專利名稱：：包含明膠的局部用組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及包含明膠的局部用組合物，例如施用于皮膚的藥物組合物或化妝品組合物及其制備和用途。
背景技術(shù)：
：在將藥物組合物或化妝品組合物配制成用于體表局部應(yīng)用的情況下，該組合物除"活性"成分之外，通常還包含確保組合物具有適于jl!i存、應(yīng)用和皮膚表面保持的性質(zhì)的成分。就此而言，當(dāng)前許多這樣的組合物都包含哺乳動物明膠，例如作為膠凝劑。明膠是膠原的衍生物，膠原是動物體內(nèi)最富足的蛋白質(zhì)。膠原是結(jié)締組織的主要組分，膠原在結(jié)締組織中以水不溶性的膠原纖維的形式存在。一般氨基酸序列是Gly-X-Y，其中X通常是脯氨酸，Y通常是羥脯氨酸。亞氨基酸脯氨酸和羥脯氨酸的含量因不同的物種而不同，與源自變溫動物(例如魚類)的膠原相比，源自恒溫動物(例如哺乳動物)的膠原所具有的這些亞氨基酸的含量較高。最常見的是，通過酸提取方法或堿提取方法，從源自?；蜇i的骨和皮的膠原制備明膠。這兩種提取方法分別得到A型明膠和B型明膠，二者具有不同的等電點。膠原分子是由三個oc-鏈組成的右手三螺旋(right-handedtriplehelix)。所述三螺旋即膠原的有序構(gòu)型通過a-鏈中的脯氨酸和羥脯氨酸單元而穩(wěn)定。術(shù)語"膠原"是指在三螺旋中發(fā)現(xiàn)的未改性分子(unmodifiedmolecules)。明膠是膠原分子末端丟失的截取膠原(extractedcollagen)。明膠的膠凝被認為是對由無序氨基酸片段(無規(guī)巻曲)互聯(lián)的三螺旋結(jié)構(gòu)(有序構(gòu)型)的區(qū)域進行再建的結(jié)果。這些凝膠是熱致可逆的，并且膠凝溫度(gellingtemperature)和融化溫度(meltingtemperature)受到脯氨酸和幾脯氨酸的含量的影響。源自哺乳動物的包含大概24%的這些亞氨基酸的明膠分別具有大約20-25°C的膠凝溫度和大約35-40°C的融化溫度。冷水魚類物種只包含16-18%，并且魚明膠(fishgelatin)通常在低于8。C膠凝，在12-14°C融化。因此，基于未改性的魚明膠的凝膠只在相應(yīng)于冰箱中的溫度(0-5。C)是機械穩(wěn)定的。明膠在藥物、食物和化妝品，及在影像、膠水和復(fù)合材料中使用數(shù)十年。在過去的數(shù)十年中，特別是由于牛綿狀腦病(BovineSpongiformEncephalopathy,BSE)的爆發(fā)，對哺乳動物明膠的替代品的研究日益增加，牛綿狀腦病對成年牛是致命的神經(jīng)錯亂，也可能以新變種克-雅二氏病(newvariantCreutzfeldt-Jacobdisease,nvCJD)的形式感染人類。另外，哺乳動物明膠的使用受到宗教顧慮的限制，穆斯林信徒(Muslims(Halal/Haram))、猶太教信徒(Jews(Kosher))和印度教信徒(Hindus)都不接受源自哺乳動物的明膠。
發(fā)明內(nèi)容發(fā)明人現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，通過與多糖膠凝劑(polysaccharidegellingagent)一同配制，魚明膠的膠凝性質(zhì)可以改變，從而制備適于體表局部應(yīng)用例如施用于皮膚的組合物，魚明膠就其使用而言不受宗教顧慮的限制，并且沒有患上nvCJB的風(fēng)險。因而，例如這種一同配制可以制備膠凝特征等于或優(yōu)于使用哺乳動物明膠的組合物的組合物。因而，鑒于一個方面，本發(fā)明提供包括藥物活性劑或化妝品活性劑和膠凝劑的局部用藥物組合物或化妝品組合物，其特征在于所述膠凝劑包括魚明膠和多糖。本發(fā)明的組合物的形式典型地可以為凝膠、乳液、霜、洗劑、溶液、著色劑、芳香劑、穩(wěn)定劑、pH調(diào)節(jié)劑、粘度調(diào)節(jié)劑、皮膚滲透促進劑(例如DMSO)、抗氧化劑、填充劑等。例如在這些組合物用作貼劑(patch)以例如通過離子電滲(iontophoresis)例如進行經(jīng)皮給藥的情況下，這些組合物還可以包含例如以下成分包封部分、支撐物等。這些組合物優(yōu)選地包含連續(xù)的水相，該水相的膠凝溫度范圍為10至30°C，更優(yōu)選地為15至28。C,而融化溫度范圍為20至42。C，更優(yōu)選地為24至40。C，尤其為28至37。C。就本發(fā)明的藥物組合物而言，藥物活性劑可以是任何藥物物質(zhì)，該藥物物質(zhì)能夠在施用部位或在經(jīng)過皮膚吸收之后發(fā)揮期望的治療或預(yù)防作用，例如抗生素作用、抗炎作用或止癢作用。常規(guī)局部用組合物中局部施用的多種藥物物質(zhì)(即使不是大多數(shù))(例如甾類、NSAIDs(例如布洛芬)、抗真菌劑(例如酮康唑)、鋰化合物(例如用于治療皮脂性皮炎(sebnorrhaicdermatitis)或傳染'l"生專欠虎(molluscumcontagiosum))、4元痤癡4b合物(侈'H口壬二酸)、抗頭屑劑(例如巰氧吡啶鋅(zincpyrithione))等)可以用于本發(fā)明的組合物中。就本發(fā)明的化妝品組合物而言，化妝品活性劑可以是任何物質(zhì)，該物質(zhì)能夠在應(yīng)用部位或在吸收到皮膚內(nèi)之后發(fā)揮期望的美容作用，例如維生素、植物油、UV吸收劑、皮膚水合劑(skinhydratingagent)、清潔劑、著色劑、芳香劑等。再次，常規(guī)局部用組合物中局部施用的多種美容劑(即使不是大多數(shù))可以用于本發(fā)明的組合物中。這些活性劑可以以類似或相當(dāng)于當(dāng)前所使用的濃度使用。如在此所使用的那樣，術(shù)語"多糖，，是指糖聚合物，其碳水化合物骨架能夠進行溶膠/凝膠轉(zhuǎn)變。在本發(fā)明組合物中的多糖膠凝劑可以源自多種來源，例如陸生或水生動物、植物、藻類等，并且這些膠凝劑可以是合成或天然存在的多糖或天然存在的多糖的衍生物。合適的水生多糖(marinepolysaccharide)的實例包括角叉菜月交(carrageenan)、>萊@臾鹽(alginate)、；京月旨(agar)牙口殼聚斗唐(chitosan)。合適的源自植物的多糖的實例包括果膠(pectin)。合適的源自微生物的多糖的實例包括膠凝糖(gellan)和小核菌葡聚糖(scleroglucan)。當(dāng)使用水生多糖時，特別是角叉菜膠和藻酸鹽時，尤其是角叉菜膠時，使用帶電的多糖，例如以靜電方式帶電的多糖和/或硫酸化的多糖是優(yōu)選的。以下特別就角叉菜膠對本發(fā)明做進一步說明。包括i-和k-角叉菜膠的角叉菜膠家族是一類從紅藻制備的線性硫酸化多糖。在k-角叉菜膠中重復(fù)的二糖單元是P-D-半乳糖-4-硫酸和3,6-去水-a-D-半乳糖，而在i-角叉菜膠中重復(fù)的二糖單元是(3-D-半乳糖-4-硫酸和3,6-去水-oc-D-半乳糖-2-硫酸。k-和i-角叉菜膠均在食物制品中使用。角叉菜膠用作穩(wěn)定劑、乳化劑、膠凝劑和脂肪置換劑(fatreplacer)。在水環(huán)境中，這兩種角叉菜膠都形成鹽致可逆或冷致可逆的凝膠(salt-orcold-settingreversiblegels)。巻曲-螺旋轉(zhuǎn)變和螺旋的聚集形成膠凝網(wǎng)絡(luò)。k-角叉菜膠具有結(jié)合特定一價陽離子的位點，從而產(chǎn)生凝膠形成，而剪切模量和彈性模量以Cs、K、Na、Li+的順序減小。通常，增加鹽濃度使k-角叉菜膠的彈性模量、凝固溫度和融化溫度提高。當(dāng)根據(jù)本發(fā)明使用K-角叉菜膠時，例如以至多100mM使用時，更尤其以至多50mM的濃度使用時，使用水溶性的鉀化合物、銣化合物或銫化合物，特別是鉀化合物，特別是使用天然存在的化合物(例如鹽)是優(yōu)選的。對于i-角叉菜膠，也發(fā)現(xiàn)了鹽依賴性的構(gòu)型轉(zhuǎn)變。人們也知道，在存在多價陽離子例如Ca"+的情況下，這些分子在強螺旋穩(wěn)定化的情況下經(jīng)歷巻曲-螺旋轉(zhuǎn)變。當(dāng)根據(jù)本發(fā)明使用i-角叉菜膠時，例如以至多100mM的濃度使用時，使用水溶性的鉀化合物、鍶化合物、鋇化合物、鐵化合物或鋁化合物，尤其是4丐化合物，特別是使用天然存在的化合物(例如鹽)是優(yōu)選的。根據(jù)本發(fā)明使用的多糖的重均分子量典型地為5kDa至2MDa，優(yōu)選地為10kDa至lMDa，最優(yōu)選地為100kDa至900kDa，特別為400至800kDa。多糖的使用濃度典型地為0.01至5wt%，優(yōu)選為0.1至1.5wt%，特別為0.2至lwt%。在將一價或多價陽離子，典型地是第1主族或第2主族金屬離子包括在組合物中的情況下，陽離子的濃度范圍典型地為2.5至lOOmM,優(yōu)選地為5至50mM。然而使用源自咸水魚類特別是冷水魚類的明膠是優(yōu)選的。亞氨基酸含量為5至25wt。/。的魚明膠是優(yōu)選的，更尤其為亞氨基酸含量為10至20wt。/o的魚明膠。魚明膠的重均分子量的范圍典型地為10至250kDa,優(yōu)選地為75至175kDa，尤其為80至150kDa。魚明膠在組合物中的濃度典型地為1至50wt%，優(yōu)選地為2至15wt。/。，特別為3至7wt。/。。在期望抗老化作用的情況下，所使用的魚明膠可以任選地包括低分子量成分，例如重均分子量低于10kDa的低分子量成分。魚明膠與多糖在本發(fā)明的組合物中的重量比例典型地為50:1至5:1,優(yōu)選地為40:1至9:1,尤其為20:1至10:1。本發(fā)明的組合物的pH范圍優(yōu)選地為3至9,更優(yōu)選地為5至7.5。將魚明膠和多糖組合是具有協(xié)同增效作用的，所形成的組合物在環(huán)境溫度(以這些成分在單獨使用時不會形成穩(wěn)定凝膠的濃度)形成具有局部施用相關(guān)性質(zhì)的穩(wěn)定凝膠，然而單獨使用這些成分或使用傳統(tǒng)的哺乳動物明膠，不能得到這些性質(zhì)。如上所述，與哺乳動物明膠相比，源自冷水物種的魚明膠具有相當(dāng)較低的凝固溫度(〈8。C)和融化溫度(低于14-15°C)。在室溫(20-22。C)，魚明膠分子處于無規(guī)巻曲構(gòu)型(與哺乳動物明膠分子不同，哺乳動物明膠分子處于有序構(gòu)型)。因而，魚明膠自身不能制備在環(huán)境溫度具有機械穩(wěn)定性的凝膠組合物。然而，與以有序構(gòu)型存在的分子相比，以無規(guī)巻曲構(gòu)型存在的魚明膠分子意味著其具有改善的水結(jié)合性質(zhì)。對于局部用產(chǎn)品，這是主要的優(yōu)點，因為無規(guī)巻曲構(gòu)型意味著可以將魚明膠最適宜開發(fā)成皮膚保濕劑(skinmoisturepreserver)。當(dāng)作為生物聚合物膜存在于皮膚表面的時候，高分子量無規(guī)巻曲魚明膠在鎖水和吸水方面也是較有效的。將魚明膠與多糖混合，可以設(shè)計出膠凝系統(tǒng)，其中魚明膠仍以無規(guī)巻曲分子的形式存在，但該系統(tǒng)作為整體有助于皮膚產(chǎn)品的機械性質(zhì)，同時仍將水限制在水凝膠中。通過對魚明膠與多糖的混合比例進行控制，可以將這些系統(tǒng)的融化溫度向特定的溫度調(diào)節(jié)。這使所組合的明膠/多糖凝膠的融化過程受到控制，并且能夠在不另外添加人造表面活性劑或脂肪/脂質(zhì)的情況下制備水含量很高的皮膚產(chǎn)品。因而，多糖和魚明膠的組合在皮膚表面上形成極好的保持皮膚水合作用的保濕膜。無規(guī)巻曲明膠分子中的一些也可以滲入皮膚，并且在真皮中置換一些降解的I型膠原。當(dāng)實現(xiàn)分子滲入的時候，非常重要的是，這些分子以柔性的無規(guī)巻曲的形式存在，而不是如膠原和處于有序構(gòu)型的明膠那樣，以剛性和伸展的有序分子的形式存在。哺乳動物明膠或膠原決不會在皮膚表面(28-32。C)融化以形成優(yōu)異的無規(guī)巻曲構(gòu)型，因為這些溫度顯著低于體內(nèi)的溫度，因此也低于這些明膠和膠原的融化溫度。本發(fā)明的組合物的另一個優(yōu)點是，在皮膚溫度處于無規(guī)巻曲構(gòu)型的魚明膠(不同于哺乳動物明膠)可以滲入皮膚，從而通過提高皮膚膠原含量，或通過對引起皮膚老化的內(nèi)源性基質(zhì)金屬蛋白酶(endogenousmatrixmetalloproteinase)提供替代皮膚自身膠原的底物，來改善皮膚柔性。鑒于另一個方面，本發(fā)明提供對人類對象進行美容處理的方法，其包括將化妝品組合物施用于所述對象的皮膚，其特征在于所述組合物是根據(jù)本發(fā)明的組合物。鑒于另一個方面，本發(fā)明提供魚明膠和多糖膠凝劑在制備包含可局部給予的藥物物質(zhì)的藥劑中的用途，該藥劑用于包括將所述藥劑施用于人類對象的皮膚的處理方法中。鑒于另一個方面，本發(fā)明提供對人類對象進行處理的方法，其包括將有效量的根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物施用于所述對象的皮膚。鑒于另一個方面，本發(fā)明提供用于制備本發(fā)明的組合物的方法，該方法包括將魚明膠、多糖膠凝劑、藥物活性物質(zhì)或化妝品活性物質(zhì)，以及任選和優(yōu)選的水混合，所述方法任選地包括對混合物進行乳化。使用在局部用化妝品和藥物特別是包含哺乳動物明膠的局部用組合物的制備和應(yīng)用中的常規(guī)操作，可以實現(xiàn)本發(fā)明的用途、方法和工藝。本發(fā)明能夠制備水含量高的最優(yōu)化皮膚制品，其包含處于無規(guī)巻曲構(gòu)型的高分子量魚明膠或高低分子量魚明膠的混合物，以及混合有一種或幾種多糖。這可通過將所組合的魚明膠/多糖系統(tǒng)的融化溫度向皮膚的表面溫度調(diào)節(jié)來實現(xiàn)。通過使用本發(fā)明，第一次可以通過水相而不是油相對乳化的皮膚制品的融化行為進行控制。該產(chǎn)品在皮膚表面上形成極好的保濕膜層，因而保持皮膚的水合作用。無規(guī)巻曲明膠滲入皮膚的較下層，這可以改善皮膚的柔性。這些乳化的產(chǎn)品在室溫可以如霜那樣穩(wěn)定，這是由于其含有多糖。這些優(yōu)異的物理性質(zhì)在純的水凝膠狀態(tài)下以及在脂質(zhì)、脂肪和油存在的乳化系統(tǒng)中都是有效的(valid)。這些產(chǎn)品不能用哺乳動物明膠得到。使用本發(fā)明，尤其可以得到以下優(yōu)點可以制備基于魚明膠的凝膠和在存在脂質(zhì)情況下的這些凝膠的乳液，其在室溫是機械穩(wěn)定的；可以制備乳化的皮膚霜制品，其是室溫穩(wěn)定的，并且具有高水含量；可以將這些凝膠的融化溫度特定地調(diào)至生物表面的溫度；可以就皮膚沉積物(skindeposition)對這些凝力交的流變學(xué)行為和結(jié)構(gòu)(texture)進4亍優(yōu)4匕；可以從源自可持續(xù)資源的生物相容的聚合物制備化妝品皮膚制品和藥物皮膚制品；例如就疾病的風(fēng)險和/或基于宗教的限制而言，可以改善皮膚制品的使用者友好性；可以制備基于魚明膠和多糖的混合物的皮趺制品，其在生物表面是易溶的；可以制備基于魚明膠和多糖的混合物的皮膚制品，就皮膚吸收和粘性對其進行優(yōu)化；以及可以得到改善的皮膚保濕作用(由于施用處于無序(無規(guī)巻曲)狀態(tài)的明膠)。魚明膠滲入皮膚，因而可以用于提高其它藥物活性物質(zhì)或化妝品活性物質(zhì)的皮膚滲透性。因而，鑒于另一個方面，本發(fā)明提供包括藥物活性劑或化妝品活性劑和皮月夫滲透促進劑(skinpenetrationenhancingagent)的局部用藥物纟且合物或化妝品組合物，其特征在于所述皮膚滲透促進劑包括魚明膠。筌于另一個方面，本發(fā)明提供魚明膠用于制備包含化妝品活性劑或藥物活性劑的局部用化妝品組合物或藥物組合物的用途，所述組合物用于包括將所述藥劑施用于人類或非人類哺乳動物對象的皮膚的處理方法中。包含作為皮膚滲透促進劑的魚明膠的組合物也優(yōu)選地包含多糖，從而實現(xiàn)膠凝作用。然而，可以使用魚明膠，但不是作為膠凝劑的成分，因而，組合物可以采取適于局部應(yīng)用的任何形式例如霜、膏(paste)、油膏(unguent)、凝膠、乳液、分散劑、懸浮液、溶液、噴霧劑等。使用溶液、霜、膏和凝膠是特別優(yōu)選的。例如如前所述，組合物中的活性成分可以是任何期望局部應(yīng)用的活性劑。然而，活性成分尤其優(yōu)選地是止痛劑、適于對抗皮膚癥狀(例如痤瘡)的物質(zhì)、能夠?qū)馆椛?例如日曬)損傷的物質(zhì)(例如谷胱甘肽)、血流刺激劑(例如血管擴張劑)等。魚明膠滲入皮膚，這使得其可以在皮膚內(nèi)對引起皮膚老化的內(nèi)生基質(zhì)金屬蛋白酶而言作為替代皮膚自身膠原的底物。因而，鑒于另一個方面，本發(fā)明提供魚明膠用于制備局部用組合物的用途，該組合物施用于人類皮膚，例如通過提高所述皮膚的膠原含量，來改善其柔性。鑒于另一個方面，本發(fā)明提供對人類對象進行治療以改善其皮膚柔性的方法，該方法包括例如以霜、膏、油膏、蠟、凝膠、乳液、分散劑、懸浮液、溶液或噴霧劑的形式，將有效量的無菌的、包含魚明膠的組合物施用于所述對象的皮膚。期望將組合物施用于面、頸、上肢(upperarms)、手、上胸和下肢(lowerthigh)中的至少一種的皮膚，特別是面、頸和上胸的皮膚，尤其是眼周圍的皮膚。在形成這些組合物時所使用的魚明膠和所使用的任何多糖可以如以上所述的那樣。根據(jù)本發(fā)明所使用的組合物優(yōu)選地與其局部應(yīng)用的指導(dǎo)一起提供，這些指導(dǎo)例如在包裝說明書中，在容器標(biāo)簽或容器包裝上。期望組合物是無菌的，并且沒有魚類組織，而且其優(yōu)選地包含至少一種藥物或化妝品載體或賦形劑?，F(xiàn)在，參考接下來的非限制性實施例，并且參考以下附圖，進一步對本發(fā)明的組合物進行說明。圖la(基質(zhì)皮膚霜(baseskincream)的融化和凝固行為)、lb(比例為1:1的基質(zhì)和水的融化和凝固行為)、lc(比例為1:1的基質(zhì)和10%(w/v)FG的融化和凝固行為)、ld(以1:1的比例混合的基質(zhì)和0.75(w/v)°/。CG+15(w/v)%FG的融化和凝固行為)和le(以1:1的比例混合的基質(zhì)和0.75%CG+5%FG+20mMKC的融化和凝固行為)是針對五種組合物的溫度(T)、彈性模量(G，)、粘度Of)和相角(S)對時間的坐標(biāo)圖，將這五種組合物從20°C加熱到40°C，然后冷卻回20°C;圖2a(純的基質(zhì)皮膚霜的融化過程)、2b(比例為1:1的基質(zhì)和水的共混物的融化過程)、2c(比例為1:1的基質(zhì)和10Q/。FG的混合物的融化過程)、2d(比例為1:1的基質(zhì)和0.75%CG+15%FG的混合物的融化過程)和2e(比例為1:1的基質(zhì)和0.75(w/v)°/。CG+15(w/v)%FG+20mMKC1的混合物的融化過程)是針對五種組合物的溫度(T)和彈性模量(G，)對時間的坐標(biāo)圖，在此期間將這五種組合物從20。C加熱到40。C;圖3a(在剪切應(yīng)力增加的情況下，純的基質(zhì)皮膚霜的機械響應(yīng)，重復(fù)數(shù)次)、圖3c(在剪切應(yīng)力增加的情況下，基質(zhì):水(l:l)的機械響應(yīng)，重復(fù)數(shù)次)、3e(在剪切應(yīng)力增加的情況下，基質(zhì)10。/。FG(1:1)的混合系統(tǒng)的機械響應(yīng)，重復(fù)數(shù)次)、3g(在剪切應(yīng)力增加的情況下，基質(zhì):FG/CG/水(1:1)的混合系統(tǒng)的機械響應(yīng)，重復(fù)數(shù)次，2=0.5%CG+10%FG,14-16-0.75。/。CG+15。/。FG)和3i(在剪切應(yīng)力增加的情況下，基質(zhì):FG/CG/20mMKC1/水(1:1)的混合系統(tǒng)的機械響應(yīng)，重復(fù)數(shù)次)是針對五種組合物的彈性模量(G，)對剪切應(yīng)力的坐標(biāo)圖，而圖3b(在剪切應(yīng)力增加的情況下，純的基質(zhì)的相角的變化)、3d(在剪切應(yīng)力增加的情況下，基質(zhì):水(l:l)的混合系統(tǒng)的相角的變化)、3f(在剪切應(yīng)力增i加的情況下，基質(zhì)10Q/。FG(1:1)的混合系統(tǒng)的相角的變化)、3h(在剪切應(yīng)力增加的情況下，基質(zhì):FG/CG/水(1:1)的系統(tǒng)的相角的變化，在高剪切應(yīng)力下沒有任何流動，2=0.5%CG+10%FG,14-16-0.75。/。CG+15。/。FG)和3j(在剪切應(yīng)力增加的情況下，基質(zhì):FG/CG/20mMKCI/水(1:1)的系統(tǒng)的相角的變化，在高剪切應(yīng)力下沒有任何流動)是針對五種組合物的相角(S)對剪切應(yīng)力的坐標(biāo)圖，這五種組合物中的每種都數(shù)次經(jīng)受增加的剪切應(yīng)力(經(jīng)受次數(shù)出現(xiàn)在坐標(biāo)圖之下)；圖4a(混合的0.5(w/v)%k-CG和10(w/v)%FG水系統(tǒng)的相角隨溫度的變化。在27。C發(fā)生膠凝，在40。C發(fā)生融化)、4b(對0.5(w/v)。/。k-CG的微小應(yīng)變振蕩測量(small-strainoscillatorymeasurement),相角隨溫度的變化，在13°C發(fā)生膠凝，在29。C發(fā)生融化)和4c(對10(w/v)°/。FG的微小應(yīng)變振蕩測量，相角隨溫度的變化，在4。C發(fā)生膠凝，在13。C發(fā)生融化)是針對三種組合物的相角(S)對溫度的坐標(biāo)圖，使這三種組合物融化，然后使其冷卻，形成凝膠；圖5a(對冷卻到4。C的0.5(w/v)%k-CG和10(w/v)%FG的微小應(yīng)變振蕩測量，外推到G，無限，得到G，=3620Pa)、5b(對冷卻到4°C的0.5(w/v)%k-CG的微小應(yīng)變振蕩測量的結(jié)果)和5c(對冷卻到4。C的10(w/v)%FG的微小應(yīng)變振蕩測量的結(jié)果，外推到G，緣，得到G，-1100Pa)是針對三種組合物的溫度(T)、彈性模量(G，)和相角(5)的坐標(biāo)圖，將這三種組合物從20。C冷卻到4°C,然后加熱到40。C;圖6是顯示0.5(w/v)%k-CG和10或15(w/v)%FG的混合系統(tǒng)在室溫的楊氏模量(YounG，smodulus)(E)的示圖(平均值士標(biāo)準(zhǔn)偏差，n>4);圖7是魚明膠濃度對在280nm的吸光度(absorbance)的坐標(biāo)圖；以及圖8是魚明膠濃度對時間的坐標(biāo)圖。具體實施方式在接下來的實施例中，使用以下材料和方法角叉菜膠平均分子量的范圍為400-800kDa的k-角叉菜膠(FMCBiopolymerA/S，Drammen,Norway)。平均分子量的范圍為400-800kDa的i-角叉菜膠(FMCBiopolymerA/S，Drammen，Norway)。魚明膠從冷水魚類物種的皮制備魚明膠(FG)樣品(NorlandInc.,USA),其平均分子量的范圍為90-140kDa。乳化模型系統(tǒng)模型基質(zhì)是"Biodermica，，日霜(BIOlinkAS，Sande^jord,NorwayandFitzone誦KMBGmbH，Hamburg,Germany)。通過用UltraThurrax進行乳化，制備脂質(zhì)和水混合物。除非另有說明，比例和百分比是以重量計。實施例1:與魚明膠和K-角叉菜膠的共混物(1:1)一起乳化、與水一起乳化和與純的魚明膠溶液一起乳化的基質(zhì)皮膚霜的完整的融化和凝固行為圖la顯示當(dāng)溫度從20°C升高到40。C然后降低回20°C的時候純的基質(zhì)皮膚霜的融化和再建。當(dāng)溫度增加的時候，反映霜的固體性質(zhì)的彈性模量(G，)具有輕微的溫度依賴性，即單調(diào)地輕微地減小，隨后當(dāng)溫度降低的時候，G，急劇地增大。這種滯后現(xiàn)象最有可能是由于脂質(zhì)成分的融化和重結(jié)晶引起的。圖lb顯示當(dāng)基質(zhì)霜與水以1:1混合的時候的行為。該混合物形成洗劑型的不均勻產(chǎn)品，而不是霜，因此顯示非期望的行為。這是由于水在系統(tǒng)中的非最優(yōu)化作用使得缺乏穩(wěn)定性。在該產(chǎn)品中，也觀察到由于水域較大而發(fā)生顆粒一致性(grainyconsistency)(這表明完全的相分離會隨著時間的推移而發(fā)生)。圖lc顯示當(dāng)基質(zhì)霜與10%魚明膠水溶液以1:1混合的時候的行為。在這個實施例中，也觀察到純的霜的滯后行為(參見圖la)。然而，G，是非常低的，這意味著機械性質(zhì)很差。圖ld顯示當(dāng)基質(zhì)霜與包含0.75。/。K-角叉菜膠和15%魚明膠的水溶液以l:l混合的時候的行為。調(diào)節(jié)這種凝膠，使其在人類皮膚上融化。當(dāng)溫度升高的時候，觀察到非常顯著的效果，當(dāng)溫度降低的時候，再次觀察到在圖1中觀察到的滯后現(xiàn)象。得到滑潤的柔和的產(chǎn)品。圖le顯示當(dāng)基質(zhì)霜以1:1與0.75。/。K-角叉菜膠和15%魚明膠的溶液并且與20mMKC1混合的時候的行為。設(shè)計這種混合物，使其在皮膚表面也保持其機械結(jié)構(gòu)。示圖現(xiàn)在顯示其機械性質(zhì)類似純的基質(zhì)霜(圖la)，不同的是在對該系統(tǒng)進行冷卻之后的滯后現(xiàn)象。這個結(jié)果表明該非融化產(chǎn)品的機械性質(zhì)可能在相當(dāng)較大的程度上受到多糖含量的影響。實施例2:與魚明膠和K-角叉菜膠的共混物(1:1)一起乳化、與水一起乳化和與純的魚明膠溶液一起乳化的基質(zhì)皮膚霜的初始的融化行為。皮膚接觸行為圖2a-2e相應(yīng)于圖la-le的初始相。清楚地觀察到，-故調(diào)節(jié)成在人類皮膚上融化的樣品(圖2d)是在G，發(fā)展過程中在皮膚溫度(30。C)附近出現(xiàn)顯著突變的唯一樣品，這表明魚明膠/角叉菜膠凝膠在皮膚上融化，因而有助于無規(guī)巻曲明膠在皮膚上的分布。在溫度降低的情況下，所有其它樣品的G，都或多或少地單調(diào)地減小，這表明霜的弱化是由于油相的變化。實施例3:與魚明膠和K-角叉菜膠的共混物(1:1)一起乳化、與水一起乳化和與純的魚明膠溶液一起乳化的基質(zhì)皮膚霜的應(yīng)力耐受(stresstolerance),在20。C的穩(wěn)定性觀察到霜在大約20Pa的應(yīng)力下開始流動(G，減小而S增大)。由于當(dāng)對霜進行數(shù)次測試的時候，在線性區(qū)域內(nèi)或在開始流動時沒有觀察到任何變化，所以系統(tǒng)的可逆性也是良好的。圖3c和3d顯示基質(zhì)和水的l:l共混物的機械響應(yīng)。清楚地觀察到，該系統(tǒng)在相當(dāng)較低的應(yīng)力下開始流動，并且在反復(fù)應(yīng)力循環(huán)的情況下，引起流動所必需的應(yīng)力變得更小，這表明系統(tǒng)是非平衡的，產(chǎn)品是非最優(yōu)化的。圖3e和3f顯示基質(zhì)和魚明膠的10%水溶液的1:1共混物的應(yīng)力行為。如水共混物那樣，該系統(tǒng)也在相當(dāng)較低的應(yīng)力下流動，并且就變形循環(huán)的次數(shù)而言，該系統(tǒng)對引起流動的應(yīng)力具有依賴性。這表明魚明膠單獨不足以形成穩(wěn)定的皮膚霜。圖3g和3h顯示基質(zhì)皮膚霜和魚明膠和K-角叉菜膠的兩種水混合物(15%/0.75%和10%/0.50%)的1:1混合物的應(yīng)力所引起的機械響應(yīng)。由于這些系統(tǒng)直到應(yīng)力與純的基質(zhì)霜所需要的應(yīng)力相當(dāng)?shù)臅r候才會流動，所以這些系統(tǒng)與添加純水或10%魚明膠的情況有很大不同，并且其也是完全可逆的系統(tǒng)(即機械響應(yīng)不依賴于變形循環(huán)的次數(shù))。此外，所觀察到的相角顯示，在所測試的應(yīng)力范疇內(nèi)，這些凝膠根本不會變成以液體為主(相角(5)總是小于45°)。這表明膠凝的多糖在使霜穩(wěn)定方面是重要的。因此，這種水含量增加的1:1混合物在20。C與純的基質(zhì)霜相比，是更穩(wěn)定的產(chǎn)品。圖3i和3j顯示基質(zhì)和添加了20mM凝膠促進離子K+的魚明膠/k-角叉菜膠共混物的1:1混合物的機械響應(yīng)。這些示圖顯示，通過添加這樣的離子，由于使角叉菜膠網(wǎng)絡(luò)額外穩(wěn)定，從而可以使該系統(tǒng)甚至更穩(wěn)定。與沒有任何額外鉀離子的非流動混合系統(tǒng)相比，在這種系統(tǒng)中，相角在所測試的最大應(yīng)力下仍4交小。實施例4:魚明膠和k-角叉菜膠的水共混物的膠凝溫度和融化溫度圖4a顯示0.5。/ok-角叉菜股和10。/。魚明膠的共混物的膠凝溫度(Tg)和融化溫度(Tm),同時圖4b和4c顯示兩種單一成分(分別為0.5。/。k-角叉菜膠(b)和10。/。魚明膠(lc))的Tg值和Tm值。這些結(jié)果表示成微小振蕩測量中相角的變化(-arctanG"/G，)，表明從以固體為主的系統(tǒng)變化成以流體為主的系統(tǒng)(S=45°),反之亦然。清楚地觀察到，由于兩種成分中的任何一種單獨都不會在室溫形成凝膠，所以這種混合物是真正具有協(xié)同增效作用的系統(tǒng)，同時混合系統(tǒng)令人驚訝地具有接近哺乳動物明膠凝膠的膠凝溫度(27。C)和融化溫度(40。C)。實施例5:魚明膠和k-角叉菜膠的共混物的凝膠強度發(fā)展過程圖5a顯示0.5Q/。k-角叉菜膠和10%魚明膠的混合物的凝膠強度的發(fā)展過程(通過微小應(yīng)力振蕩測量以動態(tài)儲能模量(dynamicstoragemodulus)(G，)的形式給出)。在圖5b和5c中，分別給出兩種單獨成分(0.5。/。k-角叉菜膠和10%魚明膠)的凝膠強度的相應(yīng)發(fā)展過程。由于兩種成分中的任何一種單獨都不會在室溫形成凝膠，所以所有結(jié)果都在4。C得到(也參見實施例1)。通過所顯示的數(shù)據(jù)，再次顯而易見的是，由于混合系統(tǒng)的G，顯著高于針對兩種單獨成分所測量的G，值，所以得到真正具有協(xié)同增效作用的系統(tǒng)。實施例6:高FG濃度時混合的魚明l^/k-角叉菜膠凝膠的強度圖6顯示沒有添加任何鹽的混有10和15%魚明膠的0.50。/。k-角叉菜月交的凝膠強度(通過壓縮分析，以楊氏模量(E)的形式給出)。實施例4顯示，兩種成分中的任何一種單獨都不會在室溫形成穩(wěn)定的凝膠，但0.50%1角叉菜膠和10%魚明膠的共混物可以在室溫形成穩(wěn)定的凝膠。圖6顯示，在包括15%魚明膠的情況下，該結(jié)果也得以證實。事實上，在k-角叉菜膠與魚明膠的比例為1:20至1:30的情況下，該混合系統(tǒng)的凝膠強度沒有受到任何顯著的影響，這證明該混合系統(tǒng)是堅固的(robust)。實施例7將平均分子量為55000Da的魚明膠溶解在PBS中，使其達到5%wt，將500|iL加至8份組織插入物(tissueinsert)。用來自SkinEthic,France的17天曰齡的表皮模型(epidermismodel)覆蓋組織插入物中的膜。將lmL的PBS加至24-孔板的孔內(nèi)。將一份帶有魚明膠溶液的組織插入物加至該多孔板的8個孔內(nèi)。在30。C對該系統(tǒng)進行孵育，每30分鐘取走一份組織插入物，如此持續(xù)3小時，然后每小時取走一份組織插入物，如此直到5小時。收集孔內(nèi)的溶液，對280nm的吸光度進行測量，以說明魚明膠分子已經(jīng)滲入表皮模型。吸光度值隨時間增加，這說明當(dāng)在30。C進行孵育時，魚明膠分子滲入表皮模型。實施例8將平均分子量為120000Da的魚明膠溶解在PBS中，使其達到5%wt。添加平均分子量為30000Da的魚明膠的低分子量級分，使其濃度達到2.5%wt。將500pL的該魚明膠溶液加至8份組織插入物。用來自SkinEthic,France的17天日齡的表皮模型覆蓋組織插入物中的膜。將lmL的PBS加至24-孔板的孔內(nèi)。將一份帶有魚明膠溶液的組織插入物加至該多孔板的8個孔內(nèi)。在30°C對該系統(tǒng)進行聘育，每30分鐘取走一份組織插入物，如此持續(xù)3小時，然后每小時取走一份組織插入物，如此直到5小時。收集孔內(nèi)的溶液，對280nm的吸光度進行測量，以說明魚明膠分子已經(jīng)滲入表皮模型。吸光度值隨時間增加，這說明當(dāng)在30。C進行孵育時，魚明膠分子滲入表皮模型。實施例9將平均分子量為30000Da的魚明膠溶解在PBS中，-使其達到5%wt，將500nL加至16份組織插入物。用來自SkinEthic,Nice,France(lotno.:06022A0304)的20天日齡的表皮模型覆蓋組織插入物中的膜。將700pL的PBS加至24-孔板的孔內(nèi)。將一份帶有魚明膠溶液的組織插入物加至該多孔板的16個孔內(nèi)。在溫和搖動的情況下，在30。C對該系統(tǒng)進行孵育，每20分鐘取走一份組織插入物，如此持續(xù)3小時，然后每30分鐘取走一份組織插入物，如此直到6.5小時。收集孔內(nèi)的溶液和插入物，對表皮模型之下和之上的280nm的吸光度進行測量，以說明魚明膠分子已經(jīng)滲入屏障。在屏障之下的溶液中，吸光度值隨時間增加，這說明當(dāng)在30。C進行孵育時，魚明膠分子滲入表皮模型。圖7顯示PBS中的魚明膠(平均分子量為30000Da)濃度和A280值之間的相關(guān)性(coherence)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。下面的表4顯示280nm的吸光度值和在表皮4莫型插入物之下的PBS(700nL)中的魚明膠濃度的計算值。PBS用作空白樣品。顯示魚明膠濃度和A280之間的相關(guān)性的標(biāo)準(zhǔn)曲線用于計算魚明膠濃度，該濃度作為時間的函數(shù)。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>表1的數(shù)據(jù)描繪于圖8中，其中FG在屏障之下的PBS中的濃度作為時間的函數(shù)。對在系統(tǒng)中處于平衡的FG的最大可能濃度進行計算，其為大約2.08。/。。這意味著在6.5小時之時，19%的FG已經(jīng)滲入表皮屏障。權(quán)利要求1.局部用藥物組合物或化妝品組合物，其包括藥物活性劑或化妝品活性劑和膠凝劑，其特征在于所述膠凝劑包括魚明膠和多糖。2.局部用藥物組合物或化妝品組合物，其包括藥物活性劑或化妝品活性劑和皮膚滲透促進劑，其特征在于所述皮膚滲透促進劑包括魚明膠。3.權(quán)利要求1或2的組合物，其包含膠凝溫度范圍為10至30。C的連續(xù)水相。4.權(quán)利要求3的組合物，其中所述膠凝溫度范圍為15至28。C。5.上述權(quán)利要求中任一項的組合物，其包含融化溫度范圍為20至42。C的連續(xù)水相。6.權(quán)利要求5的組合物，其'中所述融化溫度范圍為24至40°C。7.權(quán)利要求6的組合物，其中所述融化溫度范圍為28至37。C。8.上述權(quán)利要求中任一項的組合物，其中所述魚明膠具有5至25wt%的亞氨基酸含量。9.上述權(quán)利要求中任一項的組合物，其中所述魚明膠的重均分子量的范圍為10至250kDa。10.上述權(quán)利要求中任一項的組合物，其中所述魚明膠在組合物中的濃度為2至15wt%。11.上述權(quán)利要求中任一項的組合物，其中所述組合物包含帶電的多糖。12.權(quán)利要求ll的組合物，其中所述帶電的多糖是角叉菜膠。13.權(quán)利要求12的組合物，其中所述角叉菜膠是K-角叉菜膠。14.權(quán)利要求11至13中任一項的組合物，其中所述多糖的重均分子量為10kDa至lMDa。15.權(quán)利要求11至14中任一項的組合物，其中所述多糖的濃度為0.1至1.5wt%。16.權(quán)利要求11至15中任一項的組合物，其中所述魚明膠與多糖的重量比例為50:1至5:1。17.上述權(quán)利要求中任一項的組合物，其中所述組合物的pH范圍為5至7.5。18.權(quán)利要求11至17中任一項的組合物，其包含選自抗生素、抗炎劑、止癢劑、甾類、NSAIDs、抗真菌劑和抗痤瘡化合物的藥物活性劑。19.權(quán)利要求11至17中任一項的組合物，其包含作為化妝品活性劑的皮膚水合劑。20.處理人類對象的方法，其包括將有效量的權(quán)利要求1至18中任一項的藥物組合物施用于所述對象的皮膚。21.對人類對象進行美容處理的方法，其包括將化妝品組合物施用于所述對象的皮膚，其特征在于所述組合物是權(quán)利要求1至17和19中任一項的組合物。22.權(quán)利要求21的處理人類對象以改善其皮膚柔性的方法，其包括將有效量的無菌的、包含魚明膠的組合物施用于所述對象的皮膚。23.上述權(quán)利要求中任一項所定義的魚明膠用于制備包含化妝品活性劑或藥物活性劑的局部用化妝品組合物或藥物組合物的用途，所述組合物用于包括將所述藥劑施用于人類或非人類哺乳動物對象的皮膚的處理方法中。24.權(quán)利要求23的魚明膠和多糖膠凝劑在制備包含可局部給予的藥物物質(zhì)的藥劑中的用途，所述藥劑用于包括將所述藥劑施用于人類對象的皮膚的處理方法中。25.權(quán)利要求23的魚明膠用于制備局部用組合物的用途，所述組合物施用于人類皮膚以改善其柔性。26.用于制備權(quán)利要求1至19中任一項的組合物的方法，所述方法包括將魚明膠、多糖膠凝劑、藥物活性物質(zhì)或化妝品活性物質(zhì)，以及任選和優(yōu)選的水混合，所述方法任選地包括對所述混合物進行乳化。全文摘要本發(fā)明提供局部用藥物組合物或化妝品組合物，其包括藥物活性劑或化妝品活性劑和膠凝劑，其特征在于所述膠凝劑包括魚明膠和多糖。文檔編號A61K8/73GK101227886SQ200680026627公開日2008年7月23日申請日期2006年5月19日優(yōu)先權(quán)日2005年5月19日發(fā)明者奧拉夫·A·斯米德斯羅德,庫爾特·I·德雷格特,英格維爾德·J·豪格申請人:液體生物技術(shù)公司