專利名稱：水溶性芒果苷單鈉鹽的制備方法及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬化學(xué)制藥領(lǐng)域，具體涉及化合物芒果苷單鈉鹽的制備方法及其鎮(zhèn)咳化痰抗炎的藥理作用。
背景技術(shù)：
芒果苷，又名芒果素、知母寧。它廣泛存在與于百合科植物知母，漆樹科芒果樹、扁桃樹的葉、果實(shí)和樹皮，龍膽科植物東北龍膽、川西獐芽菜，水龍骨科植物光石韋等植物中。芒果苷為芒果葉的主要成分，芒果葉具有分布地域廣，藥材資源豐富，原料易得，價格低廉，甚至四季可采等優(yōu)點(diǎn)。其主要成分芒果苷的含量達(dá)1.92％。芒果苷具有多方面的生理活性和藥理作用，芒果苷有止咳、祛痰、平喘及抗炎、免疫、保肝利膽、抗脂質(zhì)過氧化、抗病毒、抗腫瘤、抗菌和抗糖尿病等作用[廖洪利，吳秋業(yè)，葉光明等.芒果苷藥理研究進(jìn)展[J].天津藥學(xué)，2005，17(2)50]。但芒果苷是一種四羥基的酮碳糖苷，水溶性極差，難于制成合適濃度的穩(wěn)定的藥液，影響了其療效及其應(yīng)用。增加難溶性藥物的溶解度以滿足治療需要，是中藥制劑的重要問題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就是在保留芒果苷結(jié)構(gòu)的主骨架前提下，利用碳酸氫鈉(NaHCO3)對其酸性較強(qiáng)的3-酚羥基進(jìn)行修飾，使生成鈉鹽。該化合物在作為新的止咳化痰抗炎藥的有效成分使用時，與芒果苷相比具有更好的水溶性，可制成注射劑使用。
本發(fā)明采用的技術(shù)方案芒果苷是一種四羥基酮的碳糖苷，利用芒果苷中的3位酚羥基酸性較強(qiáng)的性質(zhì)，使其與碳酸氫鈉反應(yīng)成鹽，再通過鹽析使芒果苷單鈉成鹽析出這一原理制備水溶性芒果苷單鈉鹽。芒果苷處于鄰位的6，7-二羥基因?yàn)橄噜徚u基締合的緣故，其酸性很弱，不能與碳酸氫鈉反應(yīng)；1-羥基與9-羰基形成分子內(nèi)氫鍵，其酸性也很弱，不能與碳酸氫鈉反應(yīng)；3-羥基的酸性較強(qiáng)，能與碳酸氫鈉反應(yīng)生成鹽。本發(fā)明的合成路線如下 本發(fā)明的合成條件為反應(yīng)溶媒為乙醇和水的混合物(體積比為乙醇∶水＝2∶3～7∶1)或丙酮和水的混合物(體積比為丙酮∶水＝2∶3～8∶1)，結(jié)晶溶媒為乙醇和二氯甲烷的混合物(體積比為乙醇∶二氯甲烷＝1∶2～10∶1)、或丙酮和二氯甲烷的混合物(體積比為丙酮∶二氯甲烷≥3∶2)、或純凈的丙酮，芒果苷與碳酸氫鈉的物質(zhì)的量之比為1∶1，碳酸氫鈉的質(zhì)量百分比濃度控制在1.0％～1.5％，反應(yīng)溫度55～65℃，反應(yīng)時間20～30min，真空50～60℃干燥。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1.
把裝有攪拌器和滴液漏斗的50ml三頸瓶安放在已升溫至60℃的恒溫水浴鍋中，在三頸瓶中加入5ml丙酮和2ml水，加入0.422g芒果苷(0.001mol)，攪拌，待芒果苷與溶媒充分混勻后，邊攪拌邊滴加1.5％的碳酸氫鈉溶液(5.6ml，0.001mol)，15min內(nèi)滴完，繼續(xù)攪拌，恒溫再反應(yīng)5～10min，溶液變清亮?？焖偌尤?0ml丙酮，攪拌5～10min，冷卻至室溫，過濾，丙酮洗滌，真空烤箱50～60℃干燥2～3h，得到芒果苷單鈉鹽0.412g，重量收率為92.8％。所得產(chǎn)品外觀為黃色粉末。
實(shí)施例2.
把裝有攪拌器和滴液漏斗的50ml三頸瓶安放在已升溫至60℃的恒溫水浴鍋中，在三頸瓶中加入8ml丙酮和1ml水，加入0.422g芒果苷(0.001mol)，攪拌，待芒果苷與溶媒充分混勻后，邊攪拌邊滴加1.5％的碳酸氫鈉溶液(5.6ml，0.001mol)，15min內(nèi)滴完，繼續(xù)攪拌，恒溫再反應(yīng)5～10min，溶液變清亮?？焖偌尤?0ml二氯甲烷和丙酮(體積比1∶1)的混合溶液，攪拌10～15min，過濾，丙酮洗滌，真空烤箱50～60℃干燥4～5h，得到芒果苷單鈉鹽0.364g，重量收率為81.9％。所得產(chǎn)品外觀為黃色粉末。
實(shí)施例3把裝有攪拌器和滴液漏斗的50ml三頸瓶安放在已升溫至60℃的恒溫水浴鍋中，在三頸瓶中加入3ml丙酮和2ml水，加入0.422g芒果苷(0.001mol)，攪拌，待芒果苷與溶媒充分混勻后，邊攪拌邊滴加1.5％的碳酸氫鈉溶液(5.6ml，0.001mol)，15min內(nèi)滴完，繼續(xù)攪拌，恒溫再反應(yīng)5～10min，溶液變清亮。快速加入40ml二氯甲烷和丙酮(體積比1∶1)的混合溶液，攪拌10～15min，過濾，丙酮洗滌，真空烤箱50～60℃干燥4～5h，得到芒果苷單鈉鹽0.375g，重量收率為84.5％。所得產(chǎn)品外觀為黃色粉末。
實(shí)施例4.
把裝有攪拌器和滴液漏斗的50ml三頸瓶安放在已升溫至60℃的恒溫水浴鍋中，在三頸瓶中加入5ml乙醇和2ml水，加入0.422g芒果苷(0.001mol)，攪拌，待芒果苷與溶媒充分混勻后，邊攪拌邊滴加1.5％的碳酸氫鈉溶液(5.6ml，0.001mol)，15min內(nèi)滴完，繼續(xù)攪拌，恒溫再反應(yīng)5～10min，溶液變清亮。快速加入25ml乙醇和二氯甲烷(體積比4∶1)的混合溶液，攪拌10～15min，過濾，乙醇洗滌，真空烤箱50～60℃干燥2～3h，得到芒果苷單鈉鹽0.355g，重量收率為80.0％。所得產(chǎn)品外觀為黃色粉末。
實(shí)施例5.
把裝有攪拌器和滴液漏斗的50ml三頸瓶安放在已升溫至60℃的恒溫水浴鍋中，在三頸瓶中加入5ml乙醇和2ml水，加入0.422g芒果苷(0.001mol)，攪拌，待芒果苷與溶媒充分混勻后，邊攪拌邊滴加1.5％的碳酸氫鈉溶液(5.6ml，0.001mol)，15min內(nèi)滴完，繼續(xù)攪拌，恒溫再反應(yīng)5～10min，溶液變清亮。快速加入40ml乙醇和二氯甲烷(體積比8∶1)的混合溶液，攪拌5～10min，冷卻，過濾，乙醇洗滌，真空烤箱50～60℃干燥2～3h，得到芒果苷鈉鹽0.333g，重量收率為75.0％。所得產(chǎn)品外觀為黃色粉末。
實(shí)施例6.
把裝有攪拌器和滴液漏斗的50ml三頸瓶安放在已升溫至60℃的恒溫水浴鍋中，在三頸瓶中加入7ml乙醇和1ml水，加入0.422g芒果苷(0.001mol)，攪拌，待芒果苷與溶媒充分混勻后，邊攪拌邊滴加1.5％的碳酸氫鈉溶液(5.6ml，0.001mol)，15min內(nèi)滴完，繼續(xù)攪拌，恒溫再反應(yīng)5～10min，溶液變清亮?？焖偌尤?0ml乙醇和二氯甲烷(體積比1∶1)的混合溶液，攪拌10～15min，過濾，冷卻，丙酮洗滌，真空烤箱50～60℃干燥2～3h，得到3-芒果苷鈉鹽0.375g，重量收率為84.5％。所得產(chǎn)品外觀為黃色粉末。
上述實(shí)施例中，芒果苷單鈉鹽重量收率均大于75％，為黃色粉末狀結(jié)晶。利用電噴霧電離(ESI)方法確定了其分子量為444，證實(shí)其結(jié)構(gòu)式為 本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性特點(diǎn)和顯著的進(jìn)步1.本發(fā)明利用了溶媒法制備方法，使芒果苷直接與成鹽劑碳酸氫鈉反應(yīng)成單鹽，再利用結(jié)晶溶媒使單鹽析出，該工藝簡單，成本低，有利于工業(yè)化生產(chǎn)。
2.本發(fā)明化合物與芒果苷相比，其水溶性由0.125mg/ml提高到260mg/ml(30℃)，為芒果苷水溶性的2000多倍，較好的解決了芒果苷的水不溶性問題。
3.在小鼠的急性毒性試驗(yàn)中，小鼠的最大耐受量為3.6g/kg，表明本發(fā)明所得化合物基本無毒性。
4.藥效試驗(yàn)表明，本發(fā)明化合物的鎮(zhèn)咳效果較芒果苷要強(qiáng)，其祛痰和抗炎效果與芒果苷比較無明顯差異。水溶性芒果苷鈉鹽的制備擴(kuò)大了芒果苷的使用范圍，為芒果苷注射劑的制備提供了理論基礎(chǔ)。
本發(fā)明化合物的藥理研究1實(shí)驗(yàn)材料1.1動物 昆明種小鼠，由廣西醫(yī)科大學(xué)動物室提供，動物許可證號SCXK桂2003-00031.2藥品與試劑 芒果苷自提，芒果苷單鈉鹽自制，芒果苷和芒果苷單鈉鹽臨用前均用生理鹽水配置，灌胃給藥；磷酸可待因，青海制藥廠生產(chǎn)，批號060216；遠(yuǎn)志水提液，自制；醋酸地塞米松，浙江仙琚制藥股份有限公司，批號040405；生理鹽水，廣西南寧百會藥業(yè)集團(tuán)有限公司，批號05070031.3實(shí)驗(yàn)儀器 Agilent 8453紫外可見分光光度計(jì)，美國安捷倫公司生產(chǎn)1.4統(tǒng)計(jì)方法 采用組間t檢驗(yàn)2方法和結(jié)果2.1對小鼠二氧化硫致咳的止咳作用取18～22克體重的小鼠60只，雌雄各半，隨機(jī)分成6組陰性對照(生理鹽水)組、陽性對照(可待因)組、芒果苷高劑量組、芒果苷低劑量組、芒果苷單鈉鹽高劑量組、芒果苷單鈉鹽低劑量組，每組10只，根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)量按0.2ml/10g小鼠體重灌胃給藥，于給藥后1h，用0.5g無水亞硫酸鈉和50％的硫酸2ml反應(yīng)產(chǎn)生的二氧化硫氣體刺激小鼠10s，立即取出，記錄小鼠咳嗽潛伏期和2分鐘內(nèi)小鼠的咳嗽次數(shù)。結(jié)果見表1。
表1 對小鼠二氧化硫致咳的止咳作用(n＝10)

注與生理鹽水組比較**P＜0.01，*P＜0.05；等劑量的用藥組比較▲P＜0.05結(jié)果表明，芒果苷和芒果苷單鈉鹽高、低劑量組均能明顯延長小鼠咳嗽潛伏期，減少小鼠咳嗽次數(shù)，與生理鹽水組比較有顯著性差異(P＜0.01或P＜0.05)，提示芒果苷和芒果苷單鈉鹽都有明顯的鎮(zhèn)咳作用。等劑量的用藥組之間比較對延長小鼠咳嗽潛伏期無明顯差異(P＞0.05)。但等劑量下，芒果苷單鈉鹽高劑量組與芒果苷高劑量組比較，對減少小鼠咳嗽次數(shù)有顯著差異(P＜0.05)，說明芒果苷單鈉鹽鎮(zhèn)咳效果優(yōu)于芒果苷。
2.2對小鼠氣管排泌酚紅的影響。
取18～22克體重的小鼠60只，雌雄各半，隨機(jī)分成6組陰性對照(生理鹽水)組、陽性對照(100％遠(yuǎn)志水提液)組、芒果苷高劑量組、芒果苷低劑量組、芒果苷單鈉鹽高劑量組、芒果苷單鈉鹽低劑量組，每組10只。根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)量按0.2ml/10g小鼠體重灌胃給藥兩天，于末次給藥后45min腹腔注射2％的酚紅0.2ml/只，30min后，處死小鼠，鈍性分離氣管，用5％的NaHCO3洗滌3次，每次0.8ml，回收洗液，并稀釋兩倍，于Agilent 8453紫外可見分光光度計(jì)558nm處測定吸收度(A)。結(jié)果見表2。
表2 對小鼠氣管排泌酚紅的影響(n＝10)

注與生理鹽水組比較**P＜0.01結(jié)果表明，芒果苷和芒果苷單鈉鹽高、低劑量組均能明顯增加小鼠酚紅排泌量，與空白對照組比較均有極顯著性差異(P＜0.01)，提示芒果苷和芒果苷單鈉鹽都有明顯的祛痰作用。芒果苷單鈉鹽與等劑量的芒果苷比較，對小鼠酚紅排泌量無明顯差異(P＞0.05)，說明芒果苷單鈉鹽和芒果苷的祛痰效果相似。
2.3對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響。
取18～22克體重的小鼠60只，雌雄各半，隨機(jī)分成6組陰性對照(生理鹽水)組、陽性對照(醋酸地塞米松)組、芒果苷低劑量組、芒果苷高劑量組、芒果苷單鈉鹽低劑量組、芒果苷單鈉鹽高劑量組，每組10只。根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)量按0.2ml/10g小鼠體重灌胃給藥七天，于末次給藥后30min，將100％二甲苯0.1ml/只滴到小鼠左耳前后兩面致炎，右耳不滴為正常耳。30min后脫頸椎處死小鼠，用9mm直徑的打孔器分別沿小鼠左右耳廓相同部位打下兩側(cè)耳片，分別于電子天平上稱重。左耳重量減去右耳重量為腫脹度。結(jié)果見表3。
表3 對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響(n＝10)

注與生理鹽水組比較**P＜0.01結(jié)果表明，芒果苷及其衍生物均能明顯減輕二甲苯所致小鼠炎癥，與空白對照組比較有極顯著性差異(P＜0.01)，提示芒果苷及其衍生物都有明顯的抗炎作用。芒果苷衍生物與等劑量的芒果苷比較，對減輕二甲苯所致小鼠炎癥無明顯差異(P＞0.05)，說明芒果苷衍生物和芒果苷的抗炎效果相似。
3小結(jié)本實(shí)驗(yàn)采用二氧化硫氣體刺激法、酚紅排泌法和二甲苯致耳廓腫脹法，比較了芒果苷及其衍生物的鎮(zhèn)咳、祛痰和抗炎的藥效，結(jié)果表明，芒果苷衍生物的鎮(zhèn)咳效果較芒果苷要強(qiáng)，其祛痰和抗炎效果與芒果苷相似，本實(shí)驗(yàn)說明芒果苷經(jīng)結(jié)構(gòu)修飾后，并沒有降低其藥效。水溶性芒果苷衍生物的制備將擴(kuò)大芒果苷的使用范圍，也為芒果苷注射劑的制備提供了理論基礎(chǔ)。
權(quán)利要求
1.一種新合成的藥物芒果苷單鈉鹽，化學(xué)名1，6，7-三羥基-2-(β-D-葡萄吡喃糖基)酮-3-酚鈉鹽；1，6，7-trihydroxy-2-(β-D-glucopyranosyl)xanthone-3-phenols sodium salt。分子式C19H17O11Na；分子量444。其化學(xué)結(jié)構(gòu)式為
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的新合成的藥物制備方法，其特征是利用芒果苷中的3位酚羥基酸性較強(qiáng)的性質(zhì)，使其在反應(yīng)溶媒中與碳酸氫鈉反應(yīng)生成芒果苷單鈉鹽，再通過結(jié)晶溶媒使芒果苷單鈉成鹽析出。反應(yīng)溶媒為乙醇和水的混合物(體積比為乙醇∶水＝2∶3～7∶1)，或丙酮和水的混合物(體積比為丙酮∶水＝2∶3～8∶1)；結(jié)晶溶媒為乙醇和二氯甲烷的混合物(體積比為乙醇∶二氯甲烷＝1∶2～10∶1)，或丙酮和二氯甲烷的混合物(體積比為丙酮∶二氯甲烷≥3∶2)，或純凈的丙酮。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的新合成的藥物制備方法，其特征是芒果苷與碳酸氫鈉的物質(zhì)的量之比為1∶1，碳酸氫鈉的質(zhì)量百分比濃度控制在1.0％～1.5％，反應(yīng)溫度55～65℃，反應(yīng)時間20～30min，真空烤箱50～60℃干燥。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的芒果苷單鈉鹽，其特征是該化合物用做鎮(zhèn)咳、祛痰和抗炎的藥物時，芒果苷單鈉鹽的鎮(zhèn)咳效果較芒果苷要強(qiáng)，其祛痰和抗炎效果與芒果苷比較無明顯差異。
全文摘要
本發(fā)明是在保留芒果苷結(jié)構(gòu)的主骨架前提下，利用碳酸氫鈉(NaHCO
文檔編號A61K31/7042GK1919857SQ20061011517
公開日2007年2月28日 申請日期2006年8月24日 優(yōu)先權(quán)日2006年8月24日
發(fā)明者鄧家剛, 袁葉飛 申請人:廣西中醫(yī)學(xué)院