專利名稱：一種藥物組合物和用途的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種由丹參提取物和降香提取物組成的藥物組合物和用途，具體涉及一種由丹參水溶性成分、脂溶性成分和降香揮發(fā)油(簡稱降香油)組成的藥物組合物和用途。
背景技術：
丹參Salviamiltiorrhiza是具有活血化瘀功效的傳統(tǒng)中藥，對心腦血管疾病具有顯著療效，丹參的活性成分可以分為水溶性和脂溶性兩部分，丹參的水溶性活性成分主要為丹參酚酸，主要包括丹參酚酸B、迷迭香酸、丹參素、原兒茶醛等，丹參的脂溶性活性成分主要包括丹參酮IIA、丹參酮I和隱丹參酮。
中藥降香為豆科植物降香檀Dalbergia o dorifera T.chen樹干和根的干燥心材。降香功能為行氣止痛，活血止血，用于心胸悶痛，脘脅刺痛，外治跌打出血。降香能抑制血栓形成，其起抗凝作用的成份可能為揮發(fā)油成份訾慧，指導沙明，中藥降香研究進展，遼寧中醫(yī)學院學報，第5卷，第2期，2003年5月。
目前市場上丹香注射液中丹參、降香提取物采用以下方法制備取丹參和降香二味，降香加水浸潤后，加水蒸餾，收集蒸餾液，冷藏24小時，分去油層，濾過，水溶液另器收集；丹參加水煎煮三次，每次2小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮，加入乙醇使含醇量達75％，冷藏48小時，濾過，濾液回收乙醇，濃縮，再加入乙醇使含醇量達85％，冷藏48小時，濾過，濾液回收乙醇，濃縮，即得WS-11489(ZD-1489)-2002，國家藥品監(jiān)督管理局標準(試行)，丹香冠心注射液。
丹參的脂溶性活性成分主要包括丹參酮IIA、丹參酮I和隱丹參酮。丹參的水溶性活性成分主要為丹參酚酸，主要包括丹參酚酸B、迷迭香酸、丹參素、原兒茶醛等。本發(fā)明人經(jīng)過大量的實驗研究，發(fā)現(xiàn)由丹參水溶性成分和脂溶性成分以及降香油組成的藥物組合物在治療心血管系統(tǒng)方面的疾病具有協(xié)同作用，該藥物組合物中丹參水溶性成分和脂溶性成分本身具有協(xié)同作用，又與降香油組成協(xié)同作用，其在治療冠心病、心絞痛等心肌缺血疾病方面的作用明顯優(yōu)于傳統(tǒng)的香丹注射液。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了一種由丹參提取物和降香油組成的藥物組合物。
本發(fā)明還提供了該藥物組合物在制備治療或預防冠心病、心絞痛等藥物中的應用。
本發(fā)明所述的藥物組合物中丹參提取物和降香油的比例為1∶0.11-9。
其中丹參提取物由丹參脂溶性成分和水溶性成分組成，脂溶性成分主要包括丹參酮IIA、丹參酮I和隱丹參酮等，其丹參酮(以丹參酮IIA計)含量在15％以上，優(yōu)選為50％以上；水溶性成分主要包括丹參酚酸，其含量(以丹參酚酸B計)在20％以上，優(yōu)選為50％以上；以上含量均指重量百分含量，脂溶性成分與水溶性成分的比為1∶10-20。
本發(fā)明提出的藥物組合物可以是軟膠囊、滴丸、片劑、膠囊劑、顆粒劑、口服液、微粒劑，優(yōu)選軟膠囊、滴丸，各種制劑均可以按常規(guī)方法制備。
本發(fā)明提供的藥物組合物在用于心血管疾病時，其使用劑量范圍是400mg～8000mg，優(yōu)選為400mg～4000mg。
本發(fā)明提出的丹參提取物可以由但不限于以下方法制得丹參粗粉酸水(pH4±0.5)溶脹8小時，用14倍藥材體積的酸水(pH4±0.5)滲漉，滲漉液減壓濃縮至密度1.1-1.15(60-70℃)，濃縮液用75％乙醇沉淀24小時，上清液減壓濃縮(50-60℃)，濃縮后的浸膏減壓干燥即得丹參水溶性成分，丹參酸水滲漉后的藥渣用95％乙醇浸泡12h，95％乙醇滲漉，滲漉速度5-8ml/min，收集滲漉液10-14倍量。滲漉液減壓濃縮(50-60℃)、濃縮后的浸膏減壓干燥(60-70℃)，得丹參脂溶性成分的提取物，將丹參水溶性成分與丹參脂溶性成分合并，即得丹參提取物。
本發(fā)明提出的降香油可以由但不限于以下方法制得降香粗粉水溶脹4小時，置多功能提取器中，水蒸汽蒸餾8小時，分去水層得降香揮發(fā)油。
本發(fā)明人進行了下列試驗來證實以丹參提取物和降香油為活性成分的藥物組合物在制備治療或預防心血管疾病的藥物中的作用，且其作用遠強于單用同劑量丹參提取物或降香油或傳統(tǒng)香丹注射液，但本發(fā)明并不僅限于此。
具體實施例方式
實施例1 制備丹參提取物丹參粗粉1000g，酸水(PH4±0.5)溶脹8小時，用14倍藥材體積的酸水(PH4±0.5)滲漉，滲漉液減壓濃縮至密度1.1-1.15(60-70℃)，濃縮液用75％乙醇沉淀24小時，上清液減壓濃縮(50-60℃)，濃縮后的浸膏減壓干燥(60-70℃)得200.0g，其中丹參酚酸含量20％以上。
將丹參經(jīng)酸水滲漉后的藥渣用95％乙醇浸泡12h，95％乙醇滲漉，滲漉速度5-8ml/min，收集滲漉液10-14倍量。滲漉液減壓濃縮(50-60℃)、濃縮后的浸膏減壓干燥(60-70℃)，得20.0g，其中丹參酮含量15％以上。
實施例2 制備丹參提取物丹參粗粉1000g，酸水(PH4±0.5)溶脹，用14倍藥材體積的酸水(PH4±0.5)滲漉，滲漉液上AB-8大孔樹脂(0.5g/ml生藥)，0.1mol/L酸水洗脫雜質(zhì)(約5倍柱體積)，95％乙醇洗脫丹參酚酸B，洗脫液減壓濃縮、干燥，得70g，其中丹參酚酸含量50％以上。
丹參粗粉1000g加入萃取釜，保持萃取壓力15～25MPa，萃取溫度45～60℃；CO2流量30L/h，夾帶劑加入量400ml(95％乙醇)，萃取時間3小時，分離器壓力5～8MPa，溫度45～65℃下分離。萃取物減壓干燥，得5g，其中丹參酮含量60％以上。
實施例3 制備降香揮發(fā)油降香粗粉1000g水溶脹4小時，置多功能提取器中，水蒸汽蒸餾8小時，分去水層得降香揮發(fā)油，得25g。
實施例4 制備降香揮發(fā)油降香粗粉1000g加入萃取釜，保持萃取壓力20～30MPa，萃取溫度35～55℃；CO2流量25-35L/h，萃取時間3小時，分離器壓力5～8MPa，溫度45～65℃下分離，得降香油30g。
實施例 5滴丸的制備丹參提取物16.5g降香油1.9gPEG4000 30.1gPEG6000 4.3g55g(1000丸)制備方法取丹參提取物約16.5g，降香油1.9g，與基質(zhì)(PEG4000和PEG6000)按比例混合，90-100℃水浴上加熱成為熔融液態(tài)，混勻后注入滴丸機，維持料液溫度110℃左右，滴入5℃二甲基硅油中，取出滴丸擦去二甲基硅油，干燥，選丸，包裝，即得成品。
實施例6 軟膠囊的制備丹參提取物180g降香油19g蜂蠟 3.5g大豆色拉油適量至350g(1000粒)
制備方法取粉碎過140目篩的丹參提取物約180g，降香油19g，加入事先將蜂蠟3.5g，與大豆色拉油適量加熱熔融的油相中，攪拌混懸后過膠體磨兩遍，于軟膠囊機上壓囊，干燥，包裝，即得成品。
試驗例1 丹參提取物中水溶性成分與脂溶性成分對大鼠心肌缺血損傷治療協(xié)同作用的影響材料丹參提取物按制備例2方法制備；丹參提取物稱取丹參提取物水溶性成分與脂溶性成分，按試驗要求配制需要的比例與濃度；氯化硝基四氮唑藍(N-BT)，由軍事醫(yī)學科學院藥材供應站提供。
實驗動物普通級SD大鼠，雄性，體重280g-350g，山東省天然藥物工程技術研究中心動物實驗中心提供。合格證號魯動質(zhì)字200106005號。
方法與結果動物隨機分為模型組(生理鹽水)、硝苯地平組(6mg/kg)、丹參水溶性成分組(30mg/kg)、丹參水溶性成分組(63mg/kg)、丹參脂溶性成分組(30mg/kg)、丹參脂溶性成分組(63mg/kg)、丹參水溶性成分(57.3mg/kg)+丹參脂溶性成分(5.7mg/kg)劑量組、丹參水溶性成分(59mg/kg)+丹參脂溶性成分(4mg/kg)劑量組、丹參水溶性成分(60mg/kg)+丹參脂溶性成分(3mg/kg)劑量組，每組10只。硝苯地平組在麻醉前灌胃給藥，其余各組連續(xù)灌胃給藥3天，末次給藥前16小時禁食。ip.烏拉坦(1.2g/kg)麻醉，測肢體II導聯(lián)心電圖。剪去左胸前皮毛，碘酒及酒精消毒，沿胸骨左緣1cm處，剪開胸壁肌肉及二條肋骨，迅速打開胸腔，暴露心臟，在動脈圓錐與左心耳之間結扎左冠狀動脈，立即將心臟放回，排擠出胸腔空氣，用止血鉗閉合胸腔，造成大鼠急性心肌缺血模型記錄給藥前及給藥后1.5h、3h心電圖，測量心電圖J點的升高值，6h后取出心臟，以冷生理鹽水洗凈后，-20℃冰箱冷凍過夜。次日，將冷凍的心臟由結扎處至心尖部等厚切成5片，浸入新鮮配制的0.25％N-BT磷酸緩沖液(pH 7.4)中。37℃水浴振搖10～15min。用濾紙吸干切片表面的染色液，分離染色部分和未染色部分，稱重，記算梗死面積。梗死面積(％)＝梗死部分重量/(非梗死部分重量+梗死部分重量)×100％。數(shù)據(jù)用 表示，以組間t檢驗進行統(tǒng)計學處理。
結果如表1所示，心肌缺血6小時后，模型組大鼠心肌出現(xiàn)明顯的灶狀缺血區(qū)，達到25％左右。丹參水溶性成分組(30mg/kg)、丹參脂溶性成分組(30mg/kg)組未能降低肢體導聯(lián)心電圖J點的升高、減少缺血面積；丹參水溶性成分組(63mg/kg)、丹參脂溶性成分組(63mg/kg)組均在一定程度上降低肢體導聯(lián)心電圖J點的升高、減少缺血面積(與模型組比較，p＜0.05)；組合物劑量組丹參水溶性成分組(57.3mg/kg)+丹參脂溶性成分組(5.7mg/kg)、組合物劑量組丹參水溶性成分組(59mg/kg)+丹參脂溶性成分組(4mg/kg)、組合物劑量組丹參水溶性成分組(60mg/kg)+丹參脂溶性成分組(3mg/kg)顯著地降低肢體導聯(lián)心電圖J點的升高、減少缺血面積(與模型組比較，p＜0.01)；組合物劑量組丹參水溶性成分組(57.3mg/kg)+丹參脂溶性成分組(5.7mg/kg)、組合物劑量組丹參水溶性成分組(59mg/kg)+丹參脂溶性成分組(4mg/kg)、組合物劑量組丹參水溶性成分組(60mg/kg)+丹參脂溶性成分組(3mg/kg)對肢體導聯(lián)心電圖J點的升高、減少缺血面積與丹參水溶性成分組(63mg/kg)、丹參脂溶性成分組(63mg/kg)比較亦有顯著性差異(p＜0.05)。
表1 丹參水溶性成分、丹參脂溶性成分、丹參水溶性成分和丹參脂溶性成分組合物對大鼠心肌缺血損傷的影響

與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。
與丹參水溶性成分中劑量組比較，#P＜0.05；與丹參脂溶性成分中劑量組比較，MP＜0.05試驗例2 藥物組合物對大鼠心肌缺血損傷的影響材料傳統(tǒng)香丹注射液丹參100g、降香1000g按照標準號WS-11489(ZD-1489)-2002方法提取、按注射液制備工藝制備，丹參提取率為12.0％，降香為0.02％，制成1000ml；丹參提取物、降香油按制備例1、5方法制備；丹參提取物與降香油組合物稱取丹參提取物、降香油適量，按試驗要求配制需要的比例與濃度。
在同生藥劑量下香丹注射液1.0mL/kg相當于本藥物組合物丹參提取物20mg/kg+降香油20mg/kg。
氯化硝基四氮唑藍(N-BT)，由軍事醫(yī)學科學院藥材供應站提供。
實驗動物普通級SD大鼠，雄性，體重280g-350g，山東省天然藥物工程技術研究中心動物實驗中心提供。合格證號魯動質(zhì)字200106005號。
方法與結果
動物隨機分為模型組(生理鹽水)、硝苯地平組(6mg/kg)、香丹注射液1.0mL/kg組、香丹注射液2.0mL/kg組、丹參提取物組(20mg/kg)、丹參提取物組(40mg/kg)、降香油組(20mg/kg)、降香油組(40mg/kg)、丹參提取物(4mg/kg)+降香油(36mg/kg)劑量組、丹參提取物(36mg/kg)+降香油(4mg/kg)劑量組、丹參提取物(6.7mg/kg)+降香油(33.3mg/kg)劑量組、丹參提取物(33.3mg/kg)+降香油(16.7mg/kg)劑量組、丹參提取物(20mg/kg)+降香油(20mg/kg)劑量組、丹參提取物(13.3mg/kg)+降香油(26.7mg/kg)劑量組、丹參提取物(26.7mg/kg)+降香油(13.3mg/kg)劑量組、丹參提取物(100mg/kg)+降香油(100mg/kg)劑量組、丹參提取物(200mg/kg)+降香油(200mg/kg)劑量組、丹參提取物(400mg/kg)+降香油(400mg/kg)劑量組。每組10只。硝苯地平組在麻醉前灌胃給藥，其余各組連續(xù)灌胃給藥3天，末次給藥前16小時禁食。ip.烏拉坦(1.2g/kg)麻醉，測肢體II導聯(lián)心電圖。剪去左胸前皮毛，碘酒及酒精消毒，沿胸骨左緣1cm處，剪開胸壁肌肉及二條肋骨，迅速打開胸腔，暴露心臟，在動脈圓錐與左心耳之間結扎左冠狀動脈，立即將心臟放回，排擠出胸腔空氣，用止血鉗閉合胸腔，造成大鼠急性心肌缺血模型記錄給藥前及給藥后1.5h、3h心電圖，測量心電圖J點的升高值，6h后取出心臟，以冷生理鹽水洗凈后，-20℃冰箱冷凍過夜。次日，將冷凍的心臟由結扎處至心尖部等厚切成5片，浸入新鮮配制的0.25％N-BT磷酸緩沖液(pH 7.4)中。37℃水浴振搖10～15min。用濾紙吸干切片表面的染色液，分離染色部分和未染色部分，稱重，記算梗死面積。梗死面積(％)＝梗死部分重量/(非梗死部分重量+梗死部分重量)×100％。數(shù)據(jù)用 表示，以組間t檢驗進行統(tǒng)計學處理。
結果如表2所示，心肌缺血6小時后，模型組大鼠心肌出現(xiàn)明顯的灶狀缺血區(qū)，達到26％左右。丹參提取物20mg/kg、降香油組20mg/kg、香丹注射液1.0mL/kg組未能降低肢體導聯(lián)心電圖J點的升高、減少缺血面積；丹參提取物40mg/kg、降香油40mg/kg、香丹注射液2.0mL/kg組均在一定程度上降低肢體導聯(lián)心電圖J點的升高、減少缺血面積(與模型組比較，p＜0.05)；組合物劑量組丹參提取物(4mg/kg)+降香油(36mg/kg)、組合物劑量組丹參提取物(6.7mg/kg)+降香油(33.3mg/kg)、組合物劑量組丹參提取物(36mg/kg)+降香油(4mg/kg)、組合物劑量組丹參提取物(33.3mg/kg)+降香油(6.7mg/kg)、組合物劑量組丹參提取物(20mg/kg)+降香油(20mg/kg)、組合物劑量組丹參提取物(13.3mg/kg)+降香油(26.7mg/kg)、組合物劑量組丹參提取物(26.7mg/kg)+降香油(13.3mg/kg)顯著地降低肢體導聯(lián)心電圖J點的升高、減少缺血面積(與模型組比較，p＜0.01)；組合物劑量組丹參提取物(4mg/kg)+降香油(36mg/kg)、組合物劑量組丹參提取物(6.7mg/kg)+降香油(33.3mg/kg)、組合物劑量組丹參提取物(36mg/kg)+降香油(4mg/kg)、組合物劑量組丹參提取物(33.3mg/kg)+降香油(6.7mg/kg)、組合物劑量組丹參提取物(20mg/kg)+降香油(20mg/kg)、組合物劑量組丹參提取物(13.3mg/kg)+降香油(26.7mg/kg)、組合物劑量組丹參提取物(26.7mg/kg)+降香油(13.3mg/kg)對肢體導聯(lián)心電圖J點的升高、減少缺血面積與丹參提取物40mg/kg組、降香油40mg/kg組比較亦有顯著性差異(p＜0.05)；組合物劑量組8丹參提取物(100mg/kg)+降香油(100mg/kg)、組合物劑量組9丹參提取物(200mg/kg)+降香油(200mg/kg)、組合物劑量組10丹參提取物(400mg/kg)+降香油(400mg/kg)極其顯著地降低肢體導聯(lián)心電圖J點的升高、減少缺血面積(與模型組比較，p＜0.001)；組合物劑量組9丹參提取物(200mg/kg)+降香油(200mg/kg)與組合物劑量組10丹參提取物(400mg/kg)+降香油(400mg/kg)比較，對肢體導聯(lián)心電圖J點的升高及缺血面積無明顯差異(p＞0.05)。
組合物劑量組丹參提取物(20mg/kg)+降香油(20mg/kg)對肢體導聯(lián)心電圖J點的升高、減少缺血面積與香丹注射液組2組比較亦有顯著性差異(p＜0.05)。
表2 丹參提取物、降香油、丹參提取物和降香油組合物對大鼠心肌缺血損傷的影響()

與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。
與丹參提取物中劑量組比較，#P＜0.05；與降香油中劑量組比較，Mp＜0.05；與香丹注射液組2比較，aP＜0.05。
權利要求
1.一種由丹參提取物和降香油組成的藥物組合物，其中丹參提取物由丹參脂溶性成分和水溶性成分組成，100％＞丹參酮含量≥15％，100％＞丹參酚酸含量≥20％，脂溶性成分與水溶性成分的比為1∶10-20，丹參提取物和降香油的比為1∶0.11-9。
2.根據(jù)權利要求1所述的藥物組合物，優(yōu)選為丹參提取物中100％＞丹參酮含量≥50％，100％＞丹參酚酸含量≥50％。
3.根據(jù)權利要求1或2所述的藥物組合物，可以以軟膠囊、滴丸、片劑、膠囊劑、顆粒劑、口服液或微粒劑的形式存在。
4.根據(jù)權利要求3所述的藥物組合物，優(yōu)選為軟膠囊、滴丸。
5.權利要求1或2所述的藥物組合物在制備治療或預防冠心病、心絞痛等藥物中的應用。
6.根據(jù)權利要求5所述的應用，其使用劑量范圍是400mg～8000mg。
7.根據(jù)權利要求6所述的應用，優(yōu)選為400mg～4000mg。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種由丹參提取物和降香提取物組成的藥物組合物和用途，具體涉及一種由丹參水溶性成分、脂溶性成分和降香揮發(fā)油組成的藥物組合物以及該組合物在制備治療或預防冠心病、心絞痛等心肌缺血疾病方面的應用。
文檔編號A61K9/14GK101023983SQ20061004247
公開日2007年8月29日 申請日期2006年2月23日 優(yōu)先權日2006年2月23日
發(fā)明者雷慶忠, 蔣王林 申請人:山東綠葉天然藥物研究開發(fā)有限公司