Cl、Br、I、OH、OPO(OC1-C4烷基)2、OPO(O芐基)2、OPO(OH)2、-PO(OC1-C4-烷基)2、-PO(O芐基)2、-OPO(OH)2、NO2、NH2、N(C1-C4烷基)2或O芐基，e)CH2-雜芳基，或f)C3-C6烯基；R6是a)C1-C6烷基，b)取代的C1-C6烷基，其中取代基是-芐基、-C1-C3烷基或-OC1-C4烷基，或c)環(huán)丙基；
R8是a)C1-C6烷基或b)氫；R9是a)C1-C6烷基，或b)與R8和它們連接的氮原子一起形成嗎啉基、N-(C1-C6烷基)哌嗪基、N-(COC1-C6烷基)哌嗪基或N-芳基-哌嗪基環(huán)系統(tǒng)，R11和R12是氫。
第二種實(shí)施方式的第一類化合物的說(shuō)明性例子是以下式(IIa)化合物(標(biāo)出了化合物編號(hào))
在式(IIa)化合物的第三種具體實(shí)施方式
中，R5是COR10。以下式(IIa)化合物代表了一類這種實(shí)施方式，式中R1是四唑-5-基、SO2NHCOR3或NHSO2CF3；R3是a)苯基，b)取代的苯基，其中取代基是F、Cl、Br、I或C1-C4烷氧基，c)用二-(C1-C4烷基)氨基或NH2取代的C1-C8烷基，或d)C3-C7-環(huán)烷基；R4是a)C2-C6烷基，b)取代的C2-C6烷基，其中取代基是CHO、CO2C1-C4烷基、CO2H、OC1-C4烷基、環(huán)己基、苯基或NHCO2tBu，c)芐基，d)取代的芐基，其中苯基上的取代基是F、Cl、Br、I、OH、OPO(OC1-C4烷基)2、OPO(O芐基)2、OPO(OH)2、-PO(OC1-C4烷基)2、-PO(O芐基)2、OPO(OH)2、NO2、NH2、N(C1-C4烷基)2、O芐基、OC1-C4烷基、COOH或CO2CH3，e)CH2-雜芳基或f)C3-C6烯基；R6是a)C1-C6烷基，b)取代的C1-C6烷基，其中取代基是-芐基、-C1-C3烷基或-OC1-C4烷基，或c)環(huán)丙基；R10是(a)苯基，(b)取代的苯基，其中取代基是F、Cl、Br、I、甲氧基、甲基、CF3、SMe、SO2Me、OH、OPO(O-C1-C4烷基)2、OPO(OH)2、OPO(OBn)2、CO2C1-C4烷基、COOH、O芐基或OC6H5，(c)芐基，(d)雜芳基，(e)C1-C6烷基或(f)用以下基團(tuán)取代的C1-C6烷基咪唑、哌嗪、嗎啉基、N-(C1-C6烷基)哌嗪基、N-(COC1-C6烷基)哌嗪基或N-芳基-哌嗪基；R11和R12是氫。
第三種實(shí)施方式的第一類化合物的說(shuō)明性例子是以下式(IIa)化合物(標(biāo)出了化合物編號(hào))
在式(IIa)化合物的第四種具體實(shí)施方式
中，R5是SO2R10。以下式(IIa)化合物代表了一類這種實(shí)施方式，式中R1是四唑-5-基、SO2NHSO2CF3或NHSO2CF3R3是(a)苯基，(b)取代的苯基，其中取代基是F、Cl、Br、I或C1-C4烷氧基，(c)用二-(C1-C4烷基)氨基或NH2取代的C1-C8烷基，或(d)C3-C7-環(huán)烷基；R4是(a)C2-C6烷基，(b)取代的C1-C6烷基，其中取代基是CHO、CO2C1-C4烷基、CO2H、OC1-C4烷基、環(huán)己基、苯基或NHCO2tBu，(c)芐基，(d)取代的芐基，其中苯基上的取代基是F、Cl、Br、I、OH、OPO(OC1-C4烷基)2、OPO(O芐基)2、OPO(OH)2、-PO(OC1-C4烷基)2、-PO(O芐基)2、-OPO(OH)2、NO2、NH2、N(C1-C4烷基)2或O芐基，(e)CH2-雜芳基或(f)C3-C6烯基；R6是(a)C1-C6烷基，(b)取代的C1-C6烷基，其中取代基是-芐基、-C1-C3烷基或-OC1-C4烷基，或(c)環(huán)丙基；R10是(a)苯基，
(b)取代的苯基，其中取代基是F、Cl、Br、I、甲氧基、甲基、CF3、SMe、SOMe、SO2Me、OH、OPO(O-C1-C4烷基)2、OPO(OH)2、OPO(OBn)2、CO2C1-C4烷基或COOH，(c)芐基，(d)雜芳基，(e)C1-C6烷基，或(f)用以下基團(tuán)取代的C1-C6烷基咪唑、哌嗪、嗎啉基、N-(C1-C-烷基)-哌嗪基、N-(COC1-C6烷基)-哌嗪基或N-芳基-哌嗪基；R11和R12是氫。
第四種實(shí)施方式的此類化合物的說(shuō)明性例子是以下式(IIa)化合物(標(biāo)出了實(shí)施例編號(hào))
在其它實(shí)施方式中，AT2受體拮抗劑選自美國(guó)專利號(hào)5,441,959所列的取代的喹唑啉酮化合物，尤其是此專利要求權(quán)利的化合物。式(IIIa)或其藥學(xué)相容性鹽代表了這種化合物的代表性例子
式中R1是-SO2NHCO2R23；R3是(a)鹵素(Cl、Br、I、F)，(b)C1-C4烷基，或
(c)CF3；R6是直鏈C1-C4烷基；R8是(a)R23′(b)NR24R23′；R23和R23′獨(dú)立地是(a)芳基，其中芳基定義為用選自下組的一種或兩種取代基取代或未取代的苯基或萘基鹵素(Cl、Br、I、F)、N(R24)2、CO2R24、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、NO2、CF3、C1-C4烷硫基、OH、-SO2N(R24)2、C3-C7環(huán)烷基、C3-C10烯基和S(O)n(C1-C4烷基)；其中n＝1或2，(b)雜芳基，其中雜芳基是未取代或單取代或雙取代的5元或6元雜芳環(huán)，它可含有選自N、O或S的一個(gè)或兩個(gè)雜原子，其中取代基選自-OH、-SH、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、CF3、鹵素(Cl、Br、I、F)或NO2，(c)C3-C7環(huán)烷基，(d)用選自下組的取代基任選取代的C1-C6烷基上述芳基、上述雜芳基、-OH、-SH、C1-C4烷基、-O(C1-C4烷基)、C3-C7環(huán)烷基、-S(O)n(C1-C4烷基)、-CF3、鹵素(Cl、Br、F、I)、-NO2、-CO2H、CO2-(C1-C4烷基)、-NH2、-NH(C1-C4烷基)、-N(C1-C4烷基)2，或(e)全氟-C1-C4烷基；和R24是(a)H，(b)未取代或用上述芳基或上述雜芳基取代的C1-C6烷基，或(c)芳基；和R23′和R24可一起形成嗎啉或哌嗪環(huán)，其中哌嗪環(huán)的氮上可用C1-C4烷基或C1-C4酰基取代。
式(IIIa)化合物的一種實(shí)施方式見(jiàn)下 R3是
(a)F，(b)Me，或(c)CF3；R6是直鏈C1-C4烷基；R8是R23′；R23′是(a)芳基，其中芳基定義為用選自下組的一種或兩種取代基取代或未取代的苯基或萘基鹵素(Cl、Br、I、F)、N(R24)2、CO2R24、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、NO2、CF3、C1-C4烷硫基、OH、-SO2N(R24)2、C3-C7環(huán)烷基、C3-C10烯基和S(O)n(C1-C4烷基)；其中n＝1或2，(b)雜芳基，其中雜芳基是未取代或單取代或雙取代的5元或6元雜芳環(huán)，它可含有選自N、O或S的一個(gè)或兩個(gè)雜原子，其中取代基選自-OH、-SH、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、CF3、鹵素(Cl、Br、I、F)和NO2，(c)用選自下組的取代基取代或未取代的C1-C6烷基上述芳基、上述雜芳基、-OH、-SH、C1-C4烷基、-O(C1-C4烷基)、C3-C7環(huán)烷基、-CF3、鹵素(Cl、Br、F、I)、-N(C1-C4烷基)2或C3-C7環(huán)烷基；和R23是(a)用選自下組的取代基取代或未取代的C1-C6-烷基上述芳基、上述雜芳基、C1-C4烷基、CF3、-O(C1-C4烷基)、C3-C7環(huán)烷基，或(b)全氟-C1-C4-烷基。
此實(shí)施方式的例子還有
其中Et是乙基，Pr是正丙基，cPr是環(huán)丙基，Bu是正丁基，iPn是3-甲基丁基，和Ph是苯基。
式(IIIa)結(jié)構(gòu)的第二種實(shí)施方式是其中R23、R3、R6定義與第一種實(shí)施方式相同、所有其它取代基的定義如下的實(shí)施方式
R8是-NR24R23′；R23′是用選自下組的取代基取代或未取代的C1-C6烷基芳基、雜芳基、C1-C4烷基、-O(C1-C4烷基)、CF3、NH(C1-C4烷基)、N(C1-C4烷基)2、C3-C7環(huán)烷基；R24是(a)用芳基或雜芳基取代或未取代的C1-C6烷基，或
(b)H；和R23′和R24可一起形成嗎啉或哌嗪環(huán)，其中哌嗪環(huán)的氮上可用C1-C4烷基或C1-C4酰基取代。
此實(shí)施方式的示范性例子包括
其中Me是甲基，
Et是乙基，Pr是正丙基，cPr是環(huán)丙基，iPr是異丙基，Bu是正丁基，iBu是異丁基，tBu是叔丁基，iPn是3-甲基丁基，和iHex是4-甲基戊基。
在描述式(IIIa)化合物的上述實(shí)施方式中，雜芳基取代基代表含有選自氮、氧或硫的1-3個(gè)雜原子的5元或6元芳環(huán)，例如，吡啶基、噻吩基、呋喃基、吡唑基、吡咯基、咪唑基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基、異唑基、異噻唑基、唑基、三唑基和噻唑基。
在其它實(shí)施方式中，AT2受體拮抗劑選自美國(guó)專利號(hào)5,545,651所列的咪唑化合物，尤其是此專利要求權(quán)利的化合物。式(IVa)或其藥學(xué)相容性鹽代表了這種化合物的代表性例子 式中R1位于間位或?qū)ξ?，?a)4-CO2H，(b)-CH2CO2H，(c)-C(CF3)2OH，(d)-CONHNHSO2CF3，(e)4-CONHCH(CO2H)CH2C6H5(L-異構(gòu)體)，(f)4-CONHOR12，(g)-CONHSO2R10，
(h)-CONHSO2NHR9，(i)-C(OH)R9PO3H2，(j)-NHCOCF3，(k)-NHCONHSO2R10，(l)-NHPO3H2，(m)4-NHSO2R10，(n)-NHSO2NHCOR10，(o)-OPO3H2，(p)-OSO3H，(q)-PO3H2，(r)-PO(OH)R9，(s)-SO3H，(t)-SO2NHR9，(u)-SO2NHCOR10，(v)-SO2NHCONHR9， (ii)-SO2NHCO2R10；R2獨(dú)立地是(a)H，(b)鹵素(F、Cl、Br、I)，(c)C1-C4-烷基，(d)C1-C4-烷氧基，
(e)C1-C4-酰氧基，(f)C1-C4-烷硫基，(g)C1-C4-烷基亞磺酰基，(h)C1-C4-烷基磺?；?i)-(C1-C4-烷基)-OH，(j)-(C1-C4)烷基-芳基，(k)-CO2H，(l)-CN，(m)四唑-5-基，(n)-CONHOR12，(o)-SO2NHR9，(p)-NH2，(q)C1-C4-烷基氨基，(r)C1-C4-二烷基氨基，(s)-NHSO2R10，(t)-NO2，(u)呋喃基，(v)苯基或用選自下組的一種或兩種取代基任選取代的苯基鹵素、C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基、-NO2、-CF3、C1-C4-烷硫基、-OH、-NH2、C1-C4-烷基氨基、C1-C4-二烷基氨基、-CN、-CO2R12、乙?；?；R3獨(dú)立地是(a)H，(b)鹵素，(c)C1-C4-烷基，(d)C1-C4-烷氧基，或(e)-C1-C4-烷基-(C1-C4-烷氧基)；R4是(a)-CN，(b)-NO2，或(c)-CO2R11；R5是
(a)H，(b)C1-C6-烷基，(c)C3-C6-環(huán)烷基，(d)C2-C4-烯基，或(e)C2-C4-炔基；R6是(a)C1-C10-烷基，(b)C3-C10-烯基，(c)C3-C10-炔基，(d)C3-C8-環(huán)烷基，(e)C3-C4-環(huán)烯基，(f)-C1-C3-烷基-(C3-C8-環(huán)烷基)，(g)-C1-C3-烯基-(C5-C10-環(huán)烷基)，(h)-C1-C3-炔基-(C5-C10-環(huán)烷基)，(i)-(CH2)sS(CH2)mR5，或(j)用選自下組的1-2個(gè)取代基在苯環(huán)上任選取代的芐基鹵素、C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基或-NO2；R7是(a)C1-C6-烷基，(b)C3-C6-環(huán)烷基，(c)芳基，或(d)用選自下組的1-2個(gè)取代基在苯環(huán)上任選取代的芐基鹵素、C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基或-NO2；R8是(a)H，(b)鹵素(F、Cl、Br、I)，(c)苯基或用鹵素(F、Cl、Br、I)、C1-C4-烷基、-OH、C1-C4-烷氧基、-NO2、-NR26R27、-NR26COR11、-NR26CO2R7、-S(O)rR10、-SO2NR26R27、-NR26SO2R10、-CF3任選取代的苯基，(d)用以下基團(tuán)任選取代的C1-C6-烷基i)OR25，
ii)S(O)rR10，iii)NR23R24，iv)NR26COR11，v)NR26CO2R7，vi)NR26CONR23R24，vii)OCONR23R24，viii)OCOR11，ix)芳基，(e)C2-C6-烯基，(f)-C1-C4-烷基-芳基，(h)C1-C4-烷氧基，(i)CvF2v+1，其中v＝1-3，(j)-S(O)rR10，(k)-S(O)2NR23R24，(I)-CONR23R24，(m)-COR7，或(n)-CO2R12；R9是(a)H，(b)C1-C5-烷基，(c)芳基，(d)-(C1-C4-烷基)-芳基，(e)雜芳基，或(f)C3-C5-環(huán)烷基；R10是(a)芳基，(b)C3-C7-環(huán)烷基，(c)C1-C4-全氟烷基，(d)用選自下組的取代基任選取代的C1-C4-烷基芳基、雜芳基、-OH、-SH、C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基、C1-C4-烷硫基、-CF3、鹵素、-NO2、-CO2R12、-NH2、C1-C4-烷基氨基、C1-C4-二烷基氨基、-PO3H2，或
(e)雜芳基；R11、R11a和R11b獨(dú)立地是(a)H，(b)C1-C6-烷基，(c)C3-C6-環(huán)烷基，(d)芳基，(e)-(C1-C5-烷基)-芳基，或(f)雜芳基；R12是(a)H，(b)甲基，或(c)用選自下組的1-2個(gè)取代基在苯環(huán)上任選取代的芐基鹵素、C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基或-NO2；R13是(a)-CO2H，(b)-CH2CO2H，(c)-C(CF3)2OH，(d)-CONHNHSO2CF3，(e)-CONHOR12，(f)-CONHSO2R10，(g)-CONHSO2NHR9，(h)-C(OH)R9PO3H2，(i)-NHCOCF3，(j)-NHCONHSO2R10，(k)-NHPO3H2，(l)-NHSO2R10，(m)-NHSO2NHCOR10，(n)-OPO3H2，(o)-OSO3H，(p)-PO(OH)R9，(q)-PO3H2，
(r)-SO3H，(s)-SO2NHR9，(t)-SO2NHCOR10，(u)-SO2NHCONHR9，(v)-SO2NHCO2R10， R14是(a)H，(b)C1-C6-烷基，(c)-CH2CH＝CH2，或(d)用選自下組的1-2個(gè)取代基在苯環(huán)上任選取代的芐基鹵素、C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基或-NO2；R15是(a)H，(b)C1-C8-烷基，(c)C1-C8-全氟烷基，(d)C3-C6-環(huán)烷基，(e)芳基，或(f)用選自下組的1-2個(gè)取代基在苯環(huán)上任選取代的芐基鹵素、C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基或-NO2；R16是(a)H，(b)C1-C6-烷基，或(c)用選自下組的1-2個(gè)取代基在苯環(huán)上任選取代的芐基鹵素、C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基或-NO2；R17是(a)H，(b)C1-C6-烷基，(c)C3-C6-環(huán)烷基，
(d)芳基，或(e)用選自下組的1-2個(gè)取代基在苯環(huán)上任選取代的芐基鹵素、C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基或-NO2；R18是(a)-NR19R20，(b)-NHCONH2，(c)-NHCSNH2，或(d)-NHSO2-C6H5；R19和R20獨(dú)立地是(a)H，(b)CC1-C5-烷基，或(c)芳基，R21和R22獨(dú)立地是(a)C1-C4-烷基，或一起形成(b)-(CH2)q-；R23和R24獨(dú)立地是(a)H，(b)C1-C6-烷基，(c)芳基，或(d)-(C1-C4-烷基)-芳基，或(e)R23和R24一起組成吡咯烷，哌啶或嗎啉環(huán)；R25是(a)H，(b)C1-C6-烷基，(c)芳基，(d)-(C1-C4-烷基)-芳基，(e)C3-C6-烯基，或(f)-(C3-C6-烯基)-芳基；R26和R27獨(dú)立地是(a)H，
(b)C1-C4-烷基，(c)芳基，或(d)-CH2-芳基；R28是(a)芳基，或(b)雜芳基；R29是(a)-CHO，(b)-CONH2，(c)-NHCHO，(d)-CO-(C1-C6全氟烷基)，(e)-S(O)r-(C1-C6全氟烷基)，(f)-O-(C1-C66全氟烷基)，或(g)-NR11a-(C1-C6全氟烷基)；R30是(a)-CHO，(b)-SO2-(C1-C6全氟烷基)，或(c)-CO-(C1-C6全氟烷基)；A是(a)-(CH2)n-L1-B-(T)y-(B)y-X2-(B)y-R28，(b)-(CH2)n-L1-B-T-(B)y-R28，(c)-(CH2)n-L1-B-(T)y-(B)y-X2-B，(d)-(CH2)n-L1-B-T-(B)y-R29，(e)-(CH2)n-L1-T-(B)y-X2(B)y-R28，(f)-(CH2)n-L1-T-(B)y-R28，(g)-(CH2)n-L1-T-(B)y-X2-B，(h)-(CH2)n-L1-(CR19R20)-D-(T)y-(B)y-X3-(B)y-R28，(i)-(CH2)n-L1-(CR19R20)-D-T-(B)y-R28，(j)-(CH2)n-L1-(CR19R20)-D-(T)y-(B)y-X3-B，(k)-(CH2)n-L1-(CR19R20)-D-T-(B)y-R29，(l)-(CH2)n-L1-(CR19R20)-D-T-(B)y-X4-(B)y-R28，
(m)-(CH2)n-L1-(CR19R20)-D-B-X4-(B)y-R28，(n)-(CH2)n-L1-(CR19R20)-D-T-(B)y-X4-B，(o)-(CH2)n-L1-(CR19R20)-D-B-X4-B，(p)-(CH2)n-L2-B-(T)y-(B)y-X2-(B)y-R28，(q)-(CH2)n-L2-B-T-(B)y-R28，(r)-(CH2)n-L2-B-(T)y-(B)y-X2-B，(s)-(CH2)n-L2-B-T-(B)y-R29，(t)-(CH2)n-L2-T-(B)y-X2-(B)y-R28，(u)-(CH2)n-L2-T-(B)y-R28，(v)-(CH2)n-L2-T-(B)y-X2-B，(w)-(CH2)n-L2-D-(T)y-(B)y-X3-(B)y-R28，(x)-(CH2)n-L2-D-T-(B)y-R28，(y)-(CH2)n-L2-D-(T)y-(B)y-X3-B，(z)-(CH2)n-L2-D-T-(B)y-R29，(aa)-(CH2)n-L2-D-T-(B)y-X4-(B)y-R28，(bb)-(CH2)n-L2-D-B-X4-(B)y-R28，(cc)-(CH2)n-L2-D-T-(B)y-X4-B，(dd)-(CH2)n-L2-D-B-X4-B，(ee)-(CH2)m-L3-B-(T)y-(B)y-X2-(B)y-R28，(ff)-(CH2)m-L3-B-T-(B)y-R28，(gg)-(CH2)m-L3-B-(T)y-(B)y-X2-B，(hh)-(CH2)m-L3-B-T-(B)y-R29，(ii)-(CH2)m-L3-T-(B)y-X2-(B)y-R28，(jj)-(CH2)m-L3-T-(B)y-R28，(kk)-(CH2)m-L3-T-(B)y-X2-B，(ll)-(CH2)m-L3-(CR19R20)-D-(T)y-(B)y-X3-(B)y-R28，(mm)-(CH2)m-L3-(CR19R20)-D-T-(B)y-R28，(nn)-(CH2)m-L3-(CR19R20)-D-(T)y-(B)y-X3-B，(oo)-(CH2)m-L3-(CR19R20)-D-T-(B)y-R29，(pp)-(CH2)m-L3-(CR19R.20)-D-T-(B)y-X4-(B)y-R28，(qq)-(CH2)m-L3-(CR19R.20)-D-(B)-X4-(B)y-R28，
(rr)-(CH2)m-L3-(CR19R.20)-D-T-(B)y-X4-B，(ss)-(CH2)m-L3-(CR19R.20)-D-B-X4-B， L1是(a)-CO2-，(b)-CONR11a-，(c)-NR11aCO2-，或(d)-NR11aCONR11b-；L2是(a)-CO-，(b)NR11aCO-，或(c)-O2C-；L3是(a)-O-，(b)-SO-，或
(c)-NR11a-；B是C1-C6烷基；D是C2-C8烯基或C2-C8炔基；T是(a)芳撐，或(b)雜芳撐X1是(a)碳碳單鍵，(b)-CO-，(c)-C(R19)(R20)-，(d)-O-，(e)-S-，(f)-SO-，(g)-SO2-，(h)-NR14-，(i)-CONR16-，(j)-NR16CO-，(k)-OC(R19)(R20)-，(l)-C(R19)(R20)O-，(m)-SC(R19)(R20)-，(n)-C(R19)(R20)S-，(o)--NHC(R19)(R20)-，(p)-C(R19)(R20)NH-，(q)-NR16SO2-，(r)-SO2NR16-，(s)-CH＝CH-，(t)-CF＝CF-，(u)-CF＝CH-，(v)-CH＝CF-，(w)-CF2CF2-，(x)-CH(OR15)-，
(y)-CH(OCOR17)-，(z)-C(＝NR18)-，(aa)-C(OR21)(OR22)-，(bb)1，2-環(huán)丙基，或(cc)1，1-環(huán)丙基；X2是(a)-CO-，(b)-O-，(c)-S(O)r-，(d)-(C1-C4-烷撐)-，(e)-NR11aCONR11b-，(f)-CONR11a-，(g)-NR11aCO-，(h)-SO2NR16-，(i)-NR16SO2-，(j)-OCONR11aSO2-，(k)-SO2NR11aCO-，(l)-SO2NR11aCO-，(m)-OCONR11aSO2-，(n)-SO2NR11aCONR11b-，(o)-NR11aCONR11bSO2-，(p)-SO2NR11aSO2-，(q)-CONR11aSO2NR11b-，或(r)-NR11aSO2NR11bCO-；X3是(a)-C-，(b)-SO-，(c)-SO2-，(d)單鍵，(e)-CONR11a-，(f)-SO2NR16-，
(g)-CONR11aSO2-，(h)-SO2NR11aCO-，(i)-SO2NR11aCO2-，(j)-SO2NR11aCONR11b-，(k)-SO2NR11aSO.2-，或(l)-CONR11aSO2NR11b-；X4是(a)-NR11aCONR11b-，(b)-OCONR11aSO2-，(c)-NR16SO2-，(d)-OCONR11aSO2-，(e)-NR11aCONR11bSO2-，或(f)-NR11aSO2NR11bCO-；X5是(a)-CO-，(b)-SO2-，(c)-COO-，或(d)-CONR11a-；Z是(a)-O-，(b)-S-，或(c)-NR11-；k是1或2；m是1-5；n是0-2；q是2-3；r是0-2；s是0-5；t是0-3；u是2-5；y是0或1；
以及上述化合物的藥學(xué)相容性鹽。
在特定實(shí)施方式中，上述化合物是式(IVa)化合物，其中A是(a)-(CH2)n-L1-S-(T)y-(S)y-X2-(S)y-R28，(b)-(CH2)n-L1-B-T-(B)y-R28，(c)-(CH2)n-L1-B-(T)y-(B)y-X2-B，(d)-(CH2)n-L1-B-T-(B)y-R29(e)-(CH2)n-L2-B-(T)y-(B)y-X2-(B)y-R28，(f)-(CH2)n-L2-B-T-(B)y-R28，或(g)-(CH2)n-L2-B-(T)y-(B)y-X2-B，(h)-(CH2)n-L2-B-T-(B)y-R29；上述具體實(shí)施方式
的說(shuō)明性例子是式(Va)化合物以及這些化合物的藥學(xué)相容性鹽 式中R2獨(dú)立地是(a)H，(b)鹵素(F、Cl、Br、I)，或(c)C1-C4-烷基；R3是(a)H，或(b)鹵素(F、Cl、Br、I)；R6是(a)C1-C10烷基，
(b)C3-C10烯基，或(c)C3-C10炔基；R9是(a)H，(b)C1-C5-烷基，(c)芳基，(d)-(C1-C4-烷基)-芳基，或(e)雜芳基；R10是(a)芳基，(b)C3-C7-環(huán)烷基，(c)C1-C4-全氟烷基，(d)用選自下組的取代基任選取代的C1-C4-烷基芳基、雜芳基、-OH、-SH、C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基、C1-C4-烷硫基、-CF3、鹵素、-NO2、-CO2R12、-NH2、C1-C4-烷基氨基、C1-C4-二烷基氨基、-PO3H2，或(e)雜芳基；R11、R11a和R11b獨(dú)立地是(a)H，(b)C1-C6-烷基，(c)C3-C6-環(huán)烷基，(d)芳基，(e)-(C1-C5-烷基)-芳基，或(f)雜芳基；R13是(a)-CO2H，(b)-CONHSO2R10，(c)-CONHSO2NHR9，(d)-NHCONHSO2R10，(e)-NHSO2R10，(f)-NHSO2NHCOR10，(g)-SO2NHR9，
(h)-SO2NHCOR10，(i)-SO2NHCONHR9，(j)-SO2NHCO2R10，或 R16是(a)H，(b)C1-C6-烷基，或(c)用選自下組的1-2個(gè)取代基在苯環(huán)上任選取代的芐基鹵素、C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基或-NO2；R28是(a)芳基，或(b)雜芳基；R29是(a)-CHO，(b)-CONH2，(c)-NHCHO，(d)-CO-(C1-C6全氟烷基)，(e)-S(O)r-(C1-C6全氟烷基)，E是(a)-(T)y-(B)y-X2-(B)y-R28，(b)-T-(B)y-R28，(c)-(T)y-(B)y-X2-Bor，(d)-T-(B)y-R29；L1是(a)-CO2-，(b)-CONR11a-，(c)-NR11aCO2-，(d)-NR11aCONR11b-；B是C1-C6烷基；
X2是(a)-CO-，(b)-O-，(c)-S(O)r-，(d)-(C1-C4-烷撐)-，(e)-NR11aCONR11b-，(f)-CONR11a-，(g)-NR11aCO-，(h)-SO2NR16-，(i)-NR16SO2-，(j)-CONR11aSO2-，(k)-SO2NR11aCO-，(l)-SO2NR11aCO2-，(m)-OCONR11aSO2-，(n)-SO2NR11aCONR11b-，(o)-NR11aCONR11bSO2-，(p)-SO2NR11aSO2-，(q)-CONR11aSO2NR11b-，或(r)-NR11aSO2NR11bCO-。
上述
具體實(shí)施例方式
的另一說(shuō)明性例子是式(VIa)化合物以及這些化合物的藥學(xué)相容性鹽 式中R2獨(dú)立地是
(a)H，(b)鹵素(F、Cl、Br、I)，或(c)C1-C4-烷基；R3是(a)H，或(b)鹵素(F、Cl、Br、I)；R6是(a)C1-C10烷基，(b)C3-C10烯基，或(c)C3-C10炔基；R9是(a)H，(b)C1-C5-烷基，(c)芳基(d)-(C1-C4-烷基)-芳基，或(e)雜芳基；R10是(a)芳基，(b)C3-C7-環(huán)烷基，(c)C1-C4-全氟烷基，(d)用選自下組的取代基任選取代的C1-C4-烷基芳基、雜芳基、-OH、-SH、C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基、C1-C4-烷硫基、-CF3、鹵素、-NO2、-CO2R12、-NH2、C1-C4-烷基氨基、C1-C4-二烷基氨基、-PO3H2，或(e)雜芳基；R11、R11a和R11b獨(dú)立地是(a)H，(b)C1-C6-烷基，(c)C3-C6-環(huán)烷基，(d)芳基，(e)-(C1-C5-烷基)-芳基，或(f)雜芳基；
R13是(a)-CO2H，(b)-CONHSO2R10，(c)-CONHSO2NHR9，(d)-NHCONHSO2R10，(e)-NHSO2R10，(f)-NHSO2NHCOR10，(g)-SO2NHR9，(h)-SO2NHCOR10，(i)-SO2NHCONHR9，(j)-SO2NHCO2R10，或 R16是(a)H，(b)C1-C6-烷基，或(c)用選自下組的1-2個(gè)取代基在苯環(huán)上任選取代的芐基鹵素、C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基或-NO2；R28是(a)芳基，或(b)雜芳基；R29是(a)-CHO，(b)-CONH2，(c)-NHCHO，(d)-CO-(C1-C6全氟烷基)，(e)-S(O)r-(C1-C6全氟烷基)，G是(a)-(T)y-(B)y-X2-(B)y-R28，(b)-T-(B)y-R28，
(c)-(T)y-(B)y-X2-B，或(d)-T-(B)y-R29；L2是-CO-、-NR11aCO-或-O2C-；B是C1-C6烷基；X2是(a)-CO-，(b)-O-，(c)-S(O)r-，(d)-(C2-C4-烷撐)-，(e)-NR11aCO，-NR11aCONR11b-(f)-CONR11a-，(g)-NR11aCO-，(h)-SO2NR16-，(i)-NR16SO2-，(j)-SO2NR11aSO2-，(k)-SO2NR11aCO2-，(l)-SO2NR11aCO2-，(m)-OCONR11aSO2-，(n)-SO2NR11aCONR11b-，(o)-NR11aCONR11bSO2-，(p)-SO2NR11aSO2-，(q)-CONR11aSO2NR11b-，或(r)-NR11aSO2NR11bCO-。
上述
具體實(shí)施例方式
的化合物的說(shuō)明性例子如下1-((2′-((異戊氧基羰基氨基)磺?；?-3-氟-(1，1′-聯(lián)苯基)-4-基)甲基)-5-[2-(N-苯甲酰-N-苯基氨基)乙基羰基]-4-乙基-2-丙基-1H-咪唑，1-((2′-((正丁氧基羰基氨基)磺酰基)-3-氟-(1，1′-聯(lián)苯基)-4-基)甲基)-5-[2-(N-苯甲酰-N-苯基氨基)乙基羰基]-4-乙基-2-丙基-1H-咪唑，1-((2′-((正丙氧基羰基氨基)磺?；?-3-氟-(1，1′-聯(lián)苯基)-4-基)甲基)-5-[2-(N-苯甲酰-N-苯基氨基)乙基羰基]-4-乙基-2-丙基-1H-咪唑，1-((2′-((正丁氧基羰基氨基)磺酰基)-3-氟-(1，1′-聯(lián)苯基)-4-基)甲基)-5-[2-(N-苯甲酰-正丁基氨基)乙基羰基]-4-乙基-2-丙基-1H-咪唑，1-((2′-((正丁氧基羰基氨基)磺?；?-3-氟-(1，1′-聯(lián)苯基)-4-基)甲基)-5-[2-(N-苯甲酰-正丙基氨基)乙基羰基]-4-乙基-2-prop yl-1H-咪唑，1-((2′-((正丁氧基羰基氨基)磺?；?-3-氟-(1，1′-聯(lián)苯基)-4-基)甲基)-5-[2-(N-丁酰-正丙基氨基)乙基羰基]-4-乙基-2-丙基-1H-咪唑，1-((2′-((正丁氧基羰基氨基)磺?；?-3-氟-(1，1′-聯(lián)苯基)-4-基)甲基)-5-[2-(N-丁酰-N-苯基氨基)乙基羰基]-4-乙基-2-丙基-1H-咪唑，1-((2′-((異戊氧基羰基氨基)磺?；?-3-氟-(1，1′-聯(lián)苯基)-4-基)甲基)-5-[2-(N-丁酰-N-苯基氨基)乙基羰基]-4-乙基-2-丙基-1H-咪唑，1-((2′-((異戊氧基羰基氨基)磺酰基)-3-氟-(1，1′-聯(lián)苯基)-4-基)甲基)-5-[2-(N-異煙酰-N-吡啶-3-基氨基)乙基羰基]-4-乙基-2-丙基-1H-咪唑，1-((2′-((正丁氧基羰基氨基)磺?；?-3-氟-(1，1′-聯(lián)苯基)-4-基)甲基)-5-[2-(N-異煙酰-N-吡啶-3-基氨基)乙基羰基]-4-乙基-2-丙基-1H-咪唑，1-((2′-((正丁氧基羰基氨基)磺?；?-3-氟-(1，1′-聯(lián)苯基)-4-基)甲基)-5-[2-(N-煙酰-N-吡啶-3-基氨基)乙基羰基]-4-乙基-2-丙基-1H-咪唑，1-((2′-((異戊氧基羰基氨基)磺酰基)-3-氟-(1，1′-聯(lián)苯基)-4-基)甲基)-5-[2-(N-煙酰-N-吡啶-3-基氨基)乙基羰基]-4-乙基-2-丙基-1H-咪唑，1-((2′-((異戊氧基羰基氨基)磺?；?-3-氟-(1，1′-聯(lián)苯基)-4-基)甲基)-5-[2-(N-煙酰-N-吡啶-2-基氨基)乙基羰基]-4-乙基-2-丙基-1H-咪唑，1-((2′-((異戊氧基羰基氨基)磺酰基)-3-氟-(1，1′-聯(lián)苯基)-4-基)甲基)-5-[2-(N-異煙酰-N-苯基氨基)乙基羰基]-4-乙基-2-丙基-1H-咪唑，1-((2′-((異戊氧基羰基氨基)磺酰基)-3-氟-(1，1′-聯(lián)苯基)-4-基)甲基)-5-[2-(N-丁酰-N-吡啶-3-基氨基)乙基羰基]-4-乙基-2-丙基-1H-咪唑，1-((2′-((異戊氧基羰基氨基)磺?；?-3-氟-(1，1′-聯(lián)苯基)-4-基)甲基)-5-[2-(N-異丁酰-N-吡啶-3-基氨基)乙基羰基]-4-乙基-2-丙基-1H-咪唑，1-((2′-((正丁氧基羰基氨基)磺?；?-3-氟-(1，1′-聯(lián)苯基)-4-基)甲基)-5-[2-(N-乙?；?N-吡啶-3-基氨基)乙基羰基]-4-乙基-2-丙基-1H-咪唑，1-((2′-((異戊氧基羰基氨基)磺?；?-3-氟-(1，1′-聯(lián)苯基)-4-基)甲基)-5-[2-(N-丁酰-N-吡啶-2-基氨基)乙基羰基]-4-乙基-2-丙基-1H-咪唑1-((2′-((異戊氧基羰基氨基)磺酰基)-(1，1′-聯(lián)苯基)-4-基)甲基)-5-[2-(N-丁酰-N-吡啶-3-基氨基)乙基羰基]-2-丁基-4-氯-1H-咪唑，
1-((2′-((異戊氧基羰基氨基)磺?；?-3-氟-(1，1′-聯(lián)苯基)-4-基)甲基)-5-[2-(N-丙酰-N-吡啶-3-基氨基)乙基羰基]-4-乙基-2-丙基-1H-咪唑，1-((2′-((異戊氧基羰基氨基)磺?；?(1，1′-聯(lián)苯基)-4-基)甲基)-5-[2-(N-煙酰-N-吡啶-3-基氨基)乙基羰基]-4-乙基-2-丙基-1H-咪唑，1-((2′-((異戊氧基羰基氨基)磺?；?(1，1′-聯(lián)苯基)-4-基)甲基)-5-[2(N-丁酰-N-吡啶-3-基氨基)乙基羰基]-4-乙基-2-丙基-1H-咪唑，1-((2′-((正丁氧基羰基-氨基)磺?；?-3-氟-(1，1′-聯(lián)苯基)-4-基)甲基)-4-乙基-5-(2-(2-苯氧基苯基)乙基羰基)-2-丙基-1H-咪唑，4-[((5-(2-苯甲酰芐氧基羰基)-4-乙基-2-正丙基)咪唑-1-基)甲基]-3-氟-2′-正丁氧基羰基氨基磺?；?1，1′-聯(lián)苯基，4-[((5-(2-苯甲酰芐氧基羰基)-4-乙基-2-正丙基)咪唑-1-基)甲基]-3-氟-2′-((2-苯基)乙氧基羰基氨基磺酰基)-1，1′-聯(lián)苯基，4-[((5-(2-苯甲酰芐氧基羰基)-4-乙基-2-正丙基)咪唑-1-基)甲基]-2′-((2-苯基)乙氧基羰基氨基磺?；?-1，1′-聯(lián)苯基，4-[((5-(2-苯甲酰芐氧基羰基)-4-乙基-2-正丙基)咪唑-1-基)甲基]-3-氟-2′-正丁氧基羰基氨基磺?；?1，1′-聯(lián)苯基，4-[((5-(2-苯甲酰芐氧基羰基)-4-乙基-2-正丙基)咪唑-1-基)甲基]-3-氟-2′-n-異戊氧基羰基氨基磺酰基-1，1′-聯(lián)苯基，4-[((5-(2-苯甲酰芐氧基羰基)-4-乙基-2-正丙基)咪唑-1-基)甲基]-2′-n-異戊氧基羰基氨基磺酰基-1，1′-聯(lián)苯基，4-[((5-(2-苯甲酰芐氧基羰基)-4-乙基-2-正丙基)咪唑-1-基)甲基]-3-氟-2′-正丙氧基羰基氨基磺?；?1，1′-聯(lián)苯基，4-[((5-(2-異戊氧基芐氧基羰基)-4-乙基-2-正丙基)咪唑-1-基)甲基]-3-氟-2′-正丁氧基羰基氨基磺酰基-1，1′-聯(lián)苯基，4-[((5-(2-苯基氨基羰基)芐氧基羰基-4-乙基-2-正丙基)咪唑-1-基)甲基]-3-氟-2′-正丁氧基羰基氨基磺酰基-1，1′-聯(lián)苯基，4-[((5-(2-苯甲酰芐氧基羰基)-4-乙基-2-正丙基)咪唑-1-基)甲基]-3-氟-2′-(1H-四唑-5-基)-1，1′-聯(lián)苯基，4-[((5-)2-三氟苯基)甲基氨基羰基)-4-乙基-2-正丙基)咪唑-1-基)甲基]-3-氟-2′-異戊氧基羰基氨基磺?；?1，1′-聯(lián)苯基，N-丁基，N-芐基-2-(氨基羰基)乙炔基甲基4-乙基-2-丙基-1-[[2′-(1H-四唑-5-基)聯(lián)苯基-4-基]甲基]咪唑-5-羧酸酯，N，N-二苯基-2-(氨基羰基)乙炔基甲基4-乙基-2-丙基-1-[[2′-(1H-四唑-5-基)聯(lián)苯基-4-基]甲基]咪唑-5-羧酸酯，N-苯基-2-(氨基羰基)乙基4-乙基-2-丙基-1-[[2′-(1H-四唑-5-基)聯(lián)苯基-4-基]甲基]咪唑-5-羧基酯，N-丁基，N-芐基-4-(氨基羰基)丙基4-乙基-2-丙基-1-[[2′-(1H-四唑-5-基)聯(lián)苯基-4-基]甲基]咪唑-5-羧酸酯，N，N-二戊基-4-(氨基羰基)丙基4-乙基-2-丙基-1-[[2′-(四唑-5-基)聯(lián)苯基-4-基]甲基]咪唑-5-羧酸酯，4-[(5-((2-苯甲酰)苯基羰氧基甲基)-4-氯-2-正丙基咪唑-1-基)甲基]-3-氟-2′-異戊氧基羰基氨基磺?；?lián)苯基，1-((2′-((正丁氧基羰基氨基)磺?；?-3-氟-(1，1′-聯(lián)苯基)-4-基)甲基)-2-(正丙基)-4-乙基-5-(2-(苯氧基)苯氧基)乙?；?1H-咪唑，在上述關(guān)于式(IVa)-(VIa)化合物的實(shí)施方式中，提到烷基取代基時(shí)，是指正烷基結(jié)構(gòu)(如丁基是正丁基)，除非另有說(shuō)明。然而，在上面的基團(tuán)定義中(如R3)，烷基、烯基和炔基的范圍包括支鏈和直鏈。
在上述關(guān)于式(IVa)-(VIa)化合物的實(shí)施方式中，術(shù)語(yǔ)“芳基”旨在包括用選自下組的1-3個(gè)取代基任選取代的苯基、聯(lián)苯基、萘基或芴基-OH、-SH、C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基、-CF3、鹵素、-NO2、-CO2H、-CO2CH3、-CO2-芐基、-NH2、-NH(C1-C4-烷基)、-N(C1-C4-烷基)2。術(shù)語(yǔ)雜芳基旨在包括可任選地含有1-3個(gè)雜原子的未取代、單取代或雙取代的5元-10元單環(huán)或雙環(huán)芳香環(huán)，雜原子選自O(shè)、N或S。雜芳基的定義包括但不限于以下基團(tuán)吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基、1，3，5-三嗪基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、唑基、噻唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并咪唑基、苯并唑基、苯并噻唑基、吲哚滿-2-酮基、二氫吲哚基、吲哚基、吡咯基、喹啉基和異喹啉基。尤其優(yōu)選的是用選自下組的1-3個(gè)取代基任選取代的2-、3-或4-吡啶基；2-或3-呋喃基；2-或3-噻吩基；2-、3-或4-喹啉基；或1-、3-或4-異喹啉基-OH、-SH、C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基、-CF3、鹵素、-NO2、-CO2H、-CO2CH3、-CO2-芐基、-NH2、-NH(C1-C4-烷基)、-N(C1-C4-烷基)2。術(shù)語(yǔ)芳撐旨在包括用作兩個(gè)基團(tuán)之間連接形成鏈的苯基、聯(lián)苯基、萘基或芴基。亞芳基的定義包括但不限于以下異構(gòu)體接頭1，2-苯基、1，3-苯基、1，4-苯基；4，4′-聯(lián)苯基、4，3′-聯(lián)苯基、4，2′-聯(lián)苯基、2，4′-聯(lián)苯基、2，3′-聯(lián)苯基、2，2′-聯(lián)苯基、3，4′-聯(lián)苯基、3，3′-聯(lián)苯基、3，2′-聯(lián)苯基；1，2-萘基、1，3-萘基、1，4-萘基、1，5-萘基、1，6-萘基、1，7-萘基、1，8-萘基、2，6-萘基、2，3-萘基；1，4-芴基。尤其優(yōu)選的是1，2-苯基、1，3-苯基、1，4-苯基、4，4′-聯(lián)苯基、3，3′-聯(lián)苯基和2，2′-聯(lián)苯基，它們是用選自下組的1-3個(gè)取代基任選取代的-OH、-SH、C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基、-CF3、鹵素、-NO2、-CO2H、-CO2CH3、-CO2-芐基、-NH2、-NH(C1-C4-烷基)、-N(C1-C4-烷基)2。
在上述關(guān)于式(IVa)-(VIa)化合物的實(shí)施方式中，術(shù)語(yǔ)雜亞芳撐旨在包括可任選地含有1-3個(gè)雜原子的未取代的5元-10元芳香環(huán)，所述雜原子選自O(shè)、N或S，雜亞芳基是用作兩個(gè)基團(tuán)之間連接形成鏈的基團(tuán)。雜芳基的定義包括但不限于2，3-吡啶基、2，4-吡啶基、2，5-吡啶基、2，6-吡啶基、3，4-吡啶基、3，5-吡啶基、3，6-吡啶基；2，3-呋喃基、2，4-呋喃基、2，5-呋喃基；2，3-噻吩基、2，4-噻吩基、2，5-噻吩基；4，5-咪唑基、4，5-唑基；4，5-噻唑基；2，3-苯并呋喃基；2，3-苯并噻吩基；2，3-苯并咪唑基；2，3-苯并唑基；2，3-苯并噻唑基；3，4-吲哚滿-2-酮基；2，4-二氫吲哚基；2，4-吲哚基；2，4-吡咯基；2，4-喹啉基、2，5-喹啉基、4，6-喹啉基；3，4-異喹啉基、1，5-異喹啉基。尤其優(yōu)選的是2，3-吡啶基、3，4-吡啶基、2，3-呋喃基、3，4-呋喃基、2，3-苯硫基、3，4-噻吩基、2，3-喹啉基、3，4-喹啉基和1，4-異喹啉基，它們是用選自下組的1-3個(gè)取代基任選取代的-OH、-SH、C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基、-CF3、鹵素、-NO2、-CO2H、-CO2CH3、-CO2-芐基、-NH2、-NH(C1-C4-烷基)、-N(C1-C4-烷基)2；應(yīng)該注意到在上述結(jié)構(gòu)式中，當(dāng)一個(gè)取代基可以是一種以上之前所定義基團(tuán)中的取代基時(shí)，在各個(gè)之前定義的基團(tuán)中可以獨(dú)立地選擇第一種基團(tuán)(R#、B或y)。例如，R1和R2各自可以是-CONHOR12。在各個(gè)R1和R2中，R12不必為相同的取代基，而可各自獨(dú)立地選擇。或者，例如，如果同一R基團(tuán)(我們以R2為例)在分子中出現(xiàn)兩次，這些R基團(tuán)互相獨(dú)立(一個(gè)R2基團(tuán)可以是-CONHOR12，而另一個(gè)R2基團(tuán)可以是-CN)。
在其它實(shí)施方式中，AT2受體拮抗劑選自美國(guó)專利號(hào)5,338740所列化合物，尤其是此專利要求權(quán)利的化合物，其中雜環(huán)(以下稱為“Het”)通過(guò)碳雙環(huán)或雜雙環(huán)間隔基團(tuán)(以下稱為“W”)連接于芳基或噻吩基(以下稱為“Ar”)。式(VIIa)及其藥學(xué)相容性鹽代表了這種化合物的代表性例子Ar-W-Het(VIIa)式中Ar選自
和 X1、X2、X3和X4獨(dú)立地選自CR2或氮；X5和X6中一個(gè)是CH，另一個(gè)是S；R1選自CO2H、-NHSO2CF3、-CONHSO2-(C1-C8)烷基、PO3H2、SO3H、-CONHSO2(C6H5)、-CONHSO2CF3、四唑、 或-SO2NHCO2-(C1-C8)烷基；R2選自氫、(C1-C8)烷基、(C2-C10)烯基、(C3-C8)環(huán)烷基、鹵素、羥基、-O-(C1-C6)烷基、-S-(C1-C6)烷基、-SO-(C1-C6)烷基-SO2-(C1-C6)烷基、-NR3R4或苯基，其中所述苯基任選地被獨(dú)立地選自下組的取代基單、雙或三取代氫、(C1-C8)烷基、(C2-C10)烯基、(C3-C8)環(huán)烷基、鹵素、(C1-C6)烷氧基、-S-(C1-C6)烷基、-SO-(C1-C6)烷基、-SO2-(C1-C6)烷基、-O-(C1-C6)烷基和-NR3R4；R3和R4獨(dú)立地選自氫、(C1-C8)烷基、(C2-C10)烯基或(C3-C8)環(huán)烷基，或R3和R4與它們連接的氮一起形成含有一個(gè)或兩個(gè)雜原子的5-7元飽和或部分飽和的碳環(huán)或雜環(huán)，雜原子獨(dú)立地選自氮、氧或硫；虛線代表含有X5和X6的環(huán)是芳香環(huán)W是具有下式的碳雙環(huán)或雜雙環(huán)系統(tǒng) 或 X8、X9、X10和X11存在或不存在，X7、X8、X9、X10和X11各自獨(dú)立地選自CHR5、O、S、SO、SO2或NR6；X12、X13和X14獨(dú)立地選自CR7或N；X15和X16獨(dú)立地選自CR7或S；當(dāng)CHR5的CH部分連接于Het時(shí)，R5不存在，當(dāng)R5存在時(shí)，它選自氫、(C1-C8)烷基、(C2-C10)烯基、(C3-C8)環(huán)烷基、-O-(C1-C6)烷基或苯基，其中所述苯基任選地被獨(dú)立地選自下組的取代基單、雙或三取代氫、(C1-C8)烷基、(C2-C10)烯基、(C3-C8)環(huán)烷基、鹵素、(C1-C6)烷氧基、-S-(C1-C6)烷基、-SO-(C1-C6)烷基、-SO2-(C1-C6)烷基、-O-(C1-C6)烷基和-NR3R4；
R6選自(C1-C8)烷基、(C3-C8)環(huán)烷基或苯基，其中所述環(huán)烷基是飽和或部分飽和的，其中所述環(huán)烷基可任選地含有選自氮、氧或硫的雜原子，所述苯基任選地被獨(dú)立地選自下組的取代基單、雙或三取代氫、(C1-C8)烷基、(C1-C10)烯基、(C3-C8)環(huán)烷基、鹵素、(C1-C6)烷氧基、-S-(C1-C6)烷基、-SO-(C1-C6)烷基、-SO2-(C1-C6)烷基、-O-(C1-C6)烷基和-NR3R4；R7選自氫、(C1-C8)烷基、(C2-C10)烯基、(C3-C8)環(huán)烷基、鹵素、羥基、-O-(C1-C6)烷基、-S-(C1-C6)烷基、-SO-(C1-C6)烷基、-SO2-(C1-C6)烷基、-NR3R4或苯基，其中所述苯基任選地被選自下組的取代基單、雙或三取代氫、(C1-C8)烷基、(C1-C10)烯基、(C3-C8)環(huán)烷基、鹵素、(C1-C6)烷氧基、-S-(C1-C6)烷基、-SO-(C1-C6)烷基、-SO2-(C1-C6)烷基、-O-(C1-C6)烷基和-NR3R4；虛線代表含有X15和X16的環(huán)含有一個(gè)或兩個(gè)雙鍵；和Her選自 R8、R9、R10和R11獨(dú)立地選自氫、(C1-C8)烷基、(C1-C10)烯基、(C3-C8)環(huán)烷基、鹵素、(C1-C8)烷氧基、-S-(C1-C6)烷基、-SO-(C1-C6)烷基、-CO2H、-SO2NR3R4、-NR3R4和苯基，其中所述苯基任選地被以下基團(tuán)單、雙或三取代鹵素、羥基、硝基、(C1-C8)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C1-C7)烷氧基、(C1-C7)烷硫基或氨基，其中所述氨基任選地被(C1-C7)烷基單或雙取代；其中各個(gè)出現(xiàn)的R3可以互相相同或不同，各個(gè)出現(xiàn)的R4可以互相相同或不同；限制條件是(a)X1、X2、X3和X4中不多于兩個(gè)可以是氮；和(b)X7、X8、X9、X10和X11中至少存在兩個(gè)。
關(guān)于式(VIIa)化合物，本文所用的術(shù)語(yǔ)“鹵素”包括氯、氟、溴和碘，除非另有說(shuō)明；術(shù)語(yǔ)“烷基”包括具有直鏈、支鏈或環(huán)狀部分或其組合的飽和單價(jià)烴基，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基和叔丁基，除非另有說(shuō)明；術(shù)語(yǔ)“烯基”指直鏈或支鏈不飽和烴基，例如乙烯基、1-或2-丙烯基、2-甲基-1-丙烯基和1-或2-丁烯基，除非另有說(shuō)明；
術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基”指飽和碳環(huán)基團(tuán)，例如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基和環(huán)己基，除非另有說(shuō)明；和術(shù)語(yǔ)“烷氧基”包括O-烷基，其中“烷基”定義如上，除非另有說(shuō)明。
在特定實(shí)施方式中，式(VIIa)化合物包括W具有下式的化合物 優(yōu)選的具體式(VIIa)化合物的例子是2-丁基-5-氯-1-{5-[2-(1H-四唑-5-基)-苯基]-茚滿-1-基}-1H-咪唑-4-羧酸乙酯；2-丁基-5-氯-1-{5-[2-(1H-四唑-5-基)-苯基]-茚滿-1-基}-1H-咪唑-4-羧酸；2-丁基-3-{5-[2-(1H-四唑-5-基)-苯基]-茚滿-1-基}-1，3-二氮雜螺[4.4]壬-1-烯-4-酮；(2-丁基-5-氯-1-{5-[2-(1H-四唑-5-基)-苯基]-茚滿-1-基}-1H-咪唑-4-基)甲醇2-乙基-5，7-二甲基-3-{5-[2-(1H-四唑-5-基)-苯基}-茚滿-1-基}-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶；(S)-2-乙基-5，7-二甲基-3-{5-[2-(1H-四唑-5-基)-苯基]-茚滿-1-基}-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶；(R)-2-乙基-5，7-二甲基-3-{5-[2-(1H-四唑-5-基)-苯基]-茚滿-1-基}-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶；2-乙基-7-甲基-3-{5-[2-(1H-四唑-5-基)-苯基}-茚滿-1-基}-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶；5，7-二甲基-2-丙基-3-{5-[2-(1H-四唑-5-基)-苯基]-茚滿-1-基}-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶；2-環(huán)丙基-5，7-二甲基-3-{5-[2-(1H-四唑-5-基)-苯基]-茚滿-1-基}-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶；2-丁基-5，7-二甲基-3-{5-[2-(1H-四唑-5-基)-苯基]-茚滿-1-基}-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶；2-丁基-3-{5-[2-(1H-四唑-5-基)-苯基]-茚滿-1-基}-3H-[咪唑并[4，5-b]吡啶；2-[1-(2-乙基-5，7-二甲基-咪唑并[4，5-b]吡啶-3-基)-茚滿-5-基-苯甲酸；
2-[5-(2-乙基-5，7-二甲基-咪唑并[4，5-b]吡啶-3-基)-5，6，7，8-四氫-4H-萘-2-基]-苯甲酸；2-乙基-5，7-二甲基-3-{6-[2-(1H-四唑-5-基)-苯基]-1，2，3，4-四氫-4H-萘-1-基}-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶；2-乙基-5，7-二甲基-3-{2-[2-(1H-四唑-5-基)-苯基]-6，7，8，9-四氫-5H-苯并環(huán)庚烯-5-基}-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶；2-乙基-5，7-二甲基-3-{7-[2-(1H-四唑-5-基)-苯基]-色滿-4-基}-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶；2-乙基-5，7-二甲基-3-{3-[2-(1H-四唑-5-基)-苯基]-雙環(huán)[4.2.0]辛-1，3，5-三烯-7-基}-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶；2-乙基-5，7-二甲基-3-{7-[2-(1H-四唑-5-基)-苯基]-色滿-4-基}-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶；2-乙基-5，7-二甲基-3-{3-[2-(1H-四唑-5-基)-苯基]-6，7-二氫-5H-[1]吡啶-7-基}-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶；2-[5-(2-丁基-咪唑并[4，5-b]吡啶-3-基)-萘-2-基]-苯甲酸；2-丁基-3-{6-[2-(1H-四唑-5-基)-苯基]-萘-1-基}3H-咪唑并[4，5-b]吡啶；和2-乙基-5，7-二甲基-3-{6-[2-(1H-四唑-5-基)-苯基-萘-1-基}-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶。
按照式(VIIa)的其它化合物包括2-乙基-5，7-二甲基-3-{7-[2-(2H-四唑-5-基)-苯基]-二氫苯并噻喃-4-基}-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶；3-{1，1-二氧代-7-[2-(2H-四唑-5-基)-苯基]-二氫苯并噻喃-4-基}-2-乙基-5，7-二甲基-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶；2-乙基-5，7-二甲基-3-{2-[2-(2H-四唑-5-基)-苯基]-5，6-二氫-4H-噻吩并[2，3-b]噻喃-4-基}-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶；2-乙基-5，7-二甲基-3-{2-[2-(2H-四唑-5-基)-苯基]-4，5，6，7-四氫苯并[b]噻吩-4-基}-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶；P0 2-乙基-5，7-二甲基-3-{2-[2-(2H-四唑-5-基)-苯基]-5，6-二氫-4H-環(huán)戊二烯并[b]噻吩-4-基}-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶；2-乙基-5，7-二甲基-3-{6-[2-(2H-四唑-5-基)-苯基]-3，4-二氫-2H-噻吩并[2，3-b]吡喃-4-基}-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶；2-乙基-5，7-二甲基-3-{2-[2-(2H-四唑-5-基)-苯基]-6，7-二氫-5H-[1]吡啶-5-基}-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶；5-(2-乙基-5，7-二甲基-咪唑并[4，5-b]吡啶-3-基)-2-[2-(2H-四唑-5-基)-苯基]-5，6，7，8-四氫-喹啉；4-(2乙基-5，7-二甲基-咪唑并[4，5-b]吡啶-3-基)-7-[2-(2H-四唑-5-基)-苯基]-3，4-二氫-2H-噻喃并[2，3-b]吡啶-1，1-二氧化物；2-乙基-5，7-二甲基-3-{2-[2-(2H-四唑-5-基)-苯基]-6，7-二氫-5H-環(huán)戊二烯并嘧啶-5-基}-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶；2-乙基-5，7-二甲基-3-{3-[2-(2H-四唑-5-基)-苯基]-6，7-二氫-5H-[2]氮茚-7-基}-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶；2-乙基-5，7-二甲基-3-{5-[3-(2H-四唑-5-基)-噻吩-2-基]-茚滿-1-基}-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶；2-乙基-5，7-二甲基-3-{5-[2-(2H-四唑-5-基)-噻吩-3-基]-茚滿-1-基}-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶；2-乙基-5，7-二甲基-3-{5-[4-(2H-四唑-5-基)-噻吩-3-基]-茚滿-1-基}-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶；2-乙基-5，7-二甲基-3-{5-[3-(2H-四唑-5-基)-吡啶-4-基]-茚滿-1-基}-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶；2-乙基-5，7-二甲基-3-{5-[4-(2H-四唑-5-基)-吡啶-3-基]-茚滿-1-基}-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶；2-乙基-5，7-二甲基-3-{5-[3-(2H-四唑-5-基)-吡啶-2-基]-茚滿-1-基}-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶；(2-丁基-5-氯-3-{5-[2-(2H-四唑-5-基)-苯基]-茚滿-1-基}-3H-咪唑-4-基)甲醇；2-丁基-5-氯-3-{5-[2-(2H-四唑-5-基)-苯基]-茚滿-1-基}-3H-咪唑-4-羧酸；2-丁基-5-(1，1，2，2，2-五氟-乙基)-3-{5-[2-(2H-四唑-5-基)-苯基]-茚滿-1-基}-3H-咪唑-4-羧酸；2-丁基-5-乙基-3-{5-[2-(2H-四唑-5-基)-苯基]-茚滿-1-基}-3H-咪唑-4-羧酸；2-乙氧基-3-{5-[2-(2H-四唑-5-基)-苯基]-茚滿-1-基}-3H-苯并咪唑-4-羧酸；2-乙基硫烷基-3-{5-[2-(2H-四唑-5-基)-苯基]-茚滿-1-基}-3H-苯并咪唑-4-羧酸；N-苯甲酰-2-[1-(2-乙基-5，7-二甲基-咪唑并[4，5-b]吡啶-3-基)-茚滿-5-基]-苯磺酰胺；和N-{2-[1-(2-乙基-5，7-二甲基-咪唑并[4，5-b]吡啶-3-基)-茚滿-5-基]-苯基}-苯磺酰胺。
在其它實(shí)施方式中，AT2受體拮抗劑選自AT2受體拮抗劑肽，其說(shuō)明性例子包括下式代表的六、七和八肽及其藥學(xué)相容性鹽R1-R2-R3-R4-R5-R6-Pro-R7(VIII)式中R1不存在或選自氫、琥珀酰、L-天冬氨酰、肌氨酰、L-絲氨酰、琥珀酰胺酰、L-丙基、甘氨酰、L-酪氨酰、Nα-煙酰-、酪氨?；蛘逥-或L-天冬酰胺酰；R2選自精氨?；騈-苯甲酰羰基精氨酰；R3不存在或是纈氨酰；R4不存在或選自L-苯丙氨酰或L-酪氨酰；R5選自纈氨酰、L-異亮氨酰、L-丙氨?；騆-賴氨酰；R6選自L-組氨酰、L-異亮氨酰、L-酪氨酰或?qū)Π被奖滨?；和R7選自L-丙氨酸、L-酪氨酸、L-或D-亮氨酸、甘氨酸、L-異亮氨酸或β-丙氨酸殘基。
式(VIII)的代表性例子包括但不限于H-Asn-Arg-Val-Tyr-Val-His-Pro-Ala-OH[SEQ ID NO1]；H-Asn-Arg-Val-Tyr-Val-His-Pro-Leu-OH[SEQ ID NO2]；琥珀酰-Arg-Val-Tyr-Val-His-Pro-Ala-OH[SEQ ID NO3]；H-Asp-Arg-Val-Tyr-Val-His-Pro-Ala-OH[SEQ ID NO4]；H-Arg-Val-Tyr-Val-His-Pro-Ala-OH[SEQ ID NO5]；H-Sar-Arg-Val-Tyr-His-Pro-Ala-OH[SEQ ID NO6]；H-Ser-Arg-Val-Tyr-His-Pro-Ala-OH[SEQ ID NO7]；琥珀酰胺酰-Arg-Val-Tyr-Val-His-Pro-Ala-OH[SEQ ID NO8]；H-Asn-Arg-Val-Tyr-Val-His-Pro-Gly-OH[SEQ ID NO9]；H-Asn-Arg-Val-Tyr-Val-His-Pro-Ile-OH[SEQ ID NO10]；H-Sar-Arg-Val-Tyr-Val-His-Pro-Gly-OH[SEQ ID NO11]；H-Pro-Arg-Val-Tyr-Val-His-Pro-Gly-OH[SEQ ID NO12]；H-Asn-Arg-Val-Tyr-Val-His-Pro-Gly-OH[SEQ ID NO13]；H-Sar-Arg-Val-Tyr-Val-His-Pro-β-Ala-OH[SEQ ID NO14]；H-Asn-Arg-Val-Tyr-Val-His-Pro-β-Ala-OH[SEQ ID NO15]；H-Gly-Arg-Val-Tyr-Val-His-Pro-Ala-OH[SEQ ID NO16]；
H-Sar-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-Leu-OH[SEQ ID NO17]；H-Asn-Arg-Val-Tyr-Val-His-Pro-Leu-OH[SEQ ID NO18]；H-Sar-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-Ala-OH[SEQ ID NO19]，也稱為肌丙抗增壓素(saralasin)；H-Asn-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-Ala-OH[SEQ ID NO20]；H-Asn-Arg-Val-Tyr-Ala-His-Pro-Ala-OH[SEQ ID NO21]；H-Asp-Arg-Val-Phe-Ile-His-Pro-Tyr-OH[SEQ ID NO22]，也稱為Phe4-Tyr8-Ang IIH-Asp-Arg-Val-Tyr-Ile-p-NH2Phe-Pro-Phe-OH[SEQ ID NO23]，也稱為[p-NH2Phe]6-Ang II；和煙酸-Tyr-(N-苯甲酰羰基-Arg)-Lys-His-Pro-Ile-OH[SEQ ID NO24]，也稱為CGP-42112A；在其它實(shí)施方式中，AT2受體拮抗劑選自與AT2受體多肽有免疫反應(yīng)活性的抗原結(jié)合分子。說(shuō)明性抗原結(jié)合分子包括完整的多克隆抗體?？?例如)將AT2受體多肽或其片段注射入生產(chǎn)物種中以獲得多克隆抗血清，從而制備這種抗體，所述物種可包括小鼠或兔。本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知生產(chǎn)多克隆抗體的方法?？梢圆捎玫氖痉缎苑桨竻⒁?jiàn)例如Coligan等，《新編免疫學(xué)方法》(Current Protocols In Immunology)(JohnWiley和Sons，Inc，1991)和Ausubel等，《新編分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指南》(Current Protocolsin Molecular Biology)(John Wiley和Sons Inc，1994-1998)，具體參見(jiàn)第11章第III節(jié)。
為了代替在生產(chǎn)物種中獲得的多克隆抗血清，可用標(biāo)準(zhǔn)方法制備單克隆抗體，例如Khler和Milstein(1975，Nature 256，495-497)，或其最新修改，如Coligan等(1991，同上)所述，該方法是由經(jīng)過(guò)AT2受體多肽或其片段接種的生產(chǎn)物種獲得永生化的脾細(xì)胞或其它生產(chǎn)抗體的細(xì)胞。
本發(fā)明也考慮了抗原結(jié)合分子Fv、Fab、Fab’和F(ab’)2免疫球蛋白片段?；蛘?，抗原結(jié)合分子可以是合成的穩(wěn)定Fv片段、單個(gè)可變區(qū)結(jié)構(gòu)域(也稱為dAb)、“小抗體”等形式，如本領(lǐng)域所知。
本發(fā)明也考慮了將人源化抗體用作抗體結(jié)合分子。通過(guò)將非人(如嚙齒動(dòng)物，優(yōu)選小鼠)免疫球蛋白的可變重鏈和可變輕鏈的互補(bǔ)決定區(qū)轉(zhuǎn)移到人可變區(qū)中產(chǎn)生人源化抗體。然后，在非人對(duì)應(yīng)部分的構(gòu)架區(qū)中取代人抗體的典型殘基。采用人源化抗體產(chǎn)生的抗體組分避免了與非人恒定區(qū)免疫原性相關(guān)的潛在問(wèn)題?？寺》侨?、特別是鼠免疫球蛋白可變區(qū)的通用技術(shù)參見(jiàn)例如，Orlandi等(1989，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 863833)。產(chǎn)生人源化單克隆抗體的技術(shù)參見(jiàn)例如Jones等(1986，Nature321522)，Carter等(1992，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 894285)，Sandhu(1992，Crit.Rev.Biotech.12437)，Singer等(1993，J.Immun.1502844)，Sudhir編(《抗體工程改造方法》(Antibody Engineering Protocols)，Humana Press，Inc.1995)，Kelley(“工程改造治療性抗體”(Engineering Therapeutic Antibodies)，《蛋白質(zhì)工程原理和實(shí)踐》(Protein EngineeringPrinciples and Practice)Cleland等(編)，第399-434頁(yè)(JohnWiley&Sons，Inc.1996)，和Queen等，美國(guó)專利號(hào)5,693,762(1997)。
與AT2受體多肽有免疫反應(yīng)活性的說(shuō)明性抗原結(jié)合分子及其制備方法參見(jiàn)Nora等(1998，Am J Physiol.275(4 Pt 2)H1395-403)，Yiu等(1997，Regul Pept.70(1)15-21)，Reagan等(1993，Proc Natl Acad Sci USA.90(17)7956-7960)，Rakugi等(1997，Hypertens Res.20(1)51-55)和Wang等(1998 Hypertension.32(1)78-83)，其中一些可購(gòu)得，例如但不限于H-143(Santa Cruz Biotechnology，Santa Cruz，CA)(抗人AT2羧基端的氨基酸殘基221-363)，rAT2(Ab#1)(抗大鼠AT2的18殘基C-末端片段)，rAT2(Ab#2)(抗大鼠AT2的18殘基C-末端片段)和rAT2(Ab#3)(抗大鼠AT2的10殘基N-末端片段)(Alpha Diagnostic International，Inc.-5415 Lost Lane，SA)。
在其它實(shí)施方式中，AT2受體拮抗劑選自能抑制或降低AT2基因表達(dá)產(chǎn)物的水平或功能活性的核酸分子，其說(shuō)明性例子包括反義分子、核酶和RNAi分子。因此，本發(fā)明考慮了用于抑制翻譯(如Agtr2 mRNA的翻譯)的反義RNA和DNA分子以及核酶和RNAi分子。反義RNA和DNA分子通過(guò)結(jié)合靶mRNA和防止蛋白質(zhì)翻譯而直接阻斷mRNA的翻譯。對(duì)于反義DNA，需要衍生自翻譯起始位點(diǎn)，如Agtr2基因的-10和+10之間區(qū)域的寡脫氧核糖核苷酸。示范性反義寡核苷酸可衍生自編碼AT2受體的任何核酸分子，如美國(guó)專利號(hào)5,556,780和美國(guó)專利申請(qǐng)公開(kāi)號(hào)20030083339所述的那些。在本領(lǐng)域中，利用反義寡核苷酸的治療方法已有描述，例如美國(guó)專利號(hào)5,627,158和5,734,033。通常，反義分子包含約8-30個(gè)堿基(即約8-30個(gè)連接的核苷)，一般包含約12-25個(gè)堿基。
核酶是能夠催化特異性切割RNA的酶促RNA分子。核酶作用的機(jī)制包括序列核酶分子與互補(bǔ)靶RNA的特異性雜交，然后是內(nèi)切核酸酶切割。能特異性和有效地催化內(nèi)切核酸酶切割A(yù)gtr2 RNA序列的經(jīng)工程改造的錘頭基序核酶分子也屬于本發(fā)明范圍。最初通過(guò)掃描靶分子中的核酶切割位點(diǎn)來(lái)鑒定任何潛在RNA目標(biāo)內(nèi)的特異性核酶切割位點(diǎn)，核酶切割位點(diǎn)應(yīng)包括以下序列GUA、GUU和GUC。一旦鑒定到，可評(píng)價(jià)對(duì)應(yīng)于含有切割位點(diǎn)的靶基因區(qū)域的15-20個(gè)核糖核苷酸的短RNA序列的預(yù)測(cè)結(jié)構(gòu)特征，如可使寡核苷酸序列不合適的二級(jí)結(jié)構(gòu)。也可用核糖核酸酶保護(hù)試驗(yàn)測(cè)定候選靶點(diǎn)與互補(bǔ)寡核苷酸雜交的可及性，從而評(píng)價(jià)該候選靶點(diǎn)的適當(dāng)性。
反義RNA和DNA分子以及核酶都可用本領(lǐng)域已知的用于合成核酸分子的任何方法來(lái)制備。這些方法包括本領(lǐng)域熟知的化學(xué)合成寡脫氧核糖核苷酸的技術(shù)，例如固相亞磷酰胺化學(xué)合成?；蛘?，可通過(guò)在體外和體內(nèi)轉(zhuǎn)錄編碼反義RNA分子的DNA序列產(chǎn)生RNA分子。這種DNA序列可摻入摻入了合適的RNA聚合酶啟動(dòng)子如T7或SP6聚合酶啟動(dòng)子的各種載體中?；蛘撸稍诩?xì)胞系中穩(wěn)定的引入根據(jù)所用啟動(dòng)子組成性或誘導(dǎo)性合成反義RNA的反義cDNA構(gòu)建物。
可引入對(duì)核酸分子的各種修飾，以提高細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定性和半衰期?？赡艿男揎棸ǖ幌抻趯⒑颂?或脫氧核糖-核苷酸的側(cè)翼序列加入分子的5’和/或3’端，在寡脫氧核糖核苷酸主鏈內(nèi)使用人工連接而非磷酸二酯酶連接。修飾的寡核苷酸主鏈的說(shuō)明性例子包括例如具有正常3′-5′連接的硫代磷酸酯、手性硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯、磷酸三酯、氨基烷基磷酸三酯、甲基和其它烷基膦酸酯(包括3′-烷撐膦酸酯和手性膦酸酯)、亞膦酸酯、氨基磷酸酯(包括3′-氨基氨基磷酸酯和氨基烷基氨基磷酸酯)、硫代氨基磷酸酯、硫代烷基膦酸酯、硫代烷基磷酸三酯和硼代磷酸酯，它們的2′-5′連接的類似物，以及相鄰核苷堿基單元對(duì)由3′-5′變?yōu)?′-3′或由2′-5′變?yōu)?′-2′連接的極性反轉(zhuǎn)的類似物。也包括各種鹽、混合鹽和游離酸形式。
可用于降低Agtr2基因表達(dá)或該基因的表達(dá)產(chǎn)物的水平和/或功能活性的其它物質(zhì)包括介導(dǎo)Agtr2基因或基因轉(zhuǎn)錄物的RNA干擾(RNAi)的RNA分子。RNAi指通過(guò)引入與靶基因轉(zhuǎn)錄物同源的單鏈、一般是雙鏈RNA(dsRNA)干擾或破壞靶基因產(chǎn)物。因此，在一個(gè)實(shí)施方式中，編碼對(duì)應(yīng)于至少一部分AT2受體多肽的氨基酸序列的dsRNA本身，尤其是產(chǎn)生dsRNA的構(gòu)建物可用于降低其水平和/或功能活性。可用本領(lǐng)域報(bào)道的任何技術(shù)完成RNAi-介導(dǎo)的基因表達(dá)抑制，例如將編碼莖環(huán)或發(fā)夾RNA結(jié)構(gòu)的核酸構(gòu)建物轉(zhuǎn)染入靶細(xì)胞基因組，或者表達(dá)轉(zhuǎn)染的核酸構(gòu)建物，所述構(gòu)建物與匯集啟動(dòng)子(convergent promoters)之間的靶基因有同源性，或是從單個(gè)啟動(dòng)子之后的頭對(duì)頭或尾對(duì)尾重復(fù)?？刹捎萌魏蜗嗨茦?gòu)建物，只要它能產(chǎn)生一種能夠折疊回本身并產(chǎn)生dsRNA的RNA，或只要它能產(chǎn)生兩種不同RNA轉(zhuǎn)錄物，它們隨后退火形成與靶基因同源的dsRNA。
RNAi中不需要絕對(duì)同源，描述的較低閾值是，對(duì)于約200個(gè)堿基對(duì)的dsRNA而言，同源性約為85％(Plasterk和Ketting，2000，Current Opinion in Genetics and Dev.10562-567)。因此，根據(jù)dsRNA的長(zhǎng)度，RNAi-編碼核酸與靶基因轉(zhuǎn)錄物的同源性水平可以改變，即對(duì)100-200個(gè)堿基對(duì)的dsRNA而言，與靶基因的同源性至少約為85％，對(duì)較長(zhǎng)dsRNA，即300-100個(gè)堿基對(duì)的dsRNA而言，與靶基因的同源性至少約為75％。表達(dá)經(jīng)設(shè)計(jì)與另外表達(dá)的RNA退火的一種RNA轉(zhuǎn)錄物的RNA編碼構(gòu)建物，或者表達(dá)來(lái)自匯集啟動(dòng)子的不同轉(zhuǎn)錄物的單一構(gòu)建物的長(zhǎng)度優(yōu)選至少約為100個(gè)核苷酸。表達(dá)一種RNA的RNA編碼構(gòu)建物的長(zhǎng)度優(yōu)選至少約為200個(gè)核苷酸，所述RNA經(jīng)設(shè)計(jì)通過(guò)內(nèi)部折疊形成dsRNA。
用于表達(dá)形成dsRNA的構(gòu)建物的啟動(dòng)子可以是任何類型的啟動(dòng)子，只要得到的dsRNA對(duì)靶向破壞的細(xì)胞譜系基因產(chǎn)物具有特異性?；蛘?，啟動(dòng)子可以是譜系特異性的，因?yàn)樗鼉H在具體的開(kāi)發(fā)譜系細(xì)胞中表達(dá)。當(dāng)觀察到與非靶細(xì)胞譜系中表達(dá)的基因的同源性有一些重疊時(shí)，這可能有利。啟動(dòng)子也可由外部控制的因子或胞外環(huán)境因子誘導(dǎo)。
在另一實(shí)施方式中，直接切割它們對(duì)應(yīng)的特定mRNA的約21-23個(gè)核苷酸的RNA分子(如Tuschl等的美國(guó)專利申請(qǐng)公開(kāi)號(hào)20020086356所述)可用于介導(dǎo)RNAi。所述21-23 nt RNA分子可含有3’羥基，可以是單鏈或雙鏈(作為兩條21-23 nt RNA)，其中dsRNA分子可以是鈍端或包含突出端(如5’、3’)。
AT2受體拮抗劑的鑒定本發(fā)明也涉及一種篩選能拮抗AT2受體，包括降低AT2基因(也稱為Agtr2基因)表達(dá)或該基因的表達(dá)產(chǎn)物的水平和/或功能活性的物質(zhì)的方法。因此，按照這些方法鑒定的候選物質(zhì)能夠降低AT2受體多肽的生物學(xué)活性或特性。
屬于本發(fā)明范圍的候選物質(zhì)包括拮抗性抗原結(jié)合分子，以及抑制劑肽片段、反義分子、核酶、RNAi分子和共抑制分子。其它候選物質(zhì)包括分子量大于50和小于約2,500道爾頓的小有機(jī)物，一般含有與蛋白質(zhì)發(fā)生結(jié)構(gòu)作用必需的官能團(tuán)，特別是氫鍵，一般至少包括胺、羰基、羥基或羧基，適合為至少兩種官能化學(xué)基團(tuán)。候選物質(zhì)常常含有碳環(huán)或雜環(huán)結(jié)構(gòu)，或者用一種或多種上述官能團(tuán)取代的芳族或多芳結(jié)構(gòu)。也在生物分子中發(fā)現(xiàn)了候選物質(zhì)，包括但不限于肽、糖、脂肪酸、類固醇、嘌呤、嘧啶、其衍生物、結(jié)構(gòu)類似物或組合。
因?yàn)樾?非肽)分子AT2受體拮抗劑在口服給藥后更易于吸收、具有較少的潛在抗原決定簇或與較大的蛋白質(zhì)藥物相比更可能穿過(guò)細(xì)胞膜，所以這種分子通常有利。小有機(jī)分子也可能進(jìn)入合適的細(xì)胞并影響基因表達(dá)(如通過(guò)與參與基因表達(dá)的調(diào)節(jié)區(qū)或轉(zhuǎn)錄因子相互作用)；或通過(guò)抑制或提高輔助分子的結(jié)合影響基因活性。
或者，可以獲得或不難產(chǎn)生細(xì)菌、真菌、植物和動(dòng)物提取物形式的天然化合物文庫(kù)。此外，不難通過(guò)常規(guī)的化學(xué)、物理和生化方法修飾天然或合成產(chǎn)生的文庫(kù)和化合物，并可用于產(chǎn)生組合文庫(kù)。可對(duì)已知藥物進(jìn)行定向或隨機(jī)化學(xué)修飾，如酰化、烷化、酯化、酰胺化等，以產(chǎn)生結(jié)構(gòu)類似物。
也可對(duì)已知的藥物活性化合物及其化學(xué)類似物進(jìn)行篩選。
在一些實(shí)施方式中，所述方法包括(1)將一種制備物與待測(cè)物質(zhì)接觸，其中制備物含有(i)包含至少對(duì)應(yīng)于AT2受體的生物活性片段，或其變體或衍生物的氨基酸序列的多肽；或(ii)至少包含調(diào)節(jié)AT2基因的遺傳序列的一部分的多核苷酸，其操作性連接于報(bào)道基因；和(2)檢測(cè)與沒(méi)有待測(cè)物質(zhì)時(shí)正?；騾⒈鹊乃胶?或功能活性相比，該多肽的水平和/或功能活性或者報(bào)道基因的表達(dá)產(chǎn)物降低，這表明該物質(zhì)能拮抗AT2受體。
在這種類型的說(shuō)明性例子中，所述方法包括以下步驟建立包含AT2受體多肽和能夠結(jié)合于該多肽的配體的對(duì)照系統(tǒng)；建立包含AT2受體多肽、配體和候選化合物的測(cè)試系統(tǒng)；和通過(guò)比較測(cè)試和對(duì)照系統(tǒng)確定候選化合物是否抑制或降低了該多肽的功能活性。代表性配體可包含式I-VIII中任一項(xiàng)的化合物，在這些實(shí)施方式中，篩選的功能活性可包括結(jié)合親和力。在某些實(shí)施方式中，所述方法包括(a)在待測(cè)抑制劑化合物的存在下將AT2受體多肽與配體(如血管緊張素II)一起孵育；(b)測(cè)定結(jié)合于AT2受體多肽的配體量，其中相對(duì)于不存在待測(cè)抑制劑化合物時(shí)，在待測(cè)抑制劑化合物的存在下配體與AT2受體多肽結(jié)合降低表明有抑制作用；和(c)如果觀察到配體結(jié)合降低，則將待測(cè)化合物鑒定為AT2受體拮抗劑。在其它實(shí)施方式中，所述方法包括(a)在待測(cè)抑制劑化合物的存在下將包含AT2受體多肽的細(xì)胞膜與第一種配體(如血管緊張素II)一起孵育；(b)如果第一配體也結(jié)合AT1受體，任選地用特異性結(jié)合于AT1受體的第二配體(如氯沙坦或坎地沙坦)阻斷膜上或膜中存在的任何AT1受體；(c)測(cè)定結(jié)合于膜的第一配體的量，其中相對(duì)于沒(méi)有待測(cè)抑制劑化合物時(shí)，在待測(cè)抑制劑化合物的存在下配體與膜的結(jié)合降低表明有抑制作用；和(d)如果觀察到第一配體的結(jié)合降低，則將待測(cè)化合物鑒定為AT2受體拮抗劑。
在其它說(shuō)明性實(shí)施例中，用各種藥物篩選技術(shù)，將AT2受體多肽或者其催化或免疫原性片段或寡肽形式用于篩選化合物文庫(kù)。這種篩選中所用的片段可固定于固相支持物。檢測(cè)在AT2受體多肽和待測(cè)物質(zhì)之間形成的結(jié)合復(fù)合物。在特定實(shí)施方式中，AT2受體多肽包含對(duì)應(yīng)于以下任一項(xiàng)的氨基酸序列MKGNSTLATTSKNITSGLHFGLVNISGNNESTLNCSQKPSDKHLDAIPILYYIIFVIGFLVNIVVVTLFCCQKGPKKVSSIYIFNLAVADLLLLATLPLWATYYSYRYDWLFGPVMCKVFGSFLTLNMFASIFFITCMSVDRYQSVIYPFLSQRRNPWQASYIVPLVWCMACLSSLPTFYFRDVRTIEYLGVNACIMAFPPEKYAQWSAGIALMKNILGFIIPLIFIATCYFGIRKHLLKTNSYGKNRITRDQVLKMAAAVVLAFIICWLPFHVLTFLDALAWMGVINSCEVIAVIDLALPFAILLGFTNSCVNPFLYCFVGNRFQQKLRSVFRVPITWLQGKRESMSCRKSSSLREMETFVS(人AGTR2)[SEQ ID NO25]；MKDNFSFAATSRNITSSRPFDNLNATGTNESAFNCSHKPSDKHLEAIPVLYYMIFVIGFAVNIVVVSLFCCQKGPKKVSSIYIFNLALADLLLLATLPLWATYYSYRYDWLFGPVMCKVFGSFLTLNMFASIFFITCMSVDRYQSVIYPFLSQRRNPWQASYVVPLVWCMACLSSLPTFYFRDVRTIEYLGVNACIMAFPPEKYAQWSAGIALMKNILGFIIPLIFIATCYFGIRKHLLKTNSYGKNRITRDQVLKMAAAVVLAFIICWLPFHVLTFLDALTWMGIINSCEVIAVIDLALPFAILLGFTNSCVNPFLYCFVGNRFQQKLRSVFRVPITWLQGKRETMSCRKGSSLREMDTFVS(小鼠AGTR2)[SEQ ID NO26]；和MKDNFSFAATSRNITSSLPFDNLNATGTNESAFNCSHKPADKHLEAIPVLYYMIFVIGFAVNIVVVSLFCCQKGPKKVSSIYIFNLAVADLLLLATLPLWATYYSYRYDWLFGPVMCKVFGSFLTLNMFASIFFITCMSVDRYQSVIYPFLSQRRNPWQASYVVPLVWCMACLSSLPTFYFRDVRTIEYLGVNACIMAFPPEKYAQWSAGIALMKNILGFIIPLIFIATCYFGIRKHLLKTNSYGKNRITRDQVLKMAAAVVLAFIICWLPFHVLTFLDALTWMGIINSCEVIAVIDLALPFAILLGFTNSCVNPFLYCFVGNRFQQKLRSVFRVPITWLQGKRETMSCRKSSSLREMDTFVS(大鼠AGTR2)[SEQ ID NO27]。
在其它說(shuō)明性實(shí)施例中，在固相基材，如塑料銷或其它表面上合成多種不同的小待測(cè)化合物。待測(cè)化合物與AT2受體多肽或其片段發(fā)生反應(yīng)。然后，用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知方法檢測(cè)結(jié)合多肽。多肽也可直接加在用于上述藥物篩選技術(shù)的平板上。
在其它說(shuō)明性實(shí)施例中，所述方法包括將AT2受體多肽與待測(cè)樣品文庫(kù)的單個(gè)成員相接觸；檢測(cè)待測(cè)樣品與AT2受體多肽的相互作用；鑒定與AT2受體多肽相互作用的待測(cè)樣品；和分離與AT2受體多肽相互作用的待測(cè)樣品。
在上述各實(shí)施方式中，可用分光光度法、放射性方法或免疫方法檢測(cè)相互作用。AT2受體多肽和待測(cè)樣品之間的相互作用也可用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法定量。
在其它實(shí)施方式中，所述方法包括在AT2受體能夠結(jié)合AT2受體配體并可通過(guò)合適試驗(yàn)檢測(cè)AT2受體激活水平的條件下，在存在或不存在候選物質(zhì)的情況下孵育其表面上天然或重組表達(dá)AT2受體的細(xì)胞(如內(nèi)皮細(xì)胞，如冠狀內(nèi)皮細(xì)胞(CEC)、PC12W細(xì)胞、SK-UT-1細(xì)胞、3T3成纖維細(xì)胞或NG108-15細(xì)胞)。例如，可通過(guò)測(cè)定在受體配體的存在下候選物質(zhì)使細(xì)胞中AT2受體激活水平由基線值降低的能力，鑒定AT2受體拮抗劑。在說(shuō)明性實(shí)施例中，在細(xì)胞上的AT2受體激活的條件下，在存在或不存在候選物質(zhì)的情況下，使PC12W細(xì)胞接觸血管緊張素II或在其中培養(yǎng)，并測(cè)定細(xì)胞分化。如果一種物質(zhì)能抑制細(xì)胞的分化，則將其測(cè)定為AT2受體拮抗陽(yáng)性。在其它說(shuō)明性實(shí)施例中，在細(xì)胞上的AT2受體激活的條件下，在存在或不存在候選物質(zhì)的情況下，使PC12W細(xì)胞接觸血管緊張素II或在其中培養(yǎng)，并測(cè)定氧化氮水平或細(xì)胞中氧化氮合酶的水平或功能活性。如果一種物質(zhì)能抑制氧化氮或氧化氮合酶的水平或功能活性，則將其測(cè)定為AT2受體拮抗陽(yáng)性。在其它說(shuō)明性實(shí)施例中，在細(xì)胞上的AT2受體激活的條件下，在存在或不存在候選物質(zhì)的情況下，使冠狀內(nèi)皮細(xì)胞接觸血管緊張素II或在其中培養(yǎng)，并測(cè)定細(xì)胞中細(xì)胞分化相關(guān)蛋白Zfhep的表達(dá)。如果一種物質(zhì)能抑制細(xì)胞中的Zfhep表達(dá)，則將其測(cè)定為AT2受體拮抗陽(yáng)性。在特定實(shí)施方式中，用AT1受體配體如氯沙坦或坎地沙坦阻斷細(xì)胞表面上的任何AT1受體。
組合物本發(fā)明另一方面提供了用于治療、預(yù)防和/或緩解神經(jīng)病癥狀的組合物，其含有有效量的AT2受體拮抗劑和藥學(xué)上可接受的運(yùn)載體和/或稀釋劑。
任何已知的AT2受體拮抗劑均可用于本發(fā)明方法，限制條件是AT2受體拮抗劑有藥物活性?！八幬锘钚浴盇T2受體拮抗劑是給予個(gè)體時(shí)能治療和/或預(yù)防神經(jīng)病，包括預(yù)防癥狀發(fā)生、控制癥狀或治療與神經(jīng)病相關(guān)的現(xiàn)有癥狀的形式。
可采用一種或多種本領(lǐng)域已知公開(kāi)的疼痛/傷害感受模型或神經(jīng)病模型，尤其是周圍神經(jīng)病模型，更尤其是機(jī)械性神經(jīng)損傷或糖尿病誘導(dǎo)的神經(jīng)損傷(PDN)之后發(fā)生的神經(jīng)性疼痛的模型檢測(cè)本發(fā)明組合物的效果?？刹捎?例如)能評(píng)價(jià)觸覺(jué)異常性疼痛的發(fā)病和發(fā)展、神經(jīng)性疼痛的定義癥狀(如本文所述)的模型證明此效果。可用本領(lǐng)域任何已知方法評(píng)價(jià)本發(fā)明化合物的鎮(zhèn)痛活性。這種方法的例子包括von Frey絲線法(Chaplan等，1995，Anesthesiology 83775-85，彈尾測(cè)試(Tail-flick test)(D’Amour等，1941，J.Pharmacol.Exp.and Ther.7274-79)、大鼠尾浸漬模型、角叉聚糖誘導(dǎo)的爪痛覺(jué)過(guò)敏模型、福爾馬林行為反應(yīng)模型(Dubuisson等，1977，Pain 4161-174)、VonFrey絲線測(cè)試(Kim等，1992，Pain 50355-363)、輻射熱模型、冷異常性疼痛模型(Gogas等，1997，Analgesia 3111-118)、爪壓力測(cè)試(Randall和Selitto，1957，ArchInt Pharmacodyn111409-419)和爪熱學(xué)測(cè)試(Hargreaves等，1998，Pain 3277-88)。實(shí)施例的實(shí)驗(yàn)部分描述了測(cè)定神經(jīng)病大鼠中待測(cè)化合物對(duì)觸覺(jué)異常性疼痛反應(yīng)的影響的體內(nèi)試驗(yàn)。在所述實(shí)驗(yàn)中測(cè)定為陽(yáng)性的組合物尤其可用于預(yù)防、減輕或逆轉(zhuǎn)各種疼痛相關(guān)性病癥或病理(包括癌癥)的疼痛，尤其可用于預(yù)防、減輕或逆轉(zhuǎn)(如)糖尿病患者中發(fā)現(xiàn)的神經(jīng)性疼痛。
本發(fā)明活性化合物可以作為藥學(xué)相容性抗衡離子的鹽提供?？捎迷S多酸，包括鹽酸、硫酸、乙酸、乳酸、酒石酸、蘋(píng)果酸、琥珀酸等形成藥學(xué)相容性鹽。鹽在作為對(duì)應(yīng)游離堿形式的水性或其它質(zhì)子型溶劑中溶解性可能更高。
適用于本發(fā)明的藥物組合物包括含有有效量的藥物活性化合物以實(shí)現(xiàn)其所需目的的組合物。給予患者的活性化合物劑量應(yīng)該足以隨時(shí)間實(shí)現(xiàn)有益反應(yīng)，如與神經(jīng)病相關(guān)的至少一種癥狀減輕，所述癥狀適合為神經(jīng)性疼痛，如糖尿病性神經(jīng)性疼痛或在神經(jīng)外傷或感染之后發(fā)生的神經(jīng)性疼痛。藥物活性化合物的給藥量取決于待治療對(duì)象，包括其年齡、性別、體重和總體健康狀況。在這個(gè)方面，活性化合物的準(zhǔn)確給予量取決于醫(yī)師的判斷。為了確定在治療或預(yù)防神經(jīng)病中給予活性化合物的有效量，醫(yī)生可評(píng)價(jià)麻木、虛弱、疼痛和反射消失。在任何情況下，本領(lǐng)域技術(shù)人員不難確定本發(fā)明AT2受體拮抗劑的合適劑量。
有效量的AT2受體拮抗劑是能有效治療或預(yù)防神經(jīng)病，包括預(yù)防癥狀的發(fā)生，控制癥狀(如疼痛)和/或治療與神經(jīng)病相關(guān)的現(xiàn)有癥狀的物質(zhì)。下面討論用于本發(fā)明方法的給藥方式、AT2受體拮抗劑給藥量和AT2受體拮抗劑劑型。通過(guò)相對(duì)于合適對(duì)照測(cè)定能說(shuō)明疾病進(jìn)程的一種或多種診斷參數(shù)來(lái)確定神經(jīng)病是否經(jīng)過(guò)治療。在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，“合適對(duì)照”是未用AT2受體拮抗劑治療，或用不含AT2受體拮抗劑的藥物組合物治療的動(dòng)物。在人對(duì)象中，“合適對(duì)照”可以是治療前的個(gè)體，或者可以是用安慰劑治療的人(如年齡匹配或相似的對(duì)照)。按照本發(fā)明，疼痛治療包括但不限于(i)預(yù)防可能傾向于發(fā)生疾病但仍未被診斷出患有該疾病的對(duì)象經(jīng)歷的疼痛，因此，該治療是病理狀況的預(yù)防性治療；(ii)抑制疼痛發(fā)生或疼痛病狀，即阻滯其發(fā)展；(iii)緩解疼痛，即使疼痛發(fā)生或疼痛病狀消退；或(iv)緩解相信會(huì)引起疼痛的疾病或病狀產(chǎn)生的癥狀，如緩解疼痛感覺(jué)，而不解決根本的疾病或病狀。
本發(fā)明更適用于治療被診斷患有神經(jīng)病、被懷疑患有神經(jīng)病、已知易患神經(jīng)病和認(rèn)為可能發(fā)生神經(jīng)病、或認(rèn)為之前已治療的神經(jīng)病可能復(fù)發(fā)的個(gè)體。
在一些實(shí)施方式中，根據(jù)給藥的具體方式，含有AT2受體拮抗劑的組合物通常含有約0.000001-90％、約0.0001-50％或約0.01-25％重量的AT2受體拮抗劑，其余是合適的藥物運(yùn)載體或稀釋劑等。在一些實(shí)施方式中，AT2受體拮抗劑PD-123,319的每日劑量可以是每天約0.01-6000mg、每天約0.02-3000mg或每天0.05-1500mg。在其它實(shí)施方式中，AT2受體拮抗劑L-159,686的每日劑量可以是每天約0.01-12000mg、每天約0.02-6000mg或每天0.05-3000mg。在其它實(shí)施方式中，AT2受體拮抗劑PD-121,981的每日劑量可以是每天約0.001μg-6000mg、每天約0.002μg-3000mg或每天0.005μg-1500mg。在一些實(shí)施方式中，AT2受體拮抗劑PD-126,055的每日劑量可以是每天約0.001μg-100mg、每天約0.002μg-50mg或每天0.05μg-20mg。在其它實(shí)施方式中，AT2受體拮抗劑L-161,638的每日劑量可以是每天約0.05μg-10000mg、每天約0.1μg-5000mg或每天0.5μg-2500mg。在其它實(shí)施方式中，AT2受體拮抗劑L-163,579的每日劑量可以是每天約0.001μg-3000mg、每天約0.002μg-1500mg或每天0.005μg-750mg。AT2受體拮抗劑的劑量可取決于各種因素，如給藥方式、治療對(duì)象的種類、年齡和/或個(gè)體狀況，本領(lǐng)域技術(shù)人員用標(biāo)準(zhǔn)方法不難確定。
根據(jù)所治療的具體神經(jīng)病，可配制活性化合物并全身、外用或局部給藥。配制和給藥的技術(shù)可參見(jiàn)《雷明頓藥物科學(xué)》(Remington’s Pharmaceutical Sciences)MackPublishing Co.，Easton，Pa.，最新版。合適的途徑可包括例如口服、直腸、透粘膜或腸道給藥；胃腸道外遞送，包括肌肉內(nèi)、皮下、髓內(nèi)注射，以及鞘內(nèi)、直接心室內(nèi)、靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、吸入、鼻內(nèi)或眼內(nèi)注射。對(duì)于注射而言，適合用生理相容性緩沖液如Hanks溶液、林格氏溶液或生理鹽水緩沖液將本發(fā)明治療劑配制成水溶液。對(duì)于透粘膜給藥而言，制劑中采用適合透過(guò)屏障的滲透劑。本領(lǐng)域通常已知這種滲透劑。
或者，本發(fā)明組合物可配制成用于局部或外用給藥的形式。在這種情況下，所述組合物可配制成任何形式，包括但不限于乳膏、凝膠、油、軟膏、溶液或栓劑。這種局部組合物可包含滲透增強(qiáng)劑如苯扎氯銨、毛地黃皂苷、二氫松胞菌素B、癸酸、pH從7.0升高到8.0。這里優(yōu)選涉及用于增強(qiáng)活性化合物通過(guò)表皮的滲透的滲透增強(qiáng)劑?；蛘?，外用組合物可包括其中包裹了本發(fā)明活性化合物的脂質(zhì)體。
可配制本發(fā)明組合物，以用于液體形式或者洗劑、乳膏或凝膠形式給藥，液體形式中含有可接受稀釋劑(如鹽水和無(wú)菌水)，洗劑、乳膏或凝膠形式含有可接受的稀釋劑或運(yùn)載體以產(chǎn)生所需的結(jié)構(gòu)、一致性、粘度和外觀。本領(lǐng)域技術(shù)人員熟悉可接受的稀釋劑和運(yùn)載體，它們包括但不限于乙氧基化和非乙氧基化的表面活性劑、脂肪醇、脂肪酸、烴油(如棕櫚油、椰子油和礦物油)、可可油蠟、硅油、pH平衡劑、纖維素衍生物、乳化劑如非離子性有機(jī)或無(wú)機(jī)堿、防腐劑、蠟酯、類固醇、甘油三酯、磷脂如卵磷脂和腦磷脂、多元醇酯、脂肪醇酯、親水性羊毛脂衍生物和親水性蜂蠟衍生物。
或者，不難用本領(lǐng)域熟知的藥學(xué)上可接受的運(yùn)載體將本發(fā)明活性化合物配制成適合口服給藥的劑型，這也是實(shí)施本發(fā)明優(yōu)選的。這種運(yùn)載體使本發(fā)明化合物能夠配制成劑型如片劑、丸劑、膠囊、液體、凝膠、糖漿、漿液、懸液等，以被所治療患者口服攝取。這些運(yùn)載體可選自糖、淀粉、纖維素及其衍生物、麥芽、明膠、滑石粉、硫酸鈣、植物油、合成油、多元醇、藻酸、磷酸鹽緩沖溶液、乳化劑、等滲鹽水和無(wú)熱原水。
胃腸道外給藥的藥物劑型包括水溶形式的活性化合物的水溶液。此外，活性化合物懸液可制備成合適的油性注射懸液。合適的親脂性溶劑或載體包括脂肪油如芝麻油，或合成脂肪酸酯如油酸乙酯或甘油三酯，或脂質(zhì)體。水性注射懸液可含有能提高懸液粘度的物質(zhì)，如羧甲基纖維素鈉、山梨糖醇或右旋糖苷。任選地，所述懸液也可含有合適的穩(wěn)定劑或能提高該化合物溶解性的物質(zhì)，以便制備高度濃縮的溶液。
可通過(guò)以下方法獲得口服應(yīng)用的藥物制劑混合活性化合物與固體賦形劑，任選地研磨得到的混合物，和(如果需要，在加入合適助劑后)加工顆?；旌衔?，以獲得片劑或糖衣丸劑芯。具體說(shuō)，合適賦形劑是填料，如糖，包括乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨糖醇；纖維素制劑，如玉米淀粉、小麥淀粉、水稻淀粉、馬鈴薯淀粉、明膠、黃芪樹(shù)膠、甲基纖維素、羥丙基甲基-纖維素、羧甲基纖維素鈉和/或聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。如果需要，可加入崩解劑，如交聯(lián)的聚乙烯吡咯烷酮、瓊脂或者藻酸或其鹽如藻酸鈉?？赏ㄟ^(guò)任何藥劑學(xué)方法制備這種組合物，但所有方法都包括將一種或多種上述治療劑與構(gòu)成一種或多種必需成分的運(yùn)載體聯(lián)用的步驟。通常，可以本身已知的一種方式制造本發(fā)明藥物組合物，如常規(guī)的混合、溶解、造粒、制丸、磨細(xì)、乳化、包囊、捕獲或凍干方法。
糖衣丸劑芯帶有合適的糖衣。出于這個(gè)目的，可采用濃縮的糖溶液，其中可任選地含有阿拉伯樹(shù)膠、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、卡巴浦爾凝膠、聚乙二醇和/或二氧化鈦、漆溶液和合適的有機(jī)溶劑或溶劑混合物。可將染料或顏料加入片劑或糖衣丸劑的糖衣中，以鑒定或區(qū)別活性化合物劑量的不同組合。
可口服應(yīng)用的藥物包括由明膠制成的推入配合膠囊，以及由明膠和增塑劑如甘油或山梨糖醇制成的密封軟膠囊。推入配合膠囊可含有活性成分與填料的混合物，填料有(例如)乳糖、粘合劑如淀粉，和/或潤(rùn)滑劑如滑石粉或硬脂酸鎂，以及任選的穩(wěn)定劑。軟膠囊中，活性化合物可溶解或懸浮于合適的液體，如脂肪油、液體石蠟或液體聚乙二醇。此外，可添加穩(wěn)定劑。
本發(fā)明活性化合物的劑型也可包含特別為此目的設(shè)計(jì)的注射或植入的控釋裝置或經(jīng)改造也可用于此方式的其它形式的植入物?？赏ㄟ^(guò)包衣，如用疏水性聚合物包括丙烯酸樹(shù)脂、蠟、高級(jí)脂肪醇、聚乳酸和聚乙醇酸和某些纖維素衍生物如羥丙基甲基纖維素包衣來(lái)實(shí)現(xiàn)本發(fā)明活性化合物的控制釋放。此外，可用其它聚合物基質(zhì)、脂質(zhì)體和/或微球?qū)崿F(xiàn)控釋。
可用數(shù)小時(shí)、數(shù)天、數(shù)周或數(shù)月給予本發(fā)明活性化合物，這取決于幾種因素，包括所治療神經(jīng)病的嚴(yán)重程度、認(rèn)為該病狀是否可能復(fù)發(fā)等。給藥可以是持續(xù)給藥，如用數(shù)小時(shí)、數(shù)天、數(shù)周、數(shù)月等持續(xù)灌注?；蛘?，給藥可以是間歇性給藥，如在數(shù)天中每天一次，在數(shù)小時(shí)中每小時(shí)依次或認(rèn)為合適的任何其它給藥方案。
本發(fā)明組合物也可作為噴霧器的鼻或肺吸入氣霧劑或溶液、或吹入的微細(xì)粉末給予呼吸道，本發(fā)明組合物可單獨(dú)給藥或與惰性運(yùn)載體如乳糖或其它藥學(xué)上可接受的賦形劑聯(lián)合給藥。在這種情況下，制劑顆粒的直徑宜小于50微米，適合小于10微米。
為了使本發(fā)明易于理解和產(chǎn)生實(shí)際效果，下面通過(guò)非限制性實(shí)施例的方式描述具體優(yōu)選的實(shí)施方式。
實(shí)施例實(shí)施例1PD-123,319減輕患有坐骨神經(jīng)慢性壓迫性損傷(CCI)的大鼠的神經(jīng)性疼痛通過(guò)i.v.途徑(0.1-0.3mg/kg，n＝2，圖1)或i.p.途徑(1-10mg/kg，n＝3-4，圖2)給予CCI大鼠單次推注劑量AT2受體拮抗劑PD-123,319后，劑量依賴性減輕了同側(cè)(受傷)后爪的觸覺(jué)異常性疼痛(神經(jīng)性疼痛的定義癥狀)和對(duì)側(cè)后爪的抗傷害感受。相反，i.p.給予載體(注射用水)不能顯著減輕同側(cè)或?qū)?cè)后爪中的觸覺(jué)異常性疼痛或抗傷害感受。
實(shí)施例2L-159,686減輕了CCI大鼠的神經(jīng)性疼痛通過(guò)i.v.途徑將單次推注劑量的AT2受體拮抗劑L-159,686(0.1-0.3mg/kg)給予CCI大鼠(n＝2)后，劑量依賴性減輕了同側(cè)(受傷)后爪的觸覺(jué)異常性疼痛(神經(jīng)性疼痛的定義癥狀)和對(duì)側(cè)后爪的抗傷害感受(圖3)。
實(shí)施例3PD-123,319減輕了STZ-糖尿病大鼠的神經(jīng)性疼痛將單次推注劑量的PD-123,319(0.3-3.0mg/kg)i.p.注射給完全發(fā)生觸覺(jué)異常性疼痛(用STZ誘導(dǎo)糖尿病后～8周)的STZ-糖尿病大鼠(n＝4)后，劑量依賴性減輕了觸覺(jué)異常性疼痛(神經(jīng)性疼痛的定義癥狀)(圖4)。相反，i.p.注射載體(注射用水)不能顯著減輕STZ-糖尿病大鼠的觸覺(jué)異常性疼痛。
實(shí)施例1-3的實(shí)驗(yàn)藥物和材料鹽酸賽拉嗪(Xylazil-20TM)，混合的鹽酸替來(lái)他明/鹽酸唑拉西泮(Zoletil 100)和局部抗生素粉末(硫酸新霉素2.5mg、磺胺醋酰鈉100mg、呋喃西林2mg、苯基硝酸汞0.05mg和苯佐卡因5mg，在50g可溶性粉末中)購(gòu)自Provet Qld Pty Ltd(Brisbane，Australia)。芐基青霉素鈉(BenpenTM)購(gòu)自Royal Brisbane HospitalPharmacy(Brisbane，Australia)。異氟烷(IsofloTM)購(gòu)自Abbott Australasia(Sydney，Australia)，而藥品級(jí)CO2和O2購(gòu)自BOC Gases Ltd.(Brisbane，Australia)。鏈脲霉素、檸檬酸和檸檬酸三鈉購(gòu)自Sigma-Aldrich(Sydney，Australia)。血糖計(jì)(PrecisionQ.I.DTM)和葡萄糖測(cè)試電極(Precision PlusTM)購(gòu)自昆士蘭大學(xué)的CampusPharmacy(Brisbane，Australia)。無(wú)菌硅化絲線(DysilkTM)獲自Dynek Pty Ltd(Adelaide，South Australia)。單腔聚乙烯管(內(nèi)徑0.5-mm)購(gòu)自Critchley ElectricalProducts Pty Ltd(Auburn，Australia)。美國(guó)專利號(hào)4,812,462所述的PD-123,319由昆士蘭大學(xué)(Brisbane，Australia)化學(xué)系Craig Williams博士實(shí)驗(yàn)室合成。國(guó)際公開(kāi)號(hào)WO92/20661所述L-159,686購(gòu)自Chembridge Corporation(San Diego，USA)。
患有坐骨神經(jīng)的慢性壓迫性損傷(CCI)的大鼠通過(guò)腹膜內(nèi)(i.p.)注射Zoletil 100(0.09ml/200g)和Xylazil-20TM(0.1mL/200g)麻醉成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠，按照Bennett和Xie(1988)的方法產(chǎn)生坐骨神經(jīng)的慢性壓迫性損傷(CCI)。簡(jiǎn)要說(shuō)，通過(guò)鈍剝離股二頭肌，在股中部水平暴露左側(cè)坐骨總神經(jīng)。在三叉神經(jīng)近端，清除≈10mm神經(jīng)的附著組織，繞坐骨神經(jīng)結(jié)扎四個(gè)松散的結(jié)扎線(3.0絲線)(相距≈1mm)。按層縫合切口。手術(shù)后，大鼠接受芐基青霉素(60mg s.c.)以預(yù)防感染，并在術(shù)后恢復(fù)期間保持體溫。單籠飼養(yǎng)大鼠10-14天，然后給予AT2受體拮抗劑或載體(生理鹽水)。CCI-手術(shù)后，每天檢查大鼠受影響后爪的姿勢(shì)、探索行為、體重和水?dāng)z取，以及自殘的任何跡象。
用鏈脲霉素誘導(dǎo)糖尿病以類似于上述方法的方式麻醉成年雄性SD大鼠，以有利于將聚乙烯套管(預(yù)先充滿了0.1ml無(wú)菌鹽水)插入右側(cè)頸總靜脈。通過(guò)回抽少量血液測(cè)試頸靜脈套管是否被正確安置。將鏈脲霉素(STZ)(80mg/kg)的0.1M檸檬酸鹽緩沖液(pH4.5)溶液迅速i.v.注射如頸靜脈，以誘導(dǎo)糖尿病。通過(guò)檢測(cè)個(gè)體大鼠的水?dāng)z取和血糖濃度驗(yàn)證糖尿病。用(GlucostixTM)或Precision QIDTM試劑盒監(jiān)測(cè)血糖。
與以前文獻(xiàn)的研究(Calcutt等，1996，Pain.68(2-3)293-9)一致，STZ注射10天后每天飲水多于100mL水的大鼠被分類為糖尿病，后續(xù)實(shí)驗(yàn)中僅包括血糖濃度超過(guò)15mM的大鼠。通過(guò)比較，對(duì)照非糖尿病大鼠的水?dāng)z取約為每天20mL，血糖濃度為5-6mM，與文獻(xiàn)(Calcutt等，1996，同上)一致。
藥物劑量方案在CO2/O2(50∶50％)輕度麻醉下，CCI大鼠或STZ-糖尿病大鼠接受采用250μLHamilton注射器的靜脈內(nèi)(i.v.)或腹膜內(nèi)(i.p.)途徑單次推注注射(200μL)一種AT2受體拮抗劑(PD123,319或L-159,686)。在CCI手術(shù)14天后將待測(cè)化合物給予CCI大鼠，用STZ誘導(dǎo)糖尿病8周后，將待測(cè)化合物給予STZ-糖尿病大鼠。用校正的von Frey絲線定量各待測(cè)物質(zhì)PD123,319或L-159,686對(duì)神經(jīng)性疼痛的定義癥狀-觸覺(jué)(機(jī)械)異常性疼痛的緩解作用，如下所述。
抗傷害感受的評(píng)價(jià)用校正的von Frey絲線定量觸覺(jué)異常性疼痛。將大鼠放入絲網(wǎng)測(cè)試籠(20cm×20cm×20cm)中，使其適應(yīng)約15-30分鐘。用Von Frey絲線測(cè)定快速(brisk)縮爪反射所需的最低機(jī)械閾值。簡(jiǎn)要說(shuō)，將產(chǎn)生最低力的絲線施加于后爪趾面，直到絲線輕輕地扣上。5秒后無(wú)反應(yīng)則采用遞增順序的下一絲線。所用絲線產(chǎn)生的扣重為2、4、6、8、10、12、14、16、18和20g，在各測(cè)試進(jìn)行之前校正這些重量。對(duì)任何von Frey絲線都沒(méi)有反應(yīng)的動(dòng)物計(jì)20g。
對(duì)于CCI大鼠，在CCI手術(shù)前和手術(shù)14天后定量基線von Frey縮爪閾值(PWT)，手術(shù)14天后立即給藥。對(duì)于STZ-糖尿病大鼠，在用STZ誘導(dǎo)糖尿病之前和隨后8周中每隔1-2周測(cè)定基線von Frey PWT值，以記錄觸覺(jué)異常性疼痛隨時(shí)間的發(fā)展。在所有大鼠中，基線PWT是給藥前以≈5分鐘為間隔的三個(gè)閱讀值的平均值，對(duì)各后爪分別測(cè)定。給予各待測(cè)化合物后，在給藥后的以下時(shí)間點(diǎn)上測(cè)定von Frey PWT0.08、0.25、0.5、0.75、1、1.25、1.5、2和3小時(shí)。
數(shù)據(jù)分析縮爪閾值(PWT；g)對(duì)時(shí)間作圖，以構(gòu)建各個(gè)劑量和給藥途徑中兩種待測(cè)化合物(PD123,319和L-159,686)各自的反應(yīng)對(duì)時(shí)間曲線。
實(shí)施例4PD-121,981緩解PDN的STZ-糖尿病大鼠模型的觸覺(jué)異常性疼痛將i.p.推注劑量的PD-121,981(0.001-3.0μg/kg)給予STZ-糖尿病大鼠后，劑量依賴性減輕觸覺(jué)異常性疼痛，此作用迅速發(fā)生(圖5)。在給藥0.5-1.0小時(shí)后實(shí)現(xiàn)抗異常性疼痛作用峰值。對(duì)于0.03-3.0μg/kg的劑量范圍，作用時(shí)間＞3小時(shí)。與期望結(jié)果一致的是，推注劑量的載體沒(méi)有產(chǎn)生顯著抗異常性疼痛的作用。
將推注劑量的PD-121,981(0.1μg/kg)口服給予STZ-糖尿病大鼠后，抗異常性疼痛反應(yīng)的程度和持續(xù)時(shí)間與通過(guò)i.p.途徑給予STZ-糖尿病大鼠的相同劑量的PD-121,981相似(圖6)。無(wú)論是何種給藥途徑，作用時(shí)間都不超過(guò)3小時(shí)(圖6)。
實(shí)施例5PD-126,055減輕了PDN的STZ糖尿病大鼠模型的觸覺(jué)異常性疼痛將i.p.推注劑量的PD-126,055(1.0-100ng/kg)給予STZ-糖尿病大鼠能顯著減輕觸覺(jué)異常性疼痛(圖7)。該作用從給藥～0.5小時(shí)后開(kāi)始，在給藥～0.75-1.0小時(shí)后達(dá)到抗異常性疼痛作用峰值。對(duì)于所測(cè)試的劑量，作用時(shí)間為2-3小時(shí)。與預(yù)計(jì)與期望結(jié)果一致的是，推注劑量的載體沒(méi)有產(chǎn)生顯著抗異常性疼痛的作用。
實(shí)施例6L-161,638的鈉鹽減輕了PDN的STZ糖尿病大鼠模型的觸覺(jué)異常性疼痛將推注劑量的L-161,638(0.0003-3mg/kg)i.p.給予STZ-糖尿病大鼠后，迅速開(kāi)始減輕觸覺(jué)異常性疼痛，在給藥～0.25-0.75小時(shí)后觀察到作用峰值(圖8)。對(duì)于0.0003-0.03μg/kg的劑量范圍，作用時(shí)間為～3小時(shí)。對(duì)于3mg/kg劑量，作用時(shí)間＞3小時(shí)。
實(shí)施例7L-163,579減輕了PDN的STZ糖尿病大鼠模型的觸覺(jué)異常性疼痛將推注劑量的L-163,579(0.1-10μg/kg)i.p.給予STZ-糖尿病大鼠后，劑量依賴性減輕觸覺(jué)異常性疼痛，其特征在于起效迅速(圖9)。在給藥0.5-1小時(shí)后觀察到抗異常性疼痛作用峰值(圖9)，對(duì)于所檢測(cè)的大部分劑量作用時(shí)間超過(guò)3小時(shí)。
實(shí)施例8L-159,686減輕了PDN的STZ糖尿病大鼠模型的觸覺(jué)異常性疼痛將推注劑量的L-159,686(0.03-10μg/kg)i.p.給予STZ-糖尿病大鼠后，劑量依賴性減輕觸覺(jué)異常性疼痛(圖10)，但起效相對(duì)緩慢，在給藥～1.25小時(shí)后出現(xiàn)峰值作用。將劑量增加到30和100μg/kg不能使起效更快，也不提高抗異常性疼痛反應(yīng)的程度和持續(xù)時(shí)間。對(duì)于所研究的劑量，作用時(shí)間為2-3小時(shí)。
實(shí)施例9PD-121,981減輕了CCI大鼠的觸覺(jué)異常性疼痛將推注劑量的PD-121,981(0.03-3mg/kg)i.p.給予CCI大鼠后，在同側(cè)后爪中劑量依賴性抗異常性疼痛作用迅速開(kāi)始，在給藥0.5-0.75小時(shí)后達(dá)到峰值(圖11A)。對(duì)于所測(cè)試劑量，在給藥0.5-1.0小時(shí)后，在同側(cè)后爪中出現(xiàn)抗異常性疼痛作用峰值，對(duì)應(yīng)的作用時(shí)間為2-3小時(shí)。給予CCI大鼠劑量高達(dá)3mg/kg的PD-121,981在對(duì)側(cè)后爪中產(chǎn)生不顯著的抗傷害感受作用(圖11B)。將推注劑量的PD-121,981(1mg/kg)口服給予CCI大鼠后，抗異常性疼痛反應(yīng)的程度和持續(xù)時(shí)間通過(guò)i.p.途徑給予CCI大鼠的相同劑量的PD-121,981相似(圖12)。無(wú)論是何種給藥途徑，作用時(shí)間都約為3小時(shí)(圖12)。
實(shí)施例10PD-126,055減輕了CCI大鼠的觸覺(jué)異常性疼痛一旦同側(cè)(受傷)后爪完全發(fā)生觸覺(jué)異常性疼痛后，將推注i.p.劑量的PD-126,055(3-30μg/kg)或載體給予CCI大鼠。以劑量3-30μg/kg給予PD-126,055能夠在同側(cè)后爪中迅速開(kāi)始劑量依賴性抗異常性疼痛作用(圖13A)，在給藥0.75-1小時(shí)后觀察到峰值作用。最低測(cè)試劑量(3μg/kg)對(duì)應(yīng)的作用時(shí)間為1.5小時(shí)，大于3μg/kg的劑量＞3小時(shí)。以高達(dá)30μg/kg的劑量給予CCI大鼠PD-126,055在對(duì)側(cè)后爪中產(chǎn)生不顯著的抗傷害感受作用(圖13B)。將推注劑量的PD-126,055(30μg/kg)口服給予CCI大鼠后，抗異常性疼痛反應(yīng)的程度和持續(xù)時(shí)間與通過(guò)i.p.途徑給予CCI大鼠的相同劑量的PD-126,055相似(圖14)。無(wú)論是何種給藥途徑，作用時(shí)間都約為3小時(shí)(圖14)。
實(shí)施例11
L-161,638(鈉鹽)減輕了CCI大鼠的觸覺(jué)異常性疼痛推注i.p.劑量的L-161,638(0.003-10mg/kg)在CCI大鼠的同側(cè)后爪中迅速開(kāi)始產(chǎn)生劑量依賴性抗異常性疼痛作用，在給藥0.5-0.75小時(shí)后觀察到峰值反應(yīng)(圖15A)。相反，i.p.給予載體不顯著減輕觸覺(jué)異常性疼痛(圖15A)。對(duì)應(yīng)作用時(shí)間為1.5-3小時(shí)。將劑量高達(dá)10mg/kg的L-161,638給予CCI大鼠在對(duì)側(cè)后爪中產(chǎn)生不顯著的抗傷害感受作用(圖15B)。
實(shí)施例12L-163,579減輕了CCI大鼠的觸覺(jué)異常性疼痛一旦同側(cè)(受傷)后爪完全發(fā)生觸覺(jué)異常性疼痛后，將推注i.p.劑量的L-163,579(0.01-0.3mg/kg)或載體給予CCI大鼠。以劑量0.01-0.3mg/kg給予L-163,579后，在同側(cè)后爪中迅速開(kāi)始產(chǎn)生抗異常性疼痛作用(圖16)，在給藥0.25-0.75小時(shí)后觀察到峰值作用。對(duì)應(yīng)的作用時(shí)間為1.5-3小時(shí)。
實(shí)施例13L-159,686減輕了CCI大鼠的觸覺(jué)異常性疼痛推注i.p.劑量的L-159,686(0.003-0.03mg/kg)能劑量依賴性減輕CCI大鼠的同側(cè)(受傷)后爪的觸覺(jué)異常性疼痛(圖17)。在給藥～0.75-1小時(shí)后觀察到峰值抗異常性疼痛作用，對(duì)于0.01-0.03mg/kg的劑量，作用時(shí)間＞3小時(shí)。
實(shí)施例4-13的討論單次i.p.推注劑量的各種AT2受體拮抗劑PD-121,981、PD126,055、L-161,638(鈉鹽)、L-163,579和L-159,686能夠有效減輕PDN的STZ糖尿病大鼠模型的觸覺(jué)異常性疼痛。對(duì)于試驗(yàn)樣品PD-121,981、PD126,055、L-161,638(鈉鹽)和L-163,579，抗異常性疼痛作用起效相對(duì)較快，在給藥0.25-1.0小時(shí)后觀察到峰值反應(yīng)。對(duì)于較高劑量的121,981、PD126,055、L-161,638(鈉鹽)和L-163,579，STZ-糖尿病大鼠后爪的觸覺(jué)異常性疼痛被完全逆轉(zhuǎn)，對(duì)應(yīng)的作用時(shí)間≥3小時(shí)。將單次i.p.推注劑量的L-159,686(10μg/kg)給予STZ-糖尿病大鼠產(chǎn)生的抗異常性疼痛反應(yīng)低于最大值，并且當(dāng)劑量增加十倍至100μg/kg時(shí)，這種反應(yīng)也不再增加。
有趣的是，與STZ-糖尿病大鼠相比，需要相當(dāng)大劑量的PD-121,981、PD126,055、L-161,638(鈉鹽)和L-163,579才能顯著減輕CCI大鼠的觸覺(jué)異常性疼痛。因此，盡管神經(jīng)性疼痛的CCI-和STZ-糖尿病大鼠模型顯示了相似的行為跡象，即兩組都完全發(fā)生了觸覺(jué)異常性疼痛(神經(jīng)性疼痛的定義癥狀)，但本發(fā)現(xiàn)表明，這兩類神經(jīng)性疼痛的根本病理生理學(xué)迥異。對(duì)于所測(cè)試的大多數(shù)化合物，在對(duì)側(cè)后爪中產(chǎn)生的抗傷害感受作用不顯著，這表明抗異常性疼痛反應(yīng)是通過(guò)阻斷參與產(chǎn)生疼痛反應(yīng)的靶點(diǎn)而產(chǎn)生的，而不是通過(guò)提高內(nèi)源性下行疼痛抑制系統(tǒng)而產(chǎn)生的。
鼓舞人心的是，將推注劑量的PD-121,981(0.1μg/kg)口服給予STZ-糖尿病大鼠產(chǎn)生的抗異常性疼痛作用的平均程度和持續(xù)時(shí)間與通過(guò)i.p.途徑給予的相同劑量相似。此外，推注劑量的PD-121,981(1mg/kg)和PD-126,055(30μg/kg)口服給予CCI大鼠產(chǎn)生的抗異常性疼痛反應(yīng)與通過(guò)i.p.途徑給予的相應(yīng)劑量產(chǎn)生的反應(yīng)相似。這些觀察結(jié)果表明，PD-121,981和PD-126,055在腸壁中未被顯著代謝，它們不是腸壁中P-糖蛋白的底物，但需要實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。
實(shí)施例4-11的實(shí)驗(yàn)試劑和材料異氟烷(Forthane)和芐基青霉素鈉小瓶分別購(gòu)自Abbott Australasia Pty Ltd(Sydney，Australia)和CSL Limited(Melbourne，Australia)。布比卡因注射瓶購(gòu)自Provet Qld Pty Ltd(Brisbane，Australia)。生理鹽水安瓿獲自Delta West Pty Ltd(Perth，Australia)和Abbott Australasia(Sydney，Australia)。無(wú)菌硅化絲線(DysilkTM)獲自Dynek Pty Ltd(Adelaide，South Australia)。單腔聚乙烯管(內(nèi)徑(I.D.)0.4mm，外徑(O.D.)0.8mm)購(gòu)自Aubum Plastics和Engineering Pty Ltd(Sydney，Australia)。Medisense‘Precision Plus’血糖計(jì)購(gòu)自Abbott Laboratories，(MA，USA)。
試驗(yàn)樣品AT2受體拮抗劑化合物()美國(guó)專利號(hào)4,812,462描述的PD-121,981由昆士蘭大學(xué)(Brisbane，Australia)化學(xué)系Craig Williams博士的實(shí)驗(yàn)室合成。國(guó)際公開(kāi)號(hào)WO93/23378所述的PD-126,055由Industrial Research Limited(IRL)(新西蘭)合成和提供。EMA500是L-161,638的鈉鹽(L-161,638參見(jiàn)Glinka等，1994，Bioorg.Med.Chem.Lett.41479和美國(guó)專利號(hào)5,204,354)和L-163,579，如Glinka等(1994，Bioorg.Med.Chem.Lett.42337)和美國(guó)專利號(hào)5,441,959所述，EMA500由Industrial Research Limited(IRL)(新西蘭)合成和提供。
噻吩-2-羧酸芐基-{2-乙基-4-氧代-3-[2′-(2H-四唑-5-基)-聯(lián)苯基-4-基甲基]-3，4-二氫-喹唑啉-6-基}-酰胺鈉鹽的制備 將氫氧化鈉(0.882mL，0.9976M，0.880mmo1)加入L-161,638[581mg(純度95％，含5％環(huán)己烷)，0.884mmol]的甲醇(10mL)和四氫呋喃(10mL)溶液中。室溫下30分鐘后，減壓去除揮發(fā)性物質(zhì)。將得到的膜溶解于水中，減壓濃縮(水浴T＝40℃)。將產(chǎn)物凍干，產(chǎn)生灰白色粉末EMA500(571mg，0.884mol，定量)。m.p.207-211℃；C36H28N7NaO2S.2.5H2O理論值C，63.42％；H，4.73％；N，14.38％，S，4.70％，測(cè)定值C，63.27％；H，4.80％；N，14.40％；S，4.58％；HRMS(ES)C36H28N7O2S(M-)理論值622.2025；測(cè)定值622.2033。
動(dòng)物成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠購(gòu)自Herston Medical Research Centre，昆士蘭大學(xué)。在控溫環(huán)境(21±2℃)中以12h/12h光照/黑暗循環(huán)飼養(yǎng)大鼠。隨意給予食物和水。在開(kāi)始實(shí)驗(yàn)之前，至少使大鼠適應(yīng)3天。昆士蘭大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理委員會(huì)在倫理上批準(zhǔn)了這些研究。
在大鼠中誘導(dǎo)STZ糖尿病和發(fā)生觸覺(jué)異常性疼痛糖尿病誘導(dǎo)用3％異氟烷97％氧氣麻醉成年雄性SD大鼠后，將短聚乙烯插管(0.4mm ID，0.8mm OD)插入頸靜脈，以靜脈內(nèi)(i.v.)給予單劑量的STZ(75mg/kg)。取出i.v.插管后，結(jié)扎頸靜脈，縫合傷口，局部施加布比卡因。大鼠接受芐基青霉素(60mg s.c.)以預(yù)防感染，并在手術(shù)恢復(fù)期間使大鼠保持體溫。在進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)之前單籠飼養(yǎng)大鼠，從給予STZ開(kāi)始每天監(jiān)測(cè)大鼠的總體健康狀況和舒適性。給予STZ10天后如果血糖濃度≥15mM(用Medisense裝置測(cè)定)且每天的水?dāng)z取大于100mL，則確認(rèn)糖尿病的診斷。
觸覺(jué)異常性疼痛的發(fā)生用校正的von Frey絲線測(cè)定大鼠后爪發(fā)生快速縮爪反射所需的最低機(jī)械閾值。簡(jiǎn)要說(shuō)，將單只大鼠轉(zhuǎn)移到絲網(wǎng)測(cè)試籠(20cm×20cm×20cm)中，在von Frey測(cè)試前使其適應(yīng)約10-20分鐘。從產(chǎn)生最低力的von Frey絲線開(kāi)始，將該絲線施加于后爪趾面，直到絲線輕輕地扣上。5秒后無(wú)反應(yīng)則采用力增加的下一絲線。所用絲線產(chǎn)生的扣重為2、4、6、8、10、12、14、16、18和20g。對(duì)任何von Frey絲線都沒(méi)有反應(yīng)的動(dòng)物計(jì)20g。給予STZ之前，評(píng)價(jià)基線yon Frey測(cè)定值。給予STZ之后，以周期性間隔評(píng)價(jià)后爪的基線von Frey PWT，以監(jiān)測(cè)糖尿病誘導(dǎo)的觸覺(jué)異常性疼痛的發(fā)生。給予STZ后約6-8周，當(dāng)von Frey縮爪閾值≤6g時(shí)，完全發(fā)生觸覺(jué)異常性疼痛；對(duì)應(yīng)的糖尿病前縮爪閾值為～12g。
坐骨神經(jīng)慢性壓迫性損傷的誘導(dǎo)和觸覺(jué)異常性疼痛的發(fā)生坐骨神經(jīng)慢性壓迫性損傷(CCI)的誘導(dǎo)按照Bennett和Xie的方法(1988，Pain 3387-107)，用3％異氟烷97％氧氣麻醉成年雄性SD大鼠后，繞一條坐骨神經(jīng)結(jié)扎四個(gè)松散的結(jié)扎線，以產(chǎn)生單側(cè)慢性壓迫性損傷(CCI)。簡(jiǎn)要說(shuō)，通過(guò)鈍剝離股二頭肌，在股中部水平暴露左側(cè)坐骨總神經(jīng)。在三叉神經(jīng)近端，清除≈10mm神經(jīng)的附著組織，繞坐骨神經(jīng)結(jié)扎四個(gè)松散的結(jié)扎線(3.0絲線)(相距≈1mm)。按層縫合切口。手術(shù)后，大鼠接受芐基青霉素(60mg s.c.)以預(yù)防感染，并在術(shù)后恢復(fù)期間保持體溫。單籠飼養(yǎng)大鼠后，進(jìn)行進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)，自CCI-手術(shù)后，每天監(jiān)測(cè)大鼠的總體健康狀況和舒適性。
觸覺(jué)異常性疼痛的發(fā)生用校正的von Frey絲線記錄觸覺(jué)異常性疼痛的發(fā)生的時(shí)程。von Frey縮爪閾值(PWT)≤6g時(shí)，認(rèn)為同側(cè)(受傷)后爪完全發(fā)生觸覺(jué)異常性疼痛；CCI手術(shù)的對(duì)側(cè)(未受傷)后爪的對(duì)應(yīng)PWT保持不變，仍為～12g。CCI-術(shù)后約10-14天，同側(cè)后爪完全發(fā)生觸覺(jué)異常性疼痛。
給予STZ-和CCI大鼠的試驗(yàn)樣品按照‘清除’方案，通過(guò)腹膜內(nèi)(i.p.)途徑將單次推注劑量的PD-121,981、L-161,638(鈉鹽)、L-163,579和L-159,686各自給予STZ-糖尿病大鼠組和CCI大鼠組，以使連續(xù)給予推注劑量的感興趣的試驗(yàn)樣品之間至少有3天的清除期。此外，在預(yù)研究中，通過(guò)口服途徑可將PD-121,981給予各個(gè)STZ-糖尿病大鼠組和CCI大鼠組。
抗異常性疼痛功效的評(píng)價(jià)用Von Frey絲線評(píng)價(jià)給藥前和給藥后0.25、0.5、0.45、1、1.25、1.5、2、3小時(shí)時(shí)感興趣的試驗(yàn)樣品劑量依賴性減輕STZ-和CCI大鼠組觸覺(jué)異常性疼痛的能力。治療目的是實(shí)現(xiàn)與在STZ糖尿病誘導(dǎo)前或CCI手術(shù)前相同大鼠中測(cè)定的PWT(～12g)匹配的von Frey PWT。
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不應(yīng)認(rèn)為本文中對(duì)所有參考文獻(xiàn)的引用是承認(rèn)了該文獻(xiàn)構(gòu)成本發(fā)明的“現(xiàn)有技術(shù)”。
整個(gè)說(shuō)明書(shū)中，描述本發(fā)明優(yōu)選實(shí)施方式的目的不是將本發(fā)明限制于任何一個(gè)實(shí)施方式或特定的特征集合。因此，本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)理解，根據(jù)本公開(kāi)，可在不背離本發(fā)明范圍的情況下對(duì)所述的具體實(shí)施方式
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權(quán)利要求
1.一種治療或預(yù)防對(duì)象的神經(jīng)病的方法，所述方法包括給予所述對(duì)象有效量的AT2受體拮抗劑。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述AT2受體拮抗劑選自小分子、核酸、肽、多肽或肽模擬物。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述AT2受體拮抗劑選自式(I)代表的化合物或其藥學(xué)相容性鹽 式中R1和R2獨(dú)立地選自H、芐基、取代的芐基、苯基、取代的苯基、C1-6烷基、取代的C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、取代的C3-6環(huán)烷基或雜芳基，限制條件是R1和R2不都是氫，R4選自羧酸酯、羧酸、硫酸酯、磷酸酯、磺酰胺、磷酰胺或酰胺，X選自CH、氮、硫或氧，限制條件是當(dāng)R4是硫或氧時(shí)，R1或R2之一不存在，Y選自硫、氧或N-RN，式中RN選自H、C1-6烷基、取代的C1-6烷基、芳基、取代的芳基、芐基、取代的芐基、C1-4烷基芳基、取代的C1-4烷基芳基、OH或NH2，G是五元或六元、同芳香性或不飽和、取代或未取代的雜環(huán)，包括但不限于以下環(huán)系統(tǒng) 式中符號(hào)‘*’表示該鍵為稠合環(huán)‘A’和‘G’之間共用，R5選自H、C1-6烷基、苯基、取代的苯基、取代的C1-6烷基、C1-6烷氧基或取代的C1-6烷氧基，R6和R8獨(dú)立地選自H、C1-6烷基、取代的C1-6烷基、C1-6烷氧基、取代的C1-6烷氧基、苯基、苯氧基、芐基、芐氧基、芐基氨基、聯(lián)苯基、取代的聯(lián)苯基、聯(lián)苯氧基、取代的聯(lián)苯氧基、萘基、取代的萘基、限制條件是R6或R8之一不是氫，和R7選自苯基、取代的苯基、芐基、取代的芐基、聯(lián)苯基、取代的聯(lián)苯基、聯(lián)苯基甲撐、取代的聯(lián)苯基甲撐、萘基、取代的萘基、萘基甲撐或取代的萘基甲撐。
4.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述AT2受體拮抗劑選自式(II)代表的化合物或其藥學(xué)相容性鹽 式中R1和R2獨(dú)立地選自下組H、苯基、取代的苯基、芐基、取代的芐基、C1-6烷基、取代的C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、取代的C3-6環(huán)烷基、雜芳基和取代的雜芳基、取代的聯(lián)苯基甲撐以及飽和和不飽和的取代的聯(lián)苯基甲撐，限制條件是R1和R2之一不是氫，R4選自羧酸酯、羧酸、硫酸酯、磷酸酯、磺酰胺、磷酰胺或酰胺，X選自CH、氮、硫或氧，限制條件是當(dāng)R4是硫或氧時(shí)，R1或R2之一不存在，和Y選自硫、氧或N-RN，式中RN選自H、C1-6烷基、取代的C1-6烷基、芳基、取代的芳基、芐基、取代的芐基、C1-4烷基芳基、取代的C1-4烷基芳基、OH或NH2。
5.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述AT2受體拮抗劑選自式(III)代表的化合物或其藥學(xué)相容性鹽 式中R1、R2和R3獨(dú)立地選自H、苯基、取代的苯基、芐基、取代的芐基、C1-6烷基、取代的C1-6烷基，限制條件是R1或R2中至少一個(gè)不是氫，X選自CH、氮、硫或氧，限制條件是當(dāng)R4是硫或氧時(shí)，R1或R2之一不存在，或者X是芳基或雜芳基，限制條件是R1和R2都不存在，V選自CH或氮原子，Y選自硫、氧或N-RN，式中RN選自H、C1-6烷基、取代的C1-6烷基、芳基、取代的芳基、芐基、取代的芐基、C1-4烷基芳基、取代的C1-4烷基芳基、OH或NH2，R4選自羧酸酯、羧酸、硫酸酯、磷酸酯、磺酰胺、磷酰胺或酰胺，G是五元或六元、同芳香性或不飽和、取代或未取代的雜環(huán)，包括但不限于以下環(huán)系統(tǒng) 式中符號(hào)‘*’表示該鍵為稠合環(huán)‘A’和‘G’之間共用，R5選自H、C1-6烷基、苯基、取代的苯基、取代的C1-6烷基或C1-6烷氧基，R6和R8獨(dú)立地選自H、C1-6烷基、取代的C1-6烷基、C1-6烷氧基、取代的C1-6烷氧基、苯基、苯氧基、芐基、芐氧基、芐基氨基、聯(lián)苯基、取代的聯(lián)苯基、聯(lián)苯氧基、取代的聯(lián)苯氧基、萘基、取代的萘基，限制條件是R6或R8之一不是氫，和R7選自苯基、取代的苯基、芐基、取代的芐基、聯(lián)苯基、取代的聯(lián)苯基、聯(lián)苯基甲撐、取代的聯(lián)苯基甲撐、萘基、取代的萘基、萘基甲撐和取代的萘基甲撐。
6.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述AT2受體拮抗劑選自式(IV)代表的化合物或其藥學(xué)相容性鹽 式中R10選自H、鹵素、C1-6烷基、苯基、取代的苯基、取代的C1-6烷基或C1-6烷氧基，R9選自-NR13R14，式中R13和R14獨(dú)立地選自C1-6烷基、取代的C1-6烷基、芳基、取代的芳基、芐基、取代的芐基、C1-4烷基芳基、取代的C1-4烷基芳基、OH或NH2；五元或六元、飽和或不飽和、取代或未取代的碳環(huán)或雜環(huán)，包括但不限于 V選自CH或氮原子，Y選自硫、氧或N-RN，式中RN選自H、C1-6烷基、取代的C1-6烷基、芳基、取代的芳基、芐基、取代的芐基、C1-4烷基芳基、取代的C1-4烷基芳基、OH或NH2，G是五元或六元、同芳香性或雜環(huán)、不飽和、取代的環(huán)，包括但不限于以下環(huán)系統(tǒng) 式中符號(hào)‘*’表示該鍵為稠合環(huán)‘A’和‘G’之間共用，R5選自C1-6烷基、苯基、取代的苯基、取代的C1-6烷基或C1-6烷氧基，R6和R8獨(dú)立地選自H、C1-6烷基、取代的C1-6烷基、C1-6烷氧基、取代的C1-6烷氧基、苯基、苯氧基、芐基、芐氧基、芐基氨基、聯(lián)苯基、取代的聯(lián)苯基、聯(lián)苯氧基、取代的聯(lián)苯氧基、萘基、取代的萘基，限制條件是R6或R8之一不是氫，和R7選自苯基、取代的苯基、芐基、取代的芐基、聯(lián)苯基、取代的聯(lián)苯基、聯(lián)苯基甲撐、取代的聯(lián)苯基甲撐、萘基、取代的萘基、萘基甲撐或取代的萘基甲撐。
7.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述AT2受體拮抗劑選自式(V)代表的化合物或其藥學(xué)相容性鹽 式中M是H或鹵素(氟、溴、碘、氯)，R5選自C1-6烷基、苯基、取代的苯基、取代的C1-6烷基或C1-6烷氧基，R16選自C1-6烷基氨基、C1-6二烷基氨基、取代的C1-6烷基氨基、取代的二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、取代的芳基氨基、取代的二芳基氨基、烷基芳基氨基、二烷基芳基氨基、取代的烷基芳基氨基、取代的二烷基芳基氨基、雜芳基氨基、取代的雜芳基氨基、環(huán)烷基氨基、二環(huán)烷基氨基、二雜芳基氨基、烷基羰基氨基、芳基羰基氨基、烷基芳基羰基氨基、環(huán)烷基羰基氨基，和R17選自C1-6烷基、取代的C1-6烷基、苯基、取代的苯基、芐基、取代的芐基、聯(lián)苯基、取代的聯(lián)苯基、聯(lián)苯基甲撐、取代的聯(lián)苯基甲撐、萘基、取代的萘基、雜芳基或取代的雜芳基。
8.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述AT2受體拮抗劑選自式(VIII)代表的肽化合物或其藥學(xué)相容性鹽R1-R2-R3-R4-R5-R6-Pro-R7(VIII)式中R1不存在或選自氫、琥珀酰、L-天冬氨酰、肌氨酰、L-絲氨酰、琥珀酰胺酰、L-丙基、甘氨酰、L-酪氨酰、Nα-煙酰、-酪氨?；蛘逥-或L-天冬酰胺酰；R2選自精氨?；騈-苯甲酰羰基精氨酰；R3不存在或是纈氨酰；R4不存在或選自L-苯丙氨?；騆-酪氨酰；R5選自纈氨酰、L-異亮氨酰、L-丙氨?；騆-賴氨酰；R6選自L-組氨酰、L-異亮氨酰、L-酪氨?；?qū)Π被奖滨?；和R7選自L-丙氨酸、L-酪氨酸、L-或D-亮氨酸、甘氨酸、L-異亮氨酸或β-丙氨酸殘基。
9.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述AT2受體拮抗劑選自式(IX)代表的化合物或其藥學(xué)相容性鹽 式中X選自CH或氮，R1和R2獨(dú)立地選自苯基、取代的苯基、芐基、取代的芐基、C1-6烷基、取代的C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、取代的C3-6環(huán)烷基或雜芳基，R5選自氫、C1-6烷基、苯基、取代的苯基、取代的C1-6烷基、C1-6烷氧基或取代的C1-6烷氧基，和R7選自選自苯基、取代的苯基、芐基、取代的芐基、聯(lián)苯基、取代的聯(lián)苯基、聯(lián)苯基甲撐、取代的聯(lián)苯基甲撐、萘基、取代的萘基、萘基甲撐或取代的萘基甲撐。
10.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述AT2受體拮抗劑選自式(X)代表的化合物或其藥學(xué)相容性鹽 式中X選自CH或氮，R1和R2獨(dú)立地選自苯基、取代的苯基、芐基、取代的芐基、C1-6烷基、取代的CI-6烷基、C3-6環(huán)烷基、取代的C3-6環(huán)烷基和雜芳基，和R6和R8獨(dú)立地選自H、C1-6烷基、取代的C1-6烷基、C1-6烷氧基、取代的C1-6烷氧基、苯基、苯氧基、芐基、芐氧基、芐基氨基、聯(lián)苯基、取代的聯(lián)苯基、聯(lián)苯氧基、取代的聯(lián)苯氧基、萘基、取代的萘基，限制條件是R6或R8之一不是氫。
11.如權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，AT2受體拮抗劑選自式(II)代表的化合物或其藥學(xué)相容性鹽，式中R1和R2獨(dú)立地選自苯基或取代的苯基、C1-6烷基、取代的聯(lián)苯基甲撐，X選自CH或氮，R4是羧酸。
12.如權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述AT2受體拮抗劑選自式(XI)代表的化合物或其藥學(xué)相容性鹽 式中V選自CH或氮原子，Y和W獨(dú)立地選自硫、氧或N-RN，式中RN選自H、C1-6烷基、取代的C1-6烷基、芳基、取代的芳基、芐基、取代的芐基、C1-4烷基芳基、取代的C1-4烷基芳基、OH或NH2，R5選自C1-6烷基、苯基、取代的苯基、取代的C1-6烷基或C1-6烷氧基，R7選自苯基、取代的苯基、芐基、取代的芐基、聯(lián)苯基、取代的聯(lián)苯基、聯(lián)苯基甲撐、取代的聯(lián)苯基甲撐、萘基、取代的萘基、萘基甲撐或取代的萘基甲撐，R9選自-NR13R14，式中R13和R14獨(dú)立地選自C1-6烷基、取代的C1-6烷基、芳基、取代的芳基、芐基、取代的芐基、C1-4烷基芳基、取代的C1-4烷基芳基、OH或NH2；五元或六元、飽和或不飽和、取代或未取代的碳環(huán)或雜環(huán)，包括但不限于 和R10選自H、鹵素、C1-6烷基、苯基、取代的苯基、取代的C1-6烷基或C1-6烷氧基。
13.如權(quán)利要求3或9所述的方法，其特征在于，所述AT2受體拮抗劑選自式(IX)代表的化合物或其藥學(xué)相容性鹽，式中R1和R2是苯基，X是CH，R5是氫或C1-4烷基，R7選自取代的芐基。
14.如權(quán)利要求3、9或13中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述AT2受體拮抗劑選自式(IX)代表的化合物或其藥學(xué)相容性鹽，其中R5是氫和R7選自4-(N，N-二甲基氨基)-3-甲基芐基、4-甲氧基-3-甲基芐基、4-氨基-3-甲基芐基。
15.如權(quán)利要求10所述的方法，其特征在于，所述AT2受體拮抗劑選自式(X)代表的化合物或其藥學(xué)相容性鹽，式中R1和R2獨(dú)立地選自苯基或取代的苯基，X是CH，R4是羧酸，R6選自C1-6烷基、取代的C1-6烷基、C1-6烷氧基、取代的C1-6烷氧基、苯基、苯氧基，R8選自H、苯基、苯氧基、芐基、芐氧基、芐基氨基、聯(lián)苯基、取代的聯(lián)苯基、聯(lián)苯氧基、取代的聯(lián)苯氧基、萘基或取代的萘基。
16.如權(quán)利要求12所述的方法，其特征在于，所述AT2受體拮抗劑選自式(XI)代表的化合物或其藥學(xué)相容性鹽，式中V是CH，Y和W是氧，R5選自C1-6烷基、苯基、取代的苯基、取代的C1-6烷基或C1-6烷氧基，R7選自聯(lián)苯基、取代的聯(lián)苯基、聯(lián)苯基甲撐、取代的聯(lián)苯基甲撐、萘基、取代的萘基、萘基甲撐或取代的萘基甲撐，RN選自H、C1-6烷基、取代的C1-6烷基、芳基、取代的芳基、C1-4烷基芳基、取代的C1-4烷基芳基、OH或NH2，R9選自-NR13R14，其中R13和R14獨(dú)立地選自C1-6烷基、取代的C1-6烷基、芳基、取代的芳基、芐基、取代的芐基、C1-4烷基芳基、取代的C1-4烷基芳基、OH或NH2；五元或六元、飽和或不飽和、取代或未取代的碳環(huán)或雜環(huán)，包括但不限于 R10選自H、鹵素、C1-6烷基、苯基、取代的苯基、取代的C1-6烷基或C1-6烷氧基。
17.如權(quán)利要求12或16所述的方法，其特征在于，所述AT2受體拮抗劑選自式(XI)代表的化合物或其藥學(xué)相容性鹽，式中V是CH，Y和W是氧，R5選自C1-6烷基、取代的C1-6烷基或C1-6烷氧基，R7選自聯(lián)苯基甲撐、取代的聯(lián)苯基甲撐、萘基甲撐或取代的萘基甲撐，RN選自H、C1-6烷基、取代的C1-6烷基、芳基、取代的芳基、C1-4烷基芳基、取代的C1-4烷基芳基，R9選自-NR13R14，其中R13和R14獨(dú)立地選自C1-6烷基、取代的C1-6烷基、芳基、取代的芳基、芐基、取代的芐基、C1-4烷基芳基、取代的C1-4烷基芳基；五元或六元、飽和或不飽和、取代或未取代的碳環(huán)或雜環(huán)，包括但不限于 R10是H。
18.如權(quán)利要求12、16或17中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述AT2受體拮抗劑選自式(XI)代表的化合物或其藥學(xué)相容性鹽，式中R7選自式(XII)代表的取代的聯(lián)苯基甲撐 式中RH選自氫、-OH、-SH、-HN2、腈、CF3、鹵素(F、Cl、Br、I)、-NO2、C1-C4烷基氨基、C1-C4二烷基氨基，和RA選自C1-C10烷基、C3-C10烯基、C3-C10炔基、芳基、-(C1-C4烷基)芳基、雜環(huán)基、雜芳基、C3-C7-環(huán)烷基、C1-C4-全氟烷基、-OH、-SH、-HN2、腈、G1-C10-烷氧基、鹵代C1-4烷基、羥基C1-4烷基、C1-C10-烷硫基、-CF3、鹵素(F、Cl、Br、I)、-NO2、-CO2R23、-NH2、C2-C4烷基氨基、C1-C4二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、芳基C1-4烷基氨基、芳基C1-4二烷基氨基、芳氧基、芳基C1-4烷氧基、甲酰、C1-10烷基羰基和C1-10烷氧基羰基、-PO3H2、-CO2H、-CONHSO2R21、-CONHSO2NHR20、-NHCONHSO2R21、-NHSO2R21、-NHSO2NHCOR21、-SO2NHR20、-SO2NHCOR21、-SO2NHCONHR20、-SO2NHCO2R21、四唑基、-CHO、-CONH2、-NHCHO、-CO-(C1-C6全氟烷基)、-S(O)r-(C1-C6全氟烷基)，其中R20是H、C1-C5-烷基、芳基、-(C1-C4-烷基)-芳基、雜芳基；R21是芳基、C3-C7-環(huán)烷基、C1-C4-全氟烷基、C1-C4烷基，它們是用選自下組的取代基任選取代的芳基、雜芳基、-OH、-SH、C1-C4-烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷硫基、-CF3、鹵素、-NO2、-CO2R23、-NH2、C1-C4-烷基氨基、C1-C4-二烷基氨基、-PO3H2或雜芳基；R22選自C1-C6-烷基、C3-C6-環(huán)烷基、芳基、-(C1-C5-烷基)-芳基或雜芳基。
19.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述AT2受體拮抗劑是與AT2受體多肽有免疫反應(yīng)活性的抗原結(jié)合分子。
20.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述AT2受體拮抗劑是能抑制或降低AT2基因的表達(dá)產(chǎn)物的水平或功能活性的核酸分子。
21.如權(quán)利要求20所述的方法，其特征在于，所述AT2受體拮抗劑是反義分子。
22.如權(quán)利要求20所述的方法，其特征在于，所述AT2受體拮抗劑是核酶。
23.如權(quán)利要求20所述的方法，其特征在于，所述AT2受體拮抗劑是RNAi分子。
24.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，以包含藥學(xué)上可接受的運(yùn)載體或稀釋劑的組合物形式給予所述AT2受體拮抗劑。
25.如權(quán)利要求24所述的方法，其特征在于，通過(guò)選自注射、局部應(yīng)用或口服的途徑在一定時(shí)間內(nèi)給予一定量的所述組合物，給藥時(shí)間和給藥量應(yīng)能有效治療或預(yù)防神經(jīng)病。
26.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述神經(jīng)病是原發(fā)性神經(jīng)病。
27.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述神經(jīng)病是繼發(fā)性神經(jīng)病。
28.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述神經(jīng)病是周圍神經(jīng)病。
29.如權(quán)利要求28所述的方法，其特征在于，所述神經(jīng)病是由機(jī)械性神經(jīng)損傷或生化神經(jīng)損傷引起的神經(jīng)病。
30.如權(quán)利要求18所述的方法，其特征在于，所述神經(jīng)病是疼痛性糖尿病神經(jīng)病(PDN)或相關(guān)病癥。
31.一種預(yù)防或減輕對(duì)象的神經(jīng)性疼痛的方法，所述方法包括給予所述對(duì)象有效量的AT2受體拮抗劑，所述AT2受體拮抗劑是任選為包含藥學(xué)上可接受的運(yùn)載體和/或稀釋劑的組合物形式。
32.一種在患有神經(jīng)病或處于發(fā)生神經(jīng)病風(fēng)險(xiǎn)中的對(duì)象中產(chǎn)生鎮(zhèn)痛作用的方法，所述方法包括給予所述對(duì)象有效量的AT2受體拮抗劑，所述AT2受體拮抗劑是任選為包含藥學(xué)上可接受的運(yùn)載體和/或稀釋劑的組合物形式。
33.一種AT2受體拮抗劑用于制造在患有神經(jīng)病或處于發(fā)生神經(jīng)病風(fēng)險(xiǎn)中的對(duì)象中產(chǎn)生鎮(zhèn)痛作用的藥物中的應(yīng)用。
34.一種鑒定拮抗AT2受體的藥物的方法，所述方法包括將制備物與待測(cè)藥物接觸，其中所述制備物包含(i)包含至少對(duì)應(yīng)于AT2受體多肽的生物活性片段，或其變體或衍生物的氨基酸序列的多肽；或者(ii)包含調(diào)節(jié)編碼AT2受體多肽基因的表達(dá)的遺傳序列中至少一部分的多核苷酸，其中所述多核苷酸操作性連接于報(bào)道基因；和檢測(cè)AT2受體多肽的水平或功能活性或者報(bào)道基因的表達(dá)產(chǎn)物相對(duì)于在不存在待測(cè)藥物時(shí)的正?；騾⒈人交蚬δ芑钚越档停@種降低表明該藥物是AT2受體拮抗劑。
35.如權(quán)利要求34所述的方法，包括將表達(dá)AT2受體的第一細(xì)胞樣品與AT2受體配體相接觸，并測(cè)定標(biāo)記物；將表達(dá)AT2受體的第二細(xì)胞樣品與藥物和配體相接觸并測(cè)定標(biāo)記物；然后比較所述第一細(xì)胞樣品的標(biāo)記物與所述第二細(xì)胞樣品的標(biāo)記物。
36.如權(quán)利要求34所述的方法，包括測(cè)定一種或多種標(biāo)記物的水平，或與AT2受體活化或細(xì)胞增殖或分化相關(guān)的標(biāo)記物的組合。
37.如權(quán)利要求36所述的方法，其特征在于，所述標(biāo)記物選自Zfhep表達(dá)、氧化氮水平或氧化氮合酶水平。
38.如權(quán)利要求36所述的方法，其特征在于，所述標(biāo)記物選自Zfhep表達(dá)、氧化氮水平或氧化氮合酶水平，如果所述藥物能抑制或降低Zfhep表達(dá)或氧化氮水平或氧化氮合酶的水平或功能活性或細(xì)胞分化中的任何一種或多種，則所述藥物為測(cè)試陽(yáng)性。
39.一種生產(chǎn)在患有神經(jīng)病或處于發(fā)生神經(jīng)病的風(fēng)險(xiǎn)中的對(duì)象中產(chǎn)生鎮(zhèn)痛作用的藥物的方法，所述方法包括如權(quán)利要求34所述測(cè)試懷疑能拮抗AT2受體的藥物；并在測(cè)試為拮抗陽(yáng)性的基礎(chǔ)上合成所述藥物。
40.如權(quán)利要求39所述的方法，還包括衍生所述藥物，和任選地將所述衍生藥物與藥學(xué)上可接受的運(yùn)載體或稀釋劑配制在一起，以提高所述藥物治療或預(yù)防神經(jīng)病的功效。
全文摘要
本發(fā)明涉及用于預(yù)防和改善與神經(jīng)病相關(guān)的體征和癥狀的方法和藥物。更具體說(shuō)，本發(fā)明公開(kāi)了使用血管緊張素II受體2(AT
文檔編號(hào)A61P25/02GK101087619SQ200580044199
公開(kāi)日2007年12月12日 申請(qǐng)日期2005年12月23日 優(yōu)先權(quán)日2004年12月24日
發(fā)明者M·T·史密斯, B·D·韋斯 申請(qǐng)人:昆士蘭大學(xué)