專利名稱：甾體咪唑鹽類化合物及其制備方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明涉及新穎的甾體咪唑鹽類化合物，其制備方法，以該化合物為活性成分的藥物組合物在抗癌方面的應用。
背景技術(shù)：
癌癥是嚴重威脅人類健康的一類疾病。目前用于治療癌癥的主要手段是化學療法。臨床應用的化療藥物絕大多數(shù)都有使患者惡心、嘔吐、白細胞下降、骨髓抑制等毒副作用。因此，尋找高活性、無毒或低毒性的抗癌化合物成為新藥研究的一項重要課題。
咪唑作為一類重要的五元雜環(huán)化合物廣泛存在于天然產(chǎn)物分子中。咪唑環(huán)還作為生理活性的重要結(jié)構(gòu)單元存在于合成的殺真菌劑、除莠劑、植物生長調(diào)節(jié)劑以及治療藥物的分子中。在咪唑環(huán)系基礎上合成的咪唑鹽類化合物，由于具有多種生物活性而受到國內(nèi)外有機合成及藥物化學研究工作者的重視。迄今為止，研究表明咪唑鹽類化合物具有抗腫瘤活性、抗細菌和抗真菌的活性、抗炎活性、抗心率不齊活性、血小板合成酶抑制活性，以及作為口服低血糖劑。以甾體為原料合成的甾體咪唑鹽類化合物及其制備方法至今為止文獻未見報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一系列甾體咪唑鹽類化合物及其制備方法。以3-羥基-Δ5-甾體，如膽甾醇、豆甾醇、薯蕷皂苷元、蕃麻皂苷元、妊娠烯醇酮、去氫表雄酮等為原料，經(jīng)甲磺?；螅c咪唑在無水甲苯中加熱回流，形成1-甾體咪唑類化合物，在此基礎上與鹵化芐在甲苯中加熱回流合成了1-甾體-3-芐基咪唑鹽類化合物。本發(fā)明合成了一系列甾體咪唑鹽類化合物，經(jīng)體外抗癌活性篩選以及構(gòu)效關系研究，發(fā)現(xiàn)1-位薯蕷皂苷元、妊娠烯醇酮的咪唑鹽類化合物，與已商品化的抗癌藥物——順鉑(DDP)相比較，具有非常好的體外抗癌生理活性。
本發(fā)明提供的甾體咪唑鹽類化合物用下述結(jié)構(gòu)通式(I)和(II)表示
R＝芐基R1，R2＝H，芳基，烷基R3＝H，烷基，羰基，烷氧基，羥基，胺基，烷胺基，芳胺基，巰基，芳基X＝Cl，Br，I，OH一種具有結(jié)構(gòu)通式(I)和(II)的化合物的制備方法，該方法包括以下步驟A、1-甾體咪唑化合物的合成①以3-羥基-Δ5-甾體(如膽甾醇、豆甾醇、薯蕷皂苷元、蕃麻皂苷元、妊娠烯醇酮、去氫表雄酮等)、三乙胺、甲磺酰氯為原料，先在二氯甲烷溶劑中合成3-甲磺酸酯甾體。將3-羥基甾體與三乙胺溶于二氯甲烷溶劑中，在冰浴(0℃)下緩慢滴加入甲磺酰氯，滴加完畢后，于室溫下反應1-4小時，制得3-甲磺酸酯甾體。各化合物用量(摩爾數(shù)比mol)為3-羥基甾體/三乙胺/甲磺酰氯＝1/2.0～2.5/1.0～1.5，二氯甲烷的用量為50～200ml/g 3-羥基甾體。
②以3-甲磺酸酯甾體、咪唑為原料，在無水甲苯溶劑中合成1-甾體咪唑化合物。將3-甲磺酸酯甾體、咪唑溶于無水甲苯或1，4-二氧六環(huán)或四乙氧基硅烷或四氫呋喃或1，2-二氯乙烷溶劑中，攪拌回流48-72小時，制得1-甾體咪唑化合物。各化合物用量(摩爾數(shù)比mol)為3-甲磺酸酯甾體/咪唑＝1/2，溶劑優(yōu)先選用無水甲苯，其用量為50～200ml/g 3-甲磺酸酯甾體。
R1，R2，＝H，芳基，烷基R3＝H，烷基，羰基，烷氧基，羥基，胺基，烷胺基，芳胺基，巰基，芳基a)MsCl，Et3N，CH2Cl2，0℃ b)咪唑，無水甲苯等溶劑，回流B、1-甾體-3-芐基咪唑鹽類化合物的合成以1-甾體咪唑化合物和鹵化芐為原料，在甲苯溶劑中合成1-甾體-3-芐基咪唑鹽類化合物。將1-甾體咪唑化合物溶于甲苯或二甲苯或1，4-二氧六環(huán)或四乙氧基硅烷溶劑，攪拌下加入鹵化芐，攪拌回流過夜，制得1-甾體-3-芐基咪唑鹽類化合物。各化合物用量(摩爾數(shù)比mol)為1-甾體咪唑/鹵化芐＝1.0/2.0～2.5，溶劑優(yōu)先選用甲苯，其用量為50～200ml/g 1-甾體咪唑。

R＝芐基R1，R2＝H，芳基，烷基R3＝H，烷基，羰基，烷氧基，羥基，胺基，烷胺基，芳胺基，巰基，芳基X＝Cl，Br，I，OHc)PhCH3，回流上述具有結(jié)構(gòu)通式(I)和(II)的化合物與至少一種藥物上可接受的賦型劑、稀釋劑或載體制得的藥物可用于治療癌癥。
具體實施例方式以下結(jié)合實例列舉本發(fā)明的典型化合物。
實施例1 1-(3β-薯蕷皂苷元)-3-芐基-咪唑溴鹽 制備過程如下1.1-(3β-薯蕷皂苷元)咪唑化合物的制備將薯蕷皂苷元(4.00g，10mmol)與三乙胺(3.4ml，24mmol)溶于二氯甲烷溶劑(400ml)中，攪拌，在冰浴(0℃)下緩慢滴加入甲磺酰氯(1.37mg，12mmol)，滴加完畢后，于室溫下反應3小時。反應完畢后，加入水(50ml)，用稀鹽酸中和，分離有機相，水相用二氯甲烷萃取3次(20ml/次)，合并有機相，依次用飽和NaHCO3溶液，飽和NaCl溶液洗滌后，加無水硫酸鈉干燥，過濾除去干燥劑，減壓蒸餾除去溶劑后，得到粗產(chǎn)物。
將上述粗產(chǎn)物(5mmol)、咪唑(680mg，10mmol)溶于無水甲苯溶劑(200ml)中，攪拌回流72小時，減壓蒸餾除去溶劑，經(jīng)柱層析分離，得到1-(3β-薯蕷皂苷元)咪唑化合物，收率4.4％。
2.1-(3β-薯蕷皂苷元)-3-芐基-咪唑溴鹽的制備1-(3β-薯蕷皂苷元)咪唑(0.2mmol)溶于甲苯(10ml)，攪拌下加入溴化芐(69mg，0.4mmol)，攪拌回流，反應約72小時，得到固體化合物，過濾，用甲苯洗滌數(shù)次，干燥，得白色無定形粉末化合物1，收率82.3％。
mp.218-220℃；IR(KBr)vmaxcm-13424，3058，2950，2904，1630，1559，1455，1377，1242，1159，1053，983，899，711；ESI-MS(m/e，％)556([M+1-Br]+，43)，555([M-Br]+，100)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ10.98(s，1H)，7.55-7.52(m，2H)，7.40-7.38(m，3H)，7.27(S，2H)，5.69(s，2H，PhCH2)，5.48-5.47(d，1H，J＝3Hz，H-6)，4.46-4.38(dd，1H，J＝9，15Hz)，4.28-4.20(m，1H，H-3)，3.50-3.32(m，2H)，2.78-2.70(t，1H，J＝12Hz)，2.57-2.53(d，1H，J＝12Hz)，1.11(s，3H)，0.99(d，3H)，0.80-0.79(d，6H)；13C NMR(75MHz，CDCl3)δ138.0，137.0，133.3，129.7，129.6，129.4，124.5，121.6，119.7，109.5，80.9，67.0，62.3，61.0，56.5，53.6，50.0，42.3，41.8，39.8，39.6，37.6，36.9，32.1，32.0，31.6，31.5，30.5，29.5，29.0，21.0，19.6，17.3，16.4，14.7。
實施例2 1-(3α-薯蕷皂苷元)-3-芐基-咪唑溴鹽 制備過程如下1.1-(3α-薯蕷皂苷元)咪唑化合物的制備制備方法同化合物1，得到1-(3α-薯蕷皂苷元)咪唑化合物，收率11.5％。
2.1-(3α-薯蕷皂苷元)-3-芐基-咪唑溴鹽的制備
制備方法同化合物1，得白色無定形粉末化合物2，收率94.9％。
mp.236-238℃；IR(KBr)vmaxcm-13435，3063，2950，2873，1631，1558，1455，1377，1242，1134，1052，968，899，712；ESI-MS(m/e，％)556([M+1-Br]+，43)，555([M-Br]+，100)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ10.18(S，1H)，7.54-7.51(d，4H)，7.38-7.36(t，3H)，5.73-5.68(d，2H，PhCH2)，5.64(S，1H，H-6)，4.86(S，1H，H-3)，4.45-4.38(dd，1H，J＝6，15Hz)，3.49-3.34(m，2H)，2.95-2.90(d，1H，J＝15Hz)，2.68-2.63(d，1H，J＝15Hz)，1.06(S，3H)，0.96-0.93(d，3H)，0.80-0.87(d，6H)；13C NMR(75MHz，CDCl3)δ137.1，136.8，133.5，129.4，129.3，125.5，121.7，121.5，109.4，80.8，66.9，62.1，56.5，53.3，50.0，41.7，40.3，39.6，37.1，34.9，32.3，32.0，31.8，31.4，31.1，30.3，28.8，27.6，20.5，19.3，17.2，16.3，14.5。
實施例3 1-(3α，5α-環(huán)-6β-薯蕷皂苷元)-3-芐基-咪唑溴鹽 制備過程如下1.1-(3α，5α-環(huán)-6β-薯蕷皂苷元)咪唑化合物的制備制備方法同化合物1，得到1-(3α，5α-環(huán)-6β-薯蕷皂苷元)咪唑化合物，收率37.9％。
2.1-(3α，5α-環(huán)-6β-薯蕷皂苷元)-3-芐基-咪唑溴鹽的制備
制備方法同化合物1，得白色無定形粉末化合物3，收率80.2％。
IR(KBr)vmaxcm-13432，3056，2951，2850，1631，1558，1454，1381，1217，1053，968，899，712；ESI-MS(m/e，％)556([M+1-Br]+，41)，555([M-Br]+，100)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ10.92(S，1H)，7.54-7.51(m，4H)，7.38-7.36(m，3H)，5.70(s，2H，PhCH2)，4.48-4.40(dd，1H，J＝9，15Hz)，3.56(s，1H，H-6)，3.50-3.45(dd，1H，J＝3，12Hz)，3.41-3.34(t，1H，J＝12Hz)，2.39-2.35(d，1H，J＝12Hz)，2.18-2.01(m，1H)，0.98-0.96(d，3H)，0.80-078(d，3H)，0.75(s，3H)，0.72(s，3H)；13C NMR(75MHz，CDCl3)δ136.4，134.1，129.1，128.7，125.8，128.4，117.8，109.1，80.5，66.8，62.2，58.6，55.7，53.5，48.0，43.1，41.5，40.6，39.8，35.1，34.6，33.4，31.5，31.3，30.3，30.2，28.7，24.4，24.2，22.2，19.6，17.1，16.5，14.5，14.3。
實施例4 1-(3β-妊娠烯醇酮)-3-芐基-咪唑溴鹽 1.1-(3β-妊娠烯醇酮)咪唑化合物的制備將妊娠烯醇酮(10mmol)與三乙胺(2.8ml，20mmol)溶于二氯甲烷溶劑(180ml)中，攪拌，在冰浴(0℃)下緩慢滴加入甲磺酰氯(1.14mg，10mmol)，滴加完畢后，于室溫下反應1小時。反應完畢后，加入水(50ml)，用稀鹽酸中和，分離有機相，水相用二氯甲烷萃取3次(20ml/次)，合并有機相，依次用飽和NaHCO3溶液，飽和NaCl溶液洗滌后，加無水硫酸鈉干燥，過濾除去干燥劑，減壓蒸餾除去溶劑后，得到粗產(chǎn)物。
將上述粗產(chǎn)物(5mmol)、咪唑(680mg，10mmol)溶于1，4-二氧六環(huán)溶劑(90ml)中，攪拌回流48小時，減壓蒸餾除去溶劑，經(jīng)柱層析分離，得到1-(3β-妊娠烯醇酮)咪唑化合物，收率1.9％。
2.1-(3β-妊娠烯醇酮)-3-芐基-咪唑溴鹽的制備1-(3β-妊娠烯醇酮)咪唑(0.2mmol)溶于二甲苯(4ml)，攪拌下加入溴化芐(69mg，0.4mmol)，攪拌回流，反應約需48小時，得到固體化合物，過濾，用甲苯洗滌數(shù)次，干燥，得白色無定形粉末化合物4，收率99.0％。
mp.224-226℃；IR(KBr)vmaxcm-13432，3380，3086，2944，2847，1700，1628，1557，1457，1356，1226，1093，767，714；ESI-MS(m/e，％)458([M+1-Br]+，45)，457([M-Br]+，100)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ10.11(S，1H)，7.49-7.46(m，4H)，7.35-7.33(m，3H)，5.69-5.61(t，2H，PhCH2)，5.58-5.57(d，1H，H-6，J＝3Hz)，4.82(S，1H，H-3)，2.92-2.87(d，1H，J＝15Hz)，2.64-2.59(d，1H，J＝15Hz)，2.51-2.45(t，1H，J＝9Hz)，2.08(S，3H)，1.01(S，3H)，0.58(S，3H)；13C NMR(75MHz，CDCl3)δ209.7，137.3，137.0，133.8，129.8，129.6，125.8，122.0，121.8，63.9，57.1，56.8，53.7，50.2，44.2，39.0，37.4，35.3，32.7，32.1，31.9，27.8，24.7，23.3，21.0，19.6，13.6。
實施例5 1-(3α-妊娠烯醇酮)-3-芐基-咪唑溴鹽
制備過程如下1.1-(3α-妊娠烯醇酮)咪唑化合物的制備制備方法同化合物4，得到1-(3α-妊娠烯醇酮)咪唑化合物，收率10.6％。
2.1-(3α-妊娠烯醇酮)-3-芐基-咪唑溴鹽的制備制備方法同化合物4，得白色無定形粉末化合物5，收率95.4％。
mp.＞300℃；IR(KBr)vmaxcm-13413，3058，2943，2849，1700，1621，1559，1432，1357，1164，760，714；ESI-MS(m/e，％)458([M+1-Br]+，45)，457([M-Br]+，100)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ10.92(s，1H)，7.55-7.53(m，2H)，7.40-7.38(m，3H)，7.32-7.28(m，2H)，5.68(s，2H，PhCH2)，5.49(s，1H，H-6)，4.34-4.23(m，1H，H-3)，2.79-2.71(t，1H，J＝12Hz)，2.13(s，3H，H-21)，1.09(s，3H)，0.63(s，3H)；13C NMR(75MHz，CDCl3)δ209.5，137.9，136.8，133.2，129.6，129.5，129.4，124.4，121.7，119.7，63.7，60.9，56.9，53.5，49.9，44.0，39.5，38.8，37.5，36.7，31.8，31.8，31.6，29.5，24.6，23.0，21.1，19.5，13.3。
實施例6 1-(3β-膽甾醇)-3-芐基-咪唑溴鹽 制備過程如下1.1-(3β-膽甾醇)咪唑化合物的制備制備方法同化合物1，得到1-(3α-膽甾醇)咪唑化合物，收率6.3％。
2.1-(3β-膽甾醇)-3-芐基-咪唑溴鹽的制備
制備方法同化合物1，得白色無定形粉末化合物6，收率85.3％。
mp.234-236℃；IR(KBr)vmaxcm-13439，3078，2950，2930，2905，2851，1633，1558，1444，1379，1132，817，710；ESI-MS(m/e，％)528([M+1-Br]+，42)，527([M-Br]+，100)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ10.03(s，1H)，7.62-7.47(m，4H)，7.38-7.34(m，3H)，5.72-5.64(t，2H，PhCH2)，5.60-5.59(d，1H，H-6，J＝3Hz)，4.85(s，1H，H-3)，2.94-2.89(d，1H，J＝15Hz)，2.67-2.62(d，1H，J＝15Hz)，1.03(s，3H)，0.92(s，3H)，0.88-0.87(d，3H)，0.86-0.85(d，3H)，0.66(s，3H)；13C NMR(75MHz，CDCl3)δ137.3，136.7，133.9，129.7，129.6，126.1，122.2，121.9，56.9，56.7，56.5，53.5，50.3，42.6，39.8，37.3，36.5，36.1，35.2，32.6，32.2，31.9，28.6，28.4，27.9，24.5，24.3，23.2，22.9，20.9，19.6，19.1，12.2。
實施例7 1-(3α-膽甾醇)-3-芐基-咪唑溴鹽 制備過程如下1.1-(3α-膽甾醇)咪唑化合物的制備制備方法同化合物1，得到1-(3α-膽甾醇)咪唑化合物，收率15.1％。
2.1-(3α-膽甾醇)-3-芐基-咪唑溴鹽的制備制備方法同化合物1，得白色無定形粉末化合物7，收率92.9％。
mp.284-286℃；IR(KBr)vmaxcm-13417，3052，2951，2932，2850，1631，1561，1485，1457，1380，1162，760，710；ESI-MS(m/e，％)528([M+1-Br]+，45)，527([M-Br]+，100)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ10.69(s，1H)，7.57-7.47(m，4H)，7.36-7.31(m，3H)，5.66(s，2H，PhCH2)，5.45(s，1H，H-6)，4.26-4.18(m，1H，H-3)，2.79-2.71(t，1H，J＝12Hz)，2.56-2.52(d，1H，J＝12Hz)，1.07(s，3H)，0.93-0.91(d，3H)，0.88(s，3H)，0.85(s，3H)，0.67(s，3H)；13C NMR(75MHz，CDCl3)δ138.4，136.2，133.8，129.7，129.6，124.7，122.4，120.8，61.1，57.0，56.5，53.5，50.2，42.7，40.0，39.9，39.8，37.8，36.9，36.6，36.2，32.2，32.0，29.8，28.6，28.4，24.6，24.2，23.2，23.0，21.3，19.8，19.1，12.2。
實施例8 1-(3β-豆甾醇)-3-芐基-咪唑溴鹽 制備過程如下1.1-(3β-豆甾醇)咪唑化合物的制備制備方法同化合物1，得到1-(3α-豆甾醇)咪唑化合物，收率6.3％。
2.1-(3β-豆甾醇)-3-芐基-咪唑溴鹽的制備制備方法同化合物1，得白色無定形粉末化合物8，收率85.3％。
mp.216-218℃；IR(KBr)vmaxcm-13419，3052，2957，2938，2869，1630，1561，1456，1380，1181，972，709；ESI-MS(m/e，％)554([M+1-Br]+，42)，553([M-Br]+，100)；
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ10.69(s，1H)，7.58-7.48(m，4H)，7.36-7.31(m，3H)，5.67(s，2H，PhCH2)，5.46(s，1H，H-6)，5.20-5.12(dd，1H，J＝9，15Hz)，5.06-4.98(dd，1H，J＝9，15Hz)，4.26-4.18(m，1H，H-3)，2.80-2.72(t，1H，J＝12Hz)，2.56-2.52(d，1H，J＝12Hz)，1.08(s，3H)，1.04-1.03(d，3H)，0.86(s，3H)，0.84(s，3H)，0.81(s，3H)，0.70(s，3H)；13C NMR(75MHz，CDCl3)δ138.3，138.0，135.8，133.4，129.4，129.3，124.3，122.1，120.5，60.8，56.7，55.9，53.1，51.3，49.9，42.2，40.5，39.5，39.4，37.4，36.6，31.9，31.8，31.7，29.4，28.9，25.4，24.3，21.2，21.1，21.0，19.4，19.0，12.3，12.1。
實施例9 1-(3α-豆甾醇)-3-芐基-咪唑溴鹽 制備過程如下1.1-(3α-豆甾醇)咪唑化合物的制備制備方法同化合物1，得到1-(3α-豆甾醇)咪唑化合物，收率15.1％。
2.1-(3α-豆甾醇)-3-芐基-咪唑溴鹽的制備制備方法同化合物1，得白色無定形粉末化合物9，收率92.9％。
mp.234-236℃；IR(KBr)vmaxcm-13483，3412，3089，2955，2826，1634，1559，1457，1380，1136，972，709；ESI-MS(m/e，％)554([M+1-Br]+，42)，553([M-Br]+，100)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ10.16(s，1H)，7.56-7.52(m，4H)，7.38-7.36(m，3H)，5.73-5.64(t，2H，PhCH2)，5.62-5.60(d，1H，H-6，J＝6Hz)，5.20-5.12(dd，1H，J＝9，15Hz)，5.06-4.98(dd，1H，J＝9，15Hz)，4.86(s，1H，H-3)，2.95-2.90(d，1H，J＝15Hz)，2.67-2.62(d，1H，J＝15Hz)，1.04(s，3H)，1.03-1.01(d，3H)，0.86(s，3H)，0.84-0.83(d，3H)，0.81(s，3H)，0.69(s，3H)；13C NMR(75MHz，CDCl3)δ138.6，137.4，136.9，133.8，130.0，129.6，126.1，122.1，121.9，57.1，56.8，56.3，53.6，51.6，50.4，42.5，40.9，39.8，37.4，35.3，32.6，32.3，32.3，31.9，29.3，27.9，25.8，24.6，21.6，21.5，21.0，19.6，19.4，12.6，12.4。
實施例10 1-(3β-去氫表雄酮)-3-芐基-咪唑溴鹽 制備過程如下1.1-(3β-去氫表雄酮)咪唑化合物的制備制備方法同化合物1，得到1-(3α-去氫表雄酮)咪唑化合物，收率3.0％。
2.1-(3β-去氫表雄酮)-3-芐基-咪唑溴鹽的制備制備方法同化合物1，得白色無定形粉末化合物10，收率88.6％。
mp.240-242℃；IR(KBr)vmaxcm-13434，3078，2947，2835，1735，1632，1559，1443，1130，810，711；ESI-MS(m/e，％)430([M+1-Br]+，33)，429([M-Br]+，100)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ10.21(s，1H)，7.50-7.47(m，4H)，7.41-7.32(m，3H)，5.69-5.56(m，3H，PhCH2，H-6)，4.83(s，1H，H-3)，2.95-2.90(d，2H)，2.72-2.67(d，2H)，1.04(s，3H)，0.84(s，3H)；13C NMR(75MHZ，CDCl3)δ220.7，137.1，136.9，133.5，129.4，129.3，125.2，121.7，121.4，56.5，53.3，51.7，50.1，47.5，37.2，35.8，34.9，32.3，31.4，31.2，30.8，27.5，21.8，20.0，19.3，13.6。
實施例11 1-(3α-去氫表雄酮)-3-芐基-咪唑溴鹽 制備過程如下1.1-(3α-去氫表雄酮)咪唑化合物的制備制備方法同化合物1，得到1-(3α-去氫表雄酮)咪唑化合物，收率14.3％。
2.1-(3α-去氫表雄酮)-3-芐基-咪唑溴鹽的制備制備方法同化合物1，得白色無定形粉末化合物11，收率82.9％。
mp.292-294℃；IR(KBr)vmaxcm-13417，3057，2945，2856，1741，1620，1558，1469，1371，1163，1030，759，714；ESI-MS(m/e，％)430([M+1-Br]+，33)，429([M-Br]+，100)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ10.66(s，1H)，7.43-7.41(m，2H)，7.29-7.23(m，5H)，5.54(s，2H，PhCH2)，5.38-5.37(d，1H，H-6，J＝3Hz)，4.18-4.07(m，1H，H-3)，2.71-2.63(t，1H，J＝12Hz)，2.48-2.44(d，1H，J＝12Hz)，2.39-2.29(m，1H)，0.99(s，3H)，0.75(s，3H)；13C NMR(75MHz，CDCl3)δ220.8，138.3，136.4，133.3，129.6，129.5，129.4，123.8，121.9，120.2，60.8，53.4，51.7，50.1，47.6，39.4，37.4，36.8，35.9，31.4，31.4，30.8，29.4，21.9，20.4，19.5，13.7。
實施例12 1-(3α，5α-環(huán)-6α-甾體)-3-芐基-2，4，5-三苯基咪唑氯鹽 制備過程如下1.1-(3α，5α-環(huán)-6α-甾體)-2，4，5-三苯基咪唑化合物的制備將3-羥基甾體(10mmol)與三乙胺(3.5ml，25mmol)溶于二氯甲烷溶劑(800ml)中，攪拌，在冰浴(0℃)下緩慢滴加入甲磺酰氯(1.71mg，15mmol)，滴加完畢后，于室溫下反應4小時。反應完畢后，加入水(50ml)，用稀鹽酸中和，分離有機相，水相用二氯甲烷萃取3次(20ml/次)，合并有機相，依次用飽和NaHCO3溶液，飽和NaCl溶液洗滌后，加無水硫酸鈉干燥，過濾除去干燥劑，減壓蒸餾除去溶劑后，得到粗產(chǎn)物。
將上述粗產(chǎn)物(5mmol)、2，4，5-三苯基咪唑(680mg，10mmol)溶于無水甲苯溶劑(200ml)中，攪拌回流72小時，減壓蒸餾除去溶劑，經(jīng)柱層析分離，得到1-(3α，5α-環(huán)-6α-甾體)-2，4，5-三苯基咪唑化合物，收率8.4％。
2.1-(3α，5α-環(huán)-6α-甾體)-3-芐基-2，4，5-三苯基咪唑氯鹽的制備1-(3α，5α-環(huán)-6α-甾體)-2，4，5-三苯基咪唑(0.2mmol)溶于甲苯(20ml)，攪拌下加入氯化芐(86mg，0.5mmol)，攪拌回流，反應約72小時，得到固體化合物，過濾，用甲苯洗滌數(shù)次，干燥，得白色無定形粉末化合物12，收率75.3％。
實施例13 1-(3α，5α-環(huán)-6α-17-羥基-甾體)-3-芐基-2，4，5-三甲基咪唑氯鹽
制備過程如下1.1-(3α，5α-環(huán)-6α-17-羥基-甾體)-2，4，5-三甲基咪唑化合物的制備制備方法同化合物12，底物甾體為3-羥基-17-羥基-甾體，底物咪唑為2，4，5-三甲基咪唑，得到1-(3α，5α-環(huán)-6α-17-羥基-甾體)-2，4，5-三甲基咪唑化合物，收率6.8％。
2.1-(3α，5α-環(huán)-6α-17-羥基-甾體)-3-芐基-2，4，5-三甲基咪唑氯鹽的制備制備方法同化合物12，得白色無定形粉末化合物13，收率78.5％。
實施例14 1-(3β-Δ5-17-胺基-甾體)-3-芐基-咪唑碘鹽 制備過程如下1.1-(3β-Δ5-17-胺基-甾體)咪唑化合物的制備制備方法同化合物1，底物甾體為3-羥基-Δ5-17-胺基-甾體，得到1-(3β-Δ5-17-胺基-甾體)咪唑化合物，收率5.2％。
2.1-(3β-Δ5-17-胺基-甾體)-3-芐基-咪唑碘鹽的制備制備方法同化合物1，鹵化芐為碘化芐，得白色無定形粉末化合物14，收率86.1％。
實施例15 1-(3β-Δ5-17-甲胺基-甾體)-3-芐基-咪唑碘鹽 制備過程如下1.1-(3β-Δ5-17-甲胺基-甾體)咪唑化合物的制備制備方法同化合物1，底物甾體為3-羥基-Δ5-17-甲胺基-甾體，得到1-(3β-Δ5-17-甲胺基-甾體)咪唑化合物，收率4.7％。
2.1-(3β-Δ5-17-甲胺基-甾體)-3-芐基-咪唑碘鹽的制備制備方法同化合物1，鹵化芐為碘化芐，得白色無定形粉末化合物15，收率87.2％。
實施例16 1-(3β-17-苯胺基-甾體)-3-芐基-咪唑堿鹽
制備過程如下1.1-(3β-Δ5-17-苯胺基-甾體)咪唑化合物的制備制備方法同化合物1，底物甾體為3-羥基-Δ5-17-苯胺基-甾體，得到1-(3β-Δ5-17-苯胺基-甾體)咪唑化合物，收率2.1％。
2.1-(3β-Δ5-17-苯胺基-甾體)-3-芐基-咪唑堿鹽的制備制備方法同化合物1，得到的咪唑溴鹽，再經(jīng)氨水處理，得白色無定形粉末化合物16，收率80.1％。
實施例17 1-(3β-Δ5-17-苯基-甾體)-3-芐基-咪唑堿鹽 制備過程如下1.1-(3β-Δ5-17-苯基-甾體)咪唑化合物的制備制備方法同化合物1，底物甾體為3-羥基-Δ5-17-苯基-甾體，得到1-(3β-Δ5-17-苯基-甾體)咪唑化合物，收率1.7％。
2.1-(3β-Δ5-17-苯基-甾體)-3-芐基-咪唑堿鹽的制備制備方法同化合物16，得白色無定形粉末化合物17，收率80.7％。
實施例18 1-(3β-Δ5-17-巰基-甾體)-3-芐基-咪唑溴鹽
制備過程如下1.1-(3β-Δ5-17-巰基-甾體)咪唑化合物的制備制備方法同化合物1，底物甾體為3-羥基-Δ5-17-巰基-甾體，得到1-(3β-Δ5-17-巰基-甾體)咪唑化合物，收率1.5％。
2.1-(3β-Δ5-17-巰基-甾體)-3-芐基-咪唑溴鹽的制備制備方法同化合物1，得白色無定形粉末化合物18，收率75.6％。
化合物1、2、3的抗癌活性實驗化合物1、2、3按照MTT方法進行了白血病、肝癌、喉癌和肺癌的細胞毒活性篩選，其半數(shù)致死劑量測定結(jié)果與已商品化的抗癌藥物——順鉑(DDP)相比較于下表中。
以上數(shù)據(jù)表明，化合物1、2、3具有非常好的體外抗癌活性。
權(quán)利要求
1.具有下述結(jié)構(gòu)通式(I)和(II)的甾體咪唑鹽類化合物 R＝芐基R1，R2＝H，芳基，烷基R3＝H，烷基，羰基，烷氧基，羥基，胺基，烷胺基，芳胺基，巰基，芳基X＝Cl，Br，I，OH。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其特征是含有多取代咪唑結(jié)構(gòu)單元，咪唑1-位連接甾體，3-位形成芐基鹵代鹽或芐基堿鹽。
3.一種如權(quán)利要求1所述的化合物的制備方法，該方法包括以下步驟A、1-甾體咪唑化合物的合成①以3-羥基-Δ5-甾體、三乙胺、甲磺酰氯為原料，先在二氯甲烷溶劑中合成3-甲磺酸酯甾體將3-羥基甾體與三乙胺溶于二氯甲烷溶劑中，在0℃下緩慢滴加入甲磺酰氯，用量按摩爾數(shù)比為3-羥基甾體/三乙胺/甲磺酰氯＝1/2.0～2.5/1.0～1.5，二氯甲烷的用量為50～200ml/g 3-羥基甾體，滴加完畢后，于室溫下反應1-4小時，制得3-甲磺酸酯甾體；②以3-甲磺酸酯甾體、咪唑或多取代咪唑為原料，在無水甲苯或1，4-二氧六環(huán)或四乙氧基硅烷或四氫呋喃或1，2-二氯乙烷溶劑中合成1-甾體咪唑化合物將3-甲磺酸酯甾體、咪唑溶于無水甲苯溶劑中，用量按摩爾數(shù)比為3-甲磺酸酯甾體/咪唑＝1/2，溶劑用量為50～200ml/g 3-甲磺酸酯甾體，反應攪拌回流48-72小時，制得1-甾體咪唑化合物；B、1-甾體-3-芐基咪唑鹽類化合物的合成以1-甾體咪唑化合物和鹵化芐為原料，在甲苯或二甲苯或1，4-二氧六環(huán)或四乙氧基硅烷溶劑中合成1-甾體-3-芐基咪唑鹽類化合物將1-甾體咪唑化合物溶于甲苯或二甲苯或1，4-二氧六環(huán)，攪拌下加入鹵化芐，用量按摩爾數(shù)比為1-甾體咪唑/鹵化芐＝1.0/2.0～2.5，溶劑用量為50～200ml/g 1-甾體咪唑，反應攪拌回流48-72小時，制得1-甾體-3-芐基咪唑鹽類化合物。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的化合物的制備方法，其特征是合成1-甾體咪唑化合物時，各反應物加入的先后順序采用3-羥基甾體和三乙胺溶于二氯甲烷溶劑中，在0℃下緩慢滴加入甲磺酰氯，滴加完畢后，于室溫下反應1-4小時，制得3-甲磺酸酯甾體，溶劑二氯甲烷的用量采用150ml/g 3-羥基甾體；再將3-甲磺酸酯甾體、咪唑溶于無水甲苯溶劑中，攪拌回流48-72小時，制得1-甾體咪唑化合物，溶劑無水甲苯的用量采用100ml/g 3-甲磺酸酯甾體。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的化合物的制備方法，其特征是合成1-甾體-3-芐基咪唑鹽類化合物時，各化合物用量按摩爾數(shù)比采用1-甾體咪唑/3-鹵化芐＝1.2/1.0，溶劑用量采用100ml/g 1-甾體咪唑。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的化合物的制備方法，其特征是以3-羥基甾體、三乙胺、甲磺酰氯、咪唑為原料，先制備得到1-甾體咪唑化合物，再與鹵化芐反應，制備得到甾體咪唑鹽類化合物。
7.具有結(jié)構(gòu)通式(I)和(II)的化合物與至少一種藥物上可接受的賦型劑、稀釋劑或載體制得的藥物用于治療癌癥的應用。
全文摘要
本發(fā)明涉及新穎的甾體咪唑鹽類化合物，其制備方法，以該化合物為活性成分的藥物組合物在抗癌方面的應用。用上述結(jié)構(gòu)通式(I)和(II)表示本發(fā)明以3－△
文檔編號A61P31/04GK1876672SQ20061001102
公開日2006年12月13日 申請日期2006年7月6日 優(yōu)先權(quán)日2006年7月6日
發(fā)明者張洪彬, 羊曉東, 卿晨, 劉穎玲, 李良, 劉建平 申請人:云南大學, 昆明醫(yī)學院