專(zhuān)利名稱(chēng)：替尼泊苷靜脈注射用微乳新制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種替尼泊苷靜脈注射用微乳新制劑的配方及制備。
背景技術(shù)：
替尼泊苷(teniposide，VM-26)是一種鬼臼毒素的半合成衍生物，屬于植物來(lái)源的抗腫瘤藥物。它是周期特異性細(xì)胞毒藥物，抑制DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶II，導(dǎo)致雙鏈或單鏈破壞使細(xì)胞有絲分裂停于S晚期或G2前期，從而阻礙腫瘤細(xì)胞分裂，抑制腫瘤生長(zhǎng)。替尼泊苷療效顯著，其生物活性是同類(lèi)型藥物依托泊苷的5-10倍，且臨床資料表明替尼泊苷副作用少，毒性較小，對(duì)肝、腎功能無(wú)影響。由于在臨床上具有廣泛的抗腫瘤活性，替尼泊苷現(xiàn)廣泛應(yīng)用于小兒急性淋巴細(xì)胞白血病、小細(xì)胞肺癌、淋巴瘤及神經(jīng)母細(xì)胞瘤等臨床治療，更因其中性親脂特性，能透過(guò)血腦屏障，目前已成為臨床治療腦瘤的首選化療藥物。1992年替尼泊苷被美國(guó)FDA正式批準(zhǔn)用于小兒急性淋巴細(xì)胞白血病化療，商品名為VUMON。我國(guó)在21世紀(jì)初仿制成功，其商品名為邦萊。
替尼泊苷本身幾乎不溶于水，必須溶于有機(jī)溶媒使用。如上述幾種臨床注射液制劑，均以乙醇等有機(jī)試劑作溶劑，同時(shí)為避免稀釋后析出藥物結(jié)晶，處方中加入表面活性劑聚氧乙烯蓖麻油(CremophorEL)為增溶劑。處方組成為每支安培(5ml)含替尼泊苷50mg，苯甲醇150mg，N，N-二甲基乙酰胺300mg，CremophorEL2.5mg，乙醇2.1ml。臨床單獨(dú)使用時(shí)按體表面積50-100mg/m2給藥，用5％葡萄糖或生理鹽水稀釋后靜滴。
現(xiàn)有替尼泊苷制劑在臨床使用過(guò)程中存在以下問(wèn)題過(guò)敏反應(yīng)處方中含有大量的表面活性劑CremophorEL，使用后可引起體內(nèi)組胺釋放，表現(xiàn)為嚴(yán)重的過(guò)敏反應(yīng)。為此，醫(yī)生在醫(yī)囑前必須了解病人的過(guò)敏史，如是否對(duì)替尼泊苷或者蓖麻油等過(guò)敏；在臨床使用時(shí)，醫(yī)務(wù)人員需密切觀察病人的情況，必要時(shí)使用抗組胺藥物以減輕CremophorEL造成的嚴(yán)重過(guò)敏反應(yīng)。結(jié)果是臨床上應(yīng)用起來(lái)非常不方便，給病人帶來(lái)很大的痛苦。
近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外藥學(xué)工作者致力于研究減少或替代CremophorEL使用的新的給藥系統(tǒng)，以提高藥物療效，降低毒副作用。如用于全身給藥的脂質(zhì)體、環(huán)糊精包合物，供局部給藥的微球制劑和凝膠制劑，供口服給藥的微乳制劑等。新的給藥系統(tǒng)均不含表面活性劑CremophorEL，因此，可避免過(guò)敏反應(yīng)的發(fā)生。但目前這些新制劑多數(shù)尚處于實(shí)驗(yàn)室的研究階段，作為注射給藥的脂質(zhì)體還存在不穩(wěn)定，易泄漏，成本高，大生產(chǎn)難等問(wèn)題。
為提高替尼泊苷用藥的安全性和用藥的順應(yīng)性，我們對(duì)替尼泊苷的新劑型替尼泊苷靜脈注射用微乳制劑進(jìn)行了全面地研究。新處方所選用的輔料全部為靜脈注射級(jí)，特別是處方中大幅度地降低了聚氧乙烯蓖麻油(CremophorEL)的用量，通過(guò)與其它表面活性劑合用，制成了比較穩(wěn)定的乳劑，大鼠體內(nèi)藥動(dòng)實(shí)驗(yàn)表明新劑型與VUMON相比，兩者AUC相差不大。在保證替尼泊苷達(dá)到藥效濃度的同時(shí)，基本消除了聚氧乙烯蓖麻油帶來(lái)的過(guò)敏反應(yīng)，以解決目前替尼泊苷注射液存在的最大問(wèn)題。
自50年代乳劑輸液相繼問(wèn)世以來(lái)，以乳劑作為載體的給藥系統(tǒng)的研究已經(jīng)有重大進(jìn)展。乳劑能增加難溶性藥物的溶解度和穩(wěn)定性，某些藥物制成乳劑注射給藥可減輕其刺激性和毒副作用。近年已有含藥乳劑上市，如阿斯利康公司生產(chǎn)的得普利麻(異丙酚靜脈注射乳劑)；欖香烯靜脈注射乳劑治療化療失敗的晚期非小細(xì)胞肺癌，可使多數(shù)病人治療后精神、體力、睡眠和食欲得到改善，生存質(zhì)量提高；鴉膽子油乳劑進(jìn)行前列腺體內(nèi)注射加靜脈滴注治療中、晚期前列腺癌等。乳劑具有低黏度、穩(wěn)定、吸收迅速等特點(diǎn)，并提高藥物的生物利用度，降低毒副作用，臨床前景廣闊。乳劑有以下特點(diǎn)(1)作為油相的精制豆油及作為乳化劑的磷脂對(duì)人體無(wú)毒，在體內(nèi)可完全生物降解和吸收；(2)大生產(chǎn)的技術(shù)已經(jīng)解決；(3)性質(zhì)穩(wěn)定；(4)靜注后不產(chǎn)生超過(guò)人體標(biāo)準(zhǔn)的滲透壓。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明人通過(guò)精心研究，發(fā)明了一種替尼泊苷靜脈注射用微乳新制劑，能顯著降低現(xiàn)有替尼泊苷注射液中CremophorEL的用量，以減少它所帶來(lái)的毒副作用，提供更安全的替尼泊苷注射劑。與現(xiàn)有替尼泊苷注射劑相比，兩者AUC基本相等，而過(guò)敏反應(yīng)毒副作用明顯降低，患者順應(yīng)性明顯增加。
本發(fā)明涉及將難溶性的替尼泊苷、注射用油、部分表面活性劑等溶解于有機(jī)溶劑中，制成替尼泊苷的預(yù)乳化濃縮液，臨床使用時(shí)單獨(dú)將預(yù)乳化濃縮液加入5％葡萄糖注射液中形成微乳的一種新的替尼泊苷靜脈注射用微乳制劑，其特征是制劑中，替尼泊苷或替尼泊苷與紫杉醇、依托泊苷的混合物為0.05-5％，植物油為0.1-5％，乳化劑及助乳化劑為20-80％，有機(jī)溶劑為20-70％，上述原輔料的比例為重量百分比。所述乳化劑可以是大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂、Tween60、PluronicF68、CremophorEL，或它們的混合物。所述有機(jī)溶劑是甘油、無(wú)水乙醇、丙二醇、苯甲醇、N，N-二甲基乙酰胺，或它們的混合物。所述植物油是玉米油、大豆油、芝麻油、紅花油，或它們的混合物。
優(yōu)選的制劑是將有效量的替尼泊苷加入到預(yù)定體積的乙醇中，向該制劑中加入所需的易溶于有機(jī)溶劑的乳化劑和注射用油，然后包裝制成該預(yù)乳化濃縮液。在給藥前，將預(yù)乳化濃縮液加入稀釋的含乳化劑的5％葡萄糖注射液中，形成微乳。
本發(fā)明提供一種替尼泊苷注射用微乳的制備工藝，包括將替尼泊苷、注射用油、表面活性劑、助表面活性劑等溶解到有機(jī)溶劑中充分溶解，得到預(yù)乳化濃縮液，所得到的預(yù)乳化濃縮液為淡黃色油狀溶液。
臨床使用時(shí)，將預(yù)乳化濃縮液注入濃度為5％的葡萄糖溶液中，即可得到替尼泊苷注射用微乳制劑。該微乳制劑使用時(shí)，可采用靜脈注射或靜脈滴注方式給藥。
為檢驗(yàn)本發(fā)明的替尼泊苷注射用微乳制劑產(chǎn)品所具有的優(yōu)良特征和效果，我們對(duì)該制劑做了以下一些考察1.含藥量的測(cè)定采用高效液相色譜法考察了多組替尼泊苷注射用微乳制劑中的替尼泊苷的含量，結(jié)果表明微乳制劑中的替尼泊苷的含量為標(biāo)示量的95％-105％，表明本發(fā)明制劑和制備方法具有良好的同一性和工業(yè)實(shí)用性。
2.穩(wěn)定性試驗(yàn)考察了光、熱(40℃、60℃)、常溫(25℃)和低溫(2-8℃)等因素對(duì)替尼泊苷微乳制劑穩(wěn)定性的影響，結(jié)果表明替尼泊苷微乳制劑對(duì)光和熱比較敏感，需要在低溫(2-8℃)條件下保存，可穩(wěn)定12個(gè)月。用常溫加速試驗(yàn)(40℃、RH75％)3個(gè)月，各項(xiàng)指標(biāo)均無(wú)明顯變化。
3.生物利用度試驗(yàn)在生物利用度試驗(yàn)中，分別給予大鼠劑量為9mg/kg的替尼泊苷微乳制劑或替尼泊苷市售注射劑產(chǎn)品，結(jié)果表明，所研制的替尼泊苷微乳制劑的生物利用度是替尼泊苷市售注射劑產(chǎn)品的86％，統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)未見(jiàn)明顯差異，兩制劑具有生物等效性。
4.急性刺激性試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康豚鼠，雌雄各半，體重250-350g，每組8只；受試藥物10％牛血清白蛋白，注射量為0.5ml，作為陽(yáng)性對(duì)照；替尼泊苷注射液的空白溶劑，給藥劑量為2.5mg/kg；自制乳劑的空白溶劑，劑量為2.5mg/kg；5％葡萄糖注射液，注射量0.5ml，作為陰性對(duì)照。按藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)講義方法進(jìn)行試驗(yàn)并對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行評(píng)分及判斷。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽(yáng)性對(duì)照組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物出現(xiàn)嚴(yán)重的急性過(guò)敏性反應(yīng)，如豎毛、抓鼻、咳嗽、顫抖、呼吸困難等。替尼泊苷注射液的空白溶劑組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物出現(xiàn)3級(jí)急性過(guò)敏性反應(yīng)，如多次抓鼻，多次顫抖，噴嚏，豎毛，抽搐，呼吸困難，兩例動(dòng)物出現(xiàn)大小便失禁；自制乳劑空白溶劑組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物出現(xiàn)1級(jí)反應(yīng)，如部分出現(xiàn)豎毛；葡萄糖注射液組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物呈陰性反應(yīng)。
結(jié)論根據(jù)豚鼠過(guò)敏反應(yīng)級(jí)數(shù)標(biāo)準(zhǔn)，反應(yīng)級(jí)數(shù)達(dá)2級(jí)以上(包括2級(jí))時(shí)，判定該供試品過(guò)敏反應(yīng)試驗(yàn)呈陽(yáng)性。注射劑量為2.5mg/kg的替尼泊苷注射液的空白溶劑，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物呈陽(yáng)性反應(yīng)；注射劑量為2.5mg/kg的自制微乳空白溶劑，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物呈陰性反應(yīng)。此結(jié)果表明，由于大大減少了原制劑中CremophorEL的用量，自制微乳空白溶劑的急性刺激性明顯低于替尼泊苷注射液的空白溶劑。
下面的實(shí)施例是對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步說(shuō)明和解釋?zhuān)皇菍?duì)本發(fā)明進(jìn)行任何限制。
實(shí)施例1處方替尼泊苷 0.24g無(wú)水乙醇 6.4g卵磷脂 4.5g大豆油 0.64gCremophorEL 6.32g5％葡萄糖溶液500ml制法將替尼泊苷0.24g溶解于6.4g的無(wú)水乙醇中，再加入卵磷脂4.5g、大豆油0.64g和CremophorEL6.32g，使它們混合均勻形成預(yù)濃縮液。將預(yù)濃縮液加入500ml濃度為5％的葡萄糖溶液中，震搖，形成微乳。
實(shí)施例2處方替尼泊苷 0.24g無(wú)水乙醇 8g卵磷脂 4g玉米油 0.8gCremophorEL 8g5％葡萄糖溶液500ml制法
將替尼泊苷0.24g、無(wú)水乙醇8g、卵磷脂4g、大豆油0.8g和CremophorEL8g混合均勻形成預(yù)濃縮液。將預(yù)濃縮液加入500ml濃度為5％的葡萄糖溶液中，震搖，形成微乳。
實(shí)施例3處方替尼泊苷0.24g卵磷脂 10g大豆油 1.1gCremophor EL6.4g無(wú)水乙醇24g5％葡萄糖溶液 500ml制法將替尼泊苷0.24g與卵磷脂10g、大豆油1.1g、Cremophor EL 6.4g和無(wú)水乙醇24g混合均勻形成預(yù)濃縮液。配制乳液時(shí)將預(yù)濃縮液注入500ml濃度為5％葡萄糖注射液中，形成微乳。
實(shí)施例4處方替尼泊苷 0.24gN，N-二甲基乙酰胺2g無(wú)水乙醇 5g卵磷脂 4g玉米油 0.8gCremophorEL 8g5％葡萄糖溶液500ml制法將替尼泊苷0.24g、N，N-二甲基乙酰胺、無(wú)水乙醇8g、卵磷脂4g、大豆油0.8g和CremophorEL8g混合均勻形成預(yù)濃縮液。將預(yù)濃縮液加入500ml濃度為5％的葡萄糖溶液中，震搖，形成微乳。
實(shí)施例5處方
替尼泊苷 0.24g紫杉醇 0.3g無(wú)水乙醇 5g卵磷脂 5g玉米油 1gCremophorEL 10g5％葡萄糖溶液500ml制法將替尼泊苷0.24g、紫杉醇0.3g、無(wú)水乙醇5g、卵磷脂5g、大豆油1g和CremophorEL10g混合均勻形成預(yù)濃縮液。將預(yù)濃縮液加入500ml濃度為5％的葡萄糖溶液中，震搖，形成微乳。
實(shí)施例6處方替尼泊苷 0.24g依托泊苷 0.3g無(wú)水乙醇 5g卵磷脂 5g玉米油 1gCremophorEL 10g5％葡萄糖溶液500ml制法將替尼泊苷0.24g、依托泊苷0.3g、無(wú)水乙醇5g、卵磷脂5g、大豆油1g、和CremophorEL10g混合均勻形成預(yù)濃縮液。將預(yù)濃縮液加入500ml濃度為5％的葡萄糖溶液中，震搖，形成微乳。
可以理解，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以在本發(fā)明制劑的活性組分和輔料中分別或一起加入其他藥學(xué)可接受的輔料或?qū)Ω鹘M分的比例進(jìn)行微小改變而不影響藥物制劑的基本性質(zhì)。但是，由這些改變而得到的藥物制劑及制備方法都沒(méi)有脫離本發(fā)明的精神，也落在本發(fā)明的說(shuō)明書(shū)和權(quán)利要求書(shū)的保護(hù)范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種替尼泊甙靜脈注射用乳劑，其特征是以下藥物為原料替尼泊甙，植物油，乳化劑，有機(jī)溶劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的替尼泊甙靜脈注射用乳劑，其特征是所述藥物可以是替尼泊甙、或替尼泊苷與紫杉醇、依托泊苷的混合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的替尼泊甙靜脈注射用乳劑，其特征是所述乳化劑可以是大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂、Tween 60、Pluronic F68、Cremophor EL或它們的混合物。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的替尼泊甙靜脈注射用乳劑，其特征是所述有機(jī)溶劑是甘油、無(wú)水乙醇、丙二醇、苯甲醇、N，N-二甲基乙酰胺，或它們的混合物。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的替尼泊甙靜脈注射用乳劑，其特征是所述植物油是玉米油、大豆油、芝麻油、紅花油，或它們的混合物。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的替尼泊甙靜脈注射用乳劑，其特征是將替尼泊甙溶解于植物油，乳化劑，有機(jī)溶劑組成的預(yù)乳化濃縮液中。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的替尼泊甙靜脈注射用乳劑預(yù)乳化濃縮液，其特征是可注入濃度為5％的葡萄糖注射液自動(dòng)乳化形成均一的乳劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求1的替尼泊甙靜脈注射用乳劑的平均粒徑大小在10-10000nm范圍。
9.根據(jù)權(quán)利要求2的替尼泊甙靜脈注射用乳劑，其特征是所述藥物占處方重量百分比范圍在0.05-5％。
10.根據(jù)權(quán)利要求3的替尼泊甙靜脈注射用乳劑，其特征是所述乳化劑占處方重量百分比范圍在20-80％。
11.根據(jù)權(quán)利要求4的替尼泊甙靜脈注射用乳劑，其特征是所述有機(jī)溶劑占處方重量百分比范圍在20-70％。
12.根據(jù)權(quán)利要求5的替尼泊甙靜脈注射用乳劑，其特征是所述植物油占處方重量百分比范圍在0.1-5％。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種替尼泊苷靜脈注射用微乳新制劑的配方及制備，包含活性組分和輔料，其中所述活性組分為替尼泊苷，或替尼泊苷與紫杉醇、依托泊苷的混合物，輔料由植物油，乳化劑或助乳化劑，有機(jī)溶劑組成。將活性組分與輔料制備成預(yù)濃縮液，臨床使用時(shí)加到濃度為5％的葡萄糖溶液中得到可供靜脈注射用微乳。本發(fā)明的制劑具有使用方便，與原市售制劑生物利用度相等，且減少過(guò)敏反應(yīng)毒性的特點(diǎn)。
文檔編號(hào)A61K9/107GK101015563SQ200610167688
公開(kāi)日2007年8月15日 申請(qǐng)日期2006年12月22日 優(yōu)先權(quán)日2006年12月22日
發(fā)明者張烜, 朱靜, 吳科春, 曹軼, 劉祥瑞, 孫葭北, 張強(qiáng) 申請(qǐng)人:北京大學(xué)