專利名稱：一種活性化合物石豆蘭二聚菲乙及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從蘭科植物密花石豆蘭Bulbophyllum odoratissimum(J.E.Smith)Lindl中提取的活性化合物石豆蘭二聚菲乙(bulbobiphenantrene B)及其應(yīng)用，屬藥物制備
背景技術(shù)：
蘭科植物密花石豆蘭Bulbophyllum odoratissimum(J.E.Smith)Lindl，生長(zhǎng)于海拔200-2300米混交林樹干或山谷巖石上，分布于福建、廣東、香港、廣西、四川、云南和西藏等省區(qū)。到目前為止，尚未見有關(guān)石豆蘭二聚菲乙(bulbobiphenantrene B)的報(bào)道，也未見從密花石豆蘭中提取到石豆蘭二聚菲乙(bulbobiphenantrene B)的報(bào)道，也沒有該化合物具有抗癌活性的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種從蘭科植物密花石豆蘭Bulbophyllum odoratissimum(J.E.Smith)Lindl中提取的活性化合物石豆蘭二聚菲乙(bulbobiphenantrene B)及其應(yīng)用，為研究開發(fā)新的抗癌藥物提供先導(dǎo)化合物。
本發(fā)明是以蘭科植物密花石豆蘭為原料，采用常規(guī)溶劑提取和層析分離方法，得到一種新的化合物，采用高分辨質(zhì)譜和核磁共振技術(shù)，確定了該化合物的結(jié)構(gòu)，命名為石豆蘭二聚菲乙(bulbobiphenantrene B)。
該活性化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)為
石豆蘭二聚菲乙紅色膠狀物。高分辨質(zhì)譜給出分子量482，分子式C30H26O6，采用核磁共振儀(500MHz)測(cè)定了該化合物的核磁共振氫譜、碳譜、DEPT譜、NOESY譜、HMBC譜、HMQC譜和H-H COSY譜，確定了該化合物碳原子和氫原子的信號(hào)歸屬。
石豆蘭二聚菲乙的1H及13C核磁共振數(shù)據(jù)[(CD3)2CO]見下表

本發(fā)明的活性化合物對(duì)人白血病細(xì)胞株HL-60、K562，人肺癌細(xì)胞株A549和人胃癌細(xì)胞株SGC-7901有抑制作用，可作為制備抗癌藥物的用途。
本發(fā)明對(duì)研究開發(fā)新的抗癌藥物提供了先導(dǎo)化合物，有利于進(jìn)一步開發(fā)天然藥物資源。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明的化合物采用如下的方法及操作條件制備(方法和部分操作條件同現(xiàn)有技術(shù))。具體為采集新鮮的密花石豆蘭原料低溫干燥，粉碎，用5倍量的工業(yè)乙醇室溫冷浸6次，每次3天。合并提取液，減壓濃縮得乙醇提取物。該提取物加水混勻后，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇反復(fù)萃取。減壓濃縮后分別得到石油醚、乙酸乙酯和正丁醇三個(gè)部分。乙酸乙酯部分進(jìn)行硅膠柱層析，以石油醚∶丙酮(9∶1～0∶1)、氯仿∶甲醇(1∶1～0∶1)進(jìn)行梯度洗脫，薄層層析檢測(cè)，合并為6個(gè)部分。第4部分經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析(氯仿∶甲醇10∶1)和Sephadex LH-20柱層析(甲醇水溶液9∶1)，得石豆蘭二聚菲乙(bulbobiphenantrene B)。得率為十萬(wàn)分之一。
本發(fā)明的應(yīng)用以體外培養(yǎng)的人白血病細(xì)胞株HL-60、K562、人肺癌細(xì)胞株A549和人胃癌細(xì)胞株SGC-7901，用周建軍等提出的評(píng)價(jià)抗癌物質(zhì)活性的改良MTT法(周建軍等，中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志，1993，24455-457)得出結(jié)論，石豆蘭二聚菲甲對(duì)人白血病細(xì)胞株HL-60、K562、人肺癌細(xì)胞株A549和人胃癌細(xì)胞株SGC-7901有明顯的抑制作用。檢測(cè)結(jié)果見下表。
石豆蘭二聚菲乙對(duì)人腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的半數(shù)抑制濃度(IC50，μg/ml)
權(quán)利要求
1.一種活性化合物石豆蘭二聚菲乙，其特征在于該活性化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)為
2.權(quán)利要求1所述的活性化合物石豆蘭二聚菲乙的應(yīng)用，其特征在于該活性化合物對(duì)人白血病細(xì)胞株HL-60、K562，人肺癌細(xì)胞株A549和人胃癌細(xì)胞株SGC-7901有抑制作用，可作為制備抗癌藥物的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種從蘭科植物密花石豆蘭Bulbophyllum odoratissimum(J.E.Smith)Lindl中提取的活性化合物石豆蘭二聚菲乙(bulbobiphenantrene B)及其應(yīng)用，屬藥物制備技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明利用植物密花石豆蘭Bulbophyllum odoratissimum(J.E.Smith)Lindl為原料，通過常規(guī)的粉碎、酒精提取、溶劑處理、硅膠柱層析得到石豆蘭二聚菲乙(bulbobiphenantrene B)純品。經(jīng)過現(xiàn)代波譜技術(shù)確定了其化學(xué)結(jié)構(gòu)，為一新的化合物，命名為石豆蘭二聚菲乙(bulbobiphenantrene B)。該活性化合物對(duì)人白血病細(xì)胞株HL－60、K562，人肺癌細(xì)胞株A549和人胃癌細(xì)胞株SGC－7901有抑制作用，可作為制備抗癌藥物的用途。本發(fā)明對(duì)研究開發(fā)新的抗癌藥物提供了先導(dǎo)化合物，有利于進(jìn)一步開發(fā)天然藥物資源。
文檔編號(hào)A61K31/075GK1821201SQ200610010750
公開日2006年8月23日 申請(qǐng)日期2006年3月16日 優(yōu)先權(quán)日2006年3月16日
發(fā)明者陳業(yè)高, 徐俊駒, 虞泓, 卿晨 申請(qǐng)人:云南師范大學(xué)