專利名稱：復(fù)方抗結(jié)核制劑中各藥物微丸的體內(nèi)外釋藥特性及應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本申請(qǐng)實(shí)際上是一種已經(jīng)獲得專利授權(quán)的續(xù)申請(qǐng)，發(fā)明人已經(jīng)獲得授權(quán)的發(fā)明專利名稱是“一種復(fù)方利福平制劑的釋藥系統(tǒng)”其專利申請(qǐng)?zhí)柺?3101211.6，其授權(quán)專利證書號(hào)是208518，本申請(qǐng)是進(jìn)一步將該專利中涉及的發(fā)明內(nèi)容中沒有公開的內(nèi)容和從進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)中獲得的藥物微丸的體內(nèi)外釋藥特性公布于眾。
背景技術(shù)：
發(fā)明專利“一種復(fù)方利福平制劑的釋藥系統(tǒng)”實(shí)際上是發(fā)明了一種復(fù)方利福平制劑，這種制劑可以解釋為是一種復(fù)方利福平制劑的釋藥系統(tǒng)。因?yàn)?，這種制劑涉及了由四種一線抗結(jié)核藥物利福平、異煙肼、吡嗪酰胺、鹽酸乙胺丁醇制備成四種藥物微丸。該發(fā)明還描述了微丸的制備方法，并由這四種微丸分別按照世界衛(wèi)生組織公布的抗結(jié)核固定劑量復(fù)合制劑標(biāo)準(zhǔn)處方的藥物用量配伍標(biāo)準(zhǔn)，有組合規(guī)律地將利福平微丸與另外三種微丸填充到一個(gè)膠囊殼中，形成一種特殊的復(fù)方利福平制劑的釋藥系統(tǒng)。這種系統(tǒng)后來被中國國家藥典委員會(huì)命名為利福平復(fù)方制劑的“雙釋放”制劑，其特點(diǎn)是在制劑中的有些藥物微丸是在胃中釋放，有些藥物微丸是在小腸上部釋放。采用這種雙釋放釋藥系統(tǒng)，可以有效地保護(hù)復(fù)方利福平制劑中利福平和異煙肼的穩(wěn)定性，提高產(chǎn)品的質(zhì)量和保護(hù)利福平的生物利用度不遭受損失。因?yàn)?，產(chǎn)品的質(zhì)量和利福平的生物利用度不受損失或少受損失，是確保抗結(jié)核化療中不產(chǎn)生耐藥性結(jié)核病的重要保障因素，這是當(dāng)前遏制結(jié)核病和耐藥性結(jié)核病蔓延，保障人類健康的重要研究課題，也是當(dāng)前公共衛(wèi)生建設(shè)工作的當(dāng)務(wù)之急。
在03101211.6發(fā)明專利中，發(fā)明人對(duì)外公布的是以微丸技術(shù)為基礎(chǔ)的釋藥系統(tǒng)的組成方法以及4種藥物微丸的制備方法和利福平腸溶微丸的體外釋藥特性。沒有對(duì)外公布利福平、異煙肼、吡嗪酰胺和鹽酸乙胺丁醇胃溶微丸的體內(nèi)外釋藥特性和異煙肼腸溶微丸的體內(nèi)外釋藥特性。而這些特性是藥物在體內(nèi)釋放和吸收的重要保障。因?yàn)?，即便是處方完全一樣，沒有大量的實(shí)驗(yàn)探索和在此基礎(chǔ)上獲得的完善的操作技能以及嚴(yán)格的工藝把關(guān)是無法獲得有利于體內(nèi)吸收的具有體內(nèi)外釋藥特性的微丸，而釋藥特性不同，將與藥物的體內(nèi)吸收的優(yōu)劣有密切的相關(guān)性，因此，有必要將03101211.6發(fā)明專利中在陸續(xù)的實(shí)驗(yàn)測定中獲得的微丸釋藥特性公布于眾，并冀望獲得相應(yīng)的知識(shí)產(chǎn)權(quán)保護(hù)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明是建立在專利03101211.6微丸制備的基礎(chǔ)上，對(duì)微丸按照《中國藥典》釋放度測定的方法進(jìn)行微丸在特定條件下的溶液中釋放狀況測定和以人體為受試對(duì)象，測定微丸的人體藥代動(dòng)力學(xué)特征。
需要在此處強(qiáng)調(diào)一點(diǎn)的是，雖然在制劑學(xué)的技術(shù)領(lǐng)域中，將藥物做成微丸是常識(shí)性知識(shí)，但是，對(duì)于具體的藥物，做成微丸的具體技術(shù)并不相同，有些藥物做成微丸的難度很大，例如一些揮發(fā)性藥物。所有藥物需要在有經(jīng)驗(yàn)的藥劑研究人員經(jīng)過一定的試驗(yàn)研究過程和處方篩選才能將藥物做成微丸。因?yàn)?，做成微丸的藥物并不只是在外型上做成微丸就可以了，所做成的藥物微丸必須符合藥典微丸尺寸的?guī)定，并具有良好的體內(nèi)外釋藥特性才能算得上是有臨床使用價(jià)值的藥物微丸。專利03101211.6公布的利福平、異煙肼、吡嗪酰胺、鹽酸乙胺丁醇藥物微丸是首創(chuàng)的，在此之前，世界上沒有具有臨床使用價(jià)值的上述藥物的微丸出現(xiàn)。
微丸在特定條件下的溶液中釋放狀況一般被稱為藥物制劑的體外釋放特性。本制劑屬于化學(xué)藥品制劑，在中國大陸境內(nèi)，藥物制劑的體外釋放特性的測定，必須依照《中國藥典》二部附錄“溶出度測定法”和“釋放度測定方法”。需要指出的是，本發(fā)明研究的過程中，經(jīng)歷了2000年版和2005年版兩屆《中國藥典》的執(zhí)行期間，因此，本發(fā)明藥物制劑體外釋放特性的測定是建立在兩屆《中國藥典》頒布的“溶出度測定法”和“釋放度測定法”的基礎(chǔ)上的。對(duì)照兩屆藥典的“溶出度測定法”和“釋放度測定法”的差異，“釋放度測定法”其基本測定方式是完全一樣的，不同的是對(duì)結(jié)果判斷的文字描述略有不同。但是，“溶出度測定法”2005版藥典的規(guī)定略嚴(yán)謹(jǐn)于2000年版的規(guī)定。為了方法的統(tǒng)一，研究是首先采用2000年版藥典的規(guī)定，之后，又按照2005年版藥典的規(guī)定進(jìn)行重復(fù)試驗(yàn)。本發(fā)明所公開的數(shù)據(jù)，是建立在依照2005年版《中國藥典》二部附錄“溶出度測定法”和“釋放度測定法”規(guī)定之基礎(chǔ)上的測定數(shù)據(jù)。
本研究涉及的藥物微丸包括利福平的胃溶微丸和腸溶微丸、異煙肼的胃溶微丸和腸溶微丸、吡嗪酰胺的胃溶微丸和鹽酸乙胺丁醇的胃溶微丸。其中利福平的腸溶微丸的體外釋藥特性按照《中國藥典》2000年版二部附錄“釋放度測定法”規(guī)定的方法測定的數(shù)據(jù)已經(jīng)在專利03101211.6中公開，并獲得專利保護(hù)。在采用2005年版之規(guī)定方法進(jìn)行復(fù)核測定，其基本數(shù)據(jù)沒有顯著性差異。
在微丸制作工藝的研究中發(fā)現(xiàn)，即便是完全相同的處方(主藥和敷料的混合體)，由于操作人員的不同，在潤濕劑和撒粉以及設(shè)備的轉(zhuǎn)速等操作上的差異，就會(huì)造成微丸體外的釋藥特性不同，進(jìn)而造成藥物制劑在體內(nèi)的釋放特性不同，最終造成藥物在體內(nèi)的吸收不同，導(dǎo)致藥物的療效產(chǎn)生差異。因此，當(dāng)微丸體外的釋藥特性較差時(shí)，有可能意味著藥物的療效失去作用，對(duì)于一線抗結(jié)核藥物制劑而言，不好的藥物制劑將意味著結(jié)核病治療的失敗，導(dǎo)致耐藥性結(jié)核病的發(fā)生，耐藥性結(jié)核病的蔓延將對(duì)整個(gè)人類的健康構(gòu)成嚴(yán)重的危險(xiǎn)。所以，對(duì)于一線抗結(jié)核藥物制作的微丸的產(chǎn)品質(zhì)量必須進(jìn)行嚴(yán)格的控制。
通常情況下，當(dāng)藥物制劑的處方確定以后，對(duì)藥物制劑質(zhì)量的控制一般從兩個(gè)方面著手，一方面對(duì)整個(gè)操作步驟進(jìn)行嚴(yán)格的操作控制，但是，影響因素比較多，很難做到萬無一失。因此，應(yīng)該對(duì)微丸的釋藥特性進(jìn)行控制，本發(fā)明就是以此為研究目標(biāo)。
所有微丸的制作方法都在專利03101211.6中進(jìn)行了詳細(xì)描述。需要進(jìn)一步明確的是利福平和異煙肼的胃溶微丸是指沒有進(jìn)行腸溶包衣材料包裹的微丸，或稱素丸，可以在素丸上包胃溶包衣材料，也可以不包胃溶包衣材料。其腸溶微丸是指在素丸的基礎(chǔ)上進(jìn)行了腸溶材料包衣的微丸。腸溶包衣材料和胃溶包衣材料的種類很多，可以根據(jù)包衣材料的性質(zhì)并根據(jù)其對(duì)微丸釋藥特性的要求選擇合適的方式進(jìn)行包衣。因此，包衣的材料可以是多種的，包衣的方法也可以是不同變化的，但是，微丸的釋藥特性是唯一的，迄今為止，還沒有關(guān)于這方面的報(bào)道。
所有胃溶微丸的體外釋放特性的測定是采用2005年版《中國藥典》“溶出度測定法”規(guī)定的條件測定的。測定的方法根據(jù)中國藥典中收載的利福平、異煙肼、吡嗪酰胺和鹽酸乙胺丁醇的相關(guān)制劑中的溶出度檢查項(xiàng)中的條件而確定的，對(duì)于利福平胃溶微丸采用鹽酸溶液(9→1000)900ml為溶劑，而其它三種胃溶微丸采用水900ml為溶劑。對(duì)于含四種主藥的復(fù)方制劑中的溶出度測定，儀器的裝置采用轉(zhuǎn)籃法，溶劑的溫度為37℃，轉(zhuǎn)速對(duì)于異煙肼、吡嗪酰胺、鹽酸乙胺丁醇組分的微丸采用每分鐘50轉(zhuǎn)，利福平組分的微丸采用每分鐘100轉(zhuǎn)。利福平、異煙肼、吡嗪酰胺采用高效液相色譜法(HPLC)進(jìn)行檢測，鹽酸乙胺丁醇采用提取分光法(提取-UV)進(jìn)行檢測；當(dāng)上述微丸單獨(dú)進(jìn)行體外釋藥特性試驗(yàn)時(shí)，利福平、異煙肼和吡嗪酰胺可以使用UV(紫外分光光度)方法進(jìn)行檢測和一些其他的分析方法，例如常規(guī)容量分析方法等。具體的HPLC、UV和提取-UV方法以及一些其他沒有列出的分析檢測方法有很多種，但是，不管采用何種分析方法，都應(yīng)該具有良好的專屬性、精密度、穩(wěn)定性和良好的回收率，總之應(yīng)該達(dá)到分析化學(xué)的基本要求，只有這樣，才能消除由于采用的檢測方法不同對(duì)檢測結(jié)果帶來的不應(yīng)該出現(xiàn)的顯著性差異。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，當(dāng)所有微丸在45分鐘或者更短的30分鐘的時(shí)間內(nèi)，其藥物釋放量達(dá)到標(biāo)示量的75％時(shí)基本可以滿足對(duì)微丸產(chǎn)品質(zhì)量的要求，當(dāng)達(dá)到85％以上時(shí)更好。
由于異煙肼、吡嗪酰胺、鹽酸乙胺丁醇屬于基本藥物的第1類藥物，所以，要求這3種微丸的體外釋藥量在30分鐘時(shí)應(yīng)該達(dá)到85％以上為最好。我們進(jìn)行了動(dòng)物體的體內(nèi)藥物釋放特性試驗(yàn)，試驗(yàn)顯示，當(dāng)微丸在45分鐘時(shí)釋藥量在75％以下時(shí)，其體內(nèi)的釋藥峰值就明顯降低，這對(duì)于保障藥效是十分不利的，因此，應(yīng)該保障微丸在45分鐘時(shí)的釋藥量至少應(yīng)該達(dá)到75％以上。
另外，利福平胃溶微丸的體外溶出度測定時(shí)，溶劑還可以選擇pH6.8磷酸鹽緩沖液，在上述其他條件都不改變的情況下，微丸的釋藥量可以達(dá)到75％，較佳的是達(dá)到85％以上。
在試驗(yàn)中，對(duì)于胃溶微丸的測定所采用的溶劑還可以選擇《中國藥典》2005年版規(guī)定的pH值為1.2、4.5、6.8的溶液介質(zhì)和水作為溶劑，其他條件都不改變，藥物的釋藥特性也都達(dá)到了上述體外釋藥特性的要求。當(dāng)溶劑的pH值較高時(shí)，例如以pH6.8的介質(zhì)和水為溶劑時(shí)，釋放量會(huì)有所降低，但是，最低也可以達(dá)到標(biāo)示量的60％以上，釋藥特性好的微丸一般可以達(dá)到80％以上。
腸溶利福平微丸的體外釋藥特性已經(jīng)在專利03101211.6中公開，本發(fā)明公開的是腸溶異煙肼微丸的體外釋藥特性，這里所指的的腸溶可以縮小到比較狹窄的范圍內(nèi)定義就是在小腸上部快速釋放。因?yàn)?，生物體的腸道比較長，對(duì)應(yīng)的pH范圍在5～8之間，從小腸上部的幽門開始，腸道中的pH值逐漸升高。異煙肼腸溶微丸定義在小腸上部快速釋放，就是要求微丸在pH5～7之間的范圍內(nèi)快速釋放。
異煙肼腸溶微丸的體外釋放特性的測定是采用2005年版《中國藥典》“釋放度測定法”規(guī)定的條件測定的。測定的方法選自“釋放度測定法”項(xiàng)下第二法的方法2，轉(zhuǎn)速選自每分鐘50轉(zhuǎn)，溶劑選擇水溶液、pH5.0、pH6.8緩沖溶液和鹽酸溶液(9→1000)，于30分鐘或45分鐘以及在120分鐘時(shí)取樣。當(dāng)測定時(shí)有利福平、吡嗪酰胺和鹽酸乙胺丁醇存在時(shí)，檢測方法選擇HPLC方法進(jìn)行檢測，當(dāng)只有異煙肼存在時(shí)，檢測方法也可以選擇UV(紫外分光光度)方法，檢測波長選擇263nm。同樣，檢測方法是可以改變的，但是，所采用的檢測方法應(yīng)該達(dá)到分析化學(xué)的基本要求。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，當(dāng)異煙肼腸溶微丸在鹽酸溶液(9→1000)中，120分鐘時(shí)釋放量應(yīng)小于標(biāo)示量的10％，在水溶液、pH5.0、pH6.8緩沖溶液中，45分鐘的時(shí)間內(nèi)或者更短的30分鐘時(shí)間內(nèi)，其藥物釋放量達(dá)到標(biāo)示量的70％時(shí)基本可以滿足對(duì)異煙肼腸溶微丸產(chǎn)品質(zhì)量的控制要求，當(dāng)達(dá)到85％以上時(shí)更好。
需要明確的是，在滿足本發(fā)明描述的釋藥特性的前提下，對(duì)于異煙肼、吡嗪酰胺、鹽酸乙胺丁醇組分的微丸，如果轉(zhuǎn)速選擇超過每分鐘50轉(zhuǎn)，對(duì)于利福平組分的微丸如果選擇每分鐘超過100轉(zhuǎn)等，則微丸的釋藥特性也仍然可以達(dá)到上述特性，但是，提高轉(zhuǎn)速是無意義的，同時(shí)也不超出本發(fā)明的技術(shù)范圍。然而，如果微丸因處方中輔料的選擇不佳以及制作工藝不良造成微丸的釋藥特性達(dá)不到上述條件下所描述的釋藥特性，在這種情況下，如果轉(zhuǎn)速在上述基礎(chǔ)上提高，則微丸的釋藥特性將有可能達(dá)到上述標(biāo)準(zhǔn)，然而，這樣做的目的實(shí)際上是為了掩蓋釋藥特性拙劣的微丸的真實(shí)面目。釋藥特性拙劣的微丸必然造成體內(nèi)釋藥的不良，最終導(dǎo)致藥品吸收的不足，需要注意，當(dāng)這種微丸與釋藥特性優(yōu)良的微丸在其體外釋藥特性的差別不是很懸殊時(shí)，有可能在有限的生物樣本中無法明顯地顯示出體內(nèi)吸收的差異，但是，這并不意味著可以掩蓋這種釋藥特性的拙劣，堅(jiān)持對(duì)微丸體外釋藥特性的控制是保障微丸產(chǎn)品質(zhì)量的有效保障，進(jìn)而也是制造優(yōu)良抗結(jié)核固定劑量復(fù)合制劑的必要手段和必須堅(jiān)持的原則。
本發(fā)明的一個(gè)具體的應(yīng)用就是將腸溶異煙肼微丸聯(lián)合腸溶利福平微丸裝入同一個(gè)膠囊中的應(yīng)用以及他們?cè)谏矬w中的釋藥特性。以及專利03101211.6沒有公開的將異煙肼腸溶微丸與利福平胃溶微丸裝入同一個(gè)膠囊中，以及利福平胃溶微丸的生物體內(nèi)的釋藥特性。需要強(qiáng)調(diào)的是，在上述兩種形式下，還可以將吡嗪酰胺胃溶微丸和鹽酸乙胺丁醇胃溶微丸加入組合后裝入同一個(gè)膠囊中，形成抗結(jié)核的固定劑量復(fù)合制劑。在這種制劑中藥物間的配比關(guān)系應(yīng)該符合世界衛(wèi)生組織公布的固定劑量復(fù)合制劑的標(biāo)準(zhǔn)處方規(guī)定的配比關(guān)系，其中包括2藥、3藥和4藥的處方，這些在專利03101211.6中已經(jīng)有了詳細(xì)描述，此處不再贅述。
目前的利福平、異煙肼都是胃溶型制劑，在胃溶型的制劑中，利福平達(dá)到血藥濃度高峰的平均時(shí)間在2～2.5小時(shí)之間，異煙肼達(dá)到血藥濃度高峰的平均時(shí)間在0.67～1小時(shí)之間。在專利03101211.6中，發(fā)明人以微丸技術(shù)為基礎(chǔ)，提出了利福平腸溶微丸與異煙肼胃溶微丸組合，并將其裝入同一個(gè)膠囊中的組合制劑形式。在這種形式下，異煙肼達(dá)到血藥濃度高峰的時(shí)間與普通的胃溶型制劑的時(shí)間沒有顯著性的變化，但是，利福平的平均血藥濃度達(dá)到高峰的時(shí)間在4～5小時(shí)左右，明顯的比胃溶型利福平延遲2小時(shí)左右。
將異煙肼腸溶微丸與利福平腸溶微丸組合在同一個(gè)膠囊中，則異煙肼在生物體內(nèi)血藥濃度的達(dá)峰時(shí)間與胃溶異煙肼制劑比較也將延遲2小時(shí)左右。
上述兩種組合的方式使得利福平與異煙肼的體內(nèi)釋藥特性將更加吻合，從預(yù)防抗菌素耐藥性理論分析，當(dāng)兩種以上的抗菌藥聯(lián)合服用時(shí)，藥物的體內(nèi)釋藥特性吻合的越接近，其預(yù)防產(chǎn)生耐藥性和提高藥效將更加有利。雖然這種理論的正確性需要長期的臨床實(shí)踐去驗(yàn)證，但是，將腸溶型利福平微丸與腸溶型異煙肼微丸進(jìn)行組合裝入膠囊中，或者將胃溶型利福平微丸與腸溶型異煙肼微丸進(jìn)行組合裝入膠囊中，將使得兩種組分的藥物的體內(nèi)釋藥特性的吻合程度達(dá)到或者超過了兩藥都在胃中釋藥情況下藥物釋放特性的吻合效果。
雖然小腸上部釋藥使得血藥達(dá)峰時(shí)間比在胃中釋藥平均向后延遲了2小時(shí)左右，但是，這種技術(shù)的實(shí)現(xiàn)將對(duì)在抗結(jié)核的臨床實(shí)踐中，研究利福平和異煙肼的聯(lián)合用藥、預(yù)防其耐藥性現(xiàn)象的發(fā)生奠定了藥劑學(xué)基礎(chǔ)。因?yàn)?，在酸性環(huán)境下，當(dāng)利福平與異煙肼接觸后，利福平和異煙肼都將產(chǎn)生降解，使得兩者的生物利用度遭受損失，降低了治療效果。而在小腸上部的近中性環(huán)境中，利福平與異煙肼就相對(duì)穩(wěn)定了許多，這樣就保障了兩者的生物利用度不或少遭受損失。
而以前的研究中，僅僅是將利福平微丸在小腸上部釋放，而異煙肼微丸仍在胃中釋放，這樣，雖然避免了兩者的降解和生物利用度不遭受損失，但是，兩者的生物體內(nèi)的釋藥特性(曲線)吻合的不是十分理想。因此，當(dāng)通過對(duì)微丸在生物體中的釋藥特性研究以后，實(shí)驗(yàn)結(jié)果才明顯地告訴我們，將異煙肼腸溶微丸與利福平腸溶微丸進(jìn)行組合裝入膠囊或者將異煙肼腸溶微丸與利福平胃溶微丸進(jìn)行組合裝入膠囊，將有可能具有更好的臨床效果，雖然這一效果需要進(jìn)一步的臨床實(shí)踐進(jìn)行驗(yàn)證，但是，微丸體內(nèi)釋藥特性的研究結(jié)果向我們展示了一個(gè)有價(jià)值的前景。
具體實(shí)施例方式
上面已詳述本發(fā)明，再結(jié)合實(shí)施例公開微丸的體外釋藥特性進(jìn)一步詳述本發(fā)明，顯然，實(shí)施例僅供說明絕非限制。
實(shí)施例1 利福平腸溶微丸的體外釋藥特性1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康臏y定腸溶利福平微丸在鹽酸溶液(9→1000)、水、pH5.0、pH5.6、pH6.8磷酸鹽緩沖液中的溶出曲線。
2、實(shí)驗(yàn)依據(jù)中國藥典2005年版二部附錄“釋放度測定法”項(xiàng)下第二法的方法2。取本品(相當(dāng)于利福平50mg)分別按照溶出度測定法第一法裝置，分別以水、鹽酸溶液(9→1000)、pH5.0磷酸鹽緩沖液、pH5.0磷酸鹽緩沖液、pH6.8磷酸鹽緩沖液900ml為溶劑，轉(zhuǎn)速50轉(zhuǎn)/分，依法操作，分別于5分鐘、10分鐘、20分鐘、30分鐘、45分鐘、60分鐘取溶液10ml，濾過，同時(shí)補(bǔ)充同體積的溶劑，取續(xù)濾液4ml置于10ml量瓶中用相應(yīng)的溶劑稀釋至刻度，搖勻，做為樣品溶液；另取利福平對(duì)照品適量配制成25ug/ml的對(duì)照溶液。照分光光度法在360～700nm波長間掃描其最大吸收波長并于最大吸收波長處測其吸收度，計(jì)算溶出量。
3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表數(shù)據(jù)所示 實(shí)施例2 異煙肼腸溶微丸的體外釋藥特性1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康臏y定腸溶異煙肼微丸在鹽酸溶液(9→1000)、水、pH6.8磷酸鹽緩沖液、pH5.0磷酸鹽緩沖液中的溶出曲線。
2、實(shí)驗(yàn)依據(jù)中國藥典2005年版二部附錄“釋放度測定法”項(xiàng)下第二法的方法2。取本品(相當(dāng)于異煙肼150mg)分別按照溶出度測定法第一法裝置，分別以鹽酸溶液(9→1000)、水、pH5.0磷酸鹽緩沖液、pH6.8磷酸鹽緩沖液900ml為溶劑，轉(zhuǎn)速50轉(zhuǎn)/分，依法操作，分別于10分鐘、20分鐘、30分鐘、45分鐘、60分鐘取溶液5ml，濾過，同時(shí)補(bǔ)充同體積的溶劑，取續(xù)濾液1ml置于10ml量瓶中用相應(yīng)的溶劑稀釋至刻度，搖勻，做為樣品溶液；另取異煙肼對(duì)照品適量配制成16ug/ml的對(duì)照溶液。照分光光度法在200～350nm波長間掃描其最大吸收波長并于最大吸收波長處測其吸收度，計(jì)算溶出量。
3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表數(shù)據(jù)所示

實(shí)施例3 利福平胃溶微丸的體外釋藥特性1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康臏y定利福平胃溶微丸在鹽酸溶液(9→1000)中的溶出曲線。
2、實(shí)驗(yàn)依據(jù)中國藥典2005年版二部附錄“溶出度測定法”，取本品(相當(dāng)于利福平75mg)按照溶出度測定法第一法，以鹽酸溶液(9→1000)900ml為溶劑，采用50轉(zhuǎn)/分的轉(zhuǎn)速，依法操作；分別于5、10、15、20、30、45分鐘取溶液10ml，濾過，同時(shí)補(bǔ)充同體積的溶劑。精密量取續(xù)濾液3ml，置10ml量瓶中，用鹽酸溶液(9→1000)稀釋至刻度，做為供試品溶液；另取利福平對(duì)照品，用鹽酸溶液(9→1000)稀釋成每1ml中約含25ug的溶液，做為對(duì)照品溶液。照分光光度法在360～700nm波長間掃描其最大吸收波長并于最大吸收波長處測其吸收度，計(jì)算溶出量。
3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表數(shù)據(jù)所示

表3

2、實(shí)驗(yàn)依據(jù)中國藥典2005年版二部附錄“溶出度測定法”項(xiàng)下第一法的方法。取本品(相當(dāng)于鹽酸乙胺丁醇92mg)，以水900ml為溶劑，轉(zhuǎn)速50轉(zhuǎn)/分，依法操作。分別于5、10、20、30、45、60分鐘時(shí)，取溶液5ml(同時(shí)補(bǔ)充所耗溶劑5ml)，濾過，取續(xù)濾液1ml，加溴甲酚綠溶液(取溴甲酚綠0.2g，加水30ml與0.1mol/L氫氧化鈉溶液6.5ml使溶解，加磷酸二氫鈉19.0g與磷酸氫二鈉2.5g，加水稀釋至500ml，搖勻，加0.1mol/L鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值為4.6±0.1)10ml，搖勻，精密加氯仿20ml，振搖提取后，靜置使分層，分取氯仿液，照分光光度法在360～700nm波長間掃描其最大吸收波長。照分光光度法最大吸收波長處測其吸收度。另精密量取鹽酸乙胺丁醇對(duì)照品溶液(每1ml中含鹽酸乙胺丁醇對(duì)照品100ug)，按上述方法自“溴甲酚綠溶液”起，同法測定吸收度，計(jì)算溶出量。
3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表數(shù)據(jù)所示

實(shí)施例6 腸溶異煙肼微丸聯(lián)合胃溶利福平微丸、胃溶吡嗪酰胺微丸、胃溶鹽酸乙胺丁醇微丸4藥的生物體的釋藥特性
實(shí)驗(yàn)是在5名志愿受試者之間進(jìn)行，受試者來自河南省康利醫(yī)藥技術(shù)開發(fā)有限公司的研究人員，年齡在22歲～39歲之間，男性。研究的目的是觀察腸溶異煙肼微丸聯(lián)合胃溶利福平微丸、胃溶吡嗪酰胺微丸、胃溶鹽酸乙胺丁醇微丸4藥在人體的釋藥特性。生物樣品采集自愿受試者的血和尿，其中利福平、異煙肼和吡嗪酰胺采用各自的HPLC系統(tǒng)進(jìn)行檢測，測定各藥物在受試者服藥后的血藥濃度；鹽酸乙胺丁醇采用提取-UV法進(jìn)行檢測，測定藥物的尿總排泄量。試驗(yàn)設(shè)計(jì)按照國家食品藥品監(jiān)督管理局關(guān)于“藥代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)的指導(dǎo)原則”的具體要求進(jìn)行，由于本研究處于探索研究階段，所以除了受試者人數(shù)采用5人之外，其他方面都完全按照“指導(dǎo)原則”的要求進(jìn)行，為節(jié)省篇幅，此處不再贅述。本實(shí)驗(yàn)與下面的實(shí)施例7的試驗(yàn)是在同一組受試者中進(jìn)行的。首先進(jìn)行的本實(shí)施例試驗(yàn)，在采樣結(jié)束2周以后，在同一組受試者中進(jìn)行實(shí)施例7的試驗(yàn)，中間間隔2周時(shí)間是為了消除兩個(gè)試驗(yàn)之間的相互影響，采用同一受試者的目的是盡量消除由于生物個(gè)體的差異給試驗(yàn)帶來的影響。
5名受試者實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表所示表利福平、異煙肼和吡嗪酰胺的平均血藥濃度
表各受試者服藥后利福平、異煙肼和吡嗪酰胺的達(dá)峰時(shí)間 附

圖1為腸溶異煙肼微丸聯(lián)合胃溶利福平微丸、胃溶吡嗪酰胺微丸、胃溶鹽酸乙胺丁醇微丸4藥的生物體的釋藥特性圖1中1為胃溶利福平微丸在體內(nèi)的釋藥曲線；圖1中2為腸溶異煙肼微丸在體內(nèi)的釋藥曲線；圖1中3為胃溶吡嗪酰胺微丸在體內(nèi)的釋藥曲線；由上述試驗(yàn)數(shù)據(jù)可見，異煙肼的血藥濃度達(dá)峰時(shí)間在服藥后3.1小時(shí)左右，而利福平的血藥濃度達(dá)峰時(shí)間在2.3小時(shí)左右，其曲線基本被利福平的血藥濃度曲線覆蓋，吡嗪酰胺由于是在胃中釋放，并且代謝比較緩慢，它的曲線完全覆蓋了異煙肼和利福平的曲線。
實(shí)施例7 腸溶異煙肼微丸、腸溶利福平微丸聯(lián)合胃溶吡嗪酰胺微丸、胃溶鹽酸乙胺丁醇微丸4藥的生物體的釋藥特性試驗(yàn)情況如實(shí)施例6中所描述，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表所示。
表利福平、異煙肼和吡嗪酰胺的平均血藥濃度

表各受試者服藥后利福平、異煙肼和吡嗪酰胺的達(dá)峰時(shí)間

附圖2為腸溶異煙肼微丸聯(lián)合腸溶利福平微丸、胃溶吡嗪酰胺微丸、胃溶鹽酸乙胺丁醇微丸4藥的生物體的釋藥特性圖2中1為腸溶利福平微丸在體內(nèi)的釋藥曲線；圖2中2為腸溶異煙肼微丸在體內(nèi)的釋藥曲線；圖2中3為胃溶吡嗪酰胺微丸在體內(nèi)的釋藥曲線；由上述試驗(yàn)數(shù)據(jù)可見，異煙肼的血藥濃度達(dá)峰時(shí)間在服藥后3小時(shí)左右，利福平的血藥濃度達(dá)峰時(shí)間在4.6小時(shí)左右，其曲線基本完全被利福平的血藥濃度曲線覆蓋，吡嗪酰胺由于是在胃中釋放，并且代謝比較緩慢，它的曲線完全覆蓋了異煙肼和利福平的曲線。由實(shí)施例7的試驗(yàn)可見，如果從血藥濃度盡可能以包含覆蓋的形式進(jìn)行吻合將有利于聯(lián)合抗菌藥藥效提高，則腸溶異煙肼微丸、腸溶利福平微丸聯(lián)合是比較適宜的方案。
權(quán)利要求
1.一種復(fù)方利福平制劑的釋藥系統(tǒng)中異煙肼腸溶微丸、利福平胃溶微丸、利福平腸溶微丸、異煙肼胃溶微丸、吡嗪酰胺胃溶微丸、鹽酸乙胺丁醇胃溶微丸的體外釋藥特性，其特征在于其異煙肼腸溶微丸在水溶液、pH5.0、pH6.8緩沖溶液中45分鐘的釋放量不少于75％、最佳不少于85％，在鹽酸溶液(9→1000)中120分鐘的釋放量不得超過10％；其利福平胃溶微丸在pH6.8的緩沖溶液、在水溶液、在鹽酸溶液(9→1000)中的釋放量45分鐘都不少于75％，最佳都不少于85％；其利福平腸溶微丸在水溶液、pH5.0、pH5.6緩沖溶液中45分鐘的釋放量不少于75％、最佳不少于85％，其異煙肼胃溶微丸在水溶液、在鹽酸溶液(9→1000)、pH1.2、pH4.0、pH4.5、pH5.0、pH6.8、pH7.2、pH7.6的緩沖溶液中45分鐘的釋放量都不少于75％，最佳都不少于85％；其吡嗪酰胺胃溶微丸在水溶液中45分鐘的釋放量不少于75％，最佳不少于85％；其鹽酸乙胺丁醇胃溶微丸在水溶液中45分鐘的釋放量不少于75％，最佳不少于85％。
2.根據(jù)WHO推薦的抗結(jié)核固定劑量復(fù)合制劑的標(biāo)準(zhǔn)處方的藥物配比關(guān)系和權(quán)利要求1的應(yīng)用，其特征在于將異煙肼腸溶微丸與胃溶利福平微丸、以及聯(lián)合胃溶吡嗪酰胺微丸、胃溶鹽酸乙胺丁醇微丸裝在同一個(gè)膠囊中形成異煙肼組分在腸道釋放的抗結(jié)核治療的固定劑量復(fù)合制劑。
3.根據(jù)WHO推薦的抗結(jié)核固定劑量復(fù)合制劑的標(biāo)準(zhǔn)處方的藥物配比關(guān)系和權(quán)利要求1的應(yīng)用，其特征在于將異煙肼腸溶微丸與腸溶利福平微丸配伍、進(jìn)一步可以聯(lián)合胃溶吡嗪酰胺微丸配伍，進(jìn)一步還可以聯(lián)合胃溶鹽酸乙胺丁醇微丸配伍，并裝填于同一個(gè)膠囊中，形成異煙肼組分在腸道開始釋放、利福平組分在胃中開始釋放的抗結(jié)核治療的固定劑量復(fù)合制劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求3，異煙肼腸溶微丸在腸道釋放，其特征在于異煙肼的血藥濃度的達(dá)峰時(shí)間在空腹口服給藥后3±0.5小時(shí)以上。
5.根據(jù)權(quán)利要求3，利福平胃溶微丸在胃中開始釋放，其特征在于空腹口服后，利福平胃溶微丸的血藥濃度的達(dá)峰時(shí)間與異煙肼腸溶微丸的血藥濃度的達(dá)峰時(shí)間相差小于1±0.6小時(shí)，且利福平組分的血藥濃度峰在前，異煙肼組分的血藥濃度峰在后。
6.根據(jù)權(quán)利要求4，其特征在于利福平與異煙肼都以腸溶微丸的形式在腸道中釋藥，兩者血藥濃度的達(dá)峰時(shí)間都在口服給藥后2.5±0.5小時(shí)以上，但不晚于5.0±0.5小時(shí)。
全文摘要
本發(fā)明是建立在專利03101211.6微丸制備的基礎(chǔ)上，對(duì)利福平、異煙肼微丸按照《中國藥典》釋放度測定的方法進(jìn)行微丸在特定條件下的溶液中釋放狀況測定和以人體為受試對(duì)象，測定微丸的人體藥代動(dòng)力學(xué)特征。
文檔編號(hào)A61K31/133GK1864682SQ200610092088
公開日2006年11月22日 申請(qǐng)日期2006年6月9日 優(yōu)先權(quán)日2006年6月9日
發(fā)明者李思思, 楊勇, 王偉, 和琳琳, 高藝歌 申請(qǐng)人:高華