專(zhuān)利名稱(chēng)：TNFα抑制劑治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的用途的制作方法
TNFoc抑制劑治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的用途
相關(guān)申請(qǐng)
本申請(qǐng)要求2005年5月16日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)60/681645的優(yōu)先權(quán)。
本申請(qǐng)涉及美國(guó)專(zhuān)利No.6,090,382、 6,258,562和6,509，015。本申請(qǐng)還涉及2001年3月7日提交的美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)系列號(hào)09/801 ，185; 2002年6月5日提交的美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)系列號(hào)10/16367;和2002年4月26日提交的美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)系列號(hào)10/422287; 2002年8月16日提交的美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)系列號(hào)10/525292; 2003年10月24日提交的美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)系列號(hào)10/693233; 2003年7月18日提交的美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)系列號(hào)10/622932;2003年7月18日提交的美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)系列號(hào)10/623039; 2003年7月18日提交的美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)系列號(hào)10/623076; 2003年7月18日提交的美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)系列號(hào)10/623065; 2003年7月18日提交的美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)系列號(hào)10/622928; 2003年7月18日提交的美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)系列號(hào)10/623075;2003年7月18日提交的美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)系列號(hào)10/623035; 2003年7月18日提交的美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)系列號(hào)10/622683; 2003年7月18日提交的美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)系列號(hào)10/622205; 2003年7月18日提交的美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)系列號(hào)10/6222 10 ;和2003年7月18日提交的美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)系列號(hào)10/623318。本申請(qǐng)還涉及2005年4月11日提交的PCT/USO5/12007(WO 05/110452)，和2005年10月6日提交的美國(guó)申請(qǐng)11/245，254。這些專(zhuān)利和專(zhuān)利申請(qǐng)的全部?jī)?nèi)容引入本文作為參考。
背景技術(shù)：
多關(guān)節(jié)炎可為腐蝕性或非腐蝕性的。在腐蝕性形式中，基本疾病
9過(guò)程腐蝕軟骨；在非腐蝕性形式中，軟骨不受影響。腐蝕性多關(guān)節(jié)炎 為關(guān)節(jié)炎性疾病，其導(dǎo)致受影響關(guān)節(jié)內(nèi)組織毀壞和腐蝕。腐蝕性多關(guān) 節(jié)炎發(fā)生于許多患有包括牛皮癬性關(guān)節(jié)炎、脊推關(guān)節(jié)炎癥(例如強(qiáng)直 性脊柱炎和幼年型類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)炎性病癥的患者中。表達(dá)為腐蝕 性多關(guān)節(jié)炎的病癥的許多當(dāng)前治療未能集中于減少關(guān)節(jié)疾病的放射Z 照相進(jìn)展。

發(fā)明內(nèi)容
需要采用安全有效的方式治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎。盡管例如施用
DMARD的腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的傳統(tǒng)治療可延緩疾病進(jìn)展，然而傳統(tǒng)治 療見(jiàn)效緩慢，可隨時(shí)間失去功效，且可與潛在嚴(yán)重毒性作用相關(guān)。本 發(fā)明提供一種安全有效的治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎及減緩關(guān)節(jié)疾病進(jìn)展 的方法。
本發(fā)明包括治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的方法，其包括施用TNF抑制劑。 本發(fā)明也提供一種治療患有腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的人類(lèi)受試者的方法，其 包括將抗TNFot抗體施用于該受試者從而治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎。本發(fā) 明也包括包含TNFa抑制劑的試劑盒和制造物品。
在一個(gè)實(shí)施方案中，TNFa抑制劑選自抗TNFa抗體或其抗原結(jié) 合部分、TNF融合蛋白或重組TNF結(jié)合蛋白。在一個(gè)實(shí)施方案中，該 TNF融合蛋白為依那西普(etanercept)。在另一實(shí)施方案中，該抗TNFa 抗體或其抗原結(jié)合部分選自人源化抗體、嵌合抗體及多價(jià)抗體。在一
個(gè)實(shí)施方案中，該抗TNFa抗體或其抗原結(jié)合部分為英利昔單抗 (infliximab)、格里木單抗(golimumab)或阿達(dá)木單抗(adalimumab)。在 另一實(shí)施方案中，該抗TNFa抗體或其抗原結(jié)合部分為人類(lèi)抗體。
本發(fā)明提供一種治療患有腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的人類(lèi)受試者的方法， 其包括將TNFoc抗體或其抗原結(jié)合部分施用于該受試者從而治療腐蝕 性多關(guān)節(jié)炎。
在一個(gè)實(shí)施方案中，該TNFa抗體或其抗原結(jié)合部分選自人源化 抗體、嵌合抗體和多價(jià)抗體的抗體。在另一實(shí)施方案中，該TNFa抗
10體或其抗原結(jié)合部分為英利昔單抗或格里木單抗。
在一個(gè)實(shí)施方案中，該TNFa抗體或其抗原結(jié)合部分為人類(lèi)抗體。 在一個(gè)實(shí)施方案中，該人類(lèi)抗體或其抗原結(jié)合部分以通過(guò)表面等離振 子共振測(cè)定的lx10—8 M或更低的Kd和lx10—3 s"或更低的K。ff速率常數(shù) 與人類(lèi)TNFa解離，并在標(biāo)準(zhǔn)體外L929分析中以lxlO:M或更低的IC50 中和人類(lèi)TNFa細(xì)胞毒性。在另一實(shí)施方案中，該人類(lèi)抗體或其抗原 結(jié)合部分具有以下特征
a) 以如通過(guò)表面等離振子共振測(cè)定的1 x 10-3 s-1或更低的K。ff速率 常數(shù)與人類(lèi)TNFot解離；
b) 具有一個(gè)輕鏈CDR3域，其包含SEQIDNO: 3的氨基酸序列或通 過(guò)位置l、 4、 5、 7或8處的單一丙氨酸置換或通過(guò)位置1、 3、 4、 6、 7、 8和/或9處的l至5個(gè)保守氨基酸置換而由SEQ ID NO: 3修飾的氨基酸 序列；
c) 具有一個(gè)重鏈CDR3域，其包含SEQIDNO: 4的氨基酸序列或通 過(guò)位置2、 3、 4、 5、 6、 8、 9、 10或11處的單一丙氨酸置換或通過(guò)位 置2、 3、 4、 5、 6、 8、 9、 10、 1 l和/或12處的l至5個(gè)保守氨基酸置換 而由SEQIDNO: 4修飾的氨基酸序列。在另一實(shí)施方案中，該人類(lèi)抗 體或其抗原結(jié)合部分包含一個(gè)輕鏈可變區(qū)(LCVR),其具有一個(gè)包含 SEQ ID NO: 3的氨基酸序列或通過(guò)位置1、 4、 5、 7或8處的單一丙氨 酸置換而由SEQ ID NO: 3修飾的氨基酸序列的CDR3域；且包含一個(gè) 重鏈可變區(qū)(HCVR),其具有一個(gè)包含SEQ ID NO: 4的氨基酸序列或 通過(guò)位置2、 3、 4、 5、 6、 8、 9、 10或1 l處的單一丙氨酸置換而由SEQ ID NO: 4修飾的氨基酸序列的CDR3域。在另一實(shí)施方案中，該人類(lèi) 抗體或其抗原結(jié)合部分包含一個(gè)包含SEQ ID NO: l的氨基酸序列的 輕鏈可變區(qū)(LCVR)及一個(gè)包含SEQ ID NO: 2的氨基酸序列的重鏈可 變區(qū)(HCVR)。在一個(gè)實(shí)施方案中，該人類(lèi)抗體或其抗原結(jié)合部分為 阿達(dá)木單抗。
在一個(gè)實(shí)施方案中，該TNFoc抗體或其抗原結(jié)合部分以?xún)芍芤淮?的給藥方案施用于受試者。在一個(gè)實(shí)施方案中，該受試者患有TNFa活性為有害的病癥。在 一個(gè)實(shí)施方案中，該TNFa活性為有害的病癥選自牛皮癬性關(guān)節(jié)炎、 強(qiáng)直性脊柱炎及幼年型類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。在另一實(shí)施方案中，該TNFa 活性為有害的病癥為牛皮癬性關(guān)節(jié)炎。在另一實(shí)施方案中，該TNFoc 活性為有害的病癥為類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明包括進(jìn)一步包含將其他治療劑施用于 受試者。在一個(gè)實(shí)施方案中，該其他治療劑為氨曱喋呤。在另一實(shí)施 方案中，該其他治療劑為緩解疾病的抗類(lèi)風(fēng)濕藥物(DMARD)或非甾 體抗炎藥(NSAID)或類(lèi)固醇或其任意組合。
本發(fā)明包括一種測(cè)試TNFa抗體或其抗原結(jié)合部分降低與腐蝕性 多關(guān)節(jié)炎相關(guān)的關(guān)節(jié)疾病的放射照相進(jìn)展的功效的方法。在一個(gè)實(shí)施 方案中，測(cè)試TNFot抗體或其抗原結(jié)合部分的功效的方法包括使用 患有與腐蝕性多關(guān)節(jié)炎相關(guān)的關(guān)節(jié)疾病的患者群體的改良總Sharp評(píng) 分(modified Total Sharp Score)(mTSS)和施用TNFoc抗體或其抗原結(jié)合 部分之后患者群體的mTSS來(lái)測(cè)定TNFoc抗體或其抗原結(jié)合部分的功 效，其中mTSS不變或降低表示TNFoc抗體或其抗原結(jié)合部分有效降低 與腐蝕性多關(guān)節(jié)炎相關(guān)的關(guān)節(jié)疾病的放射照相進(jìn)展。在一個(gè)實(shí)施方案 中，mTSS降低約-0.2。
在一個(gè)實(shí)施方案中，該患者群體也患有TNFa活性為有害的病癥。 在一個(gè)實(shí)施方案中，該TNFot活性為有害的病癥選自牛皮癬性關(guān)節(jié)炎、 強(qiáng)直性脊柱炎及幼年型類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。
在一個(gè)實(shí)施方案中，該TNFa抗體或其抗原結(jié)合部分選自人源化 抗體、嵌合抗體及多價(jià)抗體。在一個(gè)實(shí)施方案中，該TNFoc抗體或其 抗原結(jié)合部分為英利昔單抗或格里木單抗。在另一實(shí)施方案中，該 TNFa抗體或其抗原結(jié)合部分為人類(lèi)抗體。在一個(gè)實(shí)施方案中，該人 類(lèi)抗體或其抗原結(jié)合部分以通過(guò)表面等離振子共振測(cè)定的lxl(T8 M或 更低的Ko與lxl(T3 s"或更低的K。ff速率常數(shù)與人類(lèi)TNFa解離，并在標(biāo) 準(zhǔn)體外L929分析中以lxl(T7 M或更低的ICso中和人類(lèi)TNFa細(xì)胞毒性。
在另 一 實(shí)施方案中，該人類(lèi)抗體或其抗原結(jié)合部分具有以下特征
a) 以如通過(guò)表面等離振子共振測(cè)定的lxl(T3 s"或更低的K。ff速率 常數(shù)與人類(lèi)TNFa解離；
b) 具有一個(gè)輕鏈CDR3域，其包含SEQ ID NO: 3的氨基酸序列或通 過(guò)位置l、 4、 5、 7或8處的單一丙氨酸置換或通過(guò)位置1、 3、 4、 6、 7、 8和/或9處的l至5個(gè)保守氨基酸置換而由SEQ ID NO: 3修飾的氨基酸 序列；
c) 具有一個(gè)重鏈CDR3域，其包含SEQ ID NO: 4的氨基酸序列或通 過(guò)位置2、 3、 4、 5、 6、 8、 9、 10或11處的單一丙氨酸置換或通過(guò)位 置2、 3、 4、 5、 6、 8、 9、 10、 11和/或12處的1至5個(gè)保守氨基酸置換 而由SEQIDNO:4修飾的氨基酸序列。在另一實(shí)施方案中，該人類(lèi)抗 體或其抗原結(jié)合部分包含一個(gè)輕鏈可變區(qū)(LCVR),其具有一個(gè)包含 SEQ ID NO: 3的氨基酸序列或通過(guò)位置1、 4、 5、 7或8處的單一丙氨 酸置換而由SEQ ID NO: 3修飾的氨基酸序列的CDR3域；且包含一個(gè) 重鏈可變區(qū)(HCVR)，其具有一個(gè)包含SEQ ID NO: 4的氨基酸序列或 通過(guò)位置2、 3、 4、 5、 6、 8、 9、 10或1 l處的單一丙氨酸置換而由SEQ ID NO: 4修飾的氨基酸序列的CDR3域。
在另一實(shí)施方案中，該人類(lèi)抗體或其抗原結(jié)合部分包含一個(gè)包含 SEQ ID NO: 1的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)(LCVR)及一個(gè)包含SEQ ID NO: 2的氨基酸序列的重鏈可變區(qū)(HCVR)。在本發(fā)明的另 一 實(shí)施方案 中，該人類(lèi)抗體或其抗原結(jié)合部分為阿達(dá)木單抗。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，該TNFa抗體或其抗原結(jié)合部分以 兩周一次的給藥方案施用于受試者。在一個(gè)實(shí)施方案中，該抗體或其 抗原結(jié)合部分與包括(例如)氨曱喋呤的其他治療劑組合給藥。
本發(fā)明描述 一 種監(jiān)測(cè)TNF a抗體或其抗原結(jié)合部分治療人類(lèi)受試 者的腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的有效性的方法，其包括使用患有腐蝕性多關(guān)節(jié) 炎的患者群體的改良總Sharp評(píng)分(mTSS)基線及施用TNFa抗體或其 抗原結(jié)合部分之后患者群體的mTSS來(lái)確定TNFa抗體或其抗原結(jié)合 部分的有效性，其中選自約9-27。/。的患者群體mTSS減少；約65-73%的患者群體mTSS不變；及約9-28%的患者群體mTSS增加的結(jié)果表明， 該TNFa抗體或其抗原結(jié)合部分在治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎中有效。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，該TNFa抗體或其抗原結(jié)合部分選 自人源化抗體、嵌合抗體及多價(jià)抗體。在一個(gè)實(shí)施方案中，該TNFa 抗體或其抗原結(jié)合部分為英利昔單抗或格里木單抗。在另一實(shí)施方案 中，該TNFa抗體或其抗原結(jié)合部分為人類(lèi)抗體。
在另一實(shí)施方案中，該人類(lèi)抗體或其抗原結(jié)合部分以通過(guò)表面等 離振子共振測(cè)定的lx10—8 M或更低的Kd與lx10—3 s—!或更低的K。ff速率 常數(shù)從人類(lèi)TNFa解離，并在標(biāo)準(zhǔn)體外L929分析中以lxl(T7 M或更低的 ICso中和人類(lèi)TNFa細(xì)胞毒性。在另一實(shí)施方案中，該人類(lèi)抗體或其抗 原結(jié)合部分為阿達(dá)木單抗。
本發(fā)明也包括一種測(cè)試TNFa抗體或其抗原結(jié)合部分治療與牛皮 癬性關(guān)節(jié)炎相關(guān)的腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的功效的方法，其包括使用患有腐 蝕性多關(guān)節(jié)炎的患者群體的改良總Sharp評(píng)分(mTSS)基線及牛皮癬面 積及嚴(yán)重度指數(shù)(PASI)評(píng)分基線或ACR評(píng)分基線與施用TNFoc抗體或 其抗原結(jié)合部分之后患者群體的mTSS及PASI或ACR評(píng)分相比較來(lái)確 定TNFoc抗體或其抗原結(jié)合部分的功效，其中mTSS不變或降低及在至 少約57%的患者群體中獲得ACR20反應(yīng)或在至少約75%的患者群體中 獲得PASI 50應(yīng)答表明該TNFoc抗體或其抗原結(jié)合部分在治療與牛皮 癬性關(guān)節(jié)炎相關(guān)的腐蝕性多關(guān)節(jié)炎中有效。在一個(gè)實(shí)施方案中， ACR50反應(yīng)在至少約39。/。的患者群體中獲得。在另 一實(shí)施方案中， ACR70反應(yīng)在至少約23%的患者群體中獲得。在另 一 實(shí)施方案中， PASI75應(yīng)答在至少約59y。的患者群體中獲得。在另一實(shí)施方案中， PASI90應(yīng)答在至少約42。/。的患者群體中獲得。在一個(gè)實(shí)施方案中，該 TNFot抗體或其抗原結(jié)合部分為阿達(dá)木單抗。
本發(fā)明描述一種治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的方法，其包括以?xún)芍芤淮?的給藥方案將阿達(dá)木單抗施用于患有腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的受試者。在一 個(gè)實(shí)施方案中，阿達(dá)木單抗的劑量為約40mg。
本發(fā)明也包括一種試劑盒，其包含含TNFoc抗體或其抗原結(jié)合部
14分及藥學(xué)上可接受的載體的藥物組合物和用于施用用于治療腐蝕性 多關(guān)節(jié)炎的藥物組合物的說(shuō)明。在一個(gè)實(shí)施方案中，該藥物組合物包
含TNFot抗體或其抗原結(jié)合部分阿達(dá)木單抗。在一個(gè)實(shí)施方案中，藥 物組合物包含約40 mg阿達(dá)木單抗。在另一實(shí)施方案中，該試劑盒進(jìn) 一步包含其他治療劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，該其他治療劑為氨甲喋呤。
本發(fā)明描述一種制造物品，其包含包裝材料、TNFa抗體或其抗 原結(jié)合部分及包裝材料內(nèi)所含的說(shuō)明該TNFa抗體或其抗原結(jié)合部分 可用于治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的標(biāo)簽或包裝插頁(yè)。
本發(fā)明也包括一種制造物品，其包含包裝材料、TNFa抗體或其 抗原結(jié)合部分及包裝材料內(nèi)所含的說(shuō)明該TNFa抗體或其抗原結(jié)合部 分可用于抑制關(guān)節(jié)疾病的放射線進(jìn)展的標(biāo)簽或包裝插頁(yè)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，該制造物品包含選自人源化抗體、嵌合抗體 及多價(jià)抗體的抗體。
在一個(gè)實(shí)施方案中，該TNFa抗體或其抗原結(jié)合部分為英利昔單 抗或格里木單抗。在另一實(shí)施方案中，該TNFa抗體或其抗原結(jié)合部 分為人類(lèi)抗體。在一個(gè)實(shí)施方案中，該人類(lèi)抗體或其抗原結(jié)合部分以 通過(guò)表面等離振子共振測(cè)定的lx10—8 M或更低的Kd與lxl(T3 s"或更低 的K。ff速率常數(shù)與人類(lèi)TNFa解離，并在標(biāo)準(zhǔn)體外L929分析中以lx10-7 M或更低的IC5。中和人類(lèi)TNFa細(xì)胞毒性。在另一實(shí)施方案中，該人類(lèi) 抗體或其抗原結(jié)合部分為阿達(dá)木單抗。


圖1 a及1 b顯示改良總Sharp評(píng)分(mTSS)圖(圖1 a)和與PsA相關(guān)的放 射線照相結(jié)果(圖lb)。
圖2顯示改良總Sharp評(píng)分(mTSS)的累積分布函數(shù)圖。該圖采用基 線與第24周的放射線相片顯示受試者的基線至第24周的變化。
圖3a及3b顯示采用氨曱喋呤(mtx)(圖3a)及不采用氨曱喋呤 (mtx)(圖3 b)的受試者的mTS S的累積分布函數(shù)圖。
圖4顯示在第48周mTSS的平均變化圖。發(fā)明詳述
I.定義
為了可以更容易地理解本發(fā)明，首先定義某些術(shù)語(yǔ)。
本文使用的術(shù)語(yǔ)"人類(lèi)TNFa"(本文中縮寫(xiě)為hTNFoc或簡(jiǎn)寫(xiě)為 hTNF)指以17 kD分泌形式及26 kD膜相關(guān)形式存在的人類(lèi)細(xì)胞因子， 其生物活性形式由非共價(jià)結(jié)合的17 kD分子的三聚體組成。hTNFa的 結(jié)構(gòu)進(jìn)一步描述于(例如)Pennica， D.等人(1984) Atow" 312:724-729; Davis， J.M.等人(1987)腸c/z簡(jiǎn)勿26:1322-1326;及Jones， E.Y.等人 (1989) A^/wre 338:225-228中。術(shù)語(yǔ)人類(lèi)TNFot包括重組人類(lèi)TNFa (rhTNFa),其可由標(biāo)準(zhǔn)重組表達(dá)方法制備或購(gòu)買(mǎi)得到(R&D Systems, 目錄第210-TA號(hào)，Minneapolis,MN)。 TNFoc也稱(chēng)作TNF。
術(shù)語(yǔ)"TNFa抑制劑"指干擾TNFa活性的藥劑。該術(shù)語(yǔ)也包括本文 中所述的各抗TNFa人類(lèi)抗體及抗體部分以及美國(guó)專(zhuān)利第6,090,382 號(hào)、第6，258,562號(hào)、第6,509,015號(hào)及美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)序號(hào)09/801185及 10/302356中所述的那些抗TNFa人類(lèi)抗體及抗體部分。在一個(gè)實(shí)施方 案中，用于本發(fā)明的TNFa抑制劑為抗TNFa抗體或其片段，其包括英 利昔單4元(Remicade , Johnson and Johnson ; 4苗述于美國(guó)專(zhuān)矛J第 5,656,272號(hào)中，該專(zhuān)利引入本文作為參考)、CDP571(人源化單抹抗 TNFa IgG4抗體)、CDP 870(人源化單林抗TNFa抗體片段)、抗TNF dAb(Peptech)、 CNTO 148(格里木單抗；Medarex and Centocor,參見(jiàn) WO 02/12502)及阿達(dá)木單抗(Humira⑧Abbott Laboratories,人類(lèi)抗TNF mAb，在美國(guó)6,090，382中描述為D2E7)。其它的可用于本發(fā)明的抗體 描述于美國(guó)專(zhuān)利6,593,458; 6,498,237，; 6，451,983;和6，448,380,其中每 一個(gè)專(zhuān)利在此引入作為參考。在另一實(shí)施方案中，該TNFoc抑制劑為 TNF融合蛋白，例如依那西普(Enbref， Amgen;描述于WO 91/03553 及WO 09/406476中，引入本文作為參考)。在另一實(shí)施方案中，該TNFoc 抑制劑為重組TNF結(jié)合蛋白(r-TBP-I)(Serono)。
本文使用的術(shù)語(yǔ)"抗體"指包含4條多肽鏈(由二硫鍵相互連接的2 條重(H)鏈及2條輕(L)鏈)的免疫球蛋白分子。各重鏈包含一個(gè)重鏈可
16變區(qū)(本文中縮寫(xiě)為HCVR或VH)及一個(gè)重鏈恒定區(qū)。該重鏈恒定區(qū)包 含3個(gè)域(CH1、 CH2及CH3)。各輕鏈包含一個(gè)輕鏈可變區(qū)(本文中縮寫(xiě) 為L(zhǎng)CVR或VL)及一個(gè)輕鏈恒定區(qū)。該輕鏈恒定區(qū)包含1個(gè)域CL。 VH 及VL區(qū)可進(jìn)一步再分為高變區(qū)，稱(chēng)作互補(bǔ)決定區(qū)(CDR)，其中散布有 更保守的區(qū)，稱(chēng)作構(gòu)架區(qū)(FR)。 VH及VL各包含3個(gè)CDR及4個(gè)FR,按 以下順序從氨基末端至羧基末端排列FR1、 CDR1、 FR2、 CDR2、 FR3、 CDR3、 FR4。本發(fā)明的抗體進(jìn)一 步詳細(xì)描述于美國(guó)專(zhuān)利第 6,090,382號(hào)、第6,258，562號(hào)及第6，509，015號(hào)中，均全文均引入本文作 為參考。
本文使用的術(shù)語(yǔ)抗體的"抗原結(jié)合部分"(或簡(jiǎn)稱(chēng)為"抗體部分")指 保持特異性結(jié)合抗原(例如hTNFoc)的能力的抗體的 一 個(gè)或多個(gè)片段。 已顯示抗體的抗原結(jié)合功能可由全長(zhǎng)抗體的片段執(zhí)行。術(shù)語(yǔ)抗體的" 抗原結(jié)合部分"內(nèi)包含的結(jié)合片段的實(shí)施例包括(i)Fab片段，由VL 、 VH、 CL及CH1域組成的單價(jià)片段；(ii)F(ab')2片段，包含在4交鏈區(qū)由 二硫橋連接的2個(gè)Fab片段的二價(jià)片段；(iii)由VH及CHl域組成的Fd片 段；(iv)由抗體的單臂VL域及VH域組成的Fv片段，(v)dAb片段(Ward 等人(1989) A^ wre 341:544-546),其由VH域組成；及(vi)分離的互補(bǔ) 決定區(qū)(CDR)。此外，盡管Fv片段的2個(gè)域(VL及VH)由各自基因編碼， 但是其可使用重組方法由能使其成為單一蛋白鏈的合成連接體連接， 其中VL及VH區(qū)配對(duì)以形成單價(jià)分子(稱(chēng)為單鏈Fv(scFv);參見(jiàn)例如 Bird等人(1988) 5We"ce 242:423-426;及Huston等人(1988)尸rac. A^/. ^c"d OS^ 85:5879-5883)。該單鏈抗體也包括于術(shù)語(yǔ)抗體的"抗原 結(jié)合部分"中。也包括單鏈抗體的其它形式，例如雙抗體。雙抗體為 二價(jià)、雙特異性抗體，其中VH及VL域表達(dá)于單一多肽鏈上，但使用
與另一^4的互補(bǔ)域配對(duì)并形成兩個(gè)抗原結(jié)合位點(diǎn)(參見(jiàn)例如Holliger等 人(1993)尸rac. Ato/. 5W. "&4 90:6444-6448; Poljak等人(1994)
5Vra"w" 2:1121-1123)。本發(fā)明的抗體部分進(jìn)一步詳細(xì)描述于美國(guó)專(zhuān) 利第6,090，382號(hào)、第6,258,562號(hào)、第6,509,015號(hào)中，均全文引入本文
17作為參考。
結(jié)合片段由重組DNA技術(shù)或由完整免疫球蛋白的酶或化學(xué)裂解 而產(chǎn)生。結(jié)合片段包括Fab、 Fab'、 F(ab')2、 Fabc、 Fv、單鏈及單鏈抗 體。除了"雙特異性"或"雙功能"免疫球蛋白或抗體之外，應(yīng)理解免疫 球蛋白或抗體具有相同的各結(jié)合位點(diǎn)。"雙特異性"或"雙功能"抗體為 具有2對(duì)不同重/輕鏈對(duì)及2個(gè)不同結(jié)合位點(diǎn)的人工雜合抗體。雙特異性 抗體可由包括融合雜交瘤或連接F a b'片段的多種方法而產(chǎn)生。參見(jiàn)(例 ^口)Songsivilai禾口Lachmann, C7/".五x/ . /wmwwo/. 79:315-321 (1990); Kostelny等人,J. /w附圃/. 148， 1547-1553 (1992)。
本文使用的"保守氨基酸置換"為一個(gè)氨基酸殘基被具有類(lèi)似側(cè)鏈 的另一氨基酸殘基置換。具有類(lèi)似側(cè)鏈的氨基酸殘基家族已在現(xiàn)有技 術(shù)中定義，所述側(cè)鏈包括堿性側(cè)鏈(例如賴(lài)氨酸、精氨酸、組氨酸)、 酸性側(cè)鏈(例如天冬氨酸、谷氨酸)、不帶電的極性側(cè)鏈(例如甘氨酸、 天冬酰胺、谷氨酰胺、絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸、半胱氨酸)、非極 性側(cè)鏈(例如丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨 酸、曱疏氨酸、色氨酸)、P-分枝側(cè)鏈(例如蘇氨酸、纈氨酸、異亮氨 酸)及芳族側(cè)鏈(例如酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、組氨酸)。
本文使用的術(shù)語(yǔ)"人類(lèi)抗體"包括具有由人類(lèi)種系免疫球蛋白序列 衍生的可變區(qū)及恒定區(qū)的抗體。例如在CDR中，尤其在CDR3中，本 發(fā)明的人類(lèi)抗體可包括并非由人類(lèi)種系免疫球蛋白序列編碼的氨基 酸殘基(例如通過(guò)體外隨機(jī)或特定位點(diǎn)突變或通過(guò)體內(nèi)體細(xì)胞突變引 起的突變)。然而，本文使用的術(shù)語(yǔ)"人類(lèi)抗體"并非包括其中由例如小 鼠的另 一 哺乳物種的種系衍生的CDR序列已被移植于人類(lèi)構(gòu)架序列 上的抗體。
本文使用的術(shù)語(yǔ)"重組人類(lèi)抗體"包括由重組方式制備、表達(dá)、產(chǎn) 生或分離的所有人類(lèi)抗體，例如使用轉(zhuǎn)染至宿主細(xì)胞(以下進(jìn)一步描 述)內(nèi)的重組表達(dá)載體表達(dá)的抗體；自重組、組合人類(lèi)抗體庫(kù)(以下進(jìn) 一步描述)分離的抗體；從對(duì)于人類(lèi)免疫球蛋白基因而言為轉(zhuǎn)基因的 動(dòng)物(例如小鼠)分離的抗體(參見(jiàn)例如Taylor等人(1992) A^c/. ^4c油
187 " 20:6287);或由包含將人類(lèi)免疫球蛋白基因序列剪接為其它DNA 序列的任意其它方式制備、表達(dá)、產(chǎn)生或分離的抗體。這些重組人類(lèi) 抗體具有從人類(lèi)種系免疫球蛋白序列衍生的可變區(qū)及恒定區(qū)。然而，
在某些實(shí)施方案中，這些重組人類(lèi)抗體經(jīng)受體外突變(或當(dāng)使用對(duì)于 人類(lèi)Ig序列而言為轉(zhuǎn)基因的動(dòng)物時(shí)的體內(nèi)體細(xì)胞突變)，并且因此重組 抗體的VH及VL區(qū)的氨基酸序列為當(dāng)衍生自人類(lèi)種系VH及VL序列且 與人類(lèi)種系VH及VL序列相關(guān)時(shí)可能并非體內(nèi)天然存在于人類(lèi)抗體種 系所有組成部分內(nèi)的序列。
本文使用的"分離的抗體"指基本上不含具有不同抗原特異性的其 它抗體的抗體(例如特異性結(jié)合hTNFot的分離的抗體基本上不含特異 性結(jié)合除hTNFa之外的抗原的抗體)。然而，特異性結(jié)合hTNFa的分 離的抗體可對(duì)例如來(lái)自其它物種(以下進(jìn)一步詳細(xì)描述)的TNFa分子 的其它抗原具有交叉反應(yīng)性。此外，分離的抗體可基本上不含其它細(xì) 胞物質(zhì)和/或化學(xué)物質(zhì)。
本文使用的"中和抗體"(或"中和hTNFa活性的抗體")是指其與 hTNFa結(jié)合導(dǎo)致hTNFa的生物活性受抑制的抗體。此hTNFa的生物活 性的抑制可通過(guò)測(cè)定 一種或多種hTNFa生物活性指標(biāo)(例如hTNFod秀 導(dǎo)的細(xì)胞毒性(體外或體內(nèi))、hTNFa誘導(dǎo)的細(xì)胞活化及hTNFa對(duì) hTNFa受體的結(jié)合)而評(píng)估。這些hTNFa生物活性指標(biāo)可通過(guò)一種或 多種現(xiàn)有技術(shù)中已知的若干體外或體內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)分析進(jìn)行評(píng)估(參見(jiàn)美國(guó) 專(zhuān)利第6,090,382號(hào))。優(yōu)選地，抗體中和hTNFa活性的能力通過(guò)抑制 hTNFa誘導(dǎo)的L929細(xì)胞的細(xì)胞毒性而評(píng)估。作為hTNFa活性的其他或 替代性參數(shù)，可評(píng)估作為hTNFa誘導(dǎo)的細(xì)胞活化的測(cè)量值的抗體抑制 hTNFa誘導(dǎo)的ELAM-1在HUVEC上表達(dá)的能力。
本文使用的術(shù)語(yǔ)"表面等離振子共振"是指例如使用BIAcore系統(tǒng) (Pharmacia Biosensor AB, Uppsala, Sweden and Piscataway， NJ)由檢測(cè)
用的光學(xué)現(xiàn)象。進(jìn)一步描述參見(jiàn)美國(guó)專(zhuān)利第6，258,562號(hào)的實(shí)施例1及 J6nsson等人(1993)爿朋.B/o/. C//". 51:19; J6nsson等人(1991)歷她c/7m々w" 11:620-627; Johnsson等人(1995) /, Mo/. 7 ecogm7. 8:125 及Joh腿on等人(1991) 腸c/z艮198:268。
本文使用的術(shù)語(yǔ)"K。ff"是指抗體從抗體/抗原復(fù)合物上解離的解離
速率常數(shù)。
本文使用的術(shù)語(yǔ)"Kd"是指特異性抗體-抗原相互作用的解離常數(shù)。
本文使用的術(shù)語(yǔ)"IC5。"是指抑制目的生物終點(diǎn)(例如中和細(xì)胞毒性 活性)所需要的抑制劑的濃度。
本文使用的術(shù)語(yǔ)"核酸分子"包括DNA分子及RNA分子。核酸分子 可為單鏈或雙鏈，但優(yōu)選為雙鏈DNA。
如本文關(guān)于編碼結(jié)合hTNFa的抗體或抗體部分(例如VH、 VL、 CDR3)的核酸使用的術(shù)語(yǔ)"分離的核酸分子"是指以下核酸分子，其中 編碼抗體或抗體部分的核苷酸序列不含編碼結(jié)合除hTNFa之外的抗 原的抗體或抗體部分的其它核苷酸序列，其它序列可以天然地位于人 類(lèi)基因組DNA中核酸的側(cè)翼。因此，例如，編碼抗hTNFa抗體的VH 區(qū)的本發(fā)明的分離的核酸不含編碼結(jié)合除hTNFa之外的抗原的其它 VH區(qū)的其它序列。
本文使用的術(shù)語(yǔ)"載體"是指能轉(zhuǎn)運(yùn)另一個(gè)已連接的核酸的核酸分 子。 一種類(lèi)型的載體為"質(zhì)粒"，其指其他DNA片段可連接至其中的環(huán) 狀雙鏈DNA環(huán)。另一類(lèi)載體為病毒載體，其中其他DNA片段可連接至 病毒基因組內(nèi)。某些載體能在其導(dǎo)入的宿主細(xì)胞內(nèi)自主復(fù)制(例如具 有細(xì)菌復(fù)制起點(diǎn)的細(xì)菌載體及游離型哺乳動(dòng)物載體)。其它載體(例如 非游離型哺乳動(dòng)物載體)可在導(dǎo)入宿主細(xì)胞中時(shí)而整合到宿主細(xì)胞的 基因組內(nèi)，且因此隨宿主基因組一起復(fù)制。此外，某些載體能將基因 表達(dá)定位于其有效連接之處。在本文中這些載體被稱(chēng)作"重組表達(dá)載 體"(或簡(jiǎn)稱(chēng)"表達(dá)載體")。 一般而言，用于重組DNA技術(shù)中的表達(dá)載體 經(jīng)常以質(zhì)粒形式存在。在本說(shuō)明書(shū)中，"質(zhì)粒"與"載體"可互換使用， 因?yàn)橘|(zhì)粒為載體的最常用形式。然而，本發(fā)明包括表達(dá)載體的這些其 它形式，例如起等同作用的病毒載體(例如復(fù)制缺陷型反轉(zhuǎn)錄病毒、 腺病毒及腺伴隨病毒)。本文使用的術(shù)語(yǔ)"重組宿主細(xì)胞"(或簡(jiǎn)稱(chēng)為"宿主細(xì)胞")是指已將 重組表達(dá)載體導(dǎo)入其中的細(xì)胞。應(yīng)理解這些術(shù)語(yǔ)不僅是指特定受試者 細(xì)胞而且指該細(xì)胞的子代。由于在后代中因突變作用或環(huán)境影響可發(fā) 生某些改變，因此事實(shí)上該子代可能不同于親代細(xì)胞，但仍包括于本 文中所使用的術(shù)語(yǔ)"宿主細(xì)胞"的范圍內(nèi)。
本文使用的術(shù)語(yǔ)''劑量"是指施用于受試者的TNF a抑制劑的量。
術(shù)語(yǔ)"多可變劑量"包括為治療目的施用于受試者的TNFa抑制劑 的不同劑量。"多可變劑量方案"或"多可變劑量治療"描述基于在整個(gè) 治療過(guò)程中不同時(shí)間點(diǎn)施用不同量的TNFa抑制劑的治療方案。在一 個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明描述一種治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的多可變劑量的 方法，其包含誘導(dǎo)階段及治療階段，其中在誘導(dǎo)階段采用比治療階段 高的劑量施用TNFa抑制劑。多可變劑量療法描述于PCT申請(qǐng)第 PCT/US05/12007號(hào)中。
本文使用的術(shù)語(yǔ)"給藥"是指施用物質(zhì)(例如抗TNFa抗體)以獲得 治療目的(例如治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎)。
本文使用的術(shù)語(yǔ)"兩周一次給藥方案"、"兩周一次給藥"及"兩周一 次施用"是指施用物質(zhì)(例如抗TNFa抗體)于受試者以獲得治療目的 (例如治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎)的時(shí)間進(jìn)程。兩周 一 次給藥方案并不包括 每周一次給藥方案。優(yōu)選每隔9-19天、更優(yōu)選每隔11-17天、甚至更優(yōu) 選每隔13-15天及最優(yōu)選每隔14天施用該物質(zhì)。
短語(yǔ)"與第二藥劑聯(lián)合的第 一藥劑"中的術(shù)語(yǔ)"聯(lián)合"包括共同施用 第 一 藥劑及第二藥劑，例如其可溶解于或混合于相同的藥學(xué)上可接受 的載體中，或施用第一藥劑隨后施用第二藥劑，或施用第二藥劑隨后 施用第一藥劑。因此，本發(fā)明包括聯(lián)合治療的方法及聯(lián)合藥物組合物。 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種用于治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的聯(lián)合 療法，其包含施用抗TNF抗體。
短語(yǔ)"伴隨治療"中的術(shù)語(yǔ)"伴隨"包括在第二藥劑存在下施用藥 劑。伴隨治療方法包括共同施用第一、第二、第三或其他藥劑的方法。 伴隨治療方法也包括在第二或其他藥劑存在下施用第一或其他藥劑的方法，其中該第二或其他藥劑(例如)可以預(yù)先施用。伴隨治療方法 可由不同參與者逐步執(zhí)行。例如， 一名參與者可將第一藥劑施用于受 試者且第二參與者可將第二藥劑施用于該受試者，且給藥步驟可同時(shí) 或幾乎同時(shí)或在不同時(shí)間進(jìn)行，只要該第 一 藥劑(及其他藥劑)在該第 二藥劑(及其他藥劑)存在之后施用即可。參與者與受試者可為相同實(shí) 體(例如人)。
本文使用的術(shù)語(yǔ)"聯(lián)合療法"是指施用兩種或兩種以上的治療物
質(zhì)，例如抗TNFoc抗體及另一藥物。該其它藥物可在抗TNFoc抗體之前 或之后或同時(shí)施用。
本文使用的術(shù)語(yǔ)"試劑盒"是指包含成分的包裝產(chǎn)品或制造物品。 該試劑盒優(yōu)選包含裝有試劑盒成分的盒或容器。該盒或容器附有標(biāo)簽 或食品藥品管理局(Food and Drug Administratio)批準(zhǔn)的協(xié)議。該盒或 容器裝有優(yōu)選包含于塑料、聚乙烯、聚丙烯、乙烯或丙烯容器內(nèi)的本 發(fā)明的成分。這些容器可為帶蓋的管或瓶。試劑盒也可包括施用TNFoc 抗體或其抗原結(jié)合部分的說(shuō)明。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的試劑盒 包括包含人類(lèi)抗體D2E7的制劑，如PCT/IB03/04502及美國(guó)申請(qǐng)第 10/222140號(hào)中所述。
本發(fā)明的各方面在本文中進(jìn)一步詳細(xì)描述。
II. TNFoc4中制齊寸
本發(fā)明提供一種治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的方法，其中施用TNFa抑 制劑例如TNFa抗體或其抗原結(jié)合部分是有益的。在一個(gè)實(shí)施方案中， 這些方法包括施用以高親和力及低解離速率結(jié)合至人類(lèi)TNFa并具有 高中和能力的分離的人類(lèi)抗體或其抗原結(jié)合部分。優(yōu)選地，本發(fā)明的 人類(lèi)抗體為重組、中和性的人類(lèi)抗hTNFa抗體。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明中使用的TNFa抑制劑為抗TNFa抗體 或其片段，包括英利昔單抗(1^111化3(^@， Johnson and Johnson;描述于 美國(guó)專(zhuān)利第5,656，272號(hào)中，引入本文作為參考)、CDP571(人源化單抹 抗TNFotlgG4抗體)、CDP 870(人源化單株抗TNFoc抗體片段)、抗TNF
22dAb(Peptech)、 CNTO 148(格里木單抗；Medarex and Centocor，參見(jiàn) WO 02/12502)及阿達(dá)木單抗(Humira⑧Abbott Laboratories,人類(lèi)抗TNF mAb, US 6，090,382中描述為D2E7)。其它的可用于本發(fā)明的抗體描述 于美國(guó)專(zhuān)利6,593,458; 6,498,237，; 6,451,983;和6，448，380,其中每一個(gè) 專(zhuān)利在此引入作為參考。
本發(fā)明中使用的最優(yōu)選的重組、中和抗體在本文中稱(chēng)作D2E7，也 稱(chēng)作HUMIRA⑧及阿達(dá)木單抗(D2E7 VL區(qū)的氨基酸序列顯示于SEQ ID NO: l中；D2E7 VH區(qū)的氨基酸序列顯示于SEQ ID NO: 2中)。 D2E7(HUMIRA⑧)的性質(zhì)已描述于Salfeld等人，美國(guó)專(zhuān)利第6,090,382 號(hào)、第6,258，562號(hào)及第6，509,015號(hào)中，均引入本文作為參考。TNFa 抑制劑的其它實(shí)施例包括已進(jìn)行治療類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的臨床試驗(yàn)的 嵌合及人源化鼠抗hTNFa抗體(參見(jiàn)例如Elliott等人(1994)丄tmcW 344:1125-1 127; Elliot等人(1994)丄朋cW 344:1105-1110; Rankin等人 (1995) J. T^ewma/o/. 34:334-342)。在另一實(shí)施方案中，該抗TNFa 抗體為多價(jià)抗體。
在 一 個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的方法包括施 用D2E7抗體及抗體部分、與D2E7相關(guān)的抗體及抗體部分及具有與 D2E7等同性質(zhì)(例如以低解離動(dòng)力學(xué)結(jié)合hTNFa的高親和力及高中和 能力)的其它人類(lèi)抗體及抗體部分。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供 一種以分離的人類(lèi)抗體或其抗原結(jié)合部分治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的方 法，該分離的人類(lèi)抗體或其抗原結(jié)合部分以通過(guò)表面等離振子共振測(cè) 定的lxl0—8 M或更低的Kd與lx10—3 s—i或更低的K。ff速率常數(shù)與人類(lèi) TNFa解離，并在標(biāo)準(zhǔn)體外L929分析中以lxl(T7 M或更低的ICso中和人 類(lèi)TNFa細(xì)胞毒性。更優(yōu)選地，該分離的人類(lèi)抗體或其抗原結(jié)合部分 以5xl(T4 s"或更低的K。ff，或甚至更優(yōu)選以lxl(T4 s"或更低的K。ff自人 類(lèi)TNFa解離。更優(yōu)選地，該分離的人類(lèi)抗體或其抗原結(jié)合部分在標(biāo) 準(zhǔn)體外L929分析中以lx10—8 M或更低的IC5。，甚至更優(yōu)選以lxl(T9 M 或更低的ICs。及仍更優(yōu)選以lxl(T1Q M或更低的IC5。中和人類(lèi)TNFa細(xì) 胞毒性。在一優(yōu)選實(shí)施方案中，該抗體為分離的人類(lèi)重組抗體或其抗
23原結(jié)合部分。
本領(lǐng)域公知抗體重鏈及輕鏈CDR3域在抗體對(duì)抗原的結(jié)合特異性/
親和力中起重要作用。因此，在另一方面，本發(fā)明涉及施用具有與
hTNFoc相關(guān)的低解離動(dòng)力學(xué)且具有結(jié)構(gòu)上與D2E7相同或相關(guān)的輕鏈 及重鏈CDR3域的人類(lèi)抗體治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的方法。D2E7 VL CDR3的位置9可由Ala或Thr占據(jù)而不會(huì)顯著影響K。ff。因此，D2E7 VL CDR3的共同基序包含氨基酸序列Q-R-Y-N-R-A-P-Y-(T/A)(SEQ ID NO: 3)。另夕卜，D2E7 VH CDR3的位置12可由Tyr或Asn占據(jù)而不會(huì)顯 著影響K。ff。因此，D2E7 VH CDR3的共同基序包含氨基酸序列 V-S-Y-L-S-T-A-S-S-L-D-(Y/N)(SEQ ID NO: 4)。此外，如美國(guó)專(zhuān)利第 6,090,382號(hào)的實(shí)施例2中所闡述，D2E7重鏈及輕鏈的CDR3域適合以 單一丙氨酸殘基(在VL CDR3內(nèi)的位置1、 4、 5、 7或8或在VH CDR3 內(nèi)的位置2、 3、 4、 5、 6、 8、 9、 10或1 l)置換而不會(huì)顯著影響K。仔。 另夕卜，熟練技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，如果D2E7 VL及VHCDR3域適合經(jīng)丙 氨酸置換，則CDR3域內(nèi)其它氨基酸的置換可以是可能的，同時(shí)仍保 持抗體的低解離速率常數(shù)，尤其為通過(guò)保守氨基酸置換。優(yōu)選地，在 D2E7 VL和/或VH CDR3域內(nèi)進(jìn)行不超過(guò)1至5個(gè)保守氨基酸置換。更 優(yōu)選地，在D2E7 VL和/或VH CDR3域內(nèi)進(jìn)行不超過(guò)1至3個(gè)保守氨基 酸置換。另外，保守氨基酸置換不應(yīng)在對(duì)結(jié)合hTNFoc而言關(guān)鍵的氨基 酸位置上進(jìn)行。D2E7 VL CDR3的位置2和5和D2E7 VH CDR3的位置1 和7看來(lái)對(duì)于與hTNFot的相互作用是關(guān)的，并且因此優(yōu)選地不在這 些位置上進(jìn)行保守氨基酸置換(盡管如上所述在D2E7 VL CDR3的位 置5上進(jìn)行丙氨酸置換是可接受的)(參見(jiàn)美國(guó)專(zhuān)利第6,090，382號(hào))。
因此，在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供由施用分離的人類(lèi)抗體或 其抗原結(jié)合部分治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的方法。該抗體或其抗原結(jié)合部 分優(yōu)選地具有以下特征
a) 以如通過(guò)表面等離振子共振測(cè)定的lxl(T3 s-'或更低的K。ff速率 常數(shù)從人類(lèi)TNFoc上解離；
b) 具有一個(gè)輕鏈CDR3域，其包含SEQ ID NO: 3的氨基酸序列或通過(guò)位置l、 4、 5、 7或8處的單一丙氨酸置換或通過(guò)位置1、 3、 4、 6、 7、 8和/或9處的l至5個(gè)保守氨基酸置換而由SEQ ID NO: 3修飾的氨基酸 序列；
c)具有一個(gè)重鏈CDR3域，其包含SEQIDNO: 4的氨基酸序列或通 過(guò)位置2、 3、 4、 5、 6、 8、 9、 10或1 l處的單一丙氨酸置換或通過(guò)位 置2、 3、 4、 5、 6、 8、 9、 10、 11和/或12處的1至5個(gè)保守氨基酸置換 而由SEQ ID NO: 4修飾的氨基酸序列。
更優(yōu)選地，該抗體或其抗原結(jié)合部分以5 x 10—4 s—或更低的K。ff從人 類(lèi)TNFot上解離。甚至更優(yōu)選地，該抗體或其抗原結(jié)合部分以^10-、-1 或更低的K。ff從人類(lèi)TNFoc上解離。
在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種通過(guò)施用分離的人類(lèi)抗體或 其抗原結(jié)合部分治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的方法。該抗體或其抗原結(jié)合部 分優(yōu)選含有一個(gè)輕鏈可變區(qū)(LCVR)，其具有一個(gè)包含SEQ ID NO: 3 的氨基酸序列或通過(guò)位置l、 4、 5、 7或8處的單一丙氨酸置換而由SEQ ID NO: 3修飾的氨基酸序列的CDR3域；且含有一個(gè)重鏈可變區(qū) (HCVR),其具有一個(gè)包含SEQIDNO: 4的氨基酸序列或通過(guò)位置2、 3、 4、 5、 6、 8、 9、 10或11處的單一丙氨酸置換而由SEQIDNO: 4修 飾的氨基酸序列的CDR3域。優(yōu)選地，該LCVR進(jìn)一步具有一個(gè)包含 SEQ ID NO: 5的氨基酸序列的CDR2域(即D2E7 VL CDR2),并且該 HCVR進(jìn)一步具有一個(gè)包含SEQ ID NO: 6的氨基酸序列的CDR2域(即 D2E7 VH CDR2)。甚至更優(yōu)選地，該LCVR進(jìn)一步具有包含SEQ ID NO: 7的氨基酸序列的CDR1域(即D2E7 VL CDR1),并且該HCVR具有 包含SEQ ID NO: 8的氨基酸序列的CDR1域(即D2E7 VH CDR1)。 VL 的構(gòu)架區(qū)優(yōu)選來(lái)自VJ人類(lèi)種系家族，更優(yōu)選來(lái)自A20人類(lèi)種系Vk基 因，且最優(yōu)選來(lái)自美國(guó)專(zhuān)利第6，090,382號(hào)的圖1 A及1B中所示的D2E7 VL構(gòu)架序列。VH的構(gòu)架區(qū)優(yōu)選來(lái)自VH3人類(lèi)種系家族，更優(yōu)選來(lái)自 DP-31人類(lèi)種系VH基因，且最優(yōu)選來(lái)自美國(guó)專(zhuān)利第6,090,382號(hào)的圖2A 及2B中所示的D2E7 VH構(gòu)架序列。
因此，在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種通過(guò)施用分離的人類(lèi)抗體或其抗原結(jié)合部分治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的方法。該抗體或其抗原
結(jié)合部分優(yōu)選地含有一個(gè)包含SEQ ID NO: l的氨基酸序列的輕鏈可 變區(qū)(LCVR)(即D2E7 VL)及一個(gè)包含SEQ ID NO: 2的氨基酸序列的重 鏈可變區(qū)(HCVR)(即D2E7 VH)。在某些實(shí)施方案中，該抗體包含一個(gè) 重鏈恒定區(qū)，例如IgGl、 IgG2、 IgG3、 IgG4、 IgA、 IgE、 IgM或IgD 恒定區(qū)。優(yōu)選地，該重鏈恒定區(qū)為IgGl重鏈恒定區(qū)或IgG4重鏈恒定區(qū)。 此外，該抗體可包含一個(gè)輕鏈恒定區(qū)，K輕鏈恒定區(qū)或X輕鏈恒定區(qū)。 優(yōu)選地，該抗體包含一個(gè)K輕《連恒定區(qū)?；蛘撸摽贵w部分可為(例 如)Fab片段或單鏈Fv片段。
在其它實(shí)施方案中，本發(fā)明描述一種通過(guò)施用抗TNFa抗體治療 腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的方法，其中該抗體為分離的人類(lèi)抗體或其抗原結(jié)合
CDR3域，例如抗體或其抗原結(jié)合部分具有一個(gè)輕鏈可變區(qū)(LCVR), 該LCVR具有包含選自SEQ ID NO: 3、 SEQ ID NO: 11 、 SEQ ID NO: 12、 SEQ ID NO: 13、 SEQ ID NO: 14、 SEQ ID NO: 15、 SEQ ID NO: 16、 SEQ ID NO: 17、 SEQ ID NO: 18、 SEQ ID NO: 19、 SEQ ID NO: 20、 SF々IDNO:21、 SEQ ID NO: 22、 SEQ ID NO: 23、 SEQ ID NO: 24、 SEQ ID NO: 25和SEQ ID NO: 26的氨基酸序列的CDR3域；或具有一 個(gè)重鏈可變區(qū)(HCVR),該HCVR具有包含選自SEQIDNO:4、 SEQ ID NO: 27、 SEQ ID NO: 28、 SEQ ID NO: 29、 SEQ ID NO: 30、 SEQ ID NO: 31、 SEQ ID NO: 32、 SEQ ID NO: 33、 SEQ ID NO: 34和SEQ ID NO: 35 的氨基酸序列的CDR3域。
本發(fā)明中使用的TNFa抗體也可以是修飾的。在一些實(shí)施方案中， 該TNFa抗體或其抗原結(jié)合片段被化學(xué)修飾以提供所需的效應(yīng)。例如， 本發(fā)明的抗體及抗體片段的聚乙二醇化作用可由本領(lǐng)域中已知的任 意聚乙二醇化反應(yīng)進(jìn)行，如(例如)以下參考文獻(xiàn)中所述Focw Grow// Factor 3:4-10 (1992); EP 0 154 316;及EP 0 401 384(均全文 引入本文作為參考)。優(yōu)選地，使用反應(yīng)性聚乙二醇分子(或類(lèi)似的反 應(yīng)性水溶性聚合物)通過(guò)酰化反應(yīng)或烷基化反應(yīng)進(jìn)行聚乙二醇化作
26用。用于本發(fā)明的抗體及抗體片段的聚乙二醇化作用的優(yōu)選的水溶性 聚合物為聚乙二醇(PEG)。如本文中使用的"聚乙二醇"包括已經(jīng)用來(lái)
衍生化其它蛋白質(zhì)的任意形式的PEG,例如單(Cl-C10)烷氧基聚乙二
醇或芳氧基聚乙二醇。
制備本發(fā)明的聚乙二醇化抗體及抗體片段的方法通常應(yīng)包括以
下步驟(a)在由此使抗體或抗體片段連接于一個(gè)或多個(gè)PEG基團(tuán)的條 件下使抗體或抗體片段與例如PEG的反應(yīng)性酯或醛衍生物的聚乙二 醇反應(yīng)，及(b)獲得反應(yīng)產(chǎn)物。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)清楚地基于已知參 數(shù)及所需結(jié)果選擇最佳反應(yīng)條件或?；磻?yīng)。
聚乙二醇化抗體及抗體片段通?？梢杂脕?lái)通過(guò)施用本文中所述 的TNFa抗體及抗體片段來(lái)治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎及本發(fā)明的與TNFa 相關(guān)的病癥。通常與未聚乙二醇化抗體及抗體片段相比，聚乙二醇化 抗體及抗體片段的半衰期延長(zhǎng)。聚乙二醇化抗體及抗體片段可單獨(dú)使 用、 一起使用或與其它藥物組合物聯(lián)合使用。
在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，TNFa抗體或其片段可以被改變， 其中該抗體的恒定區(qū)被修飾以相對(duì)于未修飾的抗體減少至少 一種恒
定區(qū)調(diào)節(jié)的生物效應(yīng)功能。為了修飾本發(fā)明的抗體從而使其顯示出對(duì) Fc受體降低的結(jié)合，可使抗體的免疫球蛋白恒定區(qū)片段在對(duì)Fc受體 (FcR)相互作用所必需的特定區(qū)突變(參見(jiàn)例如Canfield and Morrison (1991) J. ￡xp. M^/. 173:1483-1491;和Lund等人(1991) J. q/7mmw"o/. 147:2657-2662)。降低抗體的FcR結(jié)合力也可減少依賴(lài)于FcR相互作用 的其它效應(yīng)功能，例如調(diào)理作用及吞噬作用及抗原依賴(lài)性細(xì)胞毒性。 本發(fā)明的抗體或抗體部分可以衍生化或連接于另 一功能分子(例 如另一個(gè)肽或蛋白質(zhì))。因此，本發(fā)明的抗體及抗體部分包括本文中 所述的人類(lèi)抗hTNFoc抗體的衍生化及其它修飾形式，包括免疫粘附分 子。例如，本發(fā)明的抗體或抗體部分可(通過(guò)化學(xué)偶耳關(guān)、基因融合、 非共價(jià)結(jié)合或其它方式)功能性連接于一種或多種其它分子實(shí)體上， 例如另一抗體(例如雙特異性抗體或雙抗體)、可檢測(cè)劑、細(xì)胞毒性劑、 藥劑和/或可調(diào)節(jié)抗體或抗體部分與另一分子(例如《連霉抗生物素核心區(qū)或聚組氨酸標(biāo)記)結(jié)合的蛋白質(zhì)或肽。
一種類(lèi)型的衍生化抗體通過(guò)使兩種或多種(相同種類(lèi)或不同種類(lèi) 的)抗體交聯(lián)而產(chǎn)生(例如產(chǎn)生雙特異性抗體)。適當(dāng)?shù)慕宦?lián)劑包括具有 由適當(dāng)間隔基分開(kāi)的兩種不同反應(yīng)性基團(tuán)的異雙功能交聯(lián)劑(例如間-馬來(lái)酰亞胺基苯曱?；?N-羥基琥珀酰亞胺酯)或同雙功能交聯(lián)劑(例
如辛二酸二琥銷(xiāo)酰亞胺酯)。這些交Jf關(guān)劑購(gòu)自Pierce Chemical Company, Rockford, IL。
括熒光化合物。示例性熒光可檢測(cè)劑包括熒光素、熒光素異硫氰酸酯、 羅丹明、5-二曱胺-l-萘磺酰氯、藻紅蛋白等。也可以諸如堿性磷酸酶、 辣根過(guò)氧化物酶、葡萄糖氧化物酶等可檢測(cè)酶使抗體衍生化。當(dāng)用可 檢測(cè)酶j吏抗體衍生化時(shí)，通過(guò)添加該酶用其來(lái)生成可檢測(cè)反應(yīng)產(chǎn)物的 其他試劑進(jìn)行檢測(cè)。例如，當(dāng)存在可檢測(cè)劑辣根過(guò)氧化物酶時(shí)，添加 過(guò)氧化氫及二氨基聯(lián)苯胺導(dǎo)致生成可檢測(cè)的有色反應(yīng)產(chǎn)物。也可采用 生物素使抗體衍生化，并通過(guò)間接測(cè)量抗生物素蛋白或鏈霉抗生物素 的結(jié)合進(jìn)行檢測(cè)。
本發(fā)明的抗體或抗體部分可通過(guò)在宿主細(xì)胞中重組表達(dá)免疫J求 蛋白輕鏈及重鏈基因而制備。為重組表達(dá)抗體，用一種或多種攜帶編 碼抗體的免疫球蛋白輕鏈及重鏈的DNA片段的重組表達(dá)載體轉(zhuǎn)染宿 主細(xì)胞，使得輕鏈及重鏈在宿主細(xì)胞內(nèi)表達(dá)并且優(yōu)選地分泌至培養(yǎng)宿 主細(xì)胞的培養(yǎng)基中，抗體可自該培養(yǎng)基回收。標(biāo)準(zhǔn)重組DNA方法用來(lái) 獲得抗體重鏈及輕鏈基因，將這些基因引入重組表達(dá)載體中，并且將 這些載體導(dǎo)入宿主細(xì)月包內(nèi)，例如Sambrook、 Fritsch及Maniatis(編)， M /ecw/ar C7om>2g，' ^ La6or<a/or_y M^歷a/， Cold Spring Harbor,
N.Y., (1989)， Ausubel等人(編)Cw/rewf尸ratoco/s M /ecw/ar Greene Publishing Associates, (1989)及Boss等人的美國(guó)專(zhuān)利第 4,816,397號(hào)中所述的那些標(biāo)準(zhǔn)重組DNA方法。
為表達(dá)D2E7或與D2E7相關(guān)的抗體，首先獲得編碼輕鏈及重鏈可 變區(qū)的DNA片段。這些DNA可通過(guò)使用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)擴(kuò)增及修飾種系輕鏈及重鏈可變序列而獲得。人類(lèi)重鏈及輕鏈可變區(qū)基因的種
系DNA序列在本領(lǐng)域中已知(參見(jiàn)例如"Vbase"人類(lèi)種系序列數(shù)據(jù)庫(kù)； 也參見(jiàn)Kabat等人(1991) Se《we"ce51 iVc^e/"s o/ /wmwwo/og/ca/ /"&r賊第5版，U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication第91-3242號(hào)；Tomli勵(lì)n等人(1992)"The Repertoire of Human Germline VH Sequences Reveals about Fifty Groups of VH Segments with Different Hypervariable Loops "乂 A/o/. 227:776-798;及Cox等人(1994)"A Directory of Human Germ-line V78 Segments Reveals a Strong Bias in their Usage"五wr /wwwwo/. 24:827-836;其內(nèi)容均引入本文作為參考)。為獲得編碼D2E7或與D2E7 相關(guān)的抗體的重鏈可變區(qū)的DNA片段，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)PCR擴(kuò)增人類(lèi)種系 VH基因的VH3家族成員。最優(yōu)選地，擴(kuò)增DP-31 VH種系序列。為獲
準(zhǔn)PCR擴(kuò)增人類(lèi)種系VL基因的VKl家族成員。最優(yōu)選地，擴(kuò)增A20VL 種系序列。適用于擴(kuò)增DP-31種系VH及A20種系VL序列的PCR引物可 基于先前引用的文獻(xiàn)中所揭示的核苷酸序列使用標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行設(shè)計(jì)。 一旦獲得種系VH及VL片段，則可使這些序列突變以編碼本文中 所揭示的D2E7或與D2E7相關(guān)的氨基酸序列。首先將由種系VH及VL DNA序列編碼的氨基酸序列與D2E7或與D2E7相關(guān)的VH及VL氨基酸 序列比較以鑒定與種系不同的D2E7或與D2E7相關(guān)的序列中的氨基酸 殘基。隨后，使用遺傳密碼測(cè)定應(yīng)進(jìn)行哪些核苷酸改變， -使種系DNA 序列的適當(dāng)核苷酸突變，從而使突變的種系序列編碼D2E7或與D2E7 相關(guān)的氨基酸序列。種系序列的誘變通過(guò)例如PCR介導(dǎo)的突變(其中突 變的核普酸引入PCR引物中，使得PCR產(chǎn)物含有該突變)或定點(diǎn)誘變的 標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)^亍。
一旦(如上所述通過(guò)種系VH和VL基因的擴(kuò)增及誘變)獲得編碼 D2E7或與D2E7相關(guān)的VH和VL片段的DNA片段，則這些DNA片段可 通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)重組DNA技術(shù)進(jìn)一步操作，例如使可變區(qū)基因轉(zhuǎn)變?yōu)槿L(zhǎng)抗 體鏈基因、Fab片段基因或scFv基因。在這些操作中，編碼VL或VH的DNA片段有效連接于編碼另 一種蛋白質(zhì)例如抗體恒定區(qū)或柔性連接
體的另 一種DNA片段。如本發(fā)明內(nèi)容中所使用的術(shù)語(yǔ)"有效連接"意思 是使兩個(gè)DNA片段連接，使得由這兩個(gè)DNA片段編碼的氨基酸序列保 持在框內(nèi)。
一編碼重鏈恒定區(qū)(CH1 、 CH2及CH3)的DNA分子而轉(zhuǎn)變?yōu)槿L(zhǎng)重鏈 基因。人類(lèi)重鏈恒定區(qū)基因的序列在本領(lǐng)域中已知(參見(jiàn)例如Kabat等 人(1 991) S，/ewce^ q/'/Vo/e/.m' q/'/〃，麗o/og/c'a/ /"Z6Te仏 #5應(yīng),U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No.
鏈恒定區(qū)可為IgGl、 IgG2、 IgG3、 IgG4、 IgA、 IgE、 IgM或IgD恒定 區(qū)，但最優(yōu)選為IgGl或IgG4恒定區(qū)。對(duì)于Fab片段重鏈基因而言，編 碼VH的DNA可有效連接于另 一僅編碼重4連CH1恒定區(qū)的DNA分子。
編碼輕鏈恒定區(qū)(CL)的DN A分子而轉(zhuǎn)變?yōu)槿L(zhǎng)輕鏈基因(以及Fab輕 鏈基因)。人類(lèi)輕鏈恒定區(qū)基因的序列在本領(lǐng)域中已知(參見(jiàn)例如Kabat 等人(1991) 、S^wewtw q/7Vo/67'"5 /7/w" w冊(cè)/og/c'rt/ /"&rw/， U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No.
鏈恒定區(qū)可為K或X恒定區(qū)，但最優(yōu)選為K恒定區(qū)。
為得到scFv基因，將編碼VH及VL的DNA片段有效連接于另 一編 碼柔性連接體(例如編碼氨基酸序列(Gly4-Ser)3)的片段，使得VH及VL 序列可表達(dá)為相鄰的單鏈蛋白，且VL及VH區(qū)由柔性連接體連接(參見(jiàn) 例如Bird等人(1988) 5"c'/誕r 242:423-426; Huston等人(1988)尸亂 ;V"〃. /k'"d OS」85:5879-5883; McCafferty等人，AWw^ (1990) 348:552-554)。
為表達(dá)本發(fā)明的抗體或抗體部分，將如上所述獲得的編碼部分或 全長(zhǎng)輕鏈及重鏈的DNA插入表達(dá)載體內(nèi)，使得這些基因有效連接于轉(zhuǎn) 錄及翻譯控制序列。在本發(fā)明內(nèi)容中，術(shù)語(yǔ)"有效連接"意思是將抗體
30基因連接至載體內(nèi)使得載體內(nèi)的轉(zhuǎn)錄及翻譯控制序列起調(diào)節(jié)抗體基 因的轉(zhuǎn)錄及翻譯的預(yù)期功能。選擇表達(dá)載體及表達(dá)控制序列以使其可 與所使用的表達(dá)宿主細(xì)胞相容?？蓪⒖贵w輕鏈基因及抗體重鏈基因插 入各自載體中，或更通常地將兩種基因均插入相同表達(dá)載體中。通過(guò) 標(biāo)準(zhǔn)方法(例如連接抗體基因片段和載體上的互補(bǔ)限制性位點(diǎn)，或者 若不存在限制性位點(diǎn)則鈍端連接)將抗體基因插入表達(dá)載體中。在插
入D2E7或與D2E7相關(guān)的輕鏈或重鏈序列之前，該表達(dá)載體可以已經(jīng) 攜帶抗體恒定區(qū)序列。例如， 一種使D2E7或與D2E7相關(guān)的VH及VL 序列轉(zhuǎn)變?yōu)槿L(zhǎng)抗體基因的方法是將其分別插入已編碼重鏈恒定區(qū) 及輕鏈恒定區(qū)的表達(dá)載體中，使得VH片段有效連接于該載體內(nèi)的CH 片段且VL片段有效連接于該載體內(nèi)的CL片段。另外或者可替代地， 重組表達(dá)載體可編碼促進(jìn)抗體鏈從宿主細(xì)胞中分泌的信號(hào)肽?？蓪⒖?br> 末端。信號(hào)肽可以是免疫球蛋白信號(hào)肽或異源信號(hào)肽(即來(lái)自非免疫 球蛋白的信號(hào)肽)。
除抗體鏈基因之外，本發(fā)明的重組表達(dá)載體攜帶控制抗體鏈基因 在宿主細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的調(diào)節(jié)序列。術(shù)語(yǔ)"調(diào)節(jié)序列"意思是包括控制抗體 鏈基因轉(zhuǎn)錄或翻譯的啟動(dòng)子、增強(qiáng)子及其它表達(dá)控制組件(例如聚腺 苷酸化信號(hào))。這些調(diào)節(jié)序列描述于(例如)Goeddel; G^we五xpm^,》w rec/mo/ogy.. Me/Aod^ ￡>zz_ymo/c>g_y 185， Academic Press, San Diego， CA (1990)中。熟練技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)了解包括選擇調(diào)節(jié)序列的表達(dá)載體 的設(shè)計(jì)可取決于例如待轉(zhuǎn)化的宿主細(xì)胞的選擇、所需的蛋白質(zhì)表達(dá)水 平等因素。用于哺乳動(dòng)物宿主細(xì)胞表達(dá)的優(yōu)選調(diào)節(jié)序列包括在哺乳動(dòng) 物細(xì)胞內(nèi)引導(dǎo)高水平蛋白質(zhì)表達(dá)的病毒組件，例如由以下病毒衍生的 啟動(dòng)子和/或增強(qiáng)子巨細(xì)胞病毒(CMV)(例如CMV啟動(dòng)子/增強(qiáng)子)、 猿猴病毒40(SV40)(例如SV40啟動(dòng)子/增強(qiáng)子)、腺病毒(例如腺病毒主 要晚期啟動(dòng)子(AdMLP))及多瘤病毒。關(guān)于病毒調(diào)節(jié)組件及其序列的進(jìn) 一步描述，參見(jiàn)例如Stinski的美國(guó)專(zhuān)利第5,168,062號(hào)、Bell等人的美 國(guó)專(zhuān)利第4,510,245號(hào)及Schaffner等人的美國(guó)專(zhuān)利第4，968,615號(hào)。除抗體鏈基因及調(diào)節(jié)序列之外，本發(fā)明的重組表達(dá)載體可攜帶其 他序列，例如調(diào)節(jié)載體在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制的序列(例如復(fù)制起點(diǎn))及選 擇性標(biāo)記基因。選擇性標(biāo)記基因有助于選擇已導(dǎo)入載體的宿主細(xì)胞
(參見(jiàn)例如均為Axel等人的美國(guó)專(zhuān)利第4,399，216號(hào)、第4,634,665號(hào)及 第5,179,017號(hào))。例如，通常選擇性標(biāo)記基因賦予已導(dǎo)入載體的宿主 細(xì)胞對(duì)例如G418、潮霉素或氨曱喋呤的藥物的抗性。優(yōu)選的可選擇標(biāo) 記基因包括二氫葉酸還原酶(DHFR)基因(用氨曱喋呤選擇/擴(kuò)增在 dhfr-宿主細(xì)胞中使用)及" 基因(用于G418選擇)。
為表達(dá)輕鏈及重鏈，由標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)將編碼重鏈及輕鏈的表達(dá)載體轉(zhuǎn) 染至宿主細(xì)胞內(nèi)。術(shù)語(yǔ)"轉(zhuǎn)染"的各種形式包括通常用于將外源DNA導(dǎo) 入原核或真核宿主細(xì)胞的大量技術(shù)，例如電穿孔、磷酸鈣沉淀、DEAE-葡聚糖轉(zhuǎn)染等。盡管在原核或真核宿主細(xì)胞內(nèi)表達(dá)本發(fā)明的抗體在理 論上是可能的，然而抗體最優(yōu)選地在真核細(xì)胞中表達(dá)，最優(yōu)選地在哺 乳動(dòng)物宿主細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，因?yàn)檫@些真核細(xì)胞、尤其哺乳動(dòng)物細(xì)胞比原 核細(xì)胞更有可能組裝且分泌適當(dāng)折疊的免疫活性抗體。已報(bào)導(dǎo)抗體基 因的原核表達(dá)對(duì)于活性抗體的高產(chǎn)量生產(chǎn)無(wú)效(Boss和Wood (1985) 7b(i(2少6:12-13)。
優(yōu)選用于表達(dá)本發(fā)明的重組抗體的哺乳動(dòng)物宿主細(xì)胞包括中國(guó) 倉(cāng)鼠卵巢(CHO細(xì)胞)(包括dhfr-CHO細(xì)胞，描述于Urlaub和Chasin， (1980) ZVoc. Wa".」c^/. Sc/. OS^ 77:4216-4220,與DHFR選擇性標(biāo)記 一起使用，例如，如Kaufman和Sharp (1982) Mo/. 5/。/. 159:601-621中 所述)、NS0骨髓瘤細(xì)胞、COS纟田胞及SP2纟田月包。當(dāng)將編碼抗體基因的 重組表達(dá)載體導(dǎo)入哺乳動(dòng)物宿主細(xì)胞時(shí)，通過(guò)培養(yǎng)宿主細(xì)胞足以-使抗 體在宿主細(xì)胞內(nèi)表達(dá)或更優(yōu)選地4吏抗體分泌至宿主細(xì)胞于其中生長(zhǎng) 的培養(yǎng)基內(nèi)的 一 段時(shí)間來(lái)產(chǎn)生抗體?？贵w可使用標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)純化方法 從培養(yǎng)基中回收。
宿主細(xì)胞也可用于產(chǎn)生完整抗體的部分，例如Fab片段或scFv分 子。應(yīng)了解以上程序的變化在本發(fā)明的范圍內(nèi)。例如，可能期望用編 碼本發(fā)明的抗體的輕鏈或重鏈(但并非兩者)的DNA轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞。也結(jié)合hTNFcc并非必需的輕鏈及重 鏈的任一個(gè)或兩者的一些或全部DNA。由這些經(jīng)截短DNA分子表達(dá)的 分子也包含于本發(fā)明的抗體中。此外，可通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)交聯(lián)方法使本 發(fā)明的抗體與第二抗體交聯(lián)產(chǎn)生雙抗體，其中 一條重鏈及一條輕鏈為 本發(fā)明的抗體且另 一條重鏈及輕鏈對(duì)除hTNFoc之外的抗原具有特異 性。
在用于重組表達(dá)本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合部分的優(yōu)選系統(tǒng)中， 通過(guò)磷酸《丐介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染將編碼抗體重鏈與抗體輕鏈的重組表達(dá)載體 導(dǎo)入dhfr-CHO細(xì)胞。在重組表達(dá)載體內(nèi)，抗體重鏈及輕鏈基因各自有 效連接于CMV增強(qiáng)子/AdMLP啟動(dòng)子調(diào)節(jié)組件以驅(qū)動(dòng)高水平的基因轉(zhuǎn) 錄。重組表達(dá)載體也攜帶DHFR基因，其允許選擇已使用氨曱喋呤選 擇/擴(kuò)增用載體轉(zhuǎn)染的C H O細(xì)胞。培養(yǎng)選擇后的轉(zhuǎn)化抹宿主細(xì)胞以表 達(dá)抗體重鏈及輕鏈并且從培養(yǎng)基中回收完整抗體。使用標(biāo)準(zhǔn)分子生物 學(xué)技術(shù)制備重組表達(dá)載體、轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞、選擇轉(zhuǎn)化抹、培養(yǎng)宿主細(xì) 胞并且從培養(yǎng)基中回收抗體。
除本文中所揭示的D2E7或其抗原結(jié)合部分或與D2E7相關(guān)的抗體 之外的本發(fā)明的重組人類(lèi)抗體可通過(guò)篩選使用由衍生自人類(lèi)淋巴細(xì) 胞的mRNA制備的人類(lèi)VL及VH cDNA制備的重組組合抗體庫(kù)、優(yōu)選 scFv噬菌體展示庫(kù)而分離。制備及篩選這些庫(kù)的方法在本領(lǐng)域中已 知。除商業(yè)上可購(gòu)得的用于產(chǎn)生噬菌體展示庫(kù)的試劑盒(例如 Pharmacia i ecow6z7 awf尸/zage ^4w/7'Z)o^v 5ys/ew， 目錄號(hào)27-9400匿01;及 StratageneS^/Z4尸TM噬菌體展示試劑盒，目錄號(hào)240612)之外，尤其適 用于產(chǎn)生及篩選抗體展示庫(kù)的方法及試劑的實(shí)例可發(fā)現(xiàn)于(例 如)Ladner等人美國(guó)專(zhuān)利第5,223,409號(hào)；Kang等人PCT公開(kāi)第WO 92/18619號(hào)；Dower等人PCT公開(kāi)第WO 91/17271號(hào)；Winter等人PCT 公開(kāi)第WO 92/20791號(hào)；Markland等人PCT公開(kāi)第WO 92/15679號(hào)； Breitling等人PCT公開(kāi)第WO 93/01288號(hào)；McCafferty等人PCT公開(kāi)第 WO 92/01047號(hào)；Garrard等人PCT公開(kāi)第WO 92/09690號(hào)；Fuchs等人 (1991) Bz'o/r"'/mo/ogj 9:1370-1372; Hay等人(1992) //ww爿""7wJ
33/fy6nWo^w 3:81-85;Huse等人(1989) Sc/e"ce 246:1275-1281; McCafferty等人，A^^" (1990) 348:552-554; Griffiths等人(1993) ￡M5<9 / 12:725-734; Hawkins等人(1992) J Mo/ 歷o/ 226:889畫(huà)896;Clackson等人(1991) 352:624-628; Gram等人(1992)
尸vV^S 89:3576-3580; Garrard等人(l 991)腸/rec/z"o/， 9:1373國(guó)1377; Hoogenboom等人(1991) tVmc爿czW Wm 19:4133-4137;及Barbas等人 (1991) /WAS* 88:7978-7982中。
在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，為分離對(duì)hTNFa具有高親和力及低解離 速率常數(shù)的人類(lèi)抗體，首先使用Hoogenboom等人，PCT公開(kāi)第WO 93/06213號(hào)中所述的表位印記方法使用對(duì)hTNFa具有高親和力及低解 離速率常數(shù)的鼠抗hTNFa抗體(例如MAK 195,登錄號(hào)為ECACC 87 050801的雜交瘤)選擇對(duì)hTNFa具有類(lèi)似結(jié)合活性的人類(lèi)重鏈及輕鏈 序列。此方法中所使用的抗體庫(kù)優(yōu)選為如McCafferty等人，PCT公開(kāi) 第WO 92/01047號(hào)、McCafferty等人，iVWw" (1990) 348:552-554及 Griffiths等人，(1993)五A^(9J12:725-734中所述制備并篩查的scFv庫(kù)。 scFv抗體庫(kù)優(yōu)選地使用重組人類(lèi)TNFoc作為抗原進(jìn)行篩查。
一旦選擇初始人類(lèi)VL及VH片段，則進(jìn)行"混合及匹配"試驗(yàn)(其中 篩選不同對(duì)的初始選擇的VL及VH片段用于hTNFoc結(jié)合)，以選擇優(yōu)選 的VL/VH對(duì)組合。另外，為了進(jìn)一步改善對(duì)hTNFa結(jié)合的親和力和/ 或降低對(duì)hTNFa結(jié)合的解離速率常數(shù)，優(yōu)選的VL/VH對(duì)的VL及VH片 段可在類(lèi)似于天然免疫應(yīng)答過(guò)程中引起抗體親和力成熟的體內(nèi)體細(xì) 胞突變過(guò)程的過(guò)程中隨機(jī)突變，優(yōu)選地在VH和/或VL的CDR3域內(nèi)突 變。該體外親和力成熟可使用分別與VH CDR3或VL CDR3互補(bǔ)的PCR 引物通過(guò)擴(kuò)增VH及VL區(qū)實(shí)現(xiàn)，這些引物已采用四種核苷酸堿基的隨 機(jī)混合物在特定位置"刺突"(spike),使得產(chǎn)生的PCR產(chǎn)物編碼VH 及VL片段，其中隨機(jī)突變作用已被導(dǎo)入VH和/或VL CDR3域?？稍俅?篩選用于結(jié)合hTNFa的這些隨機(jī)突變的VH及VL片段，并且可以選擇 顯示對(duì)于hTNFa結(jié)合而言高親和力及低解離速率的序列。
從重組免疫球蛋白展示庫(kù)篩選并分離本發(fā)明的抗hTNFa抗體之
34后，可從展示包裝(例如從噬菌體基因組)回收編碼選擇的抗體的核酸，
并通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)重組DNA技術(shù)亞克隆到其它表達(dá)載體中。如果需要，可以
將核酸進(jìn)一步操作，以產(chǎn)生本發(fā)明的其它抗體形式(例如連接于編碼 例如其他恒定區(qū)的其他免疫球蛋白域的核酸)。如以上進(jìn)一步詳細(xì)描 述的，為了表達(dá)通過(guò)篩選組合文庫(kù)而分離的重組人類(lèi)抗體，將編碼抗
體的DNA克隆到重組表達(dá)載體中，并導(dǎo)入哺乳動(dòng)物宿主細(xì)胞。
分離對(duì)hTNFot具有高親和力及低解離速率常數(shù)的人類(lèi)抗體的方
法也描述于美國(guó)專(zhuān)利第6,090,382號(hào)、第6，258,562號(hào)及第6，509，015號(hào)
中，均引入本文作為參考。
該TNFa抑制劑也可以為T(mén)NF融合蛋白，例如依那西普(Enbrel ,
Amgen;描述于WO 91/03553及WO 09/406476中，引入本文作為參考)。
在另一實(shí)施方案中，該TNFa抑制劑為重組TNF結(jié)合蛋白
(r隱TBP-I)(Serono)。
III.腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的治療
本發(fā)明提供治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的方法，包括將包含例如TNFct 抗體的TNFa抑制劑施用于患有腐燭性多關(guān)節(jié)炎的受試者。本發(fā)明也 描述確定TNFa抑制劑治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的功效的方法。優(yōu)選地， 該TNFa為人類(lèi)TNFa,并且該受試者為人類(lèi)受試者。在一個(gè)實(shí)施方案 中，該TNFa抑制劑為阿達(dá)木單抗，也稱(chēng)作HUMIRA⑧或D2E7。下文 進(jìn)一步描述利用包含抗體及抗體部分的TNFa抑制劑治療腐蝕性多關(guān) 節(jié)炎的用途以及確定TNFa抑制劑治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的功效的方 法。
術(shù)語(yǔ)"多關(guān)節(jié)炎"通常是指在受試者的兩個(gè)或兩個(gè)以上關(guān)節(jié)處的炎 癥，即腫脹、壓痛或發(fā)熱。
本文使用的術(shù)語(yǔ)"腐蝕性多關(guān)節(jié)炎"是指受試者所患的對(duì)關(guān)節(jié)造成 損傷的多關(guān)節(jié)炎。
本發(fā)明提供一種治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的方法，包括施用包含例如 TNFa抗體的TNFoc抑制劑。本發(fā)明也提供一種抑制與腐蝕性多關(guān)節(jié)炎
35相關(guān)的關(guān)節(jié)疾病的放射照相進(jìn)展的方法。下文更詳細(xì)地描述施用 TNFOC抗體或其抗原結(jié)合部分用于治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的方法。
本發(fā)明提供 一 種確定抗TNF a治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的功效的方 法。測(cè)定該功效的測(cè)量包括測(cè)定治療后關(guān)節(jié)破壞或腐蝕是否改善的試 驗(yàn)。例如，可以利用受試者的改良總Sharp評(píng)分(mTSS)測(cè)定受試者體 內(nèi)腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的改善。也可以利用mTSS作為確定治療腐蝕性多 關(guān)節(jié)炎的功效的分析。
Sharp評(píng)分為通過(guò)骨腐蝕及關(guān)節(jié)間隙狹窄評(píng)估的總關(guān)節(jié)損傷的變 化的x射線測(cè)量值(Sharp等人(1971) ^W/z〃'to &施w扁"扁14:706; Sharp等人(1985) J〃/7〃'^ cfe跑w腿"扁28:16)。 mTSS為基于評(píng)估患 者的手及足的x射線對(duì)關(guān)節(jié)損傷程度及嚴(yán)重性的測(cè)量值。針對(duì)關(guān)節(jié)腐 蝕與關(guān)節(jié)間隙狹窄對(duì)關(guān)節(jié)評(píng)分。mTSS為腐蝕評(píng)分(ES)與關(guān)節(jié)間隙狹 窄(JSN)評(píng)分的和，例如范圍為約0至約398，其中0=無(wú)損傷。ES為對(duì) 46個(gè)關(guān)節(jié)收集的關(guān)節(jié)評(píng)分的和，范圍例如為約0至約230。 JSN為對(duì)42 個(gè)關(guān)節(jié)收集的關(guān)節(jié)評(píng)分的和，范圍為例如約0至約168。評(píng)分O表示無(wú) 變化。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，mTSS通過(guò)結(jié)合范圍為約0-192的 關(guān)節(jié)間隙狹窄評(píng)分及范圍為約0-378的腐蝕評(píng)分而確定。
mTSS改善或不變證明TNFot抑制劑對(duì)治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎有效。 在一個(gè)實(shí)施方案中，關(guān)節(jié)疾病未進(jìn)展證明TNFa抑制劑治療腐蝕性多 關(guān)節(jié)炎的功效，例如在患有腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的受試者體內(nèi)隨著時(shí)間推 移Sharp評(píng)分、mTSS不變。在另一實(shí)施方案中，關(guān)節(jié)疾病的放射線進(jìn) 展降低證明TNFot抑制劑治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的功效，例如在患有腐 蝕性多關(guān)節(jié)炎的受試者體內(nèi)隨著時(shí)間推移Sharp評(píng)分、mTSS降低。
在一個(gè)實(shí)施方案中，基線與用TNF a抑制劑治療之后 一 段時(shí)間之 間mTSS的總變化^7約0.9與約-0.2。在另一實(shí)施方案中，基線與用 TNFa抑制劑治療之后一段時(shí)間之間mTSS的總變化為約0.5與約-0.2。 在另一實(shí)施方案中，基線與用TNF a抑制劑治療之后 一 段時(shí)間之間 mTSS的總變化為約0.2與約-0.2。
應(yīng)注意到上述評(píng)分中間的范圍(例如約-0.1至約0.3)也預(yù)期為本發(fā)明的一部分。例如，預(yù)期包括使用任意上述數(shù)值的組合作為上限和/ 或下限的數(shù)值范圍。
雖然以抗炎癥藥劑治療炎性疾病在治療后可得到臨床改善，但是
仍會(huì)存在由腐蝕性多關(guān)節(jié)炎引起的進(jìn)行性關(guān)節(jié)損傷(Gladman等人 (1990) J臉w顧/c/ 17:809; Hanly等人(1988;Mw"/ze畫(huà)D/"7:386)。 因此，本發(fā)明的一個(gè)特征為提供一種治療可與另一病癥相關(guān)的腐蝕性 多關(guān)節(jié)炎的方法。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明包括治療與包括但 不限于以下病癥的TNFoc活性為有害的病癥相關(guān)的腐蝕性多關(guān)節(jié)炎 類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(包括幼年型類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)、克羅恩病、牛皮癬、 牛皮癬性關(guān)節(jié)炎和強(qiáng)直性脊柱炎。腐蝕性多關(guān)節(jié)炎也可與多中心網(wǎng)狀 組織細(xì)胞增多癥(MRH)相關(guān)(Santilli等人(2002)」朋We/zww ZXs 61: 485)。
本文使用的術(shù)語(yǔ)"TNFot活性為有害的病癥"包括其中患有病癥的 受試者體內(nèi)TNFa的存在已顯示為或懷疑為造成病癥的病理生理學(xué)原 因或?qū)е虏“Y惡化的因素的疾病及其它病癥。因此，TNFoc活性為有 害的病癥為預(yù)期抑制TN F a活性可減輕其病癥的癥狀和/或進(jìn)展的病 癥。這些病癥可以(例如)由可(例如)使用如上所述抗TNFa抗體檢測(cè)的 患有病癥受試者的生物流體內(nèi)TNFa濃度增加(例如受試者的血清、血 漿、滑液等中TNFa濃度增加)而證實(shí)。存在大量TNFa活性為有害的 病癥的實(shí)例。下文進(jìn)一步"i侖述利用TNFa抑制劑治療與特定病癥相關(guān) 的腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的用途
A.自身免疫疾病
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明包括治療與自身免疫疾病相關(guān)的腐蝕 性多關(guān)節(jié)炎。在患有包括例如類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎及幼年型類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié) 炎的關(guān)節(jié)炎形式的自身免疫疾病的患者中可發(fā)現(xiàn)腐蝕性多關(guān)節(jié)炎 (Verloes (1998)她d G潔r 35:943)。
例如阿達(dá)木單抗的TNFa抗體可用于治療自身免疫疾病，尤其是 與腐蝕性多關(guān)節(jié)炎相關(guān)的那些自身免疫疾病。這些自身免疫疾病的實(shí) 例包括類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、類(lèi)風(fēng)濕性脊推炎、骨關(guān)節(jié)炎及痛風(fēng)關(guān)節(jié)炎、變態(tài)反應(yīng)、多發(fā)性硬化癥、自身免疫糖尿病、自身免疫葡萄膜炎及腎 病綜合征。自身免疫疾病的其它實(shí)例包括多系統(tǒng)自身免疫疾病和自身
免疫聽(tīng)覺(jué)喪失。自身免疫疾病的其它實(shí)例描述于美國(guó)申請(qǐng)第10/622932 號(hào)中，引入本文作為參考。 幼年型類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎
病理生理學(xué)有關(guān)(Grom等人(1996) y^A〃'^ W/zewm. 39:1703; M""gge等 人(1995) ^W/zn'^ W/zewm. 8:211)。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的TNFa 抗體用于治療幼年型類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。
本文使用的術(shù)語(yǔ)"幼年型類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎"或"JRA"是指發(fā)生在16 歲之前可導(dǎo)致關(guān)節(jié)或結(jié)締組織損傷的慢性、炎性疾病。JRA也被稱(chēng)作 幼年型慢性多關(guān)節(jié)炎和Still病。
JRA在16歲或更小的兒童體內(nèi)導(dǎo)致關(guān)節(jié)炎癥及僵硬6周以上。炎癥 導(dǎo)致關(guān)節(jié)發(fā)紅、腫脹、發(fā)熱及疼痛。任意關(guān)節(jié)均可受影響，并且炎癥 可限制受影響關(guān)節(jié)的移動(dòng)性。 一種類(lèi)型的JRA也可影響內(nèi)臟器官。
通常由所涉及的關(guān)節(jié)數(shù)、癥狀及由血液檢測(cè)所發(fā)現(xiàn)的某些抗體的 存在與否將JRA分為三類(lèi)。這種分類(lèi)有助于醫(yī)生判定疾病如何發(fā)展及 內(nèi)臟器官或皮膚是否受影響。JRA的分類(lèi)包括以下
a. 少關(guān)節(jié)型JRA,其中患者有4個(gè)或少于4個(gè)關(guān)節(jié)受影響。少關(guān)節(jié) 型為最常見(jiàn)的JRA形式，通常影響大關(guān)節(jié)，例如膝。
b. 多關(guān)節(jié)型HRA,其中5個(gè)或5個(gè)以上關(guān)節(jié)受影響。最常涉及小 關(guān)節(jié)，例如手及足中的那些小關(guān)節(jié)，但該疾病也可影響大關(guān)節(jié)。
c. 全身型JRA，其特征在于關(guān)節(jié)腫脹、發(fā)燒、輕度皮滲，也可影 響內(nèi)臟器官，例如心臟、肝臟、脾及'淋巴結(jié)。全身型JRA也稱(chēng)作Still 病。這些兒童中的一小部分在多個(gè)關(guān)節(jié)發(fā)展關(guān)節(jié)炎并且可能患有持續(xù) 至成人的嚴(yán)重關(guān)節(jié)炎。
B.脊推關(guān)節(jié)病
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明包括治療與脊推關(guān)節(jié)病相關(guān)的腐蝕性 多關(guān)節(jié)炎。在患有例如與有害的TNFot活性相關(guān)的脊推關(guān)節(jié)病的炎性
38疾病的患者中可發(fā)現(xiàn)腐蝕性多關(guān)節(jié)炎(參見(jiàn)例如Moeller等人(1990) C>toA:/"e 2:162;美國(guó)專(zhuān)利第5,231，024號(hào)；歐洲專(zhuān)利申請(qǐng)第260 610號(hào))。
本文使用的術(shù)語(yǔ)"脊推關(guān)節(jié)病"用來(lái)指幾種影響脊關(guān)節(jié)的疾病的任 意一種，其中這些疾病有同樣的普通臨床、放射學(xué)及組織學(xué)特征。許 多脊推關(guān)節(jié)病有同樣的遺傳特征，即其與HLA-B27等位基因相關(guān)。在 一個(gè)實(shí)施方案中，術(shù)語(yǔ)脊推關(guān)節(jié)病除用來(lái)指強(qiáng)直性脊柱炎以外，還指 幾種影響脊關(guān)節(jié)的疾病的任意一種，其中這些疾病有同樣的普通臨 床、放射學(xué)及組織學(xué)特征。脊推關(guān)節(jié)病的實(shí)例包括強(qiáng)直性脊柱炎、牛 皮癬性關(guān)節(jié)炎/脊推炎、腸道性關(guān)節(jié)炎、反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎或Reiter綜合征 和未分化型脊推關(guān)節(jié)病。用于研究脊推關(guān)節(jié)病的動(dòng)物模型的實(shí)例包括 朋M7"々轉(zhuǎn)基因小鼠、HLA-B27轉(zhuǎn)基因大鼠(參見(jiàn)Taurog等人(199 8) 77ze 6"/ cw^y/aW/z〃77'(^. Oxford:Oxford University Press)。
處于患脊推關(guān)節(jié)病的風(fēng)險(xiǎn)中的受試者的實(shí)例包括患有關(guān)節(jié)炎的
在本發(fā)明的一實(shí)施方案中，TNFa抑制劑用于治療患有與腐蝕性多關(guān) 節(jié)炎相關(guān)的脊推關(guān)節(jié)病的受試者?？捎肨NFa抑制劑治療的脊推關(guān)節(jié) 病的實(shí)例描述如下 強(qiáng)直性脊柱炎(AS)
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明包括使用TNFa抗體或其抗原結(jié)合部分 治療與強(qiáng)直性脊柱炎相關(guān)的腐蝕性多關(guān)節(jié)炎。腫瘤壞死因子與強(qiáng)直性 脊4主炎的病j里生^里學(xué)有關(guān)(參見(jiàn)Verjans等人(1991) ^4w/^z7^尺/zeww. 34:486;Verjans等人(1994) C7," ￡xp/mm""o/. 97:45;Kaijtzel等人(1999) //mw /wwm"o/. 60:140)。強(qiáng)直性脊柱炎(AS)為包括一處或多處推骨炎 癥的炎性病癥。AS為影響包括脊骨的推骨與骶髂關(guān)節(jié)之間的關(guān)節(jié)及脊 骨與骨盆之間的關(guān)節(jié)的軸向骨骼和/或周邊關(guān)節(jié)的慢性炎性疾病。AS 最終可導(dǎo)致受影響的推骨融合或生長(zhǎng)在一起。包括AS的脊推關(guān)節(jié)病可 與牛皮癬性關(guān)節(jié)炎(PsA)和/或包括潰瘍性結(jié)腸炎及克羅恩病的炎性腸 病(IBD)相關(guān)。
AS的早期表現(xiàn)可通過(guò)包括CT掃描及MRI掃描在內(nèi)的放射線檢測(cè)來(lái)確定。AS的早期表現(xiàn)通常包括scroiliitis以及骶髂關(guān)節(jié)變化，這由軟 骨下骨的皮質(zhì)邊緣模糊，隨后腐蝕及硬化而證實(shí)。疲勞也已被看作AS 的常見(jiàn)癥狀(Duffy等人(2002)」C7 ^m "a/ Sc/e"^/ c Mee""g摘要)。
牛皮癬性關(guān)節(jié)炎
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明包括使用TNFa抗體或其抗原結(jié)合部分
癬性關(guān)節(jié)炎(PsA)的病理生理學(xué)有關(guān)(Partsch等人(1998)力""W/zeww 57:691 ;Ritchlin等人(1998) J7 /zew/7 a^/. 25:1544)。 ^口本文中/斤才旨 的牛皮癬性TNFa與類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的活化組織炎癥有關(guān)，并且導(dǎo)致 關(guān)節(jié)破壞(參見(jiàn)例如Moeller， A.等人(1990) Cy^,"e 2:162-169; Moeller 等人的美國(guó)專(zhuān)利第5,231,024號(hào);Moeller, A.的歐洲專(zhuān)利申請(qǐng)第260 610 Bl號(hào);Tracey和Cerami，同上;Arend, W.P.及Dayer， J-M. (1995) ^r仇 W/7eww. 38:151-160;Fava， R.A.等人(1993) C/,", ￡xp. /www"o/. 94:261 -266)。 TNFoc也與促進(jìn)糖尿病中的胰島細(xì)胞死亡及調(diào)節(jié)胰島素 抗性有關(guān)(參見(jiàn)例如Tracey及Cerami，同上；PCT公開(kāi)第WO 94/08609 號(hào))。TNFa也與多發(fā)性硬化癥中的介導(dǎo)對(duì)少突膠質(zhì)細(xì)胞的細(xì)胞毒性及 誘導(dǎo)炎性斑塊有關(guān)(參見(jiàn)例如Tracey及Cerami,同上)。已對(duì)嵌合及人源 化鼠抗hTNF a抗體進(jìn)行了治療類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的臨床試驗(yàn)(參見(jiàn)例如 Elliott, M丄等人(1994)丄露"344:1125-1127;Elliot， M丄等人(1994) 344:1105-1110;Rankin， E.C.等人(1995) B廣乂 i /zewwa/o/, 34:334-342)。
牛皮癬性關(guān)節(jié)炎是指與牛皮癬(一種在身體上導(dǎo)致紅斑的常見(jiàn)慢 性皮膚病)相關(guān)的慢性炎性關(guān)節(jié)炎。20名牛皮癬患者中約有1人將發(fā)展 伴隨有皮膚病的關(guān)節(jié)炎，并且在約75%的情況中，牛皮癬早于關(guān)節(jié)炎 發(fā)生。PsA本身以多種方式表現(xiàn)，從輕微關(guān)節(jié)炎至嚴(yán)重關(guān)節(jié)炎，其中 該關(guān)節(jié)炎通常影響手指及脊骨。當(dāng)脊骨受影響時(shí)，癥狀與如上所述的 強(qiáng)直性脊柱炎的那些癥狀類(lèi)似。TNFa抗體或其抗原結(jié)合片段可用于 治療與PsA相關(guān)的腐蝕性多關(guān)節(jié)炎。
40PSA有時(shí)與關(guān)節(jié)殘毀相關(guān)。關(guān)節(jié)殘毀是指以過(guò)量骨腐蝕導(dǎo)致?lián)p壞 關(guān)節(jié)的全部腐蝕性畸形為特征的病癥。
PsA的特征性放射線特征包括關(guān)節(jié)腐蝕、關(guān)節(jié)間隙狹窄、包括關(guān)
節(jié)周?chē)肮求w骨膜炎的骨增生、包括"鉛筆帽"畸形和肢端骨質(zhì)溶解的
骨質(zhì)溶解、關(guān)節(jié)強(qiáng)直、骨刺形成及脊推炎(Wassenberg等人(2001) Z i^ewwa o/ 60:156)。與類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)不同，PsA中的關(guān)節(jié)涉及 通常為不對(duì)稱(chēng)的且可為寡關(guān)節(jié)的；骨質(zhì)疏松癥為非典型的。盡管早期 PsA中的腐蝕性變化與RA中的腐蝕性變化一樣在邊緣出現(xiàn)，然而其隨 著疾病進(jìn)展由于靠近腐蝕處的骨膜骨形成而變得不規(guī)則且不正常界 定。在嚴(yán)重的情況中，腐蝕性變化可發(fā)展為形成鉛筆帽畸形或全部骨 質(zhì)溶解(Gold等人(1988) TW/o/ C7/" WoW/z Jw 26:1195; Resnick等人 (1977) J C鼎J^oc / "AW 28:187)。不對(duì)稱(chēng)腐蝕在腕骨內(nèi)及在手的掌部 指骨(MCP)、近端指骨之間(PIP)及遠(yuǎn)側(cè)指骨之間(DIP)關(guān)節(jié)內(nèi)通過(guò)放射 線可見(jiàn)，但DIP關(guān)節(jié)通常先受影響。在指骨叢及在腱及韌帶與骨的連
放射結(jié)果以支持PsA診斷。另外，手趨向于涉及比足高得多的頻率， 兩者的比率接近2:1。
脊推關(guān)節(jié)病的其它實(shí)例描述于美國(guó)申請(qǐng)第10/622932號(hào)中，引入本 文作為參考。
C.皮膚及指曱病癥
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明包括治療與皮膚及指甲病癥相關(guān)的腐 蝕性多關(guān)節(jié)炎。本文使用的術(shù)語(yǔ)"TNFa活性為有害的皮膚及指甲病癥 "包括其中患有病癥的受試者體內(nèi)TNFa的存在已顯示為或懷疑為造 成病癥的病理生理學(xué)的原因或?qū)е虏“Y惡化的因素的皮膚和/或指甲 病癥及其它病癥，例如牛皮癬。因此，TNFa活性為有害的皮膚及指 曱病癥為預(yù)期抑制TNFa活性可減輕病癥的癥狀和/或進(jìn)展的病癥。下 文中進(jìn)一 步論述利用抗體、抗體部分或其它TNFa抑制劑治療特定皮 膚及指甲病癥的用途。在某些實(shí)施方案中，將本發(fā)明的抗體、抗體部 分或其它TNFa抑制劑與如下文中所述的另 一 治療劑聯(lián)合施用于受試者。在一個(gè)實(shí)施方案中，將TNFoc抗體與另一治療劑聯(lián)合施用于受試
者，用于治療與牛皮癬相關(guān)的腐蝕性多關(guān)節(jié)炎以及治療與關(guān)節(jié)炎相關(guān)
的牛皮癬。 牛皮癬
肺瘤壞死因子與牛皮癬的病理生理學(xué)有關(guān)(Takematsu等人(1989) 」rc/z Der腿/0/ to. 281:398; Victor及Gottlieb (2002) Z)er應(yīng)to/. 1(3):264)。牛皮癬被描述為皮膚炎癥(刺激及發(fā)紅)，其特征為經(jīng)常伴 隨有皮膚發(fā)紅、發(fā)癢及厚干銀色鱗屑。具體地說(shuō)，形成的病變涉及在 表皮增生、皮膚炎性應(yīng)答及例如淋巴因子和炎性因子的調(diào)節(jié)分子的表 達(dá)中的初級(jí)及次級(jí)改變。牛皮癬性皮膚的形態(tài)學(xué)特征為表皮細(xì)胞更換 增加、表皮變厚、異常角質(zhì)化、炎性細(xì)胞滲透至表皮及多形核白細(xì)胞 及淋巴細(xì)胞滲透至表皮層導(dǎo)致基底細(xì)胞循環(huán)增加。牛皮癬通常涉及指 甲，其常常顯示為凹陷、指曱分離、變厚及變色。牛皮癬通常與例如 關(guān)節(jié)炎(包括類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)、炎性腸病(IBD)及克羅恩病的其它炎性 病癥相關(guān)。
雖然牛皮癬的跡象最常見(jiàn)于軀干、肘、膝、頭皮、皮褶或手指甲 上，但其可影響皮膚的任意或所有部分。通常，新皮膚細(xì)胞自底層向 上移至表面需要約一個(gè)月。在牛皮癬中，此過(guò)程僅需要幾天，從而導(dǎo) 致死皮細(xì)胞疊加和厚鱗屑的形成。牛皮癬的癥狀包括覆蓋有銀色鱗 屑的干或紅皮膚斑、可裂開(kāi)及變疼并且通常在肘、膝、軀干、頭皮及 手上呈雜綠色的皮膚凸斑伴有紅色邊界；包括膿瘡的皮膚病變、皮膚痛。
牛皮癬的治療通常包括局部施用皮質(zhì)類(lèi)固醇、維生素D類(lèi)似物及 局部施用或口服類(lèi)視色素或其組合。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的 TNFa抑制劑以與這些常用治療之一組合的形式或在這些常用治療之 一存在下施用。也可與TNFa抑制劑組合用于治療牛皮癬的其他治療 劑在下文中更詳細(xì)地描述。
牛皮癬的診斷通?；谄つw外觀。另外可需要皮膚活組織檢查或
42皮膚斑的碎屑或培養(yǎng)物以排除其它皮膚病癥。若關(guān)節(jié)疼痛存在并持續(xù) 存在，則可用X射線檢查牛皮癬性關(guān)節(jié)炎。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，TNFa抑制劑用于治療牛皮癬，包 括慢性斑狀牛皮癬、點(diǎn)狀牛皮褲、反式牛皮癬、膿皰型牛皮癬、尋常 天皰瘡、紅皮癥型牛皮癬、與炎性腸病(IBD)相關(guān)的牛皮癬及與類(lèi)風(fēng) 濕性關(guān)節(jié)炎(RA)相關(guān)的牛皮癬。本發(fā)明治療方法中包括的特定類(lèi)型的 牛皮癬包括慢性斑狀牛皮癬、點(diǎn)狀牛皮癬、反式牛皮癬和膿皰型牛皮 癬。牛皮癬及其它類(lèi)型的皮膚及指甲病癥的其它實(shí)例描述于美國(guó)申請(qǐng) 第10/622932號(hào)，引入本文作為參考。
確定TNFa抑制劑治療與TNFa活性為有害的病癥相關(guān)的腐蝕性 多關(guān)節(jié)炎的功效的方法包括測(cè)量包括關(guān)節(jié)間隙狹窄和/或關(guān)節(jié)腐蝕的 關(guān)節(jié)毀壞程度的任一分析。在一個(gè)實(shí)施方案中，使用放射線照相術(shù)測(cè) 量關(guān)節(jié)毀壞。這些分析可通過(guò)測(cè)定在以TN F a抑制劑治療的受試者或 患者群體中是否得到改善而用于檢查T(mén)NFa抑制劑的功效。 一般而言， 通過(guò)比較以TNFa抑制劑治療之前測(cè)定的評(píng)分基線與以TNFa抑制劑 治療之后的時(shí)間測(cè)定的評(píng)分，來(lái)確定改善狀況。
關(guān)節(jié)炎疾病(例如Ra、 PsA及JRA)的其他改善可以通過(guò)測(cè)定ACR應(yīng) 答來(lái)確定。例如ACR20、 ACR50、 ACR70的ACR閾值可用于定義RA 及PsA的改善，并且顯示7種疾病活性測(cè)量值的改善百分比。標(biāo)準(zhǔn)包括 脆弱及腫脹關(guān)節(jié)計(jì)數(shù)的改善百分比及以下至少3種標(biāo)準(zhǔn)的改善患者 疼痛評(píng)估、患者整體評(píng)估、醫(yī)生整體評(píng)估、患者自我評(píng)估失能或疾病 活性(即紅細(xì)胞沉降速率或C反應(yīng)蛋白水平)的實(shí)驗(yàn)室測(cè)量值(Felson等 人(1993)JW/zW^ / /zaw. 36(6):729)。
其它用于測(cè)定針對(duì)治療RA、 JRA及PsA的特定療法的改善的分析 包括EULAR反應(yīng)、DAS評(píng)分、FACIT-F、 HAQ評(píng)分及SJC和/或TJC計(jì) 數(shù)。
EULAR標(biāo)準(zhǔn)使用DAS來(lái)定義應(yīng)答。應(yīng)答定義為(a)疾病活性相對(duì) 于基線的變化，和(b)追蹤過(guò)程中達(dá)到的疾病活性水平。用于定義DAS 的標(biāo)準(zhǔn)包括Ritchie關(guān)節(jié)指標(biāo)、肺脹關(guān)節(jié)計(jì)數(shù)(44個(gè)關(guān)節(jié)計(jì)數(shù))、紅細(xì)胞沉降速率及健康評(píng)估調(diào)查問(wèn)巻。DAS標(biāo)準(zhǔn)的變化形式DAS28對(duì)于腫 脹及脆弱關(guān)節(jié)使用28個(gè)關(guān)節(jié)計(jì)數(shù)。應(yīng)答定義為相對(duì)于基線的顯著變化 與所獲得的疾病活性水平的組合。良好應(yīng)答定義為D A S顯著降低 (>1.2)及低水平疾病活性(小于或等于2.4)。無(wú)應(yīng)答定義為降低小于或 等于0.6,或在獲得DAS〉3.7的情況下DAS降低大于0.6及小于或等于 1.2。任意其它評(píng)分均被-f見(jiàn)為適度應(yīng)答。
DAS為基于Ritchie關(guān)節(jié)指標(biāo)、44個(gè)腫脹關(guān)節(jié)計(jì)數(shù)、ESR及對(duì)VAS 的整體健康評(píng)估的評(píng)分。范圍從1至9變化。DAS及DAS28的連續(xù)測(cè)量 值為身體障礙及放射照相進(jìn)展的強(qiáng)有力預(yù)測(cè)，兩種指標(biāo)均為具有高和 低疾病活性的患者之間及活性和安慰劑治療的患者組之間的靈敏鑒 別器。
FACIT-F(慢性疾病療法的功能評(píng)估-疲勞)為設(shè)計(jì)為確定患者的 疲勞-慢性疾病中的相關(guān)因素的評(píng)估的有效調(diào)查問(wèn)巻(參見(jiàn)Cella及 Webster (1997) (9wco/ogy 11:232及Lai等人(2003) gwa/丄z/e
to. 12(5):485)。
健康評(píng)估調(diào)查問(wèn)巻(HAQ)為設(shè)計(jì)用來(lái)評(píng)估患者進(jìn)行日?；顒?dòng)的能 力的有效調(diào)查問(wèn)巻，尤其在成人關(guān)節(jié)炎患者中。手段由HAQ障礙指標(biāo) (20項(xiàng))、疼痛等級(jí)(l項(xiàng))及測(cè)量障礙/身體機(jī)能及生活質(zhì)量的全身健康狀 況(l項(xiàng))組成(Fries等人(1982) J^/7ewmato/. 9(5):789)。
肺脹及脆弱關(guān)節(jié)(SJC及TJC)是RA的最具特征性的特征，疾病嚴(yán)重 性直接與腫脹及脆弱關(guān)節(jié)的數(shù)量相關(guān)。計(jì)數(shù)腫脹和脆弱關(guān)節(jié)是臨床評(píng) 估RA的關(guān)4建部分。
PsA及牛皮癬的改善也可使用PASI應(yīng)答、DLQI和BSA評(píng)分測(cè)定。 DLQI(皮膚病學(xué)生活質(zhì)量指數(shù))為廣泛用于包括PsA及牛皮癬的多種皮 膚疾病的與健康相關(guān)的生活質(zhì)量測(cè)量值。體表面積(BSA)評(píng)分提供基 于身高及體重并以n^表示的表面積測(cè)量值。PASI(牛皮癬面積及嚴(yán)重
度指數(shù))為對(duì)于特定患者而言紅斑、硬化、脫皮及受牛皮癬影響的體 表面積的復(fù)合測(cè)量值。針對(duì)頭、軀干、上肢及下肢侵犯評(píng)估患者。評(píng) 分范圍為O(無(wú)缺陷)至72(最嚴(yán)重)。
44治療中PsA的改善也可使用PsARC(牛皮癬性關(guān)節(jié)炎反應(yīng)標(biāo)準(zhǔn))測(cè) 量值，其提供脆弱及肺脹關(guān)節(jié)評(píng)分變化的臨床測(cè)量值以及疾病活性的 一系列全面評(píng)估。
AS的改善可通過(guò)使用任意數(shù)量的手段評(píng)估各種AS癥狀來(lái)測(cè)量。 一些常用等級(jí)包括強(qiáng)直性脊柱炎(ASAS)、 Bath強(qiáng)直性脊柱炎病情活動(dòng) 指標(biāo)(BASDAI)(Garrett等人(1994) J W/7ewmW0/ 21:2286)、 Bath強(qiáng)直性 脊柱炎度量指標(biāo)(BASMI)(Jenkinson等人(1994) J 7 /^wm"/o/ 21:1694) 及Bath強(qiáng)直性脊柱炎功能指標(biāo)(BASFI)(Calin等人(1994) / i^ewwato/ 21:2281)中的評(píng)估。這些指標(biāo)可用以隨時(shí)間監(jiān)測(cè)患者并測(cè)定改善。用 于評(píng)估AS的改善的其他描述測(cè)量描述于美國(guó)申請(qǐng)第l 0/622932號(hào)，虧1 入本文作為參考。
IV.藥物組合物及藥物給藥
A.組合物及給藥
用于本發(fā)明的方法中的抗體、抗體部分及其它TNFa抑制劑可引 入適于施用于患有腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的受試者的藥物組合物中。通常， 該藥物組合物包含本發(fā)明的抗體、抗體部分或其它TNFa抑制劑及藥 學(xué)上可接受的載體。本文使用的"藥學(xué)上可接受的載體"包括生理上相 容的任意及所有溶劑、分散介質(zhì)、包衣、抗細(xì)菌劑及抗真菌劑、等滲 劑及吸收延遲劑及其類(lèi)似物。藥學(xué)上可接受的載體的實(shí)例包括水、鹽 水、磷酸鹽緩沖液、右旋糖、甘油、乙醇等的一種或多種及其組合。 在許多情況中，優(yōu)選地組合物中包括等滲劑，例如糖、例如甘露醇、 山梨糖醇的多元醇或氯化鈉。藥學(xué)上可接受的載體可進(jìn)一步包括少量 輔助物質(zhì)，例如濕潤(rùn)劑或乳化劑、防腐劑或緩沖劑，其增加抗體、抗 體部分或其它TNFoc抑制劑的保存期或有效性。
用于本發(fā)明的方法中的組合物可以以多種形式存在。這些形式包 括(例如)液體、半固體及固體藥劑形式，例如液體溶液(例如可注射及 可輸注溶液)、分散液或懸浮液、錠劑、丸劑、粉劑、脂質(zhì)體和栓劑。 優(yōu)選的形式取決于預(yù)期的給藥方式及治療應(yīng)用。通常，優(yōu)選的組合物 為可注射或可輸注溶液形式，例如類(lèi)似于以其它抗體或其它TNF a抑制劑用于人類(lèi)的被動(dòng)免疫的那些組合物的組合物。優(yōu)選的給藥方式為 非腸胃(例如靜脈內(nèi)、皮下、腹膜內(nèi)、肌肉內(nèi))方式。在一個(gè)實(shí)施方案
中，抗體或其它TNFa抑制劑由靜脈內(nèi)輸注或注射施用。在另一實(shí)施 方案中，抗體或其它TNFa抑制劑由肌肉內(nèi)或皮下注射施用。
該組合物配制為溶液、微乳液、分散液、脂質(zhì)體或適于高藥物濃度的 其它有序結(jié)構(gòu)。無(wú)菌可注射溶液可通過(guò)采用以上列舉的成份的一種或 組合將活性化合物(即抗體、抗體部分或其它TNFa抑制劑)以所需要的 量引入適當(dāng)溶劑中并根據(jù)需要隨后過(guò)濾滅菌而制備。 一般而言，分散 液通過(guò)將活性化合物引入含有堿性分散介質(zhì)及來(lái)自以上列舉的那些 成份的所需其它成份的無(wú)菌載體中而制備。在用于制備無(wú)菌可注射溶 液的無(wú)菌粉劑的情況中，優(yōu)選的制備方法為真空干燥及冷凍千燥，其 產(chǎn)生活性成份加上來(lái)自其預(yù)先無(wú)菌過(guò)濾的溶液的任意其他所需成份 的粉劑。溶液的適當(dāng)流動(dòng)性可(例如)通過(guò)使用例如卵磷脂的包衣，由 在分散液情況中保持所需粒徑及由使用界面活性劑而得以保持。可注 射組合物的延遲吸收可通過(guò)將例如硬脂酸鹽及明膠的延遲吸收劑包 含于組合物中而獲得。
于本發(fā)明的方法中的抗體或抗體部分與 一種或多種包括腐蝕性多關(guān) 節(jié)炎抑制劑或拮抗劑的其他治療劑共配制和/或共施用。例如，本發(fā)明 的抗hTNFa抗體或抗體部分可與 一種或多種結(jié)合與腐蝕性多關(guān)節(jié)炎 相關(guān)的其它靶標(biāo)的其他抗體(例如結(jié)合其它細(xì)胞因子或結(jié)合細(xì)胞表面 分子的抗體)、 一種或多種細(xì)胞因子、可溶性TNFa受體(參見(jiàn)例如PCT 公開(kāi)第WO 94/06476號(hào))和/或一種或多種抑制hTNFa產(chǎn)生或活性的化 學(xué)藥劑(例如如PCT公開(kāi)第WO 93/19751號(hào)中所述的環(huán)己烷-亞基衍生 物)或其任意組合共配制和/或共施用。此外，本發(fā)明的一種或多種抗 體可與兩種或兩種以上上述治療劑組合4吏用。這些組合療法可有利地 利用以更低劑量施用的治療劑，因此避免由于與各種單一療法相關(guān)的 患者可能出現(xiàn)的副作用、并發(fā)癥或低水平應(yīng)答。
46在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明包括包含有效量的TNFoc抑制劑及藥 學(xué)上可接受的載體的藥物組合物，其中該有效量的TNF oc抑制劑可有 效地治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎。在一個(gè)實(shí)施方案中，將用于本發(fā)明的方法 中的抗體或抗體部分摻入藥物制劑中，如PCT/IB03/04502及美國(guó)申請(qǐng) 第10/222140號(hào)中所述，引入本文作為參考。該制劑包括濃度為50 mg/ml的抗體D2E7，其中 一個(gè)預(yù)先填充的注射器含有40 mg的抗體用 于皮下注射。在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明的制劑包括D2E7。
盡管對(duì)于許多治療應(yīng)用而言?xún)?yōu)選的給藥途徑/方式為皮下注射，但 是本發(fā)明的抗體、抗體部分及其它TNFoc抑制劑可通過(guò)本領(lǐng)域中已知 的多種方法施用。在另一實(shí)施方案中，給藥通過(guò)靜脈內(nèi)注射或輸注進(jìn) 行。如熟練技術(shù)人員所了解的，給藥途徑和/或方式可根據(jù)所需結(jié)果而 改變。在某些實(shí)施方案中，活性化合物可用保護(hù)化合物不會(huì)快速釋放 的載體制備，例如控釋制劑，包括植入物、透皮貼劑和微膠嚢遞送系 統(tǒng)?？墒褂蒙锟山到狻⑸锵嗳莸木酆衔?，例如乙烯醋酸乙烯酯、 聚酸酐、聚乙醇酸、膠原蛋白、聚原酸酯及聚乳酸。制備這些制劑的 許多方法已申請(qǐng)專(zhuān)利或通常為熟練技術(shù)人員所知。參見(jiàn)例如SwWa/wW 朋J CoWra〃ed We/ea" Z)e//ver_y 5ywe膽，Robinson編,Dekker，
Inc., New York, 1978。
TNFot抗體也可以蛋白質(zhì)晶體制劑形式施用，包括包裹于聚合載 體內(nèi)以形成包衣顆粒的蛋白質(zhì)晶體的組合。蛋白質(zhì)晶體制劑的包衣顆 ?？蔀榍蛐?，且為直徑高達(dá)500微米的微球體或其可具有一些其它形 態(tài)且為微粒。蛋白質(zhì)晶體的增加的濃度使得本發(fā)明的抗體可以皮下方 式遞送。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的TNFoc抗體通過(guò)蛋白質(zhì)遞送系 統(tǒng)遞送，其中將一種或多種蛋白質(zhì)晶體制劑或組合物施用于患有與 TNFot相關(guān)的病癥的受試者。組合物及制備全部抗體晶體或抗體片段 晶體的穩(wěn)定制劑的方法也描述于WO 02/072636中，引入本文作為參 考。在一個(gè)實(shí)施方案中，描述于PCT/IB03/04502及美國(guó)申請(qǐng)第 10/222140號(hào)中的包含晶體化抗體片段的制劑用來(lái)使用本發(fā)明的治療 方法治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎。
47在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體、抗體部分或其它TNFa抑制劑 可口服給藥，例如與惰性稀釋劑或可吸收可食用的載體一起給藥。該 化合物(和，如果需要，其它成份)也可裝入硬殼或軟殼明膠膠嚢中壓 縮成片劑，或直接摻入患者的飲食中。對(duì)于口服治療給藥而言，可將 化合物與賦形劑一起摻入且可以可攝取片劑、口腔片劑、錠劑、膠嚢、 酏劑、懸浮液、糖漿、糯米紙嚢劑等形式使用。為通過(guò)除非腸胃給藥 之外的形式施用本發(fā)明的化合物，必需以防止其失活的物質(zhì)涂覆化合 物或與化合物共施用。
本發(fā)明的藥物組合物可包括"治療有效量"或"預(yù)防有效量"的本發(fā) 明的抗體或抗體部分。"治療有效量"是指在劑量上及對(duì)于所需要的時(shí) 間而言對(duì)獲得所需治療結(jié)果有效的量?？贵w、抗體部分或其它TNFa 抑制劑的治療有效量可根據(jù)例如個(gè)體的疾病狀態(tài)、年齡、性別及體重 及抗體、抗體部分、其它TNFa抑制劑在個(gè)體內(nèi)引起所需應(yīng)答的能力 等因素而變化。治療有效量也為其中治療有益效果超過(guò)抗體、抗體部 分或其它TNFa抑制劑的任意有毒或有害效果的量。"預(yù)防有效量"是 指在劑量上及對(duì)于所需要的時(shí)間而言對(duì)獲得所需預(yù)防結(jié)果有效的量。 通常，由于預(yù)防劑量在疾病的較早期階段之前或在疾病的較早期階段 時(shí)用于受試者，因此預(yù)防有效量比治療有效量要小。
可調(diào)節(jié)給藥方案以提供最適宜的所需應(yīng)答(例如治療或預(yù)防應(yīng) 答)。例如，可施用單個(gè)大丸劑，可隨時(shí)間以幾個(gè)分開(kāi)的劑量施用或 在顯示緊急治療狀況時(shí)可成比例地減少或增加劑量。尤其有利的是配 制易于施用且劑量均 一的劑量單位形式的非腸胃組合物。本文使用的 劑量單位形式是指適用于待治療的哺乳動(dòng)物受試者的單位劑量的實(shí)
體離散單位；各單位含有計(jì)算為與所需藥物載體產(chǎn)生所需治療效果的 預(yù)定量的活性化合物。本發(fā)明的劑量單位形式的規(guī)格由以下規(guī)定并且 直接取決于(a)活性化合物的獨(dú)特特征及待獲得的特定治療或預(yù)防效 果，及(b)在配制該活性化合物用于治療個(gè)體的敏感性的技術(shù)中的固有限制。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的單劑量方法，其包括向需要治療的受試者施用單劑量的例如人類(lèi)抗體的
TNFa抑制劑。在 一 個(gè)實(shí)施方案中，該TNFa抑制劑為抗TNFa抗體阿 達(dá)木單抗。該TNFa抑制劑的單劑量可為任意治療或預(yù)防有效量。在 一個(gè)實(shí)施方案中，將20mg、 40mg或80mg單劑量的阿達(dá)木單抗(也稱(chēng) 作D2E7)施用于受試者。單劑量可通過(guò)包括(例如)皮下給藥的任意途 徑施用。兩周一次給藥方案可用于治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎，進(jìn)一步描述 于美國(guó)申請(qǐng)第10/163657號(hào)中。治療或預(yù)防的多可變劑量方法也可用于 治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎，進(jìn)一 步描述于PCT申請(qǐng)第PCT/US05/012007號(hào) 中。
應(yīng)當(dāng)注意，劑量值可隨待減輕的疾病類(lèi)型及嚴(yán)重性而變化。進(jìn)一 步應(yīng)當(dāng)理解，對(duì)于任意特定受試者而言，應(yīng)根據(jù)個(gè)體需要及施用或監(jiān) 督組合物施用者的專(zhuān)業(yè)判斷隨時(shí)間調(diào)整特定給藥方案，本文中所提出 的劑量范圍僅為示例性的，并不意在限制所要求保護(hù)的組合物的范圍 或?qū)嵤?。也?yīng)當(dāng)注意到，本發(fā)明關(guān)于治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的方法，包 括疾病的急性處理及慢性處理。
炎的包裝的藥物組合物或試劑盒。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，該試 劑盒包含例如抗體的TNFa抑制劑、包含其他治療劑的第二藥物組合 物及用于給藥以治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的說(shuō)明。這些說(shuō)明可描述如何 (例如經(jīng)皮下)及何時(shí)(例如在第0周及第2周)將不同劑量的TNFot抑制 劑和/或其他治療劑施用于受試者進(jìn)行治療。
本發(fā)明的另 一方面涉及含有包含抗TNFa抗體及藥學(xué)上可接受的 載體的藥物組合物及各自包含適用于治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的藥物及 藥學(xué)上可接受的載體的一種或多種藥物組合物的試劑盒?；蛘?，該試 劑盒包含含有抗TNFa抗體、 一種或多種適用于治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎 的藥物及藥學(xué)上可接受的載體的單一藥物組合物。該試劑盒含有用于 藥物組合物給藥以治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的說(shuō)明。
該包裝或試劑盒可含有TNFa抑制劑，并且可將其促進(jìn)以(在包裝 內(nèi)或通過(guò)所附說(shuō)明)使用或治療本文中所述的病癥。包裝藥物或試劑
49盒另外可包括與使用第二藥劑(如本文中所述)以及第一藥劑(如本文 中所述)的說(shuō)明 一 同包裝或共促進(jìn)的第二藥劑。 B.其他治療劑
本發(fā)明也描述治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的方法，包括將TNFot抑制劑 與其他治療劑聯(lián)合施用。本發(fā)明也涉及藥物組合物及使用它與其他治 療劑聯(lián)合治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的方法。該藥物組合物包含治療腐蝕性 多關(guān)節(jié)炎的第一藥劑。該藥物組合物也可包含為活性醫(yī)藥成份的第二 藥劑；換言之，該第二藥劑為治療性的且其功能為非惰性成份，所述 惰性成分例如為藥物載體、防腐劑、稀釋劑或緩沖劑。在一個(gè)實(shí)施方 案中，該第二藥劑可適用于治療或預(yù)防腐蝕性多關(guān)節(jié)炎。在另一實(shí)施 方案中，該第二藥劑可減少或治療至少一種與例如牛皮癬性關(guān)節(jié)炎的 與腐蝕性多關(guān)節(jié)炎相關(guān)的病癥相關(guān)的癥狀。在另一實(shí)施方案中，該其 他藥劑適用于治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎和其他病癥。第一及第二藥劑可由 類(lèi)似或無(wú)關(guān)的作用機(jī)制發(fā)揮其生物效應(yīng)；或第一與第二藥劑的任一或 兩者可由多重作用機(jī)制發(fā)揮其生物效應(yīng)。藥物組合物也可包含第三化 合物或甚至更多化合物，其中該第三(及第四，等)化合物具有與第二 藥劑相同的特征。
應(yīng)當(dāng)了解，對(duì)于各個(gè)所述實(shí)施方案而言，本文中所述的藥物組合 物含有在相同藥學(xué)上可接受的載體中或不同藥學(xué)上可接受的載體中 的第一及第二藥劑、第三或其他藥劑。進(jìn)一步應(yīng)當(dāng)了解，在所述實(shí)施 方案中，第一藥劑、第二藥劑、第三藥劑及其他藥劑可同時(shí)或相繼施 用。或者，第一及第二藥劑可同時(shí)施用，且第三或其他藥劑可在前面 兩種藥劑之前或之后施用。
本文中所述的方法及藥物組合物中所使用的藥劑的聯(lián)合可對(duì)所 治療的病癥或疾病具有其他或協(xié)同治療效果。本文中所述的方法或藥 物組合物中所使用的藥劑的聯(lián)合也可減少當(dāng)單獨(dú)施用或無(wú)特定藥物 組合物的其它藥劑時(shí)與至少一種藥劑相關(guān)的有害作用。例如， 一種藥 劑的毒性副作用可被組合物的另一藥劑削弱，因此允許更高劑量、改 善患者順應(yīng)性及改善治療結(jié)果。組合物的附加或協(xié)同效應(yīng)、益處及優(yōu)
50點(diǎn)應(yīng)用于治療劑的種類(lèi)(結(jié)構(gòu)或功能類(lèi)別)或個(gè)別化合物本身。
補(bǔ)充的活性化合物也可摻入組合物中。在某些實(shí)施方案中，本發(fā) 明的抗體或抗體部分與一種或多種適用于治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的其
他治療劑共配制和/或共施用。例如，本發(fā)明的抗hTNFa抗體、抗體部 分或其它TNFa抑制劑可與 一種或多種結(jié)合其它靶標(biāo)的其他抗體(例 如結(jié)合其它細(xì)胞因子或結(jié)合細(xì)胞表面分子的抗體)、 一種或多種細(xì)胞 因子、可溶性TNFa受體(參見(jiàn)例如PCT公開(kāi)第WO 94/06476號(hào))和/或一 種或多種抑制hTNFa產(chǎn)生或活性的化學(xué)藥劑(例如如PCT公開(kāi)第WO 93/19751號(hào)中所述的環(huán)己烷-亞基衍生物)共配制和/或共施用。此外， 一種或多種本發(fā)明的抗體或其它TNF a抑制劑可與兩種或兩種以上的 上述治療劑組合使用。這些組合療法有利地可利用更低劑量的施用的 治療劑，從而避免與各種單一療法相關(guān)的可能的毒性或并發(fā)癥。
本文中所述的TNFa抑制劑例如TNFa抗體或其抗原結(jié)合部分可 與其他治療劑聯(lián)合使用，用于治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎。優(yōu)選地，其它藥 物為緩解疾病的的抗類(lèi)風(fēng)濕藥物(DMARD)或非甾體抗炎藥(NSAID) 或類(lèi)固醇或其任意聯(lián)合。DMARD的優(yōu)選實(shí)例為羥氯喹、來(lái)氟米特、 氨曱喋呤、非腸胃金、口服金和柳氮磺吡啶。
也可與TNFa抑制劑例如TNFa抗體或其抗原結(jié)合部分聯(lián)合使用治 療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的非限制性的其他藥劑包括但不限于以下藥劑非 甾體抗炎藥(NSAID);細(xì)胞因子抑制抗炎癥藥物(CSAID); CDP-571/BAY-10-3356(人源化抗TNFa抗體；Celltech/Bayer); cA2/ 英利昔單抗(嵌合抗TNFa抗體；Centocor); 75 kdTNFR-IgG/依那西普 (75 kD TNF受體-IgG融合蛋白；Immunex; 參見(jiàn)例如Jr/An'to & 臉謂油雄(1994) Vol. 37， S295; J. (1996) Vol. 44，
23 5A) ; 55 kdTNF-IgG (55 kD TNF受體-IgG融合蛋白； Hoffmann-LaRoche); IDEC-CE9.1/SB 210396(非消耗的靈長(zhǎng)動(dòng)物化抗 CD4抗體；IDEC/SmithKline;參見(jiàn)例如爿"/znto & W/zewma^m (1995) Vol. 38, S185); DAB 486-IL-2和/或DAB 389-IL-2(IL-2融合蛋白； Seragen;參見(jiàn)例如^油他cS:跑畫(huà)a"， (1993) Vol. 36， 1223);抗Tac(人源化抗IL-2Ra; Protein Design Labs/Roche); IL-4(抗炎性細(xì)胞 因子；DNAX/Schering); IL-10(SCH 52000;重組IL-IO，抗炎性細(xì)胞 因子；DNAX/Schering); IL-4、 IL-10和/或IL-4激動(dòng)劑(例如激動(dòng)劑抗 體)；IL-1RA(IL-1受體拮抗劑；Synergen/Amgen); 阿那白滯素 (Kineret /Amgen); TNF-bp/s-TNF(可溶性TNF結(jié)合蛋白；參見(jiàn)例如 B/7" "跑w腸"纖(1996) Vol. 39， No. 9(增刊)，S284;力膨r 尸/z戶'o/, - //ear/ am/ C/rcw/a組少P/z戶.o/ogy (1995) 第268巻,第37-42 頁(yè))；R973401 (IV型磷酸二酯酶抑制劑；參見(jiàn)例如jw/zn'& & W/7ewwa/,:，(1996)Vo1.39， No.9(增刊)，S282); MK-966(COX-2抑制 劑；參見(jiàn)例如v4w/7n'^ &跑w顧"纖(1996) Vol. 39， No. 9(增刊)，S81); 伊洛前列素(參見(jiàn)例如^W/zWto &跑畫(huà)油'扁(1996) Vol. 39, No. 9(增 刊)，S82);氨甲喋呤；沙立度胺(thalidomide)(參見(jiàn)例如y^ /zn'^ cfe W/zewwa/,'5m (1996) Vol. 39， No. 9(增刊)，S282)及與沙立度胺相關(guān)的 藥物(例如Celgen);來(lái)氟米特(抗炎癥及細(xì)胞因子抑制劑；參見(jiàn)例如 j〃/zn' "， A/zewwa,"、w (1996) Vol. 39, No. 9(增刊)，S131; /"/7"mw"f/o" / e"arc/z (1996) Vol. 45, pp. 103-107); 抗凝血酸(tranexamic acid)(血 漿素原活化的抑制劑；參見(jiàn)例如^"/zn'to在尺/K wwatow (1996) Vol. 39, No. 9(增刊)，S284); T-614(細(xì)胞因子抑制劑；參見(jiàn)例如^W/2Wto & W/zwm"^w(1996) Vol. 39， No. 9(增刊),S282);前列腺素E1(參見(jiàn)例 如爿W/zn'to c& W/zewwa^w (1996) Vol. 39, No. 9 (增子'J)， S282);替尼 達(dá)普(Tenidap)(非甾體抗炎藥；參見(jiàn)例如JW/zn'似cS: 7 /2eww"^yw (1996) Vol. 39， No. 9(增刊)，S280);萘普生(Naproxen)(非甾體抗炎藥；參 見(jiàn)例如7Vewra7^; oW(1996) Vol. 7, pp. 1209-1213);美洛昔康(非甾體 抗炎藥)；布洛芬(非甾體抗炎藥)；吡羅昔康(非甾體抗炎藥)；雙氯芬 酸(非甾體抗炎藥)；吲哚美辛(非甾體抗炎藥)；柳氮磺吡啶(參見(jiàn)例如 爿w/in.fe c&尺/zwwa /^ (1996) Vol. 39， No. 9 (增刊)，S281);碌J坐噪 呤(參見(jiàn)例如」W/^/to在跑w脂〃扁(1996) Vol. 39， No. 9 (增刊)， S281); ICE抑制劑(酶白介素-1(3轉(zhuǎn)化酶的抑制劑)；zap-70和/或lck抑 制劑(酪氨酸激酶zap-70或lck的抑制劑)；VEGF抑制劑和/或VEGF-R抑劑；血管生成的抑制劑)；皮質(zhì)類(lèi)固醇抗炎癥藥物(例如SB203580);TNF-轉(zhuǎn)化酶抑制劑；抗IL-12抗體；抗IL-18抗體；白介素-ll(參見(jiàn)例如Jr/Z7〃'to & A/zewwatow (1996) Vol. 39, No, 9 (增刊)，S296);白介素-13(參見(jiàn)例如^W/zr"^ cS: A/zewmatom (1996) Vol. 39, No. 9 (增刊)，S308);白介素-17抑制劑(參見(jiàn)例如爿"/z"'to & 7 /2eww"tow (1996) Vol.39, No.9(增刊)，S120);金；青霉胺；氯喹；苯丁酸氮芥；羥氯喹；環(huán)孢菌素；環(huán)磷酰胺；全淋巴照射；抗胸腺細(xì)胞球蛋白；抗CD4抗體；CD5-毒素；口服施用的肽及膠原蛋白；氯苯扎利二鈉；細(xì)胞因子調(diào)節(jié)劑(CRA)HP228及HP466(Houghten Pharmaceuticals, Inc.); ICAM畫(huà)1反義硫代磷酸酯寡脫氧核苷酸(ISIS 2302; Isis Pharmaceuticals, Inc.);可溶性補(bǔ)體受體1(TP10; T Cell Sciences, Inc.);潑尼松；奧古蛋白；聚硫酸葡萄糖胺聚糖；米諾環(huán)素；抗IL2R抗體；海洋及植物脂質(zhì)(魚(yú)及植物種子脂肪酸；參見(jiàn)例如DeLuca等人(1995) W/zeMw. A^W/zj肌21:759-777);金諾芬；苯基丁氮酮；甲氯芬那酸；氟芬那酸；靜脈內(nèi)免疫球蛋白；齊留通；阿扎立平；霉酚酸(RS-61443);他克莫司(FK-506);西羅莫司(雷帕霉素)；氨普立糖(themfectin);克拉屈濱O氯脫氧腺苷)；氨曱喋呤；抗病毒藥；免疫調(diào)節(jié)劑。任意以上提及的藥劑均可與TNFa抑制劑包括TNFot抗體聯(lián)合施用以治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎或抑制關(guān)節(jié)疾病的放射照相進(jìn)展。
在一個(gè)實(shí)施方案中，將TNFoc抑制劑例如TNFoc抗體或其抗原結(jié)合部分與以下的藥劑之一聯(lián)合施用以治療類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎KDR的d、分子抑制劑(ABT-123)、 Tie-2的小分子抑制劑；氨甲喋呤；潑尼松；賽來(lái)昔布；葉酸；硫酸鞋化氯喹；羅非昔布；依那西普；英利昔單抗；來(lái)氟米特；萘普生；伐地考昔；柳氮磺吡啶；甲潑尼龍；布洛芬；美羅昔康；醋酸甲潑尼龍；硫代蘋(píng)果酸金鈉；阿司匹林；硫唑噪呤；曲安奈德；萘石黃酸右丙氧芬(propxyphene napsylate)/apap;葉酸鹽(或酯)；萘丁美酮；雙氯芬酸；吡羅昔康；依托度酸；雙氯芬酸鈉；奧沙普秦；鹽酸羥考酮；二酒石酸氫可酮/apap;雙氯芬酸鈉/米索前列醇；芬太
53尼；阿那白滯素，人類(lèi)重組；鹽酸曲馬多；雙水楊酸酯；舒林酸；氰基鈷胺素/fa/吡哆醇；乙酰胺苯酚；阿侖膦酸鈉；潑尼龍；^克酸嗎啡堿；鹽酸利多卡因；吲哚美辛；硫酸葡糖胺/軟骨素；環(huán)孢菌素；鹽酸阿密曲替林；磺胺嘧啶；鹽酸羥考酮/乙酰胺苯酚；鹽酸奧洛他定；米索前列醇；萘普生鈉；奧美拉唑；霉酚酸酯；環(huán)磷酰胺；利妥昔單抗；IL-l TRAP; MRA; CTLA4-IG; IL-18BP; ABT-874; ABT畫(huà)325(抗IL18);抗IL 15; BIRB-796; SCIO-469; VX畫(huà)702; AMG-548; VX畫(huà)740;羅氟司特；IC-485; CDC-801;及mesopram。在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明的TNFoc抗體與以上提到的用于治療類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥劑之一耳關(guān)合施用，治療與TNFa相關(guān)的病癥。
在一個(gè)實(shí)施方案中，TNFa抑制劑例如TNFa抗體或其抗原結(jié)合部分與用于治療克羅恩病或與克羅恩病相關(guān)的病癥的藥物聯(lián)合使用?？捎糜谥委熆肆_恩病的治療劑的實(shí)例包括美沙拉秦、潑尼松、硫唑噤呤、巰噪呤、英利昔單抗、布地奈德、柳氮磺吡啶、曱潑尼龍丁二酸鈉、地芬諾酯/硫酸阿托品、鹽酸咯哌丁胺、氨甲喋呤、奧美拉唑、葉酸鹽(或酯)、環(huán)丙沙星/右旋糖-水、二酒石酸氫可酮/apap、鹽酸四環(huán)素、氟輕松、曱硝唑、硫柳汞/硼酸、考來(lái)烯胺/蔗糖、鹽酸環(huán)丙沙星、硫酸荒菪^5咸、鹽酸哌替啶、鹽酸咪達(dá)唑、鹽酸羥考酮/乙酰胺苯酚、鹽酸異丙。秦、磷酸鈉、磺胺甲噁唑/曱氧千啶、賽來(lái)昔布、聚卡波非、萘磺
酸丙氧芬、氫化可的松、多種維生素劑、巴柳氮二鈉、磷酸可待因/apap、鹽酸考來(lái)維侖、氰基鈷胺素、葉酸、左氧氟沙星、甲潑尼龍、那他珠單抗和干擾素，。
在一個(gè)實(shí)施方案中，TNFa抑制劑例如TNFoc抗體或其抗原結(jié)合部分與通常用于治療脊推關(guān)節(jié)病的藥劑例如AS聯(lián)合施用。這些藥劑的實(shí)例包括非甾體抗炎藥(NSAID)、包括Celebrex⑧、￥1(^乂@及86乂化&@的COX2抑制劑和埃托考昔。物理療法也常用于治療脊推關(guān)節(jié)病，通常與非甾體抗炎藥聯(lián)合進(jìn)行治療。
在一個(gè)實(shí)施方案中，TNFoc抑制劑例如TNFa抗體或其抗原結(jié)合部分與其他治療劑聯(lián)合施用以治療強(qiáng)直性脊柱炎?？捎糜跍p輕或抑制強(qiáng)
54直性脊柱炎的癥狀的藥劑的實(shí)例包括布洛芬、雙氯芬酸及米索前列醇、萘普生、美羅昔康、吲哚美辛、雙氯芬酸、賽來(lái)昔布、羅非昔布、柳氮磺吡啶、潑尼松、氨甲喋呤、硫唑嘌呤、米諾環(huán)素、潑尼松、依那西普及英利昔單抗。
在一個(gè)實(shí)施方案中，TNFot抑制劑例如TNFoc抗體或其抗原結(jié)合部分與其他治療劑聯(lián)合施用以治療牛皮癬性關(guān)節(jié)炎。可用于減輕或抑制牛皮癬性關(guān)節(jié)炎的癥狀的藥劑的實(shí)例包括氨甲喋呤；依那西普；羅非昔布；賽來(lái)昔布；葉酸；柳氮磺吡啶；萘普生；來(lái)氟米特；醋酸甲潑尼龍；吲哚美辛；硫酸羥化氯喹；舒林酸；潑尼松；強(qiáng)化倍他米松二丙酸酯；英利昔單抗；氨曱喋呤；葉酸鹽；曲安奈德；雙氯芬酸；二甲亞砜；吡羅昔康；雙氯芬酸鈉；酮洛芬；美洛昔康；潑尼松；曱潑尼龍；萘丁美酮；托美丁鈉；卡泊三烯；環(huán)孢菌素；雙氯芬酸；鈉/米索前列醇；氟輕松；硫酸葡糖胺；硫代蘋(píng)果酸金鈉；氫可酮；酒石酸氫鹽/apap;布洛芬；利塞膦酸鈉；磺胺嘧啶；硫鳥(niǎo)嘌呤；伐地考昔；阿來(lái)法塞及依法珠單抗(efal izumab)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，TNFa抑制劑例如TNFa抗體或其抗原結(jié)合部分與局部皮質(zhì)類(lèi)固醇、維生素D類(lèi)似物及局部或口服類(lèi)視色素或其組合聯(lián)合施用以治療牛皮癬。此外，本發(fā)明的TNFa抗體與以下藥劑之一聯(lián)合施用以治療牛皮癬KDR的小分子抑制劑(ABT-123)、 Tie-2的小分子抑制劑、卡泊三烯、氯倍他索丙酸酯、曲安奈德、鹵倍他索丙酸酯、他扎羅汀、氨甲喋呤、氟輕松、強(qiáng)化倍他米松二丙酸酯、氟輕木》、丙酮4匕物、阿曲汀(acitretin)、焦油香波(tar shampoo)、戊酸4咅4也米松、莫米松糠酸酯、酮康唑、普莫卡因/氟輕松、戊酸氫化可的松、丙酮縮氟氫羥龍、尿素、倍他米松、氯倍他索丙酸酯/emoll、氟替卡松丙酸酯、阿奇霉素、氬化可的松、增濕分子、葉酸、地奈德、煤焦油、雙醋二氟拉松、依那西普、葉酸鹽、乳酸、曱氧沙林、hc/bismuthsubgal/znox/resor、醋酸曱潑尼龍、潑尼松、防曬劑、水楊酸、氯氟舒枉\地蒽酚、新戊酸氯可托龍、煤^是取物、煤焦油/水楊酸、煤焦油/水楊酸/硫、去輕米+》、地西泮、潤(rùn)膚劑、吡美莫司潤(rùn)膚劑、氟輕松/潤(rùn)膚劑、礦物油/蓖麻油/乳酸鈉、礦物油/花生油、石油/十四烷酸異丙酯、補(bǔ)骨脂素、水楊酸、脂肪酸鹽/三溴沙侖、硫柳汞/硼酸、賽來(lái)昔布、英利昔單抗、阿來(lái)法塞、依法珠單抗、他克莫司、吡美莫司、PUVA、
UVB和柳氮磺吡啶。
抗體、抗體部分或其它TNFot抑制劑，例如TNFa抗體或其抗原結(jié)合部分，可與其它藥劑聯(lián)合使用以治療皮膚病癥。例如，本發(fā)明的抗體、抗體部分或其它TNFa抑制劑與PUVA療法組合。PUVA是補(bǔ)骨脂素(P)與用于治療許多不同皮膚病癥的長(zhǎng)波紫外輻射(UVA)的組合。本發(fā)明的抗體、抗體部分或其它TNFa抑制劑也可與吡美莫司組合。在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體用于治療牛皮癬，其中這些抗體與他克莫司組合施用。在另一實(shí)施方案中，他克莫司及TNFa抑制劑與氨曱喋呤和/或環(huán)孢菌素組合施用。在另一實(shí)施方案中，本發(fā)明的TNFa抑制劑以準(zhǔn)分子激光療法施用于治療牛皮癬。
可與TNFa抑制劑例如TNFa抗體或其抗原結(jié)合部分組合治療皮
可與TNFa抑制劑組合使用的其它非限制性實(shí)例包括抗IL-12和抗IL-18治療劑，包4舌抗體。
可將任一 以上提到的治療劑(單獨(dú)或與其組合)與包括TNFa抗體或其抗原結(jié)合部分的TNFa抑制劑組合施用于患有腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的受試者。TNFa抗體或其抗原結(jié)合部分可與已知對(duì)患有腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的受試者的急性治療有效的其他治療劑組合使用。TNFa抗體或其抗原結(jié)合部分也可與已知對(duì)患有腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的受試者的治療有效的其他治療劑組合使用。
本發(fā)明由以下實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明，這些實(shí)施例不應(yīng)—見(jiàn)為限制性
的。貫穿本申請(qǐng)中所引用的所有參考文獻(xiàn)、專(zhuān)利和公開(kāi)的專(zhuān)利申請(qǐng)的內(nèi)容均引入本文作為參考。
實(shí)施例
使用TNF抑制劑治療牛皮癬性關(guān)節(jié)炎患者中的腐蝕性多關(guān)節(jié)炎
56相當(dāng)大比例的牛皮癬性關(guān)節(jié)炎(PS A)患者中發(fā)生腐蝕性多關(guān)節(jié)炎。
通常，非生物DMARD并未顯示對(duì)該疾病中關(guān)節(jié)損傷的放射照相進(jìn)展
具有有效抑制作用。
進(jìn)行以下研究來(lái)評(píng)估TNF抑制劑，更具體而言，抗TNF抗體阿達(dá)木單抗治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的功效。進(jìn)行該研究來(lái)評(píng)估阿達(dá)木單抗在抑制中度至嚴(yán)重PsA患者中與腐蝕性多關(guān)節(jié)炎相關(guān)的關(guān)節(jié)疾病的放射線進(jìn)展方面是否有效。
對(duì)應(yīng)用NSAID療法失敗的中度至嚴(yán)重活性PsA(>3個(gè)胂脹關(guān)節(jié)及23個(gè)脆弱關(guān)節(jié))成年患者進(jìn)行24周雙盲隨機(jī)安慰劑控制試驗(yàn)。根據(jù)氨甲喋呤(MTX)使用(是/否)及牛皮癬程度(d。/?；騘3。/。體表面積[BSA])將患者分級(jí)。除具有》3個(gè)腫脹關(guān)節(jié)及》3個(gè)脆弱關(guān)節(jié)之外，納入標(biāo)準(zhǔn)包括對(duì)NSAID療法不充分應(yīng)答、牛皮癬病史及年齡218歲。排除標(biāo)準(zhǔn)包括以下標(biāo)準(zhǔn)預(yù)先抗TNF療法、研究開(kāi)始前12周內(nèi)以阿來(lái)法塞治療、研究開(kāi)始前6周內(nèi)以其它生物制劑治療、研究開(kāi)始前4周內(nèi)對(duì)牛皮癬進(jìn)行全身治療及研究開(kāi)始前2周內(nèi)進(jìn)行光療法及局部療法。
患者每隔 一周(eow)隨機(jī)皮下接受阿達(dá)木單抗40 mg或安慰劑共24周。完成24周試驗(yàn)的患者有資格參加標(biāo)簽公開(kāi)延長(zhǎng)(OLE)研究，其中所有患者均每隔 一周接受阿達(dá)木單抗。釆用標(biāo)簽公開(kāi)治療12周之后，未滿足預(yù)先規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)的患者每周接受4 0 m g 。
在盲試部分(第0及24周)和標(biāo)簽公開(kāi)部分(第48周)期間進(jìn)行放射照相評(píng)估。手和足的放射線照片利用改良總Sharp評(píng)分(mTSS)評(píng)估，其中加入PsA中通常所涉及的其他關(guān)節(jié)以更好地量化PsA中發(fā)生的顯著骨質(zhì)溶解，數(shù)值范圍得以擴(kuò)大。通過(guò)將關(guān)節(jié)間隙狹窄評(píng)分(0-192)和腐蝕評(píng)分(0-378)組合確定mTSS,如圖la所示。還評(píng)估與PsA相關(guān)的臨床結(jié)果例如鉛筆帽變化。用于該研究的mTSS圖以及與PsA相關(guān)的放射線照相結(jié)果分別顯示于圖la及l(fā)b中。
放射線照片讀取程序包括以下內(nèi)容。所有膠片均由不知道治療及膠片次序的兩位獨(dú)立讀取者讀取。讀取號(hào)1為基線及第2 4周膠片的評(píng)估。讀取號(hào)2為基線、第24周及第48周膠片的評(píng)估。利用幾個(gè)靈敏度分析來(lái)評(píng)估缺失放射線照片的影響(歸因于零改
變、最差級(jí)變化、基于具有類(lèi)似基線評(píng)分的患者的50/75百分?jǐn)?shù)變化以
及當(dāng)可得到多張放射線照片時(shí)的線性外推)。
第24周分析包括以下內(nèi)容第24周分析中包含所需要的基線與第24周膠片，其中可評(píng)估至少50%的關(guān)節(jié)。第48周分析包括以下內(nèi)容來(lái)自第24周分析的所有患者均進(jìn)行第48周分析。若不可獲得第48周膠片(或可評(píng)估小于50%的關(guān)節(jié))，則進(jìn)行以下原因分析若安慰劑初始隨機(jī)化則歸因于0改變；且若阿達(dá)木單抗初始隨機(jī)化則使用開(kāi)始兩張膠片進(jìn)行線性外推。
基線人口統(tǒng)計(jì)及疾病嚴(yán)重程度特征與中度至嚴(yán)重PsA—致，并且在治療組之間良好匹配(阿達(dá)木單抗N451，安慰劑N462;平均值±SD):年齡49.0士11.8歲;PsA持續(xù)時(shí)間9.5士8.5年;SJC (76) 14±12;TJC (78) 25±18; HAQ 1.0士0.6; mTSS 20.8士40.9; 51%同時(shí)服用氨曱喋呤?？傆?jì)，296名患者在基線及第24周照射X射線，265名患者也在第48周照射X射線。
如以前研究中所報(bào)道的，以阿達(dá)木單抗治療的患者在第24周的ACR20、 ACR50及ACR70應(yīng)答和PASI50、 PASI75及PASI90應(yīng)答顯著優(yōu)于安慰劑組。在第24周的ACR及PASI應(yīng)答顯示于以下表1及2中(所有結(jié)果均pSO.OOl,安慰劑對(duì)阿達(dá)木單抗)
表l: ACR反應(yīng)患者％
ACR20ACR50ACR70
安慰劑(N=162)1561
阿達(dá)木單抗(N—51)573923
表2: PASI反應(yīng)患者°/
PASI50PASI75PASI90
安慰劑(N^69)1210
阿達(dá)木單抗(N二69)755942
58在盲試研究階段(24周)，阿達(dá)木單抗治療的患者的mTSS進(jìn)展顯著 低于安慰劑處理患者的mTSS進(jìn)展(mTSS平均改變?yōu)?0.2對(duì)1.0 ， p<0.001,秩ANCOVA)。在所有靈敏度分析中均保持統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。 圖2顯示mTSS評(píng)分的分布，表明與安慰劑治療的患者相比，在24周治 療過(guò)程中更少的以阿達(dá)木單抗治療的患者結(jié)構(gòu)損傷增加。根據(jù)在第24 周所看到的平均評(píng)分及研究過(guò)程中Sharp評(píng)分增加的患者數(shù)量及百分 數(shù)觀察分布差異(參見(jiàn)表3)。在起初24周治療過(guò)程中，mTSS增力口(大于 0.5單位)的患者中安慰劑治療的患者為阿達(dá)木單抗治療的患者的大約 3倍。
表3:第24周時(shí)改良總Sharp評(píng)分的變化^
安慰劑 阿達(dá)木單抗 N=152 N=144
_H(5i)_n(%)
Sharp評(píng)分降低 8(5.3%) 27(18.8%)
Sharp評(píng)分不變 100(65.8%) 104(72.2%)
Sharp評(píng)分增力口 44(28.9%) 13(9.0%)
p^O.OOl,使用CMH檢驗(yàn)，安慰劑對(duì)阿達(dá)木單抗 *變化定義為mTSS評(píng)分大于0.5單位
在以阿達(dá)木單抗與安慰劑治療的受試者之間，腐蝕評(píng)分與關(guān)節(jié)狹 窄評(píng)分(p幼.OOl,使用秩ANACOVA)均觀察到統(tǒng)計(jì)顯著差異。在第24 周，腐蝕評(píng)分的變化(相對(duì)于基線變化)對(duì)于安慰劑患者而言為0.6,對(duì) 于阿達(dá)木單抗患者而言為0.0(p<0.001,秩ANCOVA),關(guān)節(jié)間隙狹窄評(píng) 分的變化(相對(duì)于基線變化)對(duì)于安慰劑患者而言為0.4，對(duì)于阿達(dá)木單 抗患者而言為-0.2(pO.001，秩ANCOVA)。
進(jìn)行說(shuō)明缺失的患者膠片的靈敏度分析，所有分析的結(jié)果均保持 統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。排除足和DIP的事后靈敏度分析如下排除足和DIP 進(jìn)行一種分析，并排除所有DIP關(guān)節(jié)進(jìn)行第二分析。在兩種分析中均 保持統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。
59在用阿達(dá)木單抗和安慰劑治療的受試者之間不論是否使用伴隨
的MTX均觀察到統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異。對(duì)于服用伴隨的MTX的患者而 言，平均差異略高。采用單一療法的患者顯示對(duì)于阿達(dá)木單抗(n二68) 相對(duì)于基線變化為-0.1 ，對(duì)于安慰劑0=74)相對(duì)于基線變化為 0.9(p《0.001，使用秩ANACOVA)。采用伴隨的MTX的患者顯示對(duì)于 阿達(dá)木單抗(n^76)相對(duì)于基線變化為-0.3，對(duì)于安慰劑(>=78)相對(duì)于基 線變化為1.2(p幼.001,使用秩ANACOVA)。圖3a及3b顯示采用及不采 用MTX的受試者的m T S S的累積分布函數(shù)圖。
48周放射線照片分析說(shuō)明在阿達(dá)木單抗患者中在第24周觀察到 的未進(jìn)展(mTSS不變)保持到第48周(參見(jiàn)圖4)。用安慰劑治療24周的 患者在標(biāo)簽公開(kāi)期間并未有疾病的放射線進(jìn)展。沒(méi)有治療組證明與 PsA相關(guān)的特征顯著進(jìn)展。與PsA相關(guān)的結(jié)果的分布情況顯示于表4 中。在基線處各組之間未發(fā)現(xiàn)顯著差異，在24周研究期間在任一組中 未發(fā)現(xiàn)顯著進(jìn)展。
表4:與PsA相關(guān)的結(jié)果的分布情況 _ 全部患者(N二313)n〖0/0)
關(guān)節(jié)間隙變寬 全部骨質(zhì)溶解
不全脫位 鉛筆帽
近關(guān)節(jié)骨膜炎
骨干骨膜炎
指骨叢再吸收
38(12.1%) 60(19.2%) 49(15.7%) 9(2.9%) 247(78.9%) 140(44.7%) 224(71.6%)
此外，如以前所才艮道的，阿達(dá)木單抗通常具有良好的耐受性。 在24周階段期間阿達(dá)木單抗抑制放射線疾病進(jìn)展比安慰劑更有 效。在服用伴隨的氨曱喋呤的患者中與服用阿達(dá)木單抗作為單一療法 的那些患者中，阿達(dá)木單抗顯示出相對(duì)于安慰劑的差異。在用阿達(dá)木 單抗治療的患者中在24周所觀察到的結(jié)構(gòu)損傷進(jìn)展的抑制作用保持l
60年?？傊撗芯孔C明阿達(dá)木單抗在也患有中度至嚴(yán)重活性PsA的患
者中有效治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎及放射照片疾病進(jìn)展超過(guò)l年。 等同方案
熟練技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)認(rèn)識(shí)5 J或僅僅使用常規(guī)試驗(yàn)就能確定本文所 述的本發(fā)明的特定實(shí)施方案的許多等同方案。這些等同方案包括于以 下的權(quán)利要求書(shū)范圍中。貫穿本申請(qǐng)中所引用的所有參考文獻(xiàn)、專(zhuān)利 及公開(kāi)的專(zhuān)利申請(qǐng)的內(nèi)容均引入本文作為參考。
評(píng)分評(píng)分評(píng)分評(píng)分評(píng)分評(píng)分
權(quán)利要求
1. 一種治療患有腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的人類(lèi)受試者的方法，包括給該受試者施用TNFα抗體或其抗原結(jié)合部分，使腐蝕性多關(guān)節(jié)炎得到治療。
2. 如權(quán)利要求1的方法，其中所述TNFa抗體或其抗原結(jié)合部分是 選自人源化抗體、嵌合抗體和多價(jià)抗體的抗體。
3. 如權(quán)利要求1的方法，其中所述TNFa抗體或其抗原結(jié)合部分為 英利昔單抗或格里木單抗。
4. 如權(quán)利要求1的方法，其中所述TNFa抗體或其抗原結(jié)合部分為 人類(lèi)抗體。
5. 如權(quán)利要求4的方法，其中所述人類(lèi)抗體或其抗原結(jié)合部分以通 過(guò)表面等離振子共振測(cè)定的lx10—8 M或更低的Kd及l(fā)x10—3 s"或更低的 K。ff速率常數(shù)從人類(lèi)TNFa上解離，并且在標(biāo)準(zhǔn)體外L929分析中以 lxl(T7 M或更低的IC5o中和人類(lèi)TNFa細(xì)胞毒性。
6. 如權(quán)利要求4的方法，其中所述人類(lèi)抗體或其抗原結(jié)合部分具有 以下特征a) 以通過(guò)表面等離振子共振測(cè)定的1 x 10-3 s"或更低的K。ff速率常 數(shù)從人類(lèi)TNFa上解離；b) 具有一個(gè)輕鏈CDR3域，其包含SEQIDNO: 3的氨基酸序列，或 通過(guò)位置l、 4、 5、 7或8處的單一丙氨酸置換或通過(guò)位置1、 3、 4、 6、 7、 8和/或9處的l至5個(gè)保守氨基酸置換由SEQIDNO: 3修飾得到的氨 基酸序列；c) 具有一個(gè)重鏈CDR3域，其包含SEQIDNO: 4的氨基酸序列，或 通過(guò)位置2、 3、 4、 5、 6、 8、 9、 10或1 l處的單一丙氨酸置換或通過(guò) 位置2、 3、 4、 5、 6、 8、 9、 10、 1 l和/或12處的l至5個(gè)保守氨基酸置 換由SEQ ID NO: 4修飾得到的氨基酸序列。
7. 如權(quán)利要求4的方法，其中所述人類(lèi)抗體或其抗原結(jié)合部分包含一個(gè)具有CDR3域的輕鏈可變區(qū)(LCVR)，該CDR3域包含SEQ ID NO: 3 的氨基酸序列或通過(guò)位置l、 4、 5、 7或8處的單一丙氨酸置換由SEQ ID NO: 3修飾的氨基酸序列；以及包含一個(gè)具有CDR3域的重鏈可變區(qū) (HCVR)，該CDR3域包含SEQIDNO: 4的氨基酸序列或通過(guò)位置2、 3、 4、 5、 6、 8、 9、 10或11處的單一丙氨酸置換由SEQ ID NO: 4修飾的 氨基酸序列。
8. 如權(quán)利要求4的方法，其中所述人類(lèi)抗體或其抗原結(jié)合部分包含 一個(gè)輕鏈可變區(qū)(LCVR),該輕鏈可變區(qū)包含SEQ ID NO: l的氨基酸序 列；以及一個(gè)重鏈可變區(qū)(HCVR),該重鏈可變區(qū)包含SEQ ID NO: 2的氨基酸序列。
9. 如權(quán)利要求4的方法，其中所述人類(lèi)抗體或其抗原結(jié)合部分為阿 達(dá)木單抗。
10. 如權(quán)利要求1至9中任一項(xiàng)的方法，其中所述藥物以?xún)芍芤淮?的給藥方案施用。
11. 如權(quán)利要求1至9中任一項(xiàng)的方法，其中所述受試者患有其中 TNFa活性為有害的病癥。
12. 如權(quán)利要求ll的方法，其中所述TNFa活性為有害的病癥選 自牛皮癬性關(guān)節(jié)炎、強(qiáng)直性脊柱炎和幼年型類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。
13. 如^L利要求11的方法，其中所述TNFa活性為有害的病癥為 牛皮癬性關(guān)節(jié)炎。
14. 如權(quán)利要求1至9中任一項(xiàng)的方法，其進(jìn)一步包括施用其他治 療劑。
15. 如權(quán)利要求14的方法，其中所述其他治療劑為氨甲喋呤。
16. —種測(cè)試TNFa抗體或其抗原結(jié)合部分降低與腐蝕性多關(guān)節(jié) 炎相關(guān)的關(guān)節(jié)疾病的放射照相進(jìn)展的功效的方法，該方法包括利用患 有與腐蝕性多關(guān)節(jié)炎相關(guān)的關(guān)節(jié)疾病的患者群體的改良總Sharp評(píng)分 (mTSS)及施用該TNFot抗體或其抗原結(jié)合部分之后該患者群體的 mTSS來(lái)確定該TNFoc抗體或其抗原結(jié)合部分的功效，其中當(dāng)該mTSS 不變或降低時(shí)，顯示該TNFot抗體或其抗原結(jié)合部分對(duì)于降低與腐蝕性多關(guān)節(jié)炎相關(guān)的關(guān)節(jié)疾病的放射照相進(jìn)展是有效的。
17. 如權(quán)利要求16的方法，其中所述患者群體進(jìn)一步患有TNFoc 活性為有害的病癥。
18. 如^L利要求17的方法，其中所述TNFa活性為有害的病癥選 自牛皮癬性關(guān)節(jié)炎、強(qiáng)直性脊柱炎和幼年型類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。
19. 如權(quán)利要求16至18中任一項(xiàng)的方法，其中所述mTSS降低約-0.2。
20. 如權(quán)利要求16至18中任一項(xiàng)的方法，其中所述TNFa抗體或 其抗原結(jié)合部分是選自人源化抗體、嵌合抗體及多價(jià)抗體的抗體。
21. 如權(quán)利要求16至18中任一項(xiàng)的方法，其中所述TNFa抗體或 其抗原結(jié)合部分為英利昔單抗或格里木單抗。
22. 如權(quán)利要求16至18中任一項(xiàng)的方法，其中所述TNFa抗體或 其抗原結(jié)合部分為人類(lèi)抗體。
23. 如權(quán)利要求22的方法，其中所述人類(lèi)抗體或其抗原結(jié)合部分 以通過(guò)表面等離振子共振測(cè)定的lxl(T8 M或更低的Kd和lx10—3 s"或更 低的K。ffit率常數(shù)從人類(lèi)TNFa上解離；并且該人類(lèi)抗體或其抗原結(jié)合 部分在標(biāo)準(zhǔn)體外L929分析中以1 x 1 (T7 M或更低的IC5。中和人類(lèi)TNFa 細(xì)月包毒性。
24. 如權(quán)利要求22的方法，其中所述人類(lèi)抗體或其抗原結(jié)合部分 具有以下特征a) 以通過(guò)表面等離振子共振測(cè)定的lx10—3 s"或更低的K。ff速率常 數(shù)從人類(lèi)TNFa上解離；b) 具有一個(gè)輕鏈CDR3域，其包含SEQ ID NO: 3的氨基酸序列或通 過(guò)位置l、 4、 5、 7或8處的單一丙氨酸置換或通過(guò)位置1、 3、 4、 6、 7、 8和/或9處的l至5個(gè)保守氨基酸置換由SEQ ID NO: 3修飾得到的氨基 酸序列；c) 具有一個(gè)重鏈CDR3域，其包含SEQIDNO: 4的氨基酸序列或通 過(guò)位置2、 3、 4、 5、 6、 8、 9、 10或11處的單一 丙氨酸置換或通過(guò)位 置2、 3、 4、 5、 6、 8、 9、 10、 1 l和/或12處的l至5個(gè)保守氨基酸置換由SEQ ID NO: 4修飾得到的氨基酸序列。
25. 如權(quán)利要求22的方法，其中所述人類(lèi)抗體或其抗原結(jié)合部分 包含一個(gè)具有CDR3域的輕鏈可變區(qū)(LCVR)，該CDR3域包含SEQ ID NO: 3的氨基酸序列或通過(guò)位置1、 4、 5、 7或8處的單一丙氨酸置換由 SEQ ID NO: 3修飾得到的氨基酸序列；并且包含一個(gè)具有CDR3域的 重鏈可變區(qū)(HCVR),該CDR3域包含SEQ ID NO: 4的氨基酸序列或通 過(guò)位置2、 3、 4、 5、 6、 8、 9、 10或11處的單一丙氨酸置換由SEQ ID NO: 4修飾得到的氨基酸序列。
26. 如權(quán)利要求22的方法，其中所述人類(lèi)抗體或其抗原結(jié)合部分 包含一個(gè)輕鏈可變區(qū)(LCVR),該輕鏈可變區(qū)包含SEQ ID NO: l的氨基 酸序列；以及一個(gè)重鏈可變區(qū)(HCVR),該重鏈可變區(qū)包含SEQ ID NO: 2的氨基酸序列。
27. 如權(quán)利要求22的方法，其中所述人類(lèi)抗體或其抗原結(jié)合部分 為阿達(dá)木單抗。
28. 如權(quán)利要求16至18中任一項(xiàng)的方法，其中所述TNFot抗體或 其抗原結(jié)合部分以?xún)芍芤淮蔚慕o藥方案施用于受試者。
29. 如權(quán)利要求16至18中任一項(xiàng)的方法，其中所述抗體或其抗原 結(jié)合部分與其他治療劑結(jié)合施用。
30. 如權(quán)利要求29的方法，其中所述其他治療劑為氨曱喋呤。
31. —種監(jiān)測(cè)TNFa抗體或其抗原結(jié)合部分治療人類(lèi)受試者的腐 蝕性多關(guān)節(jié)炎的有效性的方法，該方法包括利用患有腐蝕性多關(guān)節(jié)炎 的患者群體的改良總Sharp評(píng)分(mTSS)基線及施用該TNFa抗體或其 抗原結(jié)合部分之后患者群體的mTSS值來(lái)確定該TNFa抗體或其抗原 結(jié)合部分的有效性，其中選自i) 約9-27。/。的患者群體mTSS降低；ii) 約65-73。/。的患者群體mTSS不變；及iii) 約9-28o/o的患者群體mTSS增力口的結(jié)果顯示該TNFa抗體或其抗原結(jié)合部分在治療腐蝕性多關(guān)節(jié) 炎中有效。
32. 如權(quán)利要求31的方法，其中所述TNFa抗體或其抗原結(jié)合部 分是選自人源化抗體、嵌合抗體及多價(jià)抗體的抗體。
33. 如權(quán)利要求31的方法，其中所述TNFa抗體或其抗原結(jié)合部 分為英利昔單抗或格里木單抗。
34. 如權(quán)利要求31的方法，其中所述TNFa抗體或其抗原結(jié)合部 分為人類(lèi)抗體。
35. 如權(quán)利要求34的方法，其中所述人類(lèi)抗體或其抗原結(jié)合部分 以通過(guò)表面等離^展子共振測(cè)定的lxl(T8 M或更j氐的Kd與lxl(T3 s^或更 低的K。ff速率常數(shù)從人類(lèi)TNFa上解離，并且該人類(lèi)抗體或其抗原結(jié)合 部分在標(biāo)準(zhǔn)體外L929分析中以lxl(T7 M或更低的IC5o中和人類(lèi)TNFa細(xì)胞毒性。
36. 如權(quán)利要求34的方法，其中所述人類(lèi)抗體或其抗原結(jié)合部分 為阿達(dá)木單抗。
37. —種測(cè)試TN F a抗體或其抗原結(jié)合部分治療與牛皮癬性關(guān)節(jié) 炎相關(guān)的腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的功效的方法，該方法包括利用患有腐蝕性 多關(guān)節(jié)炎的患者群體的改良總Sharp評(píng)分(mTSS)基線及牛皮癬面積及 嚴(yán)重度指數(shù)(PASI)評(píng)分基線或ACR評(píng)分基線與施用該TNFoc抗體或其 抗原結(jié)合部分之后該患者群體的mTSS及PASI或ACR評(píng)分相比以確定 該TNFot抗體或其抗原結(jié)合部分的功效，其中當(dāng)mTSS不變或降低，及 至少約57%患者群體中達(dá)到ACR20反應(yīng)或至少約75%患者群體中達(dá)到 PASI50反應(yīng)時(shí)，顯示該TNFot抗體或其抗原結(jié)合部分在治療與牛皮癬 性關(guān)節(jié)炎相關(guān)的腐蝕性多關(guān)節(jié)炎中有效。
38. 如權(quán)利要求37的方法，所述患者群體中至少約39%進(jìn)一步達(dá) 到ACR50反應(yīng)。
39. 如權(quán)利要求38的方法，所述患者群體中至少約23%進(jìn)一步達(dá) 到ACR70反應(yīng)。
40. 如權(quán)利要求37的方法，所述患者群體中至少約59%進(jìn)一步達(dá) 到PASI75反應(yīng)。
41. 如權(quán)利要求40的方法，所述患者群體中至少約42%進(jìn)一步達(dá)到PASI90反應(yīng)。
42. 如權(quán)利要求37至41中任一項(xiàng)的方法，其中所述TNFoc抗體或 其抗原結(jié)合部分為阿達(dá)木單抗。
43. —種治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的方法，其包括以?xún)芍芤淮蔚慕o藥 方案將阿達(dá)木單抗施用于患有腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的受試者。
44. 如權(quán)利要求43的方法，其中阿達(dá)木單抗的劑量為約40mg。
45. —種試劑盒，其包含含有TNFot抗體或其抗原結(jié)合部分和藥學(xué)上可接受的載體的藥物 組合物，和用于施用該藥物組合物以治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的說(shuō)明。
46. 如權(quán)利要求45的試劑盒，其中所述藥物組合物包含TNFa抗 體或其抗原結(jié)合部分阿達(dá)木單抗。
47. 如權(quán)利要求46的試劑盒，其中所述藥物組合物包含約40mg的阿達(dá)木單抗。
48. 如權(quán)利要求45至47中任一項(xiàng)的試劑盒，其進(jìn)一步包含其他治療劑。
49. 如權(quán)利要求48的試劑盒，其中所述其他治療劑為氨曱喋呤。
50. —種制造物品，其包含a) 包裝材料；b) TNFa抗體或其抗原結(jié)合部分；及c) 包含于該包裝材料內(nèi)的標(biāo)簽或包裝插頁(yè)，其說(shuō)明該TNFa抗體或 其抗原結(jié)合部分可用于治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎。
51. —種制造物品，其包含a) 包裝材料；b) TNFoc抗體或其抗原結(jié)合部分；及c) 包含于該包裝材料內(nèi)的標(biāo)簽或包裝插頁(yè)，其說(shuō)明該TNFa抗體或 其抗原結(jié)合部分可用于抑制關(guān)節(jié)疾病的放射照相進(jìn)展。
52. 如權(quán)利要求50或51的物品，其中所述抗TNFoc抗體或其抗原 結(jié)合部分為選自人源化抗體、嵌合抗體及多價(jià)抗體的抗體。
53. 如權(quán)利要求50或51的物品，其中所述TNFoc抗體或其抗原結(jié) 合部分為英利昔單抗或格里木單抗。
54. 如權(quán)利要求50或51的物品，其中所述TNFa抗體或其抗原結(jié) 合部分為人類(lèi)抗體。
55. 如權(quán)利要求54的物品，其中所述人類(lèi)抗體或其抗原結(jié)合部分 以通過(guò)表面等離振子共振測(cè)定的lxl(T8 M或更低的Kd和lxl(T3 s"或更 低的K。ff速率常數(shù)從人類(lèi)TNFa上解離，并且該人類(lèi)抗體或其抗原結(jié)合 部分在標(biāo)準(zhǔn)體外L929分析中以1 x 1 (T7 M或更低的IC5o中和人類(lèi)TNFa 細(xì)月包毒性。
56. 如權(quán)利要求54的物品，其中所述人類(lèi)抗體或其抗原結(jié)合部分 為阿達(dá)木單抗。
全文摘要
本發(fā)明描述了治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的方法，其包括施用TNFα抗體或其抗原結(jié)合部分。本發(fā)明還描述了一種測(cè)試TNFα抗體或其抗原結(jié)合部分治療腐蝕性多關(guān)節(jié)炎的功效的方法。
文檔編號(hào)A61K39/395GK101500607SQ200680023737
公開(kāi)日2009年8月5日 申請(qǐng)日期2006年5月16日 優(yōu)先權(quán)日2005年5月16日
發(fā)明者M·溫伯格, R·S·霍夫曼 申請(qǐng)人:艾博特生物技術(shù)有限公司