專利名稱：治療肉瘤和前列腺癌的營(yíng)養(yǎng)性組合物的制作方法
治療肉瘤和前列腺癌的營(yíng)養(yǎng)性組合物
本發(fā)明涉及包含抗壞血酸化合物、L-賴氨酸化合物、L-脯氨酸化 合物和多酚化合物的組合物在制備治療纖維-或滑膜肉瘤和前列腺癌 的藥物組合物中的應(yīng)用。此外，本發(fā)明進(jìn)一步涉及一種治療方法，其 中將所述組合物施用于患纖維-或滑膜肉瘤和前列腺癌的患者。
美國(guó)癌癥協(xié)會(huì)估計(jì)，在2004年大約563， 700名美國(guó)人將死于癌癥， 并將才艮道約 1， 368， 030 個(gè)新的癌癥病例[American Cancer Society (2004)]。已經(jīng)改善了檢測(cè)工具，可以進(jìn)行各種癌癥的早期檢 測(cè)，隨后可以有較寬范圍的治療選擇，使其相關(guān)的死亡減少[Haese等 人，(2001)]。此外，當(dāng)診斷較早時(shí)，有利于存活率的升高；但是，在 晚期的癌癥和稱作軟組織肉瘤的高度轉(zhuǎn)移癌中，相關(guān)的預(yù)測(cè)一般是很 難的。大約90%的癌癥死亡是發(fā)生在轉(zhuǎn)移癌的患者中。例如，甚至當(dāng) 診斷出纖維肉瘤，并進(jìn)行了早期的手術(shù)治療時(shí)，轉(zhuǎn)移到身體遠(yuǎn)端部分 的癌癥的死亡率大于70%[Papagelopoulos等人，(2002)]。
盡管手術(shù)是早期癌癥的治療選擇，但是它的應(yīng)用一般僅限于集中 性的腫瘤，并且會(huì)伴隨很多可能的副作用。作為前列腺切除術(shù)的結(jié)果， 患者可能遭受神經(jīng)損害、陽(yáng)痿、失禁或直腸損傷[Bishoff等人，(1998)， Melman等人，(2004)， Talcott等人，(2003)]。防御癌癥的第二條 線是激素療法、化學(xué)療法和放射療法。盡管前列腺患者最初可以從激 素療法或雄激素去除療法中受益，但是至多幾年以后非-雄激素依賴性 或敏感的癌癥細(xì)胞的出現(xiàn)就會(huì)使該治療方式變得無(wú)效[Isaacs等人， (1999)]。此外，結(jié)果是患者可能發(fā)生陽(yáng)痿、熱潮紅、惡心、嘔吐、腹 瀉、肝并發(fā)癥、骨衰退、胸部生長(zhǎng)和/或壓痛[National Cancer Institute(2004)， Conde等人，(2003)]?；瘜W(xué)療法和放射療法一般 對(duì)晚期癌癥患者沒(méi)有益處，因?yàn)樗鼈冡槍?duì)的是破壞癌癥細(xì)胞，但是不 會(huì)作用于轉(zhuǎn)移灶。這些治療方法不僅不能有效地提供治療，而且會(huì)無(wú) 針對(duì)性地攻擊所有的細(xì)胞一導(dǎo)致細(xì)胞損害和身體的結(jié)締組織被破壞， 促進(jìn)了癌癥的轉(zhuǎn)移。這清楚地表明，當(dāng)前的治療方式限制了治療和預(yù) 防轉(zhuǎn)移癌，因此迫切需要新的安全和有效的治療途徑。
已經(jīng)報(bào)道了幾種營(yíng)養(yǎng)性化合物顯示出抗癌活性。已經(jīng)報(bào)道，抗壞
血酸對(duì)于惡性細(xì)胞系具有細(xì)胞毒性和抗轉(zhuǎn)移活性[Koh， Lee等人， (1998)， Roomi， House等人，(1998)， Naidu， Karl等人，(2003)]; 此外，凈艮道了低水平的抗壞血酸可以用于癌癥患者[Anthony and Schorah (1982) ， N畫(huà)z， Ortiz de Apodaca等人，(1995)， Kurbacher， Wagner等人，(1996)]。 ECGC是一種有效的抗癌劑，已經(jīng)報(bào)道了它對(duì) 于某些人癌癥細(xì)胞系具有生長(zhǎng)抑制作用[Valcic， Timmerman等人， (1996)， Mukhtar and Ahmed (2000) ， Yang， Liao等人，(1998)]。但 是，所觀察到的作用相當(dāng)?shù)娜?，因此，不適合以此為基礎(chǔ)作為快速生 長(zhǎng)和攻擊性癌癥的治療途徑。其他研究提示，在組織培養(yǎng)研究中，抗 壞血酸和EGCG與其他化合物一起對(duì)于數(shù)種癌癥細(xì)胞系的協(xié)同抗癌作 用大于單獨(dú)使用所述營(yíng)養(yǎng)素[Netke， Roomi等人，(2003)]。癌細(xì)胞形 成腫瘤，并經(jīng)各種基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs),通過(guò)降解細(xì)胞外基質(zhì)(ECM) 擴(kuò)散。已經(jīng)假定，營(yíng)養(yǎng)素例如賴氨酸和抗壞血酸可以作為ECM蛋白水 解的天然抑制劑，這樣，其就具有抑制腫瘤生長(zhǎng)和膨脹的潛力[Rath 和Pauling(1992)]。此外，提示通過(guò)抑制透明質(zhì)酸酶，抗壞血酸可以 通過(guò)防止腫瘤周圍的基質(zhì)降解而預(yù)防轉(zhuǎn)移[Cameron等人，(1979)]。
這清楚地表明，需要安全和有效的治療途徑來(lái)控制癌癥轉(zhuǎn)移的過(guò) 程，特別是攻擊性癌癥例如纖維-或滑膜肉瘤和前列腺癌。
因此，本發(fā)明的技術(shù)問(wèn)題必須視作是提供手段和方法來(lái)滿足上述 需要。
通過(guò)權(quán)利要求和下文表征的實(shí)施方案來(lái)解決該問(wèn)題。 因此，本發(fā)明涉及包含
(a) 抗壞血酸化合物，
(b) L-賴氨酸化合物，
(c) L-脯氨酸化合物，和(d)多酚化合物
的組合物在制備治療纖維-或滑膜肉瘤或前列腺癌的藥物組合物 中的應(yīng)用。
術(shù)語(yǔ)"組合物"包括上述涉及的營(yíng)養(yǎng)性化合物的液體和固體制劑 以及其凝膠。固體制劑可以制備成適當(dāng)?shù)男问剑ㄆ瑒?、膠嚢、粉 末、顆粒、茶制品等等。本領(lǐng)域公知如何制備本文涉及的所述液體、 凝膠樣和固體制劑。本文涉及的組合物可以根據(jù)本發(fā)明作為化合物的 混合物使用，或通過(guò)包含分離的成分的試劑盒來(lái)使用。各成分可以在 分開(kāi)的玻璃瓶中包裝于所述試劑盒中。該組合物也適合人或動(dòng)物使用。 優(yōu)選地，所述動(dòng)物是哺乳動(dòng)物，最優(yōu)選狗、貓或馬。
本發(fā)明涉及的氨基酸"脯氨酸"或"賴氨酸"優(yōu)選是L-氨基酸。 "脯氨酸"或"賴氨酸"也包括其羥基衍生物羥脯氨酸和羥賴氨酸及 其鹽。
術(shù)語(yǔ)"抗壞血酸"優(yōu)選是指抗壞血酸酯(ascorbate)、抗壞血酸 及其鹽。有時(shí)抗壞血酸化合物也稱作維生素C。
本發(fā)明使用的術(shù)語(yǔ)"多酚化合物"優(yōu)選是指綠茶植物的制品，包 含存在于綠茶中的多酚化合物。多酚化合物最高可以是綠茶的30%干 重。它們包括生物黃酮素(bioflavinoids)，例如黃烷醇、黃烷二醇、 黃酮和酚酸。黃垸醇代表綠茶中最豐富的多酚，通常稱作兒茶素。最 優(yōu)選地，所述兒茶素是EGCG、 EG、 ECG或EC。 EGCG是指(-)-表沒(méi)食子 兒茶精-3-沒(méi)食子酸酯、EC是指表兒茶素，是指(-)-表兒茶素，ECG 是指表兒茶素-3-沒(méi)食子酸酯，是指(-)-表兒茶素-3-沒(méi)食子酸酯，EGC 是指表沒(méi)食子兒茶精，是指(-)-表沒(méi)食子兒茶精。本領(lǐng)域公知如何獲 得這些制品。優(yōu)選地，以每天和每位患者200 mg到5000 mg的量^(吏用 多酚。
本發(fā)明的應(yīng)用中涉及的化合物可以以任意適當(dāng)?shù)谋壤蛄渴褂谩?本領(lǐng)域技術(shù)人員通過(guò)使用下文涉及的伴隨的實(shí)施例指定的測(cè)定法確定 該比例或量是否適當(dāng)。最優(yōu)選地，本發(fā)明涉及的化合物提供的每日劑 量是維生素C (例如抗壞血酸和抗壞血酸Mg、 Ca棕櫚酸酯)700 mg;
L-賴氨酸1000 mg; L-脯氨酸750 mg; L-精氨酸500 mg; N-乙酰半胱 氨酸200 mg;標(biāo)準(zhǔn)化的綠茶提取物(80%多酚)1000 mg;硒30 mg; 銅2 mg; 錳lmg。
本發(fā)明所施用的藥物組合物包括藥學(xué)可接受的栽體、稀釋劑或賦 形劑。本發(fā)明中使用的組合物可以通過(guò)本領(lǐng)域已知的方法來(lái)制備。代 表性的成分可以與常規(guī)的賦形劑、稀釋劑或載體配制在一起，形成片 劑、膠嚢、混懸劑、粉末等等，賦形劑、稀釋劑和載體的例子包括 i)填充劑和混合劑例如淀粉、糖、甘露醇和硅的衍生物；ii)粘合劑 例如羧甲基纖維素和其他纖維素衍生物、海藻酸鹽、明膠和聚乙烯吡 咯烷酮；iii)保濕劑例如甘油；崩解劑例如碳酸4丐和碳酸氫鈉；防止 溶解的試劑例如石蠟；iv)促進(jìn)吸收劑例如季胺類化合物；v)表面活 性劑例如乙酰醇和單硬脂酸甘油酯；v)吸附載體例如高冷土和膨潤(rùn) 土；和vi)潤(rùn)滑劑例如滑石、硬脂酸鈣和鎂及固體聚乙二醇。該組合 物也可以配制成常規(guī)口服的酏劑或溶液，或適合胃腸外施用例如肌內(nèi)、 皮下或靜脈途徑的溶液。理想地，該制劑是丸劑、片劑、膠嚢、錠劑、 液體或上述的類似劑型。該組合物適合配制成持續(xù)釋放的劑型等等。
本文使用的術(shù)語(yǔ)"治療"是指減少、抑制、減弱或治療伴隨著本 發(fā)明所涉及的病理性情況的癥狀。通過(guò)監(jiān)測(cè)所述病理性情況伴隨的癥 狀，該治療對(duì)于臨床醫(yī)生變的顯而易見(jiàn)。癥狀在標(biāo)準(zhǔn)教科書(shū)例如 Stedman或Pschyrembel中進(jìn)行了詳述。治療優(yōu)選是指顯著地減少、 抑制、減弱或治療。通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)的標(biāo)準(zhǔn)方法，例如Student t-檢驗(yàn)、 卡方檢驗(yàn)等等可以確定顯著性。術(shù)語(yǔ)"纖維-或滑膜肉瘤"是指在結(jié)締 組織和滑膜中出現(xiàn)的間質(zhì)細(xì)胞源性的癌癥類型。術(shù)語(yǔ)"前列腺癌"是 指前列腺發(fā)生的所有癌癥類型。所述疾病或病癥伴隨的癥狀是本領(lǐng)域 公知的，并在醫(yī)學(xué)教科書(shū)例如Stedman或Pschyrembel中進(jìn)行了詳述。 因此，臨床醫(yī)生可以無(wú)需費(fèi)力確定患者是否具有那些癥狀。術(shù)語(yǔ)"預(yù) 防"是指也可以施用所述營(yíng)養(yǎng)性組合物，以避免發(fā)生上述疾病。
在本發(fā)明的研究中，研究了在無(wú)胸腺的棵鼠中，包含賴氨酸、脯 氨酸、精氨酸、抗壞血酸和表沒(méi)食子兒茶精沒(méi)食子酸酯的該組合物，
有時(shí)也稱作營(yíng)養(yǎng)性混合物(NS)對(duì)人癌異種移植物的抑制作用。在分離 一周后，用3xl(T乳腺癌細(xì)胞MBA-MD-231接種5-6周大的雌性小鼠(I 組)；將雄性小鼠分為5組，并用3xl(^癌細(xì)胞皮下接種II組，前 列腺癌細(xì)胞PC-3; III組結(jié)腸癌細(xì)胞HCT 116; IV組，黑色素瘤細(xì)胞 A2058; V組，纖維肉瘤HT 1080; VI組，滑膜肉瘤Hs 701 T。在注 射后，將每組隨機(jī)分成2個(gè)亞組；IA-VIA組用普通膳食喂食，IB-VIB 組用含0. 5°/。的營(yíng)養(yǎng)性混合物的普通膳食喂食。(每個(gè)亞組包括6只小 鼠)。4周后，處死小鼠，將腫瘤分離，稱重，進(jìn)行組織學(xué)處理。令 人驚奇地，結(jié)果表明，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的協(xié)同作用押制了棵鼠腫瘤的生長(zhǎng)并 使其尺寸減小特別是強(qiáng)烈地將前列腺癌減小了 53%，纖維肉瘤減小 了 5.9%,滑膜肉瘤減小了 44%,而乳腺癌的減小強(qiáng)度較小(27%,未顯 示數(shù)據(jù))。此外，組織學(xué)檢查顯示，營(yíng)養(yǎng)性混合物降低了分裂指數(shù)。 在棵鼠中，該營(yíng)養(yǎng)性混合物強(qiáng)烈地抑制了腫瘤的生長(zhǎng)，而沒(méi)有任何副 作用，提示它是有希望的抗癌劑。
由于本發(fā)明，可以治療肉瘤例如纖維肉瘤和滑膜肉瘤和前列腺癌， 而沒(méi)有常規(guī)療法例如手術(shù)和/或放射療法的有害副作用。
案的各種變形.
在本發(fā)明的應(yīng)用的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述抗壞血酸化合物選 自抗壞血酸、藥學(xué)可接受的抗壞血酸鹽、抗壞血酸酯，更優(yōu)選抗壞血 酸棕櫚酸酯，和/或上述化合物的混合物。更優(yōu)選地，所述藥學(xué)可接受 的抗壞血酸鹽選自抗壞血酸鉤鹽和抗壞血酸鎂鹽。在根據(jù)本發(fā)明的組 合物的制備中使用的化合物的適當(dāng)量在W0 03/057201 A2中詳細(xì)地公 開(kāi)，通過(guò)參考引入本文。優(yōu)選地，該抗壞血酸化合物是量為25 mg到 5000 mg的抗壞血酸，和/或相同量的抗壞血酸鉤和/或抗壞血酸鎂和/ 或抗壞血酸椋櫚酸酯。所有的量是根據(jù)每天和每位患者計(jì)算的。
在本發(fā)明的應(yīng)用的一個(gè)進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述L-賴氨酸 化合物選自鹽酸L-賴氨酸、L-賴氨酸和藥學(xué)可接受的L-賴氨酸鹽。
曰月的紐^物的岳l備屮估用的化^物的i舌當(dāng)量在W003/057201 A2中詳細(xì)地公開(kāi)，通過(guò)參考引入本文。L-賴氨酸化合物優(yōu) 選也可以是上述組的物質(zhì)的至少兩種的混合物。優(yōu)選地，L-賴氨酸化 合物是每日和每位患者50 mg到5000 mg的量的L-賴氨酸。
在本發(fā)明的應(yīng)用的另一個(gè)進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述L-脯氨 酸化合物選自鹽酸L-脯氨酸、L-脯氨酸和藥學(xué)可接受的L-脯氨酸鹽。
在根據(jù)本發(fā)明的組合物的制備中使用的化合物的適當(dāng)量在W0 03/057201 A2中詳細(xì)地公開(kāi)，通過(guò)參考引入本文。L-脯氨酸化合物優(yōu) 選也可以是上述組的物質(zhì)的至少兩種的混合物。優(yōu)選地，L-脯氨酸化 合物是每日和每位患者25 mg到3000 mg的量的L-脯氨酸。
在本發(fā)明的應(yīng)用的另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述組合物進(jìn)一步 包含微量元素，選自硒、錳、鎂、4丐和銅。
在根據(jù)本發(fā)明的組合物的制備中使用的化合物的適當(dāng)量在WO 03/057201 A2中詳細(xì)地公開(kāi)，通過(guò)參考引入本文。該組合物優(yōu)選包含至 少兩種，至少三種或更多的上述組的微量元素。優(yōu)選地，微量元素可以 按每天和每位患者的下列量一起，分別或任意組合使用硒lyg到200 jig; 4同20 jng到9000 m g;錳50 |i g到10000 m g; 4丐300 mg 到600 mg; 4美300 mg到600 mg。
在本發(fā)明的應(yīng)用的一個(gè)進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述組合物進(jìn) 一步包含L-精氨酸化合物。優(yōu)選地，所述L-精氨酸化合物選自鹽酸 L-精氨酸、L-精氨酸和藥學(xué)可接受的L-精氨酸鹽。
在根據(jù)本發(fā)明的組合物的制備中使用的化合物的適當(dāng)量在WO 03/057201 A2中詳細(xì)地公開(kāi)，通過(guò)參考引入本文。L-精氨酸化合物優(yōu) 選也可以是上述組的物質(zhì)的至少兩種的混合物。優(yōu)選地，L-精氨酸化 合物是每日和每位患者50 mg到3000 mg的量的L-精氨酸。
在本發(fā)明的應(yīng)用的另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，該組合物進(jìn)一步包 含N-乙酰半胱氨酸。
本文使用的"N-乙酰半胱氨酸"包含半胱氨酸或胱氨酸(半胱氨 酸的二聚體)及其半胱氨酸鹽。在根據(jù)本發(fā)明的組合物的制備中使用 的化合物的適當(dāng)量在WO 03/057201 A2中公開(kāi)，通過(guò)參考引入本文。
優(yōu)選地，N-乙酰半胱氨酸是每日和每位患者10 mg到1500 mg的量。 在本發(fā)明的應(yīng)用的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述組合物是以口服、
胃腸外、皮下、動(dòng)脈內(nèi)或靜脈內(nèi)的形式施用。
本發(fā)明也涉及一種在患者中治療纖維-或滑膜肉瘤或前列腺癌的
方法，包括給纖維-或滑膜肉瘤或前列腺癌的患者施用治療有效量的上
述定義的組合物的步驟。
本領(lǐng)與技術(shù)人員公知如何將該組合物施用于患者。特別優(yōu)選的技
術(shù)在W0 03/057201 A2中詳細(xì)地公開(kāi)，通過(guò)參考引入本文。此外，本
發(fā)明的應(yīng)用的所有實(shí)施方案可以用于上述治療纖維-或滑膜肉瘤或前
列腺癌的方法的所有變形。
在該方法一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述患者是人。 在該方法一個(gè)進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，該組合物是口服、胃腸
外、胃腸外、皮下、動(dòng)脈內(nèi)或靜脈內(nèi)施用。
參考文獻(xiàn)的內(nèi)容通過(guò)參考引入本文。
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附圖表示的是
附

圖1:在用營(yíng)養(yǎng)性混合物(NS)治療4周后，在棵鼠中測(cè)定腫瘤
的大小和重量人乳腺癌細(xì)胞MDA-231(1A)、前列腺癌細(xì)胞PC-3 (IB)、 結(jié)腸癌細(xì)胞HCT 116(1C)、黑色素瘤細(xì)胞A2058 (1D)、纖維肉瘤HT 1 080 (1E)和滑膜肉瘤Hs 701. T(F)。每組的結(jié)果表示為平均值± SE。
附圖2:營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的協(xié)同作用對(duì)于雄性棵鼠負(fù)載的腫瘤，即結(jié)腸 癌細(xì)胞HCT 116、黑色素瘤細(xì)胞A2058和前列腺癌PC-3(2A)的作用， 及0. 5y。的營(yíng)養(yǎng)性制劑(NS)對(duì)于棵鼠(2B)中前列腺癌細(xì)胞PC-3的腫瘤 生長(zhǎng)(腫瘤值)的作用。
附圖3:在施用0. 5。/。的營(yíng)養(yǎng)性混合物(NS)4周后的組織學(xué)檢查表 明，人乳腺癌細(xì)胞MDA-231(3A-對(duì)照，3B -0. 5% NS)、結(jié)腸癌細(xì)胞HCT 116(3C-對(duì)照，3D-0. 5%NS)、黑色素瘤細(xì)胞A2058 (3E-對(duì)照，3F-O. 5% NS)和前列腺癌細(xì)胞PC-3(3G -對(duì)照，3H -0.5% NS)的分裂指數(shù)降低。
將通過(guò)下列的實(shí)施方案解釋本發(fā)明。但是，這些實(shí)施例并不是用 于限制本發(fā)明的范圍。
實(shí)施例在棵鼠中不同癌癥類型的治療
在該研究中使用的所有癌癥林是得自American Type Culture Collect ion (Rockvi lie, MD)。這些包括乳腺癌(MDA-MB-231)、前 列腺癌(PC-3)、結(jié)腸癌(HCT 116)、黑色素瘤(A2058)、纖維肉瘤 (HT-1080)和滑膜肉瘤(HTB-93)。
將黑色素瘤和滑膜肉瘤培養(yǎng)物保持在Dulbecco改性Eagle培養(yǎng) 基中，將PC-3保持在Ham F12培養(yǎng)基(F12K)中，將結(jié)腸癌保持在McCoy 培養(yǎng)基中，將HT-1080保持在MEM中，將MBA-MD-231保持在Leibovi tz 培養(yǎng)基中。所有的培養(yǎng)基中都補(bǔ)充10%胎牛血清、100 U/ml青霉素和 100 pg/ml鏈霉素。所使用的培養(yǎng)基和血清得自ATCC,抗生素(青霉 素和鏈霉素)是得自Gibco BRL， Long Island, NY。在接近融合時(shí)， 通過(guò)胰蛋白酶作用分離所培養(yǎng)的細(xì)胞，用PBS洗滌，稀釋并乳化，使 在0. 2 ml PBS和0. 1 ml Matrigel(BD Bioscience, Bedford, MA) 中細(xì)胞濃度為3 X1(T細(xì)胞，以進(jìn)行培養(yǎng)。
到來(lái)時(shí)約6周大的雄性和雌性無(wú)胸腺棵鼠(NCr-nu/nu)購(gòu)自 Simonsen Laboratories, Gilroy， CA,將其在無(wú)病原體的環(huán)境中按 照12小時(shí)光亮、12小時(shí)黑暗的方案在微型絕緣體籠中保持1周。根 據(jù)制度性的指導(dǎo)方針來(lái)護(hù)理所有動(dòng)物，以進(jìn)行實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的護(hù)理和使用。
在圏養(yǎng)1周后，將小鼠分成下列的組雌性棵鼠在I組，雄性小 鼠分為5個(gè)組，II-VI組，每組包含6只小鼠。用乙醇清潔注射位 點(diǎn)右側(cè)腹部，并用3xl(T癌細(xì)胞的0. 2 ml的PBS和0. 1 ml的Matrigel 接種II組前列腺癌細(xì)胞PC-3; III組結(jié)腸癌細(xì)胞HCT 116; IV組， 黑色素瘤細(xì)胞A2058; V組，纖維肉瘤HT 1080; VI組，滑膜肉瘤Hs 701. T。用乳腺癌細(xì)胞MBA-MD-231接種雌性小鼠(I組)。在注射后， 將每組隨機(jī)分為兩個(gè)亞組，A和B。每個(gè)亞組包括6只小鼠。從第一天 起，IA-VIA組用普通膳食喂食，IB-VIB組用補(bǔ)充了 0. 5%的營(yíng)養(yǎng)性制
劑(NS)的普通膳食喂食。每3天用測(cè)徑器測(cè)定腫瘤的長(zhǎng)度和寬度來(lái)監(jiān) 測(cè)胂瘤的生長(zhǎng)。用下列等式計(jì)算腫瘤體積體積(1111113)=長(zhǎng)度x寬度2 x1/2。 4周后，處死小鼠，將腫瘤分離，稱重，固定于10y。(v/v)緩沖 的福爾馬林中，并進(jìn)行組織學(xué)處理。
結(jié)果表明，在IB-VIB組(補(bǔ)充了 0. 5%的營(yíng)養(yǎng)性混合物的棵鼠) 中，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的協(xié)同作用抑制了棵鼠腫瘤的生長(zhǎng)并使其尺寸減小。在
研究的所有癌癥林中，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的協(xié)同作用顯著地減小了腫瘤的體積 乳腺癌細(xì)胞MBA-MD-231減小了 27%(p=. 0082)，前列腺癌細(xì)胞PC-3
減小了 53°/"p=. 0001)，結(jié)腸癌細(xì)胞HCT 116減小了 63%(p=. 0002)， 黑色素瘤細(xì)胞A2058減小了 57%(p=. 0001)，纖維肉瘤HT 1080減小 了 59%(p=. OOOl)和滑膜肉瘤Hs 701. T.減小了 44°/"p=. 0099)(見(jiàn) 附圖1A-1E)。組織學(xué)檢查顯示，用營(yíng)養(yǎng)性混合物治療降低了分裂指數(shù)。 在4周的治療時(shí)間里，用營(yíng)養(yǎng)性制劑治療顯著地降低了所研究的具有 人癌細(xì)胞異種移植物(前列腺、黑色素瘤和結(jié)腸)的棵鼠負(fù)載的平均腫 瘤大小結(jié)腸減小了 46% (p=. 0005);黑色素瘤減小了 32% (p=. 0015); 前列腺減小了 47°/"p=. 0001)。見(jiàn)附圖2A。在補(bǔ)充了營(yíng)養(yǎng)性制劑的棵 鼠中，在4周的治療期后前列腺腫瘤生長(zhǎng)與4. 5周的對(duì)照組的生長(zhǎng)相 比，降低了 36% (p= .002)(見(jiàn)附圖2B)。
所使用的所有化學(xué)品都購(gòu)自Sigma (St. Louis， Mo)，都是高質(zhì)量 的。營(yíng)養(yǎng)性混合物的母液(總重量4.4Gm)由下列物質(zhì)組成維生素C(即 抗壞血酸及抗壞血酸鎂、釣和棕櫚酸酯)7GGmg; L-賴氨酸1QQ0 mg; L-脯氨酸750 mg; L-精氨酸500 mg; N-乙酰半胱氨酸200 mg;標(biāo) 準(zhǔn)化的綠茶提取物(80°/。多酚)1000 mg;硒30 mg;銅2 mg;錳lmg。各 組的統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果表示為平均值士SE。通過(guò)獨(dú)立的樣本"t"檢驗(yàn)來(lái)分析 數(shù)據(jù)。
權(quán)利要求
1.包含(a)抗壞血酸化合物，(b)L-賴氨酸化合物，(c)L-脯氨酸化合物，和(d)多酚化合物的組合物在制備治療纖維-或滑膜肉瘤或前列腺癌的藥物組合物中的應(yīng)用。
2. 權(quán)利要求l的應(yīng)用，其中所述抗壞血酸化合物選自抗壞血酸、 藥學(xué)可接受的抗壞血酸鹽、抗壞血酸酯和/或上述化合物的混合物。
3. 權(quán)利要求2的應(yīng)用，其中所述藥學(xué)可接受的抗壞血酸鹽選自抗 壞血酸鈞鹽和抗壞血酸鎂鹽。
4. 權(quán)利要求l的應(yīng)用，其中所述抗壞血酸化合物是抗壞血酸酯。
5. 權(quán)利要求4的應(yīng)用，其中所述抗壞血酸酯是抗壞血酸棕櫚酸酯。
6. 權(quán)利要求1到5任一項(xiàng)的應(yīng)用，其中所述L-賴氨酸化合物選自 鹽酸L-賴氨酸、L-賴氨酸和藥學(xué)可接受的L-賴氨酸鹽。
7. 權(quán)利要求1到6任一項(xiàng)的應(yīng)用，其中所述L-脯氨酸化合物選自 鹽酸L-脯氨酸、L-脯氨酸和藥學(xué)可接受的L-脯氨酸鹽。
8. 權(quán)利要求1到7任一項(xiàng)的應(yīng)用，其中所述組合物進(jìn)一步包含微 量元素，選自硒、錳、鎂、鉤和銅。
9. 權(quán)利要求1到8任一項(xiàng)的應(yīng)用，其中所述組合物進(jìn)一步包含L-精氨酸化合物。
10. 權(quán)利要求9的應(yīng)用，其中所述L-精氨酸化合物選自鹽酸L-精 氨酸、L-精氨酸和藥學(xué)可接受的L-精氨酸鹽。
11. 權(quán)利要求1到10任一項(xiàng)的應(yīng)用，其中所述組合物進(jìn)一步包含 N-乙酰半胱氨酸。
12. 權(quán)利要求1到11任一項(xiàng)的應(yīng)用，其中所述組合物是以口服、 胃腸外、皮下、動(dòng)脈內(nèi)或靜脈內(nèi)的形式施用。
13. —種在患者中治療纖維-或滑膜肉瘤或前列腺癌的方法，包括 給纖維-或滑膜肉瘤或前列腺癌的患者施用治療有效量的權(quán)利要求1到 12任一項(xiàng)定義的組合物的步驟。
14. 權(quán)利要求13的方法，其中所述患者是人。
15. 權(quán)利要求13或14的方法，其中該組合物是口服、胃腸外、胃腸 外、皮下、動(dòng)脈內(nèi)或靜脈內(nèi)施用。
全文摘要
本發(fā)明涉及包含抗壞血酸化合物、L-賴氨酸化合物、L-脯氨酸化合物和多酚化合物的組合物在制備治療纖維-或滑膜肉瘤和前列腺癌的藥物組合物中的應(yīng)用。此外，本發(fā)明進(jìn)一步涉及一種治療方法，其中將所述組合物施用于患纖維-或滑膜肉瘤和前列腺癌的患者。
文檔編號(hào)A61K31/375GK101180049SQ200580049840
公開(kāi)日2008年5月14日 申請(qǐng)日期2005年4月11日 優(yōu)先權(quán)日2005年4月11日
發(fā)明者M·瓦希德·魯米, 亞歷山德拉·涅季維茨基, 瓦迪姆·伊瓦諾夫, 馬蒂亞斯·拉特 申請(qǐng)人:馬蒂亞斯·拉特