專利名稱：：一種治療酒精性脂肪肝的中藥組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種治療酒精性脂肪肝的中藥組合物，具體地說是以中草藥為原料制備的中成藥，本發(fā)明還涉及該藥物組合物的制備方法及其功能主治與適應(yīng)癥。
背景技術(shù)：
：-在西方國家中，酒精性肝病是中青年死亡的主要原因之一。美國平均每年死于酗酒者計(jì)IO余萬人，瑞典1980年統(tǒng)計(jì)，6年來中年人酒精中毒死亡率和癌腫及冠心病相仿。因此在歐美，酒精性肝病是常見病，多發(fā)病，其所花費(fèi)的研究經(jīng)費(fèi)也十分驚人。在我國，隨著生活條件的改善，醐酒帶來的身心危害也越來越明顯，己成為較為嚴(yán)重的健康問題。每天飲酒精16()g的人，40%將有酒精性肝炎和脂肪肝發(fā)生。酒精性脂肪肝及酒精性肝炎、酒精性肝硬化皆屬酒精性肝病范疇。其中酒精性脂肪肝在酒精性肝病中最為常見，尤其在中老年期發(fā)病率較高，但近些年來其發(fā)病有年輕化的趨勢.本病后期部分病人可發(fā)展為肝纖維化和肝硬變，甚至發(fā)展為肝癌而死亡?，F(xiàn)今西醫(yī)對本病的治療效果欠佳。而中醫(yī)藥通過辨證論治對其有獨(dú)特療效。中醫(yī)藥治療酒精性脂肪肝多用活血化瘀、疏肝利濕、祛痰化濁等方法，但目前市場仍缺乏治療本病的有效中成藥品種。通過臨床發(fā)現(xiàn)濕熱瘀阻，肝絡(luò)不通為酒精性脂肪肝的發(fā)生和發(fā)展過程中的重要病機(jī)。癥見脅肋脹滿或疼痛，口苦嘔惡，納呆腹脹，大便不暢或便秘，小便色黃，舌苔膩而微黃，脈弦滑等。此類病人約占臨床病人的60%左右。我們以《內(nèi)科摘要》治療酒積之名方茵陳五苓散為基礎(chǔ)，結(jié)合臨床經(jīng)驗(yàn)加味配伍，研制開發(fā)了本發(fā)明膠囊制劑，以清肝利濕為主，配伍通絡(luò)化積之品組方?，F(xiàn)代研究證明本品有降脂、保肝、解酒之功。本發(fā)明膠囊制劑的問世，將有較為廣闊的市場前景，必將會帶來良好的社會效益和經(jīng)濟(jì)效益。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種治療酒精性脂肪肝的中藥組合物及其制備方法。本發(fā)明的目的采用下述技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)，一種治療酒精性脂肪肝的中藥組合物，其主要特征在于它包含有以下重量配比的中藥材制成-茵陳6001500重量份白術(shù)3001200重量份澤渾300900重量份桂枝200900重量份穿山龍5001500重量份豬苓3001200重量份葛根5001500重量份所述的一種治療酒精性脂肪肝的中藥組合物，其最佳的中藥材重量配比為茵陳1080重量份白術(shù)324重量份澤瀉324重量份桂枝216重量份穿山龍540重量份豬苓324重量份葛根540重量份本發(fā)明所述的一種治療酒精性脂肪肝的中藥組合物，所說的藥劑是片劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、丸劑、散劑、糖漿劑、煎膏劑、合劑、滴丸劑、顆粒劑、口服液等各種藥劑學(xué)上可以接受的劑型。本發(fā)明所述的一種治療酒精性脂肪肝的中藥組合物的制備方法，其制備方法如下葛根、澤瀉、穿山龍加6-12倍量70%乙醇，加熱回流提取l-3次，每次l-3小時，合并提取液，濾過，濾液減壓回收乙醇。茵陳、豬茶、白術(shù)、桂枝四味藥材，加8-12倍量水，煎煮1-3次，每次1-3小時，合并提取液，濾過，與上述醇提濃縮液合并，混勻，加熱濃縮至相對密度約為1.08-1.10(6(TC測)的清膏，加乙醇至含醇量達(dá)50%,靜置24小時，濾過，減壓回收乙醇，濃縮，干燥，粉碎，得干粉，加入適宜的輔料，制備成各種劑型，即得。本發(fā)明藥物經(jīng)試驗(yàn)研究安全無毒，起效迅速，療效可靠，對酒精性脂肪肝有很好的治療效果。其毒理學(xué)和藥效學(xué)試驗(yàn)資料如下一、主要藥效學(xué)試驗(yàn)1.對酒精性脂肪肝的影響Wistar雄性大鼠卯只，體重150—210g，取15只作為正常對照組正常飲食和飲水飼養(yǎng)，其余動物給予79.5%玉米粉、20%豬油、0.5%膽固醇做成的混合飼料，另外30%乙醇定量飲用[1]。詞養(yǎng)1個月，隨機(jī)取部分動物采血測定CHO、TG、HDL、LDL，活殺取肝檢測肝內(nèi)TG和肝內(nèi)Gn水平，并做病理組織學(xué)檢g，確定是否已形成脂肪肝模型。測試數(shù)據(jù)見表l一l。表1-1.大鼠酒精性脂肪肝模型檢測(又±s,『10)組別正常對照組模艱對照幼CH0(畫1/L)1.309±0.1822.7290.378鵬TG(畫1/L)0.217±0.9980.470±1.932卿HDL(,ol/L)0.096±1.6310.1400.743鵬LDL(mmol/L)0.1620.5210.3211.986■Gn(g/100g)0.017±0.0980.1800.737鵬TG(陽l/100g)0.552±1.6800.806±3.003鵬注與正常對照組比胖P0.01,#ft￥P<0.001表l一l數(shù)據(jù)表明，經(jīng)過30天連續(xù)高脂飲食加酒精刺激，導(dǎo)致血脂代謝紊亂和肝內(nèi)脂肪和糖原蓄積，模型組與正常對照組比較均有顯著性差異。大體病理檢査正常對照組和模型對照組大鼠肝臟分別為5和10份。正常對照組大鼠肝臟顏色褐紅、鮮艷，包膜完整、光滑，邊緣銳利。模型對照組大鼠肝臟顏色略黃、飽滿，包膜緊張、有油膩感覺，邊緣欠銳利。組織病理檢查兩組標(biāo)本迅速低溫速凍，冰凍切片，固定后，常規(guī)標(biāo)本均進(jìn)行脂肪特染。正常對照組肝細(xì)胞大小一致，排列整齊，核無畸形，肝竇可見，枯否氏細(xì)胞偶見，無明顯變性、壞死和纖維化。模型對照組肝細(xì)胞明顯腫脹、胞漿內(nèi)呈現(xiàn)橘黃色的脂肪組織，呈片狀、大小不一；肝竇消失。匯管區(qū)血管受擠壓，管腔變小，并有少量纖維組織增生。病理檢査結(jié)論與正常對照組相比，模型對照組出現(xiàn)明顯的脂肪變性。確定已形成脂肪肝模型。其余動物隨機(jī)分為6組正常對照組、模型對照組、本發(fā)明膠囊制劑高、中、低劑量組、護(hù)肝片對照組、聯(lián)苯雙酯對照組。各藥物組按1ml/100g灌胃給藥，每天一次，連續(xù)30天，正常對照組、模型對照組灌胃給等體積蒸餾水。實(shí)驗(yàn)結(jié)束各組大鼠逐只稱重，末次藥后禁食12小時，眶靜脈取血，2500rpm低溫離心15min，取血清，測定CHO、TG、HDL、LDL7JC平，結(jié)果進(jìn)行組間t檢驗(yàn)，見橫表l一2;測定AST、ALT水平見橫表1—3。取血后立即腹腔注射10W葡萄糖20ml/kg，1小時后放血處死解剖大鼠，電子天平稱取肝臟重量，計(jì)算肝/體比值，實(shí)驗(yàn)期間的體重變化和藥后肝重、肝/體比值結(jié)果進(jìn)行組間t檢驗(yàn)，見橫表l一4。另取部分肝臟精稱用組織研磨器打肝勻漿，然后按照試劑操作說明，測定肝組織內(nèi)糖原[2-3]和TG[4]MDA[5]含量，結(jié)果進(jìn)行組間t檢驗(yàn)，見橫表1—5。_表1-2本發(fā)明膠囊制劑對酒精性脂肪肝大鼠血脂代謝的影響(又土s,n=10)_<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>注與正常對照組比#P<0.05,##P<0.01，#絲PO.001;與模型對照組比叩<0.05，"P〈0.01'**叩<0.001;與高劑量組比@P<0.05,@@P<0.01，@@@P<0.001由橫表l一2.結(jié)果可見，經(jīng)酒精性脂肪肝造模后，大鼠血CHO、TG、LDL均顯著升高，HDL則顯著降低。給予本發(fā)明膠囊制劑后可使升高的CHO顯著降低，高、中、低劑量與模型對照組比較分別有極顯著、非常顯著、顯著性差異；高劑量的作用強(qiáng)度優(yōu)于護(hù)肝片、聯(lián)苯雙酯，中劑量組作用強(qiáng)度與護(hù)肝片、聯(lián)苯雙酯組相當(dāng)，優(yōu)于低劑量組。作用強(qiáng)度呈組間劑量依賴關(guān)系。給予本發(fā)明膠囊制劑后可使升高的TG顯著降低，高劑量組模型對照組比較有極顯著性關(guān)系，作用強(qiáng)度與陽性對照組相當(dāng)，中、低劑量組與模型對照組比較有亦非常顯著性差異。給予本發(fā)明膠囊制劑后可使升高的LDL顯著降低，其藥物高、中、低劑量之間的藥效作用強(qiáng)度有一定的劑量依賴關(guān)系，與模型對照組比較有極顯著性差異，作用強(qiáng)度與護(hù)肝片相當(dāng)，優(yōu)于聯(lián)苯雙酯組。給予本發(fā)明膠囊制劑后可使降低的HDL顯著升高，其藥物高、中、低劑量與模型對照組比較均有顯著性差異，作用強(qiáng)度與聯(lián)苯雙酯相當(dāng)。表1一3.本發(fā)明膠囊制劑對酒精性脂肪肝大鼠肝功能的影響(5±s，ri=10)_組另ljAST(U/L)ALT(U/L)注與正常對照組比#P<0.05，##PO.Ol，###P<0.001;與模型對照組比*P<0.05，**P<0.01,***P<0.001;與護(hù)肝片組比&PO.05,&&PO.01,&&&PO.001;丄j聯(lián)苯雙酯組比SP0.05，$$P<0.01,$$$P<0.001;與髙劑量組比@P<0.05,@@P<0.01,@@@P<0.001由表1一3結(jié)果可見，酒精性脂肪肝大鼠血AST、ALT含量均顯著升高。給予本發(fā)明膠囊制劑后可使升高的血AST顯著降低，其藥物高、中、低劑量之間的藥效作用強(qiáng)度有一定的劑量依賴關(guān)系，與模型對照組比較藥物高、中、低劑量分別有極顯著、非常顯著性差異；高、中、低劑量的作用強(qiáng)度優(yōu)于護(hù)肝片，中、低劑量的作用強(qiáng)度與聯(lián)苯雙酯相當(dāng)。給予本發(fā)明膠囊制劑后可使升高的血ALT顯著降低，其藥物高、中劑量作用強(qiáng)度與聯(lián)苯雙酯組和護(hù)肝片組相當(dāng)，與模型組比較有極顯著性差異；低劑量組與模型組比較有非常f著性差異；中、低劑量組與與高劑量組、聯(lián)苯雙酯組比較也有非常顯著性差異。表1-4本發(fā)明膠囊制劑對酒精性脂肪肝大鼠體重、肝重改變的影響組別實(shí)驗(yàn)前體重(g)藥后15天體重(g)藥后30天體重(g)藥后肝重(g)肝/體比值(100W4.079.88,9.31###***13.85,***$$@@19.20###**$$@@11.92###***$$@@8.66183.5±11.3336.9±40.5371.1±42.211.86±1.733.25±0.67184.2土12.1255.7±54.0299.9±39.8,14.29±1.76##4.80土0.51187.8±8.9325.1±54.8*358.7±37.812.35±1.203.480.55184.6±12.0302.8±46.6聿336.536.7**12.96±1.723.900.69184.9±8.4298.8±49.1331.1±40.3*13.90±2,974.25±1.06181.9±13.2299.4±38.2#330.738.3*13.39±1.854.130.90正常對照組模型對照組聯(lián)苯雙酯組132.89290.51210.46226.32236.56246.96227.2510.3297.9737.60###168.7447.58126.5648.74144.4336.51146.9136.06#絲*143.8237.06125.63組組量量量片常傷劑劑劑肝正損髙中低護(hù)經(jīng)經(jīng)經(jīng)經(jīng)量量量片齊齊布肝高中低護(hù)±+1±+一+i±±±±±±±±±聯(lián)苯雙脂185.4±8.4304.1±38.1*357.7±56.3**12.04±1.45**3.44±0.6S***注與正常對照組比#PO.05,絲PO.Ol，腳PO.001;丄j模荊對照組比*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001;與髙劑量組比@P<0.05,@@P<0.01，@@@P<0.001;與護(hù)肝片組比&PO.05,&&P<0.0i,&&&PO.001;與聯(lián)苯雙酯組比SPO.05,$$P<0.01,$$$P<0.001由橫表l一4結(jié)果可見，酒精性脂肪肝大鼠造模后體重降低與空白組比較均有非常顯著性得差異，提示造模成功。給藥15天后，藥物高、中劑量組大鼠體重與正常組差異消除，與模型組比較有顯著性差異。給藥30天后，模型組體重與正常組比較有極顯著性差異，進(jìn)一步說明造模成功；藥物高、中、低劑量組與正常組比較差異消除，與模型組比較，分別有極顯著、非常顯著和顯著性差異。給藥30天后肝臟重量檢測結(jié)果表明高劑量組作用強(qiáng)度與聯(lián)苯雙酯對照組相當(dāng)，與模型組比較有非常顯著性差異，優(yōu)于中、低劑量組及護(hù)肝片對照組；肝/體比值統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，高劑量組作用強(qiáng)度與聯(lián)苯雙酯組相當(dāng)，與模型組比較有極顯著性差異，中劑量組與模型組比較有非常顯著性差異，作用強(qiáng)度優(yōu)于低劑量組和護(hù)肝片對照組。表1-5本發(fā)明膠囊制劑對酒精性脂肪肝大鼠肝內(nèi)物質(zhì)和抗氧化實(shí)驗(yàn)的影響(X±s，『10)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>注與正常對照組比#P<0.05,##P<0.01,###P<0.001;與模型對照組比*P<0.05,**P<0.01，***P<0.001;與髙劑量組比@P<0.05，@@P<0.01,@@@P<0.001;護(hù)肝片組比&P<0.05，&&P<0.01，&&&P<0.001;與聯(lián)苯雙酯組比SP0.05，$$P<0.01，$$$P<0.001由表l一5結(jié)果可見，酒精性脂肪肝大鼠肝內(nèi)TG、Gn、MDA及血內(nèi)MDA含量均顯著升高。對TG的影響與模型對照組比較藥物高、中、低劑量分別有極顯著、非常顯著和顯著性差異，高劑量的作用強(qiáng)度與護(hù)肝片相當(dāng)，中劑量的作用強(qiáng)度與聯(lián)苯雙酯相當(dāng)，低劑量組與高劑量組比較有非常顯著性差異，與護(hù)肝片組比較有顯著性差異。對Gn的影響其藥物高、中劑量與模型組比較有極顯著性差異，作用強(qiáng)度與護(hù)肝片組、聯(lián)苯雙酯組相當(dāng)，優(yōu)于低劑量組；低劑量組與模型組比較有非常顯著性差異，但與高劑量組比較亦有顯著性差異。對肝內(nèi)MDA的影響其藥物高、中、低劑量之間的藥效作用強(qiáng)度有一定的劑量依賴關(guān)系，與模型對照組比較分別有非常顯著、顯著性差異；高劑量的作用強(qiáng)度優(yōu)于護(hù)肝片及聯(lián)苯雙酯組，中、低劑量的作用強(qiáng)度與聯(lián)苯雙酯組相當(dāng)。對血內(nèi)MDA的影響與空白組比較高、中、低劑量組分別有昆著、非常顯著和極顯著性差異；與模型組比較，高、中劑量組呈非常顯著和顯著性差異，中劑量組作用強(qiáng)度優(yōu)于低劑量組，與護(hù)肝片組相當(dāng)。另取部分肝臟，用10%福爾馬林固定做病理組織學(xué)檢察，評價標(biāo)準(zhǔn)如下，結(jié)果進(jìn)行RKlit分析，見表1一6。病理檢查報告模型組臟器包膜略緊張，切片色微黃，有輕度油膩感，其余各組外觀切面均無明顯異常。鏡檢模型組肝臟有不同程度的脂肪變性，胞漿空殼，可見脂滴，以近包膜處為明顯，沿小葉中央?yún)^(qū)分布。部分區(qū)域可見小灶性壞死及炎細(xì)胞浸潤。未見纖維化增生。其余各組病變均不明顯。等級評分如下-1.切片中無明顯相應(yīng)病理改變，為"一"。2.片中偶見相應(yīng)病理變化，病變散在分布或單個發(fā)生，病變范圍占全視野的1/4以下，為"+"。3.相應(yīng)病理改變明顯，呈片狀或群集分布，病變范圍占全視野的1/4~1/2，計(jì)為"++"。4.相應(yīng)病變程度嚴(yán)重，病變呈大片狀分布，占據(jù)全視野的1/2以上，計(jì)為"+++".表1~6本發(fā)明膠囊制劑對酒精性脂肪肝大鼠病理學(xué)分級和積分結(jié)果(又±s,n=10)H顆粒變性數(shù)脂肪變性數(shù)纖維組織增生數(shù)由表l一6數(shù)據(jù)可見，本發(fā)明膠囊制劑高、中、低劑量對酒精性脂肪肝大鼠肝臟脂肪變性、顆粒變性分別有非常顯著、顯著性的改善作用。本發(fā)明膠囊制劑高劑量對酒精性脂肪肝大鼠肝臟纖維組織增生有顯著的改善作用。切片放入20倍物鏡下(X20)采集病變區(qū)域內(nèi)任意三個視野的圖象，通過攝相系統(tǒng)輸入計(jì)算機(jī)內(nèi)，應(yīng)用武漢同濟(jì)醫(yī)科大學(xué)清屏影象公司提供的軟件MPI-500多媒體彩色病理圖文分析系統(tǒng)進(jìn)行測量。選擇測量系數(shù)——彩色分段(脂肪變細(xì)胞所占面積/視域區(qū)面積的百分比X100。/。的均值為脂肪細(xì)胞面積百分比。)，(正常細(xì)胞所占面積/視域區(qū)面積的百分比X<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>及且&經(jīng)經(jīng)經(jīng)經(jīng)糊鵬遣塭g片E員布布布肝分正扭高中低護(hù)100%的均值為正常肝細(xì)胞面積百分比。)。統(tǒng)一視域匡條件4.535e+0.4，統(tǒng)一倍體為20倍，像素點(diǎn)長0.411wm。取圖象(取采集的圖象)一濾波一連斷一選刪除(去除細(xì)小顆粒及其它非病變細(xì)胞)一測量(每張切片測量三個視野的圖象)，每組所測切片數(shù)據(jù)經(jīng)計(jì)算機(jī)統(tǒng)計(jì)后得出結(jié)果如下結(jié)果進(jìn)行組間t檢驗(yàn)，見表1一7_表1一7.對酒精性脂肪肝肝臟病理改變圖象分析的影響(S±s,n=10)_正常肝細(xì)胞面密度脂肪變細(xì)胞面密度肝細(xì)胞與脂肪變細(xì)胞面積比值注與正常對照組比#P<0.05，##P<0.01,弁絲PO.001;與模型對照組比*P<0.05,**P<0.01，***P<0.001;與高劑量組比@P<0.05,@@P<0.01,@@@P<0.001;與護(hù)肝片組比&P<0.05，&&PO.01,&&&PO.00I;與聯(lián)苯雙酯組比SP〈0.05,$$P<0.01,$$$P<0.001由表1—7數(shù)據(jù)可見，本發(fā)明膠囊制劑對大鼠酒精性脂肪肝模型有降低脂肪變細(xì)胞面積百分比、提髙正常肝細(xì)胞面積百分比的作用，對脂肪變細(xì)胞/肝細(xì)胞面積百分比比值有減少作用，與模型對照組比較有極顯著性差異，作用強(qiáng)度與陽性對照組相當(dāng)。提示本發(fā)明膠囊制劑對灑精性大鼠肝臟脂肪變性有顯著的改善作用。2.對CC14所致肝損傷小鼠的影響18—20g昆明種小鼠60只，雌雄各半，按體重隨機(jī)分為六組正常對照組、模型對照組、本發(fā)明膠囊制劑髙、中、低劑量組和護(hù)肝片對照組。灌胃給藥0.2ml/10g,連續(xù)7天。末次藥后2h,除正常對照組外ip0.25。/。CCU—橄欖油10ml/kg6]，24h后眶靜脈取血，2500rpm離心15min,取血清測定GPT,取血后立即解剖大鼠取部分肝臟精稱、計(jì)算肝/體比值。勻漿測定肝組織內(nèi)TG，結(jié)果進(jìn)行組間t檢驗(yàn)，見表2_1、表2—2。_表2-1本發(fā)明膠囊制劑對CCU所致肝損傷小鼠的影響(又±s,n=10)_組別血GPT(卡氏單位)肝內(nèi)TG(國ol/100g)注:與正常對照組比#P<0.05，##PO.01,###P<0.001;與模型對照組比*P<0.05，**P<0.01，**叩<0細(xì)與髙劑量組比@P<0.05,@@P<0.01，@@@P<0.00155.717.30.648211.6±45.0絲#0.852122.8±37.1###***0.639138.059.30.701194.762.70.733151.4±48.20.6940.0790.105###0.084***0.112**0.0760.081**正常對照組o，4348模型對照組0,2397高劑量組0.5217中劑量組Q,4462低劑量組o.3237護(hù)肝片組0.3220聯(lián)苯雙酯組0.36700.15080.0727±0.082717.940.02750.4927±0.1243#絲207.810.17000.0915±0.045618.340.13730.1035土0.030723.810.05630.13720.056545.300.1316@0.1341±0.056746.150.07690.1115±0.056433.6821.9052.92#絲8.80,5.62***26.32#***@&23.56#***@&21.87***正常組模型組±+1+一±+1±±±±±±士+1±±±±±±±rrffn1.1ri一-1、rrl經(jīng)經(jīng)經(jīng)紹量量量片高中低護(hù)由表2—1結(jié)果可見，小鼠ip給予CCU后血清GPT含量和肝內(nèi)TG含量均顯著升高。給予本發(fā)明膠囊制劑后，高劑量可使升高的血清GPT顯著降低，與模型組比較有極顯著性差異,但作用強(qiáng)度優(yōu)于護(hù)肝片組；中劑量組與模型組比較有非常顯著性差異，作用強(qiáng)度與護(hù)肝片組相當(dāng)，優(yōu)于低劑量組。本發(fā)明膠囊制劑藥物高、中、低劑量可使升高的肝內(nèi)TG極顯著降低，與模型對照組比較有極顯著、非常顯著和顯著性差異，中劑量組作用強(qiáng)度與護(hù)肝片組相當(dāng)，優(yōu)于低劑量組。表2—2本發(fā)明膠囊制劑對CC14所致肝損傷小鼠體重、肝重改變的影響(又±s,n=10)_""""實(shí)驗(yàn)前體重(g)藥后體重(g)藥后肝重(g)肝/體比值(100%)~"注與正常對照組比#P<0.05，1,###P<0.001;與模型對照組比*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001表2—2可見，藥后模型組小鼠體重顯著降低，高、中、低劑量組小鼠肝重與模型組比較分別有極顯著、非常顯著和顯著性差異，中劑量組作用強(qiáng)度與護(hù)肝片組相當(dāng)，優(yōu)于低劑量組;肝/體比值高劑量組與模型組比較有極顯著性差異，中劑量組與模型組比較有非常顯著性差異，作用強(qiáng)度與護(hù)肝片組相當(dāng)，不如高劑量組。另取部分肝臟，用10%福爾馬林固定做病理組織學(xué)檢察，評價標(biāo)準(zhǔn)如下，結(jié)果進(jìn)行Ridit分析，見表2—3。病理檢査結(jié)果6組標(biāo)本外觀均未見明顯腫大，萎縮及明顯壞死，切面無明顯的油膩感。鏡檢與正常對照組相比，模型對照組及各用藥組均可見明顯的肝細(xì)胞壞死，嗜酸性變性及炎細(xì)胞浸潤，主要位于中央靜脈周圍及匯管區(qū)，小葉中間帶病變相對較輕，各組均未見有纖維組織增生及脂肪變性。與損傷對照組相比，各用藥組變性壞死程度較輕，但胞漿疏松化表現(xiàn)，各組差別不大。對肝細(xì)胞漿疏松化、肝細(xì)胞嗜酸性變，及肝細(xì)胞壞死等損傷性表現(xiàn)及炎細(xì)胞浸潤的抗損傷表現(xiàn)按以下標(biāo)準(zhǔn)評分肝細(xì)胞各種損傷性表現(xiàn)(-):表示無明顯病理改變。(+):表示偶見幾個細(xì)胞發(fā)生相應(yīng)的病理改變，分布散在。(++):表示l/3左右細(xì)胞發(fā)生相應(yīng)病理改變，分布較廣。(+++):表示約有一半左右甚至更多的細(xì)胞發(fā)生相應(yīng)的病理改變。炎細(xì)胞浸潤<table>complextableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>(-)表示基本上見不到炎細(xì)胞。(+):表示炎細(xì)胞在多數(shù)視野中偶見。(++):表示在多數(shù)視野中易見散在分布。(+++):表示炎細(xì)胞多見，并在局部聚集，取代部分且細(xì)胞結(jié)構(gòu)。表2-3本發(fā)明膠襄制劑對CC14所致肝損傷小鼠肝臟病理學(xué)分級和積分的影響(又土s,n-10)組另U脂肪變性嗜酸性變性肝細(xì)胞壞死炎細(xì)胞浸潤注與正常對照組比#P<0.05，##PO.Ol，#糾P〈0雇;與模型對照組比*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001**P<0.001由表2—3數(shù)據(jù)可見，小鼠給予CCU后肝臟病理改變以肝細(xì)胞脂肪性變、嗜酸性變和肝細(xì)胞壞死、炎細(xì)胞浸潤為主，給以本發(fā)明膠囊制劑后對上述改變有顯著的改善作用。切片放入20倍物鏡下(X20)采集病變區(qū)域內(nèi)任意三個視野的圖象，通過攝象系統(tǒng)輸入計(jì)算機(jī)內(nèi)，應(yīng)用武漢同濟(jì)醫(yī)科大學(xué)清屏影象公司提供的軟件MPI-500多媒體彩色病理圖文分析系統(tǒng)進(jìn)行測量。選擇測量系數(shù)——彩色分段脂肪細(xì)胞面積百分比-脂肪變細(xì)胞所占面積/視域區(qū)面積的百分比X100。/o;正常肝細(xì)胞面積百分比=正常細(xì)胞所占面積/視域區(qū)面積的百分比><100°/0;統(tǒng)一視域匡條件4.535e+0.4,統(tǒng)一倍體為20倍，像素點(diǎn)長0.411um。取采集的圖象一濾波一連斷一選刪除(去除細(xì)小顆粒及其它非病變細(xì)胞)一測量(每張切片測量三個視野的圖象)。每組所測切片數(shù)據(jù)經(jīng)計(jì)算機(jī)統(tǒng)計(jì)后得出結(jié)果如下結(jié)果進(jìn)行組間t檢驗(yàn)，見表2—4。_表2—4.對四氯化碳致肝臟病理改變圖象分析的影響組別_正常肝細(xì)胞面密度脂肪變細(xì)胞面密度肝細(xì)胞與脂肪變細(xì)胞面積比值正常對照組0.699±0.0870.038±0.0566.016±9.107模型對照組0,314±0.0430.397±0.114428.677±40.049###髙劑量組0.468±0.0640.195±0.11441.89325.320中劑量組0.379±0,0520.263±0.06669.672±16.485###***@@低劑量組0.341±0.0440.339±0.134絲#@99.379±36.735#,@@護(hù)肝片組0.371±0.0740.262±0.095絲#*73.93635.673#,@注:與正常對照組比#P<0.05,##P<0.01,###P<0.001;與模型對照組比*PO.05,**P<0.01，***PO細(xì);與高劑量組比@P<0.05，@@P<0.01，@@@P<0.001;與護(hù)肝片組比$P<0.05，$$PO.Ol，$$$P<0.001-++++++—++++++"—++++++-++++++82003700910064000262腳0442絲0541###02626320林72103004510氺氺3340承tt610"6104414氺4222621153204501氺氺4510林64004003610*氺m二PTlr，一iJl二及且且經(jīng)紹經(jīng)經(jīng)辭餅遣遣遣片+E員齊布布肝汾正fe高中低護(hù)由表2—4數(shù)據(jù)可見，本發(fā)明膠囊制劑對小鼠四氯化碳肝損傷模型有降低脂肪變細(xì)胞面積百分比，提高正常肝細(xì)胞面積百分比的作用；對脂肪變細(xì)胞/肝細(xì)胞面積百分比比值有減少作用。提示本發(fā)明膠囊制劑對小鼠四氯化碳肝損傷中肝臟脂肪變性有顯著的改善作用。3.對脂代謝影響3.1對蛋黃乳劑所致小鼠高血脂的影響昆明種雄性小鼠60只，體重18—22g,分為6組正常對照組、模型對照組、本發(fā)明膠囊制劑高、中、低劑量組、煙酸對照組，預(yù)先給藥，按0.25ml/10g體積ig,每天--次，連續(xù)5天，正常、模型對照組ig等量水。取12日新鮮雞蛋黃用生理鹽水配成75%蛋黃乳液w備用。上述小鼠除正常對照組外，于實(shí)驗(yàn)前14小時禁食，灌胃2小時后腹腔注射蛋黃乳液0.5ml/只，20小時后眶靜脈取血，放置30分鐘，2500rpm離心15min，取血清，測定CHO水平，結(jié)果進(jìn)行組間t檢驗(yàn)，見表3—1。表3—1.本發(fā)明膠囊制劑對蛋黃乳致小鼠血脂改變的影響(又±s,n=10)組別血CHO(謹(jǐn)ol/L)注與正常對照組比#PO.05,絲PO.01,#絲PO.001:與模型對照組比*<0.05,**P<0.01,***P<0.00h與煙酸對照組比$PO.05,$$P<0.01，$$$PO.001由表3—1結(jié)果可見，蛋黃乳所致小鼠血CHO水平極顯著升高，模型組與空白組比較有極顯著性差異；給予本發(fā)明膠囊制劑后可使升高的CHO顯著降低，其藥物高、中、低劑量之間的藥效作用強(qiáng)度有一定的劑量依賴關(guān)系，與模型對照組比較藥物高劑量組有極顯著，作用強(qiáng)度與煙酸相當(dāng)；中、低劑量組與模型組比較有非常顯著性差異，但作用強(qiáng)度不如煙酸對照組，中劑量組與煙酸組比較有非常顯著性差異，低劑量組與煙酸對照組比較有極顯著性差異。3.2對高脂飲食所致大鼠高血脂的影響Wistar雄性大鼠60只，體重120—140g,分為6組正常對照組、模型對照組、洛伐他汀對照組、本發(fā)明膠囊制劑高、中、低劑量組，除正常對照組外各鼠ig脂肪乳miml/100g,每天一次，連續(xù)7天。正常對照組ig等量NS。進(jìn)行成模檢測，然后隨機(jī)分組，第8天開始給藥，1ml/100g，每天一次，連續(xù)10天，正常對照組ig等量NS。末次藥后禁食12小時，取血前l(fā)小時灌胃，然后眶靜脈取血，2500rpm離心15min,取血清，測定CHO、TG、HDL、<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>LDL,結(jié)果進(jìn)行組間t檢驗(yàn)，見表3—2。表3_2本發(fā)明膠囊制劑對脂肪乳高脂大鼠血脂代謝的影響(X±s，n=l0)組別血CH0(mmol/L)血TG(mmol/L)血LDL(mmol/L)血HDL(隱ol/L)注與正常對照組比#P〈0.05'##PO.Ol，糾#PO細(xì)，與模型對照組比叩<0.05,**P<0.0i，***P<0.001,與高劑量組比$P<0.05由表3—2結(jié)果可見，大鼠灌胃給予高脂飲食后血中CHO、TG、LDL均顯著升高，而HDL則顯著降低。給予本發(fā)明膠囊制劑高、中、低劑量可使升高的CHO、LDL極顯著的降低，與模型對照組比較有極顯著性差異；給予本發(fā)明膠囊制劑高、中、低劑量可使升高的TG顯著的降低，與模型對照組比較有顯著性差異；給予本發(fā)明膠囊制劑高、中、低劑量可使降低的HDL得到顯著的升高，與模型對照組比較分別有非常顯著、顯著性差異。二、急性毒性研究-一日內(nèi)給小鼠灌胃本發(fā)明膠囊制劑浸膏60g/kg,相當(dāng)于臨床70kg人每公斤體重日用量的1764倍以上，連續(xù)觀察七天,小鼠一般狀況良好,無一死亡，說明本品低毒、安全。三、長期毒性研究給大鼠灌胃本發(fā)明膠囊制劑藥物浸膏高、中、低劑量，按含生藥量計(jì)算2.38g/kg鼠重、1.19g/kg鼠重、0.51g/kg鼠重，相當(dāng)于70kg人臨床日用量的70倍、35倍、15倍，連續(xù)給藥180天，觀察動物一般狀況，試驗(yàn)第90天、第180天，分別檢測血液學(xué)、血生化學(xué)指標(biāo)；每組分別活殺10只和20只大鼠，檢測心、肝、脾、肺、腎、胃、腦等重要臟器的臟體比值和組織病理學(xué)的改變。每組剩余10只動物，進(jìn)行60天恢復(fù)期觀察，恢復(fù)期結(jié)束后復(fù)測上述指標(biāo)，均未發(fā)現(xiàn)明顯的毒副作用和繼發(fā)、后遺的毒性反應(yīng)，說明本藥擬采用的臨床用藥劑量和療程安全、低毒。綜上所述，本發(fā)明膠囊制劑的藥效作用與臨床功用主治相吻合，急毒、長毒試驗(yàn)表明本發(fā)明安全可靠。具體實(shí)施方案<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>IJ經(jīng)經(jīng)經(jīng)他量量量伐劑劑劑洛高中低實(shí)施例h茵陳1080g白術(shù)324g澤瀉324g桂枝216g穿山龍540g豬苓324g葛根540g制備方法葛根、澤瀉、穿山龍加8倍量70%乙醇，加熱回流提取2次，每次2小時，合并提取液，濾過，濾液減壓回收乙醇。茵陳、豬苳、白術(shù)、桂枝四味藥材，加10倍量水，煎煮3次，每次1.5小時，合并提取液，濾過，與上述醇提濃縮液合并，混勻，加熱濃縮至相對密度約為1.08(6(TC測)的清膏，加乙醇至含醇量達(dá)50%，靜置24小時，濾過，減壓回收乙醇，濃縮，干燥，粉碎，得干粉。加入適宜的輔料制成片劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、丸劑、散劑、糖漿劑、煎膏劑、合劑、滴丸劑、顆粒劑、口服液、滴丸等各種劑型。實(shí)施例2:茵陳1200g白術(shù)350g澤瀉305g桂枝200g穿山龍500g豬苓320g葛根450g制備方法葛根、澤瀉、穿山龍加10倍量70%乙醇，加熱回流提取3次，每次2小時，合并提取液，濾過，濾液減壓回收乙醇。茵陳、豬苓、白術(shù)、桂枝四味藥材，加12倍量水，煎煮2次，每次2小時，合并提取液，濾過，與上述醇提濃縮液合并，混勻，加熱濃縮至相對密度約為1.1(6(TC測)的清膏，加乙醇至含醇量達(dá)50%，靜置24小時，濾過，減壓回收乙醇，濃縮，干燥，粉碎，得干粉。加入適宜的輔料制成片劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、丸劑、散劑、糖漿劑、煎膏劑、合劑、滴丸劑、顆粒劑、口服液、滴丸等各種劑型。權(quán)利要求1、一種治療酒精性脂肪肝的中藥組合物，其特征在于它由下述重量配比的原料制成的中藥制劑。茵陳600～1500重量份白術(shù)300～1200重量份澤瀉300～900重量份桂枝200～900重量份穿山龍500～1500重量份豬苓300～1200重量份葛根500～1500重量份2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療酒精性脂肪肝的中藥組合物，其中各中藥材的最佳重量配比是-茵陳1080重量份白術(shù)324重量份澤瀉324重量份桂枝216重量份穿山龍540重量份豬苓324重量份葛根540重量份3、根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的治療酒精性脂肪肝的中藥組合物，其特征在于所述的劑型是任何一種藥劑學(xué)上所述的劑型。4、根據(jù)權(quán)利要求3所述的治療酒精性脂肪肝的中藥組合物，其特征在于所述的藥劑為片劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、滴丸劑、顆粒劑、口服液、散劑、糖漿劑、滴劑、注射劑等等。5、一種權(quán)利要求l、2、3、4所述的治療酒精性脂肪肝的中藥組合物的制備方法，其特征在于葛根、澤瀉、穿山龍加6-12倍量70%乙醇，加熱回流提取l-3次，每次l-3小時，合并提取液，濾過，濾液減壓回收乙醇。茵陳、豬苓、白術(shù)、桂枝四味藥材，加8-12倍量水，煎煮l-3次，每次l-3小時，合并提取液，濾過，與上述醇提濃縮液合并，混勻，加熱濃縮至相對密度約為1.08-1.10(60℃測)的清裔，加乙醇至含醇量達(dá)50%，靜置24小時，濾過，減壓回收乙醇，濃縮，干燥，粉碎，得干粉，加入適宜的輔料，制備成各種劑型，即得。6、根據(jù)權(quán)利要求l、2、3、4、5所述的一種治療酒精性脂肪肝的中藥組合物的功能主治與適應(yīng)癥，其特征在于清肝利濕，通絡(luò)化積的功效。主要用于酒精性脂肪肝(濕熱瘀阻，肝絡(luò)不通證)的治療，癥見脅肋脹滿或疼痛，口苦嘔惡，納呆腹脹，大便不暢或便秘，小便色黃，舌苔膩而微黃，脈弦滑。全文摘要本發(fā)明涉及一種治療酒精性脂肪肝的中藥組合物，其提取工藝、制劑制備工藝和功能主治與適應(yīng)癥。其藥物組合物由茵陳、豬苓、白術(shù)、桂枝、葛根、澤瀉、穿山龍按重量配比組成。根據(jù)配方中各藥味有效成分性質(zhì)、特點(diǎn)分別采用乙醇回流提取，水提取、提取液進(jìn)行醇沉等工藝方法加工而成，從而最大限度的保留了藥效成分。本發(fā)明中藥組合物具有清肝利濕，通絡(luò)化積的功效。主要用于酒精性脂肪肝(濕熱瘀阻，肝絡(luò)不通證)的治療。癥見脅肋脹滿或疼痛，口苦嘔惡，納呆腹脹，大便不暢或便秘，小便色黃，舌苔膩而微黃，脈弦滑。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是根據(jù)中醫(yī)理論配方，工藝簡單，起效迅速，療效可靠。文檔編號A61K36/8945GK101199714SQ200610070498公開日2008年6月18日申請日期2006年12月11日優(yōu)先權(quán)日2006年12月11日發(fā)明者任海勇,劉持年,蓉孫,尹建偉,張作平,衣銀萍申請人:蓉孫