專利名稱：：蒲黃和三七的藥物組合物的制作方法蒲黃和三七的藥物組合物心腦血管疾病包括冠心病、心絞痛、心肌梗塞、瘀血型肺心病、缺血性腦病、腦血栓、高血壓、高血脂等。這些疾病的主要發(fā)病原因是動(dòng)脈硬化造成管腔狹窄、管道阻塞，從而導(dǎo)致心腦供血不足，引起頭沉、頭暈、頭痛、胸悶等癥狀，嚴(yán)重者可導(dǎo)致腦中風(fēng)及心肌梗塞的發(fā)生。心腦缺血后影響能量代謝，繼發(fā)乳酸堆積、鈣超載、自由基損傷等多種變化。一直以來心腦血管疾病都是威脅人類健康的大敵，每年奪走1200多萬人的生命，接近人口總死亡的1/4。隨著我國逐漸進(jìn)入老年社會(huì)，且隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展和生活方式、飲食習(xí)慣的改變，心腦血管疾病的患病率和死亡率正逐年上升，根據(jù)世界衛(wèi)生組織預(yù)測，至2020年，非傳染性疾病將占我國死亡原因的79%，其中心腦血管疾病將占首位。因此，如何有效防治心腦血管疾病也就引起人們的高度重視。目前，心腦血管疾病的診斷和防治是世界性研究熱點(diǎn)，也是中醫(yī)藥理論和臨床研究的重要內(nèi)容。蒲黃為香蒲科植物水燭香蒲7>//^awgw幼/o/z'aL.、東方香蒲7>p/won'e"&toPresl或同屬植物的干燥花粉。剪取雄花后，曬干，成為帶有雄花的花粉，即為草蒲黃。蒲黃還可經(jīng)炮制制成生蒲黃或蒲黃炭。蒲黃味甘，性平，歸肝、心包經(jīng)。具有止血、化瘀、通淋的功效。主要用于治療吐血、衄血、咯血、崩漏、外傷出血、經(jīng)閉痛經(jīng)、脘腹刺痛、跌撲腫痛、血淋澀痛。研究表明，蒲黃中的蒲黃總黃酮有降壓、降血脂，增加冠脈血流量和擴(kuò)張血管等作用，是心腦血管疾病的常用藥。三七為五加科植物三七P""o3c"Wog!VMe"g(Burk.)F.H.Chen的干燥根及根莖。味甘、微苦。性溫。歸肝、胃經(jīng)。有散瘀止痛，消腫定痛之功效。用于咯血，吐血，衄血，便血，崩漏，外傷出血，胸腹剌痛，跌撲腫痛。傳統(tǒng)用于止血化瘀，消腫止痛。三七提取物的主要有效成分三七總皂苷已收載入《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑》和《國家中成藥標(biāo)準(zhǔn)匯編內(nèi)科心系分冊》的國家標(biāo)準(zhǔn)中?！缎l(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑》的血栓通注射液項(xiàng)下的三七總皂苷的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的三七總皂苷是從三七主根中提取出的，其中規(guī)定含人參皂苷Rg,(C42H720,4)不得少于30.0%;含人參皂苷Rw(C54H92023)應(yīng)不得少于20.0%?！秶抑谐伤帢?biāo)準(zhǔn)匯編內(nèi)科心系分冊》的注射用血塞通項(xiàng)下的三七總皂苷的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的三七總皂苷是從三七的蘆頭中提制的，其中規(guī)定含人參皂苷Rg！(C42H72014)應(yīng)為標(biāo)示量的25.0%45.0%;含人參皂苷RW(C54H92023)應(yīng)為標(biāo)示量的30.0%40.0%;含三七皂苷R,(C47H8(A8)應(yīng)為標(biāo)示量的5.0%15.0%;含三七皂苷R卜人參皂苷R^及人參皂苷Rw的總含量應(yīng)不得少于65.0Q/。。經(jīng)文獻(xiàn)檢索，三七總皂苷能增加心腦血流量，改善微循環(huán)，抑制血小板聚集，降低血液粘稠度，擴(kuò)張血管，降低血壓，增加冠狀動(dòng)脈血流量，降低心肌耗氧量，被廣泛用于心腦缺血性心腦血管疾病的治療，是一種適合于治療心肌梗塞的藥物。目前利用蒲黃或蒲黃提取物與三七或三七提取物的相互作用，配伍組方，制備治療心腦血管疾病等方面的藥物，尚未見報(bào)道。
發(fā)明內(nèi)容為了滿足臨床需要，更好的治療心腦血管疾病等，提高人民健康水平，本發(fā)明提供了蒲黃或其提取物與三七或其提取物的藥物組合物及其制備方法，在制備治療心腦血管疾病中的應(yīng)用和含有該藥物組合物的制劑。制成本發(fā)明藥物組合物所含藥效組分的原料藥為蒲黃、三七，本發(fā)明藥物組合物具有顯著的抗心肌缺血、顯著減小心肌梗塞面積、顯著降低缺血心肌耗氧量、提高缺血心肌組織中抗自由基酶活性、增強(qiáng)心肌組織清除自由基的能力、減少心肌過氧化物及羥自由基的生成、顯著改善局灶性腦缺血再灌注損傷、降低血壓等作用，產(chǎn)生了意想不到的效果。經(jīng)過發(fā)明人大量的篩選實(shí)驗(yàn)證明，按照重量組份計(jì)算，蒲黃20010000份、三七1005000份范圍內(nèi)具有顯著協(xié)同增效作用；優(yōu)選為蒲黃5006000份、三七2002000份；進(jìn)一步優(yōu)選為蒲黃10003000份、三七5001000份。上述藥物組合物中的蒲黃和三七可以用適宜的溶劑分別或混合經(jīng)過提取加工得到其提取物，總提取物再和藥用輔料混合加工制成制劑，所得蒲黃總提取物的主要有效成分為黃酮類化合物，三七總提取物的主要有效成分為三七總皂苷。所述的溶劑是指藥學(xué)上常用的溶劑，優(yōu)選水或醇，提取方法可以用藥學(xué)上常規(guī)的方法進(jìn)行提取，如煎煮法、滲漉法、回流提取法、連續(xù)提取法等。上述藥物組合物中的蒲黃可以通過下述優(yōu)選工藝提取制備，但不僅限于下述工藝取蒲黃藥材，加70%乙醇提取三次，每次提取3小時(shí)。第一、第二次加醇14倍量，第三次加醇10倍量。合并提取液，濾過，濾液回收乙醇至相對密度為1.041.06(50°C)的濃縮液，加等量水稀釋，混勻，4'C冷藏24小時(shí)，離心，取上清液，用等量石油醚振搖提取兩次，棄去石油醚液，水液濃縮至干，殘?jiān)由倭克谷芙猓螦B-8大孔樹脂柱，分別用水、35%乙醇、70%乙醇洗脫，收集70%乙醇洗脫液，回收乙醇，減壓干燥，即得。通過上述工藝制備的蒲黃提取物，得率為24%，黃酮類化合物的含量不低于50%。蒲黃除采用上述方法提取外，還可以通過以下方法提取制備，但不僅限于下述方法工藝一取蒲黃藥材，加水煎煮三次，第一、第二次每次煎煮3小時(shí)，加水12倍量，第三次煎煮2小時(shí)，加水10倍量。合并提取液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.101.15(60°C)的浸膏，加入乙醇至含量達(dá)80%，攪勻，放置過夜，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，減壓濃縮至稠膏狀，真空干燥，即得。通過上述工藝制備的蒲黃提取物，得率為1020%，黃酮類化合物的含量不低于30%。工藝二取蒲黃藥材，加水煎煮三次，第一、第二次每次煎煮3小時(shí)，加水12倍量，第三次煎煮2小時(shí)，加水10倍量。合并提取液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.101.15(60°C)的浸膏，加入乙醇至含量達(dá)80%，放置過夜，濾過，濾液回收乙醇至相對密度為1.041.06(6(TC)的濃縮液，加等量水稀釋后，用等量石油醚振搖提取2次，棄去石油醚液，水液用等量水飽和正丁醇振搖提取三次，合并正丁醇提取液，濃縮至稠膏狀，噴霧干燥，即得。通過上述工藝制備的蒲黃提取物，得率為510%，黃酮類化合物的含量不低于40%。工藝三取蒲黃藥材，加水煎煮三次，第一、第二次每次煎煮3小時(shí)，加水12倍量，第三次煎煮2小時(shí)，加水10倍量。合并提取液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.10U5(60°C)的浸膏，加入乙醇至含量達(dá)80%，攪勻，放置過夜，濾過，濾液回收乙醇至相對密度為L041.06(60'C)的濃縮液，加等量水稀釋后，用等量石油醚振搖提取兩次，棄去石油醚液，水液用等量水飽和正丁醇振搖提取3次，合并正丁醇提取液，濃縮至干，殘?jiān)由倭克谷芙猓洗罂讟渲?，先用l倍柱體積的水洗脫，棄去水洗液，再用2倍體積的35%乙醇洗脫，棄去35%乙醇洗脫液，然后用3倍柱體積的70%乙醇洗脫，收集70%乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，濃縮至稠膏狀，噴霧干燥，即得。通過上述工藝制備的蒲黃提取物，得率為13%，黃酮類化合物的含量不低于50%。工藝四取蒲黃藥材，加70%乙醇提取三次，每次提取3小時(shí)。第一、二次加醇14倍量，第三次加醇10倍量。合并提取液，濾過，濾液回收乙醇至相對密度為1.041.06(5(TC)的清膏，加等量水稀釋，混勻，4'C冷藏24小時(shí)，離心，取上清液，用等量石油醚振搖提取兩次，棄去石油醚液，水液用等量水飽和正丁醇振搖提取三次，合并正丁醇提取液，濃縮至稠膏狀，噴霧干燥，即得。通過上述工藝制備的蒲黃提取物，得率為39%，黃酮類化合物的含量不低于40%。上述藥物組合物中的三七可以通過下述工藝提取制備，但不僅限于下述工藝取三七藥材，粉碎成粗粉，加乙醇回流提取三次，每次3小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，加水至適量(每lml相當(dāng)于2g原藥材)，冷藏24小時(shí)，濾過，濾液加于已處理好的弱極性大孔樹脂柱上，先用2倍柱體積的水洗脫，再用4~5倍的80%乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇并真空干燥，即得。通過上述工藝制備的三七提取物得率為4~5%;三七總皂苷含量不低于60%。上述藥物組合物中，其中的蒲黃和三七均可由相應(yīng)重量份的提取物直接投料制成，按照蒲黃提取物相對于藥材的得率為24%，三七提取物相對于藥材的得率為45%分別計(jì)算，制成該藥物組合物所含藥效組分的原料藥的組成還可以為蒲黃提取物4400份、三七提取物4250份；優(yōu)選為蒲黃提取物10240份、三七提取物8100份；進(jìn)一步優(yōu)選為蒲黃提取物20120份、三七提取物2050份。上述藥物組合物中，蒲黃提取物中黃酮類化合物的含量不低于30%，最好不低于50%;三七總皂苷含量不低于60%。.上述藥物組合物中，藥物組分的用量是經(jīng)過發(fā)明人進(jìn)行大量摸索總結(jié)得出的，各組分用量在上述重量份范圍內(nèi)都具有較好療效。上述組成，若以克為單位，可以制成10010000次用量的制劑，如作為片劑，可制成10010000片，每次服用110片，一天15次；如作為膠囊劑，可制成10010000粒，每次服用110粒，一天15次；如作為注射劑可以制成10010000ml，每次用量110ml，一天15次。上述組成是按重量份作為配比的，如大規(guī)模生產(chǎn)可以千克為單位，或者以噸為單位，小規(guī)模生產(chǎn)也可以以克為單位。上述重量份數(shù)對于特殊病人，可以相應(yīng)調(diào)整組成的比例，增加或者減少不超過100%。本發(fā)明物組合物可用于制備治療心腦血管疾病的藥物。藥理藥效實(shí)驗(yàn)研究表明，本發(fā)明藥物組合物可以顯著對抗心肌缺血；顯著減小心肌梗塞面積；顯著降低缺血心肌耗氧量，提高缺血心肌組織中抗自由基酶活性，增強(qiáng)心肌組織清除自由基的能力，減少心肌過氧化物及羥自由基的生成；顯著抗血小板聚集；顯著改善局灶性腦缺血再灌注損傷的神經(jīng)損傷癥狀，降低缺血再灌注損傷腦組織含水量，減輕缺血側(cè)腦半球水腫程度縮小腦梗塞體積；顯著降低血壓。共同發(fā)揮抗心肌缺血、減小心肌梗塞面積，抗血小板聚集，降低血壓等作用。上述藥物組合物，可以與任一藥學(xué)上可接受的輔料混合制成任何一種臨床上或藥學(xué)上可接受的劑型，優(yōu)選口服制劑或注射劑，以口服或腸胃外給藥的方式施用于需要這種治療的患者。用于口服給藥時(shí)，可將其制成常規(guī)的固體制劑，包括片劑、膠囊劑、顆粒劑、丸劑和口服溶液劑等。片劑系指藥物與適宜的輔料混勻壓制而成的圓片狀或異形片狀的固體制劑；片劑以口服普通片為主，另有含片、舌下片、口腔貼片、咀嚼片、分散片、可溶片、泡騰片、緩釋片、控釋片與腸溶片等。膠囊劑系指藥物或加有輔料充填于空心膠囊或密封于軟質(zhì)囊材中的固體制劑；膠囊劑依據(jù)其溶解與釋放特性，可分為硬膠囊(通稱為膠囊)、軟膠囊(膠丸)、緩釋膠囊、控釋膠囊和腸溶膠囊。顆粒劑系指藥物與適宜的輔料制成具有一定粒度的干燥顆粒狀制劑；顆粒劑可分為可溶顆粒(通稱為顆粒)、混懸顆粒、泡騰顆粒、腸溶顆粒、緩釋顆粒和控釋顆粒等。丸劑系指藥物與適宜的輔料均勻混合，以適當(dāng)方法制成的球狀或類球狀固體制劑；丸劑包括滴丸、糖丸、小丸等?？诜芤簞┫抵杆幬锶芙庥谶m宜溶劑中制成供口服的澄清液體制劑。腸胃外給藥時(shí)，可將其制成注射用的溶液、注射用水或油懸浮劑、吸入劑等。優(yōu)選劑型為口服制劑如片、膠囊、軟膠囊、顆粒、滴丸、口服液等。用于腸胃外給藥時(shí)，可制成注射劑。注射劑系指藥物制成的供注入體內(nèi)的溶液、乳液或混懸液及供臨用前配制或稀釋成溶液或混懸液的粉末或濃溶液的無菌制劑，注射劑可分為注射液、注射用無菌粉末與注射用濃溶液。注射液系指藥物制成的供注射入體內(nèi)用的無菌溶液型注射液、乳液型注射液或混懸型注射液，可用于肌內(nèi)注射、靜脈注射、靜脈滴注等；其規(guī)格有l(wèi)ml、2ml、5ml、10ml、20ml、50ml、lOOml、200ml、250ml、500ml等，其中供靜脈滴注用的大體積(一般不小于100ml)注射液也稱靜脈輸液。注射用無菌粉末系指藥物制成的供臨用前用適宜的無菌溶液配制成澄清溶液或均勻混懸液的無菌粉末或無菌塊狀物，可用適宜的注射用溶劑配制后注射，也可用靜脈輸液配制后靜脈滴注；無菌粉末用溶媒結(jié)晶法、噴霧干燥法或冷凍干燥法等制得。注射用濃溶液系指藥物制成的供臨用前稀釋供靜脈滴注用的無菌濃溶液。本發(fā)明藥物組合物的優(yōu)點(diǎn)在于-(1)首次提供了蒲黃或其提取物和三七或其提取物用于制備治療心腦血管疾病藥物的組合物，并通過藥理實(shí)驗(yàn)證實(shí)兩者有協(xié)同增效的作用，優(yōu)于兩者單獨(dú)用藥。(2)藥理藥效實(shí)驗(yàn)研究表明，本藥物組合物可用于制備治療心腦血管疾病的藥物。藥理藥效實(shí)驗(yàn)研究表明，本藥物組合物可以顯著對抗心肌缺血；顯著減小心肌梗塞面積；顯著降低缺血心肌耗氧量，提高缺血心肌組織中抗自由基酶活性，增強(qiáng)心肌組織清除自由基的能力，減少心肌過氧化物及羥自由基的生成；顯著抗血小板聚集；顯著改善局灶性腦缺血再灌注損傷的神經(jīng)損傷癥狀，降低缺血再灌注損傷腦組織含水量，減輕缺血側(cè)腦半球水腫程度縮小腦梗塞體積，降低血壓。其結(jié)果是本
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的普通人員所意想不到的。(3)本發(fā)明藥物組合物的有效成分明確、含量高，制劑穩(wěn)定性好，便于控制產(chǎn)品質(zhì)量，可以保證臨床用藥安全。(4)對蒲黃提取物和三七提取物的質(zhì)量進(jìn)行控制，并提供了優(yōu)選的制備工藝，簡便易行，且質(zhì)量較好，適用于工業(yè)化大生產(chǎn)。以下通過實(shí)驗(yàn)例來進(jìn)一步闡述本發(fā)明所述藥物的有益效果，這些實(shí)驗(yàn)例包括本發(fā)明藥物組合物的藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)，蒲黃或其提取物和三七或其提取物制備而成的藥物組合物以下簡稱蒲三。以下實(shí)驗(yàn)例中所用的蒲黃提取物均取自于實(shí)施例l,三七提取物均取自實(shí)施例2。《麵1,駄8^雄心肌梗艦麥試動(dòng)物Wistar大鼠，雄性，體重2S0280g，180只。供試品生理鹽水市購；蒲黃顆粒自制，(相當(dāng)于原藥材3g);三七顆粒自制，(相當(dāng)于原藥材lg);蒲三顆粒(蒲黃和三七原藥材的重量配比)自制，見表l。實(shí)驗(yàn)方法將大鼠隨機(jī)分為18個(gè)組，每組10只，見表l。大鼠實(shí)驗(yàn)性心肌梗死模型動(dòng)物戊巴比妥腹腔注射麻醉(45mg/kg)仰位固定。氣管插管，在胸骨左側(cè)作2cm的縱切口，近胸骨側(cè)剪斷第3、第4肋軟骨，打開胸腔后，連接人工呼吸機(jī)(通氣量2ml/100g，50次/min)。剪開心包膜，暴露心臟，冠狀動(dòng)脈左前降支根部穿線以備結(jié)扎，記錄標(biāo)準(zhǔn)II導(dǎo)聯(lián)心電圖，穩(wěn)定10分鐘，結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支，關(guān)閉胸腔。用針筒吸出動(dòng)物喉部分泌物，使動(dòng)物恢復(fù)自主呼吸。結(jié)扎冠狀動(dòng)脈15min后，灌胃給藥，一日一次。結(jié)扎冠狀動(dòng)脈4小時(shí)后，摘取心臟，在結(jié)扎線以下橫切5片，進(jìn)行氯化硝基四氮唑藍(lán)(N-BT)染色，計(jì)算心肌梗死塞區(qū)面積占心室及心臟面積的百分比，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理(t檢驗(yàn))。_表l蒲三對大鼠實(shí)驗(yàn)性心肌梗塞范圍的影響(5士s，n-10)_組別重量配比^，梗死區(qū)/心室(％)梗死區(qū)/心臟(％)注$p<0.05，與空白對照組相比；'p<0.05，"p<0.01，與模型組相比。實(shí)驗(yàn)結(jié)果及結(jié)論實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表l。(1)與空白對照組相比，模型組的心肌梗塞面積顯著增加(p<0.05),說明造模成功。(2)與模型組相比，蒲黃組心肌梗塞面積顯著減小(p<0.05)，三七組心肌梗塞面積顯82.01.03000+1001.010000+5001.01000+1001.03000+5001.0500+1001.03000+10001.0蒲三組200+1001.0(蒲黃+三七)1000+10001.03000+50001.01000+20001.0200+5001.0500+20001.0200+10001.0500+50001.029.11±5.1323.59±4.7933.19±6.37$26.66±4.48$28.32±6.11'23.17±5.66*19.26士6.59'17.14±6.37*14.56±5.62**13.05土5.27"14.46士3.55"12.24±4.17**13.84±5.47**10.36土4.78"11.67±4.08**9.15土3.02"11.68土4.63"9.34±3.26"11.74土4.33"9.42士3.15"11.78±4.29"9.34土3.48"11.55±5.64**9.52±4.54"12.29士3.21"10.01±4.19*'12.92±4.23**12.67±3.28**13.89土4.26"12.74±3.99**14.48士4.63"13.25土4.32"14.41±5.67**14.18±5.79**14.94±5.57**R80土5.19"SAJTirTTjrTTiBs"經(jīng)經(jīng)結(jié)對型黃七白模蒲三空著減小(p<0.05)，蒲三各重量配比組心肌梗塞面積均極顯著減小(p<0.01)。(3)與三七組、蒲黃組相比，蒲黃+三七各重量配比組的抗心肌梗塞作用均優(yōu)于單用三七和蒲黃的作用。本發(fā)明藥物組合物可極顯著減小梗塞區(qū)心臟及心室面積，效果優(yōu)于單用蒲黃和三七，提示兩藥配伍有協(xié)同增效作用，共同對抗心肌梗塞，保護(hù)缺血心臟。實(shí)驗(yàn)例2蒲三對心肌耗氧量及抗氧化酶的影響受試動(dòng)物雜種犬42只，體重12.68kg土1.87kg，雌雄各半。供試品蒲黃膠囊自制，(相當(dāng)于原藥材3g);三七膠囊自制，(相當(dāng)于原藥材lg);蒲三膠囊劑自制，(相當(dāng)于含蒲黃原藥材lg，三七原藥材0.5g)實(shí)驗(yàn)方法42只犬，隨機(jī)分為7組，每組6只假結(jié)扎組、模型對照組、蒲黃膠囊組、三七膠囊組、蒲三膠囊低劑量組、蒲三膠囊中劑量組、蒲三膠囊高劑量組。各給藥組均為用生理鹽水配制成混懸液后喂服，一日一次。犬心肌缺血模型制備給藥期滿的各組犬靜脈注射戊巴比妥鈉GOmg'kg—1)麻醉固定，監(jiān)測肢體n導(dǎo)聯(lián)心電圖；建立股靜脈通道，0.5%肝素鈉體內(nèi)抗凝；分離股動(dòng)脈，肝素化后股動(dòng)脈插管連續(xù)監(jiān)測BP;分離氣管并插管，行人工呼吸機(jī)正壓呼吸(頻率1618次'min'1，吸氣:呼氣比l:1.5，潮氣量350550ml);開胸暴露心臟，分離左冠狀動(dòng)脈左旋支，連接血流量計(jì)，測定冠脈血流量；分離左冠脈前降支第一分支下方2mm，除假結(jié)扎組只穿線不結(jié)扎外，其余各組均穿入兩條1號(hào)絲線，一期結(jié)扎前5min，按每公斤體重2mg，靜脈滴入利多卡因。第一條絲線結(jié)扎時(shí)將一根處理過直徑為lmm的9號(hào)針頭置于結(jié)扎線和血管之間，結(jié)扎后將針頭抽出，進(jìn)行血管狹窄的一期結(jié)扎，30min后，再將第二條絲線結(jié)扎，進(jìn)行血流阻斷的二期結(jié)扎，完成心肌缺血模型的制備。檢測指標(biāo)血氧飽和度測定于結(jié)扎前、一期結(jié)扎10mm、二期結(jié)扎即刻、15min、30min、60min、120min測定并記錄冠脈血流量，并于結(jié)扎前和二期結(jié)扎120min時(shí)分別于冠狀竇(靜脈血)、頸主動(dòng)脈各取血lml,測定血氧飽和度，按公式心肌耗氧量(MV02)ml/(min.l00g)=冠狀動(dòng)脈血流量(CBF)ml/(min.l00g)x(動(dòng)脈血氧mP/。-冠狀竇血氧mP/。)計(jì)算各組心肌耗氧量。心肌組織SOD、MDA、-OH測定二期結(jié)扎120min各組立即取出心臟，用冰生理鹽水注射液沖洗、吸干、稱重后取左心室心尖部心肌組織lg，以生理鹽水注射液為介質(zhì)，用勻漿器制成10%心肌組織勻漿，測定SOD活性、MDA和-OH含量。<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>注$p<0.05，$$p<0.01，與假結(jié)扎組比；*p<0.05，**p<0.01，與模型組比。實(shí)驗(yàn)結(jié)果及結(jié)論對心肌耗氧量的影響模型組與假結(jié)扎組相比心肌耗氧量極顯著升高(pO.01);蒲黃組、三七組、蒲三高、中、低各劑量組心肌耗氧量均極顯著低于模型組(pO.01)。對心肌組織中SOD、MDA及-OH-的影響模型組與假結(jié)扎組相比心肌組織中SOD活性極顯著升高(pO.Ol)，MDA及-OH含量極顯著降低(pO.01);蒲黃組、三七組、蒲三高、中、低各劑量組，心肌組織中SOD活性極顯著高于模型組(p〈0.01);MDA含量、-OH含量顯著降低均極顯著低于模型組(p<0.01)。與三七組、蒲黃組相比，本發(fā)明藥物組合物各劑量組的效果均優(yōu)于單用三七和蒲黃的效果。在冠脈結(jié)扎阻斷血流后，可顯著降低缺血心肌耗氧量，提高缺血心肌組織中抗自由基酶活性，增強(qiáng)心肌組織清除自由基的能力，減少心肌過氧化物及羥自由基的生成，且均優(yōu)于單用蒲黃和三七的效果，提示兩藥配伍具有協(xié)同增效作用。實(shí)驗(yàn)例3蒲S對結(jié)扎大鼠冠狀動(dòng)脈所致心肌缺血的影響受試動(dòng)物Wistar大鼠，210只，體重250280g，雌雄兼用。供試品蒲黃片自制，(相當(dāng)于原藥材3g);三七片自制，(相當(dāng)于原藥材lg);蒲三片自制(蒲黃和三七的重量配比)，見表3。實(shí)驗(yàn)方法大鼠隨機(jī)分為21組，每組10只，見表3。大鼠用烏拉坦lg/kg腹腔注射麻醉，背位固定，記錄心電，接人工呼吸機(jī)進(jìn)行人工呼吸，打開胸腔，剪開心包，各藥物分別用生理鹽水配制成所需濃度供試液后灌胃給藥，一日一次，心肌缺血對照組給予等體積的生理鹽水，給藥3min后結(jié)扎左側(cè)冠狀動(dòng)脈前降枝，全程記錄心電30min，結(jié)扎后lh取血，檢測磷酸肌酸激酶(CPK)和乳酸脫氫酶(LDH)。取出大鼠心臟，沿結(jié)扎線將心室肌均勻橫切4片，0.5%氯化硝基四氮唑蘭染色，用求積儀測每片心肌兩面的缺血面積，計(jì)算心肌缺血面積占心室面積的百分比。表3蒲三對結(jié)扎大鼠冠狀動(dòng)脈所致心肌缺血的影響(5±s，n=10)組別重量配比給藥劑量CPK(U/L)LDH(U/L)心肌缺血百分比生理鹽水組一6062±9752043±58739.43±7.82蒲黃組一2.(14414±797*1825士578*31.25±4.91**三七組一1.03527±788*1572±565*24.74±5.26**10000+1001.03068±741*1403±526*20.01士5.01"6000+1001.02987±766*1378±524*19.54±5.21**10000+2001.02811±728**1309±598**19.01±4.98**3000+1001.02798±765**1298±548**18.64士5.64"10000+5001.02726±724"1258±572**18,20±5.54**1000+1001.02704士714"1248±568**18.10±5.44**3000+5001.02648±713**1231±528**17.27±5.18**500+1001.02694±712**1238±546**17.34i5.21*115蒲三組(蒲黃3000+10001.02649±717"1235±538"17.24±5.19**+三七)200+1001.02684±752**1249±556**17.68±5.29**1000+10001.02654±703"1239±554"17.29±5.48**3000+50001.02691±752**1234±556**18.04±5.04**1000+20001.02657±726**1246±518**17.34土5.36**200+5001.02684±709**1264±512**17.90±5.27**500+20001.02714±762**1254士536"17.54±5.41**200+畫01.02768±763**1279±578**18.67±5.48**500+50001.02921±768*1345±598*18.96±5.34**200+50001.02983±775*1498±569*19.04±5.64**注*p<0.05，**p<0.01，與生理鹽水組相比。實(shí)驗(yàn)結(jié)果及結(jié)論實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表3。結(jié)扎后，生理鹽水對照組大鼠心電的QRS波均突然異常增高、加寬，心肌大范圍缺血，生化檢測表現(xiàn)為CPK和LDH均異常增高。與生理鹽水對照組相比較，蒲黃片與三七片，均能顯著減小因結(jié)扎冠狀動(dòng)脈所致的心電和生化指標(biāo)的異常改變(p<0.05)，極顯著減小心肌缺血范圍(pO.01);蒲三各重量配比組能顯著或極顯著減小因結(jié)扎冠狀動(dòng)脈所致的心電和生化指標(biāo)的異常改變(p<0.05),(pO.Ol)，極顯著減小心肌缺血范圍(p<0.01),并且對結(jié)扎大鼠冠狀動(dòng)脈所致心肌缺血的保護(hù)作用優(yōu)于蒲黃或三七單獨(dú)給藥的效果，提示蒲黃與三七合并用藥有協(xié)同抗心肌缺血保護(hù)心臟的作用。實(shí)驗(yàn)例4蒲三對血瘀型大鼠血小板聚集的影響受試動(dòng)物Wistar大鼠，雌雄各半，體重250300克，80只。供試品生理鹽水市購；蒲黃提取物片自制，(含蒲黃提取物75mg相當(dāng)于原藥材3g);三七提取物片自制，(含三七提取物42mg相當(dāng)于原藥材lg);蒲三片(蒲黃提取物和三七提取物的重量配比)自制，見表4。實(shí)驗(yàn)方法將大鼠隨機(jī)分為8個(gè)組，每組10只。各藥物分別用生理鹽水配制成所需濃度供試液后灌胃給藥，對照組給予等體積的生理鹽水，一日一次。大鼠血瘀模型制備除對照組外，其余各組分別于最后一天給藥lh后，皮下注射0.1。/。鹽酸腎上腺素0.08ml/100g，共2次，兩次間隔4小時(shí)，給藥之間(前后各間隔2小時(shí))，將大鼠浸入冰水5分鐘，處置后停食。檢測指標(biāo)停食次晨，各組分別用20M烏拉坦(lg/kg)麻醉，3.8%枸櫞酸鈉溶液抗凝(1:9，V/V)，自腹主動(dòng)脈取血，1000轉(zhuǎn)/min，離心10min，取上清液，制備富含小板血漿(PRP);余4000轉(zhuǎn)/min，離心10min，取上清液為貧血小板血漿(PPP)。用ADP(lmg/lml，加入16pl)、Thro(5U/ml，加入16pl)、COL(lmg/ml，加入,)為誘導(dǎo)劑，以比濁法在LBY—NJ血液凝聚儀測定血小板最大聚集率。表4<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>注$$p<0.01，與生理鹽水組相比；*p<0.05，**p<0.01，與模型組相比。實(shí)驗(yàn)結(jié)果及結(jié)論實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表4。與生理鹽水對照組相比，模型組的血小板最大聚集率極顯著增加(p<0.01)，說明造模成功。與模型組相比，蒲黃提取物組血小板最大聚集率顯著減小(pO.05);三七提取物組血小板最大聚集率顯著減小(pO.05);蒲三提取物各重量配比組血小板最大聚集率極顯著減小(pO.01);并且均優(yōu)于單用蒲黃提取物或三七提取物的效果。蒲三提取物可極顯著對抗COL、ADP、Thro誘導(dǎo)的血瘀大鼠的血小板聚集作用，效果優(yōu)于單用蒲黃提取物和三七提取物，提示蒲黃與三七配伍有協(xié)同抑制血小板聚集的作用。實(shí)驗(yàn)例S蒲三對大鼠腦缺血再灌注揭傷的保護(hù)作用受試動(dòng)物Wistar大鼠，140只，雌雄兼用，體重200220g。供試品生理鹽水，市購；注射用蒲黃提取物，自制，(含蒲黃提取物75mg相當(dāng)于原藥材3g);注射用三七提取物，自制，(含三七提取物42mg相當(dāng)于原藥材lg);注射用蒲三提取物，自制，(46mg，含蒲黃提取物25mg，相當(dāng)于原藥材lg;含三七提取物21mg，相當(dāng)于原藥材0.5經(jīng))。實(shí)驗(yàn)方法大鼠140只，隨機(jī)分為7組，每組20只。大鼠用10%水合氯醛3ml/kg腹腔注射麻醉，頸正中切口，分離、結(jié)扎右側(cè)頸總動(dòng)脈近心端、頸外動(dòng)脈及其分支動(dòng)脈。分離右側(cè)頸內(nèi)動(dòng)脈，沿頸內(nèi)動(dòng)脈向下分離翼顎動(dòng)脈，根部結(jié)扎該分支。在頸內(nèi)動(dòng)脈近端備線、遠(yuǎn)端放置動(dòng)脈夾，頸總動(dòng)脈分叉處切口，插入尼龍線(深度為1720mm)，拴線進(jìn)入頸內(nèi)動(dòng)脈，入顱至大腦前動(dòng)脈，阻斷大腦中動(dòng)脈所有血流來源。撤掉動(dòng)脈夾，扎緊備線，外留lcm長線頭，縫合皮膚。缺血lh后灌胃給藥，生理鹽水對照組給予生理鹽水，繼續(xù)缺血lh后再灌注，勿需再次麻醉和切開皮膚，輕輕提拉所留線頭至有阻力時(shí)提示尼龍線頭端己至頸總動(dòng)脈切口處，血流再通。假手術(shù)組除不插線外，其余步驟同上。存活鼠再灌注24h后，觀察大鼠行為變化，進(jìn)行行為評分。參考zeaLonga的5分制評分標(biāo)準(zhǔn)0分，正常，無神經(jīng)損傷癥狀；1分，不能完全伸展對側(cè)前爪；2分，向外側(cè)轉(zhuǎn)圈；3分，向?qū)?cè)傾倒；4分，不能自發(fā)行走，意識(shí)喪失。然后快速斷頭取鼠大腦。一部分(每組10只)分別稱左右腦半球濕重，置16(TC烤箱內(nèi)24h后稱干重，按以下公式計(jì)算腦組織含水量腦組織含水量(％)=(濕重一干重)/濕重X100%;—部分(每組10只)在前連合平面切下厚約2mm冠狀腦片，立刻置于2%丁正溶液中，37'C孵育30min。梗塞區(qū)呈現(xiàn)白色，非梗塞區(qū)呈現(xiàn)紅色。用求積儀(C63圖像分析系統(tǒng))測出各區(qū)面積，并計(jì)算梗塞區(qū)占全腦的百分比(％)。表5蒲三對大鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用(5±S，n=20)組別劑量神經(jīng)病學(xué)行為腦組織含水量(％)腦梗塞體積mg/kg評分左半球右半球(%)假手術(shù)組——77.17±0.8876.96±1.210生理鹽水組_1.7±0.777.24±0.9681.22±1.21$$37.33±7.17注射用蒲黃提取物組600.9±0.6*77.2U1.0179.59±1.23*28.52±6.24*注射用三七提取物組400.8±0.5*76.92±1.2076.97±0.97*19.83±5.21*注射用蒲三低劑量組200.7±0.4**76.97±0.9573.67±1.13**15.37±5.28**注射用蒲三中劑量組300.6±0.4**77.12±1.1372.53±1.20**14.54±5.12**注射用蒲三高劑量組400.5±0.3**77.25±1.1071.14±1.05**13.25±4.77**注$$p<0.01，與假手術(shù)組相比較；*p<0.05，**p<0.01，與生理鹽水組相比較。實(shí)驗(yàn)結(jié)果及結(jié)論實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表5。(1)對行為的影響假手術(shù)組大鼠均無異常癥狀，神經(jīng)行為學(xué)評分為O。生理鹽水組出現(xiàn)不能完全伸展對側(cè)前爪或向外側(cè)轉(zhuǎn)圈或向?qū)?cè)傾倒的神經(jīng)損傷癥狀，行為評分為1.7±0.7。與生理鹽水組相比較，注射用蒲黃提取物組、注射用三七提取物組均可極顯著降低神經(jīng)行為學(xué)評分(pO.05);注射用蒲三提取物各劑量組可極顯著降低神經(jīng)行為學(xué)評分(pO.Ol)。(2)對腦組織含水量的影響生理鹽水組缺血再灌注側(cè)(大腦右半球)的腦組織含水量極顯著高于假手術(shù)組(pO.Ol),說明造模成功。與生理鹽水組相比較，注射用蒲黃提取物組和注射用三七提取物組的腦組織含水量均顯著降低(p<0.05)，注射用蒲三提取物各劑量組的腦組織含水量均極顯著降低(pO.Ol)。G)對梗死面積的影響假手術(shù)組腦組織無梗塞。生理鹽水組缺血側(cè)腦組織有梗塞現(xiàn)象，梗塞體積占全腦的37.33%。與生理鹽水組相比較，注射用蒲黃提取物組和注射用三七提取物組均可顯著縮小缺血側(cè)腦組織梗塞體積(p<0.05)，注射用蒲三提取物各劑量組可極顯著縮小缺血側(cè)腦組織梗塞體積(p<0.01)。上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，蒲黃與三七合并用藥可顯著改善局灶性腦缺血再灌注損傷的神經(jīng)損傷癥狀，降低缺血再灌注損傷腦組織含水量，減輕缺血側(cè)腦半球水腫程度縮小腦梗塞體積。注射用蒲三提取物各劑量組的效果均優(yōu)于單用蒲黃提取物或三七提取物，提示蒲黃和三七合并用藥具有協(xié)同保護(hù)腦缺血再灌注損傷的作用。實(shí)驗(yàn)例6蒲三對大鼠jflL壓的影響受試動(dòng)物健康雄性大鼠，60只，體重250280g。供試品蒲黃提取物片自制，含蒲黃提取物75mg(相對于原藥材3g);三七提取物片自制，含三七提取物42mg(相對于原藥材l);蒲三提取物片自制，67mg(含蒲黃提取物25mg相對于原藥材lg含三七提取物42mg相對于原藥材lg)。實(shí)驗(yàn)方法將大鼠隨機(jī)分為6組，每組10只。各組大鼠均以2。/。戊巴比妥鈉45mg/kg腹腔注射麻醉。分離氣管，插入氣管套管；分離右頸總動(dòng)脈，插管后經(jīng)壓力換能器連接GY-40四道生理記錄儀記錄收縮壓(SAP)、舒張壓(DAP)及平均動(dòng)脈壓(MAP);同時(shí)記錄肢體II導(dǎo)聯(lián)心電圖。不同的藥物通過WZ-50G微量注射泵以每小時(shí)10ml/kg注入股靜脈，對照組給藥氯化鈉注射液，觀察給藥前、給藥后0.5h和lh的外周血壓變化。表6<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>注*p<0.05，**p<0.01，與對照組相比較。實(shí)驗(yàn)結(jié)果及結(jié)論與氯化鈉注射液對照組相比較，蒲三低劑量組，給藥后0.5h時(shí)的收縮壓和舒張壓均顯著降低(p<0.05)，給藥后lh小時(shí)的收縮壓和舒張壓均極顯著降低(pO.01);蒲三中、高劑量組，給藥lh時(shí)和給藥后lh時(shí)的收縮壓和舒張壓均顯著降低(p<0.01);降壓作用呈劑量依賴性；蒲黃提取物片給藥后0.5h時(shí)的收縮壓和舒張壓均降低，但無顯著性差異，給藥后lh時(shí)的收縮壓和舒張壓均顯著降低(p<0.05);三七提取物片給藥組，給藥后0.5h時(shí)和給藥后lh時(shí)的收縮壓和舒張壓均顯著降低(p<0.05)。蒲三提取物低、中、高劑量組的作用均優(yōu)于蒲黃提取物或三七提取物單獨(dú)給藥組的效果，提示蒲黃與三七合并用藥有協(xié)同增效作用，在抗高血壓方面將有顯著療效。具體實(shí)施方式l以下通過實(shí)施例形式的具體實(shí)施方式，對本發(fā)明的上述內(nèi)容作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)施例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。以下實(shí)施例中各劑型的輔料可以用藥學(xué)上可接受的輔料代替，或者減少、增加。實(shí)施例1蒲黃提取物的制備1、蒲黃提取物的制備方法取蒲黃藥材，加70%乙醇提取三次，每次提取3小時(shí)。第一、二次加醇14倍量，第三次加醇10倍量。合并提取液，濾過，濾液回收乙醇至相對密度為1.041.06(50'C)的濃縮液，加等量水稀釋，混勻，4"冷藏24小時(shí)，離心，取上清液，用等量石油醚振搖提取2次，棄去石油醚液，水液濃縮至干，殘?jiān)由倭克谷芙?，上AB-8大孔樹脂柱，分別用水、35%乙醇、70%乙醉洗脫，收集70%乙醇洗脫液，回收乙醇，減壓干燥，即得蒲黃提取物。2、蒲黃提取物的含量測定黃麟粉激齢顏定..色譜條件及系統(tǒng)適應(yīng)性以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-0.4%磷酸液(50:50)為流動(dòng)相；檢測波長為360nm;以異鼠李素、山奈酚、槲皮素計(jì)算柱效，理論塔板數(shù)在30004000。對照品溶液的制備分別精密稱取經(jīng)五氧化二磷干燥過夜的槲皮素、山柰酚、異鼠李素對照品適量，各加甲醇制成每lml含0.04mg、0.02mg、O.lmg的溶液，作為對照品溶液。再逐級稀釋分別配成一系列對照品溶液，即得。供試品溶液的制備取蒲黃提取物粉末1.0g，精密稱定，置250ml三角燒瓶中，加甲醇100ml超聲提取40min，放冷過濾，取濾液，提取液蒸干，殘?jiān)蛹状?25%鹽酸(4:l))混合液25ml，回流45min,放冷，轉(zhuǎn)移至50ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，取適量離心，即得。測定法分別精密吸取上述對照品溶液和供試品溶液各20pl，注入5pl定量管的液相色譜儀進(jìn)樣器，測定，即得。按照上述方法工藝制備六批蒲黃提取物，蒲黃總黃酮的含量和得率見表7。從結(jié)果可以看出，通過本工藝得到的蒲黃提取物的得率為24%，蒲黃總黃酮含量不低于50%。表7蒲黃提取物的含量測定結(jié)果和得率<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>實(shí)施例2三七提取物的制備1、三七提取物的制備方法取三七藥材，粉碎成粗粉，加乙醇回流提取三次，每次3小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，加水至適量(每lml相當(dāng)于2g原藥材)，冷藏24小時(shí)，濾過，濾液加于已處理好的弱極性大孔樹脂柱上，先用2倍柱體積的水洗脫，再用4~5倍的80%乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇并真空干燥，即得。2、三七提取物的含量測定照高效液相色譜法(附錄VID)測定色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動(dòng)相A，以水為流動(dòng)相B，按下表進(jìn)行梯度洗脫；檢測波長203nm。理論踏板數(shù)按三七皂苷R！峰計(jì)算應(yīng)不低于4000。<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>對照品溶液的制備取人參皂苷Rgl對照品、人參皂苷Rb,對照品和三七皂苷R,對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每lml含人參皂苷Rg!0.4mg、人參皂苷Rb,0.4mg、三七皂苷f^0.1mg的混合溶液，即得。供試品溶液的制備取三七提取物粉末，精密稱定，研細(xì)，取約0.8g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，防置過夜，置80。C水浴上回流2小時(shí)，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。測定法分別精密吸取上述對照品溶液和供試品溶液各10pl，注入液相色譜儀，測定，即得。按照上述工藝分別制得三批三七提取物，含量測定結(jié)果見表8。表8三七提取物的含量測定結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>實(shí)施例3蒲三片劑的制備處方一處方處方蒲黃提取物25g(相當(dāng)于原藥材lkg)三七提取物84g(相當(dāng)于原藥材2kg)預(yù)膠化淀粉120g微晶纖維素40g低取代羥丙纖維素40g2%HPMC水溶液適量硬脂酸鎂6g羧甲淀粉鈉12g共制備1000片蒲黃提取物25g(相當(dāng)于原藥材lkg)三七提取物42g(相當(dāng)于原藥材1kg)預(yù)膠化淀粉120g微晶纖維素40g低取代羥丙纖維素40g2%HPMC水溶液適量硬脂酸鎂6g羧甲淀粉鈉12g共制備畫片蒲黃提取物12.5g(相當(dāng)于原藥材500g)三七提取物42g(相當(dāng)于原藥材1000g)預(yù)膠化淀粉120g微晶纖維素40g低取代羥丙纖維素40g2%HPMC水溶液適量硬脂酸鎂6g羧甲淀粉鈉12g共制備1000片處方四蒲黃提取物三七提取物預(yù)膠化淀粉微晶纖維素低取代羥丙纖維素2%HPMC水溶液硬脂酸鎂羧甲淀粉鈉12.5g(相當(dāng)于原藥材500g)84g(相當(dāng)于原藥材2000g)120g40g40g6g12g共制備1000片制備工藝-原料中的蒲黃和三七參照實(shí)施例1、2中的制備方法制成提取物。(1)將蒲黃提取物和三七提取物粉碎過100目篩備用。(2)按照處方量稱取原料和輔料。(3)將羥丙甲纖維素溶于水中制成2%的水溶液備用。(4)將三七提取物、蒲黃提取物、預(yù)膠化淀粉、微晶纖維素、低取代羥丙纖維素混合均勻，加入2。/。HPMC水溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材。(5)過20目篩制顆粒。(6)顆粒在60'C的條件下烘干。(7)干燥好的顆粒加入硬脂酸鎂和羧甲淀粉鈉，過18目篩整粒，混合均勻。(8)取樣，半成品化驗(yàn)。(9)按照化驗(yàn)確定的片重壓片。(10)成品全檢，包裝入庫。實(shí)施例4蒲三膠囊劑的制備處方一蒲黃提取物三七提取物預(yù)膠化淀粉微晶纖維素低取代羥丙纖維素2%HPMC水溶液硬脂酸鎂_共制備150g(相當(dāng)于原藥材6000g)8.4g(相當(dāng)于原藥材200g)120g50g30g畫粒處方二:蒲黃提取物75g(相當(dāng)于原藥材3000g)三七提取物21g(相當(dāng)于原藥材500g)預(yù)膠化淀粉120g微晶纖維素50g低取代羥丙纖維素30g2%HPMC水溶液適量硬脂酸鎂6g共制備tr二1000粒蒲黃提取物75g(相當(dāng)于原藥材3000g)三七提取物8.4g(相當(dāng)于原藥材200g)預(yù)膠化淀粉120g微晶纖維素50g低取代羥丙纖維素30g2%HPMC水溶液適量硬脂酸鎂6g共制備1000粒制備工藝原料中的蒲黃和三七參照實(shí)施例1、2中的制備方法制成提取物。(1)將蒲黃提取物和三七提取物粉碎過100目篩備用。(2)按照處方量稱取原料和輔料。(3)將羥丙甲纖維素溶于水中制成2%的水溶液備用。(4)將三七提取物、蒲黃提取物、預(yù)膠化淀粉、微晶纖維素、低取代羥丙纖維素混合均勻，加入2。/。HPMC水溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材。(5)過20目篩制顆粒。(6)顆粒在6(TC的條件下烘干。(7)干燥好的顆粒加入硬脂酸鎂，過18目篩整粒，混合均勻。(8)取樣，半成品化驗(yàn)。(9)按照化驗(yàn)確定的裝量裝入膠囊。(10)成品全檢，包裝入庫。實(shí)施例5蒲三顆粒劑的制備處方一-蒲黃提取物150g(相當(dāng)于原藥材6kg)三七提取物84g(相當(dāng)于原藥材2kg)糖粉450g糊精200g甜菊素15g檸檬香精適量20/oHPMC50。/。乙醇溶液適量_共制備lOOOg處方二蒲黃提取物75g(相當(dāng)于原藥材3kg)三七提取物84g(相當(dāng)于原藥材2kg)糖粉450g糊精200g甜菊素15g檸檬香精適量2。/oHPMC50。/。乙醇溶液適量_共制備lOOOg處方三蒲黃提取物75g(相當(dāng)于原藥材3kg)三七提取物42g(相當(dāng)于原藥材1kg)糖粉450g糊精200g甜菊素15g檸檬香精適量2n/oHPMC50n/。乙醇溶液適量_共制備lOOOg處方四蒲黃提取物150g(相當(dāng)于原藥材6000g)三七提取物21g(相當(dāng)于原藥材500g)糖粉450g糊精200g甜菊素15g檸檬香精適量2VoHPMC50n/。乙醇溶液適量_共制備畫g制備工藝-原料中的蒲黃和三七參照實(shí)施例1、2中的制備方法制成提取物。(1)將蔗糖粉碎過80目篩備用；將蒲黃提取物和三七提取物粉碎過100目篩備用。(2)按照處方量稱取原料和輔料。(3)將蒲黃提取物、三七提取物與糖粉、糊精、甜菊素以等量遞加的方法混合均勻，加入2。/。HPMC50。/。乙醇溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材，(4)過20目篩制顆粒。(5)顆粒在6(TC的條件下烘干。(6)干顆粒過18目篩整粒，噴入適量檸檬香精。(7)取樣，半成品化驗(yàn)顆粒中主藥的含量，確定裝量。(8)包裝，成品全檢，包裝入庫。實(shí)施例6蒲三口服液的制備處方蒲黃提取物三七提取物丙二醇苯甲酸鈉甜菊甙純化水150g(相當(dāng)于原藥材6kg)42g(相當(dāng)于原藥材lkg)100ml15g10g加至1000ml共制備1000ml制備工藝-原料中的蒲黃和三七參照實(shí)施例1、2中的制備方法制成提取物。(1)將蒲黃提取物和三七提取物加入配液量50%的純化水中加熱攪拌溶解完全；再加入丙二醇攪拌溶解完全。(2)將苯甲酸鈉和甜菊甙用配液量20%的水溶解完全。(3)合并上述溶液，補(bǔ)加純化水至全量。(4)過0.8pm的微孔濾膜過濾。(5)半成品化驗(yàn)。(6)灌裝，成品全檢，包裝入庫。實(shí)施例7蒲三軟膠鏖的制備處方:取物取物脂25g(相當(dāng)于原藥材1000g)21g(相當(dāng)于原藥材500g)100g8gii_共制備1000粒具體步驟原料中的蒲黃和三七參照實(shí)施例1、2中的制備方法制成提取物c21提提油磷黃七豆豆蠟蒲三大大蜂1)處方量的大豆油和大豆磷脂、蜂蠟加熱熔融，混勻，放冷;2)加入蒲黃提取物和三七提取物混勻，過膠體磨；3)取樣，半成品化驗(yàn)；4)壓制成軟膠囊；成品全檢，包裝入庫。實(shí)施例8蒲三滴丸的制備處方蒲黃提取物三七提取物聚乙二醇600012.5g(相當(dāng)于原藥材500g)8.4g(相當(dāng)于原藥材200g)10g共制備1000粒具體步驟原料中的蒲黃和三七參照實(shí)施例1、2中的制備方法制成提取物。1)聚乙二醇6000在水浴中加熱熔融；2)聚乙二醇6000全部熔融后加入蒲黃提取物和三七提取物，攪拌溶解;3)過60目篩過濾；4)保持60'C滴入冷至IO'C以下的液體石蠟中制成丸；5)成品全檢，包裝入庫。實(shí)施例9蒲三注射液的制備處方一蒲黃提取物三七提取物聚山梨酯80注射用水12.5g(相當(dāng)于原藥材500g)21g(相當(dāng)于原藥材200g)50g加至1000ml共制備1000ml蒲黃提取物25g(相當(dāng)于原藥材lkg)三七提取物21g(相當(dāng)于原藥材500g)聚山梨酯8050g注射用水加至1000ml共制備1000ml具體步驟-原料中的蒲黃和三七參照實(shí)施例1、2中的制備方法制成提取物。(1)提前一天處理配液用的管道及容器等，臨用前再用新鮮的注射用水沖洗;(2)將聚山梨酯80制成20%的水溶液，加入處方量的蒲黃提取物和三七提取物，加熱攪拌溶解完全；(3)補(bǔ)加注射用水至全量；(4)加入配液量0.1%的針用活性炭，加熱攪拌15分鐘；(5)經(jīng)砂濾棒過濾脫炭，測定并調(diào)節(jié)溶液的pH值；(6)經(jīng)0.45pm的微孔濾膜精濾；(7)檢査溶液的澄明度，半成品化驗(yàn)；(8)將溶液熔封于玻璃安瓿中；(9)10(TC流通蒸汽滅菌30分鐘；(10)趁熱將樣品放入0.01%的亞甲藍(lán)溶液中檢漏；(11)燈檢，成品全檢，包裝入庫。權(quán)利要求1、一種用于心腦血管疾病的藥物組合物，其特征在于，按照重量組份計(jì)算，制成該藥物組合物所含藥效成分的原料藥的組成為蒲黃200～10000份、三七100～5000份。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，按照重量組份計(jì)算，制成該藥物組合物所含藥效成分的原料藥的組成為蒲黃5006000份、三七2002000份。3、根據(jù)權(quán)利要求2所述的藥物組合物，其特征在于，按照重量組份計(jì)算，制成該藥物組合物所含藥效成分的原料藥的組成為蒲黃10003000份、三七5001000份。4、根據(jù)權(quán)利要求13所述的任一藥物組合物的制備方法，其特征在于，所述的蒲黃和三七可以用適宜的溶劑分別或混合經(jīng)過提取加工得到其提取物，總提取物再和藥用輔料混合加工制成制劑，所得蒲黃提取物的主要有效成分為黃酮類化合物，所得三七提取物的主要有效成分為三七總皂苷。5、根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，按照重量組份計(jì)算，制成該藥物組合物所含藥效組分的原料藥的組成還可以為蒲黃提取物4400份、三七提取物4250份。6、根據(jù)權(quán)利要求5所述的藥物組合物，其特征在于，按照重量組份計(jì)算，制成該藥物組合物所含藥效組分的原料藥的組成為蒲黃提取物10240份、三七提取物8100份。7、根據(jù)權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，按照重量組份計(jì)算，制成該藥物組合物所含藥效組分的原料藥的組成為蒲黃提取物20120份、三七提取物2050份。8、根據(jù)權(quán)利要求57所述的任一藥物組合物，其特征在于，所述的蒲黃提取物中蒲黃總黃酮的含量不低于30%;三七提取物中三七總皂苷含量不低于60%，其中三七皂苷R,不低于2.0%,人參皂苷Rgl不低于25.0%，人參皂苷Rbl不低于25.0%。9、根據(jù)權(quán)利要求13、57所述的任一藥物組合物，其特征在于，該藥物組合物可以與任一藥學(xué)上可接受的輔料混合制成任何一種臨床上或藥學(xué)上可接受的劑型。10、根據(jù)權(quán)利要求9所述的藥物組合物，其特征在于，所述的劑型為口服制劑或注射劑。全文摘要本發(fā)明屬于醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，公開了蒲黃或其提取物與三七或其提取物的藥物組合物及其制備方法，在制備治療心腦血管疾病的藥物中的應(yīng)用和含有該藥物組合物的制劑。按照重量組份計(jì)算，制成它所含藥效成分的原料藥的組成為蒲黃200～10000份、三七100～5000份，或者為蒲黃提取物4～400份、三七提取物4～250份?？芍瞥扇我慌R床上或藥學(xué)上可接受的劑型，優(yōu)選口服制劑或注射劑。本發(fā)明藥物組合物中兩藥具有協(xié)同增效作用，比單用蒲黃或其提取物與三七或其提取物的治療效果大大提高。共同發(fā)揮抗心肌缺血，減小心肌梗塞面積，抗血小板聚集，降低血壓等作用。文檔編號(hào)A61K36/88GK101176771SQ20061007005公開日2008年5月14日申請日期2006年11月9日優(yōu)先權(quán)日2006年11月9日發(fā)明者黃振華申請人:黃振華