專(zhuān)利名稱(chēng)：經(jīng)取代的噠嗪基喹啉-4-基胺和嘧啶基喹啉-4-基胺類(lèi)似物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明大致為關(guān)于具有醫(yī)藥適用性質(zhì)之經(jīng)取代噠嗪基-喹啉-4-基胺和嘧啶-喹啉-4-基胺類(lèi)似物。本發(fā)明進(jìn)一步關(guān)于使用此等化合物于治療與辣椒素受體活化作用相關(guān)的病況的用途、用于鑒定其它與辣椒素受體結(jié)合的藥劑的用途，以及用于作為辣椒素受體檢測(cè)與定位的探針的用途。
先前技術(shù) 疼痛感覺(jué)，或傷害感覺(jué)，是受一群稱(chēng)為″傷害感受器(nociceptor)″的特化感覺(jué)神經(jīng)元的周邊末端所調(diào)節(jié)。有多種物理與化學(xué)刺激會(huì)在哺乳動(dòng)物誘發(fā)此等神經(jīng)元的活化，引起可能有害刺激的辨識(shí)。然而，傷害感受器活化作用的不當(dāng)或過(guò)度，會(huì)導(dǎo)致使人受盡折磨的急性或慢性疼痛。
神經(jīng)病理性疼痛涉及沒(méi)有刺激時(shí)的疼痛信號(hào)的傳遞，典型地是由神經(jīng)系統(tǒng)損傷所致。大多數(shù)情況下，此等疼痛被認(rèn)為是因周邊系統(tǒng)受到初次傷害后(例如經(jīng)由直接的傷害或全身性疾病)造成周邊與中樞神經(jīng)系統(tǒng)敏化所致。神經(jīng)病理性疼痛典型為灼熱、尖銳痛，而且其強(qiáng)度不但不會(huì)減緩，有時(shí)還可能隨著誘發(fā)該疼痛的初次傷害或疾病的惡化更形磨人。
現(xiàn)存對(duì)神經(jīng)病理性疼痛之處理法大多無(wú)效。鴉片(如嗎啡)為強(qiáng)力之止痛劑，但由于其不良副作用而使其適用性受限，如生理性成癮及戒斷特性，及呼吸抑制、情緒變化與并發(fā)便秘之腸蠕動(dòng)下降、惡心、嘔吐、及內(nèi)分泌與自主神經(jīng)系統(tǒng)改變。此外，神經(jīng)病理性疼痛經(jīng)常對(duì)傳統(tǒng)類(lèi)鴉片止痛劑療法沒(méi)有反應(yīng)或僅有部份反應(yīng)。使用N-甲基-D-天冬胺酸拮抗劑克他命(ketamine)或α(2)-腎上腺素激導(dǎo)性促效劑氯壓定(clonidine)可減輕急性或慢性疼痛，并可減少類(lèi)鴉片劑之用量，但此等制劑經(jīng)常因副作用而無(wú)法耐受。
過(guò)去曾使用辣椒素局部治療慢性與急性疼痛，包括神經(jīng)病理性疼痛。辣椒素為一種衍生自茄科(Solanaceae)植物(包括辣椒)之辛辣物質(zhì)，似乎可選擇性地作用在咸信可介導(dǎo)疼痛之小直徑之傳入神經(jīng)纖維(A-δ與C纖維)。對(duì)辣椒素之反應(yīng)特征為在周邊組織中持續(xù)活化傷害感受器，因而使得周邊傷害感受器對(duì)一種或多種刺激最后達(dá)到去敏感性。由動(dòng)物研究可見(jiàn)，辣椒素似乎藉由打開(kāi)鈣與鈉之陽(yáng)離子選擇性信道而激活C纖維膜去極化。
同樣具有類(lèi)香草醇(vanilloid)部份基團(tuán)之辣椒素結(jié)構(gòu)類(lèi)似物亦會(huì)引發(fā)類(lèi)似反應(yīng)。其中一種類(lèi)似物為樹(shù)脂毒素(resiniferatoxin)(RTX)，系大戟科(Euphorbia)植物之天然產(chǎn)物。類(lèi)香草醇受體(VR)系用于說(shuō)明辣椒素與此等相關(guān)刺激性化合物之神經(jīng)元膜辨識(shí)位置。辣椒素反應(yīng)受到另一種辣椒素類(lèi)似物(辣椒素受體阻斷劑(capsazepine))之競(jìng)爭(zhēng)性抑制(進(jìn)而擷抗)，亦受非選擇性陽(yáng)離子信道阻斷劑釕紅抑制，此等拮抗劑與VR結(jié)合不超過(guò)中等親和性(典型Ki值不低于140μM)。
已有人自大鼠與人類(lèi)之背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(dorsal root ganglioncells)選殖出類(lèi)香草醇受體。所判別出之第一種類(lèi)香草醇受體稱(chēng)為1型類(lèi)香草醇受體(VR1)，術(shù)語(yǔ)″VR1″與″辣椒素受體″在本文中可交換使用，系指此型之大鼠與/或人類(lèi)受體，及哺乳動(dòng)物同源物。VR1于疼痛感受中之角色已采用缺乏此受體之小白鼠確認(rèn)，此種小白鼠不會(huì)被類(lèi)香草醇誘發(fā)疼痛行為，且對(duì)熱與發(fā)炎之反應(yīng)已受損。VR1為一種非選擇性陽(yáng)離子信道，當(dāng)受到高溫、低pH與辣椒素受體促效劑時(shí)，其開(kāi)放閾值即下降。此辣椒素受體信道開(kāi)放后，通常即自表現(xiàn)該受體之神經(jīng)元與其它附近神經(jīng)元中釋出發(fā)炎性肽，增加疼痛反應(yīng)。受到辣椒素初次活化作用后，辣椒素受體即經(jīng)由依賴(lài)cAMP之蛋白質(zhì)激酶之磷酸化反應(yīng)，迅速去敏化反應(yīng)。
由于其在周邊組織中有對(duì)傷害感受器之去敏感化的能力，因此VR1促效劑類(lèi)香草醇化合物已被用為局部麻醉劑。然而，投予促效劑本身可能造成灼熱疼痛，而限制其治療用途。近來(lái)已有報(bào)告指出VR1拮抗劑(包括某些非類(lèi)香草醇化合物)亦適用于治療疼痛(參見(jiàn)例如PCT國(guó)際申請(qǐng)案公告案號(hào)WO 02/08221、WO 03/062209、WO 04/054582、WO04/055003、WO 04/055004、WO 04/056774、WO 05/007646、WO 05/07648、WO 05/007652、WO 05/009977、WO 05/009980，以及WO 05/009982)。
因此，需要會(huì)與VR1交互作用，但不會(huì)誘發(fā)VR1促效劑類(lèi)香草醇化合物之初期疼痛感覺(jué)之化合物來(lái)治療慢性與急性疼痛，包括神經(jīng)病理性疼痛，及其它對(duì)辣椒素受體調(diào)節(jié)作用有反應(yīng)之癥狀。本發(fā)明可符合此需求，并提供進(jìn)一步的優(yōu)點(diǎn)。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種如下面式I的經(jīng)取代噠嗪基-喹啉-4-基胺和嘧啶-喹啉-4-基胺類(lèi)似物或其醫(yī)藥上可接受的鹽
其中式I (1)A為N且B為CR8，或(2)A為CR5且B為N； Y和Z各自獨(dú)立地為N或CR1； 每個(gè)R1獨(dú)立地為氫、鹵素、氰基、氨基、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基或單-或二-(C1-C4烷基)氨基； R2為 (i)氫或鹵素；或 (ii)C1-C6烷基、(C3-C7環(huán)烷基)C0-C4烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6氨基烷基、C1-C6羥基烷基、C2-C6烷基醚、單-或二-(C1-C6烷基)氨基C0-C4烷基或(4至7員雜環(huán)烷基)C0-C4烷基；以上基團(tuán)各自經(jīng)0至4個(gè)取代基取代，所述取代基獨(dú)立地選自鹵素、氰基、羥基、氨基、酮基、單-或二-(C1-C6烷基)氨基、C1-C6烷基C1-C6烷氧基或C1-C6鹵代烷基；R3為氫、COOH、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧基羰基或與R2一起形成稠合的任選經(jīng)取代的環(huán)； R4為氫、鹵素、氰基、氨基、COOH、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基或單-或二-(C1-C4烷基)氨基； 每個(gè)R5獨(dú)立地為氫、鹵素、氰基、氨基、COOH、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基或單-或二-(C1-C4烷基)氨基； R8為 (i)氫、羥基、鹵素、氰基、氨基、氨基羰基或COOH；或 (ii)通式為L(zhǎng)Ra的基團(tuán)； Ar為6至10員芳基或5至10員雜芳基，其各自經(jīng)0至6個(gè)獨(dú)立選自下列的取代基所取代 (i)酮基； (ii)通式為L(zhǎng)Ra的基團(tuán)；或 (iii)一起形成經(jīng)0至3個(gè)取代基所取代的5至7員稠合雜環(huán)的基團(tuán)，所述取代基獨(dú)立地選自羥基、鹵素、氨基、氨基羰基、氰基、硝基、酮基、COOH、C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷硫基、C1-C8烷?；?、C1-C8烷酰基氧基、C1-C8烷氧基羰基、C1-C8烷基醚、C1-C8羥基烷基、C1-C8鹵代烷基、苯基C0-C8烷基、單或二(C1-C6烷基)氨基C0-C4烷基、C1-C8烷基磺?；?4至7員雜環(huán))C0-C8烷基； L在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地選自單一共價(jià)鍵、O、(C＝O)、O(C＝O)、C(＝O)O、OC(＝O)O、S(O)m、N(Rx)、(C＝O)N(Rx)、N(Rx)(C＝O)、N(Rx)S(O)m、S(O)mN(Rx)或N[S(O)mRw]S(O)m；其中m在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地選自0、1或2；Rx在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地選自氫、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C1-C6烷?；駽1-C6烷基磺酰基；而Rw為氫或C1-C6烷基； Ra在每次出現(xiàn)時(shí)各自獨(dú)立地選自 (i)氫、鹵素、氰基或硝基；或 (ii)C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、(C3-C7環(huán)烷基)C0-C4烷基、C1-C8鹵代烷基、C2-C8烷基醚、單-或二-(C1-C8烷基)氨基或(3至10員雜環(huán))C0-C6烷基；以上基團(tuán)各自經(jīng)0至6個(gè)獨(dú)立選自下列的取代基所取代 (a)羥基、鹵素、氨基、氨基羰基、氰基、硝基、酮基、COOH；或 (b)C1-C8烷基、C2-C8烯基、(C3-C7環(huán)烷基)C0-C4烷基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷硫基、C1-C8烷?；1-C8烷?；趸1-C8烷氧基羰基、C1-C8烷基醚、C1-C8羥基烷基、C1-C8鹵代烷基、苯基C0-C8烷基、單-或二-(C1-C6烷基)氨基羰基、單-或二-(C1-C6烷基)氨基C0-C4烷基、C1-C8烷基磺?；?4至7員雜環(huán))C0-C8烷基，以上基團(tuán)各自經(jīng)0至4個(gè)獨(dú)立選自羥基、氨基、C1-C4烷基或C1-C4烷氧基的取代基所取代。
在某些方面中，式I之化合物為VR1調(diào)節(jié)劑，且其于辣椒素受體結(jié)合性分析試驗(yàn)中之Ki不超過(guò)1微莫耳(micromolar)濃度、500奈莫耳(nanomolar)濃度、100奈莫耳濃度、50奈莫耳濃度、10奈莫耳濃度或1奈莫耳濃度及/或在測(cè)定辣椒素受體促效劑或拮抗劑活性分析試驗(yàn)中之EC50或IC50值不超過(guò)1微莫耳濃度、500奈莫耳濃度、100奈莫耳濃度、50奈莫耳濃度、10奈莫耳濃度或1奈莫耳濃度。某些具體實(shí)施例中，此等VR1調(diào)節(jié)劑為VR1拮抗劑，且于辣椒素受體活化作用活體外分析試驗(yàn)中(如在本文實(shí)施例6所提供的分析試驗(yàn))在等于IC50值、10倍于IC50值或100倍于IC50值的濃度時(shí)，沒(méi)有可檢測(cè)到之促效劑活性。
在某些方面中，本文提供所的化合物是以可檢測(cè)的標(biāo)記物標(biāo)記(例如經(jīng)放射性標(biāo)記或經(jīng)螢光素共軛)。
本發(fā)明進(jìn)一步提供醫(yī)藥組合物，在其它方面，其包含至少一種式I的化合物(如，本文所提供的化合物或其醫(yī)藥上可接受之鹽)與生理上可接受之載劑或賦形劑組合。
在又一方面中，本發(fā)明提供一種降低細(xì)胞辣椒素受體之鈣傳導(dǎo)的方法，其包括由表現(xiàn)辣椒素受體的細(xì)胞(例如神經(jīng))與本文說(shuō)明之至少一種VR1調(diào)節(jié)劑以治療上有效的濃度接觸。此等接觸可于活體內(nèi)或于活體外進(jìn)行。
進(jìn)一步提供抑制類(lèi)香草醇配位體與辣椒素受體結(jié)合之方法。某些此等態(tài)樣中，抑制作用系于活體外進(jìn)行。此等方法包括將本文所說(shuō)明之至少一種VR1調(diào)節(jié)劑，于足以檢測(cè)到抑制類(lèi)香草醇配位體與辣椒素受體結(jié)合之條件與用量或濃度下，與辣椒素受體接觸。其它此等態(tài)樣中，辣椒素受體系在患者體內(nèi)。此等方法包括使患者體內(nèi)表現(xiàn)辣椒素受體之細(xì)胞接觸至少一種本文所說(shuō)明之VR1調(diào)節(jié)劑，其VR1所用之濃度為于活體外試驗(yàn)中足以檢測(cè)到抑制類(lèi)香草醇配位體對(duì)表現(xiàn)經(jīng)選殖辣椒素受體細(xì)胞之結(jié)合，因此抑制類(lèi)香草醇配位體對(duì)患者體內(nèi)之辣椒素受體之結(jié)合。
本發(fā)明尚提供一種治療患者體內(nèi)對(duì)辣椒素受體調(diào)節(jié)作用有反應(yīng)之癥狀之方法，其包括對(duì)患者投予醫(yī)療有效量之至少一種本文所說(shuō)明之VR1調(diào)節(jié)劑。
在其它方面，提供一種為患者治療疼痛之方法，其包括對(duì)罹患(或有風(fēng)險(xiǎn)罹患)疼痛之患者投予醫(yī)療有效量之至少一種本文所說(shuō)法明之VR1調(diào)節(jié)劑。
尚提出一種治療患者之搔癢、尿失禁、膀胱過(guò)動(dòng)癥、咳嗽與/或呃逆之方法，其包括對(duì)罹患(或有風(fēng)險(xiǎn)罹患)上述一種或多種癥狀之患者投與醫(yī)療有效量之至少一種本文所說(shuō)明之VR1調(diào)節(jié)劑。
本發(fā)明尚提供一種促進(jìn)肥胖患者減輕體重之方法，其包括對(duì)肥胖患者投與醫(yī)療有效量之至少一種本文所說(shuō)明之VR1調(diào)節(jié)劑。
此方法復(fù)提供作為與辣椒素受體結(jié)合藥劑之鑒定，其包括(a)將辣椒素受體與本文所說(shuō)明有標(biāo)記之VR1調(diào)節(jié)劑，于可使VR1調(diào)節(jié)劑與辣椒素受體結(jié)合之條件下接觸，藉以產(chǎn)生已結(jié)合之有標(biāo)記之VR1調(diào)節(jié)劑；(b)于無(wú)試驗(yàn)制劑存在下檢測(cè)與已結(jié)合之有標(biāo)記VR1調(diào)節(jié)劑含量相應(yīng)之訊號(hào)；(c)將已結(jié)合之有標(biāo)記VR1調(diào)節(jié)劑與試驗(yàn)制劑接觸；(d)在試驗(yàn)制劑之存在下檢測(cè)與已結(jié)合之有標(biāo)記VR1調(diào)節(jié)劑含量相應(yīng)之訊號(hào)；及(e)與步驟(b)所檢測(cè)到之訊號(hào)比較，測(cè)定步驟(d)之訊號(hào)降低程度。
在又一方面中，本發(fā)明提供一種決定樣本中是否含有辣椒素受體之方法，其包括(a)將樣本與本文所說(shuō)明VR1調(diào)節(jié)劑于可使化合物與辣椒素受體結(jié)合之條件下接觸；與(b)檢測(cè)與辣椒素受體結(jié)合之VR1調(diào)節(jié)劑量。
本發(fā)明亦提供一種包裝之醫(yī)藥制劑，其包含(a)含于容器中之本文所說(shuō)明醫(yī)藥組合物；與(b)使用該組合物治療對(duì)辣椒素受體調(diào)節(jié)作用有反應(yīng)之一種或多種癥狀之說(shuō)明書(shū)，如疼痛、搔癢、尿失禁、膀胱過(guò)動(dòng)癥、咳嗽、呃逆與/或肥胖。
在再又一方面中，本發(fā)明提供一種制備本文所揭示化合物(包括中間物)之方法。
本發(fā)明此等與其它方面將可參考下列詳細(xì)說(shuō)明而了解。
實(shí)施方式 如上述，本發(fā)明提供經(jīng)取代的具有有用的醫(yī)藥特性的經(jīng)取代噠嗪基-喹啉-4-基胺和嘧啶基-喹啉-4-基胺類(lèi)似物。此等化合物可用于活體外或活體內(nèi)，依多種方式調(diào)節(jié)(最佳為抑制)辣椒素受體活性。
術(shù)語(yǔ)說(shuō)明 本文中通常采用標(biāo)準(zhǔn)命名法說(shuō)明化合物。具有不對(duì)稱(chēng)中心之化合物(除非另有說(shuō)明，否則)包括所有光學(xué)異構(gòu)物與其混合物。此外，具有碳-碳雙鍵之化合物可能出現(xiàn)Z-與E-型，除非另有說(shuō)明化合物之所有異構(gòu)型均包括在本發(fā)明中。若化合物呈多種互變異構(gòu)型時(shí)，所出示之化合物并不限于任一種特定互變異構(gòu)物，而希望包括所有互變異構(gòu)型。本文中某些化合物系以包括代號(hào)之通式說(shuō)明(例如R1、A1、X)。除非另有說(shuō)明，否則此等化學(xué)式中各代號(hào)之定義分別與其它代號(hào)獨(dú)立，化學(xué)式中任何出現(xiàn)一次以上之代號(hào)每次出現(xiàn)時(shí)之定義亦分別獨(dú)立。
術(shù)語(yǔ)″經(jīng)取代噠嗪基-喹啉-4-基胺和嘧啶基-喹啉-4-基胺類(lèi)似物″用于本文中指所有式I化合物，以及該等化合物的醫(yī)藥上可接受的鹽。此等化合物包括其中的喹啉核心是藉由添加環(huán)氮原子而修飾的類(lèi)似物，以及在核心結(jié)構(gòu)上附接各種取代基(如在后文中所述)的類(lèi)似物。換言之，喹啉-4-基胺類(lèi)、[1，8]萘啶-4-基胺類(lèi)、[1，5]萘啶-4-基胺類(lèi)以及[1，8]萘啶-4-基胺類(lèi)、吡啶并[2，3-b]吡嗪-8-基胺類(lèi)之化合物屬于喹啉-4-基胺類(lèi)似物的范圍之內(nèi)。
″醫(yī)藥上可接受之鹽類(lèi)″在此技藝中一般認(rèn)為是適用于與人類(lèi)或動(dòng)物之組織接觸，不會(huì)引起過(guò)度毒性，刺激性、過(guò)敏反應(yīng)或其它問(wèn)題或并發(fā)癥之酸或堿鹽類(lèi)。此等鹽類(lèi)包括如具堿性殘基(如胺類(lèi))之無(wú)機(jī)酸與有機(jī)酸鹽類(lèi)，及如具酸性殘基(如羧酸)之堿金屬或有機(jī)鹽類(lèi)。明確之醫(yī)藥用鹽類(lèi)包括(但不限于)，酸如鹽酸、磷酸、氫溴酸、蘋(píng)果酸、乙醇酸、富馬酸、硫酸、胺磺酸、磺胺酸、甲酸、甲苯磺酸、甲磺酸、苯磺酸、乙二磺酸、2-羥基乙磺酸、硝酸、苯甲酸、2-乙酰氧基苯甲酸、檸檬酸、酒石酸、乳酸、硬脂酸、水楊酸、麩胺酸、抗壞血酸、雙羥萘酸、琥珀酸、富馬酸、馬來(lái)酸、丙酸、羥基馬來(lái)酸、氫碘酸、苯基乙酸、烷酸類(lèi)如乙酸、HOOC-(CH2)n-COOH，其中n為0至4，等等。同樣地，醫(yī)藥上可接受之陽(yáng)離子包括(但不限于)鈉、鉀、鈣、鋁、鋰與銨。習(xí)此相關(guān)技藝之人士咸了解本文所提供化合物之其它醫(yī)藥上可接受之型式，包括彼等列于RemingtonThe Science andPractice of Pharmacy，第21版，Lippincott Williams & Wilkins，Philadelphia，PA(2005)中之鹽類(lèi)。一般而言，醫(yī)藥上可接受之酸或堿鹽可由包含堿性或酸性部份基團(tuán)之母化合物依任何習(xí)知之化學(xué)方法制得。簡(jiǎn)言之，此等鹽類(lèi)之制法可將此等化合物之游離的酸或堿之型式與化學(xué)計(jì)量之適當(dāng)堿或酸，于水或有機(jī)溶劑中，或于此二者之混合物中反應(yīng)而制備；通常使用非水性介質(zhì)，如醚、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇或乙腈較佳。
咸了解，式I之各化合物可以，但不必要，配方為水合物、溶劑合物或非共價(jià)錯(cuò)化物。此外，多種不同結(jié)晶型及多態(tài)異構(gòu)物(polymorph)均在本發(fā)明范圍內(nèi)。本文亦提供式I化合物之前藥。″前藥″為一種不一定完全符合本文所提供化合物結(jié)構(gòu)式要求之化合物，但可在投予患者后，于活體內(nèi)修飾，產(chǎn)生式I或本文所提供其它化學(xué)式之化合物。例如前藥可為本文所提供化合物之?；苌?。前藥包括其中羥基、胺或硫氫基鍵結(jié)在任何基團(tuán)上之化合物，當(dāng)投予哺乳動(dòng)物個(gè)體后，會(huì)分別裂解形成游離羥基、胺基或氫硫基。前藥實(shí)例包括(但不限于)乙酸、甲酸、乙醇之磷酸及苯甲酸衍生物、以及本文所提供之化合物中之胺官能基。本文所提供化合物之前藥制法可修飾化合物中之官能基，使之可裂解形成母化合物。
本文所采用術(shù)語(yǔ)″烷基″指直鏈或分支鏈之飽和脂系烴。烷基包括具有1至8個(gè)碳原子(C1-C8烷基)、1至6個(gè)碳原子(C1-C6烷基)與1至4個(gè)碳原子(C1-C4烷基)之基團(tuán)，如甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、第二丁基、第三丁基、戊基、2-戊基、異戊基、新戊基、己基、2-己基、3-己基與3-甲基戊基?！錍0-Cn烷基″指單一共價(jià)鍵(C0)或具1至n個(gè)碳原子之烷基；″C0-C4烷基″指單一共價(jià)鍵或C1-C4烷基?！錍0-C8烷基″指單一共價(jià)鍵或C1-C8烷基。在本文中的一些例子，特別指出烷基的取代基。例如，”C1-C6氰基烷基”意指具有至少一個(gè)CN取代基的C1-C6烷基。一個(gè)代表性的分支氰烷基團(tuán)為C(CH3)2CN。同樣地，”C1-C6羥基烷基”意指具有至少一個(gè)OH取代基的C1-C6烷基。
″伸烷基″指如上述定義之二價(jià)烷基。C0-C3伸烷基為單一共價(jià)鍵或具有1、2或3個(gè)碳原子之伸烷基；C0-C4伸烷基為單一共價(jià)鍵或具有1至4個(gè)碳原子之伸烷基；及C1-C6伸烷基為單一共價(jià)鍵或具有1至6個(gè)碳原子之伸烷基。
″烯基″指直鏈或分支鏈烯基，其中含有至少一個(gè)不飽和碳-碳雙鍵。烯基包括C2-C8烯基、C2-C6烯基與C2-C4烯基，其分別含有2至8個(gè)、2至6個(gè)或2至4個(gè)碳原子，如乙烯基、烯丙基或異丙烯基?！迦不逯钢辨溁蚍种ф溁颦h(huán)狀炔基，其包含一個(gè)或多個(gè)不飽和碳-碳鍵，其中至少一個(gè)為參鍵。炔基包括C2-C8炔基、C2-C6炔基與C2-C4炔基，其分別含有2至8個(gè)、2至6個(gè)或2至4個(gè)碳原子。
″環(huán)烷基″為包含一個(gè)或多個(gè)飽和/或部份飽和環(huán)的基團(tuán)，其中所有環(huán)組員均為碳，如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、環(huán)辛基、金剛烷基、十氫萘基、八氫茚基，及如上述之部份飽和基團(tuán)，如環(huán)己烯基。環(huán)烷基不包括芳香環(huán)或雜環(huán)。某些環(huán)烷基為C3-C7環(huán)烷基，其中環(huán)包含3至7個(gè)環(huán)組員，而所有的環(huán)組員都為碳?！?C3-C8環(huán)烷基)C0-C6烷基”是經(jīng)由單一共價(jià)鍵或C1-C6伸烷基鍵聯(lián)的3至8員環(huán)烷基。
本文所采用″烷氧基″指如上述烷基利用氧橋連基附接。烷氧基包括C1-C6烷氧基與C1-C4烷氧基，其分別含有1至6個(gè)或1至4個(gè)碳原子。代表性之烷氧基團(tuán)為甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、第二丁氧基、第三丁氧基、正戊氧基、2-戊氧基、3-戊氧基、異戊氧基、新戊氧基、己氧基、2-己氧基、3-己氧基與3-甲基戊氧基。
同樣地，″烷硫基″指經(jīng)由硫橋連基附接的如上述之烷基。
術(shù)語(yǔ)″酮基″用于本文中指酮(keto)基(C＝O)。為非芳香系碳原子的取代基的酮基導(dǎo)致使-CH2-轉(zhuǎn)化成-C(＝O)-。
術(shù)語(yǔ)″烷?；逯钙渲刑荚映手辨溁蚍种帕兄；?例如-(C＝O)-烷基)。烷酰基具有所標(biāo)示數(shù)字的碳原子，其酮基團(tuán)的碳包括在該所標(biāo)示的碳原子數(shù)目中。例如C2烷?；鶠榫哂惺?(C＝O)CH3的乙?；鶊F(tuán)。烷?；?，例如C2-C8烷?；?、C2-C6烷?；cC2-C4烷?；?，其分別含有2至8個(gè)、2至6個(gè)或2至4個(gè)碳原子。″C1烷酰基″指-(C＝O)-H，其(與C2-C8烷?；?均包括在術(shù)語(yǔ)″C1-C8烷?；逯秶鷥?nèi)。
″烷酮″為其中碳原子呈直鏈或分支烷基排列之酮基?！錍3-C8烷酮″、”C3-C6烷酮″與″C3-C4烷酮″分別指具有3至8、至6或至4個(gè)碳原子之烷酮。例如C3烷酮基之結(jié)構(gòu)式為-CH2-(C＝O)-CH3。
同樣地，″烷基醚″指直鏈或分支醚取代基(亦即，經(jīng)以烷氧基取代的烷基基團(tuán))。烷基醚基團(tuán)包括C2-C8烷基醚、C2-C6烷基醚與C2-C4烷基醚，其分別具有2至8、至6或至4個(gè)碳原子。C2烷基醚之結(jié)構(gòu)式為-CH2-O-CH3。
術(shù)語(yǔ)″烷氧基羰基″指通過(guò)酮(-(C＝O)-)橋附接之烷氧基(亦即通式結(jié)構(gòu)為-C(＝O)-O-烷基之基團(tuán))。烷氧基羰基包括C1-C8、C1-C-6與C1-C4烷氧基羰基，其烷基部份分別具有1至8、至6或至4個(gè)碳原子(亦即，酮橋的碳不包括在所標(biāo)示的碳原子的數(shù)目?jī)?nèi))?！盋1烷氧基羰基”意指-C(＝O)-O-CH3；C1烷氧基羰基意指-C(＝O)-O-(CH2)2CH3或-C(＝0)-O-(CH2)2CH3。
本文所采用″烷酰氧基″指利用氧橋連基連結(jié)之烷?；?亦即通式結(jié)構(gòu)為-O-C(＝O)-烷基之基團(tuán))。烷酰氧基包括C2-C8、C2-C6與C2-C4烷酰氧基，其烷基部份分別具有2至8、至6或至4個(gè)碳原子。例如，”C2烷酰氧基”意指-O-C(＝O)-CH3。
″烷基磺酰基″指式-(SO2)-烷基之基團(tuán)，其中附接點(diǎn)為硫原子。烷基磺?；–1-C6烷基磺?；cC1-C4烷基磺?；?，其分別具有1至6個(gè)或1至4個(gè)碳原子。甲基磺?；鶠橐淮硇灾榛酋；?。
″烷基胺基″指通式結(jié)構(gòu)為NH-烷基或-N(烷基)(烷基)之二級(jí)或三級(jí)胺，其中各烷基可獨(dú)立地選自烷基、環(huán)烷基及(環(huán)烷基)烷基。此等基團(tuán)包括例如單-與二-(C1-C8烷基)胺基，其中各C1-C8烷基可為相同或相異且可含1至8個(gè)碳原子，且單-與二-(C1-C6烷基)胺基與單-與二-(C1-C4烷基)胺基亦然。
″烷基胺基烷基″指利用伸烷基連結(jié)之烷基胺基(亦即具有通式結(jié)構(gòu)為-伸烷基-NH-烷基或-伸烷基-N(烷基)(烷基)之基團(tuán))，其中各烷基為獨(dú)立地選自烷基、環(huán)烷基及(環(huán)烷基)烷基。烷基氨基烷基包括，例如單-與二-(C1-C8烷基)胺基C1-C8烷基、單-與二-(C1-C6烷基)胺基C1-C6烷基與單-與二-(C1-C6烷基)胺基C1-C4烷基?！鍐?或二-(C1-C6烷基)胺基C0-C6烷基″指利用單一共價(jià)鍵或C1-C6伸烷基連結(jié)之單-或二-(C1-C6烷基)胺基C0-C6烷基。代表性烷基胺基烷基如下
咸理解在術(shù)語(yǔ)”烷基氨基”與”烷基氨基烷基”所用的”烷基”的定義與在所有其它含烷基基團(tuán)中所用的”烷基”的定義不同，而在環(huán)烷基與(環(huán)烷基)烷基所包括的范圍(例如，(C3-C7環(huán)烷基)C0-C6烷基)。
如在本文中所用，”(4至7員雜環(huán)烷基)氨基”意指式-N(R)(R)的基團(tuán)，其中一個(gè)R是4至7員雜環(huán)烷基環(huán)而另一個(gè)R是氫或C1-C6烷基。
術(shù)語(yǔ)″胺基羰基″指酰胺基團(tuán)(亦即-(C＝O)NH2)。術(shù)語(yǔ)″單-或二-(C1-C6烷基)胺基羰基″指式-(C＝O)-N(R)2的基團(tuán)，其中羰基是附接點(diǎn)，一個(gè)R是C1-C6烷基而另一個(gè)R是氫或獨(dú)立選擇的C1-C6烷基。
術(shù)語(yǔ)″鹵素″指氟、氯、溴或碘。
″鹵代烷基″為經(jīng)一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立選擇的鹵素所取代的烷基(例如″鹵代C1-C8烷基″具有1至8個(gè)碳原子；″鹵代C1-C6烷基″具有1至6個(gè)碳原子)。鹵代烷基實(shí)例包括(但不限于)單-、二-或三-氟甲基；單-、二-或三-氯甲基；單-、二-、三-、四-或五-氟乙基；單-、二-、三-、四-或-五氯乙基；與1，2，2，2-四氟-1-三氟甲基-乙基。典型鹵烷基為三氟甲基與二氟甲基。術(shù)語(yǔ)″鹵烷氧基″指利用氧橋附接的如前文所定義的鹵代烷基?！錍1-C8鹵代烷氧基″具有1至8個(gè)碳原子。”鹵代烷基磺?；币庵咐?SO2-橋附接的鹵代烷基?！錍1-C6鹵代烷氧基″具有1至6個(gè)碳原子。
位于兩個(gè)字母或代號(hào)之間之短折線(xiàn)(″-″)系用于表示取代基之附接點(diǎn)。例如-CONH2系利用碳原子附接。
″碳環(huán)″或″碳環(huán)基″包括至少一個(gè)完全由碳-碳鍵形成之環(huán)(在本文中稱(chēng)為碳環(huán))且不含雜環(huán)。除非另有說(shuō)明，否則碳環(huán)中之各碳環(huán)可獨(dú)立地為飽和、部份飽和或芳香系者。碳環(huán)通常具有1至3個(gè)稠合、側(cè)接或螺之環(huán)；某些具體實(shí)施例中之碳環(huán)可具有一個(gè)環(huán)或兩個(gè)稠合環(huán)。典型地，各環(huán)包含3至8個(gè)環(huán)組員(亦即C3-C8)；C5-C7環(huán)則出現(xiàn)在某些具體實(shí)施例中。包括稠合、側(cè)接或螺環(huán)之碳環(huán)典型地包含9至14個(gè)環(huán)組員。某些碳環(huán)為C5-C6(亦即，含5至6個(gè)環(huán)員)。某些代表性碳環(huán)為如上述環(huán)烷基。其它碳環(huán)為芳基(亦即包含至少一個(gè)芳香系碳環(huán)，該環(huán)具有或不具有額外的芳香系環(huán)和/或環(huán)烷環(huán))。此等芳基碳環(huán)包括，例如苯基、萘基(例如，1-萘基和2-萘基)、茀基、茚基與1，2，3，4-四氫-萘基。C6-C10芳基C0-C8烷基為彼等其中的碳環(huán)包括藉由直接鍵結(jié)或透過(guò)C1-C8烷基所鍵聯(lián)的至少一個(gè)芳香環(huán)。該基團(tuán)是包括，例如，苯基與茚基，以及上述任一基團(tuán)經(jīng)由C1-C8烷基(較佳為經(jīng)由C1-C4烷基)而連接的基團(tuán)。其它碳環(huán)為(C3-C8碳環(huán))C0-C4烷基(亦即，其中3至8員碳環(huán)是經(jīng)由單一共價(jià)鍵或C1-C4伸烷基鍵聯(lián)的碳環(huán))。例如，經(jīng)由直接鍵結(jié)或烷基連接的苯基，可記為苯基C0-C8烷基(例如，芐基、1-苯基-乙基、1-苯基-丙基及2-苯基-乙基)。
″雜環(huán)″或″雜環(huán)基″具有1至3個(gè)稠合、側(cè)接或螺之環(huán)；其中至少一個(gè)為雜環(huán)(亦即一個(gè)或多個(gè)環(huán)原子為獨(dú)立選自O(shè)、S、N的雜原子，其余環(huán)原子為碳)。典型地，雜環(huán)包含1、2、3或4個(gè)雜原子；某些具體實(shí)施例中，各雜環(huán)中每個(gè)環(huán)具有1或2個(gè)雜原子。各雜環(huán)通常包含3至8個(gè)環(huán)組員(某些具體實(shí)施例中出示具有4或5至7個(gè)環(huán)組員之環(huán))與典型含有9至14個(gè)環(huán)組員之包含稠合、側(cè)接或螺之環(huán)之雜環(huán)。某些雜環(huán)包含硫原子作為環(huán)組員；某些具體實(shí)施例中，硫原子經(jīng)氧化成SO或SO2。雜環(huán)可視需要經(jīng)多種，如所指定，之取代基取代。除非另有說(shuō)明，否則雜環(huán)可為雜環(huán)烷基(亦即各環(huán)為飽和或部份飽和)或雜芳基(亦即基團(tuán)中至少一個(gè)環(huán)為芳香系)，如5至10員雜芳基(其可為單環(huán)系或雙環(huán)系)或6員雜芳基(例如，吡啶基或嘧啶基)。雜環(huán)一般可藉任何環(huán)原子連結(jié)，以提供穩(wěn)定之成品化合物。N-連結(jié)之雜環(huán)基系利用其組成氮原子連結(jié)。
雜環(huán)基包括例如全氫吖呼基(azepanyl)、吖

基(azocinyl)、苯并咪唑基、苯并咪唑啉基、苯并異噻唑基、苯并異

唑基、苯并呋喃基、苯并硫代呋喃基、苯并

唑基、苯并噻唑基、苯并四唑基、

基、

烯基、噌啉基、十氫喹啉基、二氫呋喃并[2，3-b]四氫呋喃基、二氫異喹啉基、二氫四氫呋喃基、1，4-二氧雜-8-氮雜-螺[4.5]癸基、二噻

基、呋喃基、呋呫基、咪唑啉基、咪唑啶基、咪唑基、吲唑基、吲哚烯基、吲哚啉基、吲

基、吲哚基、異苯并呋喃基、異

基、異吲唑基、異吲哚啉基、異吲哚基、異噻唑基、異

唑基、異喹啉基、嗎啉基、

啶基、八氫異喹啉基、

二唑基、

唑啶基、

唑基、呔

基、哌

基、哌啶基、哌啶酮基、蝶啶基、嘌呤基、吡喃基、吡

基、吡唑啶基、吡唑啉基、吡唑基、嗒

基、吡啶并咪唑基、吡啶并

唑基、吡啶并噻唑基、吡啶基、嘧啶基、吡咯啶基、吡咯啶酮基、吡咯啉基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、喹

啉基、奎寧環(huán)基、四氫異喹啉基、四氫喹啉基、四唑基、噻二

基、噻二唑基、噻唑基、噻吩并噻唑基、噻吩并

唑基、噻吩并咪唑基、噻吩基、噻吩基(thiophenyl)、硫代嗎啉基(與其中硫原子經(jīng)氧化之變化基團(tuán))、三

基、與如本文所說(shuō)明經(jīng)1至4取代基取代之上述任何基團(tuán)。
某些雜環(huán)基是含是需要經(jīng)取代的1個(gè)雜環(huán)或2個(gè)稠合環(huán)或螺環(huán)的4至10員、5至10員、3至7員、4至7員或5至7員雜環(huán)基。4至10員雜環(huán)烷基包括，例如哌啶基、哌嗪基、吡咯烷基、吖呯基、1，4-二

-8-吖-螺[4.5]癸-8-基、N-嗎啉基、N-硫代嗎啉基以及1，1-二

-硫代嗎啉-4-基。此等基團(tuán)可如所標(biāo)示的經(jīng)取代。代表性的芳香族雜環(huán)為吖口辛基、吡啶基、嘧啶基、咪唑基、四唑基以及3，4-二氫-1H-異喹啉-2-基。C3-C10雜環(huán)烷基包括，例如哌啶基、哌嗪基、吡咯烷基、吖呯基、1，4-二

-8-吖-螺[4.5]癸-8-基、N-嗎啉基、N-硫代嗎啉基以及1，1-二

-硫代嗎啉-4-基，以及其中各前述基團(tuán)是經(jīng)取代的基團(tuán)。代表性的芳香族雜環(huán)為吖口辛基、吡啶基、嘧啶基、咪唑基、四唑基以及3，4-二氫-1H-異喹啉-2-基。
″雜環(huán)C0-C6烷基″為利用單一共價(jià)鍵或C1-C6伸烷基連結(jié)之雜環(huán)。(3至10員雜環(huán))C0-C6烷基為利用具1至6個(gè)碳原子之伸烷基連結(jié)之3至10員雜環(huán)。(4至7員雜環(huán))C0-C4烷基為利用單一共價(jià)鍵或C1-C4伸烷基鍵聯(lián)的4至7個(gè)員雜環(huán)烷基環(huán)。
本文所采用″取代基″指共價(jià)鍵結(jié)至有興趣的分子中原子之分子部份基團(tuán)。例如”環(huán)取代基”可為如鹵素、烷基、鹵代烷基或其它基團(tuán)的部份基團(tuán)，該部份基團(tuán)共價(jià)鍵結(jié)至是環(huán)員的原子(較佳為碳原子或氮原子)。芳香族取代基一般共價(jià)鍵結(jié)至環(huán)碳原子。術(shù)語(yǔ)"取代″指使用如上述取代基置換分子結(jié)構(gòu)中氫原子，但不可超過(guò)所指定原子上之價(jià)數(shù)，并可由此取代法得到化學(xué)上安定之化合物(亦即可以單離、判定其特性及測(cè)試其生物活性)。
″可任選經(jīng)取代″之基團(tuán)為未經(jīng)取代或經(jīng)氫以外之一個(gè)或多個(gè)合適基團(tuán)(其可相同或相異)取代在一個(gè)或多個(gè)可利用之位置，典型為1、2、3、4或5個(gè)位置。可任選取代亦以″經(jīng)0至X個(gè)取代基取代″的語(yǔ)法表示，其中X為可使用的取代基的最大數(shù)目。某些可任選經(jīng)取代之基團(tuán)系經(jīng)0至2、至3或至4個(gè)分別獨(dú)立選出之取代基取代(亦即未經(jīng)取代或經(jīng)至多達(dá)所出示之最大取代基數(shù)目取代)。其它任選經(jīng)取代的基團(tuán)為經(jīng)至少一個(gè)取代基(例如，經(jīng)自1至2、至3或至4個(gè)獨(dú)立選出的取代基取代)。
術(shù)語(yǔ)″VR1″與″辣椒素受體″在本文中交換使用，指第1型類(lèi)香草醇受體。除非另有說(shuō)明，否則此等術(shù)語(yǔ)包括大鼠與人類(lèi)VR1受體(例如GenBank登錄號(hào)AF327067、AJ277028與NM_018727；某些人類(lèi)VR1cDNAs及所編碼的氨基酸序列由美國(guó)專(zhuān)利案No.6,482,611所提供)，及在其它物種中發(fā)現(xiàn)之其同源物。
″VR1調(diào)節(jié)劑″亦在本文中稱(chēng)為″調(diào)節(jié)劑″，為一種調(diào)節(jié)VR1活化作用和/或VR1-介導(dǎo)的信息傳導(dǎo)作用的化合物。本文所明確提供之VR1調(diào)節(jié)劑為式I化合物與式I化合物之醫(yī)藥上可接受之鹽類(lèi)。VR1調(diào)節(jié)劑可為VR1促效劑或拮抗劑。某些調(diào)節(jié)劑與VR1結(jié)合之Ki小于1微莫耳濃度，較佳為小于，500奈莫耳濃度、100奈莫耳濃度、10奈莫耳濃度或1奈莫耳濃度。本文實(shí)例5為測(cè)定VR1之Ki之代表性分析試驗(yàn)。
若調(diào)節(jié)劑顯著抑制類(lèi)香草醇配位體與VR1結(jié)合和/或VR1-介導(dǎo)的信息傳導(dǎo)(采用例如實(shí)例6所提供的代表性分析試驗(yàn))，則此等調(diào)節(jié)劑視為″拮抗劑″；通常此等拮抗劑在實(shí)例6所提供之分析試驗(yàn)中抑制VR1活化作用之IC50值小于1微莫耳濃度，較佳為小于500奈莫耳濃度，較佳為小于100奈莫耳濃度，小于10奈莫耳濃度或1奈莫耳濃度。VR1拮抗劑包括中性拮抗劑與反促效劑。
VR1之″反促效劑″為當(dāng)不添加類(lèi)香草醇配位體時(shí)，使VR1之活性降至其基礎(chǔ)活性以下之化合物。VR1之反促效劑亦可抑制類(lèi)香草醇配位體對(duì)VR1之活性，和/或亦可抑制類(lèi)香草醇配位體與VR1結(jié)合。VR1之基礎(chǔ)活性及因VR1拮抗劑之存在而造成VR1活性之降低，可采用鈣移動(dòng)分析試驗(yàn)測(cè)定，如實(shí)例6之分析試驗(yàn)。
VR1之″中性拮抗劑″為一種抑制類(lèi)香草醇配位體對(duì)VR1之活性，但不會(huì)顯著改變受體基礎(chǔ)活性之化合物(亦即在實(shí)例6所述之鈣移動(dòng)分析試驗(yàn)中，沒(méi)有類(lèi)香草醇配位體存在時(shí)，VR1活性降低程度不超過(guò)10％，更佳為不超過(guò)5％，甚至更佳為不超過(guò)2％；最佳為沒(méi)有可偵測(cè)到之活性下降)。VR1之中性拮抗劑可抑制類(lèi)香草醇配位體與VR1結(jié)合。
本文所采用″辣椒素受體促效劑″或″VR1促效劑″為一種提高受體之活性超過(guò)受體之基礎(chǔ)活性之化合物(亦即加強(qiáng)VR1活化作用和/或VR1所介導(dǎo)之訊息傳導(dǎo))。辣椒素受體促效劑活性可采用實(shí)例6所提供之代表性分析試驗(yàn)判別。一般而言，此等促效劑在實(shí)例6所提供之分析試驗(yàn)中，EC50值小于1微莫耳濃度，較佳為小于500奈莫耳濃度，較佳為小于100奈莫耳濃度，更佳為小于10奈莫耳濃度。
″類(lèi)香草醇″為辣椒素或任何包含苯基環(huán)的化合物，此等苯環(huán)是利用兩個(gè)氧原子與相鄰環(huán)碳原子鍵結(jié)(其中一個(gè)碳原子與苯環(huán)上所鍵結(jié)之第三個(gè)部份基團(tuán)之附接點(diǎn)呈對(duì)位)。辣椒素是一種代表性的類(lèi)香草醇?！孱?lèi)香草醇配位體″為一種類(lèi)香草醇，若其與VR1結(jié)合之Ki(依本文所說(shuō)明方法測(cè)定)不超過(guò)10μm。類(lèi)香草醇配位體促效劑包括辣椒素、歐凡尼(olvanil)、N-花生四烯?；?多巴胺與樹(shù)脂毒素(resiniferatoxin)(RTX)。類(lèi)香草醇配位體拮抗劑包括辣椒素氮呯(capsazepine)與碘代樹(shù)脂毒素。
″治療有效量″(或劑量)為當(dāng)投予患者時(shí)，至始可辨識(shí)之患者得益(例如使至少一種接受治療的癥狀顯著減輕)時(shí)之用量。此等減輕程度可采用任何適當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)，包括緩和一種或多種所治療的癥狀，如疼痛。治療有效量或劑量通?？墒贵w液(如血液、血漿、血清、腦脊液(CSF)、滑液、淋巴液、細(xì)胞間質(zhì)液、眼淚或尿液)中化合物濃度足以改變類(lèi)香草醇配位體與VR1之活體外結(jié)合性(采用實(shí)例5所提供之分析試驗(yàn))和/或VR1所介導(dǎo)的信息傳導(dǎo)(采用實(shí)例6所提供之分析試驗(yàn))。咸理解可辨識(shí)的患者得益可在單次劑量的投予之后顯現(xiàn)，或可在治療有效劑量的數(shù)次投予之后顯現(xiàn)，其投予是取決于各所投予的化合物的說(shuō)明書(shū)根據(jù)預(yù)先決定的療程而決定。
本文所用的“統(tǒng)計(jì)上顯著的”是指自控制組變化至少p＜0.1的結(jié)果。顯著的程度是如使用統(tǒng)計(jì)顯著的標(biāo)準(zhǔn)參數(shù)分析試驗(yàn)如學(xué)生T試驗(yàn)。
″患者″為接受本文所提供化合物治療之任何個(gè)體。患者包括人類(lèi)，及其它動(dòng)物如寵物(例如狗與貓)與家畜?；颊呖赡茴緭Q一種或多種對(duì)辣椒素受體調(diào)節(jié)作用有反應(yīng)之癥狀(例如疼痛、曝露至類(lèi)香草醇配位體、搔癢、尿失禁、膀胱過(guò)動(dòng)癥、呼吸病變、咳嗽與/或呃逆)，或可能沒(méi)有此等癥狀(亦即治療可為在認(rèn)為有發(fā)展此等癥狀的風(fēng)險(xiǎn)的患者為預(yù)防性者)。
經(jīng)取代的噠嗪基喹啉-4-基胺和嘧啶基喹啉-4-基胺類(lèi)似物 如上述，本發(fā)明提供經(jīng)取代的噠嗪基喹啉-4-基胺和嘧啶基喹啉-4-基胺類(lèi)似物，其可用于多個(gè)方面，包括治療疼痛(例如神經(jīng)病理性或周邊神經(jīng)所介導(dǎo)之疼痛)；曝露至辣椒素；曝露至酸、熱、光、催淚氣體、空氣污染物(如，例如香煙)、傳染性制劑(包括病毒、細(xì)菌與酵母菌)、胡椒噴霧或相關(guān)制劑；呼吸癥狀如氣喘或慢性阻塞性肺??；搔癢；尿失禁或膀胱過(guò)動(dòng)癥；咳嗽或呃逆；和/或肥胖。此等化合物亦可用于活體外分析試驗(yàn)(例如受體活性分析試驗(yàn))，作為偵測(cè)及定位VR1之探針，及作為配位體結(jié)合性與VR1所介導(dǎo)訊息傳導(dǎo)分析試驗(yàn)之標(biāo)準(zhǔn)物。
在某些式I或其它本文所提供式的化合物中，Z和/或Y是N(例如，Z是N而Y是CR1、Y是N而Z是CR1或Z和Y都是N)。在其它化合物中，Y是CH(例如，其中的Y和Z都是CH的化合物)。
Ar1在本文的所提供的某些化合物中是苯基或6員雜芳基，這些基團(tuán)各自經(jīng)0至3個(gè)取代基所取代，所述取代基獨(dú)立地選自(a)通式為L(zhǎng)Ra的基團(tuán)，或(b)一起形成任選經(jīng)取代的稠合的5至7員雜環(huán)，所述的雜環(huán)經(jīng)0至3個(gè)獨(dú)立地選自Rb的取代基所取代。此等Ar基團(tuán)分別包括苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、噠嗪基，其各經(jīng)0、1或2個(gè)如上所述的取代基所取代。在某些具體實(shí)例中，一個(gè)該等取代基是位在6員Ar2的對(duì)位位置。任選的Ar2取代基是如前文所述者，且包括，例如，鹵素、羥基、氰基、氨基、C1-C6烷基、C1-C6鹵代烷基、C1-C6羥基烷基、C1-C6烷基醚、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C1-C6烷?；1-C6烷基磺?；?、C1-C6鹵代烷基磺酰基、C1-C6烷基磺酰氨基、C1-C6鹵代烷基磺酰氨基、單-或二-(C1-C6烷基)氨基或3至10員雜環(huán)烷基。優(yōu)選的Ar取代基包括鹵素、氰基、C1-C6烷基、C1-C6鹵代烷基、C1-C6羥基烷基、C1-C6氰基烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6鹵代烷氧基、C1-C6烷基醚、C1-C6烷酰基、C1-C6烷基磺?；?、C1-C6鹵代烷基磺?；?、氨基、單-或二-(C1-C6烷基)氨基或5或6員雜環(huán)烷基。在某些此等化合物中，Ar是苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、噠嗪基，其各經(jīng)0、1或2個(gè)獨(dú)立選自下列者的取代基所取代鹵素、氰基、氨基、C1-C4烷基、C1-C4羥基烷基、C1-C4氰基烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷?；1-C4鹵代烷基、C1-C4烷基磺?；1-C4鹵代烷基磺?；?或二-(C1-C4烷基)氨基或5或6員雜環(huán)烷基。
在某些本文所提供的化合物中，R2是氫、鹵素、C1-C6烷基、C4-C7環(huán)烷基、C2-C6烷基醚、單-或二-(C1-C6烷基)氨基、嗎啉基C0-C2烷基、吡咯烷基C0-C2烷基、哌嗪基C0-C2烷基、哌啶基C0-C2烷基或氮雜環(huán)丁烷基C0-C2烷基，以上基團(tuán)各自經(jīng)0至4個(gè)取代基取代，所述取代基獨(dú)立地選自鹵素、氰基、羥基、氨基、酮基、單-或二-(C1-C6烷基)氨基、C1-C6烷基或C1-C6鹵代烷基。代表性的R2是氫、鹵素、C1-C4烷基或C1-C4烷基醚。
R3在某些化合物中是氫。
R3在本文所提供的某些化合物中是氫、氰基、C1-C6烷基、C1-C6鹵代烷基、C1-C6烷氧基或C1-C6鹵代烷氧基。代表性的R4基團(tuán)包括鹵素、氰基、甲基和三氟甲基。
R5在本文所提供的某些化合物中在每次出現(xiàn)時(shí)是獨(dú)立的選自氫、鹵素、氰基、C1-C6烷基、C1-C6鹵代烷基、C1-C6烷氧基或C1-C6鹵代烷氧基。在一個(gè)子式中，標(biāo)示為R5的取代基恰有一個(gè)不為氫。在另一子式中，每個(gè)R5均為氫。
在特定化合物中，B是CR8，且R8是(i)氫、羥基、氰基、氨基羰基或COOH；或(ii)C1-C8烷氧基、C1-C8鹵代烷氧基、C1-C8烷?；?、單-或二-(C1-C8烷基)氨基、4至7員雜環(huán)烷基或(4至7員雜環(huán)烷基)氨基，以上(ii)的基團(tuán)各自經(jīng)0至2個(gè)獨(dú)立選自下列的取代基所取代 (a)羥基、鹵素、氰基、氨基、氨基羰基或COOH；或 (b)C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C1-C6鹵代烷基、(C3-C7環(huán)烷基)C0-C4烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷氧基羰基、C2-C6烷基醚、單-或二-(C1-C6烷基)氨基C0-C2烷基、單-或二-(C1-C6烷基)氨基羰基，或(4至7員雜環(huán))C0-C4烷基，以上基團(tuán)各自經(jīng)0至2個(gè)獨(dú)立選自羥基、氨基、C1-C4烷基或C1-C4烷氧基的取代基所取代。
代表性的C8基團(tuán)包括，例如，單-或二-(C1-C6烷基)氨基、哌嗪基、哌啶基和吡咯烷基，以上基團(tuán)為未經(jīng)取代或經(jīng)一個(gè)選自下列者的取代基所取代羥基、C1-C4烷基、C1-C4烯基、C1-C4鹵代烷基、C1-C6烷氧基、(單-或二-(C1-C6烷基)氨基)C0-C2烷基或(4至7員雜環(huán)烷基)C0-C2烷基，其中每個(gè)取代基是優(yōu)選地進(jìn)一步經(jīng)羥基、C1-C4烷基或C1-C4烷氧基。
在某些化合物中，A是CR5且R5在每次出現(xiàn)時(shí)是獨(dú)立地選自氫、鹵素、氰基、氨基、COOH、C1-C4烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵代烷氧基或單-或二-(C1-C4烷基)氨基。
某些式I的化合物進(jìn)一步滿(mǎn)足式II、IIa、III或IIIa或此等化合物的醫(yī)藥上可接受的鹽
在某些式II、IIa、III或IIIa的化合物中 Y和Z獨(dú)立地為N或CH；在一些具體實(shí)例中，Y和Z都為N； R2是氫、鹵素、C1-C4烷基或C2-C4烷基醚； R2是氫； R4是鹵素、氰基、C1-C6烷基、C1-C6鹵代烷基、C1-C6烷氧基或C1-C6鹵代烷氧基；以及 R8是氫、單-或二-(C1-C8烷基)氨基、哌嗪基、哌啶基和吡咯烷基，以上基團(tuán)為未經(jīng)取代或經(jīng)一個(gè)選自下列者的取代基所取代羥基、C1-C4烷基、C1-C4烯基、C1-C4鹵代烷基、C1-C6烷氧基、(單-或二-(C1-C6烷基)氨基)C0-C2烷基或(4至7員雜環(huán)烷基)C0-C2烷基，其中每個(gè)取代基是優(yōu)選地進(jìn)一步經(jīng)羥基、C1-C4烷基或C1-C4烷氧基；以及 Ar是苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、噠嗪基，其各經(jīng)0、1或2個(gè)獨(dú)立選自下列者的取代基所取代鹵素、氰基、氨基、C1-C4烷基、C1-C4羥基烷基、C1-C4氰基烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷酰基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷基磺酰基、C1-C4鹵代烷基磺酰基、單-或二-(C1-C4烷基)氨基或5或6員雜環(huán)烷基。
某些式I的化合物進(jìn)一步滿(mǎn)足式IV或一個(gè)或多個(gè)子式IVa至IVf

在式IV以及IVa至IVf中 D是N或CH； R6是氫、鹵素、氰基、C1-C4烷基、C1-C4羥基烷基、C1-C4氰基烷基、C1-C4鹵代烷基、C1-C4烷基磺?；駽1-C6鹵代烷基磺?；?； R7是氫、鹵素、氰基、氨基、C1-C4烷基、C1-C4羥基烷基、C1-C4氰基烷基、C1-C6烷氧基、C1-C4烷?；1-C4鹵代烷基、單-或二-(C1-C4烷基)氨基或5或6員雜環(huán)烷基； 且其它符號(hào)如前文所述。
在某些具體實(shí)例中，R6和R7至少一者非氫；在進(jìn)一步具體實(shí)例中，R6和R7兩者皆不為氫。在某些此等化合物中，R6是C1-C4烷基或C1-C4鹵代烷基(例如，三氟甲基)和/或R7是氨基、C1-C6烷氧基、單-或二-(C1-C4烷基)氨基或5或6員雜環(huán)烷基。
在本文中所提供的代表性化合物包括，但不限于，彼等于實(shí)施例1至3中明確描述者。咸理解本文明確列舉的化合物僅為代表性化合物，無(wú)意限制本發(fā)明之范圍。進(jìn)一步，如上述，所有本文所提供的化合物可呈游離的酸或堿或以醫(yī)藥上可接受的鹽的形式存在。此外，其它形式如此等化合物的水合物或前藥特別為本發(fā)明所考量的。
在本發(fā)明的某些方面，本發(fā)明所提供之經(jīng)取代的經(jīng)取代的噠嗪基喹啉-4-基胺和嘧啶基喹啉-4-基胺類(lèi)似物可顯著改變(調(diào)節(jié))VR1活性，其系采用活體外VR1功能分析試驗(yàn)測(cè)定，如鈣移動(dòng)分析試驗(yàn)?？刹捎肰R1配位體結(jié)合分析試驗(yàn)初步篩選此等活性。本文所提及之″VR1配位體結(jié)合分析試驗(yàn)″意欲指標(biāo)準(zhǔn)活體外受體結(jié)合性分析試驗(yàn)，如于實(shí)例5所提供者，及″鈣移動(dòng)分析試驗(yàn)″(本文中亦稱(chēng)為″訊號(hào)傳導(dǎo)分析試驗(yàn)″)可依實(shí)例6所述進(jìn)行。簡(jiǎn)言之，可采用競(jìng)爭(zhēng)型分析試驗(yàn)分析與VR1之結(jié)合性，此等分析試驗(yàn)是由VR1制劑與會(huì)結(jié)合VR1之有標(biāo)記(例如125I或3H)化合物(例如辣椒素受體促效劑如RTX)及無(wú)標(biāo)記之試驗(yàn)化合物定溫反應(yīng)。本文所提供之分析試驗(yàn)中，所使用之VR1最好為哺乳動(dòng)物VR1，更佳為人類(lèi)或大鼠VR1。受體可經(jīng)重組表現(xiàn)或自然表現(xiàn)。VR1制劑可為例如來(lái)自重組表現(xiàn)人類(lèi)VR1之人類(lèi)胚胎腎臟細(xì)胞(HEK293)或中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(CHO)細(xì)胞之膜制劑。與顯著調(diào)節(jié)類(lèi)香草醇配位體與VR1結(jié)合性之化合物定溫反應(yīng)時(shí)，會(huì)導(dǎo)致與VR1制劑結(jié)合之標(biāo)記物量相對(duì)于無(wú)化合物存在之標(biāo)記物結(jié)合量下降或提高。此下降或提高可依本文所說(shuō)明，用于決定VR1之Ki。一般而言，可在此等分析試驗(yàn)中使與VR1制劑結(jié)合之標(biāo)記物量降低之化合物較佳。
某些本文所提供的VR1調(diào)節(jié)劑在奈摩爾(亦即，次微摩爾)濃度、在次奈摩爾或低於100皮摩爾、20皮摩爾、10皮摩爾或5皮摩爾可檢測(cè)地調(diào)節(jié)VR1活性。
如上述，作為VR1拮抗劑之化合物較適用于某些具體實(shí)施例。此等化合物之IC50值可采用標(biāo)準(zhǔn)活體外VR1-所介導(dǎo)之鈣移動(dòng)化分析試驗(yàn)(如實(shí)例6所示)決定。簡(jiǎn)言之，由表現(xiàn)辣椒素受體之細(xì)胞與所需化合物及可指示細(xì)胞內(nèi)鈣濃度之指示劑(例如膜可通透之鈣敏感性染料如Fluo-3或Fura-2(二者均可得自例如Molecular Probes，Eugene，OR)，當(dāng)與Ca++結(jié)合時(shí)，分別會(huì)產(chǎn)生螢光訊號(hào))接觸。此等接觸最好在包含化合物及指示劑中一者或兩者之緩沖液或培養(yǎng)基之溶液中，與細(xì)胞培養(yǎng)一次或多次下進(jìn)行。接觸應(yīng)維持足以使染料進(jìn)入細(xì)胞中(例如1至2小時(shí))之時(shí)間量。細(xì)胞經(jīng)洗滌或過(guò)濾排除過(guò)量染料后，與類(lèi)香草醇受體促效劑(例如辣椒素、RTX或歐凡尼(olvanil))，典型于等于EC50濃度下接觸，測(cè)定螢光反應(yīng)。當(dāng)接觸過(guò)促效劑之細(xì)胞與作為VR1拮抗劑之化合物接觸時(shí)，相較于在沒(méi)有試驗(yàn)化合物下與促效劑接觸之細(xì)胞，該螢光反應(yīng)會(huì)下降至少20％，較佳為至少50％，更佳為至少80％。本文所提供VR1拮抗劑之IC50較佳為小于1微莫耳濃度，小于100nM，小于10nM或小于1nM。在某些具體實(shí)例中，本文所提供的VR1拮抗劑在等於IC50的化合物濃度在辣椒素受體促效作用的體外分析試驗(yàn)中未展現(xiàn)有可檢測(cè)的促效劑活性。某些此等拮抗劑在高於100倍的IC50的化合物濃度在辣椒素受體促效作用的體外分析試驗(yàn)中未展現(xiàn)有可檢測(cè)的促效劑活性。
其它具體實(shí)施例中，以作為辣椒素受體促效劑之化合物較佳。辣椒素受體促效劑活性通常依實(shí)例6所述測(cè)定。當(dāng)細(xì)胞與1微莫耳濃度作為VR1促效劑之化合物接觸時(shí)，該螢光反應(yīng)訊號(hào)量通常比與100nM辣椒素接觸之細(xì)胞所觀(guān)察到之螢光反應(yīng)訊號(hào)量提高至少30％。本文所提供VR1促效劑之EC50較佳為小于1微莫耳濃度，小于100nM或小于10nM。
VR1調(diào)節(jié)活性亦或者可采用培養(yǎng)之背根神經(jīng)節(jié)分析試驗(yàn)(如實(shí)例7所述)與/或活體內(nèi)疼痛緩解分析試驗(yàn)(如實(shí)例8所述)分析。本文所提供VR1調(diào)節(jié)劑在本文所提供一種或多種功能性分析試驗(yàn)中對(duì)VR1活性具有統(tǒng)計(jì)上顯著之明確效應(yīng)較佳。
某些具體實(shí)施例中，本文所提供VR1調(diào)節(jié)劑實(shí)質(zhì)上不會(huì)調(diào)節(jié)配位體與如EGF受體酪胺酸激酶或煙堿乙酰膽堿受體之其它細(xì)表胞表面受體之結(jié)合。換言之，此等調(diào)節(jié)劑實(shí)質(zhì)上不會(huì)抑制如EGF受體酪胺酸激酶或煙堿乙酰膽堿受體之細(xì)胞表面受體之活性(例如對(duì)此等受體之IC50或IC40較佳為大于1微莫耳濃度，最佳為大于10微莫耳濃度)。較佳者，調(diào)節(jié)劑不會(huì)在0.5微莫耳濃度、1微莫耳濃度或更佳為10微莫耳濃度下顯著抑制EGF受體活性或煙堿乙酰膽堿受體活性。測(cè)定細(xì)胞表面受體活性之分析試驗(yàn)可自商品取得，包括可得自Panvera(Madison，WI)藥廠(chǎng)之酪胺酸激酶分析套組。
某些具體實(shí)施例中，較佳之VR1調(diào)節(jié)劑為非鎮(zhèn)定性的。換言之，在測(cè)定疼痛緩解之動(dòng)物模式中(如本文實(shí)例8所提供之模式)，VR1調(diào)節(jié)劑之用量達(dá)充分止痛之最低劑量之兩倍劑量時(shí)，僅會(huì)暫時(shí)鎮(zhèn)定(亦即持續(xù)時(shí)間不超過(guò)解除疼痛所維持時(shí)間之1/2)或最好在鎮(zhèn)定之動(dòng)物模式分析試驗(yàn)中沒(méi)有統(tǒng)計(jì)上顯著之鎮(zhèn)定作用(采用Fitzgerald等人說(shuō)明于(1988)Toxicology 49(2-3)433-9之方法)。較佳者，其劑量達(dá)充分止痛之最低劑量之5倍劑量時(shí)，不會(huì)產(chǎn)生統(tǒng)計(jì)上顯著之鎮(zhèn)定作用。更佳者，本文所提供VR1調(diào)節(jié)劑在小于25mg/kg(較佳為小于10mg/kg)之靜脈內(nèi)劑量下或小于140mg/kg(較佳為小于50mg/kg，更佳為小于30mg/kg)之口服劑量下，不會(huì)產(chǎn)生鎮(zhèn)定作用。
若需要時(shí)，可分析本文所提供化合物之某些醫(yī)藥性質(zhì)，包括(但不限于)口服生體可用率(較佳化合物之口服生體可用率程度應(yīng)可使口服劑量小于140mg/kg，較佳為小于50mg/kg，更佳為小于30mg/kg，甚至更佳為小于10mg/kg，又更佳為小于1mg/kg與最佳為小于0.1mg/kg之化合物達(dá)醫(yī)療有效濃度)、毒性(較佳化合物當(dāng)以醫(yī)療有效量投藥給個(gè)體時(shí)，應(yīng)無(wú)毒性)、副作用(較佳化合物當(dāng)以醫(yī)療有效量投藥給個(gè)體時(shí)所產(chǎn)生之副作用應(yīng)相當(dāng)于安慰劑)、血清蛋白質(zhì)結(jié)合性及活體外與活體內(nèi)半衰期(較佳化合物之活體內(nèi)半衰期應(yīng)容許進(jìn)行每日四次(Q.I.D.)投藥法，較佳為每日三次(T.I.D.)投藥法，更佳為每日兩次(B.I.D.)投藥法及最佳為每天單次投藥法)。此外，用于經(jīng)由調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)VR1活性而治療疼痛之VR1調(diào)節(jié)劑可能需要對(duì)血腦障壁有不同滲透性，因此當(dāng)每日口服總劑量達(dá)上述時(shí)，可提供使此等調(diào)節(jié)作用達(dá)醫(yī)療有效程度，而同時(shí)具備較佳之腦中低VR1調(diào)節(jié)劑濃度，此等VR1調(diào)節(jié)劑系用于治療周邊神經(jīng)所介導(dǎo)之疼痛(亦即此等劑量在腦中(例如CSF)所產(chǎn)生之化合物濃度應(yīng)不足以顯著調(diào)節(jié)VR1活性)?？刹捎孟嚓P(guān)技藝習(xí)知之例行分析試驗(yàn)來(lái)分析此等性質(zhì)及判別個(gè)別用途之較佳化合物。例如用于預(yù)估生體可用率之分析試驗(yàn)包括轉(zhuǎn)運(yùn)通過(guò)人類(lèi)腸細(xì)胞單層，包括Caco-2細(xì)胞。單層化合物在人體中血腦障壁之通透性可經(jīng)投予化合物(例如經(jīng)靜脈內(nèi))之實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物腦中之化合物濃度來(lái)預(yù)測(cè)之。血清蛋白質(zhì)結(jié)合性可經(jīng)白蛋白結(jié)合性分析試驗(yàn)預(yù)測(cè)之?；衔锇胨テ谙蹬c化合物服用頻率成反比?；衔镏铙w外半衰期可由本文實(shí)例7所述之微粒體半衰期分析試驗(yàn)預(yù)估。
如上述，本文所提供較佳化合物為無(wú)毒性。一般而言，本文所采用術(shù)語(yǔ)″無(wú)毒性″咸了解，系一種相對(duì)定義，意指任何經(jīng)美國(guó)食品與藥物檢驗(yàn)局(″FDA″)核準(zhǔn)用于投予哺乳動(dòng)物(較佳為人類(lèi))或符合所制定之標(biāo)準(zhǔn)，可被FDA核準(zhǔn)投與哺乳動(dòng)物(較佳為人類(lèi))之物質(zhì)。此外，極佳之無(wú)毒性化合物通常會(huì)符合下列一項(xiàng)或多項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)(1)不會(huì)實(shí)質(zhì)上抑制細(xì)胞ATP產(chǎn)生；(2)不會(huì)顯著延長(zhǎng)心臟QT間隔；(3)不會(huì)造成顯著之肝擴(kuò)大，與(4)不會(huì)造成肝酵素實(shí)質(zhì)釋出。
本文所采用不會(huì)實(shí)質(zhì)上抑制細(xì)胞ATP產(chǎn)生之化合物為符合實(shí)例8所示標(biāo)準(zhǔn)之化合物。換言之，如實(shí)例8描述經(jīng)過(guò)100μM此等化合物處理之細(xì)胞中ATP含量為未處理細(xì)胞中所檢測(cè)到ATP含量之至少50％。在更佳具體實(shí)施例中，此等細(xì)胞中ATP含量為未處理細(xì)胞中所檢測(cè)到ATP含量之至少80％。
不會(huì)顯著延長(zhǎng)心臟QT間隔之化合物為一種使天竺鼠、迷你豬或狗在接受使血清中化合物濃度等于EC50或IC50之劑量投藥后，不會(huì)在統(tǒng)計(jì)上顯著延長(zhǎng)心臟QT間隔之化合物(由心電圖測(cè)定)。某些較佳具體實(shí)施例中，以非經(jīng)腸式或口服投予0.01、0.05、0.1、0.5、1、5、10、40或50mg/kg之劑量統(tǒng)計(jì)上不會(huì)導(dǎo)致顯著之延長(zhǎng)心臟QT間隔。
若實(shí)驗(yàn)室囓齒類(lèi)動(dòng)物(例如小白鼠或大鼠)每天接受使血清中化合物濃度等于EC50或IC50之劑量投藥5至10天后，所導(dǎo)致之肝對(duì)體重比例之增加不超過(guò)配對(duì)對(duì)照組之100％時(shí)，該化合物即不會(huì)造成顯著之肝擴(kuò)大。極更佳之具體實(shí)施例中，此等劑量不會(huì)使肝擴(kuò)大程度超過(guò)配對(duì)對(duì)照組之75％或50％。若采用非囓齒類(lèi)動(dòng)物(例如狗)時(shí)，此等劑量不會(huì)增加肝對(duì)體重比例超過(guò)配對(duì)未處理對(duì)照組之50％，較佳不超過(guò)25％，更佳為不超過(guò)10％。此等分析試驗(yàn)中，較佳投藥劑量以非經(jīng)腸式或口服投予，包括0.01、0.05、0.1、0.5、1、5、10、40或50mg/kg。
同樣地，若實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物(例如囓齒類(lèi))在接受可使血清中化合物濃度等于VR1對(duì)化合物之EC50或IC50之最低劑量?jī)杀稘舛群?，不?huì)使血清中丙胺酸轉(zhuǎn)胺脢(ALT)、低密度膽固醇(LDH)或天門(mén)冬胺酸轉(zhuǎn)胺脢(AST)濃度提高程度超過(guò)配對(duì)仿真處理對(duì)照組之100％時(shí)，則該化合物不會(huì)促進(jìn)肝酵素實(shí)質(zhì)性釋出。極更佳之具體實(shí)施例中，此等劑量不會(huì)使此等血清濃度超過(guò)配對(duì)對(duì)照組之75％或50％?；蛘撸艋铙w外肝細(xì)胞分析試驗(yàn)中，(于活體外與肝細(xì)胞接觸及培養(yǎng)之培養(yǎng)基中或其它此等溶液中)，在等于化合物之EC50或IC50之濃度下，不會(huì)使任何此等肝酵素釋出至培養(yǎng)基中之量高于配對(duì)仿真處理之對(duì)照組細(xì)胞培養(yǎng)基中所觀(guān)察到之基底值達(dá)可檢測(cè)之程度，則該化合物不會(huì)促進(jìn)肝酵素實(shí)質(zhì)釋出。極更佳之具體實(shí)施例中，當(dāng)化合物在化合物之EC50或IC50之5倍濃度(較佳為10倍濃度)時(shí)，不會(huì)使任何此等肝酵素釋出至培養(yǎng)基中之量高于基底值達(dá)可檢測(cè)之程度。
其它具體實(shí)施例中，某些較佳化合物不會(huì)在等于化合物對(duì)VR1之EC50或IC50濃度時(shí)，抑制或誘發(fā)微粒體細(xì)胞色素P450酵素活性，如CYP1A2活性、CYP2A6活性、CYP2C9活性、CYP2C19活性、CYP2D6活性、CYP2E1活性或CYP3A4活性。
某些較佳化合物在等于化合物之EC50或IC50濃度時(shí)，不會(huì)使染色體斷裂(clastogenic)(例如采用小白鼠紅血球前體細(xì)胞微核分析試驗(yàn)、Ames微核分析試驗(yàn)、螺旋微核分析試驗(yàn)，等等測(cè)定)。其它具體實(shí)施例中，某些較佳化合物于此等濃度下不會(huì)誘發(fā)姐妹染色分體交換(例如于中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞)。
如下文所討論，為了檢測(cè)目的，本文所提供之VR1調(diào)節(jié)劑可標(biāo)記同位素或放射性。例如化合物中可能有一個(gè)或多個(gè)原子被原子量或質(zhì)量數(shù)不同于通常天然存在之原子量或質(zhì)量數(shù)之相同元素置換。本文所提供化合物中可出現(xiàn)之同位素實(shí)例包括氫、碳、氮、氧、磷、氟與氯之同位素，如2H、3H、11C、13C、14C、15N、18O、17O、31P、32P、35S、18F與36C1。此外，經(jīng)重同位素如氘(亦即2H)取代時(shí)，由于代謝安定性較高而提供某些醫(yī)療優(yōu)勢(shì)，例如增加活體內(nèi)半衰期或降低所需劑量，因此于某些情況下較有利。
經(jīng)取代噠嗪基-喹啉-4-基胺和嘧啶-喹啉-4-基胺類(lèi)似物的制備 經(jīng)取代噠嗪基-喹啉-4-基胺和嘧啶-喹啉-4-基胺類(lèi)似物通常采用標(biāo)準(zhǔn)合成法制備。起始物可自如Sigma-Aldrich Corp.(St.Louis，MO)供貨商所提供之商品取得，或可由自商品取得之前體，采用已建立之方法制備。某些起始物質(zhì)及中間產(chǎn)物可如本文所描述而制備-其它商業(yè)及文獻(xiàn)來(lái)源包括


下列反應(yīng)圖與本文中其它各處所采用之某些定義為 Ac2O醋酸酐 AcOH醋酸 CDCl3 氘化氯仿 δ 化學(xué)遷移 DME 乙二醇二甲醚 DMF 二甲基甲酰胺 DPPF 1，1’-雙(二苯基膦基)二茂絡(luò)鐵 EDCl 1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽 Et 乙基 EtOH 乙醇 1H NMR 質(zhì)子核磁共振 HPLC 高效液相層析法 Hz 赫茲 iPr 異丙基 iPrOH異丙醇 KHMDS雙(三甲基硅烷)酰胺鉀 KtBuO第三丁基鉀 LCMS 液相層析法/質(zhì)譜 MS 質(zhì)譜 (M+1)或M+H 質(zhì)量+1 MeOH 甲醇 nBuLi正丁基鋰 Pd2(dba)3參[二亞苯甲基丙酮]二-鈀 Pd(PPh3)4肆(三苯基膦基)鈀(0) PTLC 制備型薄層層析法 THF 四氫呋喃 Xantphos 4，5-雙(二苯基膦基)-9，9-二甲基-呫噸 可采用類(lèi)似下列反應(yīng)圖所示之合成途徑，及合成有機(jī)化學(xué)相關(guān)技藝所知之合成法或?yàn)橛诖思妓囍袐故熘肯陶J(rèn)之變化合成法制備。下列反應(yīng)圖中各代號(hào)系配合本文所提供化合物之說(shuō)明之任何基團(tuán)。
反應(yīng)圖式1
反應(yīng)圖式2
反應(yīng)圖式3
反應(yīng)圖式4
反應(yīng)圖式5
反應(yīng)圖式6
反應(yīng)圖式7
反應(yīng)圖式8
反應(yīng)圖式9
反應(yīng)圖式10
反應(yīng)圖式11
反應(yīng)圖式12
反應(yīng)圖式13
反應(yīng)圖式14
反應(yīng)圖式15
某些具體實(shí)施例中，化合物可包含一個(gè)或多個(gè)不對(duì)稱(chēng)碳原子，因此化合物可出現(xiàn)不同立體異構(gòu)型。此等型式可為例如消旋物或光學(xué)活性型。如上述，所有立體異構(gòu)型均包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。盡管如此，仍可能需要得到單一對(duì)映異構(gòu)物(enantiomer)(亦即光學(xué)活性型)。制備單一對(duì)映異構(gòu)物之標(biāo)準(zhǔn)方法包括不對(duì)稱(chēng)合成法與消旋物離析法。消旋物之離析可藉以下方法達(dá)成，例如，依慣例方法進(jìn)行如于離析劑之存在下結(jié)晶；或使用層析法例如對(duì)掌性HPLC管柱。
化合物可在其合成法中使用包含至少一個(gè)放射性同位素原子之前體進(jìn)行放射性標(biāo)記。各放射性同位素較佳為碳(例如14C)、氫(例如3H)、硫(例如35S)或碘(例如125I)。標(biāo)記氚之化合物制法亦透過(guò)于氚化乙酸中，進(jìn)行鉑催化交換反應(yīng)、于氚化三氟乙酸中，進(jìn)行酸催化交換反應(yīng)；或于氚氣中以化合物作為受質(zhì)進(jìn)行異相催化交換反應(yīng)。此外，某些前體可于氚氣中參與氚-鹵素交換反應(yīng)，氚氣還原不飽和鍵，或若合適則以氚硼化鈉還原。標(biāo)記放射性之化合物制備可便利地由放射性同位素供貨商合成特制客訂之標(biāo)記放射性之探針化合物。
醫(yī)藥組合物 本發(fā)明亦提供一種醫(yī)藥組合物，其包含一種或多種本文所提供化合物，及至少一種生理上可接受之基劑或賦形劑。醫(yī)藥組合物可包含例如下列一項(xiàng)或多項(xiàng)水、緩沖液(例如中性緩沖生理食鹽水或磷酸鹽緩沖溶液)、乙醇、礦物油、植物油、二甲亞碸、碳水化合物(例如葡萄糖、甘露糖、蔗糖或葡聚糖)、甘露糖醇、蛋白質(zhì)、輔劑、多肽或胺基酸(如甘胺酸)、抗氧化劑、螯合劑(如EDTA)或谷胱甘肽與/或防腐劑。此外，本文所提供之醫(yī)藥組合物中亦可(但不必要)包括其它活性成分。
醫(yī)藥組合物可調(diào)配供任何適當(dāng)投藥方式使用，包括例如局部、口服、經(jīng)鼻、直腸內(nèi)或非經(jīng)腸式投藥。本文所采用術(shù)語(yǔ)非經(jīng)腸式包括經(jīng)皮下、皮內(nèi)、血管內(nèi)(例如靜脈內(nèi))、肌內(nèi)、脊髓、顱內(nèi)、鞘內(nèi)、與腹腔內(nèi)注射，及任何類(lèi)似之注射或輸液技術(shù)。某些具體實(shí)施例中，以適合口服之組合物較佳。此等組合物包括例如錠劑、糖衣錠、口含錠、水性或油性懸浮液、可勻散之粉劑或粒劑、乳液、硬性或軟性膠囊或糖漿或酏劑。其它具體實(shí)施例中，本發(fā)明醫(yī)藥組合物可呈冷凍干燥物調(diào)配。局部投藥用配方可能較適于某些癥狀(例如用于治療皮膚癥狀如燒傷或搔癢)。直接投藥至膀胱之配方(膀胱內(nèi)投藥)可能較適于治療尿失禁與膀胱過(guò)動(dòng)癥。
口服用組合物尚可包含一種或多種成分，如甜味劑、調(diào)味劑、著色劑與/或防腐劑，以提供吸引人且適口之制劑。錠劑包含活性成分與適合制造錠劑之生理上可接受之賦形劑混合。此等賦形劑包括例如惰性稀釋劑(例如碳酸鈣、碳酸鈉、乳糖、磷酸鈣或磷酸鈉)、制粒劑與崩解劑(例如玉米淀粉或藻酸)、結(jié)合劑(例如淀粉、明膠或阿拉伯膠)及潤(rùn)滑劑(例如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石)。錠劑可以沒(méi)有包衣或可依已知技術(shù)包覆包衣，以延緩于胃腸道中崩解與吸收，藉以提供長(zhǎng)期之持續(xù)作用。例如可使用時(shí)間延遲性物質(zhì)如單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。
口服用配方亦可呈硬明膠囊，其中由活性成分與惰性固體稀釋劑混合(例如碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土)，或呈軟明膠囊，其中活性成分與水或油介質(zhì)(例如花生油、液態(tài)石蠟或橄欖油)混合。
水性懸浮液包含活性成分(群)混合合適賦形劑制成水性懸浮液，彼等賦形劑包括懸浮劑(例如羧基甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、黃耆膠與阿拉伯膠)；與勻散劑或濕化劑(例如天然磷脂如卵磷脂、伸烷基氧化物與脂肪酸之縮合產(chǎn)物如聚氧伸乙基硬脂酸酯、環(huán)氧乙烷與長(zhǎng)鏈脂系醇之縮合產(chǎn)物如十七碳伸乙氧基鯨蠟醇、環(huán)氧乙烷以及衍生自脂肪酸和己糖醇之部份酯之縮合產(chǎn)物如聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯、或環(huán)氧乙烷與衍生自脂肪酸及己糖醇酐之部份酯之縮合產(chǎn)物如聚伸乙基山梨糖醇酐單油酸酯)。水性懸浮液亦可包含一種或多種防腐劑例如對(duì)羥基苯甲酸之乙酯或正丙酯、一種或多種著色劑、一種或多種調(diào)味劑與/或一種或多種甜味劑，如蔗糖或糖精。
油性懸浮液之調(diào)配法可將活性成分(群)懸浮于植物油中(例如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油)或于礦物油如液態(tài)石蠟。油性懸浮液可包含稠化劑如蜂蠟、硬性石蠟或鯨蠟醇?？商砑尤缟鲜鲋鹞秳┡c/或調(diào)味劑，以提供適口之口服制劑。此等懸浮液可添加抗氧化劑如抗壞血酸以防腐。
適合制備水性懸浮液之可勻散性粉劑與粒劑可藉由水的添加，使活性成分與勻散劑或濕化劑、懸浮劑及一種或多種防腐劑混合。合適之勻散劑或濕化劑及懸浮劑實(shí)例已如上述。亦可包含其它賦形劑如甜味劑、調(diào)味劑與著色劑。
醫(yī)藥組合物亦可調(diào)配成水包油性(oil-in-water)乳液。油相可為植物油(例如橄欖油或花生油)、礦物油(例如液態(tài)石蠟)或其混合物。合適之乳化劑包括天然膠質(zhì)(例如阿拉伯膠或黃耆膠)、天然磷脂(例如大豆卵磷脂、與衍生自脂肪酸及己糖醇之酯或部份酯)、酸酐(例如山梨糖醇單油酸酯)及衍生自脂肪酸及己糖醇之部份酯與環(huán)氧乙烷之縮合產(chǎn)物(例如聚氧伸乙基山梨糖醇酐單油酸酯)。乳液亦可包含一種或多種甜味劑與/或一種或多種調(diào)味劑。
糖漿與酏劑可使用甜味劑調(diào)配，如甘油、丙二醇、山梨糖醇或蔗糖。此等配方亦可包含一種或多種緩和劑、防腐劑、調(diào)味劑與/或著色劑。
局部投藥用配方典型地包含局部用基劑與活性成分(群)組合，可添加或不添加額外之可視需要選用之成分。合適之局部用基劑與其它成分是于此技藝中廣知，且咸了解，其可依特定之物理形式與傳送模式選擇基劑。局部用基劑包括水；有機(jī)溶劑如醇類(lèi)(例如乙醇或異丙醇)或甘油；二醇類(lèi)(例如丁二醇、異戊間二烯二醇或丙二醇)；脂系醇(例如羊毛脂)；水與有機(jī)溶劑之混合物，及有機(jī)溶劑之混合物如醇類(lèi)與甘油混合物；以脂質(zhì)為主之物質(zhì)如脂肪酸、?；视?包括油類(lèi)如礦物油，與天然或合成之脂肪)、磷酸甘油酯、神經(jīng)鞘脂質(zhì)與蠟類(lèi)；以蛋白質(zhì)為主之物質(zhì)如膠原與明膠；以聚硅氧為主之物質(zhì)(包括非揮發(fā)性及揮發(fā)性)與以烴為主之物質(zhì)如微型海綿與聚合物基體。組合物可另包括一種或多種適于改善所施用配方之安定性或有效性之成分，如安定劑、懸浮劑、乳化劑、黏度調(diào)整劑、膠凝劑、防腐劑、抗氧化劑、皮膚滲透強(qiáng)化劑、濕化劑與緩釋材料。此等成分實(shí)例說(shuō)明于Martindale之The Extra Pharmacopoeia(Pharmaceutical Press，London 1993)與RemingtonThe Sciences and Practice of Pharmacy，21sted.Lippincott Williams & Wilkins，Philadelphia，PA(2005)。配方可包括微膠囊，如羥甲基纖維素或明膠微膠囊、微脂粒、白蛋白微小球、微乳液、奈米粒子或奈米膠囊。
局部用配方可制成多種物理型式包括，例如固體、糊劑、乳霜、泡沫物、洗液、凝膠、粉劑、水性液體與乳液。此等醫(yī)藥可接受之型式其物理外觀(guān)與黏度可經(jīng)配方中所含乳化劑與黏度調(diào)整劑之含量來(lái)控制。固體通常堅(jiān)實(shí)，無(wú)法傾倒，經(jīng)常調(diào)配成棒狀或桿狀或特別形狀；固體可不透明或透明，其可視需要包含溶劑、乳化劑、濕化劑、軟化劑、香料、染料/著色劑、防腐劑與其它可提高或加強(qiáng)最終產(chǎn)物效力之活性成分。乳霜與洗液通常類(lèi)似，其差異主要在其黏度；洗液與乳霜二者均可能不透明、半透明或澄清，經(jīng)常包含乳化劑、溶劑與黏度調(diào)整劑，及濕化劑、軟化劑、香料、染料/著色劑、防腐劑與其它可提高或加強(qiáng)最終產(chǎn)物效力之活性成分。凝膠可制成多種不同黏度，由濃稠或高黏度至稀薄或低黏度。此等配方如同洗液與乳霜，亦可包含溶劑、乳化劑、濕化劑、軟化劑、香料、染料/著色劑、防腐劑與其它可提高或加強(qiáng)最終產(chǎn)物效力之活性成分。液體比乳霜、洗液或凝膠稀薄，通常不包含乳化劑。液態(tài)局部產(chǎn)品經(jīng)常包含溶劑、乳化劑、濕化劑、軟化劑、香料、染料/著色劑、防腐劑與其它可提高或加強(qiáng)最終產(chǎn)物效力之活性成分。
適用于局部用配方之乳化劑包括(但不限于)離子性乳化劑、鯨蠟醇、非離子性乳化劑如聚氧伸乙基油基醚、PEG-40硬脂酸酯、鯨蠟硬脂醇醚(ceteareth)-12、鯨蠟硬脂醇醚-20、鯨蠟硬脂醇醚-30、鯨蠟硬脂醇(ceteareth alcohol)、PEG-100硬脂酸酯與硬脂酸甘油酯。合適之黏度調(diào)整劑包括(但不限于)保護(hù)性膠體或非離子性膠質(zhì)如羥乙基纖維素、黃耆膠、硅酸鎂鋁、硅石、微晶蠟、蜂蠟、石蠟與棕櫚酸鯨蠟酯。凝膠組合物之形成法可添加膠凝劑如甲殼素(chitosan)、甲基纖維素、乙基纖維素、聚乙烯醇、聚季胺鹽(polyquaterniums)、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羧聚甲烯(carbomer)或甘草酸銨。合適之界面活性劑包括(但不限于)非離子性、兩性、離子性與陰離子性界面活性劑。局部用配方例如下列一種或多種二甲硅酮共多元醇(dimethicone copolyol)、聚山梨酸酯20、聚山梨酸酯40、聚山梨酸酯60、聚山梨酸酯80、月桂酰胺DEA、椰子酰胺DEA與椰子酰胺MEA、油基甜菜堿、椰子酰胺丙基磷脂?；鵓G-氯化銨(cocamidopropyl phosphatidyl PG-dimoniumchloride)、與十二酯硫酸銨。合適之防腐劑包括(但不限于)抗微生物劑如對(duì)氧苯甲酸甲酯(methylparaben)、對(duì)氧苯甲酸丙酯、山梨酸、苯甲酸與甲醛，以及物理性安定劑與抗氧化劑如維生素E、抗壞血酸鈉/抗壞血酸與五倍子酸丙酯。合適之濕化劑包括(但不限于)乳酸與其它羥基酸與其鹽類(lèi)、甘油、丙二醇與丁二醇。合適之軟化劑包括羊毛脂醇、羊毛脂、羊毛脂衍生物、膽固醇、凡士林、新戊酸異硬脂基酯與礦物油。合適之香料與色素包括(但不限于)FD&C紅色40號(hào)與FD&C黃色5號(hào)。其它適于局部用配方之額外成分可包含(但不限于)研磨劑、吸收劑、抗結(jié)塊劑、消泡劑、抗靜電劑、收斂劑(例如金縷梅、酒精與藥草萃液如洋甘菊萃液)、結(jié)合劑/賦形劑、緩沖劑、螯合劑、膜形成劑、調(diào)節(jié)劑、推進(jìn)劑、不透明劑、pH調(diào)整劑與保護(hù)劑。
調(diào)配凝膠之合適局部用基劑實(shí)例為羥丙基纖維素(2.1％)；70/30異丙醇/水(90.9％)；丙二醇(5.1％)；與聚山梨酸酯80(1.9％)。調(diào)配泡沫物之合適局部用基劑實(shí)例為鯨蠟醇(1.1％)；硬脂醇(0.5％；季銨鹽52(1.0％)；丙二醇(2.0％)；乙醇95PGF3(61.05％)；去離子水(30.05％)；P75烴推進(jìn)劑(4.30％)。所有百分比均以重量計(jì)。
傳送局部用組合物之典型方式包括使用手指涂抹；使用物理性涂抹器施用如布、衛(wèi)生紙、拭子、小棒或刷子；噴灑(包括霧、氣霧或泡沫噴灑)；滴藥法；傾注；浸泡；及潤(rùn)洗。
醫(yī)藥組合物亦可制成無(wú)菌之注射用水性或油性懸浮液。依所使用之基劑與濃度而定，本文所提供之化合物(群)可以懸浮或溶解于基劑中。此等組合物可依據(jù)相關(guān)技藝已知之方式，使用如上述之合適勻散劑、濕化劑與/或懸浮劑調(diào)配。可接受之基劑與溶劑中，可使用水、1，3-丁二醇、林格氏溶液與等張性氯化鈉溶液。此外，可使用無(wú)菌之固定油類(lèi)作為溶劑或懸浮介質(zhì)。因此無(wú)刺激性之固定油均可使用，包括合成之單-或二酸甘油酯。此外，脂肪酸如油酸見(jiàn)于注射用組合物之制備，而佐劑如局部麻醉劑、防腐劑與/或緩沖劑可溶于基劑中。
調(diào)節(jié)劑亦可調(diào)配成栓劑(例如經(jīng)直腸投藥用)。此等組合物可經(jīng)藥物混合合適之無(wú)刺激性賦形劑而制備，此賦形劑于常溫下呈固體但于直腸溫度下卻呈液體，因此可于直腸中融化以釋出藥物。合適之賦形劑包括，例如可可奶油與聚乙二醇。
輸注用的組合物典型可呈溶液、懸浮液或乳液的形式提供，該等形是可以干粉或以氣霧的形式使用習(xí)知推進(jìn)劑(例如，二氯二氟甲烷或三氯氟甲烷)投予。
醫(yī)藥組合物可調(diào)配成緩釋或控釋配方(亦即，作用為于投藥后使活性成分(群)緩慢釋放之配方，如膠囊)。此等配方通常可依相關(guān)技藝廣知之方式制備及經(jīng)例如口、直腸或皮下植入物，或植入所需目標(biāo)位置投予。優(yōu)選的配方可提供相對(duì)恒定濃度之調(diào)節(jié)劑釋放；釋放的型態(tài)可使用在此技術(shù)領(lǐng)域中所咸知的方法改變，包括(a)藉由變化包衣的厚度或組成、(b)藉由改變?cè)诎轮性鏊軇┨砑拥牧炕蚍绞健?c)藉由包括額外的成分，如釋放調(diào)整劑、(d)藉由改變基質(zhì)的組成、顆粒大小或顆粒形狀，以及(e)藉由提供一個(gè)或多個(gè)通過(guò)包衣的信道。在緩釋配方中所含的調(diào)節(jié)劑的量取決于，例如，投予的方法(例如，植入的位置)、釋放的速率和所預(yù)計(jì)的持續(xù)期間以及所要治療或預(yù)防的癥狀的性質(zhì)。
一般而言，緩釋和/或控釋配方包括基質(zhì)和/或在腸胃道(或植入位置)中延遲崩解和吸收并因此在一段更長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)提供作用延遲或作用持續(xù)的包衣。例如，可使用時(shí)間延遲材料如單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。調(diào)節(jié)該調(diào)節(jié)劑的包衣包括pH依賴(lài)的包衣(其可用以在胃中釋放調(diào)節(jié)劑)，及包括腸溶性包衣(其可用于進(jìn)一步沿著腸胃道釋放調(diào)節(jié)劑)。pH依賴(lài)的包衣包括，例如蟲(chóng)膠、酞酸醋酸纖維素、聚醋酸乙烯酞酸酯、羥基甲基纖維素酞酸酯、甲基丙烯酸酯共聚物及玉蜀黍蛋白。
外加或并用上述投藥法外，調(diào)節(jié)劑亦可加至食物或飲水中(例如供投藥給非人類(lèi)動(dòng)物，包括伙伴動(dòng)物(如狗與貓)與家畜)。動(dòng)物飼料與飲水組合物之調(diào)配可使動(dòng)物在進(jìn)食時(shí)同時(shí)攝取適量組合物。使組合物呈加至飼料或飲水中之預(yù)混合物，亦相當(dāng)方便。
化合物通常投予醫(yī)療有效量。較佳之全身劑量每日不超過(guò)每公斤體重50毫克(例如每日每公斤體重約0.001毫克至約50毫克)，口服劑量通常為高于靜脈內(nèi)投藥劑量之約5至20倍(例如每日每公斤體重0.01至40毫克)。
可與基劑材料組合以產(chǎn)生單一劑量單位之活性成分之量取決于例如所治療患者、特定之投藥模式以及任何其它共同投予的藥物而變化。劑量單位通常包含約10微克至約500毫克活性成分。最佳劑量可經(jīng)于此技藝中廣知之例行試驗(yàn)與程序而建立。
醫(yī)藥組合物可包裝用于治療對(duì)VR1調(diào)節(jié)作用有反應(yīng)之癥狀(例如治療曝露至類(lèi)香草醇配位體或其它刺激物、疼痛、搔癢、肥胖或尿失禁)。包裝之醫(yī)藥組合物可包括(i)容器，內(nèi)裝包含治療有效量之至少一種本文所說(shuō)明之VR1調(diào)節(jié)劑，及(ii)說(shuō)明書(shū)(例如卷標(biāo)或包裝夾頁(yè))，指示其中內(nèi)含之組合物是用于治療患者之對(duì)VR1調(diào)節(jié)作用有反應(yīng)之癥狀。
使用方法 本文所提供VR1調(diào)節(jié)劑可于活體外與活體內(nèi)，用以改變多方面辣椒素受體之活性與/或活化作用。某些方面中，VR1拮抗劑可用于活體外或活體內(nèi)抑制類(lèi)香草醇配位體促效劑(如辣椒素與/或RTX)與辣椒素受體結(jié)合。一般而言，此等方法包括之步驟為于水溶液中類(lèi)香草醇配位體之存在下，以及其它適合配位體與辣椒素受體結(jié)合之條件下辣椒素受體接觸本文所提供一種或多種VR1調(diào)節(jié)劑。VR1調(diào)節(jié)劑通常其濃度為足以改變類(lèi)香草醇配位體與VR1于活體外之結(jié)合性(采用實(shí)例5之分析試驗(yàn)測(cè)定)與/或VR1所介導(dǎo)訊息傳導(dǎo)作用(采用實(shí)例6之分析試驗(yàn)測(cè)定)。辣椒素受體可呈溶液或懸浮液(例如含于單離之膜或細(xì)胞制劑中)，或含于培養(yǎng)或單離之細(xì)胞中。某些具體實(shí)施例中，辣椒素受體系由患者之神經(jīng)細(xì)胞表現(xiàn)，且該水溶液為體液。較佳者，可對(duì)動(dòng)物投與一種或多種VR1調(diào)節(jié)劑，其投藥量應(yīng)使動(dòng)物體內(nèi)至少一種體液所含VR1調(diào)節(jié)劑之治療有效濃度為1微莫耳濃度或以下；較佳為500奈莫耳濃度或以下；更佳為100奈莫耳濃度或以下，50奈莫耳濃度或以下，20奈莫耳濃度或以下，或10奈莫耳濃度或以下。例如此等化合物之投藥劑量可小于20毫克/公斤體重，較佳為小于5毫克/公斤，于有些實(shí)例中，小于1毫克/公斤。
本文亦提供一種調(diào)節(jié)(較佳為降低)細(xì)胞辣椒素受體之訊息傳導(dǎo)活性(亦即鈣傳導(dǎo))之方法。此等調(diào)節(jié)法可經(jīng)于適合調(diào)節(jié)劑(群)與受體結(jié)合之條件下辣椒素受體(活體外或活體內(nèi))接觸一種或多種本文所提供VR1調(diào)節(jié)劑而達(dá)成。VR1調(diào)節(jié)劑(群)之濃度通常足以改變本文所說(shuō)明之類(lèi)香草醇配位體與VR1于活體外之結(jié)合性與/或VR1所介導(dǎo)訊息傳導(dǎo)作用。受體可呈溶液或懸浮液，含于培養(yǎng)或單離之細(xì)胞制劑或在患者之細(xì)胞內(nèi)。例如細(xì)胞可為于動(dòng)物活體內(nèi)接觸之神經(jīng)細(xì)胞?；蛘?，細(xì)胞可為于動(dòng)物活體內(nèi)接觸之上皮細(xì)胞，如尿道膀胱上皮細(xì)胞(urothelial cell)或呼吸道上皮細(xì)胞。訊息傳導(dǎo)活性之調(diào)節(jié)作用可藉由檢測(cè)其對(duì)鈣傳導(dǎo)性之影響來(lái)評(píng)估(亦稱(chēng)為鈣移動(dòng)化或流量)。訊息傳導(dǎo)活性之調(diào)節(jié)作用亦可藉由檢測(cè)接受本文所提供一種或多種VR1調(diào)節(jié)劑治療之患者癥狀之改變來(lái)評(píng)估(例如疼痛、燒傷感覺(jué)、支氣管收縮、發(fā)炎、咳嗽、呃逆、搔癢、尿失禁或膀胱過(guò)動(dòng)癥)。
本文所提供VR1調(diào)節(jié)劑(群)較佳為經(jīng)口或局部投予患者(例如人類(lèi))，且當(dāng)調(diào)節(jié)VR1訊息傳導(dǎo)活性時(shí)，存在于動(dòng)物之至少一種體液中。于活體外調(diào)節(jié)VR1訊息傳導(dǎo)活性用于此種方法之較佳VR1調(diào)節(jié)劑濃度為1奈莫耳濃度或以下，較佳為100微微莫耳濃度或以下，更佳為20微微莫耳濃度或以下，及于活體內(nèi)體液如血液中之濃度為1微莫耳濃度或以下，500奈莫耳濃度或以下，或100奈莫耳濃度或以下。
本發(fā)明復(fù)提供一種方法以處置對(duì)VR1調(diào)節(jié)作用有反應(yīng)之癥狀。本發(fā)明中，術(shù)語(yǔ)″處置″包括疾病緩和之處置及癥狀處置，其可為預(yù)防性(亦即在癥狀發(fā)生之前處理，以預(yù)防、延緩或降低癥狀之嚴(yán)重性)或治療性(亦即在癥狀發(fā)生后處理，以降低癥狀之嚴(yán)重性與/或持續(xù)時(shí)間)。不論類(lèi)香草醇配位體之局部含量，若癥狀之特征為辣椒素受體活性不當(dāng)，及/或若辣椒素受體活性之調(diào)節(jié)作用造成癥狀或其癥狀緩解時(shí)，則稱(chēng)該癥狀″對(duì)VR1調(diào)節(jié)作用有反應(yīng)″。此等癥狀包括，例如因暴露至VR1活化性刺激所造成之癥狀、疼痛、呼吸系統(tǒng)疾病如氣喘，慢性阻塞性肺病、搔癢、尿失禁、膀胱過(guò)動(dòng)癥、咳嗽、呃逆與肥胖，于下文中更詳細(xì)地說(shuō)明之。此等癥狀可采用于此技藝已建立之標(biāo)準(zhǔn)診斷及監(jiān)控?；颊呖砂ㄈ祟?lèi)、馴化伙伴動(dòng)物與家畜，其劑量如上述。
治療處方可依所使用之化合物與所治療之特定癥狀而定。然而，治療大多數(shù)疾病時(shí)，以每日投藥4次或以下之頻率較佳。通常，以每天投藥2次之給藥方式更佳，以每天單次投藥特別佳。為治療急性疼痛，迅速達(dá)到有效濃度之單一劑量為必須。然而咸了解，對(duì)任何特定患者之明確劑量與治療處方將取決于多項(xiàng)因素，包括所用之個(gè)別化合物之活性、年齡、體重、一般健康情形、性別、飲食、投藥時(shí)間、投藥途徑與排泄速度、藥物聯(lián)用與治療期間個(gè)別疾病之嚴(yán)重性。通常，使用足以提供有效治療之最低劑量較佳?？刹捎眠m合所治療或預(yù)防癥狀之醫(yī)學(xué)或獸醫(yī)學(xué)標(biāo)準(zhǔn)監(jiān)控患者之治療效力。
因曝露至辣椒素受體活化性刺激而導(dǎo)致癥狀之患者包括因熱、光、催淚氣體或酸而引起灼傷之個(gè)體及黏膜曝露至(例如因食入、吸入或眼睛接觸)辣椒素(例如辣椒或胡椒噴霧)或相關(guān)刺激物如酸、催淚氣體、傳染性制劑或空氣污染之個(gè)體。所產(chǎn)生之癥狀(可使用本文所提供VR1調(diào)節(jié)劑，尤指拮抗劑治療之癥狀)可包括例如疼痛、支氣管收縮與發(fā)炎。
可使用本文所提供VR1調(diào)節(jié)劑治療之疼痛可為慢性或急性疼痛，包括(但不限于)周邊神經(jīng)所介導(dǎo)之疼痛(尤指神經(jīng)病理性疼痛)。本文所提供化合物可用于治療例如乳房切除手術(shù)后疼痛癥候群、殘肢疼痛、幻肢疼痛、口腔神經(jīng)病理性疼痛、牙齒疼痛(牙痛)、假牙疼痛(denture pain)、皰疹后神經(jīng)痛、糖尿病神經(jīng)病變、化療引起的神經(jīng)病變、反射交感神經(jīng)失養(yǎng)癥、三叉神經(jīng)痛、骨關(guān)節(jié)炎、類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、纖維肌痛、吉蘭-拜瑞(Guillain-Barre)癥候群、感覺(jué)異常性股痛(meralgia paresthetica)、口腔燒灼癥候群和/或與神經(jīng)和神經(jīng)根損傷有關(guān)的疼痛，包括與周邊神經(jīng)疾病相關(guān)的疼痛(例如，神經(jīng)卡壓及臂神經(jīng)叢撕裂、截肢、外圍神經(jīng)病變，包括雙測(cè)外圍神經(jīng)病變、三叉神經(jīng)痛、非典型顏面痛、神經(jīng)根損傷以及蛛網(wǎng)膜炎)。其它神經(jīng)病理性疼痛癥狀包括灼痛(反射交感神經(jīng)失養(yǎng)癥-RSD、周邊神經(jīng)損傷后的次發(fā)癥狀)、神經(jīng)炎(包括，例如坐骨神經(jīng)炎、周邊神經(jīng)炎、多發(fā)神經(jīng)炎、眼神經(jīng)炎、發(fā)熱后神經(jīng)炎、游走性神經(jīng)炎、節(jié)段神經(jīng)炎與貢博氏(Gombault’s)神經(jīng)炎)、神經(jīng)元炎、神經(jīng)痛(例如如上述知彼等狀況、頸臂神經(jīng)痛、腦神經(jīng)痛、膝神經(jīng)痛、舌咽神經(jīng)痛、偏頭痛神經(jīng)痛、自發(fā)性神經(jīng)痛、肋間神經(jīng)痛、乳房神經(jīng)痛、頜關(guān)節(jié)神經(jīng)痛、莫頓氏(Morton’s)神經(jīng)痛、鼻睫神經(jīng)痛、枕骨神經(jīng)痛、紅神經(jīng)痛、斯盧德氏(Sluder’s)神經(jīng)痛、蝶顎神經(jīng)痛、眶上神經(jīng)痛與翼管神經(jīng)痛)、與手術(shù)相關(guān)之疼痛、肌肉骨骼疼痛、顏面肌肉疼痛癥候群、后天性免疫不全癥候群(AIDS)相關(guān)神經(jīng)病變、多發(fā)性硬化癥(MS)之相關(guān)神經(jīng)病變、中樞神經(jīng)系統(tǒng)疼痛(例如，由于腦干損傷所造成的疼痛、坐骨神經(jīng)痛及僵直性脊椎炎)、脊椎疼痛，包括脊椎損傷的相關(guān)疼痛。頭痛，包括周邊神經(jīng)興奮相關(guān)之疼痛，亦可依本文之說(shuō)明治療。此等疼痛包括例如，如竇性、叢發(fā)性(亦即偏頭痛性神經(jīng)痛)與緊縮型頭痛、偏頭痛、顳顎痛和上頜竇疼痛。例如當(dāng)患者出現(xiàn)偏頭痛前的先兆時(shí)，立即投予本文所提供之化合物可預(yù)防偏頭痛。其它可依本文所說(shuō)明治療之疼痛癥狀包括沙爾科氏(Charcot’s)疼痛、腸脹氣疼痛、耳痛、心痛、肌肉痛、眼痛、口頜面痛(例如，齒痛)、腹痛、婦科痛(例如，經(jīng)痛、痛經(jīng)、與膀胱炎有關(guān)之疼痛、分娩疼痛、慢性骨盆腔疼痛、慢性前列腺炎與子宮內(nèi)膜炎)、急性與慢性背痛(例如下背疼痛)、痛風(fēng)、傷疤痛、痔瘡疼痛、消化不良疼痛、絞痛(angina)、神經(jīng)根疼痛、“非疼痛性”之神經(jīng)病變、并發(fā)局部疼痛癥候群、同位疼痛與異位疼痛-包括癌相關(guān)之疼痛(例如于骨癌患者)、與曝露至毒液有關(guān)之疼痛(與發(fā)炎)(例如因蛇咬傷、蜘蛛咬傷、或昆蟲(chóng)叮咬)及創(chuàng)傷之相關(guān)疼痛(例如手術(shù)后疼痛、割傷疼痛、挫傷與斷骨，以及燒燙傷疼痛)。其它可依本文所述治療之疼痛癥狀包括如前文所述的呼吸道疾病、自體免疫疾病、免疫缺損疾病、熱潮紅、發(fā)炎性腸部疾病、胃食道逆流疾病(GERD)、腸激躁癥及/或發(fā)炎性腸部疾病。
于某些方面中，本文所提供VR1調(diào)節(jié)劑可用于治療機(jī)械性疼痛。本文所采用術(shù)語(yǔ)″機(jī)械性疼痛″指頭痛以外之疼痛，其不為神經(jīng)病理性或因暴露至熱、冷或外來(lái)化學(xué)刺激所致。機(jī)械性疼痛包括物理性創(chuàng)傷(不為熱或化學(xué)燒灼傷及/或其它曝露至有害化學(xué)物質(zhì)之疼痛性暴露)如手術(shù)后疼痛及因割傷、挫傷與斷骨引起之疼痛；牙痛、假牙疼痛；神經(jīng)根疼痛；骨關(guān)節(jié)炎；類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎；纖維肌痛；感覺(jué)異常性股痛；背痛；癌相關(guān)之疼痛；絞痛；腕隧道癥候群；及因骨折、分娩、痔瘡、腸部脹氣、消化不良及月經(jīng)引起之疼痛。
可治療之搔癢癥狀包括干癬性搔癢、因血液透析引起之搔癢、水因性(aquagenic)搔癢癥，及與外陰前庭炎有關(guān)之搔癢、接觸性皮膚、昆蟲(chóng)叮咬與皮膚過(guò)敏?？梢辣疚闹f(shuō)明治療之泌尿道疾病包括尿失禁(包括滿(mǎn)溢性尿失禁、急迫性尿失禁及壓力性尿失禁)，與過(guò)動(dòng)性或不穩(wěn)定性膀胱癥狀(包括因脊椎造成逼尿肌過(guò)度反射與膀胱過(guò)度敏感及膀胱過(guò)度敏感)。某些此等治療方法中，VR1調(diào)節(jié)劑系經(jīng)由導(dǎo)管或類(lèi)似裝置投藥，致使VR1調(diào)節(jié)劑直接注射入膀胱中。本文所提供化合物亦可用為止咳劑(預(yù)防、緩解或壓制咳嗽)及用為呃逆之治療，及促進(jìn)肥胖患者體重之減輕。
于其它方面中，本文所提供VR1調(diào)節(jié)劑可用于聯(lián)用治療中，供治療涉及發(fā)炎因子之癥狀。此等癥狀包括例如自體免疫病變與已知具有發(fā)炎成分之病理性自體免疫反應(yīng)，包括(但不限于)關(guān)節(jié)炎(尤指類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎)、干癬、克隆氏癥(Crohn’s disease)、紅斑性狼瘡、腸激躁癥、組織移植物排斥與移植器官之超急性排斥。其它此等癥狀包括創(chuàng)傷(例如頭部或脊椎傷傷)、心血管及腦血管疾病與某些傳染性疾病。
此等聯(lián)用療法中，VR1調(diào)節(jié)劑系與抗發(fā)炎劑一起投予患者。VR1調(diào)節(jié)劑與抗發(fā)炎劑可在同一醫(yī)藥組合物中，或可依任一順序分別投藥?？拱l(fā)炎劑包括例如非類(lèi)固醇抗發(fā)炎藥(NSAIDs)、非專(zhuān)一性與環(huán)氧化酶-2(COX-2)專(zhuān)一性環(huán)氧化酶酵素抑制劑、金化合物、皮質(zhì)類(lèi)固醇、胺甲蝶呤、腫瘤壞死因子(TNF)受體拮抗劑、抗-TNFα抗體、抗-C5抗體與介白素-1(IL-1)受體拮抗劑。NSAID實(shí)例包括(但不限于)布洛芬(ibuprofen)(例如ADVITM、MOTRINTM)、氟布洛芬(flurbiprofen)(ANSAIDTM)、萘普生(naproxen)或萘普生鈉(例如NAPROSYN、ANAPROX、ALEVETM)、雙氯芬酸(diclofenac)(例如CATAFLAMTM、VOLTARENTM)、雙氯芬酸鈉與米索前列醇(misoprostol)之組合(例如ARTHROTECTM)、速靈達(dá)(sulindac)(CLINORILTM)、

丙

(oxaprozin)(DAYPROTM)、二氟尼柳(diflunisal)(DOLOBIDTM)、炎痛喜康(piroxicam)(FELDENETM)、吲哚美辛(indomethacin)(INDOCINTM)、乙哚乙酸鹽(etodolac)(LODINETM)、非諾洛芬鈣(fenoprofencalcium)(NALFONTM)、酮洛芬(ketoprofen)(例如ORUDISTM、ORUVAILTM)、萘丁美酮鈉(sodium nabumetone)(RELAFENTM)、柳氮磺胺嘧啶(sulfasalazine)(AZULFIDINETM)、托美汀鈉(tolmetin sodium)(TOLECTINTM)、及羥氯喹(hydroxychloroquine)(PLAQUENILTM)。一種特別之NSAID包括抑制環(huán)氧化酶(COX)酵素之化合物；此等化合物包括塞來(lái)考昔(celecoxib)和羅非昔布(rofecoxib)(VIOXXTM)。NSAID尚包括水楊酸鹽如乙?；畻钏峄虬⑺酒チ?、水楊酸鈉、膽堿與水楊酸鎂(TRILISATETM)與水楊酰水楊酸(DISALCIDTM)及皮質(zhì)類(lèi)固醇如可體松(CORTONETM乙酸鹽)、地塞美松(dexamethasone)(例如DECADRONTM)、甲基氫化潑尼松(methylprednisolone)(MEDROLTM)、氫化潑尼松(PRELONETM)、氫化潑尼松磷酸鈉(PEDIAPREDTM)與潑尼松(例如PREDNICEN-MTM、DELTASONETM、STERAPREDTM)。其它消炎藥包括美洛昔康(meloxicam)、羅非昔布(rofecoxib)、塞來(lái)考昔(celecoxib)、依托考昔(etoricoxib)、帕瑞考昔(parecoxib)、戊地昔布(valdecoxib)和替利考昔(tilicoxib)。
此等聯(lián)用療法中，VR1調(diào)節(jié)劑之合適劑量通常如上述?？拱l(fā)炎劑之劑量與投藥方法可參見(jiàn)例如制造商于Physician’s Desk Reference中之說(shuō)明。某些具體實(shí)施例中，VR1調(diào)節(jié)劑與抗發(fā)炎劑之組合投藥結(jié)果可降低抗發(fā)炎劑要產(chǎn)生醫(yī)療效果時(shí)所需劑量，亦即降低最低醫(yī)療有效量。因此，本發(fā)明組合或聯(lián)用投藥法中，抗發(fā)炎劑之劑量最好低于不與VR1拮抗劑聯(lián)用投藥時(shí)，制造商所建議之最高抗發(fā)炎劑劑量。此劑量低于不與VR1拮抗劑組合投藥時(shí)，制造商所建議之最高抗發(fā)炎劑劑量之3/4時(shí)更佳，甚至更佳為低于1/2，極佳為低于1/4，最佳劑量為低于最高劑量之10％。咸了解，組合中VR1拮抗劑成分要達(dá)到所需效果時(shí)所需劑量同樣會(huì)受組合中抗發(fā)炎劑成分劑量與效力影響。
某些較佳具體實(shí)施例中，VR1調(diào)節(jié)劑與抗發(fā)炎劑之組合投藥法系將一種或多種VR1調(diào)節(jié)劑與一種或多種抗發(fā)炎劑包裝在同一包裝中，在同一包裝中分裝在不同容器中、或?yàn)楹幸环N或多種VR1拮抗劑與一種或多種抗發(fā)炎劑之混合物裝在同一容器中。較佳混合物系調(diào)配成口服投藥用(例如呈丸劑、膠囊、錠劑，等等)。某些具體實(shí)施例中，包裝中包含卷標(biāo)，指示該一種或多種VR1調(diào)節(jié)劑與一種或多種抗發(fā)炎劑系用于共同治療發(fā)炎疼痛癥狀。
其它方面中，本文所提供VR1調(diào)節(jié)劑可與一種或多種其它解除疼痛之醫(yī)藥組合。某些此等醫(yī)藥亦為上列之抗發(fā)炎劑。其它此等醫(yī)藥為止痛劑，包括典型作用在一種或多種類(lèi)鴉片受體亞型(例如μ、κ與/或δ)之麻醉劑，較佳為作為促效劑或部份促效劑。此等藥劑包括鴉片制劑、鴉片制劑衍生物與類(lèi)鴉片劑，及其醫(yī)藥上可接受之鹽與水合物。較佳具體實(shí)施例中，麻醉-止痛劑之明確實(shí)例包括阿芬他泥(alfentany1)、阿法普魯汀(alphaprodine)、阿尼利定(anileridine)、貝齊酰胺(bezitramide)、丁丙諾菲(buprenorphine)、丁啡喃(butorphanol)、可待因(codeine)、二乙酰基二氫嗎啡、二乙?；鶈岱?、二氫可待因、地芬諾酯(diphenoxylate)、乙基嗎啡、芬坦尼(fentanyl)、海若英、氫可酮(hydrocodone)、氫化嗎啡酮(hydromorphone)、異美沙酮(isomethadone)、左旋甲嗎凡(levomethorphan)、左旋凡(levorphane)、左嗎喃(levorphanol)、麥啶(meperidine)、美索辛(metazocine)、美沙酮(methadone)、甲嗎凡(methorphan)、甲基二氫嗎啡酮(metopon)、嗎啡、納布啡(nalbuphine)、鴉片萃出物、鴉片液體萃出物、鴉片粉末、鴉片粒劑、生鴉片、鴉片酊劑、羥考酮(oxycodone)、羥氫嗎啡酮(oxymorphone)、帕格利(paregoric)、噴他左辛(pentazocine)、哌替啶(pethidine)、安唑辛(phenazocine)、去痛定(piminodine)、丙氧吩(propoxyphene)、消旋甲嗎喃(racemethorphan)、消旋嗎喃(racemorphan)、舒芬太尼(sulfentanyl)蒂巴因(thebaine)與上述制劑的醫(yī)藥上可接受之鹽類(lèi)及水合物。
麻醉止痛劑之其它明確實(shí)例包括例如乙酰吩(acetorphine)、乙酰基二氫可待因、乙酰美沙醇(acetylmethadol)、烯丙基普洛定(allylprodine)、α-乙酰美沙醇(alphracetylmethadol)、α-美普定(alphameprodine)、α-美沙醇(alphamethadol)、苯塞定(benzethidine)、苯甲基嗎啡、β-乙酰美沙醇(betacetylmethadol)、β-美普定(betameprodine)、β-美沙醇(betamethadol)、β-普洛定(betaprodine)、克尼辛(clonitazene)、可待因甲基溴化物、可待因N-氧化物、希普嗎啡(cyprenorphine)、二氫脫氧嗎啡(desomorphine)、右旋莫酰胺(dextromoramide)、二普酰胺(diampromide)、二乙基噻丁烯(diethylthiambutene)、二氫嗎啡(dihydromorphine)、二孟賽哚(dimenoxadol)、二甲庚醇(dimepheptanol)、二甲基噻丁烯(dimethylthiamubutene)、二

菲定丁酸鹽(dioxaphetyl butyrate)、地匹哌酮(dipipanone)、羥蒂巴酚(drotebanol)、乙醇、乙基甲基噻丁烯(ethylmethylthiambutene)、依托嗒辛(etonitazene)、依托芬(etorphine)、依托利定(etoxeridine)、夫特定(furethidine)、氫化嗎啡醇(hydromorphinol)、羥基普地定(hydroxypethidine)、酮基貝米酮(ketobemidone)、左旋莫酰胺(levomoramide)、左旋酚?；鶈徉?levophenacylmorphan)、甲基脫氧嗎啡(methyldesorphine)、甲基二氫嗎啡、嗎啡啶(morpheridine)、嗎啡、甲基普酰胺(methylpromide)、嗎啡甲基磺酸酯、嗎啡-N-氧化物、嗎咯吩(myrophin)、納洛酮(naloxone)、納曲酮(naltyhexone)、煙可待因(nicocodeine)、煙嗎啡(nicomorphine)、去甲基?；郎炒?noracymethadol)、去甲基左嗎喃(norlevorphanol)、去甲基美沙酮(normethadone)、去甲基嗎啡、去甲基比喃酮(norpipanone)、苯他索咔因(pentazocaine)、吩哚散(phenadoxone)、酚安普酰胺(phenampromide)、酚嗎喃(phenomorphan)、酚普啶(phenoperidine)、吡咯他酰胺(piritramide)、福爾可定(pholcodine)、普庚索辛(proheptazoine)、備解素(properidine)、丙吡胺(propiran)、消旋莫酰胺(racemoramide)、蒂巴康(thebacon)、三甲普定(trimeperidine)與其醫(yī)藥上可接受之鹽類(lèi)與水合物。
其它明確之代表性止痛劑包括例如乙醯胺酚(paracetamol)；阿司匹林與其它如上述NSAID；NR2B拮抗劑；舒緩激肽拮抗劑；抗偏頭痛劑；抗痙攣劑如歐凱賽平(oxcarbazepine)與咔麻賽平(carmazepine)；抗抑郁劑(如TCA、SSRI、SNRI、P物質(zhì)拮抗劑，等等)；脊椎阻斷劑；加保汀(gabapentin)；氣喘治療劑，如θ2-腎上腺激導(dǎo)性受體促效劑；白三烯D4拮抗劑(例如蒙特利克(montelukast)；

Nx與

(均來(lái)自溫莎藥廠(chǎng)(Sanofi WinthropPharmaceuticals；New York，NY))；LEVO-

(Reckitt&Coleman藥廠(chǎng)；Richmond，VA)；

(Purdue Pharma L.P.藥廠(chǎng)；Norwalk，CT)；

(Knoll藥廠(chǎng)；Mount Olive，NJ)；

(Janssen藥廠(chǎng)；Titusville，NJ)；


(均來(lái)自Endo藥廠(chǎng)；Chadds Ford，PA)；

IR、MS/S與MS/L(均來(lái)自Richwood藥廠(chǎng)；Florence，KY)、

SR與

(均來(lái)自Roxanne Laboratories實(shí)驗(yàn)室；Columbus OH)及

(Bristol-Myers Squibb藥廠(chǎng)；New York，NY)。其它止痛劑包括CB2-受體促效劑，如AM1241，及與α2δ亞單位結(jié)合之化合物，如尼克定(Neurontin(Gabapentin))與普加靈(pregabalin)。
其它方面中，本文所提供VR1調(diào)節(jié)劑可與一種或多種白三烯受體拮抗劑(例如抑制半胱胺?；兹〤ysLT1受體之藥劑)組合使用。CysLT1拮抗劑包括蒙特利克(Montelukast)(

Merck&Co.Inc.)。此等組合可用于治療肺部疾病，如氣喘。
治療或預(yù)防咳嗽時(shí)，本文所提供之VR1調(diào)節(jié)劑可與其它設(shè)計(jì)用于此病癥之藥物組合使用，如抗生素、消炎劑、胱胺醯基白三烯、組織胺拮抗劑、皮質(zhì)類(lèi)固醇、類(lèi)鴉片劑、NMDA拮抗劑、質(zhì)子幫浦抑制劑、諾賽平(nociceptin)、神經(jīng)激肽(NK1、NK2與NK3)與舒緩激肽(BK1與BK2)受體拮抗劑、類(lèi)大麻酚、Na+依賴(lài)性信道與大型傳導(dǎo)Ca+2-依賴(lài)性K+-信道活化劑。明確藥劑包括右溴苯那敏(dexbrompheniramine)加假麻黃堿、洛達(dá)定(loratadine)、歐美齊靈(oxymetazoline)、抑普平(ipratropium)、阿布特洛(albuterol)、貝克美松(beclomethasone)、嗎啡、可待因、福爾可定(pholcodeine)與美沙芬(dextromethorphan)。
本發(fā)明亦提供治療尿失禁之聯(lián)用療法。此方面中，本文所提供之VR1調(diào)節(jié)劑可與其它設(shè)計(jì)用于治療此等疾病之藥物組合使用，如雌激素替代療法、黃體酮同系物、電刺激劑、鈣信道阻斷劑、抗痙攣劑、膽堿激導(dǎo)性拮抗劑、抗蕈毒堿藥物、三環(huán)素抗抑郁劑、SNRIs、貝他-腎上腺素能受體促效劑、磷酸二酯酶抑制劑、鉀信道開(kāi)放劑、諾賽平(nociceptin)/歐芬尼(orphanin)FQ(OP4)促效劑、神經(jīng)激肽(NK1與NK2)拮抗劑、P2X3拮抗劑、肌營(yíng)養(yǎng)性藥物與骶骨神經(jīng)調(diào)節(jié)劑。明確藥劑包括歐比汀(oxybutinin)、抑普寧(emepronium)、特洛定(tolterodine)、弗瓦賽(flavoxate)、氟必芬(flurbiprofen)、特洛定(tolterodine)、二環(huán)胺(dicyclomine)、普菲靈(propiverine)、普賽靈(propantheline)、二環(huán)胺(dicyclomine)、抑普胺(imipramine)、得賽平(doxepin)、得樂(lè)汀(duloxetine)、1-去胺基-8-D-精胺酸血管收縮素、蕈毒堿受體拮抗劑，如特洛定(Tolterodine)(

Pharmacia Corporation藥廠(chǎng))與抗膽堿激導(dǎo)性劑，如歐比汀(oxybutynin)(

Ortho-McNeil Pharmaceutical，Inc.Raritan，NJ)。
此等聯(lián)用療法中合適之VR1調(diào)節(jié)劑劑量通常如上述。其它解除疼痛之醫(yī)藥劑量與投藥方法可參見(jiàn)例如制造商于Physician’s DeskReference中之說(shuō)明。某些具體實(shí)施例中，VR1調(diào)節(jié)劑與一種或多種其它解除疼痛之醫(yī)藥之組合投藥結(jié)果使產(chǎn)生醫(yī)療效果時(shí)所需各醫(yī)療劑之劑量降低(例如其中一種或兩種藥劑之劑量可小于上述或制造商所建議之最高劑量之3/4、小于1/2、小于1/4、或小于10％)。
如上述醫(yī)藥組合物用于組合療法時(shí)，可再包含一種或多種如上述其它藥劑。某些此等組合物中，其它藥劑為止痛藥。本發(fā)明亦提供一種包裝之醫(yī)藥制劑，其在同一包裝中包含一種或多種VR1調(diào)節(jié)劑與一種或多種其它藥劑(例如止痛劑)。此等包裝之醫(yī)藥制劑通常包括(i)容納包含本文所說(shuō)明至少一種VR1調(diào)節(jié)劑之醫(yī)藥組合物之容器；(i)容納包含如上述至少一種其它藥劑(如緩解疼痛與/或消炎之藥劑)之醫(yī)藥組合物之容器與(iii)指示如何同時(shí)、分開(kāi)或依序使用該等組合物治療或預(yù)防患者對(duì)VR1調(diào)節(jié)作用有反應(yīng)之病癥(如出現(xiàn)疼痛與/或發(fā)炎之病癥)之說(shuō)明書(shū)(如標(biāo)簽或包裝插頁(yè))。
作為VR1促效劑之化合物亦可用在例如群體控制(替代催淚氣體)或個(gè)人保護(hù)(例如呈噴霧配方)或經(jīng)由辣椒素受體去敏化作用，作為治療疼痛、搔癢、尿失禁或膀胱過(guò)動(dòng)癥之醫(yī)療劑。通常，用于群體控制或個(gè)人保護(hù)之化合物系依據(jù)習(xí)知催淚氣體或胡椒噴霧技術(shù)調(diào)配及使用。
另一方面，本發(fā)明提供多種本文所提供化合物之非醫(yī)藥活體外與活體內(nèi)用途。例如此等化合物可加以標(biāo)記，(于如細(xì)胞制劑或組織切片、制劑或其部份中)用為偵測(cè)與定位辣椒素受體之探針。此外，本文所提供包含合適反應(yīng)基(如芳基、羰基、硝基或迭氮基)之化合物可用于受體結(jié)合位置之光親和性標(biāo)記試驗(yàn)。此外，本文所提供化合物亦可用為受體活性分析試驗(yàn)中之陽(yáng)性對(duì)照組，作為決定候選試劑與辣椒素受體結(jié)合之能力之標(biāo)準(zhǔn)物，或作為正子放射斷層掃瞄攝影(PET)或單光子放射計(jì)算機(jī)斷層掃瞄攝影(SPECT)之放射追蹤劑。此等方法可用于描述活體中辣椒素受體之特性。例如VR1調(diào)節(jié)劑可采用多種習(xí)知技術(shù)標(biāo)記(例如放射性標(biāo)記如本文中說(shuō)明之放射性核素如氚)，與樣本定溫反應(yīng)一段合適之時(shí)間(例如先分析一段結(jié)合時(shí)間決定)。定溫反應(yīng)后，排除未結(jié)合之化合物(例如經(jīng)由洗滌)，采用任何適合所采用標(biāo)記物之方法檢測(cè)已結(jié)合之化合物(例如自動(dòng)放射照相術(shù)或閃爍計(jì)數(shù)法，測(cè)定標(biāo)記放射性之化合物；分光鏡分析試驗(yàn)可用于檢測(cè)冷光基團(tuán)與螢光基團(tuán))。依相同方式處理含有有標(biāo)記之化合物以及較高量(例如超過(guò)10倍以上)無(wú)標(biāo)記之化合物之配對(duì)樣本作為對(duì)照組。試驗(yàn)樣本中殘留可檢測(cè)之標(biāo)記物含量高于對(duì)照組時(shí)，表示樣本中含有辣椒素受體。檢測(cè)分析試驗(yàn)(包括培養(yǎng)細(xì)胞或組織樣本中辣椒素受體之受體自動(dòng)放射顯影(autoradiography)(受體圖譜分析))可依Kuhar述于Current Protocols in Pharmacology(1998)John Wiley&Sons，NewYork”中第8.1.1至8.1.9.節(jié)中之方法進(jìn)行。
本文所提供之化合物亦可用于多種習(xí)知之細(xì)胞分離法。例如調(diào)節(jié)劑可連結(jié)組織培養(yǎng)盤(pán)或其它擔(dān)體之內(nèi)表面，用為親和性配位體，以于活體外使辣椒素受體固定而單離之(例如單離表現(xiàn)受體之細(xì)胞)。一項(xiàng)較佳具體實(shí)施例中，調(diào)節(jié)劑系連結(jié)螢光標(biāo)記物，如螢光素，與細(xì)胞接觸后，使用螢光激活細(xì)胞分選器(FACS)分析(或單離)。
本文所提供VR1調(diào)節(jié)劑可進(jìn)一步用于鑒定其它結(jié)合辣椒素受體之制劑之分析試驗(yàn)。一般而言，此等分析試驗(yàn)為標(biāo)準(zhǔn)競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合分析試驗(yàn)，其中已結(jié)合之有標(biāo)記VR1調(diào)節(jié)劑經(jīng)以試驗(yàn)化合物置換。簡(jiǎn)言之，進(jìn)行此等分析試驗(yàn)之方式為(a)由辣椒素受體與本文所說(shuō)明有標(biāo)記放射性之化合物，于可使化合物與辣椒素受體結(jié)合之條件下接觸，藉以產(chǎn)生已結(jié)合之有標(biāo)記之化合物；(b)于無(wú)試驗(yàn)制劑存在下檢測(cè)與已結(jié)合之有標(biāo)記化合物含量相應(yīng)之訊號(hào)；(c)由已結(jié)合之有標(biāo)記化合物與試驗(yàn)制劑接觸；(d)在試驗(yàn)制劑之存在下檢測(cè)與已結(jié)合之有標(biāo)記化合物含量相應(yīng)之訊號(hào)；及(e)與步驟(b)所檢測(cè)到之訊號(hào)比較，測(cè)定步驟(d)之訊號(hào)降低程度。
下列實(shí)例系供說(shuō)明用，并未加以限制。除非另有說(shuō)明，否則所有試劑與溶劑均為標(biāo)準(zhǔn)商品級(jí)，未再進(jìn)一步純化即使用。采用例行修飾法可以變化起始物與其它所采用之步驟，以制成本文所提供之其它化合物。
實(shí)例 此實(shí)例及下列實(shí)例之質(zhì)譜數(shù)據(jù)為電噴灑MS，系依陽(yáng)離子模式以15V或30V之錐電壓(cone voltage)，采用儀器Micromass Time-of-FlightLCT(Micromass，Beverly MA)，配備Waters 600幫浦，Waters 996光二極排列檢測(cè)器，Gilson 215自動(dòng)取樣器與Gilson 841微注射器測(cè)定。采用MassLynx(Advanced Chemistry Development，Inc；Toronto，Canada)4.0版軟件。取樣體積1微升注射至50×4.6mm ChromolithSpeedROD C18管柱，使用2-相線(xiàn)性梯度，流速6毫升/分鐘溶離。樣本于220-340nm UV范圍內(nèi)測(cè)定總吸光度。溶離條件為移動(dòng)相A-95/5/0.05水/MeOH/TFA；移動(dòng)相B-5/95/0.025水/MeOH/TFA。
梯度 時(shí)間(分鐘) ％B 0 10 0.5100 1.2100 1.21 10 每次注射之間循環(huán)2分鐘。
實(shí)例1 經(jīng)取代噠嗪基-喹啉-4-基胺和嘧啶-喹啉-4-基胺類(lèi)似物之制備 本實(shí)例說(shuō)明代表性中間產(chǎn)物的制法。
A.1-[4-(三氟甲基)噠嗪-3-基]乙酮
在密封管中將3-氯-4-(三氟甲基)噠嗪(200mg，1.10mmol；大致如在PCT國(guó)際申請(qǐng)公開(kāi)號(hào)第WO2004/074290所述制備)與第三丁基(1-乙氧基-乙烯基)錫(437mg，1.21mmol)溶于無(wú)水甲苯(5mL)中。將該溶液以氬氣氣球通氬氣5分鐘。添加Pd(PPh3)4(25.4mg，0.022mmol)并將該混和物在110℃加熱隔夜。將該混合物冷卻至室溫并通過(guò)矽藻土(Celite)過(guò)濾并以EtOAc洗滌。將溶劑揮發(fā)并將該殘質(zhì)溶在THF(10mL)與3NHCl(10mL)中。在室溫中攪拌3小時(shí)。添加EtOAc(100mL)并以H2O(50mL)、1NNaOH(50mL)和鹽水(50mL)萃取。將該有機(jī)萃取物以Na2SO4干燥并將之揮發(fā)。將該粗產(chǎn)物在矽膠上進(jìn)行色層分析，首先以己烷沖提接著以己烷/EtOAc(3∶1)沖提而得該標(biāo)題化合物。LC/MS(MH+)191.41。
B.2，2-二溴-1-[4-(三氟甲基)噠嗪-3-基]乙酮
將1-[4-(三氟甲基)噠嗪-3-基](200mg，1.08mmol)溶于冰醋酸(5mL)中。添加溴并將該溶液在60℃加熱3小時(shí)。冷卻并揮發(fā)。添加甲苯(25mL)并揮發(fā)兩次而得該標(biāo)題化合物。LC/MS(MH+)346.96。
C.6-乙氧基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
1.N-二芐基-6-乙氧基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
將N，N-二芐基-6-氯-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(2.00g，5.31mmol；大致如Horikawa et al.(2001)S.Chem.Pharm.Bull 49(12)1621-27所述制備)溶在THF(100mL)中并冷卻至0℃。滴加NaOEt(5.93mL，15.9mmol，2.68M于EtOH)至該混合物。在30分鐘之后加熱該混和物至洄流并攪拌2天。移除該溶劑并將該殘質(zhì)溶在EtOAc(100mL)和水(100mL)中。以EtOAc萃取該水層(2×100mL)。將該有機(jī)萃取物合并并以Na2SO4干燥。在減壓下將該溶劑移除。將該粗殘質(zhì)在矽膠上進(jìn)行色層分析，以己烷/EtOAc(9∶1)沖提而得該標(biāo)題化合物。LC/MS(MH+)387.14。
2.6-乙氧基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺
將N，N-二芐基-6-乙氧基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺(770mg，1.99mmol)溶在MeOH(40mL)和AcOH(5mL)的溶液中。添加10％Pd(OH)2/C(140mg)至該溶液中并以50psi氫化7小時(shí)。濾除該催化劑并將該溶液濃縮。將該殘質(zhì)溶解于EtOAc(100mL)和飽合NaHCO3水溶液(100mL)中。以EtOAc萃取(2×100mL)。將該有機(jī)萃取物合并并以Na2SO4干燥而得該標(biāo)題化合物。
D.1-[2-甲氧基-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]乙酮 1.4-氯-2-甲氧基-5-(三氟甲基)嘧啶
將2，4-二氯-5-(三氟甲基)嘧啶(6.54g，30.1mmol)溶在MeOH(50mL)中。添加三乙胺(4.20mL，30.1mmol)并在室溫?cái)嚢韪粢?。在減壓下移除該溶劑。將該殘質(zhì)溶解于CH2Cl2(100mL)和飽合NaHCO3水溶液(100mL)中。以CH2Cl2萃取該水相(2×100mL)。合并、干燥并揮發(fā)該有機(jī)萃取物。將該粗產(chǎn)物在矽膠上進(jìn)行色層分析，以己烷/Et2O(97∶3)沖提而得兩種結(jié)構(gòu)異構(gòu)物，該標(biāo)題化合物具有較大的極性。LC/MS(MH+)213.13。
2.1-[2-甲氧基-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]乙酮
在密封管中將4-氯-3-甲氧基-5-(三氟甲基)嘧啶(590mg，2.77mmol)和第三丁基(1-乙氧基-乙烯基)錫(1.10mg，3.05mmol)溶在無(wú)水甲苯(7mL)中。將該溶液以氬氣氣球通氬氣5分鐘。添加Pd(PPh3)4(64mg，0.055mmol)并將該混和物在110℃加熱隔夜。將該混合物冷卻至室溫并通過(guò)矽藻土(Celite)過(guò)濾并以EtOAc洗滌。將溶劑揮發(fā)并將該殘質(zhì)溶在THF(30mL)與2N HCl(30mL)中。在室溫中攪拌隔夜。將該混合物以冰浴冷卻并以6N的NaOH堿化。以EtOAc(2×100mL)萃取。將該有機(jī)萃取物合并并以H2O(50mL)、1N NaOH(50mL)和鹽水(50mL)萃取。將該有機(jī)萃取物以Na2SO4干燥并將之揮發(fā)。將該粗殘質(zhì)在矽膠上進(jìn)行色層分析，首先以己烷沖提接著以己烷/EtOAc(3∶1)沖提而得該標(biāo)題化合物。LC/MS(MH+)221.06。
實(shí)例2 其它代表性經(jīng)取代噠嗪基-喹啉-4-基胺和嘧啶-喹啉-4-基胺類(lèi)似物之合成 A.N-[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]-7-[4-(三氟甲基)噠嗪-3-基]-1，8-萘啶-4-胺(化合物1)
在氮?dú)鈿夥障聦?-氯-3-甲酰基吡啶-2-基氨基甲酸第三丁酯(1.6g，6.2mmol)溶在無(wú)水CH2Cl2(50mL)中。滴加三氟甲酸(2.4M1，31.0mmol)至該反應(yīng)混合物并在室溫加熱隔夜。添加飽和的碳酸鈉水溶液(50mL)至該反應(yīng)混合物中，將該有機(jī)層分離，以CH2Cl2萃取水相層(2×20mL)并以MgSO4干燥。在減壓下過(guò)濾并濃縮而得呈黃色固體的標(biāo)題產(chǎn)物。
2.5-氯-2-[4-(三氟甲基)噠嗪-3-基]-1，8-萘啶
將1-[4-(三氟甲基)噠嗪-3-基]乙酮(105mg，0.552mmol)和2-氨基-4-氯煙醛(86mg，0.552mmol)溶在無(wú)水THF(10mL)中。將該混合物冷卻至-30℃并以30分鐘的期間分次添加KtBuO(124mg，1.10mmol)。將該混合物攪拌再又30分鐘。在減壓下移除該溶劑(未加熱，未進(jìn)行至完全干燥)。添加冰(20g)和飽和的NH4Cl水溶液(20mL)。濾除所產(chǎn)生的固體(產(chǎn)物)并以冷水洗滌。將沉淀物在真空烘箱中干燥(60℃)2小時(shí)而得該標(biāo)題化合物。LC/MS(MH+)311.01。
3.N-[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]-7-[4-(三氟甲基)噠嗪-3-基]-1，8-萘啶-4-胺(化合物1)
在密封管中將5-氯-2-[4-(三氟甲基)噠嗪-3-基]-1，8-萘啶(115mg，0.370mmol)、2-氨基-5-三氟甲基-吡啶(75mg，0.463mmol)和Cs2CO3(398mg，1.22mmol)溶在二氧雜六環(huán)(5mL)中。將該溶液以氬氣氣球通氬氣5分鐘。添加Pd2dba3(PPh3)4(34mg，0.037mmol)以及將xanpthos(22mg，0.037mmol)并將該溶液以氬氣氣球通氬氣5分鐘。密封該管并在110℃加熱隔夜。冷卻該混合物并以醋酸乙酯稀釋通過(guò)矽藻土過(guò)濾該溶液。在減壓下濃縮該濾出物。以PTLC純化該粗殘質(zhì)以CH2Cl2/MeOH/NH4OH(95/5/1)沖提而得該標(biāo)題化合物。1H NMR(CDCl3)δ9.54(d，1H)，9.07(br，s，1H)，8.71(d，1H)，8.64(s，1H)，8.20(d，1H)，8.8(br m，2H)，7.96(d，1H)，7.89(d，1H)，7.25(d，1H).LC/MS(MH+)436.09。該IC50值在實(shí)施例6中所提供的分析試驗(yàn)為小于1微摩爾。
B.N-[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]-3-[4-(三氟甲基)吡啶-3-基]吡啶并[2，3-B]噠嗪-8-胺(化合物2) 1.3-[4-(三氟甲基)噠嗪-3-基]吡啶并[2，3-b]噠嗪-8-胺
將2，2-二溴-1[4-(三氟甲基)噠嗪-3-基]乙酮(375mg，0.463mmol)、吡啶-2，3，4-三胺二氫溴化物(228mg，1.19mmol，大致如Kogl et al.(1948)Recueil des Travaux Chimiques des Pays-Baset de la Beligique 6729-44所述制備)和NaHCO3(726mg，8.64mmol)溶于H2O(10mL)和二讓雜六烷(5mL)。在100℃加熱3小時(shí)。冷卻并以EtOAc(3×50mL)萃取。合并該有機(jī)萃取物并以鹽水(100mL)萃取以Na2SO4干燥。在減壓下?lián)]發(fā)該溶劑。以PTLC純化該粗殘質(zhì)以CH2Cl2/MeOH/NH4OH(90/10/1)沖提而得兩種不同結(jié)構(gòu)異構(gòu)物的2∶1的混合物，其中該標(biāo)題化合物為主要較具極性的同位體。
LC/MS(MH+)293.11。
2.N-[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]-3-[4-(三氟甲基)噠嗪-3-基]吡啶并[2，3-b]吡嗪-8-胺(化合物2)
在密封管中將3-[4-(三氟甲基)噠嗪-3-基]吡啶并[2，3-b]吡嗪-8-胺(38mg，0.129mmol)、2-氯-5-三氟甲基-吡啶(24mg，0.129mmol)和Cs2CO3(126mg，0.387mmol)溶在無(wú)水二氧雜六環(huán)(5mL)中。將該溶液以氬氣氣球通氬氣5分鐘。密封該管并在110℃加熱隔夜。冷卻該混合物至室溫并以EtOAc(10mL)稀釋。通過(guò)矽藻土過(guò)濾該溶液并以EtOAc洗滌。在減壓下?lián)]發(fā)該溶劑。以PTLC純化該粗殘質(zhì)以CH2Cl2/MeOH/NH4OH(95/5/1)沖提而得該標(biāo)題化合物。1H NMR(CDCl3)δ9.59(d，1H)，9.56(s，1H)，9.54(br，s，1H)，9.13(d，1H)，8.99(d，1H)，8.73(br，s，1H)，8.01(d，1H)，7.92(dd，1H)，7.22(d，1H).LC/MS(MH+)437.08。該IC50值在實(shí)施例6中所提供的分析試驗(yàn)為小于1微摩爾。
C.5-(三氟甲基)-4-(5-{[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]氨基}-1，8-萘啶-2-基)嘧啶-2-酚(化合物3) 1.4-(5-氯-1，8-萘啶-2-基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-酚
將1-[2-甲氧基-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]乙酮(211mg，0.958mmol)和2-氨基-4-氯煙醛(150mg，0.958mmol)溶在無(wú)水THF(15mL)中。將該混合物冷卻至-30℃并以30分鐘的期間分次添加KtBuO(215mg，1.92mmol)。將該混合物攪拌再又30分鐘。在減壓下移除該溶劑(未加熱，未進(jìn)行至完全干燥)。添加冰(20g)和飽和的NH4Cl水溶液(20mL)。濾除所產(chǎn)生的固體并以冷水洗滌。將沉淀物在真空烘箱中干燥(85℃)隔夜而得該標(biāo)題化合物。LC/MS(MH+)327.11。
2.5-(三氟甲基)-4-(5-{[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]氨基}-1，8-萘啶-2-基)嘧啶-2-酚
在密封管中將4-(5-氯-1，8-萘啶-2-基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-酚(237mg，0.725mmol)、2-氨基-5-三氟甲基-吡啶(176mg，1.09mmol)和Cs2CO3(709mg，2.18mmol)溶在無(wú)水二氧雜六環(huán)(7mL)中。將該溶液以氬氣氣球通氬氣5分鐘。添加Pd2dba3(PPh3)4(66mg，0.0725mmol)以及xanpthos(42mg，0.0725mmol)并將該溶液以氬氣氣球通氬氣5分鐘。密封該管并在110℃加熱隔夜。冷卻該混合物并以Et2O稀釋。通過(guò)矽藻土過(guò)濾該溶液。丟棄該濾出物。以MeOH洗滌該矽藻土床。在減壓下濃縮該濾出物。以矽膠純化該粗殘質(zhì)以CH2Cl2/MeOH(90/10)沖提而得該標(biāo)題化合物。LC/MS(MH+)453.10。
D.7-[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]-N-[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]-1，8-萘啶-4-胺(化合物4)
將5-(三氟甲基)-4-(5-{[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]氨基}-1，8-萘啶-2-基)嘧啶-2-酚(45mg，0.106mmol)溶在POCl3(10mL)中并洄流加熱隔夜。冷卻并在減壓下移除過(guò)量的POCl3。將該殘之溶解在EtOAc(100mL)和飽和NaHCO3水溶液(100mL)中。以EtOAc萃取該水相(3×50mL)。合并、干燥并將該有機(jī)萃取物揮發(fā)而得標(biāo)題化合物。LC/MS(MH+)471.04。
E.N-[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]-7-[5-(三氟甲基)吡啶-4-基]-1，8-萘啶-4-胺(化合物5)
將7-[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]-N-[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]-1，8-萘啶-4-胺(45mg，0.096mmol)溶在MEOH(10mL)中。添加HCO2NH4(70mg，1.10mmol)和Pd/C(15mg)。在室溫?cái)嚢?小時(shí)并在60℃攪拌6小時(shí)。冷卻并通過(guò)矽藻土過(guò)濾，以MeOH洗滌該矽藻土床。在減壓下濃縮該溶液。以PITC純化該粗產(chǎn)物而得該標(biāo)題化合物。1H NMR(CD3OD)δ9.53(s，1H)，9.35(s，1H)，9.09(d，1H)，8.94(d，1H)，8.67(d，1H)，8.51(br，s，1H)，8.09(d，1H)，8.02(dd，1H)，7.42(d，1H).LC/MS(MH+)437.00。該IC50值在實(shí)施例6中所提供的分析試驗(yàn)為小于1微摩爾。
實(shí)例3 其它代表性經(jīng)取代噠嗪基-喹啉-4-基胺和嘧啶-喹啉-4-基胺類(lèi)似物 采用例行修飾法，改變起始物，及采用其它步驟，可產(chǎn)生本文提供之其它化合物。例如，使用描述為N-[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]-7-[4-(三氟甲基)噠嗪-3-基]-1，8-萘啶-4-胺并將6-乙氧基-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺以2-氨基-5-三氟甲基-吡啶取代產(chǎn)生N-[6-乙氧基-5-(三氟甲基)吡啶-2-基]-7-[4-(三氟甲基)噠嗪-3-基]-1，8-萘啶-4-胺(化合物5)。
表I與II所示化合物是采用此等方法制備。表I所示化合物在實(shí)例6所提供的分析試驗(yàn)中IC50值為1微莫耳濃度或以下。LC/MS數(shù)據(jù)以M+1表示。在表III中，″IC50″欄中的″*″代表，在實(shí)例6所提供的分析試驗(yàn)的IC50值為以下1毫莫耳。
表I
表II






表III






























實(shí)例4 VR1-轉(zhuǎn)染細(xì)胞與膜制劑 此實(shí)例說(shuō)明用于辣椒素結(jié)合分析試驗(yàn)(實(shí)例5)之VR1-轉(zhuǎn)染細(xì)胞與含VR1之膜制劑之制法。
取人類(lèi)辣椒素受體全長(zhǎng)編碼之互補(bǔ)去氧核糖核酸(cDNA)(美國(guó)專(zhuān)利案No.6,482,611之SEQ ID NO1、2或3)次選殖(subclone)至質(zhì)體pBK-CMV(Stratagene，La Jolla，CA)，供于哺乳動(dòng)物細(xì)胞中重組表現(xiàn)。
以標(biāo)準(zhǔn)方法，轉(zhuǎn)染pBK-CMV之人類(lèi)辣椒素受體全長(zhǎng)編碼表現(xiàn)結(jié)構(gòu)至人類(lèi)胚胎腎臟(HEK293)細(xì)胞。轉(zhuǎn)染之細(xì)胞經(jīng)含G418(400μg/ml)之培養(yǎng)基中培養(yǎng)兩周以選取，獲得一群穩(wěn)定轉(zhuǎn)染之細(xì)胞。經(jīng)由限數(shù)稀釋法，自此群細(xì)胞中單離出獨(dú)立純系，得到純系之安定細(xì)胞株，供下一個(gè)試驗(yàn)使用。
進(jìn)行放射性配位體結(jié)合性試驗(yàn)時(shí)，接種細(xì)胞至T175細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)不含抗生素之培養(yǎng)基中，生長(zhǎng)至約90％滿(mǎn)盤(pán)。培養(yǎng)瓶隨后經(jīng)PBS洗滌，于含5mM EDTA之PBS中收集細(xì)胞。細(xì)胞經(jīng)溫和離心集結(jié)成塊，保存在-80℃下，至分析為止。
將先前冷凍之細(xì)胞置于冰冷羥乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)均質(zhì)緩沖液(5mM KCl、5.8mM NaCl、0.75mM CaCl2、2mM MgCl、320mM蔗糖與10mMHEPES pH 7.4)中以組織均質(zhì)器打破。組織均質(zhì)液先于1000xg(4℃)下離心10分鐘，以移除細(xì)胞核部份及細(xì)胞碎片，然后取第一次離心之上澄液再于35,000xg(4℃)下離心30分鐘，得到部份純化之膜部份。膜先再懸浮于HEPES均質(zhì)緩沖中后才進(jìn)行分析。取一份膜均質(zhì)液，利用Bradford方法(BIO-RAD蛋白質(zhì)分析套組，#500-0001，BIO-RAD，Hercules，CA)測(cè)定蛋白質(zhì)濃度。
實(shí)例5 辣椒素受體結(jié)合分析試驗(yàn) 本實(shí)例說(shuō)明辣椒素受體結(jié)合性之代表性分析試驗(yàn)，其可用于測(cè)定化合物對(duì)辣椒素(VR1)受體之結(jié)合親和性。
與[3H]樹(shù)脂毒素(resiniferatoxin)(RTX)之結(jié)合性試驗(yàn)基本上系依Szallasi與Blumberg(1992)J.Pharmacol.Exp.Ter.262883-888中說(shuō)明之方法進(jìn)行。此方法中，非專(zhuān)一性RTX結(jié)合性會(huì)因當(dāng)結(jié)合反應(yīng)結(jié)束后添加牛α1酸醣蛋白(每支管100微克)而下降。
[3H]RTX(37Ci/毫莫耳)系由國(guó)家癌癥研究所-費(fèi)得利克癌癥研究與發(fā)展中心之化學(xué)合成與分析實(shí)驗(yàn)室(the Chemical Synthesis andAnalysis Laboratory，National Cancer Institute-Frederick CancerResearch and Development Center，F(xiàn)rederick，MD)所合成而得。[3H]RTX亦可自銷(xiāo)售商而得(例如藥廠(chǎng)Amersham Pharmacia Biotech，Inc.Piscataway，NJ)。
取實(shí)例4之膜均質(zhì)液依上述離心及再懸浮于均質(zhì)緩沖液中，達(dá)蛋白質(zhì)濃度333μg/ml。于冰上制備結(jié)合性分析試驗(yàn)混合物，其中包含[3H]RTX(比活性2200mCi/ml)、2μl非放射活性試驗(yàn)化合物、0.25mg/ml牛血清白蛋白(Cohn部份V)、與5×104至1×105VR1-轉(zhuǎn)染細(xì)胞。使用上述冰-冷HEPES均質(zhì)緩沖液(pH 7.4)調(diào)整最終體積至500μl(用于競(jìng)爭(zhēng)型結(jié)合分析試驗(yàn))或1,000μl(用于飽和型結(jié)合分析試驗(yàn))。非專(zhuān)一結(jié)合性之定義為在1μM非放射活性RTX(Alexis Corp.San Diego，CA)之存在下之結(jié)合性。分析飽和結(jié)合性時(shí)，[3H]RTX之添加濃度范圍為7至1,000pM，稀釋1至2次。典型作法為每條飽和結(jié)合性曲線(xiàn)收集11個(gè)濃度點(diǎn)。
競(jìng)爭(zhēng)型結(jié)合分析試驗(yàn)系于60pM[3H]RTX及不同濃度之試驗(yàn)化合物之存在下進(jìn)行。藉將分析混合物移至37℃水浴中，起始結(jié)合性反應(yīng)，定溫反應(yīng)60分鐘后，將試管置于冰上冷卻，以中止反應(yīng)。以WALLA玻璃纖維濾紙過(guò)濾(PERKIN-ELMER，Gaithersburg，MD)(使用前先浸泡1.0％PEI(聚乙烯亞胺)2小時(shí))，膜結(jié)合之RTX藉此與游離之RTX及任何與α1酸醣蛋白結(jié)合之RTX分離。使濾紙干燥一夜后，添加WALLAC BETASCINT閃爍計(jì)數(shù)液，于WALLAC 1205BETA PLATE計(jì)數(shù)器上計(jì)數(shù)。
平衡結(jié)合參數(shù)系將所得之?dāng)?shù)值代入變構(gòu)性希爾公式(theallosteric Hill equation)，藉計(jì)算機(jī)程序FITP(Biosoft，F(xiàn)erguson，MO)而判定(說(shuō)明于Szallasi等人之(1993)J.Pharmacol.Exp.Ther.266678-683)計(jì)算數(shù)據(jù)。本文所提供化合物于此分析試驗(yàn)中對(duì)辣椒素受體之Ki值小于1μM、100nM、50nM、25nM、10nM或1nM。
實(shí)例6 鈣移動(dòng)分析試驗(yàn) 本實(shí)例說(shuō)明用于分析試驗(yàn)化合物之促效劑與拮抗劑活性之代表性鈣移動(dòng)化分析試驗(yàn)。
經(jīng)表現(xiàn)質(zhì)體轉(zhuǎn)染(依實(shí)例4所述)藉以表現(xiàn)人類(lèi)辣椒素受體之細(xì)胞接種至FALCON黑邊，透明底板之96孔盤(pán)中(#3904，BECTON-DICKINSON，F(xiàn)ranklin Lakes，NJ)，生長(zhǎng)至70至90％滿(mǎn)盤(pán)。倒空96孔盤(pán)中之培養(yǎng)基，在各孔中添加FLUO-3AM鈣敏感性染料(Molecular Probes，Eugene，OR)(染料溶液1毫克FLUO-3 AM、440μL DMSO與440μl 20％普羅尼克酸(pluronic acid)之DMSO溶液，于克氏-林格氏(Krebs-Ringer)HEPES(KRH)緩沖液(25mM HEPES、5mM KC1、0.96mM NaH2PO4、1mM MgSO4、2mM CaCl2、5mM葡萄糖、1mM丙磺舒(probenecid)，pH 7.4)中稀釋1∶250，每孔50μl稀釋溶液)。分析盤(pán)以鋁箔覆蓋，于37℃之含5％CO2環(huán)境下培養(yǎng)1至2小時(shí)。培養(yǎng)后，倒空培養(yǎng)盤(pán)中之染料，以KRH緩沖液洗滌細(xì)胞一次，再懸浮于KRH緩沖液中。
辣椒素EC50之測(cè)定法 為了測(cè)定試驗(yàn)化合物在于辣椒素或其它類(lèi)香草醇促效劑之辣椒素受體表現(xiàn)細(xì)胞中對(duì)促進(jìn)或擷抗鈣移動(dòng)反應(yīng)之能力，因此先測(cè)定促效劑辣椒素之EC50。在各孔細(xì)胞中添加依上述制備之20μl KRH緩沖液與1μl DMSO。采用FLIPR儀器，自動(dòng)加入100μl含辣椒素之KRH緩沖液至各孔中。采用螢光掃瞄器(FLUOROSKAN ASCENT)(Labsystems；Franklin，MA)或FLIPR(螢光測(cè)定儀顯影板讀數(shù)系統(tǒng)；Molecular Devices，Sunnyvale，CA)儀器監(jiān)測(cè)辣椒素誘發(fā)之鈣移動(dòng)作用。以施用促效劑后30至60秒之間之?dāng)?shù)據(jù)制成8個(gè)點(diǎn)之濃度效應(yīng)曲線(xiàn)，最終辣椒素濃度為1nM至3μM。采用KALEIDAGRAPH軟件(Synergy Software，Reading，PA)將數(shù)據(jù)代入公式 y＝a*(l/(l+(b/x)c)) 以測(cè)定反應(yīng)之50％激發(fā)濃度(excitatory concentration；EC50)。此公式中，y為最高螢光訊號(hào)，x為促效劑或拮抗劑(此時(shí)指辣椒素)濃度，a為Emax；b相當(dāng)于EC50值，且c為希爾系數(shù)(Hill coefficient)。促效劑活性之判定。
取試驗(yàn)化合物溶于DMSO中，于KRH緩沖液中稀釋?zhuān)⒓醇又烈郎鲜鲋苽渲?xì)胞中。亦添加100nM辣椒素(約EC90濃度)至相同96孔培養(yǎng)盤(pán)中之細(xì)胞作為陽(yáng)性對(duì)照組。分析孔中試驗(yàn)化合物之最終濃度為0.1nM至5μM之間。
試驗(yàn)化合物作用為辣椒素受體促效劑之能力取決于測(cè)量表現(xiàn)辣椒素受體之細(xì)胞之螢光反應(yīng)，此螢光反應(yīng)系經(jīng)化合物誘發(fā)并為隨化合物濃度變化之函數(shù)。將數(shù)據(jù)依上述方式代入，得到EC50，結(jié)果通常小于1微莫耳濃度，較佳為小于100nM，更佳為小于10nM。亦由指定試驗(yàn)化合物濃度(典型為1μM)誘發(fā)之反應(yīng)相對(duì)于由100nM辣椒素誘發(fā)之反應(yīng)計(jì)算各試驗(yàn)化合物之效力程度。此數(shù)值稱(chēng)為訊號(hào)百分比(POS)，由下列公式計(jì)算 POS＝100*試驗(yàn)化合物反應(yīng)/100nM辣椒素反應(yīng) 此分析試驗(yàn)提供一種同時(shí)分析試驗(yàn)化合物作為人類(lèi)辣椒素受體促效劑之強(qiáng)度與效力之定量法。人類(lèi)辣椒素受體之促效劑通常在小于100μM濃度下誘發(fā)可檢測(cè)之反應(yīng)，或較佳為小于1μM之濃度，或最佳為小于10nM之濃度。其在1μM濃度時(shí)，對(duì)人類(lèi)辣椒素受體之效力程度較佳為大于30 POS，更佳為大于80 POS。某些促效劑在下文說(shuō)明之分析試驗(yàn)中，于低于4nM之化合物濃度下沒(méi)有可檢測(cè)之拮抗劑活性，即證實(shí)其基本上沒(méi)有拮抗劑活性，更佳為低于10μM之濃度，及最佳為低于或等于100μM之濃度。
拮抗劑活性測(cè)定法 取試驗(yàn)化合物溶于DMSO中，以20μl KRH緩沖液稀釋?zhuān)狗治隹字凶罱K試驗(yàn)化合物濃度為1μM至5μM之間，加至如上述制備之細(xì)胞中。取含已制備之細(xì)胞與試驗(yàn)化合物之96孔盤(pán)于黑暗中與室溫下培養(yǎng)0.5至6小時(shí)。應(yīng)注意，培養(yǎng)時(shí)間不可持續(xù)超過(guò)6小時(shí)。即將測(cè)定螢光反應(yīng)之前，方利用FLIPR儀器自動(dòng)添加100μl含辣椒素之KRH緩沖液至96孔盤(pán)各孔中，其濃度為如上述測(cè)得之EC50之兩倍濃度，最終樣本體積為200μl，最終辣椒素濃度等于EC50。分析孔中試驗(yàn)化合物之最終濃度為1μM至5μM之間。辣椒素受體之拮抗劑在10微莫耳濃度或以下濃度，較佳為1微莫耳濃度或以下濃度，使此反應(yīng)相對(duì)于配對(duì)對(duì)照組(亦即于無(wú)試驗(yàn)化合物之存在下，使用兩倍EC50濃度之辣椒素處理之細(xì)胞)降低至少約20％，較佳為至少約50％，最佳為至少80％。取相對(duì)于在辣椒素之存在下及沒(méi)有拮抗劑下所觀(guān)察到之反應(yīng)降低50％時(shí)所需拮抗劑濃度，為拮抗劑之IC50，較佳為低于1微莫耳濃度、100奈莫耳濃度、10奈莫耳濃度或1奈莫耳濃度。
某些較佳VR1調(diào)節(jié)劑為于上述分析試驗(yàn)中，于低于4nM之化合物濃度下沒(méi)有可檢測(cè)之促效劑活性時(shí)，即證實(shí)其基本上沒(méi)有促效劑活性，更佳為低于10μM之濃度，及最佳為低于或等于100μM之濃度。
實(shí)例7 微粒體活體外半衰期 此實(shí)施例說(shuō)明使用代表性肝臟微粒體半衰期分析試驗(yàn)對(duì)化合物半衰期值(t1/2值)之評(píng)估。
合并的(pooled)人的肝臟微粒體從XenoTech LLC(Kansas City，KS)而得。此等肝臟微粒體亦可自In Vitro Technologies(Baltimore，MD)或Tissue Transformation Technologies(Edison，NJ)。制備六組測(cè)試反應(yīng)，各包含25 l微粒體，100M測(cè)試化合物之溶液5 l，和0.1M磷酸鹽緩沖液(19毫升0.1M NaH2PO4，81毫升0.1M Na2HPO4，以H3PO4調(diào)節(jié)至酸堿度7.4)399 l。第七反應(yīng)制備作為包含25 l微粒體的陽(yáng)性控制組，0.1M磷酸鹽緩沖液399 l，和5 l具已知代謝性之化合物的100M溶液(例如，二氮平(DIAZEPAM)或氯氮平(CLOZAPINE))。反應(yīng)于39℃預(yù)定溫10分鐘。
輔助因子混合物藉稀釋16.2毫克NADP及45.4毫克葡萄糖-6-磷酸鹽于4毫升100mM氯化鎂制備。葡萄糖-6-磷酸鹽去氫酶溶液藉由稀釋214.3 l葡萄糖-6-磷酸鹽去氫酶懸浮劑(Roche MolecularBiochemicals；Indianapolis，IN)入1285.7 l蒸餾水制備。71 l起始反應(yīng)混合物(3毫升輔助因子混合物；1.2毫升葡萄糖-6-磷酸鹽去氫酶溶液)加入6組測(cè)試反應(yīng)中的5個(gè)以及陽(yáng)性控制組。71 l 100mM氯化鎂加入第6個(gè)測(cè)試反應(yīng)，作為負(fù)控制組使用。于每時(shí)間點(diǎn)(0，1，3，5，和10分鐘)，各反應(yīng)混合75 l吸取加入內(nèi)含75 l冰冷乙腈96-孔盤(pán)的孔。樣品系于3500轉(zhuǎn)每分鐘漩渦攪拌與離心10分鐘(SorvalT 6000D離心機(jī)，HlOOOB旋轉(zhuǎn)輪)。從各反應(yīng)之75 l上層清液移至每一孔，其內(nèi)含已知LCMS圖形之(內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn))化合物的0.5M溶液150 l。進(jìn)行各個(gè)樣品的LCMS分析及測(cè)定未代謝測(cè)試化合物的量作為曲線(xiàn)下面積(AUC)，化合物濃度對(duì)時(shí)間作圖，及外推及測(cè)試化合物的t1/2值。于此提供的較佳的化合物于人的肝臟微粒體，顯示活體外大于10分鐘和少于4個(gè)小時(shí)的t1/2值，較佳介于30分鐘和1個(gè)小時(shí)之間。
實(shí)例8 MDCK毒性分析試驗(yàn) 此實(shí)施例說(shuō)明使用Madin Darby犬腎臟(MDCK)細(xì)胞的細(xì)胞毒性分析試驗(yàn)對(duì)化合物毒性的評(píng)估。
加入試驗(yàn)化合物1μL于透明底部96-孔盤(pán)的每一孔(PACKARD，Meriden，CT)使分析試驗(yàn)中之化合物的最終濃度為10微莫耳，100微莫耳或200微莫耳。加入未含試驗(yàn)化合物之溶劑于控制組孔。
MDCK細(xì)胞，ATCC號(hào)碼.CCL-34(American Type CultureCollection，Manassas，VA)，維持于無(wú)菌條件遵循于ATCC產(chǎn)品信息指示。滿(mǎn)盤(pán)之MDCK細(xì)胞經(jīng)胰蛋白酶水解，收取，和以溫暖的(37℃)培養(yǎng)液(VITACELL最低必需培養(yǎng)基(minimum essential medium)Eagle，ATCC編目#30-2003)稀釋至密度0.1x106cells/ml。稀釋之細(xì)胞100μL加入每一孔，除了含100μL溫暖培養(yǎng)液而不含細(xì)胞之五個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)控制組孔。然后培養(yǎng)盤(pán)于37℃于95％02，5％二氧化碳之下穩(wěn)定震蕩2個(gè)小時(shí)。于培養(yǎng)之后，加入50μL哺乳類(lèi)細(xì)胞水解溶液(由PACKARDMeriden，CT)ATP-LITE-M發(fā)光ATP測(cè)定套組)至每一孔，孔用PACKARDTOPSEAL黏貼紙片蓋覆，以適當(dāng)之振動(dòng)器于大約每分鐘700轉(zhuǎn)震蕩2分鐘。
相對(duì)于未經(jīng)處理的細(xì)胞，致毒性之化合物將減少ATP產(chǎn)生。ATP-LITE-M冷光ATP測(cè)定套組一般根據(jù)制造商之說(shuō)明于處理的和未經(jīng)處理的MDCK細(xì)胞中測(cè)定ATP之產(chǎn)生。PACKARD ATP LITE-M試劑被允許平衡至室溫。一旦平衡，被凍干的基體溶液重新組成于5.5毫升基質(zhì)緩沖溶液(由套組)。凍干的ATP標(biāo)準(zhǔn)溶液以去離子化的水重組成10mM存品。五個(gè)控制組孔，10μL序列稀釋之PACKARD標(biāo)準(zhǔn)液加入于每一孔，得到序列稀釋孔之最終濃度為200nM，100nM，50nM，25nM和12.5nM。加入PACKARD基體溶液(50μL)于所有孔，然后蓋覆，然后于適當(dāng)?shù)恼駝?dòng)器以大約每分鐘700轉(zhuǎn)震蕩2分鐘。白色PACKARD黏貼紙片貼附于各盤(pán)底部，樣品藉鋁箔包覆以遮光并置于黑暗10分鐘。然后使用冷光記數(shù)器于22℃測(cè)定冷光(即，PACKARD TOPCOUNT微盤(pán)閃爍及冷光記數(shù)器或TECAN SPECTRAFLUOR PLUS)，而ATP含量由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算。經(jīng)測(cè)試化合物處理細(xì)胞的ATP含量經(jīng)與未經(jīng)處理細(xì)胞比較來(lái)判定。細(xì)胞以較佳的測(cè)試化合物10μM處理系至少顯示ATP程度于80％，較佳地至少90％，未經(jīng)處理的細(xì)胞。當(dāng)使用測(cè)試化合物的100μM濃度，細(xì)胞以較佳的測(cè)試化合物處理系至少顯示ATP程度于50％，較佳地偵測(cè)ATP程度至少80％，于未經(jīng)處理的細(xì)胞中。
實(shí)例9 背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞分析試驗(yàn) 此實(shí)例說(shuō)明用于評(píng)估化合物之VR1拮抗劑或促效劑活性之代表性背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞分析試驗(yàn)。
依標(biāo)準(zhǔn)方法(Aguayo與White(1992)Brain Research 57061-61)，自新生大鼠中切下DRG，分離及培養(yǎng)。培養(yǎng)48小時(shí)后，洗滌細(xì)胞一次，與鈣敏感性染料Fluo 4 AM(2.5至10μg/ml；TefLabs，Austin，TX)培養(yǎng)30至60分鐘。然后再洗滌細(xì)胞一次。采用螢光計(jì)測(cè)定Fluo 4螢光之變化，追蹤細(xì)胞內(nèi)鈣濃度因添加辣椒素至細(xì)胞中而隨VR1增加之變化。收集60至180秒之?dāng)?shù)據(jù)，測(cè)定最高螢光訊號(hào)。
拮抗劑分析試驗(yàn)中，添加不同濃度之化合物至細(xì)胞，然后以化合物濃度為函數(shù)畫(huà)出螢光訊號(hào)曲線(xiàn)，以判別達(dá)到抑制50％辣椒素活化反應(yīng)時(shí)所需之濃度，或IC50。辣椒素受體之拮抗劑之較佳IC50低于1微莫耳濃度、100奈莫耳濃度、10奈莫耳濃度或1奈莫耳濃度。促效劑分析試驗(yàn)中，添加不同濃度之化合物至沒(méi)有添加辣椒素之細(xì)胞中。作為辣椒素受體促效劑之化合物采用螢光計(jì)追蹤Fluo-4螢光變化時(shí)，細(xì)胞內(nèi)鈣濃度會(huì)隨VR1增加。達(dá)到辣椒素活化反應(yīng)最高訊號(hào)之50％時(shí)所需濃度為EC50，其較佳為低于1微莫耳濃度、低于100奈莫耳濃度或低于10奈莫耳濃度。
實(shí)例10 判定疼痛解除之動(dòng)物模式 此實(shí)例說(shuō)明分析化合物解除疼痛程度之代表性方法。
A.疼痛解除試驗(yàn) 下列方法系用于分析疼痛解除程度。
機(jī)械性異常疼痛 基本上依Chaplan等人之(1994)J.Neurosci.Methods 5355-63及Tal與Eliav之(1998)Pain 64(3)511-518中說(shuō)明之方法分析機(jī)械性異常疼痛(對(duì)無(wú)害刺激產(chǎn)生之異常反應(yīng))。取一系列不同剛度之凡弗瑞(von Frey)絲線(xiàn)(典型為一系列8至14種絲線(xiàn))施加在后腳足底表面上，其力量恰足使絲線(xiàn)彎曲。絲線(xiàn)保持此位置不超過(guò)3秒鐘或直到大老鼠出現(xiàn)陽(yáng)性異常疼痛反應(yīng)為止。陽(yáng)性異常疼痛反應(yīng)包括舉起處理的后腳，立即舔或搖動(dòng)腳部。采用狄克森上下分析試驗(yàn)(Dixon up-downmethod)決定各絲線(xiàn)之施加順序與頻率。使用此系列中之中等絲線(xiàn)開(kāi)始試驗(yàn)，隨后依向上或向下順序連續(xù)施用，分別依開(kāi)始時(shí)所使用絲線(xiàn)是否出現(xiàn)陰性或陽(yáng)性反應(yīng)而定。
若接受此等化合物處理之大老鼠相較于未處理對(duì)照組或基劑處理組大老鼠需要使用較高剛度之凡弗瑞(von Frey)絲線(xiàn)方可引起陽(yáng)性異常疼痛反應(yīng)時(shí)，表示該化合物可有效逆轉(zhuǎn)或預(yù)防類(lèi)似機(jī)械性異常疼痛之癥狀?；蛘?，或此外，可在投予化合物之前及之后測(cè)試動(dòng)物之慢性疼痛。此等分析試驗(yàn)中，相較于處理前誘發(fā)反應(yīng)時(shí)所需絲線(xiàn)或未經(jīng)處理或經(jīng)基劑處理且亦具慢性疼痛之動(dòng)物所需絲線(xiàn)，有效化合物可使處理后誘發(fā)反應(yīng)所需絲線(xiàn)剛度提高。試驗(yàn)化合物系于疼痛發(fā)作之前或之后投藥。當(dāng)試驗(yàn)化合物在疼痛發(fā)作之后投藥時(shí)，試驗(yàn)于投藥后10分鐘至3小時(shí)進(jìn)行。
機(jī)械性痛覺(jué)過(guò)敏 基本上依Koch等人之(1996)Analgesia 2(3)157-164說(shuō)明之方法測(cè)定機(jī)械性痛覺(jué)過(guò)敏(對(duì)疼痛刺激之反應(yīng)過(guò)度)。取大老鼠置于有溫?zé)岫嗫捉饘俚匕逯畟€(gè)別籠內(nèi)。在任一只后腳足底表面上溫和針刺后，測(cè)定后腳抽回之時(shí)間期(亦即動(dòng)物將其后腳放回地板上之前保持之時(shí)間)。
若化合物使后腳抽回之時(shí)間期縮短達(dá)統(tǒng)計(jì)顯著性時(shí)，則該化合物可降低機(jī)械性痛覺(jué)過(guò)敏。試驗(yàn)化合物系于疼痛發(fā)作之前或之后投藥。當(dāng)試驗(yàn)化合物在疼痛發(fā)作之后投藥時(shí)，在投藥后10分鐘至3小時(shí)進(jìn)行試驗(yàn)。
熱痛覺(jué)過(guò)敏 基本上依Hargreaves等人說(shuō)明于(1988)Pain.32(1)77-88中方法測(cè)定熱痛覺(jué)過(guò)敏(對(duì)有害熱刺激之反應(yīng)過(guò)度)。簡(jiǎn)言之，在動(dòng)物任一只后腳之足底表面施加恒定之輻射熱源。抽回后腳之時(shí)間(亦即動(dòng)物移動(dòng)后腳之前之加熱時(shí)間期)，或稱(chēng)為熱閾值或潛伏期，即可決定動(dòng)物后腳對(duì)熱之敏感性。
若化合物使后腳抽回之時(shí)間期加長(zhǎng)達(dá)統(tǒng)計(jì)顯著性時(shí)(亦即出現(xiàn)反應(yīng)之熱閾值或潛伏期加長(zhǎng))，則該化合物可降低熱痛覺(jué)過(guò)敏。試驗(yàn)化合物系于疼痛發(fā)作之前或之后投藥。當(dāng)試驗(yàn)化合物在疼痛發(fā)作之后投藥時(shí)，在投藥后進(jìn)行試驗(yàn)10分鐘至3小時(shí)。
B.疼痛模式 可采用下列任一種方法誘發(fā)疼痛，以測(cè)定化合物之止痛效力。一般而言，采用雄性SD大鼠及下列至少一種模式時(shí)，本文所提供化合物可在上述至少一種試驗(yàn)法中使疼痛在統(tǒng)計(jì)上顯著降低。
急性發(fā)炎疼痛模式 急性發(fā)炎疼痛系基本上依Field等人說(shuō)明于(1997)Br.J.Pharmacol.121(8)1513-1522中之角叉菜膠模式中誘發(fā)急性疼痛。取100至200μl之1至2％角叉菜膠溶液注射大老鼠后腳中。注射后3至4小時(shí)，依上述方法測(cè)定動(dòng)物對(duì)熱及與機(jī)械性刺激之敏感性。在試驗(yàn)前或注射角叉菜膠之前，對(duì)動(dòng)物投與試驗(yàn)化合物(0.01至50mg/kg)?；衔锟山?jīng)口或任何非經(jīng)腸式、或局部投藥至腳部。在此模式中解除疼痛之化合物可使機(jī)械性異常疼痛與/或熱痛覺(jué)過(guò)敏在統(tǒng)計(jì)上顯著降低。
慢性發(fā)炎疼痛模式 采用下列一種方法誘發(fā)慢性發(fā)炎疼痛 1.基本上依Bertorelli等人說(shuō)明于(1999)Br.J.Pharmacol.128(6)1252-1258之方法及Stein等人說(shuō)明于(1998)Pharmacol.Biochem.Behav.31(2)455-51之方法，取200μl完全弗洛伊德氏輔劑(Complete Freund’s Adjuvant)(0.1毫克之熱殺死與干燥之結(jié)核菌(M.Tuberculosis))注射至大老鼠后腳中100μl注入足背，100μl注入足底表面。
2.基本上依Abbadie等人說(shuō)明于(1994).J Neurosci.14(10)5865-5871之方法，在大老鼠之脛骨跗骨關(guān)節(jié)上注射150μlCFA(1.5mg)。
其任一方法中，在注射CFA之前，先取得各試驗(yàn)動(dòng)物后腳對(duì)機(jī)械及熱刺激之個(gè)別敏感度底線(xiàn)。
注射CFA后，依上述測(cè)試大老鼠之熱痛覺(jué)過(guò)敏、機(jī)械性異常疼痛與機(jī)械性痛覺(jué)過(guò)敏。為了確使其發(fā)展出癥狀，在注射CFA后第5、6與7天時(shí)才開(kāi)始進(jìn)行大老鼠試驗(yàn)。第7天時(shí)，以試驗(yàn)化合物、嗎啡或基劑處理動(dòng)物。以口服劑量為1至5mg/kg之嗎啡作為合適之陽(yáng)性對(duì)照組。典型采用之試驗(yàn)化合物劑量為0.01至50mg/kg?；衔锟稍谠囼?yàn)前呈單一大丸劑投藥或在試驗(yàn)前，每天投藥1、2或3次，進(jìn)行數(shù)天。藥物可經(jīng)口或任何非經(jīng)腸式途徑、或局部投藥給動(dòng)物。
其結(jié)果以最高可能效力百分比(MPE)表示。0％MPE之定義為基劑之止痛效力，100％MPE之定義為動(dòng)物恢復(fù)注射CFA前之底線(xiàn)敏感度。在此模式中解除疼痛之化合物所得到之MPE為至少30％。
慢性神經(jīng)病理性疼痛模式 慢性神經(jīng)病理性疼痛系基本上依Bennett與Xie說(shuō)明于(1988)Pain 3387-107中之方法，采用慢性收縮傷害(CCI)處理大老鼠坐骨神經(jīng)而誘發(fā)。麻醉大鼠(例如經(jīng)腹膜內(nèi)使用劑量50至65mg/kg之戊巴比妥及依需要再增加劑量)。將后腳側(cè)面刮干凈及消毒。采用無(wú)菌技術(shù)，切開(kāi)后腳側(cè)面中股。將股二頭肌切成鈍端，曝露出坐骨神經(jīng)。在每只動(dòng)物之其中一只后腳上，依約1至2毫米之間隔，將四條結(jié)扎線(xiàn)松弛結(jié)扎坐骨神經(jīng)。另一只腳之坐骨神經(jīng)則沒(méi)有結(jié)扎且不處理。隨后蓋上肌肉，使用傷口夾或縫合線(xiàn)縫合皮膚。依上述分析大老鼠之機(jī)械性異常疼痛、機(jī)械性痛覺(jué)過(guò)敏與熱痛覺(jué)過(guò)敏。
當(dāng)化合物在此模式中，在即將試驗(yàn)前呈單一大丸劑投藥或在試驗(yàn)前，每天投藥1、2或3次，進(jìn)行數(shù)天(0.01至50mg/kg，經(jīng)口、非經(jīng)腸式或局部投藥)時(shí)，該化合物可在統(tǒng)計(jì)上顯著降低機(jī)械性異常疼痛、機(jī)械性痛覺(jué)過(guò)敏與/或熱痛覺(jué)過(guò)敏。
權(quán)利要求
1.一種如下式的化合物或其醫(yī)藥上可接受的鹽
，其中
(1)A為N且B為CR8或(2)A為CR5且B為N；
Y和Z各獨(dú)立地為N或CR1；
每個(gè)R1獨(dú)立地為氫、鹵素、氰基、氨基、C1-C4烷基、C1-C4鹵烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵烷氧基或單-或二-(C1-C4烷基)氨基；
R2為(i)氫或鹵素；或
(ii)C1-C6烷基、(C3-C7環(huán)烷基)C0-C4烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6氨基烷基、C1-C6羥基烷基、C2-C6烷基醚、單-或二-(C1-C6烷基)氨基C0-C4烷基或(4至7員雜環(huán)烷基)C0-C4烷基；以上基團(tuán)各經(jīng)0至4個(gè)取代基取代，其取代基獨(dú)立地選自鹵素、氰基、羥基、氨基、酮基、單-或二-(C1-C6烷基)氨基、C1-C6烷基C1-C6烷氧基或C1-C6鹵烷基。
R3為氫、COOH、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧基羰基或連同R2一起形成任選經(jīng)取代的稠合環(huán)；
R4為氫、鹵素、氰基、氨基、COOH、C1-C4烷基、C1-C4鹵烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵烷氧基或單-或二-(C1-C4烷基)氨基；
每個(gè)R5獨(dú)立地為氫、鹵素、氰基、氨基、COOH、C1-C4烷基、C1-C4鹵烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4鹵烷氧基或單-或二-(C1-C4烷基)氨基；
R8為
(i)氫、羥基、鹵素、氰基、氨基、氨基羰基或COOH；或
(ii)式LRa的基團(tuán)；
Ar為6至10員芳基或5至10員雜芳基，其各經(jīng)獨(dú)立選自下列者的0至6個(gè)取代基所取代
(i)酮基；
(ii)式LRa的基團(tuán)；或
(iii)一起形成經(jīng)0至3個(gè)取代基所取代的5至7員稠合雜環(huán)的基團(tuán)，其取代基獨(dú)立地選自羥基、鹵素、氨基、氨基羰基、氰基、硝基、酮基、COOH、C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷硫基、C1-C8烷醯基、C1-C8烷醯基氧基、C1-C8烷氧基羰基、C1-C8烷基醚、C1-C8羥基烷基、C1-C8鹵烷基、苯基C0-C8烷基、單或二(C1-C6烷基)氨基C0-C4烷基、C1-C8烷基磺醯基或(4至7員雜環(huán))C0-C8烷基；
L在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地選自單一共價(jià)鍵、O、(C＝O)、O(C＝O)、C(＝O)O、OC(＝O)O、S(O)m、N(Rx)、(C＝O)N(Rx)、N(Rx)(C＝O)、N(Rx)S(O)m、S(O)mN(Rx)或N[S(O)mRw]S(O)m；其中m在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地選自0、1或2；Rx在每次出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地選自氫、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C1-C6烷醯基或C1-C6烷基磺醯基；而Rw為氫或C1-C6烷基；
Ra在每次出現(xiàn)時(shí)，各獨(dú)立選自
(i)氫、鹵素、氰基、硝基；或
(ii)C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、(C3-C7環(huán)烷基)C0-C4烷基、C1-C8鹵烷基、C2-C8烷基醚、單-或二-(C1-C8烷基)氨基或(3至10員雜環(huán))C0-C6烷基；以上基團(tuán)各經(jīng)獨(dú)立選自下列者的0至6個(gè)取代基所取代
(a)羥基、鹵素、氨基、氨基羰基、氰基、硝基、酮基、COOH；以及
(b)C1-C8烷基、C2-C8烯基、(C3-C7環(huán)烷基)C0-C4烷基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷硫基、C1-C8烷醯基、C1-C8烷醯基氧基、C1-C8烷氧基羰基、C1-C8烷基醚、C1-C8羥基烷基、C1-C8鹵烷基、苯基C0-C8烷基、單-或二-(C1-C6烷基)氨基羰基、單-或二-(C1-C6烷基)氨基C0-C4烷基、C1-C8烷基磺醯基或(4至7員雜環(huán))C0-C8烷基，以上基團(tuán)各經(jīng)獨(dú)立選自羥基、氨基、C1-C4烷基或C1-C4烷氧基的0至4個(gè)取代基所取代。
2.如權(quán)利要求1所述的化合物或鹽，其中Z是N。
3.如權(quán)利要求1或2所述的化合物或鹽，其中Y是N。
4.如權(quán)利要求1或2所述的化合物或鹽，其中Y是CH。
5.如權(quán)利要求1所述的化合物或鹽，其中Y和Z是CH。
6.如權(quán)利要求1至5中任一權(quán)利要求所述的化合物或鹽，其中Ar為苯基或6員雜芳基，其各經(jīng)0至3個(gè)取代基所取代，其取代基獨(dú)立地選自(a)式LRa的基團(tuán)或(b)一起形成任選經(jīng)取代的5至7員稠合的碳環(huán)或雜環(huán)。
7.如權(quán)利要求6所述的化合物或鹽，其中Ar為苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基或噠嗪基，其各經(jīng)獨(dú)立選自下列者的0、1或2個(gè)取代基取代鹵素、氰基、C1-C6烷基、C1-C6鹵烷基、C1-C6羥基烷基、C1-C6氰基烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6鹵烷氧基、C1-C6烷基醚、C1-C6烷醯基、C1-C6烷基磺醯基、C1-C6鹵烷基磺醯基、氨基、單-或二-(C1-C6烷基)氨基或5-或6-員雜環(huán)烷基。
8.如權(quán)利要求7所述的化合物或鹽，其中Ar為苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基或噠嗪基，其各經(jīng)獨(dú)立選自下列者的0、1或2個(gè)取代基所取代鹵素、氰基、氨基、C1-C4烷基、C1-C4羥基烷基、C1-C4氰基烷基、C1-C6烷氧基、C1-C4烷醯基、C1-C4鹵烷基、C1-C4烷基磺醯基、C1-C4鹵烷基磺醯基、單-或二-(C1-C4烷基)氨基或5-或6-員雜環(huán)烷基。
9.如權(quán)利要求1至8中任一權(quán)利要求所述的化合物或鹽，其中R4是鹵素、氰基、C1-C6烷基、C1-C6鹵烷基、C1-C6烷氧基或C1-C6鹵烷氧基。
10.如權(quán)利要求9所述的化合物或鹽，其中R4是鹵素、氰基、甲基或三氟甲基。
11.如權(quán)利要求1至10中任一權(quán)利要求所述的化合物或鹽，其中
B是CR8；而
R8是
(i)氫、羥基、氰基、氨基羰基或COOH；或
(ii)C1-C8烷氧基、C1-C8鹵烷基、C1-C8烷醯基、單-或二-(C1-C8烷基)氨基、4至7員雜環(huán)烷基或(4至7員雜環(huán)烷基)氨基，以上基團(tuán)各經(jīng)獨(dú)立選自下列者的0至2個(gè)取代基所取代
(a)羥基、鹵素、氰基、氨基、氨基羰基，或COOH；或
(b)C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C1-C6鹵烷基、(C3-C7環(huán)烷基)C0-C4烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷氧基羰基、C2-C6烷基醚、單-或二-(C1-C6烷基)氨基C0-C4烷基、單-或二-(C1-C6烷基)氨基羰基，或(4至7員雜環(huán))C0-C4烷基，以上基團(tuán)各經(jīng)獨(dú)立選自羥基、氨基、C1-C4烷基或C1-C4烷氧基的0至2個(gè)取代基所取代。
12.如權(quán)利要求11所述的化合物或鹽，其中R8為單-或二-(C1-C8烷基)氨基、哌嗪基、哌啶基或吡咯烷基，以上基團(tuán)為未經(jīng)取代或經(jīng)獨(dú)立選自下列者的一個(gè)取代基所取代羥基、C1-C4烷基、C2-C4烯基、C1-C4鹵烷基、C1-C6烷氧基、(單-或二-(C1-C6烷基)氨基)C0-C2烷基或(4-至7-員雜環(huán)烷基)C0-C2烷基，其各復(fù)任選地經(jīng)羥基、C1-C4烷基或C1-C4烷氧基所取代。
13.如權(quán)利要求1至12中任一權(quán)利要求所述的化合物或鹽，其具有下式
14.如權(quán)利要求13所述的化合物或鹽，其具有下式
15.如權(quán)利要求14所述的化合物或鹽，其中
Y和Z獨(dú)立地為N或CH；
R2是氫、鹵素、C1-C4烷基或C2-C4烷基醚；
R3是氫；
R4是鹵素、氰基、C1-C6烷基、C1-C6鹵烷基、C1-C6烷氧基或C1-C6鹵烷氧基；
R8是氫、單-或二-(C1-C8烷基)氨基、哌嗪基、哌啶基或吡咯烷基，以上基團(tuán)為未經(jīng)取代或經(jīng)獨(dú)立選自下列者的一個(gè)取代基所取代羥基、C1-C4烷基、C2-C4烯基、C1-C4鹵烷基、C1-C6烷氧基、(單-或二-(C1-C6烷基)氨基)C0-C2烷基或(4-至7-員雜環(huán)烷基)C0-C2烷基，其各復(fù)任選地經(jīng)羥基、C1-C4烷基或C1-C4烷氧基所取代；以及
Ar是苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基或噠嗪基，以上基團(tuán)各經(jīng)獨(dú)立選自下列者的0、1或2個(gè)取代基取代鹵素、氰基、氨基、C1-C4烷基、C1-C4羥基烷基、C1-C4氰基烷基、C1-C6烷氧基、C1-C4烷醯基、C1-C4鹵烷基、C1-C4烷基磺醯基、C1-C4鹵烷基磺醯基、單-或二-(C1-C4烷基)氨基或5-或6-員雜環(huán)烷基。
16.如權(quán)利要求15所述的化合物或鹽，其中該化合物具有下式
其中
R4是氰基、C1-C4烷基或C1-C4鹵烷基；
R8是單-或二-(C1-C8烷基)氨基、哌嗪基、哌啶基或吡咯烷基，以上基團(tuán)為未經(jīng)取代或經(jīng)獨(dú)立選自下列者的一個(gè)取代基所取代羥基、C1-C4烷基、C2-C4烯基、C1-C4鹵烷基、C1-C6烷氧基、(單-或二-(C1-C6烷基)氨基)C0-C22烷基或(4-至7-員雜環(huán)烷基)C0-C2烷基，其各復(fù)任選地經(jīng)羥基、C1-C4烷基或C1-C4烷氧基所取代；以及
Ar是經(jīng)1或2個(gè)取代基所取代的吡啶基，其取代基獨(dú)立地選自鹵素、氰基、C1-C4烷基、C1-C4鹵烷基、C1-C4烷基磺醯基、C1-C4鹵烷基磺醯基、單-或二-(C1-C4烷基)氨基。
17.如權(quán)利要求1至12中任一權(quán)利要求所述的化合物或鹽，其中該化合物具有下式
18.如權(quán)利要求17所述的化合物或鹽，其中
Y和Z獨(dú)立地為N或CH；
R2是氫、鹵素、C1-C4烷基或C2-C4烷基醚；
R3是氫；
R4是鹵素、氰基、C1-C6烷基、C1-C6鹵烷基、C1-C6烷氧基或C1-C6鹵烷氧基；
每個(gè)R5獨(dú)立地為氫、鹵素、氰基、COOH、C1-C6烷基、C1-C6鹵烷基、C1-C6烷氧基，或C1-C6鹵烷氧基；以及
Ar是苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基或噠嗪基，以上基團(tuán)各經(jīng)獨(dú)立選自下列者的0、1或2個(gè)取代基所取代鹵素、氰基、氨基、C1-C4烷基、C1-C4羥基烷基、C1-C4氰基烷基、C1-C6烷氧基、C1-C4烷醯基、C1-C4鹵烷基、C1-C4烷基磺醯基、C1-C4鹵烷基磺醯基、單-或二-(C1-C4烷基)氨基或5-或6-員雜環(huán)烷基。
19.如權(quán)利要求1至18中任一權(quán)利要求所述的化合物或鹽，其中該化合物是VR1拮抗劑且在辣椒素受體鈣移動(dòng)分析試驗(yàn)中的IC50值為1微莫耳或以下。
20.如權(quán)利要求19所述的化合物或鹽，其中該化合物在辣椒素受體催動(dòng)作用的體外分析試驗(yàn)中，在化合物的濃度等于IC50值時(shí)，未顯示有可偵測(cè)的促效劑活性。
21.一種醫(yī)藥組成物，其包括如權(quán)利要求1至20所述的至少一種化合物與生理上可接受的載劑或賦形劑的組合。
22.如權(quán)利要求21所述的醫(yī)藥組成物，其中該組成物經(jīng)調(diào)配為注射用液體、氣霧、乳霜、凝膠、丸劑、膠囊、糖漿或經(jīng)皮貼片。
23.一種減少細(xì)胞辣椒素受體的鈣傳導(dǎo)的方法，該方法包含使表達(dá)辣椒素受體的細(xì)胞與如權(quán)利要求1至20中任一權(quán)利要求所述的化合物接觸，藉以降低辣椒素受體的鈣傳導(dǎo)。
24.如權(quán)利要求23所述的方法，其中該細(xì)胞是在動(dòng)物體內(nèi)進(jìn)行活體內(nèi)接觸。
25.如權(quán)利要求24所述的方法，其中該細(xì)胞為神經(jīng)元細(xì)胞。
26.如權(quán)利要求25所述的方法，其中該細(xì)胞為尿道上皮細(xì)胞。
27.如權(quán)利要求24所述的方法，其中接觸進(jìn)行時(shí)該化合物是存在于動(dòng)物的體液之內(nèi)。
28.如權(quán)利要求24所述的方法，其中該動(dòng)物為人類(lèi)。
29.如權(quán)利要求24所述的方法，其中該化合物或鹽是經(jīng)口投藥。
30.一種在體外抑制香草醇配體與辣椒素受體結(jié)合的方法，該方法包括將辣椒素受體與如權(quán)利要求1至20中任一權(quán)利要求所述的化合物或鹽接觸，所用的量是足以可偵測(cè)地抑制香草醇配體與辣椒素受體結(jié)合。
31.一種在患者體內(nèi)抑制香草醇配體與辣椒素受體結(jié)合的方法，該方法包括將表達(dá)辣椒素受體的細(xì)胞與如權(quán)利要求1至20中任一權(quán)利要求所述的化合物或鹽接觸，所用的量是足以在體外可偵測(cè)地抑制香草醇配體與表達(dá)經(jīng)克隆的辣椒素受體結(jié)合，且因而在患者體內(nèi)抑制香草醇配體與辣椒素受體的結(jié)合。
32.如權(quán)利要求31所述的方法，其中該患者為人類(lèi)。
33.如權(quán)利要求31所述的方法，其中在患者的血液中存在的化合物的濃度是1微摩爾或以下。
34.一種在患者體內(nèi)處置對(duì)辣椒素受體調(diào)節(jié)作用有反應(yīng)的癥狀的方法，該方法包括以治療有效量對(duì)患者投藥如權(quán)利要求1至20中任一權(quán)利要求所述的化合物或鹽，且因而緩解患者的該等癥狀。
35.如權(quán)利要求34所述的方法，其中的患者罹患(i)暴露至辣椒素、(ii)暴露至熱所引起之灼傷或刺激、(iii)暴露至光所引起之灼傷或刺激、(iv)暴露于催淚氣體、傳染性劑、空氣污染物或胡椒噴霧所引起的灼傷、支氣管收縮或刺激，或(v)暴露至酸所引起的灼傷或刺激。
36.如權(quán)利要求34所述的方法，其中該癥狀為氣喘或慢性阻塞性肺病。
37.一種處置患者疼痛的方法，其包括以治療有效量對(duì)患者投藥如權(quán)利要求1至20中任一權(quán)利要求所述的化合物或鹽，且因而緩解患者的疼痛。
38.如權(quán)利要求37所述的方法，其中在患者的血液中存在的化合物或鹽的濃度是1微莫爾或以下。
39.如權(quán)利要求37所述的方法，其中該患者為罹患神經(jīng)病理性疼痛。
40.如權(quán)利要求37所述的方法，其中該疼痛是與選自下列者的癥狀有關(guān)乳房切除手術(shù)后的疼痛癥候群、殘肢疼痛、幻想肢疼痛、口腔神經(jīng)病理性疼痛、牙痛、皰疹后神經(jīng)痛、糖尿病性神經(jīng)病變、反射交感神經(jīng)失養(yǎng)癥、三叉神經(jīng)痛、骨關(guān)節(jié)炎、類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、纖維肌痛、吉蘭-拜瑞癥候群、感覺(jué)異常性股痛、口腔燒灼癥候群、兩側(cè)周邊神經(jīng)病變、灼痛、神經(jīng)炎、神經(jīng)元炎、神經(jīng)痛、AIDS相關(guān)的神經(jīng)病變、MS相關(guān)的神經(jīng)病變、脊髓損傷相關(guān)的疼痛、手術(shù)相關(guān)的疼痛、肌肉骨骼疼痛、背痛、頭痛、偏頭痛、絞痛、分娩、痔瘡、消化不良、沙爾科氏疼痛、腸脹氣、月經(jīng)、癌癥、暴露至毒液、腸激躁癥、發(fā)炎性腸部疾病或創(chuàng)傷。
41.如權(quán)利要求37所述的方法，其中的患者為人類(lèi)。
42.一種處置患者搔癢的方法，其包括以治療有效量對(duì)患者投藥如權(quán)利要求1至20中任一權(quán)利要求所述的化合物或鹽，且因而緩解患者的搔癢。
43.一種處置患者咳嗽或呃逆的方法，其包括以治療有效量對(duì)患者投藥如權(quán)利要求1至20中任一權(quán)利要求所述的化合物或鹽，且因而緩解患者的咳嗽或呃逆。
44.一種處置患者尿失禁或膀胱過(guò)動(dòng)癥的方法，其包括以治療有效量對(duì)患者投藥如權(quán)利要求1至20中任一權(quán)利要求所述的化合物或鹽，且因而緩解患者的尿失禁或膀胱過(guò)動(dòng)癥。
45.一種促進(jìn)肥胖患者體重減輕的方法，其包括以治療有效量對(duì)患者投藥如權(quán)利要求1至20中任一權(quán)利要求所述的化合物或鹽，且因而促進(jìn)患者體重減輕。
46.如權(quán)利要求1至20中任一權(quán)利要求所述的化合物或鹽，其中該化合物經(jīng)放射標(biāo)記。
47.一種鑒定與辣椒素受體結(jié)合的藥劑的方法，其包括
(a)使辣椒素受體與如權(quán)利要求46所述的經(jīng)放射標(biāo)記的化合物在容許VR1調(diào)節(jié)劑與辣椒素受體結(jié)合的條件下接觸，因而產(chǎn)生經(jīng)結(jié)合的且經(jīng)標(biāo)記的VR1調(diào)節(jié)劑；
(b)在沒(méi)有試驗(yàn)藥劑的情況偵測(cè)信號(hào)，該信號(hào)是與經(jīng)結(jié)合且經(jīng)標(biāo)記的VR1調(diào)節(jié)劑的量相應(yīng)；
(c)將經(jīng)結(jié)合且經(jīng)標(biāo)記的VR1調(diào)節(jié)劑與試驗(yàn)藥劑接觸；
(d)在有試驗(yàn)藥劑存在的情況偵測(cè)信號(hào)，該信號(hào)是與經(jīng)結(jié)合且經(jīng)標(biāo)記的VR1調(diào)節(jié)劑的量相應(yīng)；以及
(e)偵測(cè)在步驟(d)中與在步驟(b)中所測(cè)得的信號(hào)相較信號(hào)的降低，且因而判定與辣椒素受體結(jié)合的藥劑。
48.一種測(cè)定在樣本中是否有辣椒素受體存在的方法，該方法包括下列步驟
(a)將樣本在與如權(quán)利要求1至20中任一權(quán)利要求所述的化合物在容許化合物與辣椒素受體結(jié)合的條件下接觸；以及
(b)偵測(cè)與辣椒素受體結(jié)合的化合物的濃度，且因此測(cè)定在樣本中是否有辣椒素受體存在。
49.如權(quán)利要求48所述的方法，其中該化合物經(jīng)放射標(biāo)記，且其中偵測(cè)的步驟包括下列步驟
(i)將未結(jié)合之化合物與經(jīng)結(jié)合的化合物分離；以及
(ii)偵測(cè)在樣本中是否有經(jīng)結(jié)合的化合物存在。
50.一種包裝的醫(yī)藥制劑，其包括
(a)在容器中包含如權(quán)利要求21所述的醫(yī)藥組合物；以及
(b)使用該組合物以處置疼痛的說(shuō)明書(shū)。
51.一種包裝的醫(yī)藥制劑，其包括
(a)在容器中包含如權(quán)利要求21所述的醫(yī)藥組合物；以及
(b)使用該組合物以處置咳嗽或呃逆的說(shuō)明書(shū)。
52.一種包裝的醫(yī)藥制劑，其包括
(a)在容器中包含如權(quán)利要求21所述的醫(yī)藥組合物；以及
(b)使用該組合物以處置肥胖的說(shuō)明書(shū)。
53.一種包裝之醫(yī)藥制劑，其包括
(a)在容器中包含如權(quán)利要求21所述的醫(yī)藥組合物；以及
(b)使用該組合物以處置尿失禁或膀胱過(guò)動(dòng)癥的說(shuō)明書(shū)。
54.如權(quán)利要求1至20中任一權(quán)利要求所述的化合物或鹽的用途，其用以制造供處置對(duì)辣椒素受體調(diào)節(jié)作用有反應(yīng)的癥狀所用的醫(yī)藥。
55.如權(quán)利要求54所述的用途，其中，該癥狀為疼痛、氣喘、慢性阻塞性肺病、咳嗽、呃逆、肥胖、尿失禁、膀胱過(guò)動(dòng)癥、暴露至辣椒素、因暴露至熱造成之灼傷或刺激、因暴露至光造成之灼傷或刺激、因暴露于催淚氣體、空氣污染物或胡椒噴霧造成之灼傷、支氣管收縮或刺激，或因暴露至酸造成之灼傷或刺激。
全文摘要
本發(fā)明提供經(jīng)取代的噠嗪基和嘧啶基喹唑啉類(lèi)似物。此等化合物為可用于活體外或活體內(nèi)調(diào)節(jié)專(zhuān)一性受體活性的配位體，且特別適用于治療人類(lèi)、寵物與家畜的和病理性受體活化作用相關(guān)的病癥。并提供治療此等疾病的醫(yī)藥組合物以及方法，及使用此等配位體進(jìn)行受體定位研究的方法。
文檔編號(hào)A61K31/4985GK101232885SQ200680003181
公開(kāi)日2008年7月30日 申請(qǐng)日期2006年1月25日 優(yōu)先權(quán)日2005年1月25日
發(fā)明者T·M·考德威爾, B·L·謝納爾, K·J·霍杰茨 申請(qǐng)人:神經(jīng)能質(zhì)公司