專利名稱：治療鼻炎的中藥噴霧劑組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥組合物及其制備方法，具體涉及一種治療各種鼻炎的中藥噴霧劑組合物及其制備方法。
背景技術(shù)：
根據(jù)世界醫(yī)學(xué)國際基金會31個成員國(不包括中國)1996年調(diào)查，變應(yīng)性鼻炎(即過敏性鼻炎)的發(fā)病率在10％-40％左右，并且有逐年增加的趨勢。在英國，20年變應(yīng)性鼻炎的患者增加了4倍。在中國，變應(yīng)性鼻炎的患者保守預(yù)計在4000萬以上。變應(yīng)性鼻炎4大典型癥狀是鼻塞、流涕、鼻癢、打噴嚏。這些癥狀與感冒具有相關(guān)性，因此不少變應(yīng)性鼻炎(AR)患者通常誤認為是感冒，如果包括誤診感冒或傷風(fēng)的患者，變應(yīng)性鼻炎(AR)患者數(shù)量將非?？捎^。
如果不及時治療變應(yīng)性鼻炎，會造成鼻竇炎、中耳炎、鼻息肉、支氣管哮喘、結(jié)膜炎、哮喘等疾病。但是長期使用激素或者麻黃堿類化學(xué)藥物治療副作用較多，故開發(fā)純中藥噴霧劑將有較大的經(jīng)濟效益和較好的社會效益。
目前對各種鼻炎的治療方法主要分為內(nèi)服及外治二種。內(nèi)服藥的主要缺點為須經(jīng)消化道分解后，送至肝臟處理，必然產(chǎn)生所謂首過(first-pass)效應(yīng)，藥效已受破壞，再經(jīng)全身循環(huán)送至鼻腔粘膜，因此能夠到達鼻部的藥量已較少，能夠產(chǎn)生的藥效就更小了。而且由于經(jīng)體循環(huán)時間較長，具有起效慢，藥效小的缺點。外治法一般有封閉療法、下鼻甲注射法、激光治法以及下鼻甲切除法等，這些方法會破壞鼻粘膜組織產(chǎn)生疤痕，產(chǎn)生鼻粘膜永久性傷害。
而現(xiàn)有市面上常見的鼻部外用制劑，如滴通鼻炎水、大佛水、滴鼻液、滴鼻劑等，雖然都能緩解各種鼻炎的鼻塞、鼻癢、打噴嚏和流涕等表面癥狀，對各種鼻炎有一定程度的療效，但是，還存在以下一些不足之處1)現(xiàn)有的鼻部外用制劑絕大部分不能促進修復(fù)鼻腔粘膜組織的發(fā)炎而致的損傷；雖然滴通鼻炎水在治療鼻腔粘膜組織的發(fā)炎上有一定的作用，但距離恢復(fù)鼻腔粘膜的健康狀態(tài)還有很大的差距。
2)現(xiàn)有的鼻部外用制劑不能改變變應(yīng)性鼻炎所特有的鼻粘膜免疫組化Bcl-2與Bax之比大于1的病理狀況，對變應(yīng)性鼻炎無實質(zhì)性的治療作用。
3)現(xiàn)有的鼻部外用制劑的主要成分中均含有麻黃、細辛、蒼耳子、白芷、石菖蒲、皂角等上述藥物中的一種或幾種，而上述藥物都有副作用大或毒性大的缺點。例如，長期使用麻黃會有耐藥性及引發(fā)藥物性鼻炎的副作用，其所含的麻黃素還有興奮中樞神經(jīng)作用，持續(xù)使用會有神經(jīng)過敏、不安、震顫等癥狀，此外，麻黃素還有加速心跳及升高血壓作用，心律不齊或高血壓患者不能使用；細辛主治鼻竅閉塞不通暢，但因為含黃樟醚，系致癌物質(zhì)，且毒性較大，臨床及藥理實驗已經(jīng)證實其對腎臟有毒害性，長期使用會導(dǎo)致腎衰竭。蒼耳子全株有毒，以果實(蒼耳子)為最，中毒后主要為肝腎損害。白芷雖為治療鼻淵頭痛之要藥，但因含白芷毒素，小量使用會興奮延髓血管運動中樞，使血壓升高引起流涎嘔吐，大量使用會引起強直性間歇性痙攣，繼之全身麻痹；石菖蒲含β-細辛醚，有致癌性。美國食品與藥物管理局(FDA)已明令禁止含石菖蒲的制劑輸入美國。皂角有開竅的功效，但其也有副作用，所含皂甙為原漿毒，有很強的溶血作用，使用過量會因呼吸中樞麻痹而中毒死亡。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種能治療各種鼻炎癥狀、毒副作用小，同時能有效促進鼻腔粘膜組織修復(fù)的中藥噴霧劑組合物。該中藥噴霧劑特別對變應(yīng)性鼻炎有實質(zhì)性的治療效果。
實現(xiàn)本發(fā)明目的的技術(shù)方案是治療鼻炎的中藥噴霧劑組合物，其原料藥組成如下黃芩150～190g 辛夷150～190g 丹參80～120g五味子80～120g砂仁40～60g 桑白皮80～120g，加輔料與蒸餾水配制成1000ml。
為進一步提高療效，本發(fā)明有以下優(yōu)化方案1、所述的原料藥配方為黃芩170g 辛夷170g丹參100g五味子100g砂仁50g 桑白皮100g輔料選用吐溫-80、PEG600或HPMC 5g；山梨酸鉀或尼泊金乙脂2g、甘油或山梨醇 適量，用蒸餾水配制成1000ml。
所述“甘油或山梨醇適量”是指與傳統(tǒng)制藥工藝中添加保濕劑的方法相同。
2、所述的原料藥均采用其提取物，具體組成如下砂仁、辛夷中的揮發(fā)油；砂仁、辛夷中的揮發(fā)油后藥渣的水煎提取液；丹參、五味子的乙醇提取的醇清膏；同時丹參、五味子醇提后藥渣的水煎液、黃芩、桑白皮水煎提取液的水清膏再進行醇提得到的醇清膏；以上各組分合并構(gòu)成本發(fā)明的原料藥。
所述的黃芩水煎提取液，需要在藥液煎煮沸騰后才加入黃芩，以避免黃芩苷的損失。所述的砂仁粉碎成粗顆粒，可以大大提高砂仁揮發(fā)油的提取率；所述的五味子粉碎成粗顆?；驂罕?，可以提高五味子有效成分的提取率。
以上各方案制成噴霧劑，功能主治清熱燥濕，通利鼻竅，活血消腫，補肺斂氣。用于鼻癢、鼻塞、打噴嚏和流清涕或鼻塞無歇，嗅覺遲鈍等；變應(yīng)性鼻炎及急、慢性鼻炎。
該噴劑的使用方法，鼻腔噴入給藥。一次每鼻孔1～2撳，慢性鼻炎、鼻竇炎每天使用2～3次；變應(yīng)性鼻炎、急性鼻炎每2～3小時噴用一次。
方中選用黃芩及辛夷為君藥。因“黃芩”性味苦、寒、無毒、清熱燥濕，能除肺中余邪。黃芩主瀉肺清熱，主成分為黃芩苷及黃芩素，均有抗發(fā)炎及抗過敏作用，能抑制過敏性浮腫及炎癥，降低毛細血管通透性，減少抗原抗體反應(yīng)時化學(xué)介質(zhì)的釋放量，從而抑制過敏反應(yīng)。肺主皮毛，開竅于鼻。而鼻炎的主要病位在于鼻部，肺氣不宣，則鼻竅不利。故另一君藥為辛夷，因為辛夷性味辛、溫、無毒，善通鼻竅。辛夷引胃中清陽之氣上升，直達鼻竅，加強鼻腔的通暢，快速治療鼻塞。經(jīng)藥理實驗證明，辛夷能直接詰抗慢反應(yīng)物(SRS-A)，有抗過敏作用。且辛夷無收斂血管作用，故不會發(fā)生麻痹平滑肌，產(chǎn)生反跳性血管擴張，而造成藥物性鼻炎之弊。
選用丹參為臣藥。是因為慢性鼻炎及變應(yīng)性鼻炎其鼻腔粘膜長期處于慢性炎癥狀態(tài)，致使血管出現(xiàn)收縮障礙。鼻粘膜，尤其是下鼻甲的海綿體呈現(xiàn)慢性充血，血管失去收縮能力，呈慢性擴張狀態(tài)。血管和腺體周圍有淋巴細胞及漿細胞浸潤，杯狀細胞增多，腺體分泌增強；且因靜脈和淋巴回流受阻，血管擴張滲透性增加，而粘膜水腫。即為所謂的邪毒久留，阻塞于鼻竅脈絡(luò)，致氣血流動不暢致鼻阻塞不通。而丹參性味苦、微寒、無毒、歸心、心包、肝經(jīng)，兼養(yǎng)血活血，祛淤消腫。丹參有抗凝及促纖溶作用，改善鼻部粘膜血流不暢的現(xiàn)象。丹參主要活性成分有脂溶性的二萜醌類化合物和水溶性的酚性酸類化合物兩大類，脂溶性成份有丹參酮、丹參酮IIa、丹參酮IIb、隱丹參酮等；水溶性成份有原兒茶醛、丹參素(丹參酸甲)、丹參酸乙等，有抗炎、抗病毒、化淤血之功，故能消除鼻粘膜局部的血液循環(huán)不暢的作用，所以，丹參能化淤消滯，消除鼻粘膜腫脹，而通利鼻竅。故丹參能幫助辛夷加強通利鼻竅的作用。
選用五味子及砂仁為佐藥。因為五味子性味酸、溫、無毒、斂肺氣，滋腎元，收攝津液，而止涕。五味子收斂肺氣，滋養(yǎng)腎元，溫補脾氣，使津液能輸布，水濕不能上犯鼻竅而止涕；而且五味子能滋養(yǎng)腎元，使肺能溫煦，氣能歸元，不上越鼻竅，能治噴嚏。并且根據(jù)抗菌試驗，在體外對金黃色葡萄球菌、炭疽桿菌、傷寒桿菌、痢疾桿菌、肺炎球菌、霍亂弧菌等有抑制作用，對綠膿桿菌有較強抗菌作用；在體內(nèi)有抗病毒作用，并且五味子中含有的成分gomisinA對由組織胺、白三烯D4和(LTD4)Cacl2誘發(fā)的過敏有抑制作用。因此五味子有抗菌作用，可保護鼻粘膜組織，并兼有抗過敏及抑制組織胺的作用。選用砂仁為佐藥。是因為砂仁性味辛、溫、無毒、健脾，行氣，化濕。砂仁有行氣化濕、醒脾健胃之功。脾失健運，濕邪停滯，水濕之邪上泛鼻竅，而致鼻病。故砂仁能健脾氣，化濕邪，使脾運化正常，而濕邪不滯于鼻竅，能療鼻病。而且經(jīng)過藥理研究，砂仁有抑制血小板聚集作用，與丹參配合加強消腫作用，通鼻竅。砂仁芳香健脾，燥濕行氣，脾失健運，濕邪滯留，砂仁健脾氣，助運化而除濕。五味子主斂肺滋腎，補肺氣，滋腎水，配合砂仁的健脾溫中，則補肺健脾兼滋腎，增加氣的運化，使肺氣肅降，納于腎。
選用桑白皮為使藥。是因為桑白皮性味甘、寒、無毒，主入肺經(jīng)，肺主氣，宜清肅下降，使氣納于腎。且桑白皮通調(diào)水道，利濕消腫。與組方中的砂仁、五味子配合能加強組方的去濕濁效果，而止流涕。而且能幫助組方藥物入肺經(jīng)。此組方中，丹參主養(yǎng)血活血祛淤消腫，配合辛夷的通鼻竅之功，則化鼻部脈絡(luò)的淤滯，除鼻部的阻塞不通。桑白皮則通調(diào)水道，祛濕消腫，砂仁溫中，桑白皮利水，兩者同用可加強濕邪的除去。黃芩清肺熱，桑白皮則瀉肺平喘，兩者同用除肺經(jīng)蘊熱，清降肺氣。
鼻病的病因病機為“本虛標實”，“標實”為病在鼻部，臨床上可見鼻粘膜處于慢性發(fā)炎狀態(tài)。故用黃芩及辛夷為君藥，黃芩能消炎、抗變態(tài)反應(yīng)，辛夷抗過敏，達到清熱解毒、抗炎通鼻竅治標之功?！氨咎摗睘榉?、脾、腎三臟皆虛；用五味子及砂仁為佐藥，以行氣斂肺，補脾氣，滋養(yǎng)腎氣，以行培元固本補虛之功。加上臣藥丹參來活血行血養(yǎng)血，改善損傷鼻粘膜的缺血狀態(tài)。諸藥合用，達到標本兼治的效果。
此組方可歸納為三個藥對黃芩配桑白皮主清肺余邪，消炎解熱。丹參配辛夷主破瘀消腫，通鼻竅。砂仁配五味子主健脾益腎，斂肺滋陰。諸藥合用，攻補兼施，清熱燥濕而不傷陰，滋陰益氣而不礙邪，兼活血養(yǎng)血祛瘀消腫，通利鼻竅，從而達到“標本兼治”的最佳療效。
劑型設(shè)計與選擇本發(fā)明的藥物制成外用制劑直接噴鼻，可提高鼻粘膜局部的藥物濃度，利用鼻部黏膜豐富的微循環(huán)，快速吸收，讓藥物直接在病灶區(qū)產(chǎn)生藥效；避免了其中所含有效成分揮發(fā)油的散失，使藥物直達病所，更有效地發(fā)揮其療效，改善鼻膜的血液循環(huán)，見效快，療程短。以達到三效(高效、速效、長效)，三小(劑量小、毒性小、副作用小)及五方便(使用方便、生產(chǎn)方便、運輸方便、攜帶方便、保存方便)的優(yōu)勢，來糾正現(xiàn)有治療鼻炎外用制劑的缺點與口服用藥的不足。
以上方案中的治療鼻炎的中藥噴霧劑組合物的制備方法，步驟如下各原料藥為黃芩160～170g；辛夷160～170g；丹參90～110g；五味子90～110g；砂仁45～55g；桑白皮90～110g。以上原料藥加入輔料，用蒸餾水調(diào)節(jié)重量后，即得到產(chǎn)品噴霧劑。
優(yōu)化方案是黃芩170g；辛夷170g；丹參100g；五味子100g；砂仁50g；桑白皮100g。以上六味，砂仁粉碎成粗顆粒以及辛夷，加10倍量水，浸泡1小時，水蒸氣蒸餾提取揮發(fā)油，蒸餾后的水溶液另器收集。五味子粉碎成粗顆粒以及丹參，加入8倍量80％乙醇，回流提取2次，每次1.5小時，合并，回收乙醇，減壓濃縮至相對密度1.10～1.20(50℃)的清膏，備用。五味子、丹參回流提取后的藥渣加入桑白皮，加入10倍量水，煎煮沸騰后，調(diào)pH至7.0左右，加入黃芩，半小時后再調(diào)整一次pH至7.0左右，煎煮2次，每次1.5小時，合并煎液，與提取揮發(fā)油后的水溶液合并，濾過，濾液濃縮至相對密度1.05～1.15(50℃)；加入乙醇使含醇量為60％，靜置，取上清液，回收乙醇，并濃縮至相對密度1.10～1.20(50℃)的清膏，備用。將水提醇沉的清膏稀釋至一定量，過濾，濾液加溫至50℃左右，備用。醇提的清膏稀釋至一定量，過濾，濾液加溫到50℃左右；揮發(fā)油與吐溫-80混勻，加入甘油混勻，攪拌下慢慢加入到上述兩種稀釋液中，攪拌約1小時。用三乙醇胺調(diào)節(jié)pH值至5.5～6.5。氯化鈉、山梨酸鉀分別以水溶解后加入，攪勻，加蒸餾水至1000ml，20～100μm鈦棒過濾，無菌分裝置滴瓶中，即可。
說明(1)生藥砂仁一般為種子團，為了將有效成分最大限度的保留，將砂仁種子團粉碎成粗顆粒可以大大提高砂仁揮發(fā)油的提取率。
(2)將生藥五味子粉碎成粗顆?；蛟诖笊a(chǎn)中壓扁，可以大大提高五味子有效成分的提取率。
(3)五味子煮沸后水液pH值在2.5～3.0之間，影響黃芩苷的溶出率，故需要將pH兩次調(diào)整至7.0左右。
(4)黃芩在冷水中酶解，故需要加入沸水中。
以上工藝路線的設(shè)計，是通過正交試驗，確定最終工藝并優(yōu)選出工藝參數(shù)提取時間的選擇表1 揮發(fā)油提取時間優(yōu)選考察表

注取1/2處方量(辛夷170g、砂仁50g)藥材進行實驗。
由表1可以看出，提取時間對揮發(fā)油提取影響較大，但提取3小時基本能提盡，且提取時間延長對辛夷揮發(fā)油的提取產(chǎn)生不利影響，故綜合各因素選擇提取3小時。
分離方法表2 過濾或離心優(yōu)選考察表

由表2可以看出，過濾法或離心法單獨使用，效果不佳。采用15000轉(zhuǎn)/rpm離心5min，再用20-80μm鈦棒過濾，效果很好，溶液澄清透明。
試驗例1根據(jù)本發(fā)明所制得的中藥噴霧劑，在臨床上經(jīng)臺灣高堂中醫(yī)連鎖醫(yī)院(五家醫(yī)院)的使用結(jié)果證實對急、慢性鼻炎、變應(yīng)性鼻炎、鼻竇炎的治療效果很好。統(tǒng)計資料見下表。
表3 本發(fā)明之臨床觀察統(tǒng)計結(jié)果

臨床判別標準顯效鼻炎癥狀(鼻塞、流涕、噴嚏、鼻癢)全部緩解。
有效鼻炎癥狀(鼻塞、流涕、噴嚏、鼻癢)部份明顯緩解。
無效鼻炎癥狀(鼻塞、流涕、噴嚏、鼻癢)無任何緩解。
附注1.臨床觀察時間3～14天。
2.病例性別分布男性占45％，女性占55％。
3.病例年齡分布15歲以下37％，15～60歲45％，60歲以上18％。
試驗例2 藥效學(xué)的動物模型試驗陽性對照組滴通鼻炎水，由廣西博科藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號050110。其活性成分包括蒲公英、黃芩、麻黃、蒼耳子、辛夷、白芷、細辛、石菖蒲。
試劑儀器及實驗方法均采用現(xiàn)有的技術(shù)規(guī)范。
動物大鼠，SD，雄性，由河南省醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供。
用二異氰酸甲苯橄欖油液滴入大鼠雙側(cè)前鼻孔(每側(cè)鼻孔滴5μl)，每日1次，連續(xù)7天造模，鼻炎癥狀總積分＞5，且鼻腔分泌物中含有大量白細胞。造模成功后，將造模成功的大鼠進行分組，然后按劑量折算和預(yù)試情況確定的劑量給藥，同時隔日1次給大鼠鼻腔注二異氰酸甲苯橄欖油(維持致敏)，至實驗結(jié)束(第7天造模型成功后，連續(xù)用藥14天，共再7次給大鼠鼻腔用二異氰酸甲苯橄欖油液，以維持造模)。
鼻癢、噴嚏和清涕的積分標準如下鼻癢輕搔鼻1～2次為1分，劇烈抓撓鼻面不止3分，介于二者之間為2分；
噴嚏1～3個為1分，4～10個為2分，11個以上為3分；清涕流至前鼻孔為1分，超出前鼻孔為2分，涕流滿面為3分。
鼻部出現(xiàn)炎癥癥狀時，鼻腔分必物中可見大量的細胞。鼻腔分泌物中白細胞的多少是鼻腔局部炎癥病變是滯存在或炎癥病變輕重的一個重要指標。
造模維持給二異氰酸甲苯橄欖油液放在上午，下午為各組給相應(yīng)治療藥物。
另取同一批大鼠10只，不造模，只鼻腔給相應(yīng)量的橄欖油，作為完全空白對照組。
血總SOD活力計算公式 單位為U/ml(活力單位/毫升)鼻粘膜組織電鏡觀察實驗結(jié)果一、對大鼠變應(yīng)性鼻炎模型鼻炎癥狀和分泌物中白細胞的影響
表4 本發(fā)明對大鼠變應(yīng)性鼻炎模型鼻炎癥狀積分的影響(x±s)

**表示與模型組比P＜0.01注表示平均數(shù)，s表示標準差，±s為正態(tài)分布范圍實驗結(jié)論從上表資料可以看出，本發(fā)明對噴嚏、鼻癢、流鼻涕癥狀緩解作用明顯，與陽性對照組，基本相近。
表5 本發(fā)明對大鼠變應(yīng)性鼻炎模型鼻腔分泌物中白細胞計數(shù)的影響(個，x±s)

**表示與模型組比P＜0.01實驗結(jié)論從上表結(jié)果證實，本發(fā)明組可顯著降低白細胞的數(shù)量，與陽性對照組基本相近，證實可有效治療鼻炎。
二、對大鼠變應(yīng)性鼻炎模型血液生化指標的影響
表6 本發(fā)明對大鼠變應(yīng)性鼻炎模型血液生化指標的影響(x±s)

*表示與模型組比P＜0.05**表示與模型組比P＜0.01
實驗結(jié)論從上表資料可以看出，本發(fā)明和陽性對照組均可使IL-2、IL-4、IL-6和血SP水平明顯降低，且可使血總SOD水平顯著升高，且本發(fā)明略優(yōu)于陽性對照組，證實可有效治療鼻炎癥狀。
三、對大鼠變應(yīng)性鼻炎模型鼻腔粘膜病理的影響表7 本發(fā)明對大鼠變應(yīng)性鼻炎模型鼻腔粘膜病理變化的影響(x±s)

實驗方法采用大鼠鼻粘膜呼吸區(qū)切片進行鼻粘膜組織光鏡觀察；實驗指標“-”鼻粘膜上皮、粘膜下組織和鼻腔內(nèi)均無炎癥反應(yīng)和滲出物，均為正常；“+”粘膜下充血，并有少數(shù)炎癥細胞浸潤；“++”鼻粘膜下有大量炎癥細胞浸潤，鼻腔內(nèi)有炎性滲出物；“+++”鼻粘膜下有炎癥細胞浸潤，粘膜下組織增生，粘膜脫落，鼻腔內(nèi)有炎癥滲出物和出血現(xiàn)象。
實驗結(jié)論鼻粘膜病理變化是治療鼻炎及藥物是否起作用最直觀、最重要最有說服力的指標，從病理解剖結(jié)果可以證實，本發(fā)明使鼻腔炎癥滲出和鼻腔粘膜下組織增生減少，病理變化得到明顯控制，而且顯著優(yōu)于陽性對照組，兩相對照，從而證實本發(fā)明不僅只有緩解癥狀作用，還具有顯著的治療作用。
四、對大鼠變應(yīng)性鼻炎模型鼻腔粘膜超微結(jié)構(gòu)的影響表8 本發(fā)明對大鼠變應(yīng)性鼻炎模型鼻粘膜上皮細胞纖毛體密度的影響(x±s)

**表示與模型組比P＜0.01實驗結(jié)論從上表可以證實，本發(fā)明可使鼻腔粘膜上皮細胞纖毛體密度恢復(fù)至與空白對照組基本相近，證實可恢復(fù)鼻腔之正常功能，且優(yōu)于陽性對照組。
表9 本發(fā)明對大鼠變應(yīng)性鼻炎模型鼻粘膜上皮線粒體體密度、比表面和比膜面的影響(x±s)

**表示與模型組比P＜0.01實驗結(jié)論從上表結(jié)果可以證實，本發(fā)明組使線粒體密度增大，胞漿飽滿，代謝能量大幅增高，促進上皮細胞的修復(fù)能力增強，明顯優(yōu)于陽性對照組。
五、對大鼠變應(yīng)性鼻炎模型鼻腔粘膜bcl-2mRNA、bcl-2和bax表達的影響
表10 本發(fā)明對大鼠過敏性鼻炎鼻粘膜原位雜交BCL-2mRNA表達的影響(x±s)

**表示與模型組比P＜0.01實驗方法采用多相寡核苷酸探針及長尾段標記技術(shù)試劑盒實驗結(jié)論從上表結(jié)果可以證實，本發(fā)明組可顯著降低PU值，代表可使鼻腔粘膜上皮組織異常增生減少，與空白對照組基本一致，且明顯優(yōu)于陽性對照組。
表11 本發(fā)明對大鼠變應(yīng)性鼻炎模型鼻粘膜免疫組化Bcl-2、Bax表達的影響(x±s)

**表示與模型組比P＜0.01實驗結(jié)論從上表結(jié)果可以證實，本發(fā)明組可顯著減少Bcl-2表達，顯著提高Bax陽性單位，從根本上改變了變應(yīng)性鼻炎Bcl-2Bax之比值大于1的病理狀況，證實了本發(fā)明可顯著促進炎性細胞滲出物及炎性細胞的凋亡，使變應(yīng)性鼻炎獲得徹底的治療，與陽性對照組相較，治療作用更為明確。
附注本實驗是當(dāng)前能做最深入的研究，屬基因分子科學(xué)領(lǐng)域，Bcl-2∶Bax之比值通常為1∶1；Bcl-2∶Bax之比大于1是變應(yīng)性鼻炎所特有的病理狀況，陽性對照組的Bcl-2∶Bax之比大于1；與模型組一致，說明陽性對照組無法改變變應(yīng)性鼻炎所特有的病理狀況，從而說明陽性對照組不能徹底治療變應(yīng)性鼻炎，而本發(fā)明可顯著提高Bax陽性單位，并顯著減少Bcl-2表達，使Bcl-2∶Bax之比遠遠地小于1，完全改變了變應(yīng)性鼻炎所特有的病理狀況，從而證實本發(fā)明變應(yīng)性鼻炎有實質(zhì)性的治療效果。而且本實驗結(jié)果也完全支持前面的各項實驗，從而進一步證實了本發(fā)明具有可治療各種鼻炎的療效。
試驗例3 中藥噴霧劑急性毒性試驗中藥噴霧劑毒性較小，以鼻腔可給的最大給藥體積給大鼠應(yīng)用中藥噴霧劑，并于24小時內(nèi)連續(xù)給藥3次，未見大鼠有活動、飲食、分泌物和整體情況明顯異常；第7天解剖大鼠鼻腔，未見有鼻腔粘膜的明顯異常。改用量已為臨床用量的300倍以上，可以認為臨床用量安全無毒。
初給大鼠鼻腔內(nèi)滴入中藥噴霧劑后，大鼠活動增多，個別大鼠有打噴嚏現(xiàn)象，一般10分鐘內(nèi)恢復(fù)正常，可能系鼻腔用藥后的刺激；與生理食鹽水組大鼠的反應(yīng)基本一致。每次給藥后觀察大鼠飲食、分泌物、排泄物等與對照組無明顯差異，個別大鼠鼻腔口可見有分泌物，在用藥的第2天消失。未見大鼠有全身狀況的異常，無中毒癥狀、中毒反應(yīng)和死亡情況出現(xiàn)。第7天解剖局部，未見大鼠鼻腔粘膜有肉眼可見明顯的病理變化。
實驗結(jié)論本發(fā)明無毒性，以鼻腔可給的最大給藥體積給大鼠應(yīng)用中藥噴霧劑，并于24小時內(nèi)連續(xù)給藥3次，與生理食鹽水組大鼠的反應(yīng)基本一致，未見大鼠有活動、飲食、分泌物和整體情況的明顯異常；第7天解剖大鼠鼻腔，未見有鼻腔粘膜的明顯異常。改用量已為臨床用量的300倍以上，可以認為臨床用量安全無毒。給藥組大鼠開始體重為194.6±5.2g，第7天體重為228.1±10.1g；對照組大鼠開始體重為194.4±4.6g，第7天體重為228.0±10.9g。
綜合上列各項動物實驗結(jié)果，證明本發(fā)明不管從癥狀緩解觀察、白細胞計數(shù)到鼻腔粘膜組織光學(xué)、電子顯微鏡超微結(jié)構(gòu)的觀察，乃至于血液生化檢測及屬分子生物科學(xué)領(lǐng)域之鼻粘膜原位雜交BCL-2mRNA表達、免疫組化Bcl-2、Bax表達等深入實驗，都明確顯示每個實驗結(jié)果都是可相互支持及證實的，再加上大量案例的人體臨床觀察統(tǒng)計及動物急性毒性測試結(jié)果，本發(fā)明所具有的創(chuàng)新性、有效性、安全性、優(yōu)越性應(yīng)該是無庸置疑的。
本發(fā)明的優(yōu)越處在于1)與其它鼻部外用制劑相比，除了明顯的收縮鼻粘膜，減少鼻部腺體的分泌，明確有效地緩解各種鼻炎的癥狀外，還能有效修復(fù)鼻部粘膜因發(fā)炎而致的損傷(見表4，5，6，7)，并且經(jīng)分子生物學(xué)試驗證明，本發(fā)明可明顯抑制鼻部粘膜中的發(fā)炎細胞的炎性反應(yīng)，加速發(fā)炎細胞的凋亡(見表10、11)；本發(fā)明可以增加鼻部粘膜中的SOD量(見表6)，及鼻部粘膜中粒線體比膜面積及鼻部粘膜的纖毛密度(見表9、表8)。本發(fā)明在對大鼠鼻粘膜呼吸區(qū)病理切片作鼻粘膜組織光鏡觀察及電子顯微鏡觀察中，得到了對鼻粘膜損傷組織有修復(fù)及促進纖毛組織再生的證據(jù)。本發(fā)明可使鼻腔粘膜上皮細胞纖毛體密度恢復(fù)至與空白對照組基本相近，證實可恢復(fù)鼻腔之正常功能，且優(yōu)于陽性對照組。讓鼻粘膜呼吸區(qū)上皮組織及纖毛功能重新作用是使鼻粘膜恢復(fù)正常功能的有力證據(jù)，證明可以修復(fù)已損傷的鼻部粘膜組織(表10、表11)。
2)與其它鼻部外用制劑相比，不含引起腎功能損傷的藥物，不含有潛在性致癌藥物，不含麻黃，不會引起藥物性鼻炎，不會產(chǎn)生藥物依賴性及耐藥性。因而具有毒副作用少的特點；并經(jīng)動物急性毒性試驗證實，本發(fā)明的臨床用量安全無毒。
3)與其它鼻部外用制劑相比，本發(fā)明不僅能緩解各種鼻炎的鼻塞、鼻癢、打噴嚏和流涕等主要癥狀，而且能徹底改變變應(yīng)性鼻炎所特有的Bcl-2∶Bax之比大于1的病理狀況，從而對變應(yīng)性鼻炎有實質(zhì)性的治療作用。這一結(jié)論已經(jīng)得到上述分子生物學(xué)試驗的證實。這是現(xiàn)在市面上的鼻部外用制劑所都無法達到的作用。
綜上所述表明，本發(fā)明使用藥典中收載的安全、無毒性中藥制成鼻炎噴劑，利用鼻部粘膜豐富的微循環(huán)，快速吸收，讓藥物直接在病灶區(qū)產(chǎn)生藥效。除了能明確快速有效的緩解各種鼻炎引發(fā)的鼻塞、流鼻涕、打噴嚏、鼻癢等癥狀，同時能有效地促進鼻腔粘膜組織修復(fù)至健康狀態(tài)，更能調(diào)整鼻粘膜免疫組化Bcl-2及Bax表達比例使其反轉(zhuǎn)，改善變應(yīng)性鼻炎的病理狀況，對變應(yīng)性鼻炎有實質(zhì)性的治療作用。因而本發(fā)明不僅可適用于治療各種鼻炎所引起的鼻塞、流涕、鼻癢、打噴嚏等鼻炎癥狀，尤其對于變應(yīng)性鼻炎，除癥狀緩解外，還有積極的治療效果。并且還具有三效(高效、速效、長效)，三小(劑量小、毒性小、副作用小)及五方便(使用方便、生產(chǎn)方便、運輸方便、攜帶方便、保存方便)的優(yōu)勢。
此外，本發(fā)明也可用于緩解呼吸道感染的癥狀，如緩解感冒癥狀、降低咽喉炎引起的疼痛等。


圖1為本發(fā)明工藝流程圖。
具體實施例方式
實施例1，黃芩170g 辛夷170g丹參100g五味子100g砂仁50g 桑白皮100g配制成1000ml。以上各原料藥按比例擴大，水煮醇沉，過濾純化后加入輔料吐溫-80 5g、山梨酸鉀2g、甘油適量，制成噴霧劑。
實施例2，黃芩170g、辛夷170g、丹參100g、五味子100g、砂仁50g、桑白皮100g(生產(chǎn)中按比例擴大)。參照圖1砂仁粉碎成粗顆粒與辛夷一起加10倍量水浸泡1小時，提揮發(fā)油；砂仁、辛夷提取揮發(fā)油后得到的水溶液；丹參、五味子用8倍量80％乙醇回流提取2次，每次1.5小時，得到的醇清膏；丹參、五味子醇提后藥渣與黃芩、桑白皮一起水煎煮，得到的水煎液；水煎提取液濃縮得到的水清膏再進行醇提得到醇清膏；以上原料藥加入輔料，用蒸餾水調(diào)節(jié)到1000ml(生產(chǎn)中按比例擴大)后，即得到產(chǎn)品噴霧劑。輔料為PEG600 5g；尼泊金乙脂2g、山梨醇適量。
實施例3、4，分別與實施例1或2基本相同，但原料藥比例為黃芩190g、辛夷190g、丹參120g、五味子120g、桑白皮120g、砂仁60g。輔料為HPMC5g；山梨酸鉀2g、甘油適量。
實施例5、6，分別與實施例1或2基本相同，但原料藥比例為黃芩150g、辛夷150、丹參80g、五味子80g、桑白皮80g、砂仁40g。
實施例7、8，分別與實施例1或2基本相同，但原料藥比例為黃芩190g、辛夷190g、丹參100g、五味子100g、砂仁50g、桑白皮100g。
實施例9、10，分別與實施例1或2基本相同，但原料藥比例為黃芩150g、辛夷150g、丹參120g、五味子120g、砂仁55g、桑白皮90g。
實施例11、12，分別與實施例1或2基本相同，但原料藥比例為黃芩180g、辛夷180g、丹參90g、五味子90g、砂仁50g、桑白皮90g。
實施例13、14，分別與實施例1或2基本相同，但原料藥比例為黃芩160g、辛夷180g、丹參100g、五味子100g、砂仁50g、桑白皮100g。
實施例15、16，分別與實施例1或2基本相同，但原料藥比例為黃芩180g、辛夷160g、丹參100g、五味子90g、砂仁55g、桑白皮100g。
權(quán)利要求
1.一種治療鼻炎的中藥噴霧劑組合物，其原料藥組成如下黃芩150～190g 辛夷 150～190g丹參80～120g五味子 80～120g砂仁 40～60g 桑白皮 80～120g，加輔料與蒸餾水配制成1000ml。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療鼻炎的中藥噴霧劑組合物，其特征在于，所述的原料藥配方為黃芩170g辛夷 170g丹參100g五味子 100g砂仁 50g 桑白皮 100g輔料為吐溫-80、PEG600或HPMC 5g；山梨酸鉀或尼泊金乙脂2g、甘油或山梨醇適量，用蒸餾水配制成1000ml。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的治療鼻炎的中藥噴霧劑組合物，其特征在于，所述的原料藥物均采用其提取物，具體組成如下砂仁、辛夷中的揮發(fā)油；砂仁、辛夷提取揮發(fā)油后得到的水溶液；丹參、五味子的乙醇提取的醇清膏；同時丹參、五味子醇提后藥渣的水煎液、黃芩、桑白皮水煎提取液的水清膏再進行醇提得到的醇清膏；以上各組分合并構(gòu)成本發(fā)明的原料藥。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的治療鼻炎的中藥噴霧劑組合物，其特征在于，所述的黃芩水煎提取液，是在藥液煎煮沸騰后才加入黃芩；所述的砂仁粉碎成粗顆粒；所述的五味子粉碎成粗顆粒或壓扁。
5.一種權(quán)利要求1所述的治療鼻炎的中藥噴霧劑組合物的制備方法，原料藥組成是黃芩160～180g、辛夷160～180g、丹參90～110g、五味子90～110g、砂仁45～55g、桑白皮90～110g，步驟如下砂仁與辛夷一起加10倍量水浸泡1小時，提揮發(fā)油；砂仁、辛夷提取揮發(fā)油后得到的水溶液；丹參、五味子用8倍量80％乙醇回流提取2次，每次1.5小時，得到的醇清膏；丹參、五味子醇提后藥渣與黃芩、桑白皮一起水煎煮，得到的水煎液；水煎提取液濃縮得到的水清膏再進行醇提得到醇清膏；以上各組分合并構(gòu)成本發(fā)明的原料藥，以上原料藥加入輔料，用蒸餾水調(diào)節(jié)總量后，即得到產(chǎn)品噴霧劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的治療鼻炎的中藥噴霧劑組合物的制備方法，其特征在于，具體操作步驟是砂仁粉碎成粗顆粒以及辛夷，加10倍量水，浸泡1小時，水蒸氣蒸餾提取揮發(fā)油，蒸餾后的水溶液另器收集。五味子粉碎成粗顆粒以及丹參，加入8倍量80％乙醇，回流提取2次，每次1.5小時，合并，回收乙醇，減壓濃縮至相對密度1.10～1.20的清膏，備用。五味子、丹參回流提取后的藥渣加入桑白皮，加入10倍量水，煎煮沸騰后，調(diào)pH至7.0左右，加入黃芩，半小時后再調(diào)整一次pH至7.0左右，煎煮2次，每次1.5小時，合并煎液，與提取揮發(fā)油后的水溶液合并，濾過，濾液濃縮至相對密度1.05～1.15；加入乙醇使含醇量為60％，靜置，取上清液，回收乙醇，并濃縮至相對密度1.10～1.20的清膏，備用。將水提醇沉的清膏稀釋至一定量，過濾，濾液加溫至50℃左右，備用。醇提的清膏稀釋至一定量，過濾，濾液加溫到50℃左右；揮發(fā)油與吐溫-80混勻，加入甘油混勻，攪拌下慢慢加入到上述兩種稀釋液中，攪拌約1小時。用三乙醇胺調(diào)節(jié)pH值至5.5～6.5。氯化鈉、山梨酸鉀分別以水溶解后加入，攪勻，加蒸餾水至1000ml，20～100μm鈦棒過濾，無菌分裝置滴瓶中，即可。以上步驟中，所述的砂仁粉碎成粗顆粒；所述的五味子粉碎成粗顆?；驂罕?；所述的黃芩是在藥液煎煮沸騰后才加入；所述的五味子煮沸后水液pH值在2.5～3.0之間，需要將pH兩次調(diào)整至7.0。
全文摘要
治療鼻炎的中藥噴霧劑組合物，原料藥組成黃芩150～190g，辛夷150～190g，丹參80～120g，五味子80～120g，砂仁40～60g，桑白皮80～120g，加輔料與蒸餾水配制成1000ml。優(yōu)化方案的原料藥均采用其提取物砂仁、辛夷中的揮發(fā)油；砂仁、辛夷提取揮發(fā)油后得到的水溶液；丹參、五味子的乙醇提取的醇清膏；同時丹參、五味子醇提后藥渣的水煎液、黃芩、桑白皮水煎提取液的水清膏再進行醇提得到的醇清膏。制成噴霧劑主治清熱燥濕，通利鼻竅，活血消腫，補肺斂氣。用于鼻癢、鼻塞、打噴嚏和流清涕或鼻塞無歇，嗅覺遲鈍等；變應(yīng)性鼻炎及急、慢性鼻炎。本發(fā)明還提供了以上配方的制備方法。
文檔編號A61K9/12GK1911418SQ200610085158
公開日2007年2月14日 申請日期2006年5月30日 優(yōu)先權(quán)日2005年12月15日
發(fā)明者張家銘, 張肇宇, 儲益平 申請人:常州巴斯特醫(yī)藥科技研究中心有限公司, 張家銘, 張肇宇