專利名稱：組合s1p受體激動劑/調節(jié)劑和免疫抑制藥的抗淋巴細胞抗體誘導的制作方法
專利說明組合S1P受體激動劑/調節(jié)劑和免疫抑制藥的抗淋巴細胞抗體誘導 本發(fā)明涉及特別在治療移植患者的過程中將免疫抑制藥、S1P受體調節(jié)劑和抗淋巴細胞抗體組合的免疫抑制療法。
目前的維持免疫抑制療法、例如腎移植后的維持免疫抑制療法將鈣依賴磷酸酶抑制劑(環(huán)胞菌素或他克莫司)與一種或多種免疫抑制藥、包括皮質類固醇、硫唑嘌呤(AZA)、霉酚酸嗎乙酯、霉酚酸鈉或大環(huán)內酯免疫抑制劑(依維莫司、西羅莫司)組合。已經作出努力來發(fā)展這些組合以盡可能地預防急性排斥發(fā)作和將不良作用降到最低或避免不良作用。這些努力已經產生了顯著的進展，但是特別在排斥率和副作用方面仍然需要進行改善。
現在已經出人意料地發(fā)現S1P受體激動劑與一種或多種免疫抑制藥、包括抗淋巴細胞抗體療法的組合可提供另外的意想不到的益處。特別地，當將其它藥物的劑量保持在最低水平時，可降低排斥發(fā)作、例如腎臟或心臟移植后的排斥發(fā)作，由此可改善耐受性。
因此，本發(fā)明提供了在接受者中抑制同種異體移植物排斥的方法，所述方法包括給所述接受者同時或依次施用治療有效量的S1P受體調節(jié)劑以及一種或多種免疫抑制藥和抗淋巴細胞抗體。
優(yōu)選根據本發(fā)明的該方法可以用于治療腎移植。
S1P受體調節(jié)劑或激動劑是靶向于一種或多種1-磷酸鞘氨醇受體、例如S1P1至S1P5的化合物。術語調節(jié)意欲包括S1P受體的激動作用或功能拮抗作用。與S1P受體結合的調節(jié)劑或激動劑例如可以使受體活化、內在化或脫敏。這可能與通過G蛋白進行的S1P受體信號傳導的調節(jié)、不同G蛋白的結合或解離、G蛋白與S1P受體的相互作用的變化、通過RGS(G蛋白信號傳導的調節(jié)劑)蛋白進行的G蛋白調節(jié)的改變、被調節(jié)劑占據的受體的磷酸化的增加和/或下游信號傳導途徑/激酶的活化有關。
可以在下列試驗中測定S1P受體激動劑或調節(jié)劑與各種人S1P受體的結合親和力 對人S1P受體S1P1、S1P2、S1P3、S1P4和S1P5測試化合物的S1P受體激動劑或調節(jié)劑活性。通過對化合物誘導的GTP[γ-35S]與膜蛋白的結合進行定量評價功能性受體活化，所述膜蛋白由穩(wěn)定表達適當人S1P受體的轉染CHO或RH7777細胞制備。所用的測定技術為SPA(基于閃爍鄰近的測定法)。簡言之，連續(xù)稀釋DMSO溶解的化合物，在50mM Hepes、100mMNaCl、10mM MgCl2、10μM GDP、0.1％不含脂肪的BSA和0.2nM GTP[γ-35S](1200Ci/mmol)存在下加入到SPA-珠(Amersham-Pharmacia)固定的表達膜蛋白的S1P受體中(10-20μg/孔)。于RT在96孔微量滴定板中孵育120分鐘后，通過離心步驟分離未結合的GTP[γ-35S]。用TOPcount平板讀數儀(Packard)對膜結合GTP[γ-35S]引起的SPA珠發(fā)光進行定量。使用標準曲線擬合軟件計算EC50。在本測定法中，優(yōu)選S1P受體調節(jié)劑或激動劑的與S1P受體的結合親和力＜50nM。
優(yōu)選的S1P受體激動劑或調節(jié)劑例如為除其S1P結合特性外還具有加速淋巴細胞歸巢特性的化合物，例如引起由淋巴細胞由循環(huán)至次級淋巴組織的再分布、優(yōu)選可逆的再分布導致的淋巴細胞減少的化合物，不引起全身免疫抑制。分離原初細胞；刺激來自血液的CD4和CD8 T-細胞和B-細胞以遷移入淋巴結(LN)和派爾結(PP)。
可以在下述血液淋巴細胞消減(Blood Lymphocyte Depletion)試驗中測定淋巴細胞歸巢特性 通過對大鼠管飼口服施用S1P受體激動劑或調節(jié)劑或載體。在-1天獲得用于血液監(jiān)測的尾血以得到基線個體值，并在施用后2、6、24、48和72小時獲得用于血液監(jiān)測的尾血。在本試驗中，當以例如＜20mg/kg的劑量施用時，S1P受體激動劑或調節(jié)劑使外周血液淋巴細胞消減例如50％。
適宜的S1P受體調節(jié)劑或激動劑的實例例如有 -如EP627406A1中公開的化合物，例如式I化合物，
其中 R1為直鏈或支鏈(C12-22)鏈， -其可以在鏈上具有選自雙鍵、三鍵、O、S的鍵或雜原子、NR6，其中R6為H、C1-4烷基、芳基-C1-4烷基、?；?C1-4烷氧基)羰基和羰基；和/或 -其可以具有作為取代基的C1-4烷氧基、C2-4鏈烯氧基、C2-4炔氧基、芳基C1-4烷氧基、?；?、C1-4烷氨基、C1-4烷硫基、酰氨基、(C1-4烷氧基)羰基、(C1-4烷氧基)-羰基氨基、酰氧基、(C1-4烷基)氨甲?；?、硝基、鹵素、氨基、羥基亞氨基、羥基或羧基；或者 R1為 -苯基烷基，其中烷基為直鏈或支鏈(C6-20)碳鏈；或 -苯基烷基，其中烷基為直鏈或支鏈(C1-30)碳鏈，其中所述的苯基烷基被如下基團取代 -任選被鹵素取代的直鏈或支鏈(C6-20)碳鏈； -任選被鹵素取代的直鏈或支鏈(C6-20)烷氧基鏈； -直鏈或支鏈(C6-20)鏈烯氧基； -苯基-C1-14烷氧基、鹵代苯基-C1-4烷氧基、苯基-C1-14烷氧基-C1-14烷基、苯氧基-C1-4烷氧基或苯氧基-C1-4烷基； -被C6-20烷基取代的環(huán)烷基烷基； -被C6-20烷基取代的雜芳基烷基； -雜環(huán)C6-20烷基；或 -被C2-20烷基取代的雜環(huán)烷基； 并且，其中 烷基部分可以 -在碳鏈上具有選自雙鍵、三鍵、O、S的鍵或雜原子、亞磺?；⒒酋；騈R6，其中R6如上定義；和 -具有作為取代基的C1-4烷氧基、C2-4鏈烯氧基、C2-4炔氧基、芳基C1-4烷氧基、酰基、C1-4烷基-氨基、C1-4烷硫基、酰氨基、(C1-4烷氧基)羰基、(C1-4烷氧基)羰基氨基、酰氧基、(C1-4烷基)氨甲酰基、硝基、鹵素、氨基、羥基或羧基；且 R2、R3、R4和R5各自獨立地為H、C1-4烷基或?；?； 或其可藥用鹽或水合物； -如EP1002792A1中公開的化合物，例如式II化合物，
其中m為1-9且R’2、R’3、R’4和R’5各自獨立地為H、C1-6烷基或?；? 或其可藥用鹽或水合物； -如EP0778263A1中公開的化合物，例如式III化合物，
其中 W為H；C1-6烷基、C2-6鏈烯基或C2-6炔基；未取代或被OH取代的苯基；R”4O(CH2)n；或被1-3個取代基取代的C1-6烷基，所述的取代基選自鹵素、C3-8環(huán)烷基、苯基和被OH取代的苯基； X為H，未取代或被取代的具有p個碳原子的直鏈烷基，或者未取代或被取代的具有(p-1)個碳原子的直鏈烷氧基，例如被1-3個取代基取代，所述的取代基選自C1-6烷基、OH、C1-6烷氧基、酰氧基、氨基、C1-6烷氨基、酰氨基、氧代、鹵代C1-6烷基、鹵素、未被取代的苯基和被1-3個選自如下的取代基取代的苯基C1-6烷基、OH、C1-6烷氧基、?；?、酰氧基、氨基、C1-6烷氨基、酰氨基、鹵代C1-6烷基和鹵素；Y為H、C1-6烷基、OH、C1-6烷氧基、?；?、酰氧基、氨基、C1-6烷氨基、酰氨基、鹵代C1-6烷基或鹵素，Z2為單鍵或具有q個碳原子的直鏈亞烷基； p和q各自獨立地為1-20的整數，條件是6≤p+q≤23，m’為1、2或3，n為2或3； R”1、R”2、R”3和R”4各自獨立地為H、C1-4烷基或酰基； 或其可藥用鹽或水合物； -如WO02/18395中公開的化合物，例如式IVa或IVb化合物
其中Xa為O、S、NR1s或基團-(CH2)na-，該基團未被取代或被1-4個鹵素取代；na為1或2，R1s為H或(C1-4)烷基，該烷基未被取代或被鹵素取代；R1a為H、OH、(C1-4)烷基或O(C1-4)烷基，其中烷基未被取代或被1-3個鹵素取代；R1b為H、OH或(C1-4)烷基，其中烷基未被取代或被鹵素取代；R2a各自獨立地選自H或(C1-4)烷基，其中烷基未被取代或被鹵素取代；R3a為H、OH、鹵素或O(C1-4)烷基，其中烷基未被取代或被鹵素取代；且R3b為H、OH、鹵素、(C1-4)烷基且其中烷基未被取代或被羥基取代，或者O(C1-4)烷基且其中烷基未被取代或被鹵素取代；Ya為-CH2-、-C(O)-、-CH(OH)-、-C(＝NOH)-、O或S，且R4a為(C4-14)烷基或(C4-14)鏈烯基； 或其可藥用鹽或水合物； -如WO02/06268AI中公開的化合物，例如式VII化合物，
其中R1d和R2d各自獨立地為H或氨基保護基； R3d為氫、羥基保護基或下式的基團
R4d為C1-4烷基； nd為1-6的整數； Xd為亞乙基、亞乙烯基、亞乙炔基、式-D-CH2-的基團(其中D為羰基、-CH(OH)-、O、S或N)、芳基，或被至多3個選自如下定義的a組的取代基取代的芳基； Yd為單鍵、C1-10亞烷基、被至多3個選自a組和b組的取代基取代的C1-10亞烷基、在碳鏈中部或末端具有O或S的C1-10亞烷基，或被至多三個選自a組和b組的取代基取代的在碳鏈中部或末端具有O或S的C1-10亞烷基； R5d為氫、C3-6環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)基、被至多三個選自a組和b組的取代基取代的C3-6環(huán)烷基、被至多三個選自a組和b組的取代基取代的芳基或被至多三個選自a組和b組的取代基取代的雜環(huán)基； R6d和R7d各自獨立地為H或選自a組的取代基； R8d和R9d各自獨立地為H或任選被鹵素取代的C1-4烷基； <a組>為鹵素、低級烷基、鹵代低級烷基、低級烷氧基、低級烷硫基、羧基、低級烷氧羰基、羥基、低級脂族酰基、氨基、單-低級烷氨基、二-C1-4烷氨基、酰氨基、氰基或硝基；且 <b組>為C3-6環(huán)烷基、芳基或雜環(huán)基，它們各自任選被至多三個選自a組的取代基取代； 條件是，當R5d為氫時，Yd為單鍵或直鏈C1-10亞烷基； 或其藥學上可接受的鹽、酯或水合物； -如JP-14316985(JP2002316985)中公開的化合物，例如式VIII化合物，
其中R1e、R2e、R3e、R4e、R5e、R6e、R7e、ne、Xe和Ye如JP-14316985中所公開； 或其藥學上可接受的鹽、酯或水合物； -如WO03/29184和WO03/29205中公開的化合物，例如式IX化合物，
其中Xf為O、S、SO或SO2； R1f為鹵素、三鹵代甲基、OH、C1-7烷基、C1-4烷氧基、三氟甲氧基、苯氧基、環(huán)己基甲氧基、吡啶基甲氧基、肉桂氧基、萘基甲氧基、苯氧基甲基、CH2-OH、CH2-CH2-OH、C1-4烷硫基、C1-4烷基亞磺?；?、C1-4烷基磺酰基、芐硫基、乙?；?、硝基或氰基，或苯基、苯基C1-4烷基或苯基-C1-4烷氧基，其中各苯基任選被鹵素、CF3、C1-4烷基或C1-4烷氧基取代； R2f為H、鹵素、三鹵代甲基、C1-4烷氧基、C1-7烷基、苯乙基或芐氧基； R3f為H、鹵素、CF3、OH、C1-7烷基、C1-4烷氧基、芐氧基或C1-4烷氧基甲基； R4f和R5f各自獨立地為H或下式的基團
其中R8f和R9f各自獨立地為H或任選被鹵素取代的C1-4烷基；且 nf為1-4的整數； 例如2-氨基-2-[4-(3-芐氧基苯氧基)-2-氯苯基]乙基-1，3-丙二醇、2-氨基-2-[4-(芐氧基苯硫基)-2-氯苯基]乙基-1，3-丙二醇、2-氨基-2-[4-(3-芐氧基苯氧基)-2-氯苯基]丙基-1，3-丙二醇或2-氨基-2-[4-(芐氧基苯硫基)-2-氯苯基]丙基-1，3-丙二醇； 或其藥學上可接受的鹽、酯或水合物； -如WO03/062252A1中公開的化合物，例如式X化合物，
其中 Ar為苯基或萘基；mg和ng各自獨立地為0或1；A選自COOH、PO3H2、PO2H、SO3H、PO(C1-3烷基)OH和1H-四唑-5-基；R1g和R2g各自獨立地為H、鹵素、OH、COOH或任選被鹵素取代的C1-4烷基；R3g為H或任選被鹵素或OH取代的C1-4烷基；R4g各自獨立地為鹵素或者任選被鹵素取代的C1-4烷基或C1-3烷氧基；且Rg和M各自具有如WO03/062252A1中分別對B和C所示的含義之一； 或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或水合物； -如WO03/062248A2中公開的化合物，例如式XI化合物
其中Ar為苯基或萘基；n為2、3或4；A為COOH、1H-四唑-5-基、PO3H2、PO2H2、-SO3H或PO(R5h)OH，其中R5h選自C1-4烷基、羥基C1-4烷基、苯基、-CO-C1-3烷氧基和-CH(OH)-苯基，其中所述的苯基或苯基部分是任選被取代的；R1h和R2h各自獨立地為H、鹵素、OH、COOH或任選被鹵素取代的C1-6烷基或苯基；R3h為H或任選被鹵素和/OH取代的C1-4烷基； R4h各自獨立地為鹵素、OH、COOH、C1-4烷基、S(O)0，1或2C1-3烷基、C1-3烷氧基、C3-6環(huán)烷氧基、芳基或芳烷氧基，其中烷基部分可以任選被1-3個鹵素取代；且Rh和M各自具有如WO03/062248A2中分別對B和C所示的含義之一； -如WO04/026817A中公開的化合物，例如式XII化合物
其中 R1j為鹵素、三鹵代甲基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷硫基、C1-4烷基亞磺?；?、C1-4烷基-磺?；?、芳烷基、任選被取代的苯氧基或芳烷氧基，R2j為H、鹵素、三鹵代甲基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、芳烷基或芳烷氧基，R3j為H、鹵素、CF3、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷硫基或芐氧基，R4j為H、C1-4烷基、苯基、任選被取代的芐基或苯甲?；?，或者低級脂族C1-5?；?，R5j為H、單鹵代甲基、C1-4烷基、C1-4烷氧基甲基、C1-4烷硫基甲基、羥乙基、羥丙基、苯基、芳烷基、C2-4鏈烯基或-炔基，R6j和R7j各自獨立地為H或C1-4烷基，或者R7j還可以為下式基團
其中R8j和R9j各自獨立地為H或任選被鹵素取代的C1-4烷基，Xj為O、S、SO或SO2且nj為1-4的整數，例如2-氨基-4-[4-(3-芐氧基苯硫基)-2-氯苯基]-2-甲基丁烷-1-醇或2-氨基-4-[4-(3-芐氧基苯硫基)-2-氯苯基]-2-乙基丁烷-1-醇； -如WO04/103306A、WO05/000833、WO05/103309或WO05/113330中公開的化合物，例如式XIIIa或XIIIb化合物，
其中 Ak為COOR5k、OPO(OR5k)2、PO(OR5k)2、SO2OR5k、POR5kOR5k或1H-四唑-5-基，R5k為H或C1-6烷基； Wk為鍵、C1-3亞烷基或C2-3亞鏈烯基； Yk為C6-10芳基或C3-9雜芳基，任選被1-3個基團取代，所述基團選自鹵素、OH、NO2、C1-6烷基、C1-6烷氧基；鹵素取代的C1-6烷基和鹵素取代的C1-6烷氧基； Zk為如WO04/103306A中所示的雜環(huán)基，例如氮雜環(huán)丁烷； R1k為C6-10芳基或C3-9雜芳基，任選被C1-6烷基、C6-10芳基、C6-10芳基C1-4烷基、C3-9雜芳基、C3-9雜芳基C1-4烷基、C3-8環(huán)烷基、C3-8環(huán)烷基C1-4烷基、C3-8雜環(huán)烷基或C3-8雜環(huán)烷基C1-4烷基取代；其中R1k的任意芳基、雜芳基、環(huán)烷基或雜環(huán)烷基可以被1-5個選自鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基和鹵素取代的-C1-6烷基或-C1-6烷氧基的基團取代； R2k為H、C1-6烷基、鹵素取代的C1-6烷基、C2-6鏈烯基或C2-6炔基；且 R3k或R4k各自獨立地為H、鹵素、OH、C1-6烷基、C1-6烷氧基或鹵素取代的C1-6烷基或C1-6烷氧基； 及其N-氧化物衍生物或其前藥； 或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或水合物。
根據本發(fā)明的另一個實施方案，用于本發(fā)明的S1P受體激動劑或調節(jié)劑還可以為選擇性S1P1受體激動劑或調節(jié)劑，例如對S1P1受體的選擇性是S1P3受體的至少20倍、例如100、500、1000或2000倍的化合物，正如通過在35S-GTPγS結合試驗中評價的S1P1受體的EC50與S1P3受體的EC50之比所測定的，所述化合物的結合S1P1受體的EC50為100nM或更低，如通過35S-GTPγS結合試驗所評價的。代表性的S1P1受體激動劑或調節(jié)劑例如為WO03/061567中所列的化合物，該文獻的內容引入本文作為參考，例如式XIV或XV化合物
當式I至XV化合物在分子上具有一個或多個不對稱中心時，本發(fā)明應理解為包括各種旋光異構體，并且包括外消旋物、非對映異構體及其混合物。當具有氨基的碳原子為不對稱時，式III或IVb化合物優(yōu)選在該碳原子上具有R-構型。
式I至XV化合物可以以游離或鹽的形式存在。式I至XIII化合物的可藥用鹽的實例包括與無機酸形成的鹽，例如鹽酸鹽、氫溴酸鹽和硫酸鹽；與有機酸形成的鹽，例如乙酸鹽、富馬酸鹽、馬來酸鹽、苯甲酸鹽、檸檬酸鹽、蘋果酸鹽、甲磺酸鹽和苯磺酸鹽；或如果適當的話，與金屬如鈉、鉀、鈣和鋁形成的鹽；與胺類如三乙胺形成的鹽；以及與氨基二酸如賴氨酸形成的鹽。本發(fā)明的組合中的化合物和鹽包括水合物和溶劑化物形式。
如上所述的酰基可以為基團Ry-CO-，其中Ry為C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、苯基或苯基-C1-4烷基。除非另作陳述，否則烷基、烷氧基、鏈烯基或炔基可以為直鏈或支鏈的。
當式I化合物中作為R1的碳鏈被取代時，它優(yōu)選被鹵素、硝基、氨基、羥基或羧基取代。當碳鏈被任選取代的亞苯基間隔時，碳鏈優(yōu)選是未被取代的。當亞苯基部分被取代時，它優(yōu)選被鹵素、硝基、氨基、甲氧基、羥基或羧基取代。
優(yōu)選的式I化合物為其中R1為任選被硝基、鹵素、氨基、羥基或羧基取代的C13-20烷基的那些，更優(yōu)選其中R1為被C6-14-烷基鏈取代的苯基烷基的那些，其中所述C6-14-烷基鏈任選被鹵素取代且烷基部分為任選被羥基取代的C1-6烷基。更優(yōu)選R1為在苯基上被直鏈或支鏈、優(yōu)選直鏈C6-14烷基鏈取代的苯基-C1-6烷基。C6-14烷基鏈可以位于鄰位、間位或對位，優(yōu)選位于對位。
優(yōu)選R2至R5各自為H。
優(yōu)選的式I化合物為2-氨基-2-十四烷基-1，3-丙二醇。特別優(yōu)選的式I的S1P受體調節(jié)劑為FTY720，即游離形式或可藥用鹽形式的2-氨基-2-[2-(4-辛基苯基)乙基]丙-1，3-二醇(下文稱為化合物A)，例如所示的鹽酸鹽
優(yōu)選的式II化合物為如下定義的化合物其中R’2至R’5各自為H且m為4，即游離形式或可藥用鹽形式的2-氨基-2-{2-[4-(1-氧代-5-苯基戊基)苯基]乙基}丙-1，3-二醇(下文稱為化合物B)，例如鹽酸鹽。
優(yōu)選的式III化合物為如下定義的化合物其中W為CH3，R”1至R”3各自為H，Z2為亞乙基，X為庚氧基，且Y為H，即游離形式或可藥用鹽形式的2-氨基-4-(4-庚氧基苯基)-2-甲基-丁醇(下文稱為化合物C)，例如鹽酸鹽。特別優(yōu)選R-對映異構體。
優(yōu)選的式IVa化合物為FTY720-磷酸酯(R2a為H，R3a為OH，Xa為O，R1a和R1b為OH)。優(yōu)選的式IVb化合物為化合物C-磷酸酯(R2a為H，R3b為OH，Xa為O，R1a和R1b為OH，Ya為O且R4a為庚基)。
優(yōu)選的式VIII化合物為(2R)-2-氨基-4-[3-(4-環(huán)己氧基丁基)-苯并[b]噻分6-基]-2-甲基丁-1-醇。
優(yōu)選的式IX化合物為如下定義的化合物其中Xf為S或O，R1f為芐氧基，R2f、R4f和R5fj各自為H，R3f為Cl且nf為2。
優(yōu)選的式XII化合物為如下定義的化合物其中Xj為S或O，R1j為芐氧基，R2j、R4j、R6j和R7j各自為H，R3j為Cl，R5j為羥乙基或羥丙基且nj為2。
優(yōu)選的式XIIIa化合物例如為1-{4-[1-(4-環(huán)己基-3-三氟甲基-芐氧基亞氨基)-乙基]-2-乙基-芐基}-氮雜環(huán)丁烷-3-甲酸或其前藥。
與S1P受體調節(jié)劑或激動劑組合的免疫抑制藥例如為鈣依賴磷酸酶抑制劑、mTOR抑制劑、霉酚酸、其鹽或前藥如霉酚酸鈉或霉酚酸嗎乙酯或者類固醇如潑尼松、甲潑尼龍、地塞米松、曲安奈德等。
如本文所用的術語“鈣依賴磷酸酶抑制劑”例如包括環(huán)孢菌素如環(huán)孢菌素A或ISA tx 247或FK506(他克莫司)。
如本文所用的術語“mTOR抑制劑”包括雷帕霉素或其衍生物，它們被認為具有相同的作用機制(例如抑制mTOR活性)并且具有免疫抑制性質。適宜的雷帕霉素衍生物例如包括式A化合物
其中 R1aa為CH3或C3-6炔基， R2aa為H或-CH2-CH2-OH、3-羥基-2-(羥甲基)-2-甲基-丙?；蛩倪蚧?，且 Xaa為＝O、(H，H)或(H，OH)， 條件是當Xaa為＝O且R1aa為CH3時，R2aa不為H， 或其前藥(當R2aa為-CH2-CH2-OH時)，例如其生理學上可水解的醚，例如其中R2aa為-CH2-CH2-O-Alk且Alk為任選在鏈內被1或2個氧原子間隔的C1-9烷基的化合物。
式A化合物例如在WO94/09010、WO95/16691、WO96/41807、USP5,362,718或WO99/15530中被公開，它們被引入本文作為參考。它們可以按照公開的方法或通過類似于這些參考文獻中所述的方法來制備。
優(yōu)選的雷帕霉素衍生物為32-去氧雷帕霉素、16-戊-2-炔基氧基-32-去氧雷帕霉素、16-戊-2-炔基氧基-32(S)-二氫-雷帕霉素、16-戊-2-炔基氧基-32(S)-二氫-40-O-(2-羥乙基)-雷帕霉素及更優(yōu)選的40-O-(2-羥乙基)-雷帕霉素。雷帕霉素衍生物的另外的實例例如包括如USP5,362,718中所公開的CCI779或40-[3-羥基-2-(羥甲基)-2-甲基丙酸鹽]-雷帕霉素或其可藥用鹽、例如WO99/15530中所公開的ABT578或40-(四唑基)-雷帕霉素、特別是40-表-(四唑基)-雷帕霉素。雷帕霉素衍生物還可以包括例如在WO98/02441、WO01/14387和WO03/64383中公開的所謂的rapalogs，例如AP23573、AP23464、AP23675或AP23841。雷帕霉素衍生物的其它實例為在名稱TAFA-93、biolimus-7或biolimus-9下公開的那些。
根據本發(fā)明，抗淋巴細胞抗體可以在移植接受者的免疫抑制治療過程中的不同時間點如在移植后數周、數月或甚至數年和/或在移植前施用和/或在移植后立即施用來引起免疫反應的改變以增強移植物接受。抗淋巴細胞抗體例如包括多克隆抗體，例如抗淋巴細胞球蛋白、抗胸腺細胞球蛋白(″ATGs″)，例如無論是來自兔還是來自馬的ATGAM和Thymoglobulin；單克隆抗體制劑，例如對白細胞受體如CD2、CD3、CD4、CD7、CD25、CD27、CD28、CD40、CD45、CD80、CD86、ICOS、OXA40或對其配體如CD154的嵌合抗體、人源化抗體或人抗體，例如OKT3、莫羅單抗-CD3、巴利昔單抗(Simulect；Novartis AG，CH)和達克珠單抗(Zenapax；Roche AG，CH)；或者具有至少一部分CTLA4或其突變體的胞外域的重組結合分子，例如與非-CTLA4蛋白序列結合的CTLA4或其突變體的至少細胞外部分，例如CTLA4-Ig(例如指定的ATCC68629)或其突變體，例如LEA29Y(belatacept)。特別優(yōu)選的單克隆抗體為嵌合的(例如在EP449769中有詳細描述，其內容被引入本文作為參考)或人源化的(例如在WO90/07861中有詳細描述，其內容被引入本文作為參考)抗CD25。
在一系列另外的具體或供選的實施方案中，本發(fā)明還提供了 1.1.在接受者中抑制同種異體移植物排斥的方法，所述方法包括給所述接受者例如同時或依次施用治療有效量的S1P受體調節(jié)劑以及一種或多種免疫抑制藥和抗淋巴細胞抗體。
優(yōu)選該方法用于在實體器官移植接受者中預防或治療器官移植排斥。
優(yōu)選的S1P受體調節(jié)劑為化合物A、B或C、(2R)-2-氨基-4-[3-(4-環(huán)己基氧基丁基)-苯并[b]噻吩-6-基]-2-甲基丁-1-醇或式IX化合物(其中Xf為S或O，R1f為芐氧基，R2f、R4f和R5fj各自為H，R3f為Cl且nf為2，或式XIIIa化合物。
用于本發(fā)明的方法的優(yōu)選的免疫抑制藥例如為 -鈣依賴磷酸酶抑制劑、例如環(huán)孢菌素A或FK506，其任選與類固醇、例如皮質類固醇如潑尼松組合；或 -mTOR抑制劑、例如依維莫司或西羅莫司，其任選與類固醇、例如皮質類固醇如潑尼松組合；或 -mTOR抑制劑、例如依維莫司或西羅莫司，其任選與鈣依賴磷酸酶抑制劑、例如環(huán)孢菌素A或FK506以及類固醇、例如皮質類固醇如潑尼松鈕合；或 -霉酚酸或其鹽或前藥，其任選與鈣依賴磷酸酶抑制劑、例如環(huán)孢菌素A或FK506以及類固醇、例如皮質類固醇如潑尼松組合；或 -霉酚酸或其鹽或前藥，其任選與類固醇、例如皮質類固醇如潑尼松組合。
1.2在接受者中抑制同種異體移植物排斥的方法，所述方法包括給所述接受者同時或依次施用治療有效量的S1P受體調節(jié)劑以及一種或多種免疫抑制藥和抗淋巴細胞抗體，其中抗淋巴細胞抗體在移植前施用和/或在移植后立即施用。
對于所謂的誘導療法可以施用抗淋巴細胞抗體，即作為在進行移植的非常早的時期內、例如在移植前不久和在移植后最多3個月一次或多次施用的短期治療。優(yōu)選的S1P受體激動劑或調節(jié)劑和優(yōu)選的免疫抑制藥例如如上所說明。
1.3.在接受者中抑制同種異體移植物排斥的方法，所述方法包括給所述接受者同時或依次施用治療有效量的S1P受體調節(jié)劑以及一種或多種免疫抑制藥和抗淋巴細胞抗體誘導，抗淋巴細胞抗體誘導包括至少在移植前施用抗CD25化合物或具有至少一部分CTLA4或其突變體的胞外域的重組結合分子。
2.S1P受體調節(jié)劑以及一種或多種免疫抑制藥和抗淋巴細胞抗體在制備用于如以上1.1至1.3中所定義的任意方法、例如在接受者中抑制同種異體移植物排斥的方法的藥物中的用途，由此所述的藥物同時或依次施用。
3.一種組合，例如用于如以上1.1至1.3中所定義的任意方法、例如用于治療同種異體移植物移植接受者的藥盒，該組合包含S1P受體調節(jié)劑、一種或多種免疫抑制藥和抗淋巴細胞抗體。
本發(fā)明的方法例如在實體器官移植、例如腎臟、心臟、肺或肝移植、優(yōu)選腎移植中有說明。
本發(fā)明的方法中所用的各組合組分的有效量可以根據所用的具體化合物或藥物組合物、施用方式、所治療病癥的嚴重性而改變。具有普通技術的醫(yī)師或臨床醫(yī)師可以容易地確定并開出所需的單一活性成分的有效量。
S1P受體調節(jié)劑的日劑量可以在0.5至15mg之間改變。優(yōu)選的劑量為口服1至15mg/日，更優(yōu)選2至5mg/日，包括在移植前施用的劑量。更優(yōu)選S1P受體調節(jié)劑在移植前以5mg/日的劑量口服施用，然后以2.5mg/日的劑量口服施用。
Cys A的劑量可以為口服0.5-10mg/kg/日，這取決于移植后的時間以及有無血液水平監(jiān)測。
FK506的劑量可以為口服0.05至0.2mg/kg/日。
當抗體為巴利昔單抗或達克珠單抗時，其可以以約2mg/kg的單次劑量或以4×約1mg/kg的劑量施用，例如以移植前2mg/kg、然后以4次另外的1mg/kg劑量以每周2次間隔來施用。胸腺球蛋白(thymoglobulin)或淋巴球蛋白(lymphoglobulin)可以以1-3mg/kg的劑量施用。抗淋巴細胞抗體的施用例如可以在每周或每月的基礎上、例如每周、每2周、每3周、每4周、每5周、每6周、每7周或每8周、定期或不定期地按需要進行。LEA29Y可以以變化的劑量以周期性間隔來施用，例如在移植前以10mg/kg的劑量施用，在第5天和每2周施用3個月，然后在第7個月以減少到例如5mg/kg的劑量每月施用。
mTor抑制劑可以以約0.5至30mg的日劑量、任選以分開劑量來施用。霉酚酸、其鹽或前藥可以以約150mg至3g的日劑量、任選以分開的形式來施用。
S1P受體調節(jié)劑、免疫抑制藥和用于誘導的抗體的組合在治療如上文所說明的疾病和病癥中的功效可以在標準動物或臨床試驗中、例如按照下文所述的方法來證明。
研究 將患者隨機分成兩個治療組中的一組 第1組FTY720 5mg＊，然后2.5mg QD+環(huán)孢菌素A 8-10mg/kg/日(進行調整以獲得靶血液水平)+皮質類固醇＊＊ 第2組FTY720 5mg＊，然后5mg QD+環(huán)孢菌素A 3-4mg/kg/日(進行調整以獲得靶血液水平)+皮質類固醇＊＊ ＊FTY720的首劑量在腎同種異體移植物血管再生成之前2至12小時施用。將第0天定義為研究藥物的首劑量的施用日。
＊＊除了以上治療方案中的一種外，所有患者在移植前例如以2mg/kg的劑量接受抗體誘導(抗CD25)。患者還可以以每周2次間隔接受4次另外的1mg/kg劑量的抗CD25。
第1組的Cys A靶范圍 第2組的Cys A靶范圍 在移植物血管再生成后開始用FTY720進行維持治療，移植物血管再生成在第0天或第1天、在首劑量后12至24小時之間發(fā)生。
被隨機分到第1組的患者以2次分開劑量開始施用環(huán)孢菌素A8-10mg/kg/日(進行調整以獲得靶血液水平)，被隨機分到第2組的患者以2次分開劑量開始施用環(huán)孢菌素A 3-4mg/kg/日(進行調整以獲得靶血液水平)。
在12個月的治療期間內，在第0、1、3、5、7(或出院的那天，如果早于7天的話)、14和28天以及在第2、3、6、9和12個月訪視患者。
當所有患者完成3個月的研究時，進行暫時性安全分析。當所有患者已經完成12個月的研究時，進行安全和效能的最終分析。
主要的安全評價 不良事件/嚴重不良事件 感染/嚴重感染 由不良事件(包括感染)或實驗室異常引起的研究藥物中斷 其它評價 所治療的被活組織檢查證明的急性排斥的發(fā)生率 移植物損失發(fā)生率 死亡發(fā)生率 惡性發(fā)生率 HCV病毒載量 BK多瘤病毒載量 與標準免疫抑制方案相比，本研究的劑量方案具有有益的作用。根據本方案，藥物水平的監(jiān)測變得越來越不具有強制性，固定劑量治療可成為可能。
可以例如在第2組中使用不同日劑量的環(huán)孢菌素A、例如以2次分開劑量施用3-6mg/kg的環(huán)孢菌素A來重復以上臨床試驗。
可以使用不同的S1P受體激動劑或調節(jié)劑、例如式IX化合物或式XIIIa化合物來重復以上臨床試驗。
可以使用依維莫司代替環(huán)孢菌素A來重復以上臨床試驗。
可以使用LEA29Y代替抗CD25來重復以上臨床試驗。
權利要求
1.與一種或多種免疫抑制藥和抗淋巴細胞抗體組合的S1P受體調節(jié)劑的用途，用于制備在接受者中抑制實體器官同種異體移植物排斥的藥物，由此所述藥物同時或依次施用。
2.根據權利要求1的用途，其中抗淋巴細胞抗體在移植前施用和/或在移植后立即施用。
3.根據權利要求2的用途，其中抗淋巴細胞抗體在移植前施用，抗淋巴細胞抗體選自抗CD25化合物和具有至少一部分CTLA4或其突變體的胞外域的重組結合分子。
4.根據權利要求1的用途，其中實體器官同種異體移植物為腎臟。
5.在接受者中抑制實體器官同種異體移植物排斥的方法，所述方法包括給所述接受者同時或依次施用治療有效量的S1P受體調節(jié)劑以及一種或多種免疫抑制藥和抗淋巴細胞抗體。
6.在接受者中抑制實體器官同種異體移植物排斥的方法，所述方法包括給所述接受者同時或依次施用治療有效量的S1P受體調節(jié)劑以及一種或多種免疫抑制藥和抗淋巴細胞抗體，其中抗淋巴細胞抗體在移植前施用和/或在移植后立即施用。
7.根據權利要求6的方法，其中抗淋巴細胞抗體在移植前施用，抗淋巴細胞抗體選自抗CD25化合物和具有至少一部分CTLA4或其突變體的胞外域的重組結合分子。
8.在接受者中抑制實體器官同種異體移植物排斥的組合，該組合包含S1P受體調節(jié)劑、一種或多種免疫抑制藥和抗淋巴細胞抗體。
9.根據權利要求1的用途、根據權利要求5或6的方法或者根據權利要求8的組合物，其中S1P受體調節(jié)劑選自游離形式或可藥用鹽形式的如上文定義的式I至XV化合物。
10.根據權利要求1的用途、根據權利要求5或6的方法或者根據權利要求8的組合物，其中免疫抑制藥選自鈣依賴磷酸酶抑制劑、mTOR抑制劑、霉酚酸、其鹽或前藥和類固醇。
11.根據權利要求1的用途、根據權利要求5或6的方法或者根據權利要求8的組合物，其中抗淋巴細胞抗體為抗CD25抗體、抗淋巴細胞球蛋白或抗胸腺細胞球蛋白或者具有至少一部分CTLA4或其突變體的胞外域的重組結合分子。
全文摘要
在治療移植接受者的過程中將S1P受體調節(jié)劑、一種或多種免疫抑制藥和抗淋巴細胞抗體組合的免疫抑制療法延長移植同種異體移植物的存活。
文檔編號A61P37/02GK101111259SQ200680003305
公開日2008年1月23日 申請日期2006年2月6日 優(yōu)先權日2005年2月8日
發(fā)明者S·阿拉德耶 申請人:諾瓦提斯公司