專利名稱：一種治療乙肝的中藥凍干粉針劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療乙肝的中藥凍干粉針制劑及其制備方法，屬于中藥新藥研發(fā)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
乙型病毒性肝炎是世界范圍內(nèi)一種常見和多發(fā)的傳染性疾病，嚴(yán)重威脅著人類健康。據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計，全世界有2億多人處于慢性乙肝病毒攜帶狀態(tài)，其中70％為亞洲華人。目前，用于治療病毒性肝炎的藥物，全世界估計達(dá)600種以上，但至今無療效令人滿意者，主要原因是藥物的副作用與肝炎的復(fù)發(fā)這兩個問題難以解決。因此研制一種有效、安全、質(zhì)量可控的乙肝治療藥物為醫(yī)藥界普遍關(guān)注的問題。
胡黃連始載于《新修本草》，言其“主骨蒸勞熱，補(bǔ)肝膽，明目，治冷熱泄痢，益顏色，厚腸胃，治婦人胎蒸虛驚，治三消五痔，大人五心煩熱。解巴豆毒。以人乳浸點(diǎn)目甚良。”既清虛熱，又清濕熱、血熱、疳熱。國內(nèi)外藥理試驗表明，胡黃連提取物不僅可明顯的抑制廣泛的肝炎病毒，降低血脂作用，還有較強(qiáng)的保肝利膽作用。實驗研究發(fā)現(xiàn)，胡黃連提取物有增加肝細(xì)胞生存率，降低血中AST、ALT等酶活性，促進(jìn)肝臟核酶和蛋白質(zhì)的合成等作用，對濕熱熏蒸證的患者療效尤為顯著?？梢?，胡黃連可祛邪以扶正，具有清熱利濕，除骨蒸勞熱，補(bǔ)肝利膽的功效，是一味標(biāo)本兼治的良藥。
有文獻(xiàn)報道從胡黃連中提取的胡黃連環(huán)烯醚萜總苷類成分是胡黃連中保肝降酶、抑制乙肝病毒的主要有效物質(zhì)，特別適用于治療急性乙型肝炎。這就需要快速發(fā)揮療效的制劑，目前使用的注射劑型為液體，色澤較深，經(jīng)常出現(xiàn)色澤變深甚至混濁至沉淀，因此有效期短，凍干粉針劑則有效解決溶液型注射劑穩(wěn)定性差的問題，有效期長，運(yùn)輸方便。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種治療乙肝的中藥凍干粉針制劑，具體涉及胡黃連環(huán)烯醚萜總苷凍干粉針劑及其制備方法。
本發(fā)明為固體狀態(tài)，含水量低，同時在抽真空中進(jìn)行干燥，且干燥后回充氮?dú)?，不易氧化，穩(wěn)定性高，有利于長期貯存，有效期長，可以加入適量的填充劑，使用更安全，產(chǎn)品外形完好，保存更持久，易于儲藏和運(yùn)輸。本發(fā)明每支含胡黃連環(huán)烯醚萜總苷為94.5％～100％，所述的胡黃連環(huán)烯醚萜總苷的純度為90％以上，其中胡黃連苷-II的含量為80％以上。不加或加入適量的填充劑。填充劑的選用不限于甘露醇、葡萄糖、氯化鈉。填充劑的最優(yōu)用量為0～5％。加或不加抗氧劑，抗氧劑的選用不限于亞硫酸氫鈉、亞硫酸鈉。抗氧劑的最優(yōu)用量為0～0.5％。
本發(fā)明所述的胡黃連環(huán)烯醚萜總苷的制備方法可采用本領(lǐng)域已公開的制備方法制備。
本發(fā)明所述的治療乙肝的中藥凍干粉針劑，其制備方法為胡黃連環(huán)烯醚萜總苷、加或不加填充劑，加或不加抗氧劑，溶于適量的注射用水中，過濾，濾液加補(bǔ)加注射用水至一定量，加入活性炭脫色出熱源，繼用0.45μm、0.22μm微孔濾膜分級過濾除菌，分裝至西林瓶中，冷凍干燥，回充高純度氮?dú)?，加塞扎蓋，包裝，即得。
對于本發(fā)明及其制備方法進(jìn)行了必要的質(zhì)量檢測(澄明度檢察、無菌檢查、熱原檢查、含量測定)和穩(wěn)定性考察，實驗結(jié)果見表1，表2。
表1 室溫留樣觀察初步穩(wěn)定性試驗報告

表2 加速試驗報告


試驗結(jié)果表明本品在室溫下及加速條件下穩(wěn)定性均良好。
本發(fā)明人使用實施例1中方法制得的凍干粉針劑，完成了以下藥效學(xué)試驗，試驗證明胡黃連環(huán)烯醚萜總苷凍干粉針劑具有較強(qiáng)的保肝降酶、對抗乙肝病毒作用，動物試驗療效確切，主要藥效學(xué)結(jié)果如下試驗例1 胡黃連環(huán)烯醚萜總苷凍干粉針劑對CCl4致小鼠急性肝損傷的預(yù)防保護(hù)作用胡黃連環(huán)烯醚萜總苷凍干粉針劑小(3.75mg/kg)、中(7.5mg/kg)、大(15mg/kg)三個劑量組給藥兩天后，應(yīng)用0.12％的CCl4花生油溶液0.1ml/10g造成小鼠急性肝損傷模型，造模后16小時摘眼球取血測血清ALT、AST值。結(jié)果見表3，表4。
表3 胡黃連環(huán)烯醚萜總苷凍干粉針劑對小鼠CCl4急性肝損傷血清ALT的影響(X±SD)

注與模型對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001；與正常組比較△△△P＜0.001。
表4 胡黃連環(huán)烯醚萜總苷凍干粉針劑對小鼠CCl4急性肝損傷血清AST的影響(X±SD)

注與模型對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001；與正常組比較△△△P＜0.001。
結(jié)果顯示，胡黃連環(huán)烯醚萜總苷凍干粉針劑三個劑量組與模型組相比，ALT、AST值均有不同程度降低；提示胡黃連環(huán)烯醚萜總苷凍干粉針劑三個劑量組對CCl4誘發(fā)的小鼠急性肝損傷有明顯的預(yù)防保護(hù)作用。
試驗例2 胡黃連環(huán)烯醚萜總苷凍干粉針劑對鴨乙型肝炎病毒的影響1日齡北京鴨，靜脈注射麻鴨DHBV-DNA陽性血清，建立鴨乙型肝炎動物模型，應(yīng)用陽性對照藥阿昔洛韋及胡黃連環(huán)烯醚萜總苷凍干粉針劑三個劑量(10mg/kg，20mg/kg，40mg/kg)靜脈注射給藥10天，于給藥前(T0)、給藥第5天(T5)、第10天(T10)和停藥后第3天(P3)采血，用斑點(diǎn)雜交法測定鴨血清中DHBV-DNA水平；用ELISA方法檢測血清DHBV前S表面抗原(DHBpresAg)水平。研究結(jié)果見表5，表6。
表5 胡黃連環(huán)烯醚萜總苷凍干粉針劑注射給藥對鴨血清DHBV-DNA的影響

注給藥組給藥第5、10天(T5、T10)和停藥第3天(P3)鴨血清DHBV-DNA OD值與感染前(T0)OD值比較，統(tǒng)計學(xué)采用成對t檢驗；*p＜0.05，**p＜0.01，***P＜0.001。
表6 胡黃連環(huán)烯醚萜總苷凍干粉針劑注射給藥對鴨血清DHBpresAg的影響

注給藥組給藥第5、10天(T5、T10)和停藥第3天(P3)鴨血清DHBpresAg OD值與感染前(T0)OD值比較，統(tǒng)計學(xué)采用成對t檢驗；*p＜0.05，**p＜0.01，***P＜0.001。
斑點(diǎn)雜交結(jié)果顯示，胡黃連環(huán)烯醚萜總苷凍干粉針劑三個劑量組給藥后各時間點(diǎn)鴨血清DHBV-DNA OD值與給藥前比較有不同程度下降(P＜0.001、P＜0.01或P＜0.05)，對鴨血清DHBV-DNA的抑制率最高可達(dá)80％以上；表面抗原檢測結(jié)果顯示，胡黃連環(huán)烯醚萜總苷凍干粉針劑各劑量組給藥第5天、第10天和停藥后第3天的鴨血清DHBpresAg OD值與給藥前比較有不同程度下降(P＜0.001、P＜0.01或P＜0.05)；結(jié)果表明胡黃連環(huán)烯醚萜總苷凍干粉針劑注射給藥對鴨乙型肝炎病毒有一定的抑制作用。
具體實施例方式
發(fā)明人通過以下的實施例來進(jìn)一步詳細(xì)闡述本發(fā)明，但本發(fā)明不限于此實施范圍。
實施例1取胡黃連環(huán)烯醚萜總苷30.0g，加入注射用水約2800ml，65℃水浴使溶解，加入配制量1.5‰的活性炭(4.5g)，攪拌半小時，過濾，于濾器上加水至3000ml，繼以0.45μm、0.22μm微孔濾膜分級過濾，濾液以每瓶3ml定量分裝于10ml西林瓶中，冷凍干燥，回充高純度氮?dú)?，加塞，軋蓋，包裝，即得。
實施例2取胡黃連環(huán)烯醚萜總苷30.0g，加入1％甘露醇，溶于65℃注射用水約2800ml，加入配制量1.5‰的活性炭(4.5g)，攪拌半小時，過濾，于濾器上加水至3000ml，繼以0.45μm、0.22μm微孔濾膜分級過濾，濾液以每瓶3ml定量分裝于10ml西林瓶中，冷凍干燥，回充高純度氮?dú)?，加塞，軋蓋，包裝，即得。
實施例3取胡黃連環(huán)烯醚萜總苷30.0g，加入0.9％NaCl、0.2％NaHSO3，溶于65℃注射用水約2800ml，加入配制量1.5‰的活性炭(4.5g)，攪拌半小時，過濾，于濾器上加水至3000ml，繼以0.45μm、0.22μm微孔濾膜分級過濾，濾液以每瓶3ml定量分裝于10ml西林瓶中，冷凍干燥，回充高純度氮?dú)?，加塞，軋蓋，包裝，即得。
實施例4取胡黃連環(huán)烯醚萜總苷30.0g，加入0.5％葡萄糖、0.2％NaHSO3，溶于65℃注射用水約2800ml，加入配制量1.5‰的活性炭(4.5g)，攪拌半小時，過濾，于濾器上加水至3000ml，繼以0.45μm、0.22μm微孔濾膜分級過濾，濾液以每瓶3ml定量分裝于10ml西林瓶中，冷凍干燥，回充高純度氮?dú)?，加塞，軋蓋，包裝，即得。
實施例5取胡黃連環(huán)烯醚萜總苷30.0g，加入0.5％葡萄糖、0.3％NaHSO3，溶于65℃注射用水約2800ml，加入配制量1.5‰的活性炭(4.5g)，攪拌半小時，過濾，于濾器上加水至3000ml，繼以0.45μm、0.22μm微孔濾膜分級過濾，濾液以每瓶3ml定量分裝于10ml西林瓶中，冷凍干燥，回充高純度氮?dú)?，加塞，軋蓋，包裝，即得。
權(quán)利要求
1.一種治療乙肝的中藥凍干粉針劑，其特征在于各組分的重量百分比為胡黃連環(huán)烯醚萜總苷94.5％～100％，填充劑0～5％，抗氧劑0～0.5％。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥凍干粉針劑，其特征在于胡黃連環(huán)烯醚萜總苷的純度為90％以上。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥凍干粉針劑，其特征在于胡黃連環(huán)烯醚萜總苷中胡黃連苷-II的含量為80％以上。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥凍干粉針劑，其特征在于填充劑選自甘露醇、葡萄糖、氯化鈉任一種或多種。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥凍干粉針劑，其特征在于抗氧劑選自亞硫酸氫鈉、亞硫酸鈉的任一種或多種。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥凍干粉針劑，其特征在于凍干粉針制劑的制備方法為胡黃連環(huán)烯醚萜總苷、加或不加填充劑、加或不加抗氧劑，溶于適量的注射用水中，過濾，濾液補(bǔ)加注射用水至一定量，加入活性炭脫色除熱源，用0.45μm、0.22μm微孔濾膜分級過濾除菌，分裝至西林瓶中，冷凍干燥，回充高純度氮?dú)?，加塞扎蓋，包裝，即得。
全文摘要
本發(fā)明屬于中藥新藥研究開發(fā)領(lǐng)域，涉及一種治療乙肝的中藥凍干粉針劑及其制備方法，具體涉及胡黃連環(huán)烯醚萜總苷凍干粉針劑及制備方法。其特征在于包含以下組分(重量百分比)胡黃連環(huán)烯醚萜總苷94.5％～100％，填充劑0～5％，抗氧劑0～0.5％。本發(fā)明的制備方法是將上述組分用注射用水中溶解，過濾，加入活性炭脫色除熱源，用0.45μm、0.22μm微孔濾膜分級過濾，分裝，凍干。該藥物具有較強(qiáng)的保肝降酶、抑制乙肝病毒的作用，可用于治療急慢性乙型肝炎。
文檔編號A61P1/16GK101040952SQ20061006521
公開日2007年9月26日 申請日期2006年3月20日 優(yōu)先權(quán)日2006年3月20日
發(fā)明者周亞偉 申請人:周亞偉