專利名稱：：替加環(huán)素的制造方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種用于制備替加環(huán)素的制造方法。
背景技術(shù)：
：替加環(huán)素為具有廣譜抗菌活性的抗生素。重要的是，替加環(huán)素可有效抵抗若干種抗性細(xì)菌株。通過在靜脈內(nèi)輸注之前添加相容性重構(gòu)稀釋劑來重構(gòu)呈粉末形式的替加環(huán)素?？股靥婕迎h(huán)素為經(jīng)叔丁基甘氨酰基取代的并四苯甲酰胺(naphthacenecarboxamide)游離堿。然而，替加環(huán)素難于制造，因?yàn)槠湟子诮到?包含由大氣氧進(jìn)行氧化性降解)且形成差向異構(gòu)體。因此存在對于在大量制造中控制替加環(huán)素的差向異構(gòu)化和氧化的制造方法的需求。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明涉及一種通過在凍干粉末形式的大量制造期間控制差向異構(gòu)體形成和氧化降解的替加環(huán)素制造方法。特定來說，在過程步驟期間控制溫度和氧含量為本發(fā)明的重要特征。通過噴射包括非反應(yīng)性氣體(諸如氮?dú)?的惰性氣體介質(zhì)且控制溫度而在過程中保護(hù)替加環(huán)素。本發(fā)明的一個實(shí)施例在于提供通過控制溶解氧的含量以及對本體水溶液的溫度控制來制造總降解物小于0.9%的替加環(huán)素。本發(fā)明的另一個實(shí)施例在于提供一種具有少于0.9%的總降解物的呈可重構(gòu)粉末形式的替加環(huán)素的制造方法，且進(jìn)一步提供在至少80L規(guī)模上自注射用水(WFI)和替加環(huán)素的溶液獲得的替加環(huán)素可重構(gòu)粉末。本發(fā)明的一個實(shí)施例在于提供一種在WFI水中濃度為約10mg/ml至50mg/ml、優(yōu)選20mg/mL的替加環(huán)素的制造方法，其中通過用氣態(tài)氮噴射所述水，水中的氧含量小于0.5ppm，且其中所述溶液可添加到小瓶中且所述小瓶中的溶液經(jīng)凍干為可重構(gòu)粉末。本發(fā)明的另一個實(shí)施例在于提供一種用于制備替加環(huán)素粉末的具有約13小時至約24小時的本體溶液總制造保持時間的制造方法。本發(fā)明的另一個實(shí)施例在于提供在靜脈內(nèi)投與之前可用于重構(gòu)且具有至少18個月的保存期的替加環(huán)素粉末。本發(fā)明的另一個實(shí)施例在于提供一種其中WFI水處于約2'C至約8'C的溫度的制造方法。本發(fā)明的另一個實(shí)施例在于提供從填充第一小瓶到開始6小時的凍干周期的最大無菌保持時間。本發(fā)明的一個實(shí)施例在于提供用于制備具有少于0.9%的總降解物的呈可重構(gòu)粉末形式的替加環(huán)素的制造方法，其包括以下步驟a.將WFI水中的氧含量降低且保持在小于或等于0.5ppm，同時將溫度保持在約2。C至約8'C;b.在保持所述溫度和氧含量的同時在步驟a的所述水中形成濃度為約10mg/ml至50mg/ml的替加環(huán)素溶液；c.用步驟b的所述溶液填充小瓶；d.將步驟c的所述溶液凍干以在小瓶中形成25mg至150mg的可重構(gòu)粉末；以及e.在氮?dú)庀旅芊馑鲂∑?。在上述方法的步驟b中的替加環(huán)素溶液優(yōu)選具有約20mg/ml的濃度。在上述方法的步驟d的小瓶中優(yōu)選有50mg至150mg、更優(yōu)選50mg可重構(gòu)粉末。己分析凍干且重構(gòu)的替加環(huán)素粉末具有實(shí)質(zhì)上如圖1所示的反相HPLC洗提曲線。圖1展示來自制造方法的替加環(huán)素的反相HPLC洗提曲線的典型色譜圖。圖2展示替加環(huán)素制造方法的步驟。具體實(shí)施例方式本發(fā)明提供一種具有少于0.9%的總降解物的呈可重構(gòu)粉末形式的替加環(huán)素的制造方法?？稍?0L規(guī)?；虼笥?0L規(guī)模上自注射用水(WFI)和替加環(huán)素的溶液提供用于制備替加環(huán)素可重構(gòu)粉末的方法。總降解物意謂由替加環(huán)素降解所產(chǎn)生的化合物或產(chǎn)物，其包含由于替加環(huán)素的氧化而形成的那些化合物或產(chǎn)物(例如在C-ll位處形成羥基或在C-6位處接著脫水以形成6-烯產(chǎn)物)、或由于次級反應(yīng)(例如脫羧、水解、光反應(yīng)或閉環(huán))而形成的那些化合物或產(chǎn)物(例如由于光誘導(dǎo)的反應(yīng)通過在C-4位處水解和脫氨基而形成的那些產(chǎn)物)。在定義中包含差向異構(gòu)體。定義中不包含二甲胺四環(huán)素(minocycline)和9-氨基二甲胺四環(huán)素。"少于0.9%的總降解物"意謂在形成替加環(huán)素溶液24小時后、但在凍干之前總降解物與替加環(huán)素的比率小于0.9%。通常所述方法提供濃度為約10mg/ml至50mg/ml、優(yōu)選20mg/mL的替加環(huán)素于WFI水中的溶液，其中通過用氣態(tài)氮噴射所述水使水中的氧含量小于0.5ppm，且其中所述溶液可添加到小瓶中且將所述小瓶中的溶液凍干為可重構(gòu)粉末。本發(fā)明提供一種用于制備替加環(huán)素粉末具有約13小時至約24小時的本體溶液總制造保持時間的制造方法，所述替加環(huán)素粉末可用于重構(gòu)且進(jìn)一步具有至少18個月的保存期。本發(fā)明提供一種其中WFI水保持在約2t:至約8"的溫度且水經(jīng)氮?dú)膺M(jìn)一步噴射以便氧含量低于5ppm的制造方法。已開發(fā)從用本體溶液填充第一小瓶到開始6小時的凍干周期的最大無菌保持時間以確?？刂平到?。本發(fā)明提供一種用于制備具有少于0.9%的總降解物的呈可重構(gòu)粉末形式的替加環(huán)素的制造方法，其是通過以下步驟進(jìn)行首先將WFI水中的氧含量降低且保持在小于0.5ppm,同時將溫度保持在約2'C至約8°C，隨后在仍保持所述溫度和氧含量的同時添加替加環(huán)素且形成濃度為約10mg/ml至50mg/ml的溶液。替加環(huán)素于水中的溶液可添加到小瓶中且進(jìn)一步經(jīng)凍干為可重構(gòu)粉末且在氮?dú)庀聦⑿∑窟M(jìn)一步密封。優(yōu)選替加環(huán)素溶液為20mg/ml且在凍干后小瓶具有約50mg的可重構(gòu)粉末。實(shí)例以下實(shí)例表示本發(fā)明的方法且僅出于說明目的呈現(xiàn)。盡管已詳細(xì)地且關(guān)于特定實(shí)施例描述本發(fā)明，但所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員將了解在不悖離本發(fā)明的精神和范圍的情況下可對這些實(shí)施例作出各種改變和更改。下文描述對于80L的典型批量大小來說用于注射的替加環(huán)素的典型制造方法。非無菌本體調(diào)配階段1.在開始本體調(diào)配階段之前，用經(jīng)過濾氮?dú)鈨艋{(diào)配和填充管線、產(chǎn)物轉(zhuǎn)移管線和調(diào)配物、中間物和保持貯槽。2.向調(diào)配貯槽中添加所需量的約95%(76L)的注射用水且將水冷卻至2t:-8。C'同時用經(jīng)過濾氮?dú)鈬娚洌钡饺芙庋鹾?0.5mg/L(ppm)。3.測量水的溶解氧含量。如果溶解氧含量大于0.5mg/L，那么繼續(xù)用經(jīng)過濾氮?dú)鈬娚渌钡饺芙庋鹾縎0.5mg/L(ppm)，且溫度為2'C-8°C。4.用經(jīng)過濾氮?dú)饫^續(xù)噴射且向保持貯槽加壓。在添加藥物物質(zhì)之前停止對調(diào)配貯槽中水的噴射且繼續(xù)施以經(jīng)過濾氮?dú)鈱印?.向貯槽中添加1600g藥物物質(zhì)，通過在整個過程期間保持經(jīng)過濾氮?dú)饬鱽泶_保藥物物質(zhì)不暴露于空氣中。6.將本體溶液混合。溶液溫度應(yīng)為2'C-8°C。7.向調(diào)配貯槽中添加注射用水直到達(dá)到最終體積/重量(80L)且將溶液混合。8.在調(diào)配貯槽中保持經(jīng)過濾氮?dú)鈱?。測量溶解氧含量。9.如果溶液的溶解氧含量大于0.5mg/L，那么繼續(xù)經(jīng)過濾氮?dú)鈬娚渲钡将@得穩(wěn)定的溶解氧含量測量值。無菌過濾和填充1.填充入經(jīng)滅菌玻璃小瓶中且周期性檢查填充重量。部分塞住小瓶。此過程應(yīng)在6小時內(nèi)完成(最大允許無菌溶液保持時間)。2.用來自填充機(jī)的部分塞住的小瓶裝載托盤。將裝滿的托盤置于關(guān)閉的運(yùn)輸車中。3.直到此步驟為止的制造過程應(yīng)在13-24小時(最大允許本體溶液保持時間)內(nèi)完成。凍干1.將樣品架入口溫度設(shè)定為2'C(土5。C)。2.裝載小瓶。3.關(guān)上冷凍干燥器的門以開始周期。4.將樣品架入口溫度降到-45。C。在-45。C(±5°C)的樣品架入口溫度下保持長達(dá)4小時或直到達(dá)到-17'C或低于-17'C的產(chǎn)品溫度。5.將腔室壓力降到150mTorr(mT)±150mT，隨后開始初步干燥階段。6.開始初步干燥，且持續(xù)長達(dá)20小時(樣品架溫度-1(rC到+25T:)或直到產(chǎn)品溫度升高到高于0'C，通過增加樣品架溫度來限制產(chǎn)品溫度低于產(chǎn)品的塌陷溫度(-6.5'C)/共晶溫度(-0.74。C)。7.通過將樣品架入口溫度增加到4(TC(±5。C)來進(jìn)行最后干燥且保持長達(dá)9小時或直到產(chǎn)品溫度在大于30。C下保持至少3小時。8.用經(jīng)過濾氮?dú)飧淖優(yōu)?2.5psi(土0.5psi)的部分真空且完全塞住小瓶。9.將部分真空改變?yōu)榇髿鈮骸?0.從干燥器移出小瓶且鉗口密封(crimp-seal)。HPLC測試將樣品小瓶的內(nèi)含物溶解于稀釋劑中。必要時將樣品溶液稀釋且使用梯度洗提用反相柱進(jìn)行色譜分析。通過比較樣品制劑色譜圖中的雜質(zhì)峰面積與伴隨獲得的標(biāo)準(zhǔn)制劑色譜圖中替加環(huán)素峰的平均面積來測定雜質(zhì)。色譜柱一長度約15cm，內(nèi)徑約4.6mm，由5大小的InertsilODS2粒子或等效物裝填。檢測器一能夠在248nm下運(yùn)作的紫外分光光度檢測器，其具有約0.5個滿量程的吸光度單位的靈敏度。試劑和材料乙腈一HPLC級。水一適于進(jìn)行HPLC。磷酸一試劑級，約87免H3P04。氫氧化鉀溶液(1N)—試劑級。三氟乙酸一試劑級。磷酸氫二鉀—K2HP04，HPLC級。乙二胺四乙酸鈉-(亞乙基二次氮基)-四乙酸二鈉鹽一HPLC級。亞硫酸氫鈉一NaHS03，試劑級。流動相A—溶解的4.35g磷酸氫二鉀和0.93g鈉。于950mL水中的EDTA。用磷酸將pH值調(diào)節(jié)到6.4。添加50mL乙腈且充分混合。必要時經(jīng)由0.45^m孔徑的膜過濾器過濾。必要時脫氣。流動相B—溶解的4.35g磷酸氫二鉀和0.93g鈉。于500mL水中的EDTA。用磷酸將pH值調(diào)節(jié)到6.4。添加500mL乙腈且充分混合。必要時經(jīng)由0.45pm孔徑的膜過濾器過濾。必要時脫氣。稀釋劑一將4.35g磷酸氫二鉀和0.50g亞硫酸氫鈉稱入1升容量瓶中。用水溶解且稀釋到指定體積。用1N氫氧化鉀將此溶液的pH值調(diào)節(jié)到8.0。EDTA溶液一將3.7g乙二胺四乙酸鈉稱入l升容量瓶中。用950mL水溶解。添加50mL乙腈且充分混合。替加環(huán)素參考標(biāo)準(zhǔn)物一具有已知濃度(S)。使用以下材料、方法和程序研究工藝參數(shù)(諸如溫度、時間和溶解氧含量)對替加環(huán)素溶液的純度性質(zhì)的影響的其它研究的結(jié)果呈現(xiàn)于表A至表O中。材料和方法替加環(huán)素藥物物質(zhì)批號871858C0.1NNaOH批號97120310.1NHC1批號2853無菌注射用水批號J3N472(B.Braun)程序在正常實(shí)驗(yàn)室光條件下在塑料手套袋中進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。塑料手套箱將用于控制燒杯的頂部空間。批量大小為200mL。1.用氮?dú)馀c空氣的混合物來制備手套袋以按照設(shè)計(jì)達(dá)到溶液中的氧含量。2.將夾套燒杯置于磁力攪拌器上。將其與冷卻器連接。將冷卻器設(shè)定為所需設(shè)定點(diǎn)。3.向燒杯中添加200mLSWFI。使其平衡。測量溫度和氧含量。當(dāng)其達(dá)到所需條件時，添加精確稱量的API且混合直到溶解。必要時使用刮刀輔助溶解。對于pH調(diào)節(jié)來說，使用4mL0.1NNaOH或0.1NHCl和196mLWFI進(jìn)行制造。4.在完全溶解后，將約5.5mL溶液轉(zhuǎn)移到小瓶中且塞住小瓶。這些小瓶應(yīng)在適當(dāng)頂部空間條件下塞住。將小瓶置于適當(dāng)溫度條件下。5.在1小時、4小時、8小時、IO小時、12小時和24小時時對小瓶取樣。將樣品送去分析。將10、12和24樣品在-2(TC冷凍以供第二天進(jìn)行分析。6.在每一時間點(diǎn)下測量pH值且記錄溶液顏色。結(jié)果實(shí)驗(yàn)條件直接從燒杯取出l小時樣品。將隨后時間點(diǎn)的樣品收集于在袋氣氛中處理以模擬頂部空間條件的塞住小瓶中，隨后置于水浴或冰箱中以保持其中各自的溫度條件。進(jìn)行此操作以保持在實(shí)驗(yàn)室中的安全性。一次性塑料手套袋需要氮?dú)馀c空氣的混合物的恒定流動以保持頂部空間氧含量，其將在樣品中產(chǎn)生所需溶解氧(DO)含量。在每一時間點(diǎn)下測量樣品的pH值。濃度和降解性質(zhì)如上所述由HPLC來分析濃度和降解性質(zhì)。結(jié)果展示當(dāng)自所述工藝中移除氧且控制溫度時，可見極少降解。在較高溫度條件下，降解略微升高。這些其它研究的結(jié)果展示當(dāng)自所述工藝中移除氧時，可見極少降解(參看試驗(yàn)H、I和K-O)。在較高溫度條件下，降解略微升高。所研究的pH值范圍(7.7-8.2)對替加環(huán)素本體溶液的降解不具有任何顯著影響，然而，對于在pH8.2、8'C的溫度和2ppm溶解氧的樣品來說，與在pH7.7和類似溫度和溶解氧含量的溶液相比時，可見降解略微升高。24小時后的降解總量展示溶液中溫度與溶解氧含量之間的相互作用。不考慮本體溶液經(jīng)制備或保持的溫度，當(dāng)氧含量介于0與約0.4ppm之間時，發(fā)現(xiàn)降解組分的總量降到最低。對于從0.4ppm到1.2ppm的氧含量，降解產(chǎn)物的總量仍可降到最低，只要當(dāng)氧含量增加時本體溶液經(jīng)制備且保持的溫度降低4t:到2'C即可。如比較性試驗(yàn)A-G試驗(yàn)弁A:替加環(huán)素20mg/mL，(溫度2'C,pH8.2，氧-2.0mg/L)小時濃度(mg/mL)RRT隨-6330.12隨=5720.23隨-6010.50MW=5830.550.589-氨基0.64差向異構(gòu)體0.740.76MW=5570.78Mino1.64MW-556.1.67畫-5971.851.121.451.58總計(jì)119.639BRLBRLBRLBRL0.07BRL0.18BRLBRL0.10BRL0.06BRL0.06BRL0-47419.610BRLBRLBRL0.100.06BRL0.200.06BRL0.100.090.08BRL0.08BRL0.76819.473BRL0.07BRl_0.170.06BRL0.19BRLBRL0.100.140.07BRL0.07BRL0.861019.806BRL0.180.070.210.07BRL0.25BRL0,060.100.180.08BRL0.08BRL1.261219.9010.050.190.080.190.06BRL0.260.060.060.100.190.08BRL0.08BRL1.402419.504BRL0.340.150.280.07BRL0.230.060.080."0.290.14BRL0.09BRL1.86RRT為相對滯留(在柱色譜中)組分的凈滯留體積(時間)相對于在相同條件下的標(biāo)準(zhǔn)的比率。BRL意謂低于報(bào)導(dǎo)限度(意謂小于替加環(huán)素峰的0.05%)。試驗(yàn)^B:替加環(huán)素20mg/mL,(溫度8t:，pH8.2，氧-2.0mg/L)時間:小時)濃度(mg,ml)RRT0.09(MOMW-6330.12MW-5700.14MW=5720.230.36MW=6010.50MW=5830.550.589-氨基0.64差向，0,76MW-5570.78MW=5281.25Mino1.64MW:5鄰1.67MW-5971.852.251.45所有其它總計(jì)i19.149BRLBRl_BRLBRLBRLBRLBRL0.110.07BRL0.20BRLBRLBR1_0.100.140.08BRL0.07BRL0.75419.046BRLBRLBRLBRL0.15BRL0.080.200.06BRl_0.19BRLBR1_BRL0.050.250.07BRL0.07BRL_1.128■18.795BRLBRLBRL0.070.36BRL0.170.270.06BRL0.230.060.07BRL0.070.350.07BRL0.07BRL1.851019.1440.100.100.14BRL0.550.060.250.32BRLBRL0.22BRL0.070.080.110.290.09BRLBRLBRL2.381218.6680.120.140.21BRL0.620.060.270.29BRLBRL0.24BRL0.080."0.090.230.08BRL0.07BRL2.612417.7840.230.190.400.06"60.140.620.42BRL0.060.23O加0.160.250.110.500."0.120.060.195.36普J(rèn)4^;F^,.STJSa碎瞎沙s茶繁遂玲螄。試驗(yàn)井C:替加環(huán)素20mg/mL(溫度2t:，pH7.7，氧=2mg/L)<table>complextableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>試驗(yàn)弁D:替加環(huán)素20mg/mL,(溫度8'C，pH7.7,氧-2.0mg/L)<table>complextableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table><table>complextableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table><tablecomplextableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>試驗(yàn)#1:替加環(huán)素20mg/mL，(溫度5'C，pH7.9，氧-1.0mg/L)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table><table>complextableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table><table>complextableseeoriginalpage15</column></row><table><table>complextableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>權(quán)利要求1.一種制備具有少于0.9％的總降解物呈可重構(gòu)粉末的替加環(huán)素(tigecycline)的制造方法，其包括以下步驟a.將WFI水中的氧含量降低且保持在小于或等于0.5ppm，同時將溫度保持在約2℃至約8℃；b.在保持所述溫度和氧含量的同時，在步驟a的所述水中形成濃度為約10mg/ml至50mg/ml的替加環(huán)素溶液；c.用步驟b的所述溶液填充小瓶；d.將步驟c的所述溶液凍干以在小瓶中形成25mg至150mg的可重構(gòu)粉末；e.在氮?dú)庀旅芊馑鲂∑俊?.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制造方法，其中在所述方法的步驟b中的所述替加環(huán)素溶液具有約20mg/ml的濃度。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制造方法，其中在所述方法的步驟d中，在所述小瓶中有50mg至150mg可重構(gòu)粉末。4.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一權(quán)利要求所述的方法，其中在步驟b中，替加環(huán)素于水中的溶液等于或大于80L。5.根據(jù)權(quán)利要求1至4中任一權(quán)利要求所述的方法，其中通過用氮?dú)鈬娚涫共襟Ea中水中的氧含量為0.5ppm或更小。6.根據(jù)權(quán)利要求1至4中任一權(quán)利要求所述的方法，其中通過用氮?dú)鈬娚涫共襟Ea中水中的氧含量為約0.4ppm或更小。7.根據(jù)權(quán)利要求1至4中任一權(quán)利要求所述的方法，其中通過用氮?dú)鈬娚涫共襟Ea中水中的氧含量為約0.1ppm或更小。8.根據(jù)權(quán)利要求1至7中任一權(quán)利要求所述的方法，其中在靜脈內(nèi)投與之前可用于重構(gòu)的替加環(huán)素粉末具有至少18個月的保存期。9.一種根據(jù)權(quán)利要求1的方法制造的凍干替加環(huán)素粉末，其中所述替加環(huán)素粉末具有實(shí)質(zhì)上如圖l所示的反相HPLC洗提曲線。10.—種產(chǎn)品，其由權(quán)利要求1至8中任一權(quán)利要求所述的方法所制造。全文摘要本文中揭示一種用于制備適于靜脈內(nèi)輸注的替加環(huán)素(tigecycline)的制造方法。文檔編號A61K9/19GK101198315SQ200680021384公開日2008年6月11日申請日期2006年6月16日優(yōu)先權(quán)日2005年6月16日發(fā)明者古爾穆克·查納納,多米尼克·文圖拉,理查德·桑德斯,邁赫迪·B·福齊申請人:惠氏公司