專利名稱：用于治療或預(yù)防癌癥的方法和組合物的制作方法
本申請要求2005年4月15日提交的美國臨時(shí)專利申請?zhí)?0/671,654的權(quán)益，其全文在此并入作為參考。
發(fā)明領(lǐng)域 本發(fā)明涉及用于治療或預(yù)防癌癥的組合物和方法。

背景技術(shù)：
胰島素樣生長因子，又稱生長調(diào)節(jié)素，包括胰島素樣生長因子-I(IGF-I)和胰島素樣生長因子-II(IGF-II)(Klapper，等，(1983)Endocrinol.1122215和Rinderknecht，等，(1978)Febs.Lett.89283)。這些生長因子通過與稱為胰島素樣生長因子-1受體(IGF1R或IGFR1)的共同受體結(jié)合(Sepp-Lorenzino，(1998)Breast Cancer Research and Treatment 47235)，而對包括腫瘤細(xì)胞在內(nèi)的許多細(xì)胞類型發(fā)揮促有絲分裂作用(Macaulay，(1992)Br.J.Cancer 65311)。IGFs與IGF 1R的相互作用可通過觸發(fā)受體上酪氨酸殘基的自磷酸化，從而激活受體(Butler，等，(1998)Comparative Biochemistry and Physiology 12119)。IGF1R一旦激活，就會反過來磷酸化細(xì)胞內(nèi)靶標(biāo)，從而激活細(xì)胞信號傳導(dǎo)通路。這種受體激活作用對于刺激腫瘤細(xì)胞生長和存活是必需的。因此，抑制IGF1R的活性是治療或預(yù)防人類癌癥和其他增生性疾病的一種有價(jià)值的潛在方法。
因此，對于治療或預(yù)防某些癌癥，抑制IGF1R的療法是有用的。對于治療或預(yù)防癌癥，抗-IGF 1R抗體是有用的療法。本領(lǐng)域已知幾種抗-IGF1R抗體(參見如WO 03/100008；WO 2002/53596；WO 04/71529；WO03/106621；US2003/235582；WO 04/83248；WO 03/59951；WO 04/87756或WO 2005/16970)。在本領(lǐng)域中還知道其他小分子IGF1R抑制劑。
盡管本領(lǐng)域已知的IGF1R抑制劑可用于治療或預(yù)防某些癌癥，但在本領(lǐng)域中仍然需要用于治療或預(yù)防其他癌癥例如成神經(jīng)細(xì)胞瘤、骨肉瘤、橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤和小兒癌癥的治療組合物或方法。
發(fā)明概述 本發(fā)明通過提供在治療或預(yù)防多種癌癥方面具有高效，在治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌和其他小兒癌癥方面特別有效的IGF1R抑制劑及其組合解決了該需要。
本發(fā)明提供了一種用于治療或預(yù)防受治療者醫(yī)學(xué)病癥的方法，所述醫(yī)學(xué)病癥選自成神經(jīng)細(xì)胞瘤、橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、胰腺癌和小兒癌癥，包括施用治療有效量的一種或多種IGF1R抑制劑或其藥物組合物于受治療者。在一個(gè)實(shí)施方案中，IGF1R抑制劑選自

和特異性結(jié)合人 IGF1R的分離的抗體。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體包含 (a)包含SEQ ID NO2的第20-128位氨基酸的輕鏈可變區(qū)和包含SEQ ID NO10或12的第20-137位氨基酸的重鏈可變區(qū)；(b)包含SEQID NO4的第20-128位氨基酸的輕鏈可變區(qū)和包含SEQ ID NO10或12的第20-137位氨基酸的重鏈可變區(qū)；(c)包含SEQ ID NO6的第20-128位氨基酸的輕鏈可變區(qū)和包含SEQ ID NO10或12的第20-137位氨基酸的重鏈可變區(qū)；(d)包含SEQ ID NO8的第20-128位氨基酸的輕鏈可變區(qū)和包含SEQ ID NO10或12的第20-137位氨基酸的重鏈可變區(qū)；或在此所列的任何其他IGF 1R抑制劑，例如，在以下“IGF 1R抑制劑”一節(jié)中所列的。在一個(gè)實(shí)施方案中，IGF1R抑制劑與一種或多種額外的抗癌化學(xué)治療劑或其藥物組合物聯(lián)合給藥。在一個(gè)實(shí)施方案中，額外的抗癌化學(xué)治療劑選自替尼泊苷

施鉑錠

卡鉑

依托泊苷

多柔比星

其任何脂質(zhì)體劑型例如Caelyx或

環(huán)磷酰胺

13-順式-視黃酸

異環(huán)磷酰胺

吉西他濱

伊立替康


長春新堿

更生霉素

氨甲蝶呤

和在此所列的任何其他化學(xué)治療劑，例如，在以下“額外的化學(xué)治療劑”一節(jié)中所列的。在一個(gè)實(shí)施方案中，在此所列的任何抗-IGF1R抗體的劑量在約1-20mg/kg體重或約40-1000mg/m2范圍內(nèi)。在一個(gè)實(shí)施方案中，IGF 1R抑制劑與額外的抗癌治療劑同時(shí)給藥。在一個(gè)實(shí)施方案中，IGF1R抑制劑與額外的抗癌治療劑不同時(shí)給藥。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體包含IgG恒定區(qū)。在一個(gè)實(shí)施方案中，受治療者為人(如兒童)。在一個(gè)實(shí)施方案中，IGF1R抑制劑與抗癌治療操作聯(lián)合施用。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗癌治療操作為外科腫瘤切除術(shù)和/或抗癌放射治療。
發(fā)明詳述 本發(fā)明包括用于治療或預(yù)防癌癥的組合物和方法，所述癌癥包括成神經(jīng)細(xì)胞瘤、橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤和小兒癌癥。可通過施用IGF1R抑制劑例如抗-IGF1R抗體治療或預(yù)防癌癥?？贵w可與額外的化學(xué)治療劑例如抗癌化學(xué)治療劑如在此所列的任何一種抗癌化學(xué)治療劑聯(lián)合給藥。
IGF1R抑制劑 術(shù)語“IGF1R抑制劑”或“IGF1R拮抗劑”等包括降低IGF1R表達(dá)、配體結(jié)合(如與IGF-1和/或IGF-2結(jié)合)、激酶活性(如自磷酸化活性)或任何其他生物活性(如不依賴貼壁細(xì)胞生長的介導(dǎo))以及降低為管理人員(例如研究人員、醫(yī)生或獸醫(yī))所尋求的、引起組織、系統(tǒng)、受治療者或患者生物學(xué)或醫(yī)學(xué)反應(yīng)的磷酸-IRS-1水平的任何物質(zhì)，所述磷酸-IRS-1水平降低包括任何可測的癌癥(如腫瘤生長)的病征、癥狀和/或臨床標(biāo)記的緩解和/或任何程度的癌癥(如成神經(jīng)細(xì)胞瘤橫紋肌肉瘤維耳姆斯瘤、骨肉瘤或小兒癌癥)轉(zhuǎn)移進(jìn)展的預(yù)防、減緩或中斷。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，在根據(jù)本發(fā)明的方法中可施用于患者的IGF1R抑制劑為任何特異性結(jié)合人胰島素樣生長因子-1受體(如IGF1R)的分離的抗體或其抗原結(jié)合片段(如單克隆抗體(如完整的人單克隆抗體)、多克隆抗體、雙特異性抗體、Fab抗體片段、F(ab)2抗體片段、Fv抗體片段(如VH或VL)、單鏈Fv抗體片段、dsFv抗體片段、人源化抗體、嵌合抗體或抗獨(dú)特型抗體)，例如披露于Burtrum等CancerResearch 638912-8921(2003)；法國專利申請F(tuán)R2834990，F(xiàn)R2834991和FR2834900以及PCT申請公開號WO 03/100008；WO 03/59951；WO04/71529；WO 03/106621；WO 04/83248；WO 04/87756，WO 05/16970；和WO 02/53596任何一篇中的任何一種抗體或其抗原結(jié)合片段。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，在根據(jù)本發(fā)明的方法中施用于患者的IGF1R抑制劑為包含成熟的19D12/15H12輕鏈-C、D、E或F和成熟的19D12/15H12重鏈-A或B的分離的抗胰島素樣生長因子-1受體(IGF1R)抗體。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，在根據(jù)本發(fā)明的方法中施用于患者的IGF1R抑制劑為特異性結(jié)合IGF1R的分離的抗體，其包含19D12/15H12輕鏈-C、D、E或F和/或19D12/15H12重鏈-A或B的一個(gè)或多個(gè)互補(bǔ)決定區(qū)(CDRs)(如所有的3個(gè)輕鏈CDRs以及所有的3個(gè)重鏈CDRs)。
本發(fā)明某些抗體鏈的氨基酸和核苷酸序列如下所示。打點(diǎn)下劃線字體表示信號肽。實(shí)線下劃線字體表示CDRs。無格式字體表示構(gòu)架區(qū)。成熟片段缺少信號肽。
修飾的19D12/15H12輕鏈-C(SEQ ID NO1)


GAA ATT GTG CTG ACT CAG AGC CCA GAC TCT CTG TCT GTG ACT CCA GGC GAG AGA GTC ACC ATC ACC TGC CGG GCC AGT CAG AGC ATT GGT AGT AGC TTA CAC TGG TAC CAG CAG AAA CCA GGT CAG TCT CCA AAG CTT CTC ATC AAG TAT GCA TCC CAG TCC CTC TCA GGG GTC CCC TCG AGG TTC AGT GGC AGT GGA TCT GGG ACA GAT TTC ACC CTC ACC ATC AGT AGC CTC GAG GCT GAA GAT GCT GCA GCG TAT TAC TGT CAT CAG AGT AGT CGT TTA CCT CAC ACT TTC GGC CAA GGG ACC AAG GTG GAG ATC AAA CGT ACG (SEQ ID NO2)


E IVL T Q SP DS L SV TP G E R VTI T CR ASQ SI G SS L H W YQQ K PG QSP KL L IK Y A S QSL S GV PSR FS G SG S G T DFT L TI SSL EA E DA A A Y YCH Q SS RLP HT F GQ G T K VEI K RT 修飾的19D12/15H12輕鏈-D(SEQ ID NO3)


GAA ATT GTG CTG ACT CAG AGC CCA GAC TCT CTG TCT GTG ACT CCA GGC GAG AGA GTC ACC ATC ACC TGC CGG GCC AGT CAG AGC ATT GGT AGT AGC TTA CAC TGG TAC CAG CAG AAA CCA GGT CAG TCT CCA AAG CTT CTC ATC AAG TAT GCA TCC CAG TCC CTC TCA GGG GTC CCC TCG AGG TTC AGT GGC AGT GGA TCT GGG ACA GAT TTC ACC CTC ACC ATC AGT AGC CTC GAG GCT GAA GAT TTC GCA GTG TAT TAC TGT CAT CAG AGT AGT CGT TTA CCT CAC ACT TTC GGC CAA GGG ACC AAG GTG GAG ATC AAA CGT ACG (SEQ ID NO4)


E IVL T Q SP D SL SV TP GE R VTI T C RA S QS IG SS LH W YQQ K P GQ S PK LL IK YA S QSL S G VP S RF SG SG SG T DFT L T IS S LE AE DF AV Y YCH Q S SR L PH TF GQ GT K VEI K R T 修飾的19D12/15H12輕鏈-E(SEQ ID NO5)


GAA ATT GTG CTG ACT CAG AGC CCA GGT ACC CTG TCT GTG TCT CCA GGC GAG AGA GCC ACC CTC TCC TGC CGG GCC AGT CAG AGC ATT GGT AGT AGC TTA CAC TGG TAC CAG CAG AAA CCA GGT CAG GCT CCA AGG CTT CTC ATC AAG TAT GCA TCC CAG TCC CTC TCA GGG ATC CCC GAT AGG TTC AGT GGC AGT GGA TCT GGG ACA GAT TTC ACC CTC ACC ATC AGT AGA CTG GAG CCT GAA GAT GCT GCA GCG TAT TAC TGT CAT CAG AGT AGT CGT TTA CCT CAC ACT TTC GGC CAA GGG ACC AAG GTG GAG ATC AAA CGT ACA (SEQ ID NO6)


EI VL T Q SPG TL S V SP G E RA TL S C RAS QS I G SS L H WY QQ K P GQA PR L L IK Y A SQ SL S G IPD RF S G SG S G TD FT L T ISR LE P E DA A A YY CH Q S SRL PH T F GQ G T KV EI K R T 修飾的19D12/15H12輕鏈-F(SEQ ID NO7)


GAA ATT GTG CTG ACT CAG AGC CCA GGT ACC CTG TCT GTG TCT CCA GGC GAG AGA GCC ACC CTC TCC TGC CGG GCC AGT CAG AGC ATT GGT AGT AGC TTA CAC TGG TAC CAG CAG AAA CCA GGT CAG GCT CCA AGG CTT CTC ATC AAG TAT GCA TCC CAG TCC CTC TCA GGG ATC CCC GAT AGG TTC AGT GGC AGT GGA TCT GGG ACA GAT TTC ACC CTC ACC ATC AGT AGA CTG GAG CCT GAA GAT TTC GCA GTG TAT TAC TGT CAT CAG AGT AGT CGT TTA CCT CAC ACT TTC GGC CAA GGG ACC AAG GTG GAG ATC AAA CGT ACA (SEQ ID NO8)


EI VL T Q SP GT LS V SP G E RR AT L S CR AS QS I GS L H WY QQ K P GQ AP RL L IK Y A SQ SL S G IP DR FS G SG S G TD FT L T IS RL EP E DF A V YY CH Q S SR LP HT F GQ G T KV EI K R T 修飾的19D 12/15H12重鏈-A(SEQ ID NO9)


GAG GTT CAG CTG GTG CAG TCT GGG GGA GGC TTG GTA AAG CCT GGG GGG TCC CTG AGA CTC TCC TGT GCA GCC TCT GGA TTC ACC TTC AGT AGC TTT GCT ATG CAC TGG GTT CGC CAG GCT CCA GGA AAA GGT CTG GAG TGG ATA TCA GTT ATT GAT ACT CGT GGT GCC ACA TAC TAT GCA GAC TCC GTG AAG GGC CGA TTC ACC ATC TCC AGA GAC AAT GCC AAG AAC TCC TTG TAT CTT CAA ATG AAC AGC CTG AGA GCC GAG GAC ACT GCT GTG TAT TAC TGT GCA AGA CTG GGG AAC TTC TAC TAC GGT ATG GAC GTC TGG GGC CAA GGG ACC ACG GTC ACC GTC TCC TCA (SEQ ID NO10)


Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Ser Val Ile Asp Thr Arg Gly Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Leu Gly Asn Phe Tyr TyrGly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 修飾的19D12/15H12重鏈-B(SEQ ID NO11)


GAG GTT CAG CTG GTG CAG TCT GGG GGA GGC TTG GTA CAG CCC GGG GGG TCC CTG AGA CTC TCC TGT GCA GCC TCT GGA TTC ACC TTC AGT AGC TTT GCT ATG CAC TGG GTT CGC CAG GCT CCA GGA AAA GGT CTG GAG TGG ATA TCA GTT ATT GAT ACT CGT GGT GCC ACA TAC TAT GCA GAC TCC GTG AAG GGC CGA TTC ACC ATC TCC AGA GAC AAT GCC AAG AAC TCC TTG TAT CTT CAA ATG AAC AGC CTG AGA GCC GAG GAC ACT GCT GTG TAT TAC TGT GCA AGA CTG GGG AAC TTC TAC TAC GGT ATG GAC GTC TGG GGC CAA GGG ACC ACG GTC ACC GTC TCC TCA (SEQ ID NO12)


Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Ser Val Ile Asp Thr Arg Gly Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Leu Gly Asn Phe Tyr Tyr GlY Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 包含可操作地連接CMV啟動子的15H12/19D 12輕鏈和重鏈的質(zhì)粒已于2003年5月21日保藏在美國典型培養(yǎng)物保藏中心(ATCC)；10801University Boulevard；Manassas，Virginia 20110-2209。質(zhì)粒的保藏名稱和ATCC保藏編號列于如下 CMV啟動子-15H12/19D12LCC(κ)- 保藏名稱“15H12/19D12LCC(κ)”； ATCC保藏編號PTA-5217 CMV啟動子-15H12/19D12LCD(κ)- 保藏名稱“15H12/19D12LCD(κ)”； ATCC保藏編號PTA-5218 CMV啟動子-15H12/19D12LCE(κ)- 保藏名稱“15H12/19D12LCE(κ)”； ATCC保藏編號PTA-5219 CMV啟動子-15H12/19D12LCF(κ)- 保藏名稱“15H12/19D12LCF(κ)”； ATCC保藏編號PTA-5220 CMV啟動子-15H12/19D12HCA(γ4)- 保藏名稱“15H 12/19D12HCA(γ4)” ATCC保藏編號PTA-5214 CMV啟動子-15H12/19D12HCB(γ4)- 保藏名稱“15H12/19D12HCB(γ4)” ATCC保藏編號PTA-5215 CMV啟動子-15H12/19D12HCA(γ1)- 保藏名稱“15H12/19D12HCA(γ1)”； ATCC保藏編號PTA-5216 一旦授予專利，對使用保藏在ATCC中的質(zhì)粒的所有限制將會解除。本發(fā)明包括包含抗-IGF1R抗體及其抗原結(jié)合片段的方法和組合物(如任何在此所披露的)，所述抗-IGF1R抗體及其抗原結(jié)合片段包含任何位于ATCC保藏的任何前述質(zhì)粒中的重免疫球蛋白輕鏈和/或重鏈或其成熟片段。
在一個(gè)實(shí)施方案中，“特異性”結(jié)合人IGF 1R的抗體的結(jié)合具有約10-8M或10-7M或更低的Kd；或在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，具有通過Biacore測定法測定的約1.28×10-10M或更低的Kd，或具有通過KinExA測定法測定的約2.05X10-12或更低的Kd。在另一個(gè)實(shí)施方案中，“特異性”結(jié)合人IGF1R的抗體排他性地與人IGF1R結(jié)合而不與其他蛋白結(jié)合。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，在根據(jù)本發(fā)明的方法中施用于患者的IGF 1R抑制劑包含任何列于公布的國際申請?zhí)朩O 2002/53596中的免疫球蛋白輕鏈和/或免疫球蛋白重鏈，其全文在此并入作為參考。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體包含含有選自列于WO 2002/53596中的SEQ IDNOs2、6、10、14、18、22、47和51的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和/或含有選自列于WO 2002/53596中的SEQ ID NOs4、8、12、16、20、24、45和49的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體包含選自WO 2002/53596中的抗體2.12.1；2.13.2；2.14.3；3.1.1；4.9.2和4.17.3的重鏈和/或輕鏈。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，在根據(jù)本發(fā)明的方法中能施用于患者的IGF1R抑制劑包含任何列于公布的國際申請?zhí)朩O 2003/59951中的免疫球蛋白輕鏈和/或免疫球蛋白重鏈，其全文在此并入作為參考。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體包含含有選自列于WO 2003/59951中的SEQ IDNOs54、61和65的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和/或含有選自列于WO2003/59951中的SEQ ID NOs69、75、79和83的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，在根據(jù)本發(fā)明的方法中能施用于患者的IGF 1R抑制劑包含任何列于公布的國際申請?zhí)朩O 2004/83248中的免疫球蛋白輕鏈和/或免疫球蛋白重鏈，其全文在此并入作為參考。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體包含含有選自列于WO 2004/83248中的SEQ IDNOs109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、141和143的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和/或含有選自列于WO 2004/83248中的SEQ ID NOs108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140和142的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體包含選自WO 2004/83248中的PINT-6A1；PINT-7A2；PINT-7A4；PINT-7A5；PINT-7A6；PINT-8A1；PINT-9A2；PINT-11A1；PINT-11A2；PINT-11A3；PINT-11A4；PINT-11A5；PINT-11A7；PINT-12A1；PINT-12A2；PINT-12A3；PINT-12A4和PINT-12A5的輕鏈和/或重鏈。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，在根據(jù)本發(fā)明的方法中能施用于患者的IGF 1R抑制劑包含任何列于公布的國際申請?zhí)朩O 2003/106621中的免疫球蛋白輕鏈和/或免疫球蛋白重鏈，其全文在此并入作為參考。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體包含含有選自列于WO 2003/106621中的SEQ ID NOs8-12、58-69、82-86、90、94、96、98的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和/或含有選自列于WO 2003/106621中的SEQ ID NOs7、13、70-81、87、88、92的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，在根據(jù)本發(fā)明的方法中能施用于患者的IGF1R抑制劑包含任何列于公布的國際申請?zhí)朩O 2004/87756中的免疫球蛋白輕鏈和/或免疫球蛋白重鏈，其全文在此并入作為參考。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體包含含有列于WO 2004/87756中的SEQ IDNO2的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和/或含有列于WO 2004/87756中的SEQ ID NO1的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，在根據(jù)本發(fā)明的方法中能施用于患者的IGF 1R抑制劑包含任何列于公布的國際申請?zhí)朩O 2005/16970中的免疫球蛋白輕鏈和/或免疫球蛋白重鏈，其全文在此并入作為參考。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體包含含有列于WO 2005/16970中的SEQ IDNO6或10的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和/或含有列于WO 2005/16970中的SEQ ID NO2的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗-IGF1R抗體或其抗原結(jié)合片段包含含有選自如下的氨基酸序列的免疫球蛋白重鏈可變區(qū) 1 grlgqawrsl rlscaasgft fsdyymswir qapgkglewv syisssgstr 51 dyadsvkgrf tisrdnakns lylqmnslra edtavyycvr dgvettfyyy 101 yygmdvwgqg ttvtvssast kgpsvfplap csrstsesta algclvkdyf 151 pepvtvswns galtsgvhtf psca (SEQ ID NO13) 1 vqllesgggl vqpggslrls ctasgftfss yamnwvrqap gkglewvsai 51 sgsggttfya dsvkgrftis rdnsrttlyl qmnslraedt avyycakdlg 101 wsdsyyyyyg mdvwgqgttv tvss (SEQ ID NO14) 1 gpglvkpset lsltctvsgq sisnyywswi rqpagkglew igriytsgsp 51 nynpslksrv tmsvdtsknq fslklnsvta adtavyycav tifgvviifd 101 ywgqgtlvtv ss (SEQ ID NO15) 1 evqllesggg lvqpggslrl scaasgftfs syamswvrqa pgkglewvsa 51 isgsggityy adsvkgrfti srdnskntly lqmnslraed tavyycakdl 101 gygdfyyyyy gmdvwgqgtt vtvss (SEQ ID NO16)1 pglvkpsetl sltctvsggs issyywswir qppgkglewi gyiyysgstn51 ynpslksrvt isvdtsknqf slklssvtaa dtavyycart ysssfyyygm101 dvwgqgttvt vss (SEQ ID NO17) 1 evqllesggg lvqpggslrl scaasgftfs syamswvrqa pgkglewvsg 51 itgsggstyy adsvkgrfti srdnskntly lqmnslraed tavyycakdp 101 gttvimswfd pwgqgtlvtv ss (SEQ ID NO18) 在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗-IGF1R抗體或其抗原結(jié)合片段包含含有選自如下的氨基酸序列的免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，抗-IGF1R抗體包含免疫球蛋白輕鏈、或其成熟片段(即缺少信號序列)、或其可變區(qū)，包含氨基酸序列

或
(SEQ ID NO28)。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，信號序列為SEQ ID NOs25-28的第1-22位氨基酸。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，成熟的可變區(qū)為下劃線的。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，CDRs為粗體/斜體字排字的。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗-IGF1R抗體或其抗原結(jié)合片段包含如上所述的一個(gè)或多個(gè)CDRs(如3個(gè)輕鏈CDRS)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，抗-IGF1R抗體包含免疫球蛋白重鏈或其成熟片段(即缺少信號序列)、或其可變區(qū)，包含氨基酸序列

或
(SEQ ID NO32)。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，信號序列為SEQ ID NOs29-32的第1-19位氨基酸。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，成熟可變區(qū)為下劃線的。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗-IGF1R抗體或其抗原結(jié)合片段包含如上所述的一個(gè)或多個(gè)CDRs(如3個(gè)輕鏈CDRS)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，抗-IGF1R抗體包含分別與含有SEQID NOs13-18任一的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)配對的含有SEQ ID NOs19-24任一的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，抗-IGF 1R抗體包含與含有SEQ ID NOs29或30任一的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)配對的含有SEQ ID NOs25或26任一的氨基酸序列的成熟輕鏈可變區(qū)。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，抗-IGF1R抗體包含與含有SEQID NOs31或32任一的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)配對的含有SEQ IDNOs27或28任一的氨基酸序列的成熟輕鏈可變區(qū)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗-IGF1R抗體或其抗原結(jié)合片段包含2.12.1fx的免疫球蛋白重鏈(SEQ ID NO33)或成熟片段或可變區(qū)(在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，前導(dǎo)序列是下劃線的；在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，CDRs為粗體/斜體字排字的)
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗-IGF 1R抗體或其抗原結(jié)合片段包含2.12.1fx(SEQ ID NO33)的第20-470位氨基酸。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗-IGF 1R抗體或其抗原結(jié)合片段包含2.12.1fx的成熟免疫球蛋白重鏈可變區(qū)(SEQ ID NO33的第20-144位氨基酸；SEQ ID NO34) q vqlvesgggl vkpggslrls caasgftfsd yymswirqap gkglewvsyi sssgstrdya dsvkgrftis rdnaknslyl qmnslraedt avyycardgv ettfyyyyyg mdvwgqgttv tvss 在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗-IGF1R抗體或其抗原結(jié)合片段包含2.12.1fx的免疫球蛋白輕鏈(SEQ ID NO35)或成熟片段或可變區(qū)(在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中前導(dǎo)序列是下劃線的；在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，CDRs為粗體/斜體字排字的)
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗-IGF1R抗體或其抗原結(jié)合片段包含2.12.1fx(SEQ ID NO35)的第23-236位氨基酸。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗-IGF1R抗體或其抗原結(jié)合片段包含2.12.1fx的成熟免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)(SEQ ID NO35的第23-130位氨基酸；SEQ ID NO36) diqmtqsp sslsasvgdr vtitcrasqd irrdlgwyqq kpgkapkrli yaasrlqsgv psrfsgsgsg teftltissl qpedfatyyc lqhnnyprtf gqgtkveikr 在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，抗-IGF1R抗體或其抗原結(jié)合片段包含或由包含或由2.12.1fx(SEQ ID NO35)的第23-236位氨基酸組成的免疫球蛋白鏈輕鏈和包含或由2.12.1fx(SEQ ID NO33)的第20-470氨基酸位組成的免疫球蛋白鏈重鏈組成。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，抗-IGF1R抗體或其抗原結(jié)合片段包含如上所述的一個(gè)或多個(gè)2.12.1fx CDRs(如3個(gè)輕鏈CDRs和/或3個(gè)重鏈CDRs)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗-IGF1R抗體或其抗原結(jié)合片段包含人源化的7C10免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)；變型(version)1(SEQID NO37) 1 dvvmtqspls lpvtpgepas iscrssqsiv hsngntylqw ylqkpgqspq 51 lliykvsnrl ygvpdrfsgs gsgtdftlki srveaedvgv yycfqgshvp 101 wtfgqgtkve ik 在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗-IGF1R抗體或其抗原結(jié)合片段包含人源化的7C 10免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)；變型2(SEQ ID NO38) 1 divmtqspls 1pvtpgepas iscrssqsiv hsngntylqw ylqkpgqspq 51 lliykvsnrl ygvpdrfsgs gsgtdftlki srveaedvgv yycfqgshvp 101 wtfgqgtkve ik 在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗-IGF 1R抗體或其抗原結(jié)合片段包含人源化的7C10免疫球蛋白重鏈可變區(qū)；變型1(SEQ ID NO39) 1 qvqlqesgpg lvkpsetlsl tctvsgysit ggylwnwirq ppgkglewmg 51 yisydgtnny kpslkdriti srdtsknqfs lklssvtaad tavyycaryg 101 rvffdywgqq tlvtvss 在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗-IGF1R抗體或其抗原結(jié)合片段包含人源化的7C10免疫球蛋白重鏈可變區(qū)；變型2(SEQ ID NO40) 1 qvqlqesgpg lvkpsetlsl tctvsgysit ggylwnwirq ppgkglewig 51 yisydgtnny kpslkdrvti srdtsknqfs lklssvtaad tavyycaryg 101 rvffdywgqg tlvtvss 在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗-IGF1R抗體或其抗原結(jié)合片段包含人源化的7C10免疫球蛋白重鏈可變區(qū)；變型3(SEQ ID NO41) 1 qvqlqesgpg lvkpsetlsl tctvsgysis ggylwnwirq ppgkglewig 51 yisydgtnny kpslkdrvti svdtsknqfs lklssvtaad tavyycaryg 101 rvffdywgqg t1vtvss 在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗-IGF1R抗體或其抗原結(jié)合片段包含A12免疫球蛋白重鏈可變區(qū)(SEQ ID NO42) 1 evqlvqsgae vkkpgssvkv sckasggtfs syaiswvrqa pgqglewmgg 51 iipifgtany aqkfqgrvti tadkststay melsslrsed tavyycarap 101 lrflewstqd hyyyyymdvw gkgttvtvss 在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗-IGF 1R抗體或其抗原結(jié)合片段包含A12免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)(SEQ ID NO43) 1 sseltqdpav svalgqtvri tcqgdslrsy yaswyqqkpg qapvlviygk 51 nnrpsgipdr fsgsssgnta sltitgaqaedeadyycnsr dnsdnrlifg 101 ggtkltvls 或 (SEQ ID NO105) 1 sseltqdpav svalgqtvri tcqgdslrsy yatwyqqkpg qapilviyge 51 nkrpsgipdr fsgsssgnta sltitgaqae deadyycksr dgsgqhlvfg 101 ggtkltvlg 在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗-IGF1R抗體或其抗原結(jié)合片段包含1A免疫球蛋白重鏈可變區(qū)(SEQ ID NO44) 1 evqlvqsggg 1vhpggslrl scagsgftfr nyamywvrqa pgkglewvsa 51 igsgggtyya dsvkgrftis rdnaknslyl qmnslraedm avyycarapn 101 wgsdafdiwg qgtmvtvss ；任選地包括一個(gè)或多個(gè)如下突變R30、S30、N31、S31、Y94、H94、D104、E104。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗-IGF1R抗體或其抗原結(jié)合片段包含1A免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)(SEQ ID NO45) 1 diqmtqspss lsasvgdrvt itcrasqgis swlawyqqkp ekapksliya 51 asslqsqvps rfsgsgsgtd ftltisslqp edfatyycqq ynsypptfgp 101 gtkvdik ；任選地包括一個(gè)或多個(gè)如下突變P96、I96、P100、Q 100、R103、 K103、V104、L104、D105、E105。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗-IGF1R抗體或其抗原結(jié)合片段包含單鏈抗體(fv)8A1(SEQ ID NO46) 1 evqlvqsgae vkkpgeslti sckgpgynff nywigwvrqm pgkglewmgi 51 iyptdsdtry spsfqgqvti svdksistay lqwsslkasd tamyycarsi 101 rycpggrcys gyygmdvwgq gtmvtvssgg ggsggggsgg ggsseltqdp 151 avsvalgqtv ritcqgdslr syyaswyqqk pgqapvlviy gknnrpsgip 201 drfsgsssgn tasltitgaq aedeadyycn srdssgnhvv fgggtkltvl 251 g 在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗-IGF1R抗體或其抗原結(jié)合片段包含單鏈抗體(fv)9A2(SEQ ID NO47) 1 qvqlvqsgae vrkpgasvkv scktsgytfr nydinwvrqa pgqglewmgr 51 isghygntdh aqkfqgrftm tkdtststay melrsltfdd tavyycarsq 101 wnvdywgrgt lvtvssgggg sggggsgggg salnfmltqp hsvsespgkt 151 vtisctrssg siasnyvqwy qqrpgssptt vifednrrps gvpdrfsgsi 201 dtssnsaslt isglktedea dyycqsfdst nlvvfgggtk vtvlg 在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗-IGF 1R抗體或其抗原結(jié)合片段包含單鏈抗體(fv)11A4(SEQ ID NO48) 1 evqllesggg lvqpggslrl scaasgftffs syamswvrqa pgkglewvsa 51 isgsggstyy adsvkgrfti srdnskntly lqmnslraed tavyycassp 101 yssrwysfdp wgqgtmvtvs sggggsgggg sggggsalsy eltqppsvsv 151 spgqtatitc sgddlgnkyv swyqqkpgqs pvlviyqdtk rpsgiperfs 201 gsnsgniatl tisgtqavde adyycqvwdt gtvvfgggtk ltvlg 在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗-IGF1R抗體或其抗原結(jié)合片段包含單鏈抗體(fv)7A4(SEQ ID NO49) 1 evqlvqsgae vkkpgeslti sckgsgynff nywigwvrqm pgkdlewmgi 51 iyptdsdtry spsfqgqvti svdksistay lqwsslkasd tamyycarsi 101 rycpggrcys gyygmdvwgq gtmvtvssgg gssggggsgg ggsseltqdp 151 avsvalgqtv ritcrgdslr nyyaswyqqk pgqapvlviy gknnrpsgip 201 drfsgsssgn tasltitgaq aedeadyycn srdssgnhmv fgggtkltvl 251 g 在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗-IGF 1R抗體或其抗原結(jié)合片段包含單鏈抗體(fv)11A1(SEQ ID NO50) 1 evqlvesggg vvqpgrslrl scaasgftfs dfamhwvrqi pgkglewlsg 51 lrhdgstayy agsvkgrfti srdnsrntvy lqmnslraed tatyycvtgs 101 gssgphafpv wgkgtlvtvs sggggsgggg sggggsalsy vltqppsasg 151 tpgqrvtisc sgsnsnigty tvnwfqqlpg tapklliysn nqrpsgvpdr 201 fsgsksgtsa slaisglqse deadyycaaw ddslngpvfg ggtkvtvlg 在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗-IGF 1R抗體或其抗原結(jié)合片段包含單鏈抗體(fv)7A6(SEQ ID NO51) 1 evqlvqsgae vkkpgeslti sckgsgynff nywigwvrqm pgkglewmgi 51 iyptdsdtry spsfqgqvti svdksistay lqwsslkasd tamyycarsi 101 rycpggrcys gyygmdvwgq gtlvtvssgg ggsggggsgg ggsseltqdp 151 avsvalgqtv ritcqgdslr syytnwfqqk pgqapllvvy aknkrpsgip 201 drfsgsssgn tasltitgaq aedeadyycn srdssgnhvv fgggtkltvl 251 g 在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗-IGF1R抗體或其抗原結(jié)合片段(如免疫球蛋白重鏈或輕鏈)包含一個(gè)或多個(gè)選自如下的互補(bǔ)決定區(qū)(CDR) sywmh(SEQ ID NO52)； einpsngrtnynekfkr(SEQ ID NO53)； grpdyygsskwyfdv(SEQ ID NO54)； rssqsivhsnvntyle(SEQ ID NO55)； kvsnrfs(SEQ ID NO56)；和 fqgshvppt(SEQ ID NO57)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗-IGF1R抗體或其抗原結(jié)合片段包含選自如下的免疫球蛋白重鏈可變區(qū)

和/或選自如下的免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)


本發(fā)明的范圍包括其中施用其中抗體的可變區(qū)與任何免疫球蛋白恒定區(qū)連接的抗胰島素樣生長因子受體-1(IGF1R)抗體于患者的方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，輕鏈可變區(qū)與κ鏈恒定區(qū)連接。在一個(gè)實(shí)施方案中，重鏈可變區(qū)與γ1、γ2、γ3或γ4鏈恒定區(qū)連接。在本發(fā)明的實(shí)施方案中，在此所列的任何免疫球蛋白可變區(qū)可與任何上述恒定區(qū)連接。
此外，本發(fā)明的范圍包括任何抗體或抗體片段，所述抗體或抗體片段包含任何通過Chothia等，J.Mol.Biol.186651-663(1985)；Novotny和Haber，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 824592-4596(1985)或Kabat，E.A.等，Sequences of Proteins of Immunological Interest，National Institutes ofHealth，Bethesda，Md.，(1987))中所列的任何方法鑒定的在此所列的任何免疫球蛋白輕鏈或免疫球蛋白重鏈的一個(gè)或多個(gè)CDRs(3個(gè)輕鏈CDRs和/或3個(gè)重鏈CDRs)和/或構(gòu)架區(qū)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，在此使用的術(shù)語“單克隆抗體”指從一群基本上同質(zhì)的抗體中所得到的抗體，即除了有可能天然發(fā)生的微量突變之外，包含此群抗體的單一抗體都是相同的。單克隆抗體是高度特異的，僅針對單一的抗原位點(diǎn)。單克隆抗體的優(yōu)勢在于它們能通過雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)來合成，基本上不會被其他免疫球蛋白所污染。修飾語“單克隆”表明了抗體作為一群基本上同質(zhì)的抗體中的一員的特性，而不解釋為需要用某種特定方法來產(chǎn)生抗體。如上所述，根據(jù)本發(fā)明所使用的單克隆抗體可用Kohler，等，(1975)Nature 256495首先描述的雜交瘤法制備。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，多克隆抗體是一種與一種或多種其他不相同的抗體一起產(chǎn)生的或在其存在之下產(chǎn)生的抗體。一般而言，多克隆抗體是在幾種產(chǎn)生不相同的抗體的其他B-淋巴細(xì)胞存在下，從某一B-淋巴細(xì)胞中產(chǎn)生的。多克隆抗體通常直接獲得自經(jīng)免疫接種的動物。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，雙特異性或雙功能抗體是一種具有兩個(gè)不同的重鏈/輕鏈對和兩個(gè)不同的結(jié)合位點(diǎn)的人工雜交抗體。雙特異性抗體克通過多種方法制備，包括雜交瘤融合或Fab′片段交聯(lián)。參見如Songsivilai，等，(1990)Clin.Exp.Immunol.79315-321，Kostelny，等，(1992)J Immunol.1481547-1553。此外，雙特異性抗體可形成為“雙抗體”(Holliger，等，(1993)PNAS USA 906444-6448)或“Janusins”(Traunecker，等，(1991)EMBO J.103655-3659和Traunecker，等，(1992)Int.J.Cancer Suppl.751-52)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，術(shù)語“完全人抗體”指一種僅含有人免疫球蛋白的蛋白序列的抗體。如果在小鼠、小鼠細(xì)胞或來源于小鼠細(xì)胞的雜交瘤中產(chǎn)生，全人抗體可含有小鼠的糖鏈。同樣地，“小鼠抗體”指一種僅含有小鼠免疫球蛋白序列的抗體。
本發(fā)明包括“嵌合抗體”，一種包含與來自另一種人或非人物種(如小鼠、馬、兔、狗、牛、雞)的抗體區(qū)(如恒定區(qū))融合或嵌合的本發(fā)明的可變區(qū)的抗體。這些抗體可用于在非人物種中調(diào)節(jié)IGF1R的表達(dá)或活性。
“單鏈Fv”或“sFv”抗體片段具有抗體的VH和VL區(qū)，其中這些區(qū)以單條多肽鏈形式存在。一般而言，sFv多肽在VH和VL區(qū)之間進(jìn)一步含有多肽接頭，該多肽接頭能使sFv形成抗原結(jié)合所需要的結(jié)構(gòu)。所描述的用于產(chǎn)生單鏈抗體的技術(shù)(U.S.專利號5,476,786；5,132,405和4,946,778)能適合用于產(chǎn)生抗-IGF1R-特異性單鏈抗體。對sFv的綜述參見Pluckthun in The Pharmacology of Monoclonal Antibodies，vol.113，Rosenburg和Moore編.Springer-Verlag，N.Y.，pp.269-315(1994)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，“二硫鍵穩(wěn)定的Fv片段”和“dsFv”指含有通過二硫鍵連接的重鏈可變區(qū)(VH)和輕鏈可變區(qū)(VL)的免疫球蛋白。
在本發(fā)明范圍內(nèi)的抗體的抗原結(jié)合片段還包括可通過例如胃蛋白酶對IgG酶切割所產(chǎn)生的F(ab)2片段。Fab片段可通過例如用二硫蘇糖醇或巰基乙胺還原F(ab)2來產(chǎn)生。Fab片段是通過二硫橋鍵與VH-CH1鏈連接的VL-CL鏈。F(ab)2片段是通過兩個(gè)二硫橋鍵依次連接的兩個(gè)Fab片段。F(ab)2分子的Fab部分包括二硫橋鍵位于其之間的Fc區(qū)部分。
Fv片段是VL或VH區(qū)。
取決于其重鏈恒定區(qū)的氨基酸序列，免疫球蛋白可以分為不同的類。至少有五大類免疫球蛋白IgA、IgD、IgE、IgG和IgM，其中的幾類可進(jìn)一步分為亞類(同種型)，如IgG-1、IgG-2、IgG-3和IgG-4；IgA-1和IgA-2。如在此所討論的，任何這樣的抗體或其抗原結(jié)合片段都落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
本發(fā)明的抗-IGF1R抗體還可與化學(xué)物部分綴合?；瘜W(xué)物部分尤其可以是聚合物、放射性核素或細(xì)胞毒素因子?；瘜W(xué)物部分優(yōu)選是增加抗體分子在受治療者體內(nèi)半衰期的聚合物。適合的聚合物包括但不限于聚乙二醇(PEG)(如具有2kDa、5kDa、10kDa、12kDa、20kDa、30kDa或40kDa分子量的PEG)、葡聚糖和單甲基聚乙二醇(mPEG)。Lee，等，(1999)(Bioconj.Chem.10973-981)披露了PEG綴合的單鏈抗體。Wen，等，(2001)(Bioconj.Chem.12545-553)披露了用連接有放射性金屬螯合劑(二亞乙基三胺五乙酸(DTPA))的PEG綴合抗體。
本發(fā)明的抗體和抗體片段還可綴合有標(biāo)記物，例如99Tc、90Y、111In、32P、14C、125I、3H、131I、11C、15O、13N、18F、35S、51Cr、57To、226Ra、60Co、59Fe、57Se、152Eu、67CU、217Ci、211At、212Pb、47Sc、109Pd、234Th和40K、157Gd、55Mn、52Tr和56Fe。
本發(fā)明的抗體和抗體片段還可與熒光或化學(xué)發(fā)光標(biāo)記綴合，包括熒光團(tuán)例如稀土螯合物、熒光素及其衍生物、羅丹明及其衍生物、異硫氰酸酯、藻紅蛋白、藻藍(lán)蛋白、別藻藍(lán)蛋白、鄰苯二醛、熒光胺、152Eu、丹酰、傘形酮、蟲熒光素、魯米諾標(biāo)記、異魯米諾標(biāo)記、芳香族吖啶酯標(biāo)記、咪唑標(biāo)記、吖啶鹽標(biāo)記、草酸酯標(biāo)記、水母發(fā)光蛋白標(biāo)記、2，3-二氫酞嗪二酮、生物素/抗生物素蛋白、自旋標(biāo)記合穩(wěn)定的自由基。
抗體和抗體片段還可與細(xì)胞毒素因子綴合，例如白喉毒素、綠膿假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa)外毒素A鏈、蓖麻毒素A鏈、相思豆毒蛋白A鏈、蒴蓮根毒素A鏈、α-八疊球菌、油桐(Aleurites fordii)蛋白及化合物(如脂肪酸)、石竹素蛋白、Phytoiacca americana蛋白PAPI、PAPII和PAP-S、苦瓜(momordica charantia)抑制物、瀉果素、巴豆毒素、肥皂草(saponaria officinalis)抑制物、絲林霉素(mitogellin)、局限曲菌素(restrictocin)、酚霉素和依諾霉素。
可以使用任何本領(lǐng)域已知的方法將本發(fā)明的抗體分子與各種部分綴合，包括Hunter，等，(1962)Nature 144945；David，等，(1974)Biochemistry 131014；Pain，等，(1981)J.Immunol.Meth.40219；和Nygren，J.，(1982)Histochem.and Cytochem.30407所描述的那些方法。用于綴合抗體的方法是常用的，本領(lǐng)域?qū)Υ朔浅Ｊ煜ぁ?br> 在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，IGF 1R抑制劑是BMS-577098

或AEW-541

或

通過施用這些抑制劑治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的方法落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，IGF 1R抑制劑是列于WO 03/48133中的任何一種嘧啶衍生物，例如包含核心結(jié)構(gòu)

通過施用這些抑制劑治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的方法落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，IGF1R抑制劑是列于WO 03/35614中的任何一種酪氨酸激酶抑制劑，例如包含核心結(jié)構(gòu)

(如


)。通過施用這些抑制劑治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的方法落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，IGF 1R抑制劑是列于WO 03/35615中的任何一種酪氨酸激酶抑制劑，例如包含核心結(jié)構(gòu)

通過施用這些抑制劑治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的方法落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，IGF 1R抑制劑是列于WO 03/35616中的任何一種酪氨酸激酶抑制劑，例如包含核心結(jié)構(gòu)

(如



)。通過施用這些抑制劑治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的方法落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，IGF1R抑制劑是列于WO 03/35619中的任何一種酪氨酸激酶抑制劑，例如包含核心結(jié)構(gòu)

通過施用這些抑制劑治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的方法落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，IGF1R抑制劑是還抑制如VEGF-2R、Kit、FLT3和/或PDGFR的多靶點(diǎn)激酶抑制劑，例如，SU-11248(如sunitinib malate)或Bay43-9006(sorafenib)。通過施用這些抑制劑治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的方法落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，IGF1R抑制劑是列于WO 03/24967中的任何一種化合物，例如包含核心結(jié)構(gòu)

通過施用這些抑制劑治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的方法落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，IGF1R抑制劑是列于WO 04/30625中的任何一種化合物，例如包含核心結(jié)構(gòu)

通過施用這些抑制劑治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的方法落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，IGF1R抑制劑是列于WO 04/30627中的任何一種化合物，例如包含核心結(jié)構(gòu)

通過施用這些抑制劑治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的方法落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，IGF1R抑制劑是列于WO 00/35455中的任何一種雜芳基-芳基脲，例如包含核心結(jié)構(gòu)

通過施用這些抑制劑治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的方法落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，IGF1R抑制劑是列于WO 03/27246中的任何一種肽。通過施用這些抑制劑治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的方法落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，IGF1R抑制劑是

或PCT申請公開號WO02/92599中所披露的任何4-氨基-5-苯基-7-環(huán)丁基-吡咯并[2，3-d]嘧啶衍生物。通過施用這些抑制劑治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的方法落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
抗體的產(chǎn)生 任何適合的方法可用于激發(fā)具有期望生物學(xué)特性的抗體以抑制IGF1R。期望由多種哺乳動物宿主例如小鼠、嚙齒動物、靈長類動物、人等制備單克隆抗體(mAbs)。對于制備這樣的單克隆抗體的技術(shù)描述可見于如Stites，等(編)BASIC AND CLINICAL IMMUNOLOGY(第4版)Lange Medical Publications，Los Altos，CA及其中所有用的參考文獻(xiàn)；Harlow和Lane(1988)ANTIBODIESA LABORATORY MANUAL CSHPress；Goding(1986)MONOCLONAL ANTIBODIESPRINCIPLESAND PRACTICE (第2版)Academic Press，New York，NY。因此，可通過多種本領(lǐng)域技術(shù)人員熟悉的技術(shù)獲得單克隆抗體。代表性地，來自用期望抗原免疫的動物的脾細(xì)胞通常通過骨髓瘤細(xì)胞融合得以無限增殖化。參見Kohler和Milstein(1976)Eur.J.Immunol.6511-519。無限增殖化的備選方法包括用EB病毒、癌基因或反轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)化，或其他本領(lǐng)域已知的方法。參見如Doyle，等(編輯，1994和定期的增刊)CELL ANDTISSUE CULTURELABORATORY PROCEDURES，John Wiley andSons，New Yor k，NY。篩選產(chǎn)生對抗原具有期望特異性和親和力的抗體的由單個(gè)無限增殖化細(xì)胞產(chǎn)生的克隆，并可通過多種技術(shù)提高這樣的細(xì)胞所產(chǎn)生的單克隆抗體的產(chǎn)量，包括注射入脊椎動物宿主的腹腔內(nèi)?；蛘?，根據(jù)例如Huse，等(1989)Science 2461275-1281所概述的常規(guī)實(shí)驗(yàn)方法，通過篩選人B細(xì)胞DNA文庫分離編碼單克隆抗體或其結(jié)合片段的DNA序列。
其他適合的技術(shù)包括在噬菌體或類似的載體中選擇抗體文庫。參見如Huse等，Science 2461275-1281(1989)；和Ward等，Nature 341544-546(1989)。本發(fā)明的多肽和抗體可帶有或不帶有修飾使用，包括嵌合或人源化的抗體。通常，多肽和抗體可通過共價(jià)或非共價(jià)連接提供可檢測信號的物質(zhì)得以標(biāo)記。已知多種標(biāo)記和綴合技術(shù)，并為學(xué)術(shù)和專利文獻(xiàn)所廣泛報(bào)道。適合的標(biāo)記包括放射性核素、酶、底物、輔因子、抑制劑、熒光部分、化學(xué)發(fā)光部分、磁性顆粒等。教導(dǎo)使用上述標(biāo)記的專利包括U.S.專利號3,817,837；3,850,752；3,939,350；3,996,345；4,277,437；4,275,149和4,366,241。同樣，可產(chǎn)生重組免疫球蛋白，參見Cabilly U.S.專利號4,816,567；和Queen等(1989)Proc.Nat′l Acad.Sci.USA8610029-10033；或在轉(zhuǎn)基因小鼠中制備，參見Mendez等(1997)NatureGenetics 15146-156。更多產(chǎn)生嵌合的、人源化的和人抗體的方法為本領(lǐng)域眾所周知。參見如頒發(fā)給Queen等的U.S.專利號5,530,101，頒發(fā)給Winter等的U.S.專利號5,225,539，頒發(fā)給Boss等的U.S.專利號4,816,397，所有全文都在此并入作為參考。
可用作為宿主用于本發(fā)明抗體表達(dá)的哺乳動物細(xì)胞系是本領(lǐng)域眾所周知的，并包括多種可獲得自美國典型培養(yǎng)物保藏中心(ATCC)的無限增殖化細(xì)胞系。這些細(xì)胞系包括，尤其是中國倉鼠卵巢(CHO)細(xì)胞、NSO、SP2細(xì)胞、HeLa細(xì)胞、幼倉鼠腎(BHK)細(xì)胞、猴腎細(xì)胞(COS)、人肝細(xì)胞癌細(xì)胞(如Hep G2)、A549細(xì)胞、3T3細(xì)胞、HEK-293細(xì)胞和多種其他細(xì)胞系。哺乳動物宿主細(xì)胞包括人、小鼠、大鼠、狗、猴、豬、山羊、牛、馬和倉鼠細(xì)胞。通過測定哪種細(xì)胞系具有高表達(dá)水平，選擇具有特別優(yōu)選的細(xì)胞系。其他可使用的細(xì)胞系為昆蟲細(xì)胞系例如Sf9細(xì)胞、兩棲動物細(xì)胞、細(xì)菌細(xì)胞、植物細(xì)胞和真菌細(xì)胞。當(dāng)重組表達(dá)載體編碼重鏈或其抗原結(jié)合部分時(shí)，將輕鏈和/或其抗原結(jié)合部分導(dǎo)入哺乳動物宿主細(xì)胞中，通過培養(yǎng)宿主細(xì)胞足以在宿主細(xì)胞中表達(dá)抗體或更優(yōu)選地足以將抗體分泌到宿主細(xì)胞所生長的培養(yǎng)基中的一段時(shí)間來產(chǎn)生抗體。
可利用標(biāo)準(zhǔn)的蛋白純化方法從培養(yǎng)基中回收抗體。此外，可利用多種已知技術(shù)增加本發(fā)明抗體(或其中的其他部分)在生產(chǎn)細(xì)胞系中的表達(dá)。例如，在某些條件下谷氨酰胺合成酶基因表達(dá)系統(tǒng)(GS系統(tǒng))是用于增加表達(dá)的常用手段。該GS系統(tǒng)討論于歐洲專利號0216846、0256055和0323997以及歐洲專利申請?zhí)?9303964.4有關(guān)的全部或部分內(nèi)容中。
很可能通過不同的細(xì)胞系或轉(zhuǎn)基因動物表達(dá)的抗體彼此之間會具有不同的糖基化。然而，所有在此提供的核酸分子編碼的抗體，或包含在此提供的氨基酸序列的抗體都是本發(fā)明的一部分，與抗體的糖基化無關(guān)。
額外的化學(xué)治療劑 本發(fā)明的范圍包含了含有與額外的化學(xué)治療劑結(jié)合的本發(fā)明的IGF1R抑制劑的組合物，以及通過施用與額外的化學(xué)治療劑(如額外的抗癌化學(xué)治療劑或止吐劑)結(jié)合的IGF1R抑制劑用于治療成神經(jīng)細(xì)胞瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、橫紋肌肉瘤、小兒癌癥或胰腺癌的方法。額外的化學(xué)治療劑包含任何引起所施用個(gè)體有益生理反應(yīng)的治療劑；例如，其中治療劑緩解或消除了所施用的受治療者疾病癥狀或病因。額外的化學(xué)治療劑包括任何抗癌化學(xué)治療劑?？拱┲委焺┦侨魏卫缇徑饣蛳┯玫氖苤委熣甙┌Y癥狀或病因的治療劑。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，提供了與依托泊苷(VP-16；

結(jié)合的IGF1R抑制劑。通過施用這些藥劑治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的方法落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，提供了與吉西他濱

結(jié)合的IGF1R抑制劑。通過施用這些藥劑治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的方法落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，提供了與公布的U.S.專利申請?zhí)朥.S.2004/0209878A1中所披露的任何化合物(如包含

代表的核心結(jié)構(gòu))或多柔比星

包括Caelyx或

(鹽酸多柔比星脂質(zhì)體注射劑；Ortho Biotech Products L.P；Raritan，NJ)結(jié)合的IGF1R抑制劑。

包含處于

脂質(zhì)體載體中的多柔比星，該載體由N-(羰基-甲氧基聚乙二醇2000)-1，2-二硬脂酰-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺鈉鹽(MPEG-DSPE)；完全氫化的大豆卵磷脂(HSPC)和膽甾醇組成。通過施用這些藥劑治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的方法落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，提供了與5′-脫氧-5-氟尿苷

結(jié)合的IGF1R抑制劑。通過施用這些藥劑治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的方法落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，提供了與長春新堿


結(jié)合的IGF1R抑制劑。通過施用這些藥劑治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的方法落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，提供了與替莫唑胺

任何的CDK抑制劑例如ZK-304709、Seliciclib(R-roscovitine)

任何的MEK抑制劑例如PD0325901

AZD-6244；卡培他濱(5′-脫氧-5-氟-N-[(戊氧基)羰基]-胞苷)；或L-谷氨酸、N-[4-[2-(2-氨基-4，7-二氫-4-氧-1H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基)乙基]苯甲?；鵠-二鈉鹽七水混合物(

培美曲塞二鈉七水混合物)結(jié)合的IGF1R抑制劑。通過施用這些藥劑治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的方法落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，提供了與喜樹堿(

Stork等，J.Am.Chem.Soc.93(16)4074-4075(1971)；Beisler等，J.Med.Chem.14(11)1116-1117(1962))或伊立替康(

作為

銷售的；Pharmacia&Upjohn Co.；Kalamazoo，MI)結(jié)合的IGF1R抑制劑。通過施用這些藥劑治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的方法落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，提供了與FOLFOX給藥方案(奧沙利鉑

與輸注的氟尿嘧啶

以及亞葉酸

聯(lián)用)(Chaouche等，Am.J.Clin.Oncol.23(3)288-289(2000)；de Gramont等，J.Clin.Oncol.18(16)2938-2947(2000))結(jié)合的IGF1R抑制劑。通過施用這些藥劑治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的方法落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，提供了與抗雌激素藥例如

(他莫昔芬；作為

售自AstraZeneca Pharmaceuticals LP；Wilmington，DE)或

(枸櫞酸托瑞米芬；作為

售自Shire US，Inc.；Florence，KY)結(jié)合的IGF1R抑制劑。通過施用這些藥劑治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的方法落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，提供了與芳香酶抑制劑例如

(阿那曲唑(anastrazole)；作為

售自AstraZeneca Pharmaceuticals LP；Wilmington，DE)、

(依西美坦；作為

售自PharmaciaCorporation；Kalamazoo，MI)或

(來曲唑；作為

售自Novartis Pharmaceuticals Corporation；East Hanover，NJ)結(jié)合的IGF1R抑制劑。通過施用這些藥劑治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的方法落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，提供了與雌激素例如DES(已烯雌酚)、

(雌二醇；作為

售自WarnerChilcott，Inc.；Rockaway，NJ)或結(jié)合激素(作為

售自WyethPharmaceuticals Inc.；Philadelphia，PA)結(jié)合的IGF1R抑制劑。通過施用這些藥劑治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的方法落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，提供了與抗血管生成劑包括貝伐單抗(AvastinTM；Genentech；San Francisco，CA)、抗-VEGFR-2抗體IMC-1C11、其他VEGFR抑制劑例如CHIR-258

任何一種列于WO2004/13145(如包含核心結(jié)構(gòu)式

)、WO2004/09542(如包含核心結(jié)構(gòu)式

)、WO00/71129(如包含核心結(jié)構(gòu)式

)、WO2004/09601(如包含核心結(jié)構(gòu)式

)、WO2004/01059(如包含核心結(jié)構(gòu)式

)、WO01/29025(如包含核心結(jié)構(gòu)式

)、WO02/32861(如包含核心結(jié)構(gòu)式

)或列于WO03/88900(如包含核心結(jié)構(gòu)式

)的抑制劑；3-[5-(甲磺酰哌嗪甲基)-吲哚]-喹諾酮；Vatalanib(

PTK/ZK；CPG-79787；ZK-222584)、AG-013736

和VEGF trap(AVE-0005)(一種包含VEGF受體1和2部分的可溶性誘餌受體)結(jié)合IGF1R抑制劑。通過施用這些藥劑治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的方法落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，提供了與LHRH(促黃體(生成)激素-釋放激素)激動劑例如[D-Ser(But)6，Azgly 10]的醋酸鹽(焦-Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Ser(But)-Leu-Arg-Pro-Azgly-NH2醋酸鹽[C59H84N18O14·(C2H4O2)x其中x＝1-2.4]；

(醋酸戈舍瑞林；作為

售自AstraZeneca UK Limited；Macclesfield，England)、

(醋酸亮丙瑞林；作為

售自Sanofi-Synthelabo Inc.；New York，NY)或

(撲酸曲普瑞林；作為

售自Pharmacia Company，Kalamazoo，MI)結(jié)合的IGF1R抑制劑。通過施用這些藥劑治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的方法落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，提供了與促孕劑例如

(甲孕酮；作為

售自Pharmacia&Upjohn Co.；Kalamazoo，MI)、

(己酸羥孕酮；17-((1-氧己基)氧)孕酮-4-烯-3，20-二酮；)、甲地孕酮或黃體酮結(jié)合的IGF1R抑制劑。通過施用這些藥劑治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的方法落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，提供了與選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑(SERM)例如

(雷洛昔芬；作為

售自Eli Lilly and Company；Indianapolis，IN)結(jié)合的IGF1R抑制劑。通過施用這些藥劑治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的方法落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，提供了與包括但不限于

(比卡魯胺；作為

售自AstraZeneca Pharmaceuticals LP；Wilmington，DE)；

(氟他胺；2-甲基-N-[4-硝基-3(三氟甲基)苯基]丙酰胺；作為

售自Schering Corporation；Kenilworth，NJ)；

(尼魯米特；作為

售自AventisPharmaceuticals Inc.；Kansas City，MO)以及

(甲地孕酮；作為

售自Bristol-Myers Squibb)的抗雄激素藥結(jié)合的IGF1R抑制劑。通過施用這些藥劑治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的方法落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，提供了與一種或多種對抗EGF受體或HER2功能的抑制劑，包括但不限于CP-724714

TAK-165

HKI-272

OSI-774(

erlotinib，Hidalgo等，J.Clin.Oncol.19(13)3267-3279(2001))，Lapatanib(

GW2016；Rusnak等，Molecular CancerTherapeutics 185-94(2001)；N-{3-氯-4-[(3-氟苯甲基)氧]苯基}-6-[5-({[2-(甲磺酰)乙基]氨基}甲基)-2-呋喃基]-4-喹唑啉胺；PCT申請?zhí)朩O99/35146)，Canertinib(CI-1033；

Erlichman等，Cancer Res.61(2)739-48(2001)；Smaill等，J.Med.Chem.43(7)1380-97(2000))，ABX-EGF抗體(Abgenix，Inc.；Freemont，CA；Yang等，Cancer Res.59(6)1236-43(1999)；Yang等，Crit Rev Oncol Hematol.38(1)17-23(2001))，erbitux(U.S.專利號6,217,866；IMC-C225，西妥昔單抗；Imclone；New York，NY)，EKB-569(

Wissner等，J.Med.Chem.46(1)49-63(2003))，PKI-166(

CGP-75166)，GW-572016，任何抗-EGFR抗體以及任何抗-HER2抗體結(jié)合的IGF1R抑制劑。通過施用這些藥劑治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的方法落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，提供了與

(lonafarnib；SarasarTM；Schering-Plough；Kenilworth，NJ)結(jié)合的IGF1R抑制劑。在另一個(gè)實(shí)施方案中，提供了與IGF 1R抑制劑結(jié)合的一種或多種以下FPT抑制劑

或

通過施用這些藥劑治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的方法落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
其他能被提供與IGF1R抑制劑結(jié)合的FPT抑制劑包括BMS-214662(

Hunt等，J.Med.Chem.43(20)3587-95(2000)；Dancey等，Curr.Pharm.Des.82259-2267(2002)；(R)-7-氰基-2，3，4，5-四氫-1-(1H-咪唑-4-基甲基)-3-(苯基甲基)-4-(2-噻吩基磺酰)-1H-1，4-苯并二氮卓))和R155777(tipifarnib；Garner等，Drug Metab.Dispos.30(7)823-30(2002)；Dancey等，Curr.Pharm.Des.82259-2267(2002)；(B)-6-[氨基(4-氯苯基)(1-甲基-1H-咪唑-5-基)-甲基]-4-(3-氯苯基)-1-甲基-2(1H)-喹啉酮)；
作為ZarnestraTM銷售的；Johnson&Johnson；New Brunswick，NJ)。通過施用這些藥劑治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的方法落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，提供了與

(阿米斯丁)；

(NVP-LAQ824；Atadja等，CancerResearch 64689-695(2004))、

(辛二酰苯胺異羥肟酸，

(丙戊酸；Michaelis等，Mol.Pharmacol.65520-527(2004))、

(曲古抑菌素A)、

(FK-228；Furumai等，Cancer Research 624916-4921(2002))、

(SU11248；Mendel等，Clin.Cancer Res.9(1)327-37(2003))、

(BAY43-9006)、

(KRN951)、

(氨魯米特)；

(安吖啶)；

(阿那格雷)；

(阿納托司唑；作為Arimidex售自AstraZeneca Pharmaceuticals LP；Wilmington，DE)；天冬酰胺酶；卡介苗(BCG)疫苗(Garrido等，Cytobios.90(360)47-65(1997))；

(博來霉素)；

(乙基酰胺)；

(白消安；1，4-丁二醇二甲磺酸酯；作為

售自by ESP Pharma，Inc.；Edison，New Jersey)；

(卡鉑；作為

售自Bristol-Myers Squibb；Princeton，NJ)；

(卡氮芥)；

(苯丁酸氮芥)；

(順鉑)；

(克拉屈濱)；

(氯膦酸鹽)；

(環(huán)磷酰胺)；

(去乙酰環(huán)丙氯地孕酮)；

(阿糖胞苷)；

(氮烯咪胺)；

(更生霉素)；

(柔紅霉素)；

(已烯雌酚)；

(表柔比星)；

(氟達(dá)拉濱)；

(氟氫可的松)；

(氟羥甲睪酮)；

(氟他胺)；

(羥基脲)；

(去甲氧基柔紅霉素)；

(異環(huán)磷酰胺)；

(Imatinib；作為

售自NovartisPharmaceuticals Corporation；East Hanover，NJ)；

(甲酰四氫葉酸)；

(醋酸亮丙瑞林)；

(左咪唑)；

(洛莫司汀)；

(氮芥)；

(美法侖；作為

售自Celgene Corporation；Warren，NJ)；

(巰基嘌呤)；

(巰乙磺酸鈉)；

(氨甲蝶呤)；

(絲裂霉素)；

(米托坦)；

(米托蒽醌)；

(尼魯米特)；善得定(L-半胱氨酸胺，D-苯丙氨酰-L-半胱氨酰-L-苯丙氨酰-D-色氨酰-L-賴氨酰-L-蘇氨酰-N-[2-羥基-1-(羥甲基)丙基]-，環(huán)(2_7)-二硫化物；[RR*，R*)]；

Katz等，Clin Pharm.8(4)255-73(1989)；作為Sandostatin

Depot銷售的；Novartis Pharm.Corp；E.Hanover，NJ)；奧沙利鉑(

作為EloxatinTM售自Sanofi-SynthelaboInc.；New York，NY)；

(氨羥二磷酸二鈉；作為

售自Novartis Pharmaceuticals Corporation；East Hanover，NJ)；

(戊糖苷；作為

售自Supergen；Dublin，CA)；

(光輝霉素)；

(卟菲爾鈉；作為

售自Axcan Scandipharm Inc.；Birmingham，AL)；

(甲基芐肼)；

(雷替曲塞)；利妥昔單抗(作為

售自Genentech，Inc.；South San Francisco，CA)；

(鏈脲霉素)；

(替尼泊苷)；

(睪酮)；

(沙立度胺)；

(硫鳥嘌呤)；

(塞替派)；

(維甲酸)；

(去乙酰長春酰胺)或13-順式-視黃酸

結(jié)合的IGF1R抑制劑。通過施用這些藥劑治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的方法落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，提供了與一種或多種任一的苯丙氨酸氮芥、尿嘧啶氮芥、雌氮芥、六甲密胺、5-氟脫氧尿苷、5-脫氧尿苷、阿糖胞苷、6-巰基嘌呤、脫氧柯福霉素、骨化三醇、戊柔比星、光輝霉素、長春堿、長春瑞濱、托泊替康、丙亞胺、馬馬司他、COL-3、新伐司他、BMS-275291、角鯊胺、內(nèi)皮他丁、SU5416、SU6668、EMD121974、白介素-12、IM862、血管他丁、vitaxin、屈洛昔芬、idoxyfene、螺內(nèi)酯、非那司提、西咪替丁、曲妥單抗、地尼白介素、diftitox、吉非替尼、bortezimib、紫杉醇、紫杉萜、埃搏霉素B、BMS-247550(參見例如Lee等，Clin.Cancer Res.71429-1437(2001))、BMS-310705、屈洛昔芬(3-羥泰米芬)、4-羥泰米芬、pipendoxifene、ERA-923、阿佐昔芬、氟維司群、阿考比芬、拉索昔芬(CP-336156)、碘昔芬、TSE-424、HMR-3339、ZK186619、托泊替康、PTK787/ZK 222584(Thomas等，Semin Oncol.30(3Suppl 6)32-8(2003))、人源化抗-VEGF抗體貝伐單抗、VX-745(Haddad，Curr Opin.Investig.Drugs 2(8)1070-6(2001))、PD 184352(Sebolt-Leopold，等Nature Med.5810-816(1999))、雷帕霉素、CCI-779(Sehgal等，Med.Res.Rev.，141-22(1994)；E1it，Curr.Opin.Investig.Drugs 3(8)1249-53(2002))、LY294002、LY292223、LY292696、LY293684、LY293646(Vlahos等，J.Biol.Chem.269(7)5241-5248(1994))、渥曼青霉素、BAY-43-9006、(Wilhelm等，Curr.Pharm.Des.82255-2257(2002))、ZM336372、L-779，450、Lowinger等，Curr.Pharm Des.82269-2278(2002)中披露的任何Raf抑制劑；flavopiridol(L86-8275/HMR 1275；Senderowicz，Oncogene19(56)6600-6606(2000))或UCN-01(7-羥基十字孢堿；Senderowicz，Oncogene 19(56)6600-6606(2000))結(jié)合的IGF1R抑制劑。通過施用這些藥劑治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的方法落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，提供了與一種或多種列于披露了苯乙烯基取代的雜芳基EGFR抑制劑的U.S.專利5,656,655中；列于披露了雙單和/或二環(huán)芳基雜芳基碳環(huán)和雜碳環(huán)EGFR及PDGFR抑制劑的U S.專利5,646,153中；列于披露了抑制EGFR的三環(huán)嘧啶化合物的U.S.專利5,679,683中；列于披露了具有受體酪氨酸激酶抑制活性的喹唑啉衍生物的U.S.專利5,616,582中；列于披露了具有抑制EGFR結(jié)構(gòu)的化合物的Fry等，Science 2651093-1095(1994)(參見Fry等的

圖1)中；列于披露了抑制EGFR的雜芳基乙烯二基或雜芳基乙烯二基芳基化合物的U.S.專利5,196,446中；列于披露了抑制受體-PD166285的EGFR、PDGFR和FGFR家族的稱為PD166285(鑒定為6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-(2-二乙氨基乙氧基)苯基氨)-8-甲基-8H-吡啶并(2，3-d)嘧啶-7-酮)的化合物的Panek，等，Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics 2831433-1444(1997)中的任一化合物結(jié)合的IGF 1R抑制劑。通過施用這些藥劑治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的方法落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，提供了與一種或多種任一的聚乙二醇化或未聚乙二醇化的干擾素α-2a、聚乙二醇化或未聚乙二醇化的干擾素α-2b、聚乙二醇化或未聚乙二醇化的干擾素α-2c、聚乙二醇化或未聚乙二醇化的干擾素αn-1、聚乙二醇化或未聚乙二醇化的干擾素αn-3以及聚乙二醇化、未聚乙二醇化的復(fù)合干擾素或白蛋白-干擾素-α結(jié)合的IGF1R抑制劑。通過施用這些藥劑治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的方法落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
在此使用的術(shù)語“干擾素α”意指抑制細(xì)胞增殖和調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答的高同種特異性蛋白家族。代表性的適合的干擾素-α包括但不限于重組干擾素α-2b、重組干擾素α-2a、重組干擾素α-2c、α2干擾素、干擾素α-n1(INS)、純化的天然α干擾素混合物、復(fù)合α干擾素例如描述于U.S.專利號4,897,471和4,695,623(尤其是其實(shí)施例7、8或9)中的那些、或干擾素α-n3、天然α干擾素混合物。
干擾素α-2a作為

售自Hoffmann-La Roche(Nutley，N.J)。
干擾素α-2b作為

售自Schering Corporation(Kenilworth，NJ)。干擾素α-2b的制造描述于例如U.S.專利號4,530,901中。
干擾素α-n3是一種作為ALFERON N

售自Hemispherx Biopharma，Inc.(Philadelphia，PA)的天然干擾素混合物。
干擾素α-n1(INS)是一種作為

售自Glaxo-Smith-Kline(Research Triangle Park，NC)的天然干擾素混合物。
復(fù)合干擾素作為

售自Intermune，Inc.(Brisbane，CA)。
干擾素α-2c作為

售自Boehringer IngelheimPharmaceutical，Inc.(Ridgefield，CT)。
純化的天然干擾素混合物作為

售自Sumitomo；Tokyo，Japan。
在此使用的術(shù)語“聚乙二醇化的干擾素α”意指聚乙二醇修飾的干擾素α綴合物，優(yōu)選干擾素α-2a和α-2b綴合物。優(yōu)選的聚乙二醇-干擾素α-2b綴合物為PEG 12000-干擾素α-2b。在此使用的短語“12,000分子量聚乙二醇綴合的干擾素α”和“PEG 12000-IFNα”包括諸如根據(jù)國際申請?zhí)朩O 95/13090的方法制備的并在干擾素α-2a或-2b氨基和具有12000的平均分子量的聚乙二醇之間包含尿烷鍵的綴合物。聚乙二醇化的干擾素α(PEG 12000-IFN-α-2b)可獲得自Schering-Plough ResearchInstitute，Kenilworth，N.J。
可通過將PEG聚合物連接到干擾素α-2b分子賴氨酸殘基的ε氨基上制備優(yōu)選的PEG 12000-干擾素α-2b?？赏ㄟ^尿烷鍵將一個(gè)PEG 12000分子綴合到IFN α-2b分子的游離氨基上。該綴合物特征在于連接有分子量12000的PEG。PEG 12000-IFN α-2b綴合物可配制為凍干粉末用于注射。
聚乙二醇化的干擾素α-2b作為

售自ScheringCorporation(Kenilworth，NJ)。
聚乙二醇化的干擾素α-2a作為

售自Hoffmann-La Roche(Nutley，N.J)。
可通過將干擾素α偶聯(lián)至水溶性聚合物制備其他干擾素α綴合物。這樣的聚合物的非限制性目錄包括另外的聚環(huán)氧烷均聚物例如聚丙二醇、聚氧乙烯化多元醇、它們的共聚物以及嵌段共聚物。作為基于聚環(huán)氧烷的聚合物的替代物，可有效地使用非抗原性物質(zhì)例如葡聚糖、聚乙烯吡咯烷酮、聚丙烯酰胺、聚乙烯醇、基于碳水化合物的聚合物等。這樣的干擾素α聚合物綴合物描述于例如U.S.專利號4,766,106、U.S.專利號4,917,888、歐洲專利申請?zhí)?236987或0593868或國際申請?zhí)朩O 95/13090中。
可在滅菌注射用水中使用諸如Tris-HCl、醋酸鹽或磷酸鹽例如磷酸氫二鈉/磷酸二氫鈉緩沖液的適當(dāng)緩沖液，和藥學(xué)上可接受的賦形劑(如蔗糖)，載體(如人血漿白蛋白)，毒性劑(toxicity agents)(如NaCl)，防腐劑(如thimerosol、甲酚或苯甲醇)以及表面活性劑(如吐溫或聚山梨醇酯)配制適合于腸胃外給藥的聚乙二醇化的干擾素α的藥物組合物。聚乙二醇化的干擾素α可作為凍干粉末在2°-8℃下冷藏。當(dāng)在2°-8℃之間貯藏并在重建的24小時(shí)內(nèi)使用時(shí)，重建的水溶液是穩(wěn)定的。參見例如U.S.專利號4,492,537；5,762,923和5,766,582。重建的水溶液還可以預(yù)裝填的、多劑量注射器例如用于遞送諸如胰島素的藥物的那些注射器的形式貯藏。代表性的適合的注射器包括包含放置于筆型注射器中的預(yù)裝填的管形瓶的系統(tǒng)，例如可獲得自Novo Nordisk的

Novo Pen或可獲得自Schering Corporation，Kenilworth，NJ的

其他注射器系統(tǒng)包括包含玻璃藥筒的筆型注射器，該玻璃藥筒含有處于分離隔室中的稀釋劑和凍干的聚乙二醇化的干擾素α粉末。
本發(fā)明的范圍還包括包含與一種或多種其他抗癌化學(xué)治療劑(如在此所述的)結(jié)合的以及，任選地(即含有或不含有)與一種或多種止吐劑結(jié)合的IGF1R抑制劑的組合物，所述止吐劑包括但不限于帕洛諾司瓊(作為Aloxi售自MGI Pharma)、aprepitant(作為Emend售自Merck and Co.；Rahway，NJ)、可他敏(作為

售自Pfizer；New York，NY)、安他樂(作為

售自Pfizer；New York，NY)、甲氧氯普胺(作為

售自AH Robins Co，；Richmond，VA)、勞拉西泮(作為

售自Wyeth；Madison，NJ)、阿普唑侖(作為

售自Pfizer；New York，NY)、氟派啶醇(作為

售自O(shè)rtho-McNeil；Raritan，NJ)、達(dá)哌啶醇

屈大麻酚(作為

售自Solvay Pharmaceuticals，Inc.；Marietta，GA)、地塞米松(作為

售自Merck and Co.；Rahway，NJ)、甲基氫化潑尼松(作為

售自Pfizer；New York，NY)、丙氯拉嗪(作為

售自Glaxosmithkline；Research Triangle Park，NC)、谷尼色創(chuàng)(作為

售自Hoffmann-La Roche Inc.；Nutley，NJ)、奧坦西隆(作為

售自Glaxosmithkline；Research Triangle Park，NC)、多拉司瓊(作為

售自Sanofi-Aventis；New York，NY)、托吡西隆(作為

售自Novartis；East Hanover，NJ)。
包含止吐劑的組合物被用于預(yù)防或治療惡心--一種抗癌化學(xué)治療中常見的副作用。因此，本發(fā)明還包括了通過施用任選地與一種或多種其他化學(xué)治療劑(如在此中所述的)結(jié)合的以及任選地與一種或多種止吐劑結(jié)合的IGF1R抑制劑治療或預(yù)防受治療者癌癥的方法。
本發(fā)明進(jìn)一步包含了一種通過施用與諸如外科腫瘤切除術(shù)或抗癌放射治療的治療操作結(jié)合的；任選地與如上所述的額外的化學(xué)治療劑和/或止吐劑結(jié)合的IGFR抑制劑治療或預(yù)防任何病期或類型的成神經(jīng)細(xì)胞瘤、維耳姆斯瘤、橫紋肌肉瘤、骨肉瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的方法。
治療方法和給藥 本發(fā)明包括利用包含任選地與額外的化學(xué)治療劑結(jié)合的IGF1R抑制劑以及藥學(xué)上可接受的載體的藥物組合物治療或預(yù)防橫紋肌肉瘤、維耳姆斯瘤、骨肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤或任何小兒癌癥的方法。包含與額外的化學(xué)治療劑結(jié)合的IGF1R抑制劑以及藥學(xué)上可接受的載體的藥物組合物也落入本發(fā)明范圍內(nèi)?？墒褂萌魏嗡帉W(xué)領(lǐng)域眾所周知的方法制備藥物組合物；參見如Gilman，等，(編)(1990)，The Pharmacological Bases ofTherapeutics，第8版，Pergamon Press；A.Gennaro(編)，Remington’sPharmaceutical Sciences，第18版，(1990)，Mack Publishing Co.，Easton，Pennsylvania.；Avis，等，(編)(1993)Pharmaceutical Dosage FormsParenteral Medications Dekker，New York；Lieberman，等，(編)(1990)Pharmaceutical Dosage Forms；Tablets Dekker，New York；和Lieberman，等，(編)(1990)，Pharmaceutical Dosage FormsDisperse Systems Dekker，New York。
術(shù)語“成神經(jīng)細(xì)胞瘤”包括所有類型和病期的成神經(jīng)細(xì)胞瘤。成神經(jīng)細(xì)胞瘤是一種稱為神經(jīng)嵴細(xì)胞的特殊神經(jīng)細(xì)胞的癌癥。成神經(jīng)細(xì)胞瘤可出現(xiàn)在體內(nèi)任何部位，但通常出現(xiàn)在腎上腺中。因此，本發(fā)明包括治療或預(yù)防受治療者所有類型和病期的成神經(jīng)細(xì)胞瘤的方法，包括施用治療有效量的任選地與額外的化學(xué)治療劑結(jié)合的IGF1R抑制劑于受治療者。一種表達(dá)TRK-A神經(jīng)營養(yǎng)因子受體的成神經(jīng)細(xì)胞瘤是超二倍體的，并易于自發(fā)消退。另一種表達(dá)TRK-B神經(jīng)營養(yǎng)因子受體的成神經(jīng)細(xì)胞瘤得到了額外的染色體，17q；丟失了14q雜合性；是染色體組不穩(wěn)定的。在第三種成神經(jīng)細(xì)胞瘤中，染色體1p丟失，N-MYC基因得到擴(kuò)增(Maris等，J Clin Oncol 17(7)2264-79(1999)；Lastowska等，J.Clin.Oncol.19(12)3080-90(2001)。
術(shù)語“橫紋肌肉瘤”包括所有類型和病期的橫紋肌肉瘤。因此，本發(fā)明包括治療或預(yù)防受治療者所有類型和病期的橫紋肌肉瘤的方法，包括施用治療有效量的任選地與額外的化學(xué)治療劑結(jié)合的IGF1R抑制劑于受治療者。例如，橫紋肌肉瘤的亞型包括胚胎性橫紋肌肉瘤、小泡型橫紋肌肉瘤、未分化的橫紋肌肉瘤、葡萄狀橫紋肌肉瘤和多形型橫紋肌肉瘤。一般而言，胚胎性橫紋肌肉瘤(ERMS)易于在頭頸區(qū)域、膀胱、陰道以及前列腺和睪丸之中及其周圍出現(xiàn)。這些通常感染嬰幼兒。一般而言，小泡型橫紋肌肉瘤(ARMS)更常出現(xiàn)在軀干、手臂和腿的大肌肉中，且通常感染年長的兒童或青少年。該類型稱為小泡型是因?yàn)閻盒阅[瘤細(xì)胞形成小的空腔或小泡。一般而言，葡萄樣橫紋肌肉瘤(一種胚胎性橫紋肌肉瘤亞型)出現(xiàn)在身體開口的粘膜表面下，且通常在諸如陰道、膀胱和鼻孔的區(qū)域中觀察到。代表性地，其特征在于形成息肉狀葡萄樣腫瘤塊，且其在組織學(xué)上證明了惡性腫瘤細(xì)胞存在于大量的粘液樣基質(zhì)中。一般而言，多形型橫紋肌肉瘤經(jīng)常出現(xiàn)在30-50歲的患者中。其細(xì)胞不規(guī)則地排列且大小不同，因此呈現(xiàn)多形特征。不常出現(xiàn)橫紋。
術(shù)語“骨肉瘤”包括所有類型和病期的骨肉瘤。因此，本發(fā)明包括治療或預(yù)防受治療者所有類型和病期的骨肉瘤的方法，包括施用治療有效量的任選地與額外的化學(xué)治療劑結(jié)合的IGF 1R抑制劑于受治療者。例如，三種類型的骨肉瘤包括高度骨肉瘤例如成骨細(xì)胞骨肉瘤、成軟骨細(xì)胞骨肉瘤、成纖維細(xì)胞骨肉瘤、混合型骨肉瘤、小細(xì)胞骨肉瘤、毛細(xì)血管擴(kuò)張型骨肉瘤和高度表面骨肉瘤；中度骨肉瘤例如骨膜骨肉瘤；以及低度骨肉瘤例如骨膜外骨肉瘤和髓內(nèi)低度骨肉瘤。
術(shù)語“胰腺癌”或“胰腺癌”包括所有類型和病期的胰腺癌。因此，本發(fā)明包括治療或預(yù)防受治療者所有類型和病期的胰腺癌的方法，包括施用治療有效量的任選地與額外的化學(xué)治療劑結(jié)合的IGF 1R抑制劑于受治療者。例如，三種類型的胰腺癌包括胰腺癌、囊腺癌和腺泡細(xì)胞癌。
術(shù)語“受治療者”或“患者”包括任何生物體，優(yōu)選哺乳動物(如靈長類動物、狗、馬、大鼠、小鼠、貓、兔)以及最優(yōu)選人。在一個(gè)實(shí)施方案中，“受治療者”或“患者”為兒童(如18歲或更小，例如小于1、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10歲)。在一個(gè)實(shí)施方案中，“受治療者”或“患者”是成人。
“小兒癌癥”包括任何在兒童中發(fā)生的癌癥(如任何在此提及的癌癥以及腦瘤、顱咽管瘤、Ewing氏肉瘤、肝癌，淋巴瘤(何杰金或非何杰金)、成神經(jīng)管細(xì)胞瘤、視網(wǎng)膜成神經(jīng)細(xì)胞瘤、黑素瘤、膀胱癌、維爾姆斯氏癌(維耳姆斯瘤)、卵巢癌、胰腺癌、良性前列腺增生癥、乳腺癌、前列腺癌、骨癌、肺癌、結(jié)腸直腸癌、子宮頸癌、滑膜肉瘤、與轉(zhuǎn)移性類癌瘤相關(guān)的腹瀉、腸道血管活性肽分泌瘤)。
本發(fā)明的IGF1R抑制劑還可施用于小兒患者以治療或預(yù)防IGF1R介導(dǎo)的非癌病癥，例如肢端肥大癥、巨人癥、牛皮癬、動脈粥樣硬化、血管平滑肌再狹窄、不適當(dāng)?shù)奈⒚}管增生、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、Grave氏病、多發(fā)性硬化癥、全身性紅斑狼瘡、橋本氏甲狀腺炎、重癥肌無力、自身免疫性甲狀腺炎或Bechet氏病。
使用常規(guī)的藥學(xué)上可接受的賦形劑和添加劑以及常規(guī)技術(shù)，可制備含有任選地與額外的化學(xué)治療劑結(jié)合的IGF 1R抑制劑的藥物組合物。這樣的藥學(xué)上可接受的賦形劑和添加劑包括無毒的可配伍的填料、粘合劑、崩解劑、緩沖劑、防腐劑、抗氧化劑、潤滑劑、調(diào)味劑、增稠劑、著色劑、乳化劑等。所有的給藥途徑都考慮在內(nèi)，包括但不限于腸胃外(如皮下、靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、肌內(nèi))和非腸胃外(如經(jīng)口、經(jīng)皮、鼻內(nèi)、眼內(nèi)、舌下、吸入、直腸和局部)給藥。
血管注射劑可制備為常規(guī)形式，如液體溶液或混懸液、在注射前適合溶解或混懸于液體中的固體形式或乳狀液。血管注射劑、溶液和乳狀液還可含有一種或多種賦形劑。賦形劑為例如水、鹽水、葡萄糖、甘油或乙醇。此外，如果需要的話，待給藥的藥物組合物還可含有少量無毒輔助物質(zhì)例如潤濕劑或乳化劑、pH緩沖劑、穩(wěn)定劑、增溶劑和其他這樣的試劑，例如醋酸鈉、脫水山梨醇單月桂酸酯、三乙醇胺油酸酯和環(huán)糊精。
在一個(gè)實(shí)施方案中，在腸胃外給藥的制劑中使用的藥學(xué)上可接受的載體包括含水載體、無水載體、抗微生物劑、等滲劑、緩沖劑、抗氧化劑、局部麻醉藥、懸浮和分散劑、乳化劑、掩蔽或螯合劑以及其他藥學(xué)上可接受的物質(zhì)。
含水載體的例子包括氯化鈉注射液、林格注射液、等滲葡萄糖注射液、無菌水注射液、葡萄糖和乳酸鹽林格注射液。無水腸胃外給藥的藥物的載體包括植物來源的固定油類、棉籽油、玉米油、芝麻油和花生油。必須以抑細(xì)菌或抑真菌濃度添加到包裝于多劑量容器中的腸胃外注射用制劑中的抗微生物劑包括苯酚或甲酚、汞制劑、苯甲醇、氯代丁醇、對羥基苯甲酸甲和丙酯、硫柳汞、苯扎氯銨和氯化芐乙氧銨。等滲劑包括氯化鈉和葡萄糖。緩沖劑包括磷酸鹽和檸檬酸鹽?？寡趸瘎┌蛩釟溻c。局部麻醉藥包括鹽酸普魯卡因。懸浮和分散劑包括羧甲基纖維素鈉、羥丙基甲基纖維素和聚乙烯吡咯烷酮。乳化劑包括吐溫80(TWEEN-80)。金屬離子的掩蔽或螯合劑包括EDTA。藥學(xué)載體還包括用于水可混溶的載體的乙醇、聚乙二醇和丙二醇；以及用于pH調(diào)節(jié)的氫氧化鈉、鹽酸、檸檬酸或乳酸。
在一個(gè)實(shí)施方案中，用于腸胃外給藥的制劑可包括備好用于注射的滅菌溶液，只在使用前備好與溶劑結(jié)合的無菌干燥的可溶性產(chǎn)物例如凍干粉末，包括皮下注射用片劑，備好用于注射的滅菌混懸劑，在使用前備好與載體結(jié)合的無菌干燥的不溶性產(chǎn)物以及滅菌乳狀液。溶液可以是含水的或無水的。
在此還考慮了植入使恒定水平的劑量得以保持的緩釋或持續(xù)釋放系統(tǒng)。簡言之，將活性劑(如任選地與額外的化學(xué)治療劑結(jié)合的IGF1R抑制劑)分散在固體內(nèi)基質(zhì)中，如為外部的高分子膜所圍繞的聚甲基丙烯酸甲酯、聚丁基丙烯酸甲酯、增塑或未增塑的聚氯乙烯、增塑的尼龍、增塑的聚乙二醇對苯二甲酸酯、天然橡膠、聚異戊二烯、聚異丁烯、聚丁二烯、聚乙烯、乙烯-乙烯基乙酸酯共聚物、硅酮橡膠、聚二甲基硅氧烷、硅酮碳酸酯共聚物、親水聚合物例如丙烯酸合甲基丙烯酸的酯類水凝膠、膠原、交聯(lián)的聚乙烯醇和交聯(lián)的部分水解的聚乙酸乙烯酯，如不溶于體液中的聚乙烯、聚丙烯、乙烯/丙烯共聚物、乙烯/丙烯酸乙酯共聚物、乙烯/乙烯基乙酸酯共聚物、硅酮橡膠、聚二甲基硅氧烷、氯丁橡膠、氯化聚乙烯、聚氯乙烯、具有乙酸乙烯酯的乙烯基氧化物共聚物、偏二氯乙烯、乙烯和丙烯、聚對苯二甲酸乙二醇酯離子交聯(lián)聚合物、丁基橡膠氯醇橡膠、乙烯/乙烯醇共聚物、乙烯/乙酸乙烯酯/乙烯醇三元共聚物和乙烯/乙烯基氧乙醇共聚物。在釋放率控制步驟中化合物通過外部的高分子膜擴(kuò)散。在這樣的腸胃外給藥的組合物中所包含的活性化合物的百分?jǐn)?shù)主要取決于其特性以及任選地與額外的化學(xué)治療劑結(jié)合的IGF1R抑制劑的活性和受治療者的需要。
可調(diào)節(jié)任選地與額外的化學(xué)治療劑結(jié)合的IGF1R抑制劑的濃度使得注射提供產(chǎn)生期望藥理學(xué)效應(yīng)的有效量。如下所討論的，精確的劑量取決于本領(lǐng)域已知的患者或動物的年齡、體重和狀況。
在一個(gè)實(shí)施方案中，單位劑量腸胃外給藥的制劑包裝于安瓿、管形瓶或帶有針頭的注射器中。如本領(lǐng)域已知并得以實(shí)踐的，所有用于腸胃外給藥的制劑必須是無菌的。
在一個(gè)實(shí)施方案中，任選地與額外的化學(xué)治療劑結(jié)合的IGF 1R抑制劑被配制為凍干粉末，其可重建為溶液、乳狀液和其他混合液用于給藥。該粉末還可重建并配制為固體或凝膠。
在一個(gè)實(shí)施方案中，通過在適合的溶劑中溶解任選地與額外的化學(xué)治療劑結(jié)合的IGF1R抑制劑或其藥學(xué)上可接受的衍生物，制備無菌凍干粉末。溶劑可含有改善穩(wěn)定性的賦形劑或其他粉末或制備自粉末的重建溶液的藥理學(xué)成分。可以使用的賦形劑包括但不限于葡萄糖、山梨糖醇、果糖、玉米糖漿、木糖醇、甘油、葡萄糖、蔗糖或其他適合的試劑。溶劑還可含有緩沖劑例如檸檬酸鹽、磷酸鈉或磷酸鉀或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其他這樣的緩沖劑，在一個(gè)實(shí)施方案中，在中性pH附近。在本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的標(biāo)準(zhǔn)條件下，隨后對溶液的過濾除菌以及在此之后的凍干提供了所需的劑型。在一個(gè)實(shí)施方案中，所得到的溶液應(yīng)按比例分裝到管形瓶中用于凍干。每個(gè)管形瓶可含有單一劑量或多個(gè)劑量的任選地與額外的化學(xué)治療劑結(jié)合的IGF1R抑制劑。凍干粉末可貯藏在適當(dāng)?shù)臈l件下，例如在約4℃至室溫下。
該凍干粉末與注射用水的重建提供了供腸胃外給藥使用的劑型。在一個(gè)實(shí)施方案中，為了重建，將凍干粉末添加到無菌水或其他適合的載體中。確切的量取決于所選擇的要使用的療法。這樣的量可憑經(jīng)驗(yàn)確定。
通過使用如含有去水山梨糖醇三油酸酯或油酸以及例如三氯氟甲烷、二氯氟甲烷、二氯四氟乙烷或任何其他生物學(xué)上相容的氣體推進(jìn)劑的氣溶膠；還有可能使用含有以粉末形式存在的單獨(dú)的或與賦形劑結(jié)合的任選地與額外的化學(xué)治療劑結(jié)合的IGF1R抑制劑的系統(tǒng)，可提供吸入給藥。
在一個(gè)實(shí)施方案中，任選地與額外的化學(xué)治療劑結(jié)合的IGF1R抑制劑配制為用于口服給藥的固體劑量形式，在一個(gè)實(shí)施方案中，配制為膠囊或片劑。片劑、丸劑、膠囊、錠劑等可含有一種或多種以下成分，或類似性質(zhì)的化合物粘合劑；潤滑劑；稀釋劑；助流劑；崩解劑；著色劑；甜味劑；增香劑；潤濕劑；催吐劑涂層和膜包衣。粘合劑的例子包括微晶纖維素、黃蓍膠、葡萄糖溶液、阿拉伯膠漿、明膠溶液、糖蜜、聚乙烯吡咯烷、聚烯吡酮、交聚維酮、蔗糖和淀粉糊。潤滑劑包括滑石粉、淀粉、硬脂酸鎂或硬脂酸鈣、石松子和硬脂酸。稀釋劑包括例如乳糖、蔗糖、淀粉、高嶺土、鹽、甘露糖醇和磷酸二鈣。助流劑包括但不限于膠體二氧化硅。分解劑包括交聯(lián)羧甲醚纖維素鈉、淀粉羥乙酸鈉、海藻酸、玉米淀粉、土豆淀粉、膨潤土、甲基纖維素、瓊脂和羧甲基纖維素。著色劑包括例如任何一種經(jīng)檢定批準(zhǔn)的水溶性FD和C染料，其混合物；和混懸于水合氧化鋁上的水不溶性FD和C染料。甜味劑包括蔗糖、乳糖、甘露糖醇和人造甜味劑例如糖精，以及多種噴霧干燥的調(diào)味劑。芳香劑包括提取自植物例如果實(shí)的天然香料和產(chǎn)生快感的化合物的合成混合物，例如但不限于薄荷油和水楊酸甲酯。潤濕劑包括1，2-丙二醇單硬脂酸酯、去水山梨糖醇單油酸酯、二甘醇單硬脂酸酯和聚氧乙烯月桂醚。催吐劑涂層包括脂肪酸、脂肪、蠟、蟲膠、加氨蟲膠和乙酸纖維素酞酸鹽。薄膜包衣包括羥乙基纖維素、羧甲基纖維素鈉、聚乙二醇4000和苯二甲酸醋酸纖維素。
劑量和給藥 本發(fā)明的方法包括施用任選地與額外的化學(xué)治療劑結(jié)合的IGF1R抑制劑或其藥物組合物。代表性地，當(dāng)有可能時(shí)按照Physicians′DeskReference 2003(Physicians′Desk Reference，第57版)；MedicalEconomics Company；ISBN1563634457；第57版(November 2002)中所列的經(jīng)批準(zhǔn)藥劑的產(chǎn)品信息頁中程序表以及本領(lǐng)域眾所周知的治療方案，進(jìn)行這樣的藥劑的給藥和劑量。
術(shù)語“治療有效量”或“治療有效劑量”意指為管理人員(例如研究人員、醫(yī)生或獸醫(yī))所尋求的會引起組織、系統(tǒng)、受治療者或宿主生物學(xué)或醫(yī)學(xué)反應(yīng)的本發(fā)明組合物(如IGF1R抑制劑，例如抗-IGF1R抗體)的量或劑量，所述生物學(xué)或醫(yī)學(xué)反應(yīng)包括任何可測量的諸如成神經(jīng)細(xì)胞瘤、橫紋肌肉瘤、骨肉瘤、胰腺癌或任何小兒癌癥的癌癥病征、癥狀和/或臨床標(biāo)記(如腫瘤生長)的緩解，和/或任何程度的癌癥進(jìn)展或轉(zhuǎn)移的阻止、減緩或中斷。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，任何抗-IGF1R抗體；例如，包含(a)包含SEQ ID NO2的第20-128位氨基酸的輕鏈可變區(qū)和包含SEQID NO1O或12的第20-137位氨基酸的重鏈可變區(qū)；(b)包含SEQ ID NO4的第20-128位氨基酸的輕鏈可變區(qū)和包含SEQ ID NO10或12的第20-137位氨基酸的重鏈可變區(qū)；(c)包含SEQ ID NO6的第20-128位氨基酸的輕鏈可變區(qū)和包含SEQ ID NO10或12的第20-137位氨基酸的重鏈可變區(qū)；或(d)包含SEQ ID NO8的第20-128位氨基酸的輕鏈可變區(qū)和包含SEQ ID NO10或12的第20-137位氨基酸的重鏈可變區(qū)的抗體或其抗原結(jié)合片段；或在此提及的任何其他抗-IGF1R抗體的“治療有效劑量”為約40-約1000mg/m2(如約50mg/m2、60mg/m2、70mg/m2、80mg/m2、90mg/m2、100mg/m2、約200mg/m2、約300mg/m2、約400mg/m2、約500mg/m2、約600mg/m2或約700mg/m2)或1-20mg/kg體重(如約1mg/kg體重、約2mg/kg體重、約3mg/kg體重、約4mg/kg體重、約5mg/kg體重、約6mg/kg體重、約7mg/kg體重、約8mg/kg體重、約9mg/kg體重、約10mg/kg體重、約11mg/kg體重、約12mg/kg體重、約13mg/kg體重、約14mg/kg體重、約15mg/kg體重、約16mg/kg體重、約17mg/kg體重、約18mg/kg體重、約19mg/kg體重、約20mg/kg體重)，每周一次。
可調(diào)節(jié)劑量范圍以提供所期望的最佳反應(yīng)(如治療性反應(yīng))。例如，可以施用單一劑量、也可在一段時(shí)間內(nèi)施用幾個(gè)分開的劑量、或者根據(jù)治療情況的緊急程度成比例地減少或增加劑量。例如，根據(jù)患者的年齡、體重、身高、既往病史、現(xiàn)在的給藥方法以及可能的交叉反應(yīng)、變態(tài)反應(yīng)、感受性和不利的副作用，本領(lǐng)域一般技術(shù)水平的從業(yè)人員(如醫(yī)生或獸醫(yī))可決定或調(diào)節(jié)劑量。尤其有益的是將腸胃外給藥的組合物配制為單位劑量的形式，以易于施用并使劑量一致。
本領(lǐng)域一般技術(shù)水平的醫(yī)生或獸醫(yī)可容易地決定并開出所需藥物組合物的有效量。例如，醫(yī)生和獸醫(yī)可從低于為達(dá)到期望的治療效果的劑量，開出藥物組合物中所使用的本發(fā)明的抗體或抗原結(jié)合片段，并逐步提高劑量，直到獲得期望效果?？赏ㄟ^例如測定受治療者中正接受處理的腫瘤是否縮小或停止生長，來確定本發(fā)明抗體或組合的給定劑量或治療用藥法的有效性。腫瘤大小可容易地得到測定，例如，在手術(shù)操作中通過X-射線、磁共振成像(MRI)或目視觀察。還可通過利用胸苷PET掃描來測定腫瘤大小和增殖(參見例如，Wells等，Clin.Oncol.87-14(1996))。一般而言，胸苷PET掃描包括注射放射性示蹤劑，例如[2-11C]-胸苷，然后對患者身體進(jìn)行PET掃描(Vander Borght等，Gastroenterology 101794-799，1991；Vander Borght等，J.Radiat.Appl.Instrum.Part A，42103-104(1991))。其他可使用的示蹤劑包括[18F]-FDG(18-氟去氧葡萄糖)、[124I]IUdR(5-[124I]碘-2′-脫氧尿苷)、[76Br]BrdUrd(溴脫氧尿苷)、[18F]FLT(3′-脫氧-3′氟胸苷)或[11C]FMAU(2′-氟-5-甲基-1-β-D-阿拉伯呋喃糖尿嘧啶)。
例如，醫(yī)生或獸醫(yī)可通過多種方法監(jiān)測成神經(jīng)細(xì)胞瘤進(jìn)展，進(jìn)而相應(yīng)地改變給藥方案。監(jiān)測成神經(jīng)細(xì)胞瘤的方法包括，例如，CT掃描(如監(jiān)測腫瘤大小)、MRI掃描(如監(jiān)測腫瘤大小)、胸部X-射線檢查(如監(jiān)測腫瘤大小)、骨掃描、骨髓活體組織檢查(如檢查轉(zhuǎn)移到骨髓中)、激素試驗(yàn)(如腎上腺素的激素水平)、全血檢查(CBC)(如檢查貧血或其他異常)、在尿和血液中檢驗(yàn)兒茶酚胺類(成神經(jīng)細(xì)胞瘤腫瘤標(biāo)記物)、用于檢查高香草酸(HMA)或香草扁桃酸(VMA)水平(成神經(jīng)細(xì)胞瘤標(biāo)記物)的24小時(shí)尿檢驗(yàn)以及MIBG掃描(掃描注射的I123-標(biāo)記的間碘β胍(metaiodobetaguanidine)；如檢測腎上腺腫瘤)。
例如，醫(yī)生或獸醫(yī)可通過多種方法監(jiān)測橫紋肌肉瘤進(jìn)展，進(jìn)而相應(yīng)地改變給藥方案。監(jiān)測橫紋肌肉瘤的方法包括，例如腫瘤活組織檢查、CT掃描(如監(jiān)測腫瘤大小)、MRI掃描(如監(jiān)測腫瘤大小)、胸部CT掃描(如監(jiān)測轉(zhuǎn)移)、骨掃描(如監(jiān)測轉(zhuǎn)移)、骨髓活組織檢查(如監(jiān)測轉(zhuǎn)移)、腰椎穿刺(如檢查轉(zhuǎn)移到腦中)以及徹底的身體檢查。
例如，醫(yī)生或獸醫(yī)可通過多種方法監(jiān)測骨肉瘤進(jìn)展，進(jìn)而相應(yīng)地改變給藥方案。監(jiān)測骨肉瘤的方法包括，例如，侵襲區(qū)或胸部的X-射線檢查(如檢查波及肺)、侵襲區(qū)的CT掃描、血液檢查(如測定堿性磷酸酶水平)、胸部CT掃描以查看癌癥是否波及到肺、切開活組織檢查、或骨掃描以查看癌癥是否波及到其他的骨。
例如，醫(yī)生或獸醫(yī)可通過多種方法監(jiān)測胰腺癌進(jìn)展，進(jìn)而相應(yīng)地改變給藥方案。監(jiān)測胰腺癌的方法包括血液檢查以檢查腫瘤標(biāo)記物CA19-9和/或癌胚抗原(CEA)、上胃腸系統(tǒng)(如吞鋇檢查)、內(nèi)窺鏡超聲檢查術(shù)；內(nèi)窺鏡逆行性膽胰管造影術(shù)(胰管和膽管的x-射線檢查)；經(jīng)皮經(jīng)肝膽管造影術(shù)(旦管的x-射線檢查)、腹部超聲成像、腹部CT掃描。
本發(fā)明的組合物和方法包括任選地與一種或多種化學(xué)治療劑結(jié)合的IGF1R抑制劑。術(shù)語“與......結(jié)合”指本發(fā)明組合的組分可配制為用于同時(shí)給藥的單一組合物，或可單獨(dú)配制為兩種或多種組合物(如試劑盒)。此外，本發(fā)明組合的每種組分可在不同于其他組分施用時(shí)間的時(shí)間施用于受治療者；例如，在給定的一段時(shí)間內(nèi)，以一定的間隔不同時(shí)(如單獨(dú)或依次)施用每種組分。此外，單獨(dú)的組分可通過相同或不同的途徑(如經(jīng)口、由靜脈內(nèi)、皮下)施用于受治療者。
實(shí)施例 本發(fā)明意在舉例說明本發(fā)明，并不受限于此。任何披露于下的方法或組合物都落入本發(fā)明范圍內(nèi)。
實(shí)施例1抗體19D12對體內(nèi)腫瘤生長的作用 將腫瘤細(xì)胞與基質(zhì)膠(Matrigel)(1∶1細(xì)胞∶凝膠)一起皮下接種在無胸腺的裸小鼠右脅腹部。在這些實(shí)驗(yàn)中，每只小鼠皮下接種與常規(guī)基質(zhì)膠以1∶1混合的5×106個(gè)細(xì)胞。用卡尺測量腫瘤大小并將數(shù)據(jù)輸入labcat程序中。將具有100mm3平均大小的小鼠分為一組。腫瘤大小和體重每周測量兩次。
在此所列數(shù)據(jù)顯示所測試的癌細(xì)胞對所測定的19D 12抗-IGF1R抗體(包含SEQ ID NO8的第20-128位氨基酸的輕鏈可變區(qū)和包含SEQID NO10的第20-137位氨基酸的重鏈可變區(qū))具有異乎尋常的高水平敏感性。特別是，在所測試的癌癥中該抗體在相對低的劑量水平下能高效抑制腫瘤生長。
抗體處理啟動的細(xì)節(jié)和時(shí)間概述于下表1中。
表1.小鼠接種和治療概要 接神后啟動 細(xì)胞系#接種的細(xì)胞/小鼠 處理的天數(shù) 在這些實(shí)驗(yàn)中，小鼠每周給藥兩次，以所示頻度腹膜內(nèi)(i.p.)施用抗體19D12和化學(xué)治療劑。處理后腫瘤大小和小鼠體重每周測量兩次。
在這些實(shí)驗(yàn)中使用環(huán)磷酰胺、施鉑錠或吉西他濱(健擇(gemzar))的處理概述于下表2中。
表2.給予小鼠的化學(xué)治療處理概要
mpk＝毫克/公斤體重 wk＝周 下表3顯示了在所示的抗體或環(huán)磷酰胺劑量下，所觀察到的接種SK-N-AS成神經(jīng)細(xì)胞瘤細(xì)胞的小鼠中的腫瘤大小。
表3.處理對小鼠中成神經(jīng)細(xì)胞瘤腫瘤生長的影響
下表4顯示了在所示的抗體或施鉑錠劑量下，所觀察到的接種SK-N-MC成神經(jīng)細(xì)胞瘤細(xì)胞的小鼠中的腫瘤大小。
表4.處理對小鼠中成神經(jīng)細(xì)胞瘤腫瘤生長的影響

下表5顯示了在所示的抗體劑量下，所觀察到的接種SK-N-FI成神經(jīng)細(xì)胞瘤細(xì)胞的小鼠中的腫瘤大小。
表5.處理對小鼠中成神經(jīng)細(xì)胞瘤腫瘤生長的影響
下表6顯示了在所示的抗體和/或環(huán)磷酰胺劑量下，所觀察到的接種SJCRH30橫紋肌肉瘤細(xì)胞的小鼠中的腫瘤大小。
表6.處理對小鼠中橫紋肌肉瘤腫瘤生長的影響

下表7顯示了在所示的抗體和/或化學(xué)治療劑劑量下，所觀察到的接種Hs700T惡性胰腺細(xì)胞的小鼠中的腫瘤大小。
表7.處理對小鼠中胰腺腫瘤生長的影響
實(shí)施例2在SJSA-1異種移植模型中針對骨肉瘤的抗-IGF1R療效 這些數(shù)據(jù)證實(shí)了本發(fā)明的IGF 1R抑制劑例如抗-IGF1R抗體對于治療患者骨肉瘤是有用的。
將約7百萬個(gè)SJSA-1骨肉瘤細(xì)胞皮下接種到每只雌性裸小鼠(品系NU/NU，來自Charles River，年齡～6周大，平均重量～20克)的脅腹部。對于表8中所列的實(shí)驗(yàn)，當(dāng)異種移植腫瘤達(dá)到約100mm3的平均大小時(shí)，在接種后第18天啟動給藥。在研究期間以每只小鼠0.02mg、0.1或0.5mg的劑量每周兩次腹膜內(nèi)給予抗-IGF1R抗體(19D12輕鏈F/重鏈A(如上所示))，與此同時(shí)以100mpk的劑量總共注射3次每周兩次腹膜內(nèi)給予細(xì)胞毒素環(huán)磷酰胺。用卡尺每周測量兩次異種移植腫瘤大小，并通過LabCat程序用電子學(xué)的方法收集數(shù)據(jù)。表8中的數(shù)據(jù)證實(shí)了在該模型中顯著的抗-IGF1R-依賴的骨肉瘤腫瘤生長抑制。
對于表9中所列的實(shí)驗(yàn)，在接種后第15天啟動給藥。以每只小鼠0.04mg或0.1mg的劑量每周兩次腹膜內(nèi)給予抗-IGF1R抗體(LCF/HCA)，與此同時(shí)以50mpk或100mpk的劑量每周一次腹膜內(nèi)給予細(xì)胞毒素環(huán)磷酰胺。用卡尺每周測量兩次異種移植腫瘤大小，并通過LabCat程序用電子學(xué)的方法收集數(shù)據(jù)。表9中的數(shù)據(jù)包括在一段時(shí)間內(nèi)觀察到的腫瘤體積，并證實(shí)了抗-IGF1R-依賴的腫瘤體積消退。
表8.抗-IGF1R處理減小骨肉瘤腫瘤體積 05-IGFR-12SJSA-1 平均n＝10腫瘤尺寸mm3
平均標(biāo)準(zhǔn)誤差
腫瘤體積為mm3 表9.抗-IGF 1R和細(xì)胞毒素聯(lián)合處理消退骨肉瘤腫瘤體積 05-IGFR-21SJSA-1 平均n＝10腫瘤尺寸mm3
平均標(biāo)準(zhǔn)誤差
腫瘤體積為mm3 *************************** 本發(fā)明的范圍不為在此所描述的特定實(shí)施方案所限制。實(shí)際上，除了在此的描述之外，還科根據(jù)上述描述對本發(fā)明進(jìn)行各種修改，這對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的。這樣的修改意在落入所附權(quán)利要求的范圍之內(nèi)。
為了所有的目的，本申請全文中所引用的專利、專利申請、出版物、產(chǎn)品說明書以及實(shí)驗(yàn)方案，其全文在此并入作為參考。
序列表
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<210>1
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<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>輕鏈C
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(384)
<400>1
atg tcg cca tca caa ctc att ggg ttt ctg ctg ctc tgg gtt cca gcc 48
Met Ser Pro Ser Gln Leu Ile Gly Phe Leu Leu Leu Trp Val Pro Ala
1 5 10 15
tcc agg ggt gaa att gtg ctg act cag agc cca gac tct ctg tct gtg 96
Ser Arg Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ser Val
20 25 30
act cca ggc gag aga gtc acc atc acc tgc cgg gcc agt cag agc att144
Thr Pro Gly Glu Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile
35 40 45
ggt agt agc tta cac tgg tac cag cag aaa cca ggt cag tct cca aag192
Gly Ser Ser Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys
50 55 60
ctt ctc atc aag tat gca tcc cag tcc ctc tca ggg gtc ccc tcg agg240
Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Leu Ser Gly Val Pro Ser Arg
65 70 75 80
ttc agt ggc agt gga tct ggg aca gat ttc acc ctc acc atc agt agc288
Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser
85 90 95
ctc gag gct gaa gat gct gca gcg tat tac tgt cat cag agt agt cgt336
Leu Glu Ala Glu Asp Ala Ala Ala Tyr Tyr Cys His Gln Ser Ser Arg
100 105 110
tta cct cac act ttc ggc caa ggg acc aag gtg gag atc aaa cgt acg384
Leu Pro His Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr
115 120 125
<210>2
<211>128
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>合成構(gòu)建體
<400>2
Met Ser Pro Ser Gln Leu Ile Gly Phe Leu Leu Leu Trp Val Pro Ala
1 5 10 15
Ser Arg Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ser Val
20 25 30
Thr Pro Gly Glu Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile
35 40 45
Gly Ser Ser Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys
50 55 60
Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Leu Ser Gly Val Pro Ser Arg
65 70 75 80
Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser
85 90 95
Leu Glu Ala Glu Asp Ala Ala Ala Tyr Tyr Cys His Gln Ser Ser Arg
100 105 110
Leu Pro His Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr
115 120 125
<210>3
<211>384
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>輕鏈D
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(384)
<400>3
atg tcg cca tca caa ctc att ggg ttt ctg ctg ctc tgg gtt cca gcc48
Met Ser Pro Ser Gln Leu Ile Gly Phe Leu Leu Leu Trp Val Pro Ala
1 5 10 15
tcc agg ggt gaa att gtg ctg act cag agc cca gac tct ctg tct gtg96
Ser Arg Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ser Val
20 25 30
act cca ggc gag aga gtc acc atc acc tgc cgg gcc agt cag agc att144
Thr Pro Gly Glu Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile
35 40 45
ggt agt agc tta cac tgg tac cag cag aaa cca ggt cag tct cca aag192
Gly Ser Ser Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys
50 55 60
ctt ctc atc aag tat gca tcc cag tcc ctc tca ggg gtc ccc tcg agg240
Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Leu Ser Gly Val Pro Ser Arg
65 70 75 80
ttc agt ggc agt gga tct ggg aca gat ttc acc ctc acc atc agt agc288
Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser
85 90 95
ctc gag gct gaa gat ttc gca gtg tat tac tgt cat cag agt agt cgt336
Leu Glu Ala Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys His Gln Ser Ser Arg
100 105 110
tta cct cac act ttc ggc caa ggg acc aag gtg gag atc aaa cgt acg384
Leu Pro His Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr
115 120 125
<210>4
<211>128
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>合成構(gòu)建體
<400>4
Met Ser Pro Ser Gln Leu Ile Gly Phe Leu Leu Leu Trp Val Pro Ala
1 5 10 15
Ser Arg Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ser Val
20 25 30
Thr Pro Gly Glu Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile
35 40 45
Gly Ser Ser Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys
50 55 60
Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Leu Ser Gly Val Pro Ser Arg
65 70 75 80
Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser
85 90 95
Leu Glu Ala Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys His Gln Ser Ser Arg
100 105 110
Leu Pro His Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr
115 120 125
<210>5
<211>384
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>輕鏈E
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(384)
<400>5
atg tcg cca tca caa ctc att ggg ttt ctg ctg ctc tgg gtt cca gcc 48
Met Ser Pro Ser Gln Leu Ile Gly Phe Leu Leu Leu Trp Val Pro Ala
1 5 10 15
tcc agg ggt gaa att gtg ctg act cag agc cca ggt acc ctg tct gtg 96
Ser Arg Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Val
20 25 30
tct cca ggc gag aga gcc acc ctc tcc tgc cgg gcc agt cag agc att 144
Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile
35 40 45
ggt agt agc tta cac tgg tac cag cag aaa cca ggt cag gct cca agg 192
Gly Ser Ser Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg
50 55 60
ctt ctc atc aag tat gca tcc cag tcc ctc tca ggg atc ccc gat agg 240
Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Leu Ser Gly Ile Pro Asp Arg
65 70 75 80
ttc agt ggc agt gga tct ggg aca gat ttc acc ctc acc atc agt aga 288
Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg
85 90 95
ctg gag cct gaa gat gct gca gcg tat tac tgt cat cag agt agt cgt 336
Leu Glu Pro Glu Asp Ala Ala Ala Tyr Tyr Cys His Gln Ser Ser Arg
100 105 110
tta cct cac act ttc ggc caa ggg acc aag gtg gag atc aaa cgt aca 384
Leu Pro His Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr
115 120 125
<210>6
<211>128
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>合成構(gòu)建體
<400>6
Met Ser Pro Ser Gln Leu Ile Gly Phe Leu Leu Leu Trp Val Pro Ala
1 5 10 15
Ser Arg Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Val
20 25 30
Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile
35 40 45
Gly Ser Ser Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg
50 55 60
Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Leu Ser Gly Ile Pro Asp Arg
65 70 75 80
Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg
85 90 95
Leu Glu Pro Glu Asp Ala Ala Ala Tyr Tyr Cys His Gln Ser Ser Arg
100 105 110
Leu Pro His Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr
115 120 125
<210>7
<211>384
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>輕鏈F
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(384)
<400>7
atg tcg cca tca caa ctc att ggg ttt ctg ctg ctc tgg gtt cca gcc 48
Met Ser Pro Ser Gln Leu Ile Gly Phe Leu Leu Leu Trp Val Pro Ala
1 5 10 15
tcc agg ggt gaa att gtg ctg act cag agc cca ggt acc ctg tct gtg 96
Ser Arg Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Val
20 25 30
tct cca ggc gag aga gcc acc ctc tcc tgc cgg gcc agt cag agc att 144
Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile
35 40 45
ggt agt agc tta cac tgg tac cag cag aaa cca ggt cag gct cca agg192
Gly Ser Ser Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg
50 55 60
ctt ctc atc aag tat gca tcc cag tcc ctc tca ggg atc ccc gat agg240
Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Leu Ser Gly Ile Pro Asp Arg
65 70 75 80
ttc agt ggc agt gga tct ggg aca gat ttc acc ctc acc atc agt aga288
Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg
85 90 95
ctg gag cct gaa gat ttc gca gtg tat tac tgt cat cag agt agt cgt336
Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys His Gln Ser Ser Arg
100 105 110
tta cct cac act ttc ggc caa ggg acc aag gtg gag atc aaa cgt aca384
Leu Pro His Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr
115 120 125
<210>8
<211>128
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>合成構(gòu)建體
<400>8
Met Ser Pro Ser Gln Leu Ile Gly Phe Leu Leu Leu Trp Val Pro Ala
1 5 10 15
Ser Arg Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Val
20 25 30
Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile
35 40 45
Gly Ser Ser Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg
50 55 60
Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Leu Ser Gly Ile Pro Asp Arg
65 70 75 80
Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg
85 90 95
Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys His Gln Ser Ser Arg
100 105 110
Leu Pro His Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr
115 120 125
<210>9
<211>411
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>重鏈A
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(411)
<400>9
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Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val Ala Ile Leu Lys Gly
1 5 10 15
gtc cag tgt gag gtt cag ctg gtg cag tct ggg gga ggc ttg gta aag 96
Val Gln Cys Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys
20 25 30
cct ggg ggg tcc ctg aga ctc tcc tgt gca gcc tct gga ttc acc ttc 144
Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe
35 40 45
agt agc ttt gct atg cac tgg gtt cgc cag gct cca gga aaa ggt ctg 192
Ser Ser Phe Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu
50 55 60
gag tgg ata tca gtt att gat act cgt ggt gcc aca tac tat gca gac 240
Glu Trp Ile Ser Val Ile Asp Thr Arg Gly Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp
65 70 75 80
tcc gtg aag ggc cga ttc acc atc tcc aga gac aat gcc aag aac tcc 288
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser
85 90 95
ttg tat ctt caa atg aac agc ctg aga gcc gag gac act gct gtg tat 336
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
100 105 110
tac tgt gca aga ctg ggg aac ttc tac tac ggt atg gac gtc tgg ggc 384
Tyr Cys Ala Arg Leu Gly Asn Phe Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly
115 120 125
caa ggg acc acg gtc acc gtc tcc tca 411
Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
130 135
<210>10
<211>137
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>合成構(gòu)建體
<400>10
Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val Ala Ile Leu Lys Gly
1 5 10 15
Val Gln Cys Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys
20 25 30
Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe
35 40 45
Ser Ser Phe Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Ile Ser Val Ile Asp Thr Arg Gly Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp
65 70 75 80
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser
85 90 95
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
100 105 110
Tyr Cys Ala Arg Leu Gly Asn Phe Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly
115 120 125
Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
130 135
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<211>411
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>重鏈B
<220>
<221>CDS
<222>(1)..(411)
<400>11
atg gag ttt ggg ctg agc tgg gtt ttc ctt gtt gct ata tta aaa ggt 48
Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val Ala Ile Leu Lys Gly
1 5 10 15
gtc cag tgt gag gtt cag ctg gtg cag tct ggg gga ggc ttg gta cag 96
Val Gln Cys Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln
20 25 30
ccc ggg ggg tcc ctg aga ctc tcc tgt gca gcc tct gga ttc acc ttc 144
Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe
35 40 45
agt agc ttt gct atg cac tgg gtt cgc cag gct cca gga aaa ggt ctg 192
Set Ser Phe Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu
50 55 60
gag tgg ata tca gtt att gat act cgt ggt gcc aca tac tat gca gac 240
Glu Trp Ile Ser Val Ile Asp Thr Arg Gly Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp
65 70 75 80
tcc gtg aag ggc cga ttc acc atc tcc aga gac aat gcc aag aac tcc 288
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser
85 90 95
ttg tat ctt caa atg aac agc ctg aga gcc gag gac act gct gtg tat 336
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
100 105 110
tac tgt gca aga ctg ggg aac ttc tac tac ggt atg gac gtc tgg ggc 384
Tyr Cys Ala Arg Leu Gly Asn Phe Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly
115 120 125
caa ggg acc acg gtc acc gtc tcc tca 411
Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
130 135
<210>12
<211>137
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>合成構(gòu)建體
<400>12
Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val Ala Ile Leu Lys Gly
1 5 10 15
Val Gln Cys Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln
20 25 30
Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe
35 40 45
Ser Ser Phe Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Ile Ser Val Ile Asp Thr Arg Gly Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp
65 70 75 80
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser
85 90 95
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
100 105 110
Tyr Cys Ala Arg Leu Gly Asn Phe Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly
115 120 125
Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
130 135
<210>13
<211>174
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白重鏈可變區(qū)
<400>13
Gly Arg Leu Gly Gln Ala Trp Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala
1 5 10 15
Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr Tyr Met Ser Trp Ile Arg Gln Ala
20 25 30
Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser Tyr Ile Ser Ser Ser Gly Ser
35 40 45
Thr Arg Asp Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gy Arg Phe Thr Ile Ser Arg
50 55 60
Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala
65 70 75 80
Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val Arg Asp Gly Val Glu Thr Thr
85 90 95
Phe Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu
115 120 125
Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys
130 135 140
Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser
145 150 155 160
Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ser Cys Ala
165 170
<210>14
<211>124
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白重鏈可變區(qū)
<400>14
Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser
1 5 10 15
Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ala
20 25 30
Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser
35 40 45
Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Thr Thr Phe Tyr Ala Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Arg Thr Thr Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Lys Asp Leu Gly Trp Ser Asp Ser Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp
100 105 110
Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210>15
<211>112
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白重鏈可變區(qū)
<400>15
Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr
1 5 10 15
Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Asn Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln
20 25 30
Pro Ala Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Arg Ile Tyr Thr Ser Gly
35 40 45
Ser Pro Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Met Ser Val
50 55 60
Asp Thr Ser Lys Ash Gln Phe Ser Leu Lys Leu Asn Ser Val Thr Ala
65 70 75 80
Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Val Thr Ile Phe Gly Val Val
85 90 95
Ile Ile Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
100 105 110
<210>16
<211>125
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白重鏈可變區(qū)
<400>16
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ile Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Leu Gly Tyr Gly Asp Phe Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met
100 105 110
Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210>17
<211>113
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白重鏈可變區(qū)
<400>17
Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val
1 5 10 15
Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro
20 25 30
Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser
35 40 45
Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp
50 55 60
Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala
65 70 75 80
Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Thr Tyr Ser Ser Ser Phe Tyr
85 90 95
Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser
100 105 110
Ser
<210>18
<211>122
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白重鏈可變區(qū)
<400>18
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Thr Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Pro Gly Thr Thr Val Ile Met Ser Trp Phe Asp Pro Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210>19
<211>136
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)
<400>19
Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Phe Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp
1 5 10 15
Ile Arg Arg Asp Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro
20 25 30
Lys Arg Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Arg Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser
35 40 45
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser
50 55 60
Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln His Asn
65 70 75 80
Asn Tyr Pro Arg Thr Phe Gly Gln Gly Thr Glu Val Glu Ile Ile Arg
85 90 95
Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln
100 105 110
Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr
115 120 125
Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp
130 135
<210>20
<211>107
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)
<400>20
Asp Ile Gln Met Thr Gln Phe Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp
20 25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Arg Leu His Arg Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln His Asn Ser Tyr Pro Cys
85 90 95
Ser Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210>21
<211>100
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)
<400>21
Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Phe Thr Cys Arg
1 5 10 15
Ala Ser Gln Asp Ile Arg Arg Asp Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
20 25 30
Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Arg Leu Gln Ser
35 40 45
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr
50 55 60
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys
65 70 75 80
Leu Gln His Asn Asn Tyr Pro Arg Thr Phe Gly Gln Gly Thr Glu Val
85 90 95
Glu Ile Ile Arg
100
<210>22
<211>107
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)
<400>22
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Ser Asp
20 25 30
Leu Gly Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Lys Leu His Arg Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln His Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210>23
<211>92
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)
<400>23
Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Thr
1 5 10 15
Phe Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu
20 25 30
Ile His Val Ala Ser Ser Leu Gln Gly Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser
35 40 45
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln
50 55 60
Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Asn Ala Pro
65 70 75 80
Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
85 90
<210>24
<211>91
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)
<400>24
Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Arg Gly Arg Tyr
1 5 10 15
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
20 25 30
Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly
35 40 45
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro
50 55 60
Glu Asp Phe Ala Val Phe Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro Arg
65 70 75 80
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
85 90
<210>25
<211>236
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白輕鏈
<400>25
Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp
1 5 10 15
Phe Pro Gly Ala Arg Cys Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser
20 25 30
Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser
35 40 45
Gln Gly Ile Arg Asn Asp Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys
50 55 60
Ala Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val
65 70 75 80
Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr
85 90 95
Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln
100 105 110
His Asn Ser Tyr Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile
115 120 125
Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp
130 135 140
Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn
145 150 155 160
Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu
165 170 175
Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp
180 185 190
Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr
195 200 205
Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser
210 215 220
Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
225 230 235
<210>26
<211>236
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白輕鏈
<400>26
Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp
1 5 10 15
Phe Pro Gly Ala Arg Cys Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser
20 25 30
Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Phe Thr Cys Arg Ala Ser
35 40 45
Gln Asp Ile Arg Arg Asp Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys
50 55 60
Ala Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Arg Leu Gln Ser Gly Val
65 70 75 80
Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr
85 90 95
Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln
100 105 110
His Asn Asn Tyr Pro Arg Thr Phe Gly Gln Gly Thr Glu Val Glu Ile
115 120 125
Ile Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp
130 135 140
Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn
145 150 155 160
Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu
165 170 175
Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp
180 185 190
Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr
195 200 205
Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser
210 215 220
Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
225 230 235
<210>27
<211>236
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白輕鏈
<400>27
Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp
1 5 10 15
Phe Pro Gly Ala Arg Cys Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser
20 25 30
Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser
35 40 45
Gln Gly Ile Arg Asn Asp Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys
50 55 60
Ala Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val
65 70 75 80
Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr
85 90 95
Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln
100 105 110
His Asn Ser Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile
115 120 125
Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp
130 135 140
Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn
145 150 155 160
Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu
165 170 175
Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp
180 185 190
Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr
195 200 205
Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser
210 215 220
Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
225 230 235
<2l0>28
<211>236
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白輕鏈
<400>28
Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp
1 5 10 15
Phe Pro Gly Ala Arg Cys Asp Ile Gln Met Thr Gln Phe Pro Ser Ser
20 25 30
Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser
35 40 45
Gln Gly Ile Arg Asn Asp Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys
50 55 60
Ala Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Arg Leu His Arg Gly Val
65 70 75 80
Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr
85 90 95
Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln
100 105 110
His Asn Ser Tyr Pro Cys Ser Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile
115 120 125
Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp
130 135 140
Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn
145 150 155 160
Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu
165 170 175
Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp
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Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr
195 200 205
Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser
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Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
225 230 235
<210>29
<211>473
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白重鏈
<400>29
Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val Ala Ile Ile Lys Gly
1 5 10 15
Val Gln Cys Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys
20 25 30
Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe
35 40 45
Ser Asp Tyr Tyr Met Ser Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu
50 55 60
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65 70 75 80
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85 90 95
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100 105 110
Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Leu Arg Phe Leu Glu Trp Leu Leu Tyr Tyr
115 120 125
Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr
130 135 140
Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro
145 150 155 160
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165 170 175
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180 185 190
Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly
195 200 205
Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly
210 215 220
Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys
225 230 235 240
Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys
245 250 255
Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys
260 265 270
Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val
275 280 285
Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Ash Trp Tyr
290 295 300
Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu
305 310 315 320
Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His
325 330 335
Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys
340 345 350
Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln
355 360 365
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370 375 380
Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro
385 390 395 400
Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn
405 410 415
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420 425 430
Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val
435 440 445
Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln
450 455 460
Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
465 470
<210>30
<211>470
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白重鏈
<400>30
Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val Ala Ile Ile Lys Gly
1 5 10 15
Val Gln Cys Gln Ala Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys
20 25 30
Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe
35 40 45
Ser Asp Tyr Tyr Met Ser Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Val Ser Tyr Ile Ser Ser Ser Gly Ser Thr Arg Asp Tyr Ala
65 70 75 80
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn
85 90 95
Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
100 105 110
Tyr Tyr Cys Val Arg Asp Gly Val Glu Thr Thr Phe Tyr Tyr Tyr Tyr
115 120 125
Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
130 135 140
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
145 150 155 160
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
165 170 175
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
180 185 190
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
195 200 205
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr
210 215 220
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
225 230 235 240
Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
245 250 255
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
260 265 270
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
275 280 285
Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
290 295 300
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn
305 310 315 320
Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp
325 330 335
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro
340 345 350
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu
355 360 365
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn
370 375 380
Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
385 390 395 400
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
405 410 415
Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
420 425 430
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
435 440 445
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
450 455 460
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
465 470
<210>31
<211>470
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白重鏈
<400>31
Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Leu Phe Leu Val Ala Ile Leu Lys Gly
1 5 10 15
Val Gln Cys Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln
20 25 30
Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe
35 40 45
Ser Ser Tyr Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Val Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala
65 70 75 80
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn
85 90 95
Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
100 105 110
Tyr Tyr Cys Ala Lys Gly Tyr Ser Ser Gly Trp Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr
115 120 125
Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
130 135 140
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
145 150 155 160
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
165 170 175
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
180 185 190
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
195 200 205
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr
210 215 220
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
225 230 235 240
Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
245 250 255
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
260 265 270
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
275 280 285
Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
290 295 300
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn
305 310 315 320
Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp
325 330 335
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro
340 345 350
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu
355 360 365
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn
370 375 380
Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
385 390 395 400
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
405 410 415
Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
420 425 430
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
435 440 445
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
450 455 460
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
465 470
<210>32
<211>470
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白重鏈
<400>32
Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Leu Phe Leu Val Ala Ile Leu Lys Gly
1 5 10 15
Val Gln Cys Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln
20 25 30
Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe
35 40 45
Ser Ser Tyr Ala Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Val Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Thr Thr Phe Tyr Ala
65 70 75 80
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Arg Thr
85 90 95
Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
100 105 110
Tyr Tyr Cys Ala Lys Asp Leu Gly Trp Ser Asp Ser Tyr Tyr Tyr Tyr
115 120 125
Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
130 135 140
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
145 150 155 160
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
165 170 175
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
180 185 190
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
195 200 205
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr
210 215 220
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
225 230 235 240
Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
245 250 255
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
260 265 270
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
275 280 285
Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
290 295 300
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn
305 310 315 320
Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp
325 330 335
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro
340 345 350
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu
355 360 365
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn
370 375 380
Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
385 390 395 400
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
405 410 415
Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
420 425 430
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
435 440 445
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
450 455 460
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
465 470
<210>33
<211>470
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>2.12.1fx的免疫球蛋白重鏈
<400>33
Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val Ala Ile Ile Lys Gly
1 5 10 15
Val Gln Cys Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys
20 25 30
Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe
35 40 45
Ser Asp Tyr Tyr Met Ser Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Val Ser Tyr Ile Ser Ser Ser Gly Ser Thr Arg Asp Tyr Ala
65 70 75 80
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn
85 90 95
Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
100 105 110
Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Gly Val Glu Thr Thr Phe Tyr Tyr Tyr Tyr
115 120 125
Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
130 135 140
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
145 150 155 160
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
165 170 175
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
180 185 190
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
195 200 205
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr
210 215 220
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
225 230 235 240
Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
245 250 255
Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
260 265 270
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
275 280 285
Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
290 295 300
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn
305 310 315 320
Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp
325 330 335
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro
340 345 350
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu
355 360 365
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn
370 375 380
Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
385 390 395 400
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
405 410 415
Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
420 425 430
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
435 440 445
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
450 455 460
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
465 470
<210>34
<211>125
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>2.12.1fx的成熟的免疫球蛋白重鏈可變區(qū)
<400>34
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Tyr Met Ser Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Tyr Ile Ser Ser Ser Gly Ser Thr Arg Asp Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Gly Val Glu Thr Thr Phe Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met
100 105 110
Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210>35
<211>236
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>2.12.1fx的免疫球蛋白輕鏈
<400>35
Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp
1 5 10 15
Phe Pro Gly Ala Arg Cys Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser
20 25 30
Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser
35 40 45
Gln Asp Ile Arg Arg Asp Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys
50 55 60
Ala Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Arg Leu Gln Ser Gly Val
65 70 75 80
Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr
85 90 95
Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln
100 105 110
His Asn Asn Tyr Pro Arg Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile
115 120 125
Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp
130 135 140
Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn
145 150 155 160
Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu
165 170 175
Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp
180 185 190
Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr
195 200 205
Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser
210 215 220
Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
225 230 235
<210>36
<211>108
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>2.12.1fx的成熟的免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)
<400>36
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Arg Arg Asp
20 25 30
Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Arg Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln His Asn Asn Tyr Pro Arg
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
100 105
<210>37
<211>112
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>人源化的7C10免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)；
變型1
<400>37
Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30
Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Gln Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Leu Tyr Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95
Ser His Val Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210>38
<211>112
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>人源化的7C10免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)；
變型2
<400>38
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30
Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Gln Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Leu Tyr Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95
Ser His Val Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210>39
<211>117
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>人源化的7C10免疫球蛋白重鏈可變區(qū)；
變型1
<400>39
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Tyr Ser Ile Thr Gly Gly
20 25 30
Tyr Leu Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp
35 40 45
Met Gly Tyr Ile Ser Tyr Asp Gly Thr Asn Asn Tyr Lys Pro Ser Leu
50 55 60
Lys Asp Arg Ile Thr Ile Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser
65 70 75 80
Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Gly Arg Val Phe Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210>40
<211>117
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>人源化的7C10免疫球蛋白重鏈可變區(qū)；
變型2
<400>40
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Tyr Ser Ile Thr Gly Gly
20 25 30
Tyr Leu Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp
35 40 45
Ile Gly Tyr Ile Ser Tyr Asp Gly Thr Asn Asn Tyr Lys Pro Ser Leu
50 55 60
Lys Asp Arg Val Thr Ile Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser
65 70 75 80
Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Gly Arg Val Phe Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210>41
<211>117
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>人源化的7C10免疫球蛋白重鏈可變區(qū)；
變型3
<400>41
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Tyr Ser Ile Ser Gly Gly
20 25 30
Tyr Leu Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp
35 40 45
Ile Gly Tyr Ile Ser Tyr Asp Gly Thr Asn Asn Tyr Lys Pro Ser Leu
50 55 60
Lys Asp Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser
65 70 75 80
Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Gly Arg Val Phe Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210>42
<211>130
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>A12免疫球蛋白重鏈可變區(qū)
<400>42
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Ash Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ala Pro Leu Arg Phe Leu Glu Trp Ser Thr Gln Asp His Tyr
100 105 110
Tyr Tyr Tyr Tyr Met Asp Val Trp Gly Lys Gly Thr Thr Val Thr Val
115 120 125
Ser Ser
130
<210>43
<211>109
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>A12免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)
<400>43
Ser Ser Glu Leu Thr Gln Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gln
1 5 10 15
Thr Val Arg Ile Thr Cys Gln Gly Asp Ser Leu Arg Ser Tyr Tyr Ala
20 25 30
Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr
35 40 45
Gly Lys Asn Asn Arg Pro Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Ser Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Ala Gln Ala Glu
65 70 75 80
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser Arg Asp Asn Ser Asp Asn Arg
85 90 95
Leu Ile Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Ser
100 105
<210>44
<211>119
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>1A免疫球蛋白重鏈可變區(qū)
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(119)
<223>可能的突變R30，S30，N31，S31，Y94，H94，D104，E104.
<400>44
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Arg Asn Tyr
20 25 30
Ala Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ala Ile Gly Ser Gly Gly Gly Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Ala Pro Asn Trp Gly Ser Asp Ala Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Met Val Thr Val Ser Ser
115
<210>45
<211>107
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>1A免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)
<220>
<221>MISC_FEATURE
<222>(1)..(107)
<223>可能的突變P96，I96，P100，Q100，R103，K103，V104，L104，
D105，E105
<400>45
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Trp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Glu Lys Ala Pro Lys Ser Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Pro
85 90 95
Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
100 105
<210>46
<211>251
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>單鏈fv 8A1
<400>46
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Thr Ile Ser Cys Lys Gly Pro Gly Tyr Asn Phe Phe Asn Tyr
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Tyr Pro Thr Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Val Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ser Ile Arg Tyr Cys Pro Gly Gly Arg Cys Tyr Ser Gly Tyr
100 105 110
Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ser
130 135 140
Glu Leu Thr Gln Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gln Thr Val
145 150 155 160
Arg Ile Thr Cys Gln Gly Asp Ser Leu Arg Ser Tyr Tyr Ala Ser Trp
165 170 175
Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr Gly Lys
180 185 190
Asn Asn Arg Pro Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Ser Ser
195 200 205
Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Ala Gln Ala Glu Asp Glu
210 215 220
Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser Arg Asp Ser Ser Gly Asn His Val Val
225 230 235 240
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
245 250
<210>47
<211>245
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>單鏈fv 9A2
<400>47
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Arg Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Thr Ser Gly Tyr Thr Phe Arg Asn Tyr
20 25 30
Asp Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Ile Ser Gly His Tyr Gly Asn Thr Asp His Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Phe Thr Met Thr Lys Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Phe Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ser Gln Trp Asn Val Asp Tyr Trp Gly Arg Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
115 120 125
Gly Gly Ser Ala Leu Asn Phe Met Leu Thr Gln Pro His Ser Val Ser
130 135 140
Glu Ser Pro Gly Lys Thr Val Thr Ile Ser Cys Thr Arg Ser Ser Gly
145 150 155 160
Ser Ile Ala Ser Asn Tyr Val Gln Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Ser
165 170 175
Ser Pro Thr Thr Val Ile Phe Glu Asp Asn Arg Arg Pro Ser Gly Val
180 185 190
Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Ile Asp Thr Ser Ser Asn Ser Ala Ser
195 200 205
Leu Thr Ile Ser Gly Leu Lys Thr Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys
210 215 220
Gln Ser Phe Asp Ser Thr Asn Leu Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys
225 230 235 240
Val Thr Val Leu Gly
245
<210>48
<211>245
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>單鏈fv 11A4
<400>48
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asr Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ser Ser Pro Tyr Ser Ser Arg Trp Tyr Ser Phe Asp Pro Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
115 120 125
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Leu Ser Tyr Glu Leu Thr Gln
130 135 140
Pro Pro Ser Val Ser Val Ser Pro Gly Gln Thr Ala Thr Ile Thr Cys
145 150 155 160
Ser Gly Asp Asp Leu Gly Asn Lys Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln Lys
165 170 175
Pro Gly Gln Ser Pro Val Leu Val Ile Tyr Gln Asp Thr Lys Arg Pro
180 185 190
Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser Asn Ser Gly Asn Ile Ala
195 200 205
Thr Leu Thr Ile Ser Gly Thr Gln Ala Val Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr
210 215 220
Cys Gln Val Trp Asp Thr Gly Thr Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys
225 230 235 240
Leu Thr Val Leu Gly
245
<210>49
<211>251
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>單鏈fv 7A4
<400>49
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Thr Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Asn Phe Phe Asn Tyr
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Asp Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Tyr Pro Thr Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Val Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ser Ile Arg Tyr Cys Pro Gly Gly Arg Cys Tyr Ser Gly Tyr
100 105 110
Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
Gly Gly Gly Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ser
130 135 140
Glu Leu Thr Gln Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gln Thr Val
145 150 155 160
Arg Ile Thr Cys Arg Gly Asp Ser Leu Arg Asn Tyr Tyr Ala Ser Trp
165 170 175
Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr Gly Lys
180 185 190
Asn Asn Arg Pro Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Ser Ser
195 200 205
Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Ala Gln Ala lu Asp Glu
210 215 220
Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser Arg Asp Ser Ser Gly Asn His Met Val
225 230 235 240
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
245 250
<210>50
<211>249
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>單鏈fv 11A1
<400>50
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Phe
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ile Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu
35 40 45
Ser Gly Leu Arg His Asp Gly Ser Thr Ala Tyr Tyr Ala Gly Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Arg Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys
85 90 95
Val Thr Gly Ser Gly Ser Ser Gly Pro His Ala Phe Pro Val Trp Gly
100 105 110
Lys Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
115 120 125
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Leu Ser Tyr Val Leu Thr Gln
130 135 140
Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln Arg Val Thr Ile Ser Cys
145 150 155 160
Ser Gly Ser Asn Ser Asn Ile Gly Thr Tyr Thr Val Asn Trp Phe Gln
165 170 175
Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Ser Asn Asn Gln
180 185 190
Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr
195 200 205
Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Gln Ser Glu Asp Glu Ala Asp
210 215 220
Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Asn Gly Pro Val Phe Gly
225 230 235 240
Gly Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly
245
<210>51
<211>251
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>單鏈fv 7A6
<400>51
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Thr Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Asn Phe Phe Asn Tyr
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Tyr Pro Thr Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Val Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ser Ile Arg Tyr Cys Pro Gly Gly Arg Cys Tyr Ser Gly Tyr
100 105 110
Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ser
130 135 140
Glu Leu Thr Gln Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gln Thr Val
145 150 155 160
Arg Ile Thr Cys Gln Gly Asp Ser Leu Arg Ser Tyr Tyr Thr Asn Trp
65 170 175
Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Leu Leu Val Val Tyr Ala Lys
180 185 190
Asn Lys Arg Pro Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Ser Ser
195 200 205
Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Ala Gln Ala Glu Asp Glu
210 215 220
Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser Arg Asp Ser Ser Gly Asn His Val Val
225 230 235 240
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
245 250
<210>52
<211>5
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>CDR
<400>52
Ser Tyr Trp Met His
1 5
<210>53
<211>17
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>CDR
<400>53
Glu Ile Asn Pro Ser Asn Gly Arg Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe Lys
1 5 10 15
Arg
<210>54
<211>15
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>CDR
<400>54
Gly Arg Pro Asp Tyr Tyr Gly Ser Ser Lys Trp Tyr Phe Asp Val
1 5 10 15
<210>55
<211>16
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>CDR
<400>55
Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser Asn Val Asn Thr Tyr Leu Glu
1 5 10 15
<210>56
<211>7
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>CDR
<400>56
Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser
1 5
<210>57
<211>9
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>CDR
<400>57
Phe Gln Gly Ser His Val Pro Pro Thr
1 5
<210>58
<211>123
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白重鏈可變區(qū)
<400>58
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Glu Ile Asn Pro Ser Asn Gly Arg Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Phe
85 90 95
Ala Arg Gly Arg Pro Asp Tyr Tyr Gly Ser Ser Lys Trp Tyr Phe Asp
100 105 110
Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser
115 120
<210>59
<211>118
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白重鏈可變區(qū)
<400>59
Gln Val Gln Phe Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Leu Met His Trp Ile Lys Gln Arg Pro Gly Arg Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Asn Val Val Thr Lys Phe Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Ser Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Pro Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Ala Tyr Cys Arg Pro Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Thr Val Thr Val Ser Ser
115
<210>60
<211>123
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白重鏈可變區(qū)
<400>60
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Glu Ile Asn Pro Ser Asn Gly Arg Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Arg Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Phe
85 90 95
Ala Arg Gly Arg Pro Asp Tyr Tyr Gly Ser Ser Lys Trp Tyr Phe Asp
100 105 110
Val Trp Gly Ala Gly Thr Thr Val Thr Val Ser
115 120
<210>61
<211>120
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白重鏈可變區(qū)
<400>61
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Met Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Thr Gly Tyr Thr Phe Ser Ser Phe
20 25 30
Trp Ile Glu Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly His Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Glu Ile Leu Pro Gly Ser Gly Gly Thr His Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Gly Lys Ala Thr Phe Thr Ala Asp Lys Ser Ser Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly His Ser Tyr Tyr Phe Tyr Asp Gly Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210>62
<211>120
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白重鏈可變區(qū)
<400>62
Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly Ser Val Leu Val Arg Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Ser
20 25 30
Trp Ile His Trp Ala Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Glu Ile His Pro Asn Ser Gly Asn Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Val Asp Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Trp Arg Tyr Gly Ser Pro Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser
115 120
<210>63
<211>120
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白重鏈可變區(qū)
<400>63
Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Arg Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Gly Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Ser Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Pro Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Asp Tyr Tyr Gly Ser Ser Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser
115 120
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<211>123
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白重鏈可變區(qū)
<400>64
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Glu Ile Asn Pro Ser Asn Gly Arg Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Phe
85 90 95
Ala Arg Gly Arg Pro Asp Tyr Tyr Gly Ser Ser Lys Trp Tyr Phe Asp
100 105 110
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115 120
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<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白重鏈可變區(qū)
<400>65
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
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50 55 60
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65 70 75 80
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Ala Arg Gly Arg Pro Asp Tyr Tyr Gly Ser Ser Lys Trp Tyr Phe Asp
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<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白重鏈可變區(qū)
<400>66
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
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65 70 75 80
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<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白重鏈可變區(qū)
<400>67
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Arg Gly Leu Glu Trp Ile
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<220>
<223>免疫球蛋白重鏈可變區(qū)
<400>68
Gln Ile Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala
1 5 10 15
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20 25 30
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100 105 110
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115
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<220>
<223>免疫球蛋白重鏈可變區(qū)
<400>69
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
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<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白重鏈可變區(qū)
<400>70
Gln Ile Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
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<400>71
Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Met Lys Pro Gly Ala Ser
1 5 10 15
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100 105 110
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<212>PRT
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<220>
<223>免疫球蛋白重鏈可變區(qū)
<400>72
Gln Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Ala Glu Leu Met Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Thr Gly Tyr Thr Phe Ser Ser Phe
20 25 30
Trp Ile Glu Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly His Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Glu Ile Leu Pro Gly Ser Gly Gly Thr His Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
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65 70 75 80
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<220>
<223>免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)
<400>73
Asp Val Leu Met Thr Gln Ile Pro Val Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
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20 25 30
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65 70 75 80
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<220>
<223>免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)
<400>74
Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30
Asn Val Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
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<220>
<223>免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)
<400>75
Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30
Asn Val Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
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Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
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Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ala Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Ile Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
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Arg
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<211>113
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<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)
<400>76
Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30
Asn Val Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
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Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Ile Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
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100 105 110
Arg
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<211>113
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)
<400>77
Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30
Asn Val Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
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100 105 110
Arg
<210>78
<211>113
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)
<220>
<221>misc_feature
<222>(28)..(28)
<223>xaa可為任何天然存在的氨基酸
<220>
<221>misc_feature
<222>(101)..(101)
<223>xaa可為任何天然存在的氨基酸
<400>78
Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Xaa Ile Val His Ser
20 25 30
Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
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Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
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65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
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Ser His Val Pro Xaa Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
Arg
<210>79
<211>113
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)
<400>79
Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30
Asn Val Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ala Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Ile Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95
Ser His Val Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
Arg
<210>80
<211>113
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)
<400>80
Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30
Asn Val Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ala Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Ile Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95
Ser His Val Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
Arg
<210>81
<211>113
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)
<400>81
Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30
Asn Val Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ala Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Ile Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95
Ser His Val Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
Arg
<210>82
<211>113
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)
<400>82
Asp Val Leu Met Thr Gln Ile Pro Val Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ile Ile Val His Asn
20 25 30
Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
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Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
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Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
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Ser His Val Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
Arg
<210>83
<211>113
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)
<400>83
Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Phe Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30
Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Ser Gly Gln Ser
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Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
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Ser His Val Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
Arg
<210>84
<211>113
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)
<400>84
Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30
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Ser His Val Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
Arg
<210>85
<211>113
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)
<400>85
Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30
Asn Val Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
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Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ala Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Ile Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95
Ser His Val Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
Arg
<210>86
<211>113
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)
<400>86
Glu Leu Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Thr Ile Val His Ser
20 25 30
Asn Gly Asp Thr Tyr Leu Asp Trp Phe Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
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100 105 110
Arg
<210>87
<211>113
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)
<400>87
Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30
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35 40 45
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85 90 95
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100 105 110
Arg
<210>88
<211>113
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)
<400>88
Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30
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Arg
<210>89
<211>113
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)
<400>89
Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Val Ser Leu Ser Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30
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35 40 45
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Ile Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Ala
85 90 95
Ser His Ala Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
Arg
<210>90
<211>113
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)
<400>90
Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30
Ser Gly Asn Thr Tyr Phe Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95
Ser His Ile Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
Arg
<210>91
<211>113
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)
<400>91
Asp Ile Glu Leu Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30
Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95
Ser His Val Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
Arg
<210>92
<211>113
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)
<400>92
Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30
Asn Val Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Ile Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95
Ser His Val Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
Arg
<210>93
<211>113
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)
<400>93
Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30
Asn Val Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ala Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Ile Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95
Ser His Val Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
Arg
<210>94
<211>113
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)
<400>94
Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30
Asn Val Asr Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Ile Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95
Ser His Val Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
Arg
<210>95
<211>113
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)
<400>95
Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30
Asn Val Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ala Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Ile Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95
Ser His Val Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
Arg
<210>96
<211>113
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)
<400>96
Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Asn Gln Thr Ile Leu Leu Ser
20 25 30
Asp Gly Asp Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95
Ser His Val Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
Arg
<210>97
<211>113
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)
<400>97
Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Thr Ile Val His Ser
20 25 30
Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Thr Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95
Thr His Ala Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
Arg
<210>98
<211>113
<212>PRT
<213>人工序列
<220>
<223>免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)
<400>98
Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser
20 25 30
Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Ser Ile Ser Ser Arg Phe Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Gln Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly
85 90 95
Ser His Val Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
Arg
權(quán)利要求
1.一種用于治療或預(yù)防受治療者病癥的方法，包括施用治療有效量的一種或多種IGF1R抑制劑或其藥物組合物于受治療者，所述病癥選自成神經(jīng)細(xì)胞瘤、橫紋肌肉瘤、骨肉瘤、胰腺癌和小兒癌癥。
2.權(quán)利要求1的方法，其中IGF1R抑制劑選自
和特異性結(jié)合人IGF1R的分離的抗體。
3.權(quán)利要求2的方法，其中抗體包含
(a)包含SEQ ID NO2的第20-128位氨基酸的輕鏈可變區(qū)和包含SEQ ID NO10或12的第20-137位氨基酸的重鏈可變區(qū)；
(b)包含SEQ ID NO4的第20-128位氨基酸的輕鏈可變區(qū)和包含SEQ ID NO10或12的第20-137位氨基酸的重鏈可變區(qū)；
(c)包含SEQ ID NO6的第20-128位氨基酸的輕鏈可變區(qū)和包含SEQ ID NO10或12的第20-137位氨基酸的重鏈可變區(qū)；或
(d)包含SEQ ID NO8的第20-128位氨基酸的輕鏈可變區(qū)和包含SEQ ID NO10或12的第20-137位氨基酸的重鏈可變區(qū)。
4.權(quán)利要求1的方法，其中IGF1R抑制劑與一種或多種額外的抗癌化學(xué)治療劑或其藥物組合物聯(lián)合給藥。
5.權(quán)利要求4的方法，其中額外的化學(xué)治療劑是選自替尼泊苷(
)、施鉑錠(
)、卡鉑(
)、依托泊苷(
)、多柔比星(
)、其任何脂質(zhì)體劑型、環(huán)磷酰胺(
)、13-順式-視黃酸(
)、異環(huán)磷酰胺(
)、吉西他濱(
)、伊立替康(
)、長春新堿(
)、更生霉素(
)骨化三醇和氨甲蝶呤
)的一種或多種。
6.權(quán)利要求4的方法，其中IGF1R抑制劑與額外的抗癌治療劑同時(shí)給藥。
7.權(quán)利要求4的方法，其中IGF1R抑制劑與額外的抗癌治療劑不同時(shí)給藥。
8.權(quán)利要求2的方法，其中抗體包含IgG恒定區(qū)。
9.權(quán)利要求1的方法，其中受治療者是人。
10.權(quán)利要求9的方法，其中受治療者是兒童。
11.權(quán)利要求1的方法，其中IGF1R抑制劑與抗癌治療操作聯(lián)合施用。
12.權(quán)利要求11的方法，其中抗癌治療操作是外科腫瘤切除術(shù)和/或抗癌放射治療。
全文摘要
本發(fā)明涉及用于治療多種癌癥的組合物和方法。使用其的治療組合和方法也包括在本申請中。
文檔編號A61K31/519GK101222926SQ200680021634
公開日2008年7月16日 申請日期2006年4月14日 優(yōu)先權(quán)日2005年4月15日
發(fā)明者Y·王, M·劉, J·A·佩奇特, W·R·比肖普 申請人:先靈公司