專利名稱：治療糖尿病的降糖甲制劑及其制備方法和質量控制方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種治療糖尿病的降糖甲制劑及其制備方法和質量控制方法，屬于中藥制藥的技術領域。
背景技術：
降糖甲片收載于中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標準，臨床應用多年，組方嚴謹，配伍合理，已收入2004年國家基本藥物目錄，臨床應用得到廣大患者的認同和歡迎，具有堅實的臨床基礎，無毒副作用，療效確切。通過市場調查，降糖甲片配合降糖藥格列齊特片銷售，可彌補西藥不能緩解的消渴癥狀，市場潛力較大。但降糖甲片的質量控制標準簡單，產(chǎn)品質量不易控制，加之片劑經(jīng)過制粒、壓片等工序，藥物在體內(nèi)的吸收要經(jīng)過崩解、顆粒溶解等過程，藥物吸收緩慢。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種治療糖尿病的降糖甲制劑及其制備方法和質量控制方法，本發(fā)明在現(xiàn)有降糖甲片的基礎上進行研究和改進，將其制備成膠囊劑、顆粒劑、水丸或滴丸劑，藥物吸收迅速，每次服用量減少；輔料用量少，生產(chǎn)工序簡化，降低了生產(chǎn)成本；并提高了質量控制標準。
本發(fā)明是這樣構成的它是用黃芪642.6g、酒炙黃精642.6g、地黃642.6g、太子參642.6g和天花粉642.6g制成的膠囊劑、顆粒劑、水丸或滴丸劑。
治療糖尿病的降糖甲制劑的制備方法為取太子參129g粉碎成細粉，剩余的太子參與黃芪、黃精、地黃和天花粉加水煎煮三次，第一次加10倍量水，煎煮2小時，第二次加8倍量水，煎煮1小時，第三次加6倍量水，煎煮1小時；合并煎液，濾過，濾液濃縮至約1050ml，加乙醇使含醇量為75％，攪勻，靜置48小時，濾過，濾液濃縮至50℃熱測相對密度為1.25～1.30的稠膏，加入太子參細粉，混勻，干燥，粉碎成細粉，加入適當輔料制成不同的制劑。
降糖甲膠囊劑是這樣制備的取太子參129g粉碎成細粉，剩余的太子參與黃芪、黃精、地黃和天花粉加水煎煮三次，第一次加10倍量水，煎煮2小時，第二次加8倍量水，煎煮1小時，第三次加6倍量水，煎煮1小時；合并煎液，濾過，濾液濃縮至約1050ml，加乙醇使含醇量為75％，攪勻，靜置48小時，濾過，濾液濃縮至50℃熱測相對密度為1.25～1.30的稠膏，加入太子參細粉，混勻，干燥，粉碎成細粉，裝腸溶膠囊，即得。
降糖甲顆粒劑是這樣制備的取太子參129g粉碎成細粉，剩余的太子參與黃芪、黃精、地黃和天花粉加水煎煮三次，第一次加10倍量水，煎煮2小時，第二次加8倍量水，煎煮1小時，第三次加6倍量水，煎煮1小時；合并煎液，濾過，濾液濃縮至約1050ml，加乙醇使含醇量為75％，攪勻，靜置48小時，濾過，濾液濃縮至50℃熱測相對密度為1.25～1.30的稠膏，加入太子參細粉，1～4倍量的糊精、適量蛋白糖或甜蜜素、適量香精，制顆粒，干燥，包裝，即得。
降糖甲水丸是這樣制備的取太子參129g粉碎成細粉，剩余的太子參與黃芪、黃精、地黃和天花粉加水煎煮三次，第一次加10倍量水，煎煮2小時，第二次加8倍量水，煎煮1小時，第三次加6倍量水，煎煮1小時；合并煎液，濾過，濾液濃縮至約1050ml，加乙醇使含醇量為75％，攪勻，靜置48小時，濾過，濾液濃縮至50℃熱測相對密度為1.25～1.30的稠膏，加入太子參細粉，混勻，干燥，粉碎成細粉，用適量水泛制成丸，干燥，即得。
降糖甲滴丸劑這樣制備取太子參與黃芪、黃精、地黃和天花粉加水煎煮三次，第一次加10倍量水，煎煮2小時，第二次加8倍量水，煎煮1小時，第三次加6倍量水，煎煮1小時；合并煎液，濾過，濾液濃縮至約1200ml，加乙醇使含醇量為75％，攪勻，靜置48小時，濾過，濾液濃縮至50℃熱測相對密度為1.25～1.30的稠膏，加入PEG6000和PEG4000 500g～600g，滴制成丸，即得。
降糖甲制劑的質量控制方法主要包括性狀、鑒別、檢查以及含量測定項目中的部分或全部，其中鑒別包括顯微觀察和對制劑中黃芪、黃精、太子參、天花粉的薄層色譜鑒別；含量測定是對制劑中黃芪所含黃芪甲苷的含量測定。
黃芪的鑒別方法是以黃芪對照藥材為對照，以氯仿∶甲醇＝8.5∶0.5為展開劑的薄層色譜法；黃精的鑒別方法是以黃精對照藥材為對照，以氯仿∶甲醇∶醋酸＝5∶4∶1為展開劑的薄層色譜法；太子參的鑒別方法是以太子參對照藥材為對照，以氯仿∶甲醇∶14％氨水溶液＝2∶3∶1為展開劑的薄層色譜法；天花粉的鑒別方法是以天花粉對照藥材為對照，以正丁醇∶乙醇∶冰醋酸∶水＝8∶2∶2∶3為展開劑的薄層色譜法。
具體的鑒別方法包括以下項目的部分或全部(1)取本制劑，置顯微鏡下觀察淀粉粒眾多，單粒五類圓形及半圓形直徑4～20μm，臍點呈裂縫狀，偶見復粒，由2～3粒集成；導管主為螺紋及網(wǎng)狀導管，直徑10～22μm；(2)取裝量差異項下的本制劑或其內(nèi)容物1.5g，加醋酸乙酯20ml，加熱回流1小時，濾過，濾液濃縮至約1ml，作為供試品溶液；另取黃芪對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典2000年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇＝8.5∶0.5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以碳酸鈉試液，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；(3)取裝量差異項下的本制劑或其內(nèi)容物2g，加乙醇20ml，加熱回流2小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加丙酮10ml使溶解，濾過，濾液濃縮至1ml，作為供試品溶液；另取黃精對照藥材2g，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典2000年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇∶醋酸＝5∶4∶1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％磷鉬酸乙醇溶液，熱風吹至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；(4)取裝量差異項下的本制劑或其內(nèi)容物3g，加甲醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水30毫升加熱溶解，用乙醚提取3次，每次30ml；水層揮去乙醚，用水飽和的正丁醇提取3次，依次為40、30、20ml，合并正丁醇，加0.5毫升氨水，再以正丁醇飽和的水洗至中性，水浴蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取太子參對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典2000年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5～10μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇∶14％氨水溶液＝2∶3∶1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％茚三酮溶液，105℃加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；(5)取裝量差異項下的本制劑或其內(nèi)容物2g，加甲醇25ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液濃縮至1ml，作為供試品溶液；另取天花粉對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典2000年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5～10μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正丁醇∶乙醇∶冰醋酸∶水＝8∶2∶2∶3為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％茚三酮溶液，105℃加熱至斑點顯色清晰；置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
黃芪中黃芪甲苷的含量測定方法是以黃芪甲苷對照品為對照，以乙腈∶水＝36∶64為流動相的高效液相色譜法。
具體的含量測定方法為照中國藥典2000年版一部附錄VI D高效液相色譜法測定系統(tǒng)適應用性試驗用碳十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈∶水＝36∶64為流動相；用蒸發(fā)光散射檢測器檢測；理論塔板數(shù)按黃芪甲苷峰計應不低于6000；對照品溶液的制備 精密稱取黃芪甲苷對照品適量，加甲醇溶解，制成每1ml含0.40mg的溶液，即得；
供試品溶液的制備 取裝量差異項下的本制劑或其內(nèi)容物6g，精密稱定，置具塞三角燒瓶中，精密加甲醇50ml，稱定重量，在250W、29～34kHz條件下超聲處理1小時，放冷，加甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密吸取續(xù)濾液25ml，蒸干，殘渣用加水飽和的正丁醇50ml溶解，以氨試液20ml洗滌，分取正丁醇液，蒸干，殘渣用甲醇溶解并定容至5ml，搖勻，即得；測定法精密吸取對照品溶液各10μl、20μl，供試品溶液10μl，注入液相色譜儀，測定，用外標兩點法自然對數(shù)方程計算，即得；本膠囊劑每粒含黃芪以黃芪甲苷C41H68O14計，不得少于0.13mg。顆粒劑每袋含黃芪以黃芪甲苷C41H68O14計，不得少于0.2～0.4mg；水丸每1g含黃芪以黃芪甲苷C41H68O14計，不得少于0.3mg；滴丸每1g含黃芪以黃芪甲苷C41H68O14計，不得少于0.13mg。
本發(fā)明所述質量控制方法包括性狀膠囊劑為腸溶膠囊劑，其內(nèi)容物為棕色粉末；氣微香，味甘苦；對于顆粒劑，藥物為棕色顆粒；氣微香，味甘苦；對于水丸，藥物為棕黑色丸；氣微香，味甘苦；對于滴丸劑，藥物為深棕色丸；氣微香，味甘苦；鑒別(1)取本制劑，置顯微鏡下觀察淀粉粒眾多，單粒五類圓形及半圓形直徑4～20μm，臍點呈裂縫狀，偶見復粒，由2～3粒集成；導管主為螺紋及網(wǎng)狀導管，直徑10～22μm；(2)取裝量差異項下的本制劑或其內(nèi)容物1.5g，加醋酸乙酯20ml，加熱回流1小時，濾過，濾液濃縮至約1ml，作為供試品溶液；另取黃芪對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典2000年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇＝8.5∶0.5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以碳酸鈉試液，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；(3)取裝量差異項下的本制劑或其內(nèi)容物2g，加乙醇20ml，加熱回流2小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加丙酮10ml使溶解，濾過，濾液濃縮至1ml，作為供試品溶液；另取黃精對照藥材2g，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典2000年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇∶醋酸＝5∶4∶1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％磷鉬酸乙醇溶液，熱風吹至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；
(4)取裝量差異項下的本制劑或其內(nèi)容物3g，加甲醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水30毫升加熱溶解，用乙醚提取3次，每次30ml；水層揮去乙醚，用水飽和的正丁醇提取3次，依次為40、30、20ml，合并正丁醇，加0.5毫升氨水，再以正丁醇飽和的水洗至中性，水浴蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取太子參對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典2000年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5～10μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇∶14％氨水溶液＝2∶3∶1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％茚三酮溶液，105℃加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；(5)取裝量差異項下的本制劑或其內(nèi)容物2g，加甲醇25ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液濃縮至1ml，作為供試品溶液；另取天花粉對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典2000年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5～10μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正丁醇∶乙醇∶冰醋酸∶水＝8∶2∶2∶3為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％茚三酮溶液，105℃加熱至斑點顯色清晰；置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；檢查應符合中國藥典2000年版一部附錄I各制劑項下有關的各項規(guī)定；含量測定照中國藥典2000年版一部附錄VI D高效液相色譜法測定系統(tǒng)適應用性試驗用碳十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈∶水＝36∶64為流動相；用蒸發(fā)光散射檢測器檢測；理論塔板數(shù)按黃芪甲苷峰計應不低于6000；對照品溶液的制備 精密稱取黃芪甲苷對照品適量，加甲醇溶解，制成每1ml含0.40mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取裝量差異項下的本制劑或其內(nèi)容物6g，精密稱定，置具塞三角燒瓶中，精密加甲醇50ml，稱定重量，在250W、29～34kHz條件下超聲處理1小時，放冷，加甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密吸取續(xù)濾液25ml，蒸干，殘渣用加水飽和的正丁醇50ml溶解，以氨試液20ml洗滌，分取正丁醇液，蒸干，殘渣用甲醇溶解并定容至5ml，搖勻，即得；測定法 精密吸取對照品溶液各10μl、20μl，供試品溶液10μl，注入液相色譜儀，測定，用外標兩點法自然對數(shù)方程計算，即得；本膠囊劑每粒含黃芪以黃芪甲苷C41H68O14計，不得少于0.13mg。顆粒劑每袋含黃芪以黃芪甲苷C41H68O14計，不得少于0.2～0.4mg；水丸每1g含黃芪以黃芪甲苷C41H68O14計，不得少于0.3mg；滴丸每1g含黃芪以黃芪甲苷C41H68O14計，不得少于0.13mg。
本方中，黃芪味甘，微溫，歸肺、脾經(jīng)。具有補氣固表，利尿托毒，排膿，斂瘡生肌、利水的功效，主治氣血虛弱、自汗、久瀉脫肛、子宮脫垂、腎炎浮腫、蛋白尿、糖尿病、慢性潰瘍等癥。黃精味甘，性微溫，歸脾、肺、腎經(jīng)。補氣養(yǎng)陰，健脾，潤肺，益腎。具有很好的補肺，強筋骨，降血糖，填精髓，延緩人體衰老的作用。地黃性寒，味甘。歸心、肝、腎經(jīng)。清熱涼血，養(yǎng)陰，生津；用于熱病煩渴、發(fā)斑發(fā)疹、陰虛內(nèi)熱、吐血、衄血、糖尿病、傳染性肝炎。太子參性平，味甘、微苦。歸脾、肺經(jīng)。具有益氣健脾、生津潤肺之功能。用于脾虛體倦、食欲不振、病后虛弱、氣陰不足、自汗口渴、肺燥干咳。天花粉性微寒，味甘、微苦。歸肺、胃經(jīng)。具有清熱生津、消腫排膿之功能。用于熱病煩渴、肺熱燥咳、內(nèi)熱消渴、瘡瘍腫毒。以上諸藥合用，共奏補中益氣，養(yǎng)陰生津之功。用于氣陰兩虛型消渴癥(非胰島素依賴型糖尿病)。
與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明藥物吸收迅速，每次服用量減少，吸濕性小，穩(wěn)定性好；生產(chǎn)工序簡化，降低了生產(chǎn)成本；質量標準中增加了黃芪甲苷的含量測定及黃精、太子參、天花粉藥材的薄層色譜鑒別，提高了降糖甲制劑的質量控制標準，從而有效確保了該制劑的臨床療效。
本申請人進行了一系列的試驗研究，以優(yōu)選、驗證本發(fā)明藥物制劑的制備工藝和質量控制方法，使其達到最佳效果。
實驗例1制備工藝研究工藝條件的優(yōu)選原片劑工藝中黃芪等四味藥材加水煎煮提取，規(guī)定了煎煮次數(shù)，煎煮時間，但未明確加水量。在提取時間提取次數(shù)不變的情況下，申請人對加水量、藥材吸水率等作單因素試驗考察，并以黃芪甲苷轉移率和總固體物收率為評價指標，對水煎煮工藝條件進行研究，以確定最佳提取工藝。
1.煎煮工藝研究1.1藥材吸水率試驗按處方比例稱取1/15處方量藥材4份，每份205.6g，分別加水6倍量(1233.6ml)浸沒，于不同時間濾出浸泡液，直至吸水量不再增加為止，結果見表1。
表1藥材吸水試驗結果

結果表明，吸水率約為藥材重量的200％，故第一次煎煮多加約2倍量的水。
1.2加水量的確定按處方1/10投料，照各試驗號下的要求煎煮，濃縮為105ml。以加水量進行單因素考察，并以黃芪甲苷含量、總固體物收率為評價指標，篩選出最佳加水量，結果見表2。
1.2.1黃芪甲苷含量測定分析處方中君、臣藥的有效成分，以君藥黃芪中黃芪甲苷的轉移率為指標，對加水量進行考察。黃芪甲苷含量測定方法照高效液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VI D)測定。
樣品處理 取樣品溶液適量，置具塞三角燒瓶中濃縮近干，精密加甲醇50ml，稱定重量，超聲處理(250W，29～34kHz)1小時，放冷，加甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密吸取續(xù)濾液25ml，蒸干，殘渣用加水飽和的正丁醇50ml溶解，以氨試液20ml洗滌，分取正丁醇液，蒸干，殘渣用5％甲醇溶解并定容至5ml，搖勻，用0.45μm濾膜濾過，即得供試品溶液色譜條件 色譜柱迪馬SB-C18(5μm，150×4.6 i.d.mm)，產(chǎn)品系列號8011091；流動相∶乙腈-水(36∶64)；流速0.7ml/min；溫度30℃；蒸發(fā)光檢測器條件空氣1.6L/min；漂移管溫度41℃；信號增益(Gain)1；闖擊器(Impactor)開(ON)。
系統(tǒng)適用性試驗 用碳十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水(36∶64)為流動相；用蒸發(fā)光散射檢測器檢測。理論塔板數(shù)按黃芪甲苷峰計應不低于6000。
分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
1.2.2總固體物測定 精密吸取藥材煎煮濃縮液50ml，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，揮干，于105℃干燥3小時，移至干燥器中，冷卻30分鐘，迅速精密稱定重量，計算，即得。
表2加水量考察結果

50ml濃縮液相當于藥材量146.86g，含黃芪藥材30.60g，藥材含黃芪甲苷0.054％。
從表2結果可見，煎煮三次，各次加水量分別為12，10，8倍與10，8，6倍對黃芪甲苷轉移率和總固體物收率無明顯影響。從節(jié)省工時，降低能耗的角度，選擇2號試驗的加水量方案，即藥材加水煎煮三次，第一次加水10倍量，煎煮2小時(第一次多加2倍量水)，第二次加水8倍量，煎煮1小時，第三次加水6倍量，煎煮1小時。濾過，合并濾液，濃縮至1050ml，備用。
1.3浸膏得率及工藝穩(wěn)定性考察分別取1、2、3倍處方量黃芪、黃精(酒炙)、地黃、太子參、天花粉三份，按優(yōu)選的工藝進行提取，濃縮，干燥，考察黃芪甲苷轉移率、收膏率及穩(wěn)定性。試驗結果表明黃芪甲苷平均轉移率為67.17％，RSD＝3.92％；浸膏得率為10.24％，RSD＝3.50％。說明所選提取工藝穩(wěn)定可行，結果見表3。
表3工藝穩(wěn)定性驗證試驗

藥材含黃芪甲苷0.054％，投料藥材含黃芪20.84％，含黃芪甲苷理論量分別為0.347g，0.694g，1.041g。
2.太子參粉碎工藝2.1藥材前處理 取太子參揀選除去雜質，稱取處方比例量。
2.2粉碎過篩 藥材粉碎成細粉(指能全部通過五號篩，并含能通過六號篩不少于95％的粉末)，篩分后的篩余料(“頭子”)于80℃干燥后再粉碎、過篩，備用。
3.干燥工藝研究取1倍處方量的黃芪等四味藥材，按擬訂的煎煮工藝提取，濃縮，醇沉，濃縮至相對密度為1.28(50℃熱測)，分為4份。分別加入太子參細粉32.25g，混勻，置不同條件下干燥，粉碎。取樣測定黃芪甲苷含量，結果見表4。
表4不同干燥條件的比較


總藥材3213g，煎煮藥材量3084g，細粉129g，1/4＝32.25g。
干浸膏收率10.76％、10.70％、10.47％、10.35％，干浸膏重82.99g、82.50g、80.73g、79.82g。
藥材含黃芪甲苷0.054％，每份含黃芪160.65g，黃芪甲苷理論量0.0868g。
試驗結果表明，除100℃常壓干燥黃芪甲苷損失率較高外，其余干燥條件對黃芪甲苷無明顯影響。真空干燥時間短，樣品質地疏松，易于粉碎。故選用60～80℃真空干燥。
實驗例2成型工藝研究一、膠囊劑成型工藝(一)方中制備工藝為黃芪等四味藥材煎煮提取，太子參部分藥材細粉收膏，粉碎后填充膠囊。內(nèi)容物的流動性對膠囊的填充有影響。通過測定粉末休止角，結果表明，粉末的流動性均較好，可直接填充膠囊，無需進行制粒。樣品干燥后根據(jù)制成總量，再加適量(5g～10g)淀粉調節(jié)總量，以保證生藥日服用量的一致。即藥液濃縮至稠膏后加生藥細粉收膏，混合，60～80℃減壓干燥，粉碎，用適量淀粉調整總量至450g，混勻，裝入膠囊，制成1000粒，即得。
(二)處方量、日劑量、裝量、規(guī)格的確定1處方量計算根據(jù)處方工藝條件篩選出的工藝數(shù)據(jù)計算處方量，并以原片劑處方量進行了比較。
1.1降糖甲片處方共含生藥2142g，制成1000片，每1片含生藥2.142g。1次6片，1日3次，每日服用生藥量38.556g。
1.2降糖甲膠囊處方共含生藥3213g，制成1000粒，每粒含生藥3.213g。服用量1次4粒，1日3次，每日服用生藥量38.556g。
兩劑型每次和每日服用生藥量相同。
1.3干浸膏根據(jù)試驗結果，本制劑干浸膏平均收率為10.24％，得干膏粉3084×10.24％＝315.80g2制劑處方干浸膏粉315.8g
生藥細粉 129g補加淀粉 5～10g共制1000粒(0.45g/粒)淀粉實際加入量可根據(jù)浸膏的實際收率進行調整，使總制備量為450g，以保證每日服用的生藥量不變。
(三)粉末吸濕性考察將不同濃度的硫酸溶液置于干燥器中密封于25℃恒溫干燥箱中放置24小時，即可獲得不同的恒溫恒濕的實驗條件。精密稱取經(jīng)80℃恒溫干燥3小時的降糖甲膠囊內(nèi)容物(每份約2g)于恒重的稱量瓶中，再將稱量瓶置于上述恒溫恒濕條件的干燥器中放置3天，取出，精密稱重，計算出吸濕率，結果見表5。
表5樣品吸濕率

以吸濕率為縱坐標，相對濕度為橫坐標作圖，得吸濕率曲線。
從吸濕率曲線可知，降糖甲膠囊臨界相對濕度(CRH)約為55％。由此可確定本制劑的貯存條件。
(四)中試按本發(fā)明擬訂的處方和制法，10倍處方量投料，對生產(chǎn)工藝中各項指標進行檢測，以進一步考察本制劑制備工藝的合理性，試驗結果表明，制備工藝路線合理，工藝條件符合工廠生產(chǎn)要求。
二、顆粒劑成型工藝(一)工藝研究 由制備工藝提取的清膏，加入適量糊精收膏，易干燥，干燥后干浸膏的吸濕性明顯改善。本制劑為顆粒，需加入適量蔗糖、蛋白糖或檸檬酸作矯味劑。經(jīng)試驗制備800～1500g顆粒，以加入糊精300～1000g、2％的蛋白糖16～30g、檸檬酸5～20g、香精5～20ml為宜。采用不同濃度乙醇濕法制粒，結果制粒時的乙醇濃度低于75％時，難以制粒，成型后顆粒易結塊，高于85％時顆粒成型不好，粒度不合格。故選75％乙醇潤濕制粒，80℃真空干燥，即得。
(二)制劑處方干浸膏粉 414g
蛋白糖(2％) 16～30g糊精 300～1000g檸檬酸5～20g橘子香精 5～20ml共制800～1500g糊精實際加入量可根據(jù)浸膏的實際收率進行調整，以保證每日服用的生藥量不變。
(三)顆粒吸濕性考察試驗結果表明吸濕性與環(huán)境的相對濕度有關。相對濕度在70％以下時，未見明顯吸濕。臨界相對濕度為70％。因此，在生產(chǎn)過程中應將相對濕度控制在70％以下。
表6樣品吸濕率

(四)中試按擬訂的制備工藝生產(chǎn)三批(10倍處方量)，對生產(chǎn)工藝中各項指標進行檢測，以進一步考核本制劑制備工藝的合理性，試驗結果表明，該制備工藝路線合理，工藝條件符合工廠生產(chǎn)要求。
三、申請人同樣對水丸和滴丸劑的成型工藝進行了試驗研究，結果表明，本發(fā)明制成水丸時，不加入輔料的效果更好；而制成滴丸劑時，選用PEG6000和PEG4000作為基質的效果較好，且其最佳用量為500g～600g。
實驗例3質量控制方法研究1.鑒別本制劑由黃芪、黃精(酒炙)、地黃、太子參、天花粉五味中藥經(jīng)提取而成。原質量標準中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標準(中藥成方制劑第八冊104頁)“降糖甲片”(標準號WS3-B-1570-93)中鑒別(1)為太子參生粉的顯微鑒別，(2)、(3)分別為黃芪、黃精的薄層鑒別，為提高該制劑的質量標準，申請人對方中的其余藥材均進行了薄層色譜鑒別研究。
1.1儀器及試藥REPROSTAR3薄層色譜成像系統(tǒng)(瑞士GAMAG)；黃芪對照藥材(批號0974-200106)、黃精對照藥材(1341-200401)、太子參對照藥材(批號1004-200203)、天花粉對照藥材(批號1361-200401)。以上對照藥材均購至中國藥品生物制品鑒定所；乙醚、氯仿、冰醋酸、正丁醇、甲醇、乙醇等均為分析純；硅膠G預制板(青島海洋化工廠)；硅膠G薄層板(自制)。
1.2鑒別(1)同原標準。
(2)同原標準。
(3)同原標準。
(4)對方中太子參藥材的薄層色譜鑒別供試品溶液的制備取降糖甲制劑或其內(nèi)容物3g，加入甲醇50ml超聲提取30分鐘，濾過，濾液蒸干。殘渣加水50ml加熱溶解，放冷后，轉移至分液漏斗中。用乙醚提取5次，每次30ml，水層揮去乙醚，用水飽和的正丁醇提取3次(40，30，20ml)，合并正丁醇提取液，加0.5毫升氨水，再以正丁醇飽和的水洗至中性，水浴上蒸干，殘渣加甲醇1毫升使溶解，作為供試品溶液。
對照藥材溶液的制備取對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液。
陰性對照溶液的制備取去除太子參的陰性制劑3克，同法制成陰性對照溶液。
薄層色譜層析條件硅膠G板，展開劑氯仿-甲醇-14％氨水溶液(2∶3∶1)，展開，取出，晾干，噴以5％茚三酮溶液，于105℃加熱至斑點顯色清晰。曾以正丁醇-乙酸乙酯-水-甲醇(4∶1∶5∶0.5)展開系統(tǒng)的多種比例進行展開，取出，晾干，分別于日光和365nm紫外燈下檢視，經(jīng)反復試驗比較，以氯仿-甲醇-14％氨水溶液(2∶3∶1)為展開劑展開效果較好，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯紫紅色的斑點，陰性對照無干擾，故該項鑒別列入本發(fā)明質量標準。
(5)對方中天花粉藥材的薄層色譜鑒別供試品溶液的制備取降糖甲制劑樣品2g，加甲醇25ml，超聲提取30分鐘，濾過，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液。
對照藥材溶液的制備取天花粉對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液。
陰性對照溶液的制備取去除天花粉藥材的陰性制劑2克，同法制成陰性對照溶液。
薄層色譜層析條件硅膠G板，展開劑正丁醇-無水乙醇-冰醋酸-水(8∶2∶2∶3)，顯色劑5％茚三酮溶液，在105℃下加熱至斑點顯色清晰。曾經(jīng)用該展開系統(tǒng)的各種比例和不同的展開系統(tǒng)反復試驗，結果以以上展開劑展開，色譜分離好，斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點，陰性對照無干擾。故該項鑒別列入本發(fā)明質量標準。
2.檢查 按照各制劑項下的有關規(guī)定(《中國藥典》2000年版一部附錄I)進行檢查。檢查指標、方法及結果見表7。
2.1水分 照《中國藥典》2000年版一部附錄IL膠囊劑項下相應方法檢測。
2.2裝量差異 照《中國藥典》2000年版一部附錄IL膠囊劑項下相應方法檢測。
2.3崩解時限 照《中國藥典》2000年版一部附錄IL膠囊劑項下相應方法檢測。
2.4微生物限度 照《中國藥典》2000年版一部附錄XIIIC的檢查方法及膠囊劑微生物限度標準進行檢查。
2.5重金屬檢查 照《中國藥典》2000年版一部附錄IX E項下重金屬檢查法(第二法)檢查。
取本制劑或其內(nèi)容物2g，緩緩熾灼至完全炭化，放冷，加硫酸1ml，使?jié)櫇瘢玫蜏丶訜嶂亮蛩岢M后，加硝酸0.5ml，蒸干除盡氧化氮，放冷，在500～600℃熾灼使完全灰化，放冷，加鹽酸2ml置水浴上蒸干，加水15ml，滴加氨試液至酚酞指示液顯中性，再加醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml，微熱溶解，移置納氏比色管中，加水稀釋成25ml，得樣品管。另取配制供試品溶液的試劑，置瓷皿中蒸干，加醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml與水15ml，微熱溶解后，移置納氏比色管中，加標準鉛溶液2ml(每1ml相當于10μg的Pb)，再用水稀釋成25ml，得標準鉛溶液管。依法檢查，即得。
檢測結果三批樣品的樣品管顯示的顏色均淺于標準鉛溶液管顏色，說明本制劑重金屬含量低于百萬分之十。故不列入本發(fā)明質量標準。
2.6砷鹽檢查 照《中國藥典》2000年版一部附錄ⅨF項下砷鹽檢查法(第一法)檢查。
取本制劑或其內(nèi)容物1g，加氫氧化鈣0.5g，混勻，加水少量攪拌均勻，干燥，先用小火燒灼使炭化，再于500～600℃熾灼至完全灰化，加鹽酸5ml，水21ml，得樣品管。依法檢查，即得。
檢測結果三批樣品的樣品管所產(chǎn)生的砷斑顏色均淺于標準砷斑顏色，說明本制劑砷鹽含量均低于百萬分之二。故不列入本發(fā)明質量標準。
表7降糖甲制劑檢查項目研究結果
由表7可知，上述批次降糖甲制劑樣品的檢查項目都在《中國藥典》2000年版一部附錄I所規(guī)定的范圍之內(nèi)。
3.含量測定 根據(jù)對方中各味藥材的化學成分分析，申請人在試驗中對方中黃芪所含黃芪甲苷的含量進行了測定，并對測定方法進行了研究。
3.1儀器 Agilent 1100高效液相色譜儀，包括Agilent-G1312A二元泵，61315B二極管陣列檢測器，G1313自動進樣器，G1316A柱溫箱，G1322A真空脫氣機，Agilent-A.08.03[847]化學工作站；蒸發(fā)光散射檢測器(美國奧泰ELSD 2000)；超聲波清洗機(250W，29～34kHz；北京超聲設備廠)。
3.2試藥 乙腈(色譜純)；水為重蒸水；黃芪甲苷對照品(中國藥品生物制品檢定所，含量測定用，批號0781-200109)。
3.3色譜條件 色譜柱迪馬SB-C18(5μm，150×4.6 i.d.mm)，產(chǎn)品系列號8011091；流動相乙腈-水(36∶64)；流速0.7ml/min；溫度30℃；蒸發(fā)光檢測器條件空氣1.6L/min；漂移管溫度41℃；信號增益(Gain)1；闖擊器(Impactor)開(ON)。
3.4系統(tǒng)適用性試驗 分別取黃芪甲苷對照品溶液、制劑供試品溶液及缺黃芪藥材的陰性對照溶液、空白溶劑注入液相色譜儀，記錄色譜圖?？梢?，黃芪甲苷的保留時間tR約為10.0分鐘，即本試驗條件下黃芪甲苷與其他組分分離完全。理論塔板數(shù)以黃芪甲苷峰計算為6000，黃芪甲苷與及其他組分峰的分離度大于1.5。故定理論板數(shù)以黃芪甲苷峰計，應不低于5000。
3.5檢測器參數(shù)的選擇 根據(jù)流動相種類和比例，通過觀察在不同漂移管溫度和不同空氣流速進樣時黃芪甲苷的信號強度，再結合基線噪音的情況，最后確定漂移管溫度為41℃，空氣流速為1.6L/min，信號增益(Gain)為1。
3.6黃芪甲苷對照品純度檢查 稱取黃芪甲苷對照品適量，用甲醇配制成每1ml含1mg的對照品溶液，吸取該溶液20μl，注入液相色譜儀，測定，用峰面積歸一化計算黃芪甲苷含量為100.0％。
3.7線性關系考察3.7.1對照品溶液的制備 精密稱取黃芪甲苷對照品10.10mg，置25ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度、搖勻，即得濃度為0.404mg/ml的對照品溶液。
3.7.2標準曲線的繪制 分別精密吸取上述對照品溶液4、8、12、16、20、25μl，注入液相色譜儀，記錄色譜，以峰面積為橫坐標、進樣量為縱坐標，結果發(fā)現(xiàn)，線性關系不好(γ＝0.99479)，而以峰面積的自然對數(shù)(lnA)和進樣量的自然對數(shù)(lnM)進行線性回歸計算，得線性回歸方程lnM＝0.679825lnA-2.797564(r＝0.999955)，由于該回歸方程不通過坐標原點，故正文采用外標兩點法自然對數(shù)方程計算含量。線性范圍1.616～10.100μg。
3.8供試品溶液的制備制劑中黃芪藥材所含的黃芪甲苷為已提取出來的游離化合物，該類化合物只需用甲醇、乙醇等溶劑溶解即可，試驗中，采用超聲波提取，并分別考察了以不同濃度甲醇為提取溶劑、超聲處理時間、凈化方法等，結果以甲醇為溶劑，超聲處理1小時的方法最為有效。
3.8.1供試品黃芪甲苷提取溶劑的選擇以不同濃度的甲醇為溶劑，采用超聲處理60min的方法提取制劑樣品中黃芪甲苷，結果見表8。
表8制劑用不同提取方法的結果比較

從表8中可見，用50～100％甲醇超聲處理50min后的結果基本一致，由于提取液在凈化處理中需蒸干，故選用甲醇為提取溶劑。
3.8.2 超聲處理時間考察 以甲醇為溶劑，考察不同超聲處理時間的結果，見表9。
表9不同超聲處理時間的結果比較

結果超聲處理60分鐘與90分鐘結果基本一致，故選用超聲處理60分鐘。
3.8.3凈化方法的考察 由于制劑成分復雜，直接用甲醇提取液進樣測定，干擾黃芪甲苷的分離，將甲醇提取液蒸干后，殘渣用水飽和的正丁醇溶解，用氨試液洗滌正丁醇液，除去干擾物質，經(jīng)考察，用20ml氨試液洗滌一次后的供試品溶液不干擾黃芪甲苷的測定，且回收率好。
3.8.4供試品溶液的制備 取裝量差異項下的本制劑或其內(nèi)容物6.0g，精密稱定，置具塞三角燒瓶中，精密加甲醇50ml，稱定重量，超聲處理1小時，冷后，加甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密吸取續(xù)濾液25ml，蒸干，殘渣用加水飽和的正丁醇50ml溶解，以氨試液20ml洗滌，分取正丁醇液，蒸干，殘渣用甲醇溶解并定容至5ml，搖勻，即得。
3.8.5陰性對照液的制備 取缺黃芪藥材的陰性對照品，按供試品溶液的制備方法制備陰性對照品溶液。
3.9精密度試驗 取對照品溶液(0.404mg/ml)10μl，重復進樣5次，測定峰面積(結果見表10)，RSD＝1.05％。
表10黃芪甲苷的精密度試驗

3.10重復性試驗取供試品(20040701)，按本發(fā)明質量標準中供試品溶液的制備方法，制備3個不同濃度供試品溶液各3份，分別精密吸取10μl進樣，測定峰面積，計算(結果見表11)，平均含量0.829mg/g，RSD＝0.99％，結果表明，重復性良好。
表11制劑供試品中黃芪甲苷的重復性試驗

3.11穩(wěn)定性試驗取一供試品(20040701)，按本發(fā)明質量標準中供試品溶液的制備方法制備供試品溶液，按規(guī)定的時間，精密吸取10μl進樣測定(表12)，結果表明制劑供試品溶液中黃芪甲苷在8小時內(nèi)穩(wěn)定。
表12供試品中黃芪甲苷穩(wěn)定性試驗

3.11回收率試驗 稱取已測定含量的制劑(平均含量0.829mg/g)9份，分別按下表精密加入黃芪甲苷對照品適量，按本發(fā)明質量標準制備供試品溶液，分別精密吸取10μl進樣，測定峰面積(結果見表13)，計算，黃芪甲苷的平均回收率為100.42％，RSD＝1.70％。
表13制劑供試品中黃芪甲苷的回收率試驗

3.12樣品測定 按本發(fā)明質量標準制備降糖甲制劑供試品溶液和對照品溶液，分別精密吸取供試品溶液10μl、對照品溶液10μl、20μl進樣，記錄色譜，測定峰面積，計算含量。
十批樣品中黃芪甲苷的含量測定結果見表14。
表14降糖甲制劑中黃芪甲苷含量測定結果


3.14樣品黃芪甲苷含量限度 從10批降糖甲膠囊中試樣品測定結果可見，各批號樣品中黃芪甲苷提取率均在50％以上，故制劑中黃芪甲苷提取率按不低于50％計。每1粒膠囊劑中黃芪甲苷含量限度計算如下黃芪甲苷含量限度＝制劑含黃芪藥材(g)×黃芪藥材含黃芪甲苷限度×提取率×片重(g)/制備量(g)＝642.6g×0.04％×50％×0.45g×1000/450g＝0.129mg/粒，故暫定本膠囊劑每粒含黃芪以黃芪甲苷(C41H68O14)計，不得少于0.13mg。同樣計算可得，顆粒劑每袋含黃芪以黃芪甲苷C41H68O14計，不得少于0.2～0.4mg；水丸每1g含黃芪以黃芪甲苷C41H68O14計，不得少于0.3mg；滴丸每1g含黃芪以黃芪甲苷C41H68O14計，不得少于0.13mg。
具體實施例方式本發(fā)明的實施例1黃芪642.6g、黃精(酒炙)642.6g、地黃642.6g、太子參642.6g、天花粉642.6g取太子參129g粉碎成細粉，剩余的太子參與黃芪、黃精、地黃和天花粉加水煎煮三次，第一次加10倍量水，煎煮2小時，第二次加8倍量水，煎煮1小時，第三次加6倍量水，煎煮1小時；合并煎液，濾過，濾液濃縮至約1050ml，加乙醇使含醇量為75％，攪勻，靜置48小時，濾過，濾液濃縮至50℃熱測相對密度為1.25～1.30的稠膏，加入太子參細粉，混勻，60～80℃減壓干燥，粉碎，用適量淀粉調整總量至450g，混勻，裝腸溶膠囊，制成1000粒(0.45g/粒)，即得膠囊劑。本制劑口服，一次4粒，一日3次。
本發(fā)明的實施例2黃芪642.6g、黃精(酒炙)642.6g、地黃642.6g、太子參642.6g、天花粉642.6g取太子參129g粉碎成細粉，剩余的太子參與黃芪、黃精、地黃和天花粉加水煎煮三次，第一次加10倍量水，煎煮2小時，第二次加8倍量水，煎煮1小時，第三次加6倍量水，煎煮1小時；合并煎液，濾過，濾液濃縮至約1050ml，加乙醇使含醇量為75％，攪勻，靜置48小時，濾過，濾液濃縮至50℃熱測相對密度為1.25～1.30的稠膏，加入太子參細粉、2倍量的糊精和2％的蛋白糖20g，用75％乙醇潤濕制顆粒，80℃真空干燥，包裝，每袋裝8g～15g，即得顆粒劑。本制劑口服，一次1～2袋，一日3次。
本發(fā)明的實施例3黃芪642.6g、黃精(酒炙)642.6g、地黃642.6g、太子參642.6g、天花粉642.6g取太子參129g粉碎成細粉，剩余的太子參與黃芪、黃精、地黃和天花粉加水煎煮三次，第一次加10倍量水，煎煮2小時，第二次加8倍量水，煎煮1小時，第三次加6倍量水，煎煮1小時；合并煎液，濾過，濾液濃縮至約1060ml，加乙醇使含醇量為75％，攪勻，靜置48小時，濾過，濾液濃縮至50℃熱測相對密度為1.25～1.30的稠膏，加入太子參細粉，混勻，干燥，粉碎成細粉，用適量水泛制成丸，干燥，制成400g～500g，即得水丸。本制劑口服，一次1～2g，一日3次。
本發(fā)明的實施例4黃芪642.6g、黃精(酒炙)642.6g、地黃642.6g、太子參642.6g、天花粉642.6g取太子參與黃芪、黃精、地黃和天花粉加水煎煮三次，第一次加10倍量水，煎煮2小時，第二次加8倍量水，煎煮1小時，第三次加6倍量水，煎煮1小時；合并煎液，濾過，濾液濃縮至約1200ml，加乙醇使含醇量為75％，攪勻，靜置48小時，濾過，濾液濃縮至50℃熱測相對密度為1.25～1.30的稠膏，加入PEG6000和PEG4000 500g～600g，滴制成丸，制成1000g，即得滴丸劑。本制劑口服，一次10～20粒，一日3次。
本發(fā)明的實施例5降糖甲制劑的質量控制方法包括性狀膠囊劑為腸溶膠囊劑，其內(nèi)容物為棕色粉末；氣微香，味甘苦；對于顆粒劑，藥物為棕色顆粒；氣微香，味甘苦；對于水丸，藥物為棕黑色丸；氣微香，味甘苦；對于滴丸劑，藥物為深棕色丸；氣微香，味甘苦。
鑒別(1)取本制劑，置顯微鏡下觀察淀粉粒眾多，單粒五類圓形及半圓形直徑4～20μm，臍點呈裂縫狀，偶見復粒，由2～3粒集成；導管主為螺紋及網(wǎng)狀導管，直徑10～22μm；(2)取裝量差異項下的本制劑或其內(nèi)容物1.5g，加醋酸乙酯20ml，加熱回流1小時，濾過，濾液濃縮至約1ml，作為供試品溶液；另取黃芪對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典2000年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇＝8.5∶0.5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以碳酸鈉試液，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；
(3)取裝量差異項下的本制劑或其內(nèi)容物2g，加乙醇20ml，加熱回流2小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加丙酮10ml使溶解，濾過，濾液濃縮至1ml，作為供試品溶液；另取黃精對照藥材2g，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典2000年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇∶醋酸＝5∶4∶1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％磷鉬酸乙醇溶液，熱風吹至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；(4)取裝量差異項下的本制劑或其內(nèi)容物3g，加甲醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水30毫升加熱溶解，用乙醚提取3次，每次30ml；水層揮去乙醚，用水飽和的正丁醇提取3次，依次為40、30、20ml，合并正丁醇，加0.5毫升氨水，再以正丁醇飽和的水洗至中性，水浴蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取太子參對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典2000年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5～10μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇∶14％氨水溶液＝2∶3∶1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％茚三酮溶液，105℃加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；(5)取裝量差異項下的本制劑或其內(nèi)容物2g，加甲醇25ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液濃縮至1ml，作為供試品溶液；另取天花粉對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典2000年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5～10μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正丁醇∶乙醇∶冰醋酸∶水＝8∶2∶2∶3為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％茚三酮溶液，105℃加熱至斑點顯色清晰；置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；檢查應符合中國藥典2000年版一部附錄I各制劑項下有關的各項規(guī)定；含量測定照中國藥典2000年版一部附錄VI D高效液相色譜法測定系統(tǒng)適應用性試驗 用碳十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈∶水＝36∶64為流動相；用蒸發(fā)光散射檢測器檢測；理論塔板數(shù)按黃芪甲苷峰計應不低于6000；對照品溶液的制備 精密稱取黃芪甲苷對照品適量，加甲醇溶解，制成每1ml含0.40mg的溶液，即得；供試品溶液的制備 取裝量差異項下的本制劑或其內(nèi)容物6g，精密稱定，置具塞三角燒瓶中，精密加甲醇50ml，稱定重量，在250W、29～34kHz條件下超聲處理1小時，放冷，加甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密吸取續(xù)濾液25ml，蒸干，殘渣用加水飽和的正丁醇50ml溶解，以氨試液20ml洗滌，分取正丁醇液，蒸干，殘渣用甲醇溶解并定容至5ml，搖勻，即得；測定法 精密吸取對照品溶液各10μl、20μl，供試品溶液10μl，注入液相色譜儀，測定，用外標兩點法自然對數(shù)方程計算，即得；本膠囊劑每粒含黃芪以黃芪甲苷C41H68O14計，不得少于0.13mg；顆粒劑每袋含黃芪以黃芪甲苷C41H68O14計，不得少于0.2～0.4mg；水丸每1g含黃芪以黃芪甲苷C41H68014計，不得少于0.3mg；滴丸每1g含黃芪以黃芪甲苷C41H68O14計，不得少于0.13mg。
權利要求
1.一種治療糖尿病的降糖甲制劑，其特征在于它是用黃芪642.6g、酒炙黃精642.6g、地黃642.6g、太子參642.6g和天花粉642.6g制成的膠囊劑、顆粒劑、水丸或滴丸劑。
2.如權利要求1所述治療糖尿病的降糖甲制劑的制備方法，其特征在于取太子參129g粉碎成細粉，剩余的太子參與黃芪、黃精、地黃和天花粉加水煎煮三次，第一次加10倍量水，煎煮2小時，第二次加8倍量水，煎煮1小時，第三次加6倍量水，煎煮1小時；合并煎液，濾過，濾液濃縮至約1050ml，加乙醇使含醇量為75％，攪勻，靜置48小時，濾過，濾液濃縮至50℃熱測相對密度為1.25～1.30的稠膏，加入太子參細粉，混勻，干燥，粉碎成細粉，加入適當輔料制成不同的制劑。
3.按照權利要求2所述治療糖尿病的降糖甲制劑的制備方法，其特征在于降糖甲膠囊劑是這樣制備的取太子參129g粉碎成細粉，剩余的太子參與黃芪、黃精、地黃和天花粉加水煎煮三次，第一次加10倍量水，煎煮2小時，第二次加8倍量水，煎煮1小時，第三次加6倍量水，煎煮1小時；合并煎液，濾過，濾液濃縮至約1050ml，加乙醇使含醇量為75％，攪勻，靜置48小時，濾過，濾液濃縮至50℃熱測相對密度為1.25～1.30的稠膏，加入太子參細粉，混勻，干燥，粉碎成細粉，裝腸溶膠囊，即得。
4.按照權利要求2所述治療糖尿病的降糖甲制劑的制備方法，其特征在于降糖甲顆粒劑是這樣制備的取太子參129g粉碎成細粉，剩余的太子參與黃芪、黃精、地黃和天花粉加水煎煮三次，第一次加10倍量水，煎煮2小時，第二次加8倍量水，煎煮1小時，第三次加6倍量水，煎煮1小時；合并煎液，濾過，濾液濃縮至約1050ml，加乙醇使含醇量為75％，攪勻，靜置48小時，濾過，濾液濃縮至50℃熱測相對密度為1.25～1.30的稠膏，加入太子參細粉、1～4倍量的糊精、適量蛋白糖或甜蜜素、適量香精，制顆粒，干燥，包裝，即得。
5.按照權利要求2所述治療糖尿病的降糖甲制劑的制備方法，其特征在于降糖甲水丸是這樣制備的取太子參129g粉碎成細粉，剩余的太子參與黃芪、黃精、地黃和天花粉加水煎煮三次，第一次加10倍量水，煎煮2小時，第二次加8倍量水，煎煮1小時，第三次加6倍量水，煎煮1小時；合并煎液，濾過，濾液濃縮至約1050ml，加乙醇使含醇量為75％，攪勻，靜置48小時，濾過，濾液濃縮至50℃熱測相對密度為1.25～1.30的稠膏，加入太子參細粉，混勻，干燥，粉碎成細粉，用適量水泛制成丸，干燥，即得。
6.如權利要求1所述治療糖尿病的降糖甲制劑的制備方法，其特征在于降糖甲滴丸劑這樣制備取太子參與黃芪、黃精、地黃和天花粉加水煎煮三次，第一次加10倍量水，煎煮2小時，第二次加8倍量水，煎煮1小時，第三次加6倍量水，煎煮1小時；合并煎液，濾過，濾液濃縮至約1200ml，加乙醇使含醇量為75％，攪勻，靜置48小時，濾過，濾液濃縮至50℃熱測相對密度為1.25～1.30的稠膏，加入PEG6000和PEG4000 500g～600g，滴制成丸，即得。
7.如權利要求1或2所述治療糖尿病的降糖甲制劑的質量控制方法，其特征在于所述質量控制方法主要包括性狀、鑒別、檢查以及含量測定項目中的部分或全部，其中鑒別包括顯微觀察和對制劑中黃芪、黃精、太子參、天花粉的薄層色譜鑒別；含量測定是對制劑中黃芪所含黃芪甲苷的含量測定。
8.按照權利要求7所述治療糖尿病的降糖甲制劑的質量控制方法，其特征在于黃芪的鑒別方法是以黃芪對照藥材為對照，以氯仿∶甲醇＝8.5∶0.5為展開劑的薄層色譜法；黃精的鑒別方法是以黃精對照藥材為對照，以氯仿∶甲醇∶醋酸＝5∶4∶1為展開劑的薄層色譜法；太子參的鑒別方法是以太子參對照藥材為對照，以氯仿∶甲醇∶14％氨水溶液＝2∶3∶1為展開劑的薄層色譜法；天花粉的鑒別方法是以天花粉對照藥材為對照，以正丁醇∶乙醇∶冰醋酸∶水＝8∶2∶2∶3為展開劑的薄層色譜法。
9.按照權利要求7或8所述治療糖尿病的降糖甲制劑的質量控制方法，其特征在于具體的鑒別方法包括以下項目的部分或全部(1)取本制劑，置顯微鏡下觀察淀粉粒眾多，單粒五類圓形及半圓形直徑4～20μm，臍點呈裂縫狀，偶見復粒，由2～3粒集成；導管主為螺紋及網(wǎng)狀導管，直徑10～22μm；(2)取裝量差異項下的本制劑或其內(nèi)容物1.5g，加醋酸乙酯20ml，加熱回流1小時，濾過，濾液濃縮至約1ml，作為供試品溶液；另取黃芪對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典2000年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇＝8.5∶0.5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以碳酸鈉試液，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；(3)取裝量差異項下的本制劑或其內(nèi)容物2g，加乙醇20ml，加熱回流2小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加丙酮10ml使溶解，濾過，濾液濃縮至1ml，作為供試品溶液；另取黃精對照藥材2g，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典2000年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇∶醋酸＝5∶4∶1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％磷鉬酸乙醇溶液，熱風吹至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；(4)取裝量差異項下的本制劑或其內(nèi)容物3g，加甲醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水30毫升加熱溶解，用乙醚提取3次，每次30ml；水層揮去乙醚，用水飽和的正丁醇提取3次，依次為40、30、20ml，合并正丁醇，加0.5毫升氨水，再以正丁醇飽和的水洗至中性，水浴蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取太子參對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典2000年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5～10μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇∶14％氨水溶液＝2∶3∶1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％茚三酮溶液，105℃加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；(5)取裝量差異項下的本制劑或其內(nèi)容物2g，加甲醇25ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液濃縮至1ml，作為供試品溶液；另取天花粉對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典2000年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5～10μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正丁醇∶乙醇∶冰醋酸∶水＝8∶2∶2∶3為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％茚三酮溶液，105℃加熱至斑點顯色清晰；置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
10.按照權利要求7所述治療糖尿病的降糖甲制劑的質量控制方法，其特征在于黃芪中黃芪甲苷的含量測定方法是以黃芪甲苷對照品為對照，以乙腈∶水＝36∶64為流動相的高效液相色譜法。
11.按照權利要求7或10所述治療糖尿病的降糖甲制劑的質量控制方法，其特征在于具體的含量測定方法為照中國藥典2000年版一部附錄VI D高效液相色譜法測定系統(tǒng)適應用性試驗用碳十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈∶水＝36∶64為流動相；用蒸發(fā)光散射檢測器檢測；理論塔板數(shù)按黃芪甲苷峰計應不低于6000；對照品溶液的制備精密稱取黃芪甲苷對照品適量，加甲醇溶解，制成每1ml含0.40mg的溶液，即得；供試品溶液的制備 取裝量差異項下的本制劑或其內(nèi)容物6g，精密稱定，置具塞三角燒瓶中，精密加甲醇50ml，稱定重量，在250W、29～34kHz條件下超聲處理1小時，放冷，加甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密吸取續(xù)濾液25ml，蒸干，殘渣用加水飽和的正丁醇50ml溶解，以氨試液20ml洗滌，分取正丁醇液，蒸干，殘渣用甲醇溶解并定容至5ml，搖勻，即得；測定法 精密吸取對照品溶液各10μl、20μl，供試品溶液10μl，注入液相色譜儀，測定，用外標兩點法自然對數(shù)方程計算，即得；本膠囊劑每粒含黃芪以黃芪甲苷C41H68O14計，不得少于0.13mg；顆粒劑每袋含黃芪以黃芪甲苷C41H68O14計，不得少于0.2～0.4mg；水丸每1g含黃芪以黃芪甲苷C41H68O14計，不得少于0.3mg；滴丸每1g含黃芪以黃芪甲苷C41H68O14計，不得少于0.13mg。
12.按照權利要求7所述治療糖尿病的降糖甲制劑的質量控制方法，其特征在于所述質量控制方法包括性狀膠囊劑為腸溶膠囊，其內(nèi)容物為棕色粉末；氣微香，味甘苦；對于顆粒劑，藥物為棕色顆粒；氣微香，味甘苦；對于水丸，藥物為棕黑色丸；氣微香，味甘苦；對于滴丸劑，藥物為深棕色丸；氣微香，味甘苦；鑒別(1)取本制劑，置顯微鏡下觀察淀粉粒眾多，單粒五類圓形及半圓形直徑4～20μm，臍點呈裂縫狀，偶見復粒，由2～3粒集成；導管主為螺紋及網(wǎng)狀導管，直徑10～22μm；(2)取裝量差異項下的本制劑或其內(nèi)容物1.5g，加醋酸乙酯20ml，加熱回流1小時，濾過，濾液濃縮至約1ml，作為供試品溶液；另取黃芪對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典2000年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇＝8.5∶0.5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以碳酸鈉試液，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；(3)取裝量差異項下的本制劑或其內(nèi)容物2g，加乙醇20ml，加熱回流2小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加丙酮10ml使溶解，濾過，濾液濃縮至1ml，作為供試品溶液；另取黃精對照藥材2g，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典2000年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇∶醋酸＝5∶4∶1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％磷鉬酸乙醇溶液，熱風吹至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；(4)取裝量差異項下的本制劑或其內(nèi)容物3g，加甲醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水30毫升加熱溶解，用乙醚提取3次，每次30ml；水層揮去乙醚，用水飽和的正丁醇提取3次，依次為40、30、20ml，合并正丁醇，加0.5毫升氨水，再以正丁醇飽和的水洗至中性，水浴蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取太子參對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典2000年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5～10μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇∶14％氨水溶液＝2∶3∶1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％茚三酮溶液，105℃加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；(5)取裝量差異項下的本制劑或其內(nèi)容物2g，加甲醇25ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液濃縮至1ml，作為供試品溶液；另取天花粉對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；照中國藥典2000年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5～10μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正丁醇∶乙醇∶冰醋酸∶水＝8∶2∶2∶3為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％茚三酮溶液，105℃加熱至斑點顯色清晰；置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；檢查應符合中國藥典2000年版一部附錄I各制劑項下有關的各項規(guī)定；含量測定照中國藥典2000年版一部附錄VI D高效液相色譜法測定系統(tǒng)適應用性試驗 用碳十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈∶水＝36∶64為流動相；用蒸發(fā)光散射檢測器檢測；理論塔板數(shù)按黃芪甲苷峰計應不低于6000；對照品溶液的制備 精密稱取黃芪甲苷對照品適量，加甲醇溶解，制成每1ml含0.40mg的溶液，即得；供試品溶液的制備 取裝量差異項下的本制劑或其內(nèi)容物6g，精密稱定，置具塞三角燒瓶中，精密加甲醇50ml，稱定重量，在250W、29～34kHz條件下超聲處理1小時，放冷，加甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密吸取續(xù)濾液25ml，蒸干，殘渣用加水飽和的正丁醇50ml溶解，以氨試液20ml洗滌，分取正丁醇液，蒸干，殘渣用甲醇溶解并定容至5ml，搖勻，即得；測定法 精密吸取對照品溶液各10μl、20μl，供試品溶液10μl，注入液相色譜儀，測定，用外標兩點法自然對數(shù)方程計算，即得；本膠囊劑每粒含黃芪以黃芪甲苷C41H68O14計，不得少于0.13mg；顆粒劑每袋含黃芪以黃芪甲苷C41H68O14計，不得少于0.2～0.4mg；水丸每1g含黃芪以黃芪甲苷C41H68O14計，不得少于0.3mg；滴丸每1g含黃芪以黃芪甲苷C41H68O14計，不得少于0.13mg。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種治療糖尿病的降糖甲制劑及其制備方法和質量控制方法，它是用黃芪642.6g、酒炙黃精642.6g、地黃642.6g、太子參642.6g和天花粉642.6g制成的膠囊劑、顆粒劑、水丸或滴丸劑。與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明藥物吸收迅速，每次服用量減少，吸濕性小，穩(wěn)定性好；生產(chǎn)工序簡化，降低了生產(chǎn)成本；質量標準中增加了黃芪甲苷的含量測定及黃精、太子參、天花粉藥材的薄層色譜鑒別，提高了降糖甲制劑的質量控制標準，從而有效確保了該制劑的臨床療效。
文檔編號A61P3/00GK1903325SQ20061020075
公開日2007年1月31日 申請日期2006年7月28日 優(yōu)先權日2006年7月28日
發(fā)明者朱欽 申請人:貴州泰爾醫(yī)藥研究所