專利名稱：一種病毒滅活袋裝凍干血漿及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物制品領(lǐng)域，具體說是涉及一種經(jīng)病毒滅活的袋裝凍干血漿。
背景技術(shù)：
血漿對(duì)于失血性休克的擴(kuò)容、燒傷的搶救以及由于輸用庫存血或代用品導(dǎo)致 的滲血等都是主要的治療措施。
目前，國(guó)內(nèi)外臨床上應(yīng)用的血漿制品有io余種，血漿分為新鮮血漿和普通
血漿兩種，新鮮血漿又分為新鮮冰凍血漿(又稱FFP)和新鮮液體血漿；普通血
漿分為普通冰凍血漿、保存的液體血漿。新鮮冰凍血漿和普通冰凍血槳都是將抗
凝全血在4。C條件下離心后分離，再經(jīng)一3(TC冰箱速凍而得，需保存在一20。C冰 柜或低溫冰箱中，且保存體積較大。新鮮液體血槳是將保存期內(nèi)的抗凝全血在4 。C條件下經(jīng)離心后分離得到，在fC保存條件下，24h之內(nèi)必須輸注，保存時(shí)間 短。
相比之下，無需低溫保存設(shè)備的凍干血漿保存更容易，但常用的凍千血漿主 要是玻璃瓶裝凍干血漿，由大量混合血漿制備而成，傳播乙型肝炎病毒、丙型肝 炎病毒和艾滋病毒的風(fēng)險(xiǎn)性較高。另外玻璃瓶易碎，不適于空投和顛簸運(yùn)輸，為 防止玻璃瓶破裂，有的玻璃瓶外面套上一個(gè)金屬罐，但這種包裝的凍干血漿分量 重，運(yùn)輸攜帶也不方便。如果選用目前臨床輸血采用的PVC血袋進(jìn)行凍干血漿， 則存在不易凍干等問題，無法達(dá)到生物制品規(guī)程的要求。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了一種經(jīng)病毒滅活后制備的袋裝凍干血漿，其制備方法是將新鮮
分離的血漿置于特制的凍干血漿袋(已獲得國(guó)家實(shí)用新型專利授權(quán)，專利號(hào)
ZL2005 2 0001469.3)中經(jīng)病毒滅活后冷凍干燥而得。
本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的
(1) 血漿的分離
1) 新鮮血漿將采集時(shí)間在6h以內(nèi)的抗凝全血4。C下離心，分離得到的血漿；
2) 新鮮冰凍血漿將新鮮血漿在一2(TC下凍存，冷凍狀態(tài)一直持續(xù)到使用之前， 有效期自采血日起l年；
3) 普通血漿來源于保存期內(nèi)，或過期不滿5天的抗凝全血分離得到；
4) 普通冷凍血漿來源于保存期滿1年的新鮮冷凍血槳，或普通血漿在一20'C 以下凍存，冷凍狀態(tài)一直持續(xù)到使用之前，有效期自采血日起為5年。
(2) 血漿病毒滅活目前用于血漿病毒滅活的方法較多，常用的有有機(jī)溶劑/ 清潔劑法、光化學(xué)法、加熱法、紫外線(UVA) /光敏劑法等，各種方法對(duì)
血漿病毒的滅活效果不一，但選擇合適的條件，都能達(dá)到較好的滅活效果。
1) 有機(jī)溶劑/清潔劑法(S/D法)將分離得到的同種血型血漿置于容器中，加入
有機(jī)溶劑磷酸三丁酯(TNBP)和TritonX-lOO處理后，植物油萃取TOBP， 固相層析法去除TritonX-lOO，除菌后分裝入特制的凍干血漿袋中；
2) 光化學(xué)法將分離得到的單袋血漿置于特制的凍干血漿袋中，加入光敏劑亞 甲藍(lán)，病毒滅活裝置處理后，去除亞甲藍(lán)；
3) 加熱分離得到的同種血型血漿置于容器中，加入保護(hù)劑后邊攪拌邊加熱， 加熱處理后用超濾等方法除去保護(hù)劑，除菌后分裝入特制的凍干血漿袋中；
4) 紫外線(UVA) /光敏物法將分離得到的血漿置于特制的凍干血漿袋中，加 入光敏劑補(bǔ)骨脂類化合物S-59，然后用紫外線(UVA)進(jìn)行照射處理，滅活 血漿中的病毒。
(3) 血漿預(yù)凍
經(jīng)病毒滅活后的血漿置于特制的凍干血漿袋中，放入一40'C以下的低溫冰箱 或冰柜中預(yù)凍，使其成為固體。
(4) 病毒滅活凍干血漿的制備
預(yù)凍后的血漿置于凍干機(jī)中，剪開蒸發(fā)管，在阱底溫度一56"C，真空度10Pa 以下，經(jīng)48h真空升華去水制成淡黃色疏松體，從凍干機(jī)中取出后迅速封口。
本發(fā)明中應(yīng)用的特制凍干血漿袋是經(jīng)中華人民共和國(guó)國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局授權(quán) 的實(shí)用新型(專利號(hào)ZL 2005 2 0001469.3)，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、重量輕、不易破碎、 便于運(yùn)輸。由于該凍干血漿袋在袋身上設(shè)置有多根蒸發(fā)管，使袋身形成貫通型多 通路，可使血漿在干燥時(shí)增加水分蒸發(fā)渠道，縮短水分蒸發(fā)路徑和時(shí)間，從而達(dá) 到凍干血漿的目的。
本發(fā)明的病毒滅活凍干血漿直接凍存于特制凍干血漿袋中，重量輕，便于攜 帶和運(yùn)輸，耐摔、耐壓，避免了空投和顛簸運(yùn)輸造成的玻璃瓶易碎問題，無需低 溫保存設(shè)備，保存容易，且復(fù)溶速度快， 一旦救治需要，可用滅菌注射用水迅速 溶解后立即使用，是一種快速、有效的抗休克藥物。病毒滅活袋裝凍干血槳特別 適用于因突發(fā)情況下出現(xiàn)的大量傷員的及時(shí)救治，發(fā)揮擴(kuò)容、抗休克、穩(wěn)定血壓 等作用，可避免因大量失血引起的休克和循環(huán)衰竭等的發(fā)生，為后續(xù)治療爭(zhēng)取時(shí) 間。亦可用于燒傷的救治，也可用于交通事故、安全生產(chǎn)事故及其它突發(fā)傷毀事 件引起休克的救治，具有巨大的社會(huì)經(jīng)濟(jì)價(jià)值，應(yīng)用前景廣闊。


圖1專用凍干血漿袋及外觀呈淡黃色疏松體的病毒滅活袋裝凍干血漿 圖2復(fù)溶后的血漿呈黃色混濁液體，無異物
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1新鮮血漿的分離
新鮮釆集的200ml抗凝全血，4。C條件下，3800轉(zhuǎn)離心15min，小心分離得 到100ml血漿。
實(shí)施例2普通血漿的分離
全血采集后超過6h，保存期內(nèi)的抗凝全血200ml， 4。C條件下，3800轉(zhuǎn)離心 15min，小心分離得到105ml血漿。
實(shí)施例3血漿病毒滅活
血漿病毒滅活的方法較多，現(xiàn)以亞甲藍(lán)/光化學(xué)法為例，說明血漿病毒的滅 活方法。在潔凈工作臺(tái)中取0.9%的靜脈注射用生理鹽水25.7ml，加入10mg/ml 的亞甲藍(lán)注射液(江蘇濟(jì)川制藥有限公司產(chǎn)品)lml，混勻得到lmmol/L的亞甲
藍(lán)工作液。取分離獲得的lOOml血漿分裝入特制的凍干血槳袋(國(guó)家實(shí)用新型專 利授權(quán)，專利號(hào)ZL 2005 2 0001469.3)中，加入亞甲藍(lán)工作液10(^1使其終濃 度為lpmol/L，熱合封口后用波長(zhǎng)為630nm的光源在光強(qiáng)度不低于40 000Lux條 件下照射處理30min以滅活血漿中的病毒。
實(shí)施例4病毒滅活袋裝凍干血漿的制備
將經(jīng)過病毒滅活的裝于特制凍干血漿袋中的100ml血漿放入一4(TC以下的 低溫冰箱或冰柜，預(yù)凍4h，待血漿凍成固體狀態(tài)后取出，放入LGJ-10型冷凍干 燥機(jī)，剪丌封口，在阱底溫度一56°C，真空度10Pa以下，凍干48h，得到淡黃 色疏松體，取出后快速封口，即為病毒滅活袋裝凍干血槳。
實(shí)施例5病毒滅活袋裝凍干血漿水分含量測(cè)定
將凍干的病毒滅活血漿按照《生物制品規(guī)程》(1995版)中的費(fèi)氏測(cè)定方法 進(jìn)行水分檢測(cè)，水分含量在2.2%-2.5%間，符合《生物制品規(guī)程》(1995版)凍 干血漿水分《3%的要求。
實(shí)施例6病毒滅活袋裝凍干血漿的復(fù)溶及凝血因子活性檢測(cè)
將各100ml滅菌注射用水分別加入到室溫保存30、 60、 90及180天的病毒 滅活凍干血漿中，迅速溶解得到的溶液為淡黃色混濁液，分別測(cè)定復(fù)溶血漿中的 凝血因子活性(測(cè)定方法參見國(guó)家《生物制品規(guī)程》，2000版)，結(jié)果顯示(表l)， 隨室溫存放時(shí)間的延長(zhǎng)，病毒滅活凍干血漿中凝血因子活性有所下降，但其活性 均保持在80%以上，符合《生物制品規(guī)程》(1995版)中對(duì)凍干血漿的要求。
儲(chǔ)存條件
II
凝血因子活性(％)
V
V1D
IX
XT
新鮮冷凍血漿100100100100100
凍干血漿(0d)10010010097,8訓(xùn)
室溫30d98.898.510091.495.2
室溫60d92.594.298.883.592.7
室溫卯d91.7肌593.995.991.2
室溫180d85.983.4卯.290.886.權(quán)利要求
1、一種病毒滅活袋裝凍干血漿，其特征在于所述的病毒滅活袋裝凍干血漿是將分離的血漿經(jīng)病毒滅活后，于專用的凍干血漿袋中進(jìn)行凍干而得，其制備方法包括以下步驟(1)血漿的分離；(2)對(duì)分離出的血漿進(jìn)行病毒滅活；(3)經(jīng)病毒滅活后的血漿置于凍干專用血漿袋中于-40℃以下預(yù)凍；(4)預(yù)凍后的血漿置于冷凍干燥機(jī)中凍干；(5)凍干后快速封口。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的病毒滅活袋裝凍干血漿，其特征在于凍干所用的血漿 袋為專用血漿袋，袋身上設(shè)置有蒸發(fā)管，與袋身形成貫通型多通路，可使血 漿在干燥時(shí)增加水分蒸發(fā)渠道，縮短水分蒸發(fā)路徑和時(shí)間，從而達(dá)到凍干血 漿的目的。
3、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的病毒滅活袋裝凍干血漿，其特征在于所用的血漿是新 鮮血漿、新鮮冷凍血槳、普通血漿或普通冷凍血漿。 .
4、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的病毒滅活袋裝凍干血漿，其特征在于所用的血漿是單 袋血漿或同種血型的混合血漿。
5、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的病毒滅活袋裝凍干血漿，其特征在于對(duì)血漿進(jìn)行病毒 滅活時(shí)的方法是有機(jī)溶劑/清潔劑法、光化學(xué)法、加熱法或照射法。
6、 根據(jù)權(quán)利要求5所述的病毒滅活方法，其特征在于所述的光化學(xué)法所用的光 敏劑為亞甲藍(lán)。
7、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的病毒滅活袋裝凍干血漿，其特征在于凍干條件為阱底 溫度一56。C，真空度10Pa以下凍干48h。
8、 病毒滅活袋裝凍干血漿的應(yīng)用，其特征在于可作為一種抗休克藥物用于創(chuàng)傷 導(dǎo)致的失血性休克的擴(kuò)容治療，交通事故、安全生產(chǎn)事故及其它突發(fā)傷毀事 件引起休克的院前處置。
9、 病毒滅活袋裝凍干血漿的應(yīng)用，其特征在于作為一種藥物用于燒傷的治療。
10、 病毒滅活袋裝凍干血漿的應(yīng)用，其特征在于作為一種藥物用于由于輸用庫 存血或代用品導(dǎo)致滲血的治療。
全文摘要
本發(fā)明涉及生物制品領(lǐng)域，具體說是涉及一種經(jīng)病毒滅活的袋裝凍干血漿。本發(fā)明的袋裝凍干血漿與傳統(tǒng)的瓶裝凍干血漿相比，特點(diǎn)是重量輕，便于攜帶和運(yùn)輸，且不易碎、耐壓，無需低溫保存，是一種快速、有效的抗休克藥物。特別適用于因突發(fā)事件出現(xiàn)的大量傷員的及時(shí)救治，發(fā)揮擴(kuò)容、抗休克、穩(wěn)定血壓等作用，避免因大量失血引起的休克和循環(huán)衰竭等的發(fā)生，為后續(xù)治療爭(zhēng)取時(shí)間。亦可用于燒傷的搶救，也可用于交通事故、安全生產(chǎn)事故及其它突發(fā)傷毀事件引起休克的救治，具有巨大的社會(huì)經(jīng)濟(jì)價(jià)值，應(yīng)用前景廣闊。
文檔編號(hào)A61K35/16GK101190234SQ20061014549
公開日2008年6月4日 申請(qǐng)日期2006年11月20日 優(yōu)先權(quán)日2006年11月20日
發(fā)明者呂麗萍, 周錫鵬, 張艷宇, 許金波, 舫 閆, 平 馬 申請(qǐng)人:中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院野戰(zhàn)輸血研究所