專利名稱：：植物甾醇在制備治療慢性非細菌性前列腺炎藥物中的應用的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及植物藥物，具體涉及植物甾醇新的醫(yī)學治療用途，即在制備治療慢性非細菌性前列腺炎藥物中的應用，以及植物甾醇制備的藥物組合物。
背景技術：
：目前，植物甾醇的化學組分及藥理作用己有系統(tǒng)的研究。植物甾醇是一種含有多種結構相近的甾醇混合物，其中主要含有P—谷甾醇(e—sitosterol豆甾醇(Stigmasterol)、菜油甾醇(Campesterol)及菜籽甾醇(Brassicasterol)等，以e—谷甾醇、豆甾醇為主(許文林,王雅瓊,等.重結晶法精制植物甾醇的溶劑選擇.揚州大學學報自然科學版，2002,5(1):5861)。植物甾醇具有較強的藥理活性。目前的研究證明了植物甾醇具備降低血液膽甾醇含量、抑制腫瘤和預防癌癥、抑制乳腺增生、調節(jié)免疫、抗炎、退熱、調節(jié)生長和抗病毒等多方面的藥理作用(韓軍花.植物甾醇的性質、功能及應用.國外醫(yī)學分冊:衛(wèi)生學分冊，2001,28(5):285291)。慢性前列腺炎是成年男性泌尿系統(tǒng)多發(fā)病，多發(fā)于20-40歲青壯年，中國成年人慢性非細菌性前列腺炎發(fā)病率高，約占前列腺炎發(fā)病率的64%。臨床目前常用于治療慢性非細菌性前列腺的藥物有抗生素類、抗炎類、a受體阻斷劑、植物藥、免疫抑制劑等藥物，現(xiàn)有的治療藥物存在治療效果差、治愈率低、不良反應多的缺陷，因而臨床應用有局限。上述文獻報道了有關植物甾醇的性質、功能和應用，但未涉及其在治療慢性非細菌性前列腺炎的敘述。本發(fā)明對植物甾醇治療慢性非細菌前列腺炎進行深入研究，結果發(fā)現(xiàn)，植物甾醇治療慢性非細菌性前列腺炎療效確切，可以作為新用途的研發(fā)。
發(fā)明內容本發(fā)明需要解決的技術問題在于研究植物甾醇新的醫(yī)學治療用途，以及利用其制備臨床適用的療效好、安全性極高的治療慢性非細菌性前列腺炎的新藥。植物甾醇中各甾醇的英文名、分子式和分子量見表l。表l各甾醇的英文名、分子式與分子量為解決上述技術問題，本發(fā)明提供了如下技術解決方案。植物甾醇在制備治療慢性非細菌性前列腺炎的藥物中的應用，其特征在于植物甾醇主要由e—谷甾醇、豆甾醇、菜油甾醇和/或菜籽甾醇組成。本發(fā)明提供了一種治療慢性非細菌性前列腺炎的植物甾醇藥物組合物，該藥物組合物由植物甾醇與藥學上可接受的載體組成。所述的藥物組合物，其特征在于其中的植物甾醇按百分重量比，含e—谷甾醇3090%、豆甾醇540%、菜油甾醇和/或菜籽甾醇560%。所述的藥物組合物，其特征在于含植物留醇與聚氧乙烯蓖麻油。所述的藥物組合物，其特征在于可以是植物甾醇與稀釋劑、崩解劑組配的常規(guī)片劑或膠囊劑；或者是植物甾醇與稀釋劑、甜味劑組配的顆粒劑；或者是植物甾醇與稀釋劑和羥丙甲纖維素K4M組配的緩釋片劑或膠囊劑；其中稀釋劑可選用乳糖，微晶纖維素，淀粉，糊精，甘露醇，蔗糖，葡萄糖，磷酸鈣，聚乙二醇6000，聚維酮；崩解劑可選用低取代羥丙纖維素，羧甲淀粉鈉，交聯(lián)聚維酮，交聯(lián)羧甲基纖維素鈉；甜味劑可選用甜菊苷，阿司帕坦，甜蜜素，乙?；前彼徕?亦可選加粘合劑、潤滑劑或潤濕劑。本發(fā)明較好的植物甾醇藥物組合物，其特征在于按重量比，植物甾醇l:乳糖或微晶纖維素25:羧甲淀粉鈉或交聯(lián)聚維酮0.05~0.2;或者，植物甾醇l-聚乙二醇6000或聚維酮(K30)28;或者，植物甾醇1:乳糖或微晶纖維素0.1~0.5:羥丙甲纖維素K4M0.7~1.3。本發(fā)明更好的植物甾醇藥物組合物為按重量比，植物甾醇l:乳糖或微晶纖維素3.54.5:羧甲淀粉鈉或交聯(lián)聚維酮0.10.15;或者，植物甾醇l:聚乙二醇e—谷甾醇豆甾醇P—SitosterolStigmasterolC29H50OC29H48O414,69412.7菜油溪醇菜籽留醇BrassicasterolC柳pesterolC28H46OC28H48O398.67概66名名式量文文子子中英分分6000或聚維酮(K30)3~5;或者，植物甾醇l:乳糖或微晶纖維素0.20.3:羥丙甲纖維素K4M0.8-1.0。為了更好地理解本發(fā)明，下面用植物甾醇的藥理毒理試驗及結果、臨床試驗及結果來說明其在制藥領域的新用途。此外，當單獨使用植物甾醇中的單一成分，或兩種以上化合物組成的混合物均可達到同樣的藥理效果。植物甾醇為e_谷甾醇、豆甾醇、菜油甾醇和/或菜籽甾醇的混和物。本發(fā)明所用的植物甾醇原料購自中國江蘇春之谷生物制品有限公司，其產品達到國家食品級標準，屬醫(yī)藥、食品、化工原料。以此植物甾醇提取物為原料，使用丙酮重結晶精制，得精制大豆植物甾醇供本發(fā)明使用，共制得精制植物甾醇約90kg。將精制植物甾醇約320g和適當量的制備藥物膠囊用的輔料混和灌裝膠囊8000粒(每粒含植物甾醇40mg)，備用。本發(fā)明的另一目的是提供了植物甾醇在制備治療慢性非細菌性前列腺炎藥物中的應用。通過下列試驗來說明本發(fā)明的非臨床安全性評價的研究結果如下一、急性毒性試驗1、大鼠急性毒性試驗在最大給藥濃度和最大給藥容量條件，大鼠口服灌胃(ig)給藥劑量為21.82g/kg，動物未見死亡及異常毒性反應。2、犬急性毒性試驗在最大給藥濃度和最大給藥容量條件，Beagle犬口服灌胃(ig)給藥劑量為7.6g/kg，動物未見死亡及異常毒性反應。二、長期毒性試驗1、對大鼠灌胃給藥的長期毒性試驗用雄性SD大鼠進行的為期26周的長期毒性試驗，試驗結果表明，大鼠灌胃給藥26周，低(400mg/kg)、中(1206mg/kg)、高(3636mg/kg)劑量組動物一般狀態(tài)正常、攝食量、血常規(guī)、血清生化等指標均未見異常改變。高劑量組大鼠體重于給藥9周后可見下降趨勢。低、高劑量組雄鼠腎上腺，各劑量組雄鼠腦及睪丸的臟器系數(shù)在正常范圍內稍有升高(上述臟器的絕對重量與溶劑對照組大鼠相比無明顯差異)。各受檢臟器均未見明顯的病理組織學改變。結論在本試驗條件下，大鼠灌胃植物甾醇400mg/kg、1206mg/kg、3636mg/kg，連續(xù)26周，未見與受試物明顯相關的毒性作用發(fā)生。2、對Beagle犬灌胃給藥的長期毒性試驗用雄性Beagle犬進行的為期39周的長期毒性試驗，經口灌胃給藥26周中期試驗結果表明，植物甾醇低(120.0mg/kg)、中(527.9mg/kg)、高(2322.6mg/kg)個劑量，Beagle犬未出現(xiàn)死亡，一般情況良好。動物的攝食量、體重、體溫、血常規(guī)、血清生化、糞尿檢査、心電圖等指標均未見明顯異常。各受檢臟器組織病理學檢査正常。結論在本試驗條件下，Beagle犬灌胃植物甾醇120.0mg/kg、527.9mg/kg、2322.6mg/kg，連續(xù)26周，未見與受試物明顯相關的毒性作用發(fā)生。三、一般藥理學試驗植物甾醇(1161.3mg/kg、527.9mg/kg、120.0mg/kg)經口灌胃給予麻醉Beagle犬，麻醉Beagle犬的血壓(收縮壓、舒張壓)、心率，P、T、R波和QRS、PR、Q-T間期、呼吸頻率和呼吸幅度等指標均無明顯影響；植物甾醇(220mg/kg、1100mg/kg、2200mg/kg，ig)對小鼠自發(fā)活動無明顯影響，對戊巴比妥鈉致小鼠睡眠無協(xié)同作用，與閾下戊巴比妥鈉亦無明顯協(xié)同催眠作用。試驗結果表明，植物甾醇(1161.3mg/kg、527.9mg/kg、120.0mg/kg)對麻醉Beagle犬的心血管系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)無明顯影響，植物甾醇(220mg/kg、U00mg/kg、2200mg/kg)對小鼠精神神經系統(tǒng)也無明顯的作用。本發(fā)明的藥效學研究結果如下一、對角叉菜膠致大鼠前列腺炎試驗動物SD系大鼠，清潔級，雄性，體重300350g，購自浙江省實驗動物中心，實驗動物生產許可證SCXK(浙)2003-0001。實驗動物使用許可證SYXK(浙)2003-0001。禁食過夜后供用。樣品供試驗用植物甾醇樣品由上海藥谷藥業(yè)有限公司研制，以無水乙醇(終含量為5%)浸潤藥物粉末后，并以蒸餾水配制成7.5mg/ml、3.75mg/ml和1.875mg/ml的混懸制劑供實驗動物灌胃用，每日給藥前充分混勻。試劑角叉菜膠，遼寧省藥物研究所生產，批號020812。氯化鈉注射液，杭州民生藥業(yè)集團有限公司，批號30402233。戊巴比妥鈉，上海化學試劑公司，批號F20020915。對照藥舍尼通⑧普適泰片劑，批號20040306。南京美瑞制藥有限公司制造。方法-SD大鼠，連續(xù)灌胃給藥7天，第6天給藥后30min，戊巴比妥鈉50mg/kg麻醉，在無菌條件下，大鼠下腹部正中切口，為避免術中器械對腺體的物理刺激，在兩側儲精囊內注入1%無菌角叉菜膠生理鹽水溶液0.lml,對照組注射生理鹽水，然后縫合腹壁。24小時后在麻醉下檢測各項指標。觀察指標-1)稱取實驗前后體重；2)取前列腺液10^1放入白細胞稀釋液中，計數(shù)白細胞總數(shù)；3)另取l滴前列腺液涂片，鏡下觀察卵磷脂小體密度，其評分標準為卵磷脂小體滿視野為4分，3/4視野為3分，1/2視野為2分，1/4視野為1分，進行統(tǒng)計處理；4)側葉前列腺病理切片檢査，比較不同處理組間組織病理學差異。結果1)對大鼠體重、前列腺白細胞數(shù)與卵磷脂小體密度的影響由表2可見，植物甾醇75mg/kg、150mg/kg明顯減少角叉菜膠所致非細菌性前列腺炎大鼠前列腺液中白細胞的增高數(shù)目，回升低下的卵磷脂小體密度。表2.植物甾醇對角叉菜膠所致大鼠非細菌性前列腺炎的影響(；土s，n-10)。組別劑量體重(g)白細胞數(shù)卵磷脂小體(mg/kg)DlD7(10Vml)密度(級)正常對照組—357.5±20.0392.8±22.94.81±0.623.7±0.5模型組—347.0±27.2383.9±28.726.61士3.25厶aa1.2±0.2AAA舍尼通60350.0±18.3385.1±23.17.54±1.04林*2.6±0.7林*植物甾醇37.5350.0±13.7390.5±14.524.27±3.151.2±0.475346.5±17.8393.8±16.411.27±2.64*林1.7±0.4**150355.0±11.8389.2±15.96.24±1.00*林2.7±0.7***厶厶a代O.OOl正常組；**代O.Ol，***代O.001M.模型組2)前列腺組織病理形態(tài)學觀察病理檢査發(fā)現(xiàn)，對照組大鼠前列腺腺體間可見少量結締組織及立方形或低柱狀腺上皮細胞。模型組大鼠前列腺腺腔內有大量炎癥細胞浸潤，并有脫落的上皮細胞。陽性對照舍尼通組大鼠前列腺顯示間質輕度水腫，少量炎癥細胞浸潤，可見少數(shù)巨噬細胞，腺腔內有少量脫落的上皮細胞。植物甾醇治療組隨劑量遞增顯示炎癥程度減輕，高劑量組大鼠前列腺顯示間質有輕至中度水腫，腺腔內有少量脫落上皮細胞及炎癥細胞，偶見少數(shù)巨噬細胞(見附圖l)。小結植物甾醇75mg/kg、150mg/kg預先給藥對角叉菜膠所致非細菌性前列腺炎大鼠前列腺液中白細胞數(shù)增高和卵磷脂小體密度減少有明顯的預防作用。前列腺病理組織檢査發(fā)現(xiàn)，角叉菜膠模型組大鼠前列腺腺腔內有大量炎癥細胞浸潤，并有脫落的上皮細胞。植物甾醇處理組隨劑量遞增顯示炎癥程度明顯減輕，前列腺間質有輕至中度水腫，腺腔內有少量脫落上皮細胞及炎癥細胞，并偶見少數(shù)巨噬細胞。二、對消痔靈致大鼠前列腺炎試驗動物SD系大鼠，清潔級，雄性，體重240280g，購自浙江省實驗動物中心，實驗動物生產許可證SCXK(浙)2003-0001。實驗動物使用許可證號SYXK(浙)2003-0001。禁食過夜后供用。樣品供試驗用植物甾醇樣品由上海藥谷藥業(yè)有限公司提供，先用少量95%乙醇助溶然后加水配制成水混懸制劑(500ml含95%乙醇27ml)經超聲振蕩供實驗動物灌胃用，不同濃度的植物甾醇混懸液中乙醇含量均為5%。試劑益盛@消痔靈注射液，批號0311174，吉林省集安益盛藥業(yè)股份有限公司。戊巴比妥鈉，上海化學試劑公司，批號F20020915。注射用青霉素鈉，規(guī)格80萬單位/支，批號05029304，中諾藥業(yè)(石家莊)有限公司。0.9%氯化鈉注射液，杭州民生藥業(yè)集團有限公司，規(guī)格250ml:2.25g，250ml/瓶,批號30402233。對照藥舍尼通@普適泰片，批號20050901，南京美瑞制藥有限公司制造。儀器BH-2生物顯微鏡日本OLYMPUS;AEL-200型電子天平日本島津公司產品；超聲波振蕩器中船七院七二六所生產。方法雄性SD大鼠，戊巴比妥鈉50mg/kgip麻醉后，剪除下腹部被毛，在無菌條件下，下腹正中切口，直達腹腔，提取膀胱及兩側精囊，暴露前列腺，以25%消痔靈注射液0.2ml分別注射至前列腺側葉，每一側葉分別注入O.lml，然后縫合腹壁。術后連續(xù)3d每只肌注青霉素4萬單位。術后第7d將大鼠分組，灌胃給藥l次/d，連續(xù)28d。處死后解剖檢査下列指標。檢測指標1)肉眼觀察側葉前列腺病變狀態(tài)；2)稱大鼠體重、側葉前列腺濕重并以計算得相對重量表示結果；3)側葉前列腺液涂片，鏡下觀察卵磷脂小體密度；4)計數(shù)側葉前列腺液白細胞總數(shù)；5)前列腺病理切片檢査各組大鼠的前列腺側葉經稱重后，即固定于10%福爾馬林中，經系列乙醇脫水，二甲苯透明，石蠟包埋，切片，HE染色后鏡檢。按前列腺間質中炎癥細胞浸潤和成纖維細胞增生的程度，前列腺腺腔大小及腺腔內分泌物多少進行評分["2],比較不同處理組間組織病理學差異，按各組前列腺病變的評分進行Ridit分析[:']。根據(jù)統(tǒng)計結果判斷藥物是否有效。前列腺病變評分標準①按前列腺間質中炎癥細胞浸潤和成纖維細胞增生程度-:間質無或偶見炎癥細胞和/成纖維細胞增生；+:間質中有少量炎癥細胞浸潤和/成纖維細胞增生，呈散在分布；++:間質中炎癥細胞浸潤和/成纖維細胞增生較多；+++:間質中大量炎癥細胞浸潤和/成纖維細胞增生；呈簇灶狀或束狀分布;②按前列腺腺腔大小及腺腔內分泌物多少-:前列腺腺腔大小不一，大部分較大，腺上皮表面形成很多皺襞，腺腔不規(guī)則，腔內有大量深粉染的分泌物。+:前列腺腺腔變小，皺襞減少，腺腔內分泌物減少，變淡。++:前列腺腺腔明顯變小，皺襞減少，腺腔內分泌物明顯微鏡減少或無，顏色變淡。結果1)對前列腺側葉相對重量、前列腺液白細胞總數(shù)和卵磷脂小體密度的影響由表3可見，消痔靈注射液復制大鼠前列腺炎模型使前列腺液內卵磷脂小體密度明顯減少，白細胞數(shù)增多，前列腺濕重減輕。陽性對照藥舍尼通及植物甾醇均可增加前列腺液內卵磷脂小體密度，其中植物甾醇37.5mg/kg劑量組作用相對較弱，其他各劑量組的作用與陽性藥物舍尼通相當；舍尼通及植物甾醇均可逆轉消痔靈注射液復制大鼠前列腺炎模型所致的前列腺液內白細胞數(shù)增高，其中75mg/kg劑量組植物甾醇作用最強；舍尼通及植物甾醇均可逆轉消痔靈引起的側葉前列腺相對重量減輕，其中75mg/kg劑量組植物甾醇作用最強；在動物尸檢過程中亦發(fā)現(xiàn)模型組動物側葉前列腺組織體積明顯縮小，質地較硬；而75mg/kg劑量組動物前列腺組織相對正常。表3.植物甾醇對消痔靈致非細菌性前列腺炎大鼠前列腺液的影響(5土sd，n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>O.Ol，tt抑代O.001ra生理鹽水組*代0.05，**代0.01，***代0.001ks消痔靈模型組2)前列腺組織的肉眼觀察-大鼠處死后剖檢,見正常對照組前列腺組織柔軟,紅潤，有光澤；模型組前列腺組織表面缺少光澤，有的腺組織表面有灰白色點狀結節(jié)，有的前列腺與周圍組織有不同程度的粘連；給舍尼通和植物甾醇各組的前列腺表面光澤大多較正常，與周圍組織無粘連或較輕粘連,未見到灰白色結節(jié)。3)前列腺組織的光學顯微鏡下組織形態(tài)學觀察見圖2。①正常對照組大鼠的前列腺由一層纖維結締組織及平滑肌構成的被膜所包繞，被膜中的纖維結締組織及平滑肌與腺體內的相連且延續(xù)，前列腺腺腔大小不一，腺上皮表面形成很多皺襞，使腺體很不規(guī)則，腺泡上皮多為單層柱狀或立方形，腺腔內多有粉紅色的分泌物。②模型組大鼠的前列腺間質中可見程度不等的淋巴細胞、單核細胞等炎癥細胞浸潤和成纖維細胞增生，數(shù)量多少不等，甚者炎癥細胞和成纖維細胞聚集成束狀、簇灶狀，致間質明顯增寬，腺腔變小，大多腺腔內分泌物減少，顏色變淺，為淡紅色，有的腔內無分泌物。表明消痔靈致大鼠非細菌性前列腺炎病理模型已成功建立。③陽性對照藥舍尼通組大鼠前列腺間質中炎癥細胞浸潤和成纖維細胞增生明顯減輕，腔內分泌物也增多，顏色變深，半數(shù)以上大鼠的前列腺基本正常，表明舍尼通治療大鼠非細菌性前列腺炎有效(與模型組相比P<0.01)。植物甾醇150mg/kg和75mg/kg組的大鼠前列腺間質中炎癥細胞浸潤和成纖維細胞增生均顯著減輕，腺腔擴大，腔內有多量深粉染的分泌物。有較多大鼠的前列腺形態(tài)結構基本正常，表明植物甾醇150mg/kg和75mg/kg對治療大鼠非細菌性前列腺炎有效(與模型組相比P均〈0.01)。但植物甾醇37.5mg/kg組大鼠的前列腺間質中炎癥細胞浸潤和成纖維細胞增生情況，腺腔大小及腔內分泌物多少與模型組無顯著差異，表明植物甾醇37.5mg/kg對治療大鼠非細菌性前列腺炎無效(與模型組相比P>0.05)。4)植物齒醇對消痔靈致大鼠非細菌性前列腺炎的前列腺病變的影響表4植物甾醇對消痔靈致大鼠前列腺炎的評分結果(n40)組別劑量mg/kg炎癥細胞浸潤—++++++成纖維細胞增生_++++++腺腔大小一+++腔內分泌物一+++對照1000010000910910模型02350361019037舍尼通6055006400640640植物37.522510370235235<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>注表中數(shù)字為動物數(shù)。表5實驗各組前列腺病變經Ridit統(tǒng)計結果(『10)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>注P值與模型組比較各組大鼠的前列腺切片評分經Ridit分析統(tǒng)計，結果表明1)25%消痔靈注入模型組大鼠前列腺側葉，致側葉前列腺間質中炎癥細胞浸潤和成纖維細胞增生，腺腔縮小，分泌物減少，與對照組有顯著差異(P〈0.05)。表明25%消痔靈致大鼠非細菌性前列腺炎造型成功。2)舍尼通組大鼠側葉前列腺間質中炎癥細胞浸潤和成纖維細胞增生均明顯減輕，腺腔縮小和分泌物減少也明顯減輕，與模型組有顯著差異(P〈0.05),表明舍尼通對消痔靈致大鼠非細菌性前列腺炎療效顯著。3)植物甾醇150mg/kg，75mg/kg組大鼠側葉前列腺間質中炎癥細胞浸潤和成纖維細胞增生均顯著輕于模型組，腺腔縮小和分泌物減少也明顯減輕，與模型組有顯著差異(P〈0.05)，表明植物甾醇150mg/kg，75mg/kg對消痔靈致大鼠非細菌性前列腺炎療效顯著。4)植物甾醇37.5mg/kg組大鼠側葉前列腺間質中炎癥細胞浸潤和成纖維細胞增生程度及腺腔大小和腔內分泌物與模型組無顯著差異(P〉0.05)，表明植物甾醇37.5mg/kg對消痔靈致大鼠非細菌性前列腺炎無明顯效果。結論植物甾醇對消痔靈所致大鼠非細菌性前列腺炎動物模型顯示下列藥效1)植物甾醇對消痔靈注射液所致非細菌性前列腺炎大鼠前列腺液內卵磷脂小體密度減少、白細胞數(shù)增多與前列腺濕重減輕有明顯的干預作用。其中植物甾醇37.5mg/kg劑量組作用相對較弱，75mg/kg150mg/kg劑量組的作用與陽性藥物舍尼通60mg/kg相當；在動物尸檢過程中亦發(fā)現(xiàn)模型組動物側葉前列腺組織體積明顯縮小，質地較硬；而75mg/kg劑量組動物組織相對正常。2)前列腺組織的肉眼觀察發(fā)現(xiàn)，正常對照組前列腺組織柔軟,紅潤，有光澤；模型組前列腺組織表面缺少光澤，或有腺組織表面灰白色點狀結節(jié),前列腺與周圍組織有不同程度的粘連。給予植物甾醇各組的大鼠的前列腺表面光澤大多較正常,與周圍組織無粘連或較輕粘連，未見到灰白色結節(jié)。3)前列腺組織病理形態(tài)學觀察發(fā)現(xiàn)，模型組大鼠的前列腺間質中可見程度不等的淋巴細胞、單核細胞等炎癥細胞浸潤和成纖維細胞增生，數(shù)量多少不等，甚者炎癥細胞和成纖維細胞聚集成束狀、簇灶狀，致間質明顯增寬，大多腺腔內分泌物減少。表明消痔靈致大鼠非細菌性前列腺炎病理模型已成功建立。4)前列腺組織病理切片炎癥細胞浸潤和成纖維細胞增生程度及腺腔大小和腔內分泌物的分級綜合評價表明，植物甾醇中、高劑量組大鼠側葉前列腺間質中炎癥細胞浸潤和成纖維細胞增生均顯著減輕，有較多大鼠的前列腺形態(tài)結構基本正常，腺腔縮小和分泌物減少也明顯減輕。表明植物甾醇對治療大鼠非細菌性前列腺炎有效，但植物甾醇低劑量組則未見作用。本發(fā)明的臨床研究結果如下-一、植物甾醇治療慢性非細菌性前列腺炎的臨床研究1、病例基本情況共入組了30名III型前列腺炎門診患者，年齡從20歲-55歲(具體年齡見表7)，病程最長達30年，最短l年，部分患者曾經使用其他治療藥物，但是療效欠佳，所有病例均符合研究方案的入選標準。表7、入選病例年齡構成表<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>2、病人入選標準1)有尿頻、排尿不適、陰囊或會陰疼痛不適等慢性前列腺炎(III型)癥狀，并持續(xù)8周以上的男性門診患者，年齡在20—55歲間2)美國國家衛(wèi)生研究院慢性前列腺炎癥狀評分(NIH-CPSI)210。3)前列腺液細菌培養(yǎng)陰性。4)一周內未服用其它治療慢性非細菌性前列腺炎和影響排尿的藥物。3、治療方法植物甾醇膠囊(每粒含植物甾醇40mg)。口服，服用劑量為每次l粒，每日3次，連續(xù)服用8周。試驗過程中停止服用其他治療藥物。第4周和第8周的周末進行隨訪(隨訪復査需在前一日服藥的24小時之后進行，且每次隨訪當天的藥物在本次隨訪的各項檢査結束后服用)。4、檢測指標分別于治療前，治療后4周和8周，記錄受試者的臨床體征、前列腺液細菌培養(yǎng)檢査、肝功能、腎功能、血常規(guī)、尿常規(guī)、美國國家衛(wèi)生研究院慢性前列腺炎癥狀評分(NIH-CPSI)等。5、療效標準治愈前列腺炎癥狀消失；顯效美國國家衛(wèi)生研究院慢性前列腺炎癥狀評分(NIH-CPSI)降低50%以上;有效NIH-CPSI降低2550%;無效NIH-CPSI降低25%以下。6、治療結果用藥后8周，治愈(前列腺炎癥狀消失)0例；顯效(美國國家衛(wèi)生研究院慢性前列腺炎癥狀評分(NIH-CPSI)降低50%以上)5例，有效(NIH-CPSI降低2550%)20例，無效(蘭-CPSI降低25%以下)3例；脫落2例。NIH-CPSI評分下降0-18%，有效患者當中美國國家衛(wèi)生研究院慢性前列腺炎癥狀評分(NIH-CPSI)評分平均下降為12.56分，患者總有效率為89.29%。治療過程中和治療后，30例受試者血、尿常規(guī)，肝、腎功能均未見異常，無其他明顯不良反應。7、結論臨床試驗結果表明，植物甾醇對慢性非細菌性前列腺炎具備良好的療效，且無明顯不良反應。從以上研究結果顯示(1)藥理、毒理試驗結果表明，本發(fā)明的植物甾醇具備安全性極高，藥理作用強，具備良好的抗慢性非細菌性前列腺炎的作用，與同時設立的舍尼通為對照組進行實驗比較，結果經統(tǒng)計處理，呈顯著性差異，且其療效優(yōu)于舍尼通對照組。(2)臨床實驗結果表明，本發(fā)明的植物甾醇配制成的膠囊劑，治療慢性非細菌性前列腺炎，治療總有效率高，且無明顯不良反應。本發(fā)明用植物甾醇治療慢性非細菌性前列腺炎，其來源豐富、價廉、未見毒副作用，制備工藝簡單，并可制成口服劑型、注射劑型、片劑等，使用方便，注射用能用用作肌肉注射或靜脈注射。本發(fā)明的以植物甾醇為活性成分制備的藥物組合物，其臨床用量以植物甾醇計可以是6-2100mg，較優(yōu)選的是30-210mg，最優(yōu)選的是120mg，每日分3次服用。附圖1:植物甾醇對角叉菜膠致大鼠前列腺炎的組織形態(tài)學影響(均為HE染色)圖l一l與圖l一2為對照組大鼠(1-4)的前列腺前列腺由一層纖維結締組織及平滑肌構成的被膜所包繞，被膜中的纖維結締組織及平滑肌與腺體內的相連且延續(xù)，前列腺腺腔大小不一，腺上皮表面形成很多皺襞，使腺腔很不規(guī)則，腺泡上皮多為單層柱狀或立方形，腺腔內可見大量深粉染的分泌物。圖1-1HEX10;圖l-2示立方形或低柱狀腺上皮細胞及腔內分泌物，HEX40;圖l一3與圖l一4為模型組大鼠的前列腺圖l-3示間質水腫并有大量淋巴細胞、單核細胞和中性分葉核白細胞等炎癥細胞HEX10,圖1-4示腺腔內大量炎癥細胞和脫落的上皮細胞(HEX10);圖l一5與圖l一6為舍尼通組大鼠(3-3)的前列腺圖1-5示間質輕度水腫,幾個炎癥細胞浸潤，可見二個巨噬細胞(箭頭處)HEX10,圖l-6示腺腔內少量脫落的上皮細胞，腔內有較多分泌物HEX10;圖l一7與圖l一8為植物甾醇150mg/kg組大鼠(4-7)的前列腺圖示間質輕(左圖)至中度(右圖)水腫，有少量炎癥細胞浸潤，腺腔內少量脫落上皮細胞及炎癥細胞，圖1一7見二個巨噬細胞(箭頭處)HEX10;圖l一9與圖I一IO為植物甾醇75mg/kg組大鼠(5-9)的前列腺圖l一9示間質中度水腫，較多炎癥細胞浸潤，毛細血管擴張，充血HEXIO，圖l一IO示腺腔內較多炎癥細胞和一些脫落的上皮細胞，有一些分泌物HEX10;圖l一ll與圖1—12為植物甾醇37.5mg/kg組大鼠(6-13)的前列腺圖l_11示間質高度水腫，大量炎癥細胞浸潤HEXIO，圖1—12示腺腔內較多炎癥細胞和大量脫落的上皮細胞，僅有少量分泌物HEXIO。附圖2植物甾醇對消痔靈致大鼠前列腺炎的光學顯微鏡下組織形態(tài)學觀察(均為HE染色)圖2—1為正常對照組大鼠組織結構基本正常，HE染色X10;圖2—2為模型組大鼠前列腺間質大量炎癥細胞和成纖維細胞，呈灶簇狀及束狀分布，腺腔內無內分泌物，服染色X10;圖2—3為舍尼通組大鼠前列腺前列腺結構基本正常，間質未見炎癥細胞浸潤和成纖維細胞增生，腺腔內有分泌物，HE染色X10;圖2—4為植物甾醇150mg/kg組大鼠(6-5):前列腺組織結構基本正常，間質中未見炎癥細胞浸潤和成纖維細胞增生，腺腔內有分泌物，HE染色X10;圖2—5為植物甾醇75mg/kg組大鼠(5-1):前列腺間質少量淋巴細胞和成纖維細胞，腺腔較大，腺腔內有多量深粉染的分泌物，HE染色X10;圖2—6為植物甾醇37.5mg/kg組大鼠(4-1):前列腺間質有較多淋巴細胞和成纖維細胞，呈灶性分布，有的腺腔內無分泌物，HE染色XIO。具體實施例方式下面將描述本發(fā)明的幾個實施例，但本發(fā)明的內容完全不局限于此。植物甾醇購自江蘇春之谷生物制品有限公司，產品質量達到企業(yè)擬訂的質量標準要求，達到國家食品級標準，屬醫(yī)藥、食品、化工原料。其余輔料均為常用制劑規(guī)格。實施例1植物甾醇普通膠囊劑的制備處方植物甾醇40mg乳糖155mg羧甲淀粉鈉5mg5%聚維酮(K30)的70%乙醇溶液適量取植物甾醇、乳糖，羧甲淀粉鈉過80目篩混均，加入5%聚維酮K30的70先乙醇溶液適量制軟材，過40目篩制粒。50-60。C烘箱鼓風干燥。干顆粒過40目篩整粒。按處方量灌裝l號膠囊，每粒含植物甾醇40mg。實施例2植物甾醇普通膠囊劑的制備處方植物甾醇40mg微晶纖維素155mg交聯(lián)聚維酮5mg5%聚維酮(K30)的70%乙醇溶液適量取植物甾醇、微晶纖維素，交聯(lián)聚維酮過80目篩混均，加入5%聚維酮K30的70%乙醇溶液適量制軟材，過40目篩制粒。50-6CTC烘箱鼓風干燥。干顆粒過40目篩整粒。按處方量灌裝l號膠囊，每粒含植物甾醇40mg。實施例3植物甾醇普通膠囊劑的制備處方植物甾醇40mg聚維酮(K30)160mg乙醇適量硬脂酸鎂lmg取植物甾醇、聚維酮加適量乙醇加熱溶解，置旋轉蒸發(fā)儀除去乙醇，冷卻，粉碎，過40目篩，加入處方量的硬脂酸鎂，混合均勻。按處方量灌裝l號膠囊，每粒含植物甾醇40mg。實施例4植物甾醇普通片劑的制備處方植物甾醇40mg乳糖155mg羧甲淀粉鈉5mg5%聚維酮(K30)的70%乙醇溶液適量硬脂酸鎂lmg取植物甾醇、乳糖，羧甲淀粉鈉過80目篩混均，加入5%聚維酮K30的7(m乙醇溶液適量制軟材，過20目篩制粒。50-6CTC烘箱鼓風干燥。干顆粒過20目篩整粒，加入處方量的硬脂酸鎂，混合均勻，壓片，每片含植物甾醇40mg。實施例5植物甾醇顆粒劑的制備處方植物甾醇40mg乳糖760mg羧甲基纖維素鈉lOOmg甜菊苷lOOmg5%聚維酮(K30)的70%乙醇溶液適量取植物甾醇、乳糖、羧甲基纖維素鈉，甜菊苷過80目篩混均，加入5%聚維酮K30的70°/。乙醇溶液適量制軟材，過18目篩制粒。50-6(TC烘箱鼓風千燥。干顆粒過18目篩整粒，按處方量用鋁塑復合膜袋包裝，每袋含植物甾醇40mg。實施例6植物甾醇緩釋膠囊劑的制備處方植物甾醇120mg乳糖30mg羥丙甲纖維素K4M100mg3%羥丙甲纖維素(E5)水溶液適量硬脂酸鎂2mg取植物甾醇、乳糖，羥丙甲纖維素K4M過80目篩混均，加入3%羥丙甲纖維素(E5)水溶液適量制軟材，過20目篩制粒。50-6(TC烘箱鼓風干燥。干顆粒過20目篩整粒，加入處方量的硬脂酸鎂，混合均勻。按處方量灌裝l號膠囊，每粒含植物甾醇120mg。實施例7植物甾醇緩釋片劑的制備處方植物甾醇120mg乳糖30mg羥丙甲纖維素K4M100mg3%羥丙甲纖維素(E5)水溶液適量硬脂酸鎂2mg取植物甾醇、乳糖，羥丙甲纖維素K4M過80目篩混均，加入3%羥丙甲纖維素(E5)水溶液適量制軟材，過20目篩制粒。50-6(TC烘箱鼓風干燥。干顆粒過20目篩整粒，加入處方量的硬脂酸鎂，混合均勻，壓片，每片含植物甾醇120mg。上述實例還可選用其它輔料，稀釋劑如乳糖，微晶纖維素，淀粉，糊精，甘露醇，蔗糖，葡萄糖，磷酸鈣，聚乙二醇6000，聚維酮；崩解劑如低取代羥丙纖維素，羧甲淀粉鈉，交聯(lián)聚維酮，交聯(lián)羧甲基纖維素鈉，甜味劑如甜菊苷，阿司帕坦，甜蜜素，乙?；前彼徕?；粘合劑如預膠化淀粉，羥丙甲纖維素，聚維酮，明膠，羧甲基纖維素鈉；潤滑劑如硬脂酸鎂，滑石粉，微粉硅膠，聚乙二醇6000;潤濕劑如水，乙醇，含水乙醇表面活性劑如十二烷基硫酸鈉，土溫80;骨架材料如羥丙甲纖維素，乙基纖維素等。實施例8植物甾醇注射用濃溶液的制備處方植物甾醇10mg聚氧乙烯蓖麻油527mg無水乙醇396mg取植物甾醇溶于無水乙醇，加入聚氧乙烯蓖麻油，混勻，經0,22um微孔濾膜過濾，分裝封口，于10(TC流通蒸汽滅菌30分鐘即得，每支含植物甾醇10mg。注射用濃溶液的增溶劑還可選用如下輔料吐溫80，泊洛薩姆188，聚氧乙烯氫化蓖麻油，聚氧乙烯醚蓖麻油等。本發(fā)明的藥物組合物，最佳給藥方式是口服，劑量為每日3次，每次40mg。權利要求1、植物甾醇在制備治療慢性非細菌性前列腺炎的藥物中的應用。2、根據(jù)權利要求1所述植物甾醇在制備治療慢性非細菌性前列腺炎的藥物中的應用，其特征在于該藥物為植物甾醇與藥學上可接受載體組成的藥物組合物。3、根據(jù)權利要求2所述的藥物組合物，其特征在于其中植物甾醇按百分重量比，含0—谷甾醇3090%、豆甾醇540%、菜油甾醇和/或菜籽甾醇560%。4、根據(jù)權利要求2所述的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物為常規(guī)片劑、膠囊劑、顆粒劑、緩釋片劑或膠囊劑。5、根據(jù)權利要求2所述的藥物組合物，其特征在于其中所述藥學上可接受的載體為稀釋劑選自乳糖，微晶纖維素，淀粉，糊精，甘露醇，蔗糖，葡萄糖，磷酸鈣，聚乙二醇6000或聚維酮；崩解劑自選自低取代羥丙纖維素，羧甲淀粉鈉，交聯(lián)聚維酮或交聯(lián)羧甲基纖維素鈉；甜味劑可選自甜菊苷，阿司帕坦，甜蜜素，乙?；前彼徕?；以及粘合劑、潤滑劑或潤濕劑。6、根據(jù)權利要求4所述的藥物組合物，其特征在于其中常規(guī)片劑或膠囊劑的組成按重量比為植物甾醇l:稀釋劑25:崩解劑0~0.2。7、根據(jù)權利要求4所述的藥物組合物，其特征在于其中顆粒劑的組成按重量比為植物甾醇l:稀釋劑1030:崩解劑04:甜味劑1~4。8、根據(jù)權利要求4所述的藥物組合物，其特征在于其中緩釋片劑或膠囊劑的組成按重量比為植物甾醇l:稀釋劑0.10.5:羥丙甲纖維素K4M0.71.3。9、根據(jù)權利要求6所述的藥物組合物，其特征在于其中常規(guī)片劑或膠囊劑的組成按重量比為植物甾醇l:稀釋劑3.54.5:崩解劑0~0.15。10、根據(jù)權利要求7所述的藥物組合物，其特征在于其中顆粒劑的組成按重量比，植物甾醇l:稀釋劑1525:崩解劑03:甜味劑2~3。11、根據(jù)權利要求8所述的藥物組合物，其特征在于其中緩釋片劑或膠囊劑的組成按重量比為植物甾醇l:稀釋劑0.20.3:羥丙甲纖維素K4M0.81.0。全文摘要本發(fā)明公開了植物甾醇在制備治療慢性非細菌性前列腺炎藥物中的應用及其藥物組合物，植物甾醇主要由β-谷甾醇、豆甾醇、菜油甾醇和/或菜籽甾醇組成。本發(fā)明的藥物組合物為普通片劑、膠囊劑以及顆粒劑和注射劑或緩釋片劑、膠囊劑。具有良好的抗慢性非細菌性前列腺炎作用，且安全性高，臨床可用于治療慢性非細菌性前列腺炎。文檔編號A61K31/56GK101167729SQ200610117588公開日2008年4月30日申請日期2006年10月26日優(yōu)先權日2006年10月26日發(fā)明者吳偉泳,惠永正,翎楊,鄧嘉元申請人:上海藥谷藥業(yè)有限公司