專利名稱：含抗結(jié)核病藥物的緩釋劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種含抗結(jié)核病藥物的緩釋劑，屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域。具體而言，本發(fā)明提供一種含環(huán)絲氨酸和/或喹諾酮類抗結(jié)核藥物的緩釋劑，主要為緩釋注射劑和緩釋植入劑。該緩釋劑局部應(yīng)用為主，可于結(jié)核病灶局部獲得并維持有效藥物濃度。
背景技術(shù)：
以肺結(jié)核為代表的結(jié)核病本來就是一種嚴(yán)重影響人民健康的疾病，在全世界廣泛流行，奪去了數(shù)億人的生命，人們稱之為白色瘟疫，曾有“十癆九死”之說。
隨著鏈霉素等抗癆藥的問世，結(jié)核病成了一種可治療的疾病。然而隨著人們對其嚴(yán)重性的忽視、相關(guān)防治方面投入的明顯不足、治療不規(guī)范，由此引起的結(jié)核菌耐藥的產(chǎn)生已經(jīng)成為成功治療該病的最棘手的問題。
由于它的傳染性非常強(qiáng)，其發(fā)病率近年每年全球以1％的速度在增長。在世界衛(wèi)生組織確定的全球需要重點(diǎn)控制的三種疾病中，結(jié)核病僅次于艾滋病，居瘧疾之前。全球每秒鐘即有一個(gè)人受結(jié)核菌感染，每分鐘會(huì)有3到4個(gè)人因結(jié)核病死亡，目前全球平均每年仍有約300萬人死于結(jié)核病。中國的結(jié)核病目前流行非常嚴(yán)重，現(xiàn)已成為世界上22個(gè)結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國家之一；目前中國約有六百萬結(jié)核病人，占全球患病人數(shù)的三分之一，居世界第二位僅次于印度；在中國耐藥病人占了全球的四分之一。全國每年至少有150萬例新病人發(fā)生，其中傳染性病人超過65萬例，每年因結(jié)核病死亡的人數(shù)高達(dá)二十五萬，且多為中青年。其作為單一傳染病已成為頭號(hào)殺手。結(jié)核病需要六個(gè)月以上的連續(xù)用藥才能取得較滿意的預(yù)后。由于治療時(shí)間較長，不少病人可能就忘了及時(shí)定量服藥，因而常造成耐藥性的產(chǎn)生。而耐藥性結(jié)核病人的治療一方面是時(shí)間的拖長，另一方面就是多種藥物聯(lián)合化療應(yīng)用費(fèi)用昂貴。如在中國需兩三萬元以上。因此，研究開發(fā)新的有效的防治結(jié)核病的制劑或方法已經(jīng)成為急切解決的世界性課題。
目前，有不少新的抗結(jié)核藥物已經(jīng)顯示出較好的療效，然而對耐多藥結(jié)核病(MDR-TB)效果不夠理想。因?yàn)閷芏嗦圆≡?，特別是局部病灶而言，常規(guī)療法給藥很難獲得有效殺菌濃度。加大劑量或長期服用藥物又會(huì)有很多副作用。

發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種含抗結(jié)核病藥物的緩釋劑，具體而言，是一種含環(huán)絲氨酸和/或喹諾酮類藥物的抗結(jié)核病藥物緩釋劑，主要為緩釋注射劑和緩釋植入劑。
環(huán)絲氨酸和/或喹諾酮類藥物作為常用的抗結(jié)核病藥物，國外主要為口服制劑，即使一般的注射劑也不夠理想，因?yàn)椴荒苡诓≡畈课猾@得有效藥物濃度。而且在應(yīng)用過程中明顯的全身毒性和耐藥的產(chǎn)生極大地限制了該藥的應(yīng)用。
本發(fā)明發(fā)現(xiàn)，將抗結(jié)核病藥物制成緩釋劑(主要為緩釋注射劑和緩釋植入劑)不僅能夠極大地提高局部的藥物濃度、降低藥物在循環(huán)系統(tǒng)中的濃度、降低藥物對正常組織的毒性，還能夠極大方便藥物應(yīng)用、減少療程、縮短治療時(shí)間、減少藥物的并發(fā)癥、降低病人的費(fèi)用、減少藥物耐受。以上意外發(fā)現(xiàn)構(gòu)成本發(fā)明的主要內(nèi)容。
本發(fā)明藥物緩釋劑的一種形式是緩釋注射劑，由緩釋微球和溶媒組成。具體而言，該緩釋注射劑由以下成分組成(a)緩釋微粒，由重量百分比如下的成分組成抗結(jié)核病藥物1-70％緩釋輔料30-99％助懸劑 0.0-30％以上為重量百分比和(b)溶媒，為普通溶媒或含助懸劑的特殊溶媒。
其中，抗結(jié)核病藥物選自環(huán)絲氨酸和/或喹諾酮類藥物；緩釋輔料選自聚苯丙生、雙脂肪酸與癸二酸共聚物(PFAD-SA)、聚(芥酸二聚體-癸二酸)[P(EAD-SA)]、聚(富馬酸-癸二酸)[P(FA-SA)]、乙烯乙酸乙烯酯共聚物(EVAc)、聚乳酸(PLA)、聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物(PLGA)、木糖醇、低聚糖、軟骨素、甲殼素、透明質(zhì)酸、膠原蛋白、明膠和白蛋膠之一或其組合；助懸劑選自羧甲基纖維素鈉、(碘)甘油、二甲硅油、丙二醇、卡波姆、甘露醇、山梨醇、表面活性物質(zhì)、土溫20、土溫40和土溫80之一或其組合。
喹諾酮類藥物如但不限于，氧氟沙星、環(huán)丙沙星、司帕沙星。本發(fā)明抗結(jié)核病藥物可選自環(huán)絲氨酸和/或喹諾酮類藥物中的一種或數(shù)種。
上述抗結(jié)核病藥物在組合物中所占的比例因具體情況而定，可為1％-70％，以2％-50％為佳，5％-40％為最佳。
本發(fā)明抗結(jié)核緩釋微球中的有效成分及緩釋輔料的重量百分比優(yōu)選如下抗結(jié)核病藥物2-50％
緩釋輔料50-98％助懸劑 0.0-30％緩釋輔料選自聚苯丙生、雙脂肪酸與癸二酸共聚物(PFAD-SA)、聚(芥酸二聚體-癸二酸)、聚(富馬酸-癸二酸)、乙烯乙酸乙烯酯共聚物、聚乳酸、聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物、透明質(zhì)酸、膠原蛋白或明膠。
本發(fā)明緩釋微球中的有效成分及重量百分比最優(yōu)選如下(1)5-40％的環(huán)絲氨酸、氧氟沙星、環(huán)丙沙星或司帕沙星；(2)5-40％的環(huán)絲氨酸與5-40％的氧氟沙星、環(huán)丙沙星或司帕沙星的組合；(3)5-40％的氧氟沙星與5-40％的環(huán)丙沙星或司帕沙星的組合；或(4)5-40％的環(huán)丙沙星與5-40％的司帕沙星的組合。
本發(fā)明緩釋微球中緩釋輔料及其的重量百分比最優(yōu)選如下(1)55-90％的PLA；(2)50-90％的PLGA；(3)50-85％的聚苯丙生；(4)55-90％的雙脂肪酸與癸二酸共聚物；或(5)55-90％的EVAc。
以上緩釋微球與含羧甲基纖維素鈉、(碘)甘油、二甲硅油、丙二醇、卡波姆、甘露醇、山梨醇、表面活性物質(zhì)、土溫20、土溫40或土溫80的助懸劑的溶媒一起制成緩釋注射劑。其中羧甲基纖維素鈉在溶媒中的濃度可為0.1-5％，但以0.5-3％為優(yōu)選，以1-2％為最優(yōu)選。
聚乳酸的分子量峰值可為，但不限于，5000-100,000，但以20,000-60,000為優(yōu)選，以30,000-50,000為最優(yōu)選；聚乙醇酸的分子量可為，但不限于，5000-100,000，但以20,000-60,000為優(yōu)選，以30,000-50,000為最優(yōu)選；以上聚羥基酸可單選或多選。當(dāng)單選時(shí)，以聚乳酸(PLA)或羥基羧酸和乙醇酸的共聚物(PLGA)為優(yōu)選，共聚物的分子量可為，但不限于，5000-100,000，但以20,000-60,000為優(yōu)選，以30,000-50,000為最優(yōu)選；當(dāng)多選時(shí)，以高分子多聚物或不同高分子多聚物組成的復(fù)合多聚物或共聚物為優(yōu)選，以含不同分子量聚乳酸或癸二酸的復(fù)合多聚物或共聚物為最優(yōu)選，如，但不限于，分子量為1000到30000的聚乳酸與分子量為20000到50000的聚乳酸混合、分子量為10000到30000的聚乳酸與分子量為30000到80000的PLGA混合、分子量為20000到30000的聚乳酸與癸二酸混合、分子量為30000到80000的PLGA與癸二酸混合。
在各種高分子聚合物中，以聚乳酸、癸二酸、含聚乳酸或葵二酸的高分子多聚物的混合物或共聚物為首選，混合物和共聚物可選自，但不限于，PLA、PLGA、乙醇酸和羥基羧酸的混合物、葵二酸與芳香聚酐或脂肪族聚酐的混合物或共聚物。乙醇酸和羥基羧酸的共混比例是10/90-90/10(重量)，最好是25/75-75/25(重量)。共混的方法是任意的。乙醇酸和羥基羧酸共聚時(shí)的含量分別為重量百分比10-90％和90-10％。芳香聚酐的代表物是聚苯丙生[聚(1，3-二(對羧基苯氧基)丙烷-癸二酸)(p(CPP-SA))、雙脂肪酸-癸二酸共聚物(PFAD-SA)]、聚(芥酸二聚體-癸二酸)[P(EAD-SA)]和聚(富馬酸-癸二酸)[P(FA-SA)]等。對羧苯氧基丙烷(p-CPP)與癸二酸共聚時(shí)的含量分別為重量百分比10-60％和20-90％，共混重量比是10-40∶50-90，最好是重量比15-30∶65-85。
除上述輔料外，還可選用其他物質(zhì)見美國專利(專利號(hào)4757128；4857311；4888176；4789724)及《藥用輔料大全》(第123頁，四川科學(xué)技術(shù)出版社1993年出版，羅明生和高天惠主編)中已有詳細(xì)描述。另外，中國專利(申請?zhí)?6115937.5；91109723.6；9710703.3；01803562.0)及美國發(fā)明專利(專利號(hào)5,651,986)也列舉了某些藥用輔料，包括充填劑、增溶劑、吸收促進(jìn)劑、成膜劑、膠凝劑、制(或致)孔劑、賦型劑或阻滯劑等。
為調(diào)節(jié)藥物釋放速度或改變本發(fā)明的其它特性，可以改變聚合物的單體成分或分子量、添加或調(diào)節(jié)藥用輔料的組成及配比，添加水溶性低分子化合物，如，但不限于，各種糖或鹽等。其中糖可為，但不限于，木糖醇、低聚糖、(硫酸)軟骨素及甲殼素等，其中鹽可為，但不限于，鉀鹽和鈉鹽等。
緩釋注射劑中，藥物緩釋系統(tǒng)可制成微球、亞微球、微乳、納米球、顆粒或球形小丸，然后與注射溶媒混合后制成注射劑使用。在各種緩釋注射劑中以混懸型緩釋注射劑為優(yōu)選，混懸型緩釋注射劑是將含抗結(jié)核成分的藥物緩釋系統(tǒng)懸浮于注射液中所得的制劑，所用的輔料為上述緩釋輔料中的一種或其組合，所用溶媒為普通溶媒或含助懸劑的特殊溶媒。普通溶媒為，但不限于，蒸餾水、注射用水、生理沖液、無水乙醇或各種鹽配制的緩沖液。助懸劑的目的在于有效懸浮含藥微球，從而利于注射之用。
助懸劑選自羧甲基纖維素鈉、(碘)甘油、二甲硅油、丙二醇、卡波姆、甘露醇、山梨醇、表面活性物質(zhì)、土溫20、土溫40和土溫80之一或其組合。
助懸劑在普通溶媒中的含量因其的特性而定，可為0.1-30％因具體情況而定。優(yōu)選助懸劑的組成為A)0.5-5％羧甲基纖維素鈉+0.1-0.5％土溫80；或B)5-20％甘露醇+0.1-0.5％土溫80；或。
C)0.5-5％羧甲基纖維素鈉+5-20％山梨醇+0.1-0.5％土溫80。
緩釋注射劑的制備方法是任意的，可用若干種方法制備如，但不限于，混合法、熔融法、溶解法、噴霧干燥法制備微球、溶解法結(jié)合冷凍(干燥)粉碎法制成微粉、脂質(zhì)體包藥法及乳化法等。其中以溶解法(即溶劑揮發(fā)法)、干燥法、噴霧干燥法和乳化法為優(yōu)選。微球則可用于制備上述各種緩釋注射劑，其方法是任意的。所用微球的粒徑范圍可在5-400um之間，以10-300um之間為優(yōu)選，以20-200um之間為最優(yōu)選。
微球還可用于制備其他緩釋注射劑，如凝膠注射劑、凝膠緩釋注射劑、嵌段共聚物膠束注射劑。其中，嵌段共聚物膠束由疏水-親水嵌段共聚物在水溶液中形成，具有球形內(nèi)核-外殼結(jié)構(gòu)，疏水嵌段形成內(nèi)核，親水嵌段形成外殼。載藥膠束注射進(jìn)入體內(nèi)達(dá)到控制藥物釋放或靶向治療的目的。所用藥物載體為上述任意一種或其組合。其中優(yōu)選分子量為1000-15000的聚乙二醇(PEG)作為膠束共聚物的親水嵌段，優(yōu)選生物降解聚合物(如PLA、聚丙交酯、聚己內(nèi)酯及其共聚物(分子量1500-25000))作為膠束共聚物的疏水嵌段。嵌段共聚物膠束的粒徑范圍可在10-300um之間，以20-200um之間的為優(yōu)選。凝膠注射劑系將生物降解聚合物(如PLA、PLGA或DL-LA和ε-己內(nèi)酯共聚物)溶于某些兩親性溶媒，再加入藥物與之混溶(或混懸)后形成流動(dòng)性較好的凝膠，可經(jīng)局部注射。一旦注入，兩親性溶媒很快擴(kuò)散至體液，而體液中的水分則滲入凝膠，使聚合物固化，緩慢釋放藥物。
本發(fā)明發(fā)現(xiàn)影響藥物和/或緩釋微球懸浮和/或注射的關(guān)鍵因素是溶媒的黏度，黏度越大，懸浮效果越好，可注射性越強(qiáng)。這種意外發(fā)現(xiàn)構(gòu)成了本發(fā)明的主要指數(shù)特征之一。溶媒的黏度取決于助懸劑的黏度，助懸劑的黏度為100cp-3000cp(20℃-30℃時(shí))，優(yōu)選1000cp-3000cp(20℃-30℃時(shí))，最優(yōu)選1500cp-3000cp(20℃-30℃時(shí))。按照此條件所制得的溶媒的黏度為10cp-650cp(20℃-30℃時(shí))，優(yōu)選20cp-650cp(20℃-30℃時(shí))，最優(yōu)選60cp-650cp(20℃-30℃時(shí))。
注射劑的制備有多種方法，一種是將助懸劑為“0”的緩釋微粒(A)直接混于特殊溶媒中，得到相應(yīng)的緩釋微粒注射劑；另一種是將助懸劑不為“0”的緩釋微粒(A)混于特殊溶媒或普通溶媒中，得到相應(yīng)的緩釋微粒注射劑；再一種是將緩釋微粒(A)混于普通溶媒中，然后加入助懸劑混勻，得到相應(yīng)的緩釋微粒注射劑。除外，還可先將緩釋微粒(A)混于特殊溶媒中制得相應(yīng)的混懸液，然后用真空干燥等辦法去除混懸液中的水分，之后再用特殊溶媒或普通溶媒混懸，得到相應(yīng)的緩釋微粒注射劑。以上方法只是用于說明而非限制本發(fā)明。值得注意的是，懸浮藥物或緩釋微球(或微囊)在注射劑中的濃度因具體需要而定，可為，但不限于，10-400mg/ml，但以30-300mg/ml為優(yōu)選，以50-200mg/ml最優(yōu)選。注射劑的黏度為50cp-1000cp(20℃-30℃時(shí))，優(yōu)選100cp-1000cp(20℃-30℃時(shí))，最優(yōu)選200cp-650cp(20℃-30℃時(shí))。此黏度適用于18-22號(hào)注射針頭和特制的內(nèi)徑更大的(至3毫米)注射針頭。
緩釋微球還可用于制備緩釋植入劑，所用的藥用輔料可為上述藥用輔料中的任何一種或多種物質(zhì)，但以水溶性高分子聚合物為主選，在各種高分子聚合物中，以聚乳酸、葵二酸、含聚乳酸或葵二酸的高分子多聚物的混合物或共聚物為首選，混合物和共聚物可選自，但不限于，PLA、PLGA、PLA與PLGA的混合物、葵二酸與芳香聚酐或脂肪族聚酐的混合物或共聚物。聚乳酸(PLA)與聚乙醇酸的共混比例是10/90-90/10(重量)，最好是25/75-75/25(重量)。共混的方法是任意的。乙醇酸和乳酸共聚時(shí)的含量分別為重量百分比10-90％和90-10％。芳香聚酐的代表物是對羧苯基丙烷(p-CPP)，對羧苯基丙烷(p-CPP)與葵二酸共聚時(shí)的含量分別為重量百分比10-60％和20-90％，共混重量比是10-40∶50-90，最好是重量比15-30∶65-85。
因此，本發(fā)明緩釋劑的又一種形式是緩釋劑為緩釋植入劑。抗結(jié)核植入劑的有效成分可均勻地包裝于整個(gè)藥用輔料中，也可包裝于載體支持物中心或其表面；可通過直接擴(kuò)散和/或經(jīng)多聚物降解的方式將有效成分釋放。
緩釋植入劑的特點(diǎn)在于所用的緩釋輔料除高分子聚合物外，還含有上述任意一種或多種其它輔料。添加的藥用輔料統(tǒng)稱為添加劑。添加劑可根據(jù)其功能分為充填劑、致孔劑、賦型劑、分散劑、等滲劑、保存劑、阻滯劑、增溶劑、吸收促進(jìn)劑、成膜劑、膠凝劑等。
緩釋植入劑的主要成份可制成多種劑型。如，但不限于，膠囊、緩釋劑、植入劑、緩釋劑植入劑等；呈多種形狀，如，但不限于，顆粒劑、丸劑、片劑、散劑、顆粒劑、球形、塊狀、針狀、棒狀、柱狀及膜狀。在各種劑型中，以體內(nèi)緩慢釋放植入劑為優(yōu)選。體積大小取決于病灶的部位、大小等因素?？蔀?.1-5mm(粗)×1-10mm(長)的棒狀，也可為片狀等其它形狀。
緩釋植入劑的最佳劑型為生物相容性、可降解吸收的緩釋劑植入，可因不同臨床需要而制成各種形狀及各種劑型。其主要成份的包裝方法和步驟在美國專利中(US5651986)已有詳細(xì)描述，包括若干種制備緩釋制劑的方法如，但不限于，(i)把載體支持物粉末與藥物混合然后壓制成植入劑，即所謂的混合法；(ii)把載體支持物熔化，與待包裝的藥物相混合，然后固體冷卻，即所謂的熔融法；(iii)把載體支持物溶解于溶劑中，把待包裝的藥物溶解或分散于聚合物溶液中，然后蒸發(fā)溶劑，干燥，即所謂的溶解法；(iv)噴霧干燥法；及(v)冷凍干燥法等。
本發(fā)明緩釋植入劑的有效成分及重量百分比優(yōu)選如下抗結(jié)核病藥物2-50％
緩釋輔料50-98％助懸劑 0.0-30％緩釋植入劑的有效成分及重量百分比最優(yōu)選如下(1)5-40％的環(huán)絲氨酸、氧氟沙星、環(huán)丙沙星或司帕沙星；(2)5-40％的環(huán)絲氨酸與5-40％的氧氟沙星、環(huán)丙沙星或司帕沙星的組合；(3)5-40％的氧氟沙星與5-40％的環(huán)丙沙星或司帕沙星的組合；或(4)5-40％的環(huán)丙沙星與5-40％的司帕沙星的組合。
本發(fā)明抗結(jié)核緩釋微球中的緩釋輔料的重量百分比優(yōu)選如下(1)55-95％的PLA；(2)50-98％的PLGA；(3)50-95％的聚苯丙生；(4)55-90％的雙脂肪酸與癸二酸共聚物；或(5)55-90％的EVAc。
除此之外，所選的輔料還可為上述任意一種以上的組合。
本發(fā)明可以用于制備治療人及動(dòng)物的各種結(jié)核的藥物制劑，主要為緩釋注射劑或緩釋植入劑。所制備的藥物制劑雖然可以用于全身結(jié)核如肺結(jié)核的治療，但以治療局部病灶為優(yōu)選。常見的局部病灶或稱之為肺外結(jié)核主要包括結(jié)核球、淋巴結(jié)核、骨關(guān)節(jié)結(jié)核、滑膜結(jié)核、結(jié)核性骨髓炎、腎結(jié)核、皮膚結(jié)核、腸結(jié)核、乳腺結(jié)核、生殖器結(jié)核(輸卵管、子宮內(nèi)膜、睪丸、附睪)、肛門結(jié)核、甲狀腺結(jié)核、心包結(jié)核、胸壁結(jié)核、結(jié)核瘺道、胸膜結(jié)核等。除此之外，局部病灶還包括慢性纖維空洞性肺結(jié)核及因結(jié)核引起的或合并的慢性病變，如但不限于，重癥褥瘡、頑固性皮膚潰瘍、糖尿病足、股骨頭壞死和老年前列腺類疾病等。
給藥途徑取決于多種因素，為于結(jié)核所在部位獲得有效濃度，藥物可經(jīng)多種途徑給予，如皮下、腔內(nèi)(如腹腔、胸腔及椎管內(nèi))、病灶周或病灶內(nèi)注射或放置、淋巴結(jié)內(nèi)及骨髓內(nèi)注射，但緩釋植入劑以病灶局部注射(緩釋注射劑)或放置(緩釋植入劑)為優(yōu)選?？捎谑中g(shù)時(shí)或手術(shù)前后注射或放置；可經(jīng)纖支鏡等器械介入治療，如治療肺結(jié)核空洞；也可經(jīng)皮穿刺病灶內(nèi)給藥介入治療；還可關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射或放置；可與全身化療同時(shí)或前后分開應(yīng)用，但局部應(yīng)用前后最好有一周到數(shù)月的全身抗結(jié)核治療。
給藥劑量因藥物組成不同而異，但藥物總量可為常規(guī)途徑日給藥量的10％到200％不等。如環(huán)絲氨酸為0.5～20毫克/公斤，氧氟沙星為0.75～30毫克/公斤或0.1-1.6g/d，環(huán)丙沙星為0.1-3g/d。當(dāng)兩種藥物聯(lián)合應(yīng)用時(shí)，每一種藥物的劑量不要超過其常規(guī)途徑日給藥量的100％。如環(huán)絲氨酸為2.5～10毫克/公斤，氧氟沙星為7.5～15毫克/公斤或0.6-0.8g/d，環(huán)丙沙星為1.0-1.5g/d。若病灶沒有完全清除或改善，可考慮20到40天后再次放置或注射緩釋劑。為防止病灶內(nèi)結(jié)核菌播散，每次局部給藥前后應(yīng)配以全身給藥。
本發(fā)明所制的緩釋注射劑或緩釋植入劑中還可加入其它藥用成分，如，但不限于，抗菌素、止疼藥、抗凝藥、止血藥等。
通過如下試驗(yàn)和實(shí)施例對本發(fā)明的技術(shù)方法作進(jìn)一步的描述試驗(yàn)1、不同方式應(yīng)用抗結(jié)核病藥物(環(huán)絲氨酸)后的局部藥物濃度比較以大白鼠為試驗(yàn)對象，將其分組后分別經(jīng)下列不同方式接受等量環(huán)絲氨酸(10毫克)組1，腹腔注射普通環(huán)絲氨酸注射劑；組2，季肋部皮下注射普通環(huán)絲氨酸注射劑；組3，季肋部皮下注射環(huán)絲氨酸緩釋注射劑；組4，季肋部皮下放置環(huán)絲氨酸緩釋植入劑。一周、兩周、三周后分別測定局部給藥處藥物濃度。結(jié)果表明，經(jīng)不同方式應(yīng)用后的局部藥物濃度差異顯著，局部給藥能夠明顯提高，并有效維持給藥部位的有效藥物濃度。其中以局部放置緩釋植入劑和注射緩釋注射劑的效果最好。然而，局部注射緩釋注射劑操作最方便、容易。這一發(fā)現(xiàn)構(gòu)成本發(fā)明的重要特征。以下的相關(guān)試驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)了這一點(diǎn)。
試驗(yàn)2、不同方式應(yīng)用抗結(jié)核病藥物后的體內(nèi)抑菌作用比較以大白鼠為試驗(yàn)對象，將2×105個(gè)結(jié)核桿菌注射于其股骨骨髓腔內(nèi)，一周后按照試驗(yàn)1的分組(10只/組)給于等量環(huán)絲氨酸治療。隨后檢查局部紅腫等炎癥變化，三十天后處死動(dòng)物并取局部骨髓檢菌。結(jié)果表明，注射環(huán)絲氨酸緩釋注射劑和放置環(huán)絲氨酸緩釋植入劑組效果最好，局部紅腫在治療后第一周開始明顯縮小，所有動(dòng)物無死亡。在腹腔注射普通環(huán)絲氨酸注射劑組，70％動(dòng)物20天內(nèi)死亡；在局部注射普通環(huán)絲氨酸注射劑組，20％動(dòng)物20天內(nèi)死亡，但50％動(dòng)物30天內(nèi)死亡。比較抑菌效果表明，經(jīng)不同方式應(yīng)用后的作用差異顯著，局部給藥能夠明顯提高并有效維持所在部位的有效藥物濃度，其中以局部放置緩釋植入劑和注射緩釋注射劑的效果最好。不過，注射緩釋注射劑操作最方便、容易。不僅療效好，毒副作用也小。
試驗(yàn)3、不同途徑應(yīng)用環(huán)絲氨酸的體內(nèi)抑菌作用比較以大白鼠為試驗(yàn)對象，重復(fù)試驗(yàn)2，結(jié)果見表1表1
以上結(jié)果表明，抗結(jié)核病藥物環(huán)絲氨酸經(jīng)不同途徑給藥的抑菌作用不同，以局部應(yīng)用的效果為好(P＜0.05)，其中局部注射環(huán)絲氨酸緩釋注射劑和局部置環(huán)絲氨酸緩釋植入劑的效果更好。
試驗(yàn)4、不同途徑應(yīng)用環(huán)絲氨酸的體內(nèi)抑菌作用比較以大白鼠為試驗(yàn)對象，重復(fù)試驗(yàn)3，但觀察動(dòng)物至給藥后60天，結(jié)果見表2表2
以上結(jié)果表明，抗結(jié)核病藥物環(huán)絲氨酸經(jīng)不同途徑給藥的抑菌作用不同，以局部應(yīng)用的效果為好，其中局部注射環(huán)絲氨酸緩釋注射劑和局部放置環(huán)絲氨酸緩釋植入劑的效果更好。但局部放置環(huán)絲氨酸緩釋植入劑的效果比局部注射環(huán)絲氨酸緩釋注射劑的效果為好(P＜0.01)。
試驗(yàn)5、不同途徑應(yīng)用環(huán)絲氨酸的體內(nèi)抑菌作用比較以大白鼠為試驗(yàn)對象，重復(fù)試驗(yàn)3，但觀察動(dòng)物至給藥后60天，結(jié)果見表3表3
試驗(yàn)6、不同途徑應(yīng)用環(huán)絲氨酸的體內(nèi)抑菌作用比較以大白鼠為試驗(yàn)對象，重復(fù)試驗(yàn)3，但觀察動(dòng)物至給藥后60天，結(jié)果見表4表4
實(shí)驗(yàn)5和6的結(jié)果表明，抗結(jié)核病藥物經(jīng)不同途徑給藥的抑菌作用不同，以局部應(yīng)用的效果為好，其中局部注射緩釋注射劑和局部放置緩釋植入劑的效果更好。但局部放置緩釋植入劑的效果比局部注射緩釋注射劑的效果為好(P＜0.01)。
同樣明顯的治療效果還見于局部放置及局部注射的司帕沙星。
試驗(yàn)7、不同藥物聯(lián)合的增效作用取2×105個(gè)結(jié)核桿菌培養(yǎng)24小時(shí)后用同濃度(5ug/ml)不同藥物處理24小時(shí)，檢測細(xì)胞生長抑制率(％)，結(jié)果見表5表5不同藥物聯(lián)合的增效作用(抑制率％)
實(shí)驗(yàn)7結(jié)果表明，抗結(jié)核病藥環(huán)絲氨酸及喹諾酮類藥物單獨(dú)應(yīng)用均有明顯的抑菌作用，但聯(lián)合應(yīng)用的效果為好(P＜0.01)。
總之，局部放置及局部注射環(huán)絲氨酸或喹諾酮類藥物緩釋劑對細(xì)菌生長均有明顯的抑制作用，所表現(xiàn)出的顯著的治療作用與其局部獲得的有效藥物濃度有關(guān)。因此，本發(fā)明所述的緩釋劑的有效成分為環(huán)絲氨酸或任意一種喹諾酮類藥物及其組合。
含有以上有效成分的藥物可制成緩釋微球，進(jìn)而制成緩釋注射劑和植入劑，其中以與含助懸劑的特殊溶媒組合形成的混懸注射劑為優(yōu)選。
緩釋注射劑或緩釋植入劑還可通過以下實(shí)施方式得以進(jìn)一步說明。上述實(shí)施例及以下實(shí)施例只是對本發(fā)明作進(jìn)一步說明，并非對其內(nèi)容和使用作任何限制。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1.
將90、90和80mg聚苯丙生(對羧苯基丙烷(p-CPP)∶葵二酸(SA)為20∶80)共聚物分別放入(甲)、(乙)及(丙)三個(gè)容器中，然后每個(gè)中加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，分別加入10m環(huán)絲氨酸、l0mg氧氟沙星、l0mg環(huán)絲氨酸和l0mg氧氟沙星，重新?lián)u勻后用噴霧干燥法制備含10％環(huán)絲氨酸、10％氧氟沙星及10％環(huán)絲氨酸和10％氧氟沙星的注射用微球。然后將微球懸浮于含15％甘露醇的生理鹽水中，制得相應(yīng)的混懸型緩釋注射劑。注射劑的黏度為300cp-600cp(20℃-30℃時(shí))。該緩釋注射劑在體外生理鹽水中的釋藥時(shí)間為15-20天，在小鼠皮下的釋藥時(shí)間為30-40天左右。
實(shí)施例2.
加工成緩釋注射劑的方法步驟與實(shí)施例1相同，但所不同的是所含抗結(jié)核有效成分及其重量百分比為(1)5-40％的環(huán)絲氨酸、氧氟沙星、環(huán)丙沙星或司帕沙星；(2)5-40％的環(huán)絲氨酸與5-40％的氧氟沙星、環(huán)丙沙星或司帕沙星的組合；
(3)5-40％的氧氟沙星與5-40％的環(huán)丙沙星或司帕沙星的組合；或(4)5-40％的環(huán)丙沙星與5-40％的司帕沙星的組合。
實(shí)施例3.
將70mg分子量峰值為65000的聚乳酸(PLGA，75∶25)分別放入(甲)、(乙)及(丙)三個(gè)容器中，然后每個(gè)中加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，分別向三個(gè)容器中加入30mg環(huán)絲氨酸、30mg環(huán)丙沙星、15mg環(huán)絲氨酸和15mg環(huán)丙沙星，重新?lián)u勻后用噴霧干燥法制備含30％環(huán)絲氨酸、30％環(huán)丙沙星、15％環(huán)絲氨酸和15％環(huán)丙沙星的注射用微球。將干燥后的微球懸浮于含1.5％羧甲基纖維素鈉的生理鹽水中，制得相應(yīng)的混懸型緩釋注射劑。注射劑的黏度為300cp-600cp(20℃-30℃時(shí))。該緩釋注射劑在體外生理鹽水中的釋藥時(shí)間為10-15天，在小鼠皮下的釋藥時(shí)間為20-30天左右。
實(shí)施例4加工成緩釋注射劑的方法步驟與實(shí)施例3相同，但所不同的是所含抗結(jié)核有效成分及其重量百分比為(1)5-40％的環(huán)絲氨酸、氧氟沙星、環(huán)丙沙星或司帕沙星；(2)5-40％的環(huán)絲氨酸與5-40％的氧氟沙星、環(huán)丙沙星或司帕沙星的組合；(3)5-40％的氧氟沙星與5-40％的環(huán)丙沙星或司帕沙星的組合；或(4)5-40％的環(huán)丙沙星與5-40％的司帕沙星的組合。
實(shí)施例5.
將70mg乙烯乙酸乙烯酯共聚物(EVAc)放入容器中，加入100毫升二氯甲烷溶解混勻后，加入20毫克環(huán)絲氨酸和10毫克司帕沙星，重新?lián)u勻后用噴霧干燥法制備含20％環(huán)絲氨酸和10％司帕沙星的注射用微球。然后將微球懸浮于含5-15％山梨醇的注射液中，制得相應(yīng)的混懸型緩釋注射劑。該緩釋注射劑在體外生理鹽水中的釋藥時(shí)間為10-15天，在小鼠皮下的釋藥時(shí)間為20-30天左右。
實(shí)施例6.
加工成緩釋注射劑的方法步驟與實(shí)施例5相同，但所不同的是所含抗結(jié)核有效成分為10-20％的環(huán)絲氨酸與10-20％的氧氟沙星、環(huán)丙沙星或司帕沙星的組合。
實(shí)施例7.
將70mg聚苯丙生(對羧苯基丙烷(p-CPP)∶葵二酸(SA)為20∶80)共聚物放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入20mg氧氟沙星和10mg環(huán)丙沙星，重新?lián)u勻后用噴霧干燥法制備含20％氧氟沙星與10％環(huán)丙沙星的注射用微球。然后將微球懸浮于含1.5％羧甲基纖維素鈉和0.5％吐溫80的生理鹽水中，制得相應(yīng)的混懸型緩釋注射劑。該緩釋注射劑在體外生理鹽水中的釋藥時(shí)間為10-15天，在小鼠皮下的釋藥時(shí)間為20-30天左右。
實(shí)施例8.
加工成緩釋注射劑的方法步驟與實(shí)施例7相同，但所不同的是所含抗結(jié)核有效成分為10-20％的氧氟沙星與10-20％的環(huán)丙沙星或司帕沙星的組合。
實(shí)施例9將70mg聚苯丙生(對羧苯基丙烷(p-CPP)∶葵二酸(SA)為20∶80)共聚物放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入15mg氧氟沙星和15mg司帕沙星，重新?lián)u勻后用噴霧干燥法制備含15％氧氟沙星和15％司帕沙星注射用微球。然后將微球懸浮于含1.5％羧甲基纖維素鈉和15％山梨醇和0.2％吐溫80的生理鹽水中，制得相應(yīng)的混懸型緩釋注射劑。該緩釋注射劑在體外生理鹽水中的釋藥時(shí)間為10-15天，在小鼠皮下的釋藥時(shí)間為20-30天左右。
實(shí)施例10加工成緩釋注射劑的方法步驟與實(shí)施例9相同，但所不同的是所含抗結(jié)核有效成分為15％的氧氟沙星與15％的司帕沙星的組合。
實(shí)施例11將70mg聚苯丙生(對羧苯基丙烷(p-CPP)∶葵二酸(SA)為20∶80)共聚物放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入10mg環(huán)丙沙星和20mg司帕沙星，重新?lián)u勻后用噴霧干燥法制備含10％環(huán)丙沙星和20％司帕沙星的注射用微球。然后將微球經(jīng)壓片法制得相應(yīng)的緩釋植入劑。該緩釋植入劑在體外生理鹽水中的釋藥時(shí)間為10-15天，在小鼠皮下的釋藥時(shí)間為30-40天左右。
實(shí)施例12加工成緩釋植入劑的方法步驟與實(shí)施例11相同，但所不同的是所含抗結(jié)核有效成分為10-20％的環(huán)丙沙星與10-20％的司帕沙星的組合。
實(shí)施例13將70mg分子量峰值為45000的聚乳酸(PLGA，50∶50)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻后，加入10mg環(huán)絲氨酸和20mg利福噴汀，重新?lián)u勻后用噴霧干燥法制備含10％環(huán)絲氨酸和20％利福噴汀的注射用微球。然后將微球經(jīng)壓片法制得相應(yīng)的緩釋植入劑。該緩釋植入劑在體外生理鹽水中的釋藥時(shí)間為15-25天，在小鼠皮下的釋藥時(shí)間為35-50天左右。
實(shí)施例14加工成緩釋植入劑的方法步驟與實(shí)施例11、13相同，但所不同的是所含抗結(jié)核有效成分及重量百分比為(1)5-40％的環(huán)絲氨酸、氧氟沙星、環(huán)丙沙星或司帕沙星；(2)5-40％的環(huán)絲氨酸與5-40％的氧氟沙星、環(huán)丙沙星或司帕沙星的組合；(3)5-40％的氧氟沙星與5-40％的環(huán)丙沙星或司帕沙星的組合；或(4)5-40％的環(huán)丙沙星與5-40％的司帕沙星的組合。
實(shí)施例15加工成緩釋劑的方法步驟與實(shí)施例1-14相同，但所不同的是所用的緩釋輔料為下列之一或其組合a)分子量峰值為10000-30000、30000-60000、60000-100000或100000-150000的聚乳酸(PLA)；b)分子量峰值為10000-30000、30000-60000、60000-100000或100000-150000的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物(PLGA)，其中，聚乙醇酸和羥基乙酸的比例為50-95∶50-50；c)乙烯乙酸乙烯酯共聚物(EVAc)；d)10∶90、20∶80、30∶70、40∶60、50∶50或60∶40的對羧苯基丙烷(p-CPP)∶葵二酸(SA)共聚物(聚苯丙生)；e)雙脂肪酸與癸二酸共聚物；f)聚(芥酸二聚體-癸二酸)共聚物；g)聚(富馬酸-癸二酸)共聚物；h)木糖醇、低聚糖、軟骨素、甲殼素、鉀鹽、鈉鹽、透明質(zhì)酸、膠原蛋白、明膠或白蛋膠。
實(shí)施例16加工成緩釋注射劑的方法步驟與實(shí)施例1-10相同，但所不同的是所用的助懸劑分別為下列之一或其組合a)0.5-3.0％羧甲基纖維素(鈉)；b)5-15％甘露醇；c)5-15％山梨醇；d)0.1-1.5％表面活性物質(zhì)；e)0.1-0.5％吐溫20；f)(碘)甘油、二甲硅油、丙二醇或卡波姆；g)0.5-5％羧甲基纖維素鈉+0.1-0.5％土溫80；
h)5-20％甘露醇+0.1-0.5％土溫80；或i)0.5-5％羧甲基纖維素鈉+5-20％山梨醇+0.1-0.5％土溫80。
以上實(shí)施例僅用于說明，而并非局限本發(fā)明的應(yīng)用。
本發(fā)明所公開和保護(hù)的內(nèi)容見權(quán)利要求。
權(quán)利要求
1.含抗結(jié)核病藥物緩釋劑，其特征在于該抗結(jié)核病藥物緩釋劑主要用于結(jié)核病灶局部，從而將抗結(jié)核病藥物在結(jié)核病灶局部釋放，在有效獲得和維持局部有效藥物濃度的同時(shí)降低其全身毒性。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述之抗結(jié)核病藥物緩釋劑，其特征在于該抗結(jié)核病藥物緩釋劑為緩釋注射劑，由以下成分組成(A)緩釋微球，包括抗結(jié)核病藥物 1-70％緩釋輔料 30-99％助懸劑0.0-30％以上為重量百分比和(B)溶媒，為普通溶媒或含助懸劑的特殊溶媒。其中，抗結(jié)核有效成分為環(huán)絲氨酸和/或喹諾酮類藥物；助懸劑的黏度為100cp-3000cp(20℃-30℃時(shí))，選自羧甲基纖維素鈉、碘甘油、二甲硅油、丙二醇、卡波姆、甘露醇、山梨醇、表面活性物質(zhì)、土溫20、土溫40和土溫80之一或其組合。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述之抗結(jié)核緩釋注射劑，其特征在于喹諾酮類藥物選自氧氟沙星、環(huán)丙沙星、司帕沙星之一或其組合。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述之抗結(jié)核緩釋注射劑，其特征在于抗結(jié)核緩釋注射劑的抗結(jié)核有效成分及其重量百分比為(1)5-40％的環(huán)絲氨酸、氧氟沙星、環(huán)丙沙星或司帕沙星；(2)5-40％的環(huán)絲氨酸與5-40％的氧氟沙星、環(huán)丙沙星或司帕沙星的組合；(3)5-40％的氧氟沙星與5-40％的環(huán)丙沙星或司帕沙星的組合；或(4)5-40％的環(huán)丙沙星與5-40％的司帕沙星的組合。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述之抗結(jié)核緩釋注射劑，其特征在于緩釋輔料選自下列之一或其組合a)聚乳酸；b)聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；c)聚苯丙生；d)乙烯乙酸乙烯酯共聚物；e)雙脂肪酸與癸二酸共聚物；f)聚(芥酸二聚體-癸二酸)共聚物；g)聚(富馬酸-癸二酸)共聚物；h)木糖醇、低聚糖、軟骨素、甲殼素、鉀鹽、鈉鹽、透明質(zhì)酸、膠原蛋白、明膠或白蛋膠。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述之抗結(jié)核緩釋注射劑，其特征在于所用的助懸劑分別為下列之一a)0.5-3.0％羧甲基纖維素(鈉)；b)5-15％甘露醇；c)5-15％山梨醇；d)0.1-1.5％表面活性物質(zhì)；e)0.1-0.5％吐溫20；f)(碘)甘油、二甲硅油、丙二醇或卡波姆；g)0.5-5％羧甲基纖維素鈉+0.1-0.5％土溫80；h)5-20％甘露醇+0.1-0.5％土溫80；或i)0.5-5％羧甲基纖維素鈉+5-20％山梨醇+0.1-0.5％土溫80。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述之抗結(jié)核病藥物緩釋劑，其特征在于該抗結(jié)核病藥物緩釋劑為緩釋植入劑，由以下成分組成(1)抗結(jié)核病藥物1-70％(2)緩釋輔料30-99％(3)助懸劑 0.0-30％以上為重量百分比
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述之抗結(jié)核緩釋緩釋植入劑，其特征在于抗結(jié)核緩釋植入劑的抗結(jié)核有效成分及其重量百分比為(1)5-40％的環(huán)絲氨酸、氧氟沙星、環(huán)丙沙星或司帕沙星；(2)5-40％的環(huán)絲氨酸與5-40％的氧氟沙星、環(huán)丙沙星或司帕沙星的組合；(3)5-40％的氧氟沙星與5-40％的環(huán)丙沙星或司帕沙星的組合；或(4)5-40％的環(huán)丙沙星與5-40％的司帕沙星的組合。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述之抗結(jié)核緩釋植入劑，其特征在于緩釋輔料選自下列之一或其組合a)聚乳酸；b)聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物；c)聚苯丙生；d)乙烯乙酸乙烯酯共聚物；e)雙脂肪酸與癸二酸共聚物；f)聚(芥酸二聚體-癸二酸)共聚物；g)聚(富馬酸-癸二酸)共聚物；h)木糖醇、低聚糖、軟骨素、甲殼素、鉀鹽、鈉鹽、透明質(zhì)酸、膠原蛋白、明膠或白蛋膠。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述之所述之抗結(jié)核緩釋植入劑，其特征在于緩釋輔料中a)聚乳酸的分子量峰值選自10000-30000、300000-60000、60000-100000或100000-150000；b)聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物中，聚乙醇酸和羥基乙酸的比例為50-95∶50-50，分子量峰值為10000-30000、300000-60000、60000-100000或100000-150000；c)聚苯丙生中，對羧苯基丙烷∶葵二酸為10∶90、20∶80、30∶70、40∶60、50∶50或60∶40。
全文摘要
含抗結(jié)核病藥物緩釋劑為植入劑和緩釋注射劑，在結(jié)核病灶局部放置或注射該劑能將藥物緩慢釋放，在有效獲得和維持局部灶有效藥物濃度的同時(shí)降低其全身毒性。緩釋注射劑由緩釋微球和溶媒組成。緩釋微球由緩釋輔料和選自環(huán)絲氨酸、氧氟沙星、環(huán)丙沙星和/或司帕沙星的抗結(jié)核藥組成，溶媒為含助懸劑的特殊溶媒；助懸劑黏度為100cp－3000cp(20℃－30℃時(shí))，選自羧甲基纖維素鈉等；緩釋輔料選自EVAc、聚苯丙生、PLA、PLGA、聚(芥酸二聚體－癸二酸或富馬酸－癸二酸)共聚物等；緩釋植入劑可由緩釋微球或經(jīng)其他方法制成。該劑對耐多藥結(jié)核菌、結(jié)核球及淋巴、關(guān)節(jié)、腎、皮膚、腸、乳腺、生殖器等處結(jié)核、結(jié)核性骨髓炎、瘺道、空洞性肺結(jié)核等頑固性結(jié)核病變具有顯著獨(dú)特的治療效果。
文檔編號(hào)A61K47/36GK1857218SQ20061020031
公開日2006年11月8日 申請日期2006年4月4日 優(yōu)先權(quán)日2006年4月4日
發(fā)明者孫忠厚 申請人:濟(jì)南康泉醫(yī)藥科技有限公司