專利名稱：一種治療疼痛的藥物組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥物組合物及其制備方法和質(zhì)量控制方法，特別涉及一種治療疼痛的藥物組合物及其制備方法和質(zhì)量控制方法。
背景技術(shù)：
腰腿痛是一種常見病、多發(fā)病，中醫(yī)將其歸屬為痹癥。疼痛是這類疾病給患者造成身心痛苦和生活不便的主要臨床癥狀。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，目前已收載入國家標(biāo)準(zhǔn)的治療腰腿痛的口服和外用制劑近200余種，但是其中同一藥物組合兼有口服和外用兩種制劑的藥物并不多見。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種藥物組合物及其制劑的制備方法，本發(fā)明另一目的在于提供該中藥組合物的用途及其制劑的質(zhì)量控制方法。
本發(fā)明目的是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)本發(fā)明藥物組合物是由如下原料藥組成馬錢子200-500重量份土鱉蟲80-150重量份川牛膝80-150重量份 麻黃80-150重量份乳香80-150重量份 沒藥80-150重量份僵蠶80-150重量份 蒼術(shù)80-150重量份全蝎80-150重量份 甘草80-150重量份。
本發(fā)明藥物組合物原料藥的最佳配比如下馬錢子460重量份土鱉蟲84重量份川牛膝143重量份麻黃86重量份醋制乳香140重量份 醋制沒藥82重量份麩炒僵蠶145重量份 麩炒蒼術(shù)84重量份全蝎139重量份甘草84重量份。
本發(fā)明藥物組合物原料藥的最佳配比如下馬錢子250重量份 土鱉蟲140重量份川牛膝82重量份麻黃142重量份 醋制乳香84重量份 醋制沒藥139重量份麩炒僵蠶86重量份 麩炒蒼術(shù)144重量份 全蝎82重量份甘草145重量份。
本發(fā)明藥物組合物原料藥的最佳配比如下馬錢子316重量份 土鱉蟲84重量份川牛膝84重量份麻黃84重量份 醋制乳香84重量份 醋制沒藥84重量份麩炒僵蠶84重量份 麩炒蒼術(shù)84重量份 全蝎84重量份甘草84重量份。
按藥劑學(xué)方法，可以將上述原料藥制備成各種臨床或藥學(xué)上可接受的劑型，包括但不限于如下劑型當(dāng)中的一種如片劑、硬膠囊、軟膠囊、緩釋片、控釋片、緩釋膠囊、控釋膠囊，口服溶液劑、口服混懸劑、口服乳劑、膠漿劑、口服液、乳劑、膠體溶液、合劑、酊劑、滴劑、混懸滴劑、丸劑、滴丸、顆粒劑、腸溶顆粒劑、散劑、巴布膏劑或橡膠膏劑等。
本發(fā)明上述藥物組合物中的馬錢子可以用450-500重量份的調(diào)制馬錢子粉替代，優(yōu)選調(diào)制馬錢子粉460重量份、480重量份或490重量份。
本發(fā)明的調(diào)制馬錢子粉按照藥典中的常規(guī)方法，或如下方法制備每取制馬錢子100重量份，粉碎成細(xì)粉，照中華人民共和國藥典馬錢子的含量測定項(xiàng)下方法測定士的寧含量后，加淀粉5-100重量份，使士的寧C21H22N202含量按干燥品計(jì)為1.09％～1.15％后，混勻，即制成調(diào)制馬錢子粉。
按藥劑學(xué)方法，可以將含有調(diào)制馬錢子粉的上述原料藥制備成各種臨床或藥學(xué)上可接受的劑型，包括但不限于如下劑型當(dāng)中的一種如片劑、硬膠囊、軟膠囊、緩釋片、控釋片、緩釋膠囊、控釋膠囊，口服溶液劑、口服混懸劑、口服乳劑、膠漿劑、口服液、乳劑、膠體溶液、合劑、酊劑、滴劑、混懸滴劑、丸劑、滴丸、顆粒劑、腸溶顆粒劑、散劑、粉劑、巴布膏劑或橡膠膏劑等。
本發(fā)明藥物組合物制劑的制備工藝如下
在每100重量份的調(diào)制馬錢子粉中加入5％-15％淀粉漿60-100重量份，制成顆粒，干燥；取上述顆粒，用50％-70％乙醇作溶劑，進(jìn)行滲漉，收集漉液，回收乙醇，減壓濃縮至相對密度在80℃為1.30～1.35的稠膏備用；其余土鱉蟲九味原料藥，破碎，用85％-95％乙醇回流提取2-4次，每次1.5-2.5小時(shí)，合并提取液，濾過，濾液濃縮至相對密度在60℃下為1.15～1.20的清膏；清膏與上述稠膏合并，加常規(guī)輔料制成常規(guī)劑型。
本發(fā)明藥物組合物制成橡膠膏劑，其中橡膠膏劑的基質(zhì)是由如下原料按重量份組成橡膠25-40重量份 羊毛脂4-8重量份 白油2-5重量份 凡士林2-4重量份 氧化鋅25-35重量份 氫化松香15-25重量份 薄荷腦1.5-2.5重量份 防老劑2，6-二叔丁基對甲酚1-1.5重量份，120#汽油90-150重量份。
本發(fā)明藥物組合物的橡膠膏劑的制備工藝如下在每100重量份的調(diào)制馬錢子粉中加入10％淀粉漿80重量份，制成顆粒，干燥；取上述顆粒，用60％乙醇作溶劑，進(jìn)行滲漉，收集漉液，回收乙醇，減壓濃縮至相對密度在80℃為1.30～1.35的稠膏備用；其余土鱉蟲九味原料藥，破碎，用90％乙醇回流提取3次，每次2小時(shí)，合并提取液，濾過，濾液濃縮至相對密度在60℃下為1.15～1.20的清膏；清膏與上述稠膏合并，另加3.0-3.4倍重的由橡膠、松香等制成的基質(zhì)，制成涂料，涂膏、切段、蓋襯、切片，包裝制成。
本發(fā)明橡膠膏劑的質(zhì)量控制方法包括如下方法中一種或幾種A、取本藥物組合物橡膠膏劑2片，撕去蓋襯，剪碎，加入3→100硫酸溶液100ml，超聲10-20分鐘，浸泡過夜，濾過，濾液加氨水調(diào)pH9～10，用氯仿提取3次，每次15-25ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)勇确?ml使溶解，作為供試品溶液。取馬錢子堿對照品，加氯仿制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以3-5∶4-6∶0.5-0.7∶0.3-0.5甲苯-丙酮-乙醇-濃氨試液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
B、取本藥物組合物橡膠膏劑2片，撕去蓋襯，剪碎，加入3→100硫酸溶液100ml，超聲10-20分鐘，浸泡過夜，濾過，濾液加氨水調(diào)pH9～10，用氯仿提取3次，每次15-25ml，合并氯仿液，加入1→10鹽酸甲醇溶液1ml，蒸干，加甲醇0.5ml使溶解，作為供試品溶液。另取鹽酸麻黃堿對照品加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對照品溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以15-25∶3-5∶0.3-0.6氯仿-甲醇-濃氨試液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液，于105℃烘至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
C、取本藥物組合物橡膠膏劑10片，去掉蓋襯，剪碎，置500ml圓底燒瓶中，加水300ml，連接揮發(fā)油提取器，自測定器頂端加水至刻度，并溢流入瓶中為止，再加入正己烷1ml，微沸提取1-3小時(shí)，放冷，分取正己烷，作為供試品溶液。水層保留供川牛膝鑒別用。另取蒼術(shù)對照藥材0.5g，加正己烷2ml，超聲提取10-20分鐘，濾過，濾液作為對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液10μl、對照藥材溶液5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以60～90℃石油醚-8-12∶0.1乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以3％-7％二甲氨基苯甲醛的5％-15％硫酸乙醇溶液，在100-110℃加熱至斑點(diǎn)清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上有相同顏色的污綠色斑點(diǎn)。
D、取鑒別C項(xiàng)下的水層，濾過，濾液濃縮至約80ml，濾過，殘?jiān)盟礈?次，每次5-15ml，合并濾液，加乙醚提取3次，每次20-40ml，棄去乙醚液，水溶液用氯仿振搖提取4次，每次20-40ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)勇确?ml使溶解，作為供試品溶液。另取川牛膝對照藥材1g，加90％乙醇10ml，加熱回流1-3小時(shí)，濾過，濾液濃縮至無醇味，加水100ml，加熱回流0.5-1.5小時(shí)，濾過，濾液加乙醚提取，自“加乙醚提取3次”起同供試品溶液操作，制成對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以6-10∶2-6∶1苯-氯仿-丙酮為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的亮藍(lán)色熒光斑點(diǎn)。
E、取本藥物組合物橡膠膏劑3片，去掉蓋襯，剪碎，加10％乙醇40-60ml，加1mol/L鹽酸溶液10ml加熱回流0.5-1.5小時(shí)，濾過，濾液中加濃鹽酸使其濃度約為5％，加熱回流1-3小時(shí)，濾過，濾液加氯仿振搖提取3次，每次5-15ml，合并氯仿提取液，用5％碳酸鈉溶液提取3次，每次10ml，合并堿液，用乙醚提取3次，每次3-8ml，棄去乙醚液，用鹽酸調(diào)pH為1～2，用氯仿振搖提取3次，每次5-15ml，合并氯仿液，蒸干，加無水乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取甘草對照藥材0.2g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)樣于同一硅膠G薄層板上，以3-7∶10-20∶4-10∶0.5，30～60℃石油醚-甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以3-7％香草醛的5-15％硫酸乙醇溶液，105℃加熱至斑點(diǎn)清晰。樣品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的黃色斑點(diǎn)。
F、色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以80-120∶450-500∶20-50甲醇-水-冰醋酸，用三乙胺調(diào)節(jié)pH值至2.5-3.5，作為流動相；檢測波長為254nm。理論板數(shù)按士的寧峰計(jì)算應(yīng)不低于5000。對照品溶液的制備精密稱取士的寧對照品適量，加流動相制成每1ml約含2-3μg的溶液，即得。供試品溶液的制備取本藥物組合物橡膠膏1/4片，剪碎，置磨口三角瓶中，加氯仿15-25ml，濃氨水1.0ml，密塞，超聲處理5-15分鐘。提取液移入分液漏斗中，用20-40ml氯仿分次洗滌三角瓶，洗液并入分液漏斗中，用0.5mol/L硫酸溶液提取5次，每次5-15ml，合并硫酸液，加濃氨試液調(diào)節(jié)pH值至9～10，用氯仿提取5次，每次5-15ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)恿鲃酉嗳芙?，轉(zhuǎn)移至50ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，濾過。精密量取續(xù)濾液1ml置10ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。照高效液相色譜法測定，分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各15-25μl，注入液相色譜儀，測定，即得；每片橡膠膏中含士的寧C21H22N2O2應(yīng)為3.5～6.5mg。
質(zhì)量控制方法優(yōu)選包括如下方法中一種或幾種
A、取本藥物組合物橡膠膏劑2片，撕去蓋襯，剪碎，加入3→100硫酸溶液100ml，超聲15分鐘，浸泡過夜，濾過，濾液加氨水調(diào)pH9～10，用氯仿提取3次，每次20ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)勇确?ml使溶解，作為供試品溶液。取馬錢子堿對照品，加氯仿制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以4∶5∶0.6∶0.4甲苯-丙酮-乙醇-濃氨試液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
B、取本藥物組合物橡膠膏劑2片，撕去蓋襯，剪碎，加入3→100硫酸溶液100ml，超聲15分鐘，浸泡過夜，濾過，濾液加氨水調(diào)pH9～10，用氯仿提取3次，每次20ml，合并氯仿液，加入1→10鹽酸甲醇溶液1ml，蒸干，加甲醇0.5ml使溶解，作為供試品溶液。另取鹽酸麻黃堿對照品加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對照品溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以20∶4∶0.5氯仿-甲醇-濃氨試液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液，于105℃烘至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
C、取本藥物組合物橡膠膏劑10片，去掉蓋襯，剪碎，置500ml圓底燒瓶中，加水300ml，連接揮發(fā)油提取器，自測定器頂端加水至刻度，并溢流入瓶中為止，再加入正己烷1ml，微沸提取2小時(shí)，放冷，分取正己烷，作為供試品溶液。水層保留供川牛膝鑒別用。另取蒼術(shù)對照藥材0.5g，加正己烷2ml，超聲提取15分鐘，濾過，濾液作為對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液10μl、對照藥材溶液5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以10∶0.1，60～90℃石油醚-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％二甲氨基苯甲醛的10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上有相同顏色的污綠色斑點(diǎn)。
D、取鑒別C項(xiàng)下的水層，濾過，濾液濃縮至約80ml，濾過，殘?jiān)盟礈?次，每次10ml，合并濾液，加乙醚提取3次，每次30ml，棄去乙醚液，水溶液用氯仿振搖提取4次，每次30ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)勇确?ml使溶解，作為供試品溶液。另取川牛膝對照藥材1g，加90％乙醇10ml，加熱回流2小時(shí)，濾過，濾液濃縮至無醇味，加水100ml，加熱回流1小時(shí)，濾過，濾液加乙醚提取，自“加乙醚提取3次”起同供試品溶液操作，制成對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以8∶4∶1苯-氯仿-丙酮為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的亮藍(lán)色熒光斑點(diǎn)。
E、取本藥物組合物橡膠膏劑3片，去掉蓋襯，剪碎，加10％乙醇50ml，加1mol/L鹽酸溶液10ml加熱回流1小時(shí)，濾過，濾液中加濃鹽酸使其濃度約為5％，加熱回流2小時(shí)，濾過，濾液加氯仿振搖提取3次，每次10ml，合并氯仿提取液，用5％碳酸鈉溶液提取3次，每次10ml，合并堿液，用乙醚提取3次，每次5ml，棄去乙醚液，用鹽酸調(diào)pH為1～2，用氯仿振搖提取3次，每次10ml，合并氯仿液，蒸干，加無水乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取甘草對照藥材0.2g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)樣于同一硅膠G薄層板上，以5∶15∶7∶0.5，30～60℃石油醚-甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，105℃加熱至斑點(diǎn)清晰。樣品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的黃色斑點(diǎn)。
F、色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以100∶480∶35甲醇-水-冰醋酸，用三乙胺調(diào)節(jié)pH值至3.1，作為流動相；檢測波長為254nm；理論板數(shù)按士的寧峰計(jì)算應(yīng)不低于5000；對照品溶液的制備精密稱取士的寧對照品適量，加流動相制成每1ml約含2.5μg的溶液，即得；供試品溶液的制備取本藥物組合物橡膠膏1/4片，剪碎，置磨口三角瓶中，加氯仿20ml，濃氨水1.0ml，密塞，超聲處理10分鐘；提取液移入分液漏斗中，用30ml氯仿分次洗滌三角瓶，洗液并入分液漏斗中，用0.5mol/L硫酸溶液提取5次，每次10ml，合并硫酸液，加濃氨試液調(diào)節(jié)pH值至9～10，用氯仿提取5次，每次10ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)恿鲃酉嗳芙?，轉(zhuǎn)移至50ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，濾過；精密量取續(xù)濾液1ml置10ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得；照高效液相色譜法測定，分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得；每片橡膠膏中含士的寧C21H22N2O2為4.6～5.8mg。
本藥物組合物帖膏是在專用于治療腰腿痛和風(fēng)濕性關(guān)節(jié)痛的藥物本藥物組合物膠囊的基礎(chǔ)上，經(jīng)改變給藥途徑和制劑工藝的新的中藥外用制劑。本藥物組合物膠囊遵從傳統(tǒng)中醫(yī)理論科學(xué)組方，逐外侵寒、濕之邪，溫通經(jīng)絡(luò)止痛，實(shí)、瘀兩證兼治。從選方、組方到批準(zhǔn)上市銷售，至今歷經(jīng)30多年的臨床實(shí)踐應(yīng)用，證明該產(chǎn)品對主治的各種疾病具有良好的治療效果。在多家醫(yī)院進(jìn)行的治療腰腿痛病證臨床實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，總有效率達(dá)90％以上。
河北省遵化醫(yī)院在臨床實(shí)踐中，采用本藥物組合物膠囊內(nèi)服結(jié)合外敷治療骨關(guān)節(jié)炎300例，痊愈98例(32.67％)，顯效177例(59.00％)，有效16例(5.33％)，無效9例(3.00％)，總有效率97.00％；對照組150例，痊愈14例(9.33％)，顯效47例(31.33％)，有效58例(38.66％)，無效31例(20.66％)，總有效率79.33％兩組比較有顯著的差異。提示本藥物組合物膠囊外用同樣具有治療效果，且與口服用藥具有協(xié)同作用。
腰腿痛為局部癥狀，本藥物組合物帖膏直接用于病患部位，藥物的有效成分經(jīng)皮吸收后直接作用在病患部位發(fā)揮治療作用，使療效更為迅速和顯著，使用也更方便。本藥物組合物帖膏與本藥物組合物膠囊聯(lián)合使用可相互協(xié)同，進(jìn)一步提高治療效果。
在現(xiàn)有的成藥制劑中，鮮有將同一種藥物組合制成內(nèi)服和外用的不同制劑協(xié)同使用，依據(jù)已有的臨床應(yīng)用實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，本藥物組合物帖膏除具有顯著的治療作用外，還可與本藥物組合物膠囊內(nèi)外和用，提高治療效果，具備一定的新穎性和創(chuàng)新性。
本藥物組合物膠囊具有消腫止痛、疏散寒邪、溫經(jīng)通絡(luò)之功效，用于腰椎間盤突出癥、腰椎增生癥、坐骨神經(jīng)痛、腰肌勞損、腰肌纖維炎，慢性風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等病癥，臨床療效確切。由于其主治病癥多發(fā)生在局部，因而臨床上也有將膠囊內(nèi)容物調(diào)成糊后外用以達(dá)到治療目的的情況。本藥物組合物膠囊處方中各藥味有效成分多為脂溶性成分，具有一定的皮膚滲透性，故外用有效是有可能的。經(jīng)藥效學(xué)和急性毒性研究結(jié)果表明相同劑量下，本藥物組合物外用的藥效與本藥物組合物膠囊(口服給藥)相當(dāng)，而外用較口服給藥LD50提高了許多倍，即在藥效保證的前提下，安全性顯著提高。
下面實(shí)驗(yàn)例用于進(jìn)一步說明但不限于本發(fā)明。
實(shí)驗(yàn)例1提取工藝預(yù)試驗(yàn)選擇水、乙醇兩種常用的中藥提取溶媒，分別進(jìn)行了處方中藥材提取工藝實(shí)驗(yàn)研究，以出膏率為制劑學(xué)評價(jià)指標(biāo)；以本藥物組合物膠囊為對照藥，鎮(zhèn)痛(對光電刺激小鼠甩尾的影響、對小鼠醋酸扭體的影響)、抗炎(小鼠角叉菜膠足趾腫)作用為藥效學(xué)評價(jià)指標(biāo)，對不同提取工藝制備的提取物進(jìn)行了綜合評價(jià)。
試驗(yàn)結(jié)果制劑學(xué)評價(jià)醇提工藝的出膏率低于水提工藝，適宜于制備橡膠膏劑。
藥效學(xué)評價(jià)本藥物組合物膠囊具有很好的鎮(zhèn)痛抗炎作用；相當(dāng)于同等生藥給藥量下，兩種提取工藝的提取物外用給藥，鎮(zhèn)痛、抗炎作用不低于原劑型；醇提物的鎮(zhèn)痛作用優(yōu)于水提物，抗炎作用二者無差別。結(jié)論本藥物組合物橡膠膏藥材提取應(yīng)采用醇提工藝。
實(shí)驗(yàn)例2馬錢子粉提取試驗(yàn)研究馬錢子粉為80目以上細(xì)粉，直接投料進(jìn)行滲漉速率很慢。為解決這一問題，用10％的淀粉漿為粘合劑將馬錢子粉制成20目的顆粒后再進(jìn)行滲漉，使得滲漉可在正常速率下進(jìn)行。
以馬錢子粉中主要藥效成分士的寧的轉(zhuǎn)移率為工藝評價(jià)指標(biāo)，對提取溶媒的酒精度、溶媒用量、滲漉速率等關(guān)鍵工藝參數(shù)進(jìn)行了正交優(yōu)選試驗(yàn)。確定馬錢子粉提取工藝為用16倍馬錢子粉投料重量的60％乙醇滲漉。滲漉速率約5ml/kg/min。按此工藝提取馬錢子粉，士的寧轉(zhuǎn)移率平均可達(dá)96％。
實(shí)驗(yàn)例3土鱉蟲等九味藥提取實(shí)驗(yàn)研究將不同酒精度的溶媒在相同條件下的九味藥提取物按處方中的比例加入馬錢子粉提取浸膏，以鎮(zhèn)痛(小鼠醋酸扭體法)、抗炎(小鼠角叉菜膠足趾腫)藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)為評價(jià)指標(biāo)，確定最佳提取溶媒。提取最佳溶媒為90％乙醇；對溶媒加入量、提取時(shí)間、提取次數(shù)等工藝參數(shù)組合進(jìn)行正交試驗(yàn)，以出膏量為評價(jià)指標(biāo)篩選工藝參數(shù)。經(jīng)優(yōu)選確定土鱉蟲等九味藥的提取工藝為用4倍量的90％乙醇回流提取3次，每次2小時(shí)。
濃縮工藝減壓濃縮，馬錢子粉浸膏濃縮至1.30-1.35(80℃)，九味藥濃縮至1.15-1.20(60℃)。
實(shí)驗(yàn)例4提取中試實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)行了3批(4萬貼生藥量/批，投料量馬錢子粉19.2kg/批；土鱉蟲等九味藥30.24kg/批)提取中試實(shí)驗(yàn)研究。馬錢子粉提取試驗(yàn)士的寧平均轉(zhuǎn)移率達(dá)89.79％；九味藥提取試驗(yàn)出膏量平均23.44％。與小試結(jié)果基本接近。
實(shí)驗(yàn)例5制劑成型工藝研究貼劑基質(zhì)的確定參照橡皮膏各成分的配比，加入藥物浸膏，以粘性、耐熱性為評價(jià)指標(biāo)調(diào)整基質(zhì)中各成分的比例，選擇確定最佳的基質(zhì)成分配比和藥物浸膏與基質(zhì)配比。根據(jù)處方生藥量、提取出膏率、浸膏和基質(zhì)配比確定橡膠膏的含膏量應(yīng)不少于1.6g/100cm2。
裱褙材料的選擇將橡膠膏膠漿分別涂布在白布和膚色彈力布上，比較舒適度，考察裱褙材料對含量測定的影響。結(jié)果選擇膚色彈力布作為橡膠膏的裱褙材料。
制備工藝研究參照現(xiàn)有的橡膠膏劑生產(chǎn)通用工藝規(guī)程，制定了基質(zhì)制備工藝和橡膠膏制備工藝。
小樣試制在實(shí)驗(yàn)室制備了三批本藥物組合物橡膠膏，以粘性和耐熱性為評價(jià)指標(biāo)，進(jìn)行比較，確定浸膏和基質(zhì)在1∶3.3的配比下制備的橡膠膏比較理想。
橡膠膏中試試驗(yàn)研究進(jìn)行了3批，理論產(chǎn)量為4萬貼/批的藥材提取和橡膠膏生產(chǎn)中試試驗(yàn)研究。三批橡膠膏成品率分別為85.0％，83.5％，87.0％。經(jīng)檢驗(yàn)符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定。
實(shí)驗(yàn)例6質(zhì)量研究實(shí)驗(yàn)處方的確定
本藥物組合物膠囊處方

本藥物組合物橡膠膏是在本藥物組合物膠囊處方基礎(chǔ)上改變工藝和給藥途徑開發(fā)研制的新藥。研究結(jié)果表明，同等生藥含量下橡膠膏和膠囊劑的主要藥效相當(dāng)，故將本藥物組合物橡膠膏每片含生藥量確定為與本藥物組合物膠囊的一日劑量相同(與4粒膠囊所含生藥量相同)。相應(yīng)的橡膠膏處方為

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究對橡膠膏中士的寧的含量測定方法進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究，采用反相高效液相法測定本藥物組合物橡膠膏中士的寧含量的檢測方法，確定了橡膠膏中士的寧含量限度；研究制定了橡膠膏中馬錢子、麻黃、蒼術(shù)、川牛膝、甘草中指標(biāo)成分的薄層鑒別方法。
穩(wěn)定性試驗(yàn)研究以三批中試樣品為實(shí)驗(yàn)材料，在40℃，相對濕度70％的環(huán)境中進(jìn)行了加速穩(wěn)定性試驗(yàn)研究和正常環(huán)境下的穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)研究。已完成的6個(gè)月初步穩(wěn)定項(xiàng)實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，橡膠膏的各項(xiàng)質(zhì)量指標(biāo)穩(wěn)定，符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的要求。
實(shí)驗(yàn)例7藥理藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)研究研究內(nèi)容試驗(yàn)藥本藥物組合物橡膠膏中藥浸膏；對照藥本藥物組合物膠囊；賦性劑對照物；給藥劑量0.075克生藥/kg、0.15g生藥/kg、0.3g生藥/kg(相當(dāng)臨床劑量2.5、5、10倍)。
1鎮(zhèn)痛試驗(yàn)研究進(jìn)行了對小鼠醋酸扭體反映的影響；對大鼠水浴甩尾反應(yīng)的影響；對小鼠光電刺激甩尾反映的影響三種鎮(zhèn)痛試驗(yàn)研究?？寡讓?shí)驗(yàn)研究進(jìn)行了對巴豆油性小鼠耳腫的影響；對大鼠角叉菜膠足腫的影響；對大鼠棉球肉芽腫的影響的三種抗炎試驗(yàn)研究。
2活血化淤實(shí)驗(yàn)研究觀察對大鼠紅細(xì)胞壓積，高切變速率、低切變速率下全血粘度的影響。
3對自身血腫吸收的影響觀察對小鼠自身血腫吸收的影響.
研究結(jié)果該藥的主要藥效學(xué)試驗(yàn)顯示其作用強(qiáng)度不低于相同劑量的本藥物組合物膠囊。小鼠醋酸扭體試驗(yàn)顯示其對動物扭體的抑制率分別為69.2％、53.8％、38.5％，顯示出很強(qiáng)的鎮(zhèn)痛效果；甩尾試驗(yàn)表明該藥起效快，藥后0.5小時(shí)即顯示出明顯的鎮(zhèn)痛作用，鎮(zhèn)痛試驗(yàn)證明本藥物組合物橡膠膏能夠非常明顯地提高化學(xué)刺激、光熱刺激、溫?zé)岽碳に鹛弁吹耐撮撝?。抗炎試?yàn)顯示，該藥對3種急、慢性實(shí)驗(yàn)性炎癥模型有非常顯著的抗炎作用，且有起效時(shí)間快，維持藥效時(shí)間長的特點(diǎn)。同時(shí)血液流變學(xué)試驗(yàn)顯示藥物還有一定的活血化瘀作用，表明藥物通過活血化瘀起到舒筋活血、活血止痛的作用，這也利于受損組織的恢復(fù)。對血腫吸收試驗(yàn)顯示，藥物能夠促進(jìn)自身血腫的吸收，加快受損組織修復(fù)。提示該藥外用還具有治療跌打損傷，消除淤血腫痛的作用。
試驗(yàn)結(jié)論本藥物組合物橡膠膏同本藥物組合物膠囊一樣，主要通過其促進(jìn)受損組織血腫吸收、抗炎鎮(zhèn)痛及一定的活血化瘀作用來治療各種軟組織損傷或慢性勞損引起的疼痛，試驗(yàn)結(jié)果與該藥的功能主治亦相吻合，為該藥在臨床上使用提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
具體實(shí)施例如下實(shí)施例1橡膠膏劑制備如下取馬錢子316g 土鱉蟲84g 川牛膝84g 麻黃84g 醋制乳香84g醋制沒藥84g 麩炒僵蠶84g 麩炒蒼術(shù)84g 全蝎84g 甘草84g，其中馬錢子按如下方法制成調(diào)制馬錢子粉取馬錢子316g，粉碎成細(xì)粉，照中華人民共和國藥典馬錢子的含量測定項(xiàng)下方法測定士的寧含量1.7％，然后加淀粉177g，使士的寧C21H22N2O2含量按干燥品計(jì)為1.09％后，混勻，即得調(diào)制馬錢子粉約493g。
調(diào)制馬錢子粉加入10％淀粉漿390g，制成顆粒，干燥；取上述顆粒，用60％乙醇作溶劑，進(jìn)行滲漉，收集漉液，回收乙醇，減壓濃縮至相對密度在80℃為1.30～1.35的稠膏備用。其余土鱉蟲等九味，破碎，用90％醇回流提取3次，每次2小時(shí)，合并提取液，濾過，濾液濃縮至相對密度在60℃為1.15～1.20的清膏。與上述稠膏合并，另加3.0～3.4倍重的由橡膠、松香等制成的基質(zhì)，制成涂料，進(jìn)行涂膏、切段、蓋襯、切片，制成1000片，包裝，即得。
實(shí)施例2橡膠膏劑制備如下調(diào)制馬錢子粉480g 土鱉蟲84g 川牛膝84g 麻黃84g 醋制乳香84g 醋制沒藥84g 麩炒僵蠶84g 麩炒蒼術(shù)84g 全蝎84g 甘草84g，調(diào)制馬錢子粉加入10％淀粉漿385g，制成顆粒，干燥；取上述顆粒，用60％乙醇作溶劑，進(jìn)行滲漉，收集漉液，回收乙醇，減壓濃縮至相對密度在80℃為1.30～1.35的稠膏備用。其余土鱉蟲等九味，破碎，用90％乙醇回流提取3次，每次2小時(shí)，合并提取液，濾過，濾液濃縮至相對密度在60℃為1.15～1.20的清膏。與上述稠膏合并，另加3.0～3.4倍重的由橡膠、松香等制成的基質(zhì)，制成涂料，進(jìn)行涂膏、切段、蓋襯、切片，制成1000片，包裝，即得。
實(shí)施例3顆粒劑的制備調(diào)制馬錢子粉460g 土鱉蟲84g 川牛膝143g 麻黃86g 醋制乳香140g 醋制沒藥82g 麩炒僵蠶145g 麩炒蒼術(shù)84g 全蝎139g 甘草84g，以上十味，調(diào)制馬錢子粉加入10％淀粉漿385g，制成顆粒，干燥；取上述顆粒，用60％乙醇作溶劑，進(jìn)行滲漉，收集漉液，回收乙醇，減壓濃縮至相對密度在80℃為1.30～1.35的稠膏備用。其余土鱉蟲等九味，破碎，用90％乙醇回流提取3次，每次2小時(shí)，合并提取液，濾過，濾液濃縮至相對密度在60℃為1.15～1.20的清膏。與上述稠膏合并，加常規(guī)輔料制成顆粒劑。
實(shí)施例4膠囊的制備調(diào)制馬錢子粉490g 土鱉蟲140g 川牛膝82g 麻黃142g 醋制乳香84g醋制沒藥139g 麩炒僵蠶86g麩炒蒼術(shù)144g 全蝎82g 甘草145g，加常規(guī)輔料，按常規(guī)方法制成裝膠囊。
實(shí)施例5片劑的制備調(diào)制馬錢子粉480g 土鱉蟲84g 川牛膝84g 麻黃84g 醋制乳香84g 醋制沒藥84g 麩炒僵蠶84g 麩炒蒼術(shù)84g 全蝎84g 甘草84g，加常規(guī)輔料，按常規(guī)方法制成片劑。
實(shí)施例6散劑的制備取馬錢子316g 土鱉蟲84g 川牛膝84g 麻黃84g 醋制乳香84g醋制沒藥84g 麩炒僵蠶84g 麩炒蒼術(shù)84g 全蝎84g 甘草84g，制成散劑，每袋3g。
實(shí)施例7口服溶液的制備取馬錢子250g 土鱉蟲140g 川牛膝82g 麻黃142g 醋制乳香84g醋制沒藥139g 麩炒僵蠶86g 麩炒蒼術(shù)144g 全蝎82g 甘草145g，加入溶劑、矯味劑、乳化劑等輔料，制成口服溶液，每瓶100ml。
實(shí)施例8緩釋片的制備取馬錢子316g 土鱉蟲84g 川牛膝84g 麻黃84g 醋制乳香84g醋制沒藥84g 麩炒僵蠶84g 麩炒蒼術(shù)84g 全蝎84g 甘草84g，將馬錢子制成調(diào)制的馬錢子粉，加入其它原料藥及輔料，按常規(guī)方法制成緩釋片。
實(shí)施例9控釋膠囊的制備取馬錢子316g 土鱉蟲84g 川牛膝84g 麻黃84g 醋制乳香84g醋制沒藥84g 麩炒僵蠶84g 麩炒蒼術(shù)84g 全蝎84g 甘草84g，加入輔料，按常規(guī)方法制成控釋膠囊，每粒0.3g。
實(shí)施例10滴丸的制備取馬錢子316g 土鱉蟲84g 川牛膝84g 麻黃84g 醋制乳香84g醋制沒藥84g 麩炒僵蠶84g 麩炒蒼術(shù)84g 全蝎84g 甘草84g，將馬錢子制成調(diào)制的馬錢子粉，加入其它原料藥及輔料，按常規(guī)方法制成滴丸。
實(shí)施例11質(zhì)量控制中的鑒別方法A.取實(shí)施例1的本藥物組合物橡膠膏劑2片，撕去蓋襯，剪碎，加入硫酸溶液(3→100)100ml，超聲15分鐘，浸泡過夜，濾過，濾液加氨水調(diào)pH9～10，用氯仿提取3次，每次20ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)勇确?ml使溶解，作為供試品溶液。取馬錢子堿對照品，加氯仿制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-丙酮-乙醇-濃氨試液(4∶5∶0.6∶0.4)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
B.取實(shí)施例1的本藥物組合物橡膠膏劑2片，撕去蓋襯，剪碎，加入硫酸溶液(3→100)100ml，超聲15分鐘，浸泡過夜，濾過，濾液加氨水調(diào)pH9～10，用氯仿提取3次，每次20ml，合并氯仿液，加入鹽酸甲醇溶液(1→10)1ml，蒸干，加甲醇0.5ml使溶解，作為供試品溶液。另取鹽酸麻黃堿對照品加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對照品溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-濃氨試液(20∶4∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液，于105℃烘至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
C.取實(shí)施例1的本藥物組合物橡膠膏劑10片，去掉蓋襯，剪碎，置500ml圓底燒瓶中，加水300ml，連接揮發(fā)油提取器，自測定器頂端加水至刻度，并溢流入瓶中為止，再加入正己烷1ml，微沸提取2小時(shí)，放冷，分取正己烷，作為供試品溶液。(水層保留供川牛膝鑒別用)另取蒼術(shù)對照藥材0.5g，加正己烷2ml，超聲提取15分鐘，濾過，濾液作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液10μl、對照藥材溶液5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(10∶0.1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％二甲氨基苯甲醛的10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上有相同顏色的污綠色斑點(diǎn)。
D.取[鑒別]C項(xiàng)下的水層，濾過，濾液濃縮至約80ml，濾過，殘?jiān)盟礈?次，每次10ml，合并濾液，加乙醚提取3次，每次30ml，棄去乙醚液，水溶液用氯仿振搖提取4次，每次30ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)勇确?ml使溶解，作為供試品溶液。另取川牛膝對照藥材1g，加90％乙醇10ml，加熱回流2小時(shí)，濾過，濾液濃縮至無醇味，加水100ml，加熱回流1小時(shí)，濾過，濾液加乙醚提取，自“加乙醚提取3次”起同供試品溶液操作，制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以苯-氯仿-丙酮(8∶4∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的亮藍(lán)色熒光斑點(diǎn)。
E.取實(shí)施例1的本藥物組合物橡膠膏劑3片，去掉蓋襯，剪碎，加10％乙醇50ml，加1mol/L鹽酸溶液10ml加熱回流1小時(shí)，濾過，濾液中加濃鹽酸使其濃度約為5％，加熱回流2小時(shí)，濾過，濾液加氯仿振搖提取3次，每次10ml，合并氯仿提取液，用5％碳酸鈉溶液提取3次，每次10ml，合并堿液，用乙醚提取3次，每次5ml，棄去乙醚液，用鹽酸調(diào)pH為1～2，用氯仿振搖提取3次，每次10ml，合并氯仿液，蒸干，加無水乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取甘草對照藥材0.2g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)樣于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(30～60℃)-甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸(5∶15∶7∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，105℃加熱至斑點(diǎn)清晰。樣品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的黃色斑點(diǎn)。
實(shí)施例12質(zhì)量控制中的含量測定方法色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水-冰醋酸(100∶480∶35)，用三乙胺調(diào)節(jié)pH值至3.1，作為流動相；檢測波長為254nm。理論板數(shù)按士的寧峰計(jì)算應(yīng)不低于5000。
對照品溶液的制備 精密稱取士的寧對照品適量，加流動相制成每1ml約含2.5μg的溶液，即得。
供試品溶液的制備 取實(shí)施例1的本藥物組合物橡膠膏1/4片，剪碎，置磨口三角瓶中，加氯仿20ml，濃氨水1.0ml，密塞，超聲處理10分鐘。提取液移入分液漏斗中，用30ml氯仿分次洗滌三角瓶，洗液并入分液漏斗中，用0.5mol/L硫酸溶液提取5次，每次10ml，合并硫酸液，加濃氨試液調(diào)節(jié)pH值至9～10，用氯仿提取5次，每次10ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)恿鲃酉嗳芙?，轉(zhuǎn)移至50ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，濾過。精密量取續(xù)濾液1ml置10ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。
測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
每片含士的寧(C21H22N2O2)應(yīng)為3.5～6.5mg。
實(shí)施例13質(zhì)量控制方法A.取實(shí)施例2的本藥物組合物橡膠膏劑2片，撕去蓋襯，剪碎，加入硫酸溶液(3→100)100ml，超聲15分鐘，浸泡過夜，濾過，濾液加氨水調(diào)pH9～10，用氯仿提取3次，每次20ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)勇确?ml使溶解，作為供試品溶液。取馬錢子堿對照品，加氯仿制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-丙酮-乙醇-濃氨試液(4∶5∶0.6∶0.4)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
B.取實(shí)施例2的本藥物組合物橡膠膏劑2片，撕去蓋襯，剪碎，加入硫酸溶液(3→100)100ml，超聲15分鐘，浸泡過夜，濾過，濾液加氨水調(diào)pH9～10，用氯仿提取3次，每次20ml，合并氯仿液，加入鹽酸甲醇溶液(1→10)1ml，蒸干，加甲醇0.5ml使溶解，作為供試品溶液。另取鹽酸麻黃堿對照品加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對照品溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-濃氨試液(20∶4∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液，于105℃烘至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
C.取實(shí)施例2的本藥物組合物橡膠膏劑10片，去掉蓋襯，剪碎，置500ml圓底燒瓶中，加水300ml，連接揮發(fā)油提取器，自測定器頂端加水至刻度，并溢流入瓶中為止，再加入正己烷1ml，微沸提取2小時(shí)，放冷，分取正己烷，作為供試品溶液。(水層保留供川牛膝鑒別用)另取蒼術(shù)對照藥材0.5g，加正己烷2ml，超聲提取15分鐘，濾過，濾液作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液10μl、對照藥材溶液5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(10∶0.1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％二甲氨基苯甲醛的10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上有相同顏色的污綠色斑點(diǎn)。
D.取[鑒別]C項(xiàng)下的水層，濾過，濾液濃縮至約80ml，濾過，殘?jiān)盟礈?次，每次10ml，合并濾液，加乙醚提取3次，每次30ml，棄去乙醚液，水溶液用氯仿振搖提取4次，每次30ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)勇确?ml使溶解，作為供試品溶液。另取川牛膝對照藥材1g，加90％乙醇10ml，加熱回流2小時(shí)，濾過，濾液濃縮至無醇味，加水100ml，加熱回流1小時(shí)，濾過，濾液加乙醚提取，自“加乙醚提取3次”起同供試品溶液操作，制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以苯-氯仿-丙酮(8∶4∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的亮藍(lán)色熒光斑點(diǎn)。
E.取實(shí)施例2的本藥物組合物橡膠膏劑3片，去掉蓋襯，剪碎，加10％乙醇50ml，加1mol/L鹽酸溶液10ml加熱回流1小時(shí)，濾過，濾液中加濃鹽酸使其濃度約為5％，加熱回流2小時(shí)，濾過，濾液加氯仿振搖提取3次，每次10ml，合并氯仿提取液，用5％碳酸鈉溶液提取3次，每次10ml，合并堿液，用乙醚提取3次，每次5ml，棄去乙醚液，用鹽酸調(diào)pH為1～2，用氯仿振搖提取3次，每次10ml，合并氯仿液，蒸干，加無水乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取甘草對照藥材0.2g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)樣于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(30～60℃)-甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸(5∶15∶7∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，105℃加熱至斑點(diǎn)清晰。樣品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的黃色斑點(diǎn)。
取實(shí)施例2的藥物組合物制劑進(jìn)行含量測定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水-冰醋酸(100∶480∶35)，用三乙胺調(diào)節(jié)pH值至3.1，作為流動相；檢測波長為254nm。理論板數(shù)按士的寧峰計(jì)算應(yīng)不低于5000。
對照品溶液的制備 精密稱取士的寧對照品適量，加流動相制成每1ml約含2.5μg的溶液，即得。
供試品溶液的制備 取本藥物組合物橡膠膏1/4片，剪碎，置磨口三角瓶中，加氯仿20ml，濃氨水1.0ml，密塞，超聲處理10分鐘。提取液移入分液漏斗中，用30ml氯仿分次洗滌三角瓶，洗液并入分液漏斗中，用0.5mol/L硫酸溶液提取5次，每次10ml，合并硫酸液，加濃氨試液調(diào)節(jié)pH值至9～10，用氯仿提取5次，每次10ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)恿鲃酉嗳芙?，轉(zhuǎn)移至50ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，濾過。精密量取續(xù)濾液1ml置10ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。
測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
每片含士的寧(C21H22N2O2)應(yīng)為為3.5～6.5mg。
權(quán)利要求
1.一種治療疼痛的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的原料藥組成如下馬錢子200-500重量份 土鱉蟲80-150重量份 川牛膝80-150重量份麻黃80-150重量份 乳香80-150重量份沒藥80-150重量份僵蠶80-150重量份 蒼術(shù)80-150重量份全蝎80-150重量份甘草80-150重量份。
2.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的原料藥組成如下馬錢子460重量份土鱉蟲84重量份 川牛膝143重量份麻黃86重量份 醋制乳香140重量份 醋制沒藥82重量份麩炒僵蠶145重量份 麩炒蒼術(shù)84重量份 全蝎139重量份甘草84重量份。
3.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的原料藥組成如下馬錢子250重量份 土鱉蟲140重量份川牛膝82重量份麻黃142重量份 醋制乳香84重量份 醋制沒藥139重量份麩炒僵蠶86重量份 麩炒蒼術(shù)144重量份 全蝎82重量份甘草145重量份。
4.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的原料藥組成如下馬錢子316重量份土鱉蟲84重量份川牛膝84重量份麻黃84重量份 醋制乳香84重量份 醋制沒藥84重量份麩炒僵蠶84重量份 麩炒蒼術(shù)84重量份 全蝎84重量份甘草84重量份。
5.如權(quán)利要求1、2、3或4所述的藥物組合物，其特征在于將該藥物組合物制成片劑、硬膠囊、軟膠囊、緩釋片、控釋片、緩釋膠囊、控釋膠囊，口服溶液劑、口服混懸劑、口服乳劑、膠漿劑、口服液、乳劑、膠體溶液、合劑、酊劑、滴劑、混懸滴劑、氣霧劑、噴霧劑、丸劑、滴丸、顆粒劑、腸溶顆粒劑、散劑、巴布膏劑或橡膠膏劑。
6.如權(quán)利要求1、2、3或4所述的藥物組合物，其特征在于其中馬錢子用450-500重量份的調(diào)制馬錢子粉替代。
7.如權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其特征在于其中調(diào)制馬錢子粉為460重量份、480重量份或490重量份。
8.如權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其特征在于其中調(diào)制馬錢子粉是由如下方法得到每取制馬錢子100重量份，粉碎成細(xì)粉，測定士的寧含量后，加淀粉5-100重量份，使士的寧C21H22N2O2含量按干燥品計(jì)為1.09％～1.15％后，混勻，即得。
9.如權(quán)利要求7所述的藥物組合物，其特征在于其中調(diào)制馬錢子粉是由如下方法得到每取制馬錢子100重量份，粉碎成細(xì)粉，測定士的寧含量后，加淀粉5-100重量份，使士的寧C21H22N2O2含量按干燥品計(jì)為1.09％～1.15％后，混勻，即得。
10.如權(quán)利要求8或9所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于該方法為在每100重量份的調(diào)制馬錢子粉中加入5％-15％淀粉漿60-100重量份，制成顆粒，干燥；取上述顆粒，用50％-70％乙醇作溶劑，進(jìn)行滲漉，收集漉液，回收乙醇，減壓濃縮至相對密度在80℃為1.30～1.35的稠膏備用；其余土鱉蟲九味原料藥，破碎，用85％-95％乙醇回流提取2-4次，每次1.5-2.5小時(shí)，合并提取液，濾過，濾液濃縮至相對密度在60℃下為1.15～1.20的清膏；清膏與上述稠膏合并，加常規(guī)輔料制成常規(guī)劑型。
11.如權(quán)利要求8或9所述的藥物組合物，其特征在于該組合物制成橡膠膏劑時(shí)加入基質(zhì)，基質(zhì)是由如下成分按重量份組成橡膠25-40重量份 羊毛脂4-8重量份 白油2-5重量份 凡士林2-4重量份 氧化鋅25-35重量份 氫化松香15-25重量份 薄荷腦1.5-2.5重量份 防老劑2，6-二叔丁基對甲酚1-1.5重量份 120#汽油90-150重量份。
12.如權(quán)利要求11所述的中藥組合物的制備方法，其特征在于該方法為在每100重量份的調(diào)制馬錢子粉中加入10％淀粉漿80重量份，制成顆粒，干燥；取上述顆粒，用60％乙醇作溶劑，進(jìn)行滲漉，收集漉液，回收乙醇，減壓濃縮至相對密度在80℃為1.30～1.35的稠膏備用；其余土鱉蟲九味原料藥，破碎，用90％乙醇回流提取3次，每次2小時(shí)，合并提取液，濾過，濾液濃縮至相對密度在60℃下為1.15～1.20的清膏；清膏與上述稠膏合并，另加3.0-3.4倍重的由橡膠、松香等制成的基質(zhì)，制成涂料，涂膏、切段、蓋襯、切片，包裝制成。
13.如權(quán)利要求11所述的中藥組合物的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法包括如下方法中的一種或幾種A、取本藥物組合物橡膠膏劑2片，撕去蓋襯，剪碎，加入3→100硫酸溶液100ml，超聲10-20分鐘，浸泡過夜，濾過，濾液加氨水調(diào)pH9～10，用氯仿提取3次，每次15-25ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)勇确?ml使溶解，作為供試品溶液；取馬錢子堿對照品，加氯仿制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以3-5∶4-6∶0.5-0.7∶0.3-0.5甲苯-丙酮-乙醇-濃氨試液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；B、取本藥物組合物橡膠膏劑2片，撕去蓋襯，剪碎，加入3→100硫酸溶液100ml，超聲10-20分鐘，浸泡過夜，濾過，濾液加氨水調(diào)pH9～10，用氯仿提取3次，每次15-25ml，合并氯仿液，加入1→10鹽酸甲醇溶液1ml，蒸干，加甲醇0.5ml使溶解，作為供試品溶液；另取鹽酸麻黃堿對照品加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對照品溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以15-25∶3-5∶0.3-0.6氯仿-甲醇-濃氨試液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液，于105℃烘至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；C、取本藥物組合物橡膠膏劑10片，去掉蓋襯，剪碎，置500ml圓底燒瓶中，加水300ml，連接揮發(fā)油提取器，自測定器頂端加水至刻度，并溢流入瓶中為止，再加入正己烷1ml，微沸提取1-3小時(shí)，放冷，分取正己烷，作為供試品溶液；水層保留供川牛膝鑒別用；另取蒼術(shù)對照藥材0.5g，加正己烷2ml，超聲提取10-20分鐘，濾過，濾液作為對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液10μl、對照藥材溶液5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以60～90℃石油醚-乙酸乙酯8-12∶0.1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以3％-7％二甲氨基苯甲醛的5％-15％硫酸乙醇溶液，在100-110℃加熱至斑點(diǎn)清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上有相同顏色的污綠色斑點(diǎn)；D、取鑒別C項(xiàng)下的水層，濾過，濾液濃縮至約80ml，濾過，殘?jiān)盟礈?次，每次5-15ml，合并濾液，加乙醚提取3次，每次20-40ml，棄去乙醚液，水溶液用氯仿振搖提取4次，每次20-40ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)勇确?ml使溶解，作為供試品溶液；另取川牛膝對照藥材1g，加90％乙醇10ml，加熱回流1-3小時(shí)，濾過，濾液濃縮至無醇味，加水100ml，加熱回流0.5-1.5小時(shí)，濾過，濾液加乙醚提取，自“加乙醚提取3次”起同供試品溶液操作，制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以6-10∶2-6∶1苯-氯仿-丙酮為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的亮藍(lán)色熒光斑點(diǎn)；E、取本藥物組合物橡膠膏劑3片，去掉蓋襯，剪碎，加10％乙醇40-60ml，加1mol/L鹽酸溶液10ml加熱回流0.5-1.5小時(shí)，濾過，濾液中加濃鹽酸使其濃度約為5％，加熱回流1-3小時(shí)，濾過，濾液加氯仿振搖提取3次，每次5-15ml，合并氯仿提取液，用5％碳酸鈉溶液提取3次，每次10ml，合并堿液，用乙醚提取3次，每次3-8ml，棄去乙醚液，用鹽酸調(diào)pH為1～2，用氯仿振搖提取3次，每次5-15ml，合并氯仿液，蒸干，加無水乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草對照藥材0.2g，同法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)樣于同一硅膠G薄層板上，以3-7∶10-20∶4-10∶0.5，30～60℃石油醚-甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以3-7％香草醛的5-15％硫酸乙醇溶液，105℃加熱至斑點(diǎn)清晰；樣品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的黃色斑點(diǎn)；F、色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以80-120∶450-500∶20-50甲醇-水-冰醋酸，用三乙胺調(diào)節(jié)pH值至2.5-3.5，作為流動相；檢測波長為254nm；理論板數(shù)按士的寧峰計(jì)算應(yīng)不低于5000；對照品溶液的制備 精密稱取士的寧對照品適量，加流動相制成每1ml約含2-3μg的溶液，即得；供試品溶液的制備取 本藥物組合物橡膠膏1/4片，剪碎，置磨口三角瓶中，加氯仿15-25ml，濃氨水1.0ml，密塞，超聲處理5-15分鐘；提取液移入分液漏斗中，用20-40ml氯仿分次洗滌三角瓶，洗液并入分液漏斗中，用0.5mol/L硫酸溶液提取5次，每次5-15ml，合并硫酸液，加濃氨試液調(diào)節(jié)pH值至9～10，用氯仿提取5次，每次5-15ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)恿鲃酉嗳芙猓D(zhuǎn)移至50ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，濾過；精密量取續(xù)濾液1ml置10ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得；照高效液相色譜法測定，分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各15-25μl，注入液相色譜儀，測定，即得；每片含士的寧C21H22N2O2應(yīng)為3.5～6.5mg。
14.如權(quán)利要求13所述的中藥組合物的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法包括如下方法中的一種或幾種A、取本藥物組合物橡膠膏劑2片，撕去蓋襯，剪碎，加入3→100硫酸溶液100ml，超聲15分鐘，浸泡過夜，濾過，濾液加氨水調(diào)pH9～10，用氯仿提取3次，每次20ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)勇确?ml使溶解，作為供試品溶液；取馬錢子堿對照品，加氯仿制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以4∶5∶0.6∶0.4甲苯-丙酮-乙醇-濃氨試液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；B、取本藥物組合物橡膠膏劑2片，撕去蓋襯，剪碎，加入3→100硫酸溶液100ml，超聲15分鐘，浸泡過夜，濾過，濾液加氨水調(diào)pH9～10，用氯仿提取3次，每次20ml，合并氯仿液，加入1→10鹽酸甲醇溶液1ml，蒸干，加甲醇0.5ml使溶解，作為供試品溶液；另取鹽酸麻黃堿對照品加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對照品溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以20∶4∶0.5氯仿-甲醇-濃氨試液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液，于105℃烘至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；C、取本藥物組合物橡膠膏劑10片，去掉蓋襯，剪碎，置500ml圓底燒瓶中，加水300ml，連接揮發(fā)油提取器，自測定器頂端加水至刻度，并溢流入瓶中為止，再加入正己烷1ml，微沸提取2小時(shí)，放冷，分取正己烷，作為供試品溶液；水層保留供川牛膝鑒別用；另取蒼術(shù)對照藥材0.5g，加正己烷2ml，超聲提取15分鐘，濾過，濾液作為對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液10μl、對照藥材溶液5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以10∶0.1，60～90℃石油醚-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％二甲氨基苯甲醛的10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上有相同顏色的污綠色斑點(diǎn)；D、取鑒別C項(xiàng)下的水層，濾過，濾液濃縮至約80ml，濾過，殘?jiān)盟礈?次，每次10ml，合并濾液，加乙醚提取3次，每次30ml，棄去乙醚液，水溶液用氯仿振搖提取4次，每次30ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)勇确?ml使溶解，作為供試品溶液；另取川牛膝對照藥材1g，加90％乙醇10ml，加熱回流2小時(shí)，濾過，濾液濃縮至無醇味，加水100ml，加熱回流1小時(shí)，濾過，濾液加乙醚提取，自“加乙醚提取3次”起同供試品溶液操作，制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以8∶4∶1苯-氯仿-丙酮為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的亮藍(lán)色熒光斑點(diǎn)；E、取本藥物組合物橡膠膏劑3片，去掉蓋襯，剪碎，加10％乙醇50ml，加1mol/L鹽酸溶液10ml加熱回流1小時(shí)，濾過，濾液中加濃鹽酸使其濃度約為5％，加熱回流2小時(shí)，濾過，濾液加氯仿振搖提取3次，每次10ml，合并氯仿提取液，用5％碳酸鈉溶液提取3次，每次10ml，合并堿液，用乙醚提取3次，每次5ml，棄去乙醚液，用鹽酸調(diào)pH為1～2，用氯仿振搖提取3次，每次10ml，合并氯仿液，蒸干，加無水乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草對照藥材0.2g，同法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)樣于同一硅膠G薄層板上，以5∶15∶7∶0.5，30～60℃石油醚-甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，105℃加熱至斑點(diǎn)清晰；樣品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的黃色斑點(diǎn)；F、色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以100∶480∶35甲醇-水-冰醋酸，用三乙胺調(diào)節(jié)pH值至3.1，作為流動相；檢測波長為254nm；理論板數(shù)按士的寧峰計(jì)算應(yīng)不低于5000；對照品溶液的制備 精密稱取士的寧對照品適量，加流動相制成每1ml約含2.5μg的溶液，即得；供試品溶液的制備 取本藥物組合物橡膠膏1/4片，剪碎，置磨口三角瓶中，加氯仿20ml，濃氨水1.0ml，密塞，超聲處理10分鐘；提取液移入分液漏斗中，用30ml氯仿分次洗滌三角瓶，洗液并入分液漏斗中，用0.5mol/L硫酸溶液提取5次，每次10ml，合并硫酸液，加濃氨試液調(diào)節(jié)pH值至9～10，用氯仿提取5次，每次10ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)恿鲃酉嗳芙?，轉(zhuǎn)移至50ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，濾過；精密量取續(xù)濾液1ml置10ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得；照高效液相色譜法測定，分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得；每片含士的寧C21H22N2O2為4.6～5.8mg。
15.如權(quán)利要求1、2、3、4、7、8或9所述的藥物組合物在制備治療腰腿痛和風(fēng)濕性關(guān)節(jié)痛的藥物中的應(yīng)用。
16.如權(quán)利要求6所述的藥物組合物在制備治療腰腿痛和風(fēng)濕性關(guān)節(jié)痛的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開一種治療疼痛的藥物組合物及其制劑的制備方法，該藥物組合物主要由馬錢子、土鱉蟲、川牛膝、麻黃、乳香、沒藥、僵蠶、蒼術(shù)、全蝎、和甘草組成，其中的馬錢子可以用調(diào)制馬錢子粉替代；本發(fā)明另一目的在于提供該中藥組合物制劑的質(zhì)量控制方法及其治療疼痛的用途。
文檔編號A61P29/00GK1850161SQ20061005683
公開日2006年10月25日 申請日期2006年3月7日 優(yōu)先權(quán)日2006年1月17日
發(fā)明者索偉, 龐永清, 秦婷, 王春民, 李沈明, 計(jì)福全 申請人:承德頸復(fù)康藥業(yè)集團(tuán)有限公司