專利名稱：一種銀杏內(nèi)酯b粉針劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種由中藥銀杏葉提取所得到的藥物單體銀杏內(nèi)酯B制成的銀杏內(nèi)酯B粉針劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
血小板活化因子(PAF)是一種重要的炎癥介質(zhì)，也是多種疾病發(fā)病的介質(zhì)之一。病理研究表明PAF在過(guò)敏、潰瘍、哮喘、血栓形成、炎癥、器官移植排斥、內(nèi)毒素導(dǎo)致的休克等過(guò)程中起著重要作用。銀杏總內(nèi)酯是從銀杏葉內(nèi)提取的有效成分銀杏內(nèi)酯A、B、C及白果內(nèi)酯的組合物，是一類較強(qiáng)的植物提取物血小板活化因子拮抗劑。研究表明，其中，銀杏內(nèi)酯B是活性最強(qiáng)的血小板活化因子拮抗劑。
銀杏內(nèi)酯B的結(jié)構(gòu)式為 銀杏內(nèi)酯B銀杏內(nèi)酯B難溶于水，不僅使其不易被分離提純，而且將其制成注射劑等劑型也比較困難，主要體現(xiàn)在在吸收效果及生物利用率、產(chǎn)品的穩(wěn)定性上難以獲得理想的實(shí)用效果。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)銀杏葉類產(chǎn)品進(jìn)行了許多研究并有臨床使用，如德國(guó)的Ginaton、法國(guó)的Tanakan，中國(guó)藥典2005版中藥部亦收載了銀杏葉、銀杏提取物及銀杏葉片等品種，但是均為含有混合的銀杏內(nèi)酯A、B、C及白果內(nèi)酯，目前尚未有單一的銀杏內(nèi)酯B產(chǎn)品上市，國(guó)內(nèi)也沒(méi)有銀杏內(nèi)酯B產(chǎn)品進(jìn)入臨床研究階段。
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)銀杏內(nèi)酯B開(kāi)環(huán)成鹽后溶解性確實(shí)增加，有利于制成水溶性制劑。在中國(guó)專利文獻(xiàn)CN1472214A中就公開(kāi)了這樣一種方法，是利用含氮有機(jī)物與銀杏內(nèi)酯B復(fù)合成銀杏內(nèi)酯B復(fù)合物，其中含氮有機(jī)物以精氨酸、賴氨酸或葡甲胺為佳。采用這種方法雖然能夠解決銀杏內(nèi)酯B的水溶性問(wèn)題，但是藥物的穩(wěn)定性下降，例如銀杏內(nèi)酯B與葡甲胺(1∶0.8～1.2)開(kāi)環(huán)成鹽的樣品對(duì)熱敏感，較難在常溫下保存，需要低溫(10℃以下)保存才能夠維持藥品的穩(wěn)定性；并且采用這方法生產(chǎn)工藝比較復(fù)雜，且因含氮有機(jī)物的價(jià)格較高的原因也增加了藥品的生產(chǎn)成本。上述技術(shù)問(wèn)題均限制了這種方法在現(xiàn)實(shí)中的應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種新型的銀杏內(nèi)酯B粉針劑，在解決銀杏內(nèi)酯B的水溶性問(wèn)題時(shí)，又能夠解決藥物的穩(wěn)定性問(wèn)題。
本發(fā)明的另一個(gè)目的還在于提供一種所述銀杏內(nèi)酯B粉針劑的制備方法，這種方法工藝簡(jiǎn)單，生產(chǎn)成本低。
為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的第一個(gè)目的，采用如下技術(shù)方案一種銀杏內(nèi)酯B粉針劑，是由主藥和助溶劑及賦形劑制成的粉針劑，所述主藥的基本組成為銀杏內(nèi)酯B，助溶劑為碳酸鈉、丙二醇，按重量計(jì)其重量比是銀杏內(nèi)酯B∶碳酸鈉∶丙二醇為1∶1～2∶1～10。
優(yōu)選比例為銀杏內(nèi)酯B∶碳酸鈉∶丙二醇為1∶1∶3針對(duì)銀杏內(nèi)酯B的理化性能及劑型，賦形劑可以為右旋糖酐40、乳糖、甘露醇中的一種或幾種。
由于銀杏內(nèi)酯B提純比較困難，獲得純的銀杏內(nèi)酯B單體成本很高，因此所述的主藥中銀杏內(nèi)酯B的重量含量要求是大于90％，另外還可以含有少量的銀杏內(nèi)酯A。
本發(fā)明提供的這種銀杏內(nèi)酯B粉針劑的制備方法為將銀杏內(nèi)酯B原料與碳酸鈉、丙二醇按重量比為1∶(1～2)∶(1～10)的比例混合均勻，加注射用水溶解，往該溶液中加入占總重量比為50％～80％的賦形劑，使之溶解，用截流分子量為0.8～3萬(wàn)Dolton的膜超濾，除去熱源，最后用濾膜過(guò)濾除菌，分裝，預(yù)凍與干燥，軋蓋，得銀杏內(nèi)酯B粉針劑成品。
所述的賦形劑可以為右旋糖酐40、乳糖、甘露醇中的一中或幾種。
所述的過(guò)濾除菌過(guò)程中的濾膜可以為0.22μm的濾膜。
本發(fā)明利用少量的碳酸鈉成鹽和丙二醇增溶，解決了銀杏內(nèi)酯B難溶問(wèn)題和穩(wěn)定性問(wèn)題，使得本發(fā)明所提供的銀杏內(nèi)酯B粉針劑具有較好水溶性和穩(wěn)定性，藥品有效成分可直接進(jìn)入血液，生物利用度高。這種粉針劑具有抗過(guò)敏、抗炎、抗休克的特性，可抑制血小板聚集，減少血栓形成，對(duì)治療心腦血管系統(tǒng)疾病等提供一種較好的藥物制劑。本發(fā)明所提供的銀杏內(nèi)酯B粉針劑的組成及制備方法工藝簡(jiǎn)單，不使用有毒有害的有機(jī)溶劑，使用超濾法過(guò)濾減少藥品被吸附的損失，工藝成本低，另外所用原料碳酸鈉為12元/kg，丙二醇為8元/kg，相對(duì)于600元/kg的葡甲胺，可以降低產(chǎn)品成本。
對(duì)于本發(fā)明的銀杏內(nèi)酯B粉針劑的水溶性和穩(wěn)定性，發(fā)明人進(jìn)行了下述試驗(yàn)一、溶解度試驗(yàn)本發(fā)明的銀杏內(nèi)酯B粉針劑與銀杏內(nèi)酯B溶解于注射用水的溶解性能對(duì)比數(shù)據(jù)見(jiàn)表1表1本發(fā)明的銀杏內(nèi)酯B溶液澄清度檢測(cè)對(duì)比結(jié)果

表1表明，本發(fā)明的銀杏內(nèi)酯B粉針劑溶解度好，符合注射劑要求。
二、穩(wěn)定性考察穩(wěn)定性試驗(yàn)的目的是考察藥物在溫度、濕度、光線的影響下隨時(shí)間變化的規(guī)律，為藥品的生產(chǎn)、包裝、貯存、運(yùn)輸條件提供科學(xué)依據(jù)，同時(shí)通過(guò)試驗(yàn)建立藥品的有效期。由于本發(fā)明的銀杏內(nèi)酯B粉針劑中所含有成分明確，純度較高，故參考ICH中有關(guān)要求進(jìn)行試驗(yàn)，本發(fā)明方法產(chǎn)品的穩(wěn)定性試驗(yàn)均參照質(zhì)量研究部分的試驗(yàn)條件。
試驗(yàn)所用銀杏內(nèi)酯B粉針劑試樣的主要成分為銀杏內(nèi)酯B∶碳酸鈉∶丙二醇為1∶1∶3。
1、影響因素實(shí)驗(yàn)1)、高溫試驗(yàn)取本發(fā)明的銀杏內(nèi)酯B粉針劑，于60℃的環(huán)境中放置10天，分別于第5天和第10天取樣，按考察項(xiàng)目進(jìn)行檢測(cè)，與0天測(cè)定結(jié)果比較，本品的性狀變?yōu)辄S色塊狀物，溶液的顏色及含量均有所變化，所以改為高溫40℃條件下試驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表2表2高溫40℃試驗(yàn)測(cè)定結(jié)果

銀杏內(nèi)酯B粉針劑經(jīng)高溫40℃考察10天，性狀有所改變、含量略有下降，應(yīng)陰涼處保存；pH值、澄明度、有關(guān)物質(zhì)與0天相比無(wú)明顯變化。
2)、強(qiáng)光照射試驗(yàn)取本品，置于可調(diào)光照箱中，在照度為4500Lx±500Lx的條件下放置10天，分別于第5天和第10天取樣，按上述考察項(xiàng)目進(jìn)行檢測(cè)，與0天測(cè)定結(jié)果比較，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)下表3。
表3強(qiáng)光試驗(yàn)測(cè)定結(jié)果

銀杏內(nèi)酯B粉針劑經(jīng)強(qiáng)光照射考察10天，本品的含量略有下降，其他各項(xiàng)考察指標(biāo)無(wú)明顯變化。
3)、高濕試驗(yàn)取本品適量于敞口稱量瓶中，置相對(duì)濕度為92.5％的恒濕密閉容器中放置10天，分別于第5天和第10天取樣，按上述考察項(xiàng)目進(jìn)行檢測(cè)，與0天測(cè)定結(jié)果比較，測(cè)定結(jié)果下表4。
表4高濕試驗(yàn)測(cè)定結(jié)果

銀杏內(nèi)酯B粉針劑經(jīng)高濕試驗(yàn)考察10天，本品的含量略有下降，其他各項(xiàng)考察指標(biāo)基本穩(wěn)定。
2、加速試驗(yàn)加速試驗(yàn)的目的是通過(guò)使用超常的貯存條件加速藥物的化學(xué)降解或物理變化，探討藥物的穩(wěn)定性，為藥品審評(píng)、包裝、運(yùn)輸及貯存提供必要的資料，其試驗(yàn)方法如下取本品三批，按市售所需條件包裝，于溫度為40±2℃、相對(duì)濕度為75±5％的條件下考察，外觀性狀變?yōu)榈S色疏松塊狀物、含量有所下降，所以將考察條件改為溫度為25±2℃、相對(duì)濕度為60±10％放置6個(gè)月，分別于0、1、2、3、6月末取樣一次，按重點(diǎn)考察項(xiàng)目進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)下表5。
表5銀杏內(nèi)酯B粉針劑加速試驗(yàn)測(cè)定結(jié)果


試驗(yàn)表明三批樣品的含量稍有降低，其他考察項(xiàng)目均無(wú)明顯變化。
3、長(zhǎng)期試驗(yàn)取本品在溫度為6℃±2℃、相對(duì)濕度RH60％±10％的條件下放置12個(gè)月，在試驗(yàn)期間分別于第3個(gè)月、6個(gè)月、9個(gè)月、12個(gè)月末取樣進(jìn)行檢測(cè)(12個(gè)月以后繼續(xù)考察，按時(shí)取樣進(jìn)行檢測(cè)，以確定本品的最終有效期)，與0月數(shù)據(jù)比較。試驗(yàn)表明三批樣品的外觀性狀、細(xì)菌內(nèi)毒素、可見(jiàn)異物、pH值、均無(wú)明顯變化，含量略有下降。測(cè)定結(jié)果見(jiàn)下表5。
表5銀杏內(nèi)酯B粉針劑三批樣品長(zhǎng)期試驗(yàn)測(cè)定結(jié)果

4、考察結(jié)論試驗(yàn)結(jié)果表明，按市售包裝的銀杏內(nèi)酯B粉針劑在高溫度影響下，藥品的性狀會(huì)發(fā)生改變，含量有所下降，光線影響的條件下含量略有下降；于加速試驗(yàn)條件(溫度為40±2℃、相對(duì)濕度為75±5％)考察，外觀性狀變?yōu)榈S色疏松塊狀物、含量有所下降，所以將考察條件改為溫度25℃±2℃、相對(duì)濕度RH60％±10％考察了6個(gè)月，于長(zhǎng)期試驗(yàn)條件(6℃±2℃、相對(duì)濕度RH60％±10％)下考察了12個(gè)月，含量下降但仍在合格范圍內(nèi)，其它各項(xiàng)指標(biāo)均無(wú)明顯變化；有效期暫定為2年。長(zhǎng)期試驗(yàn)仍繼續(xù)進(jìn)行，結(jié)果將按有效期確定的統(tǒng)計(jì)分析方法來(lái)確定本品的最終有效期。
對(duì)銀杏內(nèi)酯B∶碳酸鈉∶丙二醇為1∶2∶6，以及為1∶2∶10進(jìn)行了相同條件下的試驗(yàn)，其含量下降仍在合格范圍內(nèi)，但由于碳酸鈉及丙二醇用量增加會(huì)使產(chǎn)品成本增加。
綜上所述，本品貯藏條件為密閉，避光，置陰涼處(20℃以下)；有效期暫定為二年。
藥效學(xué)試驗(yàn)試驗(yàn)所用銀杏內(nèi)酯B粉針劑試樣的主要成分為銀杏內(nèi)酯B∶碳酸鈉∶丙二醇為1∶1∶3。
1、銀杏內(nèi)酯B粉針劑對(duì)大鼠局灶性腦缺血的影響取雄性大鼠70只，體重180-220g，隨機(jī)分為7組，分別為假手術(shù)對(duì)照組；腦缺血模型組；銀杏內(nèi)酯B粉針劑小劑量組9mg/kg；銀杏內(nèi)酯B粉針劑中劑量組18mg/kg；銀杏內(nèi)酯B粉針劑大劑量組36mg/kg(以上3組均為靜脈給藥)；銀杏內(nèi)酯B粉針劑灌胃給藥對(duì)照組灌胃給藥18mg/kg；金納多注射液陽(yáng)性對(duì)照組18mg/kg，相當(dāng)于人臨床用藥等效劑量2倍量(成人用藥量為100mg/日，按體表面積比值折算，大鼠用藥的等效劑量為100×0.018×5＝9mg/kg)。灌胃組灌胃給藥，每日1次，連續(xù)3天；其余各組靜脈注射給藥，假手術(shù)對(duì)照組及腦缺血模型組給予生理鹽水。末次給藥后30分鐘，參照Longa等人的方法采用頸內(nèi)動(dòng)脈線栓法制備大鼠大腦中動(dòng)脈閉塞(MCAO)模型。大鼠用10％水合三氯乙醛(300mg/kg)ip麻醉，仰臥恒溫手術(shù)臺(tái)上頸部正中切口，暴露右側(cè)頸總動(dòng)脈，向外牽引二腹肌及胸鎖乳突肌，由頸總動(dòng)脈分叉處向頭端依次游離，結(jié)扎并剪斷頸外動(dòng)脈的分支枕骨下動(dòng)脈和甲狀腺上動(dòng)脈，在頸外動(dòng)脈遠(yuǎn)端結(jié)扎，切斷頸外動(dòng)脈使其主干游離備用，然后分離頸內(nèi)動(dòng)脈，用絲線在頸外動(dòng)脈根部打一松扣，夾閉頸總動(dòng)脈和頸內(nèi)動(dòng)脈。將尼龍線經(jīng)頸外動(dòng)脈主干切口，緩慢向頸內(nèi)動(dòng)脈入顱方向推進(jìn)，以頸總動(dòng)脈分叉處為標(biāo)記，推進(jìn)20mm左右時(shí)感到阻力，即達(dá)到了較細(xì)的大腦前動(dòng)脈內(nèi)，阻斷了MCA的所有血供來(lái)源，扎緊頸外動(dòng)脈根部松扣。1小時(shí)后，拔出尼龍線，扎緊動(dòng)脈殘端。縫合皮膚，完成MCAO導(dǎo)致局灶性腦缺血-再灌模型。假手術(shù)組大鼠麻醉后，僅暴露頸內(nèi)外動(dòng)脈分叉，不閉塞MCA。
術(shù)后24小時(shí)后按Bederson的方法對(duì)動(dòng)物的行為缺陷進(jìn)行分級(jí)評(píng)分，標(biāo)準(zhǔn)如下0級(jí)未觀察到神經(jīng)癥狀。1級(jí)提尾懸空時(shí)，動(dòng)物的手術(shù)對(duì)側(cè)前肢表現(xiàn)為腕肘屈曲，肩內(nèi)旋，肘外展，緊貼胸壁。2級(jí)將動(dòng)物置于光滑平面上，推手術(shù)側(cè)向?qū)?cè)移動(dòng)時(shí)，阻力降低。3級(jí)動(dòng)物自由行走時(shí)向手術(shù)對(duì)側(cè)環(huán)轉(zhuǎn)或轉(zhuǎn)圈。4級(jí)軟癱，肢體無(wú)自發(fā)活動(dòng)。
動(dòng)物評(píng)分后，腹主動(dòng)脈取血，斷頭取出大腦，稱重，手術(shù)顯微鏡下確認(rèn)中動(dòng)脈已阻斷后，平均分成5個(gè)腦片，置TTC染液中37℃避光溫孵，10％甲醛固定24h后，根據(jù)重量法計(jì)算梗塞部重量占腦組織重量的百分比，作為腦梗塞范圍大小的指標(biāo)。測(cè)定血清SOD活性及MDA含量(比色法)，第二腦片組織常規(guī)脫水，石蠟包埋制片，HE染色，光學(xué)顯微鏡下觀察病理組織學(xué)。
表6銀杏內(nèi)酯B粉針劑對(duì)局灶性腦缺血大鼠的影響(x±SD n＝10)

與假手術(shù)對(duì)照組比較#P＜0.05，##P＜0.01；與模型組比較*P＜0.05，**P＜0.01。
表7銀杏內(nèi)酯對(duì)局灶性腦缺血大鼠MDA含量及SOD活性的影響(x±SD n＝10)

與對(duì)照組比較##P＜0.01；與模型組比較*P＜0.05，**P＜0.01。
結(jié)論銀杏內(nèi)酯B粉針劑能降低局灶性腦缺血模型大鼠梗塞范圍，改善大鼠由于腦缺血所致的神經(jīng)行為障礙。能升高血清SOD活性及降低MDA含量。能減輕腦缺血大鼠腦組織的病理?yè)p傷。提示對(duì)大鼠腦缺血缺氧有一定的保護(hù)作用。
2、銀杏內(nèi)酯B粉針劑對(duì)犬腦血流量及腦血管阻力的影響取健康雜種犬，30條，♀、♂兼用，體重10-12kg，隨機(jī)分為五組，對(duì)照組靜脈注射生理鹽水(2ml/kg)。銀杏內(nèi)酯B粉針劑小劑量組2.66mg/kg，中劑量組5.33mg/kg，大劑量組10.66mg/kg，均為靜脈注射，用藥量分別相當(dāng)于人臨床用藥的等效劑量，2倍劑量，4倍劑量(成人用藥量為100mg/日，按體表面積比值折算，犬用藥的等效劑量為100×0.32/12＝2.66mg/kg)。金納多注射液陽(yáng)性對(duì)照組靜脈注射5.33mg/kg，相當(dāng)于人臨床用藥等效劑量2倍量。
動(dòng)物自小隱靜脈按30mg/kg靜脈注射3％戊巴比妥鈉麻醉，仰臥固定于手術(shù)臺(tái)上。分離一側(cè)股靜脈，結(jié)扎遠(yuǎn)側(cè)端，插輸液管備用。分離一側(cè)股動(dòng)脈，插入充滿肝素生理鹽水溶液的動(dòng)脈插管，經(jīng)壓力換能器記錄平均動(dòng)脈壓(MAP)。將針狀電極插入四肢皮下，記錄標(biāo)準(zhǔn)II導(dǎo)心電圖(ECG)。沿頸正中線切開(kāi)皮膚，分離左側(cè)頸總動(dòng)脈，結(jié)扎進(jìn)入顱內(nèi)之前的頸外動(dòng)脈及椎動(dòng)脈，保留頸內(nèi)動(dòng)脈，頸總動(dòng)脈掛2.5mm電磁流量計(jì)探頭測(cè)量頸內(nèi)動(dòng)脈流量，以此代表腦血流量。腦血流量以100g腦組織每分鐘血流毫升數(shù)表示。腦血流量(ml/100g·min)＝頸內(nèi)動(dòng)脈流量×100/一側(cè)腦重。腦血管阻力(kPa.ml/100g·min)＝平均血壓(MAP)/腦血流量[1]。手術(shù)10min待動(dòng)物各項(xiàng)觀察指標(biāo)穩(wěn)定后，股靜脈緩慢注射給藥，給藥體積2ml/kg，對(duì)照組給予等體積生理鹽水，記錄藥前及藥后1、5、30、60、120min的血壓、頸內(nèi)動(dòng)脈流量、心電圖。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)處死動(dòng)物，取腦組織稱重。
表8銀杏內(nèi)酯B粉針劑對(duì)犬腦血流量的影響(ml/100g.min)(x±SDn＝6)

與給藥前比較#P＜0.05，##P＜0.01；與對(duì)照組比較*P＜0.05，**P＜0.01。
表9銀杏內(nèi)酯B粉針劑對(duì)犬SAP、DAP、MAP的影響(x±SD，n＝6)


與對(duì)照組及給藥前比較P＞0.05。
表10銀杏內(nèi)酯B粉針劑B對(duì)犬HR的影響(x±SD，n＝6)

與對(duì)照組及給藥前比較P＞0.05。
表11銀杏內(nèi)酯B粉針劑對(duì)犬腦血管阻力的影響(kPa.ml/100g·min)(x±SD n＝6)

與給藥前比較#P＜0.05，##P＜0.01；與對(duì)照組比較*P＜0.05，**P＜0.01。
結(jié)論銀杏內(nèi)酯能使犬腦血流量增加、腦血管阻力降低，具有增加腦血流量的作用。而對(duì)血壓及心率無(wú)明顯影響。
3、銀杏內(nèi)酯B粉針劑對(duì)急性不完全性腦缺血大鼠的影響選擇SD雄性大鼠70只，體重250-280g，隨機(jī)分為7組假手術(shù)對(duì)照組；腦缺血模型組；銀杏內(nèi)酯B粉針劑小劑量組9mg/kg；中劑量組18mg/kg；大劑量組36mg/kg；銀杏內(nèi)酯灌胃給藥對(duì)照組18mg/kg，；金納多注射液陽(yáng)性對(duì)照組18mg/kg。連續(xù)給藥3天，末次給藥后30分鐘，大鼠ip水合氯醛麻醉，仰臥固定，切開(kāi)頸正中皮膚，分離雙側(cè)頸總動(dòng)脈，靜脈注射伊文思藍(lán)50mg/kg，5分鐘后結(jié)扎雙側(cè)頸總動(dòng)脈，縫合皮膚，常規(guī)消毒，假手術(shù)組分離雙側(cè)頸總動(dòng)脈但不結(jié)扎，給伊文思藍(lán)3小時(shí)后，斷頭取腦，稱重，分別浸泡于甲酰胺溶液中，在45℃恒溫箱中溫育72小時(shí)，待腦組織中色素全部浸出，取色素液用721型分光光度計(jì)，波長(zhǎng)620nm進(jìn)行比色，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出腦內(nèi)伊文思藍(lán)的含量，以μg/g腦濕重表示。
表12銀杏內(nèi)酯B粉針劑對(duì)腦缺血模型大鼠腦組織伊文思藍(lán)含量的影響(x±SD n＝10)

與對(duì)照組比較##P＜0.01；與模型組比較*P＜0.05，**P＜0.01。
結(jié)論銀杏內(nèi)酯B粉針劑能減少腦缺血模型大鼠腦組織中伊文思藍(lán)的含量，減輕因腦缺血缺氧導(dǎo)致的毛細(xì)血管通透性的增加，對(duì)大鼠腦缺血缺氧有一定的保護(hù)作用。
4、銀杏內(nèi)酯B粉針劑對(duì)小鼠腦缺血缺氧的影響KM種小鼠，60只，雌、雄各半，隨機(jī)分為6組對(duì)照組(生理鹽水)；銀杏內(nèi)酯B粉針劑小劑量組13mg/kg；中劑量組26mg/kg；大劑量組52mg/kg(以上3組均為靜脈注射給藥)；銀杏內(nèi)酯灌胃給藥組52mg/kg；金納多注射液陽(yáng)性對(duì)照組26mg/kg。每天給藥一次，給藥體積為20ml/kg。連續(xù)給藥3天，末次給藥后30min(iv)或60min(ig)，小鼠經(jīng)乙醚麻醉后，分離雙側(cè)頸總動(dòng)脈并穿線結(jié)扎，觀察并記錄結(jié)扎雙側(cè)頸總動(dòng)脈后動(dòng)物存活時(shí)間。以完全阻斷雙側(cè)頸總動(dòng)脈血流開(kāi)始計(jì)時(shí)至小鼠10秒內(nèi)呼吸少于2次時(shí)為止，為小鼠缺血后存活時(shí)間，試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表8。銀杏內(nèi)酯B粉針劑可明顯延長(zhǎng)小鼠腦缺血后存活的時(shí)間，其中劑量為26，52mg/kg，差異具有顯著性意義。
表13銀杏內(nèi)酯B粉針劑對(duì)小鼠腦缺血后存活時(shí)間的影響(n＝10，x±SD)

與對(duì)照組比較*P＜0.05，**P＜0.01結(jié)論實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，小鼠靜脈注射給予銀杏內(nèi)酯B粉針劑(13，26，52mg/kg)及灌胃給予銀杏內(nèi)酯(52mg/kg)能不同程度的延長(zhǎng)小鼠頸動(dòng)脈結(jié)扎后的存活時(shí)間。提示銀杏內(nèi)酯B粉針劑對(duì)小鼠腦缺血缺氧具有一定的保護(hù)作用。其中相同劑量的銀杏內(nèi)酯靜脈注射給藥優(yōu)于灌胃給藥。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的銀杏內(nèi)酯B粉針劑及其制備方法作進(jìn)一步說(shuō)明。
實(shí)施例1銀杏內(nèi)酯B 20.0g 碳酸鈉30.0g丙二醇30.0g 右旋糖酐40120.0g
乳糖80.0g按處方比例將銀杏內(nèi)酯B、碳酸鈉、丙二醇，加注射用水1500ml溶解，再加入右旋糖酐40和乳糖，使溶解，加注射用水定容至2000ml，截流分子量為0.8萬(wàn)Dolton的膜超濾，除去熱源，最后用0.23μm濾膜過(guò)濾除菌，分裝1000支，預(yù)凍與干燥，軋蓋，得銀杏內(nèi)酯B粉針劑成品。
實(shí)施例2銀杏內(nèi)酯B 20.0g碳酸鈉40.0g丙二醇 180.0g 右旋糖酐4060.0g乳糖40.0g按處方比例將銀杏內(nèi)酯B、碳酸鈉、丙二醇，加注射用水1500ml溶解，再加入右旋糖酐40或乳糖，使溶解，加注射用水定容至2000ml，截流分子量為1萬(wàn)Dolton的膜超濾，除去熱源，最后用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌，分裝1000支，預(yù)凍與干燥，軋蓋，得銀杏內(nèi)酯B粉針劑成品。
實(shí)施例3銀杏內(nèi)酯B 20.0g碳酸鈉20.0g丙二醇 60.0g右旋糖酐4060.0g乳糖20.0g甘露醇20.0g按處方比例將銀杏內(nèi)酯B、碳酸鈉、丙二醇，加注射用水1500ml溶解，再加入右旋糖酐40、乳糖和甘露醇，使溶解，加注射用水定容至2000ml，截流分子量為3萬(wàn)Dolton的膜超濾，除去熱源，最后用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌，分裝1000支，預(yù)凍與干燥，軋蓋，得銀杏內(nèi)酯B粉針劑成品。
將所得樣品進(jìn)行溶液配伍試驗(yàn)，影響因素試驗(yàn)，40℃±2℃相對(duì)濕度75％±5％條件下加速試驗(yàn)，結(jié)果均顯示處方良好，外觀成形佳，產(chǎn)品穩(wěn)定，能夠?yàn)榭惯^(guò)敏、抗炎、抗休克，抑制血小板聚集，減少血栓形成，治療心腦血管系統(tǒng)疾病等提供一種較好的藥物制劑。
權(quán)利要求
1.一種銀杏內(nèi)酯B粉針劑，是由主藥和助溶劑及賦形劑制成的粉針劑，其特征在于所述主藥基本組成為銀杏內(nèi)酯B，助溶劑為碳酸鈉、丙二醇，按重量計(jì)其重量比是銀杏內(nèi)酯B∶碳酸鈉∶丙二醇為1∶1～2∶1～10。
2.如權(quán)利要求1所述的銀杏內(nèi)酯B粉針劑，其特征在于銀杏內(nèi)酯B∶碳酸鈉∶丙二醇的重量比為1∶1∶3。
3.如權(quán)利要求1或2所述的銀杏內(nèi)酯B粉針劑，其特征在于所述的賦形劑為右旋糖酐40、乳糖、甘露醇中的一種或幾種。
4.如權(quán)利要求1或2所述的銀杏內(nèi)酯B粉針劑，其特征在于所述的主藥中銀杏內(nèi)酯B的重量含量大于90％。
5.一種權(quán)利要求1所述的銀杏內(nèi)酯B粉針劑的制備方法，其特征在于將銀杏內(nèi)酯B原料與碳酸鈉、丙二醇按重量比為1∶1～2∶1～10的比例混合均勻，加注射用水溶解，往該溶液中加入占總重量比為50％～80％的賦形劑并使之溶解，用截流分子量為0.8～3萬(wàn)Dolton的膜超濾，除去熱源，最后用濾膜過(guò)濾除菌，分裝，預(yù)凍與干燥，軋蓋，得銀杏內(nèi)酯B粉針劑成品。
6.如權(quán)利要求5所述的銀杏內(nèi)酯B粉針劑的制備方法，其特征在于所述的賦形劑為右旋糖酐40、乳糖、甘露醇中的一種或幾種。
7.、如權(quán)利要求5或6所述的銀杏內(nèi)酯B粉針劑的制備方法，其特征在于所述的過(guò)濾除菌的濾膜為0.22μm的濾膜。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種銀杏內(nèi)酯B粉針劑，是由主藥和助溶劑及賦形劑制成的粉針劑，其特征在于所述主藥的主要成分為銀杏內(nèi)酯B，助溶劑為碳酸鈉、丙二醇，按重量含量計(jì)其重量比是銀杏內(nèi)酯B∶碳酸鈉∶丙二醇為1∶1～2∶1～10。還公開(kāi)了這種粉針劑的制備方法。本發(fā)明的銀杏內(nèi)酯B粉針劑，藥效穩(wěn)定、成本低。
文檔編號(hào)A61K47/10GK1843351SQ20061000783
公開(kāi)日2006年10月11日 申請(qǐng)日期2006年2月17日 優(yōu)先權(quán)日2006年2月17日
發(fā)明者劉全勝, 夏中寧, 舒軍, 林學(xué)良 申請(qǐng)人:夏中寧