專利名稱：一種增強免疫功能的藥物或保健品及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥制品或保健品領(lǐng)域，特別涉及一種能增強免疫功能的藥物或保健品及其制備方法。
背景技術(shù)：
免疫是人體的一種生理功能；人體依靠這種功能識別“自己”和“非己”的成分，從而破壞和排斥進入體內(nèi)的抗原物質(zhì)，如病原體等，或人體本身所產(chǎn)生的損傷細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞等，以此來維持人體內(nèi)部環(huán)境的平衡和穩(wěn)定。由此可見，免疫的主要功能有防御感染、自身穩(wěn)定和免疫監(jiān)視。預(yù)防感染，使人體能夠抵抗病原體等的侵襲，防止疾病的產(chǎn)生，從而維護人體的健康；自身穩(wěn)定，使人體能夠及時清除體內(nèi)的衰老、死亡和損傷細(xì)胞；免疫監(jiān)視，使人體能夠隨時識別和清除體內(nèi)產(chǎn)生的異常細(xì)胞(如腫瘤細(xì)胞)。然而，隨著人們生活水平的提高，生活結(jié)構(gòu)的變化、年齡的增長、睡眠的不足、飲食習(xí)慣的調(diào)整和精神的壓力的逐步增加，使我們的身體的負(fù)荷不斷增加，自身防疫能力卻是在逐漸下降；同時，隨著環(huán)境的惡化，各種病毒、細(xì)菌確越來越繁多和具有攻擊力；為了保持一個健康的體魄，我們除了需要培養(yǎng)自身的免疫力外，我們還有必要通過增強免疫力的藥物進行必要的補充，特別是對免疫力低下的人群。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種能增強免疫功能的藥物或保健品。
本發(fā)明的另一目的在于提供一種制備上述藥物或保健品的方法。
本發(fā)明的目的是通過如下技術(shù)方案實現(xiàn)的一種增強免疫功能的藥物或保健品，其活性成分包括地龍?zhí)崛∥锖痛涛寮犹崛∥铩?br> 所述藥物或保健品還包括輔料淀粉、甘露醇、硬脂酸鎂。
所述藥物或保健品各組分的重量百分含量為地龍?zhí)崛∥?0～80％刺五加提取物 10～70％淀粉 5～30％甘露醇4～20％硬脂酸鎂 1～10％所述藥物或保健品中所述地龍?zhí)崛∥镉行С煞譃榈佚埗嚯?；刺五加提取物有效成分為總皂苷?br> 一種制備上述藥物或保健品的方法，其包括如下過程，將地龍?zhí)崛∥锖痛涛寮犹崛∥锓謩e粉碎、過篩；將甘露醇和硬脂酸鎂混合；將地龍?zhí)崛∥?、刺五加提取物、甘露醇和硬脂酸鎂的混合物與淀粉混合制粒；然后制成所需劑型。
地龍(earthworm)俗稱“蚯蚓”，“曲膳”，別名“地龍子”，系環(huán)節(jié)動物。是生物進化過程中最先具有免疫記憶和識別的動物之一。其味咸性寒，歸肝、脾、膀胱經(jīng)。具有清熱定驚，通絡(luò)，平喘，利尿之功效。從地龍體內(nèi)提取了多種具有生物活性的肽類，即地龍肽(lumbricus peptide，LP)，它是地龍體內(nèi)小分子多肽的總稱，大量的文獻表明地龍?zhí)崛∥锞哂性鰪娒庖吖δ艿淖饔谩?br> 通過如下實驗研究證明地龍肽具有增強免疫功能的作用1.不同劑量的地龍肽能增強小鼠Mφ細(xì)胞毒活性，LP 3個劑量組Mφ的細(xì)胞毒活性均有所增強，與正常對照組相比較，0.1，1和10mg/l LP組Mφ的細(xì)胞毒活性明顯增強(P＜0.01)
2.地龍肽對小鼠Mφ，脾細(xì)胞分泌TNF-α的影響，與正常對照組相比較，0.1，0.5mg/l LP組Mφ經(jīng)LPS誘生后分泌TNF-α的水平明顯增加(P＜0.01)、與環(huán)磷酰胺組相比較，環(huán)磷酰胺+LP組Mφ自發(fā)及經(jīng)LPS誘生后分泌TNF-α的水平均明顯增加(P＜0.01)。
3.地龍肽對小鼠脾細(xì)胞分泌IL-2的影響，與正常對照組相比較，0.1g/l LP組脾細(xì)胞自發(fā)及經(jīng)ConA誘生分泌IL-2的量均明顯增加(P＜0.01)；1g/l和0.5g/l LP組IL-2的自發(fā)分泌也增加(分別為P＜0.01和P＜0.05)。經(jīng)LPS誘生后，分泌IL-2的水平雖有所增加，但與正常對照組相比較無顯著差異(P＞0.05)。環(huán)磷酰胺+LP組與環(huán)磷酰胺組相比較，脾細(xì)胞自發(fā)及經(jīng)ConA誘生后分泌IL-2的水平均明顯升高(P＜0.01)4.地龍肽各組分對NK細(xì)胞活性的影響，地龍肽在濃度為0.1、0.5和1mg/l時，均可顯著提高NK細(xì)胞的活性(P＜0.001)，且濃度越大效果越明顯，地龍肽可明顯拮抗環(huán)磷酰胺的抑制作用(P＜0.05)。
5.地龍肽對小鼠正常Mφ和正常脾細(xì)胞分泌NO的影響，NO是由Mφ內(nèi)誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)催化L精氨酸與氧分子反應(yīng)生成的。NO在活化的Mφ細(xì)胞殺傷腫瘤細(xì)胞的效應(yīng)中起著重要的作用，NO是一種新發(fā)現(xiàn)的抗腫瘤分子，0.1g/l LP可使Mφ和脾細(xì)胞分泌NO的水平明顯提高(p＜0.01)。
6.地龍肽能使實驗組小白鼠脾指數(shù)和胸腺指數(shù)明顯升高(P＜0.05)說明實驗組小白鼠的免疫功能顯著增強。結(jié)果顯示小鼠廓清指數(shù)與吞噬指數(shù)明顯升高(P＜0.01)說明LP增強小鼠免疫功能明顯強于黃芪沖劑。小鼠半數(shù)溶血素測定結(jié)果明顯升高，說明小鼠的體液免疫功能也有顯著增強(P＜0.05)。
另外，蚯蚓內(nèi)有大量脂肪酸、核酸及其衍生物游離氨基酸，還有微量元素磷、鈣、鐵、鉀、鋅、銅以及多種維生素，可作為人體理想的營養(yǎng)來源。特別是它的蛋白質(zhì)含量十分豐富，遠(yuǎn)高于雞蛋和一般肉類，其中有人體必需的8種氨基酸。在美國、日本、大洋洲和非洲都有將蚯蚓作為食品來食用的習(xí)慣。日本是目前蚯蚓的最大消費國，也是最大的蚯蚓進口國。日本食品工業(yè)運用現(xiàn)代技術(shù)開發(fā)研制出蚯蚓粉保健食品。經(jīng)測定這種蚯蚓保健品，含有蛋白質(zhì)58.5％，脂肪6.3％，亞油酸110毫克，維生素B11.3毫克，維生素B23.3毫克，灰分5.9％等多種營養(yǎng)成分。試驗結(jié)果表明，這種保健食品具有調(diào)節(jié)身體疲勞狀況，降低血液過高的膽固醇，降低血壓以及預(yù)防神經(jīng)痛和便泌等效果。蚯蚓還可提取氨基酸，作為輕工業(yè)的原料，生產(chǎn)出美膚化妝品及各種食品及保健食品。按照現(xiàn)代醫(yī)藥學(xué)理論以地龍多肽物質(zhì)為主要原料開發(fā)具有免疫調(diào)節(jié)作用的保健食品是可行的。
刺五加提取物為五加科植物刺五加的根及根莖的提取物。性味與歸經(jīng)味辛、微苦，性溫，歸脾、腎、心經(jīng)。功能與主治補腎強腰，益氣安神，活血通絡(luò)。主治腎虛體弱，腰膝酸軟，小兒行遲，脾虛乏力，氣虛浮腫，食欲不振，失眠多夢，健忘，胸痹疼痛，風(fēng)寒濕痹，跌打腫痛。
化學(xué)成分根含刺五加甙A、B、B1、C、D、E。根莖含具免疫促進作用的堿溶性刺五加多糖AS-II、AS-III及水溶性刺五加多糖PES-A、PES-B。
刺五加提取物的藥理作用1、對非特異性刺激的作用(1)抗疲勞作用(2)耐缺氧作用(3)抗高低溫及抗放射作用(4)抗應(yīng)激作用(5)解毒作用2、對免疫功能的影響(1)對單核-巨噬細(xì)胞系統(tǒng)吞噬功能的影響給小鼠或豚鼠每日灌胃刺五加醇提水溶液50g(生藥)/kg1次，連續(xù)14日、15日，明顯增加單核、吞噬細(xì)胞和腹腔巨噬細(xì)胞吞噬能力。
(2)對淋巴細(xì)胞功能的影響給小鼠每日每只灌胃刺五加提取物0.02ml，連續(xù)9日，明顯阻止因游泳疲勞所致的T、B淋巴細(xì)胞、殺傷細(xì)胞、非特異性免疫功能下降。
刺五加多糖使小鼠脾臟細(xì)胞數(shù)及腸系膜淋巴結(jié)細(xì)胞數(shù)明顯增加，且對環(huán)磷酰胺所致的細(xì)胞數(shù)目減少有顯著拮抗效應(yīng)。刺五加多糖能使小鼠脾臟白髓總體積和淋巴結(jié)皮質(zhì)總體積明顯增加，且能顯著對抗環(huán)磷酰胺減少脾臟白髓總體積和淋巴結(jié)皮質(zhì)總體積的作用。作為免疫調(diào)節(jié)劑，刺五加多糖可促進淋巴細(xì)胞增殖，使之代謝活躍，功能增強，以此形態(tài)學(xué)改變?yōu)榛A(chǔ)，促進了機體的免疫功能。刺五加多糖的延緩衰老、抗腫瘤等作用可能與其對免疫系統(tǒng)的作用密不可分。
刺五加多糖在體外具有誘導(dǎo)小鼠脾細(xì)胞產(chǎn)生IL-2的作用，提示多糖增強機體免疫的機理可能與誘導(dǎo)機體產(chǎn)生IL-2有關(guān)。IL-2是一種極為重要的淋巴因子，具有誘導(dǎo)Th細(xì)胞和Tc細(xì)胞增殖，刺激B細(xì)胞產(chǎn)生抗體，活化巨噬細(xì)胞，增強NK細(xì)胞和LAK活性的作用。
巨噬細(xì)胞是單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)中作用最強的一類細(xì)胞，也是抗腫瘤的效應(yīng)細(xì)胞。刺五加浸膏及醇提物具有明顯增強巨噬細(xì)胞的吞噬作用，對應(yīng)激狀態(tài)下小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能進行研究，結(jié)果表明，起作用的主要成分為刺五加苷。從應(yīng)激學(xué)角度來說，由于刺五加的適應(yīng)原樣作用使得應(yīng)激狀態(tài)下的小鼠腎上腺皮質(zhì)激素的分泌控制在適量水平，進而促進單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)的吞噬功能。從而提高免疫功能，改善機體健康狀況。
(3)對抗體形成的影響給LACA系及C57BL/6純系小鼠每日腹腔注射刺五加多糖注射劑12.5mg/kg、25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg1次，給藥9日后，25-100mg/kg加五加多糖明顯增加小鼠分泌IgG和IgM的抗體分泌細(xì)胞(PFC)，提示增強特異性體液免疫功能。
(4)對干擾素的影響用含10μg/ml的刺五加多糖的培養(yǎng)基，將誘發(fā)細(xì)胞預(yù)處理24-48小時后，用150U/ml干擾素啟動2小時，結(jié)果證明刺五加多糖顯著提高細(xì)胞產(chǎn)生干擾素的能力。
(5)有升高白細(xì)胞的作用。
上述結(jié)果提示刺五加提取物對免疫功能的影響是多方面的。
下面通過具體的藥理實驗進一步說明本發(fā)明的功效。
龍肽免疫膠囊增強免疫力功能動物試驗報告1實驗動物SPF級昆明種雌性小鼠，18-22g，實驗動物生產(chǎn)許可證號SCXK(鄂)2003-0005；實驗動物使用許可證號SYXK(鄂)2003-0014。動物飼養(yǎng)室溫度為22-26℃，濕度為47-67％。
2樣品檢驗及依據(jù)一種由地龍?zhí)崛∥铩⒋涛寮犹崛∥?、淀粉、甘露醇、硬脂酸鎂等原輔料制作的被命名為龍肽免疫膠囊的硬膠囊劑，按《保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范》2003年版(功能學(xué)評價程序)中保健食品評價試驗項目、試驗原則及結(jié)果判定的相關(guān)規(guī)定進行檢驗。
3劑量分組按人群推薦日攝入量0.05g/kg BW擴大10、20、30倍設(shè)立低、中、高三個劑量組，即0.5、1.0、1.5g/kg BW，共分四個實驗組，每實驗組包括空白對照組、低、中、高劑量組，各劑量組實驗動物數(shù)為10只。免疫實驗一組進行遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)和小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞實驗；免疫實驗二組進行ConA誘導(dǎo)的小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實驗和NK細(xì)胞活性測定；免疫實驗三組進行淋巴器官/體重比值測定和碳廓清實驗；免疫實驗四組進行血清溶血素的測定和抗體生成細(xì)胞檢測。小鼠連續(xù)灌胃30天后開始試驗。各實驗組均按0.20ml/10g BW容量經(jīng)口灌胃給予。
4試驗方法與結(jié)果4.1方法4.1.1 ConA誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗方法無菌取脾，置于盛有適量無菌Hank’s液平皿中，用鑷子輕輕將脾磨碎，制成單個細(xì)胞懸液。經(jīng)200目篩網(wǎng)過濾，用Hank’s液洗2次，每次離心10min(1000r/min)。然后將細(xì)胞懸浮于1mL的完全培養(yǎng)液中，用臺酚蘭染色計數(shù)活細(xì)胞數(shù)(應(yīng)在95％以上)，調(diào)整細(xì)胞濃度為3×106個/mL。將每一份脾細(xì)胞懸液分兩孔加入24孔培養(yǎng)板中，每孔1mL，一孔加75μLConA液(相當(dāng)于7.5μg/mL)，另一孔作為對照，置5％CO2，37℃孵箱中培養(yǎng)72h。培養(yǎng)結(jié)束前4h，每孔輕輕吸去上清液0.7mL，加入0.7mL不含小牛血清的RPMl1640培養(yǎng)液，同時加入MTT(5mg/mL)50μL/孔，繼續(xù)培養(yǎng)4h。培養(yǎng)結(jié)束后，每孔加入1mL酸性異丙醇，吹打混勻，使紫色結(jié)晶完全溶解。然后分裝到96孔培養(yǎng)板中，每個孔作3個平行孔(100μL/孔)，用酶標(biāo)儀以570nm波長測定光密度值。
4.1.2二硝基氟苯(DNFB)誘導(dǎo)遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)(DTH)方法耳腫脹法。用1％DNFB(以1∶1的丙酮麻油溶液配制)致敏小鼠后，第5天再用DNFB攻擊右耳，24h后處死動物剪下左右耳殼用打孔器取下直經(jīng)8mm的耳片，稱重，以左右耳的重量之差來表示DTH的程度。
4.1.3血清溶血素的測定方法血凝法。取羊血，用生理鹽水洗滌3次，每次離心(2000r/min)10min。將壓積SRBC用生理鹽水配成2％(v/v)的細(xì)胞懸液，每只鼠腹腔注射0.2mL進行免疫。4～5天后，摘除眼球取血于離心管內(nèi)，放置約1h，將凝固血與管壁剝離，使血清充分析出，2000r/min離心10min，收集血清。
凝集反應(yīng)用生理鹽水將血清倍比稀釋，將不同稀釋度的血清分別置于微量血凝實驗板內(nèi)，每孔100μL，再加入100μL 0.5％(v/v)SRBC懸液，混勻，放入濕潤的平盤內(nèi)并加蓋，于37℃溫箱孵育3h，觀察血球凝集程度。根據(jù)血清凝聚程度的級別計算出抗體積數(shù)。
4.1.4腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞試驗方法半體內(nèi)法。制備20％的雞紅細(xì)胞懸液；每只鼠腹腔注射1mL該懸液，30min后處死動物，將其仰位固定于鼠板上，開腹，經(jīng)腹腔注入生理鹽水2mL，轉(zhuǎn)動鼠板1min，然后，吸出腹腔洗液1mL，平均分滴于2片載玻片上，37℃溫育30min；育畢用生理鹽水漂洗，晾干，以1∶1的丙酮甲醇溶液固定，4％Giemsa-磷酸緩沖液染色3min，再用蒸餾水漂洗晾干。油鏡下計數(shù)100個巨噬細(xì)胞，按下式計算吞噬率和吞噬指數(shù) 4.1.5小鼠碳廓清試驗方法按體重從小鼠尾靜脈注入稀釋的印度墨汁(10mL/kg)，待墨汁注入，立即計時注入墨汁后2、10min，分別從內(nèi)眥靜脈叢取血20μL，并立即將其加到2mL0.1％ Na2CO3溶液中。各吸0.1mL于96孔酶標(biāo)板中，用酶標(biāo)儀在600nm波長處測光密度值(OD)，以Na2CO3溶液作空白對照。
將小鼠處死，取肝臟和脾臟，用濾紙吸干臟器表面血污，分別稱重。
以吞噬指數(shù)表示小鼠碳廓清的能力。按下式計算吞噬指數(shù)a。受試樣品組的吞噬指數(shù)顯著高于對照組，可判定該項實驗結(jié)果陽性。
K=LgOD1-lgOD2t2-t1]]> 4.1.6抗體生成細(xì)胞檢測取脫纖維的羊血，用生理鹽水洗滌3次，每次離心(2000r/min)10min，每只鼠經(jīng)腹腔注射2％(v/v)SRBC 0.2mL。將SRBC免疫4～5天后的小鼠頸椎脫臼處死，取出脾臟，放在盛裝有Hank’s液的小平皿內(nèi)，輕輕磨碎脾臟，制成細(xì)胞懸液，經(jīng)200目篩網(wǎng)過濾，離心(1000/min)10min，用Hank’s液洗2遍，最后將細(xì)胞懸浮在5mL RPMI1640培養(yǎng)液中，計數(shù)細(xì)胞，并將細(xì)胞濃度調(diào)整為5×106個/mL。
空斑的測定將表層培養(yǎng)基(1g瓊脂糖加雙蒸水至100mL)加熱溶解后，放入45～50℃水浴保溫，與等量pH7.2～7.4、2倍濃度的Hank’s液混合，分裝小試管，每管0.5mL，再向管內(nèi)加50μL10％SRBC(v/v，用SA緩沖液配制)，20μL脾細(xì)胞懸液(5×106個/mL)，迅速混勻，傾倒于己刷瓊脂糖薄層的玻片上，做平行片，待瓊脂凝固后，將玻片水平扣放在片架上，放入二氧化碳培養(yǎng)箱中孵育1.5h，然后用SA緩沖液稀釋的補體(1∶8)加入玻片架凹槽內(nèi)，繼續(xù)溫育1.5h后，計數(shù)溶血空斑數(shù)。
4.1.7 NK細(xì)胞活性測定方法乳酸脫氫酶(LDH)測定法。
靶細(xì)胞的傳代(YAC-1細(xì)胞)實驗前24h將靶細(xì)胞進行傳代培養(yǎng)。用前以Hank’s液洗3次，用RPMI1640完全培養(yǎng)調(diào)整細(xì)胞濃度為4×105個/mL。
脾細(xì)胞懸液的制備(效應(yīng)細(xì)胞)無菌取脾，置于盛有適量無菌Hank’s液的小平皿中，用鑷子輕輕將脾磨碎，制成單細(xì)胞懸液。經(jīng)200目篩網(wǎng)過濾，用Hank’s液洗2次，每次離心10min(1000r/min)。棄上清將細(xì)胞彈起，加入0.5mL滅菌水20秒，裂解紅細(xì)胞后再加入0.5mL2倍Hank’s液及8mLHanks液，1000r/min，10min離心，用1mL含10％小牛血清的RPMI1640完全培養(yǎng)液重懸，用1％冰醋酸稀釋后計數(shù)(活細(xì)胞數(shù)應(yīng)在95％以上)，用臺酚蘭染色計數(shù)活細(xì)胞數(shù)(應(yīng)在95％以上)，最后用RPMI 1640完全培養(yǎng)液調(diào)整細(xì)胞濃度為2×107個/mL。
NK細(xì)胞活性檢測取靶細(xì)胞和效應(yīng)細(xì)胞各100μL(效靶比50∶1)，加入U型96孔培養(yǎng)板中靶細(xì)胞自然釋放孔加靶細(xì)胞和培養(yǎng)液各100μL，靶細(xì)胞最大釋放孔加靶細(xì)胞和1％NP40各100μL；上述各項均設(shè)三個平行孔，于37℃、5％CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4h，然后將96孔培養(yǎng)板以1500r/min離心5min，每孔吸取上清100μL置平底96孔培養(yǎng)板中，同時加入LDH基質(zhì)液100μL，根據(jù)室溫不同反應(yīng)3～10min，每孔加入1mol/L的HCl30μL，在酶標(biāo)儀490nm處測定光密度值(OD)。
按下式計算NK細(xì)胞活性，受試樣品組的NK細(xì)胞活性顯著高于對照組的NK細(xì)胞活性，即可判定該項實驗結(jié)果陽性。

4.2結(jié)果4.2.1試驗前后動物體重結(jié)果見表1、表2、表3、表4各組動物間體重?zé)o明顯差異。
表1 實驗一組試驗前后動物體重記錄(x±SD)

表2 實驗二組試驗前后動物體重記錄(x±SD)

表3 實驗三組試驗前后動物體重記錄(x±SD)

表4 實驗四組試驗前后動物體重記錄(x±SD)

4.2.2對動物淋巴器官/體重比值的影響見表5。各組動物間胸腺/體重比值和脾臟/體重比值無明顯差異(P＞0.05、P＞0.05)。
表5 龍肽免疫膠囊對動物淋巴器官/體重比值的影響(x±SD)

4.2.3脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實驗結(jié)果見表6。從表6可見，與空白對照組比較，龍肽免疫膠囊高劑量組顯著性增強ConA誘導(dǎo)的脾淋巴細(xì)胞增殖能力P＜0.05)。
4.2.4遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)實驗結(jié)果見表6。從表6可見與空白對照組比較，龍肽免疫膠囊高劑量組顯著性增強小鼠對DNFB誘發(fā)的DTH反應(yīng)(p＜0.05)。
表6 龍肽免疫膠囊對小鼠細(xì)胞免疫功能影響

4.2.5血清溶血素測定實驗結(jié)果見表7。從表7可見，與空白對照組比較，龍肽免疫膠囊高劑量組可顯著性升高血清溶血素含量(P＜0.05)。
4.2.6腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞實驗結(jié)果見表8。從表8可見，與空白對照組比較，龍肽免疫膠囊高劑量組明顯提高吞噬率、吞噬指數(shù)(P＜0.05、P＜0.05)。
表7 龍肽免疫膠囊對小鼠體液免疫功能的影響

表8 龍肽免疫膠囊對小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響

4.2.7碳廓清實驗結(jié)果見表9。從表9可見，與空白對照組比較，龍肽免疫膠囊高劑量組可顯著性提高小鼠碳廓清吞噬指數(shù)(P＜0.05)。
表9 龍肽免疫膠囊對小鼠碳廓清功能的影響

4.2.8抗體生成細(xì)胞檢測實驗結(jié)果見表10。從表10見，與空白對照組比較，龍肽免疫膠囊高劑量組能明顯增強抗體生成細(xì)胞能力(P＜0.05)。
表10 龍肽免疫膠囊對抗體生成細(xì)胞功能的影響

4.2.9 NK細(xì)胞活性實驗結(jié)果見表11。從表11可見，與空白對照組比較，龍肽免疫膠囊各劑量組均不能增強小鼠NK細(xì)胞活性(P＞0.05)。
表11 龍肽免疫膠囊對小鼠NK細(xì)胞活性的影響

5結(jié)論人群推薦日攝入量0.05g/kg BW擴大10、20、30倍設(shè)立低、中、高三個劑量組，即0.5、1.0、1.5/kg BW，另設(shè)空白對照組。采用SPF級昆明種小鼠，連續(xù)經(jīng)口灌胃給予，30天后開始實驗。實驗結(jié)果以P≤0.05判斷為顯著性差異，結(jié)果顯示1)各劑量組與空白對照組比較，小鼠體重、淋巴器官/體重比值差異均無顯著性；2)高劑量組能明顯增強ConA誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖能力；3)高劑量組能明顯增強二硝基氟苯誘導(dǎo)的小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)；4)高劑量組能明顯升高小鼠血清溶血素含量；5)高劑量組能明顯增強小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞功能；6)高劑量組能明顯增強小鼠碳廓清能力；7)高劑量組能明顯增強抗體生成細(xì)胞能力；8)各劑量組均不能增強小鼠NK細(xì)胞活性。按照增強免疫力功能作用評價程序規(guī)定，該受試物具有增強免疫力功能作用。
具體實施例方式實施例一取地龍?zhí)崛∥?0份(其有效成分為地龍多肽)和刺五加提取物70(有效成分為總皂苷)分別粉碎、過篩；取甘露醇5份和硬脂酸鎂10份混合；將上述份量的地龍?zhí)崛∥?、刺五加提取物、甘露醇和硬脂酸鎂的混合物與淀粉5份在常溫常壓下混合制粒。然后進行膠囊填充，制成膠囊。
實施例二取地龍?zhí)崛∥?0份和刺五加提取物10分別粉碎、過篩；取甘露醇4份和硬脂酸鎂1份混合；將上述份量的地龍?zhí)崛∥?、刺五加提取物、甘露醇和硬脂酸鎂的混合物與淀粉5份在常溫常壓下混合制粒。然后壓片，得片劑。
實施例三取地龍?zhí)崛∥?5份和刺五加提取物25分別粉碎、過篩；取甘露醇20份和硬脂酸鎂10份混合；將上述份量的地龍?zhí)崛∥?、刺五加提取物、甘露醇和硬脂酸鎂的混合物與淀粉30份在常溫常壓下混合制粒。然后進行膠囊填充，制成膠囊。
實施例四取地龍?zhí)崛∥?0份和刺五加提取物10分別粉碎、過篩；取甘露醇20份和硬脂酸鎂10份混合；將上述份量的地龍?zhí)崛∥铩⒋涛寮犹崛∥?、甘露醇和硬脂酸鎂的混合物與淀粉30份在常溫常壓下混合制粒。然后進行膠囊填充，制成膠囊。
實施例五取地龍?zhí)崛∥?0份和刺五加提取物40分別粉碎、過篩；取甘露醇4份和硬脂酸鎂10份混合；將上述份量的地龍?zhí)崛∥?、刺五加提取物、甘露醇和硬脂酸鎂的混合物與淀粉6份在常溫常壓下混合制粒。
權(quán)利要求
1.一種增強免疫功能的藥物或保健品，其特征在于，其活性成分包括地龍?zhí)崛∥锖痛涛寮犹崛∥铩?br> 2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種增強免疫功能的藥物或保健品，其特征在于，所述各組分的重量百分含量為地龍?zhí)崛∥?0～80％，刺五加提取物 10～70％。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種增強免疫功能的藥物或保健品，其特征在于，所述藥物或保健品還包括輔料淀粉、甘露醇、硬脂酸鎂。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種增強免疫功能的藥物或保健品，其特征在于，所述輔料各組分的重量百分含量為淀粉5～30％甘露醇 4～20％硬脂酸鎂1～10％
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種增強免疫功能的藥物或保健品，其特征在于，所述地龍?zhí)崛∥镉行С煞譃榈佚埗嚯摹?br> 6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種增強免疫功能的藥物或保健品，其特征在于，所述刺五加提取物有效成分為總皂苷。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種增強免疫功能的藥物或保健品，其特征在于，所述藥物或保健品可以制成藥物學(xué)上可接受的任何固體制劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種增強免疫功能的藥物或保健品，其特征在于，所述固體制劑為膠囊。
9.一種制備權(quán)利要求1-8中任意一個所述的增強免疫功能的藥物或保健品的方法，其包括如下過程將地龍?zhí)崛∥锖痛涛寮犹崛∥锓謩e粉碎、過篩；將甘露醇和硬脂酸鎂混合；將地龍?zhí)崛∥?、刺五加提取物、甘露醇和硬脂酸鎂的混合物與淀粉混合制粒；然后制成所需劑型。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的制備方法，其特征在于，所制成的劑型為片劑或顆粒劑或膠囊劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及醫(yī)藥制品或保健品領(lǐng)域，特別涉及一種能增強免疫功能的藥物或保健品及其制備方法。一種增強免疫功能的藥物或保健品，包括地龍?zhí)崛∥锖痛涛寮犹崛∥铩Ｋ鏊幬锘虮＝∑愤€包括輔料淀粉、甘露醇、硬脂酸鎂。所述藥物或保健品各組分的重量百分含量為地龍?zhí)崛∥?0~80％，刺五加提取物10~70％，淀粉5~30％，甘露醇4~20％，硬脂酸鎂1~10％。
文檔編號A61K9/16GK1857350SQ200610034578
公開日2006年11月8日 申請日期2006年3月27日 優(yōu)先權(quán)日2006年3月27日
發(fā)明者陳東, 房瑋琳, 李同學(xué) 申請人:珠海博康藥業(yè)有限公司