專利名稱：一種中藥制劑及其制法和質(zhì)控方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥制劑及其制法和質(zhì)控方法，屬于中藥的技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：
康艾扶正膠囊是由靈芝、黃芪、刺梨、熟地黃、女貞子、淫羊藿、姜制半夏七味藥組成。該方益氣解毒，散結(jié)消腫，和胃安神。用于腫瘤放化療引起的白細胞下降，血小板減少，免疫功能降低所致的體虛乏力、食欲不振、嘔吐、失眠等癥的輔助治療。但是在長期的臨床實踐中發(fā)現(xiàn)，該產(chǎn)品的黃芪等藥物水提得到的浸膏，含有多糖、粘液質(zhì)等，極易吸潮變質(zhì)，出現(xiàn)嚴重粘結(jié)等情況。并且劑型品種單一，限制了藥物組合的應(yīng)用。鑒于這些情況，需要尋找一種治療效果理想，工藝合理可行，質(zhì)量穩(wěn)定可控的有效治療藥物制劑。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種中藥制劑及其制法和質(zhì)控方法。本發(fā)明提供的制備方法工藝合理可行，能夠指導(dǎo)大生產(chǎn)，并且本發(fā)明提供的分散片制劑、微丸，崩解性好，生物利用度高，質(zhì)量穩(wěn)定，服用方便，特別適合于老年人及吞服藥片或膠囊有困難的患者服用；本發(fā)明提供的滴丸制劑，解決了藥物遇濕熱不穩(wěn)定的問題，還可以掩蓋藥物的不良口味、氣味，并且起到增加穩(wěn)定性、改善生物利用度的作用。
本發(fā)明是這樣構(gòu)成的按照重量計算，它主要是由靈芝30g、黃芪30g、刺梨25g、熟地黃20g、女貞子20g、淫羊藿20g、姜制半夏10g制作而成的制劑，包括注射劑，包括注射液、粉針、凍干粉針、凝膠劑、片劑、分散片、膠囊劑、軟膠囊劑、微囊劑、顆粒劑、丸劑、微丸、散劑、滴丸劑、緩釋制劑、控釋制劑、凝膠劑、口服液體制劑、煎膏劑、浸膏劑和膜劑等藥劑學(xué)上所有可以接受的劑型。準(zhǔn)確的說所述的制劑是滴丸、微丸、分散片。
所述制劑中的滴丸劑這樣制備取靈芝，粉碎成粗粉，與女貞子加乙醇浸泡12小時，加乙醇回流提取二次，每次2小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮至相對密度80℃時為1.25～1.34的稠膏，干燥，粉碎；藥渣與其余黃芪等五味藥材，加水煎煮二次，每次2小時，分次濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對密度80℃時為1.25～1.34的稠膏，干燥，粉碎，加入上述膏粉，按浸膏粉∶基質(zhì)＝1∶0.7～2.2加入PEG4000，混合均勻，加熱熔融，攪拌均勻，轉(zhuǎn)移至滴丸機，滴距為1～9cm，滴速20～50d/min、料溫60～90℃，將藥液滴入冷卻劑中，冷卻劑溫度為10～40℃，收集滴丸并吸除表面的冷卻劑，即得。所述制劑中的滴丸劑這樣制備取靈芝，粉碎成粗粉，與女貞子加乙醇浸泡12小時，加乙醇回流提取二次，每次2小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮至相對密度80℃時為1.25～1.34的稠膏，干燥，粉碎；藥渣與其余黃芪等五味藥材，加水煎煮二次，每次2小時，分次濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對密度80℃時為1.25～1.34的稠膏，干燥，粉碎，加入上述膏粉，按浸膏粉∶基質(zhì)＝1∶1.7加入PEG4000，混合均勻，加熱熔融，攪拌均勻，轉(zhuǎn)移至滴丸機，滴距為3～7cm，滴速30～40d/min、料溫70～80℃，將藥液滴入冷卻劑甲基硅油中，冷卻劑溫度為20～30℃，收集滴丸并吸除表面的甲基硅油，即得。所述制劑中的微丸劑這樣制備取靈芝，粉碎成粗粉，與女貞子加乙醇浸泡12小時，加乙醇回流提取二次，每次2小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮至相對密度80℃時為1.25～1.34的稠膏，干燥，粉碎；藥渣與其余黃芪等五味藥材，加水煎煮二次，每次2小時，分次濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對密度80℃時為1.25～1.34的稠膏，干燥，粉碎，加入上述膏粉，加入無水乙醇作潤濕劑制軟材，過24目篩制得濕顆粒，隨即投入轉(zhuǎn)速為40r/min的糖衣機中滾圓，并置于40℃烘箱中干燥后取出，再過篩選擇24～40目的微丸進行包衣包衣液為濃度4％的丙烯酸樹脂溶液，進風(fēng)溫度為50℃，噴霧壓力為1.5kg/cm2，輸液速度為18ml/min，即得。所述制劑中的分散片劑這樣制備取靈芝，粉碎成粗粉，與女貞子加乙醇浸泡12小時，加乙醇回流提取二次，每次2小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮至相對密度80℃時為1.25～1.34的稠膏，干燥，粉碎；藥渣與其余黃芪等五味藥材，加水煎煮二次，每次2小時，分次濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對密度80℃時為1.25～1.34的稠膏，干燥，粉碎，加入膏粉，再加入5％乳糖、7％交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮，混勻，加入乙醇，制軟材，制粒，干燥，40目篩整粒，混勻后壓片，另取薄荷腦，加乙醇適量使溶解，噴入，再噴入上述揮發(fā)油，混勻，密閉2小時，即得。
鑒別方法包括以下全部或部分內(nèi)容 a.制劑中黃芪甲苷、黃芪藥材中一種或兩種的薄層色譜法鑒別 取本品適量，加50～100％甲醇或50～100％乙醇提取，濾過，濾液，加于100～200目的中性氧化鋁柱上，用30～50％甲醇或20～40％乙醇洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣用氫氧化鈉溶液溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取，正丁醇液蒸干，殘渣加溶劑使溶解，作為供試品溶液；另取黃芪藥材，同法制成對照藥材溶液；取黃芪甲苷對照品，制成對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述對照藥材溶液、對照品溶液中的一種或兩種及供試品溶液適量，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水＝11～15∶5～7∶1.5～2.5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰，分別置日光及紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點或熒光斑點； b.制劑中女貞子、齊墩果酸中一種或兩種的薄層色譜法鑒別 取本品適量，加三氯甲烷或乙酸乙酯提取，濾過，濾液濃縮或蒸干再加溶劑溶解，作為供試品溶液；另取女貞子對照藥材，加甲醇或乙醇提取，濾過，濾液濃縮或蒸干再加溶劑溶解，作為對照藥材溶液；取齊墩果酸對照品，制成為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述對照藥材溶液、對照品溶液中的一種或兩種及供試品溶液適量，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-丙酮-乙酸乙酯＝4～6∶1.5～2.5∶0.8～1.2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色斑點； c.制劑中淫羊霍藥材、淫羊霍苷中一種或兩種的薄層色譜法鑒別 取本品適量，加水溶解或提取，水液用乙酸乙酯或三氯甲烷或正丁醇振搖提取，提取液蒸干，殘渣加甲醇或乙醇使溶解，作為供試品溶液；取淫羊霍對照藥材，濾液濃縮或蒸干再加溶劑溶解，作為對照藥材溶液；另取淫羊霍苷對照品，制成對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述對照藥材溶液、對照品溶液中的一種或兩種及供試品溶液適量，分別點于同一硅膠H薄層板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水＝9～11∶0.8～1.2∶0.8～1.2∶0.8～1.2為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365nm下檢視；供試品色譜中，在與對照色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色斑點。
準(zhǔn)確的說鑒別方法包括以下全部或部分內(nèi)容 a.制劑中黃芪藥材、黃芪甲苷中一種或兩種的薄層色譜法鑒別 取本品粉末適量，加甲醇超聲提取，濾過，濾液，加于100～200目的中性氧化鋁柱上，用40％甲醇洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣用氫氧化鈉溶液溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇使溶解，作為供試品溶液；另取黃芪藥材，同法制成對照藥材溶液；取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述對照藥材溶液、對照品溶液中的一種或兩種及供試品溶液適量，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水＝13∶6∶2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰，分別置日光及紫外光燈365nm下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，日光下顯相同的棕褐色斑點，紫外光燈365nm下顯相同的橙黃色熒光斑點；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點或熒光斑點； b.制劑中女貞子藥材、齊墩果酸中一種或兩種的薄層色譜法鑒別 取本品粉末適量，加三氯甲烷或乙酸乙酯，加熱回流，濾過，濾液蒸干，殘渣加三氯甲烷或乙酸乙酯使溶解，作為供試品溶液；另取女貞子對照藥材，加甲醇加熱回流，濾過，濾液蒸干，殘渣加無水乙醇-三氯甲烷＝3∶2混合溶液使溶解，作為對照藥材溶液；取齊墩果酸對照品，加三氯甲烷或乙酸乙酯或乙醇制成為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述對照藥材溶液、對照品溶液中的一種或兩種及供試品溶液適量，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-丙酮-乙酸乙酯＝5∶2∶1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色斑點； c.制劑中淫羊霍藥材、淫羊霍苷中一種或兩種的薄層色譜法鑒別 取本品粉末適量，加水溶解或提取，水溶液用乙醚振搖提取，棄去乙醚液，水液再用乙酸乙酯振搖提取，乙酸乙酯液蒸干，殘渣加甲醇或乙醇使溶解，作為供試品溶液；取淫羊霍對照藥材，加甲醇或乙醇提取，提取液濃縮，作為對照藥材溶液；另取淫羊霍苷對照品，加甲醇或乙醇制成對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述對照藥材溶液、對照品溶液中的一種或兩種及供試品溶液適量，分別點于同一硅膠H薄層板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水＝10∶1∶1∶1為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365nm下檢視；供試品色譜中，在與對照色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色斑點。
制劑中黃芪甲苷的高效液相色譜法含量測定方法如下 取本品，研細，取粉末適量，精密稱定，加甲醇充分浸漬后超聲提取，濾過，甲醇溶液加于100～200目中性氧化鋁柱上，用30～50％甲醇或20～40％乙醇洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣用堿性溶液溶解，堿性溶液用水飽和的正丁醇振搖提取，正丁醇液蒸干，殘渣加適量甲醇使溶解并定容，濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液；精密稱取黃芪甲苷對照品適量，加甲醇制成對照品溶液；采用高效液相色譜法，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水＝30～38∶70～62為流動相；蒸發(fā)光散射檢測器檢測；理論板數(shù)按黃芪甲苷峰計算應(yīng)不低于3000；精密吸取對照品溶液、供試品溶液適量，注入液相色譜儀，測定，以外標(biāo)兩點法對數(shù)方程計算，即得；本品每日用劑量含黃芪甲苷不得少于0.15mg。準(zhǔn)確的說，制劑中黃芪甲苷的高效液相色譜法含量測定方法如下 取本品，研細，取粉末適量，精密稱定，加甲醇充分浸漬后超聲提取，濾過，甲醇溶液加于100～200目中性氧化鋁柱上，用40％甲醇洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣用氫氧化鈉溶液溶解，氫氧化鈉溶液用水飽和的正丁醇振搖提取，正丁醇液蒸干，殘渣加適量甲醇使溶解并定容，濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液；精密稱取黃芪甲苷對照品適量，加甲醇制成對照品溶液；采用高效液相色譜法，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水＝34∶66為流動相；蒸發(fā)光散射檢測器檢測；理論板數(shù)按黃芪甲苷峰計算應(yīng)不低于5000；精密吸取對照品溶液10μl、20μl，供試品溶液20μl，注入液相色譜儀，測定，以外標(biāo)兩點法對數(shù)方程計算，即得；本品每日用劑量含黃芪甲苷不得少于0.30mg。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)，采用合理可行的工藝，能夠用于指導(dǎo)生產(chǎn)。本申請人在研制過程中發(fā)現(xiàn)，滴丸和分散片崩解時間、微丸中的輔料是影響產(chǎn)品質(zhì)量的關(guān)鍵。通過大量實驗，本發(fā)明提供的工藝制得的微丸、分散片、崩解性好，生物利用度高，特別適合于老年人及吞服藥片或膠囊有困難的患者服用；本發(fā)明提供的滴丸，解決了藥物遇濕熱不穩(wěn)定的問題，還可以掩蓋藥物的不良口味、氣味，并且起到增加穩(wěn)定性、改善生物利用度的作用。而且本發(fā)明提供的制劑不良反應(yīng)小、可供病人長期使用，達到了發(fā)明的目的。
申請人:進行了一系列實驗，以選擇本發(fā)明提供的藥物制劑的制備工藝、使用的輔料種類及用量、比例等；保證其科學(xué)、合理、可行；得到的制劑具有有效的治療效果。
實驗例1提取等工藝的研究 現(xiàn)有技術(shù)中，加水量和加醇量沒有明確，因此采用單因素試驗方法，以黃芪甲苷含量和出膏率為考察指標(biāo)進行優(yōu)選，試驗方法及結(jié)果如下1.1加醇量的確定 康艾扶正膠囊中靈芝、女貞子藥材采用乙醇提取，提取時間和次數(shù)已確定，加醇量沒有明確，因此采用單因素試驗方法，以出膏率為考察指標(biāo)進行優(yōu)選，試驗方法及結(jié)果如下 稱取靈芝30g，女貞子20g，混在一塊，共6份，分別加乙醇浸泡12小時，加乙醇回流提取2次，每次2小時，過濾，合并濾液，減壓濃縮、干燥，以出膏率為考察指標(biāo)，實驗設(shè)計及結(jié)果見下表。
加醇量的考察 由上表可見加醇量為10、10倍和10、8倍量時浸膏收得率較高，而兩者之間沒有明顯的區(qū)別，在保證有效成分提取充分的前提下，為了節(jié)約成本和縮短工時，確定提取加醇量第一次10倍量，第二次8倍量。
1.2水溶性成分提取時用水量的確定 為使藥材中的有效成分得到充分提取，靈芝藥渣和女貞子藥渣再與黃芪、刺梨、熟地黃、淫羊藿、半夏藥材進行提取。影響采用煎煮法提取中藥中有效成分提取的主要因素有提取次數(shù)、提取時間、加水量?，F(xiàn)有技術(shù)中，加水量沒有明確，因此采用單因素試驗方法，以黃芪甲苷為考察指標(biāo)進行優(yōu)選，試驗方法及結(jié)果如下 稱取黃芪30g、刺梨25g，熟地黃20g、淫羊藿20g、半夏10g，混在一塊，共6份，將上述“加醇量的考察”試驗中醇提后所剩的藥渣混在一塊，平均分成6份，和黃芪、刺梨、熟地黃、淫羊藿、半夏一塊煎煮2次，每次2小時，過濾，合并濾液，減壓濃縮，干燥，以黃芪甲苷為考察指標(biāo)，實驗設(shè)計及結(jié)果見下表。
加水量的考察 由上表可見加水量為10、10倍和10、8倍量時浸膏收得率和黃芪甲苷含量較高，而兩者之間沒有明顯的區(qū)別，在保證有效成分提取充分的前提下，考慮都加10倍量耗費的資源和能源較多，因此確定提取加水量第一次10倍量，第二次8倍量。
1.3提取工藝的驗證 為了驗證所確定的制備工藝的可行性，我們對此工藝條件進行了三次驗證實驗。
試驗方法按處方比例稱取黃芪60g、刺梨50g，熟地黃40g、淫羊藿40g、半夏20g，靈芝60g，女貞子40g，共3分；靈芝粉碎成粗粉，與女貞子加乙醇浸泡12小時，加乙醇回流提取2次，每次2小時，第一次加10倍量乙醇，第二次加8倍量乙醇，濾過，濾液減壓濃縮，干燥，稱定干膏(I)膏重；藥渣與其余黃芪等五味藥材，加水煎煮2次，每次2小時，第一次加10倍量水，第二次加8倍量水，濾過，合并濾液，減壓濃縮，干燥，稱定干膏(II)膏重及黃芪甲苷含量，結(jié)果見下表。 提取工藝驗證實驗 由驗證實驗的結(jié)果可見該條件提取結(jié)果浸膏收得率及黃芪甲苷含量比較穩(wěn)定，說明該提取工藝條件是合理、穩(wěn)定可行的。
1.4分離、濃縮工藝研究 分離選擇均采用200目濾布濾過。
濃縮工藝條件結(jié)合工廠現(xiàn)有的生產(chǎn)設(shè)備，濾液采用三效濃縮罐濃縮，濃縮至相對密度約為1.30(60℃)的稠膏，備用。濃縮條件為溫度為一效84℃、二效80℃、三效69℃，真空度為一效0.025Mpa、二效0.046Mpa、三效0.068Mpa。
實驗例2成型工藝研究 2.1分散片劑成型工藝研究 分散片遇水可迅速崩解形成均勻的粘性懸液的水分散片，解決了原劑型崩解性差，溶出緩慢的缺點，本申請人制得的分散片在19℃～21℃水中3min內(nèi)完全崩解，混懸性好、生物利用度高、分散均勻度。崩解時限檢查采用轉(zhuǎn)籃法，升降式崩解儀，取6片，觀察通過篩網(wǎng)的情況，通過率高則崩解性好，更宜人體吸收；片劑硬度的測定用片劑四用儀測定片劑的硬度。
結(jié)果表明，最佳工藝條件為加入5％乳糖、7％交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮，混勻，加入乙醇，制軟材。
2.2微丸 以丙烯酸樹脂為包衣材料，對其包衣液濃度、進風(fēng)溫度、噴霧壓力及輸液速度4個主要處方工藝參數(shù)，利用U8(84)均勻設(shè)計表安排試驗，采用擬水平方法，將各因素所取4個水平重復(fù)使用，以P(通過16/36篩的百分數(shù))、F(在30min溶解的百分數(shù))為指標(biāo)。
結(jié)果表明，包衣液為濃度4％的丙烯酸樹脂溶液，進風(fēng)溫度為50℃，噴霧壓力為1.5kg/cm2，輸液速度為18ml/min為最佳工藝條件。
2.3滴丸成型工藝研究 2.3.1制劑處方設(shè)計和篩選 根據(jù)文獻報道，選擇常用的滴丸基質(zhì)聚乙二醇4000和聚乙二醇6000進行比較試驗。將不同型號的聚乙二醇置小燒杯內(nèi)，加熱至80-90℃，待全部熔融后，加入浸膏粉，考察基質(zhì)與浸膏粉的的融合情況，選擇融合情況較好的處方進行滴制(滴制條件料溫75℃，冷卻劑為二甲基硅油，滴距3～7cm，滴速30～40滴/分)，結(jié)果見下表。 基質(zhì)與主藥的融合情況比較 上述結(jié)果表明，處方3熔融藥液的流動性好，滴丸成型性好，光滑、圓潤，丸重差異小，溶散較快，故選3號處方。
2.3.2丸重規(guī)格確定 根據(jù)上述處方篩選結(jié)果，并由于本品設(shè)計為含浸膏22.5mg/丸，故確定丸重規(guī)格為60mg/丸。
2.3.3冷卻劑選擇 取浸膏粉10g，聚乙二醇4000 17g，混合均勻，加熱至80-90℃，待全部熔融后，取適量，分別滴入二甲硅油和液體石蠟冷卻劑中，觀察滴丸成型情況，結(jié)果見下表。冷卻劑選擇 上表表明，以二甲硅油為冷卻劑滴丸圓整度好，成型好。
2.3.4冷卻劑溫度選擇 取浸膏粉10g，聚乙二醇4000 17g，混合均勻，加熱至80-90℃，待全部熔融后，取適量，分別滴入不同溫度的二甲硅油冷卻劑中，觀察滴丸成型情況，結(jié)果見下表。冷卻劑溫度選擇 注梯度冷卻方法為上部30～40℃，中部為15～30℃，下部為5～15℃。
上表表明，在上述三種冷卻溫度下，本品的成型性均良好，為簡便操作，故選擇冷卻劑溫度為20～30℃。
2.3.5滴頭口徑選擇 取浸膏粉10g，聚乙二醇4000 17g，按制法制得熔融藥液，分別以不同口徑的滴頭滴制，考察所得滴丸的平均丸重與目標(biāo)丸重(60mg/丸)的接近程度，結(jié)果見下表。
滴頭口徑選擇 上述結(jié)果表明，滴頭口徑為4.3/5.1(內(nèi)/外mm/mm)的滴頭所滴制的滴丸丸重與目標(biāo)丸重最接近，故選擇滴頭口徑為4.3/5.1(內(nèi)/外mm/mm)。
2.3.6滴距選擇 取浸膏粉10g，聚乙二醇4000 17g，按制法制得熔融藥液，分別以不同的滴距滴制，考察所得滴丸的丸重差異和外觀形狀，結(jié)果見下表。
滴距選擇 上表表明，當(dāng)?shù)尉嘣?～7cm時，滴丸外觀圓整，表面光滑，重量差異小，故選擇滴距為3～7cm。
2.3.7熔融藥液溫度(料溫)、滴制速度選擇 取浸膏粉10g，聚乙二醇4000 17g，按制法制得熔融藥液，按下表的料溫和滴制速度(其余條件按制法)進行滴制，結(jié)果見下表。 熔融藥液溫度(料溫)、滴制速度選擇 從上表可知，當(dāng)選用滴速30～40d/min、料溫70～80℃時，所得丸重與目標(biāo)丸重最接近，同時重量差異小、滴丸外觀圓整、美觀。故選擇滴速30～40d/min、料溫70～80℃。
實驗例3藥理實驗 試驗動物昆明種小白鼠，體重22～24g，♂♀各半，試驗前飼養(yǎng)觀察一周。
3.1對小白鼠常壓耐缺氧存活時間的影響 小鼠60只隨機分4組?？诜辔刚麴s水或不同濃度藥物0.4ml/20g體重兩天，實驗當(dāng)日再給藥一次后30分鐘，皮下注射異丙腎上腺素20mg/kg，15分鐘后將動物放于125ml廣口磨口瓶內(nèi)(瓶內(nèi)置25g鈉石灰，并以濾紙覆蓋)，每瓶一只，立即以凡士林封閉，計時，記錄自小白鼠投入后至死亡的時間，結(jié)果見下表。
3.2對小白鼠游泳疲勞時間的影響 小鼠60只隨機分4組。實驗前同法預(yù)先給藥3天，實驗當(dāng)日再給藥一次后30分鐘，于小白鼠尾根部負2g的重物，將小白鼠放入80×60×40cm水池內(nèi)，水深25cm，水溫20±1℃，每次各組放一只，觀察小白鼠頭部沉入水中10秒鐘不能浮出水面者的游泳時間，結(jié)果見下表。
對小白鼠常壓耐缺氧存活時間的影響(x±s) 對小白鼠游泳時間的影響(x±s) 結(jié)果表明，本發(fā)明產(chǎn)品療效好，不低于膠囊劑。
實驗例4滴丸劑中黃芪甲苷、黃芪藥材的薄層色譜鑒別方法研究 為了突出黃芪的特征，選擇了黃芪甲苷作為其特征成分斑點，但是由于制劑中存在較多與黃芪甲苷結(jié)構(gòu)相近或極性相似的成分，例如靈芝、熟地黃中的多糖類，淫羊霍中的淫羊霍苷等成分。只有排除這些成分的干擾，才能獲得理想的色譜效果。薄層色譜法效果優(yōu)劣的關(guān)鍵因素為展開條件，特別是展開劑的組成。因此，試驗以硅膠G薄層板為固定相，篩選了多種展開條件，部分展開條件與結(jié)果如下 滴丸劑中黃芪甲苷、黃芪藥材的薄層色譜鑒別方法研究 經(jīng)過篩選，確定了最佳條件以硅膠G薄層板為固定相，以氯仿-甲醇-水＝13∶6∶2為展開劑，在此條件下，黃芪甲苷特征斑點的Rf值適中，和其它斑點分離最清晰，陰性無干擾。
實驗例5滴丸劑中女貞子藥材、齊墩果酸的薄層色譜鑒別方法研究 為了突出女貞子的特征，選擇了齊墩果酸作為其特征成分斑點，但是由于制劑中存在較多與齊墩果酸結(jié)構(gòu)相近或極性相似的成分，例如刺梨、半夏中的有機酸類等成分。只有排除這些成分的干擾，才能獲得理想的色譜效果。薄層色譜法效果優(yōu)劣的關(guān)鍵因素為展開條件，特別是展開劑的組成。因此，試驗以硅膠G薄層板為固定相，篩選了多種展開條件，部分展開條件與結(jié)果如下 滴丸劑中女貞子藥材、齊墩果酸的薄層色譜鑒別方法研究 經(jīng)過篩選，確定了最佳條件以硅膠G薄層板為固定相，以氯仿-甲醇-水＝13∶6∶2為展開劑，在此條件下，齊墩果酸特征斑點的Rf值適中，和其它斑點分離最清晰，陰性無干擾。
實驗例6滴丸劑中淫羊霍藥材、淫羊霍苷的薄層色譜鑒別方法研究 為了突出淫羊霍的特征，選擇了淫羊霍苷作為特征斑點，但是由于制劑中存在較多與淫羊霍苷結(jié)構(gòu)相近或極性相似的成分，例如黃芪中的黃芪甲苷等。只有排除這些成分的干擾，才能獲得理想的色譜效果。薄層色譜法效果優(yōu)劣的關(guān)鍵因素為展開條件，特別是展開劑的組成。因此，試驗篩選了多種展開條件，部分展開條件與結(jié)果如下 滴丸劑中淫羊霍藥材、淫羊霍苷的薄層色譜鑒別方法研究 經(jīng)過篩選，確定了最佳條件以硅膠H薄層板為固定相，乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水＝10∶1∶1∶1為展開劑，在此條件下，淫羊霍特征斑點的Rf值適中，和其它斑點分離最清晰，陰性無干擾。
實驗例7滴丸劑中黃芪甲苷的高效液相色譜法含量測定 1儀器與試藥 1.1主要儀器 高效液相色譜儀426 Alltech 蒸發(fā)光散射檢測器 2000ESAlltech 電子分析天平 BP211DSARTORIUS 超聲波清洗機 KQ250B昆山市超聲儀器有限公司 1.2試藥 黃芪甲苷 含量測定用 中國藥品生物制品檢定所 甲醇 分析純 北京化工廠 乙腈 色譜級 迪馬公司 2色譜條件 色譜柱Diamonsil ODS 250mm×4.6mm 5μm 檢測器蒸發(fā)光散射檢測器 漂移管溫度105℃ 載氣量2.7L/min 流動相乙腈-水(34∶66) 流速1.0ml/min 柱溫30℃ 試驗選擇了黃芪甲苷作為其指標(biāo)成分，但是由于制劑中存在較多與黃芪甲苷結(jié)構(gòu)相近或極性相似的成分，例如靈芝、熟地黃中的多糖類，淫羊霍中的淫羊霍苷等成分。只有排除這些成分的干擾，才能獲得理想的色譜效果。高效液相色譜法效果優(yōu)劣的關(guān)鍵因素為洗脫條件，特別是流動相的組成。因此，試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為固定相，篩選了多種流動相，部分流動相與結(jié)果如下色譜條件的考察 經(jīng)過篩選，確定了以十八烷基硅烷鍵合硅膠為固定相，乙腈-水＝34∶66為流動相，在此條件下，黃芪甲苷保留時間適中，峰行尖銳，對稱，與相鄰峰分離最清晰，陰性無干擾。理論板數(shù)按黃芪甲苷峰計算應(yīng)不低于5000。
3測定法 取本品，研細，取約5g，精密稱定，加甲醇50ml，浸漬過夜，超聲處理30分鐘，濾過，藥渣再加甲醇超聲處理2次(30ml、20ml)，每次30分鐘，濾過，殘渣用甲醇20ml洗滌，濾過，合并濾液與洗滌液，揮至20ml，加于中性氧化鋁柱(100～200目，24g，內(nèi)徑1.5cm)上，用40％甲醇120ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣用0.5％氫氧化鈉溶液30ml溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取4次(30ml、20ml、20ml、20ml)，合并正丁醇液，蒸干，殘渣加適量甲醇使溶解，轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，微孔濾膜(0.45μm)濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。取黃芪甲苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含0.15mg的對照品溶液。分別精密吸取對照品溶液10μl、20μl、供試品溶液20μl，注入液相色譜儀，外標(biāo)兩點法對數(shù)方程計算，即得。
4陰性干擾排除試驗 為考察其它藥材和輔料是否干擾黃芪甲苷的測定，除黃芩外，按處方比例稱取其它藥材和輔料同法制成陰性對照溶液并測定。結(jié)果表明，陰性對黃芪甲苷的含量測定無干擾。
5線性關(guān)系的考察精密量取黃芪甲苷對照品溶液(1.621mg/ml)0.25ml、0.50m、1.00ml、1.50ml、2.00ml，分置5ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，配制成0.08105mg/ml、0.1621mg/ml、0.3242mg/ml、0.4863mg/ml、0.6484mg/ml的對照品溶液，分別從中精密吸取10μl，注入液相色譜儀，照高效液相色譜法測定。以峰面積的對數(shù)為橫坐標(biāo)，黃芪甲苷的進樣量對數(shù)為縱坐標(biāo)做圖，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果如下 黃芪甲苷線性關(guān)系 回歸方程 Y＝0.6044X-3.302 相關(guān)系數(shù) γ＝0.9999 結(jié)果表明，黃芪甲苷在0.6272μg～1.8816μg之間線性關(guān)系良好。
6精密度試驗 精密吸取同一份黃芪甲苷對照品溶液20μl，注入液相色譜儀，重復(fù)測定5次，考察對照品溶液精密度，測定結(jié)果如下 精密度試驗 結(jié)果表明，對照品溶液精密度良好。
7穩(wěn)定性試驗 7.1對照品穩(wěn)定性試驗 精密吸取同一份黃芪甲苷對照品溶液20μl，注入液相色譜儀，分別在0、2、6、8、24小時進樣測定，測定結(jié)果如下 對照品穩(wěn)定性試驗結(jié)果 結(jié)果表明，對照品溶液在24小時內(nèi)穩(wěn)定性良好。
7.2供試品溶液穩(wěn)定性試驗精密吸取同一份供試品溶液20μl，注入液相色譜儀，分別在0、2、4、8、24小時進樣測定，測定結(jié)果如下 供試品溶液穩(wěn)定性試驗結(jié)果 結(jié)果表明，供試品溶液在24小時內(nèi)穩(wěn)定性良好。
8重復(fù)性試驗 取同一批號的本品，研細，取約5g(共5份)，精密稱定，按正文供試品溶液的制備和測定法項下操作。結(jié)果如下重復(fù)性試驗 結(jié)果表明，重復(fù)性良好。
9加樣回收率試驗 采用加樣回收法，取同一批號的本品，研細，取約2.5g(共6份)，精密稱定，分置具塞錐形瓶中；精密量取黃芪甲苷對照品溶液(0.3154mg/ml)1ml，分置上述具塞錐形瓶中，按色譜條件和測定法項下操作，測定結(jié)果如下 黃芪甲苷加樣回收率試驗 平均回收率＝97.39％，RSD＝1.08％。
10樣品含量測定 按色譜條件和測定法項下操作，測定十批樣品，結(jié)果如下 康艾扶正滴丸中黃芪甲苷的含量 具體的實施方式 本發(fā)明的實施例1靈芝30g、黃芪30g、刺梨25g、熟地黃20g、女貞子20g、淫羊藿20g、姜制半夏10g 取靈芝，粉碎成粗粉，與女貞子加乙醇浸泡12小時，加乙醇回流提取二次，每次2小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮至相對密度80℃時為1.25～1.34的稠膏，干燥，粉碎；藥渣與其余黃芪等五味藥材，加水煎煮二次，每次2小時，分次濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對密度80℃時為1.25～1.34的稠膏，干燥，粉碎，加入上述膏粉，按浸膏粉∶基質(zhì)＝1∶1.7加入PEG4000，混合均勻，加熱熔融，攪拌均勻，轉(zhuǎn)移至滴丸機，滴距為5cm，滴速35d/min、料溫75℃，將藥液滴入冷卻劑甲基硅油中，冷卻劑溫度為25℃，收集滴丸并吸除表面的甲基硅油，即得滴丸劑，口服，一日三次， 20-40丸/次。
本發(fā)明的實施例2靈芝30g、黃芪30g、刺梨25g、熟地黃20g、女貞子20g、淫羊藿20g、姜制半夏10g 取靈芝，粉碎成粗粉，與女貞子加乙醇浸泡12小時，加乙醇回流提取二次，每次2小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮至相對密度80℃時為1.25～1.34的稠膏，干燥，粉碎；藥渣與其余黃芪等五味藥材，加水煎煮二次，每次2小時，分次濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對密度80℃時為1.25～1.34的稠膏，干燥，粉碎，加入上述膏粉，再加入無水乙醇作潤濕劑制軟材，過24目篩制得濕顆粒，隨即投入轉(zhuǎn)速為40r/min的糖衣機中滾圓，并置于40℃烘箱中干燥后取出，再過篩選擇24~40目的微丸進行包衣包衣液為濃度4％的丙烯酸樹脂溶液，進風(fēng)溫度為50℃，噴霧壓力為1.5kg/cm2，輸液速度為18ml/min，即得微丸劑。
本發(fā)明的實施例3靈芝30g、黃芪30g、刺梨25g、熟地黃20g、女貞子20g、淫羊藿20g、姜制半夏10g 取靈芝，粉碎成粗粉，與女貞子加乙醇浸泡12小時，加乙醇回流提取二次，每次2小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮至相對密度80℃時為1.25～1.34的稠膏，干燥，粉碎；藥渣與其余黃芪等五味藥材，加水煎煮二次，每次2小時，分次濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對密度80℃時為1.25～1.34的稠膏，干燥，粉碎，加入上述膏粉，再加入5％乳糖、7％交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮，混勻，加入乙醇，制軟材，制粒，干燥，40目篩整粒，混勻后壓片，另取薄荷腦，加乙醇適量使溶解，噴入，再噴入上述揮發(fā)油，混勻，密閉2小時，即得分散片劑。
本發(fā)明的實施例4靈芝30g、黃芪30g、刺梨25g、熟地黃20g、女貞子20g、淫羊藿20g、姜制半夏10g 取靈芝，粉碎成粗粉，與女貞子加乙醇浸泡12小時，加乙醇回流提取二次，每次2小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮至相對密度80℃時為1.25～1.34的稠膏，干燥，粉碎；藥渣與其余黃芪等五味藥材，加水煎煮二次，每次2小時，分次濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對密度80℃時為1.25～1.34的稠膏，干燥，粉碎，加入上述膏粉，按浸膏粉∶基質(zhì)＝1∶1.7加入PEG4000，混合均勻，加熱熔融，攪拌均勻，轉(zhuǎn)移至滴丸機，滴距為3cm，滴速30d/min、料溫70℃，將藥液滴入冷卻劑甲基硅油中，冷卻劑溫度為20℃，收集滴丸并吸除表面的甲基硅油，即得滴丸。
本發(fā)明的實施例5靈芝30g、黃芪30g、刺梨25g、熟地黃20g、女貞子20g、淫羊藿20g、姜制半夏10g 取靈芝，粉碎成粗粉，與女貞子加乙醇浸泡12小時，加乙醇回流提取二次，每次2小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮至相對密度80℃時為1.25～1.34的稠膏，干燥，粉碎；藥渣與其余黃芪等五味藥材，加水煎煮二次，每次2小時，分次濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對密度80℃時為1.25～1.34的稠膏，干燥，粉碎，加入上述膏粉，按浸膏粉∶基質(zhì)＝1∶1.7加入PEG4000，混合均勻，加熱熔融，攪拌均勻，轉(zhuǎn)移至滴丸機，滴距為7cm，滴速40d/min、料溫80℃，將藥液滴入冷卻劑甲基硅油中，冷卻劑溫度為30℃，收集滴丸并吸除表面的甲基硅油，即得滴丸。
本發(fā)明的實施例6靈芝30g、黃芪30g、刺梨25g、熟地黃20g、女貞子20g、淫羊藿20g、姜制半夏10g 取靈芝，粉碎成粗粉，與女貞子加乙醇浸泡12小時，加乙醇回流提取二次，每次2小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮至相對密度80℃時為1.25～1.34的稠膏，干燥，粉碎；藥渣與其余黃芪等五味藥材，加水煎煮二次，每次2小時，分次濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對密度80℃時為1.25～1.34的稠膏，干燥，粉碎，加入上述膏粉，按浸膏粉∶基質(zhì)＝1∶0.7加入PEG4000，混合均勻，加熱熔融，攪拌均勻，轉(zhuǎn)移至滴丸機，滴距為1cm，滴速20d/min、料溫60℃，將藥液滴入冷卻劑中，冷卻劑溫度為10℃，收集滴丸并吸除表面的冷卻劑，即得滴丸。
本發(fā)明的實施例7靈芝30g、黃芪30g、刺梨25g、熟地黃20g、女貞子20g、淫羊藿20g、姜制半夏10g 取靈芝，粉碎成粗粉，與女貞子加乙醇浸泡12小時，加乙醇回流提取二次，每次2小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮至相對密度80℃時為1.25～1.34的稠膏，干燥，粉碎；藥渣與其余黃芪等五味藥材，加水煎煮二次，每次2小時，分次濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對密度80℃時為1.25～1.34的稠膏，干燥，粉碎，加入上述膏粉，按浸膏粉∶基質(zhì)＝1∶2.2加入PEG4000，混合均勻，加熱熔融，攪拌均勻，轉(zhuǎn)移至滴丸機，滴距為9cm，滴速50d/min、料溫90℃，將藥液滴入冷卻劑中，冷卻劑溫度為40℃，收集滴丸并吸除表面的冷卻劑，即得滴丸。
實施例8滴丸劑中黃芪甲苷的薄層色譜法鑒別 取本品粉末5g，加甲醇60ml，浸漬過夜，超聲處理30分鐘，濾過，藥渣再加甲醇超聲處理2次(30ml、20ml)，每次30分鐘，濾過，殘渣用甲醇20ml洗滌，濾過，合并濾液與洗滌液，揮至20ml，加于中性氧化鋁柱(100～200目，24g，內(nèi)徑1.5cm)上，用40％甲醇120ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣用0.5％氫氧化鈉溶液30ml溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取4次(30ml、20mml、20ml、20ml)，合并正丁醇液，蒸干，殘渣加適量甲醇使溶解，轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，作為供試品溶液；按處方比例稱取其它藥材和輔料同法制成陰性對照溶液；另取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各20μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水(13∶6∶2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰，分別置日光及紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，日光下顯相同的棕褐色斑點；紫外光燈(365nm)下顯相同的橙黃色熒光斑點，且陰性無干擾。
實施例9微丸劑中黃芪藥材、黃芪甲苷的薄層色譜法鑒別 取本品1g，加50％乙醇50ml超聲提取20分鐘，濾過，濾液濃縮至20ml，加于中性氧化鋁柱(100～200目，10g，內(nèi)徑1.0cm)上，用50％甲醇120ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣用0.5％氫氧化鈉溶液30ml溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取2次(30ml、20mml)，合并正丁醇液，蒸干，殘渣加適量甲醇1ml溶解，作為供試品溶液；另取黃芪藥材1g，同法制成對照藥材溶液；取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水(15∶5∶2.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰，分別置日光及紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點或熒光斑點。
實施例10分散片劑中黃芪藥材、黃芪甲苷的薄層色譜法鑒別 取本品粉末1g，加50％甲醇50ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液濃縮至10ml，加于中性氧化鋁柱(100～200目，10g，內(nèi)徑1.0cm)上，用40％乙醇100ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣用0.2％氫氧化鈉溶液20ml溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取2次(30ml、20mml)，合并正丁醇液，蒸干，殘渣加適量甲醇1ml溶解，作為供試品溶液；另取黃芪藥材0.5g，同法制成對照藥材溶液；取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水(11∶7∶1.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰，分別置日光及紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點或熒光斑點。
實施例11滴丸劑中齊墩果酸的薄層色譜法鑒別 取本品粉末2.5g，加氯仿50ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作為供試品溶液；按處方比例稱取其它藥材和輔料同法制成陰性對照溶液；另取齊墩果酸對照品，加氯仿制成1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液、陰性對照溶液各10μl、對照品溶液5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-丙酮-醋酸乙酯(5∶2∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在110℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色斑點，且陰性無干擾。
實施例12微囊劑中女貞子藥材、齊墩果酸的薄層色譜法鑒別 取本品粉末1.5g，加醋酸乙酯30ml，超聲15分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作為供試品溶液；另取女貞子對照藥材，加乙醇超聲提取，濾過，濾液蒸干，殘渣加無水乙醇-三氯甲烷(3∶2)混合溶液1ml使溶解，作為對照藥材溶液；取齊墩果酸對照品，加氯仿制成1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，上述對照藥材溶液、對照品溶液、供試品溶液2～10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-丙酮-醋酸乙酯(4∶2.5∶1.2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以15％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色斑點。
實施例13分散片劑中女貞子藥材、齊墩果酸的薄層色譜法鑒別 取本品粉末1.0g，加醋酸乙酯30ml，超聲15分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作為供試品溶液；另取女貞子對照藥材，加甲醇加熱回流，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇使溶解，作為對照藥材溶液；取齊墩果酸對照品，加醋酸乙酯制成1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，上述對照藥材溶液、對照品溶液、供試品溶液2～10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-丙酮-醋酸乙酯(6∶1.5∶0.8)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以15％硫酸乙醇溶液，在110℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色斑點。
實施例14滴丸劑中淫羊霍苷的薄層色譜法鑒別 取本品3g，加水15ml，超聲處理使溶解，用乙醚振搖提取2次，每次15ml，棄去乙醚液，水液再用醋酸乙酯振搖提取3次，每次15ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；按處方比例稱取其它藥材和輔料同法制成陰性對照溶液；另取淫羊霍苷對照品，加甲醇制成每1ml含0.6mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各5μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠H薄層板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(10∶1∶1∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色斑點，且陰性無干擾。
實施例15微囊劑中淫羊霍藥材、淫羊霍苷的薄層色譜法鑒別 取本品粉末2g，加水20ml，超聲提取，水液用三氯甲烷振搖提取3次，每次20ml，合并三氯甲烷液，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取淫羊霍對照藥材0.5g，加甲醇20ml提取，提取液濃縮至1ml，作為對照藥材溶液；取淫羊霍苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各5μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠H薄層板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(11∶1.2∶0.8∶1.2)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色斑點。
實施例16微丸劑中淫羊霍藥材、淫羊霍苷的薄層色譜法鑒別 取本品粉末2g，加水20ml，超聲提取，濾過，濾液用乙醚20ml振搖提取，棄去乙醚液，水液再用正丁醇30ml振搖提取，正丁醇液蒸干，殘渣加乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取淫羊霍對照藥材0.5g，加乙醇20ml提取，提取液濃縮至1ml，作為對照藥材溶液；取淫羊霍苷對照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各1～10μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠H薄層板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(9∶0.8∶1.2∶0.8)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色斑點。
實施例17滴丸劑中黃芪甲苷的高效液相色譜法含量測定 取本品，研細，取約5g，精密稱定，加甲醇50ml，浸漬過夜，超聲處理30分鐘，濾過，藥渣再加甲醇超聲處理2次(30ml、20ml)，每次30分鐘，濾過，殘渣用甲醇20ml洗滌，濾過，合并濾液與洗滌液，揮至20ml，加于中性氧化鋁柱(100～200目，24g，內(nèi)徑1.5cm)上，用40％甲醇120ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣用0.5％氫氧化鈉溶液30ml溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取4次(30ml、20ml、20ml、20ml)，合并正丁醇液，蒸干，殘渣加適量甲醇使溶解，轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，微孔濾膜(0.45μm)濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。取黃芪甲苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含0.15mg的對照品溶液。采用高效液相色譜法，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水＝34∶66為流動相；蒸發(fā)光散射檢測器檢測；理論板數(shù)按黃芪甲苷峰計算應(yīng)不低于5000；分別精密吸取對照品溶液10μl、20μl、供試品溶液20μl，注入液相色譜儀，外標(biāo)兩點法對數(shù)方程計算，即得。本品每日用劑量含黃芪甲苷不得少于0.30mg。
實施例18分散片劑中黃芪甲苷的高效液相色譜法含量測定 取本品，研細，取約3g，精密稱定，加甲醇50ml，浸漬過夜，超聲處理30分鐘，濾過，藥渣再加甲醇超聲處理2次(30ml、20ml)，每次30分鐘，濾過，殘渣用甲醇20ml洗滌，濾過，合并濾液與洗滌液，揮至20ml，加于中性氧化鋁柱(100～200目，10g，內(nèi)徑1.5cm)上，用30％甲醇110ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣用0.5％氫氧化鈉溶液30ml溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取4次(30ml、20ml、20ml、20ml)，合并正丁醇液，蒸干，殘渣加適量甲醇使溶解，轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，微孔濾膜(0.45μm)濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。取黃芪甲苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含0.15mg的對照品溶液。采用高效液相色譜法，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水＝30∶70為流動相；蒸發(fā)光散射檢測器檢測；理論板數(shù)按黃芪甲苷峰計算應(yīng)不低于4000；分別精密吸取對照品溶液10μl、20μl、供試品溶液20μl，注入液相色譜儀，外標(biāo)兩點法對數(shù)方程計算，即得。本品每日用劑量含黃芪甲苷不得少于0.20mg。
實施例19微丸劑中黃芪甲苷的高效液相色譜法含量測定 取本品，研細，取約3g，精密稱定，加甲醇30ml，浸漬過夜，超聲處理20分鐘，濾過，藥渣再加甲醇超聲提取2次(20ml、20ml)，每次20分鐘，濾過，殘渣用甲醇20ml洗滌，濾過，合并濾液與洗滌液，揮至10ml，加于中性氧化鋁柱(100～200目，10g，內(nèi)徑1.0cm)上，用40％乙醇120ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣用0.5％氫氧化鈉溶液20ml溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取4次(20ml、20ml、10ml、10ml)，合并正丁醇液，蒸干，殘渣加適量甲醇使溶解，轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。取黃芪甲苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含0.10mg的對照品溶液。采用高效液相色譜法，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水＝38∶62為流動相；蒸發(fā)光散射檢測器檢測；理論板數(shù)按黃芪甲苷峰計算應(yīng)不低于3000；分別精密吸取對照品溶液8μl、16μl、供試品溶液10μl，注入液相色譜儀，外標(biāo)兩點法對數(shù)方程計算，即得。本品每日用劑量含黃芪甲苷不得少于0.15mg。
權(quán)利要求
1、一種中藥制劑，其特征在于按照重量計算，它主要是由靈芝30g、黃芪30g、刺梨25g、熟地黃20g、女貞子20g、淫羊藿20g、姜制半夏10g制作而成的制劑，包括注射劑，包括注射液、粉針、凍干粉針、凝膠劑、片劑、分散片、膠囊劑、軟膠囊劑、微囊劑、顆粒劑、丸劑、微丸、散劑、滴丸劑、緩釋制劑、控釋制劑、凝膠劑、口服液體制劑、煎膏劑、浸膏劑和膜劑等藥劑學(xué)上所有可以接受的劑型。
2、按照權(quán)利要求1所述的中藥制劑，其特征在于所述的制劑是滴丸、微丸、分散片。
3、按照權(quán)利要求1或2所述的中藥制劑的制備方法，其特征在于所述制劑中的滴丸劑這樣制備取靈芝，粉碎成粗粉，與女貞子加乙醇浸泡12小時，加乙醇回流提取二次，每次2小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮至相對密度80℃時為1.25～1.34的稠膏，干燥，粉碎；藥渣與其余黃芪等五味藥材，加水煎煮二次，每次2小時，分次濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對密度80℃時為1.25～1.34的稠膏，干燥，粉碎，加入上述膏粉，按浸膏粉∶基質(zhì)＝1∶0.7～2.2加入PEG4000，混合均勻，加熱熔融，攪拌均勻，轉(zhuǎn)移至滴丸機，滴距為1～9cm，滴速20～50d/min、料溫60～90℃，將藥液滴入冷卻劑中，冷卻劑溫度為10～40℃，收集滴丸并吸除表面的冷卻劑，即得。
4、按照權(quán)利要求3所述的中藥制劑的制備方法，其特征在于所述制劑中的滴丸劑這樣制備取靈芝，粉碎成粗粉，與女貞子加乙醇浸泡12小時，加乙醇回流提取二次，每次2小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮至相對密度80℃時為1.25～1.34的稠膏，干燥，粉碎；藥渣與其余黃芪等五味藥材，加水煎煮二次，每次2小時，分次濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對密度80℃時為1.25～1.34的稠膏，干燥，粉碎，加入上述膏粉，按浸膏粉∶基質(zhì)＝1∶1.7加入PEG4000，混合均勻，加熱熔融，攪拌均勻，轉(zhuǎn)移至滴丸機，滴距為3～7cm，滴速30～40d/min、料溫70～80℃，將藥液滴入冷卻劑甲基硅油中，冷卻劑溫度為20～30℃，收集滴丸并吸除表面的甲基硅油，即得。
5、按照權(quán)利要求1或2所述的中藥制劑的制法，其特征在于所述制劑中的微丸劑這樣制備取靈芝，粉碎成粗粉，與女貞子加乙醇浸泡12小時，加乙醇回流提取二次，每次2小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮至相對密度80℃時為1.25～1.34的稠膏，干燥，粉碎；藥渣與其余黃芪等五味藥材，加水煎煮二次，每次2小時，分次濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對密度80℃時為1.25～1.34的稠膏，干燥，粉碎，加入上述膏粉，加入無水乙醇作潤濕劑制軟材，過24目篩制得濕顆粒，隨即投入轉(zhuǎn)速為40r/min的糖衣機中滾圓，并置于40℃烘箱中干燥后取出，再過篩選擇24～40目的微丸進行包衣包衣液為濃度4％的丙烯酸樹脂溶液，進風(fēng)溫度為50℃，噴霧壓力為1.5kg/cm2，輸液速度為18ml/min，即得。
6、按照權(quán)利要求1或2所述的中藥制劑的制法，其特征在于所述制劑中的分散片劑這樣制備取靈芝，粉碎成粗粉，與女貞子加乙醇浸泡12小時，加乙醇回流提取二次，每次2小時，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮至相對密度80℃時為1.25～1.34的稠膏，干燥，粉碎；藥渣與其余黃芪等五味藥材，加水煎煮二次，每次2小時，分次濾過，合并濾液，減壓濃縮至相對密度80℃時為1.25～1.34的稠膏，干燥，粉碎，加入膏粉，再加入5％乳糖、7％交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮，混勻，加入乙醇，制軟材，制粒，干燥，40目篩整粒，混勻后壓片，另取薄荷腦，加乙醇適量使溶解，噴入，再噴入上述揮發(fā)油，混勻，密閉2小時，即得。
7、按照權(quán)利要求1～6中任意一項所述的中藥制劑的質(zhì)控方法，其特征在于鑒別方法包括以下全部或部分內(nèi)容
a.制劑中黃芪甲苷、黃芪藥材中一種或兩種的薄層色譜法鑒別
取本品適量，加50～100％甲醇或50～100％乙醇提取，濾過，濾液，加于100～200目的中性氧化鋁柱上，用30～50％甲醇或20～40％乙醇洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣用氫氧化鈉溶液溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取，正丁醇液蒸干，殘渣加溶劑使溶解，作為供試品溶液；另取黃芪藥材，同法制成對照藥材溶液；取黃芪甲苷對照品，制成對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述對照藥材溶液、對照品溶液中的一種或兩種及供試品溶液適量，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水＝11～15∶5～7∶1.5～2.5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰，分別置日光及紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點或熒光斑點；
b.制劑中女貞子、齊墩果酸中一種或兩種的薄層色譜法鑒別
取本品適量，加三氯甲烷或乙酸乙酯提取，濾過，濾液濃縮或蒸干再加溶劑溶解，作為供試品溶液；另取女貞子對照藥材，加甲醇或乙醇提取，濾過，濾液濃縮或蒸干再加溶劑溶解，作為對照藥材溶液；取齊墩果酸對照品，制成為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述對照藥材溶液、對照品溶液中的一種或兩種及供試品溶液適量，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-丙酮-乙酸乙酯＝4～6∶1.5～2.5∶0.8～1.2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色斑點；
c.制劑中淫羊霍藥材、淫羊霍苷中一種或兩種的薄層色譜法鑒別
取本品適量，加水溶解或提取，水液用乙酸乙酯或三氯甲烷或正丁醇振搖提取，提取液蒸干，殘渣加甲醇或乙醇使溶解，作為供試品溶液；取淫羊霍對照藥材，濾液濃縮或蒸干再加溶劑溶解，作為對照藥材溶液；另取淫羊霍苷對照品，制成對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述對照藥材溶液、對照品溶液中的一種或兩種及供試品溶液適量，分別點于同一硅膠H薄層板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水＝9～11∶0.8～1.2∶0.8～1.2∶0.8～1.2為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365nm下檢視；供試品色譜中，在與對照色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色斑點。
8、按照權(quán)利要求7所述的中藥制劑的質(zhì)控方法，其特征在于鑒別方法包括以下全部或部分內(nèi)容
a.制劑中黃芪藥材、黃芪甲苷中一種或兩種的薄層色譜法鑒別
取本品粉末適量，加甲醇超聲提取，濾過，濾液，加于100～200目的中性氧化鋁柱上，用40％甲醇洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣用氫氧化鈉溶液溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇使溶解，作為供試品溶液；另取黃芪藥材，同法制成對照藥材溶液；取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述對照藥材溶液、對照品溶液中的一種或兩種及供試品溶液適量，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水＝13∶6∶2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰，分別置日光及紫外光燈365nm下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，日光下顯相同的棕褐色斑點，紫外光燈365nm下顯相同的橙黃色熒光斑點；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點或熒光斑點；
b.制劑中女貞子藥材、齊墩果酸中一種或兩種的薄層色譜法鑒別
取本品粉末適量，加三氯甲烷或乙酸乙酯，加熱回流，濾過，濾液蒸干，殘渣加三氯甲烷或乙酸乙酯使溶解，作為供試品溶液；另取女貞子對照藥材，加甲醇加熱回流，濾過，濾液蒸干，殘渣加無水乙醇-三氯甲烷＝3∶2混合溶液使溶解，作為對照藥材溶液；取齊墩果酸對照品，加三氯甲烷或乙酸乙酯或乙醇制成為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述對照藥材溶液、對照品溶液中的一種或兩種及供試品溶液適量，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-丙酮-乙酸乙酯＝5∶2∶1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色斑點；
c.制劑中淫羊霍藥材、淫羊霍苷中一種或兩種的薄層色譜法鑒別
取本品粉末適量，加水溶解或提取，水溶液用乙醚振搖提取，棄去乙醚液，水液再用乙酸乙酯振搖提取，乙酸乙酯液蒸干，殘渣加甲醇或乙醇使溶解，作為供試品溶液；取淫羊霍對照藥材，加甲醇或乙醇提取，提取液濃縮，作為對照藥材溶液；另取淫羊霍苷對照品，加甲醇或乙醇制成對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述對照藥材溶液、對照品溶液中的一種或兩種及供試品溶液適量，分別點于同一硅膠H薄層板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水＝10∶1∶1∶1為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365nm下檢視；供試品色譜中，在與對照色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色斑點。
9、按照權(quán)利要求1～6中任意一項所述的中藥制劑的質(zhì)控方法，其特征在于制劑中黃芪甲苷的高效液相色譜法含量測定
取本品，研細，取粉末適量，精密稱定，加甲醇充分浸漬后超聲提取，濾過，甲醇溶液加于100～200目中性氧化鋁柱上，用30～50％甲醇或20～40％乙醇洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣用堿性溶液溶解，堿性溶液用水飽和的正丁醇振搖提取，正丁醇液蒸干，殘渣加適量甲醇使溶解并定容，濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液；精密稱取黃芪甲苷對照品適量，加甲醇制成對照品溶液；采用高效液相色譜法，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水＝30～38∶70～62為流動相；蒸發(fā)光散射檢測器檢測；理論板數(shù)按黃芪甲苷峰計算應(yīng)不低于3000；精密吸取對照品溶液、供試品溶液適量，注入液相色譜儀，測定，以外標(biāo)兩點法對數(shù)方程計算，即得；本品每日用劑量含黃芪甲苷不得少于0.15mg。
10、按照權(quán)利要求9所述的中藥制劑的質(zhì)控方法，其特征在于制劑中黃芪甲苷的高效液相色譜法含量測定
取本品，研細，取粉末適量，精密稱定，加甲醇充分浸漬后超聲提取，濾過，甲醇溶液加于100～200目中性氧化鋁柱上，用40％甲醇洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣用氫氧化鈉溶液溶解，氫氧化鈉溶液用水飽和的正丁醇振搖提取，正丁醇液蒸干，殘渣加適量甲醇使溶解并定容，濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液；精密稱取黃芪甲苷對照品適量，加甲醇制成對照品溶液；采用高效液相色譜法，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水＝34∶66為流動相；蒸發(fā)光散射檢測器檢測；理論板數(shù)按黃芪甲苷峰計算應(yīng)不低于5000；精密吸取對照品溶液10μl、20μl，供試品溶液20μl，注入液相色譜儀，測定，以外標(biāo)兩點法對數(shù)方程計算，即得；本品每日用劑量含黃芪甲苷不得少于0.30mg。
全文摘要
本發(fā)明一種中藥制劑及其制法和質(zhì)控方法，屬于中藥的技術(shù)領(lǐng)域。它由靈芝、黃芪、刺梨、熟地黃、女貞子、淫羊藿、姜制半夏等藥組成，制成分散片、微丸、滴丸等劑型，同時提供了本制劑的含量測定和鑒別方法，該制劑主要用于治療腫瘤放化療引起的白細胞下降，血小板減少，免疫功能降低所致的體虛乏力、食欲不振、嘔吐、失眠等病癥，同時工藝合理，質(zhì)量可控，可直接指導(dǎo)生產(chǎn)；服用方便，外觀美潔，易于被患者接受。
文檔編號A61K9/16GK1970022SQ200610138210
公開日2007年5月30日 申請日期2006年11月3日 優(yōu)先權(quán)日2005年11月4日
發(fā)明者于文風(fēng) 申請人:北京奇源益德藥物研究所